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Informe de Fitopatología - Completo Final

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UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA

Curso: Introducción a la agronomía

Profesora: Heidi Huarhua Zaquinaula

Departamento: Fitopatología

Integrantes:
Burga Sempértegui, Leslie 20190015
Mamani Olgado, Marisol 20190054
Navarro Anchapuri, Xiomara 20190062
Pacheco Ramos, Anderson 20190066
Elías Martínez, Jazmin 20190030
Luna Arévalo, Vanesa 20190053

Facultad: Agronomía

LA MOLINA - LIMA - PERU


ÍNDICE

Introducción ...................................................................................................................... 2

Justificación .................................................................................................................. 2

Objetivos ....................................................................................................................... 2

Hipótesis ....................................................................................................................... 2

Marco teórico .................................................................................................................... 2

Materiales y métodos ........................................................................................................ 3

Materiales ..................................................................................................................... 3

Metodología .................................................................................................................. 3

Resultados y Discusión ..................................................................................................... 4

Resultados ..................................................................................................................... 4

Discusión ...................................................................................................................... 4

Anexos .............................................................................................................................. 7

Referencias bibliográficas ................................................................................................ 8


Introducción
El arándano es una especie vigorosa, de rápido crecimiento y altos rendimientos, pero
susceptible a varias enfermedades que pueden alterar su desarrollo, acortar su vida
productiva y afectar la calidad y cantidad de fruta. Por estas razones es importante saber
y observar el proceso de cómo se presentan los signos y síntomas.
En el presente informe daremos a conocer el proceso llevado a cabo en el curso de
introducción a la agronomía, con el grupo de fitopatología. Este proceso cuenta con
varias etapas que serán explicaras detalladamente, teniendo en cuenta solo los días
transcurridos hasta la fecha de entrega del presente informe.
La experimentación ha sido llevada a cabo en el laboratorio de fitopatología, utilizando
distintos materiales de laboratorio como placas petri, piceta, buretas, probeta y papel
toalla que permite mejor la absorción del agua. Utilizando arándanos frescos y en un
buen estado; estaremos siguiendo paso a paso las indicaciones de la profesora a cargo,
cumpliendo también todas las exigencias y cuidados que se requiere para esta
experimentación.

Justificación
Esta experimentación nos ayudará a identificar mejor el signo y síntomas del patógeno
Alternaria alternata en los arándanos, tendiendo 3 grupos de prueba, lo cual nos servirá
de base para poder un diagnóstico de la enfermedad que causa este patógeno y aplicar
la solución adecuada. Estas observaciones nos serán como base para seguir los estudios
superiores que llevaremos a cabo más adelante en nuestra vida universitaria.

Objetivos
 Reconocer los síntomas y signos que se presenta en el arándano infectado por
el patógeno Alternaria alternata
 Lograr un óptimo conocimiento con respecto al patógeno Alternaria alternata

Hipótesis
 Colocando el patógeno, Alternaria alternata, en los grupos de experimentación
serán infectados y el grupo “testigo” no será infectado por dicho patógeno.
 Podremos observar los signos y síntomas que se presentarán en los arándanos
infectados.

