BR112018011302B1 - Compostos, sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, composição farmacêutica e composição imunogênica compreendendo ditos compostos e usos terapêuticos dos mesmos - Google Patents

Abstract

NOVOS COMPOSTOS. Um composto com a Fórmula (I) em que Y1, Y2, X1, X2, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R8 e R9 são tal como definidos aqui; e sais farmaceuticamente aceitáveis e tautômeros dos mesmos, composições, combinações e medicamentos contendo os referidos compostos e processos para a preparação dos mesmos. A invenção também se refere ao uso dos referidos compostos, combinações, composições e medicamentos no tratamento de doenças em que a modulação de STING (Estimulador dos Genes de Interferon) é benéfica, por exemplo, em inflamação, doenças alérgicas e autoimunes, doenças infecciosas, câncer, síndromes pré-cancerosas e como adjuvantes de vacinas.

Description

CAMPO DA INVENÇÃO

[001]A presente invenção refere-se a compostos, composições, combinações e medicamentos contendo os referidos compostos, e processos para a preparação dos mesmos. A invenção também se refere ao uso dos referidos compostos, combinações, composições e medicamentos no tratamento de doenças em que a modulação de STING (Estimulador dos Genes de Interferon) é benéfica, por exemplo, em inflamação, doenças alérgicas e autoimunes, doenças infecciosas, infecção pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV), AIDS, câncer, síndromes pré-cancerosas e como composição imunogênica ou adjuvantes de vacina.

FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO

[002]Os vertebrados são constantemente ameaçados pela invasão de micro-organismos e desenvolveram mecanismos de defesa imune para eliminar patógenos infecciosos. Nos mamíferos, este sistema imunológico compreende dois ramos: a imunidade inata e a imunidade adaptativa. O sistema imunológico inato é a primeira linha de defesa, a qual é iniciada pelos Receptores de Reconhecimento de Padrões (PRRs) que detectam os ligantes dos patógenos, bem como os padrões moleculares associados a danos (Takeuchi O. et al., Cell, 2010: 140, 805-820). Um número crescente destes receptores foi identificado, os quais incluem os receptores semelhantes a Toll (TLRs), receptores de lectina do tipo C, receptores semelhantes a genes induzidos pelo ácido retinoico I (RIG-I) e receptores semelhantes a NOD (NLRs) e também sensores de DNA fita dupla. A ativação de PRRs leva à regulação positiva dos genes envolvidos na resposta inflamatória, incluindo os interferons tipo 1, citocinas e quimiocinas pró-inflamatórias que suprimem a replicação dos patógenos e facilitam a imunidade adaptativa.

[003]A proteína adaptadora STING (Estimulador dos Genes de Inteferon), também conhecida como TMEM 173, MPYS, MITA e ERIS, foi identificada como uma molécula de sinalização central aos ácidos nucleicos citosólicos na resposta imune inata (Ishikawa H e Barber GN, Nature, 2008: 455, 674-678; WO 2013/1666000). A ativação de STING resulta na regulação positiva das vias IRF3 e NFKB, levando à indução de Interferon-β e outras citocinas. O STING é crítico para respostas ao DNA citosólico de origem patogênica ou hospedeira e de ácidos nucleicos incomuns chamados de Dinucleotídeos Cíclicos (CDNs)

[004]Os CDNs foram identificados pela primeira vez como mensageiros bacterianos secundários responsáveis pelo controle de numerosas respostas na célula procariótica. Os CDNs bacterianos, como o c-di-GMP, são moléculas simétricas caracterizadas por duas ligações fosfodiéster 3' 5'.

[005]A ativação direta de STING por CDNs bacterianos foi recentemente confirmada através de cristalografia de raios-X (Burdette DL e Vance RE, Nature Immunology, 2013: 14, 19-26). Consequentemente, os CDNs bacterianos e seus análogos têm atraído o interesse como potenciais adjuvantes de vacina (Libanova R. et al., Microbial Biotechnology 2012: 5, 168-176; WO 2007/054279, WO 2005/087238).

[006]Mais recentemente, a resposta ao DNA citosólico foi elucidada e mostrou um envolvimento na geração, por uma enzima chamada GMP-AMP sintase cíclica (cGAS, anteriormente conhecida como C6orf150 ou MB21D1), de uma nova molécula de sinalização de CDN de mamífero identificada como cGAMP, que então ativa STING. Ao contrário dos CDNs bacterianos, o cGAMP é uma molécula não assimétrica caracterizada por misturas de ligações fosfodiéster 2', 5' e 3', 5'. (Gao P et al., Cell, 2013: 153, 1-14). A interação de cGAMP com STING também foi demonstrada por cristalografia de raios-X (Cai X et al., Molecular Cell, 2014: 54, 289-296).

[007]O interferon foi descrito pela primeira vez como uma substância que poderia proteger as células da infecção viral (Isaacs & Lindemann, J. Virus Interference. Proc. R. Soc. Lon. Ser. B. Biol. Sci. 1957: 147, 258-267). No homem, os interferons de tipo I são uma família de proteínas relacionadas que são codificadas por genes no cromossomo 9 e codificam pelo menos 13 isoformas de interferon alfa (IFNa) e uma isoforma de interferon beta (IFNβ). O IFNα recombinante foi a primeira terapia biológica aprovada e tornou-se uma terapia importante em infecções virais e no câncer. Além da atividade antiviral direta nas células, os interferons são conhecidos como potentes moduladores da resposta imune, atuando sobre as células do sistema imunológico.

[008]A administração de um composto molecular pequeno, que poderia estimular a resposta imune inata, incluindo a ativação dos interferons de tipo I e outras citocinas, poderia se tornar uma estratégia importante para o tratamento ou prevenção de doenças humanas, incluindo as infecções virais. Este tipo de estratégia imunomoduladora tem o potencial de identificar compostos que podem ser úteis não apenas em doenças infecciosas, mas também em câncer (Zitvogel, L. et al., Nature Reviews Immunology, 2015 15 (7), p405-414), doenças alérgicas (Moisan J. et al., Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol., 2006: 290, L987-995), outras condições inflamatórias, tais como a doença do intestino irritável (Rakoff-Nahoum S., Cell., 2004, 23, 118 (2): 229-41) e como adjuvantes de vacina (Persing et al., Trends Microbiol. 2002: 10 (10 Suplemento), S32-7 e Dubensky et al., Therapeutic Advances in Vaccines, publicados online em 5 de setembro de 2013).

[009]As doenças alérgicas estão associadas a uma resposta imune aos alérgenos de perfil Th2. As respostas Th2 estão associadas a níveis elevados de IgE, que, por meio de seus efeitos nos mastócitos, promove uma hipersensibilidade aos alérgenos, resultando nos sintomas observados, por exemplo, na rinite alérgica e na asma. Em indivíduos saudáveis, a resposta imune aos alérgenos é mais equilibrada com uma resposta mista de células Th2/Th1 e T reguladora. Demonstrou-se que a indução de interferons de tipo I resulta na redução de citocinas de tipo Th2 no ambiente local e promove as respostas Th1/Treg. Neste contexto, a indução de interferons de tipo 1, por exemplo, pela ativação de STING, pode oferecer um benefício no tratamento de doenças alérgicas, como a asma e a rinite alérgica (Huber JP et al. J Immunol 2010: 185, 813-817).

[010]Em contrapartida, a produção aumentada e prolongada de IFN de tipo I está associada a uma variedade de infecções crônicas, incluindo as infecções por Mycobacteria (Collins et al., CHM 2015, Wassermann et al., CHM 2015, Watson et al., CHM 2015), Franciscella (Storek et Jl 2015; Jin et al., JI 2011), Chlamydia (Prantner et al., JI 2010; Barker et al., Mbio 2013; Zhang et al., JI 2014), Plasmodium (Sharma et al., Immunity, 2011) e HIV (Herzner et al., Nat Immunol 2015; Nissen et al., Clin Exp Immunol 2014; Gao et al., Science 2013; Lahaye et al., Science 2013;)(revisado em Stifter e Feng, JI 2014). Da mesma forma, o excesso de produção de interferon de tipo I é encontrado entre pacientes com formas complexas de doença autoimunes. A evidência genética em seres humanos e a fundamentação de estudos em modelos animais sustentam a hipótese de que a inibição de STING resulta na redução de interferon de tipo I que desencadeia doenças autoimunes (Crow YJ et al., Nat. Genet. 2006; 38917-920, Stetson DB et al., Cell 2008; 134; 587 -598). Portanto, os inibidores da STING fornecem um tratamento para pacientes com produção crônica de interferon de tipo I e de citocinas pró-inflamatórias associadas a infecções ou doenças autoimunes complexas. As doenças alérgicas estão associadas a uma resposta imune aos alérgenos de perfil Th2.

[011]Demonstrou-se que os compostos que se ligam a STING e atuam como agonista induzem os interferons de tipo 1 e outras citocinas em incubação com PBMCs humanas. Os compostos que induzem os interferons humanos podem ser úteis no tratamento de várias doenças como, por exemplo, no tratamento de doenças alérgicas e outras doenças inflamatórias, por exemplo, a rinite alérgica e a asma, no tratamento de doenças infecciosas, síndromes pré-cancerosas e câncer e também pode ser útil como composição imunogênica ou adjuvantes de vacina. Os compostos que se ligam a STING podem atuar como antagonistas e podem ser úteis no tratamento, por exemplo, de doenças autoimunes.

[012]Prevê-se que atuação de agentes de ativação ou inibição sobre STING possa ser uma abordagem promissora para o tratamento de doenças em que a modulação da via de IFN de tipo 1 seja benéfica, incluindo as doenças inflamatórias, alérgicas e autoimunes, doenças infecciosas, câncer, síndromes pré-cancerosas e como composição imunogênica ou adjuvantes de vacinas.

[013]Os Pedidos de Patente Internacional WO 2014/093936, WO 2014/189805, WO 2013/185052, US2014/0341976, WO 2015/077354,PCT/EP2015/062281 e GB 1501462.4 divulgam certos dinucleotídeos cíclicos e seu uso na indução de uma resposta imune.

[014]Um objetivo da invenção é proporcionar outros dinucleotídeos cíclicos adequados para o tratamento do câncer.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[015]A invenção é direcionada aos compostos de acordo com a Fórmula (I):em que Y1, Y2, X1, X2, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R8 e R9 são definidos como abaixo e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

[016]Em outro aspecto da presente invenção, é proporcionada uma composição farmacêutica compreendendo um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

[017]Em outro aspecto da presente invenção, é proporcionado um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso em terapia.

[018]Em outro aspecto da presente invenção, é proporcionado um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso no tratamento de uma doença em que a modulação de STING é benéfica.

[019]Em outro aspecto da presente invenção, é proporcionado um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso no tratamento da inflamação, doenças alérgicas e autoimunes, doenças infecciosas, câncer, síndromes pré-cancerosas e como composição imunogênica ou adjuvantes de vacina.

[020]Em outro aspecto da presente invenção, é proporcionado um método de tratamento de uma doença em que a modulação de STING é benéfica em um indivíduo, o qual compreende administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[021]Em outro aspecto da presente invenção, é proporcionado um método de tratar inflamação, doenças alérgicas e autoimunes, doenças infecciosas e câncer em um indivíduo, o qual compreende administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[022]Em outro aspecto da presente invenção, proporciona-se o uso de um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na fabricação de um medicamento a ser utilizado no tratamento de uma doença em que a modulação de STING é benéfica.

[023]Em outro aspecto da presente invenção, proporciona-se a utilização de um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na fabricação de um medicamento a ser utilizado no tratamento de doenças inflamatórias, alérgicas e autoimunes, infecciosas doenças, síndromes pré-cancerosas e câncer.

[024]Em outro aspecto, é proporcionada uma combinação compreendendo um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos um outro agente terapêutico.

[025]Em outro aspecto da presente invenção, é proporcionada uma composição farmacêutica compreendendo um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos um outro agente terapêutico e um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

[026]Em outro aspecto, é proporcionada uma combinação compreendendo um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos um outro agente terapêutico para uso em terapia.

[027]Em outro aspecto, é proporcionada uma combinação compreendendo um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos um outro agente terapêutico para uso no tratamento de uma doença ou condição em que a modulação de STING é benéfica.

[028]Em outro aspecto, é proporcionada uma combinação compreendendo um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos um outro agente terapêutico para uso no tratamento de doenças inflamatórias, alérgicas e autoimunes, doenças infecciosas, síndromes pré- cancerosas e câncer.

[029]Em outro aspecto da presente invenção, é proporcionado um método de tratamento de uma doença ou condição em que a modulação de STING é benéfica em um indivíduo, o qual compreende administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma combinação que contém um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos um outro agente terapêutico.

[030]Em outro aspecto da presente invenção, é proporcionado um método de tratamento da inflamação, doenças alérgicas e autoimunes, doenças infecciosas e câncer em um indivíduo, o qual compreende administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma combinação que contém um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos um outro agente terapêutico.

[031]Em outro aspecto da presente invenção, é proporcionada uma composição imunogênica ou adjuvante de vacina compreendendo um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[032]Em outro aspecto da invenção, é proporcionada uma composição compreendendo um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um ou mais agentes imunoestimuladores.

[033]Em outro aspecto da presente invenção, é proporcionada uma composição imunogênica compreendendo um antígeno ou composição antigênica e um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[034]Em outro aspecto da presente invenção, é proporcionada uma composição imunogênica compreendendo um antígeno ou composição antigênica e um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo para uso no tratamento ou prevenção de doenças.

[035]Em outro aspecto da presente invenção, proporciona-se a uso de um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para a fabricação de uma composição imunogênica compreendendo um antígeno ou composição antigênica, para o tratamento ou prevenção de doenças.

[036]Em outro aspecto da presente invenção, é proporcionado um método de tratamento ou prevenção de doenças que compreende administrar uma composição imunogênica contendo um antígeno ou composição antigênica e um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, a um indivíduo humano que sofre ou é susceptível à doença.

[037]Em outro aspecto da presente invenção, é proporcionada uma composição imunogênica ou vacinal compreendendo um antígeno ou composição antigênica e um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso no tratamento ou prevenção de doenças.

[038]Em outro aspecto da presente invenção, é proporcionada uma composição imunogênica compreendendo um antígeno ou composição antigênica e um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso no tratamento ou prevenção de doenças.

[039]Em outro aspecto da presente invenção, proporciona-se o uso de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para a fabricação de uma composição imunogênica ou vacinal que compreende um antígeno ou composição antigênica para o tratamento ou prevenção de doenças.

[040]Em outro aspecto da presente invenção, é proporcionado um método de tratamento ou prevenção de doenças que compreende administrar uma composição vacinal contendo um antígeno ou composição antigênica e um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, a um indivíduo humano que sofre ou é susceptível à doença.

[041]Em outro aspecto, é proporcionado um método de tratamento de uma infecção por HIV em um humano que possui ou está em risco de adquirir a infecção, por meio da administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ao humano.

[042]Em outro aspecto, é proporcionado um método de tratamento de uma infecção na AIDS, em um humano apresentando a infecção, por meio da administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ao humano.

[043]Em outro aspecto, é proporcionado um método de tratamento de uma infecção por HIV em um humano por meio da administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ao humano.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

[044]Figura 1A Figura 1 representa as estruturas dos Compostos 1 a 13, em que R7 é tal como definido na Fórmula (I).

[045]Figura 2A Figura 2 representa as estruturas dos Compostos 14 a 26, em que R7 é tal como definido na Fórmula (I).

[046]Figura 3A Figura 3 representa as estruturas dos Compostos 27 a 39, em que R7 é tal como definido na Fórmula (I).

[047]Figura 4A Figura 4 representa as estruturas dos Compostos 40 a 42.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

[048]Esta invenção refere-se a novos compostos de Fórmula (I): em que: Y1 e Y2 são independentemente CH2 ou O; XI e X2 são independentemente S ou O; R1 é OH e R2 é NH2 ou R1 é NH2 e R2 é H; R3 é OH e R4 é NH2 ou R3 é NH2 e R4é H; R5 é selecionado de: F, OH e OC(O)R7; R6 é selecionado de: F, OH e OC(O)R7; desde que: quando nem R5 ou R6 são F, pelo menos um de Y1 e Y2 é CH2; e R8 e R9 são selecionados independentemente a partir de: H, CH2OC(O)R7, CH2OCO2R7, CH2CH2SC(O)R7 e CH2CH2SSCH2R7; desde que: quando ambos X1 e X2 são O, pelo menos um de R8 e R9 não é H; em que R7 é selecionado a partir de: arila, heteroarila, heterocicloalquila, cicloalquila, alquila C1-20 e alquila C1-20 substituída por um a 5 substituintes selecionados independentemente a partir de: arila, cicloalquila, hidroxi e F; e sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo.

[049]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (I), pelo menos um de Y1 e Y2 é O. Adequadamente, nos compostos de Fórmula (I), ambos Y1 e Y2 são O.

[050]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (I), pelo menos um de X1 e X2 é S. Adequadamente, nos compostos de Fórmula (I), X1 é S. Adequadamente, nos compostos de Fórmula (I), ambos X1 e X2 são S.

[051]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (I), R1 é NH2 e R2 é H.

[052]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (I), R5 é OH.

[053]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (I), R6 é F.

[054]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (I), quando um de R8 e R9 não é H, ele é CH2CH2SC(O)C1-6 alquila.

[055]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (I), quando um de R8 e R9 não é H, ele é CH2CH2SSC1-4 alquila OH.

[056]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (I), quando X1 é S, R8 e R9 são H.

[057]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (I), quando X2 é S, R8 e R9 são H.

[058]Adequadamente nos compostos de Fórmula (I), um de R8 e R9 é H.

[059]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (I), quando X1 e X2 são O, um de R8 e R9 é H.

[060]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (I), R7 é alquila C12-18.

[061]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (I), R7 é selecionado a partir de: alquila C1-20 e alquila C1-20 substituída por um a 5 substituintes selecionados independentemente a partir de: arila, cicloalquila e F.

[062]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (I), R7 é alquila C 1-20.

[063]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (I), R7 é terc-butila.

[064]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (I), R7 é isopropila.

[065]Exemplos de compostos da presente invenção incluem os compostos representados nas Figuras 1, 2, 3 e 4.

[066]Os compostos de Fórmula (I) podem estar na forma de um sal.

[067]Estão incluídos nos compostos de Fórmula (I), os compostos de Fórmula (II): em que: Y11 e Y12 são independentemente CH2 ou O; XII é S; X12 é O; R11 é OH e R12é NH2 ou R11 é NH2 e R12 é H; R13 é OH e R14 é NH2 ou R13 é NH2 e R14 é H; R15 é selecionado a partir de: F, OH e OC(O)R17; R16 é selecionado a partir de: F, OH e OC(O)R17; desde que: quando nem R15 ou R16 são F, pelo menos um de Y11 e Y12 é CH2; e R18 e R19 são selecionados independentemente a partir de: H, CH2OC(O)R17, CH2OCO2R17, CH2CH2SC(O)R17 e CH2CH2SSCH2R17; em que R17 é selecionado a partir de: arila, heteroarila, heterocicloalquila, cicloalquila, alquila C1-20 e alquila C1-20 substituída por um a cinco substituintes selecionados independentemente a partir de: arila, cicloalquila, hidroxi e F;e sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo.

[068]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (II), pelo menos um de Y11 e Y12 é O. Adequadamente, nos compostos de Fórmula (I), ambos Y11 e Y12 são O.

[069]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (II), R11 é NH2 e R12 é H.

[070]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (II), R15 é OH.

[071]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (II), R16 é F.

[072]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (II), quando um de R18 e R19 não é H, ele é CH2CH2SC(O)C1-6 alquila.

[073]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (II), quando um de R18 e R19 é H, isto é CH2CH2SSC1-4 alquila OH.

[074]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (II), R18 e R19 são H.

[075]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (II), um de R18 e R19 é H.

[076]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (II), R17 é alquila C12-18.

[077]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (II), R17 é selecionado a partir de: alquila C1-20 e alquila C1-20 substituída por um a 5 substituintes selecionados independentemente a partir de: arila, cicloalquila e F.

[078]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (II), R17 é alquila C 1-20.

[079]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (II), R17 é terc-butila.

[080]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (II), R17 é isopropila.

[081]Adequadamente, os compostos de Fórmula (II) estão na forma de um sal farmaceuticamente aceitável.

[082]Estão incluídos nos compostos de Fórmula (I), os compostos de Fórmula (III): em que: Y21 e Y22 são independentemente CH2 ou O; X21 é O; X22 é S; R21 é OH e R22 é NH2 ou R21 é NH2 e R22 é H; R23 é OH e R24 é NH2 ou R23 é NH2 e R24 é H; R25 é selecionado a partir de: F, OH e OC(O)R27; R26 é selecionado a partir de: F, OH e OC(O)R27; desde que: quando nem R25 ou R26 são F, pelo menos um de Y21 e Y22 é CH2; e R28 e R29 são selecionados independentemente a partir de: H, CH2OC(O)R27, CH2OCO2R27, CH2CH2SC(O)R27 e CH2CH2SSCH2R27; em que R27 é selecionado a partir de: arila, heteroarila, heterocicloalquila, cicloalquila, alquila C1-20 e alquila C1-20 substituída por um a cinco substituintes selecionados independentemente a partir de: arila, cicloalquila, hidroxi e F; e sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo.

[083]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (III), pelo menos um de Y21 e Y22 é O. Adequadamente nos compostos de Fórmula (III), ambos Y21 e Y22 são O.

[084]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (III), R21 é NH2 e R22 é H.

[085]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (III), R25 é OH.

[086]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (III), R26 é F.

[087]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (III), quando um de R28 e R29 não é H, ele é CH2CH2SC(O)C1-6 alquila.

[088]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (III), quando um de R28 e R29 não é H, ele é CH2CH2SSC1-4 alquila OH.

[089]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (III), R28 e R29 são H.

[090]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (III), um de R28 e R29 é H.

[091]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (III), R27 é alquila C12-18.

[092]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (II I), R27 é selecionado a partir de: alquila C1-20 e alquila C1-20 substituída por um a 5 substituintes selecionados independentemente a partir de: arila, cicloalquila e F.

[093]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (III), R27 é alquila C1-20.

[094]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (III), R27 é terc-butila.

[095]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (III), R27 é isopropila.

[096]Adequadamente, os compostos de Fórmula (III) estão na forma de um sal farmaceuticamente aceitável.

[097]Estão incluídos nos compostos de Fórmula (I) e nos compostos de Fórmula (II), os compostos de Fórmula (IV): em que: X31 é S; X32 é O; R31 é OH e R32 é NH2 ou R31 é NH2 e R32 é H; R33 é OH e R34 é NH2 ou R33 é NH2 e R34 é H; R35 é selecionado a partir de: F, OH e OC(O)R37; R36 é selecionado a partir de: F, OH e OC(O)R37; desde que: pelo menos um de R35 e R36 seja F; e R38 e R39 são selecionados independentemente a partir de: H, CH2OC(O)R37, CH2OCO2R37, CH2CH2SC(O)R37 e CH2CH2SSCH2R37;em que R37 é selecionado a partir de: arila, heteroarila, heterocicloalquila, cicloalquila, alquila C1-20 e alquila C1-20 substituída por um a 5 substituintes selecionados independentemente a partir de: arila, cicloalquila, hidroxi e F;e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

[098]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (IV), R31 é NH2 e R32 é H.

[099]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (IV), R35 é OH.

[0100]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (IV), R36 é F.

[0101]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (IV), quando um de R38 e R39 não é H, ele é CH2CH2SC(O)C1-6 alquila.

[0102]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (IV), quando um de R38 e R39 não é H, ele é CH2CH2SSC1-4 alquila OH.

[0103]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (IV), R38 e R39 são H.

[0104]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (IV), um de R38 e R39 é H.

[0105]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (IV), R37 é alquila C12-18.

[0106]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (IV), R37 é selecionado a partir de: alquila C1-20 e alquila C1-20 substituída por um a 5 substituintes selecionados independentemente a partir de: arila, cicloalquila e F.

[0107]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (IV), R37 é alquila C1-20.

[0108]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (IV), R37 é terc-butila.

[0109]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (IV), R37 é isopropila.

[0110]Adequadamente, os compostos de Fórmula (IV) estão na forma de um sal farmaceuticamente aceitável.

[0111]Estão incluídos nos compostos de Fórmula (I) e nos compostos de Fórmula (III), os compostos de Fórmula (V):em que: X41 é O; X42 é S; R41 é OH e R42 é NH2 ou R41 é NH2 e R42 é H; R43 é OH e R44 é NH2 ou R43 é NH2 e R44 é H; R45 é selecionado a partir de: F, OH e OC(O)R47; R46 é selecionado a partir de: F, OH e OC(O)R47; desde que: pelo menos um de R45 e R46 seja F; e R48 e R49 são selecionados independentemente a partir de: H, CH2OC(O)R47, CH2OCO2R47, CH2CH2SC(O)R47 e CH2CH2SSCH2R47; em que R47 é selecionado a partir de: arila, heteroarila, heterocicloalquila, cicloalquila, alquila C1-20 e alquila C1-20 substituída por um a 5 substituintes selecionados independentemente de: arila, cicloalquila, hidroxi e F; e sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo

[0112]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (V), R41 é um NH2 e R42 é H.

[0113]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (V), R45 é OH.

[0114]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (V), R46 é F.

[0115]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (V), quando um de R48 e R49 não é H, ele é CH2CH2SC(O)C1-6 alquila.

[0116]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (V), quando um de R48 e R49 não é H, ele é CH2CH2SSC1-4 alquila OH.

[0117]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (V), R48 e R49 são H.

[0118]Adequadamente nos compostos de Fórmula (V), um de R48 e R49 é H.

[0119]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (V), R47 é alquila C12-18.

[0120]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (V), R47 é selecionado a partir de: alquila C1-20 e alquila C1-20 substituída por um a 5 substituintes selecionados independentemente a partir de: arila, cicloalquila e F.

[0121]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (V), R47 é alquila C1-20.

[0122]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (V), R47 é terc-butila.

[0123]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (V), R47 é isopropila.

[0124]Adequadamente, os compostos de Fórmula (V) estão na forma de um sal farmaceuticamente aceitável.

[0125]Estão incluídos nos compostos de Fórmula (I), os compostos de Fórmula (VI): em que: X51 é O; X52 é O; R51 é OH e R52 é NH2 ou R51 é NH2 e R52 é H; R53 é OH e R54 é NH2 ou R53 é NH2 e R54 é H; R55 é selecionado a partir de: F, OH e OC(O)R47; R56 é F; R58 e R59 são selecionados independentemente a partir de: H, CH2OC(O)R57, CH2OCO2R57, CH2CH2SC(O)R57 e CH2CH2SSCH2R57; em que R57 é selecionado a partir de: arila, heteroarila, heterocicloalquila, cicloalquila, alquila C1-20 e alquila C1-20 substituída por um a 5 substituintes selecionados independentemente a partir de: arila, cicloalquila, hidroxi e F; desde que pelo menos um de R58 e R59 não seja H. e sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo

[0126]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (VI), R51 é NH2 e R52 é H.

[0127]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (VI), R55 é OH.

[0128]Adequadamente, nos compostos de fórmula (VI), quando um de R58 e R59 não é H, ele é CH2CH2SC(O)C1-6 alquila.

[0129]Adequadamente, nos compostos de fórmula (VI), quando um de R58 e R59 não é H, ele é CH2CH2SSC1-4 alquila OH.

[0130]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (VI), um de R58 e R59 é H.

[0131]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (VI), R57 é alquila C12-18.

[0132]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (VI), R57 é selecionado a partir de: alquila C1-20 e alquila C1-20 substituída por um a 5 substituintes selecionados independentemente a partir de: arila, cicloalquila e F.

[0133]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (VI), R57 é alquila C1-20.

[0134]Adequadamente, nos compostos de Fórmula (VI), R57 é terc-butila.

[0135]Adequadamente nos compostos de Fórmula (VI), R57 é isopropila.

[0136]Adequadamente, os compostos de Fórmula (VI) estão na forma de um sal farmaceuticamente aceitável.

[0137]Estão incluídos nos compostos de Fórmula (I): (1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-8,17-bis(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-18- hidroxi-3,12-dissulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3X5,12X5-difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona; (1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-8,17-bis(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-18- hidroxi-3,12-dissulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3X5,12X5- difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona, isômero 1; (1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-8,17-bis(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-18- hidroxi-3,12-dissulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3X5,12X5- difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona, isômero 2; (1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-8,17-bis(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-12,18- diidroxi-3-sulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3X5,12X5- difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona; (1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-8,17-bis(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-12,18- diidroxi-3-sulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3X5,12X5- difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona, isômero 1; (1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-8,17-bis(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-12,18- diidroxi-3-sulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3X5,12X5- difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona, isômero 2; (1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-17-(2-amino-6-oxo-6,9-diidro-1H-purin-9-il)-8- (6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-12,18-diidroxi-3-sulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa- 3X5,12X5-difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona; (1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-17-(2-amino-6-oxo-6,9-diidro-1H-purin-9-il)-8- (6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-12,18-diidroxi-3-sulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa- 3X5,12X5-difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona, isômero 1; (1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-17-(2-amino-6-oxo-6,9-diidro-1H-purin-9-il)-8- (6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-12,18-diidroxi-3-sulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa- 3À5,12À5-difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona, isômero 2; (1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-17-(2-amino-6-oxo-6,9-diidro-1H-purin-9-il)-8- (6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-18-hidroxi-3,12-dissulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa- 3À5,12À5-difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona; (1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-17-(2-amino-6-oxo-6,9-diidro-1H-purin-9-il)-8- (6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-18-hidroxi-3,12-dissulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa- 3À5,12À5-difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona, isômero 1; e (1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-17-(2-amino-6-oxo-6,9-diidro-1H-purin-9-il)-8- (6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-18-hidroxi-3,12-dissulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa- 3À5,12À5-difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona, isômero 2; e sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo

[0138] Considera-se que o Composto 2 é uma mistura de isômeros, conforme indicado abaixo:

[0139]Os isômeros do Composto 2 são:

[0140]Considera-se que o Composto 28 é uma mistura de isômeros, conforme indicado abaixo:

[0141]Os isômeros do composto 28 são:

[0142]Considera-se que os compostos representados, por exemplo, pela estrutura: também existem em uma forma protonada, tal como:que representa o mesmo composto.

[0143]Considera-se que os compostos representados, por exemplo, pela estrutura:também existem em uma forma protonada, tal como:que representa o mesmo composto.

[0144]Considera-se que os compostos representados, por exemplo, pela estrutura:também existem em uma forma protonada, tal como:que representa o mesmo composto.

[0145]Tipicamente, os sais da presente invenção são sais farmaceuticamente aceitáveis. Os sais compreendidos dentro do termo “sais farmaceuticamente aceitáveis” referem-se aos sais não tóxicos dos compostos desta invenção.

[0146]Os sais, incluindo os sais farmaceuticamente aceitáveis, são facilmente preparados pelos técnicos no assunto.

[0147]Os sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis representativos incluem, mas não estão limitados a, 4-acetamidobenzoato, acetato, adipato, alginato, ascorbato, aspartato, benzenossulfonato (besilato), benzoato, bisulfato, bitartrato, butirato, edetato de cálcio, canforato, canforsulfonato (camsilato), caprato (decanoato), caproato (hexanoato), caprilato (octanoato), cinamato, citrato, ciclamato, digluconato, 2,5-diidroxibenzoato, disuccinato, dodecilsulfato (estolato), edetato (etilenodiaminotetracetato), estolato (lauril sulfato), etano-1,2-dissulfonato (edisilato), etanossulfonato (esilato), formiato, fumarato, galactarato (mucato), gentisato (2,5-diidroxibenzoato), glucoheptonato (gluceptato), gluconato, glucuronato, glutamato, glutarato, glicerofosfato, glicolato, hexilresorcinato, hipurato, hidrabamina (N,N'-di(desidroabietil)-etilenodiamina), bromidrato, cloridrato, iodidrato, hidroxinaftoato, isobutirato, lactato, lactobionato, laurato, malato, maleato, malonato, mandelato, metanossulfonato (mesilato), metilsulfato, mucato, naftaleno-1,5- dissulfonato (napadisilato), naftaleno-2-sulfonato (napsilato), nicotinato, nitrato, oleato, palmitato, p-aminobenzenossulfonato, p-aminosaliciclato, pamoato (embonato), pantotenato, pectinato, persulfato, fenilacetato, feniletilbarbiturato, fosfato, poligalacturonato, propionato, p-toluenossulfonato (tosilato), piroglutamato, piruvato, salicilato, sebacato, estearato, subacetato, succinato, sulfamato, sulfato, tanato, tartarato, teoclato (8-cloroteofilinato), tiocianato, trietiodeto, undecanoato, undecilenato e valerato.

