MÉTODO PARA MEJORAR LA TOLERANCIA DE PLANTAS FRENTE A TEMPERATURAS MUY FRÍAS Y/O HELADAS
Descripción
La presente invención se refiere al uso de compuestos, que inhiben la cadena respiratoria mitocondrial en el nivel del complejo de b/Ci , especialmente, de compuestos activos de estrobilurina, para mejorar la tolerancia de plantas frente a temperaturas muy frías y/o heladas. La temperatura es uno de los factores, que afecta el crecimiento de plantas. Temperaturas muy frías (de hasta 0°C) y heladas (temperaturas por debajo de 0°C) pueden retardar la germinación y el crecimiento de plantas y tienen un efecto substancial sobre su desarrollo y sobre su calidad y la calidad de sus productos. Plantas de cultivo, tales como maíz, remolacha de azúcar, arroz, soya, papas, tomates, pimientos, melones, pepinos, frijoles, alverjas, plátanos y frutas cítricas sufren daños y/o un desarrollo substancialmente retardado aún a temperaturas por debajo de 5°C. Aún temperaturas que son ligeramente por debajo de 0°C resultan en la muerte parcial o total de estas especies de plantas. Heladas tardías alrededor del tiempo de florecimiento, por ejemplo, muchas veces resultan en substanciales pérdidas de rendimiento, por ejemplo, en especies de frutas de pepa y de hueso, tales como manzanas, peras, membrillo, melocotones, nectarinas, albaricoques, ciruelas, ciruelas damascenas, almendras o cerezas. Plantas, que han sufrido daños debido a temperaturas muy frías o heladas, presentan síntomas de marchitamiento, por ejemplo, en las hojas, flores y botones. Flores dañadas por heladas no desarrollan ningunos frutos o frutos dañados o frutos con daños en la cáscara, que son difíciles de vender, si es que se alcanza venderlos del todo. Severos daños por frío o heladas resultan en la muerte de la planta entera. Daños por fío y daños por heladas son, por tanto, importantes factores de pérdida en el sector agrícola. Las posibilidades que existen hasta la fecha para evitar daños por fío y daños por heladas son bastante insatisfactorias porque son muy complejas y porque los resultados frecuentemente no son reproducibles. Posibilidades que deben ser mencionadas en este contexto son el cultivo de variedades de plantas resistentes al frío y las heladas, el inicio del cultivo de plantas sensibles al frío en el invernadero, que luego son transferidas lo más tarde posible afuera, el cultivo bajo
láminas de plástico, la circulación de aire en la plaza, el soplado de aire caliente, la colocación de calefactores en la plaza y la irrigación protectora frente a las heladas. La DE 4437945 describe productos fortalecientes para las plantas, que contienen vitamina E, que supuestamente reducen el efecto dañino de agroquímicos fitotóxicos y otros factores de estrés abióticos. Estas composiciones pueden comprender, adicionalmente, crioprotectores, tales como glicerol. El crioprotector, que está presente opcionalmente, no se describe en el sentido de tener un efecto inhibidor de daños por fío o daños por heladas. J. Lalk y K. Dórffling describe en Physiol. Planta. 63, 287-292 (1985) que el ácido abscísico puede mejorar la resistencia frente a heladas y la resistencia frente a temperaturas muy frías en trigo de invierno aclimatizado. Es un objeto de la presente invención el proveer una composición, que mejora la tolerancia de plantas frente a temperaturas muy frías y/o heladas. Este objeto se alcanza usando un compuesto activo, que inhibe la cadena respiratoria mitocondrial en el nivel del complejo de b/c, para mejorar la tolerancia de plantas a bajas temperaturas. Especialmente, las estrobiluñnas son útiles para los fines de la presente invención. Compuestos activos, que inhiben la cadena respiratoria mitocondrial en el nivel del complejo de b/c, son conocidos como fungicidas de la literatura [ver, por ejemplo, Dechema-Monographien Vol. 129, 27-38, VCH Verlagsgemeinschaft Weinheim 1993;
Natural Product Reports 1993, 565-574; Biochem. Soc. Trans. 22, 63S (1993)]. Sin embargo, hasta la fecha no hay ninguna sugerencia, en el sentido de que tales compuestos activos pudiesen ser usados para mejorar la tolerancia de plantas frente a temperaturas muy frías y/o heladas, fenómeno que solo se ha encontrado dentro del marco de la presente invención. Una clase de muy importantes compuestos activos, que inhiben la cadena respiratoria mitocondrial en el nivel del complejo de b/c-i son las estrobilurínas. Estrobilurinas son generalmente conocidas desde hace mucho tiempo como fungicidas, en algunos caso se han descrito como insecticidas (EP-A 178 826; EP-A 253 213; WO 93/15046; WO 95/18789; WO 95/21 153; WO 95/21 154; WO 95/24396;
WO 96/01256; WO 97/15552; WO 97/27189). Otro ejemplo de un compuesto activo, que inhibe la cadena respiratoria mitocondrial en el nivel del complejo de b/d es famoxadona (5-metil-5-(4-fenoxifenil)-3-(fenilamino)-2,4-oxazolidindíona). Ejemplos específicos de estrobilurinas apropiadas son los compuestos de la fórmula I
en la que las variables tienen las definiciones abajo indicadas:
X es halógeno, Crd-alquilo o trifluorometilo;
m es 0 ó 1 ; Q es C(=CH-CH3)-COOCH3, C(=CH-OCH3)-COOCH3, C(=N-OCH3)- CONHCH3, C(=N-OCH3)-COOCH3 , N(-OCH3)-COOCH3, o el grupo Q1
donde # respresenta en enlace con el anillo fenilo;