Marco teórico
El arándano americano, Vaccinium corymbosum L. (Ericaceae), es un arbusto de hoja
ancha, caduca, que se distribuye por el centro este norteamericano (PRITTS y
HANCOCK, 1992). Sus hojas son alternas y dentadas con peciolos cortos sus flores
son péndulas y se abren solitarias en la axila de las hojas, el cáliz, poco marcado, tiene
4 o 5 dientes obtusos y la corola esférica verde pálido deja sobresalir el estigma.
A continuación, se describen las enfermedades más comunes que afectan a este frutal.
Según el boletín N°6 “Manual de manejo agronómico del arándano” del Instituto de
Investigaciones Agropecuarias (INIA)
ARMILARIOSIS (Armillaria mellea)
Las plantas sufren un lento decaimiento junto con clorosis del follaje. El cuello de las
plantas se torna corchoso, la corteza se desprende con facilidad y bajo ésta se observan
masas de micelios gruesos, de color blanco y dispuestos en abanicos, las que también
pueden ser visibles hacia el interior de la corona.
PUDRICIÓN GRIS DE FLORES Y FRUTOS (Botryotinia fuckeliana)
Los síntomas se observan de preferencia en flores y frutos, aunque también pueden
afectarse las hojas, en éstas causa lesiones de color café que comienzan generalmente
por el centro de la lámina y se extienden hacia los bordes, produciendo una necrosis
extensiva de las hojas. En el caso de las flores se producen lesiones necróticas, las que
crecen hasta atizonar por completo la flor y posteriormente el racimo floral.

La Alternaria alternata es un microorganismo que normalmente es detectado en el


ambiente. Posee una fase patogénica en la que puede infectar a diversas especies,
favorecido por el estrés, madurez y senescencia del hospedero. La infección de los
frutos puede iniciarse en el campo cuando estos se encuentran en maduración, puede
ingresar a través de heridas que se producen por rameo, escaldaduras, granizo,etc. Sin
embargo esta se desarrolla mayormente durante la conservación de la fruta .Esto según
fuentes del Sistema Nacional Argentino de Vigilancia y Monitoreo de Plagas
(SINAVIMO)

Materiales y métodos
Materiales
 Una caja de arándanos
 Una botella de lejía
 Papel toalla
 Jeringa de tuberculina
 Bata y guantes
 Alternaria alternata en solución
 Una caja de plástico
 Alcohol
 Piseta con agua destilada
 3 placas Petri
Metodología
1. Elaboración de la cámara húmeda
o Desinfectaremos la caja de plástico para prevenir posibles agentes
contaminantes.
o Colocaremos 3 pliegos de papel toalla, asegurándonos que estos cubran
completamente la base.
o Humedeceremos el papel toalla con agua destilada contenida en la
piseta.
2. Desinfección de los arándanos
o Para esto necesitaremos que la proporción de ácido clorhídrico en el
agua se encuentre el 0.5%, nuestra botella de lejía se encontraba al 4%
por lo que hicimos nuestros cálculos y usamos 62.5ml de lejía para
completar los 500ml que se requerían para la desinfección.
o Sumergiremos los arándanos en el agua con ácido clorhídrico al 0.5%
durante 2 minutos.
3. Inoculación de los arándanos
En el trabajo tendremos tres grupos de 10 arándanos cada uno.
o Testigos: este grupo no será infectado con Alternaria alternata
o Infectados sin heridas: para este grupo aplicaremos Alternaria alternata
en el pedúnculo y solo una o dos gotas
o Infectados con heridas: para la realización de las heridas utilizaremos
las jeringas de tuberculina. Haremos 3 heridas en el envés de cada
arándano y colocaremos las gotas de Alternaria alternata sobre estas.
4. Finalización del trabajo
o Desinfectaremos las placas Petri para prevenir agentes infecciosos.
o En las placas Petri colocaremos el grupo de testigos, infectados sin
heridas e infectados con heridas
o Finalmente colocaremos las placas Petri en la cámara húmeda.

