BR112021005789A2 - produtos microbianos para animais - Google Patents
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Abstract
PRODUTOS MICROBIANOS PARA ANIMAIS. A presente invenção refere-se a micro-organismos alimentados diretamente para uso em melhora do desempenho reprodutivo em animais, redução da perda por mortes e/ou eventos de ausência de alimentação em animais, melhora da produção de leite e/ou da qualidade de leite em animais leiteiros e inibição de uma doença ou transtorno em animais leiteiros selecionados a partir do grupo que consiste em febre do leite, cetose, placenta retida, metrite, pneumonia e abomaso deslocado. Mais particularmente, a invenção refere-se a cepas de Bacillus (86, 300, 101, 235, 177 e 102) isoladas e cepas que têm todas as características de identificação destas cepas para usos que compreendem os usos supracitados.
Description
Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "PRODU- TOS MICROBIANOS PARA ANIMAIS".
[001] O presente pedido reivindica prioridade sob 35 USC § 119 (e) ao Pedido Provisório dos Estados Unidos Nº de Série 62/740.169 depositado em 2 de outubro de 2018, cuja descrição do qual é incorpo- rada ao presente documento a título de referência.
[002] A presente invenção refere-se a produtos microbianos ali- mentados diretamente para uso em melhora do desempenho reprodu- tivo em animais, redução da perda por mortes e/ou eventos de ausên- cia de alimentação em animais, melhora da produção de leite e/ou da qualidade do leite em animais leiteiros e inibição de uma doença ou transtorno em animais leiteiros selecionados a partir do grupo que consiste em febre do leite, cetose, placenta retida, metrite, pneumonia e abomaso deslocado. Mais particularmente, a invenção refere-se a cepas de isoladas 86, 300, 101, 235, 177 e 102 e cepas que têm todas as características de identificação destas cepas, para usos que com- preendem os usos supracitados.
[003] A presente invenção refere-se a composições microbianas de alimentação direta (Direct-Fed Microbial, DFM). O desempenho re- produtivo é de grande importância em toda a produção animal. No ga- do leiteiro, a recruzamento das vacas em tempo hábil é crucial para assegurar que a vaca atinja seu potencial na produção de leite vitalí- cia. A concepção tardia, as altas taxas de aborto e as baixas taxas de prenhez podem afetar negativamente a produção total de leite de um rebanho e as vacas com dificuldades de reprodução geralmente preci- sam ser removidas do rebanho. O desempenho reprodutivo aprimora- do cria valor para um laticínio de várias maneiras: por meio do aumen-
to da produção de leite, por meio de bezerros adicionais que nascem e por meio da economia nos custos de reposição das novilhas. Além disso, a reprodução aprimorada economiza despesas associadas à mão de obra extra e técnicos para inseminações, medicamentos para tratamentos e mão de obra e custos de sincronização do tempo de in- seminação ou ovulação.
[004] Da mesma forma, é necessário um investimento financeiro e mão-de-obra significativos na criação de gado. Os custos de alimen- tação, água potável, abrigo, vacinação e tratamentos médicos, manu- seio e ordenha são várias das despesas significativas associadas ao manejo do gado, incluindo vacas leiteiras. Por exemplo, os custos de criação de um único animal de reposição de novilha podem ultrapassar US $ 1.500. Na indústria de laticínios, o controle da mortalidade das vacas é fundamental tanto do ponto de vista econômico quanto do bem-estar dos animais leiteiros. A mortalidade de vacas adultas tem aumentado nas últimas décadas e inclui perdas por mortes em virtude de transtornos no parto, transtornos digestivos, transtornos locomoto- res, transtornos metabólicos, transtornos do úbere/tetas, acidentes e causas desconhecidas. Novas tecnologias para reduzir as taxas de mortalidade são necessárias tanto na indústria de laticínios quanto na pecuária como um todo.
[005] À medida que a população mundial aumenta, a demanda crescente por produtos proteicos de alta qualidade, incluindo produtos lácteos, está aumentando; no entanto, as pressões para reduzir o im- pacto da agricultura no meio ambiente por meio do uso de menos re- cursos de terra e água também estão crescendo. Melhorias na produ- ção geral de leite por vaca e nos componentes do leite, incluindo gor- dura e proteína ajudam a atender ambas as necessidades, atendendo à crescente necessidade de maior produção de leite sem recursos animais adicionais. Além disso, a produção de leite eficiente é essen-
cial para a viabilidade econômica de um laticínio. Aumentar as porcen- tagens de gordura e proteína do leite resulta em um leite de melhor qualidade que gera maior receita para um laticínio.
[006] As Requerentes desenvolveram composições DFM que re- sultam em melhora do desempenho reprodutivo em animais, reduzem a perda por mortes e/ou eventos de ausência de alimentação em ani- mais, melhora a produção e/ou qualidade do leite em animais leiteiros e inibe uma doença ou transtorno em animais leiteiros, em que a do- ença ou transtorno é selecionado a partir do grupo que consiste em febre do leite, cetose, placenta retida, metrite, pneumonia e abomaso deslocado. As composições DFM descritas no presente documento oferecem um benefício comercial ao conferir todas estas propriedades ou uma combinação das mesmas.
[007] São fornecidos métodos e composições para melhorar o desempenho reprodutivo em animais, diminuir a perda por mortes e/ou eventos de ausência de alimentação em animais, melhorar a produção de leite e/ou a qualidade do leite em animais leiteiros e inibir uma do- ença ou transtorno em animais leiteiros selecionado a partir do grupo que consiste em febre do leite, cetose, placenta retida, metrite, pneu- monia e abomaso deslocado. Em várias modalidades, o animal pode ser selecionado a partir do grupo que consiste em uma espécie avíco- la, uma espécie suína, uma espécie bovina, uma espécie ovina, uma espécie equina e um animal de companhia. Na modalidade na qual o animal é uma espécie suína, a espécie suína pode ser selecionada a partir do grupo que consiste em um porco de crescimento/terminação, um leitão, uma porca e um porco reprodutor. Em outra modalidade, o animal pode ser um animal leiteiro selecionado a partir do grupo que consiste em uma vaca, uma cabra, uma ovelha ou uma búfala.
[008] Em várias modalidades, as composições para uso nos mé- todos descritos no presente documento podem ser uma embalagem comercial, um aditivo para ração para uma composição de ração ani- mal, um aditivo para a água potável de um animal ou uma composição de ração animal (por exemplo, uma ração completa), cada uma com- preendendo todas as cepas isoladas que compreendem a cepa de Ba- cillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B- 50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275) e a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276).
[009] Em outra modalidade, é fornecido um método para melho- rar o desempenho reprodutivo de um animal. O método compreende a etapa de administrar ao animal uma composição de ração ou água po- tável que compreende uma quantidade eficaz de um aditivo que com- preende uma cepa de Bacillus isolada selecionada a partir do grupo que consiste na cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Baci- llus 177 (NRRL Nº B-67275), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B- 67276), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276) e combinações das mesmas, em que a cepa de Bacillus me- lhora o desempenho reprodutivo do animal.
[010] Em ainda outra modalidade, é fornecido um método para diminuir a perda por mortes e/ou diminuir os eventos de ausência de alimentação para um animal. O método compreende a etapa de admi- nistrar ao animal uma composição de ração ou água potável que com- preende uma quantidade eficaz de um aditivo que compreende uma cepa de Bacillus isolada selecionada a partir do grupo que consiste na cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a ce- pa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), uma ce- pa que tem todas as características de identificação da cepa de Baci- llus 177 (NRRL Nº B-67275), uma cepa que tem todas as característi- cas de identificação da cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276) e combinações das mesmas, em que a cepa de Bacillus diminui a perda por mortes e/ou diminui os eventos de ausência de alimentação para o animal.
[011] Em ainda outra modalidade, é fornecido um método para melhorar a produção de leite e/ou qualidade do leite em um animal lei- teiro. O método compreende a etapa de administrar ao animal uma composição de ração ou água potável que compreende uma quantida- de eficaz de um aditivo que compreende uma cepa de Bacillus isola- da selecionada a partir do grupo que consiste na cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a ce- pa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276), uma cepa que tem todas as caracte-
rísticas de identificação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), uma cepa que tem todas as ca- racterísticas de identificação da cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B- 67218), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276) e combinações das mes- mas, em que a cepa de Bacillus melhora a produção de leite e/ou a qualidade do leite no animal.
[012] Em outra modalidade ilustrativa, é fornecido um método pa- ra inibir uma doença ou transtorno em animais leiteiros, em que a do- ença ou transtorno é selecionado a partir do grupo que consiste em febre do leite, cetose, placenta retida, metrite, pneumonia e abomaso deslocado. O método também pode ser para outros tipos de animais quando a doença for pneumonia. O método compreende a etapa de administrar ao animal uma composição de ração ou água potável que compreende uma quantidade eficaz de um aditivo que compreende uma cepa de Bacillus isolada selecionada a partir do grupo que consis- te na cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a ce- pa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Baci- llus 86 (NRRL Nº B-50944), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), uma ce- pa que tem todas as características de identificação da cepa de Baci- llus 101 (NRRL Nº B-67218), uma cepa que tem todas as característi- cas de identificação da cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Ba- cillus 177 (NRRL Nº B-67275), uma cepa que tem todas as caracterís- ticas de identificação da cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276) e combinações das mesmas, em que a cepa de Bacillus inibe a doença ou transtorno, em que a doença ou transtorno é selecionado a partir do grupo que consiste em febre do leite, cetose, placenta retida, metrite, pneumonia e abomaso deslocado.
[013] As cláusulas a seguir e combinações das mesmas, forne- cem vários aspectos ilustrativos adicionais da invenção descrita no presente documento. As várias modalidades descritas em qualquer outra seção do presente pedido de patente, incluindo a seção intitula- da "DESCRIÇÃO DETALHADA DE MODALIDADES ILUSTRATIVAS" e os EXEMPLOS, são aplicáveis a qualquer uma das modalidades a seguir da invenção descritas nas cláusulas numeradas abaixo.
[014] 1. Método para melhorar o desempenho reprodutivo de um animal, o método caracterizado pelo fato de que compreende a etapa de administrar ao animal uma composição de ração ou água potável que compreende uma quantidade eficaz de um aditivo que compreen- de uma cepa de Bacillus isolada selecionada a partir do grupo que consiste na cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Baci- llus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B- 67218), a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276) e combinações das mesmas, em que a cepa de Bacillus me- lhora o desempenho reprodutivo do animal.
[015] 2. Um método para diminuir a perda por mortes e/ou dimi- nuir os eventos de ausência de alimentação para um animal, o método compreendendo a etapa de administrar ao animal uma composição de ração ou água potável que compreende uma quantidade eficaz de um aditivo que compreende uma cepa de Bacillus isolada selecionada a partir do grupo que consiste na cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B- 50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), uma ce- pa que tem todas as características de identificação da cepa de Baci- llus 235 (NRRL Nº B-67219), uma cepa que tem todas as característi- cas de identificação da cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Ba- cillus 102 (NRRL Nº B-67276) e combinações das mesmas, em que a cepa de Bacillus diminui a perda por mortes e/ou diminui eventos de ausência de alimentação para o animal.
[016] 3. O método de acordo com a cláusula 1 ou 2, em que o animal é selecionado a partir do grupo que consiste em uma espécie avícola, uma espécie suína, uma espécie bovina, uma espécie ovina, uma espécie equina e um animal de companhia.
[017] 4. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 3, em que o animal é uma espécie suína e a espécie suína é seleci- onada a partir do grupo que consiste em um porco de crescimen- to/terminação, um leitão, uma porca e um porco reprodutor.
[018] 5. O método de acordo com a cláusula 1 ou 2, em que o animal é um animal leiteiro.
[019] 6. O método de acordo com a cláusula 5, em que o animal leiteiro é selecionado a partir do grupo que consiste em uma vaca, uma cabra, uma ovelha ou uma búfala.
[020] 7. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 6, em que a cepa de Bacillus produz uma enzima selecionada a par- tir do grupo que consiste em uma α-galactosidase, uma protease, uma lipase, uma amilase, uma xilanase, uma celulase e combinações das mesmas.
[021] 8. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 7 que compreende ainda a etapa de administrar ao animal uma outra cepa bacteriana selecionada a partir do grupo que consiste em uma outra cepa de Bacillus, uma cepa de bactérias do ácido láctico e com- binações das mesmas.
[022] 9. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 8, em que cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Baci- llus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B- 67218), a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Baci- llus 177 (NRRL Nº B-67275) e a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B- 67276) são todas administradas ao animal.
[023] 10. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 8, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218) ou uma cepa que tem todas as características de identifica- ção da cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218).
[024] 11. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 8, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº
B-67219) ou uma cepa que tem todas as características de identifica- ção da cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219).
[025] 12. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 8, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B- 50944) ou uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944).
[026] 13. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 8, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943) ou uma cepa que tem todas as características de identifica- ção da cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943).
[027] 14. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 8, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275) ou uma cepa que tem todas as características de identifica- ção da cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275).
[028] 15. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 8, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276) ou uma cepa que tem todas as características de identifica- ção da cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276).
[029] 16. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 8, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218).
[030] 17. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 8, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219).
[031] 18. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 8, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B- 50944).
[032] 19. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 8, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943).
[033] 20. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 8, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275).
[034] 21. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 8, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276).
[035] 22. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 21, em que cada uma das cepas de Bacillus é administrada na com- posição de ração em uma dose de cerca de 1,0 x 10 3 CFU/libra da composição de ração a cerca de 5,0 x 1012 CFU/libra da composição de ração.
[036] 23. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 21, em que cada uma das cepas de Bacillus é administrada na com- posição de ração em uma dose de cerca de 0,5 x 10 7 CFU/libra da composição de ração a cerca de 5,0 x 10 7 CFU/libra da composição de ração.
[037] 24. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 21, em que cada uma das cepas de Bacillus é administrada na com- posição de ração em uma dose maior do que cerca de 5,0 x 10 6 CFU/libra da composição de ração.
[038] 25. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 24 que compreende ainda a etapa de administrar um antibiótico ao animal.
[039] 26. O método de acordo com a cláusula 25, em que o anti- biótico é selecionado a partir do grupo que consiste em eritromicina, levofloxacina, trimetoprim/sulfametoxazol, trimetoprim, daptomicina, rifampicina, tilosina, tilmicosina, vancomicina, monensina, lasalocida e propionato de laquilomicina.
[040] 27. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 26 que compreende ainda a etapa de administrar ao animal uma en-
zima selecionada a partir do grupo que consiste em uma galactosida- se, uma protease, uma lipase, uma amilase, uma hemicelulase, uma arabinoxilanase, uma xilanase, uma celulase, uma NSPase, uma fitase e combinações das mesmas.
[041] 28. O método de acordo com a cláusula 27, em que a en- zima é uma NSPase ou uma fitase.