es -O-B, -CH20-B, -OCH2-B, -CH2S-B, -CH=CH-B, -C=C-B, -CH20-N=C(R1)-B, -CH2S-N=C(R )-B, -CH20-N=C(R )-CH=CH-B, o -CH20-N=C(R1)-C(R2)=N-OR3, donde es fenilo, naftilo, heteroarilo de cinco o seis miembros o heterociclilo de cinco o seis miembros, que contiene uno, dos o tres átomos de nitrógeno y/o un átomo de oxígeno o de azufre o uno o dos átomos de oxígeno y/o de azufre, estando los sistemas de anillo sin sustituir o sustituidos por uno, dos o tres grupos Ra: significa, independientemente, ciano, nitro, amino, aminocarbonilo, aminotiocarbonilo, halógeno, Ci-Ce-alquilo, CrCe-haloalquilo, Ci-C6-alquil-carbonilo, Ci-C6-alquilsulfonilo, Ci-C6-alquilsulfinilo, C3-C6-cicloalquilo, C C6-alcoxi, CrCe-haloalcoxi, d-Ce-alquiloxicarbonilo, C C6-alquiltio, Ci-C6-alquilamino, di-d-Ce-alquilamino, CrCe-alquilaminocarbonilo, di-C C6-alquilaminocarbonilo, CrCe-alquilaminotiocarbonilo, di-C-rC6-alquilaminotiocarbonilo, C2-C6-alquenilo, C2-C6-alqueniloxi, fenilo, fenoxi, bencilo, benciloxi, heterociclilo de cinco o seis miembros, heteroarilo de cinco o seis miembros, heteroariloxi de cinco o seis miembros, C(=NORa)-Rb o OC(Ra)2-C(Rb)=NOR , pudiendo los grupos cíclicos a su vez estar sin sustituir o sustituidos por uno, dos, tres, cuatro o cinco grupos Rb:
significa, independientemente, ciano, nitro, halógeno, amino, aminocarbonilo, aminotiocarbonilo, C C6-alquilo, d-Ce-haloalquilo, CrC6-alquilsulfonilo, C C6-alquilsulfinilo, C3-C6-cicloalquilo, CrC6-alcoxi, CrC6-haloalcoxi, d-C6-alcox¡-carbonilo, Ci-C6-alquiltio, d-C6-alquilamino, di-Ci-C6-alquilamino, d-C6-alquilaminocarbonilo, di-Ci-C6-alquilaminocarbonilo, d-C6-alquilaminotio-carbonilo, di-Ci-C6-alquilaminotiocarbonilo, C2-C6-alquenilo, C2-C6-alqueniloxi, C3-C6-cicloalquilo, C3-C6-cicloalquenilo, fenilo, fenoxi, feniltio, bencilo, benciloxi, heterociclilo de cinco o seis miembros, heteroarilo de cinco o seis miembros, heteroariloxi de cinco o seis miembros o C(=NORA)-RB; RA, RB significan, independientemente entre si, hidrógeno o Ci-C6-alquilo; es hidrógeno, ciano, d-d-alquilo, d-d-haloalquilo, C3-C6-cicloalquilo, Ci-C4-alcoxi, o d-C4-alquiltio; es fenilo, fenilcarbonilo, fenilsulfonilo, heteroarilo de cinco o seis miembros, heteroarilcarbonilo de cinco o seis miembros o heteroarilsulfonilo de cinco o seis miembros, pudiendo los sistemas de anillo estar sin sustituir o sustituidos por uno, dos, tres, cuatro o cinco grupos Ra, d-do-alquilo, C3-C6-c¡cloalquilo, C2-Ci0-alquenilo, C2-C10-alquinilo, d-do- alquilcarbonilo, C2-Ci0-alquenilcarbonilo, C3-C 0-alquinilcarbonilo, d-dcr alquilsulfonilo o C(=NORa)-Rb, pudiendo las cadenas de carbono estar sin sustituir o sustituidas por uno, dos, tres, cuatro o cinco grupos Rc: Rc significa, independientemente, ciano, nitro, amino, aminocarbonilo, aminotiocarbonilo, halógeno, d-C6-alquilo, CrC6-haloalquilo, d-C6- alquilsulfonilo, d-d-alquilsulfinilo, d-d-alcoxi, d-C6-haloalcoxi, d- C6-alcoxicarbonilo, C C6-alquiltio, CrC6-alquilamino, di-d-d-alquil- amino, d-C6-alquilam¡nocarbonilo, di-d-C6-alquilam¡nocarbonilo, d- C6-alquilaminotiocarbonilo, di-Ci-C6-alquilaminotiocarbonilo, C2-C6- alquenilo, C2-C6-alqueniloxi, C3-C6-cicloalquilo, C3-C6-cicloalquiloxi, heterociclilo de cinco o seis miembros, heterocicliloxi de cinco o seis miembros, bencilo, benciloxi, fenilo, fenoxi, feniltio, heteroarilo de cinco o seis miembros, heteroariloxi de cinco o seis miembros o heteroariltio, pudiendo los grupos cíclicos estar parcial o completamente halogenados o sustituidos por uno, dos o tres grupos Ra; y es hidrógeno, d-Ce-alquilo, C2-C6-alquenilo, C2-C6-alquinilo, pudiendo las cadenas de carbono estar parcial o completamente halogenadas o
sustituidas por uno, dos, tres o cuatro grupos Rc; y compuestos de estrobilurina seleccionadas del grupo, que consiste de metil (2-cloro-5-[1 -(3-metilbenciloxiimino)etil]bencil)carbamato, metil (2-cloro-5-[1 -(6-metilpiridin-2-ilmetoxiimino)etil]bencil)carbamato, 2-(2-(6-(3-cloro-2-metil-fenoxi)-5-fluoro-pirimidin-4-iloxi)-fenil)-2-metoxi-imino-N-metil-acetamida y 3-metoxi-2-(2-(N-(4-metox¡-fenil)ciclo-propano-carboximidoil-sulfanil-metil)-fenil)-acrilato de metilo; y sales de los mismos. Los compuestos activos de la fórmula I pertenecen a la clase de los compuestos activos de estrobilurina, de los que se sabe desde hace mucho tiempo que son activos como fungicidas y, en ciertos caso, también como insecticidas. Se describen, por ejemplo, en la EP 178 826; EP 253 213; WO 93/15046; WO 95/18789; WO 95/21 153; WO 95/21 154; WO 95/24396; WO 96/01256; WO 97/15552; WO 97/27189. De acuerdo a la presente invención, el estés por frío que pueden sufrir las plantas cuando bajan las temperaturas puede impedirse o reducirse efectivamente mediante la presente invención. En la producción de cultivos se entienden por bajas temperaturas unas temperaturas muy frías y heladas, a saber, temperaturas de 15°C, preferentemente, de 15°C a -15°C, muy preferentemente, de 10°C a -10°C y especialmente, de 10°C a -5°C. Igualmente, temperaturas de 10°C o 1 1 °C a 0°C y 5°C a 0°C, así como temperaturas por debajo de 0°C pueden ser muy dañinas para los respectivos cultivos. Por tanto, la temperatura que causa daños a las plantas depende del cultivo en cuestión. Los compuestos usados de acuerdo a la invención se emplean, preferentemente, para mejorar la tolerancia de plantas frente a temperaturas de -15°C a 15°C, muy preferentemente, de -10°C a 10°C y especialmente, de -5°C a 10°C. Además, el mejoramiento de la tolerancia de las plantas frente a temperaturas de 10°C o 1 1 °C a 0°C, 5°C a 0°C, así como temperaturas por debajo de 0°C es particularmente importante. En el caso de plantas sensibles al frío, los compuestos usados de acuerdo a la presente invención, especialmente un compuesto de estrobilurina, más específicamente los compuestos de la fórmula I, se usan, especialmente, para mejorar la tolerancia de las plantas frente a temperaturas muy frías y para reducir el estés por frío de plantas en caso de una caída de temperatura, respectivamente. Esto se entiende, generalmente, como la tolerancia frente a temperaturas de 0°C a 15°C,
