Biología General I 2024
Biología General I 2024
Biología General I 2024
MANUAL DE LABORATORIO
BIOLOGÍA GENERAL I
Actividades Fecha
Introducción al laboratorio de Biología General I 05 de febrero
Practica 1. 12 de febrero
Bioseguridad y Redacción de reportes
Practica 2. 19 de febrero
Método científico
Practica 3. 26 de febrero
Estereomicroscopio y Microscopio óptico
Practica 4. 11 de marzo
Observación de células procariotas
Practica 5. 18 de marzo
Factores que influye la estabilidad de la membrana celular
Examen parcial de laboratorio 1 de abril
Practica 6. 8 de abril
Mecanismos de transporte celular
Practica 7. 15 de abril
Metabolismo del peróxido de hidrogeno
Practica 8. 29 de abril
Mecanismo de acción de algunas enzimas
Practica 9. 6 de mayo
Respiración
Practica 10. 13 de mayo
Mitosis y meiosis
Practica 11. 20 de mayo
Genética mendeliana
Examen final de laboratorio 27 de mayo
Trabajo de Laboratorio
1. Antes de llegar a la práctica es esencial leer la guía. El alumno debe considerar los objetivos
relacionados con la práctica y tomarlos en cuenta durante el desarrollo de la misma. Así
mismo deberá consultar bibliográficamente los principios en que se fundamenta la práctica
y los procedimientos a seguir. Para completar la información que está en la guía de
laboratorio deberá responder a las preguntas Pre--‐laboratorio.
3. Cada alumno deberá traer un fólder con gancho, y en él, la guía de la semana que se
trabajará; adicionalmente, deberá traer consigo hojas en blanco en las que podrá realizar
anotaciones de la explicación, así como los resultados obtenidos durante la práctica. Habrán
prácticas en donde hará uso de hojas de microscopía (adjuntas en cada práctica donde se
requieran), las mismas podrá presentarlas como sus resultados en el reporte de laboratorio.
5. Los datos y observaciones del experimento, deberán ser anotados de forma INMEDIATA en
el fólder y escritos a lapicero. NUNCA deberá tratar de memorizar los resultados obtenidos.
6. Cada alumno deberá entregar al inicio del laboratorio el reporte de la práctica anterior y el
cuestionario Pre--‐laboratorio y Post--‐laboratorio asociado a esa práctica. El reporte se
aceptará ÚNICAMENTE al inicio de la práctica. En caso de no presentarlo, automáticamente
pierden el derecho de responder el examen corto de la práctica a realizarse.
7. Los reportes de laboratorio se entregarán en hojas tamaño carta, color blanco, impresas en
dúplex, letra Arial, tamaño 11 a espacio cerrado (1.0). No se aceptan reportes escritos a
mano. Debe tomar en cuenta la REDACCIÓN y ORTOGRAFÍA para la elaboración del reporte.
Para mayor información consulte la rúbrica adjunta.
9. En las hojas de microscopía, la elaboración de los dibujos deberán ser realizados a lápiz o
crayones, en los mismos tendrá que señalar las estructuras importantes, así como llenar la
información requerida (muestra, aumento, tinción y descripción) para cada dibujo.
10. La práctica será desarrollada de forma individual o colectiva según le sea indicado por su
catedrático. Tenga en cuenta que el trabajo de laboratorio representa el 30% de su zona
final.
Reglamento de Laboratorio
I. Resumen: (Muchas veces se coloca a la cabeza de un artículo). Deberá indicar los objetivos
principales, describir los métodos empleados, resumir los resultados y enunciar las
conclusiones principales. Debe escribirse en pretérito, porque se refiere a un trabajo ya
realizado y no debe exceder las 10 líneas.
II. Metodología: La finalidad principal es describir el diseño experimental y dar luego detalles
suficientes para que un investigador pueda repetir los experimentos. La mayor parte de la
sección debe escribirse en tiempo pasado. Características: específico y escrito en forma
cronológica.
1. ¿Con qué materiales se trabajó?
2. ¿Qué métodos fueron usados? Su diseño experimental.
III. Resultados: Tienen que expresarse clara y sencillamente. Las mediciones reiteradas se
presentarán en cuadros o gráficas. Nunca presente los mismo datos en más de una forma.
1. ¿Cuáles son los resultados de sus observaciones o experimentos? Puede incluir
tablas de datos o gráficas.
IV. Discusión: Esta parte se ocupa de decir qué significan los resultados obtenidos. Muestre
cómo concuerdan (o no) sus resultados e interpretaciones con los trabajos anteriormente
publicados. Los tiempos verbales oscilan continuadamente entre el presente y el pasado.
Los trabajos de otros se describirán en presente, pero sus propios resultados deberá
describirlos en pasado. Recuerde que en esta sección deberá hacer mención de sus tablas
y además citar dentro la literatura que fundamente lo discutido en formato APA.
1. ¿Qué deducciones o interferencias puede hacer en base de sus resultados y los de
los trabajos anteriores?
V. Conclusiones:
1. ¿Qué aplicaciones tienen sus resultados?
2. ¿Cuál es la importancia de sus resultados?
3. ¿Qué significa sus resultados y deducciones en lo que respecta a investigaciones
futuras?
VI. Anexos: Es una sección destinada para que se incluyan imágenes del experimento, gráficas,
cálculos o cualquier dato que apoyo lo que se ha descrito en la discusión. Cada anexo
deberá identificarse como “Anexo No. ” así como la fuente de donde se extrajo.
VII. Literatura citada: Presenta las referencias en orden alfabético y con el sistema de nombre
y año.
1. ¿Cuáles son los libros y artículos que usted citó en el texto de su artículo?
Ocular
Tubodel
ocular
Cabezal
Revólver
Brazo
Objetivos
Platina Pinzas
Condensador Tornillos de
Diafragma la platina
Micrométrico
Fuente de luz
Macrométrico
I. Introducción
II. Objetivos
Que el estudiante:
1. Integre a su actividad de laboratorio, las medidas de bioseguridad apropiadas, según sea
necesario.
2. Maneje muestras en el laboratorio de forma segura, tomando en cuenta la integridad propia
y de la muestra misma, para resguardar su salud y la fiabilidad de los resultados obtenidos
apartir de la muestra.
3. Conozca la forma correcta de descartar cada uno de los desechos generados durante las
prácticas de laboratorio
III. Alcance
Que el estudiante:
1. Aplique las reglas de bioseguridad en su trabajo diario.
2. Indique la división adecuada de trabajo dentro de un laboratorio de biología celular.
3. Sea capaz de descartar de manera correcta los distintos tipos de desechos generados
durante la práctica de laboratorio..
IV. Antecedentes
El término bioprotección se refiere a las medidas de protección de la institución y del personal destinadas
a reducir el riesgo de pérdida, robo, uso incorrecto, desviaciones o liberación intencionalde patógenos o
de toxinas (OMS, 2005).
Los errores humanos, las técnicas de laboratorio incorrectas y el mal uso de los equipos, son las
principales causas de accidentes de laboratorio e infecciones relacionadas. Es por ello que es necesario
cumplir con métodos técnicos diseñados para reducir al mínimo los accidentes de laboratorio más
comunes (OMS, 2005).
Figura 1.1
Fuente: Cortez, MF., et al. (2013). Guía de Bioseguridad para Laboratorios Clínicos. Chile, Chile: Instituto de Salud Pública de Chile.
Fuente: Cortez, MF., et al. (2013). Guía de Bioseguridad para Laboratorios Clínicos. Chile, Chile: Instituto de Salud Pública de Chile.
B. Niveles de bioseguridad
Existen diferentes niveles de bioseguridad en los laboratorios, de acuerdo al tipo de microorganismoque se
manipule. A continuación se muestra una tabla con los tipos de microorganismos y los niveles de
bioseguridad correspondientes, así como el tipo de práctica que se realiza y el equipo de seguridad necesario:
Tabla 1.1 Relación de los grupos de riesgo con los niveles de bioseguridad, las prácticas y el equipo
1. Bata: las batas cubren tanto la vestimenta como las regiones expuestas de los brazos. Por esta
razón la bata debe cumplir con las siguientes especificaciones: blanca, manga larga, que cubra
hasta la rodilla, con botones o broches al frente que permitan mantenerla cerrada en todo
momento que el individuo se encuentre dentro del laboratorio (Cortez, MF. et al., 2013).
2. Lentes de bioseguridad: Los ojos proveen una superficie acuosa en el cuerpo por medio del cual
pueden ingresar los patógenos. Es por ello que deben estar protegidos en todo momento, a
través del uso de lentes de protección de laboratorio. No se deben de utilizar lentes de contacto
dentro del laboratorio (Cortez, MF. et al., 2013).
