NO315750B1 - Resolusjon av arylalkansyrer - Google Patents
Resolusjon av arylalkansyrer Download PDFInfo
- Publication number
- NO315750B1 NO315750B1 NO19940570A NO940570A NO315750B1 NO 315750 B1 NO315750 B1 NO 315750B1 NO 19940570 A NO19940570 A NO 19940570A NO 940570 A NO940570 A NO 940570A NO 315750 B1 NO315750 B1 NO 315750B1
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- ketoprofen
- biotransformation
- enantiomer
- ester
- acid
- Prior art date
Links
- 239000002253 acid Substances 0.000 title claims description 13
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 title description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 13
- DKYWVDODHFEZIM-NSHDSACASA-N dexketoprofen Chemical compound OC(=O)[C@@H](C)C1=CC=CC(C(=O)C=2C=CC=CC=2)=C1 DKYWVDODHFEZIM-NSHDSACASA-N 0.000 claims description 12
- DKYWVDODHFEZIM-UHFFFAOYSA-N ketoprofen Chemical compound OC(=O)C(C)C1=CC=CC(C(=O)C=2C=CC=CC=2)=C1 DKYWVDODHFEZIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 8
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 8
- 239000011942 biocatalyst Substances 0.000 claims description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 6
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 241000223230 Trichosporon Species 0.000 claims description 2
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 2
- 125000005907 alkyl ester group Chemical group 0.000 claims 3
- DKYWVDODHFEZIM-LLVKDONJSA-N (2r)-2-(3-benzoylphenyl)propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](C)C1=CC=CC(C(=O)C=2C=CC=CC=2)=C1 DKYWVDODHFEZIM-LLVKDONJSA-N 0.000 claims 1
- 125000004494 ethyl ester group Chemical group 0.000 claims 1
- 125000004492 methyl ester group Chemical group 0.000 claims 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims 1
- 230000036983 biotransformation Effects 0.000 description 22
- 229960002783 dexketoprofen Drugs 0.000 description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 9
- 229960000991 ketoprofen Drugs 0.000 description 8
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 8
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 6
- PXTPHOZOKYFBLV-UHFFFAOYSA-N 2-(3-benzoylphenyl)-2-methylbutanoic acid Chemical compound CCC(C)(C(O)=O)C1=CC=CC(C(=O)C=2C=CC=CC=2)=C1 PXTPHOZOKYFBLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 241000223231 Trichosporon beigelii Species 0.000 description 2
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- CQSMNXCTDMLMLM-UHFFFAOYSA-N ethyl 2-(3-benzoylphenyl)propanoate Chemical compound CCOC(=O)C(C)C1=CC=CC(C(=O)C=2C=CC=CC=2)=C1 CQSMNXCTDMLMLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 2
- -1 ketoprofen ester Chemical class 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 2
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 2
- HGRGFZWEVKNHJT-UHFFFAOYSA-N 2-(3-benzoylphenyl)-2-methylpropanoic acid Chemical compound OC(=O)C(C)(C)C1=CC=CC(C(=O)C=2C=CC=CC=2)=C1 HGRGFZWEVKNHJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000178951 Endomyces Species 0.000 description 1
- HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N Ibuprofen Chemical compound CC(C)CC1=CC=C(C(C)C(O)=O)C=C1 HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CMWTZPSULFXXJA-UHFFFAOYSA-N Naproxen Natural products C1=C(C(C)C(O)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CMWTZPSULFXXJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009603 aerobic growth Effects 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 150000007860 aryl ester derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000002210 biocatalytic effect Effects 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000010931 ester hydrolysis Methods 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- 229960001680 ibuprofen Drugs 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L magnesium sulfate heptahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.[Mg+2].[O-]S([O-])(=O)=O WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940061634 magnesium sulfate heptahydrate Drugs 0.000 description 1
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 229960002009 naproxen Drugs 0.000 description 1
- CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-N naproxen Chemical compound C1=C([C@H](C)C(O)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- IERBVBGUKBHALB-UHFFFAOYSA-K tripotassium;phosphate;dihydrate Chemical compound O.O.[K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O IERBVBGUKBHALB-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
- 229910000368 zinc sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
- C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
- C07D213/54—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
- C07D213/55—Acids; Esters
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
- C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
- C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/10—Nitrogen as only ring hetero atom
- C12P17/12—Nitrogen as only ring hetero atom containing a six-membered hetero ring
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P41/00—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
- C12P41/003—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions
- C12P41/005—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions by esterification of carboxylic acid groups in the enantiomers or the inverse reaction
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/40—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carboxyl group including Peroxycarboxylic acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/40—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carboxyl group including Peroxycarboxylic acids
- C12P7/44—Polycarboxylic acids
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Description
Teknisk område
Denne oppfinnelse vedrører fremgangsmåte ved fremstilling av hovedsakelig én enantiomer av en kiral 2-arylalkansyre fra en blanding av enantiomerer av en arylester av 2-arylalkansyren.