especialmente, de 0°C a 10°C. En caso de plantas sensibles a las heladas, a los que pertenecen, adicionalmente a las plantas sensibles al frío arriba indicadas, por ejemplo, especies de frutas de pepita y de hueso durante la fase de florescencia y frutas cítricas y otras plantas, que si bien son resistentes al frío, no son resistentes a las heladas, estos compuestos son especialmente apropiados también para mejorar la tolerancia de las plantas frente a temperaturas de -15°C a 0°C, muy preferentemente, de -10°C a 0°C, y, especialmente, de -5°C a 0°C. Bajo tolerancia se entiende, especialmente, la reducción o prevención de daños por fío y/o daños por heladas en plantas. De acuerdo a la presente invención, estés por frío no está limitado únicamente a daños por heladas debido a la formación de cristales de hielo, sino también cubre daños que se presentan a temperatura más altas, especialmente en cultivos sensibles. En tales plantas, ya temperaturas de, por ejemplo, 10°C a 5°C o 10°C a 0°C pueden producir significantes daños. De acuerdo a la presente invención, se ha encontrado, que también se pueden proteger a cultivos sensibles frente a tales daños cuando se les aplica un compuesto, que inhibe la cadena respiratoria mitocondrial en el nivel del complejo de b/d, especialmente, un compuesto de la fórmula I. De esta manera se pueden proteger, por ejemplo, café, maíz, arroz soya y especies de frutas cítricas efectivamente contra el estrés por frío. Los compuestos, que inhiben la cadena respiratoria mitocondrial en el nivel del complejo de b/d, especialmente, las estrobilurinas, más específicamente, los compuestos de la fórmula I, se usan muy preferentemente para reducir o prevenir daños por fío en plantas de cultivo sensibles al frío, tales como maíz, arroz, soya, remolacha de azúcar, caña de azúcar, berenjenas, tomates, pimientos, papas, melones, pepinos, vid (vino), frijoles, alverjas, plátanos, frutas cítricas y café. Además, la presente invención puede ser empleada con éxito contra el estés por frío en trigo, cebada, girasoles y colza. Además, de acuerdo a la invención, los compuestos, que inhiben la cadena respiratoria mitocondrial en el nivel del complejo de b/d, especialmente, los compuestos de la fórmula I, se usan, muy preferentemente, para reducir o prevenir daños por heladas en las plantas de cultivo arriba mencionadas que son sensibles al frío, además, en frutas de pepita y frutas de hueso, en todas las especies de frutas cítricas y café. En caso de algunas frutas de pepitas y frutas de hueso, estos compuestos se usan muy preferentemente, para prevenir daños por heladas en los botones, flores, hojas y frutos jóvenes de estas plantas. Las especies de frutas de
pepitas y de hueso son, por ejemplo, manzanas, peras, membrillos, melocotones, albaricoques, nectarinas, cerezas, ciruelas, ciruelas damascenas o almendras, preferentemente, manzanas. Las frutas cítricas son, por ejemplo, limones, naranjas, clementinas o tangerinas. Especialmente, los compuestos usados de acuerdo a la presente invención, específicamente, los compuestos de la fórmula I, se usan para reducir o prevenir daños por heladas en especies de frutas de hueso (p.ej. almendras) y frutas de pepitas, especialmente, en manzanas. Una modalidad de la invención se refiere a un compuesto activo de la fórmula I, tal y como se define al comienzo, o un compuesto de estrobilurina seleccionado entre metil (2-cloro-5-[1-(3-metilbenciloxiimino)etil]bencil)carbamato y metil (2-cloro-5-[1-(6-metilpiridin-2-ilmetoxiimino)etil]bencil)carbamato. En otra modalidad de la invención se usan los compuestos de la fórmula I tal y como se definen al comienzo. Adicionalmente, se pueden usar de acuerdo a la invención los siguientes compuestos alistados en las Tabla de abajo. Tabla I
Tabla II
Tabla III
Tabla IV
Tabla V
Tabla VI
Tabla VII
Para el uso de acuerdo a la invención se usan, preferentemente, los compuestos activos de estrobilurina comerciales. Son especialmente preferidos los siguientes compuestos activos: compuesto I-5 (piraclostrobina), 11-1 (kresoxim-metilo), II-3 (dimoxistrobina), 11-11 (ZJ 0712), III-3 (picoxistrobina), IV-6 (trifloxistrobina), IV-9 (enestroburina), V-16 (orisastrobina), VI-1 (metominostrobina), VII-1 (azoxistrobina) y VII-11 (fluoxastrobina). Otro compuesto de la fórmula I, que es útil es fluacripirim (metil (E)-2-{a-[2-isopropoxi-6-(trifluorometil)pirimidin-4-iloxi]-o-tolil}-3-metoxiacrilato). En el contexto de la presente invención, el término "compuestos de la fórmula I" se refiere tanto a los compuestos neutros de la fórmula I y a otros compuestos activos de estrobilurina mencionados al comienzo, y también a las sales de estos. Los compuestos usados de acuerdo a la presente invención, especialmente, los compuestos de la fórmula I, se usan, preferentemente, en una cantidad de aplicación de 25 a 1000 g/ha, muy preferentemente, de 50 a 500 g/ha y especialmente, de 50 a 250 g/ha.