3. Mascarillas: Se debe usar mascarilla cada vez que exista la posibilidad de exposición de la mucosa
nasal u oral a cualquier fluido biológico o a sus aerosoles y en procedimientos en los que se está
en riesgo de inhalación de vapores de sustancias tóxicas. Los tipos de mascarillas son las
siguientes:
a. Mascarilla quirúrgica: Se debe utilizar siempre que exista riesgo de salpicaduras con sangre u
otro fluido potencialmente infeccioso para evitar la exposición de la mucosa oral y nasal.
b. Mascarilla de alta eficiencia: Se debe utilizar siempre que exista riesgo de generación de
aerosoles de agentes que se puedan transmitir por inhalación. Por ejemplo cada vez que se
manipulan fuera del CBS, muestras que provienen de un paciente en el que se sospecha
Mycobacterium tuberculosis. Su uso es exclusivo en áreas técnicas del laboratorio. Pueden ser
reutilizadas por el trabajador siempre y cuando se mantenga limpia, no deformada y con el
filtro seco.
c. Mascarilla autofiltrante: Se debe utilizar al manipular o estar expuesto a productos químicos
como gases, vapores o sus combinaciones con productos contaminantes particulados. Existen
varios tipos de acuerdo a la protección respiratoria que ofrecen (Cortez, MF. et al., 2013).
4. Guantes: Son recomendados para eliminar o disminuir el riesgo de contacto de las manos con
sustancias tóxicas o microorganismos potencialmente presentes en cualquier muestra clínica
como también en el manejo de cepas en el laboratorio de microbiología. Los guantes desechables
se clasifican de acuerdo al material, a continuación se muestra los diferentes tipos de guantes
ysu uso adecuado:
Antes y después del uso de guantes debe realizarse lavado de manos. Su eliminación debe hacerse junto
con los residuos contaminados del laboratorio, en contenedor con bolsa roja. En la toma de muestras
clínicas, los guantes deben ser cambiados entre paciente y paciente, y desechados en bolsa roja. El uso de
este implemento es exclusivo en áreas técnicas del laboratorio y deben descartarse antes de abandonar
las instalaciones del laboratorio (Cortez, MF. et al., 2013).
5. Protección de los pies: Es recomendable el uso de zapato cerrado, puntera cerrada, sin
tacos(Cortez, MF. et al., 2013).
Esta función es responsabilidad del estudiante, debe realizarse al inicio y término de la jornada de
trabajo. Para las mesas de trabajo, se recomienda el uso de hipoclorito de sodio en concentracionesen
rango de 0.05 a 0.5% lo que dependerá de las características y facilidad de limpieza del material de la
superficie, así, en materiales porosos y superficies difíciles de descontaminar, se recomienda eluso de
concentraciones de 0.5%; si el material en cambio, es liso y de fácil limpieza, puede descontaminarse con
concentraciones más bajas de hipoclorito. El uso de alcohol al 70% en superficies ha demostrado tener
menor eficacia debido a su rápida evaporación y este se utiliza después de haber realizado la
descontaminación con el hipoclorito de sodio (Cortez, MF. et al., 2013).
1. Colocar toallas de papel absorbente sobre el derrame, de manera que se cubra toda el
áreainvolucrada.
2. Verter sobre las toallas de papel solución de hipoclorito de sodio al 0.5%.
3. Dejar actuar el hipoclorito de sodio durante 10 minutos.
4. Retirar las toallas de papel y descartar en contenedor con bolsa roja.
5. Limpiar con etanol al 70% y papel absorbente (Cortez, MF. et al., 2013).
La manipulación adecuada de los diferentes materiales de laboratorio permiten reducir al mínimo los
accidentes dentro del laboratorio. Por lo tanto es importante conocer el manejo adecuado de los
mismos. Así mismo, la disposición adecuada de residuos es esencial para controlar y minimizar los riesgos
desde los lugares de generación, favoreciendo el cuidado de la salud y seguridad de los trabajadores y
de la comunidad circundante. Es necesario que el laboratorio disponga de procedimientos documentados
que describan las actividades relacionadas con su manejo, incluyendo la segregación, el almacenamiento,
el transporte y la eliminación, en concordancia con las disposiciones locales y cumpliendo con la
reglamentación vigente (Cortez, MF. et al., 2013). Los tipos de residuos se describen en la siguiente tabla,
así como la forma apropiada de descarte:
Tabla 1.2: Tipos de residuos
Residuos peligrosos
Categoría 1 Categoría 2 Categoría 3 Categoría 4
Contaminados por Residuos sospechosos de Residuos que por sus
1. Residuos consistentes o sustancias radioactivas. contener agentes características físicas,
contaminados por drogas La segregación, patógenos en químicas y
citotóxicas almacenamiento, concentración o cantidad microbiológicas,
2. Residuos consistentes o transporte y tratamiento suficiente para causar pueden ser entregados
contaminados por solventes de estos residuos debe enfermedad a un huésped a la recolección
orgánicos halogenados realizarse conforme a la susceptible. se incluyen: municipal, y pueden
3. Residuos consistentes o normativa vigente. 1. Cultivos y ser dispuestos en un
contaminados por solventes Considerando las muestras relleno sanitario, ya
orgánicos no halogenados características que almacenadas. que no representan un
4. Residuos consistentes o presentan los laboratorios 2. Residuos patológicos riesgo adicional para
contaminados por sustancias del país, el manejo de la salud.
orgánicas peligrosas estos residuos no será 3. Sangre y derivados Adicionalmente, se
5. Residuos consistentes, que abordado en esta guía. 4. Cortopunzantes consideran los
contienen o están 5. Residuos de animales residuos especiales
contaminados por metales cadáveres o partes de que han sido
pesados animales sometidos a
6. Residuos consistentes o tratamiento de
contaminados por sustancias descontaminación
químicas inorgánicas dentro de laboratorio
peligrosas sustancias. que los genera.
Descarte de
Punzocortante: todo
agente capaz de perforar
de alguna manera la
bolsa.
Fuente: Cortez, MF., et al. (2013). Guía de Bioseguridad para Laboratorios Clínicos. Chile, Chile: Instituto de Salud Pública
de Chile.
F. Accidentes laborales
La prevención de accidentes laborales se realiza mediante buenas técnicas de laboratorio, sin embargo
es importante conocer las medidas a tomar en cuenta al momento de presentarse un accidente laboral
y adoptar medidas correctivas para evitar su repetición. Todo accidente laboral debe ser notificado al
superior para que el accidente quede documentado (Cortez, MF. et al., 2013).
1. Accidentes cortopunzantes
Estos accidentes ocurren durante la manipulación, limpieza y desecho de elementos corto punzantecomo
agujas, bisturís, material de vidrio, entre otros. Continua siendo la recapsulación de agujas y el llene
excesivo de las cajas cortopunzantes las principales fuentes de riesgo y para el personal que realiza el
aseo el principal riesgo se encuentra en las bolsas de basura doméstica en la que se eliminóuna aguja.
Estas deben depositarse en los recipientes para eliminar material cortopunzante, cuya característica
principal es estar fabricados en material resistente. En el caso de cortes o perforaciones, se recomienda
los siguientes procedimientos:
a. Lavar inmediatamente con mucha agua y buscar, inmediatamente, notificar al instructor.
b. Si el accidente es con material cortopunzante que está en contacto con alguna sustancia
química peligrosa puede ocurrir también quemadura e incluso intoxicación grave o hasta
envenenamiento. En ese caso, además de los procedimientos ya descritos, llame,
inmediatamente al área competente de su centro, informe el nombre de la sustancia química
involucrada en el accidente y siga las orientaciones.
c. Si hay cortes es necesario cuidar, primero, la herida, siguiendo los procedimientos
recomendados en el párrafo anterior. Después, es necesario remover los trozos de vidrio
utilizando pinzas estériles.
d. Si los pedazos de vidrio están sobre la mesa de trabajo, utilice una pinza para retirarlos; si es-
tuvieran en el piso, recoja los pedazos con una pala. Bajo ningún concepto recoja los pedazos
de vidrio con las manos ni permita que otras personas lo hagan.
e. En el caso de accidentes cortopunzantes con exposición a material biológico, luego de realizar
las acciones inmediatas descritas anteriormente se procederá seguir las directrices
institucionales con la intención de clasificar el riesgo y realizar la toma de muestra para
serología que corresponda (Cortez, MF. et al., 2013).