[042] 29. O método de acordo com a cláusula 1 ou 2, em que o animal é um bovino e a cepa de Bacillus é administrada durante a lac- tação.
[043] 30. O método de acordo com a cláusula 1 ou 2, em que o animal é um bovino e a cepa de Bacillus é administrada durante a ges- tação.
[044] 31. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 30, em que a composição de ração é administrada diariamente ao animal.
[045] 32. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 ou 3 a 31, em que a melhora na capacidade de reprodução é selecio- nada a partir do grupo que consiste em uma redução no número de intervalos entre partos, um aumento na detecção de cios, um aumento na taxa de concepção, uma diminuição nos abortos e um aumento na taxa de prenhez.
[046] 33. Um método para melhorar a produção de leite e/ou qua- lidade do leite em um animal leiteiro, o método compreendendo a eta- pa de administrar ao animal uma composição de ração ou água potá- vel que compreende uma quantidade eficaz de um aditivo que com- preende uma cepa de Bacillus isolada selecionada a partir do grupo que consiste na cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B- 67218), a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276),
uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), uma cepa que tem todas as caracte- rísticas de identificação da cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), uma cepa que tem todas as caracte- rísticas de identificação da cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275), uma cepa que tem todas as ca- racterísticas de identificação da cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B- 67276) e combinações das mesmas, em que a cepa de Bacillus me- lhora a produção de leite e/ou a qualidade do leite no animal.
[047] 34. Um método para inibir uma doença ou transtorno em um animal leiteiro, em que a doença ou transtorno é selecionado a partir do grupo que consiste em febre do leite, cetose, placenta retida, metrite, pneumonia e abomaso deslocado, o método compreendendo a etapa de administrar ao animal uma composição de ração ou água potável que compreende uma quantidade eficaz de um aditivo que compreende uma cepa de Bacillus isolada selecionada a partir do gru- po que consiste na cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Baci- llus 177 (NRRL Nº B-67275), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B- 67276), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276) e combinações das mesmas, em que a cepa de Bacillus ini- be a doença ou transtorno no animal leiteiro, em que a doença ou transtorno é selecionado a partir do grupo que consiste em febre do leite, cetose, placenta retida, metrite, pneumonia e abomaso desloca- do.
[048] 35. O método de acordo com a cláusula 33 ou 34, em que o animal leiteiro é selecionado a partir do grupo que consiste em uma vaca, uma cabra, uma ovelha ou uma búfala.
[049] 36. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 35, em que a cepa de Bacillus produz uma enzima selecionada a partir do grupo que consiste em uma α-galactosidase, uma protease, uma lipase, uma amilase, uma xilanase, uma celulase e combinações das mesmas.
[050] 37. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 36 que compreende ainda a etapa de administrar ao animal uma outra cepa bacteriana selecionada a partir do grupo que consiste em uma outra cepa de Bacillus, uma cepa de bactérias do ácido láctico e combinações das mesmas.
[051] 38. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 37, em que a cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL N° B- 67218), a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275) e a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276) são todas administradas ao animal.
[052] 39. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 37, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218) ou uma cepa que tem todas as características de identifi- cação da cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218).
[053] 40. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas
33 a 37, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219) ou uma cepa que tem todas as características de identifi- cação da cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219).
[054] 41. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 37, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944) ou uma cepa que tem todas as características de identifi- cação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944).
[055] 42. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 37, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943) ou uma cepa que tem todas as características de identifi- cação da cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943).
[056] 43. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 37, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275) ou uma cepa que tem todas as características de identifi- cação da cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275).
[057] 44. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 37, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276) ou uma cepa que tem todas as características de identifi- cação da cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276).
[058] 45. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 37, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218).
[059] 46. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 37, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219).
[060] 47. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 37, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944).
[061] 48. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 37, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 300 (NRRL
Nº B-50943).
[062] 49. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 37, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275).
[063] 50. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 37, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276).
[064] 51. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33-50, em que cada uma das cepas de Bacillus é administrada na composição de ração em uma dose de cerca de 1,0 x 10 3 CFU/libra da composição de ração a cerca de 5,0 x 1012 CFU/libra da composição de ração.
[065] 52. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33-50, em que cada uma das cepas de Bacillus é administrada na composição de ração em uma dose de cerca de 0,5 x 10 7 CFU/libra da composição de ração a cerca de 5,0 x 10 7 CFU/libra da composição de ração.
[066] 53. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 50, em que cada uma das cepas de Bacillus é administrada na composição de ração em uma dose maior do que cerca de 5,0 x 106 CFU/libra da composição de ração.
[067] 54. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33-53 que compreende ainda a etapa de administrar um antibiótico ao animal.
[068] 55. O método de acordo com a cláusula 54, em que o anti- biótico é selecionado a partir do grupo que consiste em eritromicina, levofloxacina, trimetoprim/sulfametoxazol, trimetoprim, daptomicina, rifampicina, tilosina, tilmicosina, vancomicina, monensina, lasalocida e propionato de laquidomicina.
[069] 56. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas
33-55 que compreende ainda a etapa de administrar ao animal uma enzima selecionada a partir do grupo que consiste em uma galactosi- dase, uma protease, uma lipase, uma amilase, uma hemicelulase, uma arabinoxilanase, uma xilanase, uma celulase, uma NSPase, uma fitase e combinações das mesmas.
[070] 57. O método de acordo com a cláusula 56, em que a en- zima é uma NSPase ou uma fitase.
[071] 58. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 57, em que a cepa de Bacillus é administrada durante a lactação.
[072] 59. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 57, em que a cepa de Bacillus é administrada durante a gestação.
[073] 60. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 59, em que a composição de ração é administrada diariamente ao animal.
[074] 61. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 ou 35 a 60, em que a melhora na produção de leite e/ou qualidade do leite é selecionada a partir do grupo que consiste em aumento da produção de leite, aumento da percentagem de gordura do leite, au- mento do teor de proteínas do leite, aumento do leite corrigido pelo teor de gordura total, aumento do teor de energia do leite e redução da contagem de células somáticas.
[075] 62. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1, 2 ou 5-61, em que o animal é uma vaca.
[076] 63. Uma embalagem comercial para uso animal que com- preende todas as cepas isoladas que compreendem a cepa de Baci- llus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B- 50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275) e a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276).
[077] 64. Um aditivo para uma ração animal que compreende to-
das as cepas isoladas que compreendem a cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B- 67219), a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275) e a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276).
[078] 65. Um aditivo para água potável de um animal que com- preende todas as cepas isoladas que compreendem a cepa de Baci- llus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B- 50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275) e a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276).
[079] 66. Uma composição de ração animal que compreende to- das as cepas isoladas que compreendem a cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL N° B-67218), a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B- 67219), a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275) e a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276).
[080] 67. A embalagem comercial, aditivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou composição de ração animal de acordo com qualquer uma das cláusulas 63 a 66 para uso na melhora do de- sempenho reprodutivo dos animais.
[081] 68. A embalagem comercial, aditivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou composição de ração animal de acordo com qualquer uma das cláusulas 63 a 66 para uso na diminuição da perda por mortes e/ou eventos de ausência de alimentação no animal.
[082] 69. A embalagem comercial, aditivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou composição de ração animal de acordo com qualquer uma das cláusulas 63 a 66 para uso na melhora da pro- dução de leite e/ou qualidade do leite no animal.
[083] 70. A embalagem comercial, aditivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou composição de ração animal de acordo com qualquer uma das cláusulas 63 a 66 para uso na inibição de uma doença ou transtorno no animal selecionado a partir do grupo que consiste em febre do leite, cetose, placenta retida, metrite, pneumonia e abomaso deslocado.
[084] 71. O aditivo para ração ou aditivo para a água potável do animal de acordo com a cláusula 64 ou 65 na forma de um concentra- do.
[085] 72. O aditivo para ração ou aditivo para a água potável do animal de acordo com a cláusula 64 ou 65 na forma de um supercon- centrado.
[086] 73. O aditivo, a composição de ração ou o aditivo para a água potável do animal de acordo com qualquer uma das cláusulas 64 a 72 na forma seca.
[087] 74. A composição de ração de acordo com a cláusula 73 na forma peletizada.
[088] 75. A embalagem comercial, aditivo para ração ou aditivo para a água potável do animal de acordo com qualquer uma das cláu- sulas 63 a 65 ou 67 a 74, em que as cepas estão em uma forma sele- cionada a partir do grupo que consiste em um pó, um líquido e na for- ma de pelotas.
[089] 76. A embalagem comercial, aditivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou composição de ração de acordo com qualquer uma das cláusulas 63 a 75 que compreende ainda um carre- ador para as cepas de Bacillus.
[090] 77. A embalagem comercial, aditivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou composição de ração de acordo com a cláusula 76, em que o carreador é selecionado a partir do grupo que consiste em um farelo, cascas de arroz, um sal, uma dextrina e combi- nações dos mesmos.
[091] 78. A embalagem comercial, aditivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou composição de ração de acordo com qualquer uma das cláusulas 63 a 77 em um saco.
[092] 79. A embalagem comercial, aditivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou composição de ração de acordo com a cláusula 78, em que o saco é um saco plástico.
[093] 80. A embalagem comercial, aditivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou composição de ração de acordo com qualquer uma das cláusulas 63 a 79 que compreende ainda instruções para o uso de uma ou mais das cepas de Bacillus.
[094] 81. A embalagem comercial, aditivo para ração, composi- ção de ração ou aditivo para a água potável do animal de acordo com qualquer uma das cláusulas 63 a 80 em um saco de 20 libras.
[095] 82. A embalagem comercial, aditivo para ração, composi- ção de ração ou aditivo para a água potável do animal de acordo com qualquer uma das cláusulas 63 a 80 em um saco de 50 libras.
[096] 83. O aditivo para ração ou aditivo para a água potável do animal de acordo com qualquer uma das cláusulas 64, 65, 67 a 73 ou 75-82 na forma de pó.
[097] 84. O aditivo para ração ou aditivo para a água potável do animal de acordo com qualquer uma das cláusulas 64, 65, 67 a 72, 75 ou 78 a 80 na forma líquida.
[098] 85. A embalagem comercial, aditivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou composição de ração de acordo com qualquer uma das cláusulas 63 a 84 em um recipiente para uso co- mercial.
[099] 86. A embalagem comercial, aditivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou composição de ração de acordo com a cláusula 85, em que o recipiente compreende plástico.
[0100] 87. A embalagem comercial, aditivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou composição de ração de acordo com a cláusula 85, em que o recipiente compreende papel.
[0101] 88. A embalagem comercial, aditivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou composição de ração de acordo com qualquer uma das cláusulas 63 a 87, em que as cepas compreendem ainda um aglutinante.
[0102] 89. A embalagem comercial, aditivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou composição de ração de acordo com a cláusula 88, em que o aglutinante é selecionado a partir do grupo que consiste em argila, componentes da parede celular de levedura, silica- to de alumínio e glucano ou combinações dos mesmos.
[0103] A Figura 1 é um gráfico que mostra (Painel A) a redução das quantidades retais de E. coli total (16S), o gene da enterotoxina sensível ao calor (Labile Enterotoxin, LT), o gene de fixação e esgota- mento de intimina (eaeA) de E. coli enteropatogênica e entero- hemorrágica, (Painel B) a redução numérica nas quantidades dos ge- nes de alfa e beta toxinas de Clostridium perfringens (cpa e cpb, res- pectivamente) e (Painel C) a redução no gene de Aspergillus (18S) (p ≤ 0,05) durante a suplementação com Bacillus.
[0104] A Figura 2 mostra uma fotografia de um gel que exibe perfis de RAPD PCR (Iniciadores 1 a 6) para as cepas de Bacillus 86 e 300. A cepa 86 tem o perfil superior e a cepa 300 tem o perfil inferior. As linhas mais à esquerda e mais à direita têm marcadores e cada con- junto de duas linhas consecutivas entre os marcadores corresponde aos Iniciadores 1 a 6 indo da esquerda para a direita.
[0105] A Figura 3 mostra uma fotografia de um gel que exibe um perfil de RAPD PCR (Iniciadores 1 a 6) para a cepa 101 de Bacillus. Para o Iniciador 1, bandas fracas aparecem aproximadamente a 1000, 1500 e mais de 1600 pares de bases. Para o Iniciador 2, uma banda intensa aparece a 650 pares de bases e uma banda fraca aparece aproximadamente a 400 pares de bases. Para o Iniciador 3, uma ban- da tênue aparece aproximadamente a 400 pares de base, uma banda dupla tênue aparece a 600 e 700 pares de base e bandas fracas apa- recem a 1000 e 1400 pares de base.
[0106] A Figura 4 mostra uma fotografia de um gel que exibe um perfil de RAPD PCR (Iniciadores 1 a 3) para a cepa de Bacillus 102. Para o Iniciador 1, uma banda intensa aparece a 900 pares de base e bandas fracas aparecem a 1200 e 1400 pares de base. Para o Inicia- dor 2, bandas intensas aparecem a 600, 700 e 1000 pares de ba- ses. Para o Iniciador 3, uma banda intensa aparece a 600 pares de bases, uma banda dupla a 700 e 750 pares de bases, uma banda du- pla a 900 e 1100 pares de bases e bandas fracas aparecem a 400 e mais de 1800 pares de bases.
[0107] A Figura 5 mostra uma fotografia de um gel que exibe um perfil de RAPD PCR (Iniciadores 2 e 3) para a cepa de Bacillus 177. Para o Iniciador 2, bandas intensas aparecem a 600, 700 e 1000 pares de bases. Para o Iniciador 3, bandas intensas aparecem a 600 pares de bases, uma banda dupla a 700 e 750 pares de bases, uma banda dupla a 900 e 1100 pares de bases e bandas fracas aparecem a 400 e mais de 1800 pares de bases.
[0108] A Figura 6 mostra uma fotografia de um gel que exibe um perfil de RAPD PCR (Iniciadores 1 a 6) para a cepa de Bacillus 235. Para o Iniciador 1, bandas fracas aparecem a aproximadamente 1000 e mais de 1600 pares de bases. Para o Iniciador 2, uma banda intensa aparece a 650 pares de bases e uma banda fraca aparece a aproxi- madamente 400 pares de bases. Para o Iniciador 3, bandas fracas aparecem a aproximadamente 400, 600, 1000 e 1400 pares de bases.