Resultados y Discusión
Resultados
En el tiempo que pudimos observar nuestro experimento en la cámara húmeda, de
exactamente una semana, se vio que los arándanos que presentaron mayor presencia de
signos, como micelios, fueron las muestras inoculadas sin heridas. La temperatura fue
constante y la humedad solo varió en primer día.
Por otra parte, dentro de las muestras inoculadas con heridas, se nos presentó un
arándano infectado con Botrytis cinerea y en la muestra de los testigos absolutos, uno
de los diez resulto infectado con Alternaria alternata. Evaluar ANEXOS
Discusión
Alternaria alternata se clasifica taxonómicamente dentro de la clase de hongos
imperfectos, orden Hyphomycetes y familia Dematiaceae. Según el Sistema Nacional
Argentino de Vigilancia y Monitoreo de plagas (SINAVIMO) “Este patógeno afecta tanto
a tallos como también fruta inmadura como madura, que muestran alguna alteración
fisiológica o daños como golpe de sol, deficiencia de nutrientes”
En nuestra experimentación con los arándanos hicimos heridas a un grupo para poder ver
mejor el efecto del patógeno en la fruta, este patógeno produce pudriciones, también
decoloraciones en muchas partes de las plantas, manchas en hojas y frutos. En casi todos
los casos, este se comporta como un parásito de heridas. El ingreso directo y estomatal
puede invadir un hospedero que está fisiológicamente debilitado.
Alternaria alternata tiene una amplia gama de hospederos, este hongo tiene una habilidad
para competir como saprófito en tejidos en descomposición y posee además una fase
patogénica en la que puede infectar diversas especies, favorecido por estrés, madurez y
senescencia de hospedero lo podemos encontrar en tomate, trigo, papaya, arándanos etc.
Su diseminación es por corrientes de aire estando sus esporas presentes en el aire y polvo
en todas partes y también en lugares húmedos; de esta forma, el riesgo de infección está
siempre presente. Adicionalmente este hongo puede infectar tejidos vegetales
previamente dañadas por otros patógenos. Es el caso por ejemplo de frutos colonizados
inicialmente por Botrytis cinérea, agente causal de pudrición gris. Alternaria alternata
puede mantenerse a lo largo del tiempo en forma de micelios en los restos de las plantas
que ya han sido infectadas y/o en forma de esporas o micelios en la superficie de
semillas.(Sandoval & Nuñez, 2016)
Alternaria alternata afecta a sus hospederos mediante la toxina A que ataca solamente a
ciertas especies, como por ejemplo el tomate, ocasionando necrosis, las especies del
género Alternaria sintetizan más de 70 metabolitos secundarios tóxicos para las plantas
(fitotoxinas), pero solo una pequeña parte de ellos se han caracterizado químicamente e
identificado como compuestos tóxicos para personas y animales, por lo que se consideran
micotoxinas. También tiene la capacidad de infectar de forma directa a través de la
epidermis.
Así pues, como en nuestra experimentación de los arándanos tuvimos tres placas Petri
con 10 arándanos cada placa, las cuales se clasificaron en: una placa con heridas (P1),
otra placa estaba sin heridas (P2), pero lo inoculamos directamente en el pedúnculo y la
última placa era un testigo absoluto o control (P3).
En nuestra experimentación tuvimos el caso de la placa (P3) que no tenía que ser afectada
puesto que no inoculamos directamente, pero fue afectada indirectamente con la
Alternaria alternata. El motivo que hemos deducido es que este hongo está presente en
el aire y en condiciones ambientales húmedas, en nuestra cámara húmeda el porcentaje
fue más del 60%.
En las placas (P2), los arándanos que no fueron heridos, pero si se inocularon
directamente con el patógeno presentaron el signo de un moho blanco que es el micelio
el conjunto de hifas, si bien su inserción en el fruto no fue por alguna herida fue más que
todo mecánico, ya que este patógeno tiene la capacidad para poder infectar de manera
directa a través de la epidermis sus higas van penetrando al fruto. En algunos arándanos
se notó claramente el cambio de coloración que produjo el patógeno que se inoculó,
puesto que ese síntoma es uno de los efectos de la alternaria.
En la última placa (P3) se apreció mejor el comportamiento del patógeno en los arándanos
puesto que ya tenían un daño externo, hecho exclusivamente para la experimentación,
insertamos tres punzadas de una aguja en cada arándano y luego colocamos el agente
patógeno en el lugar que se realizó el daño, como en las investigaciones que realizamos
acerca de la alternaria son hongos saprofitos en los cuales al hacer las heridas su infección
es mucho más efectiva, también se vio un caso especial es esta última placa que es el caso
de un arándano que se determinó los signos de Botrytis, y pues la respuesta que tenemos
es porque la Botrytis es un agente patógeno principal en el arándano y también se
desarrolla en condiciones húmedas.
El fruto del arándano es muy perecedero debido a que presenta una tasa respiratoria
elevada del tipo climatérico donde el etileno es producido al momento de la cosecha,
susceptible a la descomposición rápida por lo que tiene una corta vida de mercado
existiendo diferencias entre cultivares en su capacidad o vida de almacenaje. Los frutos
están expuestos a múltiples pérdidas de postcosecha debido a la manipulación,
almacenamiento y distribución, siendo la descomposición por hongos la principal causa
de estas pérdidas, entre los agentes causales destacan Botrytis cinerea, Alternaria
alternata, Rhizopus stolonifer que provocan síntomas de pudrición de frutos.(Santa Cruz
Mego, 2018)
Se realizo en esta investigación la evaluación del tiempo de vida útil del arándano
(Vaccinium corymbosum) fresco variedad azúl, almacenado en atmósfera modificada. La
importancia de esta investigación que se fundamenta en buscar nuevas alternativas y
parámetros de conservación de frutos frescos, como son los arándanos, y más aún cuando
queremos atender a clientes muy exigentes, que requieren productos frescos de calidad,
en mercados nacionales e internacionales. De los cuales resultó una muy buena
producción no hubo ninguna muestra de infección puesto que se realizó con mucho rigor
y se varió las condiciones para que se desarrolle el patógeno que era común en los
arándanos.
Para la experimentación se utilizaron tres placas ubicadas en una cámara húmeda.