Las quemaduras son lesiones producidas por contacto térmico, químico o físico, pueden afectar la piel,
conjuntiva y mucosa. Pueden generarse lesiones que van desde inflamación tisular leve hasta lesiones
inflamatorias severas que conducen a la muerte. El manejo y tratamiento debe iniciarse en el sitio del
accidente, identificar el origen de la quemadura, mantener la calma, solicitar ayuda y realizar una
atención rápida ya que puede disminuir en forma importante la lesión, complicaciones ysus secuelas
(Cortez, MF. et al., 2013).
V. Prelaboratorio:
VII. Procedimiento
VIII. Referencias
Introducción:
Objetivos
Materiales
• Computadoras
Procedimiento
Pre--‐laboratorio
https://books.google.com.gt/books?id=CUg8AAAAQBAJ&printsec=frontcover&dq=solomon+biolo
gy&hl=es&sa=X&ved=0ahUKEwiL2tOi1--_gAhXBneAKHaS0D-
EQ6AEIKjAA#v=onepage&q=solomon%20biology&f=false
Post--‐laboratorio
Referencias
Vodopich, D. y Moore, R. (2011). Biology Laboratory Manual. 9º Ed. McGraw Hill. Estados Unidos
de América. 314 pp.
Práctica No. 2
Método científico
Introducción
El método científico es un conjunto de técnicas usadas por la comunidad científica para investigar
fenómenos naturales. Con este método, el investigador debe de plantear el problema y tener un
objetivo trazado para llevar a cabo la investigación científica y analizar los datos para alcanzar una
conclusión sobre la investigación.
El método científico no se trata de una receta, pero consiste en un ciclo con 5 pasos básicos y un paso
de retroalimentación:
El método científico se usa en todas las ciencias, incluida la química, la física, geología y psicología.
Los científicos hacen diferentes preguntas y realizan diferentes pruebas.
Objetivos:
• Analizar los resultados obtenidos para que el alumno se introduzca a la creación de discusión de
resultados.
Materiales:
• Tabletas de Alka--‐Seltzer
• Agua
• Estufa
• Termómetro
• Baño de María
• Cronómetro
Procedimiento:
3. Rotular 3 Beakers. Agregar la misma cantidad de agua a los tres Beaker. Uno de los Beaker debe
ser colocado en la refrigeradora, otro dejado a temperatura ambiente y otro en el baño de maría
a 60ºC. Mida con un termómetro las temperatura y regístrelas en Cuadro 1.
4. Una vez medida la temperatura, agregar la tableta de Alka Seltzer a cada Beaker y tomar el
tiempo que tarda en disolverse. No debe de esperar hasta que el burbujeo pare.
5. Haga una gráfica de regresión lineal.
Cuadro 1. Efecto de la temperatura en el tiempo que una tableta de Alka--Seltzer tarda en disolverse.
Temperatura (ªC) Tiempo en que tarda en
disolverse una tableta (s)
6. Ahora para medir el efecto del pH en el tiempo que le toma a una tableta de Alka--‐Seltzaer
disolverse, rotular tres Beakers y agregar soluciones con pH ácido, básico, neutro.
7. Con papel medidor de pH mida el pH de las soluciones y regístrelo en la tabla.
8. Agregar una tableta a los Beakers y medir el tiempo en el que tarda en disolverse la tableta.
9. Hacer una gráfica de regresión lineal con los datos.
Cuadro 2. Efecto de la temperatura en el tiempo que una tableta de Alka--Seltzer tarda en disolverse.
pH Tiempo en que tarda en
disolverse una tableta (s)
Pre--‐laboratorio
Post--‐laboratorio
1. ¿Su hipótesis fue correcta o incorrecta? Si fue incorrecta, indique la respuesta correcta basada en
la información de su experimento y conforme a fundamento teórico trate de explicar lo sucedido.
Si la respuesta coincide con su hipótesis indique cómo sus resultados apoyan su hipótesis.
2. Identificar las fuentes de error. ¿Qué pudo haber afectado sus resultados?
3. Escriba brevemente su conclusión.
Práctica No. 3
Estereomicroscopio y microscopio óptico
Introducción
La palabra microscopio es un vocablo que proviene del griego micro, que significa pequeño,y
scopein, mirar. Este aparato permite observar lo que es invisible a simple vista. Existen diversos tipos
de microscopios, desde la lupa, formada por una sola lente, hasta el microscopio electrónico (1).
Los microscopios empleados en las ciencias biológicas son comúnmente de tipo óptico o compuesto
y el estereoscópico o de disección; se disponen de una gran variedad de modelos en su construcción;
básicamente, los microscopios ópticos se caracterizan por tener un tubo que lleva dos sistemas de
lentes: el ocular en el extremo superior y el objetivo en el extremo inferior; la imagen se forma por
el objetivo y se magnifica por el ocular (2).
Estos dos microscopios son los que se utilizarán dentro del laboratorio de Biología Celular y
Molecular Humana, y de los cuales más adelante se identificarán sus partes y aprenderá como
usarlos.
Objetivos
Antecedentes
Microscopio óptico
Los microscopios de luz, compuestos u ópticos, usan lentes, para enfocar y amplificar los rayos de
luz que pasan a través de un espécimen o rebotan en él. La capacidad de definición de estos
microscopios es de aproximadamente de 1 micra (una millonésima parte de metro). Los
microscopios equipados con un solo ocular se llaman monoculares; aquellos con dos oculares,
binoculares (1).
Para poder observar en el microscopio óptico, las preparaciones deberán ser de pequeño tamaño y
delgadas, a fin de que la luz pueda atravesarlas. De forma conjunta, se deberá colocar la preparación
sobre una lámina de vidrio llamada portaobjetos y agregará ya sea agua o bien, algún colorante para
teñir y ver mejor la muestra. Finalmente, se cubrirá con una segunda laminilla de vidrio llamada
cubreobjetos.
En este instrumento, la imagen que se observa no es la imagen real del objeto, sino que es una
imagen virtual, dado que no sólo se encuentra aumentada, sino que además, se ve doblemente
invertida (3).
El microscopio de luz, compuesto u óptico está integrado por 3 sistemas, los cuales son:
1. Sistema Mecánico
2. Sistema Óptico
3. Sistema de Iluminación
Sistema Mecánico
El sistema mecánico es el esqueleto o armazón del microscopio, el cual proporciona soporte y
estabilidad al equipo. Está integrado por:
Sistema Óptico
El sistema óptico está formado por 2 sistemas de lentes: Oculares y Objetivos.
1. Lentes oculares: Van montados en la parte superior del tubo del microscopio. Su nombre
se debe a la cercanía de la pieza con el ojo del observador y sus aumentos van desde 4x
hasta 20x.
2. Lentes objetivos: Se encuentran en el revólver y quedan cerca del objeto a observar. Hay 2
tipos de objetivos: Objetivos secos y de Inmersión
Los objetivos secos se utilizan sin colocar alguna sustancia entre ellos y la preparación, únicamente
el aire. Proporcionan poco aumento que va desde 4x, 10x y 40x; dicho aumento se encuentra
grabado en el exterior de cada objetivo. En el caso del objetivo 4x es también llamado objetivo de
rastreo o panorámico; el de 10x es también llamado seco débil y 40x, seco fuerte.
Los objetivos de inmersión se utilizan colocando una sustancia entre ellos y la preparación, por lo
general, se emplea el aceite de cedro. Proporcionan un mayor aumento y definición, de 100x; se
pueden identificar ya que son los más largos y presentan un extremo contráctil que evita romper la
preparación en caso esté muy próxima.
Sistema de Iluminación
El sistema de Iluminación está formado por la fuente de iluminación, espejo, condensador, y
diafragma.
Microscopio estereoscópico
Estos microscopios no poseen condensador ni diafragma, estando estructurado por una base de 4
ó 5cm de altura que le sirve al mismo tiempo de platina, en cuya porción central se encuentra un
orificio de unos 7cm de diámetro cubierto por un cristal nevado.
El sistema de iluminación consiste en dos lámparas, una que se haya en la base del microscopio,
cuyos rayos atraviesan el cristal nevado de la platina, proporcionando una iluminación tenue y otra
instalada en la articulación que sostiene al sistema de los lentes, que proyecta la luz en dirección
oblicua sobre el objeto dando la posibilidad de observar cuerpos opacos. Este microscopio está
provisto de un tornillo único, articulado a una cremallera, que se utiliza para aproximar o alejar al
lente objetivo del objeto a examinar.
Eyepiece
Interpupillary scale
Eyetub
e
Microscope arm
One-‐‐hand
slide loading
stage
Revolving nose piece
Stage
1. Retire la funda del microscopio con cuidado, dóblela y guárdela en su puesto de trabajo.
2. Anótese en la línea disponible que encuentre en la Hoja de Control del Uso del Microscopio.
(Esta hoja es únicamente para llevar un control del uso de los microscopios y hacer constar
que usted lo está recibiendo en buenas condiciones).