[0148]Os sais de adição de base farmaceuticamente aceitáveis representativos incluem, mas não estão limitados a, alumínio, 2-amino-2- (hidroximetil)-1,3-propanodiol (TRIS, trometamina), arginina, benetamina (N- benzilfenetilamina), benzatina (N, N'-dibenziletilenodiamina, bis-(2-hidroxietil) amina, bismuto, cálcio, cloroprocaína, colina, clemizol (1-p clorobenzil-2-pirrolildina-1'- ilmetilbenzimidazol), ciclo-hexilamina, dibenziletilenodiamina, dietilamina, dietiltriamina, dimetilamina, dimetiletanolamina, dopamina, etanolamina, etilenodiamina, L-histidina, ferro, isoquinolina, lepidina, lítio, lisina, magnésio, meglumina (N-metilglucamina), piperazina, piperidina, potássio, procaína, quinina, quinolina, sódio, estrôncio, t-butilamina e zinco .

[0149]A invenção inclui todas as formas estequiométricas e não estequiométricas possíveis dos compostos de Fórmula (I) dentro do seu escopo.

[0150]Os compostos da invenção podem existir na forma sólida ou líquida. Na forma sólida, o composto da invenção pode existir em um contínuo de estados sólidos que variam desde totalmente amorfo até completamente cristalino. O termo “amorfo” refere-se a um estado em que o material não possui ordem de faixas longas em níveis moleculares e, dependendo da temperatura, pode exibir as propriedades físicas de um sólido ou um líquido. Tipicamente, esses materiais não conferem padrões distintivos de difração de raios X e, ao exibir as propriedades de um sólido, são descritos mais convencionalmente como um líquido. Após aquecer, ocorre uma mudança de propriedades sólidas para líquidas, a qual é caracterizada por uma mudança de estado normalmente de segunda ordem (“transição vítrea”). O termo “cristalino” refere-se a uma fase sólida em que o material possui uma estrutura interna regular ordenada em níveis moleculares e fornece um padrão distinto de difração de raios X com picos definidos. Esses materiais, quando aquecidos suficientemente, também apresentarão as propriedades de um líquido, mas a mudança de sólido para líquido é caracterizada por uma mudança de fase, normalmente de primeira ordem (“ponto de fusão”).

[0151]Os compostos da invenção podem ter a capacidade de se cristalizarem em mais de uma forma, uma característica que é conhecida como polimorfismo (“polimorfos”). O polimorfismo pode ocorrer geralmente como resposta às mudanças na temperatura ou pressão, ou a ambas, e também pode resultar de variações no processo de cristalização. Os polimorfos podem ser distinguidos por várias características físicas conhecidas no estado da arte, tais como os padrões de difração de raios X, solubilidade e ponto de fusão.

[0152]Os compostos de Fórmula (I) podem existir nas formas solvatadas e não solvatadas. Tal como aqui utilizado, o termo “solvato” refere-se a um complexo de estaquiometria variável formado por um soluto (nesta invenção, um composto de Fórmula (I) ou um sal) e um solvente. Tais solventes, para o propósito da invenção, podem não interferir com a atividade biológica do soluto. O técnico no assunto compreenderá que solvatos farmaceuticamente aceitáveis podem ser formados para os compostos cristalinos, em que moléculas de solvente são incorporadas na rede cristalina durante a cristalização. As moléculas de solvente incorporadas podem ser moléculas de água ou não aquosas, tais como as moléculas de etanol, isopropanol, DMSO, ácido acético, etanolamina e acetato de etila. A rede cristalina incorporada com moléculas de água é referida tipicamente como “hidratos”. Os hidratos incluem hidratos estequiométricos, bem como composições contendo quantidades variáveis de água.

[0153]Observa-se também que os compostos de Fórmula (I) podem formar tautômeros. Os “tautômeros” referem-se aos compostos que são formas alternáveis de uma estrutura de determinado compostos, e que variam quanto ao deslocamento de átomos e elétrons de hidrogênio. Assim, duas estruturas podem estar em equilíbrio através do movimento de elétrons π e um átomo (geralmente H). Por exemplo, enóis e cetonas são tautômeros, pois são rapidamente interconvertidos pelo tratamento com ácido ou base. Entende-se que todos os tautômeros e misturas de tautômeros dos compostos da presente invenção estão incluídos no escopo dos compostos da presente invenção. Por exemplo, e para uma clareza absoluta, nos compostos de Fórmula (I), quando R1 ou R3 são OH, os compostos formarão o tautômero ceto (= O).

[0154]Embora os aspectos para cada variável tenham sido geralmente listados acima, separadamente para cada variável, esta invenção inclui aqueles compostos nos quais vários ou cada aspecto na Fórmula (I) são selecionados de cada um dos aspectos listados acima. Portanto, esta invenção pretende incluir todas as combinações de aspectos para cada variável.

[0155]As moléculas de CDN nativas podem ser sensíveis à degradação por fosfodiesterases que estão presentes no sangue, na superfície da célula hospedeira ou nas células hospedeiras, por exemplo, nas células apresentadoras de antígeno, que absorvem formulações vacinais que contêm as referidas moléculas nativas de CDN. Exemplos específicos são as ectonucleotidiases, como CD39, CD73 e ENPP1, que residem na membrana plasmática celular, voltadas para o plasma, muitas das quais são conhecidas por degradar nucleotídeos, por exemplo, o ATP é convertido em AMP tanto por CD39 quanto por ENPP1. Recentemente, a ENPP1 foi identificada como um dos principais contribuintes para a degradação de CDNs que possuem uma ligação fosfodiéster 2'-5 '(Li, L. et al., 2014, Nature Chemical Biology, 10 (12), p10431048). A potência de um CDN que possui atividade agonista de STING seria diminuída por tal degradação, resultando em menor nível de expressão induzido de uma molécula de assinatura da imunidade inata (por exemplo, IFN-beta) e, portanto, apresenta uma potência adjuvante mais fraca. A presente invenção descreve duas abordagens diferentes e complementares que podem ser utilizadas para melhorar e manter a potência de novos CDNs descritos. Conforme descrito detalhadamente nas seções abaixo, estas abordagens são a substituição de enxofre pelo oxigênio nas posições não ligantes do fosfodiéster e o uso de uma estratégia pró-fármaco para melhorar a penetração de CDN na célula e protegê-lo da degradação.

[0156]Um aspecto da presente invenção refere-se aos diastereômeros definidos estereoquimicamente de dinucleotídeos cíclicos mono-e ditiodifosfato de purina que induzem a ativação de TBK 1 dependente de STING e os seus métodos de preparação e utilização.

[0157]A presente invenção refere-se aos métodos de proporcionar um agonista potente de STING que é capaz de iniciar e manter uma resposta das células T aos antígenos tumorais, isoladamente ou em combinação com outros agentes imuno-oncológicos, e aos métodos de proporcionar composições adjuvantes. Estas composições são constituídas por um ou mais dinucleotídeos de purina cíclica de Fórmula (I), em que os dinucleotídeos cíclicos de purina presentes na composição são os diastereômeros de monotiofosfato único ou diastereômeros de ditiofosfato substancialmente puros, métodos para a sua fabricação e métodos para a uso dos mesmos para estimular uma resposta imune em um animal. O objetivo de ambos agente único e formulação vacinal é proporcionar uma combinação de antígenos e adjuvantes capazes de gerar uma população suficiente de células T e/ou células B de memória que reajam rapidamente a um patógeno, célula tumoral, etc., contendo um antígeno de interesse.

[0158]Os tiofosfatos (também referidos como fosforotioatos) são uma variante de nucleotídeos normais em que um dos oxigênios não ligantes ligados ao fósforo é substituído por um enxofre. Uma ligação de fosforotioato é inerentemente quiral. O técnico no assunto reconhecerá que cada tiofosfato nesta estrutura pode existir na forma Rou S. Assim, as formas Rp e Sp, são possíveis em cada átomo de fósforo. Em cada caso, os diastereômeros substancialmente puros destas moléculas são preferenciais. Exemplos de tais moléculas de tiofosfato de CDN estão representados nas FIGS. 1 a 4 no presente documento.

[0159]O termo “pró-fármaco”, tal como aqui utilizado, refere-se a uma modificação de compostos contemplados, em que o composto modificado é convertido dentro do corpo (por exemplo, em uma célula alvo ou órgão alvo) de volta à forma não modificada através de reações enzimáticas ou não enzimáticas. Em muitos casos, a forma de pró-fármaco é inativa ou substancialmente menos ativa do que a forma não pró-fármaco original dos compostos contemplados. Em certas formas de realização, a hidroxila em uma ribose compreende um grupo de saída do pró- fármaco (Compostos 13, 26 e 39). Em outras formas de realização, a forma do pró- fármaco envolve a derivação de um ou ambos os fosfatos e/ou tiofosfatos (compostos 3-12, 16-25 e 29-38). Os pró-fármacos podem modificar as propriedades físicoquímicas, biofarmacêuticas e farmacocinéticas dos medicamentos. As razões para o desenvolvimento de pró-fármacos são comumente a fraca solubilidade aquosa, instabilidade química, baixa biodisponibilidade oral, ausência de penetração na barreira hematoencefálica e alto metabolismo de primeira passagem associado ao fármaco original. As porções de pró-fármaco adequadas são descritas, por exemplo, “Prodrugs and Targeted Delivery”, J. Rautico, Ed., John Wiley & Sons, 2011. Os pró- fármacos de fosfatos que são especialmente relevantes para a presente invenção encontram-se descritos por Wiemer, AJ e Wiemer, DF em “Prodrugs of Phosphonates and Phosphates: Crossing the Membrane Barrier” em Topics of Current Chemistry, (2015) V360, 115-160.

[0160]Os dinucleotídeos cíclicos de purina preferenciais da presente invenção incluem os pró-fármacos de CDN de difosfato (tais como os Compostos 9, 10, 11 e 12 da Figura 1; os Compostos 22, 23, 24 e 25 da Figura 2 ; os Compostos 35, 36, 37 e 38 da Figura 3 e os Compostos 40, 41 e 42 da Figura 4), os não pró-fármacos de monotiofosfatos (tais como os Compostos 2, 15 e 28 das Figuras 1-3) e os não pró- fármacos de ditiofosfosfatos (tais como os Compostos 1, 14 e 27 das Figuras 1-3) e formas de pró-fármaco tanto do mono-(tal como os Compostos 7, 8, 20, 21, 33 e 34 das Figuras 1-3) e ditiofosfato (tais como os Compostos 3 -6, 16-19 e 29-32 das Figuras 1 a 3).

Definições

[0161]Tal como aqui utilizado, “um composto da invenção” inclui todos os solvatos, complexos, polimorfos, derivados radiomarcados, tautômeros, estereoisômeros e isômeros ópticos dos compostos de Fórmula (I) e os sais dos mesmos.

[0162]Tal como aqui utilizado, os compostos específicos da invenção são designados numericamente de acordo com a indicação nas Figuras. Por exemplo, o Composto 2 é o composto na Figura 1 com “2” abaixo dele, e o Composto 27 é o composto na Figura 3 com “27” abaixo dele. Além disso, as designações “a” e “b”, etc. correspondem ao Isômero 1 e ao Isômero 2, etc., respectivamente. Por exemplo, “Composto 2a” é o Isômero 1 do Composto 2, “Composto 27b” é o Isômero 2 do Composto 27.

[0163]Salvo definição em contrário, a designação “Isômero” ou “Diastereômero” é uma indicação da ordem em que um composto especificado é eluído de uma coluna de separação nas condições especificadas. O composto especificado com um tempo de retenção mais curto na LCMS é designado como “Isômero 1” ou “Diastereômero 1”, o composto especificado com um tempo de retenção mais longo na LCMS é designado como “Isômero 2” ou “Diastereômero 2”, etc.

[0164]Tal como aqui utilizado, o termo “quantidade eficaz” significa a quantidade de um fármaco ou agente farmacêutico que induzirá a resposta biológica ou médica de um tecido, sistema, animal ou humano que se procura, por exemplo, por um pesquisador ou clínico. Além disso, o termo “quantidade terapeuticamente eficaz” significa qualquer quantidade que, em comparação com um indivíduo correspondente que não tenha recebido tal quantidade, resulte em um melhor tratamento, cura, prevenção ou melhora de uma doença, distúrbio ou efeito colateral ou diminuição da taxa de avanço de uma doença ou distúrbio. O termo também inclui, dentro de seu escopo, as quantidades efetivas para aumentar/melhorar a função fisiológica normal.

[0165]O termo “profilaxia” inclui prevenção e refere-se a uma medida ou procedimento que serve para prevenir, em vez de curar ou tratar uma doença. Prevenção refere-se a uma redução no risco de adquirir ou desenvolver uma doença, que faz com que pelo menos um sintoma clínico da doença não se desenvolva em um indivíduo que possa estar exposto a um agente causador de doença ou a um indivíduo predisposto à doença antes do início da doença.

[0166]Tal como aqui utilizado, o termo “farmaceuticamente aceitável” refere- se aos compostos, materiais, composições e formas de dosagem que estão, no escopo do bom senso médico, adequados para utilização em contato com os tecidos de seres humanos e animais sem toxicidade excessiva, irritação ou outro problema ou complicação, proporcional a uma razão risco/ benefício razoável.

[0167]Tal como aqui utilizado, “excipientes farmaceuticamente aceitáveis” inclui todos os diluentes, carreadores ligantes, deslizantes e outros componentes de formulações farmacêuticas com os quais o composto da invenção é administrado.

[0168]“Alquila” refere-se a uma cadeia de hidrocarboneto com o número especificado de “átomos membros”. Por exemplo, alquila C1-C6 refere-se a um grupo alquila contendo de 1 a 6 átomos membros. Por exemplo, alquila C12-C18 refere-se a um grupo alquila contendo de 12 a 18 átomos membros. Por exemplo, alquila C1-C20 refere-se a um grupo alquila contendo de 1 a 20 átomos membros. Os grupos alquila podem ser saturados, insaturados, de forma linear ou ramificada. Os grupos alquila ramificados representativos têm um, dois ou três ramos. Exemplos de alquila incluem metila, etila, etileno, propila (n-propila e isopropila), buteno, butila (n-butila, isobutila e t-butila), pentila e hexila.

[0169]“Cicloalquila”, salvo indicação em contrário, refere-se a um sistema de anel de hidrocarboneto não aromático saturado ou não saturado contendo de três a sete átomos de carbono. Os grupos cicloalquila são sistemas de anel monocíclicos ou bicíclicos. Por exemplo, cicloalquila C3-C7 refere-se a um grupo cicloalquila contendo de 3 a 7 átomos membros. Exemplos de cicloalquila, tal como aqui utilizados, incluem: ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclo-hexila, ciclobutenila, ciclopentenila, ciclo- hexenila, ciclo-heptila e espiro-heptano.

[0170]“Arila” refere-se a um anel de hidrocarboneto aromático. Os grupos arila são sistemas de anel monocíclico, bicíclico e tricíclico com um total de cinco a catorze átomos membros de anel, em que pelo menos um sistema de anel é aromático e em que cada anel no sistema contém 3 a 7 átomos membros, tais como fenila, naftaleno, tetrahidronaftaleno e bifenila. Adequadamente arila é fenila.

[0171]“Heteroarila” refere-se a um anel aromático monocíclico de 4 a 8 membros contendo de 1 a 7 átomos de carbono e contendo de 1 a 4 heteroátomos, desde que, quando o número de átomos de carbono é 3, o anel aromático contém pelo menos dois heteroátomos. Grupos heteroarila contendo mais de um heteroátomo podem conter heteroátomos diferentes. O heteroarila descrito inclui: pirrolila, pirazolila, imidazolila, oxazolila, isoxazolila, tiazolila, isotiazolila, furanila, furazanila, tienila, triazolila, piridinila, pirimidinila, piridazinila, pirazinila, triazinila, tetrazinila.

[0172]“Heterocicloalquila” refere-se a um anel não aromático saturado ou insaturado contendo 4 a 12 átomos membros, dos quais 1 a 11 são átomos de carbono e de 1 a 6 são heteroátomos. Os grupos heterocicloalquila contendo mais de um heteroátomo podem conter heteroátomos diferentes. Os grupos heterocicloalquila são sistemas de anel monocíclicos ou um anel monocíclico fundido com um anel arila ou com um anel heteroarila contendo de 3 a 6 átomos membros. Exemplos de heterocicloalquila incluem: pirrolidinila, tetrahidrofuranila, diidrofuranila, piranila, tetrahidropiranila, diidropiranila, tetrahidrotienila, pirazolidinila, oxazolidinila, oxetanila, tiazolidinila, piperidinila, homopiperidinila, piperazinila, morfolinila, tiamorfolinila, 1,3- dioxolanila, 1,3-dioxanila, 1,4-dioxanila, 1,3-oxatiolanila, 1,3-oxatianila, 1,3-ditianila, 1,3oxazolidin-2-ona, hexahidro-1H-azepina, 4,5,6,7,tetrahidro-1H-benzimidazol, piperidinila, 1,2,3,6-tetrahidro-piridinila e azetidinila.

[0173]“Heteroátomo”, salvo definição em contrário, refere-se a um átomo de nitrogênio, enxofre ou oxigênio.

Composições

[0174]Embora seja possível que o composto da invenção possa ser administrado como o produto químico bruto para uso em terapia, é possível apresentar o composto da invenção como ingrediente ativo como uma composição farmacêutica. Tais composições podem ser preparadas de uma maneira bem conhecida no estado da arte farmacêutica e compreendem pelo menos um composto ativo. Consequentemente, a invenção proporciona ainda composições farmacêuticas compreendendo um composto da invenção e um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis. O(s) excipiente(s) devem ser aceitáveis no sentido de serem compatíveis com os outros ingredientes da composição e não deletérios ao receptor. De acordo com outro aspecto da invenção, também é proporcionado um processo para a preparação de uma composição farmacêutica incluindo o agente, ou os sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, com um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis. A composição farmacêutica pode ser utilizada no tratamento e/ou profilaxia de qualquer uma das condições descritas no presente documento.

[0175]Geralmente, o composto da invenção é administrado em uma quantidade farmaceuticamente eficaz. A quantidade do composto realmente administrado será tipicamente determinada por um médico, levando-se em conta as circunstâncias relevantes, incluindo a condição a ser tratada, a via de administração escolhida, o composto atual administrado, a idade, o peso, a resposta de cada paciente, a gravidade dos sintomas do paciente e outros.

[0176]As composições farmacêuticas podem ser apresentadas nas formas de dose única contendo uma quantidade predeterminada de ingrediente ativo por dose única. O termo “formas de dosagem única” refere-se a unidades fisicamente discretas adequadas como dosagens únicas para humanos e outros mamíferos, em que cada unidade contém uma quantidade predeterminada de material ativo calculada para produzir o efeito terapêutico desejado, em associação com um excipiente, veículo ou carreador. As formas de dosagem únicas típicas incluem ampolas ou seringas doseadas e preenchidas previamente com as composições líquidas, ou pílulas, comprimidos, cápsulas ou semelhantes no caso de composições sólidas.

[0177]As composições de dosagem única preferenciais são aquelas que contêm uma dose diária ou subdose, ou uma fração apropriada, de um ingrediente ativo. Tais doses únicas podem, portanto, ser administradas uma vez ou mais de uma vez ao dia. Tais composições farmacêuticas podem ser preparadas por qualquer método bem conhecido no estado da arte farmacêutica.

[0178]As composições farmacêuticas podem ser adaptadas para administração por qualquer via apropriada, por exemplo por via oral (incluindo bucal ou sublingual), retal, inalada, intranasal, tópica (incluindo bucal, sublingual ou transdérmica), vaginal ou injetável (incluindo subcutânea, intramuscular, parentérica, intravenosa ou intradérmica). Tais composições podem ser preparadas por qualquer método conhecido no estado da arte farmacêutica, por exemplo, associando o ingrediente ativo com o(s) carreador(es) ou excipiente(s).

[0179]Além das vias de administração descritas acima para o tratamento de câncer, as composições farmacêuticas podem ser adaptadas para administração por injeção intratumoral ou peritumoral. Espera-se que a injeção intratumoral ou peritumoral de um composto da presente invenção diretamente ou adjacente a um único tumor sólido induza uma resposta imune que pode atacar e destruir células cancerosas em todo o corpo, reduzindo substancialmente e, em alguns casos, eliminando permanentemente, o tumor do indivíduo acometido pela doença. A ativação do sistema imune dessa maneira para matar tumores em um sítio distante é comumente conhecida como efeito abscopal e foi demonstrada em animais com múltiplas modalidades terapêuticas (van der Jeught, et al., Oncotarget, 2015, 6 (3), 1359-1381). Uma vantagem adicional da administração local ou intratumoral ou peritumoral é a capacidade de obter eficácia equivalente em doses muito mais baixas, minimizando ou eliminando os eventos adversos que podem ser observados em doses sistêmicas muito maiores (Marabelle, A., et al., Clinical Cancer Research, 2014, 20 (7), págs. 1747-1756).

[0180]As composições farmacêuticas adaptadas para administração oral podem ser apresentadas como unidades discretas, tais como cápsulas ou comprimidos; pós ou grânulos; soluções ou suspensões em líquidos aquosos ou não aquosos; espumas ou whips comestíveis; ou emulsões líquidas de óleo em água ou emulsões líquidas de água em óleo.

[0181]Por exemplo, para administração oral na forma de um comprimido ou cápsula, o componente de fármaco ativo pode ser combinado com um excipiente oral inerte farmaceuticamente aceitável e não tóxico, tal como etanol, glicerol, água e semelhantes. Os pós são preparados por redução do composto até um tamanho adequado e mistura com um excipiente farmacêutico preparado de forma semelhante, tal como um carboidrato comestível, como, por exemplo, amido ou manitol. Agente aromatizante, conservante, dispersante e colorante também podem estar presentes.

[0182]As cápsulas são formuladas pela preparação de uma mistura em pó, como descrito acima, e preenchimento das coberturas de gelatina formadas. Excipientes incluindo deslizantes e lubrificantes, tais como sílica coloidal, talco, estearato de magnésio, estearato de cálcio ou polietilenoglicol sólido, podem ser adicionados à mistura em pó antes da operação de enchimento. Um agente desintegrante ou solubilizante, tal como ágar-ágar, carbonato de cálcio ou carbonato de sódio, pode ser adicionado também para melhorar a disponibilidade do medicamento quando a cápsula é ingerida.

[0183]Além disso, quando desejado ou necessário, excipientes, incluindo agentes aglutinantes, deslizantes, lubrificantes, edulcorantes, aromatizantes, desintegrantes e corantes adequados, podem ser incorporados também na mistura. Os aglutinantes adequados incluem amido, gelatina, açúcares naturais, tais como glicose ou beta-lactose, edulcorantes de milho, gomas naturais e sintéticas, tais como acácia, tragacanto ou alginato de sódio, carboximetilcelulose, polietilenoglicol, ceras e semelhantes. Os lubrificantes utilizados nestas formas de dosagem incluem o oleato de sódio, estearato de sódio, estearato de magnésio, benzoato de sódio, acetato de sódio, cloreto de sódio e semelhantes. Os desintegrantes incluem, sem limitação, amido, metilcelulose, ágar, bentonita, goma xantana e semelhantes. Os comprimidos são formulados, por exemplo, preparando-se uma mistura de pó, granulando ou quebrando, adicionando um agente lubrificante e desintegrante e pressionando em comprimidos. uma mistura em pó é preparada misturando-se o composto com uma mistura adequada, com um diluente ou base, tal como descrito acima e, opcionalmente, com um aglutinante, tal como carboximetilcelulose, aliginato, gelatina ou polivinilpirrolidona, um retardante de solução, tal como parafina, um acelerador de reabsorção, tal como um sal quaternário e/ou um agente de absorção, tal como bentonita, caulim ou fosfato dicálcico. A mistura em pó pode ser granulada ao molhar com um aglutinante, tal como xarope, pasta de amido, mucilagem de acádia ou soluções de materiais celulósicos ou poliméricos e ao forçar através de uma tela. Como uma alternativa à granulação, a mistura em pó pode passar através da máquina de comprimidos e o resultado são pastas formadas imperfeitamente quebradas em grânulos. Os grânulos podem ser lubrificados para evitar a aderência às matrizes de formação de comprimidos por meio da adição de ácido esteárico, um sal estearato, talco ou óleo mineral. A mistura lubrificada é então compressa em comprimidos. Os compostos da presente invenção podem ser combinados também com um carreador inerte que flui livremente e compressos em comprimidos diretamente sem passar pelas etapas de granulação ou pulverização. Um revestimento protetor claro ou opaco composto por uma camada de vedação de goma-laca, um revestimento de açúcar ou material polimérico e um revestimento polido de cera podem ser fornecidos. Pode-se adicionar corantes a estes revestimentos para distinguir dosagens únicas diferentes.

[0184]Os fluidos orais tais como solução, suspensões, xaropes e elixires podem ser preparados na forma de unidade de dosagem, de modo que uma dada quantidade contenha uma quantidade predeterminada do composto. Os xaropes podem ser preparados dissolvendo-se o composto em uma solução aquosa com sabor adequado, enquanto que os elixires são preparados através da utilização de um veículo alcoólico não tóxico. As suspensões podem ser formuladas dispersando-se o composto em um veículo não tóxico. Podem ser adicionados também agentes solubilizantes e emulsionantes, tais como álcoois isoestearílicos etoxilados e éteres de polioxietileno sorbitol, conservantes, aditivos aromatizantes, tais como óleo de hortelã ou edulcorantes naturais ou sacarina ou outros edulcorantes artificiais.

[0185]Quando apropriado, as composições de dosagem única para administração oral podem ser microencapsuladas. A composição pode ser preparada também para prolongar ou sustentar a liberação, por exemplo, pelo revestimento ou inserção do material particulado em polímeros, cera ou semelhantes.

[0186]Os compostos da invenção podem ser administrados também na forma de sistemas de administração por lipossomas, tais como vesículas unilamelares pequenas, vesículas unilamelares grandes e vesículas multilamelares. Os lipossomas podem ser formados a partir de uma variedade de fosfolipídeos, tais como colesterol, estearilamina ou fosfatidilcolinas. Os compostos da invenção podem ser administrados também sob a forma de um veículo de administração de nanopartículas, os quais apresentam múltiplas composições e métodos de preparação. Ambas nanopartículas poliméricas e lipossomos adequadamente compostos e dimensionados são formulações particularmente vantajosas para o tratamento de câncer e, em particular, para a distribuição dos compostos da presente invenção, uma vez que são preferencialmente direcionados ao tumor e aos linfonodos. Estas formulações direcionadas apresentam várias vantagens potenciais, isto é: protegem os compostos da presente invenção da degradação, aumentam a quantidade de agente ativo para ação local e minimizam os efeitos secundários potenciais indesejáveis como resultado da exposição sistêmica excessiva (Cai, Shuang et al., 2011. Advanced Drug Devlivery Reviews, 2011, V63, págs. 901-908). O uso potencial de tais abordagens na formulação de um agonista de CDN STING foi demonstrado para formulações que atuam diretamente em tumores (Nakumura, T. et al., Journal of Controlled Release, 2015, V216, págs. 149-157) e no uso como um adjuvante (Hanson, M. et al., Journal of Clinical Investigation, 2015, V125 (6), págs. 2532-2546). Além disso, existem vários modos de administração (intratumoral, subcutânea, intravenosa, intraperitoneal e intramuscular) das formulações de nanopartículas e lipossomas que podem ser úteis especialmente para os compostos da presente invenção. Especificamente, semelhantes às moléculas de CDN nativas, as da presente invenção podem ser sensíveis à degradação por fosfodiesterases que estão presentes dentro ou sobre as células hospedeiras, por exemplo, nas células apresentadoras de antígeno. A potência de um composto da presente invenção pode ser diminuída por tal degradação, resultando em menor nível de expressão induzido de uma molécula de assinatura da imunidade inata (por exemplo, IFN-beta). Assim, esta degradação pode proporcionar uma potência mais fraca medida pela liberação de IFN-beta pelas PBMCs ou uma potência vacinal reduzida, conforme definida pela magnitude de uma resposta imune antígeno-específica medida.

[0187]As composições farmacêuticas adaptadas para administração transdérmica podem ser apresentadas como emplastros discretos destinados a permanecerem em contato íntimo com a epiderme do receptor durante um período prolongado de tempo.

[0188]As composições farmacêuticas adaptadas para administração tópica podem ser formuladas como pomadas, cremes, suspensões, loções, pós, soluções, pastas, géis, sprays, aerossóis ou óleos.

[0189]Para tratamentos oculares ou de outros tecidos externos, por exemplo, boca e pele, as composições são preferencialmente aplicadas como pomada ou creme tópico. Quando formuladas em uma pomada, o ingrediente ativo pode ser utilizado com uma base de pomada parafínica ou miscível em água. Alternativamente, o ingrediente ativo pode ser formulado em um creme em uma base de creme de óleo em água ou uma base de água em óleo.

[0190]As composições farmacêuticas adaptadas para administração tópica ocular incluem colírios, em que o ingrediente ativo é dissolvido ou suspenso em um veículo adequado, especialmente um solvente aquoso.

[0191]As composições farmacêuticas adaptadas para administração tópica bucal incluem drágeas, pastilhas e enxaguantes bucais.

[0192]As composições farmacêuticas adaptadas para administração retal podem ser apresentadas como supositórios ou como enemas.

[0193]As formas de dosagem para administração nasal ou inalação podem ser convenientemente formuladas como aerossóis, soluções, suspensões, gotas, géis ou pós secos.

[0194]As composições para administração intranasal incluem composições aquosas administradas no nariz por gotas ou por bomba pressurizada. As composições adequadas contêm água como diluente ou veículo para este fim. As composições para administração pulmonar ou nasal podem conter um ou mais excipientes, por exemplo, um ou mais agentes de suspensão, um ou mais conservantes, um ou mais tensoativos, um ou mais agentes de ajuste de tonicidade, um ou mais cossolventes e podem incluir componentes para controlar o pH da composição, por exemplo, um sistema tamponante. Além disso, as composições podem conter outros excipientes, tais como antioxidantes, por exemplo, metabissulfito de sódio e agentes de mascaramento do sabor. As composições podem ser administradas também no nariz ou em outras regiões do trato respiratório por nebulização.

[0195]As composições intranasais podem permitir que o(s) composto(s) de Fórmula (I) ou (um) sal(is) farmaceuticamente aceitável(is) seja(m) administrado(s) em todas as áreas da cavidade nasal (o tecido alvo) e, além disso, pode permitir que o(s) composto(s) de Fórmula (I) ou (um) sal(is) farmaceuticamente aceitável(is) permaneçam em contato com o tecido alvo por períodos de tempo maiores. Um regime de dosagem adequado para composições intranasais seria aquele em que o paciente inala lentamente através do nariz após a cavidade nasal está limpa. Durante a inalação, a composição seria administrada a uma narina enquanto a outra seria comprimida manualmente. Este procedimento seria então repetido para a outra narina. Normalmente, uma ou duas pulverizações por narina serão administradas pelo procedimento acima, uma, duas ou três vezes ao dia, idealmente uma vez ao dia. as composições intranasais adequadas para administração uma vez por dia são particularmente interessantes.

[0196]O(s) agente(s) de suspensão, se incluído(s), estará(ão) tipicamente presente(s) em uma quantidade de 0,1 a 5% (p/p), tal como de 1,5% a 2,4% (p/p), com base no peso total da composição. Exemplos de agentes de suspensão farmaceuticamente aceitáveis incluem, mas não estão limitados a, Avicel® (celulose microcristalina e carboximetilcelulose sódica), carboximetilcelulose sódica, veegum, tragacanto, bentonita, metilcelulose, goma xantana, carbopol e polietilenoglicóis.

