NL8100292A - Zuur additiezout van m-amsa; samenstelling die dit zout bevat; werkwijze voor de bereiding van het zout en de samenstelling; farmaceutisch preparaat met anti-tumorwerking. - Google Patents

Description

V' 4 -1- * VO 1533

Zuur additiezout van m-AMSA; samenstelling die dit zout "bevat; -werkwijze voor de bereiding van bet zout en de samenstelling; farmaceutisch preparaat met anti-tumorwerking.

De uitvinding heeft betrekking op een nieuw zuur additiezout en een nieuwe samenstelling, die dit zout bevat, welke de voordelige anti-tumoreigenschappen van de bekende vrije base en bovendien verrassend hoge oplosbaarheid in water bezitten, waardoor de bereiding 5 van nuttige doseringsvormen voor intraveneuse toediening mogelijk wordt gemaakt.

Het acridinederivaat m-AMSA _/” 1+' — (9-acridinylaraino) -methaansulfon-m-anisidide_7 is beschreven door Cain, e.a. in Europ.J.Cancer 10, 539-5^9 (197*0 s waarbij gewezen is op een signi-10 ficante tumorwerkzaamheid in tumor systemen bij dieren. Sedertdien is de verbinding met veelbelovende eerste resultaten elinisch geevalueerd.

Wanneer een anti-tumormiddel, zoals m-AMSA voor elinisch gebruik bij de mens wordt toegepast, is ingezien, dat de oplosbaarheid van het middel vaak de faktor vormt, die de bepaling van de toedie-15 ningsweg en de dos erings vormen beheerst. Een in water oplosbaar materiaal kan bijv. in het algemeen intraveneus worden toegediend, terwijl een niet in water oplosbaar materiaal bewerkt is tot andere vormen van parenterale toediening, zoals intramusculair en subcutaan. Een therapeutisch middel met oplosbaarheid in water vergemakkelijkt ook be-20 reiding van orale en niet-intraveneuse parenterale doseringsvormen voor de toediening aan de mens. Het is derhalve beslist voordelig wanneer een therapeutisch middel in water oplosbaar is, in het bijzonder wanneer men in ogenschouw neemt, dat de meest direkte weg voor het realiseren van therapeutische bloedspiegels van een geneesmiddel in het 25 menselijk lichaam de intraveneuse toediening is.

De vrije base van m-ASMA heeft een zeer geringe oplosbaarheid in water en kan derhalve niet als doseringsvorm voor intraveneuse toediening worden gebruikt. Pogingen zijn gedaan om zuur additiezouten te bereiden, teneinde dit oplosbaarheidsprobleem te overwinnen, maar 30 de bekende monohydrochloride en monomethaansulfonaatzouten bleken eveneens voor clinische toepassing onvoldoende in water oplosbaar te zijn.

De momenteel elinisch toegepaste samenstelling bestaat uit twee steriele vloeistoffen, die vlak voor het gebruik worden gecombineerd. Een oplos 8100292 * * -2- sing van m-.AMSA in watervrij Ν,Ν-dimethylaceetamide bevindt zich. in een ampul. Een afzonderlijk flesje bevat een waterige melkzuuroplos-sing, welke als verdunningsmiddel dienst doet. Na. het mengen'wordt de verkregen m-AMSA oplossing door intraveneuse infusie toegediend.

5 Hoewel de bestaande clinische samenstelling een' intrave neuse doseringsvorm verschaft, zijn daaraan verschillende hadelèn'verbonden. Behalve de voor de hand liggende moeilijkheden' bij het bereiden en toedienen van de doseringsvorm, bevat hij dimethylaceetamide als vehiculum. Het is bekend, dat dimethylaceetamide verschillende 10 toxische symptomen bij dieren vertoont en derhalve als farmaceutisch vehiculum onaanvaardbaar of ongewenst kan blijken te zijn.

Doel van de uitvinding is derhalve in water oplosbare, stabiele, therapeutisch aanvaardbare vormen van m-AMSA te. verschaffen, die intraveneus (alsook langs andere wegén} kunnen worden toegediend 15 en niet dimethylaceetamide als farmaceutisch vehiculum bevatten of vereisen.

Dit doel, alsmede andere eigenschappen en voordelen van de uitvinding zullen aan de deskundige uit de volgende beschrijving duidelijk worden.