Las composiciones de acuerdo a la invención pueden estar presentes también en combinación con otos compuestos activos, por ejemplo, con herbicidas, insecticidas, reguladores del crecimiento o también con fertilizantes. Cuando los compuestos usados de acuerdo a la presente invención, especialmente, los compuestos (I), o las composiciones que los comprenden son combinados entre si o con otros compuestos activos, especialmente, fungicidas, se puede alcanzar en muchos casos, por ejemplo, aumentar el espectro de acción o prevenir el desarrollo de resistencias. En muchos casos se alcanzan efectos sinergéticos. La siguiente lista de fungicidas, insecticidas, retardadores del crecimiento y cebadores , que pueden ser usados conjuntamente con el compuesto activo, que inhibe la cadena respiratoria mitocondrial en el nivel del complejo de b/c,, especialmente, con el compuesto activo de estrobilurina, es ilustrativa pero no limitativa de las combinaciones posibles: Estrobilurinas azoxistrobina, dimoxistrobina, enestroburina, fluoxastrobina, kresoxim-metilo, metominostrobina, picoxistrobina, piraclostrobina, trifloxistrobina, orisastrobina, metil (2-cloro-5-[1-(3-metilbenciloxiimino)etil]bencil)carbamato, metil (2-cloro-5-[1- (6-metilpiridin-2-ilmetoxiimino)etil]bencil)carbamato, metil 2-(orto-((2,5- dimetilfeniloximetilene)fenil)-3-metoxiacrilato, 2-(2-(6-(3-cloro-2-metil-fenoxi)-5- fluoro-pirimidin-4-iloxi)-fenil)-2-metoxiimino-N-metil-acetamida; 3-metoxi-2-(2-(N- (4-metoxi-fenil)-ciclopropanocarboximidoilsulfanilmetil)-fenil)-acrilato de metilo; Carboxamidas - carboxanilidas: benalaxilo, benalaxilo-M, benodanilo, bixafeno, boscalida, carboxina, mepronilo, fenfuram, fenhexamida, flutolanilo, furametpir, metalaxilo, ofurace, oxadixilo, oxicarboxina, pentiopirad, tifluzamida, tiadinilo, anilida de ácido 2-amino-4-metil-tazol-5-carboxílico, 2-cloro-N-(1 ,1 ,3-trimetil-indan-4-il)- nicotinamida, N-(4'-bromobifenil-2-il)-4-difluorometil-2-metiltazol-5-carboxamida, N-(4'-trifluorometilbifenil-2-il)-4-difluorometil-2-metiltazol-5-carboxamida, N-(4'- cloro-3'-fluorobifenil-2-il)-4-difluorometil-2-metiltazol-5-carboxamida, N-(3',4'- dicloro-4-fluoro-bifenil-2-il)-3-difluorometil-1-metilpirazol-4-carboxamida, N'-(3',4'- dicloro-5-fluorobifenil-2-il)-3-difluorometil-1-metilpirazol-4-carboxamida, N-(2- cianofenil)-3,4-dicloroisotazol-5-carboxamida, N-(2-(1 ,3-dimetil-butil)-fenil)-1 ,3,3- trimetil-5-fluoro-1 H-pirazol-4-carboxamida, N-(4'-cloro-3',5-difluoro-bifenil-2-il)-3- difluorometil-1-metil-1 H-pirazol-4-carboxilic acid amida, N-(4'-cloro-3',5-difluoro- bifenil-2-il)-3-trifluorometil-1-metil-1 H-pirazol-4-carboxamida, N-(3',4'-dicloro-5-
fluoro-bifenil-2-il)-3-trifluorometil-1 -metil-1 H-p¡razol-4-carboxam¡da, N-(3',5- difluoro-4'-metil-bifenil-2-il)-3-difluorometil-1 -metil-1 H-pirazol-4-carboxamida, N- (3\5-difluoro-4'-metil-bifenil-2-N)-3-trifluorometil-1 -metil-1 H-pirazol-4- carboxamida, N-(cis-2-biciclopropil-2-il-fenil)-3-difluorometil-1 -metil-1 H-pirazol-4- 5 carboxamida, N-(trans-2-biciclopropil-2-il-fenil)-3-difluorometil-1 -metil-1 H-pirazol- 4-carboxamida; - morfolidas de ácido carboxílico: dimetomorf, flumorf; - benzamidas: flumetover, fluopicolida (picobenzamida), fluopiram, zoxamida, N-(3-etil-3,5-5tr¡met¡l-ciclohexil)-3-formilamino-2-hidroxi-benzam¡da; 10 - otras carboxamidas: carpropamida, diclocimet, mandipropamida, oxitetraciclina, siltiofam, N-(6-metoxi-piridin-3-il) ciclopropanocarboxamida, N-(2-(4-[3-(4- clorofenil)prop-2-iniloxi]-3-metoxifenil)etil)-2-metanosulfonilamino-3- metilbutiramida, N-(2-(4-[3-(4-clorofenil)prop-2-iniloxi]-3-metoxifenil)-etil)-2- etanosulfonilamino-3-metilbutiramida; ] 5 Azoles - triazoles: azaconazol, bitertanol, bromuconazol, ciproconazol, difenoconazol, diniconazol, diniconazole-M, enilconazol, epoxiconazol, fenbuconazol, flusilazol, fluquinconazol, flutriafol, hexaconazol, imibenconazol, ipconazol, metconazol, micobutanilo, oxpoconazol, paclobutrazol, penconazol, propiconazol, 0 protioconazol, simeconazol, tebuconazol, tetraconazol, triadimenol, triadimefona, triticonazol, uniconazol, 1 -(4-cloro-fenil)-2-([1 ,2,4]triazol-1 -il)-cicloheptanol; - imidazoles: ciazofamida, imazalilo, imazalil-sulfato, pefurazoato, procloraz, triflumizol; - benzimidazoles: benomilo, carbendazim, fuberidazol, tiabendazol; 5 - otros: etaboxam, etridiazol, himexazol; Compuestos de heterociclilo nitrogenados - piridinas: fluazinam, pirifenox, 3-[5-(4-clorofenil)-2,3-dimetilisoxazolidin-3- iljpiridina, 2,3,5,6-tetracloro-4-metanosulfonil-piridina, 3,4,5-tricloro-piridin-2,6- dicarbonitrile, N-(1-(5-bromo-3-cloro-piridin-2-il)-etil)-2,4-dicloro-nicotinamida, N- Q ((5-bromo-3-cloro-piridin-2-il)-metil)-2,4-dicloro-nicotinamida; - pirimidinas: bupirimato, ciprodinilo, diflumetorim, ferimzona, fenarimol, mepanipirim, nitrapirina, nuarimol, pirimetanilo; - piperacinas: triforina; - pirróles: fludioxonilo, fenpiclonilo; - morfolinas: aldimorf, dodemorf, dodemorf-acetato, fenpropimorf, tridemorf;