[0197]As composições para administração pulmonar ou nasal podem conter um ou mais excipientes e podem ser protegidas da contaminação e crescimento microbiano ou fúngico por inclusão de um ou mais conservantes. Exemplos de agentes antimicrobianos ou conservantes farmaceuticamente aceitáveis incluem, mas não estão limitados a, compostos de amônio quaternário (por exemplo cloreto de benzalcônio, cloreto de benzetônio, cetrimida, cloreto de cetilpiridínio, cloreto de lauralcônio e cloreto de miristil picolínio), agentes mercuriais (por exemplo, nitrato fenilmercúrico, acetato fenilmercúrico e timerosal), agentes alcoólicos (por exemplo, clorobutanol, álcool feniletílico e álcool benzílico), ésteres antibacterianos (por exemplo, ésteres de ácido para-hidroxibenzoico), agentes quelantes, tais como edetato dissódico (EDTA) e outros agentes antimicrobianos, tais como clorexidina, clorocresol, ácido sórbico e sais dos mesmos (como sorbato de potássio) e polimixina. Exemplos de agentes antifúngicos ou conservantes farmaceuticamente aceitáveis incluem, mas não estão limitados a, benzoato de sódio, ácido sórbico, propionato de sódio, metilparabeno, etilparabeno, propilparabeno e butilparabeno. O(s) conservante(s), se incluído(s), pode(m) estar presente(s) em uma quantidade de 0,001 a 1% (p/p), tal como de 0,015% a 0,5% (p/p) com base no peso total da composição.

[0198]As composições (por exemplo, em que pelo menos um composto está em suspensão) podem incluir um ou mais tensoativos que atuam como facilitadores da dissolução das partículas de medicamento na fase aquosa da composição. Por exemplo, a quantidade de tensoativos utilizada é uma quantidade que não levará a formação de espuma durante a mistura. Exemplos de tensoativos farmaceuticamente aceitáveis incluem os álcoois, ésteres e éteres graxos, tais como mono-oleato de poiloxietileno (20) sorbitano (Polissorbato 80), éteres de macrogol e poloxâmeros. O tensoativo pode estar presente em uma quantidade de cerca de 0,01 a 10% (p/p), tal como de 0,01 a 0,75% (p/p), por exemplo, cerca de 0,5% (p/p), com base no peso total da composição.

[0199]Um ou mais agente(s) de ajuste de tonicidade podem ser incluídos para obter tonicidade com fluidos corporais, por exemplo, fluidos da cavidade nasal, resultando em níveis reduzidos de irritação. Exemplos de agentes de ajuste de tonicidade farmaceuticamente aceitáveis incluem, mas não estão limitados a, cloreto de sódio, dextrose, xilitol, cloreto de cálcio, glicose, glicerina e sorbitol. Um agente para ajuste de tonicidade, caso esteja presente, pode ser incluído em uma quantidade de 0,1 a 10% (p/p), tal como de 4,5 a 5,5% (p/p), por exemplo cerca de 5,0% (p/p), com base no peso total da composição.

[0200]As composições da invenção podem ser tamponadas pela adição de agentes tamponantes adequados, tais como citrato de sódio, ácido cítrico, trometamol, fosfatos, tais como fosfato dissódico (por exemplo, as formas dodecahidrato, heptahidrato, diidratado e anidro) ou fosfato de sódio e misturas dos mesmos.

[0201]Um agente tamponante, caso esteja presente, pode ser incluído em uma quantidade de 0,1 a 5% (p/p), por exemplo 1 a 3% (p/p) com base no peso total da composição.

[0202]Exemplos de agentes de mascaramento de sabor incluem sucralose, sacarose, sacarina ou um sal do mesmo, frutose, dextrose, glicerol, xarope de milho, aspartame, acessulfame-K, xilitol, sorbitol, eritritol, glicirricina de amônio, taumatina, neotame, manitol, mentol, eucalipto óleo, cânfora, um agente aromatizante natural, um agente aromatizante artificial e combinações dos mesmos.

[0203]Um ou mais cossolventes podem ser incluídos para ajudar a solubilidade do(s) composto(s) medicamentoso(s) e/ou outros excipientes. Exemplos de cossolventes farmaceuticamente aceitáveis incluem, mas não estão limitados a, propilenoglicol, dipropilenoglicol, etilenoglicol, glicerol, etanol, polietilenoglicóis (por exemplo, PEG300 ou PEG400) e metanol. Em uma forma de realização, o cossolvente é o propilenoglicol.

[0204]O(s) cossolvente(s), caso estejam presentes, pode(m) ser incluído(s) em uma quantidade de 0,05 a 30% (p/p), tal como de 1 a 25% (p/p), por exemplo, de 1 a 10% (p/p) com base no peso total da composição.

[0205]As composições para a administração por inalação incluem misturas aquosas, orgânicas ou aquosas/orgânicas, pó seco ou composições cristalinas administradas no trato respiratório por bomba pressurizada ou inalador, por exemplo, inaladores com reservatório de pó seco, inaladores de pó seco de dose única, inaladores de pó seco multidose pré-calibrada, inaladores nasais ou inaladores de aerossóis pressurizados, nebulizadores ou insufladores. As composições adequadas contêm água como diluente ou veículo para este fim e podem ser fornecidas com excipientes convencionais, tais como agentes tamponantes, agentes modificadores de tonicidade e semelhantes. As composições aquosas podem ser administradas também ao nariz e outras regiões do trato respiratório por nebulização. Tais composições podem ser soluções aquosas ou suspensões ou aerossóis administrados a partir de embalagens pressurizadas, tais como um inalador de dose calibrada, com a utilização de um propulsor liquefeito adequado.

[0206]As composições para administração tópica ao nariz (por exemplo, para o tratamento da rinite), ou ao pulmão, incluem composições de aerossol pressurizado e composições aquosas liberadas nas cavidades nasais por bomba pressurizada. As composições que não são pressurizadas e são adequadas para administrações tópicas na cavidade nasal são particularmente interessantes. As composições adequadas contêm água como diluente ou veículo para este fim. As composições aquosas para administração ao pulmão ou nariz podem ser fornecidas com excipientes convencionais, tais como agentes tamponantes, agentes modificadores de tonicidade e semelhantes. As composições aquosas podem ser administradas também no nariz por nebulização

[0207]Um dispensador de fluido pode ser tipicamente usado para fornecer uma composição fluida às cavidades nasais. A composição fluida pode ser aquosa ou não aquosa, mas tipicamente aquosa. Tal dispensador de fluido pode ter um bico dispensador ou orifício dispensador, através do qual uma dose calibrada da composição fluida é dispensada após a aplicação de uma força exercida pelo usuário sobre um mecanismo bombeador do dispensador de fluido. Tais dispensadores de fluidos são geralmente providos de um reservatório com múltiplas doses calibradas da composição de fluido, em que as doses são dispensadas mediante acionamentos sequencias da bomba. O bico ou orifício dispensador pode ser configurado para ser inserido nas narinas do usuário para dispensar a composição fluida por pulverização na cavidade nasal. Um dispensador de fluido do tipo acima mencionado é descrito e ilustrado na publicação do Pedido de Patente Internacional No. WO 2005/044354 (Glaxo Group Limited). O dispensador tem um espaço/alojamento que abriga um dispositivo dispensador de fluido com uma bomba de compressão montada em um recipiente que contém uma composição de fluido. Este espaço tem pelo menos uma alavanca lateral acionada manualmente que se move para dentro em relação ao espaço para mover o recipiente para cima no espaço por meio de um came que faz com que a bomba comprima e bombeie para uma dose calibrada da composição de uma haste da bomba através de um bico nasal do espaço. Em uma forma de realização, o dispensador de fluido é do tipo geral ilustrado nas Figuras 30-40 do documento WO 2005/044354.

[0208]Uma composição aquosa contendo um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser administrada também por uma bomba, conforme revelado no Pedido de Patente Internacional No. WO 2007/138084 (Glaxo Group Limited), por exemplo, como descrito tendo como referência as Figuras 22 -46, ou como descrito no Pedido de Patente Britânico No. GB0723418.0 (Glaxo Group Limited), por exemplo, como descrito tendo como referência as Figuras 7-32 do mesmo. A bomba pode ser acionada por um atuador, conforme descrito nas Figuras 1-6 do documento GB0723418.0.

[0209]As composições em pó seco para administração tópica no pulmão por inalação podem, por exemplo, ser apresentadas em cápsulas e cartuchos, por exemplo, de gelatina, ou blisters, por exemplo, de folhas de alumínio laminadas, para uso em um inalador ou insuflador. As composições de mistura em pó contêm geralmente uma mistura em pó para inalação do composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e uma base em pó adequada (substância veículo/ diluente/ excipiente), tal como mono-, di-ou polissacarídeos (por exemplo lactose ou amido). As composições em pó seco podem incluir também, além do fármaco e o veículo, um excipiente adicional (por exemplo, um agente ternário, tal como um éster de açúcar, por exemplo, octaacetato de celobiosa, estearato de cálcio ou estearato de magnésio.

[0210]Em uma forma de realização, uma composição adequada para administração por inalação pode ser incorporada em uma pluralidade de recipientes de dose selados, proporcionados na(s) embalagem(ns) contendo o medicamento, montados dentro de um dispositivo de inalação adequado. Os recipientes podem ser quebráveis, descoláveis ou abertos de outro modo, um por vez, e as doses da composição em pó seco são administradas por inalação em um bocal do dispositivo de inalação, como é conhecido no estado da arte. O pacote de medicamentos pode assumir várias formas diferentes, por exemplo, uma forma de disco ou uma tira alongada. Dispositivos de inalação representativos são os dispositivos DISKHALER™ e DISKUS™, comercializados pela GlaxoSmithKline.

[0211]Uma composição em pó seco inalável pode ser fornecida também como um reservatório de massa (bulk reservoir) em um dispositivo de inalação, sendo o dispositivo fornecido com um mecanismo de medição/calibração para calibrar uma dose da composição do reservatório para um canal de inalação onde a dose calibrada pode ser inalada por um paciente que a inala em um bocal do dispositivo. Exemplos destes dispositivos comercializados são TURBUHALER™ (AstraZeneca), TWISTHALER™ (Schering) e CLICKHALER™ (Innovata).

[0212]Outro método de entrega para uma composição em pó seco inalável é para doses calibradas da composição a serem fornecidas em cápsulas (uma dose por cápsula) que são então carregadas em um dispositivo de inalação, tipicamente pelo paciente de acordo com a necessidade. O dispositivo tem meios para romper, perfurar ou de outra forma abrir a cápsula para que a dose possa ser entrar nos pulmões do paciente quando este inala no bocal do dispositivo. Exemplos de tais dispositivos comercializados, pode-se mencionar o ROTAHALER™ (GlaxoSmithKline) e HANDIHALER™ (Boehringer Ingelheim).

[0213]As composições de aerossol pressurizado adequadas para inalação podem ser uma suspensão ou uma solução e podem conter um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um propulsor adequado, tal como um fluorocarbono ou clorofluorocarbono contendo hidrogênio ou misturas dos mesmos, particularmente, os hidrofluoroalcanos, especialmente 1,1,1,2- tetrafluoroetano, 1,1,1,2,3,3,3-heptafluoro-n-propano ou uma mistura dos mesmos. A composição de aerossol pode opcionalmente conter na composição excipientes adicionais bem conhecidos no estado da arte, tais como tensoativos, por exemplo, ácido oleico, lecitina ou um ácido oligoláctico ou um derivado dos mesmos, como, por exemplo, o descrito nos documentos WO 94/21229 e WO 98/34596 (Minnesota Mining and Manufacturing Company) e cossolventes, por exemplo, o etanol. As composições pressurizadas serão geralmente mantidas em uma lata (por exemplo, uma lata de alumínio) fechada com uma válvula (por exemplo, uma válvula de medição) e instalada em um atuador provido com um bocal.

[0214]As composições farmacêuticas adaptadas para administração vaginal podem ser apresentadas como pessários, tampões, cremes, géis, pastas, espumas ou formulações em spray.

[0215]As soluções farmacêuticas adaptadas para administração injetável incluem soluções de injeção estéril aquosas e não aquosas que podem conter antioxidantes, tampões, bacteriostáticos e solutos que tornam a composição isotônica em relação ao sangue do receptor pretendido; e suspensões estéreis aquosas e não aquosas que podem incluir agentes de suspensão e agentes espessantes. As composições podem ser apresentadas em recipientes de doses únicas ou multidoses, por exemplo, ampolas e frascos selados, e podem ser armazenadas em uma condição liofilizada que requer apenas a adição do veículo líquido estéril, por exemplo, água para preparações injetáveis, imediatamente antes do uso. Soluções e suspensões de injeção extemporânea podem ser preparadas a partir de pós, grânulos e comprimidos estéreis.

[0216]Deve-se entender que, para além dos ingredientes particularmente mencionados acima, as composições podem incluir outros agentes convencionais no estado da arte, tendo em consideração o tipo de formulação em questão, por exemplo, aqueles adequados para administração oral podem incluir agentes aromatizantes.

[0217]As moléculas de RNA de interferência ou antissenso podem ser administradas ao mamífero que necessite das mesmas. Alternativamente, construtos incluindo o mesmo podem ser administrados. Tais moléculas e construtos podem ser usados para interferir na expressão da proteína de interesse, por exemplo, histona desmetilase e, por conseguinte, modificar a desmetilação das histonas. Normalmente, a entrega/administração são os meios conhecidos no estado da arte.

[0218]As moléculas de RNA de interferência ou antissenso podem ser administradas in vitro ou in vivo a células, por exemplo, a tumores de um mamífero. Os modos de administração podem ser utilizados sem limitações, incluindo: intravenosa, intramuscular, intraperitonal, intra-arterial, administração local durante a cirurgia, endoscópica, subcutânea e oral. Os vetores podem ser selecionados pelas propriedades desejáveis para qualquer aplicação específica. Os vetores podem ser virais ou plasmidiais. Os vetores adenovirais são úteis neste caso. Os promotores célula, tecido-específicos, ou de outro modo reguláveis, podem ser usados para controlar a transcrição das moléculas polinucleotídicas inibitórias. Carreadores não- virais, tais como lipossomas ou nanoesferas, também podem ser utilizados.

[0219]Os compostos de Fórmula (I), e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, podem ser formulados também para produzir uma composição a ser utilizada como um adjuvante para modular a atividade de vacinas. Tais composições podem conter anticorpo(s) ou fragmento(s) de anticorpo ou um componente antigênico, incluindo mas não limitado, a proteínas, DNA, bactérias vivas ou mortas e/ou vírus ou partículas semelhantes a vírus, em conjunto com um ou mais componentes com atividade adjuvante incluindo, mas não limitado a, emulsões de sais de alumínio, óleo e água, proteínas de choque térmico, preparações e derivados de lipídeo A, glicolipídeos, outros agonistas de TLR, tais como CpG DNA ou agentes semelhantes, citocinas, tais como GM-CSF ou IL-12 ou agentes semelhantes.

[0220]Uma quantidade terapeuticamente eficaz do agente dependerá de uma série de fatores, incluindo, por exemplo, a idade e o peso do indivíduo, a condição precisa que requer tratamento e sua gravidade, a natureza da formulação e a via de administração, e, em última análise, o critério do médico assistente ou veterinário. Em particular, o indivíduo a ser tratado é um mamífero, particularmente, um humano.

[0221]O agente pode ser administrado como dose diária. Esta quantidade pode ser dada em dose única por dia ou, geralmente, em diversas subdoses (tais como, duas, três, quatro, cinco ou seis) por dia, tal forma que a dose diária total seja a mesma.

[0222] Adequadamente, quantidade do composto da invenção administrada, de acordo com a presente invenção, será uma quantidade selecionada de 0,01 mg a 1 g por dia (calculada como o composto livre ou sem sal).

[0223]Os compostos de Fórmula (I), e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, podem ser utilizados isoladamente ou em combinação com outros agentes terapêuticos. Os compostos de Fórmula (I), e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, e os outros agentes farmaceuticamente ativos podem ser administrados em conjunto ou separadamente e, quando administrados separadamente, a administração pode ocorrer simultânea ou sequencialmente, em qualquer ordem, por qualquer via conveniente composições farmacêuticas separadas ou combinadas.

[0224]As quantidades do(s) composto(s) de Fórmula (I), ou o(s) sal(is) farmaceuticamente aceitável(is), e o(s) outro(s) agente(s) farmaceuticamente ativo(s), e os horários relativos da administração serão selecionados de modo a atingir o efeito terapêutico combinado desejado. Os compostos da presente invenção e outros agentes terapêuticos podem ser utilizados em combinação por administração simultaneamente numa composição farmacêutica unitária incluindo ambos os compostos. Alternativamente, a combinação pode ser administrada separadamente em composições farmacêuticas separadas, cada uma incluindo um dos compostos de uma maneira sequencial em que, por exemplo, o composto da invenção é administrado primeiro e o outro, segundo e vice-versa. Essa administração sequencial pode ser temporalmente próxima (por exemplo, simultaneamente) ou distante. Além disso, não há a necessidade de os compostos serem administrados na mesma forma de dosagem, por exemplo, um composto pode ser administrado por via tópica e o outro composto pode ser administrado por via oral.

[0225]As combinações podem ser apresentadas como um kit combinado. Pelo termo “kit combinado” ou “kit de componentes”, como aqui utilizado, significa que a composição ou composições farmacêuticas são utilizadas para administrar a combinação de acordo com a invenção. Quando ambos os compostos são administrados simultaneamente, o kit combinado pode conter ambos os compostos em uma única composição farmacêutica, tal como um comprimido, ou em composições farmacêuticas separadas. Quando os compostos não são administrados simultaneamente, o kit combinado conterá cada composto em composições farmacêuticas separadas em uma única embalagem ou em composições farmacêuticas separadas em embalagens separadas.

[0226]O kit combinado pode conter também instruções, como instruções de dosagem e administração. Tais instruções de dosagem e administração podem aquelas que são fornecidas a um médico, por exemplo, por um rótulo de medicamento, ou podem aquelas que são fornecidas por um médico, como instruções para um paciente.

[0227]Quando a combinação é administrada separadamente de uma maneira sequencial, em que uma é administrada primeiro e a outra, segundo ou vice-versa, tal administração sequencial pode ser temporalmente próxima ou distante. Por exemplo, a administração do outro agente minutos a vários minutos após a administração do primeiro agente e a administração do outro agente várias horas a vários dias após a administração do primeiro agente, em que o lapso de tempo não é limitado. Por exemplo, um agente pode ser administrado uma vez por dia e o outro agente pode ser administrado 2 ou 3 vezes ao dia, ou um agente pode ser administrado uma vez por semana e o outro agente pode ser administrado uma vez por dia e assim por diante.

[0228]Será claro para um técnico no assunto que, quando necessário, os outros ingredientes terapêuticos podem ser utilizados na forma de sais, por exemplo, como sais de metal alcalino ou amina ou como sais de adição de ácido, ou pró- fármacos, ou como ésteres, por exemplo, ésteres de alquila inferior, ou como solvatos, por exemplo hidratos, para otimizar a atividade e/ou estabilidade e/ou características físicas, tais como a solubilidade, do ingrediente terapêutico. Será claro também que, quando necessário, os ingredientes terapêuticos podem ser utilizados na forma opticamente pura.

[0229]Quando combinados na mesma composição, entende-se que os dois compostos devem ser estáveis e compatíveis entre si e os outros componentes da composição e podem ser formulados para administração. Quando formulados separadamente, podem ser proporcionados convenientemente em qualquer composição adequada, de tal maneira como é conhecida por tais compostos no estado da arte.

[0230]Quando o composto de Fórmula (I) é utilizado em combinação com um segundo agente terapêutico ativo contra a mesma doença, condição ou distúrbio, a dose de cada composto pode diferir daquela quando o composto é utilizado isoladamente. As doses adequadas serão prontamente entendidas pelos técnicos no assunto.

[0231]Em uma forma de realização, o mamífero nos métodos e usos da presente invenção é um humano.

[0232]A invenção também proporciona uma composição farmacêutica compreendendo de 0,5 a 1000 mg de um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e de 0,5 a 1000 m g de um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[0233]Os compostos da invenção são úteis no tratamento de doenças em que a modulação de STING é benéfica. Isso inclui inflamação, doenças alérgicas e autoimunes, doenças infecciosas, câncer e síndromes pré-cancerosas.

[0234]Como moduladores da resposta imune, os compostos de Fórmula (I) e os sais aceitáveis dos mesmos, sob o ponto de vista farmacêutico, podem ser úteis também, independentemente ou em combinação, como um adjuvante no tratamento de doenças em que a modulação de STING é benéfica.

[0235]Em um aspecto, a doença ou condição é a inflamação, alergia e distúrbios autoimunes. As doenças autoimunes associadas incluem, mas não estão limitadas a, lúpus eritematoso sistêmico, psoríase, diabetes mellitus insulino- dependente (IDDM), dermatomiosite, vírus da imunodeficiência humana (HIV), AIDS e síndrome de Sjogren (SS). A inflamação representa um grupo de respostas vasculares, celulares e neurológicas ao trauma. A inflamação pode ser caracterizada como o movimento de células inflamatórias, como monócitos, neutrófilos e granulócitos nos tecidos. Isso geralmente está associado à função de barreira endotelial reduzida e edema nos tecidos. A inflamação pode ser classificada como aguda ou crônica. A inflamação aguda é a resposta inicial do corpo aos estímulos nocivos e ocorre devido ao aumento do movimento do plasma e leucócitos do sangue para os tecidos lesados. Uma cascata de eventos bioquímicos se propaga e amadurece a resposta inflamatória, envolvendo o sistema vascular local, o sistema imunológico e várias células dentro do tecido lesado. A inflamação prolongada, conhecida como inflamação crônica, leva a uma mudança progressiva no tipo de células que estão presentes no local da inflamação e é caracterizada pela destruição simultânea e cicatrização do tecido do processo inflamatório.

[0236]Quando ocorre como parte de uma resposta imune à infecção ou como uma resposta aguda ao trauma, a inflamação pode ser benéfica e normalmente é autolimitante. No entanto, a inflamação pode ser prejudicial em várias condições. Isso inclui a produção de inflamação excessiva em resposta a agentes infecciosos, o que pode levar a danos significativos nos órgãos e à morte (por exemplo, no surgimento da sepse). Além disso, a inflamação crônica é geralmente deletéria e é a causa de numerosas doenças crônicas, causando danos graves e irreversíveis aos tecidos. Em tais situações, a resposta imune é muitas vezes dirigida contra o próprio tecido (autoimunidade), embora as respostas crônicas a materiais estranhos também possam levar ao dano bystander aos próprios tecidos.

[0237]O objetivo da terapia anti-inflamatória é, portanto, reduzir essa inflamação, inibir a autoimunidade quando presente e permitir que o processo fisiológico ou de cicatrização e reparo tecidual progridam.

[0238]Os agentes podem ser usados para tratar a inflamação de qualquer tecido e órgãos do corpo, incluindo inflamação musculoesquelética, inflamação vascular, inflamação neural, inflamação do sistema digestivo, inflamação ocular, inflamação do sistema reprodutivo e outras inflamações, conforme exemplificado abaixo.

[0239]A inflamação musculoesquelética refere-se a qualquer condição inflamatória do sistema musculoesquelético, particularmente as condições que afetam as articulações esqueléticas, incluindo as articulações da mão, pulso, cotovelo, ombro, mandíbula, espinha, pescoço, quadril, joelho, tornozelo e pé e condições que afetam os tecidos que conectam os músculos aos ossos, como os tendões. Exemplos de inflamação musculoesquelética que podem ser tratados com os compostos da invenção incluem artrite (incluindo, por exemplo, osteoartrite, artrite reumatoide, artrite psoriática, espondilite anquilosante, artrite infecciosa aguda e crônica, artrite associada à gota e pseudogota e artrite idiopática juvenil), tendinite, sinovite, tenossinovite, bursite, fibrosite (fibromialgia), epicondilite, miosite e osteíte (incluindo, por exemplo, doença de Paget, osteíte púbica e osteíte fibrosa cística).

[0240]A inflamação ocular refere-se à inflamação de qualquer estrutura do olho, incluindo as pálpebras. Exemplos de inflamação ocular que podem ser tratados com os compostos da invenção incluem blefarite, blefarocalase, conjuntivite, dacrioadenite, queratite, ceratoconjuntivite sicca (olho seco), esclerite, tricíase e uveíte.

[0241]Exemplos de inflamação do sistema nervoso que podem ser tratados com os compostos da invenção incluem encefalite, síndrome de Guillain-Barre, meningite, neuromiotonia, narcolepsia, esclerose múltipla, mielite e esquizofrenia.

[0242]Exemplos de inflamação do sistema vascular ou linfático que podem ser tratados com os compostos da invenção incluem artrosclerose, artrite, flebite, vasculite e linfangite.

[0243]Exemplos de condições inflamatórias do sistema digestivo que podem ser tratados com os compostos da invenção incluem colangite, colecistite, enterite, enterocolite, gastrite, gastroenterite, doença intestinal inflamatória (como doença de Crohn e colite ulcerativa), ileíte e proctite.

[0244]Exemplos de condições inflamatórias do sistema reprodutor que podem ser tratados com os compostos da invenção incluem cervicite, corioamnionite, endometrite, epididimite, onfalite, ooforite, orquite, salpingite, abscesso de tubo- ovariano, uretrite, vaginite, vulvite e vulvodinia.

[0245]Os agentes podem ser usados para tratar condições autoimunes que tenham um componente inflamatório. Tais condições incluem alopecia aguda disseminada, alopecia universal, doença de Behcet, doença de Chagas, síndrome de fadiga crônica, disautonomia, encefalomielite, espondilite anquilosante, anemia aplástica, hidradenite supurativa, hepatite autoimune, ooforite autoimune, doença celíaca, doença de Crohn, diabetes mellitus tipo 1, arterite de células gigantes, síndrome de Goodpasture, doença de Grave, síndrome de Guillain-Barre, doença de Hashimoto, púrpura de Henoch-Schonlein, doença de Kawasaki, lúpus eritematoso, colite microscópica, poliarterite microscópica, doença mista do tecido conjuntivo, esclerose múltipla, miastenia grave, síndrome de opsoclonus-mioclonus, neurite óptica, tireoidite de ORD, pênfigo, poliarterite nodosa, polimialgia, artrite reumatoide, síndrome de Reiter, síndrome de Sjogren, arterite temporal, granulomatose de Wegener, anemia hemolítica autoimune tipo quente, cistite intersticial, doença de Lyme, morfeia, psoríase, sarcoidose, esclerodermia, colite ulcerativa e vitiligo.

[0246]Os agentes podem ser utilizados para tratar doenças de hipersensibilidade mediada por células T tendo um componente inflamatório. Tais condições incluem hipersensibilidade de contato, dermatite de contato (incluindo aquela por hera venenosa), urticária, alergias cutâneas, alergias respiratórias (febre do feno, rinite alérgica) e enteropatia sensível ao glúten (doença celíaca).

[0247]Outras condições inflamatórias que podem ser tratadas com os agentes incluem, por exemplo, apendicite, dermatite, dermatomiosite, endocardite, fibrossite, gengivite, glossite, hepatite, hidradenite supurativa, irite, laringite, mastite, miocardite, nefrite, otite, pancreatite, parotidite, pericardite, peritonite, faringite, pleurite, pneumonite, prostatiste, pielonefrite e estomatite, rejeição de transplante (envolvendo órgãos como rim, fígado, coração, pulmão, pâncreas (por exemplo, células de ilhotas), medula óssea, córnea, intestino delgado e aloenxertos de pele, homoenxertos de pele e xenoenxertos de válvula cardíaca, doença do soro e doença do enxerto contra o hospedeiro), pancreatite aguda, pancreatite crônica, síndrome do desconforto respiratório agudo, síndrome de Sexary, hiperplasia congênita adrenal, tireoidite não supurativa, hipercalcemia associada ao câncer, pênfigo, dermatite bolhosa herpetiforme, eritema multiforme grave, dermatite esfoliativa, dermatite seborreica, rinite alérgica sazonal ou perene, asma brônquica, dermatite de contato, dermatite atópica, reações de hipersensibilidade à droga, conjuntivite alérgica, ceratite, herpes zóster oftálmico, irite e oiridociclite, coriorretinite, neurite óptica, sarcoidose sintomática, quimioterapia para tuberculose pulmonar fulminante ou disseminada, púrpura trombocitopênica idiopática em adultos, trombocitopenia secundária em adultos, anemia hemolítica adquirida (autoimune), leucemia e linfomas em adultos, leucemia aguda da infância, enterite regional, vasculite autoimune, esclerose múltipla, doença pulmonar obstrutiva crônica, rejeição de transplante de órgão sólido, sepse. Os tratamentos preferenciais incluem o tratamento de rejeição de transplantes, artrite reumatoide, artrite psoriática, esclerose múltipla, diabetes tipo 1, asma, doença inflamatória intestinal, lúpus eritematoso sistêmico, psoríase, doença pulmonar crônica e inflamação que acompanha condições infecciosas (por exemplo, sepse).

[0248]Em outro aspecto da invenção, é proporcionado um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso no tratamento da inflamação, alergia e doença autoimune.

[0249]Em outro aspecto, é proporcionado um método de tratamento de inflamação, alergia e doença autoimune, o qual compreende administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, a um humano que precise do mesmo.

[0250]Em outro aspecto, proporciona-se o uso de um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na fabricação de um medicamento para o tratamento de inflamação, alergia e doença autoimune.

[0251]Em um aspecto, a doença a ser tratada é a asma.

[0252]Os compostos de Fórmula (I) e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos podem ser utilizados em combinação com um ou mais outros agentes que podem ser úteis na prevenção ou tratamento de doenças alérgicas, doenças inflamatórias, doenças autoimunes, por exemplo; imunoterapia antigênica, anti- histaminas, esteroides, AINEs, broncodilatadores (por exemplo, agonistas beta 2, agonistas adrenérgicos, agentes anticolinérgicos, teofilina), metotrexato, moduladores de leucotrienos e agentes semelhantes; terapia de anticorpos monoclonais, tais como anti-IgE, anti-TNF, anti-IL-5, anti-IL-6, anti-IL-12, anti-IL-1 e agentes semelhantes; terapias de receptores, por exemplo, entanercept e agentes semelhantes; imunoterapias antígeno não-específica (por exemplo, interferon ou outras citocinas/quimiocinas, moduladores de receptores de citocinas/quimiocinas, agonistas de citocinas ou antagonistas, agonistas de TLRe agentes semelhantes).

[0253]Em um outro aspecto, é proporcionada uma combinação compreendendo um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos outro agente terapêutico útil no tratamento de doenças alérgicas, inflamação ou doenças autoimunes.

[0254]Em outro aspecto, é proporcionada uma combinação compreendendo um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos um outro agente terapêutico útil no tratamento de doenças alérgicas, inflamação ou doenças autoimunes para uso em terapia.

[0255]Em outro aspecto, é proporcionada uma combinação compreendendo um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos um outro agente terapêutico útil no tratamento de doenças alérgicas, inflamação ou doenças autoimunes, para uso no tratamento de doenças alérgicas, inflamação ou doenças autoimunes.

[0256]Em outro aspecto, proporciona-se o uso de uma combinação compreendendo um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos um outro agente terapêutico útil no tratamento de doenças alérgicas, inflamação ou doenças autoimunes na fabricação de um medicamento para o tratamento de doenças alérgicas, inflamação ou doenças autoimunes.

[0257]Em outro aspecto, é proporcionado um método de tratamento de doenças alérgicas, inflamação ou doenças autoimunes, o qual compreende administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma combinação compreendendo um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos um outro agente terapêutico útil no tratamento de doenças alérgicas, inflamação ou doenças autoimunes, a um humano que necessite do mesmo.

[0258]Em outro aspecto, é proporcionada uma composição farmacêutica compreendendo uma combinação contendo um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos um outro agente terapêutico útil no tratamento de doenças alérgicas, inflamação ou doenças autoimunes e um ou mais de excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

[0259]Em um aspecto, a doença a ser tratada com essa combinação é a asma.

[0260]Em um aspecto, a doença ou condição a ser tratada é o câncer.