¨ (…) Dos características comercialmente relevantes del fruto son: la cicatriz que queda
al desprenderse el pedúnculo, Qué debe ser pequeña y seca a fin de dificultar la acción de
los patógenos, y la firmeza, que está muy relacionada con el grosor de la epidermis¨
(Rubio)
Debido a que es justo por el pedúnculo donde inoculamos y al ser éste el punto más
susceptible a los patógenos, de la Alternaria alternata en nuestros arándanos se dio de
una forma esperada, en comparación a otro grupo logró desarrollar el patógeno en la que
se esperaba. Sin embargo, se desarrolló el patógeno que se inoculo también se llegó a
desarrollar en uno de los arándanos el patógeno de Botrytis cinérea, pero solo presentó
en una de las placas, placa 1, y de ella solo en uno de los 10 arándanos.

¨ (…) A medida que la enfermedad avanza, los frutos se van cubriendo totalmente con las
estructuras del hongo, formando una masa poco densa de color grisáceo o marrón claro y
se produce el ablandamiento total del fruto. ¨ (Gorriti, 2014)

Basándonos en esta información pudimos identificar que el patógeno presente en uno de


los arándanos de la placa 1 era el de Botrytis cinérea. Y esto se debe también a que las
condiciones del desarrollo para los dos patógenos era la apropiada.

Alternaria (Alternaria sp.). Este hongo se ha identificado como una de las principales
causas de la podredumbre de los frutos de arándano. El patógeno causa lesiones
hundidas en los frutos cuando la infección se produce antes de la cosecha. La superficie
del área infectada a menudo está recubierta por una masa de esporas de color verde-
negruzca, lo que permite diferenciarla de la antracnosis. Las infecciones ocurren a través
de la cicatriz de los frutos. En las plantaciones del suroeste andaluz es el hongo
cuantitativamente más aislado en lesiones de hojas, ramas y brotes, si bien no se han
detectado pudriciones de frutos por Alternaria. (SCRIBD, 2018)

Los síntomas de la Alternaria alternata que se presentaron fueron los esperados y los
estudiados. En los arándanos infectados de la placa 1 y 2 fueron los que se esperaban,
pero a pesar de haberlos inoculado en todos los arándanos no fue de 100% la
sintomatología.

