C-Wert (Genetik)

Der C-Wert ist eine Basiseinheit in der Genetik. Er gibt als Messgröße an, wie viel Desoxyribonukleinsäure (DNA) ein einfaches, in der Fachsprache haploides, Genom eines Lebewesens enthält; dieser Wert wird jeweils mit 1 C bezeichnet.^[1] Es gibt zwei Möglichkeiten, die entsprechende DNA-Menge darzustellen:

• als Masse der im haploiden Genom enthaltenen DNA, angegeben in Pikogramm (pg);^[2]
• als Anzahl der im haploiden Genom enthaltenen DNA-Basenpaare (bp).^[3]

Der C-Wert ist innerhalb einer biologischen Art weitgehend stabil und damit ein artspezifisches Merkmal. Zwischen Arten kann er sehr verschieden sein. Die Werte reichen von 10⁶ Basenpaaren (1 Mbp) für Mycoplasma bis zu den 10¹¹ Basenpaaren (100 Gbp) bei manchen Pflanzen und Amphibien.^[3] Bei Vergleichen wurde festgestellt, dass komplexere Organismen zumeist einen höheren C-Wert haben. Dass dies manchmal nicht so ist, wird auch C-Wert-Paradoxon genannt.^[3]

Der C-Wert wird gerne dazu verwendet, um die Genome verschiedener Arten zu bemessen. Es gibt offene Quellen, von denen 1 C-Werte von Pflanzen und von Tieren abzurufen sind.

Die botanische Datenbank in Großbritannien (Version 6.0, Dezember 2012) umfasst C-Werte von 8510 Arten.^[4] Darin sind kaum mehr als 1 Prozent der (bekannten) Angiospermen gelistet.^[5]

Vor allem bei Pflanzen ist zu bedenken, ob die Keimzellenkerne einer Art (Rasse) jedes Chromosom einfach, doppelt oder dreifach besitzen. Soll derartige Komplexität einer Erbmasse betont werden, darf die betreffende Genomgröße als Cx (monoploid), C2x (diploid) oder C3x (triploid) notiert werden. Ohne die Komplexität zu berücksichtigen, schreibt man für das ganze (holoploide) Genom den gewohnten, blanken C-Wert.^[6] Das Problem der konstitutiven Polyploidie und ihre Wirkung auf die Zellengröße hat bereits Hans Winkler experimentell untersucht. Er verwies darauf, dass „Tetraploidie und Verdoppelung der diploiden Chromosomenzahl nicht notwendig miteinander identisch sind“ [S. 517].^[7]

Seit 2005 gibt es in Estland eine Datenbank mit 2336 Einträge zu C-Werten von Pilzen (Stand November 2018).^[8]

Die Datenbank für C-Werte von 6222 Tierarten wird aus Kanada angeboten. Das kleinste animale Genom mit 0,02 pg DNA besitzt der Nematode Pratylenchus coffeae; das andere Extrem, 132,83 pg DNA, präsentiert der Lungenfisch Protopterus aethiopicus.^[9]

Ein Bericht über 67 Säugetierarten mit damals 51 neuen Genomgrößen weist auf die kompakt kleinen Genome der Fledermäuse hin.^[10]

Der C-Wert bildet die Basis, um verschieden große Zellkerne in den Geweben desselben Organismus (oder einer Art) miteinander zu vergleichen. Für diesen Zweck werden die DNA-Mengen als Vielfaches des C-Wertes angegeben.

In einem Diplont beträgt der DNA-Gehalt eines Zellkernes ab vollendeter S-Phase 4 C und bleibt auf diesem Niveau bis zur nächsten mitotischen Metaphase einschließlich. Die beiden Tochterzellkerne erhalten durch die Anaphase und die nachfolgende Kernteilung 2 C; diese DNA-Menge halten sie bis zum Beginn der nächsten S-Phase. Durch DNA-Synthese (Replikation) aller Chromosomen steigt der DNA-Gehalt wiederum von 2 C über Zwischenwerte auf 4 C.