Bakgrunn for oppfinnelsen
Mange farmasøytisk aktive forbindelser fremstilt ved kjemisk syntese erholdes og selges som blandinger av stereoisomerer. Imidlertid er det ofte slik at bare én av disse stereoisomerer er farmasøytisk aktiv. Den kontaminerende enantiomer har ofte meget liten aktivitet, hvis den har noen i det hele tatt, eller i noen tilfeller har den uønskede bivirkninger og viser toksisitet.
Undersøkelser av et antall forskere har vist at den anti-inflammatoriske aktivitet av 2-arylalkansyrene naproxen og ibuprofen bevirkes av (S)-enantiomeren. Det samme er tilfelle for ketoprofen som for tiden fremstilles og selges som racemat.
Arylalkansyrer kan oppløses enantiomert ved biotransformasjon i henhold til følgende reaksjonsskjema:
hvor R' er en alkylgruppe, Ar er en aromatisk rest, og R er f.eks. en alifatisk rest med 1-4 karbonatomer.
Eksempler på forskjellige biokatalysatorer anvendt i opp-løsningsprosessene er brakt for dagen i EP-A-0407033, EP-A- 0227078, EP-A-0289804, EP-A-0197474 og i Agricultural and Biol. Chem. vol. 45, nr. 6,1981, side 1389-1392.
Et spesiell formål med foreliggende oppfinnelse er å til-veiebringe en økonomisk produksjonsmåte for optisk rent (S)-ketoprofen.
Oppsummering av oppfinnelsen
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer en fremgangsmåte for resolusjon av (S)-ketoprofen fra en racemisk blanding som angitt i krav 1. Denne metode innebærer biokatalytisk hydrolyse av en ester av racemisk ketoprofen for å gi en biotransformasjonsløsning inneholdende ketoprofensyre som er rik på hovedsakelig én enantiomer, og ketoprofenester som er rik på hovedsakelig den andre enantiomer. Forutsatt at syreproduktet av biotransformasjonen er tilstrekkelig rik på den ønskede enantiomer, kan ytterligere forbedring av den optiske renhet lett og økonomisk oppnås med kjemiske standardmetoder ved å danne et salt med et kiralt amin med høy optisk renhet, etterfulgt av krystallisasjon fra en oppløsning. Den gjenværende ketoprofenester fra biotransformasjonen kan lett renses, kjemisk racemiseres og resir-kuleres for anvendelse i videre biotransformasjoner, for å minimalisere råmaterialkostnadene.
