레사주린

Resazurin
레사주린
Resazurin.PNG
이름
IUPAC 이름
7-제복시-10-제노페녹사진-10-ium-3-1
기타 이름
알라마 블루, 비브란트, 업티 블루, 디아조 레소르시놀, 아조레소린, 레사조인, 레사주린
식별자
3D 모델(JSmol)
켐벨
켐스파이더
ECHA InfoCard 100.008.171 Edit this at Wikidata
펍켐 CID
유니
  • InChi=1S/C12H7NO4/c14-7-1-3-9-11(5-7)17-12-6-8(15)2-4-10(12)13(9)16/h1-6,14H ☒N
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    키: PLXBWHJQWKZRKG-UHFFFAOYAB
  • [1]: C1=CC2=C(C=C1O)OC3=CC(=O)C=CC3=[N+]2[O-]
특성.
C12H7NO4
어금질량 229.191 g·1911−1
용해성성의
위험
GHS 라벨 표시:
GHS07: Exclamation mark
경고
H315, H319, H335
P261, P305+P351+P338
NFPA 704(화재 다이아몬드)
2
1
0
달리 명시된 경우를 제외하고, 표준 상태(25°C [77°F], 100 kPa)의 재료에 대한 데이터가 제공된다.
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Infobox 참조 자료

레사주린(7-Hydroxy-3H-페녹사진-3-1 10-산화물)은 약하게 형광, 무독성, 세포 과민성, 재독성에 민감한 페녹사진 염료다.[2][3]레사주린은 파란색~보라색(pH > 6.5)을 가지며 분홍색·고형광 레소루핀(7-Hydroxy-3H-페녹사진-3-1)으로 불가역적으로 줄일 수 있어 미생물학적·세포적·효소 분석 등에 사용된다.레소루핀은 중성 pH에서 분홍색을 육안으로 관찰하거나 불소측정을 통해 검출할 수 있으며, 최대 호기량은 530-570nm, 방출량은 580-590nm이다.[4]

해결책 resorufin을 포함하는 조건을 줄이고 제출되면,(어<>-110 mV)거의 모든 resorufin 취소할 수 있어 그translucidnon-fluorescent dihydroresorufin(죄. hydroresorufin)에이고 그 해결책translucid이 되p.에서 자세한 내용은 resorufin/dihydroresorufin/값 쌍의 산화 환원 잠재력은 -51 mV 대 표준 수소 전극이 절감된다.H 7.0). 이 같은 용액의 E가h 증가하면 디히드로레소루핀이 다시 산화되어 레소루핀으로 변하게 되는데, 이러한 가역반응을 이용하여 배양 매질의 redox 잠재력이 혐기성 유기체에 대해 충분히 낮은 수준에 머물러 있는지를 감시할 수 있다.

레사주린 (pH 표시기)
pH 6.5 이하 pH 6.5 이상
6.5 ⇌ 6.5

레사주린 솔루션은 크레프트의 이분법 지수로 알려진 가장 높은 값 중 하나이다.[5]이는 관찰된 표본의 두께나 농도가 증가하거나 감소할 때 인지된 색상 색의 변화가 크다는 것을 의미한다.

보통 레사주린은 나트륨 소금으로 시중에서 구입할 수 있다.

세포 생존성 응용 프로그램

레사주린은 대사 활성 세포의 유산소 호흡에 의해 레소루핀으로 감소되며 세포 생존성의 지표로 사용할 수 있다.1929년 페슈와 심메르트에 의해 우유 속의 박테리아 함량을 정량화하는 데 처음 사용되었다.[6]그것은 포유류 세포 배양에서 생존 가능한 세포의 존재를 감지하는 데 사용될 수 있다.[7]초기에 Alamar Blue 상표(Trek Diagnostic Systems, Inc.)로 상업적으로 도입되었으며, 현재는 AB 어세이, Vybrant(분자 프로브), UptiBlue(Interchim) 등의 다른 이름으로도 구입할 수 있다.

레자주린 기반 측정은 Formazan 기반 측정(MTT/X)과 같은 참조 실행성 측정과 탁월한 상관 관계를 보여준다.TT)[8] 및 삼중수소 티미딘 기반 기법독성이 낮아 장기간 연구에 적합하며, 세포수집, 세포생존, 세포증식 등 세포배양검사에 동물세포, 박테리아, 곰팡이 등에 적용됐다.[9]

또한 레사주린은 표준 생사/죽음의 검사를 대신하기 위해 사이토카인 검사, 세포사멸을 측정하기 위한 캐스파아제 검사 또는 유전자 또는 단백질 발현을 측정하기 위한 리포터 검사와 같은 화학적 발광 검사로 다중화된다.[8]

레소루핀에 대한 레소루린의 되돌릴 수 없는 반응은 유산소 호흡에 비례한다.[10]

  • 세포 생존성을 위한 색도 측정법으로서의 레사주린

  • 세포 생존을 위한 형광 분석으로 사용되는 레사주린 - 녹색 빛에 노출되었을 때 레사주린이 형광 투시되지 않음

  • 세포 생존을 위한 형광 분석으로서의 레사주린 - 녹색 빛에 노출되었을 때 레소루핀 형광체

레사주린 저감시험

레사주린은 우유 샘플의 품질을 결정하기 위한 일련의 빠른 테스트 중 하나로 사용될 수 있다.이번 테스트에서는 레사주린을 레독스 염료로 첨가해 레소루핀과 무색 디하이드로레소루핀으로 전환해 마우비시핑크로 변한다.이것은 유산소 호흡을 위해 우유에 존재하는 사용 가능한 산소를 이용하는 박테리아의 존재로 인해 우유 샘플의 산화 감소 전위가 감소하기 때문에 발생한다.색 변화 속도는 우유 샘플에 존재하는 박테리아 수의 지표로 사용된다.[11]

기타 응용 프로그램

레소루핀에 대한 레소루린 감소, 디히드로레소루핀에 대한 가역적 감소.