Für diesen Prozess im Zellkern ist entscheidend, dass zwischen erstem und zweitem Schritt einer Meiose die DNA-Synthese unterbleibt. Nur so wird durch die Anaphase II den Kernen der Keimzellen 1 C zuteil. Diese Reduktion auf ein einziges Genom (einen einfachen = haploiden Chromosomensatz) ist der notwendige Zweck der Meiose.^[11][12] Der DNA-Gehalt 1 C charakterisiert eine Keimzelle (Spermienzelle oder unbefruchtete Eizelle).^[13]

Erst der C-Wert ermöglicht, die Verminderung der Kern-DNA auf den haploiden Wert 1 C mit der im Lichtmikroskop feststellbaren Chromosomenzahl zu verbinden und unzweideutig zu beschreiben. Denn über weite Strecken der Meiose zeigen sich die Chromosomen (als Bivalente) zum haploiden Satz vereinigt. Das Problem veranschaulicht die folgende Tabelle:

Die Genomgröße des Menschen wird zurzeit mit 1 C = 3,50 pg DNA gelistet.^[14] Dieser C-Wert beruht auf mikrofotometrischen Untersuchungen und entspricht 3423 Mbp. Die Umrechnung folgt der Gleichung 1 pg DNA = 978 Mbp.^[15] Die Messungen der Kern-DNA sind genau genug, um bei vielen Säugern die Spermien mit einem X-Chromosom von Spermien mit einem Y-Chromosom zu unterscheiden. Dies gilt folgerichtig für einen X-abhängigen gegenüber einem Y-anhängigen C-Wert. Das "Referenzgenom" des Menschen beruht auf Daten, die durch DNA-Sequenzierung gewonnen wurden. Die aktuelle Ausgabe „GRCh38.p12“ summiert das X-haltige Genom auf 3031,07 Mbp und das Y-haltige Genom auf 2932,26 Mbp.^[16] Es ist keine Utopie: Nach solcher Zellsortierung kann eine gezielte künstliche Besamung beziehungsweise eine In-vitro-Befruchtung über das Geschlecht des Embryos entscheiden.^[17][18]

Siehe Hauptartikel Endoreplikation.

Dieser nicht seltene Zellprozess besteht aus einer Reihe von DNA-Synthesen innerhalb desselben Zellkernes. Bei solchen Endozyklen unterbleibt nach jeder S-Phase die Kernteilung, sodass der C-Wert ansteigt. Besonders hohe C-Werte sind von Polytänchromosomen oder polyploiden Zellkernen in Hochleistungsorganen bekannt. Endoreplikation gehört in solchen Fällen zur gesunden, normalen Entwicklung.^[19] Beispiele sind die Malpighi-Gefäße, Speicheldrüsen und Spinndrüsen von Fliegen und Mücken,^[20] von Schmetterlingen^[21] und Spinnen.^[22] Die größten Zellkerne der Spinndrüsen in den Larven des Seidenspinners erreichen mit 17 Endozyklen den Rekordwert von etwa 300.000 C.^[23]

Auch für Menschen ist Endoreplikation wichtig. Die Trophoblasten mit endoreplizierten Zellkernen dienen im frühen Embryonalstadium der Blastozyste, damit sie sich in die Gebärmutter einnisten kann.^[24][25][26]

Krebserkrankungen beruhen auf genetischen Defekten, auf Fehlverteilungen von Chromosomen in der Mitose. Diese Vorstellungen gehen zurück auf David Paul von Hansemann und Theodor Boveri.^[27][28] Die Pioniere konnten DNA-Mengen lediglich abschätzen und – schwierig bei menschlichen Mitosen – Chromosomen zählen. Hansemann hätte sich gewünscht, den DNA-Gehalt in Kernen während der Interphase genau quantifizieren zu können.^[29]

Erst das Aufkommen der Mikroskop-Fotometrie erlaubte, Abweichungen der Kern-DNA von den regulären Werten 2 C, 4 C, auch 8 C und darüber hinaus festzustellen.^[30][31] Solche Erfolge öffneten das Feld der quantitativen Zytogenetik und Zytopathologie, um abnorme DNA-Gehalte, die Aneuploidie der Zellkerne, in Tumoren aufzuspüren.^{[32][33][34][35]}