[0109] São fornecidos métodos e composições para melhorar o desempenho reprodutivo em animais, diminuir a perda por mortes e/ou eventos de ausência de alimentação em animais, melhorar a produção de leite e/ou a qualidade do leite em animais leiteiros e inibir uma do- ença ou transtorno em animais leiteiros selecionado a partir do grupo que consiste em febre do leite, cetose, placenta retida, metrite, pneu- monia e abomaso deslocado. Também são fornecidos métodos para inibir a pneumonia nos animais descritos no presente documento, ex- ceto animais leiteiros. Em várias modalidades, o animal pode ser sele- cionado a partir do grupo que consiste em uma espécie avícola, uma espécie suína, uma espécie bovina, uma espécie ovina, uma espécie equina e um animal de companhia. Na modalidade na qual o animal é uma espécie suína, a espécie suína pode ser selecionada a partir do grupo que consiste em um porco de crescimento/terminação, um lei- tão, uma porca e um porco reprodutor. Em outra modalidade, o animal pode ser um animal leiteiro selecionado a partir do grupo que consiste em uma vaca, uma cabra, uma ovelha ou uma búfala.
[0110] Em várias modalidades, as composições para uso nos mé- todos descritos no presente documento podem ser uma embalagem comercial, um aditivo para ração para uma composição de ração ani- mal, um aditivo para a água potável de um animal ou uma composição de ração animal (por exemplo, uma ração completa), cada um com- preendendo todas as cepas isoladas que compreendem a cepa de Ba- cillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B- 50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275) e a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276).
[0111] Em outra modalidade, é fornecido um método para melho- rar o desempenho reprodutivo de um animal. O método compreende a etapa de administrar ao animal uma composição de ração ou água po- tável que compreende uma quantidade eficaz de um aditivo que com-
preende uma cepa de Bacillus isolada selecionada a partir do grupo que consiste na cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Baci- llus 177 (NRRL Nº B-67275), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B- 67276), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276) e combinações das mesmas, em que a cepa de Bacillus me- lhora o desempenho reprodutivo do animal.
[0112] Em ainda outra modalidade, é fornecido um método para diminuir a perda por mortes e/ou diminuir os eventos de ausência de alimentação para um animal. O método compreende a etapa de admi- nistrar ao animal uma composição de ração ou água potável que com- preende uma quantidade eficaz de um aditivo que compreende uma cepa de Bacillus isolada selecionada a partir do grupo que consiste na cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a ce- pa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus
101 (NRRL Nº B-67218), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), uma ce- pa que tem todas as características de identificação da cepa de Baci- llus 177 (NRRL Nº B-67275), uma cepa que tem todas as característi- cas de identificação da cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276) e combinações das mesmas, em que a cepa de Bacillus diminui a perda por mortes e/ou diminui os eventos de ausência de alimentação para o animal.
[0113] Em ainda outra modalidade, é fornecido um método para melhorar a produção de leite e/ou qualidade do leite em um animal lei- teiro. O método compreende a etapa de administrar ao animal uma composição de ração ou água potável que compreende uma quantida- de eficaz de um aditivo que compreende uma cepa de Bacillus isolada selecionada a partir do grupo que consiste na cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a ce- pa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276), uma cepa que tem todas as caracte- rísticas de identificação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), uma cepa que tem todas as caracte- rísticas de identificação da cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), uma cepa que tem todas as caracte- rísticas de identificação da cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276) e combinações das mesmas, em que a cepa de Bacillus melhora a produção de leite e/ou a qualidade do leite no animal.
[0114] Em outra modalidade ilustrativa, é fornecido um método pa-
ra inibir uma doença ou transtorno em animais leiteiros, em que a do- ença ou transtorno é selecionado a partir do grupo que consiste em febre do leite, cetose, placenta retida, metrite, pneumonia e abomaso deslocado. O método compreende a etapa de administrar ao animal uma composição de ração ou água potável que compreende uma quantidade eficaz de um aditivo que compreende uma cepa de Baci- llus isolada selecionada a partir do grupo que consiste na cepa de Ba- cillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B- 50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B- 50944), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276) e combinações das mes- mas, em que a cepa de Bacillus inibe a doença ou transtorno em ani- mais leiteiros, em que a doença ou transtorno é selecionado a partir do grupo que consiste em febre do leite, cetose, placenta retida, metrite, pneumonia e abomaso deslocado.
[0115] As seguintes cláusulas e combinações das mesmas forne- cem vários aspectos ilustrativos adicionais da invenção descrita no presente documento. As várias modalidades descritas em qualquer outra seção do presente pedido de patente, incluindo a seção intitula- da "ANTECEDENTES E SUMÁRIO DA INVENÇÃO" e os EXEMPLOS são aplicáveis a qualquer uma das modalidades da invenção a seguir descritas nas cláusulas numeradas abaixo.
[0116] 1. Método para melhorar o desempenho reprodutivo de um animal, o método caracterizado pelo fato de que compreende a etapa de administrar ao animal uma composição de ração ou água potável que compreende uma quantidade eficaz de um aditivo que compreen- de uma cepa de Bacillus isolada selecionada a partir do grupo que consiste na cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Baci- llus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B- 67218), a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), uma cepa que tem todas as caracte- rísticas de identificação da cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), uma cepa que tem todas as caracte- rísticas de identificação da cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275), uma cepa que tem todas as caracte- rísticas de identificação da cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276) e combinações das mesmas, em que a cepa de Bacillus melhora o de- sempenho reprodutivo do animal.
[0117] 2. Método para diminuir a perda por mortes e/ou diminuir eventos de ausência de alimentação para um animal, o método carac- terizado pelo fato de que compreende a etapa de administrar ao ani- mal uma composição de ração ou água potável que compreende uma quantidade eficaz de um aditivo que compreende uma cepa de Baci- llus isolada selecionada a partir do grupo que consiste na cepa de Ba- cillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B- 50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B- 50944), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276) e combinações das mes- mas, em que a cepa de Bacillus diminui a perda por mortes e/ou dimi- nui - eventos de ausência de alimentação para o animal.
[0118] 3. O método de acordo com a cláusula 1 ou 2, em que o animal é selecionado a partir do grupo que consiste em uma espécie avícola, uma espécie suína, uma espécie bovina, uma espécie ovina, uma espécie equina e um animal de companhia.
[0119] 4. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 3, em que o animal é uma espécie suína e a espécie suína é seleci- onada a partir do grupo que consiste em um porco de crescimen- to/terminação, um leitão, uma porca e um porco reprodutor.
[0120] 5. O método de acordo com a cláusula 1 ou 2, em que o animal é um animal leiteiro.
[0121] 6. O método de acordo com a cláusula 5, em que o animal leiteiro é selecionado a partir do grupo que consiste em uma vaca, uma cabra, uma ovelha ou uma búfala.
[0122] 7. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 6, em que a cepa de Bacillus produz uma enzima selecionada a par- tir do grupo que consiste em uma α-galactosidase, uma protease, uma lipase, uma amilase, uma xilanase, uma celulase e combinações das mesmas.
[0123] 8. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 7 que compreende ainda a etapa de administrar ao animal uma outra cepa bacteriana selecionada a partir do grupo que consiste em uma outra cepa de Bacillus, uma cepa de bactérias do ácido láctico e com- binações das mesmas.
[0124] 9. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 8, em que cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Baci- llus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B- 67218), a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275) e a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276) são todas administradas ao animal.
[0125] 10. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 8, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218) ou uma cepa que tem todas as características de identifica- ção da cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218).
[0126] 11. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 8, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219) ou uma cepa que tem todas as características de identifica- ção da cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219).
[0127] 12. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 8, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B- 50944) ou uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944).
[0128] 13. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 8, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943) ou uma cepa que tem todas as características de identifica- ção da cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943).
[0129] 14. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 8, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275) ou uma cepa que tem todas as características de identifica-
ção da cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275).
[0130] 15. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 8, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276) ou uma cepa que tem todas as características de identifica- ção da cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276).
[0131] 16. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 8, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218).
[0132] 17. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 8, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219).
[0133] 18. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 8, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B- 50944).
[0134] 19. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 8, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943).
[0135] 20. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 8, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275).
[0136] 21. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 8, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276).
[0137] 22. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 21, em que cada uma das cepas de Bacillus é administrada na com- posição de ração em uma dose de cerca de 1,0 x 10 3 CFU/libra da composição de ração a cerca de 5,0 x 1012 CFU/libra da composição de ração.
[0138] 23. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 21, em que cada uma das cepas de Bacillus é administrada na com-
posição de ração em uma dose de cerca de 0,5 x 10 7 CFU/libra da composição de ração a cerca de 5,0 x 10 7 CFU/libra da composição de ração.
[0139] 24. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 21, em que cada uma das cepas de Bacillus é administrada na com- posição de ração em uma dose maior do que cerca de 5,0 x 10 6 CFU/libra da composição de ração.
[0140] 25. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 24 que compreende ainda a etapa de administrar um antibiótico ao animal.
[0141] 26. O método de acordo com a cláusula 25, em que o anti- biótico é selecionado a partir do grupo que consiste em eritromicina, levofloxacina, trimetoprim/sulfametoxazol, trimetoprim, daptomicina, rifampicina, tilosina, tilmicosina, vancomicina, monensina, lasalocida e propionato de laquidomicina.
[0142] 27. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 26 que compreende ainda a etapa de administrar ao animal uma en- zima selecionada a partir do grupo que consiste em uma galactosida- se, uma protease, uma lipase, uma amilase, uma hemicelulase, uma arabinoxilanase, uma xilanase, uma celulase, uma NSPase, uma fitase e combinações das mesmas.
[0143] 28. O método de acordo com a cláusula 27, em que a en- zima é uma NSPase ou uma fitase.
[0144] 29. O método de acordo com a cláusula 1 ou 2, em que o animal é um bovino e a cepa de Bacillus é administrada durante a lac- tação.
[0145] 30. O método de acordo com a cláusula 1 ou 2, em que o animal é um bovino e a cepa de Bacillus é administrada durante a ges- tação.
[0146] 31. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 30, em que a composição de ração é administrada diariamente ao animal.
[0147] 32. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 ou 3 a 31, em que a melhora na capacidade de reprodução é selecio- nada a partir do grupo que consiste em uma redução no número de intervalos entre partos, um aumento na detecção de cios, um aumento na taxa de concepção, uma diminuição nos abortos e um aumento na taxa de prenhez.
[0148] 33. Um método para melhorar a produção de leite e/ou qua- lidade do leite em um animal leiteiro, o método compreendendo a eta- pa de administrar ao animal uma composição de ração ou água potá- vel que compreende uma quantidade eficaz de um aditivo que com- preende uma cepa de Bacillus isolada selecionada a partir do grupo que consiste na cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B- 67218), a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276) e combinações das mesmas, em que a cepa de Bacillus me- lhora a produção de leite e/ou a qualidade do leite no animal.
[0149] 34. Um método para inibir uma doença ou transtorno em um animal leiteiro, em que a doença ou transtorno é selecionado a partir do grupo que consiste em febre do leite, cetose, placenta retida, metrite, pneumonia e abomaso deslocado, o método compreendendo a etapa de administrar ao animal uma composição de ração ou água potável que compreende uma quantidade eficaz de um aditivo que compreende uma cepa de Bacillus isolada selecionada a partir do gru- po que consiste na cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Baci- llus 177 (NRRL Nº B-67275), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B- 67276), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), uma cepa tendo g todas as características de identificação da cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276) e combinações das mesmas, em que a cepa de Bacillus ini- be a doença ou transtorno no animal leiteiro, em que a doença ou transtorno é selecionado a partir do grupo que consiste em febre do leite, cetose, placenta retida, metrite, pneumonia e abomaso desloca- do.
[0150] 35. O método de acordo com a cláusula 33 ou 34, em que o animal leiteiro é selecionado a partir do grupo que consiste em uma vaca, uma cabra, uma ovelha ou uma búfala.
[0151] 36. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 35, em que a cepa de Bacillus produz uma enzima selecionada a partir do grupo que consiste em uma α-galactosidase, uma protease, uma lipase, uma amilase, uma xilanase, uma celulase e combinações das mesmas.
[0152] 37. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 36 que compreende ainda a etapa de administrar ao animal uma outra cepa bacteriana selecionada a partir do grupo que consiste em uma outra cepa de Bacillus, uma cepa de bactérias do ácido láctico e combinações das mesmas.
[0153] 38. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 37, em que a cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL N° B- 67218), a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275) e a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276) são todas administradas ao animal.
[0154] 39. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 37, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218) ou uma cepa que tem todas as características de identifi- cação da cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218).
[0155] 40. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 37, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219) ou uma cepa que tem todas as características de identifi- cação da cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219).
[0156] 41. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 37, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944) ou uma cepa que tem todas as características de identifi- cação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944).
[0157] 42. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 37, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943) ou uma cepa que tem todas as características de identifi- cação da cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943).
[0158] 43. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 37, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 177 (NRRL
Nº B-67275) ou uma cepa que tem todas as características de identifi- cação da cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275).
[0159] 44. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 37, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276) ou uma cepa que tem todas as características de identifi- cação da cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276).
[0160] 45. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 37, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218).
[0161] 46. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 37, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219).
[0162] 47. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 37, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944).
[0163] 48. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 37, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943).
[0164] 49. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 37, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275).
[0165] 50. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 37, em que a cepa administrada é a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276).
[0166] 51. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33-50, em que cada uma das cepas de Bacillus é administrada na composição de ração em uma dose de cerca de 1,0 x 103 CFU/libra da composição de ração a cerca de 5,0 x 1012 CFU/libra da composição de ração.
[0167] 52. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas
33-50, em que cada uma das cepas de Bacillus é administrada na composição de ração em uma dose de cerca de 0,5 x 107 CFU/libra da composição de ração a cerca de 5,0 x 10 7 CFU/libra da composição de ração.
[0168] 53. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 50, em que cada uma das cepas de Bacillus é administrada na composição de ração em uma dose maior do que cerca de 5,0 x 106 CFU/libra da composição de ração.
[0169] 54. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33-53 que compreende ainda a etapa de administrar um antibiótico ao animal.
[0170] 55. O método de acordo com a cláusula 54, em que o anti- biótico é selecionado a partir do grupo que consiste em eritromicina, levofloxacina, trimetoprim/sulfametoxazol, trimetoprim, daptomicina, rifampicina, tilosina, tilmicosina, vancomicina, monensina, lasalocida e propionato de laquidomicina.
[0171] 56. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33-55 que compreende ainda a etapa de administrar ao animal uma enzima selecionada a partir do grupo que consiste em uma galactosi- dase, uma protease, uma lipase, uma amilase, uma hemicelulase, uma arabinoxilanase, uma xilanase, uma celulase, uma NSPase, uma fitase e combinações das mesmas.
[0172] 57. O método de acordo com a cláusula 56, em que a en- zima é uma NSPase ou uma fitase.
[0173] 58. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 57, em que a cepa de Bacillus é administrada durante a lactação.
[0174] 59. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 57, em que a cepa de Bacillus é administrada durante a gestação.
[0175] 60. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 a 59, em que a composição de ração é administrada diariamente ao animal.