레사주린은 미토콘드리아에서 효과적으로 감소되어 미토콘드리아 대사 활성도 평가하는데 유용하다.

보통 효소로서 NADPH 탈수소효소나 NADH 탈수소효소가 존재하는 경우 NADPH나 NADH는 레사주린을 레소루핀으로 변환하는 환원제다.따라서 레자주린/디아포라제/NADPH 시스템을 사용하여 NADH, NADPH 또는 디아포라제 수준과 NADH 또는 NADPH를 생성하는 생화학적 반응에 관련된 모든 생화학적 또는 효소 활동을 검출할 수 있다.[12][13][14][15][16]

레사주린은 L-글루타마이트를 검사하는 데 사용될 수 있으며 96개의 웰 플레이트에서 우물당 2.0pmol의 감도를 달성할 수 있다.[17]

레사주린은 또한 유출물에서 발견되는 유기물의 에어로빅 생분해 측정에도 사용될 수 있다.[18]

레사주린은 하천에서의 유산소 호흡량을 측정하는 데 사용된다.[19]대부분의 유산소호흡은 하천침대에서 발생하기 때문에 레사주린을 레소루핀으로 전환하는 것도 물기둥과 하천침대 사이의 교환량을 측정하는 척도다.

합성

레사주린은 레소르시놀과 4-니트로소레소르시놀 사이의 산성 촉매 응결에 의해 제조되며, 그 후 망간()을 이용한 중간 산화에 의해 제조된다.IV) 산화물:

Resazurin synthesis

탄산나트륨이 과다한 조잡한 반응 제품을 처리하면 레사주린 나트륨 소금이 산출되는데, 이는 일반적으로 염료의 상업적 형태다.알코올에서 응축 단계를 실행하는 것은 가능하지만 제품의 수율이 낮아진다; 순수한 물이나 아세트산에서는 반응이 만족스럽게 진행되지 않는다.[20]

관련염료

구조적으로 레사주린과 관련된 10-아세틸-3,7-디하이드록시페녹사진(Amplex Red라고도 함)은 1:1 스토이치측정법에서22 HO와 반응하여 동일한 부산물 레소루핀(HRP 또는 효소를 사용하는 NADH, NADPH)과 NADPH를 조합하여 생산한다.[21][22]

7-ethoxyresorufin은 아릴 탄화수소에 대한 노출에 대응하여 생성된 세포 배양 및 환경 샘플에서 에톡시레소루핀-O-데틸아제(EROD) 검사 시스템을 사용하여 시토크롬 P450(CYP1A1) 유도를 측정할 때 기질로 사용되는 화합물이다.이 화합물은 효소에 의해 촉매되어 같은 형광 물질인 레소루핀을 생산한다.[23][24]

1,3-디클로로-7-히드록시-9,9-디메틸아크리딘-2(9H)-원(DDAO 염료), 올리고뉴클레오티드 라벨링에 사용되는 형광 염료.[25]

참조

  1. ^ "Resazurin C12H7NO4 ChemSpider".
  2. ^ Bueno, C.; Villegas, M. L.; Bertolotti, S. G.; Previtali, C. M.; Neumann, M. G.; Encinas, M. V. (2002). "The Excited-State Interaction of Resazurin and Resorufin with Aminesin Aqueous Solutions. Photophysics and Photochemical Reaction". Photochemistry and Photobiology. 76 (4): 385–90. doi:10.1562/0031-8655(2002)0760385TESIOR2.0.CO2. PMID 12405144.
  3. ^ Haggerty, Roy; Martí, Eugènia; Argerich, Alba; Schiller, Daniel von; Grimm, Nancy B. (2009). "Resazurin as a "smart" tracer for quantifying metabolically active transient storage in stream ecosystems". Journal of Geophysical Research: Biogeosciences. 114 (G3). doi:10.1029/2008JG000942. hdl:10261/38263. ISSN 2156-2202.
  4. ^ 첸, J. L. 스틸, T. W. & Stuckey, D. C. (2015년)혐기성 소화에서 생물독성을 위한 형광 기반 빠른 측정의 모델링 및 적용.환경 과학 기술, 49(22), 13463-13471.http://pubs.acs.org/doi/10.1021/acs.est.5b03050
  5. ^ Kreft, Samo; Kreft, Marko (2009). "Quantification of dichromatism: A characteristic of color in transparent materials". Journal of the Optical Society of America A. 26 (7): 1576–81. Bibcode:2009JOSAA..26.1576K. doi:10.1364/JOSAA.26.001576. PMID 19568292.
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  8. ^ a b c UptiBlue 실행 가능한 셀 검사 기술 매뉴얼
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  24. ^ Chang, Thomas K.H.; Waxman, David J. (2005). "Enzymatic Analysis of cDNA-Expressed Human CYP1A1, CYP1A2, and CYP1B1 With 7-Ethoxyresorufin as Substrate". In Phillips, I.R.; Shephard, E.A. (eds.). Cytochrome P450 Protocols. Methods in Molecular Biology. Vol. 320 (2nd ed.). pp. 85–90. doi:10.1385/1-59259-998-2:85. ISBN 9781588294418. PMID 16719376.
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