20 Volgens een aspect van de uitvinding wordt een nieuw in water oplosbaar zuur additiezout van m-AMSA verschaft,.dat na re- constitutie met steriel water of een steriel waterig vehiculum intraveneus kan worden toegediend en niet het aan de bekende intraveneuse vormen van dit middel verbonden nadelen bezit. Meer in het bijzonder 25 verschaft de uitvinding het kristallijne monogluconaatzout van m-AMSA.

Volgens een ander aspect van de uitvinding wordt een stabiele vaste, in water oplosbare samenstelling verschaft, welke met water of een waterig vehiculum kan worden geconstitueerd in de vorm 30 . van een stabiele oplossing van m-AMSA, welke samenstelling een mengsel van ongeveer 1 mol m-AMSA mono-gluconaatzout per een tot drie mol van een organisch zuur (of voorloper daarvan], gekozen uit gluconzuur, gluconolacton of mengsels daarvan, bevat.

Andere aspecten van de uitvinding zijn werkwijzen voor het 35 bereiden van het bovenbeschreven zout en de bovenbeschreven samenstelling.

In de bij de beschrijving behorende tekening toont: 8 1 0 0 2 9 2 ' * ? -3- figuur 1 het infrarode absorptiespectrum van het kristal-lijne gluconaatzout, gepelleteerd in kaliumbromide; figuur 2 het infrarood ahsorptiespectrum van een typerende in water oplosbare samenstelling, gepelleteerd in kaliumbromide.

5 ~ Vele conventionele farmaceutisch aanvaardbare zuur addi- tiezouten van m-AMSA zijn slechts weinig oplosbaar in water en derhalve voor intraveneuse toediening aan menselijke patiënten niet geschikt. Dit blijkt uit literatuurplaatsen, waarin de hydrochloride en methaan-sulfonaatzouten zijn beschreven, alsook uit oplosbaarheidsproeven, 10 die door de uitvinders zijn uit gevoerd aan zouten zoals het levuli-naat, citraat en lactobionaat.

Bij het onderzoek naar oplosbaarheidseigenschappen van m-AMSA zuur additiezouten is verrassenderwijze gevonden, dat een bepaald kristallijn zout van m-AMSA een significant hoge oplosbaarheid 15 in water bij kamertemperatuur bezit, waardoor een aanvaardbare intraveneuse doseringsvorm wordt verkregen. Het nieuwe mono-gluconaatzout van m-AMSA dat door de uitvinding wordt verschaft, heeft bij kamertem-

O

peratuur een oplosbaarheid in water van ongeveer 25 mg/cm . Dit gluconaatzout bleek eveneens een aanvaardbare stabiliteit te bezitten, 20 zowel als kristallijne vastestof alsook als waterige oplossing na re-constitutie.

De bereiding van het kristallijne gluconaatzout van m-AMSA kan worden uit gevoerd door de volgende trappen: 1) het vormen van een oplossing van m-AMSA en een orga-25 nisch zuur (of voorloper daarvan) gekozen uit de groep gluconzuur (D-gluconzuur), gluconolacton (D-gluconzuur -lacton) en mengsels daarvan in een inert waterig polair organisch oplosmiddel, waarbij de molverhouding van organisch zuur tot m-AMSA tussen ongeveer' 1:1 en ongeveer 2:1 ligt; en 30 2) het kristalliseren van het gewenste gluconaatzout uit de aldus verkregen oplossing.

Het voor het oplossen van de m-AMSA base gebruikte bijzondere inerte polaire organische oplosmiddel is niet kritisch en voorbeelden van geschikte oplosmiddelen zullen de deskundigen duidelijk 35 zijn. Geprefereerde oplosmiddelen zijn polaire alkoholen en ketonen, zoals methanol, ethanol, n-propanol, isopropanol, aceton, n-butanol, 2-butanon, n-pentanol, n-hexanol,diethyleenglycol, methylisobutylketon, 8100292 ψ * -1*- 3-pentanon enz. Een bijzonder geschikt oplosmiddel is ethanol. 'Het oplosmiddelsysteem bevat bij voorkeur een' klein percentage water (bijv. ongeveer 0,3%) dat aan het organische oplosmiddel kan worden toegevoegd of bij voorkeur in de vorm van een waterige gluconzuur of 5 gluconolactonoplossing wordt toegevoerd.