[0176] 61. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 33 ou 35 a 60, em que a melhora na produção de leite e/ou qualidade do leite é selecionada a partir do grupo que consiste em aumento da produção de leite, aumento da percentagem de gordura do leite, au- mento do teor de proteínas do leite, aumento do leite corrigido pelo teor de gordura total, aumento do teor de energia do leite e redução da contagem de células somáticas.
[0177] 62. O método de acordo com qualquer uma das cláusulas 1, 2 ou 5-61, em que o animal é uma vaca.
[0178] 63. Uma embalagem comercial para uso animal que com- preende todas as cepas isoladas que compreendem a cepa de Baci- llus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B- 50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275) e a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276).
[0179] 64. Um aditivo para uma ração animal que compreende to- das as cepas isoladas que compreendem a cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B- 67219), a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275) e a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276).
[0180] 65. Um aditivo para água potável de um animal que com- preende todas as cepas isoladas que compreendem a cepa de Baci- llus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B- 50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275) e a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276).
[0181] 66. Uma composição de ração animal que compreende to- das as cepas isoladas que compreendem a cepa de Bacillus 86 (NRRL
Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL N° B-67218), a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B- 67219), a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275) e a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276).
[0182] 67. A embalagem comercial, aditivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou composição de ração animal de acordo com qualquer uma das cláusulas 63 a 66 para uso na melhora do de- sempenho reprodutivo dos animais.
[0183] 68. A embalagem comercial, aditivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou composição de ração animal de acordo com qualquer uma das cláusulas 63 a 66 para uso na diminuição da perda por mortes e/ou eventos de ausência de alimentação no animal.
[0184] 69. A embalagem comercial, aditivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou composição de ração animal de acordo com qualquer uma das cláusulas 63 a 66 para uso na melhora da pro- dução de leite e/ou qualidade do leite no animal.
[0185] 70. A embalagem comercial, aditivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou composição de ração animal de acordo com qualquer uma das cláusulas 63 a 66 para uso na inibição de uma doença ou transtorno no animal selecionado a partir do grupo que consiste em febre do leite, cetose, placenta retida, metrite, pneumonia e abomaso deslocado.
[0186] 71. O aditivo para ração ou aditivo para a água potável do animal de acordo com a cláusula 64 ou 65 na forma de um concentra- do.
[0187] 72. O aditivo para ração ou aditivo para a água potável do animal de acordo com a cláusula 64 ou 65 na forma de um superconcentrado.
[0188] 73. O aditivo, a composição de ração ou o aditivo para a água potável do animal de acordo com qualquer uma das cláusulas 64 a 72 na forma seca.
[0189] 74. A composição de ração de acordo com a cláusula 73 na forma peletizada.
[0190] 75. A embalagem comercial, aditivo para ração, aditivo ou para a água potável do animal de acordo com qualquer uma das cláu- sulas 63 a 65 ou 67 a 74, em que as cepas estão em uma forma sele- cionada a partir do grupo que consiste em um pó, um líquido e em forma de pelotas.
[0191] 76. A embalagem comercial, aditivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou composição de ração de acordo com qualquer uma das cláusulas 63 a 75 que compreende ainda um carre- ador para as cepas de Bacillus.
[0192] 77. A embalagem comercial, aditivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou composição de ração de acordo com a cláusula 76, em que o carreador é selecionado a partir do grupo que consiste em um farelo, cascas de arroz, um sal, uma dextrina e combi- nações dos mesmos.
[0193] 78. A embalagem comercial, aditivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou composição de ração de acordo com qualquer uma das cláusulas 63 a 77 em um saco.
[0194] 79. A embalagem comercial, aditivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou composição de ração de acordo com a cláusula 78, em que o saco é um saco plástico.
[0195] 80. A embalagem comercial, aditivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou composição de ração de acordo com qualquer uma das cláusulas 63 a 79 que compreende mais instruções para o uso de uma ou mais das cepas de Bacillus.
[0196] 81. A embalagem comercial, aditivo para ração, composi- ção de ração ou aditivo para a água potável do animal de acordo com qualquer uma das cláusulas 63 a 80 em um saco de 20 libras.
[0197] 82. A embalagem comercial, aditivo para ração, composi- ção de ração ou aditivo para a água potável do animal de acordo com qualquer uma das cláusulas 63 a 80 em um saco de 50 libras.
[0198] 83. O aditivo para ração ou aditivo para a água potável do animal de acordo com qualquer uma das cláusulas 64, 65, 67 a 73 ou 75-82 na forma de pó.
[0199] 84. O aditivo para ração ou aditivo para a água potável do animal de acordo com qualquer uma das cláusulas 64, 65, 67 a 72, 75 ou 78 a 80 na forma líquida.
[0200] 85. A embalagem comercial, aditivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou composição de ração de acordo com qualquer uma das cláusulas 63 a 84 em um recipiente para uso co- mercial.
[0201] 86. A embalagem comercial, aditivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou composição de ração de acordo com a cláusula 85, em que o recipiente compreende plástico.
[0202] 87. A embalagem comercial, aditivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou composição de ração de acordo com a cláusula 85, em que o recipiente compreende papel.
[0203] 88. A embalagem comercial, aditivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou composição de ração de acordo com qualquer uma das cláusulas 63 a 87, em que as cepas compreendem ainda um aglutinante.
[0204] 89. A embalagem comercial, aditivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou composição de ração de acordo com a cláusula 88, em que o aglutinante é selecionado a partir do grupo que consiste em argila, componentes da parede celular de levedura, silica- to de alumínio e glucano ou combinações dos mesmos.
[0205] Em várias modalidades, o animal ao qual um aditivo para ração, uma composição de ração ou água potável conforme descrito no presente documento é administrada pode ser selecionado a partir do grupo que consiste em uma espécie avícola, uma espécie suína, uma espécie bovina, uma espécie ovina, uma espécie equina e um animal de companhia. Na modalidade na qual o animal é um animal de companhia, o animal de companhia pode ser, por exemplo, uma espé- cie canina ou uma espécie felina. Na modalidade na qual o animal é uma espécie suína, a espécie suína pode ser selecionada a partir do grupo que consiste em um porco de crescimento/terminação, um lei- tão, uma porca e um porco reprodutor. Em várias modalidades exem- plificativas, o animal pode ser selecionado a partir do grupo que con- siste em uma galinha (por exemplo, um frango ou uma galinha poedei- ra), um porco, um cavalo, um pônei, uma vaca, uma búfala, um peru, uma cabra, uma ovelha, uma codorna, um faisão, uma avestruz, um pato e combinações dos mesmos. Em uma modalidade ilustrativa, o animal pode ser uma vaca.
[0206] Em quaisquer modalidades descritas no presente documen- to, exceto aquelas que requerem a administração de todas as cepas em combinação, as cepas podem ser administradas individualmente ou em qualquer combinação. Em uma modalidade, uma quantidade eficaz da cepa de Bacillus pode ser administrada ao animal. Por "quantidade eficaz" entenda-se uma quantidade da cepa de Baci- llus (por exemplo, cepa 86, 300, 101 ou 235, 177 ou 102 ou cepas que têm todas de suas características de identificação) capaz de melhorar o desempenho reprodutivo em animais, diminuir a perda por mortes e/ou eventos de ausência de alimentação em animais, melhorar a pro- dução de leite e/ou a qualidade do leite em animais leiteiros e/ou inibir uma doença ou transtorno em animais leiteiros selecionado a partir do grupo que consiste em febre do leite, cetose, placenta retida, metrite, pneumonia e abomaso deslocado, conforme descrito a seguir, através de qualquer mecanismo. Em um aspecto, a melhora no desempenho reprodutivo é selecionada a partir do grupo que consiste em uma dimi- nuição no número de intervalos entre partos, um aumento na taxa de detecção de cios, um aumento na taxa de concepção, uma diminuição nos abortos e um aumento na taxa de prenhez (por exemplo, uma taxa de prenhez de 21 dias). Em outro aspecto ilustrativo, a melhora na produção de leite e/ou qualidade do leite é selecionada a partir do grupo que consiste em aumento da produção de leite, um aumento da porcentagem de gordura do leite, um aumento do teor de proteínas do leite, um aumento do leite corrigido pelo teor de gordura total, um au- mento do teor de energia do leite e uma diminuição na contagem de células somáticas (por exemplo, redução da média logarítmica da con- tagem de células somáticas).
[0207] Conforme usado no presente documento, "inibir uma doen- ça ou transtorno" pode significar reduzir o número de animais com a doença ou transtorno, prevenir a doença ou transtorno, reduzir os sin- tomas da doença ou transtorno em animais ou combinações dos mesmos, em que a doença ou transtorno é selecionado a partir do grupo que consiste em febre do leite, cetose, placenta retida, metrite, pneumonia e abomaso deslocado. Conforme usado no presente do- cumento, "diminuir a perda por morte em animais" pode significar re- duzir o número de perdas dos animais por morte ou prevenir as perdas por morte dos animais. Conforme usado no presente documento, "di- minuir eventos de ausência de alimentação em animais" pode signifi- car reduzir o número de eventos de ausência de alimentação nos ani- mais ou prevenir quaisquer eventos de ausência de alimentação nos animais ou, por exemplo, aumentar a ruminação diária (por exemplo, tempo de ruminação por dia). Conforme usado no presente documen- to, os termos "inibir", "inibição", "diminuir", "diminuição", "aumentar", "aumento", "melhorar", "melhora", "reduzir" ou "redução", por exemplo, são todos relativos à condição dos animais (por exemplo, animais lei-
teiros) antes de administrar a cepa ou cepas aos animais (denomina- dos "Pré-Bacillus" nos Exemplos) ou, por exemplo, em relação a um animal não alimentado com a cepa de Bacillus. Conforme usado no presente documento, "melhorar a qualidade do leite" pode signifi- car aumentar a porcentagem de gordura do leite (ou, por exemplo, li- bras de gordura do leite), aumentar o teor de proteínas do leite (por exemplo, em porcentagem ou libras), aumentar o leite corrigido pelo teor de gordura total, aumentar o teor de energia do leite e/ou diminuir a contagem de células somáticas, conforme descrito no presente do- cumento. Conforme usado no presente documento, "teor de energia do leite" (Energy-Corrected Milk, ECM) é um cálculo da quantidade de energia no leite com base no volume, gordura e proteínas do leite. O teor de energia do leite determina a quantidade de leite produzida, ajustada para 3,5 % de gordura e 3,2 % de proteínas. O teor de ener- gia do leite é uma medida mais útil para rastrear a produtividade do rebanho do que simplesmente o volume de leite produzido, uma vez que coloca todos os animais em uma base igual para fins comparati- vos ao longo do tempo.
[0208] Em modalidades descritas no presente documento nas quais as composições da presente invenção que compreendem as ce- pas de Bacillus 86 e/ou 300 e/ou 101 e/ou 235 e/ou 177 e/ou 102 e/ou cepas que têm todas de suas características de identificação, são ad- ministradas a um animal, as composições são, de preferência, admi- nistradas aos animais através da via oral em uma composição de ra- ção ou na água potável, porém, qualquer outro método eficaz de ad- ministração conhecido por aqueles versados na técnica pode ser usa- do. Em uma modalidade ilustrativa, as cepas de Bacillus 86 e/ou 300 e/ou 101 e/ou 235 e/ou 177 e/ou 102 e/ou cepas que têm todas de su- as características de identificação são fornecidas na forma de um adi- tivo para adição à água potável do animal.
[0209] Em outra modalidade ilustrativa, as cepas de Bacillus 86 e/ou 300 e/ou 101 e/ou 235 e/ou 177 e/ou 102 e/ou cepas que têm to- das de suas características de identificação são fornecidas na forma de um aditivo para ração para adição a uma composição de ração. A composição de ração pode conter a cepa de Bacillus 86 e/ou 300 e/ou 101 e/ou 235 e/ou 177 e/ou 102 e/ou cepas que têm todas de suas características de identificação, em uma mistura com uma ração ani- mal, incluindo qualquer mistura de ração animal reconhecida na técni- ca ou qualquer mistura de ração animal descrita no presente docu- mento. Conforme usado no presente documento, "composição de ra- ção" ou "composição de ração animal" significa uma composição de ração que compreende a cepa de Bacillus 86 e/ou 300 e/ou 101 e/ou 235 e/ou 177 e/ou 102 e/ou cepas que têm todas de suas característi- cas de identificação, em uma mistura com uma ração animal e, opcio- nalmente, quaisquer outros componentes que possam ser usados em uma composição de ração, incluindo outras cepas bacterianas, tais como outras cepas de Bacillus ou cepas de Lactobacillus.
[0210] Qualquer mistura de ração animal, incluindo aquelas co- nhecidas na técnica e aquelas descritas no presente documento, pode ser usada de acordo com os métodos e composições descritas no pre- sente pedido de patente, tais como farinha de colza, farinha de semen- te de algodão, farinha de soja, fubá, cevada, trigo, silagem e feno ensi- lado. Em várias modalidades, uma ração mista total com base em feno de alfafa e silagem de milho ou uma ração mista de silagem de milho pode ser usada. Em várias modalidades, a mistura de ração animal pode ser suplementada com a cepa de Bacillus 86 e/ou cepa de Baci- llus 300 e/ou cepa de Bacillus 101 e/ou cepa de Bacillus 235 e/ou cepa de Bacillus 177 e/ou cepa de Bacillus 102 e/ou cepas que têm todas de suas características de identificação, porém, outros ingredientes podem ser opcionalmente adicionados à mistura de ração animal, in-
cluindo outras cepas bacterianas diferentes, tais como outras cepas de Bacillus ou cepas de Lactobacillus.
[0211] Em várias modalidades ilustrativas, os ingredientes opcio- nais da mistura de ração animal incluem açúcares e carboidratos com- plexos, tais como monossacarídeos, dissacarídeos e polissacarídeos solúveis em água e insolúveis em água. Outros ingredientes opcionais incluem grãos solúveis de destilados secos, gordura (por exemplo, gordura bruta), fósforo, bicarbonato de sódio, calcário, sal, fitato, cál- cio, sódio, enxofre, magnésio, potássio, cobre, ferro, manganês, zinco, cinzas, óleo de peixe, um óleo derivado de farinha de peixe, semente crua (por exemplo, linhaça), um antioxidante e amido. Em outra moda- lidade, os minerais podem ser adicionados na forma de uma pré- mistura mineral.