Beskrivelse av oppfinnelsen
Foreliggende oppfinnelse er basert på oppdagelsen av en biokatalysator som er egnet for anvendelse i biotransformasjonen beskrevet ovenfor: Det er blitt identifisert en mikrobe (ENZA-I3) som er ytterst nyttig når det gjelder å utføre den ønskede resolusjon. Denne organisme ble opprin-nelig isolert ved å undersøke prøver fra renseanlegg for vekst på etanol som eneste karbonkilde. Påfølgende isola-sjon av organismen på plater inneholdende etylketoprofen viste at etter veksten var det utstrakt klarering av det vannuløselige ketoprofen rundt ENZA-13-koloniene {indi-kerende potensiell esterhydrolyse). Påfølgende utsortering i flytende media viste at ENZA-I3 var betraktelig mer aktiv når det gjalt å hydrolysere etylketoprofen enn andre isolater under den flytende utsortering.
Denne stamme har vist seg å ha et antall karakteristikker som er fordelaktige for resolusjonen av (S)-ketoprofen fra den racemiske ketoprofenester, nemlig: (a) Den hydrolyserer kortkjedede ketoprofenestere meget hurtig. (b) Den produserer (S)-ketoprofensyre fra racemisk etylketoprofen med meget høy selektivitet, slik at ved lave konsentrasjoner kan det oppnås ketoprofen med mer enn 95 % renhet. Ved omdannelser som nærmer seg 50 % {40-50 %) blir dette redusert til 90 % renhet. Denne selektivitet erholdes uten behovet for å rense ut kontaminerende aktiviteter (som kan være dyre) eller over-uttrykke aktiviteten av interesse ved kloning. (c) Ved å forandre substratet fra etyl- til metylketopro-fen er det mulig å forandre selektiviteten hos biokatalysatoren således at (R)-ketoprofensyre fortrinnsvis akkumu-leres istedenfor (S)-enantiomeren. Ved å ta biotransformasjonen til mer enn 50 % kan således (S)-ketoprofen produ-seres som metylesteren. (d) Organismen vokser hurtig ved omgivelsestemperatur med en fordoblingstid på 1,5-2 timer, hvilket gjør det mulig å fremstille biokatalysatoren enkelt og økonomisk.
Den isolerte stamme er blitt identifisert av Centralbureau Voor Schimmelcultures (CBS) i Nederland som Trichosporon laibacchii (Windisch) som også klassifiseres som Endomyces laibacchii. Flere alternative stammer av denne art er offentlig tilgjengelige fra CBS. Disse stammer, f.eks. CBS 5791, 5790, 5381 og 2495, er blitt erholdt og testet sammen med isolatet ENZA-13. Disse tester viser at noen av disse stammer er nesten like gode som ENZA-13 når det gjelder å utføre biotransformasjonen. I CBS-katalogen (32. utgave) klassifiseres disse stammer som Trichosporon beigelii, men de er imidlertid blitt omdøpt av CBS til Bndomyces laibacchii. Stammer av T. beigelii som er blitt testet, har vist seg å ha lignende selektivitet som ENZA-I3, men de er ikke like aktive.
ENZA-13 er blitt deponert ved International Mycological Institute, Kew, UK, den 20: august 1991, under bestemmelse-ne i Budapest-traktaten, hvor den har fått nummeret 348917.
Ytterligere karakteristikker hos den deponerte mikrobe ENZA-13 er gitt nedenfor:
Anvendelse av nitrogenkilde:
Utseende:Kolonier -kremfarvede, membranøse
Filamenter -velutviklede pseudo-hyfer/septae hyphae arthocandida
Asei -ingen
Teliospores/basidia - ingen
Følgende eksempler illustrerer oppfinnelsen. Følgende medier ble anvendt i eksemplene 1 til 5 (hvor (S)-ketoprofen ble fremstilt):
♦Ivanhoe Chemical Company, IL, USA
Alle medier ble innstilt til pH 6,5 med natriumhydroksyd før autoklaveringen. Alle medier ble varmesterilisert ved 121°C i mellom 20 og 40 minutter før inokkulasjonen. Gluko-sen ble sterilisert separat fra resten av mediet som 50 % løsning.