3. Tome el microscopio por BRAZO con una mano y deslice su mano libre bajo la BASE;
cárguelo.
4. Desplace con cuidado el microscopio, hasta llevarlo al frente de usted, a unos 15cm de la
orilla de la mesa. NO LO ARRASTRE.
5. Observe los lentes oculares y verifique la magnificación que poseen. Anótelo en la sección
de cálculo de aumento.
6. Ubique el CABEZAL del microscopio y localice el REVÓLVER en cual sostiene los LENTES
OBJETIVOS.
7. Examine el OBJETIVO PANORÁMICO y anote la magnificación que posee en la sección de
cálculo de aumento.
8. Realice el paso 6 para los OBJETIVOS seco débil, seco fuerte e inmersión.
9. Calcule el AUMENTO para de cada OBJETIVO multiplicando la magnificación del LENTE
OCULAR por la magnificación del LENTE OBJETIVO, en el siguiente espacio.
Panorámico * =
Seco débil * =
Seco fuerte * =
Inmersión * =
1. Antes de comenzar a trabajar, explore el BRAZO del microscopio y localice los tornillos de
enfoque. El tornillo que se encuentra más próximo al BRAZO del microscopio (el más
grande), es el tornillo MACROMÉTRICO, el cual sube y baja la platina y ayuda a enfocar.
Sobre el tornillo MACROMÉTRICO, sobresale el tornillo MICROMÉTRICO (es más pequeño),
el cual afina y aclara la imagen enfocada.
2. Sobre un recuadro de papel, escriba a lápiz el número “5”.
3. Tomar una lámina PORTAOBJETOS y colocar el trozo de papel con el número, sobre ésta
lámina. Asegúrese que el número se pueda leer bien y de no colocarlo al revés.
4. Agregar una gota de agua destilada sobre la letra y colocarle un CUBREOBJETOS.
5. Verifique que el OBJETIVO que se encuentre en posición para observar su preparación, sea
el de menor aumento (4x). Si no es así, haga girar el REVÓLVER hasta ubicarlo.
6. Coloque la preparación sobre la PLATINA y sujétela con la PINZAS DE LA PLATINA. Cerciórese
que quede bien asegurado el portaobjetos, a fin de evitar que se deslice y quiebre la
lámina.
7. Asegúrese que la PLATINA se encuentre hasta abajo, en caso contrario, gire el tornillo
MACROMÉTRICO para conseguirlo.
8. Encienda la luz del microscopio.
9. Centre la preparación utilizando los TORNILLOS DE LA PLATINA que se encuentran ubicados
al lado derecho de la misma y con los cuales podrá moverla, hacia el lado derecho o
izquierdo y adelante o hacia atrás.
10. Mientras observa por los LENTES OCULARES, comience a girar el TORNILLO
MARCOMÉTRICO, hasta obtener una imagen.
11. Enfocada la imagen, afine y aclare la misma utilizando el TORNILLO MICROMÉTRICO y dibuje
lo que observa y cómo lo observa, en sus hojas de microscopía adjuntas a estapráctica.
12. Para cambiar al OBJETIVO seco débil, simplemente haga girar el REVÓLVER y afine la imagen
con el tornillo MICROMÉTRICO. Dibuje nuevamente lo que observa.
13. Repita el numeral anterior usando los OBJETIVOS seco fuerte y de inmersión. Al final de esta
segunda parte deberá contar con 4 dibujos en total (4x, 10x, 40x y 100x).
• Tome con una mano el BRAZO del estereoscopio y por la BASE con la mano que tenga libre,
levántelo.
• Traslade con cuidado a la mesa de trabajo a unos 15cm de la orilla. NO LO ARRASTRE.
• Anótese en la línea disponible de la Hoja de Control de Uso del Estereoscopio que
encontrará en su puesto de trabajo. Esta hoja es para tener un registro de quien utiliza este
instrumento y que usted ha recibido el mismo en buenas condiciones.
• Conecte el estereoscopio al fluido eléctrico.
• Encienda presionando el interruptor que se encuentra en la parte trasera derecha de la
base.
• En la esquina superior derecha del PIE del estereoscopio se encuentra ubicado el PANEL DE
CONTROL DE ILUMINACIÓN. Presione el ícono de bombillo inferior (ver la imagen siguiente).
Esto encenderá la luz de transmisión.
Post--‐laboratorio
1. ¿Qué objetivo utilizaría para enfocar el preparado y obtener mayor campo visual?
2. ¿Qué función cumple el condensador y el diafragma?
3. ¿Qué objetivo utilizaría para observar los detalles del campo visual?
4. ¿Qué aumento obtendría con un ocular de 5x y un objetivo de10x?
Anotaciones:
HOJA DE MICROSCOPÍA
Muestra:
Preparación:
Aumento:
Descripción:
Muestra:
Preparación:
Aumento:
Descripción:
Muestra:
Preparación:
Aumento:
Descripción:
HOJA DE MICROSCOPÍA
Muestra:
Preparación:
Aumento:
Descripción:
Muestra:
Preparación:
Aumento:
Descripción:
Práctica No. 4
Observación de células procariotas y eucariotas
Introducción
La célula es la unidad más pequeña que puede llevar a cabo todas las actividades propias de los
seres vivos. Es, por así decirlo, el bloque de construcción incluso de los organismos multicelulares
más complejos.
Las células procariotas son células que carecen de núcleo, y por lo general son mucho más
pequeñas que las eucariotas (el volumen de las procariotas es apenas un milésimo del de las
eucariotas y la longitud es apenas un décimo del de las eucariotas). Los organismos procariotas
son unicelulares y forman el Reino del mismo nombre que incluyen a las bacterias y las
cianobacterias.
El ADN suele estar limitado a una o más regiones nucleares, a veces llamadas nucleoides, que no
están rodeadas por una membrana distintiva. Algunas poseen pared celular o membrana externa
que envuelve en su totalidad e incluye a la membrana plasmática.
Las células eucariotas difieren de las células procariotas en muchos aspectos. Además de ser más
grandes, contienen una gran variedad de organelos membranosos que le proporcionan a la célula
una organización estructural y funcional.
Técnicamente una célula eucariota se divide en el núcleo (organelo que consta de una membrana
de doble capa que contiene el material genético) y el citoplasma (contiene varios tipos de organelos
y una matriz líquida llamada citosol). Las células eucariotas pueden dividirse en dos tipos: animal y
vegetal. Con algunas excepciones, todas las células eucariotas contienen los siguientes organelos:
1. Núcleo
2. Retículo endoplásmico (RE)
3. Aparato de Golgi
4. Vesículas
5. Mitocondrias
Objetivos
• Microscopio óptico
• Goteros con agua
• Láminas con bacterias (cocos gram + y bacilos gram - ‐)
• Portaobjetos
• Azul de metileno
• Raspado de mucosa bucal
• Cubreobjetos
• Pinzas y bisturí
• Cianofitas
• Palillos de dientes
• Material vegetal Elodea, papa y cebolla (Los 2 últimos proporcionado por los
estudiantes).
Procedimiento
Cianofitas:
1. Observar y dibujar las muestras de cianofitas.
2. Reconocer presencia de pared celular, ausencia de organelos y núcleo.
Bacterias:
3. Observar y dibujar bacterias.
Cloroplastos en Elodea:
Los plástidos son organelos unidos a membranas exclusivas de plantas. Los cloroplastos contienen
clorofila, los leucoplastos contienen almidón. Los cromoplastos contienen distintos tipos de
pigmentos, incluyendo carotenoides, los cuales les dan el color amarillo o naranja a las plantas.
1. Tome una hoja de Elodea, colóquela entre porta y cubreobjetos con una gota de
agua y cuidando que la cara inferior quede hacia arriba.