De hier gebruikte term organisch zuur slaat op gluconzuur zelf of een voorloper daarvan, die in een waterige oplossing hydrolyseert onder vorming van gluconzuur, bijv. gluconolacton. De bereiding van gluconzuur in een goed gedefinieerde kristallij ne vorm 10 is lastig en daarom wordt in de handel' verkrijgbaar gluconzuur als een 50$1 s waterige oplossing geleverd. Gluconolacton anderzijds is een goed gedefinieerd kristallijn materiaal, dat gemakkelijk in waterige oplossing tot gluconzuur kan worden' gehydrolyseerd. Yanwege de verkrijgbaarheid van kristallijn gluconolacton wordt gluconolacton 15 bij voorkeur als bron voor gluconzuur bij de bereiding van. het gluco-naatzout toegepast. Het gluconolacton kan aan een waterige oplossing van polair organisch oplosmiddel worden toegevoegd om het gluconzuur te verkrijgen of aan het organisch oplosmiddel worden toegevoegd in de vorm van een waterige oplossing.

20 De temperatuur waarbij het oplossen wordt .bewerkt is niet kritisch en kan variëren van het vriespunt tot het'kookpunt -van het oplosmiddelsysteem. Liefst worden temperaturen rond kamertemperatuur of hoger toegepast. Gevonden is, dat de oplosbaarheid maximaal is wanneer het mengsel op een reflux temperatuur wordt gebracht. ' 25 Het gluconzuur of gluconolacton kan worden toegepast in molverhoudingen van ongeveer 1-2 mol per mol m-AMSA base. Het produkt met de beste kwaliteit wordt echter verkregen bij toepassing van equi-molaire hoeveelheden m-AMSA en organisch zuur.

Ha de vorming van een' oplossing van m-AMSA en zuur, wordt 30 bij voorkeur een filtratietrap uitgevoerd voordat men' kristallisatie laat plaatsvinden. Standaardkristallisatietechnieken kunnen dan worden gebruikt om het gewenste gluconaatzout ts verkrijgen. Entkristallen van het gluconaatzout kunnen aan het reaktiemengsel worden toegevoegd om kristallisatie op te roepen en/of te bevorderen. Ha de winning wordt 35 het kristallijne zout gewassen (bijv. met ethanol] en gedroogd volgens gebruikelijke procedures. Herkristallisatie (bijv. uit ethanol] kan worden gebruikt om produkt in een zeer gezuiverde vorm te verkrijgen.

8 1 0 0 29 2 ï. * -5-

Volgens een ander aspect van de uitvinding wordt een stabiele vaste, in water oplosbare samenstelling verschaft, die geschikt is voor reconstitute met water of een ander waterig vehiculum tot een stabiele oplossing van m-AMSA, welke samenstelling een mengsel 5 van ongeveer 1 mol m-AMSA monogluconaatzout per 1-3 mol organisch zuur (of een voorloper daarvan), gekozen uit de groep gluconzuur, glucono-lacton en mengsels daarvan, bevat.

. De bovenbeschreven samenstelling kan worden gebruikt in de vorm van een droog gevuld (Engels "dry-fill") of gelyofiliseerd 10 produkfc, maar is bij voorkeur een gelyofiliseerd mengsel. De samenstelling kan geschikt en snel worden geconstitueerd met steriel water of een steriel waterig vehiculum, waarbij tenminste een 5 mg/cm ware oplossing van m-AMSA met uitstekende stabiliteit wordt verkregen.

De bereiding van in water oplosbare samenstelling kan 15 geschikt worden uitgevoerd volgens een gebruikelijke lyofilisatiepro-eedure. Een waterige oplossing van m-AMSA en een overmaat gluconzuur of een bron voor gluconzuur (d.w.z. een organisch zuur, dat in water onder vorming van gluconzuur hydrolyseert) wordt derhalve gevormd, en de oplossing wordt vervolgens aan een standaard lyofilisatieprocede .

20 onderworpen om de gewenste vaste samenstelling te verkrijgen.

Het gluconzuur (of equivalentmateriaal) wordt gebruikt in een molverhouding van ongeveer 2-U mol (liefst ongeveer 2,5 mol) per mol m-AMSA.base. Aangezien, zoals bovenstaand is vermeld, commercieel gluconzuur niet in een goed gedefinieerd kristallijne vorm ver-25 krijgbaar is, wordt bij voorkeur kristallijn gluconolacton als organisch zuur gebruikt. Het gluconolacton hydrolyseert snel in water onder vorming van gluconzuur. Tijdens de lyofilisatie wordt gluconzuur tenminste gedeeltelijk omgezet in gluconolacton. Het gelyofiliseerde produkt omvat derhalve een mengsel van het monogluconaatzout van m-30 AMSA met ongeveer 1-3 mol overmaat gluconzuur, welk zuur gedeeltelijk in de vorm van gluconzuur en gedeeltelijk in de vorm van gluconolacton verkeert.