[0261]Exemplos de doenças cancerosas em que os compostos de Fórmula (I), ou sais ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, podem ter efeitos antitumorais potencialmente benéficos incluem, mas não estão limitados a, câncer de pulmão, osso, pâncreas, pele, cabeça, pescoço, útero, ovários, estômago, cólon, mama, esôfago, intestino delgado, intestino, sistema endócrino, glândula da paratireoide, glândula adrenal, uretra, próstata, pênis, testículos, ureter, bexiga, rim ou fígado; câncer retal; câncer da região anal; carcinomas das trompas de Falópio, endométrio, colo do útero, vagina, vulva, pelve renal, células renais; sarcoma de tecido mole; mixoma; rabdomioma; fibroma; lipoma; teratoma; colangiocarcinoma; hepatoblastoma; angiossarcoma; hemagioma; hepatoma; fibrossarcoma; condrossarcoma; mieloma; leucemia crônica ou aguda; linfomas linfocíticos; linfoma primário do SNC; neoplasmas do SNC; tumores da medula espinhal; carcinomas de células escamosas; sarcoma sinovial; mesoteliomas pleurais malignos; glioma do tronco encefálico; adenoma pituitário; adenoma brônquico; hamartoma condromato; inesotelioma; Doença de Hodgkin ou uma combinação de um ou mais dos cânceres anteriores.

[0262]Adequadamente, a presente invenção refere-se a um método de tratamento ou diminuição da gravidade dos cânceres selecionados do grupo constituído por (gliomas) cerebral, glioblastomas, astrocitomas, glioblastoma multiforme, síndrome de Bannayan-Zonana, doença de Cowden, doença de Lhermitte-Duclos, tumor de Wilm, Sarcoma de Ewing, rabdomiossarcoma, ependimoma, meduloblastoma, câncer de cabeça e pescoço, rim, fígado, melanoma, ovário, pancreático, adenocarcinoma, adenocarcinoma ductal, carcinoma adenosquâmico, carcinoma de células acinares, glucagonoma, insulinoma, próstata, sarcoma, osteossarcoma, células gigantes, tumor de osso, tireoide, leucemia de células T linfoblástica, leucemia mieloide crônica, leucemia linfocítica crônica, leucemia de células pilosas, leucemia linfoblástica aguda, leucemia mieloide aguda, leucemia neutrofílica crônica, leucemia de células T linfoblástica aguda, plasmocitoma, leucemia imunoblástica de grandes células, leucemia de células do manto, mieloma múltiplo, leucemia megacariótica, mieloma múltiplo, leucemia megacariocítica aguda, leucemia promielocítica, eritroleucemia, linfoma maligno, linfoma de Hodgkin, linfoma de não-Hodgkin, linfoma de células T linfoblástica, linfoma de Burkitt, linfoma folicular, neuroblastoma, câncer de bexiga, câncer urotelial, câncer de vulva, câncer cervical, câncer de endometrio, câncer renal, mesotelioma, câncer de esôfago, câncer de glândula salivar, câncer hepatocelular, câncer gástrico, câncer de nasofaringe, câncer bucal, câncer da boca, GIST (tumor estromal gastrointestinal) e câncer de testículo.

[0263]Adequadamente, a presente invenção refere-se a um método de tratamento ou diminuição da gravidade de síndromes pré-cancerosas em um mamífero, incluindo um humano, em que a síndrome pré-cancerosa é selecionada a partir de: neoplasia cervical intraepitelial, gamopatia monoclonal de significado indeterminado (MGUS), síndrome mielodisplásica, anemia aplástica, lesões cervicais, nevos de pele (pré-melanoma), neoplasia intraepitelial prostática (intradutífera), carcinoma ductal in situ (DCIS), pólipos do cólon e hepatite grave ou cirrose.

[0264]Os compostos da presente invenção também podem ser utilizados como adjuvantes para melhorar a resposta imune aumentada a qualquer determinado antígeno e/ou reduzir a reatogenicidade/ toxicidade em um paciente, particularmente um humano, que precise dos mesmos. Para tal, um composto desta invenção pode ser utilizado em combinação com composições vacinais para modificar, especialmente melhorar, a resposta imune, por exemplo, aumentando-se o nível ou a duração da proteção e/ou permitindo uma redução na dose antigênica.

[0265]Os compostos de Fórmula (I) e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos podem ser utilizados em combinação com uma ou mais vacinas ou antígenos imunogênicos úteis na prevenção ou tratamento de infecções virais. Tais vacinas ou antígenos imunogênicos incluem, sem limitação, proteínas ou partículas derivadas de agentes patogênicos, tais como vírus atenuados, partículas virais e proteínas virais normalmente utilizadas como substâncias imunogênicas. Exemplos de vírus e antígenos virais incluem, sem limitações, o Poliovírus, Cioronaviridae e Coronavírus, Rhinovirus (todos os subtipos), Adenovírus (todos os subtipos), vírus da Hepatite A, Hepatite B, Hepatite C, Hepatite D, Papilomavírus Humano (incluindo todos os subtipos), vírus da Raiva, vírus linfotrófico de células T humanas (todos os subtipos), vírus da rubéola, vírus das caxumba, vírus de Coxsackie A (todos os subtipos), vírus de Cosackie B (todos os subtipos), enterovírus humanos, herpesvírus, incluindo o citomegalovírus, o vírus Epstein-Barr, os herpesvírus humanos (todos os subtipos), herpesvírus simples, vírus da varicela zoster, vírus da imunodeficiência humana (HIV)(todos os subtipos), AIDS, vírus Epstein-Barr, Reovírus (todos os subtipos), Filovírus, incluindo vírus de Marburg e Ebola (todas as cepas), Arenavírus, incluindo vírus da corioromenite linfocítica, vírus Lassa, vírus Junin e vírus Machupo, Arbovírus, incluindo vírus do Nilo Ocidental, vírus da dengue (todos os sorotipos), vírus Zika, vírus da febre por carrapato do Colorado, vírus Sindbis, Togaviridae, Flaviviridae, Bunyaviridae, Reoviridae, Rhabdoviridae, Orthomyxoviridae, Poxvírus, incluindo o ortopoxvírus (vírus da varíola, poxvírus de macaco, vírus vaccinia, vírus cowpox), os yatapoxvírus (vírus de tanapox, o vírus do tumor de macaco de Yaba), parapoxvírus, vírus de molusco, vírus da febre amarela, Hantavírus, incluindo vírus Hantaan, Seul, Dobrava, Sin Nombre, Puumala e Saaremaa tipo Dobrava, vírus influenza e vírus parainfluenza humanos (todos os tipos), vírus da influenza H1N1 e da gripe suína, vírus sincicial respiratório (todos os subgrupos), rotavírus, incluindo rotavírus humanos A-E, rotavírus bovino, rotavírus de macaco rhesus, Poliomavírus, incluindo vírus símio 40, vírus JC, vírus BK, Coltivírus, vírus eyach, calcivírus e Parvoviridae, incluindo dependovírus, parvovírus e eritrovírus.

[0266]Os compostos da presente invenção também podem ser úteis no tratamento de uma ou mais doenças que afetam mamíferos que são caracterizados pela proliferação celular na área de distúrbios associados a neovascularização e/ou permeabilidade vascular, incluindo os distúrbios proliferativos de vasos sanguíneos, incluindo artrite (artrite reumatoide) e reestenose; distúrbios fibróticos, incluindo cirrose hepática e aterosclerose; distúrbios proliferativos de células mesangiais, incluindo glomerulonefrite, nefropatia diabética, nefrosclerose maligna, síndromes de microangiopatia trombótica, retinopatias proliferativas, rejeição de transplante de órgãos e glomerulopatias; e distúrbios metabólicos, incluindo a psoríase, diabetes mellitus, cicatrização crônica de feridas, inflamação e doenças neurodegenerativas.

[0267]Em outro aspecto da invenção, é proporcionado um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso no tratamento de um estado de doença selecionado do grupo constituído por: HIV, HBV, HCV, influenza, verrugas dérmicas, esclerose múltipla, inflamação alérgica e como um adjuvante.Zhijian Chen -Regulation and function of the cGAS-STING pathway of cytosolic DNA sensing - Nature Immunology (2016), 17, 1142-1149. Seng-Ryong Woo -STING-Dependent Cytosolic DNA Sensing Mediates Innate Immune Recognition of Immunogenic Tumors (2014), 41, 830-842. Jenny P.-Y. Ting -NLRX1 Sequesters STING to Negatively Regulate the Interferon Response, Thereby Facilitating the Replication of HIV-1 and DNA Viruses - Cell Host and Microbe (2016), 19, 515-528. Zhijian Chen -Pivotal Roles of cGAS-cGAMP Signaling in Antiviral Defense and Immune Adjuvant Effects -Science (2013), 341, 1390-1394. Nuchsupha Sunthamala -E2 Proteins of High Risk Human Papillomaviruses Down- Modulate STING and IFN-k Transcription in Keratinocytes - PLoS (2014), 9, 1-11. Guo, H., et al. (2016). NLRX1 Sequesters STING to Negatively Regulate the Interferon Response, Thereby Facilitating the Replication of HIV-1 and DNA Viruses. Cell host & microbe 19, 515-528. Gao, D., et al. (2013). Cyclic GMP-AMP synthase is an innate immune sensor of HIV and other retroviruses. Science 341, 903-906. Guo, F., et al. (2015). Sting agonists induce an innate antiviral immune response against hepatitis B virus. Antimicrobial Agents and Chemotherapy 59, 1273-1281. Dansako, H., et al. (2016). The cyclic GMP-AMP synthetase-STING signaling pathway is required for both the innate immune response against HBV and the suppression of HBV assembly. FEBS J 283, 144-156. Chang, J., et al. (2015). Treatment of chronic hepatitis B with pattern recognition receptor agonists: Current status and potential for a cure. Antiviral Research 121, 152-159. Li, XD, et al. (2013). Pivotal roles of cGAS-cGAMP signaling in antiviral defense and immune adjuvant effects. Science 341, 1390-1394. Carroll, EC, et al. (2016). The Vaccine Adjuvant Chitosan Promotes Cellular Immunity via DNA Sensor cGAS-STING-Dependent Induction of Type I Interferons. Immunity 44, 597-608. Wang, J., et al. (2016). Natural STING Agonist as an “Ideal” Adjuvant for Cutaneous Vaccination. J Invest Dermatol 136, 2183-2191. Holm, CK, et al. (2016). Influenza A virus targets a cGAS-independent STING pathway that controls enveloped RNA viruses. Nat Commun 7, 10680. Shirey, KA, et al. (2011). The anti-tumor agent, 5,6-dimethylxanthenone-4-acetic acid (DMXAA), induces IFN-beta-mediated antiviral activity in vitro and in vivo. J Leukoc Biol 89, 351-357. Nitta, S., et al. (2013). Hepatitis C virus NS4B protein targets STING and abrogates RIG-I-mediated type I interferon-dependent innate immunity. Hepatology 57, 46-58. Sunthamala, N., et al. (2014). E2 proteins of high risk human papillomaviruses down- modulate STING and IFN-kappa transcription in keratinocytes. PLoS One 9, e91473. Lau, L., et al. (2015). DNA tumor virus oncogenes antagonize the cGAS-STING DNA- sensing pathway. Science 350, 568-571. Kidd, P. (2003). Th1/Th2 balance: the hypothesis, its limitations, and implications for health and disease. Altern Med Rev 8, 223-246. Huang, L., et al. (2013). Cutting edge: DNA sensing via the STING adaptor in myeloid dendritic cells induces potent tolerogenic responses. J Immunol 191, 3509-3513. Lemos, H., et al. (2014). Activation of the STING adaptor attenuates experimental autoimmune encephalitis. J Immunol 192, 5571-5578.

[0268]Em outro aspecto da invenção, é proporcionado um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso no tratamento de câncer e/ou síndromes pré-cancerosas.

[0269]Em outro aspecto, é proporcionado um método de tratamento de câncer que compreende administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, a um humano que precise do mesmo.

[0270]Em outro aspecto, proporciona-se o uso de um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na fabricação de um medicamento para o tratamento de câncer e/ou síndromes pré-cancerosas.

[0271]Em uma forma de realização, o composto da invenção pode ser utilizado com outros métodos terapêuticos de tratamento contra o câncer. Em particular, na terapia antineoplásica, prevê-se a terapia de combinação com outros agentes quimioterápicos, hormonais, anticorpos, bem como tratamentos por radiação e/ou cirúrgicos diferentes dos mencionados acima.

[0272]Em uma forma de realização, a terapia anticâncer/antineoplásica adicional é a cirúrgica e/ou radioterapia.

[0273]Em uma forma de realização, a terapia antineoplásica adicional é pelo menos um agente antineoplásico adicional.

[0274]Em outro aspecto, é proporcionada uma combinação compreendendo um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos um agente antineoplásico.

[0275]Em outro aspecto, é proporcionada uma combinação compreendendo um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos um agente antineoplásico, para uso em terapia.

[0276]Em outro aspecto, é proporcionada uma combinação compreendendo um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos um agente antineoplásico, para uso no tratamento de câncer e/ou síndromes pré-cancerosas.

[0277]Em outro aspecto, é proporcionado o uso de uma combinação compreendendo um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos um agente antineoplásico, na fabricação de um medicamento para o tratamento de câncer e/ou síndromes pré-cancerosas.

[0278]Em outro aspecto, é proporcionado um método de tratamento do câncer que compreende administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma combinação compreendendo um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos um agente antineoplásico a um humano que precise do mesmo.

[0279]Em outro aspecto, é proporcionada uma composição farmacêutica compreendendo uma combinação compreendendo um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos um outro agente terapêutico, particularmente pelo menos um agente antineoplásico e um ou mais carreadores, diluentes e excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

[0280]Qualquer agente antineoplásico que tenha atividade contra um tumor passível de ser tratado pode ser utilizado na combinação. Os agentes antineoplásicos típicos úteis incluem, mas não estão limitados a, agentes antimicrotúbulos, tais como diterpenoides e alcaloides de vinca; complexos de coordenação de platina; agentes alquilantes, tais como mostarda de nitrogênio, oxazafosforinas, alquilsulfonatos, nitrosoureias e triazenos; antibióticos, como antraciclinas, actinomicinas e bleomicinas; inibidores da topoisomerase II, tais como epipodofilotoxinas; antimetabólitos, tais como análogos de purina e pirimidina e compostos antifolato; inibidores da topoisomerase I, tais como camptotecinas; hormônios e análogos hormonais; inibidores da via de transdução de sinal; inibidores de angiogênese da tirosina não receptora; agentes imunoterápicos; agentes proapoptóticos; inibidores de sinalização do ciclo celular; agentes imuno-oncológicos e agentes imunoestimuladores.

Agentes antimicrotúbulos ou antimitóticos:

[0281]Os agentes antimicrotúbulos ou antimitóticos são agentes de fase específicos ativos contra os microtúbulos de células tumorais durante a fase M ou mitose do ciclo celular. Exemplos de agentes antimicrotúbulos incluem, mas não estão limitados a, diterpenoides e alcaloides de vinca.

[0282]Os diterpenoides, que são derivados de fontes naturais, são agentes antineoplásicos fase específicos que atuam nas fases G2/M do ciclo celular. Acredita- se que os diterpenoides estabilizem a subunidade β-tubulina dos microtúbulos, ligando-se a esta proteína. A desmontagem da proteína parece ser então inibida, o que paralisa a mitose e provoca a morte celular subsequente. Exemplos de diterpenoides incluem, mas não estão limitados a, o paclitaxel e o seu análogo, o docetaxel.

[0283]O paclitaxel, de 5β, 20-epoxM,2α,4,7β,10β,13α-hexa-hidroxitax-11-en- 9-ona 4,10-diacetato 2-benzoato-13-éster com (2R,3S)-N-benzoil-3-fenilisoserina; é um produto diterpeno natural isolado da árvore de teixo do Pacífico Taxus brevifolia e encontra-se comercialmente disponível na forma de uma solução injetável -TAXOL®. Ele é um membro da família taxano dos terpenos. O paclitaxel foi aprovado para uso clínico no tratamento de câncer de ovário refratário nos Estados Unidos (Markman et al., Yale Journal of Biology and Medicine, 64: 583, 1991; McGuire et al., Ann. Lntem, Med., 111: 273,1989) e para o tratamento de câncer de mama (Holmes et al., J. Nat. Cancer Inst., 83: 1797, 1991). É um candidato potencial para o tratamento de neoplasias na pele (Einzig et al., Proc. Am. Soc. Clin. Oncol., 20:46) e carcinomas de cabeça e pescoço (Forastire et al., Sem. Oncol., 20:56, 1990). O composto também apresenta potencial para o tratamento da doença renal policística (Woo et al., Nature, 368: 750, 1994), câncer de pulmão e malária. O tratamento de pacientes com paclitaxel resulta na supressão da medula óssea (linhagens celulares múltiplas, Ignoff, RJ et al., Cancer Chemotherapy Pocket Guide, 1998) relacionada à duração da dosagem acima de uma concentração limite (50nM)(Kearns, CM et al., Seminars in Oncolog, 3 (6) p.16-23, 1995).

[0284]O docetaxel, (2R, 3S)-N-carboxi-3-fenilisoserina, éster N-terc-butílico, 13-éster com 5β-20-epoxi-1,2α,4,7β,10β,13α-hexa-hidroxitax-11-en-9-ona 4-acetato 2-benzoato, triidratado; encontra-se comercialmente disponível na forma de uma solução injetável -TAXOTERE®. O docetaxel é indicado para o tratamento do câncer de mama. O docetaxel é um derivado semissintético do paclitaxel q.v., preparado com um precursor natural, a 10-desacetil-bacatina III, extraído da agulha da árvore de teixo europeu.

[0285]Os alcaloides de vinca são agentes de fase antineoplásicos específicos derivados da planta pervinca. Os alcaloides de vinca atuam na fase M (mitose) do ciclo celular, ligando-se especificamente à tubulina. Conseqüentemente, a molécula de tubulina ligada é incapaz de se polimerizar em microtúbulos. Acredita-se que a mitose seja paralisada na metáfase com morte celular subsequente. Exemplos de alcaloides de vinca incluem, mas não estão limitados a, vinblastina, vincristina e vinorelbina.

[0286]A vinblastina, sulfato de vincaleucoblastina, encontra-se comercialmente disponível como VELBAN® na forma de solução injetável. Embora, tenha uma possível indicação como terapia de segunda linha de vários tumores sólidos, ela é indicada principalmente no tratamento de câncer de testículo e vários linfomas, incluindo a doença de Hodgkin; e linfomas linfocíticos e histiocíticos. A mielossupressão é o efeito colateral limitante da dose de vinblastina.

[0287]A vincristina, vincaleucoblastina, 22-oxo-, sulfato, encontra-se comercialmente disponível como ONCOVIN® na forma de uma solução injetável. A vincristina é indicada para o tratamento de leucemias agudas e seu uso em regimes de tratamento para linfomas malignos de Hodgkin e não-Hodgkin também foi observado. A alopecia e os efeitos neurológicos são os efeitos colaterais mais comuns da vincristina e, em menor grau, ocorrem a mielossupressão e os efeitos da mucosite gastrointestinal.

[0288]A vinorelbina, 3',4'-dideidro-4'-desoxi-C'-norvincaleucoblastina [R- (R*,R*)-2,3-diidroxibutanodioato (1:2)(sal)], comercialmente disponível na forma de solução injetável de tartarato de vinorelbina (NAVELBINE®), é um alcaloide de vinca semissintético. A vinorelbina é indicada como agente único ou em combinação com outros agentes quimioterápicos, tais como a cisplatina, no tratamento de vários tumores sólidos, particularmente o câncer de próstata de células não pequenas, câncer de próstata avançado e refratário a hormônio. A mielossupressão é o efeito colateral limitante da dose mais comum de vinorelbina.

Complexos de coordenação de platina:

[0289]Os complexos de coordenação de platina são agentes antineoplásicos não-fase específicos, que interagem com o DNA. Os complexos de platina entram nas células tumorais, sofrem reação com água (aquation) e formam ligações cruzadas intra e intercadeias com o DNA, causando efeitos biológicos adversos ao tumor. Exemplos de complexos de coordenação de platina incluem, mas não estão limitados a, a oxaliplatina, cisplatina e carboplatina.

[0290]A cisplatina, cis-diaminodicloroplatina, encontra-se comercialmente disponível como PLATINOL® na forma de uma solução injetável. A cisplatina é indicada principalmente no tratamento de câncer de testículo e ovário metastático e câncer de bexiga avançado.

[0291]A carboplatina, platina, diamina [1,1-ciclobutano-dicarboxilato (2-)-O,O'], encontra-se comercialmente disponível como PARAPLATIN® na forma de uma solução injetável. A carboplatina é indicada principalmente no tratamento de primeira e segunda linhas do carcinoma de ovário avançado.

Agentes alquilantes:

[0292]Os agentes alquilantes são agentes antineoplásicos não-fase específicos e eletrofílicos fortes. Tipicamente, os agentes alquilantes formam ligações covalentes, por alquilação, com o DNA através de porções nucleofílicas da molécula de DNA, tais como os grupos fosfato, amino, sulfidrila, hidroxila, carboxila e imidazol. Essa alquilação interrompe a função do ácido nucleico, o que leva à morte celular. Exemplos de agentes alquilantes incluem, mas não estão limitados a, mostardas de nitrogênio, tais como ciclofosfamida, melfalano e clorambucila; sulfonatos de alquila, tais como busulfan; nitrosoureias, como a carmustina; e triazenos, como a dacarbazina.

[0293]Ciclofosfamida, 2-óxido de 2-[bis(2-cloroetil)amino]tetrahidro-2H-1,3,2- oxazafosforina mono-hidratado, comercialmente disponível como solução injetável ou comprimidos como CYTOXAN®. A ciclofosfamida é indicada como agente único ou em combinação com outros agentes quimioterápicos, no tratamento de linfomas malignos, mieloma múltiplo e leucemias.

[0294]Melfalano, 4-[bis(2-cloroetil)amino]-L-fenilalanina, encontra-se comercialmente disponível na forma de uma solução injetável ou comprimidos como ALKERAN®. O melfalano é indicado para o tratamento paliativo do mieloma múltiplo e carcinoma epitelial irressecável do ovário. A supressão da medula óssea é o efeito colateral limitante de dose mais comum do melfalano.

[0295]O clorambucil, ácido 4-[bis(2-cloroetil)amino]benzenobutanoico, encontra-se comercialmente disponível como LEUKERAN® em comprimidos. O clorambucil é indicado para o tratamento paliativo da leucemia linfática crônica e linfomas malignos, como o linfossarcoma, o linfoma folicular gigante e a doença de Hodgkin.

[0296]O bussulfan, dimetanossulfonato de 1,4-butanodiol, encontra-se comercialmente disponível como MYLERAN® em comprimidos. O bussulfan é indicado para o tratamento paliativo da leucemia mieloide crônica.

[0297]A carmustina, 1,3-[bis(2-cloroetil)-1-nitrosoureia, encontra-se comercialmente disponível como frascos únicos de material liofilizado como BiCNU®. A carmustina é indicada para o tratamento paliativo como agente único ou em combinação com outros agentes para tumores cerebrais, mieloma múltiplo, doença de Hodgkin e linfomas não-Hodgkin.

[0298]A dacarbazina, 5-(3,3-dimetil-1-triazeno)-imidazol-4-carboxamida, encontra-se comercialmente disponível como frascos únicos de material como DTIC- Dome®. A dacarbazina é indicada para o tratamento do melanoma maligno metastático e em combinação com outros agentes para o tratamento de segunda linha da doença de Hodgkin.

Antibióticos Antineoplásicos:

[0299]Os antibióticos antineoplásicos são agentes não-fase específicos, que se ligam ou intercalam com o DNA. Tipicamente, tal ação resulta em complexos de DNA estáveis ou ruptura de cadeia, o que interrompe a função comum dos ácidos nucleicos, levando à morte celular. Exemplos de agentes antibióticos antineoplásicos incluem, mas não estão limitados a, actinomicinas, tais como dactinomicina, ancociclinas, tais como daunorrubicina e doxorrubicina; e bleomicinas.

[0300]A dactinomicina, também conhecida como Actinomicina D, encontra-se comercialmente disponível na forma injetável, como COSMEGEN®. A dactinomicina é indicada para o tratamento do tumor de Wilm e do rabdomiossarcoma.

[0301]A daunorrubicina, cloridrato de (8S-cis-)-8-acetil-10-[(3-amino-2,3,6- trideoxi-α-L-L-lixo-hexopiranosil)oxi]-7,8,9,10-tetrahidro-6,8,11-triidroxi-1-metoxi-5,12 naftacenediona, encontra-se comercialmente disponível na forma injetável lipossomal como DAUNOXOME® ou injetável, como CERUBIDINE®. A daunorrubicina é indicada na indução da remissão no tratamento da leucemia aguda não-linfocítica e do sarcoma avançado de Kaposi associado ao HIV.

[0302]A doxorrubicina, cloridrato de (8S,10S)-10-[(3-amino-2,3,6-trideoxi-L- lixo-hexopiranosil)oxi]-8-glicolil, 7,8,9,10-tetrahidro-6,8,11-triidroxi-1-metoxi-5,12 naftacenediona, encontra-se comercialmente disponível na forma injetável como RUBEX® ou ADRIAMYCIN RDF®. A doxorrubicina é indicada principalmente para o tratamento de leucemia linfoblástica aguda e leucemia mieloblástica aguda, mas também é um componente útil no tratamento de alguns tumores e linfomas sólidos.

[0303]A bleomicina, uma mistura de antibióticos glicopeptídicos citotóxicos isolados de uma cepa de Streptomyces verticillus, encontra-se comercialmente disponível como BLENOXANE®. A bleomicina é indicada como tratamento paliativo, como agente único ou em combinação com outros agentes, do carcinoma de células escamosas, linfomas e carcinomas testiculares.

Inibidores da topoisomerase II:

[0304]Os inibidores da topoisomerase II incluem, mas não estão limitados a, epipodofilotoxinas.

[0305]As epipodofilotoxinas são agentes antineoplásicos fase específicos derivados da planta mandrágora. As epipodofilotoxinas geralmente afetam as células nas fases S e G2 do ciclo celular, formando um complexo ternário com topoisomerase II e DNA, causando rupturas na cadeia de DNA. As rupturas de cadeia se acumulam, levando à morte celular. Exemplos de epipodofilotoxinas incluem, mas não estão limitados a, etoposídeos e teniposídeos.

[0306]O etoposídeo, 4'-dimetil-epipodofilotoxina 9[4,6-0-(R)-etilideno-β-D- glucopiranosídeo], encontra-se comercialmente disponível na forma de uma solução injetável ou cápsulas como VePESID® e é comumente conhecido como VP-16. O etoposídeo é indicado como um agente único ou em combinação com outros agentes quimioterápicos no tratamento do câncer de pulmão de células não pequenas e testículo.

[0307]O teniposídeo, 4'-dimetil-epipodofilotoxina 9[4,6-0-(R)-tenilideno-β-D- glucopiranosídeo], encontra-se comercialmente disponível na forma de uma solução injetável como VUMON® e é comumente conhecido como VM-26. O teniposídeo é indicado como agente único ou em combinação com outros agentes quimioterápicos no tratamento da leucemia aguda em crianças.

Agentes antineoplásicos antimetabólitos:

[0308]Os agentes antineoplásicos antimetabólitos são agentes antineoplásicos específicos de fase que atuam na fase S (síntese de DNA) do ciclo celular inibindo a síntese de DNA ou inibindo a síntese da base de purina ou pirimidina e, assim, limitando a síntese do DNA. Consequentemente, a fase S não prossegue, o que leva à morte celular. Exemplos de agentes antineoplásicos antimetabólitos incluem, mas não estão limitados a, fluorouracila, metotrexato, citarabina, mecaptopurina, tioguanina e gemcitabina.

[0309]O 5-fluorouracil, 5-fluoro-2,4-(1H,3H) pirimidinadiona, encontra-se comercialmente disponível como fluorouracila. A administração do 5-fluorouracil leva à inibição da síntese do timidilato e também é incorporado no RNA e DNA. O resultado normalmente é a morte celular. O 5-fluorouracil é indicado como agente único ou em combinação com outros agentes quimioterápicos no tratamento de carcinomas de mama, cólon, reto, estômago e pâncreas. Outros análogos de fluoropirimidina incluem a 5-fluoro desoxiuridina (floxuridina) e 5-fluorodeoxiuridina monofosfato.

[0310]A citarabina, 4-amino-1-β-D-arabinofuranosil-2(1H)-pirimidinona, encontra-se comercialmente disponível como CYTOSAR-U® e é comumente conhecida como Ara-C. Acredita-se que a citarabina apresente especificidade de fase celular na fase S, inibindo o alongamento da cadeia de DNA por meio da incorporação da citarabina na extremidade terminal na cadeia crescente de DNA. A citarabina é indicada como agente único ou em combinação com outros agentes quimioterápicos no tratamento da leucemia aguda. Outros análogos de citidina incluem a 5-azacitidina e 2',2'-difluorodesoxicitidina (gemcitabina).

[0311]A mercaptopurina, 1,7-diidro-6H-purina-6-tiona mono-hidratada, encontra-se comercialmente disponível como PURINETHOL®. A mercaptopurina apresenta especificidade de fase celular na fase S, inibindo a síntese de DNA por um mecanismo ainda não especificado. A mercaptopurina é indicada como agente único ou em combinação com outros agentes quimioterápicos no tratamento da leucemia aguda. Um análogo útil da mercaptopurina é a azatioprina.

[0312]A tioguanina, 2-amino-1,7-diidro-6H-purina-6-tiona, encontra-se comercialmente disponível como TABLOID®. A tioguanina apresenta especificidade de fase celular na fase S, inibindo a síntese de DNA por um mecanismo ainda não especificado. A tioguanina é indicada como um agente único ou em combinação com outros agentes quimioterápicos no tratamento da leucemia aguda. Outros análogos de purina incluem a pentostatina, eritrohidroxinoniladenina, fosfato de fludarabina e cladribina.

[0313]A gemcitabina, monocloridrato de 2'-desoxi-2',2'-difluorocitidina (isômero β), encontra-se comercialmente disponível como GEMZAR®. A gemcitabina apresenta especificidade de fase celular na fase S e bloqueia a progressão das células no limite G1/S. A gemcitabina é indicada em combinação com a cisplatina no tratamento do câncer de pulmão de células não pequenas avançado localmente e, isoladamente, no tratamento do câncer de pâncreas avançado localmente.

[0314]O metotrexato, ácido N-[4[[(2,4-diamino-6-pteridinil) metil]metilamino]benzoil]-L-glutâmico, encontra-se comercialmente disponível como metotrexato de sódio. O metotrexato apresenta efeitos na fase celular, especificamente na fase S, inibindo a síntese, reparo e/ou replicação do DNA através da inibição da redutase do ácido diidrofólico, o qual é necessário para a síntese de nucleotídeos à base de purina e timidilato. O metotrexato é indicado como agente único ou em combinação com outros agentes quimioterápicos no tratamento do coriocarcinoma, leucemia meníngea, linfoma não Hodgkin e carcinomas de mama, cabeça, pescoço, ovário e bexiga.

Inibidores da topoisomerase I:

[0315]As camptotecinas, incluindo, a camptotecina e derivados de camptotecina estão disponíveis, ou em desenvolvimento, como inibidores da topoisomerase I. Acredita-se que a atividade citotóxica das camptotecinas esteja relacionada com a sua atividade inibidora da topoisomerase I. Exemplos de camptotecinas incluem, mas não estão limitados a, o irinotecano, topotecano e as várias formas ópticas de 7-(4-metilpiperazino-metileno)-10,11-etilenodioxi-20- camptotecina descritas abaixo.

[0316]O irinotecano HCl, (4S)-4,11-dietil-4-hidroxi-9-[(4-piperidinopiperidino) carboniloxi]-1H-pirano [3',4',6,7]indolizino [1,2-b]quinolina-3,14(4H,12H)-diona,encontra-se comercialmente disponível como a solução injetável CAMPTOSAR®. O irinotecano é um derivado da camptotecina que se liga, juntamente com o seu metabólito ativo SN-38, ao complexo topoisomerase I-DNA. Acredita-se que a citotoxicidade ocorre como resultado de rupturas irreparáveis na cadeia dupla causadas pela interação do complexo ternário da topoisomerase I: DNA: irintecano ou SN-38 com as enzimas de replicação. O irinotecano é indicado para o tratamento do câncer metastático do cólon ou do reto.