2. Enfoque y observe: pared celular, presencia y color de cloroplastos y vacuola.
Pre--‐laboratorio
Post--‐laboratorio
Anotaciones:
Hojas de microscopía
Muestra:
Preparación:
Aumento:
Descripción:
Muestra:
Preparación:
Aumento:
Descripción:
Muestra:
Preparación:
Aumento:
Descripción:
Muestra:
Preparación:
Aumento:
Descripción:
Muestra:
Preparación:
Aumento:
Descripción:
Muestra:
Preparación:
Aumento:
Descripción:
Muestra:
Preparación:
Aumento:
Descripción:
Muestra:
Preparación:
Aumento:
Descripción:
Muestra:
Preparación:
Aumento:
Descripción:
Práctica No. 5
Introducción:
Las células están rodeadas por una doble capa de lípidos, llamada membrana celular. La función de
la membrana es mantener unidos todos los componentes celulares y proteger la célula del ambiente
exterior. También regula lo que entra y sale de la célula para que no pierda demasiados nutrientes
o demasiados iones. La membrana celular se compone básicamente de: proteínas, colesterol y
lípidos. El modelo del mosaico fluido es la forma en la que los científicos describen cómo se ve y
cómo funciona la membrana celular. De acuerdo a este modelo, las moléculas juntas forman un
mosaico que se mueve constantemente de manera fluida, lo cual hace que la membrana no sea una
barrera completamente impenetrable. El estado físico de los lípidos de una membrana se describe
por su viscosidad o fluidez. Hay factores que influyen en la fluidez de los lípidos de la membrana,
como la temperatura.
La temperatura afecta la forma en que se mueven los lípidos y qué tan cerca se encuentran. Si la
temperatura se mantiene relativamente tibia (37ºC), los lípidos se encuentran en estado
relativamente líquido y la bicapa parece un cristal líquido bidimensional. A dicha temperatura los
ejes de las moléculas mantienen una disposición paralela. Cuando la célula está en un ambiente
frío se juntan más las moléculas formando una estructura rígida, es decir, se forma un gel cristalino
congelado en el que las cadenas de ácido graso de los fosfolípidos está muy limitado y por ello
impide el paso de sustancias. La temperatura a la cual ocurre este cambio se le llama temperatura
de transición. En el caso que ésta sea mayor, las moléculas de lípidos y sus colas son libres de
moverse en ciertas direcciones; además que las proteínas de la membrana se desnaturalizan y por
ello se daña la membrana.
Otros factores que puede dañar la estabilidad y permeabilidad de la membrana es el cambio de pH,
ya que los y la concentración de solventes orgánicos.
Objetivos
Materiales:
• Tubos de ensayo
• Extracto de remolacha
• Buffer pH 2
• Buffer pH 5
• Buffer pH 6
• Buffer pH 7
• Buffer pH 9
• Buffer pH 11
• Etanol 20%, 40%, 60%, 80%, 100%.
• Remolacha
Procedimiento
1. Cortar 12 discos de remocha lo más delgados posible y rotular 4 tubos con las siguientes
temperaturas: 0ªC, 37ºC, 60ºC, 90ºC.
2. Colocar los discos en un Beacker y lavarlos con agua del chorro, cambiando agua hasta que
ya no se destiñan.
3. Agregar 5 mL de agua a cada tubo.
4. Colocar 3 discos de remolacha a cada tubo.
5. Incubar un tubo a 0ºC (freezer de la refrigeradora), 37ªC, en el baño de maría a 60ªC y
90ºC.
6. Dejar los tubos incubados por 30 minutos.
7. Comparar con los estándares.
8. Hacer una gráfica (eje x: temperatura y eje y: número de estándar).
1. Cortar diez discos de remolacha y lavarlos con agua del chorro hasta que no se destiñan.
2. Rotular los tubos de ensayo con la concentración de etanol adecuada: 20%, 40%, 60%,
80%, 100% (un tubo de ensayo para cada concentración).
3. Medir 2 mL de cada solución y agregar al tubo adecuado.
4. Agregar dos discos de remolacha a cada tubo.
5. Esperar 5 minutos.
6. Comparar con los estándares.
7. Hacer una gráfica (eje x: concentración de etanol y eje y: número de estándar).
Pre--‐laboratorio:
Post--‐laboratorio:
Referencias
Anotaciones:
Práctica No. 6
Mecanismos de transporte celular
Introducción
Las sustancias pueden atravesar la membrana celular por diferentes procesos: transporte activo y
transporte pasivo. El transporte activo es el movimiento de moléculas o iones con o en contra del
gradiente de concentración o de difusión de la sustancia por el uso de energía metabólica (ATP).
El transporte pasivo ocurre solamente por difusión y no utiliza energía metabólica.
DIFUSIÓN
El tiempo necesario para alcanzar una distribución uniforme depende de varios factores: la
temperatura de la solución, el tamaño de las moléculas, la viscosidad del medio. El conocimiento
del tiempo que requieren las moléculas para difundir dentro de las células es importante para los
estudios de transporte biológico. Las moléculas de pequeño tamaño migran como si estuvieran en
agua mientras que las proteínas y las moléculas de tamaño similar son retrasadas porque chocan
con obstáculos mayores como los ribosomas y los ácidos nucleicos.
En las células eucarióticas, debido a su tamaño, los tiempos de difusión son muy grandes e
incompatibles con las reacciones químicas en las que las distintas sustancias son necesarias. Sin
embargo, las subdivisiones en compartimentos limitados por membranas facilita la difusión. Un
gradiente de concentración es una medida de la diferencia en la concentración de una sustancia
entre dos regiones. A mayor gradiente de concentración, mayor será la velocidad de difusión.
POTENCIAL AGUA
Los iones inorgánicos, azúcares, aminoácidos, proteínas, nucleótidos, etc., reaccionan entre sí y con
otras sustancias (en el grado en que la actividad de la célula lo requiera) gracias a su interacción
con el agua en su carácter de solvente. En estado disuelto, esas sustancias se desplazan de un punto
al otro del sistema celular siguiendo sus propios gradientes de concentración y actividad.
El agua cumple también el papel de reactivo o de producto en numerosos puntos del metabolismo
celular. Así, pues, las moléculas de ésta se incorporan (hidrólisis) a un gran número
de reacciones metabólicas. Además es del agua de donde proceden los hidrógenos involucrados en
la fotosíntesis y el oxígeno que es liberado como uno de los productos del proceso. El potencial
químico del agua (ψa) que se halla en el citoplasma de las células dependerá de la temperatura, la
presión, las sustancias disueltas y de la retención por diversos tipos de superficies. Dado que no
es sencillo determinar el potencial químico absoluto del agua en una condición determinada, lo que
se hace habitualmente es compararlo con el potencial del agua pura en las condiciones estándares
(25oC, presión normal), al que se denomina ψºa. Es esa diferencia, a la que se denomina potencial del
agua (ψa -‐‐ ψºa = Ψa).
POTENCIAL OSMÓTICO
Si colocamos agua pura y una solución en un recipiente, pero separados por una membrana
semipermeable, es decir capaz de permitir el paso de las moléculas de agua pero no de las moléculas
de soluto, el agua pura se moverá desde su compartimiento hacia el que contiene la solución. El agua
pura del compartimiento que la contiene, posee un nivel energético, una capacidad para realizar
trabajo y un potencial agua superiores al del agua que forma la solución en el otro compartimiento
y por eso tiende a moverse, a fluir a través de los poros de la membrana, que por su tamaño lo
permiten. Este caso particular de difusión, en que el flujo neto de agua se produce a través de una
membrana semipermeable, recibe el nombre de ósmosis y es un fenómeno que se produce
corrientemente entre células vecinas o entre compartimientos celulares separados por membranas.
Si observamos bajo el microscopio células vegetales, veremos que si están inmersas en una solución
hipertónica, las células se contraen como consecuencia de la salida de agua. En cambio si la solución
es hipotónica el agua entra a la célula y se manifiesta un exceso de presión que recibe el nombre de
presión de turgencia pues la membrana plasmática presiona contra la pared celular.
TURGENCIA:
La presión de turgencia determina el estado de rigidez de una célula, es el fenómeno por el cual las
células al absorber agua, se hinchan, ejerciendo presión contra las membranas celulares, las cuales
se ponen tensas. En células vegetales, de esto depende que una planta este marchita o firme.
Objetivos
Materiales
• Microscopio óptico
• Portaobjetos
• Cubreobjetos
• Cajas Petri
• Pipetas Pasteur
• Probetas 10 y 50ml
• Tubos de ensayo
• Gradillas
• Alcohol al 70 %
• Lanceta estéril
• Pinzas
• Bisturí o cuchillas
• Lancetas estériles
• Goteros con agua destilada
• Solución salina al 15%
• Sacarosa 0.1M, 0.2M, 0.4M, 0.6M y 0.8M
• NaCl al 0.6%, 0.9% y 1.2%.
• Material vegetal:Elodea o hierba de pollo, papa grande (La última
proporcionada por los estudiantes 1 por mesa)
• Algodón
• Bisturí
Procedimiento
1. Rotular 6 cajas de Petri indicando cuál llevará el agua destilada y cuáles las
concentraciones de sacarosa (0.1 M, 0.2M, 0.4M, 0.6M y 0.8M).
2. De una papa extraer 24 cuadros de 1cm2. No incluir cáscara en ellos. Todos
deben ser de la misma papa.