Bos (como se citó en Volcy, 2008) consideró una adaptación de los postulados de Koch
en la fitopatología, por lo que, la enfermedad en las plantas ocasionada por el
microorganismo Alternaria alternata, de acuerdo al campo que cubrió nuestra
experimentación, ha cumplido con el postulado, puesto que:
El aislamiento y posterior cultivo del agente patógeno, fue realizado en un laboratorio
y utilizado por nosotros para la inoculación del cultivo axénico en arándanos sanos,
brindándole las condiciones ambientales necesarias para que este pueda vivir. La
asociación de la presencia del hongo con la enfermedad es notoria, pues según
(Vázquez et al, 2012), la sintomatología de frutos infectados por el género Alternaria,
está dada por la aparición de micelios y pudrición. En nuestros arándanos, se encontró
una sintomatología similar.
Placa 2
Moggia (como se citó en Figueroa, 2010) afirma que las infecciones causadas por los
hongos, se presentan principalmente a nivel de la inserción del pedúnculo. El
tratamiento aplicado en nuestra segunda placa, fue la inoculación directa del cultivo
axénico del patógeno en el pedúnculo de nuestras frutas.
Finalizado nuestro control, podemos observar la proliferación de la enfermedad en un
70% del total, con una diferencia de 20% respecto a la placa que contenía arándanos
con heridas, por lo que podemos concluir que, este hongo ataca con menor facilidad al
fruto que se encuentra en buenas condiciones.
Anexos
ANEXO 1. Tabla de registro de síntomas y signos
CULTIVO FECHA TEMPERATURA HUMEDAD OBSERVACIONES
Viernes, No se observaron alteraciones a simple
31/04/19 21.9°C 64% vista.
En uno de los diez, se observó la
Lunes, presencia de micelio cercano al
03/05/19 21.7°C 62% pedúnculo del arandano.
Cuatro son los arándanos que tienen
Arándano Martes, una estructura verdosa en la parte
inoculado 04/05/19 21.7°C 62% donde se inoculo y uno presenta el
mismo signo pero de color blanco.
Miércoles, Siete presentan moho con un tono
05/05/19 21.7°C 62% verde petróleo en la parte inoculada y
solo una de ellas tienen mayor
volumen.
Tres arándanos se encontraron con
Viernes, puntos de coloraciones verdosas.
31/04/19 21.9°C 64%
Tres de los diez, presentaron
alteraciones distintitas; dos de ella
parecen tener micelios en la parte
Lunes, inculada y uno por el pedúnculo.
03/05/19 21.7°C 62%
Siguen siendo tres los afectados;
Arándano confirmamos que dos arándanos tienen
inoculado micelios de color blanco (Providentes)
Con daño Martes, 21.7°C 62% y el el tercero tiene micelios de color
previo 04/05/19 marrón claro y está alrededor de todo
el pericarpio del fruto.
Confirmamos que un arándano
presentó Botrytis cinerea, otro tuvo
presencia de micelos balnqueino por
Miércoles, 21.7°C 62% todo el pericarpio y de las ocho
05/05/19 faltaltes, solo tres más estan
presentando micelios en menor
cadidad en a parte inoculada.
Viernes, No se observaron alteraciones a simple
31/04/19 21.9°C 64% vista.
Uno de los diez, presentó micelios de
coloracion blanquesina, a pesar de no
Arándano Lunes, 21.7°C 62% haber sido infectado.
Testigo 03/05/19
En el arándano que se presentaba los
Martes, micelios, ahora tiene mayor volumen.
04/05/19 21.7°C 62%
Nueve de las diez, siguen intactas,
Miércoles, mientras que la infecada siguen
05/05/19 21.7°C 62% manteniendo su condición.
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