Die Definition des C-Wertes als haploider DNA-Gehalt einer biologischen Art leistete Hewson Swift, nachdem er Zellkerne vom Mais mit einem selbst konzipierten Mikrofotometer gewogen hatte.^[36]

Mit einem Mikroskop-Fotometer misst man den Lichtverlust durch die Zellkerne, die auf Glasträgern fixiert und mit der Feulgenreaktion DNA-spezifisch gefärbt sind. Obwohl zeitaufwändig, hat dieses Verfahren den Vorteil, dass jeder einzelne Kern morphologisch beurteilbar sowie für Messwiederholungen zugänglich ist. Für die Bestimmung von 1 C müssen nicht unbedingt (kompakte) Spermien verwendet werden. Belastbarer ist das Ergebnis, wenn Spermatiden (1 C) mit identifizierten Kernen aus der Prophase I (4 C) verrechnet werden.

Die andere Methode ist die Durchflusszytometrie von Zellen, deren Kern-DNA mittels eines spezifischen fluoreszierenden Farbstoffes registriert wird. Dieses Licht messende Verfahren hat den Vorteil, sehr große Stichproben bewerten zu können.^[37][38]

Bei beiden Verfahren ist es notwendig, neben der Probe einen externen DNA-Standard mit bekanntem, anerkanntem DNA-Gehalt zu messen. Von den Gerätewerten des Standards werden die Gerätewerte der Probe in pg oder bp umgerechnet. Ellen Rasch führte die 2 C-Zellkerne von roten Blutzellen eines Huhns als DNA-Standard mit 2,53 pg DNA ein.^[39]

• Genomgröße
• Abschnitt Genomgrößen im Artikel Genom
• Abschnitt Zellkerne wiegen im Artikel Zytogenetik

• Animal Genome Size Database, Datenbank der Genomgrößen bei Tieren.
• Plant DNA C‐Values Database, Datenbank der Genomgrößen bei Pflanzen.
• Fungal Genome Size Database., Datenbank der Genomgrößen bei Pilzen.