3. Colocar en cada caja de Petri 4 cuadros de papa.
4. Pesar rápidamente los grupos de cuatro cuadros (P inicial) y colocar las
soluciones (agua destilada y sacarosa) en cada grupo de forma que la solución
cubra los cuadros depapa.
5. Transcurridos por lo menos 20mins., retirar los cuadros, quitarles el exceso de
soluciones con papel absorvente y volver a pesarlos (P final).
6. Completar la siguiente tabla. ¿Qué conclusiones obtiene?
Agua destilada
0.1M
0.2M
0.4M
0.6M
0.8M
Pre--‐laboratorio
Post--‐laboratorio
Anotaciones:
Hojas de microscopía
Muestra:
Preparación:
Aumento:
Descripción:
Muestra:
Preparación:
Aumento:
Descripción:
Muestra:
Preparación:
Aumento:
Descripción:
Práctica No. 7
Metabolismo del peróxido de hidrógeno
Introducción
Metabolismo
El metabolismo incluye todas las reacciones químicas que ocurren en los seres vivos. En casi
todos los casos, estas reacciones son controladas por enzimas. Las reacciones pueden servir
para sintetizar nuevos compuestos para construir más células y mantener las ya existentes;
obtener la energía necesaria para el funcionamiento de la célula ó catalizar sustancias para
aumentar la velocidad de las reacciones
Tipos de Metabolismo
Los organismos no se diferencian en la manera de procurarse compuestos inorgánicos del medio, todos
los obtienen de una manera directa. En cambio, si se van a diferenciar en cómo van a obtener las
sustancias orgánicas. Ciertos organismos las obtienen a partir de sustancias inorgánicas, como el
CO2, H2 O, NO3, PO4-‐‐3, etc. A estos organismos se les llama autótrofos. Otros son incapaces de
elaborar los compuestos orgánicos a partir de compuestos inorgánicos y deben obtenerlos del medio
son los organismos heterótrofos.
Los organismos además de materiales necesitan también energía. Cuando la fuente de energía es
la luz, el organismo recibe el nombre de fotosintético. Cuando la energía la obtienen a partir de
sustancias químicas, tanto orgánicas como inorgánicas, los llamaremos quimiosintéticos.
Enzimas
Son proteínas o asociaciones de proteínas y otras moléculas orgánicas o inorgánicas que actúan
catalizando los procesos químicos que se dan en los seres vivos. Esto es, actúan facilitando las
transformaciones químicas; acelerando considerablemente las reacciones y disminuyendo la
energía de activación que muchas reacciones requieren.
Las enzimas, como catalizadores que son, no modifican la constante de equilibrio y tampoco se
transforman, recuperándose intactas al final del proceso. La rapidez de actuación de las enzimas y
el hecho de que se recuperen intactas para poder actuar de nuevo es la razón de que se necesiten
en pequeñísimas cantidades.
Es de destacar que las enzimas son específicas. Esto es, una enzima puede actuar sobre un substrato
o un grupo de substratos relacionados (especificidad de substrato) pero no sobre otros; por
ejemplo: la sacarasa, que hidroliza solo la sacarosa.
Otras enzimas, sin embargo, tienen especificidad de acción al realizar una acción determinada pero
sobre múltiples substratos; por ejemplo: las lipasas que hidrolizan los enlaces éster en los lípidos.
Debido a esta especificidad de las enzimas existen en la célula miles de enzimas diferentes. La
especificidad de las enzimas ha llevado a comparar a éstas con llaves y a los substratos con
cerraduras (modelo de la llave y la cerradura).
Mecanismo de acción
La catálisis enzimática de las reacciones es esencial para los sistemas vivos. En condiciones
biológicamente significativas, las reacciones sin catalizar tienden a ser lentas. La mayoría de
moléculas biológicas son muy estables al pH neutro, temperatura suave y ambiente acuoso presente
en el interior de las células. Es decir que, muchas de las reacciones necesarias para digerir los
alimentos, enviar señales nerviosas o contraer el músculo no se dan a una velocidad útil sin catálisis.
Una enzima soluciona estos problemas al proporcionar un ambiente dentro del cual una reacción
determinada es, energéticamente, más favorable. El rasgo distintivo de una reacción catalizada
enzimática es que tiene lugar dentro de los confines de una bolsa de la enzima denominada sitio
activo. La molécula fijada en el sitio activo y sobre la que actúa el enzima se denomina sustrato. El
complejo enzima--sustrato es de importancia central en la acción de los enzimas.
Las enzimas tienen un pH y temperatura óptima de trabajo y se mueven en rangos de acción muy
estrechos. Una vez que la enzima hace contacto con su sustrato, facilita el trabajo de otras enzimas
que lo degradan y luego se forma el producto que es liberado para que la célula lo pueda absorber
y utilizar.
Objetivos
Materiales
• Tubos de ensayo
• Beaker 100ml
• Gradillas
• Goteros
• Mortero
• Arena fina
• Probetas 10ml
• Papel pH
• Agitadores de vidrio
• Baño de maría
• HCl 1N
• NaOH 1N
• Hidroxilamina 5%
• ½ libra hígado fresco (proporcionado por los estudiantes, por laboratorio).
• 1 zanahoria grande ((proporcionado por los estudiantes, por laboratorio).
Procedimiento
Durante el metabolismo normal, una célula puede producir el peróxido de hidrógeno (H 2O2) como
resultado, por ejemplo, en el cambio de ácido pirúvico a ácido acético o vinagre (en las levaduras).
¿Qué otra reacción en la célula produce H2O2?. El H2O2 llamado agua oxigenada, es una sustancia
tóxica para las células. ¿Qué sucede con el H 2O2 producido en las células? Este experimento debe
sugerirle la respuesta.
Presencia de enzimas
Pre--‐laboratorio
Post--‐laboratorio
Anotaciones:
Práctica No. 8
Mecanismo de acción de algunas enzimas
Introducción
En la célula ocurren procesos físicos y químicos. Al proceso mediante el cual se sintetizan algunas
moléculas se le denomina anabolismo y al proceso mediante el cual algunas moléculas se degradan
se le llama catabolismo. La suma de estas reacciones se le conoce como metabolismo.
La digestión de la mayoría de los alimentos ocurre mediante reacciones de hidrólisis. Por ejemplo,
el almidón, un polisacárido, se rompe en moléculas de glucosa mediante su hidrólisis. Todo esto
ocurre dentro de las células gracias a compuestos químicos que controlan estas reacciones. Las
sustancias que se encargan de controlar estas reacciones y la velocidad en que ocurren sin causar
daño a la célula, se llaman catalizadores. Las enzimas son proteínas que trabajan como catalizadores
y hacen posible este tipo de reacciones. Las enzimas son altamente específicas, hay una enzima para
cada producto o sustrato que debe modificar. Tienen un pH y temperatura óptima de trabajo y se
mueven en rangos de acción muy estrechos. Una vez que la enzima hace contacto con su sustrato,
facilita el trabajo de otras enzimas que lo degradan y luego se forma el producto que es liberado
para que la célula lo pueda absorber y utilizar.
Objetivos
Materiales
Procedimiento
Tabla 1. Observaciones
Tubo 3 minuto 5 minutos 10 minutos Conclusiones
(Despues de picar)
1) Solo gelatina
Tabla 2. Observaciones
Observaciones
Tubo
Cambios de coloración, después del baño María a 37 C por 10 minutos
1. 2ml almidón + 2 gotas de lugol
1. Realizar el mismo experimento (inciso 7 al 12) con la diferencia que los tubos se
calentarán en el baño de agua hasta los 70C.
2. Anotar observaciones en la Tabla No. 3.
Tabla 3. Observaciones
Observaciones
Tubo
Cambios de coloración, después del baño María a 70C por 10 minutos
1. 2ml almidón + 2 gotas de lugol
Pre--‐laboratorio
1. Caso: Está investigando moléculas que inhiben una enzima bacteriana. Descubre
que la adición de varios grupos de fosfatos a un inhibidor mejora su efectividad.
¿De qué modo el conocimiento de la estructura tridimensional de la enzima
bacteriana ayudaría a entender por qué los grupos fosfato mejoran la efectividad
del inhibidor?
2. ¿Por qué se necesita menos energía para que ocurra una reacción cuando una
enzima está presente?
Post--‐laboratorio
1. ¿Por qué son específicas las enzimas y por qué no puede cada una acelerar
muchas reacciones diferentes?