- dicarboximidas: ¡prodiona, fluoroimida, procimidona, vinclozolina; - otros: acibenzolar-S-metilo, anilacina, blasticidina-S, captan, quinometionato, captafol, dazomet, debacarb, diclomecina, difenzoquat, difenzoquat-sulfato de metilo, fenoxanilo, folpet, ácido oxolínico, piperalina, fenpropidina, famoxadona, fenamidona, octilinona, probenazol, proquinazida, piroquilona, quinoxifeno, triciclazol, 5-cloro-7-(4-metilpiperidin-1-il)-6-(2,4,6-trifluorofenil)-[1 ,2,4]triazolo[1 ,5- a]pirimidina, 2-butoxi-6-iodo-3-propilcromen-4-ona, N,N-dimetil-3-(3-bromo-6- fluoro-2-metilindol-1-sulfonil)-[1 ,2,4]triazol-1 -sulfonamida; Carbamatos v ditíocarbamatos - ditíocarbamatos: ferbam, mancozeb, maneb, metiram, metam, metasulfocarb, propineb, tiram, zineb, ziram; - carbamatos: dietofencarb, bentiavalicarb, flubentiavalicarb, iprovalicarb, propamocarb, propamocarb clorhidrato, metil 3-(4-clorofenil)-3-(2- isopropoxicarbonilamino-3-metilbutirilamino)propionato, 4-fluorofenil N-(1-(1-(4- cianofenil)etanosulfonil)but-2-il)carbamato; Otros fungicidas - guanidinas: dodina, dodina base libre, guazatina, guazatina-acetato, iminoctadina, iminoctadina-triacetato, iminoctadine-tris(albesilate); - antibióticos: kasugamicina, kasugamicina-clorhidrato-hidrato, polioxinas, estreptomicina, validamicina A; - Compuestos de metal orgánicos: sales de fentina (p.ej. acetato de fentina, cloruro de fentina, hidróxido de fentina); - Compuestos heterocíclicos conteniendo azufre: isoprotiolano, ditianona; - Compuestos de fósforo orgánicos: edifenfos, fosetilo, fosetilo-aluminio, iprobenfos, pirazofos, tolclofos-metilo, ácidos fosforoso y sus sales; - Compuestos de cloro orgánicos: tiofanto metilo, clorotalonilo, diclofluanida, diclorofeno, flusulfamida, ftalida, hexaclorobenceno, pencicurona, pentaclorofenol y sus sales, quintozeno, tolilfluanida, N-(4-cloro-2-nitro-fenil)-N- etil-4-metil-bencenosulfonamida; - Derivados de nitrofenilo: binapacrilo, dicloran, dinocap, dinobutona, nitrotal- isopropilo, tecnaceno; - Compuestos activos inorgánicos: caldo de Burdeos, sales de cobre (p.ej. acetato de cobre, hidróxido de cobre, oxicloruro de cobre, sulfato de cobre básico), azufre; - otros: bifenilo, bronopol, ciflufenamida, cimoxanilo, difenilamina, metrafenona,
mildiomicina, oxina-cobre, prohexadiona-calcio, espiroxamina, tolilfluanida, N- (ciclopropilmetoxiimino-(6-difluorometoxi-2,3-difluoro-fenil)-metil)-2-feni acetamida, N'-(4-(4-cloro-3-trifluorometil-fenoxi)-2,5-dimetil-fenil)-N-etil-N-metil formamidina, N'-(4-(4-fluoro-3-trifluorometil-fenoxi)-2,5-dimetil-fenil)-N-etil-N-metil 5 formamidina, N'-(2-metil-5-trifluormetil-4-(3-trimetilsilanil-propoxi)-fenil)-N-etil-N- metil formamidina, N'-(5-difluormetil-2-metil-4-(3-trimetilsilanil-propoxi)-fenil)-N- etil-N-metil formamidina; Reguladores del crecimiento (PGRs): auxinas (p.ej. ácido ß-indolacético (IAA), ácido 4- indol-3-ilbutírico (IBA), 2-(1 -naftil)acetamida (NAA)), citoquininas, gibberellinas, etileno, 10 ácido abscísico . Retardadores del crecimiento: prohexadiona y sus sales, trinexapac-etilo, clormequat, cloruro de mepiquat, diflufenzopir. Cebadores: benzotiadiazol (BTH), ácido salicílico y sus derivados, ácido ß-butírico (BABA), 1 -metilciclopropeno (1 -MCP), lipopolisacáridos (LPS), neonicotinoides (p.ej. ] 5 acetamiprida, clotianidina, dinetofurano, fipronilo, imidacloprida, tiacloprida, tiametoxam). Moduladores de etileno: inhibidores de la biosíntesis de etileno, que inhiben la transformación de S-adenosil-L-metionina en ácido 1 -aminociclopropano-1 -carboxílico (ACC), tales como derivados de vinilglicina, hidroxilaminas, derivados de oxim éteres; 0 inhibidores de la biosíntesis de etileno, que bloquean la transformación de ACC en etileno, seleccionadas del grupo, que consiste de: iones Co++ o Ni++ en forma disponible para las plantas; absorbentes de radicales fenólicos, tales como galato de n-propilo; poliaminas, tales como putrescina, espermina o espermidina; análogos estructurales de ACC, tales como ácido a-aminoisobutírico o ácido L- 5 aminociclopropeno-1 -carboxílico; ácido salicílico o acibenzolar-S-metilo; análogos estructurales de ácido ascórbico, que actúan como inhibidores de la ACC oxidasa, tales como prohexadiona-Ca o trinexapac-etilo; y compuestos de triazolilo, tales como paclobutrazol o uniconazol como inhibidores de monooxigenasas dependientes de citocromo P-450, cuya principal acción consiste en bloquear la biosíntesis de Q gibberellinas; inhibidores de la acción de etileno seleccionadas del grupo, que consiste de: análogos estructurales de etileno, tales como 1 -metilciclopropeno ó 2,5-norbornadieno y 3- amino-1 ,2,4-triazol o iones Ag++ Los compuestos activos arriba mencionados son generalmente conocidos y se obtienen en el comercio.