[0317]O topotecano HCl, monocloridrato de (S)-10-[(dimetilamino) metil]-4- etil-4,9-diidroxi-1H-pirano[3',4',6,7]indolizino [1,2-b]quinolina-3,14-(4H,12H)-diona, encontra-se comercialmente disponível na forma de solução injetável HYCAMTIN®. O topotecano é um derivado da camptotecina que se liga ao complexo de topoisomerase I: DNA e evita a religação das quebras de cadeias simples causadas pela Topoisomerase I em resposta à deformação torsional da molécula de DNA. O topotecano é indicado para o tratamento de segunda linha do carcinoma metastático do câncer de ovário e câncer de células pequenas.

Hormônios e análogos hormonais:

[0318]Hormônios e análogos hormonais são compostos úteis para o tratamento de câncer em que há uma relação entre o(s) hormônio(s) e o crescimento e/ou falta de crescimento do câncer. Exemplos de hormônios e análogos hormonais úteis no tratamento do câncer incluem, mas não estão limitados a, adrenocorticosteroides, como a prednisona e prednisolona, que são úteis no tratamento do linfoma maligno e leucemia aguda em crianças; aminoglutetimida e outros inibidores de aromatase, tais como anastrozol, letrazol, vorazol e exemestano úteis no tratamento de carcinoma adrenocortical e carcinoma de mama dependente de hormônio contendo receptores de estrogênio; progestrinas, tais como acetato de megestrol úteis no tratamento de câncer de mama dependente de hormônio e carcinoma endometrial; estrogênios, estrogênios e antiestrogênios, como fulvestrant, flutamide, nilutamide, bicalutamide, acetato de ciproterona e 5a-redutases, como finasterida e dutasterida, úteis no tratamento do carcinoma prostático e hipertrofia prostática benigna; antiestrogênios, tais como o tamoxifeno, toremifeno, raloxifeno, droloxifeno, iodoxifeno, bem como os moduladores seletivos dos receptores de estrogênio (SERMS), tais como os descritos nas Patentes dos Estados Unidos Nos. 5,681,835, 5,877,219 e 6,207,716, úteis no tratamento do carcinoma de mama dependente de hormônio e outros tipos de câncer suscetíveis; e hormônio liberador de gonadotropina (GnRH) e seus análogos que estimulam a liberação de hormônio leutinizante (LH) e/ou hormônio folículo estimulante (FSH) para o tratamento do carcinoma prostático, por exemplo, agonistas e antagagonistas de LHRH, como o acetato de goserelina e o luprolide.

Inibidores da via de transdução de sinal:

[0319]Os inibidores da via de transdução de sinal são aqueles inibidores, que bloqueiam ou inibem um processo químico que induz uma alteração intracelular. Tal como aqui utilizado, esta alteração é a proliferação ou diferenciação celular. Os inibidores de trandução de sinal úteis na presente invenção incluem os inibidores das tirosina quinase receptoras, tirosina quinases não-receptoras, bloqueadores de domínio SH2/SH3, serina/treonina quinases, fosfordilinositol-3 quinases, sinalização de mioinositol e oncogenes Ras.

[0320]Várias proteínas tirosina quinases catalisam a fosforilação de resíduos de tirosil específicos em várias proteínas envolvidas na regulação do crescimento celular. Tais proteínas tirosina quinases podem ser amplamente classificadas como quinase receptoras ou não-receptoras.

[0321]As tirosina quinase receptoras são proteínas transmembranas com um domínio de ligação ao ligante extracelular, um domínio transmembranar e um domínio tirosina quinase. O receptor tirosina quinase está envolvido na regulação do crescimento celular e geralmente são denominados como receptores do fator de crescimento. Demonstrou-se que a ativação inadequada ou não controlada de muitas dessas quinases, ou seja, a atividade aberrante do receptor quinase do fator de crescimento, por exemplo, por superexpressão ou mutação, resulta no crescimento celular descontrolado. Consequentemente, a atividade aberrante de tais quinases tem sido associada ao crescimento de tecido maligno. Consequentemente, os inibidores dessas quinases poderiam fornecer métodos de tratamento do câncer. Os receptores do factor de crescimento incluem, por exemplo, o receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFr), o receptor do fator de crescimento derivado de plaquetas (PDGFr), erbB2, erbB4, ret, o receptor do fator de crescimento endotelial vascular (VEGFr), a tirosina quinase com domínios de homologia ao fator de crescimento epidérmico semelhante à imunoglobulina (TIE-2), fator de crescimento do receptor de insulina -I (IGFI), fator de estimulação de colônias de macrófagos (CFMS), BTK, ckit, cmet, receptores de fator de crescimento de fibroblastos (FGF), receptores Trk (TrkA, TrkB e TrkC), receptores de ephrin (eph), e o protooncogene RET. Vários inibidores dos receptores de crescimento estão em desenvolvimento e incluem antagonistas de ligantes, anticorpos, inibidores de tirosina quinase e oligonucleotídeos antissenso. Os receptores e agentes do fator de crescimento que inibem a função do receptor do fator de crescimento são descritos, por exemplo, em Kath, John C., Exp. Opin. Ther. Patentes (2000) 10 (6): 803-818; Shawver et al DDT Vol 2, No. 2 de fevereiro de 1997; e Lofts, FJ et al., "Growth factor receptors as targets", New Molecular Targets for Cancer Chemotherapy, ed. Workman, Paul e Kerr, David, CRC press 1994, Londres.

[0322]As tirosina quinases, que não são quinases receptoras do fator de crescimento, são denominadas de tirosina quinase não-receptoras. As tirosina quinase não-receptoras úteis na presente invenção, que são alvos ou potenciais alvos de drogas antineoplásicas, incluem cSrc, Lck, Fyn, Yes, Jak, cAbl, FAK (quinase de adesão focal), tirosina quinase de Brutons e Bcr-Abl. Tais quinases e agentes não- receptoras que inibem a função da tirosina quinase não-receptora estão descritos em Sinh, S. e Corey, SJ, (1999) Journal of Hematotherapy and Stem Cell Research 8 (5): 465-80; e Bolen, JB, Brugge, JS, (1997), Annual review of Immunology. 15: 371-404.

[0323]Os bloqueadores do domínio SH2/SH3 são agentes que interrompem a ligação do domínio SH2 ou SH3 em uma variedade de enzimas ou proteínas adaptadoras, incluindo a subunidade PI3-K p85, quinases da família Src, moléculas adaptadoras (Shc, Crk, Nck, Grb2) e Ras-GAP. Os domínios SH2/SH3 como alvos para drogas antineoplásicas são discutidos em Smithgall, TE (1995), Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 34 (3) 125-32.

[0324]Inibidores das Serina/ Treonina quinases, incluem os bloqueadores da cascata de MAP quinase que incluem bloqueadores de Raf quinases (rafk), Quinase Regulada por sinal Extracelular ou Mitógeno (MEKs) e Quinases Reguladas por sinal Extracelular (ERKs); e bloqueadores dos membros da família da proteína quinase C, incluindo os bloqueadores de PKCs (alfa, beta, gama, epsilon, mu, lambda, iota, zeta). Quinase da família IkB (IKKa, IKKb), quinases da família PKB, membros da família de quinase akt e receptores quinases de TGF beta. Tais serina/ treonina quinases e seus inibidores são descritos em Yamamoto, T., Taya, S., Kaibuchi, K. (1999), Journal of Biochemistry. 126 (5) 799-803; Brodt, P, Samani, A. e Navab, R. (2000), Biochemical Pharmacology, 60. 1101-1107; Massague, J., Weis-Garcia, F. (1996) Cancer Surveys. 27: 41-64; Philip, PA e Harris, AL (1995), Cancer Treatment and Research. 78: 3-27, Lackey, K. et al. Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, (10), 2000, 223-226; Patente US No. 6,268,391; e Martinez-Iacaci, L., et al., Int. J. Cancer (2000), 88 (1), 44-52.

[0325]Os inibidores de membros da família de fosfotidil inositol-3 quinase, incluindo os bloqueadores de PI3-quinase, ATM, DNA-PK e Ku também são úteis na presente invenção. Tais quinases são discutidas em Abraham, RT (1996), Current Opinion in Immunology. 8 (3) 412-8; Canman, CE, Lim, DS (1998), Oncogene 17 (25) 3301-3308; Jackson, SP (1997), International Journal of Biochemistry and Cell Biology. 29 (7): 935-8; e Zhong, H. et al, Cancer Res, (2000) 60 (6), 1541-1545.

[0326]Também são úteis na presente invenção inibidores de sinalização de Myo-inositol, tais como bloqueadores de fosfolipase C e análogos de mio-inositol. Tais inibidores de sinal são descritos em Powis, G. e Kozikowski A., (1994) New Molecular Targets for Cancer Chemotherapy ed., Paul Workman e David Kerr, CRC press 1994, Londres.

[0327]Outro grupo de inibidores da via de transdução de sinal são inibidores do oncogene Ras. Tais inibidores incluem os inibidores das proteases farnesiltransferase, geranil-geranil transferase e CAAX, bem como oligonucleotídeos antissenso, ribozimas e imunoterapia. Tais inibidores demonstraram que bloqueiam a ativação de ras em células contendo ras mutante e tipo selvagem, agindo consequentemente como agentes de antiproliferação. A inibição do oncogene Ras é discutida em Scharovsky, OG, Rozados, VR, Gervasoni, SI Matar, P. (2000), Journal of Biomedical Science. 7 (4) 292-8; Ashby, MN (1998), Current Opinion in Lipidology. 9(2) 99-102; e BioChem. Biophys. Acta, (19899) 1423 (3): 19-30.

[0328]Como mencionado acima, os antagonistas de anticorpos para a ligação do receptor de quinase receptor também podem servir como inibidores de transdução de sinal. Este grupo de inibidores da via de transdução de sinal inclui a utilização de anticorpos humanizados para o domínio de ligação ao ligante extracelular da tirosina quinase receptora. Por exemplo, o anticorpo específico de C225 EGFR Imclone (ver Green, MC et al., Antibody Therapy Monoclonal for Solid Tumors, Cancer Treat. Rev., (2000), 26 (4), 269-286); Herceptin® e anticorpo para erbB2 (vide Tyrosine Kinase Signalling in Breast cancer: erbB Family Receptor Tyrosine Kinases, Breast cancer Res, 2000, 2 (3), 176-183); e o anticorpo específico para 2CB VEGFR2 (vide Brekken, RA et al., Selective Inhibition of VEGFR2 Activity by a monoclonal Anti-VEGF antibody blocks tumor growth in mice, Cancer Res. (2000) 60, 5117-5124).

Agentes antiangiogênicos:

[0329]Os agentes antiangiogênicos, incluindo os inibidores de angiogênese de MEK não-receptora podem ser úteis. Agentes antiangiogênicos, tais como os que inibem os efeitos do fator de crescimento edotelial vascular (por exemplo, o anticorpo anti-fator de crescimento de células endoteliais vascular -bevacizumab [Avastin™] e compostos que funcionam por outros mecanismos (por exemplo, linomida, inibidores da função da integrina αvβ3, endostatina e angiostatina);

Agentes imunoterápicos:

[0330]Os agentes utilizados em regimes imunoterapêuticos também podem ser úteis na combinação com os compostos da Fórmula (I). As abordagens de imunoterapia, incluindo, por exemplo, abordagens ex vivo e in vivo para aumentar a imunogenicidade das células tumorais do paciente, como a transfecção com citocinas, como a interleucina 2, a interleucina 4 ou o fator estimulador das colônias de granulócitos e macrófagos, aborda a diminuição da anergia de células T, abordagens que usam células imunes transfectadas, tais como células dendríticas transfectadas com citocinas, abordagens usando linhagens de células tumorais transfectadas com citocinas e abordagens usando anticorpos anti-idiotípicos

Agentes pró-aptóticos:

[0331]Os agentes utilizados nos regimes pró-apoptóticos (por exemplo, oligonucleotídeos antissenso de bcl-2) também podem ser utilizados na combinação da presente invenção.

Inibidores da sinalização de ciclo celular

[0332]Os inibidores de sinalização do ciclo celular inibem as moléculas envolvidas no controle do ciclo celular. Uma família de proteína quinases chamadas quinases dependentes de ciclina (CDKs) e a sua interação com uma família de proteínas denominadas ciclinas controla a progressão através do ciclo celular eucariótico. A ativação e inativação coordenadas de diferentes complexos de ciclina/ CDK são necessárias para a progressão normal ao longo do ciclo celular. Vários inibidores da sinalização do ciclo celular estão em desenvolvimento. Por exemplo, exemplos de quinases dependentes de ciclina, incluindo CDK2, CDK4 e CDK6 e inibidores para a mesmas, estão descritos, por exemplo, em Rosania et al., Exp. Opin. Ther. Patents (2000) 10 (2): 215-230.

[0333]Em uma forma de realização, a combinação da presente invenção compreende um composto de Fórmula I, ou um sal ou solvato do mesmo, e pelo menos um agente antineoplásico selecionado a partir de agentes antimicrotúbulos, complexos de coordenação de platina, agentes alquilantes, agentes antibióticos, inibidores da topoisomerase II, antimetabólitos, inibidores da topoisomerase I, hormônios e análogos hormonais, inibidores da via de transdução de sinal, inibidores da angiogênese de tirosina não receptora MEK, agentes imunoterápicos, agentes pró- apoptóticos e inibidores de sinalização do ciclo celular.

[0334]Em uma forma de realização, a combinação da presente invenção inclui um composto de Fórmula I, ou um sal ou solvato do mesmo, e pelo menos um agente antineoplásico, que é um agente antimicrotúbulo selecionado a partir de diterpenoides e alcaloides de vinca.

[0335]Em outra forma de realização, pelo menos um agente antineoplásico é um diterpenoide.

[0336]Em outra forma de realização, pelo menos um agente antineoplásico é um alcaloide de vinca.

[0337]Em uma forma de realização, a combinação da presente invenção inclui um composto de Fórmula I, ou um sal ou solvato do mesmo, e pelo menos um agente antineoplásico, que é um complexo de coordenação de platina.

[0338]Em outra forma de realização, pelo menos um agente antineoplásico é paclitaxel, carboplatina ou vinorelbina.

[0339]Em outra forma de realização, pelo menos um agente antineoplásico é a carboplatina.

[0340]Em outra forma de realização, pelo menos um agente antineoplásico é a vinorelbina.

[0341]Em outra forma de realização, pelo menos um agente antineoplásico é paclitaxel.

[0342]Em uma forma de realização, a combinação da presente invenção inclui um composto de Fórmula I, ou sais ou solvatos dos mesmos, e pelo menos um agente antineoplásico, que é um inibidor da via de transdução de sinal.

[0343]Em outra forma de realização, o inibidor da via de transdução de sinal é um inibidor de um receptor quinase do fator de crescimento VEGFR2, TIE 2, PDGFR, BTK, erbB2, EGFr, IGFR-1, TrkA, TrkB, TrkC ou c-fms.

[0344]Em outra forma de realização, o inibidor da via de transdução de sinal é um inibidor de uma serina/ treonina quinase rafk, akt ou PKC-zeta.

[0345]Em outra forma de realização, o inibidor da via de transdução de sinal é um inibidor de uma tirosina quinase não receptora selecionada da família de quinases src.

[0346]Em outra forma de realização, o inibidor da via de transdução de sinal é um inibidor de c-src.

[0347]Em outra forma de realização, o inibidor da via de transdução de sinal é um inibidor do oncogene Ras selecionado a partir de inibidores da farnesil transferase e geranil transferase.

[0348]Em outra forma de realização, o inibidor da via de transdução de sinal é um inibidor de uma serina/ treonina quinase selecionada do grupo constituído pela PI3K.

[0349]Em outra forma de realização, o inibidor da via de transdução de sinal é um inibidor duplo de EGFr/ erbB2, por exemplo, N-{3-cloro-4-[(3- fluorobenzil)oxi]fenil}-6-[5-({[2-(metanossulfonil)etil]amino}metil)-2-furil]-4- quinazolinamina (estrutura abaixo):

[0350]Em uma forma de realização, a combinação da presente invenção inclui um composto de Fórmula I, ou um sal ou solvato do mesmo, e pelo menos um agente antineoplásico, que é um inibidor da sinalização do ciclo celular.

[0351]Em outra forma de realização, o inibidor de sinalização do ciclo celular é um inibidor de CDK2, CDK4 ou CDK6.

Agentes imunoestimuladores:

[0352]Tal como aqui utilizado, "agente imunoestimulante" refere-se a qualquer agente que possa estimular o sistema imune. Tal como aqui utilizado, os agentes imunoestimuladores incluem, mas não estão limitados a, adjuvantes de vacinas, tais como agonistas dos receptores tipo Toll, bloqueadores de checkpoint de células T, tais como mAbs para PD-1 e CTL4, e agonista de checkpoint de células T, tais como mAbs agonistas para OX-40 e ICOS.

[0353]Exemplos adicionais de um outro ingrediente ou ingredientes ativos (agente antineoplásico) para uso em combinação ou coadministrado com o composto de Fórmula (I), inventado e descrito aqui, são os agentes anti-PD-L1.

[0354]Os anticorpos anti-PD-L1 e os métodos para produzir os mesmos são conhecidos no estado da arte.

[0355]Tais anticorpos para PD-L1 podem ser policlonais ou monoclonais e/ou recombinantes e/ou humanizados.

[0356]Exemplos de anticorpos PD-L1 são divulgados em: Patente US No. 8,217,149; 12/633,339; Patente US No. 8 383 796; 13/091,936; Patente US No. 8,552,154; 13/120,406; Publicação de Patente US No. 20110280877; 13/068337; Publicação de Patente US No. 20130309250; 13/892671; WO 2013019906; WO 2013079174; Pedido US No. 13/511,538 (depositado em 7 de agosto de 2012), que é a Fase Nacional nos EUA do Pedido International No. PCT/US10/58007 (depositado em 2010); e Pedido US No. 13/478,511 (depositado em 23 de maio de 2012).

[0357]Exemplos de anticorpos adicionais para PD-L1 (também referidos como CD274 ou B7-H1) e métodos para uso estão descritos na Patente US No. US 7,943,743; US 20130034559, WO 2014055897, Patente US No. 8,168,179; e Patente US No. 7.595.048. Os anticorpos PD-L1 estão em desenvolvimento como agentes imunomoduladores para o tratamento de câncer.

[0358]Em uma forma de realização, o anticorpo para PD-L1 é um anticorpo descrito na Patente US No. 8,217,149. Em outra forma de realização, o anticorpo anti- PD-L1 compreende as CDR de um anticorpo descrito na Patente US No. 8,217,149.

[0359]Em outra forma de realização, o anticorpo para PD-L1 é um anticorpo descrito no Pedido US No. 13/511,538. Em outra forma de realização, o anticorpo anti- PD-L1 compreende as CDR de um anticorpo descrito no Pedido US No. 13/511,538.

[0360]Em outra forma de realização, o anticorpo para PD-L1 é um anticorpo divulgado no Pedido No. 13/478,511. Em outra forma de realização, o anticorpo anti- PD-L1 compreende as CDR de um anticorpo divulgado no pedido de US No. 13/478,511.

[0361]Em uma forma de realização, o anticorpo anti-PD-L1 é BMS-936559 (MDX-1105). Em outra forma de realização, o anticorpo anti-PD-L1 é MPDL3280A (RG7446). Em outra forma de realização, o anticorpo anti-PD-L1 é MEDI4736.

[0362]Exemplos adicionais de outro ingrediente ou ingredientes ativos (agente antagonista antineoplásico) para uso em combinação ou coadministrados com o composto de Fórmula (I), inventado e descrito aqui, são antagonistas de PD-1

[0363]"Antagonista PD-1" significa qualquer composto químico ou molécula biológica que bloqueia a ligação de PD-L1 expresso em uma célula cancerosa ao PD- 1 expresso em uma célula imune (célula T, célula B ou célula NKT) e, de preferência, também bloqueia a ligação de PD-L2 expresso em uma célula cancerosa ao PD-1 expresso na célula imune. Nomes alternativos ou sinônimos para PD-1 e seus ligantes incluem: PDCD1, PD1, CD279 e SLEB2 para PD-1; PDCD1L1, PDL1, B7H1, B7-4, CD274 e B7-H para PD-L1; e PDCD1L2, PDL2, B7-DC, Btdc e CD273 para PD-L2. Em quaisquer formas de realização dos aspectos ou formas de realização da presente invenção em que um indivíduo humano deve ser tratado, o antagonista de PD-1 bloqueia a ligação de PD-L1 humano ao PD-1 humano, e, de preferência, bloqueia a ligação de PD-L1 e PD-L2 humanos ao PD-1 humano. As sequências de aminoácidos de PD-1 humano podem ser encontradas no NCBI Locus No.: NP_005009. As sequências de aminoácidos de PD-L1 e PD-L2 humanos podem ser encontradas no NCBI Locus No.: NP_054862 e NP_079515, respectivamente.

[0364]Os antagonistas de PD-1 úteis em qualquer dos aspectos da presente invenção incluem um anticorpo monoclonal (mAb) ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, o qual se liga especificamente a PD-1 ou PD-L1, e, de preferência, se liga especificamente a PD-1 ou PD-L1 humano. O mAb pode ser um anticorpo humano, um anticorpo humanizado ou um anticorpo quimérico, e pode incluir uma região constante humana. Em algumas formas de realização, a região constante humana é selecionada do grupo constituído pelas regiões constantes IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4, e nas formas de realização preferenciais, a região constante humana é uma região constante de IgG1 ou IgG4. Em algumas formas de realização, o fragmento de ligação ao antígeno é selecionado do grupo constituído pelos fragmentos Fab, Fab'-SH, F(ab')2, scFv e Fv.

[0365]Exemplos de mAbs que se ligam ao PD-1 humano e são úteis no varios aspectos e formas de realização da presente invenção, estão descritos nos documentos US 7488802, US 7521051, US 8008449, US 8354509, US 8168757, WO 2004/004771, WO 2004/072286, WO 2004/056875 e US 2011/0271358.

[0366]Os MAbs PD-1 anti-humano específicos úteis como antagonistas de PD-1 em qualquer um dos aspectos e formas de realização da presente invenção incluem: MK-3475, um MAb IgG4 humanizado com a estrutura descrita em WHO Drug Information, vol. 27, No. 2, páginas 161-162 (2013) e que compreende as sequências de aminoácidos da cadeia pesada e leve mostradas na Figura 6; nivolumab, um mAb IgG4 humano com a estrutura descrito em WHO Drug Information, Vol. 27, No. 1, páginas 68-69 (2013) e que compreende as sequências de aminoácidos da cadeia pesada e leve mostradas na Figura 7; os anticorpos humanizados h409A11, h409A16 e h409A17, descritos nos documentos WO 2008/156712 e AMP-514, estão sendo desenvolvidos pela Medimmune.

[0367]Outros antagonistas de PD-1, que são úteis em qualquer dos aspectos e formas de realização da presente invenção, incluem uma imunoadesina que se liga especificamente a PD-1, e, de preferência, se liga especificamente a PD-1 humano, por exemplo, uma proteína de fusão que contém a porção de ligação a PD-1 ou extracelular de PD-L1 ou PD-L2 fundida a uma região constante, tal como uma região Fc de uma molécula de imunoglobulina. Exemplos de moléculas de imunoadesão que se ligam especificamente a PD-1 estão descritas em WO 2010/027827 e WO 2011/066342. Proteínas de fusão específicas úteis como antagonista de PD-1 no método de tratamento, os medicamentos e os usos da presente invenção incluem AMP-224 (também conhecido como B7-DCIg), que é uma proteína de fusão PD-L2- FC e se liga a PD-1 humano.

[0368]Outros exemplos de mAbs que se ligam ao PD-L1 humano e úteis no método de tratamento, medicamentos e utilizações da presente invenção, são descritos nos documentos WO 2013/019906, W02010/077634 A1 e US 8383796. Os mAbs PD-L1 anti-humano específico úteis como antagonista de PD-1 no método de tratamento, medicamentos e usos da presente invenção incluem MPDL3280A, BMS- 936559, MEDI4736, MSB0010718C.

[0369]KEYTRUDA/pembrolizumab é um anticorpo anti-PD-1 comercializado pela Merck para o tratamento de câncer de pulmão. A sequência de aminoácidos de pembrolizumab e os métodos de uso estão descritos na Patente US No. 8,168,757.

[0370]Opdivo/nivolumab é um anticorpo monoclonal totalmente humano comercializado pela Bristol Myers Squibb dirigido contra a receptor PD-1 de superfície de células imunoreguladoras negativas humanas (programmed death-1 ou programmed cell death-1/PCD-1) com atividade de imunopotencializadora. Nivolumab se liga e bloqueia a ativação de PD-1, uma proteína transmembrana da superfamília das Ig, pelos seus ligantes PD-L1 e PD-L2, resultando na ativação de células T e das respostas imunes mediadas por células contra células tumorais ou patógenos. O PD- 1 ativado regula negativamente a ativação das células T e a função efetora através da supressão da ativação da via P13k/Akt. Outros nomes para nivolumab incluem: BMS- 936558, MDX-1106 e ONO-4538. A sequência de aminoácidos para nivolumab e métodos de utilização e fabricação são divulgados na Patente US No. US 8,008,449.

[0371]Exemplos adicionais de um outro ingrediente ou ingredientes ativos (agente antineoplásico) para uso em combinação ou coadministrados com o composto de Fórmula (I), inventado e descrito aqui, são imunomoduladores.

[0372]Tal como aqui utilizado, "imunomoduladores" se referem a qualquer substância que inclua anticorpos monoclonais que afetam o sistema imunológico. As proteínas de ligação ICOS da presente invenção podem ser consideradas imunomoduladores. Os imunomoduladores podem ser usados como agentes antineoplásicos para o tratamento do câncer. Por exemplo, os moduladores incluem, mas não estão limitados a, os anticorpos anti-CTLA-4, tais como ipilimumab (YERVOY) e anticorpos anti-PD-1 (Opdivo/nivolumab e Keytruda/pembrolizumab). Outros imunomoduladores incluem, mas não estão limitados a, aos anticorpos contra OX-40, anticorpos contra PD-L1, anticorpos contra LAG3, anticorpos contra TIM-3, anticorpos contra 41BB e anticorpos contra GITR.

[0373]Yervoy (ipilimumab) é um anticorpo contra CTLA-4 totalmente humano comercializado pela Bristol Myers Squibb. A estrutura proteica do ipilimumab e os métodos de uso estão descritos nas Patentes US Nos. 6,984,720 e 7,605,238.

[0374]CD134, também conhecido como OX40, é um membro da superfamília de receptores TNFRque não são expressos constitutivamente em células T virgens em repouso, ao contrário do CD28. OX40 é uma molécula coestimuladora secundária, expressa 24 a 72 horas depois da ativação; seu ligante, OX40L, também não é expresso em células apresentadoras de antígeno em repouso, mas é expresso após a ativação das mesmas. A expressão do OX40 depende da ativação completa da célula T; sem CD28, a expressão de OX40 é retardada e quatro vezes mais baixa. Os anticorpos contra OX-40, as proteínas de fusão a OX-40 e os métodos de uso dos mesmos são divulgados nas Patentes dos Estados Unidos Nos.: US 7,504,101; US 7,758,852; US 7,858,765; US 7,550,140; US 7,960,515; WO 2012027328; WO 2013028231.

[0375]O termo "receptor tipo Toll" (ou "TLR"), tal como aqui utilizado, refere- se a um membro da família de receptores tipo Toll de proteínas, ou um fragmento do mesmo, que detecta um produto microbiano e/ou inicia uma resposta imune adaptativa. Em uma forma de realização, um TLR ativa uma célula dendrítica (DC). Os receptores tipo Toll (TLRs) são uma família de receptores de reconhecimento de padrões que foram inicialmente identificados como sensores do sistema imune inato que reconhecem patógenos microbianos. Os TLRs reconhecem estruturas distintas nos micróbios, muitas vezes referidos como "PAMPs" (padrões moleculares associados aos patógenos). A ligação do ligante aos TLRs desencadeia uma cascata de vias de sinalização intracelular que induzem a produção dos fatores envolvidos na inflamação e na imunidade. Nos humanos, dez TLRs foram identificados. Os TLRs que são expressos na superfície das células incluem TLR-1, -2, -4, -5 e -6, enquanto TLR-3, -7/8 e-9 são expressos com o compartimento do RE. Os subconjuntos de CDs humanos podem ser identificados com base nos padrões de expressão distintos de TLR. A título de exemplo, o subconjunto mieloide ou "convencional" de DC (mDC) expressa TLRs 1-8 quando estimulado e uma cascata de marcadores de ativação (por exemplo, CD80, CD86, MHC classe I e II, CCR7), citocinas pró-inflamatórias e quimiocinas são produzidas. Um resultado desta estimulação e da expressão resultante é o priming/ativação primária das células T CD4+ e CD8+ antígeno específicas. Essas DCs adquirem uma capacidade aprimorada para absorver/captar antígenos e apresentá-los de forma apropriada às células T. Em contrapartida, o subconjunto plasmocitoide das DCs (pDC) expressa apenas TLR7 e TLR9 após a ativação, com uma ativação resultante de células NK bem como de células T. Como as células tumorais em processo de morte podem afetar adversamente a função da DC, sugeriu-se que a ativação de DC com agonistas de TLRpode ser benéfica para a ativação primária da imunidade antitumoral em uma abordagem de imunoterapia para o tratamento do câncer. Sugeriu-se também que o tratamento bem-sucedido do câncer de mama usando radiação e quimioterapia requer a ativação do TLR4.

[0376]Os agonistas de TLR conhecidos no estado da arte e que tem utilidade na presente invenção incluem, mas são não limitado a, os seguintes: Pam3Cys, um agonista de TLR1/2; CFA, um agonista de TLR2; MALP2, um agonista de TLR2; Pam2Cys, um agonista de TLR2; FSL-1, um agonista de TLR-2; Hib-OMPC, um agonista de TLR-2; ácido poliribosínico: poliribocídicico (Poli I:C), um agonista de TLR3; ácido poliadenosina-poliureídico (poli AU), um agonista de TLR3; ácido poli- inosínico-policitidílico estabilizado com poli-L-lisina e carboximetilcelulose (Hiltonol), um agonista de TLR3; flagelina bacteriana, um agonista de TLR5; imiquimod, um agonista de TLR7; resiquimod, um agonista de TLR7/8; ioxoribina, um agonista de TLR7 / 8; e dinucleotídeo CpG não metilado (CpG-ODN), um agonista de TLR9.

[0377]Agonistas de TLR adicionais conhecidos no estado da arte e que tem utilidade na presente invenção incluem ainda, mas não estão limitados a, os fosfatos de aminoalquil glucosaminida (AGPs) que se ligam ao receptor TLR4 são conhecidos por serem úteis como adjuvantes de vacina e agentes imunoestimuladores para estimular a produção de citocinas, ativando os macrófagos, promovendo a resposta imune inata e aumentando a produção de anticorpos em animais imunizados. Um exemplo de um agonista de TLR4 de ocorrência natural é o LPS bacteriano. Um exemplo de um agonista de TLR4 semissintético é o monofosforil lipídeo A (MPL). AGPs e os seus efeitos imunomoduladores através de TLR4 são divulgados nas Publicações de Patente, tais como os documentos WO 2006/016997, WO 2001/090129, e/ou Patente US No. 6,113,918 e foram relatados na literatura. Derivados de AGP adicionais são divulgados na Patente US No. 7,129,219, Patente US No. 6,525,028 e Patente US No. 6,911,434. Alguns AGPs agem como agonistas de TLR4, enquanto outros são reconhecidos como antagonistas de TLR4.

[0378]Além dos agentes imunoestimuladores descritos acima, as composições da presente invenção podem compreender ainda uma ou mais substâncias adicionais que, devido à sua natureza adjuvante, podem estimular o sistema imune a responder aos antígenos cancerígenos presentes nas células tumorais inativadas. Tais adjuvantes incluem, mas não estão limitados a, lipídeos, lipossomas, bactérias inativadas que induzem a imunidade inata (por exemplo, Listeria monocytogenes inativada ou atenuada), composições que medeiam a ativação imune inata através dos receptores tipo (NOD)(NLRs), receptores semelhantes a genes induzidos pelo ácido retinoico I (RIG-I)(RLRs) e / ou receptores de lectina tipo C (CLRs). Exemplos de PAMPs incluem lipoproteínas, lipopolipeptídeos, peptidoglicanos, zimosan, lipopolissacarídeos, porinas de Neisseria, flagelina, profilina, galactoceramida, muramil dipeptídeo. Peptídeoglicanas, lipoproteínas e ácido lipoteicoico são componentes de parede celular de bactérias gram-positivas. Os lipopolissacarídeos são expressos pela maioria das bactérias, sendo o MPL um exemplo. A flagelina refere-se ao componente estrutural dos flagelos bacterianos que é secretado por bactérias patogênicas e comensais. A rt-galactosilceramida (rt- GalCer) é um ativador de células T natural killers (NKT). O muramil dipeptídeo é um motivo de peptídeoglicano bioativo comum a todas as bactérias.

