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Práctica 5 Lab Análisis Q. C.

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Laboratorio de Análisis Químico Clínicos

Reporte de Prácticas

Por : César Antonio Díaz Cisneros


Profesor: Gaudencio Gutiérrez Ruiz
PRÁCTICA # 5
TINCIÓN DE FROTIS SANGUÍNEO

TIPO DE PRÁCTICA: individual TIEMPO DE DURACION: 1 hora

OBJETIVOS
● Conocer los procedimientos para teñir un frotis sanguíneo.
● Conocer el fundamento de la tinción de Wright.
● Identificar por su morfología y tinción cada tipo de células presentes en la sangre.

INTRODUCCION
Los colorantes ácidos (rojos) se unen con los componentes básicos (azules) de las células y los colorantes
básicos son atraídos por los componentes ácidos de las mismas; y las estructuras de neutrófilos son aquellas
que tienen afinidad por ambos tipos de colorantes.
Esta característica de los colorantes se ha utilizado para diferenciar de acuerdo con sus afinidades tintoriales
todos los tipos de células. Así por ejemplo, los eritrocitos aparecen con tono naranja-rosado, debido a la
concentración de estructuras básicas como la hemoglobina, la cual tiene afinidad por los colorantes ácidos.
Como la eosina. En el caso de los gránulos de los Eosinófilo también son atraídos por la eosina, derivado de
ahí su nombre. Por su parte los colorantes básicos teñirán como el RNA y DNA citoplasmáticos.

MATERIAL
MATERIAL REACTIVOS
1. 1 frotis sanguíneo (previamente identificado) 1. Colorante de Wright
2. Cronometro y/o reloj. 2. Agua destilada
3. Soporte para tinción (2 varillas de vidrio unidas 3. Alcohol
en sus extremos con manguera) y/o contenedor
para tinción
4. Pizeta
5. Pipetas Pasteur
PROCEDIMIENTO
1. Coloque sobre el soporte el frotis sanguíneo.
2. Añada el colorante de Wright gota a gota, hasta cubrir la extensión
3. Adicione el mismo número de gotas de agua destilada.
4. Deje actuar de 4 a 5 minutos.
5. Lave las extensiones con agua destilada
6. Limpie la parte inferior del portaobjetos con una torunda impregnada de alcohol.
7. Seque el frotis por agitación al aire “o dejarlo en posición inclinada sobre un papel filtro para que se
seque por evaporación.

NOTA: Existen colorantes comerciales para la tinción de Wright con los cuales no hay necesidad de utilizar
agua sino únicamente se utiliza alguna solución buffer y se siguen las instrucciones del fabricante

RECOMENDACIONES
● Para obtener resultados óptimos de tinción, los frotis se teñirán dentro de la primera hora después de
realizados.
● Cuando adicione el colorante al frotis, procure que no se derrame.
● Antes de teñir un frotis asegúrese que este identificado. ● No soplar sobre la extensión para tratar
de secarlo.

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INVESTIGACIÓN

1. ¿Si no se dispone de colorante Wright ya listo para su uso ¿cómo lo prepararía?


Para preparar 100 mL se requiere de colorante de Wright (0.3g), metanol (97.0 mL) y glicerol (3.0 mL).
Disuelves en un mortero el colorante con el glicerol. Una vez disuelto se adiciona el metanol trasvasándolo a
un frasco oscuro. Y se agita para mezclar.

2. ¿A qué se atribuye que después de la tinción el frotis adquiere un aspecto rosado intenso y que
características tintoriales tendrían las células?
Toma un color morado o rosa dependiendo el tipo de célula teñida, da una coloración púrpura a los núcleos
de los leucocitos y a los gránulos neutrofílicos y da color rosado a los eritrocitos.

3. ¿Cuál será la causa por la que un frotis tiene un color azul o violeta terminada la tinción y que
características tintoriales mostrarían las células?
La coloración característica azul o rosa es el producto de la combinación de los colorantes purificados de
eosina y tiazina.

RESULTADOS
Después de muchos intentos logre un frotis decente para analizar, pero después de hacer la tinción y dejar
reposar la muestra 5 minutos al volver ya no estaba mi frotis debido a alguna confusión de mis compañeros
y debido a esto perdí mi frotis.
CONCLUSIONES
En una practica donde habemos tantas personas realizando la misma práctica lo correcto sería etiquetar mi
frotis y colocarle una inscripción con plumón para identificarlo en la gradilla de tinción, por no haber hecho
esto pasó esta confusión. También pudimos observar las consecuencias de realizar una mala tinción puesto
que los tiempos y técnicas son delicados, podrías arruinar partes de o quemar toda la muestra si no se
cuidan los tiempos de la tinción y la manipulación de la muestra.

BIBLIOGRAFIA
1. Rodak, Bernardette F. (2014). Fundamentos y aplicaciones clínicas., segunda edición., México D.F
editorial Médica Panamericana.
2. https://www.google.com/url?sa=t&source=web&rct=j&url=https://www.ispch.cl/sites/default/files/
RECOMENDACIONES%2520PARA%2520LA%2520TINCI%25C3%2593N%2520DEL%2520FROTIS
%2520SANGU
%25C3%258DNEO.pdf&ved=2ahUKEwi54_f1peH6AhXvlGoFHZ1tB9IQFnoECAwQBg&usg=AOvVaw0UFDn
1Iu5bZVnLnuz0ggDT

3. https://www.google.com/url?sa=t&source=web&rct=j&url=https://es.m.wikipedia.org/wiki/Tinci
%25C3%25B3n_de_Wright&ved=2ahUKEwi54_f1peH6AhXvlGoFHZ1tB9IQFnoECA0QAQ&usg=AOvVaw0
bABofliFAjtnaWxOyvpQx

4. https://www.google.com/url?sa=t&source=web&rct=j&url=https://
qbhematologia.files.wordpress.com/2011/08/prc3a1ctica-
3.pdf&ved=2ahUKEwjs3sSupOH6AhXwrmoFHWYnARcQFnoECAwQBg&usg=AOvVaw28e7LFg1BFdM0G0l
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