Biotransformasjonsblandingen er som følger:
Ketoprofen-etylester ble tilsatt til biotransformasjonsblandingen for å gi en sluttkonsentrasjon på 50 g/l etter tilsetningen av inokkulatet. Biotransformasjonsmediet ble varmesterilisert ved 121°C i 20-40 minutter; ketoprofen-etylesteren ble varmesterilisert separat.
Den anvendte sporelementløsning var som følger:
Eksempel 1
Celler (ENZA-13) ble inokkulert i YM-agarplater (Difco<®>) og inkubert ved 23°C i 2 dager. En enkelt koloni ble deretter overført til 75 ml så-medium i en 500 ml rystekolbe. Denne fikk deretter vokse aerobt ved 23°C i 24 timer. Kulturen ble da overført til en 2,8 1 fermenter inneholdende 1,5 1 vekstmedium ved 23°C. Veksten fikk fortsette i 10 timer med tilstrekkelig gjennomlufting og omrøring til å opprettholde aerobe betingelser. 150 ml av denne kultur ble deretter overført til 1,35 1 biotransformasjonsmedium i en 2,8 1 beholder. Under biotransformasjonen ble en omrøring på 1200 rpm og en gjennomlufting på 0,5 wm opprettholdt. Temperaturen var regulert til 23°C. En prøve tatt 20 timer etter starten viste en ketoprofen-konsentrasjon på 7 g/l med en renhet på 98 % (S)-ketoprofen. En prøve tatt 73 timer etter starten av biotransformasjonen viste en ketoprofen-konsentrasjon på 23,3 g/l med en renhet på 94 % (S)-ketoprofen.
Eksempel 2
En lignende metode som beskrevet 1 eksempel 1 ble anvendt, men i større skala. Cellene ble inokkulert i YM-agarplater (Difco<®>) og inkubert i 2 dager. Enkeltkolonier ble deretter hver overført til fire 1 1 koniske kolber inneholdende 250 ml så-medium. Etter 1 døgns vekst ble innholdet i alle kolber overført til en 15 1 fermenter inneholdende 9 1 vekstmedium. Etter 10 timers aerob vekst ble 5 1 celleløs-ning overført til en75 1 beholder inneholdende 45 1 biotransf ormas jonsmedium for å starte biotransformasjonen. En luftstrøm på 0,2 wm og en omrøringshastighet på 500 rpm ble anvendt for å opprettholde aerobe betingelser og sikre god blanding. En analyse av en prøve tatt 71 timer etter starten av biotransformasjonen viste at 17 g/l ketoprofen var akkumulert med en renhet på 93 % til fordel for (S)-enantiomeren.
Eksempel 3
Kulturer med forskjellige stammer, tilgjengelige fra CBS og vist i følgende tabell, ble overført fra friske YM-agarplater til 250 ml kolber inneholdende 25 ml vekstmedium uten glukose. Etter 24 timers vekst ble 5,0 ml av hver kultur overført til 250 ml rystekolber inneholdende 20 ml biotransformasjonsmedia. Prøver ble tatt etter rystning ved 23°C i 72 timer. Resultatene er angitt i tabellen nedenfor:
<*>Vanskelig å bestemme kvantitativt pga lave konsentrasjoner, men selektivitet for (S)-enantiomeren (i større eller mindre grad) ble observert for stammene.
Eksempel 4. Virkningen av temperaturen
Undersøkelser viser at virkningen av biokatalysatoren er den samme under biotransf ormas j onen ved 23°C og 26°C. Ved 20°C er biotransformasjonshastigheten den samme som ved 23°C, men biokatalysatorens enantioselektivitet synker slik at i en standard biotransformasjon (eksempel 1) er syrepro-dukts renhet bare 88 % (S)-ketoprofen etter 70 timer og ikke 93-94 %. Ved 30°C faller hastigheten for katalysen med ca 40-50 %, og enantioselektiviteten er heller ikke god.
Eksempel 5. Virkningen av pH
Aktivitet iakttas mellom pH 4,5 og 7,5 (og nesten sikkert høyere, men det er ikke testet). Selektiviteten av biokatalysatoren avtar signifikant under pH 4,5. Den optimale pH-verdi antas å ligge mellom 6,5 og 7,5.
