Muestras de Sangre AVES
Muestras de Sangre AVES
Muestras de Sangre AVES
Las muestras para diagnsticos se utilizan para determinar el estado de salud o para identificar
patgenos especficos en lotes de pollonas, ponedoras y reproductoras. Las pruebas de rutina incluyen
muestras de sangre, suero, tejidos y muestras de gasas o hisopos en formalina: traqueal, orofarngeal,
cloacal, de rganos y articulaciones. Para investigaciones especficas, se puede utilizar las tarjetas FTA
(Tecnologa Rpida para el Anlisis de los cidos nucleicos) para recolectar mdula de las plumas,
sangre o hisopados de cualquier tipo.
ENTREGA DE MUESTRAS
Cuando se envan muestras a un laboratorio de diagnstico, es importante proporcionar la informacin
completa y relevante del lote en el formulario de presentacin al laboratorio. La informacin crtica que
debe acompaar a todos los envos de muestras para diagnstico incluyen:
Identificacin y ubicacin del lote
Edad del lote
Fecha en que se tomaron las muestras
Programa de vacunacin
Historia del lote, incluyendo problemas de salud o de produccin
Esta informacin es esencial para que el veterinario y la persona que hace el diagnstico puedan
hacer una interpretacin significativa de los resultados serolgicos o del diagnstico y proporcionar
recomendaciones que mejoren la salud y/o la produccin del lote.
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Conservando la primera muestra de suero (por
medio de congelacin) para analizarla al mismo
tiempo que la segunda muestra se reduce la
variacin de la prueba de laboratorio debido a
factores externos o cambios en los reactivos. Se
puede utilizar una tctica similar para controlar
la eficacia de las vacunas muertas dadas en un
programa de pollonas.
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Boletn Tcnico SEROLOGA Y TOMA DE MUESTRAS DE SANGRE
MTODOS UTILIZADOS PARA EXTRAER SANGRE
1. Mtodo utilizando una aguja en la vena (braquial) del ala
La vena braquial del ala es un sito aceptable para extraer sangre en aves de 4 semanas de edad o ms.
En las aves ms jvenes, la vena es demasiado pequea para poder extraer sangre eficientemente.
PASO 1 PASO 2
Figura 4. Tome el ave de las dos patas. Figura 5. Coloque las patas debajo del
codo de la mano que no domina.
PASO 3 PASO 4
Figura 6. Las manos deben quedar libres Figura 7. Quite las plumas para poder
para tener acceso debajo del ala. ver bien la vena braquial.
PASO 5 PASO 6
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Mtodo utilizando una aguja en la vena (braquial) del ala (continuacin)
PASO 7 PASO 8
Figura 10. La aguja debe insertarse Figura 11. Si la aguja est en la vena
primero bajo la piel y luego dentro de la braquial, la sangre fluir en la jeringa con
vena entre el codo y las articulaciones del un mnimo jaln del mbolo. Si jala el
hombro. mbolo con demasiada fuerza va a crear
alta presin negativa, provocando que la
vena se colapse y se detenga el flujo de
sangre en la aguja.
PASO 9
Despus de sacar la aguja de la vena,
aplique presin con el dedo sobre el
sito de la inyeccin para promover
un cogulo rpido. Es comn que se
forme un hematoma o cogulo de
sangre en el rea de la inyeccin.
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Boletn Tcnico SEROLOGA Y TOMA DE MUESTRAS DE SANGRE
2. Puncin de la vena utilizando un bistur
Aunque este mtodo es ms rpido para recolectar sangre, tiene el potencial de causar mayor
trauma que si se utiliza una aguja y una jeringa.
a. Se utiliza una navaja #11 insertada en el mango de un bistur #3 o #4 para realizar la
puncin de la vena braquial justo arriba de la articulacin del codo.
b. Se utiliza un tubo para recolectar la sangre cuando la hemorragia sale de la cortada. Con
este mtodo es ms probable que la muestra se contamine con bacteria, moho, etc. Si se
limpia la piel con alcohol antes de cortar se puede limitar la contaminacin.
c. Dependiendo del tamao del corte, este mtodo puede causar un trauma significante
(perdida de sangre, estrs, etc.) al ave, adems implica el riesgo de una ruptura de la
arteria braquial y del nervio.
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MANEJO APROPIADO DE LAS MUESTRAS caliente o cuando estan expuestas directamente a
DE SANGRE la luz del sol.
Una vez obtenida la sangre en la jeringa, la La contaminacin de bacteria y moho pueden
muestra debe tranferirse cuidadosamente causar que el suero tenga una apariencia viscosa
a un tubo para que se forme el cogulo. La con partculas slidas parecidas al queso. Los
coagulacin se produce cuando las clulas en microrganismos oportunistas se alimentan de
la sangre se unen por medio del proceso de los anticuerpos en el suero y bajan la cantidad de
coagulacin y se separa de la porcin lquida de anticuerpos medidos por el laboratorio.
la sangre (suero).