1. ↑ Hans Winkler: Verbreitung und Ursache der Parthenogenesis im Pflanzen- und Tierreiche. Gustav Fischer, Jena: 1920.
2. ↑ Jochen Graw: Genetik. Springer-Verlag, Berlin / Heidelberg 2010, ISBN 978-3-642-04998-9, S. 7, doi:10.1007/978-3-642-04999-6. 
3. ↑ ^{a b c} Wilfried Janning, Elisabeth Knust: Genetik. Allgemeine Genetik – Molekulare Genetik – Entwicklungsgenetik. 2. Auflage. Thieme, Stuttgart 2008, ISBN 978-3-13-128772-4, S. 132. 
4. ↑ Johnston E, Bennett MD, Leitch IJ, Pellicer J, Hidalgo O: Plant DNA C‐values database , Datenbank in der Version vom 1. April 2019 auf der Website der Royal Botanic Gardens, aufgerufen am 30. August 2024
5. ↑ Michael D Bennett: Plant genome values: How much do we know? In: PNAS 95, 5, 1998: 2011–2016. PDF
6. ↑ Johann Greilhuber, Jaroslav Doležel, Martina A Lysák, Michael D Bennett: The origin, evolution and proposed stabilization of the terms ‘Genome Size’ and ‘C-value’ to describe nuclear DNA contents. In: Ann Bot 95, 1, 2005: 255–260. PMC 4246724 (freier Volltext)
7. ↑ Hans Winkler: Über die experimentelle Erzeugung von Pflanzen mit abweichenden Chromosomenzahlen. In: Z Bot 8, 1916: 417–531; Tafeln IV, V, VI. Digitalisat.
8. ↑ Bellis Kullman, Heidi Tamm, Kaur Kullman (2005): Fungal genome size database. At: Institute of Agricultural and Environmental Sciences, Estonian Agricultural University, Riia 181, Tartu 51014, Estonia. Datenbank.
9. ↑ T Ryan Gregory: Animal genome size database. Release 2.0 Guelph (Ontario) 2005. Datenbank
10. ↑ Carlo Alberto Redi, Helmut Zacharias, S Merani, M Oliveira-Miranda, M Aguilera, Maurizio Zuccotti, Silvia Garagna, Ernesto Capanna: Genome sizes in Afrotheria, Xenarthra, Euarchontoglires, and Laurasiatheria. In: J Heredity 96, 5, 2005: 485–493.
11. ↑ August Weismann: Amphimixis oder: Die Vermischung der Individuen. Fischer, Jena 1891.
12. ↑ August Weismann: Die Nothwendigkeit einer Halbirung des Keimplasma's. (Das ist der erste Abschnitt von Capitel VIII. Veränderung des Keimplasma’s durch Amphimixis.) In: Das Keimplasma. Eine Theorie der Vererbung. Fischer, Jena 1892; dort S. 308–330. Zum Verständnis dieses Meisterwerks der theoretischen Genetik setze „Idant“ = Chromosom und „Id“ = Gen. Digitalisat.
13. ↑ Jochen Graw: Genetik. Springer-Verlag, Berlin / Heidelberg 2010, ISBN 978-3-642-04998-9, S. 222, doi:10.1007/978-3-642-04999-6. 
14. ↑ T Ryan Gregory: Animal genome size database. Release 2.0 Guelph (Ontario) 2005. Datenbank
15. ↑ Jaroslav Doležel, Jan Bartoš, Hermann Voglmayr, Johann Greilhuber: Nuclear DNA content and genome size of trout an human. In: Cytometry; A 51, 2003: 127–128.
16. ↑ Genome Reference Consortium beim National Institute of Health (USA): Referenzgenom Homo sapiens. Datenbank. Zeigt auch den haploiden Chromosomensatz (1 n = 23, X oder Y).
17. ↑ Duane L Garner, K Michael Evans, George E Seidel: Sex-sorting sperm using flow cytometry/cell sorting. In: Methods Mol Biol 927, 2013: 279–295. Erfolge wurden erzielt bei „cattle, swine, horses, sheep, goats, dogs, cats, deer, elk, dolphins, water buffalo as well as in humans“.
18. ↑ J M DeJamette, C R McCleary, M A Leach, J F Moreno, R L Nebel, C E Marshall: Effects of 2.1 and 3.5 × 10⁶ sex-sorted sperm dosages on conception rates of Holstein cows and heifers. In: J Dairy Sci 93, 9, 2010: 4079–4085.
19. ↑ Terry L Orr-Weaver: When bigger is better: The role of polyploidy in organogenesis. In: Trends Genet 31, 6, 2015:307–315. doi:10.1016/j.tig.2015.03.011
20. ↑ Claus Pelling, Terrence D Allen: Scanning electron microscopy of polytene chromosomes. In: Chromosome Research 1, 1993: 221–237.
21. ↑ Lydia Buntrock, František Marec, Sarah Krueger, Walther Traut: Organ growth without cell division: somatic polyploidy in a moth, Ephestia kuehniella. In: Genome 55, 11, 2012: 755–763. doi:10.1139/g2012-060.