Under anvendelse av standardmetoden (eksempel 1) med pH innstilt til 4,5 hadde en prøve etter 66 timer 8 g/l (renhet 91 % (S)-ketoprofen); ved pH 6,5 etter 66 timer hadde prøven 24 g/l (renhet 94 % (S)-ketoprofen); ved pH 7,5 etter 66 timer hadde prøven 23 g/l (renhet 80 % (S)-ketoprofen) .
Eksempel 6. Kjedelengdens virkning
Cellene ble dyrket i et medium inneholdende 25 g/l gjær-ekstrakt, 10 g/l kaliumdihydratfosfat, 0,5 g/l magnesium-sulfatheptahydrat, 2 g/l ammoniumsulfat og 1 ml/l spor-elementløsning. (CaCl22H20 - 53 g/l, FeSCv7H20 - 2 g/l, MnS04H20 - 100 mg/l, ZnS04'7H30 - 200 mg/l, CuS04- 40 mg/l, CoCl2H20 - 60 mg/l, NaMo04- 40 mg/l, H3B03- 30 mg/l) , med pH innstilt til 6,5 med natriumhydroksyd. Etter vekst over natten ble kolbene overført ved 20 % til 250 ml rystende kolber inneholdende 25 ml av samme medium, men med forskjellige ketoprofenestere tilsatt til en sluttkonsentrasjon på 10 mg/l. Hastigheten av biotransformasjonen og den enantiomere renhet av ketoprofenproduktet ble deretter målt. Resultatene var:
Claims (5)
1. Fremgangsmåte ved fremstilling av hovedsakelig én enantiomer av en kiral 2-arylalkansyre fra en blanding av enantiomerer av en alkylester av 2-arylalkansyren med følgende formel:
hvor R' er en alkylgruppe, Ar er en aromatisk rest, og R er en alifatisk gruppe med 1-4 karbonatomer;karakterisert vedat fremgangsmåte omfat-ter å anvende som en biokatalysator mikroorganismen Trichosporon ENZA 1-3, IMI 348917, ved en temperatur fra 20 til 30°C.
2. Fremgangsmåte i henhold til krav 1, hvor den kirale 2-arylalkansyre er 2-(3-benzoylfenyl)propionsyre.
3. Fremgangsmåte i henhold til krav 2, hvor alkylesteren er en metylester, og enantiomeren som hovedsakelig dannes er (R)-2-(3-benzoylfenyl)propionsyre.
4. Fremgangsmåte i henhold til krav 2, hvor alkylesteren er en etylester, og enantiomeren som hovedsakelig dannes er (S)-2-(3-benzoylfenyl)propionsyre.
5. Fremgangsmåte i henhold til et av de foregående krav, hvilken fremgangsmåte utføres ved en pH på 4,5 til 7,5.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB919118149A GB9118149D0 (en) | 1991-08-22 | 1991-08-22 | Araylalkanoic acid resolution |
| PCT/EP1992/001892 WO1993004189A1 (en) | 1991-08-22 | 1992-08-19 | Arylalkanoic acid resolution |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO940570L NO940570L (no) | 1994-02-18 |
| NO940570D0 NO940570D0 (no) | 1994-02-18 |
| NO315750B1 true NO315750B1 (no) | 2003-10-20 |
Family
ID=10700381
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO19940570A NO315750B1 (no) | 1991-08-22 | 1994-02-18 | Resolusjon av arylalkansyrer |
Country Status (22)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5516690A (no) |
| EP (1) | EP0599967B1 (no) |
| JP (1) | JP3174328B2 (no) |
| KR (1) | KR100240696B1 (no) |
| AT (1) | ATE161053T1 (no) |
| AU (1) | AU662556B2 (no) |
| BG (1) | BG62056B1 (no) |
| CA (1) | CA2116003C (no) |
| CZ (1) | CZ283141B6 (no) |
| DE (2) | DE599967T1 (no) |
| DK (1) | DK0599967T3 (no) |
| ES (1) | ES2058047T3 (no) |
| FI (1) | FI103807B1 (no) |
| GB (1) | GB9118149D0 (no) |
| GR (2) | GR940300068T1 (no) |
