Fiksasi
Fiksasi
Fiksasi
METODE PARAFIN
adalah metode pembuatan preparat irisan dengan
parafin sbg bahan embeddingnya
- TRIMMING
- SECTION
- AFFIXING
- STAINING
- MOUNTING
- LABELLING
NARKOSE
Hewan dimatikan dengan cara dibius (dinarkose), untuk
tikus putih,mencit,kelinci,marmot ,dsb menggunakan
bahan kimia tertentu
Yg harus diperhatikan :
- arah potongan
- Bahan/organ diambil secepatnya ;
untuk organ-organ yang berlumuran darah
atau banyak mengandung kotoran ,cuci dulu
dengan larutan garam fisiologis(NaCl 0,9%).
Mengapa? Bagaimana cara membuatnya?
FIKSASI
Adalah suatu proses/usaha yg dilakukan utk
mematikan komponen2 sel dan mengawetkan
semaksimal mungkin mendekati keadaan
sewaktu masih hidup
3. Lar. Helly
4. Lar. Carroy
5. Lar. Orth
Fiksatif tunggal yg umum dipakai
1. Formaldehid (HCHO)
- Gas yg kuat & tdk berwarna dgn
konsentrasi yg diperdagangkan: 37-39,5 %
- Jk akan digunakan utk fiksasi hrs
diencerkan mjd formalin 10 %. Bagaimana
caranya ???
- Uapnya berbahaya
- Mudah teroksidasi mjd formic acid cara
menetralisir : di (+) kalsium karbonat
Formaldehid lanjt…
Dapat mengerutkan dan mengeraskan
bahan
Sering digunakan utk fiksasi
Daya penetrasi sedang
Dpt membuat protein dlm jar. mjd lbh asam
meningkatkan afinitas thdp zat warna yg
bersifat basa
2. As. Asetat (CH3COOH)
Mrpkan zat yg tdk bwarna dgn bau yg tajam
Asam asetat glasial (AAG) : as. Asetat
padat & murni tetapi mencair pd suhu 17ºC
Dpt bercampur dengan air dan alkohol
Dpt mengendapkan nukleoprotein
sdgkan histon dlm nukleus akan diarutkan
Tdk dpt m’fiksir lemak
Daya penetrasi cepat
tp dpt mbengkakkan jaringan
3. As. Pikrat (C6H2(NO2)3OH)
Btk : kristal bwarna kuning
Paling sering digunakan sbg fiksatif
Pelarut yg umum digunakan : akuades
jenuh atau hampir jenuh
Mampu mengendapkan protein
mbtk picrates dpt dihilangkan dgn
lithium carbonat
Fiksatif Campuran yg umum digunakan
1. Larutan Bouin
- as. pikrat jenuh 75 ml
- Formalin 25 ml
- AAG 5 ml
Kelebihan :
Penetrasi cepat
Kelemahan :
Beberapa jaringan akan menjadi keras dan
rapuh bila dibiarkan berada dlm fiksatif
terlalu lama
2. Larutan Zenker
- Potassium Dikromat 2,5 % 100 ml
- Sodium Sulfat 1 gr
- Merkuri klorida 5 gr
Kelemahan :
Daya penetrasi lemah
Jika fiksasi terlalu lama menyebabkan
jaringan mjd keras
Fiksatif tidak tahan lama
3. Lar. Helly
Formula sama dgn Zenker sesaat
sebelum dipakai di (+)kan formalin 5-10%
sebnyk 5 ml
Kelebihan dan kekurangan hampir sama
dengan lar. Zenker
Fiksatif ini tdak tahan lama
dlm wktu 24 jam sdh terbentuk endapan
coklat
Disebut juga sbg larutan formol Zenker