Ha de vorming van de waterige oplossing van m-AMSA en zuur, wordt het reaktiemengsel bij voorkeur voor de lyofilisatie gefiltreerd.

35 De lyofilisatie kan in conventionele laboratorium of industrie lyofili-satoren worden uitgevoerd. De lyofilisatieparameters zijn bij voorkeur als volgt: 8 1 00 29 2 -6- voorbevriezing bij -55°C; bevriezing gedurende 2 uur bij -50°C; sublimatie gedurende ongeveer 68 uur bij -4o°C bij een druk yan onge-_2 veer 4x10 Torr; 5 drogen gedurende ongeveer 48 uur bij +30°C.

Het kristallijne gluconaatzout en' de in water oplosbare samenstelling volgens de uitvinding vertonen vrijwel dezelfde anti-tumoreigenschappen als de m-AMSA vormen volgens· de stand der techniek. Vanwege hun hoge oplosbaarheid in water kunnen' zij echter' worden ge-10 bruikt voor de bereiding van doseringsvormen voor intraveneuse toediening, die geen ongewenst farmaceutisch vehiculum zoals dimethylaceet-amide bevatten. Het zout en de samenstelling kunnen bovendien worden gebruikt voor de bereiding van een droog gevuld of gelyofiliseerd pro-dukt ih een enkel flesje, dat met stèriel water of een' steriel waterig 15 vehiculum kan worden geconstitueerd. Een geprefereerd vehiculum voor reconstitutie van het gluconaatzout is waterig gluconzuur.

Het m-AMSA zout en de samenstelling volgens de idt vinding kunnen worden gebruikt voor de bereiding van orale óf niet intrave-neuse parenterale doseringsvormen alsmede het geprefereerde intraye-20 neuse injecteerbare produkt. Het zout en de samenstelling hebben'een aanvaardbare stabiliteit, zowel in vaste vorm als in waterige oplossing, en hebben voldoende oplosbaarheid in water om de toediening van een effectieve dosis van m-AMSA in een. betrekkelijk klein volume parenterale oplossing mogelijk te maken (waardoor pil (Engels "bolus").

25 intraveneuse injecties mogelijk worden).

Bij de behandeling van tumoren bij zoogdieren, kunnen het zout en samenstelling volgens de uitvinding oraal of parenteraal worden toegediend, bij voorkeur parenteraal, in doseringen (ingesteld op een hoeveelheid m-AMSA base) en volgens voorschriften, die in de literatuur 30 zijn beschreven.

De uitvinding wordt aan de hand van de voorbeelden nader toegelicht.

Voorbeeld I

Bereiding van m-AMSA monogluconaatzout 35 Men loste 0,89 g, 0,005 mol delta gluconolacton op in 3 ' 3 ‘ 0,5 cm water. Men voegde 1,95 g, 0,005.mol m-AMSA base en 100 cm ethanol toe, en kookte het mengsel gedurende een. korte tijd, d.w.z. 5-10 8100292 -7- >- « » minuten onder terugvloeikoeling. De verkregen oplossing liet men een nacht staan, waarna het kristallijne materiaal van de oplossing werd 3 .

afgescheiden. Het produkt werd uit 100 cm ethanol herknstalliseerd waarbij 1,10 g kristallijn m-AMSA monogluconaatzout werd verkregen.

5 Eigenschappen van het gluconaatzout: m-AMSA gehalte volgens U.V. = 62,6$ (theoretisch gehalte is 66,6$) gluconzuurgehalte volgens U.V. 36,9$ gluconolactongehalte volgens Ü.Y. 1,1$.

10 Oplosbaarheid in water 30 mg/cm^ bij 50-60°C; 25 mg/crn^ bij kamertemperatuur.

o

Opgelost in water met., een concentratie van 7,1 ^ug/cm , vertoonde het gluconaatzout ultraviolet absorptiepieken bij 208 nm (O.D. 0,527), 2^-7,5 nm (0.D. 0,567), 263 nm (O.D. 0,1*25) en 1*12 nm 15 (O.D. 0,121).