| HU (1) | HU213748B (no) |
| NO (1) | NO315750B1 (no) |
| RO (1) | RO115970B1 (no) |
| RU (1) | RU2119955C1 (no) |
| SK (1) | SK280179B6 (no) |
| UA (1) | UA27817C2 (no) |
| WO (1) | WO1993004189A1 (no) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5912164A (en) * | 1993-03-03 | 1999-06-15 | Laboratorios Menarini S.A. | Stereoselective hydrolysis of chiral carboxylic acid esters using esterase from ophiostoma or ceratocystis |
| GB9304256D0 (en) * | 1993-03-03 | 1993-04-21 | Chiros Ltd | Arylalkanoic acid resolution |
| GB9304351D0 (en) * | 1993-03-03 | 1993-04-21 | Chiros Ltd | Arylalkanoic acid resolution and microorganisms for use therein |
| US6242243B1 (en) * | 1998-03-30 | 2001-06-05 | Council Of Scientific & Industrial Research | Trichosporon sp RRLY-15 (DSM 11829) and its use to prepare S(+)-6-methoxy-methyl-2-naphthalene acetic acid |
| US20030059903A1 (en) * | 2001-04-03 | 2003-03-27 | Degussa Ag | Process for the production of L-amino acids using strains of the family enterobacteriaceae that contain an attenuated aceA gene |
| US7223582B2 (en) * | 2002-01-17 | 2007-05-29 | Korea Research Institute Of Bioscience And Biotechnology | Esterase, its DNA, its overexpression and production of optically active aryl propionic acids using the same |
| US10632095B2 (en) * | 2013-12-16 | 2020-04-28 | Zoetis Services Llc | Long-acting ketoprofen compositions |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0197474B1 (en) * | 1985-04-01 | 1991-07-10 | Kanegafuchi Kagaku Kogyo Kabushiki Kaisha | Process for preparing optically active indoline-2-carboxylic acid |
| AU599944B2 (en) * | 1985-12-20 | 1990-08-02 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Process for preparing (S)-alpha-methylarylacetic acids |
| US5322791A (en) * | 1985-12-20 | 1994-06-21 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Process for preparing (S)-α-methylarylacetic acids |
| US4857469A (en) * | 1987-04-09 | 1989-08-15 | Toyo Jozo Co., Ltd. | Process for preparing optically active mercapto compound |
| US5108916A (en) * | 1989-06-05 | 1992-04-28 | Rhone-Poulenc Rorer, S.A. | Process for stereoselectively hydrolyzing, transesterifying or esterifying with immobilized isozyme of lipase from candida rugosa |
| WO1991013163A1 (en) * | 1990-02-26 | 1991-09-05 | Rhone-Poulenc Inc. | Stereospecific resolution by hydrolysis of esters of 2-arylpropionic acids by liver enzymes |
-
1991
- 1991-08-22 GB GB919118149A patent/GB9118149D0/en active Pending
-
1992
- 1992-08-19 EP EP92918204A patent/EP0599967B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-19 US US08/193,004 patent/US5516690A/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-19 HU HU9400462A patent/HU213748B/hu unknown
- 1992-08-19 DE DE0599967T patent/DE599967T1/de active Pending
- 1992-08-19 ES ES92918204T patent/ES2058047T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-19 RU RU94015601A patent/RU2119955C1/ru active
- 1992-08-19 KR KR1019940700492A patent/KR100240696B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1992-08-19 DK DK92918204T patent/DK0599967T3/da active