Si las aves estn deshidratadas (especialmente
Debe remover la aguja de la jeringa antes de en climas clidos o debido al estrs), producen
ponerla en el tubo de coagulacin. (Figura muestras pobres de suero gelificado. Adems, el
13). El forzar la sangre de nuevo a travs de suero de las aves que han comido recientemente
la aguja puede romper los glbulos rojos tiene una apariencia turbia debido al exceso
(hemlisis), lo que resulta en una muestra de de grasa en el suero. Las muestras lipmicas
mala calidad. (grasosas) no son ideales para ser analizadas en
Inyecte lentamente la sangre en el tubo de el laboratorio, ya que la grasa va a interferir con
coagulacin, permitiendo que corra sobre cualquier prueba basada pticamente o en las
uno de los lados del tubo, lo cual ayuda a pruebas de anticuerpos de fijacin tal como la
la formacin del cogulo. La sangre debe prueba de ELISA.
colocarse dentro del tubo antes de que inicie Cuando la sangre esta en el proceso de la
el proceso de coagulacin. formacin del coagulo, no debe congelarse.
No mueva los tubos mientras ocurre Las muestras no deben agitarse o permitir que
el proceso de coagulacin. Los tubos rueden. La manipulacin brusca de las muestras
deben colocarse en forma casi plana hace que el suero tenga una apariencia de color
(horizontalmente) para tener una mayor rojo o rosado. La hemolisis interfiere con las
superficie mientras se forma el cogulo pruebas de laboratorio que miden los niveles
(Figura 14). La cantidad de suero que sale de de los anticuerpos. Las muestras que contienen
la sangre coagulada depende del rea de la cogulos de sangre no deben enviarse, ya que
superficie para la formacin del cogulo. Si puede ocurrir una hemlisis en el camino al
mantiene los tubos verticalmente hay una laboratorio.
superficie muy pequea y se produce muy
poca cantidad de suero. Utilice un soporte
para los tubos de ensayo para mantener los
tubos en posicin casi plana. Si no tiene un
soporte para los tubos de ensayo, entonces
use un pedazo de madera perforado con
agujeros de un tamao apropiado o tambin
puede usarse una rejilla de alambre.
El tiempo para la formacin del cogulo
depende de la temperatura ambiental a la que
se mantengan las muestras. La temperatura Figura 13.
ideal para la formacin del cogulo es de 80
a 100F (27 a 38C). A esta temperatura, la
separacin del suero toma aproximadamente
de 12 a 18 horas. A temperaturas ms bajas,
el proceso de coagulacin es ms lento y se
reduce el rendimiento de suero.
Las muestras de sangre pueden daarse y
estn sujetas a la contaminacin de bacterias
si se exponen a temperaturas altas por largos
periodos de tiempo. Esto puede ocurrir cuando
las muestras de sangre se dejan en un automvil Figura 14.
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RECOLECCIN Y MANEJO DEL SUERO
Despus de que el suero se haya separado del
cogulo de sangre, saque el suero del tubo de
coagulacin y colquelo en otro tubo, o saque el
cogulo del tubo con un palito de madera, (como
un palillo de dientes), dejando nicamente el suero
en el tubo. El cogulo debe manejarse
cuidadosamente durante el proceso de la
separacin del suero. Las muestras turbias,
viscosas o con hemlisis no deben enviarse al
laboratorio.
Cuando el suero ha sido separado del cogulo
exitosamente, debe mantenerse a una temperatura
fra (45F o 7C) y enviarse inmediatamente al
laboratorio. No congele el suero si va a utilizarlo
dentro de 3 a 5 das. Los tubos que contienen
las muestras de suero de aves individuales
deben permanecer cerrados hermticamente, A B C
organizados por lote, en bolsas de plstico
Figura 15. Ejemplos de muestras de suero
selladas y claramente identificadas con etiquetas
buenas. Note el color mbar transparente y el
o con tinta permanente. Las muestras deben
volumen adecuado (>0.25 ml).
enviarse en contenedores aislados de espuma de
polietileno con al menos un paquete fro. Es mejor
evitar enviar las muestras de suero por correo al
laboratorio los jueves o viernes, ya que llegarn al
laboratorio durante el fin de semana. El suero que No enve al laboratorio muestras de
va a almacenarse por largos perodos de tiempo suero que:
debe congelarse a una temperatura de +14F a Contengan menos de 0.25 ml
-40F (-10C a -40C). de suero
Con hemlisis excesiva (rojas)
Con lipemia excesiva (grasa)
Con cogulos
Gelificado viscoso o con
partculas parecidas al queso
A B C D E