[0212] Ingredientes de aminoácidos opcionais que podem ser adi- cionados à mistura de ração animal são arginina, histidina, isoleucina, leucina, lisina, cisteína, metionina, fenilalanina, treonina, triptofano, va- lina, etil HCl de tirosina, alanina, ácido aspártico, glutamato de sódio, glicina, prolina, serina, etil HCl de cisteína e análogos e sais dos mes- mos. As vitaminas que podem ser opcionalmente adicionadas são tia- mina HCl, riboflavina, piridoxina HCl, niacina, niacinamida, inositol, clo- reto de colina, pantotenato de cálcio, biotina, ácido fólico, ácido ascór- bico e vitaminas A, B, K, D, E e assim por diante. Em outra modalida- de, as vitaminas podem ser adicionadas na forma de uma pré-mistura de vitaminas. Em ainda outra modalidade, ingredientes de proteína podem ser adicionados à mistura de ração animal e incluem proteína obtida a partir de farinha de carne, farinha de ossos ou farinha de pei- xe, ovo líquido ou em pó, solúveis de peixe, proteína bruta e assim por diante.
[0213] Em outro aspecto ilustrativo, quaisquer ingredientes medi- camentosos conhecidos na técnica podem ser adicionados à mistura de ração animal ou a um aditivo para a água potável do animal, tal como antibióticos. Em várias modalidades, o antibiótico é selecionado a partir do grupo que consiste em eritromicina, levofloxacina, trimeto- prima/sulfametoxazol, trimetoprima, daptomicina, rifampicina, tilosina, tilmicosina, vancomicina, monensina, lasalocida e propionato de laqui- domicina e combinações das mesmas. Em outra modalidade, a mistu- ra de ração animal, a composição de ração, o aditivo para ração ou o aditivo para a água potável do animal podem conter antibióticos ou podem não conter antibióticos.
[0214] Em outra modalidade ilustrativa, uma ou mais enzimas po- dem ser adicionadas à mistura de ração animal. Em várias modalida- des, as enzimas que podem ser adicionadas incluem uma galactosida- se, uma fitase, uma protease, uma lipase, uma amilase, uma hemice- lulase, uma arabinoxilanase, uma xilanase, uma celulase, uma NSPase, combinações das mesmas e qualquer outra enzima que me- lhore a eficácia da composição de ração para os usos descritos no presente documento. Em ainda outra modalidade, levedura, fungos (por exemplo, Aspergillus ou Trichoderma) ou micronutrientes podem ser adicionados à ração animal. Qualquer um dos ingredientes descri- tos acima que são adequados para adição a um aditivo para a água potável do animal pode ser adicionado como um componente do aditi- vo para a água potável do animal conforme descrito no presente do- cumento.
[0215] Em várias modalidades ilustrativas, a cepa de Bacillus (por exemplo, cepa de Bacillus 86 e/ou 300 e/ou 101 e/ou 235 e/ou 177 e/ou 102 e/ou cepas que têm todas de suas características de identifi- cação) ou quaisquer outras cepas bacterianas diferentes adicionadas além destas cepas de Bacillus podem ser administradas na composi- ção de ração, cada cepa em uma dose de cerca de 1,0 x 10 3 CFU/libra da composição de ração a cerca de 5,0 x 1012 CFU/libra da composi-
ção de ração, cada cepa em uma dose de cerca de 0,5 x 10 7 CFU/libra da composição de ração a cerca de 5,0 x 107 CFU/libra da composição de ração ou em uma dose maior do que cerca de 5,0 x 10 6 CFU/libra da composição de ração.
Em outras modalidades, cada cepa de Bacillus (por exemplo, cepa de Bacillus 86 e/ou 300 e/ou 101 e/ou 235 e/ou 177 e/ou 102 e/ou cepas que têm todas de suas característi- cas de identificação) pode ser administrada na composição de ração em uma dose maior do que cerca de 1,0 x 103 CFU/libra da composi- ção de ração, em uma dose maior do que cerca de 1,1 x 103 CFU/libra da composição de ração, em uma dose maior do que cerca de 1,25 x 103 CFU/libra da composição de ração, em uma dose maior do que cerca de 1,5 x 103 CFU/libra da composição de ração, em uma dose maior do que cerca de 1,75 x 10 3 CFU/libra da composição de ração, em uma dose maior do que cerca de 1,0 x 104 CFU/libra da composi- ção de ração, em uma dose maior do que cerca de 2,0 x 104 CFU/libra da composição de ração, em uma dose maior do que cerca de 3,0 x 104 CFU/libra da composição de ração, em uma dose maior do que cerca de 4,0 x 104 CFU/libra da composição de ração, em uma dose maior do que cerca de 5,0 x 10 4 CFU/libra da composição de ração, em uma dose maior do que cerca de 6,0 x 104 CFU/libra da composi- ção de ração, em uma dose maior do que cerca de 7,0 x 104 CFU/libra da composição de ração, em uma dose maior do que cerca de 8,0 x 104 CFU/libra da composição de ração, em uma dose maior do que cerca de 1,0 x 105 CFU/libra da composição de ração, em uma dose maior do que cerca de 1,0 x 10 6 CFU/libra da composição de ração, em uma dose maior do que cerca de 2,0 x 106 CFU/libra da composi- ção de ração, em uma dose maior do que cerca de 3,0 x 106 CFU/libra da composição de ração, em uma dose maior do que cerca de 4,0 x 106 CFU/libra da composição de ração, em uma dose maior do que cerca de 5,0 x 106 CFU/libra da composição de ração, em uma dose maior do que cerca de 6,0 x 10 6 CFU/libra da composição de ração, em uma dose maior do que cerca de 7,0 x 106 CFU/libra da composi- ção de ração, em uma dose maior que cerca de 8,0 x 106 CFU/libra da composição de ração, em uma dose maior do que cerca de 9,0 x 106 CFU/libra da composição de ração, em uma dose maior do que cerca de 1,0 x 107 CFU/libra da composição de ração, em uma dose maior do que cerca de 2,0 x 10 7 CFU/libra da composição de ração, em uma dose maior do que cerca de 3,0 x 107 CFU/libra da composi- ção de ração, em uma dose maior que cerca de 4,0 x 107 CFU/libra da composição de ração, em uma dose maior do que cerca de 5,0 x 107 CFU/libra da composição de ração, em uma dose maior do que cerca de 1,0 x 108 CFU/libra da composição de ração, em uma dose maior do que cerca de 1,0 x 10 9 CFU/libra da composição de ração, em uma dose maior do que cerca de 1,0 x 10 10 CFU/libra da composi- ção de ração, em uma dose maior do que cerca de 1,0 x 10 11 CFU/libra do composição de ração ou em uma dose maior do que cerca de 1,0 x 1012 CFU/libra da composição de ração. Em todas as modalidades descritas neste parágrafo, o animal pode ser alimentado ou pode con- sumir cerca de 30 libras, cerca de 35 libras, cerca de 40 libras, cerca de 45 libras, cerca de 50 libras, cerca de 55 libras, cerca de 60 libras, cerca de 65 libras ou cerca de 70 libras da composição de ração por dia.
[0216] Em outras modalidades, as cepas de Bacillus (por exem- plo, cepa de Bacillus 86, 300, 101, 235, 177 e 102 e/ou cepas que têm todas de suas características de identificação) podem ser administra- das na composição de ração ao adicionar cerca de 15 gramas de um aditivo para ração à composição de ração completa, em que os 15 gramas do aditivo compreendem todas as cepas para fornecer um to- tal das cepas combinadas nos 15 gramas do aditivo de cerca de 1,0 x 109 CFU, cerca de 2,0 x 109 CFU, cerca de 3,0 x 109 CFU, cerca de 4,0 x 109 CFU, cerca de 5,0 x 109 CFU, cerca de 6,0 x 109 CFU, cerca de 7,0 x 109 CFU, cerca de 8,0 x 109 CFU, cerca de 9,0 x 109 CFU ou cer- ca de 1,0 x 1010 CFU para alimentar o animal por dia. Em todas as modalidades descritas neste parágrafo, o animal pode ser alimentado ou pode consumir cerca de 30 libras, cerca de 35 libras, cerca de 40 libras, cerca de 45 libras, cerca de 50 libras, cerca de 55 libras, cerca de 60 libras, cerca de 65 libras ou cerca de 70 libras da composição de ração completa por dia e os 15 gramas do aditivo para ração podem ser adicionados a qualquer uma destas quantidades da composição de ração.
[0217] Em outra modalidade, as cepas de Bacillus (por exem- plo, cepa de Bacillus 86, 300, 101, 235, 177 e 102 e/ou cepas que têm todas de suas características de identificação) podem ser administra- das na composição de ração ao adicionar cerca de 15 gramas de um aditivo para ração que compreende cerca de 7,0 x 10 9 CFU no total das cepas combinadas (por exemplo, cerca de 7,35 x 10 9 CFU no to- tal), por exemplo, a cerca de 30 libras, cerca de 35 libras, cerca de 40 libras, cerca de 45 libras, cerca de 50 libras, cerca de 55 libras, cerca de 60 libras, cerca de 65 libras ou cerca de 70 libras da composição de ração completa a ser alimentada ou consumida por animal por dia.
[0218] Em qualquer das modalidades de dose para as cepas de Bacillus 86, 300, 101, 235, 177 e 102 e/ou cepas que têm todas de su- as características de identificação, descritas acima, as cepas de Baci- llus (cepas de Bacillus 86, 300, 101, 235, 177 e 102 e/ou cepas que têm todas de suas características de identificação) podem ser incluí- das no aditivo para ração para adição à composição de ração em pro- porções exemplificativas selecionadas a partir de qualquer uma das proporções mostradas abaixo, em que as proporções referem-se às cepas de Bacillus 86, 300, 101, 235, 177 e 102 e/ou cepas que têm todas de suas características de identificação, nesta ordem.
1:1:1:1:1:1 1:0,8:1:1:1:1 1:1:0,8:1:1:1 1:1:1:0,8:1:1 1:1:1:1:0,8:1 1:1:1:1:1:0,8 1:0,5:1:1:1:1 1:1:0,5:1:1:1 1:1:1:0,5:1:1 1:1:1:1:0,5:1 1:1:1:1:1:0,5 1:0,2:1:1:1:1 1:1:0,2:1:1:1 1:1:1:0,2:1:1 1:1:1:1:0,2:1 1:1:1:1:1:0,2 0,8:0,5:1:1:1:1 1:0,8:0,5:1:1:1 1:1:0,8:0,5:1:1 1:1:1:0,8:0,5:1 1:1:1:1:0,8:0,5 0,2:0,5:1:1:1:1 1:0,2:0,5:1:1:1 1:1:0,2:0,5:1:1 1:1:1:0,2:0,5:1 1:1:1:1:0,2:0,5 0,8:0,2:1:1:1:1 1:0,8:0,2:1:1:1 1:1:0,8:0,2:1:1 1:1:1:0,8:0,2:1
1:1:1:1:0,8:0,2 0,8:0,5:0,2:1:1:1 1:0,8:0,5:0,2:1:1 1:1:0,8:0,5:0,2:1 1:1:1:0,8:0,5:0,2 0,2:1:1:1:0,8:0,5 0,8:0,2:0,5:1:1:1 1:0,8:0,2:0,5:1:1 1:1:0,8:0,2:0,5:1 1:1:1:0,8:0,2:0,5 0,5:1:1:1:0,8:0,2 0,2:0,8,:0,5:1:1:1 1:0,2:0,8:0,5:1:1 1:1:0,2:0,8:0,5:1 1:1:1:0,2:0,8:0,5 0,2:1:1:1:0,8:0,5
[0219] Em várias modalidades, a cepa de Bacillus (por exem- plo, cepa de Bacillus 86 e/ou 300 e/ou 101 e/ou 235 e/ou 177 e/ou 102) para uso de acordo com os métodos e as composições descritas no presente documento podem ser selecionadas a partir do grupo que consiste na cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Baci- llus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B- 67218), a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), uma cepa que tem todas as caracte- rísticas de identificação da cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), uma cepa que tem todas as características de identificação da ce- pa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), uma cepa com todas das ca- racterísticas de identificação da cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-
67219), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275) e uma cepa que tem to- das as características de identificação da cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276). A cepa de Bacillus MDG 101 e a cepa de Bacillus MDG 235 foram depositadas em 4 de janeiro de 2016 na Agricultural Rese- arch Service Culture Collection (NRRL), National Center for Agricultu- ral Usation Research, Agricultural Research Service, USDA, 1815 North University Street, Peoria, Illinois 61604- 3999 e receberam os números de acesso B-67218 e B-67219, respectivamente.
A cepa de Bacillus MGL177 e a cepa de Bacillus MGL102 foram depositadas em 7 de junho de 2016 na Agricultural Research Service Culture Collection (NRRL), National Center for Agricultural Usation Research, Agricultural Research Service, USDA, 1815 North University Street, Peoria, Illinois 61604-3999 e receberam os números de acesso B-67275 e B-67276, respectivamente.
A cepa de Bacillus MDG86 e a cepa de Bacillus MDG300 foram depositadas em 14 de março de 2014 no Agricultural Research Service Culture Collection (NRRL), National Center for Agri- cultural Usation Research, Agricultural Research Service, USDA, 1815 North University Street, Peoria, Illinois 61604-3999 e receberam os números de acesso B-50944 e B-50943, respectivamente.
As designa- ções de cepa NRRL MDG86 e MDG300 são equivalentes à cepa de Bacillus 86 e 300, respectivamente, conforme referido no pedi- do.
As designações de cepas NRRL MDG 101, MDG 235, MGL177 e MGL102 são equivalentes às cepas de Bacillus 101, 235, 177 e 102, respectivamente, conforme citado no pedido.
Os depósitos foram feitos de acordo com as disposições do Tratado de Budapeste sobre o Re- conhecimento Internacional do Depósito de Micro-organismos para Fins de Procedimento de Patente.
As cepas descritas no presente do- cumento podem ser denominadas como cepa de Bacillus 86, cepa de Bacillus 300, cepa de Bacillus 101, cepa de Bacillus 235, cepa de Ba-
cillus 177 ou cepa de Bacillus 102 ou cepa 86, cepa 300, cepa 101, cepa 235, cepa 177 ou cepa 102.
[0220] As cepas de Bacillus 102 e 177 são cepas de Bacillus pumi- lus, a cepa de Bacillus 77 é uma cepa de Bacillus licheniformis e todas as outras cepas descritas no pedido são cepas de Bacillus subtilis.
[0221] Qualquer uma destas cepas pode ser administrada indivi- dualmente ou em combinação na forma de uma composição de ração (por exemplo, uma ração completa que compreende uma mistura de ração animal) ou na água potável para um animal. Em uma modalida- de, várias cepas são administradas em combinação em uma única composição. Em outra modalidade, várias cepas são administradas em composições separadas.
