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Fluorescencia Molecular

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Fluorescencia molecular

Dalia Gpe. Cruz Moreno


Paulina Estrada Crdenas
Introduccin
La fluorescencia es un proceso de emisin en el cual las molculas
son excitadas por la absorcin de radiacin electromagntica. Las
especies excitadas se relajan al estado fundamental, liberando su
exceso de energa en forma de fotones. una de las caractersticas
ms atractivas de los mtodos de fluorescencia es su sensibilidad
inherente, la cual es , con frecuencia, de uno a tres ordenes de
magnitud mejor que las de la espectroscopia de absorcin. No
obstante, los mtodos de fluorescencia se aplican mucho menos
que los mtodos de absorcin debido al nmero relativamente
limitado de sistemas qumicos que se pueden hacer fluorescer.
ESTADOS ENERGETICOS
L a fluorescencia surge de una transicin
La excitacin electrnica se da por medio de la absorcin de
fotones.
Al haber una absorcin de energa se presentan los estados
siguientes.

La absorcin del fotn se
da a una velocidad
enorme, sin embargo el
fenmeno de emisin se
da a una velocidad
bastante ms lenta.

http://flowcyt.salk.edu/fluo.html
Instrumentacin
Detector Amplificador
Instrumento de
lectura
Muestra
Monocromador
o filtro
Monocromador
o filtro
Fuente
El equipo electronico y el sistema de
computo calculan la relacin entre la
intensidad de la fluorescencia y la
intensidad del haz de referencia, lo cual
anula el efecto de las fluctuaciones de la
intensidad de la fuente.
La mejor fuente es la lmpara de arco
de xenn, tambin es usada la lmpara
de vapor de mercurio.
Los componentes de un
espectrofluormetro son los mismos que
los encontrados en los
espectrofotmetros, con la diferencia
que existen 2 monocromadores y que la
emisin de la muestra se monitorea por
medio de un detector que se encuentra
a 90 con respecto al haz de excitacin.


ESTRUCTURA
Tipo de compuesto :
*Los compuestos que presentan mayor fluorescencia son los
hidrocarburos aromticos.
*La fluorescencia se aumentara con la presencia de grupos
electro donadores y disminuir en presencia de grupos
electro aceptores.

TEMPERATURA,SOLVENTES Y PH
Puede contribuir a una desactivacin del compuesto
por conversin externa

El mismo efecto de desactivacin por conversin
externa se puede dar en una mala seleccin del
solvente.
A determinados PH pueden existir especies resonantes
que influyan en la fluorescencia.

METODO
Formacin de un quelato
fluorescente y se mide
su emisin.
Aplicaciones.
Deteccin y cuantificacin de substancias que son separadas a travs del
uso de la cromatografa de lquidos.

Determinacin de molculas orgnicas.

Deteccin de vitaminas como la tiamina, riboflavina y la piridoxina.

Determinacin de contaminantes en el medio ambiente (hidrocarburos
aromticos poli cclicos).
Compuestos
fluorescentes
cido 5-aminolevulnico

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