22. ↑ Ellen M Rasch, B A Connelly: Genome size and endonuclear DNA replication in spiders. In: J Morphol 265, 2005: 209–214.
23. ↑ Somashekarappa Niranjanakumari, Karumathil P Gopinathan: Characterisation of the DNA-polymerase-alpha-primase complex from the silk glands of Bombyx mori. In: Europ J Biochem 201, 1991: 431–438. doi:10.1111/j.1432-1033.1991.tb16301.x
24. ↑ Tatiana G Zybina, H G Frank, S Biesterfeld, P Kaufmann: Genome multiplication of extravillous trophoblast cells in human placenta in the course of differentiation and invasion into endometrium and myometrium. II. Mechanisms of polyploidization. In: Tsitologiia 46, 7, 2004: 640–648.
25. ↑ Tatiana G Zybina, Eugenia V Zybina: Cell reproduction and genome multiplication in the proliferative and invasive trophoblast cell populations of mammalian placenta. In: Cell Biol Int 29, 12, 2005: 1071–1083.
26. ↑ Eugenia V Zybina, Tatiana G Zybina: Polytene chromosomes in mammalian cells. In: Internat Rev Cytology 165, 1996: 53–119.
27. ↑ David Hansemann: Ueber asymmetrische Zelltheilung in Epithelkrebsen und deren biologische Bedeutung. In: Arch Pathol Anat Physiol Klin Medicin 119, 1890: 299–326.
28. ↑ Theodor Boveri: Zur Frage der Entstehung maligner Tumoren. Fischer, Jena 1914.
29. ↑ Paul A Hardy, Helmut Zacharias: Reappraisal of the Hansemann–Boveri hypothesis on the origin of tumors. In: Cell Biol Internat 29, 2005: 983–992.
30. ↑ Niels B Atkin, B M Richards: Deoxyribonucleid acid in human tumours as measured by microspectrophotometry of Feulgen stain: A comparison of tumours arising at different sites. In: Brit J Cancer 10, 1956: 769–786.
31. ↑ Walter Sandritter, M Carl, W Ritter: Cytophotometric measurements of the DNA content in human malignant tumors by means of the Feulgen reaction. In: Acta Cytol 10, 1966: 26–30.
32. ↑ J Oltmann, K Heselmeyer-Haddad, L S Hernandez, R Meyer, I Torres, Y Hu, N Doberstein, J K Killian, D Petersen, Y J Zhu, D C Edelman, P S Meltzer, R Schwartz, E M Gertz, A A Schäffer, Gert Auer, J K Habermann, Thomas Ried: Aneuploidy, TP53 mutation, and amplification of MYC correlate with increased intratumor heterogeneity and poor prognosis of breast cancer patients. In: Genes Chromosomes Cancer 57, 4, 2018: 165–175. doi:10.1002/gcc.22515.
33. ↑ A E Pinto, T Pereira, G L Silva, S André: Aneuploidy identifies subsets of patients with poor clinical outcome in grade 1 and grade 2 breast cancer. In: Breast 24, 4, 2015: 449–455. doi:10.1016/j.breast.2015.04.004.
34. ↑ Peter Melsheimer, Svetlana Vinokurova, Nicolas Wentzensen, Gunther Bastert, Magnus von Knebel Doeberitz: DNA aneuploidy and integration of human papillomavirus type 16 e6/e7 oncogenes in intraepithelial neoplasia and invasive squamous cell carcinoma of the cervix uteri. In: Clin Cancer Res 10, 9, 2004: 3059–3063. PDF.
35. ↑ Rüdiger G Steinbeck, Gert U Auer: Genome instability in human tumorigenesis: Microphotometry of interphase nuclei and pathologic mitoses reveals dysplasia. In: Eur J Histochem 44, 2000: 133–142.
36. ↑ Hewson Hoyt Swift: The constancy of desoxyribose nucleic acid in plant nuclei. In: Proc Natl Acad Sci USA 36, 1950: 643–654.
37. ↑ Zbigniew Darzynkiewicz, Xuan Huang, Hong Zhao: Analysis of cellular DNA content by flow cytometry. In: Current Protocols Immunol 13. Februar 2018. doi:10.1002/cpim.36
38. ↑ Jaume Pellicer, Ilia J Leitch: The application of flow cytometry for estimating genome size and ploidy level in plants. In: Methods Mol Biol 1115, 2014: 279–307. doi:10.1007/978-1-62703-767-9_14.
39. ↑ P K Mulligan, Ellen M Rasch: Determination of DNA content in the nurse and follicle cells from wild type and mutant Drosophila melanogaster by DNA-Feulgen cytophotometry. In: Histochemistry 82, 1985: 233–247.