En una modalidad preferida se usan los compuestos, que inhiben la cadena respiratoria mitocondrial en el nivel del complejo de D/CL especialmente, los compuestos de estrobilurina, específicamente, los compuestos de la fórmula I, de acuerdo a la invención en combinación con biorreguladores, especialmente, con cebadores. En una modalidad preferida se usan los compuestos, que inhiben la cadena respiratoria mitocondrial en el nivel del complejo de blci , especialmente, los compuestos de estrobilurina, específicamente, los compuestos de la fórmula I, de acuerdo a la invención en combinación con prohexadiona-Ca, y/o con trinexapac-etilo y/o con un crioprotector convencional como sustancia auxiliar. En otra modalidad preferida se usan los compuestos, que inhiben la cadena respiratoria mitocondrial en el nivel del complejo de blc^ , especialmente, los compuestos de estrobilurina, específicamente, los compuestos de la fórmula I, de acuerdo a la invención en combinación con vitamina E o un derivado de la misma y/o con ácido abscísico y/o con un crioprotector convencional como sustancia auxiliar. La relación ponderal de compuestos, que inhiben la cadena respiratoria mitocondrial en el nivel del complejo de b/ci, especialmente, los compuestos de estrobilurina, específicamente, los compuestos de la fórmula I, a I avitamina E o sus derivados oscila, preferentemente, de 1 : 1 hasta 1 :20, muy preferentemente, de 1 :5 hasta 1 :20 y especialmente, de 1 :5 hasta 1 : 15. La relación ponderal de los compuestos usados de acuerdo a la invención, específicamente, los compuestos de la fórmula I, al ácido abscísico oscila, preferentemente, de 1 :0.05 hasta 1 : 1 , muy preferentemente, de 1 :0.05 hasta 1 :0.5 y especialmente, de 1 :0.1 hasta 1 :0.3. La relación ponderal de los compuestos usados de acuerdo a la invención, específicamente, los compuestos de la fórmula I, al crioprotector varía, preferentemente, de 1 : 10 hasta 1 : 1000, muy preferentemente, de 1 : 10 hasta 1 :500 y especialmente, de 1 : 0 hasta 1 : 100. En el contexto de la presente invención, vitamina E representa todas los compuestos del grupo de vitamina E, por ejemplo, los a- a ?-tocoferoles y los tocotrienoles y sus isómeros, sales y ésteres, siendo sin relevancia si estos compuestos son de origen natural o sintético. Sustancias que se usan muy preferentemente son el a-tocoferol natural (RRR-a-tocoferol) o un éster del mismo con un ácido carboxílico de 1 a 4 átomos de carbono, como p.ej. ácido fórmico, ácido acético, ácido propiónico o ácido butírico. Se usa, especialmente el acetato de oc-tocoferol.
Ácido abscísico es el ácido (S)(+)-5-(1-hidrox¡-2,6,6-trimetil-4-oxo-2-ciclohexenil)-3-metil-cis/trans-2,4-pentadienoico. Crioprotectores apropiados para el tratamiento de plantas abarcan, por ejemplo, los alcoholes, tales como propanol y butanol, polioles, tales como glicol o gliceroi, (poli)éter polioles, tales como dietilenglicol, trietilenglicol y polietilenglicoles con un peso molecular de hasta 500 y las sales de ácido fórmico, tales como, especialmente, las sales de sodio, potasio, amonio, calcio y magnesio del ácido fórmico. Un crioprotector de preferencia es el gliceroi. También es preferido usar uno o mas sales del ácido fórmico. En la fisiología de las plantas los cebadores son compuestos conocido por su actividad de "priming". Bajo "priming" se entiende un procedimiento, que resulta en una capacidad más alta de las plantas de aguantar tanto el estrés biótico (p.ej. patógenos fúngicos) y abiótico (p.ej. sequedad). Ya que los cebadores interaccionan de manera compleja con señales en las plantas, generalmente, pueden ser clasificadas como subgrupo de los biorreguladores (descrito por Conrath et al. (2006) Priming: Getting ready for battle. Molecular Planta-Microbe Interactions 19: 1062-1071). Bajo moduladores de etileno se entienden sustancias, que bloquean la formación natural del hormona vegetal etileno o bien de su acción [descritos, por ejemplo, en M. Lieberman (1979), Biosynthesis and action of etilene, Annual Review of Plant Physiology 30: 533-591 ; S.F. Yang y N.E. Hoffman (1984), Etilene biosynthesis and its regulation in higher plants, Annual Review of Plant Physiology 35: 155-189; E.S. Sisler et. al. (2003), 1 -substituted cyclopropenes: Effective blocking agents for etilene action in plants, Plant Growth Regulation 40: 223-228; WO2005044002]. Los compuestos usados de acuerdo a la invención, específicamente, los compuestos de la fórmula I, o su combinación con los auxiliares arriba indicados se emplean, típicamente, como las formulaciones que suelen ser usadas convencionalmente en la protección de cultivos de campo. Por ejemplo, pueden ser diluidos con agua en forma de soluciones concentradas, suspensiones o emulsiones y se aplicados por pulverización. Las formas de uso dependen del tipo de planta o de la parte de planta en que se aplica; en cualquier caso debe estar asegurada una distribución lo más fina posibles de los compuestos activos y auxiliares. Adicionalmente a los compuestos usados de acuerdo a la invención, específicamente, los compuestos de la fórmula I, de ser apropiado, en combinación
con vitamina E y/o ácido abscísico y/o el crioprotector, las formulaciones pueden comprender los auxiliares de formulación, que suelen ser usados para la formulación de productos para la protección de plantas de cultivo, por ejemplo, auxiliares inertes y/o sustancias tensoactivas, tales como emulsionantes, dispersantes, humectantes, etc. Sustancias tensoactivas apropiadas son las sales de metal alcalino o alcalinotérreo o de amonio de ácidos sulfónicos aromáticos, por ejemplo, ácido lignosulfónico, ácido fenolsulfónico, ácido naftalinsulfónico y ácido dibutilnaftalinsulfónico y de ácidos grasos, sulfonatos de alquilo y alquilarilo, éteres alquílicos, éteres laurílicos y sulfatos de alcoholes grasos y las sales de hexa, hepta y octadecanoles sulfatados y de éteres glicólicos, condensados de naftalina sulfonada y sus derivados con fomraldehído, condensados de naftalina o de ácidos naftalinsulfónicos con fenol y formaldehido, polioxietilen octilfenol éter, isooctilfenol, octilfenol o nonilfenol etoxilados, alquilfenil poliglicol éteres, tributilfenil poliglicol éter, alquilaril poliéter alcoholes, alcohol isotridecílico, condensados de alcohol graso/óxido de etileno, aceite castor etoxilado, éteres alquílicos de polioxietileno o polioxipropileno, poliglicol éter acetato de alcohol laurílico, ésteres de sorbitol, lejías residuales lignosulfíticas, metilcelulosa o siloxanos. Ejemplos de siioxanos apropiados son copolímeros de poliéter/polimetilsiloxano, que se denominan agentes de esparcimiento o de penetración. Auxiliares de formulación inertes son, esencialmente. fracciones de aceite mineral de punto de ebullición mediano hasta alto, tales como keroseno y aceite diesel, además, aceites de alquiltrán de carbón y aceites de origen vegetal o animal, hidrocarburos alifáticos, cíclicos y aromáticos, por ejemplo, parafinas, tetrahidronaftalina, naftalinas alquiladas y sus derivados, bencenos alquilados y sus derivados, alcoholes, tales como metanol, etanol, propanol, butanol y ciclohexanol, cetonas, tales como ciclohexanona, disolventes fuertemente polares, por ejemplo, aminas, tales como N-metilpirrolidona, y agua. Las formas de aplicación acuosas de los compuestos usados de acuerdo a la invención, específicamente, de los compuestos I, o sus combinaciones con vitamina E y/o ácido abscísico y/o el crioprotector pueden ser preparadas a partir de formulaciones de depósito, tales como emulsiones concentrados, suspensiones, pastas, polvos humectables o granulados solubles en agua por adición de agua. Para preparar emulsiones, pastas o dispersiones de aceite se pueden homogeneizar los compuestos usados de acuerdo a la presente invención, especialmente, los