[0222] Em outra modalidade, uma ou mais das cepas de Bacillus descritas nos parágrafos anteriores (por exemplo, cepa de Bacillus 86 e/ou cepa de Bacillus 300 e/ou cepa de Bacillus 101 e/ou cepa de Ba- cillus 235 e/ou cepa de Bacillus 177 e/ou cepa de Bacillus 102 e/ou cepas que têm todas de suas características de identificação) podem ser administradas ao animal juntamente com outra cepa bacteriana diferente selecionada a partir do grupo que consiste em outra cepa de Bacillus, uma cepa de bactérias do ácido láctico e combinações das mesmas. Em ainda outra modalidade, uma ou mais das cepas de Ba- cillus descritas nos parágrafos anteriores (por exemplo, cepa de Baci- llus 86 e/ou cepa de Bacillus 300 e/ou cepa de Bacillus 101 e/ou cepa de Bacillus 235 e/ou cepa de Bacillus 177 e/ou cepa de Bacillus 102 e/ou cepas que têm todas de suas características de identificação) po- dem ser administradas ao animal juntamente com qualquer outra cepa bacteriana diferente eficaz para os usos descritos no presente docu- mento.
[0223] Conforme usado no presente documento, "uma cepa que tem todas as características de identificação" da cepa de Bacillus 86, a cepa de Bacillus 300, a cepa de Bacillus 101, cepa de Bacillus 235, cepa de Bacillus 177 ou cepa de Bacillus 102 pode ser uma cepa mutante que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 86, a cepa de Bacillus 300, a cepa de Bacillus 101, cepa de Bacillus 235, cepa de Bacillus 177 ou cepa de Bacillus 102 (por exem- plo, tem um perfil de caracterização por DNA com base em análise de DNA que corresponde ao perfil de caracterização por DNA de cepa de Bacillus 86, cepa de Bacillus 300, cepa de Bacillus 101, cepa de Baci- llus 235, cepa de Bacillus 177 ou cepa de Bacillus 102, atividades en- zimáticas que correspondem à cepa de Bacillus 86, cepa de Bacillus 300, cepa de Bacillus 101, cepa de Bacillus 235, cepa de Bacillus 177 ou cepa de Bacillus 102, atividade antimicrobiana que corresponde à cepa de Bacillus 86, cepa de Bacillus 300, cepa de Bacillus 101, cepa de Bacillus 235, cepa de Bacillus ou 177 ou cepa de Bacillus 102, perfis de tolerância e sensibilidade a antibiótico que correspon- dem à cepa de Bacillus 86, cepa de Bacillus 300, cepa de Bacillus 101, cepa de Bacillus 235, cepa de Bacillus 177 ou cepa de Bacillus 102). Em modalidades alternativas, a mutação pode ser uma mutação natural ou uma mutação geneticamente modificada.
Em outra modali- dade, "uma cepa que tem todas as características de identificação" da cepa de Bacillus 86, a cepa de Bacillus 300, a cepa de Bacillus 101, cepa de Bacillus 235, cepa de Bacillus 177 ou cepa de Bacillus 102 pode ser uma cepa, por exemplo, produzida ao isolar um ou mais plasmídeos da cepa de Bacillus 86, a cepa de Bacillus 300, a cepa de Bacillus 101, cepa de Bacillus 235, cepa de Bacillus 177 ou cepa de Bacillus 102 e introduzir um ou mais plasmídeos em outra bactéria, tal como outra cepa de Bacillus, contanto que o um ou mais plasmídeos contenham DNA que confere as características de identificação da ce- pa de Bacillus 86, a cepa de Bacillus 300, a cepa de Bacillus 101, cepa de Bacillus 235, cepa de Bacillus 177 ou cepa de Bacillus 102 (por exemplo, um perfil de caracterização por DNA com base em análise de DNA que corresponde ao perfil de caracterização por DNA da cepa de Bacillus 86, a cepa de Bacillus 300, a cepa de Bacillus 101, cepa de Bacillus 235, cepa de Bacillus 177 ou cepa de Bacillus 102).
[0224] A composição de ração ou água potável que compreende a cepa de Bacillus 86 e/ou cepa de Bacillus 300 e/ou cepa de Bacillus 101 e/ou cepa de Bacillus 235 e/ou cepa de Bacillus 177 e/ou cepa de Bacillus 102 e/ou cepas que têm todas de suas características de iden- tificação podem ser administradas ao animal durante qualquer período de tempo que seja eficaz para os usos descritos no presente docu- mento ou combinações dos mesmos. Por exemplo, em uma modalida- de, a composição de ração ou água potável pode ser fornecida ao animal diariamente. Em uma modalidade alternativa, a composição de ração ou água potável pode ser administrada ao animal durante a lac- tação e/ou durante a gestação. Os períodos de tempo para a adminis- tração da composição de ração ou água potável descritos acima são exemplos não limitativos e será reconhecido que qualquer período de tempo ou cronograma de administração determinado como eficaz para os usos descritos no presente documento ou combinações dos mes- mos pode ser usado.
[0225] Em modalidades adicionais da invenção, são fornecidas composições que compreendem a cepa de Bacillus 86, a cepa de Ba- cillus 300, a cepa de Bacillus 101, a cepa de Bacillus 235, a cepa de Bacillus 177 e a cepa de Bacillus 102 e/ou cepas que têm todas de suas características de identificação. Em uma modalidade, é fornecida uma embalagem comercial para uso animal que compreende todas as cepas isoladas que compreendem a cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B- 50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275) e a cepa de Bacillus 102
(NRRL Nº B-67276).
[0226] Em outra modalidade, é fornecido um aditivo para ração para uma ração animal que compreende todas as cepas isoladas que compreendem a cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B- 67218), a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275) e a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276).
[0227] Em ainda outra modalidade, é fornecido um aditivo para a água potável de um animal que compreende todas as cepas isoladas que compreendem a cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Baci- llus 177 (NRRL Nº B-67275) e a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B- 67276).
[0228] Em ainda outra modalidade, é fornecida uma composição de ração animal que compreende todas as cepas isoladas que com- preendem a cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Baci- llus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B- 67218), a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275) e a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276).
[0229] Em uma modalidade, o aditivo para ração para adição a uma mistura de ração animal para produzir uma composição de ração completa pode ser misturado com a mistura de ração animal, por exemplo, com um sistema automatizado de distribuição de micronutri- entes ou, por exemplo, através de pesagem e adição manuais para atingir qualquer uma das doses da cepa de Bacillus 86, a cepa de Ba- cillus 300, a cepa de Bacillus 101, cepa de Bacillus 235, cepa de Baci- llus 177 ou cepa de Bacillus 102 e/ou cepas que têm todas de suas características de identificação descritas no presente documento para administração ao animal na forma de uma composição de ração com-
pleta. A mistura também pode ser feita através de qualquer outro mé- todo adequado conhecido na técnica para combinar produtos microbi- anos de alimentação direta com uma mistura de ração animal para ob- ter uma mistura uniforme. Em várias modalidades, a mistura pode ser feita durante qualquer período de tempo adequado (por exemplo, cer- ca de 1 a cerca de 4 minutos). Na modalidade na qual cepa de Bacillus 86, cepa de Bacillus 300, cepa de Bacillus 101, a cepa de Bacillus 235, a cepa de Bacillus 177 e a cepa de Bacillus 102 e/ou cepas que têm todas de suas características de identificação estão na forma de um aditivo para beber água do animal, a cepa de Bacillus 86, a cepa de Bacillus 300, a cepa de Bacillus 101, a cepa de Bacillus 235, a cepa de Bacillus 177 e a cepa de Bacillus 102 e/ou cepas que têm todas de suas características de identificação podem estar na forma, por exem- plo, de um pó, um líquido ou pelotas e pode ser misturada com a água potável usando qualquer método adequado conhecido na técnica para atingir qualquer uma das doses da cepa de Bacillus 86, a cepa de Ba- cillus 300, a cepa de Bacillus 101, cepa de Bacillus 235, cepa de Baci- llus 177 ou cepa de Bacillus 102 e/ou cepas que têm todas de suas características de identificação descritas no presente documento para administração ao animal na água potável do animal. A cepa de Baci- llus 86, a cepa de Bacillus 300, a cepa de Bacillus 101, a cepa de Ba- cillus 235, a cepa de Bacillus 177 e a cepa de Bacillus 102 e/ou cepas que têm todas de suas características de identificação também podem ser alimentadas diretamente ao animal através da via oral (ou seja, por meio de inserção através da via oral) na forma de um pó, um líquido, uma cápsula, um revestimento, um gel ou uma pelota.
[0230] Em qualquer uma das modalidades de composição descri- tas no presente documento, a cepa de Bacillus 86, a cepa de Bacillus 300, a cepa de Bacillus 101, a cepa de Bacillus 235, a cepa de Bacillus 177 e a cepa de Bacillus 102 e/ou cepas que têm todas de suas carac-
terísticas de identificação podem causar um efeito selecionado a partir do grupo que consiste em melhorar o desempenho reprodutivo do animal, diminuir a perda por mortes e/ou eventos de ausência de ali- mentação no animal, melhorar a produção de leite e/ou a qualidade do leite no animal e/ou inibir uma doença ou transtorno no animal selecio- nado a partir do grupo que consiste em febre do leite, cetose, placenta retida, metrite, pneumonia e abomaso deslocado.
[0231] Em um aspecto ilustrativo, o aditivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou a composição de ração pode estar na forma de uma embalagem comercial. Em outra modalidade ilustrativa, o aditivo para ração ou aditivo para a água potável do animal que compreende a cepa de Bacillus 86, a cepa de Bacillus 300, a cepa de Bacillus 101, a cepa de Bacillus 235, a cepa de Bacillus 177 e a cepa de Bacillus 102 e/ou cepas que têm todas de suas características de identificação na embalagem comercial podem estar na forma de um concentrado que compreende, por exemplo, cerca de 1 x 108 a cerca de 7 x 1010 CFU/g das cepas em combinação ou um superconcentrado (por exemplo, cerca de 8 x 10 10 a cerca de 5 x 1012 CFU/g das cepas em combinação). Em outra modalidade, o aditivo para ração, composi- ção de ração ou aditivo para a água potável do animal ou a cepa de Bacillus 86, a cepa de Bacillus 300, a cepa de Bacillus 101, a cepa de Bacillus 235, a cepa de Bacillus 177 e a cepa de Bacillus 102 e/ou ce- pas que têm todas de suas características de identificação estão em uma composição em uma embalagem comercial e podem estar na forma seca (por exemplo, um pó), uma forma peletizada, uma forma líquida, na forma de um revestimento superior ou na forma de um gel, na forma de uma cápsula ou em qualquer outra forma adequada.
[0232] Em ainda outra modalidade, as cepas na forma de uma embalagem comercial podem estar, por exemplo, na forma seca (por exemplo, um pó ou forma liofilizada), em uma forma peletizada ou em uma forma líquida.
[0233] Em outra modalidade ilustrativa, a embalagem comercial, aditivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou composi- ção de ração pode compreender ainda um carreador para a cepa de Bacillus 86, a cepa de Bacillus 300, a cepa de Bacillus 101, a cepa de Bacillus 235, a cepa de Bacillus 177 e a cepa de Bacillus 102 e/ou ce- pas que têm todas de suas características de identificação. O carrea- dor pode ser selecionado a partir do grupo que consiste em um farelo, casca de arroz, um sal, óleo mineral, uma dextrina (por exemplo, mal- todextrina), soro de leite, açúcar, calcário, amido seco, aluminato de sílica de sódio, óleo vegetal e combinações dos mesmos. Em outra modalidade, o carreador pode ser qualquer carreador adequado co- nhecido na técnica para um produto microbiano de alimentação dire- ta. Em outra modalidade, a embalagem comercial, aditivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou composição de ração pode compreender ainda um aglutinante, tal como argila, componentes da parede celular de levedura, silicato de alumínio, glucano ou outros aglutinantes conhecidos. Em outra modalidade, a embalagem comer- cial, aditivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou com- posição da ração pode compreender ainda aglutinantes inorgâni- cos/orgânicos, óleos essenciais e/ou ácidos orgânicos. Qualquer um dos componentes aglutinantes ou carreadores pode ser adicionado exogenamente (isto é, não está naturalmente presente em combina- ção com as cepas de Bacillus) e qualquer uma das composições des- critas no presente documento pode estar presente em composições de nutrientes dietéticos (por exemplo, composições probióticas).
[0234] Em ainda outras modalidades, a embalagem comercial, adi- tivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou composição de ração que compreende a cepa de Bacillus 86, a cepa de Bacillus 300, a cepa de Bacillus 101, a cepa de Bacillus 235, a cepa de Bacillus
177 e a cepa de Bacillus 102 e/ou cepas que têm todas de suas carac- terísticas de identificação está em um recipiente para uso comerci- al. Em várias modalidades, o recipiente pode ser, por exemplo, um sa- co (por exemplo, um saco de 20 libras, um saco de 50 libras, um saco de 2 onças, um saco de 1 libra ou um saco de 1 kg), uma bolsa, um tambor, uma garrafa ou uma caixa. Em aspectos ilustrativos, o recipi- ente para a embalagem comercial, aditivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou composição de ração que compreende a cepa de Bacillus 86, a cepa de Bacillus 300, a cepa de Bacillus 101, a cepa de Bacillus 235, a cepa de Bacillus 177 e a cepa de Bacillus 102 e/ou cepas que têm todas de suas características de identificação po- de compreender plástico, metal, folha, papel, fibra ou papelão (por exemplo, um balde de plástico, um saco de papel, um saco de folha, um tambor de fibra, etc.). A embalagem comercial, aditivo para ração, aditivo para a água potável do animal ou composição de ração pode ainda compreender instruções para uso de uma ou mais das cepas de Bacillus.
[0235] Em um aspecto, qualquer uma das composições descritas no presente documento pode compreender ainda um componente nu- triente adicionado exogenamente (isto é, não naturalmente presente com a cepa de Bacillus) selecionado a partir do grupo que consiste em uma vitamina, um antibiótico, uma enzima, uma monossacarídeo, dis- sacarídeo ou polissacarídeo solúvel ou insolúvel em água, uma gordu- ra, fósforo, bicarbonato de sódio, calcário, cálcio, sódio, enxofre, mag- nésio, potássio, cobre, ferro, manganês, zinco, óleo de peixe, semente crua, um antioxidante e um amido. Em uma modalidade, o componen- te nutriente adicionado exogenamente pode ser uma enzima e a enzi- ma pode ser selecionada a partir do grupo que consiste em uma galac- tosidase, uma protease, uma lipase, uma amilase, uma hemicelulase, uma arabinoxilanase, uma xilanase, uma celulase, uma NSPase, uma fitase e combinações das mesmas.