2. Compare y contraste la inhibición reversible con la irreversible.
3. Compare y contraste la inhibición competitiva con la no competitiva.
Anotaciones:
Práctica No. 9
Respiración
Introducción
En las células eucariotas la respiración se realiza en las mitocondrias y ocurre en tres etapas:
La respiración celular es una parte del metabolismo, concretamente del catabolismo, en la cual la
energía contenida en distintas biomoléculas, como los glúcidos, es liberada de manera controlada.
Durante la respiración una parte de la energía libre desprendida en estas reacciones exotérmicas,
es incorporada a la molécula de ATP, que puede ser a continuación utilizado en los procesos
endotérmicos, como son los de mantenimiento y desarrollo del organismo (anabolismo).
La respiración celular podría dividirse en tres tipos, según el papel atribuido al oxígeno:
a) Respiración aeróbica: Hace uso del O2 como aceptor último de los electrones
desprendidos de las sustancias orgánicas. Es la forma más extendida, propia de
una parte de las bacterias y de los organismos eucariontes, cuyas mitocondrias
derivan de aquéllas. Se llama aerobios a los organismos que, por este motivo,
requieren O2.
b) Respiración anaeróbica: No interviene el oxígeno, sino que se emplean
otros aceptores finales de electrones, muy variados, generalmente
minerales y, a menudo, subproductos del metabolismo de otros
organismos. La respiración anaeróbica es propia de procariotas
diversos, habitantes sobre todo de suelos y sedimentos, y algunos de
estos procesos son importantes en los ciclos biogeoquímicos de los
elementos. No debe confundirse la respiración anaerobia con la
fermentación, que es una oxidación--‐r educción interna a la molécula
procesada, en la que no se requiere ni O2 ni
ningún otro aceptor de electrones. Se llama anaerobios a los
organismos que no requieren O2 para la respiración.
c) Respiración facultativa: Interviene o no el oxígeno.
Durante la respiración, el oxígeno es transportado hasta los diversos tejidos. Al mismo tiempo, los
subproductos del metabolismo son eliminados. La eliminación del CO 2 está relacionada con su efecto
en los niveles de ácido y bases en la sangre. Cuando el CO2 entra en la sangre se combina conel agua
y se disocia, de manera reversible originando ácido carbónico que a su vez se disocia en iones
hidrógeno e iones carbonato. El aumento en la cantidad de los iones hidrógeno en la sangre hace
que el pH de ésta disminuya. Cuantos más H + se acumulan, la sangre se hace más ácida, a medida
que se eliminan se hace más básica.
Objetivos
Materiales
• Agua destilada
• Fenolftaleína
• NaOH 2.5%
• Papel pH
• Probetas 100mL
• Reloj
• Beaker 200mL
• Probetas
• Cronómetros
• Elodea
• Caracoles
• Alumino
Procedimiento
Pre--‐laboratorio
1. En la década de 1940 algunos médicos comenzaron a prescribir dosis bajas de un
fármaco llamado dinitrifenol (DNP) para ayudar a los pacientes a perder peso.
Este tratamiento fue abandonado después de la muerte de algunos pacientes.
Hoy sabemos que el DNP vuelve a la membrana interna de la mitocondria
permeable el paso de iones H+. A partir de los conocimientos sobre el
metabolismo energético, explicar cuáles son la consecuencias que acarrearían el
uso de DNP.
2. Hace un siglo, Louis Pasteur investigaba el metabolismo de la levadura, un
organismo anaerobio facultativo. Observó que, en una solución de agua y azúcar,
este microorganismo se multiplicaba. También observó que la multiplicación era
mayor cuando la solución era aireada.
a) Explicar la importancia del azúcar para la levadura.
b) Justificar la diferencia del crecimiento de la levadura en condiciones
aeróbicas y anaeróbicas.
Post--‐laboratorio
Anotaciones
Práctica No. 10
Mitosis y Meiosis
Introducción
MITOSIS
Dependiendo del tipo de células donde se lleve a cabo, la división celular toma el nombre de
Mitosis (si ocurre en células somáticas) o Meiosis (si ocurre en
células germinales).
MEIOSIS
La meiosis es el proceso de división celular mediante el cual se obtienen cuatro células hijas con la
mitad de cromosomas. Este proceso se realiza en las glándulas sexuales para la producción de
gametos. Se producen en dos etapas principales: meiosis I y meiosis II.
MEIOSIS I
En la primera división meiótica se evidencian los cromosomas, cada uno de ellos formados por dos
cromátidas. Estos cromosomas, mitad de ellos de origen materno y la otra mitad de origen paterno,
los cromosomas en una célula diploide se dividen nuevamente y es donde se genera diversidad
gnética. Al final de la primera división meiótica, se han producido dos células y cada una de ellas
con la mitad de los cromosmas homólogos. Las fases que la forman son:
• Profase I: Es la etapa más compleja del proceso y a su vez se divide en 5
subetapas: leptoteno, zigoteno o cigonema, paquiteno, diploteno y diacinesis.
• Metafase I: Los cuatro homólogos están dispuestos simétricamente en una línea
imaginaria, en el plano ecuatorial, transversal a la zona. De esta manera, cada uno
se dirige hacia uno de los dos polos de la célula.
• Anafase I: Las fibras del huso meiótico se ponen en contacto con los
centrómeros; cada tétrada migra a un polo de la célula.
• Telofase I: En los dos polos de la célula madre se forman dos grupos de
cromosomas haploides, donde solo hay un cromosoma de cada tipo. Los
cromosomas se encuentran todavía en la fase tétrada. El citoplasma de las dos
células se distribuyen y se realiza a citocinesis, es decir, la división celular de la
célula madre en dos células hijas separadas. Las fibras del huso meiótico se
desintegran y los cromosomas se dispersan.
MEIOSIS II
Objetivos
Materiales
• Microscopio óptico
• Láminas fijas de meiosis
Procedimiento
Pre--‐laboratorio
Post--‐laboratorio
Anotaciones
Hojas de microscopía
Muestra:
Preparación:
Aumento:
Descripción:
Muestra:
Preparación:
Aumento:
Descripción:
Muestra:
Preparación:
Aumento:
Descripción:
Muestra:
Preparación:
Aumento:
Descripción:
Muestra:
Preparación:
Aumento:
Descripción:
Muestra:
Preparación:
Aumento:
Descripción:
Muestra:
Preparación:
Aumento:
Descripción:
Muestra:
Preparación:
Aumento:
Descripción:
Muestra:
Preparación:
Aumento:
Descripción:
Muestra:
Preparación:
Aumento:
Descripción:
Muestra:
Preparación:
Aumento:
Descripción:
Muestra:
Preparación:
Aumento:
Descripción:
Muestra:
Preparación:
Aumento:
Descripción:
Muestra:
Preparación:
Aumento:
Descripción:
Muestra:
Preparación:
Aumento:
Descripción:
Práctica No. 11
Genética Mendeliana
Introducción
Uno de los artículos científicos más famosos, titulado “Experiments in Plant Hybridazation” escrito
por Gregor Mendel se ha convertido en la base de la genética y herencia. Los experimentos y
conclusiones presentados en este artículo forman lo que hoy conocemos como “Genética
Mendeliana”. La gran contribución de Mendel fue el reemplazo de la teoría de la mezcla (Blending
Theory of Inheritance), la cual afirma que todas las características se mezclan. Mendel propuso la
teoría de la herencia particulada. Esta afirma que: (1) características heredadas son determinadas
por diferentes factores (ahora llamados genes), (2) estos factores ocurren en pares (genes están
en cromosomas homólogos paternos y maternos), (3) los genes se segregan por lo que solo uno
del par de homólogos es contenido en un gameto particular (Voldopich y Moore, 2011).
Un gen es una unidad hereditaria en un cromosoma. El gen tiene un estado alternativo llamado
alelos. Los alelos para un gen en particular ocurren pares. Los alelos que enmascaran la expresión
de otros alelos se llaman dominantes. Estos alelos se designan con una letra mayúscula (porejemplo,
P). Alelos cuya expresión es enmascarada por alelos dominantes son llamados recesivos, y se
designan con letra minúscula (por ejemplo, p). El genotipo de un organismo incluyen todos los alelos
presentes en la célula, sean dominantes o recesivos. Mientras que la apariencia física es conocida
como fenotipo. Por tanto, si las flores moradas (P) son dominante a las flores blancas (p), una planta
con flores moradas tendrá el genotipo PP o Pp. Una planta con flores blancas únicamente tendrá el
genotipo pp. Cuando los pares de alelos son idénticos (PP o pp), el genotipo es homocigoto.
Heterocigoto se refiere a un par de alelos diferentes (Pp) (Voldopich y Moore, 2011).