Figuur 1 toont het infrarood absorptiespectrum vanhet gluconaatzout, gepelleteerd in kaliumbromide.

Voorbeeld II

Bereiding van een m-AMSA samenstelling, die in 'Water oplosbaar' is.

20 (voor de bereiding van 75 mg m-AMSA activiteit bevattende flesjes) Samenstelling per flesje ' 'pér litér lading m-AMSA base , 75 mg 5 g.

gluconolacton (gluconzuur £ -lacton) 93,1*6 mg 6,23 g.

3 2^ water voor injectie q,.s. tot 15 cm q.s. tot 1 1

Berei dings instructies (voor een lading van 1 litér) 1) Bereiding van een 10$rs oplossing van gluconolacton: -afwegen van 10 g gluconolacton -toevoeging onder roeren van het lacton aan een glazen

O

2q houder, die 80 cm water voor injectie bevat; blijven' roeren totdat een volledige oplossing is verkregen.

-met water voor injectie aanvullen tot 100 cm -5 minuten roeren.

Deze oplossing moet na 2l* uur staan bij kamertemperatuur y. worden gebruikt.

2) Afwegen van 5 g m-AMSA base.

, O

3) onder roeren toevoegen van 25 cnr van een lO.'s gluco- 8 1 00 29 2 -8-

O

nolactonoplossing aan een geschikte glazen houder die 600 cmr water voor injectie bevat.

b) Onder sterk roeren langzaam toevoegen van de 5 g m-AMSA base aan de glazen houder. Gedurende 30 minuten blijven roeren.

O

5 5) Onder roeren toevoegen van 20 cnr van een 10#'s gluconolactonop- lossing aan het reaktiemengsel. Gedurende 30 minuten roeren.

6) langzaam toevoegen van de rest van de 10$rs gluconolactonoplossing

O

(17,3 cnr) aan het reaktiemengsel. Blijven roeren, totdat volledige oplossing is verkregen.

10 T) met water voor injectie aanvullen tot 1 liter.

8) Onder toepassing van stikstofdruk de oplossing door een 0,22yU filter leiden.

O O

9) Vullen van de oplossing in 30-38 cnr flint glas flesjes (15 cnr oplossing per flesje). Gedeeltelijk inbrengen van rode butyllyofili- 15 satiestoppen.

10) Onderwerpen van de flesjes aan vriesdrogen bij de volgende parameters : voorbevriezing bij -55°C, bevriezing gedurende 2 uur bij -50°C · 20 . sublimatie gedurende ongeveer 68 uur bij -^-0°C bij een druk van onge-—2 veer tac10 torr, drogen gedurende ongeveer U8 uur bij +30°C.

11) Een stop doen op de flesjes onder verminderde druk of stikstof-atmosfeer en af dichten.

O

25 12) Voor reconstitutie 20 cm water voor injectie per flesje gebruiken.

Eigenschappen van de gélyófiliseerdé samenstelling:

O

Reconstitutieduur met 20 cm water b-5 minuten. pH van de oplossing 3,65.

Analyse van het gelyofiliseerde produkt: 30 . van 0,172 g totale samenstelling, ongeveer 72 mg m-AMSA, ongeveer 93 mg totaal gluconzuur (potentiometrie) waarvan ongeveer i+0 mg £ -gluconolacton is (gaschromatografie). Verontreinigingen beneden detectiegrenzen % E^O (K.F.) = 0,8.

De stabiliteit in water van het geconstitueerde produkt 35 bij 2b uur bevredigend. Verlies aan sterkte nauwelijks waarneembaar en geen verontreinigingen werden gevonden.

Bij oplossen in water bij een concentratie van 12,17/Ug/ 8 1 00 29 2 -9- 3 . . ...

cm , vertoonde de gelyofiliseerde samenstelling ultraviolet absorptie- pieben bij 209 am (O.D. 0,607), 2^7,5 nm (O.D.0,607), 266 nm (O.D. 0,53*0, U13 nm (O.D. ,0,1^5) en ^35 mu (O.D. 0,11*3).

Fgiuur 2 toont bet infrarood absorptiespectrum van de 5 gelyofiliseerde samenstelling, gepelleteerd in kaliumbromide.