[0236] Os exemplos a seguir são apenas para fins ilustrativos. Os exemplos não são limitativos e não se destinam a limitar a invenção de forma alguma. EXEMPLO 1 Teste de Campo
[0237] O objetivo do ensaio de campo foi determinar o efeito da suplementação com a cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276), a cepa de Baci- llus 177 (NRRL B-67275) e a cepa de Bacillus 235 (NRRL B-67219) sobre a saúde da vaca, produção de leite e parâmetros de reprodução, em uma fazenda no meio-oeste de 700 vacas leiteiras Holandesas com incidência de problemas digestivos acima da média. Design e Métodos de Ensaio
[0238] As medidas de produção, reprodução e saúde foram moni- toradas em todo o rebanho via Dairy Comp 305 (Valley Agricultural Software, Tulare, CA) com um período de 3 meses de suplementação pré-Bacillus servindo como linha de base. Todo o rebanho foi monito- rado quanto à produção de leite, componentes do leite, saúde e de- sempenho reprodutivo por 10 meses, durante os quais as vacas rece- beram suplementação diária de Bacillus, medindo semanalmente a produção individual de leite da vaca, mensalmente os componentes DHIA do leite e mensalmente eventos de saúde. Durante o período de suplementação de Bacillus, as vacas receberam 15 gramas do produto de Bacillus diariamente para fornecer 7,35 x 109 unidades formadoras de colônias (CFU) por cabeça por dia de Bacillus vivo dentro de uma silagem de milho padrão e ração total mista com base em feno de alfa- fa. As medidas reprodutivas foram avaliadas durante um período de 6 meses ao longo de anos consecutivos, durante os quais a suplemen-
tação pré-Bacillus foi comparada com a suplementação pós-Bacillus para controlar a variação sazonal. Análise Estatística
[0239] Os dados de produção e componentes foram analisados por meio do procedimento MIXED do SAS (versão 9.2 SAS Institute, Cary NC) procurando os efeitos fixos do tratamento e a interação do tratamen- to*mês*ano, usando dias em lactação (Days In Milk, DIM) como covariá- vel. As medidas de saúde e reprodutiva foram avaliadas por meio do pro- cedimento GLIMMIX do SAS. A significância entre as médias foi definida em p ≤ 0,05 e as tendências foram indicadas quando p ≤ 0,1. Resultados
[0240] A alimentação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276), a ce- pa de Bacillus 177 (NRRL B-67275) e a cepa de Bacillus 235 (NRRL B-67219) diminuiu a incidência de deslocamento do abomaso, cetose e metrite em vacas novas. Tabela 1. Efeito do tratamento sobre a porcentagem média de vacas novas com doença Pré-Bacillus Bacillus P valor de tratamento Abomaso Deslocado 12,68 % 4,72 % 0,0016 Cetose 11,74 % 4,95 % < 0,0001 Metrite 12,68 % 5,29 % 0,0021
[0241] A alimentação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276), a ce- pa de Bacillus 177 (NRRL B-67275) e a cepa de Bacillus 235 (NRRL B-67219) aumentou a porcentagem de gordura do leite e o teor total de energia do leite em todo o rebanho. Tabela 2. Efeito do tratamento sobre as porcentagens médias dos componentes do leite e na produção diária de energia do leite
Pré-Bacillus Bacillus LS LS P valor de
SEM SEM média média tratamento % de Gordura 4,0112 % 0,0198 4,2903 % 0,0098 < 0,0001 de leite % de Proteína 3,1543 % 0,00658 3,0892 % 0,003264 < 0,0001 do leite Teor de ener- gia do leite 82,5794 0,5072 88,1808 0,2516 < 0,0001 (lbs/vaca/dia)
[0242] A alimentação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276), a ce- pa de Bacillus 177 (NRRL B-67275) e a cepa de Bacillus 235 (NRRL B-67219) melhorou as medidas reprodutivas no rebanho, conforme evidenciado por menos intervalos entre partos, maior detecção de cios, taxa de concepção e taxas de prenhez de 21 dias. Tabela 3. Efeito do tratamento sobre as medidas de eficiência repro- dutiva P valor de Pré-Bacillus Bacillus tratamento Taxa de detecção de cios, % 52,6 57,3 < 0,05 Intervalos entre partos 2,8 2,3 < 0,05 Taxa de concepção, % 36,0 43,8 < 0,05 Taxa de prenhez de 21 dias, % 17,9 23,9 < 0,05 EXEMPLO 2 Teste de Campo
[0243] O objetivo do ensaio de campo foi determinar o efeito da suplementação com a cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276), a cepa de Baci- llus 177 (NRRL B-67275) e a cepa de Bacillus 235 (NRRL B-67219) sobre as populações microbianas retais, saúde da vaca e produção de leite, em 14.000 vacas leiteiras na região de Mountain-West dos EUA com incidência de problemas digestivos acima da média e histórico de síndrome hemorrágica jejunal. Design e Métodos de Ensaio
[0244] O produto microbiano com a cepa de Bacillus alimentado diretamente foi suplementado a vacas em um laticínio de Idaho duran- te um período de 6 meses. Durante o período de suplementação de Bacillus, as vacas receberam 15 gramas do produto de Bacillus dia- riamente para fornecer 7,35 x 109 unidades formadoras de colônias (CFU) por cabeça por dia de Bacillus vivo dentro de uma silagem de milho padrão e ração total mista com base em feno de alfada ensilado. Antes da suplementação com DFM, 40 vacas aleatoriamente selecio- nadas foram amostradas por meio de esfregaço retal para estabelecer quantidades de linha de base de marcadores bacterianos e fúngicos gastrintestinais associados e genes de virulência. A amostragem foi repetida 60 dias após a implantação do suplemento de Bacillus, acom- panhando os mesmos animais hospedeiros (n = 37). O DNA genômico foi isolado a partir de esfregaços retais frescos, quantificado e subme- tido à qPCR para quantificação de genes alvo usando os iniciadores e condições de qPCR citados na Tabela 4. Tabela 4. Micro-organismos e genes alvo associados medidos por PCR quantitativa (qPCR) Micro-organismo Genes alvo associados 16S rRNA: gene conservado em todas as E. coli LT: Enterotoxina sensível ao calor Sta: Toxina A estável ao calor E. coli eaeA : proteína de aderência à intimina stx1: toxina Shiga 1 stx2: toxina Shiga 2 EAST1: Toxina enteroagregativa estável Clostridium per- cpa: alfa toxina fringens cpb: beta toxina Aspergillus spp. 18S rRNA: gene conservado em todos os Aspergillus
[0245] As medidas de produção e saúde foram monitoradas em todo o rebanho via Dairy Comp 305 (Valley Agricultural Software, Tula- re, CA) com um período de 6 meses antes da suplementação de Baci- llus servindo como linha de base. Então, pelos próximos 6 meses, todo o rebanho recebeu suplementação diária de Bacillus e foi monitorado quanto à produção de leite e eventos de saúde usando a produção in- dividual semanal de leite e eventos de saúde mensais. A gordura e a proteína do leite foram avaliadas mensalmente em um subconjunto de vacas (n = 1055) durante o mesmo período. Análise Estatística
[0246] As quantidades de genes microbianos foram transformadas em log10 e analisadas quanto aos efeitos significativos do tratamento com Bacillus usando ANOVA de uma via e comparações de pares de Tukey no Minitab v.17 (State College, PA). A significância entre as médias foi definida em p ≤ 0,05 e as tendências foram indicadas quan- do p ≤ 0,1. Os dados de produção e componentes foram analisados por meio do procedimento MIXED do SAS (versão 9.2 SAS Institute, Cary NC) procurando os efeitos fixos do tratamento e a interação do tratamento*mês*ano, usando dias em lactação (DIM) como covariá- vel. As medidas de saúde e reprodutiva foram avaliadas por meio do procedimento GLIMMIX do SAS. A significância entre as médias foi definida em p ≤ 0,05 e as tendências foram indicadas quando p ≤ 0,1. Resultados
[0247] A alimentação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276), a ce- pa de Bacillus 177 (NRRL B-67275) e a cepa de Bacillus 235 (NRRL B-67219) reduziu o trânsito gastrintestinal de populações microbianas indesejáveis. Especificamente, o rastreamento longitudinal de vacas individuais revelou que, após 60 dias de suplementação com Baci-
llus, houve reduções significativas nas quantidades retais de E. co- li total (16S), o gene da enterotoxina sensível ao calor (LT) e o gene de fixação e esgotamento de intimina (eaeA) de E. coli enteropatogênica e entero-hemorrágica. As quantidades do gene fúngico Aspergillus (18S) também foram reduzidas após a suplementação (p < 0,05) e as quantidades dos genes das alfa e beta toxinas de Clostridium perfrin- gens (cpa e cpb, respectivamente) foram numericamente reduzidas durante a suplementação de Bacillus (Figura 1). A alimentação da ce- pa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276), a cepa de Bacillus 177 (NRRL B- 67275) e a cepa de Bacillus 235 (NRRL B-67219) resultou na redução da incidência de febre do leite (hipocalcemia) (Tabela 5) em vacas frescas, bem como uma redução no número de vacas em todo o reba- nho com ausência de alimentação (Tabela 5). Tabela 5. Efeito do tratamento sobre a porcentagem média de vacas com doença Baci- P valor de Pré-Bacillus llus tratamento Hipocalcemia (febre do leite) 2,37 % 1,69 % 0,0094 Eventos de ausência de ali- 545 357 < 0,0001 mentação por dia
[0248] A alimentação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276), a ce- pa de Bacillus 177 (NRRL B-67275) e a cepa de Bacillus 235 (NRRL B-67219) resultou em percentuais de gordura e proteína do leite signi- ficativamente aumentados (Tabela 6) que, por sua vez, melhoraram o teor de energia do leite (Tabela 6) comparado com 6 meses de suplementação pré-Bacillus.
Tabela 6. Efeito do tratamento sobre as porcentagens médias dos componentes do leite e no teor de energia do leite Pré-Bacillus Bacillus P valor LS média SEM LS média SEM de tra- tamento % Gordura de leite 4,5393 % 0,0129 4,9569 % 0,0123 < 0,0001 % Proteína do leite 3,4497 % 0,00497 3,5973 % 0,00471 < 0,0001 Teor de energia do 76,0631 0,2635 78,2249 0,2497 < 0,0001 leite (lbs/vaca/dia) EXEMPLO 3 Meta-análise de Cinco Ensaios de Campo
[0249] O objetivo deste estudo foi determinar o efeito da suple- mentação com a cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B- 67218), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276), a cepa de Baci- llus 177 (NRRL B-67275) e a cepa de Bacillus 235 (NRRL B-67219) para cinco rebanhos leiteiros dos EUA sobre a saúde da vaca de tran- sição, perdas por mortes do rebanho, taxa de aborto, qualidade do lei- te, componentes do leite e produção de leite. Design e Métodos de Ensaio
[0250] As medidas de produção, reprodução e saúde foram moni- toradas em cinco rebanhos representando 20.000 vacas via Dairy Comp 305 (Valley Agricultural Software, Tulare, CA) ou o software PCDART (DRMS, Raleigh, NC) com um período de 3 meses antes da Suplementação de Bacillus servindo como linha de base. Os reba- nhos foram monitorados por 3 meses, durante os quais as vacas rece- beram suplementação diária de Bacillus, medindo semanalmente a produção individual de leite, mensalmente os componentes do leite DHIA e mensalmente eventos de saúde. Durante o período de suple- mentação de Bacillus, as vacas receberam 15 gramas do produto de Bacillus diariamente para fornecer 7,35 x 109 unidades formadoras de colônias (CFU) por cabeça por dia de Bacillus vivo em uma ração total mista com base em silagem de milho. Análise Estatística
[0251] A produção de leite e os dados de componentes foram ana- lisados por meio do procedimento MIXED do SAS, com efeitos fixos de tratamento e a interação de tratamento*mês*ano, usando dias de lac- tação e a fazenda como covariáveis. As medidas de saúde e reprodu- tiva foram avaliadas por meio do procedimento GLIMMIX do SAS. Resultados
[0252] A alimentação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276), a cepa de Baci- llus 177 (NRRL B-67275) e a cepa de Bacillus 235 (NRRL B-67219) re- sultaram em uma incidência significativamente reduzida de placenta reti- da e cetose, desafios importantes para a saúde em vacas leiteiras de transição (Tabela 7). As perdas totais por mortes do rebanho também foram menores durante o período de suplementação de Bacillus. Tabela 7. Efeito do tratamento sobre a porcentagem média de eventos de doença de vacas de transição e perdas totais por mortes do rebanho Pré-Bacillus Bacillus P valor
LS LS SEM SEM de trata- média média mento Placenta retida 13,54 % 0,97 % 9,74 % 0,91 % 0,0165 Cetose 17,96 % 1,32 % 12,54 % 1,41 % 0,0157 Metrite 11,69 % 0,89 % 11,05 % 1,15 % 0,6640 Abomaso deslocado 4,30 % 0,50 % 4,21 % 0,54 % 0,9078 Perdas por morte 1,03 % 0,09 % 0,81 % 0,08 % 0,0918
[0253] A alimentação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276), a ce- pa de Bacillus 177 (NRRL B-67275) e a cepa de Bacillus 235 (NRRL B-67219) resultou em um aumento significativo nas porcentagens de gordura e proteína do leite (Tabela 8). O teor de energia do leite foi aumentado em 2,47 libras por vaca por dia durante o consumo de Bacillus. Além disso, a contagem de células somáticas, um indica- dor de infecção bacteriana da glândula mamária e uma medida da qualidade do leite, também foi reduzida durante a suplementação de Bacillus (Tabela 8). Tabela 8. Efeito do tratamento sobre a contagem média de células somáticas do leite, porcentagens dos componentes do leite e teor de energia do leite Pré-Bacillus Bacillus P valor
LS LS SEM SEM de trata- média média mento Contagem de células somáticas (em milha- 438,01 10,985 404,26 10,693 0,0277 res de células) % de Gordura de leite 4,05 0,033 4,30 0,033 < 0,0001 % de Proteína do leite 3,23 0,013 3,28 0,013 0,0079 Teor de energia do 77,63 0,840 80,10 0,854 0,0387 leite (lbs/vaca/dia)
[0254] A alimentação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276), a ce- pa de Bacillus 177 (NRRL B-67275) e a cepa de Bacillus 235 (NRRL B-67219) melhorou as medidas reprodutivas no rebanho, conforme evidenciado por menos abortos (Tabela 9). Tabela 9. Efeito do tratamento sobre a porcentagem média de abortos Pré-Bacillus Bacillus P valor de LS média SEM LS média SEM tratamento Abortos 4,11 % 0,31 % 3,14 % 0,22 % 0,0194 EXEMPLO 4 Análise de RAPD (DNA Polimórfico Amplificado Aleatoriamente) de Cepas DFM
[0255] A fim de obter códigos de barras genéticos ou "caracteriza- ções de perfil" das cepas de Bacillus descritas no presente documento,
a análise RAPD (DNA polimórfico amplificado aleatoriamente) foi reali- zada com cada cepa. Cada isolado foi cultivado durante a noite em 10 ml de caldo tríptico de soja a 32 °C. Posteriormente, o DNA foi extraído destas culturas usando o kit DNeasy Mini da Qiagen, seguindo o pro- tocolo fornecido para bactérias Gram-positivas. Um kit RAPD GE Heal- thcare Illustra Ready-To Go foi usado para realizar RAPD-PCR com cada amostra de DNA para amplificar fragmentos genéticos de com- primento arbitrário. Os iniciadores para RAPD que foram usados para a análise RAPD-PCR incluem os seguintes: Iniciador 1 (5'- GGTGCGGGAA-3); Iniciador 2 (5'-GTTTCGCTCC3'); e Iniciador 3 (5'- GTAGACCCGT-3). Os produtos de PCR foram separados por meio de eletroforese em gel e os padrões de bandas foram detectados e com- binados usando o software BioNumerics. Conforme mostrado nas Fi- guras 2 a 6, uma caracterização de perfil de DNA em comum não foi observada entre as cepas DFM. Portanto, as Figuras 2 a 6 demons- tram que as cepas DFM descritas no presente documento são cepas diferentes, cada uma com uma caracterização de perfil de DNA única. EXEMPLO 5 Teste de Campo
[0256] O objetivo deste ensaio de campo foi determinar o efeito da suplementação com a cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276), a ce- pa de Bacillus 177 (NRRL B-67275) e a cepa de Bacillus 235 (NRRL B-67219) sobre os parâmetros de reprodução de vacas em uma fa- zenda de vacas leiteiras Holstein na região central do Texas de 870 vacas com indicadores de eficiência de reprodutividade média. Design e Métodos de Ensaio
[0257] As medidas de reprodução foram monitoradas em todo o rebanho via Dairy Comp 305 (Valley Agricultural Software, Tulare, CA).