Objetivos
Materiales
• Hojas
• Computadoras
• Monedas
Procedimiento
Hay dos posibles copias de un gen que el óvulo o espermatozoide podrían obtener de cada
par, pero solamente recibe una de ellas. Si la probabilidad de obtener uno de los dos es igual,
esto puede ser expresado como ½, tal y como la probabilidad de obtener cara oescudo
cuando lanzamos una moneda. Un cuadro de Punnett puede ser usado para predecir las
posibles combinaciones de los alelos.
NOTA: Para esta parte del laboratorio el estudiante debe traer dos monedas deQ.1.00
1. Usar dos monedas. Una moneda representa un par de genes en un padre. La otra moneda
representa el mismo par de genes en el otro padre.
TT =
Tt =
tt =
3. Asumiendo que ambos padres son heterocigotos (Tt) llene el siguiente cuadro de Punnet y
registre la descendencia bajo la probabilidad esperada.
4. ¿Cuál fue la proporción de la descendencia? Estos son las probabilidades predichas.
Dedo largo:
Dedo corto:
5. Lance las monedas juntas. Los resultados obtenidos solo podrían ser: PP, Pp o pp.
6. Lance las monedas 10, 50, 100 veces y registre cada resultado en la columna
correspondiente.
Número de TT Tt tt
lanzamientos
10
Razón
50
Razón
100
Razón
Fenotipo
tt
Parte II. Cruce Dihíbrido
NOTA: cada pareja debe de traer dos monedas de Q.1.00 y dos monedas de 25 centavos.
4. Ambos padres son heterocigotos para las dos características, es decir, YyRr x YyRr.
5. Tirar las cuatro monedas y anotar en el cuadro de resultados.
6. Determinar las probabilidad teórica y la empírica.
Cuadro de Punnett
Tabla de resultados:
Instrucciones:
Forma de ojos
Grosor de labios
Visión
Habilidad verbal
Longitud dedos
1. En el hombre el color pardo de los ojos "A" domina sobre el color azul "a". Una
pareja en la que el hombre tiene los ojos pardos y la mujer ojos azules tienen dos
hijos, uno de ellos de ojos pardos y otro de ojos azules. Averiguar el genotipo del
padre y la probabilidad de que el tercer hijo sea de ojos azules.
*Nota: De hecho la situación es complicada porque hay más de un gen involucrado
en el color de ojos, pero para este ejemplo solo tomaremos en cuenta un gen.
2. La acondroplasia es una anomalía determinada por un gen autosómico que da
lugar a un tipo de enanismo en la especie humana. Dos enanos acondroplásicos
tienen dos hijos, uno acondroplásico y otro normal. La acondroplasia, ¿es un
carácter dominante o recesivo?. ¿Por qué? ¿Cuál es el genotipo de cada uno de los
progenitores? ¿Por qué? ¿Cuál es la probabilidad de que el próximo descendiente
de la pareja sea normal? ¿Y de qué sea acondroplásico? Hacer un esquema del
cruzamiento.
3. La fenilcetonuria (FCU) es un desorden metabólico que se hereda con carácter
autosómico recesivo. Dos progenitores sanos tienen un hijo con FCU.
Indique los fenotipos y genotipos de todos los apareamientos que teóricamente
pueden dar un descendiente afectado de FCU.
¿A cuál de estos tipos de apareamiento pertenece el caso descrito?
¿Cuál es la probabilidad de que el siguiente hijo padezca también la enfermedad?
¿Cuál será la probabilidad de qué un hijo normal (sano) de estos padres sea
portador heterocigótico para FCU?
4. La fibrosis cística es una enfermedad causada por un mutación en el gen para el
canal de cloro. Dado que una copia del gen produce suficientes proteína, la
enfermedad es recesiva, solo se muestra cuando las dos copias tienen la mutación.
Suponga que un hombre con historial familiar se casa con una mujer que no tiene
la historial familiar de la enfermedad. ¿Cuál es el genotipo de cada uno? Si estas
dos personas se convierten en padres, cuál es la probabilidad de que sus hijos
tengan la enfermedad? Cuál es la probabilidad de que tengan hijos portadores?
¿Hay alguna diferencia si los hijos son hombres o mujeres?
5. La enfermedad de Huntington resulta de un error genético en el cual los
componentes del sistema nervioso se degenera con la edad. La enfermedad no
se muestra has los 50 años. Es una enfermedad dominante, dado que una copia
de la mutación es suficiente para causar problemas. Suponga que un hombre con
dos niños de 15 y 17 años, desarrolla la enfermedad a la edad de los 50 años y él
es heterocigoto. Su esposa no tiene la enfermedad. ¿Cuál es el genotipo del
hombre, de la mujer y de los niños? ¿Cuál es el chance de los niños para tener esta
enfermedad?
6. Hemofilia es una enfermedad ligada al sexo, dado que el gen es encontrado en el
cromosoma X (no hay gen paralelo encontrado en el cromosoma Y. La proteína
hecha por este gen es conocida como factor 8 de coagulación, uno de los
componentes del sistema de coagulación. Sin esta proteína la sangre no se
coagulará apropiadamente. Con solo una copia del gen, un heterocigoto tendrá
suficiente proteína para hacer funcionar normalmente el sistema de coagulación,
por lo tanto la enfermedad es recesiva. Suponga un hombre tiene hemofilia y tiene
una hija que es portadora. Ésta se casa con un hombre normal para el rasgo
de hemofilia. ¿Cuál es la probabilidad de que una hija de este apareamiento sea
hemofílica? ¿Cuál es la probabilidad de tener un hijo hemofílico? Si la pareja tiene
4 hijos, ¿cuál es la probabilidad de que los 4 nazcan con hemofilia?
7. En los humanos hay un gen que controla la formación de músculos en la
lengua que permiten a las personas a enrollar la lengua. Hay personas que carecen
de estos músculo y no pueden enrollar sus lenguas. La habilidad para enrollar la lengua
es dominante sobre no enrollarla. La habilidad de saborear ciertas sustancias es
también genéticamente controlado. Por ejemplo, una sustancia llamada
feniltiocarbonato (PTC) , la cual algunas personas pueden saborear (característica
deominante), mientras otras no pueden (característica recesiva). La representación
sería: R representa que puede enrollar la lengua, r que no puede enrollarla, T que
puede saborear PTC y t que no puede saborearla. Supongamos que una mujer
homocigota que enrolla la lengua y que no saborea PTC se casa con un hombre
heterocigoto enrollador de lengua y que saborea PTC. Si estos padres tuvieran 12 hijos
cuántos esperaríamos que fueran homocigotos no saboreadores de PTC y que
pudieran enrollar la lengua?
8. Codominancia: Algunos genes tienen más de dos alelos. Un ejemplo de ello
es el grupo sanguíneo ABO. En este ejemplo solo consideraremos los tres alelos más
comunes del grupo sanguíneo, los cuales codifican por la estructura de unantígeno en
la superficie de los glóbulos rojos. Los alelos con los que trabajaremos se simbolizan
con IA, IB, i. Sin embargo una persona solo puede tener dos copias del gen. Los posibles
genotipos son: IA IA, IAi, IBIB, IBi, IAIB, ii. Para simplificar trabajaremos con la siguiente
notación: AA, AO, BB, BO, AB. Suponga que una persona con tipo de
sangre A y una persona con tipo de sangre B se casan. ¿Qué posible genotipo tendrán
sus hijos?
9. Hay otro gen que codifica para un antígeno diferente que se encuentra en
la superficie de los glóbulos rojos. Éste antígeno es el factor Rh. Sra. Johnston, Sr.
Johnson, y Sra. Jonhstone entraron al mismo hospital y dieron a luz a tres niñas. Se
cree que las niñas fueron mezcladas, por lo que se realizó prueba de grupo sanguíneo
a las niñas y a los padres. Teniendo como resultado:
Ms. Johnston A+
Mr. Johnston B+
Ms. Johnson B-
Mr. Johnson O+
Ms. A+
Johnstone
Mr. A-
Johnstone
Bebé A O+
Bebé B AB-
Bebé C B-
Haga cuadros de Punnett, piense en los genotipos con los cuales tendrían mayor variedad
de descendencia. Determine los posibles padres de cada bebé. NOTA: El grupo sanguíneo
NO es una prueba de paternidad. Únicamente puede ser usado para eliminar a una persona
como padre potencial.
Uso de Pedigree
Para elaborar un árbol genealógico, existe una serie de símbolos para representar
diferentes aspectos:
Una vez que se reúnen los datos de varias generaciones y se dibuja la genealogía, un
análisis cuidadoso permitirá determinar si la característica es dominante o recesiva. Hay
algunas reglas a seguir:
Referencias
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Anotaciones