8 1 00 29 2

Claims (17)

1. 0 -10- 'CONCLUSIES
2. 1. Het kristallijne gluconaatzout van m-AMSA.
3. 2. Stabiele, vaste, in water oplosbare samenstelling voor reconstitutie met water of een waterig vehiculum in de: vorm 5 van een stabiele oplossing van m-AMSA, welke samenstelling een mengsel omvat van ongeveer 1 mol m-AMSA gluconaatzout per een tot drie mol van een organisch zuur, gekozen uit de groep gluconzuur, gluconolacton en mengsels daarvan.
4. 3. Samenstelling volgens conclusie 2, met het kenmerk, 10 dat deze ongeveer 1 mol m-AMSA gluconaat zout per 1,5 mol organisch zuur bevat. U. Stabiele, vaste, in water oplosbare samenstelling voor reconstitutie met water of een waterig vehiculum in de vorm van een stabiele oplossing van m-AMSA, welke samenstelling verkregen 15 is door de volgende trappen: - 1. het vormen van een waterige oplossing van m-AMSA en een organisch zuur, gekozen uit de groep gluconzuur, gluconolacton en mengsels daarvan, waarbij de molverhouding van het organisch zuur tot m-AMSA ongeveer 2:1 tot ongeveer U:1 bedraagt; en 20 2) het lyofiliseren van de aldus verkregen waterige oplossing.
5. 5. Samenstelling volgens conclusie b, met het kenmerk, dat ongeveer 2,5 mol organisch zuur per mol m-AMSA wordt gebruikt.
6. 6. Samenstelling volgens conclusie U of 5» met het kenmerk, dat het toegepaste organische zuur gluconolacton is. 25 7· Samenstelling- volgens conclusie b, met het kenmerk, dat de waterige oplossing van trap (1) gevormd wordt door ongeveer 5 g m-AMSA en 6,23 g gluconolacton per liter oplossing te laten reageren.
7. 8. Werkwijze voor het bereiden van het kristallijne 30 gluconaatzout van m-AMSA, met het kenmerk, dat deze de volgende trappen omvat: 1. het vormen van een oplossing van m-AMSA en een organisch zuur, gekozen uit de groep gluconzuur, gluconolacton en mengsels daarvan, in een inert waterig polair organisch oplosmiddel, waarbij de molver-35 houding van organisch zuur tot m-AMSA ongeveer 1:1 tot ongeveer 2:1 bedraagt; en 2. het kristalliseren van het gewenste gluconaatzout uit de aldus ver- 8100292 -11- kregen oplossing.
8. 9. Werkwijze volgens conclusie 8, met het kenmerk, dat het toegepast'e organische zuur gluconolacton is.
9. 10. Werkwijze volgens conclusie 8, met het kenmerk, dat 5 het toegepaste organische zuur gluconzuur is.
10. 11. Werkwijze volgens conclusie 8, met het kenmerk, dat ongeveer 1 mol organisch zuur per mol m-AMSA wordt gebruikt.
11. 12. Werkwijze volgens conclusie 8, met het kenmerk, dat het organische oplosmiddel ethanol is.
12. 13. Werkwijze volgens conclusie 8, met het kenmerk, dat trap(l) bij reflux temperatuur wordt uit gevoerd. ik. Werkwijze volgens conclusie 8, met het kenmerk, dat de in trap (1) gevormde oplossing voor kristallisatie wordt gefiltreerd.
13. 15. Werkwijze voor het bereiden van een stabiele, vaste in water oplosbare samenstelling voor reconstitutie met water of een waterig vehiculum in de vorm van een 'stabiele oplossing van m-AMSA met het kenmerk, dat deze de volgende trappen omvat: 1. het vormen van een waterige oplossing van m-AMSA en een organisch 20 zuur, gekozen uit de groep gluconzuur, gluconolacton en mengsels daarvan, waarbij de molverhouding van het organisch zuur tot m-AMSA ongeveer 2:1 tot ongeveer U:1 bedraagt, en 2. het lyofiliseren van de.aldus verkregen waterige oplossing.
14. 16. Werkwijze volens conclusie 15, met het kenmerk, dat 25 het organische zuur gluconolacton is.
15. 17. Werkwijze volgens conclusie 15, met het kenmerk, dat de molverhouding van organisch zuur tot m-AMSA ongeveer 2,5:1 is.
16. 18. Werkwijze volgens conclusie 15, met het kenmerk, dat de waterige oplossing van trap 1} voor de lyofilisatie wordt gefil- 30 treerd.
17. 19· Farmaceutisch preparaat met anti-tumorwerkzaamheid, met het kenmerk, dat gluconaatzout van m-AMSA bevat. 8 1 00 29 2