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Método de Ritchie

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Método de Ritchie o de sedimentación por centrifugación y flotación (mixto, con fijador)

Fundamento

Se basa en la concentración de los quistes y huevos por sedimentación mediante la centrifugación, con la ayuda de
formol y éter para separar y visualizar los elementos parasitarios.

Materiales.

- Gradilla de tubos de ensayo. - Solución de formol 10%

- Tubos de ensayo 13 x 100. - Solución fisiológica (Anexo C).


- Éter etílico.
- Pipetas Pasteur o de transferencia.
- Lugol.
- Lámina portaobjetos.
- Bajalengua o bagueta.
- Laminillas cubreobjetos.

- Hisopos - Microscopio binocular.

Procedimiento

- Coloque en el tubo de ensayo 1 a 2 g de muestra de heces, agregue 8 mL de solución salina, homogenice y


centrifugue a 2000 rpm por 2 a 3 minutos.

- Decante el sobrenadante y repita 1-2 veces el paso anterior hasta que se observe el sobrenadante limpio.

- Decante el sobrenadante, agregue al sedimento 6 mL de solución de formol al 10%, homogenice y deje reposar
5 min, luego agregue 3 mL de éter.

- Coloque el parafilm sobre el tubo y agite cuidadosamente para evitar la salida del material.
- Elimine las capas formadas de sobrenadante, de ser necesario, con ayuda de un hisopo.

- Retire la tapa, centrifugue el tubo de 2000 a 3000 r.p.m por 3 min.


- Deposite una gota de lugol en la lámina portaobjeto y con ayuda de una pipeta Pasteur, tome una
porción del sedimento para mezclarlo con la solución de lugol.

- Cubra con una laminilla cubreobjeto y observe al microscopio.


Éter

Detritus

Formalina

Sedimento

Figura 7. Aplicación del método de Ritchie (sedimentación y flotación)

Observación

Se pueden observar quistes, ooquistes y huevos de los parásitos. Es poco útil para observar trofozoítos y
larvas.

Resultado

Informe el nombre, estadio evolutivo del parásito y la presencia de cristales de Charcot-Leyden.

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