compuestos de la fórmula I, o sus combinaciones arriba indicadas con vitamina E y/o ácido abscisico y/o el crioprotector, como tales o disueltos en un aceite o disolvente, en agua por medio de agentes humectantes, adhesivos, dispersantes o emulsionantes. Naturalmente, las formas de uso comprenderán los auxiliares usados en formulaciones de depósito. En una modalidad preferida se emplean los compuestos usados de acuerdo a la invención, específicamente, los compuestos de la fórmula I, o sus combinaciones arriba indicadas en forma de una mezcla de pulverización acuosa. La mezcla de pulverización acuosa comprende el respectivo compuesto en una cantidad de, preferentemente, 50 a 200 ppm. Cuando la combinación arriba mencionada es usada como mezcla de pulverización, entonces comprenderá la vitamina E en una cantidad de, preferentemente, 50 a 4000 ppm, muy preferentemente, 500 a 3500 ppm y, especialmente, 1 000 a 3000 ppm; el ácido abscisico en una cantidad de, preferentemente, 0 a 200 ppm, muy preferentemente, 2.5 a 100 ppm y, especialmente, 5 a 15 ppm, y el crioprotector en una cantidad de, preferentemente, 0 a 50000 ppm, muy preferentemente, 500 a 20000 ppm y, especialmente, 500 a 10000 ppm. Los componentes usados de acuerdo a la invención, específicamente, el compuesto activo de estrobilurina, otro compuesto activo adicional y/o el crioprotector pueden ser aplicados sobre la planta o las partes de la planta como mezcla o separadamente; en el último caso se deben aplicar los componentes individuales dentro de un intervalo de tiempo lo más corto posible. Los compuestos activos, especialmente, las estrobilurinas usadas de acuerdo a la invención pueden ser aplicadas en todas las plantas arriba mencionadas, pero también en especies de planta diferentes a estas. Dependiendo de la parte de planta sobre la cual se desea aplicar los compuestos, se pueden usar los aparatos conocidos como tales y convencionalmente usados en la práctica agrícola, prefiriéndose la aplicación en forma de soluciones de pulverización acuosas o mezclas de pulverización. El método inventivo es apropiado como aplicación foliar en cultivos de plantas vivientes, para la aplicación sobre el suelo antes de la siembra o plantación, inclusive para la aplicación sobre todo el suelo y aplicaciones en los surcos, proporcionando una protección en los tempranos estadios de maíz, trigo, soya, algodón y otros cultivos frente a estrés por frío. La aplicación se efectúa por pulverización hasta chorrear o por desinfección de las semillas. Se tratan, o bien, las partes aéreas de la planta o solamente partes
individuales de la planta, tales como flores, hojas o frutos. La selección de las partes individuales de la planta a tratar depende de la especie de planta y su estadio de desarrollo. Estadios más tardíos pueden ser protegidos, preferentemente, mediante tratamiento de las hojas. En una variante se aplican los compuestos sobre las semillas. Es preferido el tratamiento de los vástagos, plántulas, botones y flores en diferentes estadios, y de los frutos jóvenes La aplicación se efectúa, preferentemente, antes de un período de frío o de heladas. Preferentemente, se realiza por lo menos 12 horas, muy preferentemente, por lo menos 24 horas y especialmente, 36 horas a 20 días antes de que se cuenta con la llegada de temperaturas muy frías o heladas. Para el tratamiento de semillas se aplica el compuesto activo, generalmente, en una cantidad de 1 a 1000 g/100 kg, preferentemente, de 5 a 100 g/100 kg de semillas.
La presente invención se refiere, además, a un método para mejorar la tolerancia de las plantas frente a bajas temperaturas, preferentemente, para reducir o prevenir daños por fío y daños por heladas en plantas, que comprende aplicar una composición acuosa, que comprende un compuesto usado de acuerdo a la invención, específicamente, un compuesto de la fórmula I, sobre semillas, plantas o partes de planta. Lo arriba indicado con respecto a los compuestos usados de acuerdo a la invención, específicamente, los compuestos de la fórmula I, otros componentes, la composición acuosa y la aplicación vale aquí análogamente. La tolerancia de las plantas frente a temperaturas muy frías y heladas se alcanza mejorar marcadamente mediante el uso de acuerdo a la invención de los compuestos activos de estrobilurina. Especialmente, se evitan o por lo menos se reducen daños por fío y daños por heladas en plantas mediante el uso de acuerdo a la invención. Otra ventaja del uso de acuerdo a la invención del compuesto, que inhibe la cadena respiratoria mitocondrial en el nivel del complejo de b/Ci , especialmente, los compuestos activos de estrobilurina, tales como kresoxim-metilo, piraclostrobina y orisastrobina, especialmente, piraclostrobina y orisastrobina, preferentemente, kresoxim-metilo y orisastrobina, especialmente, orisastrobina, es su actividad contra el chamusco. Por tanto, las plantas tratadas de acuerdo a la invención no solamente son más resistentes a bajas temperaturas, sino que adicionalmente son protegidos frente a esta infección de las flores. El efecto protector de los tratamientos contra el estrés por frío no solo se pudo medir cuantitativamente en un ambiente controlado (p.ej. peras, maíz, arabidopsis,
trigo), sino que también se observó en otros cultivos tanto bajo condiciones prácticas del campo (p.ej. remolachas de azúcar, naranjas), demostrando la amplia aplicabilidad del principio. Los siguientes ejemplos ilustran la invención, pero no deben entenderse como limitativos. Ejemplo 1 1.1 Experimento Plantas de Arabidopsis thaliana se cultivaron en macetas (8 cm de diámetro) bajo condiciones ambientales controladas de 21 °C durante el día y 19°C durante la noche, bajo un régimen de luz de 9 horas de luz y 15 horas de oscuridad por día. El tratamiento químico se llevó a cabo 18 días después de la siembra. Cada maceta se trató con 500 µ? de solución de pulverización de acuerdo al plan de tratamiento abajo indicado con un pulverizador de bomba comercial. 1 ) no tratado 2) orisastrobina (250 ppm) 3) orisastrobina (500 ppm) 4) Piraclostrobina (500 ppm) Después del tratamiento químico se volvió mantener las macetas bajo las mismas condiciones para tres días. Entonces se transfirieron las macetas a tres condiciones diferentes para someterlos al estés por frío: Las plantas de control (A) se mantuvieron bajo las mismas condiciones arriba descritas. Las plantas expuestas a estrés (B) se transfirieron para 2 días a 6°C con un ciclo de día-noche de 9-15 h. Este tratamiento frío permite a las plantas de Arabidopsis a aclimatizarse hasta cierto punto al subsiguiente estrés de heladas (-4°C, 24 h en la oscuridad) (Wanner et al. , 1999, Cold-induced freezing tolerance in Arabidopsis, Planta
Physiology 120, 391-399). Las plantas bajo estrés (C) no se aclimatizaron al frío y se mantuvieron durante otros 2 días bajo ambiente controlado antes de transferirlas para un día a -4°C sin luz. Después de estos tratamientos se volvieron las macetas nuevamente a condiciones de crecimiento estándar (condiciones ambientales controladas) a como se describe arriba.