[0379]Devido às suas qualidades de adjuvante, os agonistas de TLRsão preferencialmente usados em combinação com outras vacinas, adjuvantes e/ou imunomoduladores, e podem ser combinados em várias combinações. Assim, em certas formas de realização, os compostos de Fórmula (I) aqui descritos que se ligam a STING e induzem a ativação de TBKI dependente de STING e uma célula tumoral inativada que expressa e secreta uma ou mais citocinas que estimulam a indução, recrutamento e/ou maturação das DCs, conforme descrito aqui, podem ser administrados em conjunto com um ou mais agonistas de TLRpara fins terapêuticos.

[0380]Exemplos adicionais de um outro ingrediente ou ingredientes ativos (agente antineoplásico) para uso em combinação ou coadministrados com o composto de Fórmula (I), inventados e descritos aqui, são anticorpos contra ICOS.

[0381]As CDRs para anticorpos murinos contra ICOS humano com atividade agonista são mostradas no documento PCT/EP2012/055735 (WO 2012/131004). Anticorpos para ICOS também são divulgados nos documentos WO 2008/137915, WO 2010/056804, EP 1374902, EP 1374901 e EP 1125585.

[0382]A indoleamina 2,3-dioxigenase 1 (IDO1) é uma enzima chave imunossupressora que modula a resposta imune antitumoral ao promover a geração de células T regulatórias e o bloqueio da ativação de células T efetoras, facilitando, desta forma, o crescimento tumoral ao permitir que as células cancerosas escapem do controle do sistema imune. (Lemos H, et al., Cancer Res. 2016 15 de abril; 76 (8): 2076-81), (Munn DH, et at., Trends Immunol. 2016 Mar; 37 (3): 193-207). Outros ingredientes ativos (agentes antineoplásicos) para uso em combinação ou coadministrados com os compostos de Fórmula (I), inventados e descritos aqui, são os inibidores de IDO. Epacadostato, ((Z)-N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N'-hidroxi-4-[2- (sulfamoilamino)etilamino]-1,2,5-oxadiazol-3-carboxamidina), é um inibidor oral seletivo e altamente potente da enzima IDO1 que reverte a supressão imune associada ao tumor e restaura a resposta imune antitumoral eficaz. O epacadostat é divulgado na Patente US No. 8,034,953.

[0383]Exemplos adicionais de um outro ingrediente ou ingredientes ativos (agente antineoplásico) para uso em combinação ou coadministrado com o composto de Fórmula (I), inventado e descrito aqui, são os inibidores de CD73 e antagonistas da adenosina A2a e A2b.

[0384]Em um aspecto, a doença a ser tratada é uma doença infecciosa causada, por exemplo, por bactérias ou vírus.

[0385]Em outro aspecto da invenção, é proporcionado um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso no tratamento de doenças infecciosas.

[0386]Em outro aspecto, é proporcionado um método de tratamento de doenças infecciosas que compreende administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, a um humano que precise do mesmo.

[0387]Em outro aspecto, é proporcionada o uso de um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na fabricação de um medicamento para o tratamento de doenças infecciosas.

[0388]Em uma forma de realização, o composto da invenção pode ser utilizado com outros métodos terapêuticos de tratamento de doenças infecciosas. Em particular, agentes antivirais e antibacterianos estão previstos.

[0389]Os compostos de Fórmula (I) e os seus sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos podem ser usados em combinação com um ou mais agentes úteis na prevenção ou tratamento de infecções bacterianas e virais. Exemplos de tais agentes incluem, sem limitação; os inibidores de polimerase, tais como os descritos no documento WO 2004/037818-A1, bem como aqueles descritos nos documentos WO 2004/037818 e WO 2006/045613; JTK-003, JTK-019, NM-283, HCV-796, R-803, R1728, R1626, bem como os descritos nos documentos WO 2006/018725, WO 2004/074270, WO 2003/095441, US 2005/0176701, WO 2006/020082, WO 2005/080388, WO 2004/064925, WO 2004/065367, WO 2003/007945, WO 02/04425, WO 2005/014543, WO 2003/000254, EP 1065213, WO 01/47883, WO 2002/057287, WO 2002/057245 e agentes semelhantes; inibidores de replicação, tais como aciclovir, famciclovir, ganciclovir, cidofovir, lamivudina e agentes semelhantes; inibidores de protease, tais como os inibidores de protease do HIV, saquinavir, ritonavir, indinavir, nelfinavir, amprenavir, fosamprenavir, brecanavir, atazanavir, tipranavir, palinavir, lasinavir e os inibidores de protease do HCV, BILN2061, VX-950, SCH503034; e agentes semelhantes; inibidores nucleosídeos e nucleotídeos da transcriptase reversa, tais como zidovudina, didanosina, lamivudina, zalcitabina, abacavir, estavidina, adefovir, adefovir dipivoxil, fozivudina, todoxil, emtricitabina, alovudina, amdoxovir, elvucitabina e agentes semelhantes; inibidores não-nucleosídeos da transcriptase reversa (incluindo um agente com atividade antioxidante, como imunocal, oltipraz etc.), tais como nevirapina, delavirdina, efavirenz, loviride, imunocal, oltipraz, capravirina, TMC-278, TMC-125, etravirina e agentes semelhantes; inibidores de entrada, tais como enfuvirtida (T-20), T-1249, PRO-542, PRO-140, TNX-355, BMS-806, 5-Helix e agentes semelhantes; inibidores de integrasse, tais como L-870,180 e agentes semelhantes; inibidores de brotamento, tais como PA-344 e PA-457, e agentes semelhantes; inibidores do receptor de quimiocinas, tais como vicriviroc (Sch-C), Sch- D, TAK779, maraviroc (UK-427.857), TAK449, bem como como os descritos nos documentos WO 02/74769, WO 2004/054974, WO 2004/055012, WO 2004/055010, WO 2004/055016, WO 2004/055011 e WO 2004/054581, e agentes semelhantes; inibidores de neuraminidase, tais como CS-8958, zanamivir, oseltamivir, peramivir e agentes semelhantes; bloqueadores dos canais iônicos, tais como amantadina ou rimantadina e agentes semelhantes; e RNA de interferência e oligonucleotídeos antissenso, tais como ISIS-14803 e agentes semelhantes; agentes antivirais com mecanismo de ação indeterminado, por exemplo aqueles descritos nos documentos WO 2005/105761, WO 2003/085375, WO 2006/122011, ribavirina e agentes semelhantes. Os compostos de Fórmula (I) e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos podem ser utilizados também em combinação com um ou mais outros agentes que podem ser úteis na prevenção ou tratamento de infecções virais, por exemplo, nas terapias imunológicas (por exemplo, interferon ou outras citocinas/ quimiocinas, moduladores dos receptores de citocinas/ quimiocinas, agonistas ou antagonistas de citocinas e agentes semelhantes); e vacinas terapêuticas, agentes antifibróticos, agentes anti-inflamatórios, como corticosteroides ou AINEs (agentes anti-inflamatórios não-esteroides) e agentes semelhantes.

[0390]Em outro aspecto, é proporcionada uma combinação compreendendo um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos um outro agente terapêutico útil no tratamento de doenças infecciosas.

[0391]Em outro aspecto, é proporcionada uma combinação compreendendo um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos um outro agente terapêutico útil no tratamento de doenças infecciosas para uso em terapia.

[0392]Em outro aspecto, é proporcionada uma combinação compreendendo um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos um outro agente terapêutico útil no tratamento de doenças infecciosas, para uso no tratamento de doenças infecciosas.

[0393]Em outro aspecto, é proporcionado o uso de uma combinação compreendendo um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos um agente terapêutico adicional útil no tratamento de doenças infecciosas na fabricação de um medicamento para o tratamento de doenças infecciosas.

[0394]Em outro aspecto, é proporcionado um método de tratamento de doença infecciosa que compreende administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma combinação contendo um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos um outro agente terapêutico útil no tratamento de doenças infecciosas, a um humano que precise do mesmo.

[0395]Em outro aspecto, é proporcionada uma composição farmacêutica compreendendo uma combinação contendo um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos um outro agente terapêutico útil no tratamento de doenças infecciosas, e um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

[0396]Em outro aspecto, é proporcionada uma composição compreendendo um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um ou mais agentes imunoestimuladores.

[0397]Além disso, é proporcionada uma composição imunogênica ou adjuvante de vacina compreendendo um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0398]Além disso, é proporcionada uma composição imunogênica compreendendo um antígeno ou composição antigênica e um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0399]Além disso, é proporcionada uma composição vacinal compreendendo um antígeno ou composição antigênica e um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0400]Além disso, é proporcionado um método de tratamento ou prevenção de doenças que compreende administrar uma composição imunogênica contendo um antígeno ou composição antigênica e um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, a um indivíduo humano que sofre ou é suscetível à doença.

[0401] Além disso, é proporcionado um método de tratamento ou prevenção de doenças que compreende administrar uma composição vacinal contendo um antígeno ou composição antigênica e um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, a um indivíduo humano que sofre ou é suscetível à doença.

[0402]Além disso, é proporcionado o uso de um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para a fabricação de uma composição imunogênica contendo um antígeno ou composição antigênica, para o tratamento ou prevenção de doenças.

[0403]Além disso, é proporcionado o uso de um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para a fabricação de uma composição vacinal contendo um antígeno ou composição antigênica, para o tratamento ou prevenção de doenças.

[0404]Considera-se que os compostos representados no pedido podem ser desenhados usando diferentes convenções. Por exemplo, os dois compostos a seguir são considerados equivalentes quanto à estrutura química e estereoquímica.Preparação e exemplos de compostos

[0405]Os compostos de Fórmula (I), em que Y1, Y2, X1, X2, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R8 e R9 são tal como definidos acima, podem ser preparados por métodos conhecidos na técnica de síntese orgânica, conforme estabelecido nos esquemas e exemplos abaixo. Em todos os métodos, compreende-se bem que os grupos de proteção para os grupos sensíveis ou reativos podem ser empregados quando necessário de acordo com os princípios gerais da química. Os grupos de proteção são manipulados de acordo com os métodos padrão de síntese orgânica (PGM Wuts e TW Green (2007) Greene's Protetive Groups in Organic Synthesis, 4a edição, John Wiley & Sons). Estes grupos são removidos em uma fase de síntese adequada do composto utilizando-se métodos que são facilmente evidentes para os técnicos no assunto. A seleção de processos, bem como as condições reacionais e a ordem de sua execução, devem ser consistentes com a preparação dos compostos de Fórmula (I).

[0406]Os compostos de Fórmula (I) e seus sais podem ser preparados pela metodologia descrita a seguir, constituindo outros aspectos desta invenção.

[0407]Por conseguinte, é proporcionado um processo para a preparação de um composto de Fórmula (I), em que R5 é OC(O)R7 e R6 é F, e ambos Y1 e Y2 são O, ambos X1 e X 2 são S-, tal como ilustrado na fórmula (IIa), em que R1, R2, R3 e R4 são tal como definidos acima para um composto de Fórmula (I). O processo compreende a acilação de um composto de Fórmula (IIIa):em que R1, R2, R3, R4 e R7 são tal como definidos acima para um composto da fórmula (IIa) e depois disso, se necessário, a preparação de um sal do composto então formado.

[0408]Exemplo 1: Um composto de fórmula (IIIa) e qualquer anidrido mirístico em um solvente adequado, por exemplo, dimetilformamida (DMF), na presença de uma base tal como a piridina, é agitado à temperatura ambiente ou aquecido a uma temperatura adequada, por exemplo, a 60 °C, durante um período de tempo adequado, por exemplo, de 2 a 48 horas. O produto, de fórmula (IIa), é isolado pela remoção dos compostos voláteis e purificação, se necessário.

[0409]Além disso, é proporcionado um processo para a preparação de um composto de Fórmula (I), em que R5 é OH e R6 é F, e ambos Y1 e Y2 são O, ambos X1 e X2 são S, e ambos R8 e R9 são CH2OC(O)tBu, ilustrado como fórmula (IVa), em que R1, R2, R3 e R4 são tal como definidos acima para um composto de Fórmula (I). O processo compreende a adição de um grupo carboniloximetila a um composto de fórmula (IIIa):

[0410]Exemplo 2: Um composto de fórmula (IIIa) e pivalato de clorometila (POM-Cl) em um solvente adequado, por exemplo, dimetilformamida (DMF), na presença de uma base, tal como Et3N, é agitado à temperatura ambiente por um período de tempo adequado, por exemplo, 48 horas. O produto, de fórmula (IVa), é isolado pela remoção dos voláteis e purificação, se necessário.

[0411]Um composto da fórmula (IIIa) pode ser preparado pela desproteção de um composto da fórmula (Va):em que, R1, R2, R3 e R4 são tal como definidos acima para um composto da fórmula (IIIa) e P1 é um grupo protetor adequado, tal como terc-butildimetilsililoxi (TBDMS) e, em seguida, se necessário, pela preparação de um sal do composto então formado.

[0412]Exemplo 3: Um composto de fórmula (Va), em um solvente adequado, por exemplo, piridina, é aquecido a uma temperatura adequada, por exemplo, a 50 °C, depois tratada com uma mistura de trihidrofluoreto de trietilamina e trietilamina durante um período de tempo adequado, por exemplo, de 2 a 3 horas. O produto, de fórmula (IIIa), é isolado por precipitação pela adição de um solvente, por exemplo, acetona, ou por remoção dos voláteis e purificação, se necessário.

[0413]Um composto da fórmula (Va) pode ser preparado pela desproteção de um composto da fórmula (VIa):em que P1 é um grupo protetor, tal como definido para o composto da fórmula (Va) e R12, R13, R14 e R15 são definidos como R12 é OH e R13 é NHCOiPr, ou R12 é NHBz e R13 é H; R14 é OH e R15 é NHCOiPr ou R14 é NHBz e R15 é H;

[0414]Exemplo 4: Um composto da fórmula (VIa) é dissolvido em uma mistura adequada, por exemplo, metilamina em metanol ou amônia aquosa em metanol, e aquecido a uma temperatura adequada, por exemplo, de 50 a 55 °C, por um período adequado de tempo, por exemplo, de 2 a 72 horas. O produto, de fórmula (Va), é isolado pela remoção do solvente e purificação, se necessário.

[0415]Um composto de fórmula (VIa) pode ser preparado pela reação de um composto de fórmula (VIla):em que P1, R12, R13, R14 e R15 são tal como definidos acima para um composto da fórmula (VIa).

[0416]Exemplo 5: Um composto da fórmula (VIIa) é dissolvido em um solvente adequado, por exemplo, piridina, tratado com um reagente de acoplamento adequado, por exemplo, 2-cloro-5,5-dimetil-1,3,2-dioxafosforinano 2-óxido e agitado a uma temperatura adequada, por exemplo, a 20°C, durante um período de tempo adequado, por exemplo, 0,5 a 2 horas. A reação foi inibida pela adição de um solvente adequado, por exemplo, água, depois adicionou-se um agente sulfatante, por exemplo, 3H- benzo[c][1,2]ditiol-3-ona, e agitada a uma temperatura adequada, por exemplo, a 20 °C, por um período de tempo adequado, por exemplo, de 5 a 10 minutos. A reação foi inibida pela adição de um solvente adequado, por exemplo, solução aquosa de NaHCO3. O produto, de fórmula (VIa), foi extraído com um solvente orgânico adequado, tal como EtOAc. O produto, de fórmula (VIa), é isolado por remoção do solvente e purificação, se necessário.

[0417]Um composto de fórmula (VIIa) pode ser preparado pela reação de um composto de fórmula (VIIIa) com um composto de fórmula (IXa):em que, P1, R12, R13, R14 e R15 são tal como definidos acima para um composto de fórmula (VIIa) e DMTr é um grupo protetor de 4,4-dimetoxitritil.

[0418]Exemplo 6: Um composto de fórmula (IXa), em um solvente adequado, por exemplo, acetonitrila na presença de peneiras moleculares, é tratado com uma solução de um composto de fórmula (VIIIa) dissolvido em um solvente adequado, por exemplo, acetonitrila, e agitado a uma temperatura adequada, por exemplo, a 20 °C, durante um período de tempo adequado, por exemplo, de 0,5 a 2 horas. É adicionada uma solução de um agente sulfatante adequado, por exemplo, N,N-dimetil-N'-(3-tioxo- 3H-1,2,4-ditiazol-5-il) formimidamida (DDTT) e a mistura é agitada a uma temperatura adequada, por exemplo, a 20 °C, durante um período de tempo adequado, por exemplo, de 0,5 a 1 hora. Após a evaporação do solvente, o resíduo é dissolvido em um solvente adequado, por exemplo, uma mistura de diclorometano e água, e tratado com um reagente adequado, por exemplo, ácido dicloroacético, e agitado a uma temperatura adequada, por exemplo, a 20 °C, por um período de tempo adequado, por exemplo, de 15 minutos. Uma solução contendo o produto, de fórmula (VIIa), é obtida pela adição de um solvente adequado, por exemplo, piridina, e pela concentração por evaporação.

[0419]Um composto da fórmula (VIIIa) pode ser preparado pela reação de um composto da fórmula (Xa).em que, R12 e R13 são tal como definidos acima para um composto de fórmula (VIIIa) e DMTr é um grupo protetor de 4,4-dimetoxitritil.

[0420]Exemplo 7: Um composto da fórmula (Xa) é dissolvido em uma mistura adequada, por exemplo, acetonitrila contendo água, é tratado com trifluoroacetato de piridínio e agitado a uma temperatura adequada, por exemplo, a 20 °C, por um período de tempo adequado, por exemplo, de 1 a 5 minutos. Em seguida, adiciona-se terc- butilamina e agita-se a mistura a uma temperatura adequada, por exemplo, a 20 °C, por um período de tempo adequado, por exemplo, de 10 minutos. O produto é isolado por evaporação do solvente e depois dissolvido em um solvente adequado, por exemplo, diclorometano contendo água, e tratado com ácido dicloroacético e agitado a uma temperatura adequada, por exemplo, a 20 °C, durante um período de tempo adequado, por exemplo, de 15 minutos. Uma solução concentrada do produto, de fórmula (VIIIa), em acetonitrila é obtida pela adição de piridina seguida pela quebra azeotrópica da mistura com acetonitrila anidra.

[0421]Os fosforamidites da fórmula (IXa) e (Xa) são conhecidos na literatura ou encontram-se comercialmente disponíveis pelos fornecedores, tais como Sigma, Chemgenes e CarboSynth ou podem ser preparados por métodos conhecidos.

[0422]Exemplo 8 -Composto 1b (1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-8,17-bis(6-amino-9H-purin-9-il)-9- fluoro-18-hidroxi-3,12-dissulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3X5,12X5-difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona, sal de bisamônio

[0423]Intermediário 1: hidrogenofosfonato de (2R, 3R, 4R, 5R)-5-(6- benzamido-9H-purin-9-il)-2-((bis(4-metoxifenil)(fenil) metoxi) metil)-4-fluorotetrahidrofuran-3-ila

[0424]A uma solução de (2R, 3R, 4R, 5R)-5-(6-benzamido-9H-purin-9-il)-2- ((bis(4-metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-4-fluorotetrahidrofuran-3-il (2-cianoetil) diisopropilfosforamidita (2190 mg, 2,5 mmol) em acetonitrila (15 mL) e água (0,090 mL, 5,00 mmol) à temperatura ambiente, adicionou-se 2,2,2-trifluoroacetato de piridina (579 mg, 3,00 mmol). A mistura foi agitada durante 1 minuto, após o qual a LCMS indicou a conversão completa para o primeiro intermediário, m/z (M+H) = 793,3. Em seguida, adicionou-se 2-metilpropan-2-amina (13,14 mL, 125 mmol) e agitou-se a mistura durante 10 minutos, após o qual a LCMS indicou o consumo do primeiro intermediário formado.

[0425]A mistura foi concentrada a vácuo para gerar uma espuma branca. A espuma foi então dissolvida em acetonitrila (20 mL) e concentrada. Esse processo foi repetido mais uma vez. O material bruto foi dissolvido em diclorometano (10 mL) e purificado por cromatografia em duas bateladas (gel de sílica, eluição por gradiente de 0-30% de metanol em diclorometano). As frações desejadas foram combinadas e evaporadas para proporcionar dois sólidos brancos separados que foram então dissolvidos em diclorometano, combinados e evaporados para se obter o composto do título (780 mg, 1,055 mmol, 42,2% de rendimento) como um sólido branco. LCMS m/z 740.4 (M+H).

[0426]Intermediário 2: hidrogenofosfonato de (2R, 3R, 4R, 5R)-5-(6-benzamido-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2-(hidroximetil)tetrahidrofuran-3-ila

[0427]O intermediário 2 foi produzido, em geral, de acordo com o procedimento abaixo. Pequenas modificações podem ser utilizadas, como, por exemplo, aquelas descritas para o Intermediário 2 em outros Exemplos.

[0428]A uma solução de hidrogenofosfonato de (2R, 3R, 4R, 5R)-5-(6- benzamido-9H-purin-9-il)-2-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-4- fluorotetrahidrofuran-3-ila (775 mg, 1,048 mmol) em diclorometano (20 mL) e água (0,188 mL, 10,48 mmol) à temperatura ambiente adicionou-se ácido 2,2-dicloroacético (0,655 mL, 8,38 mmol). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos.

[0429]A reação foi então inibida pela adição de piridina (1,356 mL, 16,76 mmol) e concentrada a vácuo para se obter um óleo incolor. O material foi armazenado sob nitrogênio a 4 °C. Depois de armazenar a 4 °C, o material solidificado para gerar o composto do título impuro como um sólido branco ceroso, que foi utilizado sem purificação adicional. LCMS m/z 438,3 (M+H).

[0430]Intermediário 3: hidrogenofosfonato de (2R, 3R, 4R, 5R)-5-(6- benzamido-9H-purin-9-il)-2-((((2R, 3R, 4R, 5R)-2-(6-benzamido-9H-purin-9-il)-4- ((terc-butildimetilsilil)oxi)-5-(hidroximetil)tetrahidrofuran-3-il)oxi)(2-cianoetoxi) fosforotioil)oxi)metil)-4-fluorotetrahidrofuran-3-ila

[0431]O intermediário 3 foi produzido, em geral, de acordo com o procedimento abaixo. Pequenas modificações podem ser utilizadas, como, por exemplo, aquelas descritas para o Intermediário 3 em outros Exemplos.

[0432]O hidrogenofosfonato de (2R, 3R, 4R, 5R)-5-(6-benzamido-9H-purin-9- il)-4-fluoro-2-(hidroximetil)tetrahidrofuran-3-ila (458 mg, 1,047 mmol) sólido e impuro obtido acima foi submetido à quebra azeotrópica com acetonitrila anidra (3 x 20 mL). Após a última concentração, 10 mL de acetonitrila foram mantidos no balão. À temperatura ambiente, adicionou-se (2R, 3R, 4R, 5R)-2-(6-benzamido-9H-purin-9-il)- 5-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)tetrahidrofuran-3-il (2-cianoetil) diisopropilfosforamidita (1345 mg, 1,361 mmol) foi submetido à secagem azeotrópica com acetonitrila anidra (3 x 20 mL). Após a última concentração, 5 mL de acetonitrila foram mantidos no balão e foram adicionadas peneiras moleculares de 3Â (~ 40 esferas). A solução foi deixada em pé sobre as peneiras moleculares à temperatura ambiente durante 1 hora.

[0433]À suspensão seca de hidrogenofosfonato de (2R, 3R, 4R, 5R)-5-(6- benzamido-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2-(hidroximetil)tetrahidrofuran-3-ila (458 mg, 1,047 mmol) em acetonitrila (10 mL) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de nitrogênio, adicionou-se a solução pré-seca de (2R, 3R, 4R, 5R)-2-(6-benzamido-9H- purin-9-il)-5-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-4-((terc- butildimetilsilil)oxi)tetrahidrofuran-3-il (2-cianoetil) diisopropilfosforamidita (1345 mg, 1,361 mmol) em acetonitrila (5 mL) por seringa. A coloração da solução passou de laranja a amarelo claro. A mistura foi agitada sob uma atmosfera de nitrogênio à temperatura ambiente durante 1 hora, após o qual a LCMS indicou o material de partida mínimo restante. Em seguida, adicionou-se (E)-N,N-dimetil-N'-(3-tioxo-3H- 1,2,4-ditiazol-5-il) formimidamida (237 mg, 1,152 mmol) à mistura reacional e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. O solvente foi evaporado a vácuo e o resíduo foi colocado em diclorometano (40 mL) e água (0,188 mL, 10,47 mmol), seguido da adição de ácido 2,2-dicloroacético (1,037 mL, 12,57 mmol). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 10 minutos, após o qual a LCMS indicou a formação do produto desejado. A reação foi inibida com piridina (10 mL, 124 mmol), em seguida, a mistura foi concentrada a vácuo para dar o composto do título impuro como um óleo de laranja. LCMS: m/z 1054 (M+H). O produto foi armazenado sob nitrogênio a 4 °C e utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional.

[0434]Intermediário 4: N-{9-[(1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-17-(6- benzamido-9H-purin-9-il)-18-[(terc-butildimetilsilil)oxi]-3-(2-cianoetoxi)-9-fluoro-12- oxo-12-sulfanil-3-sulfanilideno-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3X5,12À5- difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-8-il]-9H-purin-6-il}benzamida

[0435]Uma solução de hidrogenofosfonato de (2R, 3R, 4R, 5R)-5-(6- benzamido-9H-purin-9-il)-2-((((2R, 3R, 4R, 5R)-2-(6-benzamido-9H-purin-9-il)-4- ((terc-butildimetilsilil)oxi)-5-(hidroximetil)tetrahidrofuran-3-il)oxi)(2-cianoetoxi) fosforotioil)oxi)metil)-4-fluorotetrahidrofuran-3-ila (1104 mg, 1,047 mmol) bruto em piridina (~ 20 mL) foi evaporada e, em seguida, redissolvida em piridina (20 mL) e concentrada até aproximadamente 10 mL. A esta solução sob nitrogênio, adicionou- se 2-óxido de 2-cloro-5,5-dimetil-1,3,2-dioxafosfinano (677 mg, 3,67 mmol) em uma porção. A mistura reacional foi agitada à temperatura ambiente sob nitrogênio durante 30 minutos, após o qual a LCMS indicou o consumo do material de partida, em seguida, a reação foi inibida pela adição de água (0,660 mL, 36,7 mmol). Adicionou-se, em seguida, 3H-benzo[c][1,2]ditiol-3-ona (264 mg, 1,571 mmol) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 5 minutos antes de se verter sobre uma solução de água (160 mL) contendo bicarbonato de sódio (4400 mg, 52,4 mmol). Esta mistura foi agitada durante 5 minutos, depois adicionou-se EtOAc (150 mL) e a mistura foi agitada por mais 10 minutos. A solução foi transferida para um funil de separação, e a camada aquosa foi separada da orgânica. A camada aquosa foi ainda extraída com EtOAc (150 mL), depois as camadas orgânicas combinadas foram secas (Na2SO4), filtradas e evaporadas a vácuo até se obter um óleo laranja. O material foi armazenado sob nitrogênio a 4 °C durante a noite.

[0436]Após aquecer até a temperatura ambiente, o material bruto foi diluído com tolueno (20 mL) e evaporado para remover o excesso de piridina. O produto bruto foi purificado por cromatografia (sílica gel, ISCO Teledyne Gold, 80 g). A eluição por gradiente foi realizada a partir de 0-10% de metanol em diclorometano ao longo de 15 minutos, seguido de uma retenção isocrática de 5 minutos a 10% de metanol em diclorometano. Em seguida, o gradiente aumentou de 10-20% de metanol em diclorometano ao longo de 15 minutos seguido de uma retenção isocrática de 10 minutos a 20% de metanol em diclorometano. As frações desejadas foram combinadas e evaporadas a vácuo para se obter o composto do título (570 mg, 0,342 mmol, rendimento de 32,6%) como um sólido amarelo.

[0437]Foram observados quatro isômeros por LCMS [m/z 1068,5 (M+H)] em uma proporção aproximada de 8: 4: 2: 1 com tempos de retenção de 1,13, 1,23, 1,18 e 1,08 minutos, respectivamente. O produto foi armazenado sob nitrogênio a 4 °C e utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional.

[0438]Intermediário 5: (1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-8,17-bis(6- amino-9H-purin-9-il)-18-[(terc-butildimetilsilil)oxi]-9-fluoro-3,12-dissulfanil-2.4.7.11.13.16- hexaoxa-3X5,12X5-difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona, sal de bisamônio

[0439]Uma solução do N-{9-[(1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-17-(6- benzamido-9H-purin-9-il)-18-[(terc-butildimetilsilil)oxi]-3-(2-cianoetoxi)-9-fluoro-12- oxo-12-sulfanil-3-sulfanilideno-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3X5,12X5-difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-8-il]-9H-purin-6-il}benzamida acima obtida (570 mg, 0,534 mmol) em metilamina (33% por peso em etanol)(25 mL, 201 mmol) foiagitada à temperatura ambiente durante 50 minutos, após o qual a LCMS indicou o consumo do materiais de partida. A mistura reacional foi concentrada a vácuo para se obter um resíduo de laranja. O material foi armazenado sob nitrogênio a 4 °C durante a noite.

[0440]O material foi deixado em aquecimento até a temperatura ambiente e dissolvido em metanol/ DMSO (4 mL no total). Uma porção foi purificada usando HPLC de fase reversa (10-90% de acetonitrila: água (com 0,1% de modificador NH4OH), coluna Gemini C18 50x30 mm, 47 mL/min, gradiente de 8 minutos, coleta de UV = 214 nm).

[0441]Outra porção foi purificada usando HPLC de fase reversa (10-50% de acetonitrila: água (com 0,1% de modificador NH4OH), coluna Gemini C18 50x30 mm, 47 mL/min, gradiente de 8 minutos, coleta de UV = 214 nm).

[0442]As frações das duas purificações foram combinadas e concentradas para se obter três produtos isoméricos: • Isômero 1 do composto do título como um sal de bisamônio, sendo a estereoquimia exata nos dois centros de fósforo indeterminada (6 mg, pureza por LCMS = 70%, 4,99 μmol, rendimento de 0,936%) como uma goma esbranquiçada, LCMS m/z 807,2 (M+H), tRET = 0,68 min. • Isômero 2 do composto do título como um sal de bisamônio, sendo a estereoquimia exata nos dois centros de fósforo indeterminada (64 mg, pureza por LCMS = 22%, 0,017 mmol, rendimento de 3,14%) como uma goma incolor, LCMS m/z 807,2 (M+H), tRET = 0,80 min. • Isômero 3 do composto do título como um sal de bisamônio, sendo a estereoquimia exata nos dois centros de fósforo indeterminada (26 mg, pureza por LCMS = 50%, 0,015 mmol, rendimento de 2,90%) como um sólido branco, LCMS m/z 807,2 (M+H), tRET = 0,92 min.

[0443]O último isômero da eluição, o isômero 3 do composto do título, foi o produto principal, conforme determinado pela área sob o pico da cromatografia (UV @ 214 nm) e foi utilizado na etapa de desproteção seguinte.

[0444]Exemplo 8: (1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-8,17-bis(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-18-hidroxi-3,12-dissulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3À5,12X5- difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona, sal de bisamônio

[0445]O isômero 3 de (1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-8,17-bis(6-amino-9H-purin-9-il)-18-[(terc-butildimetilsilil)oxi]-9-fluoro-3,12-dissulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3X5,12À5-difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona (25 mg, 0,031 mmol) obtido da etapa anterior foi suspenso em piridina (0,5 mL) e trietilamina (0,5 mL). A mistura foi agitada e aquecida a 50 °C, depois adicionou-se triidrofluoreto de trietilamina (0,5 mL, 3,07 mmol) e a mistura foi agitada a 50 °C durante mais 2 horas, tempo no qual a LCMS indicou o consumo total do material de partida e a conversão para o produto desejado.