- 1992-08-19 RO RO94-00247A patent/RO115970B1/ro unknown
- 1992-08-19 AU AU24685/92A patent/AU662556B2/en not_active Expired
- 1992-08-19 DE DE69223516T patent/DE69223516T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-19 UA UA94005318A patent/UA27817C2/uk unknown
- 1992-08-19 JP JP51163292A patent/JP3174328B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-19 AT AT92918204T patent/ATE161053T1/de active
- 1992-08-19 CZ CZ94364A patent/CZ283141B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1992-08-19 SK SK176-94A patent/SK280179B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1992-08-19 WO PCT/EP1992/001892 patent/WO1993004189A1/en active IP Right Grant
- 1992-08-19 CA CA002116003A patent/CA2116003C/en not_active Expired - Lifetime
-
1994
- 1994-02-16 BG BG98484A patent/BG62056B1/bg unknown
- 1994-02-18 FI FI940792A patent/FI103807B1/fi not_active IP Right Cessation
- 1994-02-18 NO NO19940570A patent/NO315750B1/no not_active IP Right Cessation
- 1994-10-31 GR GR940300068T patent/GR940300068T1/el unknown
-
1998
- 1998-03-06 GR GR980400474T patent/GR3026303T3/el unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3717535B2 (ja) | 新規微生物およびＬ−α−アミノ酸の製法 | |
| EP0195717A2 (en) | Process for the biotechnological preparation of optically active alpha-arylalkanoic acids | |
| NO147570B (no) | Fremgangsmaate for fremstilling av d-fenylglycin ved enzymatisk omdannelse av d,l-fenylhydantoin | |
| Ushio et al. | Stereochemical control in microbial reduction 4. Effect of cultivation conditions on the reduction of β-keto esters by methylotrophic yeasts. | |
| DK165124B (da) | Fremgangsmaade til fremstilling af en 5-hydroxy-s541-macrolidforbindelse | |
| NO315750B1 (no) | Resolusjon av arylalkansyrer | |
| WO2017016199A1 (zh) | 一种沙链霉菌的用途及香兰素的生产方法 | |
| KR0136574B1 (ko) | 발효에 의한 2-(4-히드록시페녹시)프로피온산의 제조 방법 | |
| DK171744B1 (da) | Fremgangsmåde til fremstilling af pyrodruesyre | |
| JPH01104195A (ja) | ２−アリールオキシプロピオン酸の製造方法 | |
| JPH04234991A (ja) | 新規微生物 | |
| BE824987A (fr) | Procede pour la preparation de la beta-ergocriptine | |
| JP3679819B2 (ja) | （ｓ）−３−（２−チエニルチオ）ブタン酸の製造法 | |
| JPH02303499A (ja) | ハロゲノプロピオン酸エステルの酵素による鏡像異性選択的分離方法 | |
| FR2550549A1 (fr) | Nouvelle souche produisant de la clavine, procede pour sa preparation, ainsi qu'un procede microbiologique de production d'alcaloides de la clavine | |
| US6395535B1 (en) | Optical resolution of 4-halogeno-3-alkanoyloxy-butyronitrile | |
| WO1993011256A1 (fr) | Procede de production d'un norborneol presentant une activite optique | |
| WO2004005275A1 (en) | Fed batch solid state fermentation for the production of hmg-coa reductase inhibitors | |
| JPH0851996A (ja) | エナンチオマー純粋なラクタムの製法 | |
| WO1991002808A1 (en) | Preparation of d-malic acid or derivative | |
| JPH04141096A (ja) | Ｒ（―）―１，３―ブタンジオールの製造法 | |
| KR20010085642A (ko) | 미생물을 이용하여 광학적으로 활성인 3-히드록시피롤리딘유도체를 제조하는 방법 | |
| JPH07327692A (ja) | 光学活性β−ヒドロキシカルボン酸及びその対掌体エステルの製造方法 | |
| JPS63216487A (ja) | メバロン酸の製造方法 | |
| JPH09512169A (ja) | 微生物の存在下にカルボン酸を生物変換する方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MK1K | Patent expired |