1.2 Resultados 3 días y 9 días después del tratamiento (3 días después de haber regresado de la exposición a heladas) se evaluó el tratamiento visualmente, evaluando los síntomas en por cien de daño sobre las hojas. A los tres días después del tratamiento químico no pudo observarse ningún daño de las hojas. Después de la exposición al estrés se encontraron los siguientes daños de las hojas:
Las condiciones ambientales seleccionadas fueron suficientes para inducir severos daños en las hojas. A como era de esperar, un período de aclimatización al frío de 2 días según la condición de estrés "B" era capaz de reducir los síntomas de estrés. Sin embargo, a como puede verse de los resultados, la reducción más efectiva de los síntomas de estrés se alcanzó con los tratamientos químicos inventivos. Ambos tratamientos químicos con orisastrobina y piraclostrobina resultaron altamente efectivos para reducir los síntomas de estés por frío en plantas de
Arabidopsis bajo diferentes condiciones de estrés. Ejemplo 2 2.1 Experimento Un ramo único en un peral Bosc en estadio de plena floración se pulverizó
hasta chorrear con Pristine 38WG aplicando una cantidad de 1 ,03 gramos por dos litros, equivalente a 14,5 onzas por acre con 200 galones por acre (Pristine® 38WG es una formulación comercial de piraclostrobina y boscalida fabricada por BASF Aktiengesellschaft). Se agregó Silgard ® 309 (un adyuvante comercial) a Pristine® y se usó en una cantidad de 0,297 mi por dos litros, equivalente a 2,0 oz por 100 gal o 4,0 oz por acre. Se pulverizó la formulación Pristine® mas Silgard®, dejando un sólo ramo en un árbol cercano sin pulverizar. Un día más tarde se usó una caja de temperatura controlada para ramos, que encerraba un armazón de ramo 2 metros de largo para reducir la temperatura de temperatura ambiente de 3.9°C a -3.7°C. El tiempo necesario para alcanzar esta temperatura era aproximadamente 10 minutos. Se aumentó la temperatura ligeramente y se mantuvo a entre -3.3°C y -2.8°C durante 5 minutos. Cinco días más tarde se evaluaron los botones en cuanto a daños debido a heladas. Se contó el número total de flores en cada ramo dentro de la caja. Se consideró dañada una flor cuando se veía una descoloración en la base del pistilo en la taza de la flor. 2.2 Resultados Rama de control: en total, 283 flores, 202 (71%) sanas y 81 (29%) dañadas Rama tratada de acuerdo a la presente invención: en total, 163 flores 147 (90%) sanas y 16 (10%) dañadas Por tanto, cuando se aplicó Pristine® antes del tratamiento frío se alcanzó un grado de protección substancial frente a heladas en las flores del peral. Ejemplo 3 3.1 Experimento Semillas de maíz (Zea mays; variedad Pioneer herbicide resistant 33P71 ) se trataron usando: T1 : Agua (no tratadas) T2: Piraclostrobina (5 g de ingrediente activo / 100kg de semillas) T3: Azoxistrobina (1 g de ingrediente activo / 100kg de semillas) A continuación, se plantaron las semillas en macetas de plástico (6 cm x 6 cm x 7 cm) llenadas con arena (metro mix). Se incubaron las semillas en una cámara de crecimiento (Conviron) a 25°C y 60 % de humedad con un ciclo de oscuridad/luz de 16/8 h durante 5 días (las plántulas estaban en estadio de code 10). En este momento se sometieron las plántulas a una temperatura de -5°C durante 3 horas. Después del
estés por frío se dejaron crecer las plántulas vivas hasta haber alcanzado code 13. En este estadio se sometieron otra vez por 2 horas a estés por frío a -5°C. Finalmente, se registró el número de plántulas dañadas (%) en cada tratamiento de semillas. 3.2 Resultados
Las condiciones ambientales elegidas eran suficientes para inducir severo daño en las hojas. A como puede verse de los resultados, el tratamiento de las semillas con los químicos inventivos de la fórmula I alcanzó reducir efectivamente los síntomas de estrés bajo estés por frío, mientras que las plantas de control tratadas únicamente con agua eran severamente dañadas. Ejemplo 4 Árboles cítricos adultos (Citrus sinensis) se trataron aplicando tres veces 1600 g/ha de piraclostrobina sobre las hojas en intervalos 14 a 18 días. Las aplicaciones comenzaron recién antes de las primeras heladas de la temporada de invierno. Las temperaturas bajaron a -6°C en tres períodos separadas de tiempo frío. Con temperaturas sumamente bajas se cuenta con que nada pueda reducir los daños. Sin embargo, aún bajo estas condiciones extremas, las plantas que crecían en las parcelas tratados con piraclostrobina presentaban menos síntomas de quema en las hojas y menos caída de frutos, que las plantas de control no tratadas. Los resultados de este experimento demuestran la buena protección frente a heladas de piraclostrobina en frutas cítricas.