[0446]A mistura foi deixada em resfriamento até a temperatura ambiente, depois adicionou-se acetona (~ 10 mL) e evaporou-se o solvente e o material foi armazenado sob nitrogênio a 4 °C durante a noite.

[0447]O resíduo bruto foi purificado usando HPLC de fase reversa (0-20% de acetonitrila em água (0,1% de NH4OH), coluna Gemini 50x30 mm, 47 mL/min, gradiente de 8 minutos, detecção por UV @ 214 nm). As frações desejadas foram combinadas e evaporadas para se obter o composto do título como um sal de bisamônio (2,3 mg) como um diastereômero único, sendo a estereoquimia exata nos dois centros de fósforo indeterminada. O produto foi um sólido branco. LCMS m/z 693,1 (M+H). 1H RMN (600 MHz, DMSO-d6 com uma gota de D2O): δ ppm 8,69 (s, 1H), 8,33 (s, 1H), 8,14-8,17 (m, 1H), 8,12 (br s, 1H), 6,24 (br dd, J = 14,5, 3,2 Hz, 1H), 6,08 (br d, J = 8,3 Hz, 1H), 5,71-5,86 (m, 1H), 5,22 (br t, J = 8,7 Hz, 2H), 4,49-4,54 (m, 1H), 4,32 (br s, 1H), 4,16 (br s, 1H), 4,08-4,15 (m, 2H), 4,03-4,06 (m, 1H), 4,00-4,03 (m, 1H), 3,73 (br s, 1H).13C RMN (150 MHz, DMSO-d6 com uma gota de D2O): δ ppm 156,1, 155,9, 153,2, 152,9, 150,4, 149,1, 119,1, 118,4, 90,6, 85,3, 83,6, 83,0, 80,6, 77,7, 71,6, 71,1, 67,2, 63,3.31P RMN (162 MHz, DMSO-d6 com uma gota de D2O) δ ppm 53,84 e 49,04.

[0448]Nota-se que o Exemplo 8 produziu o Composto 1b -Isômero 2. Devido à pequena escala da reação, nenhum Composto 1a -Isômero 1 foi isolado. Tanto o Isômero 1 como o Isômero 2 do Composto 1 são preparados nos Exemplos 8a e 8b abaixo.

[0449]Exemplos 8a e 8b -Compostos 1a e 1b (1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-8,17-bis(6-amino-9H-purin-9-il)-9- fluoro-18-hidroxi-3,12-dissulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3X5,12X5- difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona, sal de bisamônio

[0450]Intermediário 1: hidrogenofosfonato de (2R, 3R, 4R, 5R)-5-(6- benzamido-9H-purin-9-il)-2-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-4- fluorotetrahidrofuran-3-ila

[0451]A uma solução de (2R, 3R, 4R, 5R)-5-(6-benzamido-9H-purin-9-il)-2- ((bis(4-metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-4-fluorotetrahidrofuran-3-il (2-cianoetil) diisopropilfosforamidita (10 g, 11,42 mmol) em acetonitrila (65 mL) e água (0,411 mL, 22,83 mmol) à temperatura ambiente, adicionou-se 2,2,2-trifluoroacetato de piridina (2,65 g, 13,70 mmol). A mistura foi agitada durante 1 minuto, após o qual a LCMS indicou a conversão completa para o primeiro intermediário m/z 793,7 (M+H). Em seguida, adicionou-se 2-metilpropan-2-amina (60,0 mL, 571 mmol) e a mistura foi agitada durante 15 minutos, após o qual a LCMS indicou o consumo do primeiro intermediário formado.

[0452]A mistura foi concentrada a vácuo para se obter uma espuma branca. A espuma foi então dissolvida em acetonitrila e concentrada (50 mL). Esse processo foi repetido mais uma vez. O material bruto foi dissolvido em diclorometano e purificado por cromatografia (sílica gel, ISCO RediSep, 120 g de sílica) e eluído com um gradiente de 0-30% de metanol em diclorometano. As frações desejadas foram combinadas e evaporadas a vácuo para se obter o composto do título (4,8 g, 6,49 mmol, rendimento de 56,8%) sob a forma de um sólido branco. LCMS m/z 740,3 (M+H).

[0453]Intermediário 2: hidrogenofosfonato de (2R, 3R, 4R, 5R)-5-(6- benzamido-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2-(hidroximetil)tetrahidrofuran-3-ila

[0454]O intermediário 2 foi produzido, em geral, de acordo com o procedimento abaixo. Pequenas modificações podem ser utilizadas, como, por exemplo, aquelas descritas para o Intermediário 2 em outros Exemplos.

[0455]A uma solução de hidrogenofosfonato de (2R, 3R, 4R, 5R)-5-(6- benzamido-9H-purin-9-il)-2-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-4-fluorotetrahidrofuran-3-ila (4,8 g, 6,49 mmol) em diclorometano (100 mL) e água (1,169 mL, 64,9 mmol) à temperatura ambiente, adicionou-se ácido 2,2-dicloroacético (4,06 mL, 51,9 mmol). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. A reação foi então inibida com piridina (8,40 mL, 104 mmol) e concentrada a vácuo para se obter o composto do título impuro como um óleo incolor. O material foi imediatamente usado como está na etapa seguinte. Uma massa final não foi determinada. LCMS m/z 438,3 (M+H).

[0456]Intermediário 3: hidrogenofosfonato de (2R, 3R, 4R, 5R)-5-(6- benzamido-9H-purin-9-il)-2-((((2R, 3R, 4R, 5R)-2-(6-benzamido-9H-purin-9-il)-4- ((terc-butildimetilsilil)oxi)-5-(hidroximetil)tetrahidrofuran-3-il)oxi)(2-cianoetoxi) fosforotioil)oxi)metil)-4-fluorotetrahidrofuran-3-ila

[0457]O intermediário 3 foi produzido, em geral, de acordo com o procedimento abaixo. Pequenas modificações podem ser utilizadas, como, por exemplo, aquelas descritas para o Intermediário 2 em outros Exemplos.

[0458]O hidrogenofosfonato de (2R, 3R, 4R, 5R)-5-(6-benzamido-9H-purin-9- il)-4-fluoro-2-(hidroximetil)tetrahidrofuran-3-ila sólido e impuro (2,84 g, 6,49 mmol) obtido acima foi submetido à quebra azeotrópica com acetonitrila anidra (3 x 60 mL). Após a última concentração, 20 mL de acetonitila foram mantidos no balão. À temperatura ambiente, foi adicionado (2R, 3R, 4R, 5R)-2-(6-benzamido-9H-purin-9-il)- 5-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)tetrahidrofuran-3-il (2-cianoetil) diisopropilfosforamidita (8,00 g, 8,10 mmol) foi submetido à secagem azeotrópica com acetonitrila anidra (3 x 60 mL). Após a última concentração, 30 mL de acetonitrila no foram mantidos no balão e peneiras moleculares de 3Â (~ 40 esferas) foram adicionadas. A solução foi deixada em pé sobre as peneiras moleculares à temperatura ambiente durante 1 hora.

[0459]À suspensão seca de hidrogenofosfonato de (2R, 3R, 4R, 5R)-5-(6- benzamido-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2-(hidroximetil)tetrahidrofuran-3-ila (2,84 g, 6,49 mmol) em acetonitrila (40 mL) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de nitrogênio, adicionou-se a solução pré-seca de (2R, 3R, 4R, 5R)-2-(6-benzamido-9H- purin-9-il)-5-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-4-((terc- butildimetilsilil)oxi)tetrahidrofuran-3-il (2-cianoetil) diisopropilfosforamidita (8,00 g, 8,10 mmol) em acetonitrila (30 mL) por seringa. A mistura foi agitada sob uma atmosfera de nitrogênio à temperatura ambiente durante 1 hora, após o qual a LCMS indicou o material de partida mínimo restante. Em seguida, adicionou-se à mistura reacional (E)- N,N-dimetil-N'-(3-tio-oxo-3H-1,2,4-ditiazol-5-il) formimidamida (1,467 g, 7,14 mmol) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 45 minutos. O solvente foi evaporado a vácuo e o resíduo foi introduzido em diclorometano (100 mL) e água (1,170 mL, 64,9 mmol), seguido da adição de ácido 2,2-dicloroacético (6,43 mL, 78 mmol). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 10 minutos, após o qual a LCMS indicou a formação do produto desejado. A reação foi inibida com piridina (12,61 mL, 156 mmol), em seguida, a mistura foi concentrada a vácuo para se obter o composto do título impuro como um óleo de laranja. A LCMS indicou a formação de dois isômeros com dois picos sobrepostos entre 0,98-1,04 min. O material foi imediatamente usado como está na etapa seguinte. Uma massa final da amostra não foi determinada. LCMS m/z 1054,6 (M+H).

[0460]Intermediário 4: N-{9-[(1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-17-(6- benzamido-9H-purin-9-il)-18-[(terc-butildimetilsilil)oxi]-3-(2-cianoetoxi)-9-fluoro-12- oxo-12-sulfanil-3-sulfanilideno-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3X5,12X5- difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-8-il]-9H-purin-6-il}benzamida

[0461]Uma solução de hidrogenofosfonato de (2R, 3R, 4R, 5R)-5-(6- benzamido-9H-purin-9-il)-2-((((2R, 3R, 4R, 5R)-2-(6-benzamido-9H-purin-9-il)-4- ((terc-butildimetilsilil)oxi)-5-(hidroximetil)tetrahidrofuran-3-il)oxi)(2-cianoetoxi) fosforotioil)oxi)metil)-4-fluorotetrahidrofuran-3-ila bruto (6,84 g, 6,49 mmol) foi submetido à quebra azeotrópica a partir da piridina (3 x 50 mL), deixando-se a piridina (40 mL) após a última concentração. A esta solução sob nitrogênio, foi adicionado 2- óxido de 2-cloro-5,5-dimetil-1,3,2-dioxafosfinano (4,19 g, 22,71 mmol) em uma porção. A reação foi agitada à temperatura ambiente sob nitrogênio durante 30 minutos, após o qual a LCMS indicou o consumo do material de partida, em seguida, a reação foi inibida com a adição de água (4,09 mL, 227 mmol). Em seguida, 3H- benzo[c][1,2]ditiol-3-ona (1,638 g, 9,73 mmol), e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 5 minutos antes de ser vertida em uma solução de água (400 ml) contendo bicarbonato de sódio (27,3 g, 324 mmol). A mistura foi agitada durante 10 minutos, depois adicionou-se EtOAc (200 mL) e a mistura foi agitada durante mais 10 minutos. A solução foi transferida para um funil de separação, e a camada aquosa foi separada da orgânica. A camada aquosa foi ainda extraída com EtOAc (2 x 200 mL), em seguida, as camadas orgânicas combinadas foram secas (Na2SO4), filtradas e evaporadas a vácuo até se obter um óleo laranja. O material foi armazenado sob nitrogênio a 4 °C até a utilização na etapa seguinte.

[0462]Após aquecer até a temperatura ambiente, o material bruto foi diluído com tolueno (50 mL) e evaporado para remover o excesso de piridina. Este processo foi repetido mais duas vezes. O produto bruto foi purificado por cromatografia (sílica gel, ISCO Teledyne Gold, 220 g de sílica). A eluição por gradiente foi realizada a partir de 0-10% de metanol em diclorometano ao longo de 15 minutos, seguido de uma retenção isocrática de 5 minutos a 10% de metanol em diclorometano. Em seguida, o gradiente aumentou de 10-20% de metanol em diclorometano ao longo de 15 minutos seguido de uma retenção isocrática de 5 minutos a 20% de metanol em diclorometano. As frações desejadas foram combinadas e evaporadas a vácuo para se obter um óleo laranja. O material foi armazenado sob nitrogênio a 4 °C durante a noite.

[0463]Após aquecer até a temperatura ambiente, o material foi purificado novamente por cromatografia (sílica gel, ISCO Teledyne Gold, 120 g de sílica). A eluição por gradiente foi realizada a partir de 0-10% de metanol em diclorometano ao longo de 15 minutos, seguido de uma retenção isocrática de 5 minutos a 10% de metanol em diclorometano. Em seguida, o gradiente aumentou de 10-20% de metanol em diclorometano ao longo de 10 minutos, seguido de uma retenção isocrática de 5 minutos a 20% de metanol em diclorometano. As frações desejadas foram combinadas e evaporadas a vácuo para se obter o composto do título impuro (2,81 g) como um sólido amarelo. A LCMS indicou a presença de dois principais diastereômeros com tempos de retenção de 1,09, 1,18 minutos, respectivamente. Dois isômeros menores também foram observados. O produto foi armazenado sob nitrogênio a 4 °C até a utilização na etapa seguinte sem purificação adicional. LCMS m/z 1068 (M+H).

[0464]Intermediário 5: (1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-8,17-bis(6-amino-9H-purin-9-il)-18-[(terc-butildimetilsilil)oxi]-9-fluoro-3,12-dissulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3X5,12X5-difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona, sal de bisamônio

[0465]A uma solução de N-{9-[(1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-17-(6- benzamido-9H-purin-9-il)-18-[(terc-butildimetilsilil)oxi]-3-(2-cianoetoxi)-9-fluoro-12- oxo-12-sulfanil-3-sulfanilideno-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3X5,12À5- difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-8-il]-9H-purin-6-il}benzamida (1,0 g, 0,936 mmol) em etanol (5 mL) adicionou-se metilamina (33% por peso em etanol)(20 ml, 161 mmol ) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos, após o qual a LCMS indicou o consumo dos materiais de partida. A mistura reacional foi concentrada a vácuo até se obter um resíduo escuro (tan). O material foi introduzido em DMSO e purificado usando cromatografia (gel de sílica de fase reversa, RediSep Gold C18, 30 g). A eluição por gradiente foi realizada a 100% de água (com 0,1% de modificador NH4OH) durante 4 CV seguido de 0-15% de acetonitrila em água (com 0,1% de modificador NH4OH) durante 3 CV seguido de 15-25% de acetonitrila em água (com 0,1 % de modificador NH4OH) para 6 CV seguido de 25-90% de acetonitrila em água (com 0,1% de modificador NH4OH) para 3 CV seguido por uma retenção isocrática a 90% de acetonitrila em água (com 0,1% de modificador NH4OH) para 4 CV.

[0466]As frações da purificação foram combinadas e dois produtos isoméricos principais foram isolados: • Isômero 2 do composto do título como um sal de bisamônio, sendo a estereoquimia exata nos dois centros de fósforo indeterminada (28 mg, pureza por LCMS = 54%, 0,018 mmol, rendimento 1,921%) como resíduo incolor, LCMS m/z 807,1 (M+H), tRET = 0,80 min. • Isômero 3 do composto do título como um sal de bisamônio, sendo a estereoquimia exata nos dois centros de fósforo indeterminada (46 mg, pureza por LCMS = 70%, 0,038 mmol, 4,09% de rendimento) como um resíduo amarelo, LCMS m/z 807,2 (M+H), tRET = 0,91 min.

[0467]Exemplos 8a e 8b: (1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-8,17-bis(6- amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-18-hidroxi-3,12-dissulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa- 3À5,12À5-difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona, sal de bisamônio

[0468]O isômero 2 do intermediário 5, (1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)- 8,17-bis(6-amino-9H-purin-9-il)-18-[(terc-butildimetilsilil)oxi]-9-fluoro-3,12-dissulfanil- 2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3À5,12X5-difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona (25 mg, 0,031 mmol), obtido da etapa anterior, foi suspenso em piridina (0,5 mL) e trietilamina (0,5 mL). A mistura foi agitada e aquecida a 50 °C, em seguida, adicionou- se triidrofluoreto de trietilamina (0,5 mL, 3,07 mmol) e a mistura foi agitada a 50 °C durante 2 horas, após o qual a LCMS indicou o consumo total do material de partida e a conversão para o produto desejado. A mistura reacional foi evaporada a vácuo, e o balão foi armazenado sob nitrogênio a 4 °C durante a noite.

[0469]Após aquecer até a temperatura ambiente, o resíduo foi colocado em água (~ 5 mL) e um precipitado foi formado. Os sólidos foram separados da mistura e o filtrado foi ajustado para pH = 10 utilizando hidróxido de amônio. A solução foi purificada usando HPLC de fase reversa (0-5% de acetonitrila: água (com 0,1% de modificador NH4OH), coluna Gemini C18 50 x 30 mm, 40 mL/min, gradiente de 7 minutos, detecção por UV = 214 nm). Os sólidos coletados foram colocados em água (~ 2 mL) e metanol (~ 0,5 mL) e adicionou-se hidróxido de amônio a pH = 10. A solução foi purificada usando HPLC de fase reversa (0-5% de acetonitrila: água (com 0,1% modificador NH4OH), coluna Gemini C18 50 x 30 mm, 40 mL/min, gradiente de 7 minutos, detecção por UV = 214 nm).

[0470]As frações desejadas de ambas as purificações foram combinadas e removidas a vácuo para se obter um resíduo incolor. O resíduo foi colocado em água (2 mL) e liofilizado durante a noite para se obter o composto do título (Exemplo 8a, 7 mg) como um sal de bisamônio como um diastereômero único, com a estereoquímica exata nos dois centros de fósforo indeterminados. O produto foi um sólido branco. LCMS m/z 693,3 (M+H). tRET = 0,29 min.1H RMN (400 MHz, DMSO-d6 com uma gota de D2O) δ ppm 8,59-8,62 (m, 1H), 8,398,41 (m, 1H), 8,17 (s, 1H), 8,13 (s , 1H), 6,19-6,27 (m, 1H), 6,05-6,10 (m, 1H), 5,705,87 (m, 1H), 5,24-5,36 (m, 1H), 5,14-5,23 (m, 1H), 4,31 -4,36 (m, 1H), 4,23-4,29 (m, 1H), 4,15-4,23 (m, 1H), 4,11-4,15 (m, 1H), 3,98-4,08 (m, 1H), 3,82-3,91 (m, 1H), 3,663,72 (m, 1H). 31P RMN (162 MHz, DMSO-d6 com uma gota de D2O) δ ppm 53,66, 55,91. 19F RMN (376 MHz, DMSO-d6 com uma gota de D2O) δ ppm -206,48.

[0471]O isômero 3 do intermediário 5, (1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)- 8,17-bis(6-amino-9H-purin-9-il)-18-[(terc-butildimetilsilil)oxi]-9-fluoro-3,12-dissulfanil- 2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3À5,12À5-difosfatricido[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona (175 mg, 0,217 mmol), obtido a partir de um lote diferente (pureza por LCMS = 50%), foi suspenso em piridina (1 mL) e trietilamina (1 mL). A mistura foi agitada e aquecida a 50 °C, em seguida, adicionou-se triidrofluoreto de trietilamina (1 mL, 6,14 mmol) e a mistura foi agitada a 50 °C durante 3 horas, após o qual a LCMS indicou o consumo completo do material de partida e a conversão para o produto desejado. A mistura foi deixada em resfriamento até a temperatura ambiente, depois adicionou-se acetona (~ 10 mL) e um precipitado fino foi formado. O precipitado foi coletado pela filtração a vácuo para se obter um resíduo cinzento, que foi descartado. O filtrado foi evaporado a vácuo e o balão foi armazenado sob nitrogênio a 4 °C durante a noite.

[0472]Após aquecer até a temperatura ambiente, o resíduo foi colocado em metanol (~ 6 mL) e purificado utilizando HPLC de fase reversa (0-15% de acetonitrila: água (com 0,1% de modificador NH4OH), coluna Gemini C18 50 x 30 mm, 47 mL/min, gradiente de 8 minutos, detecção por UV = 214 nm). As frações desejadas foram combinadas e removidas a vácuo para se obter um sólido branco, ainda contaminado por algumas impurezas.

[0473]O sólido foi ainda purificado usando coluna HILIC preparativa (Luna HILIC, 5u 21 x 250 mm, 20 mL/min, detecção por UV = 254 nm) com um gradiente isocrático de 20% de formato de amônio aquoso e 80% de acetonitrila. As frações desejadas foram combinadas e evaporadas a vácuo de 90%, depois foram colocadas em água e adicionou-se acetonitrila e 5 gotas de hidróxido de amônio a pH = 10. O material foi congelado e liofilizado durante a noite. Este processo foi repetido mais duas vezes para se obter o composto do título (Exemplo 8b, 12 mg) como um sal de bisamônio como um diastereômero único, com a estereoquímica exata nos dois centros de fósforo indeterminados. O produto foi um sólido branco. LCMS m/z 693,3 (M+H), tRET = 0,37 min.1H RMN (600 MHz, DMSO-d6 com uma gota de D2O) δ ppm 8,50-9,29 (m, 1H), 8,43 (br s, 1H), 8,16 (s, 1H), 7,73-8,11 (m, 1H), 6,26 (br d, J=14,4 Hz, 1H), 6,15 (br d, J=7,2 Hz, 1H), 5,72 (s, 1H), 5,29-5,41 (m, 1H), 5,17-5,29 (m, 1H), 4,27-4,46 (m, 2H), 4,21 (br s, 1H), 4,01-4,15 (m, 1H), 3,86-3,91 (m, 1H), 3,81-3,86 (m, 1H), 3,77 (br d, J=10,6 Hz, 1H), 31P RMN (162 MHz, DMSO-d6 com uma gota de D2O) δ ppm 54,27, 49,69, 19F RMN (376 MHz, DMSO-d6 com uma gota de D2O) δ ppm -204,90 (br,)

[0474]Exemplos 9a e 9b -Compostos 2a e 2b (1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-8,17-bis(6-amino-9H-purin-9-il)-9- fluoro-12,18-diidroxi-3-sulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3X5,12X5- difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona, sal de bisamônio

[0475]Intermediário 2: hidrogenofosfonato de (2R, 3R, 4R, 5R)-5-(6- benzamido-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2-(hidroximetil)tetrahidrofuran-3-ila

[0476]O intermediário 2 foi produzido, em geral, de acordo com o procedimento descrito abaixo. Pequenas modificações podem ser utilizadas, como, por exemplo, aquelas descritas para o Intermediário 2 em outros exemplos.

[0477]A uma solução em temperatura ambiente de (2R, 3R, 4R, 5R)-5-(6- benzamido-9H-purin-9-il)-2-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-4-fluorotetrahidrofuran-3-il (2-cianoetil) diisopropilfosforamidita (4,01 g, 4,6 mmol) em acetonitrila (35 mL) e água (0,165 mL, 9,1 mmol) adicionou-se trifluoroacetato de piridina 2,2,2-(1,06 g, 5,5 mmol). A reação foi agitada durante 10 minutos, em seguida, terc-butilamina pura (24,2 mL, 228 mmol) foi adicionada. A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos e depois concentrada sob pressão reduzida. A espuma branca resultante foi submetida à quebra azeotrópica com acetonitrila (2x), em seguida, o resíduo seco foi colocado em uma mistura de diclorometano (100 mL) e água (0,82 mL, 45,7 mmol) e tratado com ácido 2,2-dicloroacético puro (3,01 mL, 36,5 mmol). Após 30 minutos, a reação foi inibida com piridina (5,91 mL, 73,1 mmol), em seguida, concentrada sob pressão reduzida até uma suspensão oleosa. O material foi submetido à quebra azeotrópica com acetonitrila (3x), em seguida, colocado em acetonitrila anidra (60 mL) e concentrado até um volume de cerca de 20 mL para se obter o composto do título impuro como uma suspensão com coloração laranja claro. LCMS m/z 437,9 (M+H). Esta mistura foi utilizada na etapa seguinte sem purificação adicional.

[0478]Intermediário 3: hidrogenofosfonato de (2R, 3R, 4R, 5R)-5-(6- benzamido-9H-purin-9-il)-2-((((2R, 3R, 4R, 5R)-2-(6-benzamido-9H-purin-9-il)-4- ((terc-butildimetilsilil)oxi)-5-(hidroximetil)tetrahidrofuran-3-il)oxi)(2-cianoetoxi) fosforotioil)oxi)metil)-4-fluorotetrahidrofuran-3-ila

[0479]O intermediário 3 foi produzido, em geral, de acordo com o procedimento descrito abaixo. Pequenas modificações podem ser utilizadas, como, por exemplo, aquelas descritas para o Intermediário 3 em outros exemplos.

[0480]A (2R, 3R, 4R, 5R)-2-(6-benzamido-9H-purin-9-il)-5-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)tetrahidrofuran-3-il (2- cianoetil) diisopropilfosforamidita (5,9 g, 5,9 mmol) foi submetida à quebra azeotrópica com acetonitrila (2x), em seguida, colocado em 40 mL de acetonitrila anidra, concentrado aproximadamente a metade, em seguida, armazenado sob nitrogênio sobre peneiras moleculares de 3Â. Após 1 hora, esta solução foi adicionada à mistura bruta previamente preparada (Intermediário 2) de hidrogenofosfonato de (2R, 3R, 4R, 5R)-5-(6-benzamido-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2-(hidroximetil)tetrahidrofuran-3-ila (2,0 g, 4,6 mmol) sob nitrogênio. A reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora, em seguida, tratada com 3-(dimetilaminometilideno)amino)-3H-1,2,4-ditiazol-3-tiona (1,03 g, 5,0 mmol), agitada por 30 minutos e concentada sob pressão reduzida. O resíduo foi colocado em numa mistura de diclorometano (60 mL) e água (0,823 mL, 45,7 mmol) e depois tratado com ácido 2,2-dicloroacético (4,5 mL, 54,8 mmol). Esta foi agitada à temperatura ambiente durante 15 minutos antes da inibição com piridina (25 mL, 309 mmol) e concentração sob pressão reduzida. O concentrado oleoso foi submetido à quebra azeotrópica a partir de piridina, em seguida, colocado em piridina anidra (60 mL) e concentrado sob pressão reduzida até cerca de 20 mL para se obter o composto do título impuro como um óleo de coloração laranja escuro. LCMS m/z 1054,2 (M+H). Esta mistura foi utilizada na etapa seguinte sem purificação adicional.

[0481]Intermediário 6: N-{9-[(1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-17-(6- benzamido-9H-purin-9-il)-18-[(terc-butildimetilsilil)oxi]-3-(2-cianoetoxi)-9-fluoro-12- hidroxi-12-oxo-3-sulfanilideno-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3X5,12X5- difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-8-il]-9H-purin-6-il}benzamida

[0482]A uma solução bruta de hidrogenofosfonato de (2R, 3R, 4R, 5R)-5-(6- benzamido-9H-purin-9-il)-2-((((2R, 3R, 4R, 5R)-2-(6-benzamido-9H-purin-9-il)-4- ((terc-butildimetilsilil)oxi)-5-(hidroximetil)tetrahidrofuran-3-il)oxi)(2-cianoetoxi) fosforotioil)oxi)metil)-4-fluorotetrahidrofuran-3-ila (Intermediário 3, 4,8 g, 4,6 mmol) em piridina (20 mL) sob nitrogênio, adicionou-se 2-óxido de 2-cloro-5,5-dimetil-1,3,2- dioxafosfinano (3,0 g, 16,0 mmol). A reação foi agitada à temperatura ambiente sob nitrogênio durante 30 minutos, em seguida, foi inibida com a adição de água (2,9 mL, 160 mmol) seguido de iodo (1,5 g, 5,9 mmol). Após 10 minutos, a mistura foi vertida em uma solução de bissulfito de sódio (0,95 g, 9,1 mmol) em água (300 ml). Após 5 minutos, a mistura reacional foi tratada em porções com bicarbonato de sódio sólido (19,2 g, 229 mmol). A suspensão castanha dourada resultante foi extraída com EtOAc (3 x 200 mL), em seguida, os extratos foram lavados com bicarbonato de sódio aquoso saturado, secos sobre Na2SO4 e concentrados em um óleo. Um dos dois seguintes métodos de purificação foi, em seguida, utilizado para purificar o produto de diferentes lotes.

[0483]Método A: O óleo foi submetido à quebra azeotrópica com tolueno para remover o excesso de piridina, em seguida, purificado por cromatografia em sílica (coluna Biotage-100g) eluindo-se com gradientes sucessivos de 0-10% de MeOH em DCM (10 min), 10% de MeOH em DCM (10 minutos), 10-20% de MeOH em DCM (10 min) e, finalmente, 20-40% de MeOH em DMC (10 min). As frações de interesse identificadas por LCMS foram combinadas e concentradas para se obter o composto do título impuro (1,03 g, 0,979 mmol) como um sólido de coloração laranja claro. Dois isômeros foram observados por LCMS [m/z 1052,3 (M+H)] em uma proporção aproximada de 1: 1 com tempos de retenção de 1,00, 1,09 minutos, respectivamente. O produto foi armazenado sob atmosfera de nitrogênio a 4 °C e utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional.

[0484]Método B: O óleo foi submetido à quebra azeotrópica com tolueno para remover o excesso de piridina, em seguida, purificado por cromatografia em sílica (Teledyne ISCO Gold -120g) eluindo-se com gradientes sucessivos de 100% de DCM (5 min), 0-10% de MeOH em DCM (5 min), 10% de MeOH em DCM (10 minutos), e 10-40% de MeOH em DMC (20 min). As frações de interesse foram combinadas e concentradas para se obter uma mistura aproximadamente de 1: 1 de diastereômeros como um amarelo escuro sólido. A mistura de diastereômeros foi separada por HPLC de fase reversa (coluna Gemini C-18: 30 x 50 mm; 45-60% de CH3CN p/ 0,1% de TFA/ água p / 0,1% de TFA), 12 min de corrida, coleta a 214 nm. As frações de interesse foram combinadas, tratadas com bicarbonato de sódio aquoso saturado, em seguida, concentradas para remover a acetonitrila. Os concentrados aquosos foram, em seguida, extraídos com EtOAc. Os extratos foram secos (sobre Na2SO4) foram concentrados para se obter os diastereômeros individuais. • Diastereômero 1 do composto do título (42 mg) como um sólido branco, sendo a estereoquimia exata no centro de fósforo quiral indeterminada. LCMS m/z 1052,7 (M+H), tRET = 1,00 min. • Diastereômero 2 do composto do título (43 mg) como um sólido branco, sendo a estereoquimia exata no centro de fósforo quiral indeterminada. LCMS m/z 1052,7 (M+H). tRET = 1,09 min.

[0485]Exemplos 9a e 9b: (1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-8,17-bis(6- amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-12,18-diidroxi-3-sulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa- 3X5,12À5-difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona, sal de bisamônio

[0486]Uma solução de intermediário 6 (purificado pelo método A), N-{9-[(1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-17-(6-benzamido-9H-purin-9-il)-18-[(terc- butildimetilsilil)oxi]-3-(2-cianoetoxi)-9-fluoro-12-hidroxi-12-oxo-3-sulfanilideno- 2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3X5,12X5-difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-8-il]-9H-purin- 6-il}benzamida (1,03 g, 0,979 mmol) em metilamina a 33% por peso em EtOH (40 mL, 321 mmol) foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas após o qual a LCMS indicou a conversão completa do material de partida e a presença do intermediário protegido por O-TBS desejado. Apenas um pico ligeiramente largo para o intermediário foi notado, indicando, pelo menos, que um diastereômero estava presente. A reação foi concentrada até se obter um resíduo com coloração laranja escuro o qual foi purificado por HPLC de fase reversa (coluna Gemini C-18 30 x 50 mm; 10-60% de acetonitrila p/ 0,1% de TFA/ água p/ 0,1% de TFA), gradiente de 12 minutos, com detecção a 254 nm. As frações de interesse foram combinadas e concentradas sob pressão reduzida. Neste ponto, a LCMS indicou a perda do grupo de proteção silil. A fase aquosa foi ainda concentrada a aproximadamente 3 a 5 mL e, em seguida, o metanol foi adicionado (25 mL). A suspensão resultante foi filtrada e os sólidos foram lavados com MeOH e, em seguida, éter dietílico, depois seco por sucção para se obter 75 mg do produto sal-diTFA impuro desejado como um sólido branco. LCMS m/z 677,2 (M+H).