As vacas receberam suplementação diária de Bacillus em uma taxa de 7,5 gramas do produto de Bacillus para fornecer 3,68 x 109 unidades formadoras de colônias (CFU) por cabeça por dia de Bacillus vivo den- tro de uma silagem de milho padrão, feno e mistura total com base em ração de silagem. A taxa de concepção, intervalos entre partos, taxa de prenhez de 21 dias e taxa de detecção de cios foram calculados e medidos durante um período de 6 meses (novembro - abril) após o iní- cio da suplementação de Bacillus. O mesmo período de 6 meses (no- vembro - abril) do ano anterior foi usado como linha de base (suple- mentação pré-Bacillus) para controlar a variação sazonal. Análise Estatística
[0258] As medidas reprodutivas foram avaliadas por meio do pro- cedimento PROC MIXED do SAS (versão 9.2 SAS Institute, Cary NC). A significância entre as médias foi definida em p ≤ 0,05 e as ten- dências foram indicadas quando p ≤ 0,1. Resultados
[0259] A alimentação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276), a ce- pa de Bacillus 177 (NRRL B-67275) e a cepa de Bacillus 235 (NRRL B-67219) melhorou as medidas reprodutivas no rebanho, conforme evidenciado por menos intervalos entre partos, uma concepção mais elevada e taxas de prenhez de 21 dias. Tabela 10. Efeito do tratamento sobre as medidas de eficiência repro- dutiva P valor de Pré-Bacillus Bacillus tratamento Taxa de detecção de cios, % 57,1 61,8 0,1337 Intervalos entre partos 3,4 2,7 0,0003 Taxa de concepção, % 29,7 37,8 0,0005 Taxa de prenhez de 21 dias, % 18,2 24,7 0,0104 EXEMPLO 6
Teste de Campo
[0260] O objetivo do ensaio de campo foi determinar o efeito da suplementação com a cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276), a cepa de Baci- llus 177 (NRRL B-67275) e a cepa de Bacillus 235 (NRRL B-67219) sobre a saúde da vaca e os parâmetros de produção de leite em uma fazenda de vacas leiteiras Holandesas saudáveis com 370 vacas no meio-oeste, com alguns casos esporádicos de síndrome do intestino hemorrágico (HBS). Design e Métodos de Ensaio
[0261] As vacas receberam suplementação diária de Bacillus em uma taxa de 15 gramas do produto de Bacillus, correspondendo a 7,35 x 109 unidades formadoras de colônias (CFU) por cabeça por dia de Bacillus vivo dentro de uma silagem de milho padrão e ração total mis- ta com base em feno de alfafa. As medidas de produção e saúde fo- ram monitoradas em todo o rebanho via Dairy Comp 305 (Valley Agri- cultural Software, Tulare, CA). A produção de leite, os componentes do leite e os dados de eventos de saúde foram coletados 4 meses antes da suplementação com Bacillus, servindo como linha de base e 4 me- ses após o início da suplementação com Bacillus. Os dados de rumi- nação foram coletados 5 meses antes do início da suplementação com Bacillus para servir como linha de base e comparados com 5 me- ses após a suplementação com Bacillus. Análise Estatística
[0262] Os dados da produção de leite e dos componentes do leite foram analisados usando o software PROC MIXED do Statistical Analysis System (SAS), com Tratamento*mês*ano e Tratamento como efeitos principais, usando dias em lactação (DIM) como covariável. Os dados de eventos de saúde foram analisados usando PROC GLIMMIX do SAS,
com efeitos principais do Tratamento. Os dados de ruminação foram ana- lisados por meio do PROC MIXED usando o Tratamento como efeito principal e N como covariável. A significância entre as médias foi definida em p ≤ 0,05 e as tendências foram indicadas quando p ≤ 0,1. Resultados
[0263] A alimentação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276), a ce- pa de Bacillus 177 (NRRL B-67275) e a cepa de Bacillus 235 (NRRL B-67219) por 4 meses diminuiu a incidência de pneumonia em todo o rebanho. Tabela 11. Efeito do tratamento sobre a porcentagem média de vacas novas ou o rebanho inteiro com pneumonia P valor de Pré-Bacillus Bacillus tratamento Rebanho Pneumonia 0,93 % 0,10 % 0,0190 inteiro
[0264] A alimentação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276), a ce- pa de Bacillus 177 (NRRL B-67275) e a cepa de Bacillus 235 (NRRL B-67219) aumentou a ruminação diária em todo o rebanho. Tabela 12. Efeito do tratamento sobre a ruminação média Pré-Bacillus Bacillus LS P valor de SEM LS média SEM média tratamento Ruminação 514,4 2,5157 530,8 2,491 < 0,0001 (minutos/dia)
[0265] A alimentação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276), a ce- pa de Bacillus 177 (NRRL B-67275) e a cepa de Bacillus 235 (NRRL B-67219) aumentou a produção de leite, o percentual de gordura do leite e quilos de gordura e proteína do leite, resultando em aumento do leite corrigido para gordura total, bem como teor de energia do leite no rebanho inteiro. Tabela 13. Efeito do tratamento sobre a produção média de leite, por- centagens dos componentes do leite e teor de energia do leite Pré-Bacillus Bacillus P valor
LS LS SEM SEM de trata- média média mento Produção de leite 62,935 0,4529 69,7133 0,449 < 0,0001 (lbs/vaca/dia) Teor de energia do leite 76,1103 0,5019 81,7609 0,5019 < 0,0001 (lbs/vaca/dia) Leite corrigido pe- la gordura 75,6833 0,5109 80,7342 0,5065 < 0,0001 (lbs/vaca/dia) Gordura do leite, % 4,8888 0,02086 4,5873 0,02068 < 0,0001 Gordura do lei- 2,9937 0,02117 3,1235 0,02099 < 0,0001 te, libras Proteínas do leite, 3,5566 0,00799 3,5427 0,00792 0,2186 % Proteínas do lei- 2,1912 0,01419 2,4203 0,01407 < 0,0001 te, libras
[0266] A alimentação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276), a ce- pa de Bacillus 177 (NRRL B-67275) e a cepa de Bacillus 235 (NRRL B-67219) diminuiu a contagem logarítmica de células somáticas pre- sentes no leite. Tabela 14. Efeito do tratamento sobre a contagem logarítmica média de células somáticas Pré-Bacillus Bacillus LS LS P valor de
SEM SEM média média tratamento Log da contagem 158,44 9,9795 138,84 9,8849 0,1645 de células somáticas
Claims (24)
1. Método para melhorar o desempenho reprodutivo de um animal, caracterizado pelo fato de que compreende a etapa de admi- nistrar ao animal uma composição de ração ou água potável que com- preende uma quantidade eficaz de um aditivo que compreende uma cepa de Bacillus isolada selecionada a partir do grupo que consiste na cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), cepa de Baci- llus 235 (NRRL Nº B-67219), cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B- 67275), cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), uma cepa que tem todas as características de identifica- ção da cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276), e combi- nações das mesmas, em que a cepa de Bacillus melhora o desempe- nho reprodutivo do animal.
2. Método para diminuir a perda por mortes e/ou diminuir eventos de ausência de alimentação em um animal, caracterizado pelo fato de que compreende a etapa de administrar ao animal uma com- posição de ração ou água potável que compreende uma quantidade eficaz de um aditivo que compreende uma cepa de Bacillus isolada selecionada a partir do grupo que consiste na cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275), cepa de Bacillus
102 (NRRL Nº B-67276), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), uma ce- pa que tem todas as características de identificação de cepa de Baci- llus 235 (NRRL Nº B-67219), uma cepa que tem todas as característi- cas de identificação da cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Ba- cillus 102 (NRRL Nº B-67276) e combinações das mesmas, em que a cepa de Bacillus diminui a perda por mortes e/ou diminui eventos de ausência de alimentação para o animal.
3. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o animal é selecionado a partir do grupo que consiste em uma espécie avícola, uma espécie suína, uma espécie bovina, uma espécie ovina, uma espécie equina e um animal de companhia.
4. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o animal é uma espécie suína e a espécie suína é se- lecionada a partir do grupo que consiste em um porco em crescimento, um leitão, uma porca e um porco reprodutor.
5. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o animal é um animal leiteiro.
6. Método, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que o animal leiteiro é selecionado a partir do grupo que consiste em uma vaca, uma cabra, uma ovelha ou uma búfala.
7. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a cepa de Bacillus produz uma enzima selecionada a partir do grupo que consiste em uma α-galactosidase, uma protease, uma lipase, uma amilase, uma xilanase, uma celulase e combinações das mesmas.
8. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que compreende ainda a etapa de administrar ao animal outra cepa bacteriana selecionada a partir do grupo que consiste em outra cepa de Bacillus, uma cepa de bactéria do ácido láctico e combi- nações das mesmas.
9. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que cada uma das cepas de Bacillus é administrada na composição de ração em uma dose de cerca de 1,0 x 10 3 CFU/libra da composição de ração a cerca de 5,0 x 1012 CFU/libra da composição de ração.
10. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que cada uma das cepas de Bacillus é administrada na composição de ração em uma dose de cerca de 0,5 x 10 7 CFU/libra da composição de ração a cerca de 5,0 x 107 CFU/libra da composição de ração.
11. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que compreende ainda a etapa de administrar um antibió- tico ao animal.
12. Método, de acordo com a reivindicação 11, caracteriza- do pelo fato de que o antibiótico é selecionado a partir do grupo que consiste em eritromicina, levofloxacina, trimetoprima/sulfametoxazol, trimetoprima, daptomicina, rifampicina, tilosina, tilmicosina, vancomici- na, monensina, lasalocida e propionato de laquilomicina.
13. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que compreende ainda a etapa de administrar ao animal uma enzima selecionada a partir do grupo que consiste em uma galac- tosidase, uma protease, uma lipase, uma amilase, uma hemicelulase, uma arabinoxilanase, uma xilanase, uma celulase, uma NSPase, uma fitase e combinações das mesmas.
14. Método, de acordo com a reivindicação 13, caracteriza-
do pelo fato de que a enzima é uma NSPase ou uma fitase.
15. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o animal é uma vaca e a cepa de Bacillus é adminis- trada durante a lactação.
16. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o animal é uma vaca e a cepa de Bacillus é adminis- trada durante a gestação.
17. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a cepa de Bacillus é administrada ao animal diaria- mente.
18. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a melhora no desempenho reprodutivo é selecionada a partir do grupo que consiste em uma diminuição no número de inter- valos entre partos, um aumento na detecção de cio, um aumento na taxa de concepção, uma diminuição nos abortos e um aumento na ta- xa de prenhez.
19. Método para melhorar a produção de leite e/ou a quali- dade do leite em um animal leiteiro, caracterizado pelo fato de que compreende a etapa de administrar ao animal uma composição de ra- ção ou água potável que compreende uma quantidade eficaz de um aditivo que compreende uma cepa de Bacillus isolada selecionada a partir do grupo que consiste na cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B- 50944), cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B- 67219), cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275), cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276), uma cepa que tem todas as características de identifica- ção da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), uma cepa possuindo todas as características de identificação da cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), uma cepa que tem todas as características de identificação de cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275), uma ce- pa que tem todas as características de identificação da cepa de Baci- llus 102 (NRRL Nº B-67276), e combinações das mesmas, em que a cepa de Bacillus melhora a produção de leite e/ou a qualidade do leite no animal.
20. Método para inibir uma doença ou transtorno em um animal leiteiro, caracterizado pelo fato de que a doença ou transtorno é selecionado a partir do grupo que consiste em febre do leite, cetose, placenta retida, metrite, pneumonia e abomaso deslocado, o método compreendendo a etapa de administrar ao animal uma composição de ração ou água potável que compreende uma quantidade eficaz de um aditivo que compreende uma cepa de Bacillus isolada selecionada a partir do grupo que consiste na cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B- 50944), cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B- 50943), cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275), cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276) , uma cepa que tem todas as características de identifica- ção da cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), uma cepa que tem todas as características de identificação da cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275), uma ce- pa que tem todas as características de identificação da cepa de Baci- llus 102 (NRRL Nº B-67276), e combinações das mesmas, em que a cepa de Bacillus inibe a doença ou transtorno no animal leiteiro, em que a doença ou transtorno é selecionado a partir do grupo que con-
siste em febre do leite, cetose, placenta retida, metrite, pneumonia e abomaso deslocado.
21. Embalagem comercial para uso em animais, caracteri- zada pelo fato de que compreende todas as cepas isoladas que com- preendem a cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Baci- llus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B- 67218), a cepa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275) e a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276).
22. Aditivo alimentício para ração animal, caracterizado pe- lo fato de que compreende todas as cepas isoladas que compreendem a cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a ce- pa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275) e a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276).
23. Aditivo para a água potável de um animal, caracterizado pelo fato de que compreende todas as cepas isoladas que compreen- dem a cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a ce- pa de Bacillus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B-67275) e a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276).
24. Composição de ração animal, caracterizada pelo fato de que compreende todas as cepas isoladas que compreendem a cepa de Bacillus 86 (NRRL Nº B-50944), a cepa de Bacillus 300 (NRRL Nº B-50943), a cepa de Bacillus 101 (NRRL Nº B-67218), a cepa de Baci- llus 235 (NRRL Nº B-67219), a cepa de Bacillus 177 (NRRL Nº B- 67275) e a cepa de Bacillus 102 (NRRL Nº B-67276).
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