[0487]O produto foi ainda purificado por cromatografia pré-preparativa (Luna HILIC 3u: 4,6 x 150 mm; eluição isocrática com 30 mM de HCO2NH4 aquoso (20%), CH3CN (80%)). As frações de interesse foram combinadas e concentradas até obter um resíduo que foi liofilizado a partir da água (5 mL) e 3 gotas de hidróxido de amônio). Para remover o formato de amônio residual, o processo de liofilização foi repetido mais 4 vezes para se obter o composto do título (Exemplo 9a, 50 mg) como um sal de bisamônio como um diastereômero único, sendo a estereoquimia exata no centro de fósforo quiral indeterminada. O produto intitulado era um sólido branco. LCMS m / z 677,6 (M+H), tRET = 0,11 min1H RMN(600 MHz, DMSO-d6 com uma gota de D2O): δ ppm 8,48 (s, 1H), 8,39 (s, 1H), 8,17 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 6,23 (dd, J =15,1, 3,0 Hz, 1H), 6,09 (d, J =8,3 Hz, 1H), 5,69 (br dt, J =52,1, 3,4 Hz, 1H), 5,16 (ddd, J =8,1,6,6, 4,2 Hz, 1H), 5,02-5,10 (m, 1H), 4,35 (d, J =4,2 Hz, 1H), 4,24 (br s, 1H), 4,11-4,18 (m, 1H), 4,09 (br s, 1H), 3,97 (br d, J =10,6 Hz, 1H), 3,89-3,95 (m, 1H), 3,72 (br d, J =12,5 Hz, 1H).13C RMN(150 MHz DMSO-d6, com uma gota de D2O): δ ppm 156,0, 155,8, 153,0, 152,8, 150,3, 148,9, 119,1, 118,4, 92,4, 85,4, 84,0, 83,3, 81,0, 77,9, 72,3, 71,4, 65,9, 62,6.31P RMN (162 MHz, DMSO-d6, com uma gota de D2O) δ ppm 55,67 e -2,51,19F RMN (376 MHz, DMSO-d6, com uma gota de D2O) δ ppm -205,16,

[0488]Observa-se que o Exemplo 9a também pode ser preparado usando o procedimento descrito abaixo para o Exemplo 9b.

[0489]Uma solução do Diastereômero 2 do Intermediário 6 (purificado pelo método B), N-{9-[(1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-17-(6-benzamido-9H-purin-9- il)-18-[(terc-butildimetilsilil)oxi]-3-(2-cianoetoxi)-9-fluoro-12-hidroxi-12-oxo-3- sulfanilideno-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3À5,12À5-difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan- 8-il]-9H-purin-6-il}benzamida (43 mg, 0,041 mmol), em 33 % de metilamina em EtOH (8,0 mL, 64,3 mmol) foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos e depois concentrada. O resíduo resultante de coloração laranja escuro foi colocado em piridina anidra (0,50 mL) e trietilamina (0,50 mL), aquecido a 50 °C e depois tratado com triidrofluoreto de trietilamina (0,50 mL, 3,07 mmol). Após 1 hora, a reação estava completa. A mistura foi arrefecida e concentrada até um óleo escuro que foi colocado em água (7,5 mL) e hidróxido de amônio (10 gotas). A suspensão resultante (pH ~ 3) foi filtrada e os sólidos foram dissolvidos em uma mistura de água (2 mL) e hidróxido de amônio (1 mL) e depois purificado por HPLC de fase reversa (coluna Gemini C-18: 30 x 50 mm; 0-10 % de acetonitrila / água com 0,1% de NH4OH; 214 nm). As frações de interesse foram combinadas e concentradas sob pressão reduzida até se obter um resíduo úmido que foi colocado em água (5 ml) e 5 gotas de hidróxido de amônio e. em seguida, liofilizado para se obter o composto do título (Exemplo 9b, 7,0 mg) como um sal de bisamônio como um único diastereômero, sendo a estereoquímica exata no centro de fósforo quiral indeterminada. O produto foi um sólido branco. LCMS m/z 677,2 (M+H), tRET = 0,32 min.1H RMN (600MHz, DMSO-d6 com uma gota de D2O): δ ppm 8,65-9,35 (m, 1H), 8,44 (br s, 1H), 7,77-8,29 (m, 2H), 6,25 (br d, J =14,4 Hz, 1H), 6,11-6,19 (m, 1H), 5,53-5,73 (m, 1H), 5,18-5,44 (m, 1H), 4,96-5,08 (m, 1H), 4,40-4,54 (m, 1H), 4,33 (br s, 2H), 4,23 4,30 (m, 1H), 4,16 (br s, 1H), 3,98-4,06 (m, 1H), 3,81 (br s, 1H).31P RMN (162 MHz, DMSO-d6 com uma gota de D2O) δ ppm 49,48 e -2,94. 19F RMN (376 MHz, DMSO-d6 com uma gota de D2O) δ ppm -206,44 (br).

[0490]Exemplos 10a e 10b - Compostos 28a e 28b (1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-17-(2-amino-6-oxo-6,9-diidro-1H-purin-9-il)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-12,18-diidroxi-3-sulfanil-2,4,7,11,13,16- hexaoxa-3À5,12À5-difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona

[0491]Intermediário 7: hidrogenofosfonato de (2R, 3R, 4R, 5R)-5-(6- benzamido-9H-purin-9-il)-2-(((((2R, 3R, 4R, 5R)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-5-(hidroximetil)-2-(2-isobutiramido-6-oxo-1H-purin-9(6H)-il)tetrahidrofuran-3-il)oxi)(2- cianoetoxi) fosforotioil)oxi)metil)-4-fluorotetrahidrofuran-3-ila

[0492](2R, 3R.4R, 5R)-5-((bis(4-metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2-(2-isobutiramido-6-oxo-1H-purin-9 (6H)-il)tetrahidrofuran-3-il (2- cianoetil) diisopropilfosforamidita (4,0 g, 4,12 mmol) foi submetido à quebra azeotrópica três vezes com acetonitria (20 mL). Após a última concentração, manteve- se 15 mL de acetonitrila no balão de reação e peneiras moleculares de 3Â (~ 20 esferas) foram adicionadas à solução limpa. A solução foi deixada em pé sobre as peneiras moleculares sob nitrogênio durante ~ 1 hora.

[0493]A um balão de fundo redondo separado da mistura bruta previamente preparada (Intermediário 2) de hidrogenofosfonato de (2R, 5R)-5-(6-benzamido-9H- purin-9-il)-4-fluoro-2-(hidroximetil)tetrahidrofuran-3-ila em acetonitrila (10 mL) foi adicionada, por seringa, a solução pré-seca acima de (2R, 3R.4R, 5R)-5-((bis(4- metoxifenil)(fenil)metoxi)metil)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2-(2-isobutiramido-6-oxo- 1H-purin-9 (6H)-il)tetrahidrofuran-3-il (2-cianoetil) diisopropilfosforamidita em acetonitrila (~ 15 mL). Após 30 minutos de agitação à temperatura ambiente, adicionou-se (E)-N,N-dimetil-N'-(3-oxo-3H-1,2,4-ditiazol-5-il) formimidamida (DDTT)(780 mg, 3,80 mmol). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos, seguida pela evaporação a vácuo da acetonitrila. Diplorometano (DCM)(50 mL) e Água (650 μL) foram então adicionados ao resíduo, seguido da adição de ácido 2,2-dicloroacético (3,5 mL, 42,4 mmol). Este foi agitado à temperatura ambiente durante 30 minutos antes de ser inibido com piridina (20 mL). A mistura foi concentrada a vácuo para se obter o composto do título impuro como um óleo laranja. LCMS m/z 1036,2 (M+H). O produto bruto foi utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional.

[0494]Intermediário 8: N-{9-[(1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-18-[(terc- butildimetilsilil)oxi]-3-(2-cianoetoxi)-9-fluoro-12-hidroxi-17-[2-(2-metilpropanamido)-6- oxo-6,9-diidro-1 H-purin-9-il]-12-oxo-3-sulfanilideno-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3X5,12X5-difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-8-il]-9H-purin-6-il}benzamida

[0495]A uma solução bruto de hidrogenofosfonato de (2R, 3R, 4R, 5R)-5-(6- benzamido-9H-purin-9-il)-2-(((((2R, 3R, 4R, 5R)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-5-(hidroximetil)-2-(2-isobutiramido-6-oxo-1H-purin-9(6H)-il)tetrahidrofuran-3-il)oxi)(2- cianoetoxi) fosforotioil)oxi)metil)-4-fluorotetrahidrofuran-3-ila (Intermediário 7, 3,55 g, 3,43 mmol) em piridina (60 mL) adicionou-se 2-óxido de 2-cloro-5,5-dimetil-1,3,2- dioxafosfinano (DMOCP)(2,2 g, 11,92 mmol), e a mistura foi agitada sob nitrogênio à temperatura ambiente durante 30 minutos. A reação foi inibida com água (2,2 mL, 10 equiv. a DMOCP), seguido de adição de iodo (1,2 g, 4,73 mmol). A mistura foi agitada durante 10 minutos, depois vertida em uma solução de água (400 mL) e bisulfito de sódio (NaHSO3)(1,0 g, 9,61 mmol). Após 5 minutos de agitação, bicarbonato de sódio (NaHCO3)(14,4 g, 171 mmol) foi adicionado lentamente em porções como sólido (precaução: evolução do gás). O produto foi extraído com éter dietílico 1: 1: EtOAc (300 mL x 2) e os extratos combinados foram secos sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados a vácuo. O excesso de piridina foi removido por concentração com tolueno (2 x100 mL). O material bruto foi purificado por cromatografia em sílica (coluna de 100 gramas) utilizando-se um gradiente de 0-20% de MeOH/ DCM, depois mantendo-se a 20% de MeOH / DCM até que todo o produto desejado tivesse sido eluído da coluna. As frações desejadas foram combinadas e concentradas para se obter dois produtos isoméricos: • Isômero 1 do composto do título, mais polar, como uma mistura impura (1,39 g, pureza por LCMS ~ 33% juntamente com ~ 28% do Isômero 2). LCMS m/z 1034,1 (M+H), tRET = 0,98 min. • Isômero 2 do composto do título, menos polar, como uma mistura impura (230 mg, pureza por LCMS ~ 33%). LCMS m/z 1034,2 (M+H), tRET = 1,09 min.

[0496]Intermediários 9a e 9b: (1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-17-(2- amino-6-oxo-6,9-diidro-1H-purin-9-il)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-12-hidroxi-3- sulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3À5,12À5-difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-3,12- diona

[0497]O isômero 1 do Intermediário 8, N-{9-[(1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-18-[(terc-butildimetilsilil)oxi]-3-(2-cianoetoxi)-9-fluoro-12-hidroxi-17-[2-(2- metilpropanamido)-6-oxo-6,9-diidro-1H-purin-9-il]-12-oxo-3-sulfanilideno-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3X5,12X5-difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-8-il]-9H-purin- 6-il}benzamida (1,39 g, 1,34 mmol), foi agitado em metanamina (33% por peso em EtOH)(10,0 mL, 80 mmol) sob nitrogênio à temperatura ambiente durante 3 horas. A mistura reacional foi concentrada e o resíduo foi purificado através de HPLC de fase reversa, utilizando-se um gradiente de 10-50% de ACN/ H2O (0,1% de TFA)), para se obter o Isômero 1 do composto do título (Intermediário 9a, impuro, 280 mg) como um sólido escuro. LCMS m/z 807,1 (M+H), tRET = 0,80 min.

[0498]Seguindo o mesmo procedimento para a preparação do Intermediário 9a, o Isômero 2 do Intermediário 8, N-{9-[(1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-18- [(terc-butildimetilsilil)oxi]-3-(2-cianoetoxi)-9-fluoro-12-hidroxi-17-[2-(2- metilpropanamido)-6-oxo-6,9-diidro-1H-purin-9-il]-12-oxo-3-sulfanilideno- 2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3X5,12X5-difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-8-il]-9H-purin- 6-il}benzamida (230 mg, 0,22 mmol), foi agitada em metanamina (33% por peso em EtOH)(2,0 mL, 16 mmol) sob nitrogênio à temperatura ambiente durante 3 horas. A mistura reacional foi concentrada e o resíduo foi purificado através de HPLC de fase reversa, utilizando-se um gradiente de 10-50% de ACN/ H2O (0,1% de TFA)), para se obter o Isômero 2 do composto do título (Intermediário 9b, impuro, 60 mg) como um sólido escuro. LCMS m/z 807,1 (M+H), tRET = 0,85 min.

[0499]Exemplos 10a e 10b: (1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-17-(2- amino-6-oxo-6,9-diidro-1H-purin-9-il)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-12,18- diidroxi-3-sulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3X5,12X5- difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona

[0500]A uma suspensão do Isômero 1 de (1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-17-(2-amino-6-oxo-6,9-diidro-1H-purin-9-il)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro- 12-hidroxi-3-sulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3À5,12À5- difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona (Intermediário 9a, 280 mg, 0,35 mmol) em piridina (2 mL) e trietilamina (2 mL) a 50 ° C adicionou-se triidrofluoreto de trietilamina ( 1,5 mL, 9,21 mmol). A mistura foi agitada a 50 ° C durante 4 horas. A LCMS indicou que algum material de partida ainda não havia sido consumido, e a reação foi deixada em agitação à temperatura ambiente durante 16 horas. Em seguida, a mistura reacional foi diluída com acetona (~ 25 mL) e a precipitação foi formada. Após 15 minutos de agitação, a reação foi filtrada. O sólido foi enxaguado com acetona (~ 10 mL) e seco. O filtrado foi concentrado a vácuo e, em seguida, adicionou-se tolueno para remover qualquer piridina restante. O filtrado bruto e o sólido filtrado foram individualmente purificados através da HPLC de fase reversa, utilizando-se um gradiente de 0 a 20% de ACN: H2O (0,1% de NH4OH), e combinados. Os espectros de 19F RMN apresentaram TFA residual presente nas amostras. Uma segunda purificação por HPLC de fase reversa, usando um gradiente de 0-10% de ACN/ H2O (0,1% de NH4OH), gerou o composto do título (Exemplo 10a, 4 mg) como um sal de bisamônio como um diastereômero único, sendo a estereoquímica exata no centro de fósforo indeterminada. O produto foi um sólido branco. LCMS m/z 693,0 (M+H), tRET = 0,11 min.1H RMN (600 MHz, DMSO-d6 com uma gota de D2O): δ ppm 8,30 (s, 1H), 8,19 (s, 1H), 7,97 (s, 1H), 6,26 (dd, J = 15,9, 2,3 Hz, 1H), 5,86 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 5,59-5,76 (m, 1H), 5,30 (br s, 1H), 5,06 (br d, J = 15,5 Hz, 1H), 4,35 (d, J = 3,8 Hz, 1H) 4,25 (br s, 1H), 4,02-4,07 (m, 1H), 4,01-4,13 (m, 2H), 3,88-3,99 (m, 2H).19F RMN (376 MHz, DMSO-d6 com uma gota de D2O): δ ppm -203,83. 31P RMN (162 MHz, DMSO-d6 com uma gota de D2O): δ ppm 55,73, -2,66.

[0501]Seguindo o mesmo procedimento para a preparação do Exemplo 10a, a reação do Isômero 2 de (1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-17-(2-amino-6-oxo- 6,9-diidro-1H-purin-9-il)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-12-hidroxi-3-sulfanil- 2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3À5,12À5-difosfatricido[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona (Intermediário 9b, 60 mg, 0,35 mmol) produziu o composto do título (Exemplo 10b, 7 mg) como um sal de bisamônio como um diastereômero único, sendo a estereoquímica exata no centro de fósforo indeterminada. O produto foi um sólido branco. LCMS m/z 693,0 (M+H), tRET = 0,37 min.1H RMN (400 MHz, DMSO-d6 com uma gota de D2O): δ ppm 8,50 (br s, 1 H), H) 8,22 (br s, 1 H), 7,94 (br s, 1H), 6,35 (d, J = 14 Hz, 1H), 5,87 (d, J = 7,86 Hz, 1H), 5,54-5,67 (m, 1H), 4,98 (br, J = 15,5 Hz, 1H), 4,39 (br s, 1H), 4,33 (d, J = 6,84 Hz, 1 H), 4,24 (br s, 1H), 4,13 (br s, 1H), 4,00-4,10 (m, 2H), 3,89-3,98 (m, 2H). 19F RMN (376 MHz, DMSO-d6 com uma gota de D2O): δ ppm -205,00. 31P RMN (162 MHz, DMSO-d6 com uma gota de D2O): δ ppm 49,15, -2,90.

[0502]Exemplos 11a e 11b - Compostos 27a e 27b (1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-17-(2-amino-6-oxo-6,9-diidro-1H-purin- 9-il)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-18-hidroxi-3,12-dissulfanil-2,4,7,11,13,16- hexaoxa-3À5,12À5-difosfatricido[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona, sal de bisamônio27a -Isômero 1 27b -Isômero 2

[0503]Intermediário 10: N-{9-[(1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-18-[(terc- butildimetilsilil)oxi]-3-(2-cianoetoxi)-9-fluoro-17-[2-(2-metilpropanamido)-6-oxo-6,9- diidro-1H-purin-9-il]-12-oxo-12-sulfanil-3-sulfanilideno-2,4,7,11,13,16-hexaoxa- 3À5,12À5-difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-8-il]-9H-purin-6-il}benzamida

[0504]A uma solução bruta de hidrogenofosfonato de (2R, 5R)-5-(6- benzamido-9H-purin-9-il)-2-((((((2R,5R)-4 -((terc-butildimetilsilil)oxi)-5-(hidroximetil)-2- (2-isobutiramido-6-oxo-1H-purin-9(6H)-il)tetrahidrofuran-3-il)oxi)(2-cianoetoxi) fosforotioil)oxi)metil)-4-fluorotetrahidrofuran-3-ila (Intermediário 7, 2,58 g, 2,49 mmol) em piridina (50 mL) adicionou-se 2-óxido de 2-cloro-5,5-dimetil-1,3,2-dioxafosfinano (DMOCP)(1,70 g, 9,21 mmol), e a mistura foi agitada sob nitrogênio à temperatura ambiente durante 30 minutos. Em seguida, a reação foi inibida com água (1,6 mL, 89 mmol), seguido pela adição de 3H-benzo[c][1,2]ditiol-3-ona (660 mg, 3,92 mmol). A mistura foi agitada durante 10 minutos, em seguida, vertida em um béquer contendo água (350 ml) e bicarbonato de sódio (NaHCO3)(10 g, 119 mmol). A pasta amarela foi agitada durante 10 minutos, em seguida, transferida para um funil de separação. O produto foi extraído com 1: 1 éter dietílico: EtOAc (2 x 300 mL). Os extratos combinados foram secos sobre sulfato de sódio, filtrados, e concentrados a vácuo. O material bruto foi purificado por cromatografia sobre sílica (100 gramas de coluna) eluindo-se com 0-10% de MeOH/ DCM, em seguida, mantendo a 10% de MeOH / DCM. As frações desejadas foram combinadas e concentradas para se obter o composto do título impuro (1,1 g) como um sólido castanho-amarelado. Dois isômeros principais aparentemente fazem parte de ~ 77% da mistura pela LCMS. LCMS m/z 1050,1 (M+H), tRET = 1,09 e 1,20 min, respectivamente.

[0505]Intermediário 11: (1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-17-(2-amino-6- oxo-6,9-diidro-1H-purin-9-il)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-18-[(terc-butildimetilsilil)oxi]-9- fluoro-3,12-disulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3X5,12X5- difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona

[0506]N-{9-[(1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-18-[(terc-butildimetilsilil)oxi]-3-(2-cianoetoxi)-9-fluoro-17-[2-(2-metilpropanamido)-6-oxo-6,9- diidro-1H-purin-9-il]-12-oxo-12-sulfanil-3-sulfanilideno-2,4,7,11,13,16-hexaoxa- 3X5,12X5-difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-8-il]-9H-purin-6-il}benzamida impure (Intermediário 10, 0,77 g, 0,73 mmol) foi agitada em metanamina (33% por peso em EtOH)(10,0 mL, 80 mmol) sob nitrogênio à temperatura ambiente durante 2 horas. O LCMS bruto indicou 4 isômeros ((M+H)+ = 823) com tRET = 0,74, 0,83, 0,90 e 0,94 min, em uma proporção bruta de 20:3: 13:19 (mas a proporção poderia ser significativamente afetada por possíveis sobreposições com os picos de impurezas).Os compostos voláteis foram removidos a vácuo. O material bruto foi purificado através de HPLC de fase reversa, utilizando-se um gradiente de 10-60% de ACN: H2O (0,1% de TFA). Dois isômeros principais foram separados. • Isômero 1 do composto do título (120 mg, 64% de pureza por LCMS juntamente com 8% de produto desprotegido de TBS) como um sólido escuro, sendo a estereoquímica exata em dois centros de fósforo indeterminada. LCMS m/z 823,1 (M+H). tRET = 0,74 min. • Isômero 2 do composto do título (130 mg, 50% de pureza por LCMS juntamente com 18% de produto desprotegido de TBS) como um sólido escuro, com a estereoquímica exata em dois centros de fósforo indeterminada. LCMS m/z 823,1 (M+H). tRET = 0,96-1,00 min como um pico largo com prolongamento de pico.

[0507]Exemplos 11a e 11b: (1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-17-(2- amino-6-oxo-6,9-diidro-1H-purin-9-il)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-9-fluoro-18-hidroxi- 3,12-dissulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3X5,12X5- difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona, sal de bisamônio

[0508]A uma suspensão do Isômero 1 do Intermediário 11, (1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-17-(2-amino-6-oxo-6,9-diidro-1H-purin-9-il)-8-(6-amino-9H- purin-9-il)-18-[(terc-butildimetilsilil)oxi]-9-fluoro-3,12-disulfanil-2,4,7,11,13,16- hexaoxa-3À5,12À5-difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona (120 mg, 0,146 mmol), em piridina (2 mL) e trietilamina (2 mL) a 50 °C adicionou-se triidrofluoreto de trietilamina (700 μL, 4,30 mmol) e a mistura foi agitada e aquecida a 50 ° C durante 4 horas. A LCMS indicou que algum material de partida ainda não havia sido consumido. A mistura reacional foi deixada em agitação durante 16 horas à temperatura ambiente. Em seguida, adicionou-se acetona (~ 25 mL) e o sólido foi precipitado. Este foi deixado em agitação à temperatura ambiente durante ~ 30 minutos, filtrado e enxaguado com acetona. O sólido filtrado não continha qualquer produto desejado, conforme determinado pela LCMS, e foi descartado. O filtrado, contendo o produto desejado, foi concentrado a vácuo e adicionou-se tolueno para remover qualquer piridina adicional restante. O resíduo foi purificado através de HPLC de fase reversa, utilizando-se um gradiente de 0-10% de ACN: H2O (0,1% de NH4OH), para se obter o produto que não era muito puro e parecia estar contaminado com trifluoroacetato. Assim, o sólido foi absorvido em ~ 2 mL de água e adicionou várias gotas de NH4OH aquoso a 30%. Foi purificado adicionalmente através de HPLC de fase reversa, utilizando-se um gradiente de 0-10% de ACN: H2O (0,1% de NH4OH), para se obter o composto do título (Exemplo 11a, 13 mg) como um sal de bisamônio como um diastereômero único, sendo a estereoquímica exata em dois centros de fósforo indeterminada. O produto foi um sólido branco. LCMS m/z 708,9 (M+H). tRET = 0,17 min. 1H RMN (600MHz, DMSO-d6 com uma gota de D2O): δ ppm 8,31 (s, 1H), 8,21 (s, 1H), 8,11 (br s, 1H), 6,25 (dd, J = 15,1, 2,6 Hz, 1H), 5,84 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 5,68 (d, J = 51,7 Hz, 1H), 5,27-5,37 (m, 1H), 5,16-5,25 (m, 1H), 4,32 (d, J = 4,2 Hz, 1H), 4,26 (br s, 1H), 4,01-4,17 (m, 3H), 3,90-3,96 (m, 1H), 3,81 (br d, J = 11,7 Hz, 1H). 19F RMN (376 MHz, DMSO-d6 com uma gota de D2O) δ ppm -205,30 (br). 31P RMN (162 MHz, DMSO-d6 com uma gota de D2O) δ ppm 55,77, 54,01.

[0509]Seguindo o mesmo procedimento para a preparação do Exemplo 11a, exceto que a primeira purificação usou um gradiente de 0-20% de ACN: H2O (0,1% de NH4OH), a reação do Isômero 2 do Intermediário 11, (1R, 6R, 8R, 9R, 10R, 15R, 17R, 18R)-17-(2-amino-6-oxo-6,9-diidro-1H-purin-9-il)-8-(6-amino-9H-purin-9-il)-18- [(terc-butildimetilsilil)oxi]-9-fluoro-3,12-disulfanil-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3 X5,12X5- difosfatriciclo[13.2.1.06,10]octadecan-3,12-diona (130 mg, 0,158 mmol), produziu o composto do título (Exemplo 11b, 16 mg) na forma de um sal de bisamônio como um único diastereoisômero, sendo a estereoquímica exata em dois centros de fósforo indeterminada. O produto foi um sólido branco. LCMS m/z 708,9 (M+H). tRET = 0,42 min.1H RMN (600MHz, DMSO-d6 com uma gota de D2O): δ ppm 8,22 (br s, 1H), 8,18 (s, 1H), 8,05 (br s, 1H), 6,27 (dd, J = 15,3, 2,1 Hz, 1H), 5,82 (br d, J = 8,3 Hz, 1H), 5,60 (d, J = 49,9 Hz, 1H), 5,27-5,46 (m, 1H), 5,12-5,27 (m, 1H), 4,42-4,59 (m, 1H), 4,30 (br s, 1H), 4,14 (br d, J = 2,3 Hz, 1H), 4,11 (br d, J = 5,7 Hz, 2H), 4,06 (br d, J = 9,1 Hz, 1H), 3,82 (br d, J = 11,0 Hz, 1H). 19F RMN (376 MHz, DMSO-d6 com uma gota de D2O) δ ppm -205,05.31P RMN (162 MHz, DMSO-d6 com uma gota de D2O) δ ppm 53,85, 47,48.

ABREVIATURAS

[0510]A lista seguinte fornece definições de certas abreviaturas utilizadas aqui. Compreende-se que a lista não é exaustiva, mas o significado das abreviaturas que não estão definidas a seguir serão prontamente entendidas pelos técnicos no assunto. DCMDiclorometano DMFN,N-Dimetilformamida DMSODimetilssulfóxido DMTrDimetoxitritil THFTetrahidrofurano EtOAcAcetato de etila MeOHMetanol EtOHEtanol MeCNAcetonitrila HClÁcido clorídrico HPLCCromatografia líquida de alta eficiência MDAPHPLC Autopreparativa dirigida por massa SPEExtração em fase sólida MeOHMetanol TBDMSterc-Butildimetilsilil TBMEterc-Butil metil éter TFAÁcido trifluoroacético DIPEAN,N-diisopropiletilamina

NOMENCLATURA

[0511]Os compostos foram nomeados a partir da estrutura usando a ferramenta de nomenclatura da Chem Draw (CambridgeSoft) ou Marvin Sketch (ChemAxon).

[0512]Exemplo 12 -Composição injetável

[0513]Uma forma injetável para administração da presente invenção é produzida pela agitação de 1,7% por peso do Composto # 2 em uma solução salina a 0,9%.

[0514]Ensaio

[0515]Os compostos são testados em um ensaio de ligação STING semelhante ao descrito por Li et al. (Nature Chemical Biology, 10, 1043-1048, (2014)).

[0516]Atividade biológica

[0517]Os compostos da invenção foram testados em um ensaio de ligação STING semelhante ao descrito em Li et al. (Nature Chemical Biology, 10, 1043-1048, (2014)). Os compostos da invenção foram testados em um ensaio de ligação de Transferência de Energia de Ressonância por Fluorescência (FRET). Li et al. utilizaram um ensaio de ligação - Ensaio de Proximidade de Cintilação (SPA).

[0518]A atividade de STING para os compostos da invenção é apresentada na Tabela 1 abaixo.Tabela 1

[0519]Enquanto as formas de realização preferenciais da invenção são ilustradas pela descrição anterior, deve-se entender que a invenção não está limitada às instruções precisas divulgadas aqui, e que o direito a todas as modificações compreendidas pelo escopo das reivindicações seguintes está reservado.

Claims (25)

1. Composto CARACTERIZADO pelo fato de que apresenta a Fórmula (IV): em que: X31 é S; X32 é O; R31 é OH e R32 é NH2 ou R31 é NH2 e R32 é H; R33 é OH e R34 é NH2 ou R33 é NH2 e R34 é H; R35 é selecionado a partir de: F, OH e OC(O)R37; R36 é selecionado a partir de: F, OH e OC(O)R37; desde que: pelo menos um de R35 e R36 seja F; e R38 e R39 são selecionados independentemente a partir de: H, CH2OC(O)R37, CH2OCO2R37, CH2CH2SC(O)R37 e CH2CH2SSCH2R37; em que R37 é selecionado a partir de: arila, heteroarila, heterocicloalquila, cicloalquila, alquila C1-20 e alquila C1-20 substituída com um a cinco substituintes selecionados independentemente a partir de: arila, cicloalquila, hidróxi e F; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, CARACTERIZADO pelo fato de que: R35 é selecionado a partir de: F e OH; e R36 é selecionado a partir de: F e OH; desde que: pelo menos um de R35 e R36 seja F.

3. Composto, de acordo com a reivindicação 1, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, CARACTERIZADO pelo fato de que: R35 é OH; e R36 é F.

4. Composto, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que é selecionado a partir de: ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; um sal farmaceuticamente aceitável de: um sal farmaceuticamente aceitável de: um sal farmaceuticamente aceitável de: ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; e ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

5. Composição farmacêutica CARACTERIZADA pelo fato de que compreende um composto, como definido na reivindicação 1, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

6. Uso de um composto de fórmula (IV), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, como definido na reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que é para a fabricação de um medicamento para o tratamento de um estado de doença selecionado a partir de: inflamação, doenças alérgicas, doenças autoimunes, vírus da imunodeficiência humana (HIV), doenças infecciosas, câncer e síndromes pré-cancerosas em um mamífero em necessidade do mesmo.

7. Uso, de acordo com a reivindicação 6, CARACTERIZADO pelo fato de que o mamífero é um humano.

8. Composição imunogênica CARACTERIZADA pelo fato de que compreende um antígeno ou composição antigênica e um composto, como definido na reivindicação 1, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

9. Uso de um composto, ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, como definido na reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que é para a fabricação de um medicamento para o tratamento de uma doença selecionada a partir de: HBV, HCV, gripe, verrugas cutâneas, esclerose múltipla e inflamação alérgica em um humano em necessidade do mesmo.

10. Composto, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que apresenta a seguinte estrutura:ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

11. Composto, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que é:

12. Sal farmaceuticamente aceitável CARACTERIZADO pelo fato de que é de um composto, como definido na reivindicação 10, que é:

13. Composto, de acordo com a reivindicação 10, CARACTERIZADO pelo fato de que é:ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

14. Composto, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que é:

15. Sal farmaceuticamente aceitável CARACTERIZADO pelo fato de que é de um composto, como definido na reivindicação 10, que é:

16. Composto, de acordo com a reivindicação 10, CARACTERIZADO pelo fato de que é:ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

17. Composto, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que é:

18. Sal farmaceuticamente aceitável CARACTERIZADO pelo fato de que é de um composto, como definido na reivindicação 10, que é:

19. Composição farmacêutica CARACTERIZADA pelo fato de que compreende um composto, como definido na reivindicação 10, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

20. Uso de um composto, ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, como definido na reivindicação 10, CARACTERIZADO pelo fato de que é para a fabricação de um medicamento para o tratamento de um estado de doença selecionado a partir de: inflamação, doenças alérgicas, doenças autoimunes, vírus da imunodeficiência humana (HIV), doenças infecciosas, câncer e síndromes pré- cancerosas em um mamífero em necessidade do mesmo.

21. Uso, de acordo com a reivindicação 20, CARACTERIZADO pelo fato que o mamífero é um humano.

22. Composição imunogênica CARACTERIZADA pelo fato de que compreende um antígeno ou composição antigênica e um composto, como definido na reivindicação 10, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

23. Uso de um composto, ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, como definido na reivindicação 10, CARACTERIZADO pelo fato de que é para a fabricação de um medicamento para o tratamento de uma doença selecionada a partir de: HBV, HCV, gripe, verrugas cutâneas, esclerose múltipla e inflamação alérgica, em um humano em necessidade do mesmo.

24. Composto, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que é selecionado a partir de:ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; e ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

25. Composto, de acordo com a reivindicação 1, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, CARACTERIZADO pelo fato de que R38 e R39 são H.