마이코박테리아 표현형 검사

Phenotypic testing of mycobacteria

미생물학에서 마이코박테리아 표현형 검사는 여러 가지 방법을 사용한다.아래에 마이코박테륨의 변종과 종을 식별하고 구별하기 위해 가장 일반적으로 사용되는 표현형 테스트가 설명되어 있습니다.

테스트

단독 C 및 N 소스로서의 아세트아미드

배지 : KHO24(0.5g), MgSO>*47H02(0.5g), 정제 한천(20g), 증류수(1000ml).아세트아미드를 0.02M의 최종 농도로 보충하여 pH 7.0으로 조정하고 115°C에서 30분간 고압 멸균한다.경사진 후 배지의 1루프를 접종하고 배양한다.2주(급성장자) 또는 4주(저성장자)[1]의 배양 후 성장을 읽습니다.

아릴술파타아제 시험

아릴술파타아제 효소는 대부분의 마이코박테리아에 존재한다.아릴술파타아제 효소가 페놀프탈레인 이황산염을 페놀프탈레인(중탄산나트륨의 존재 하에서 붉은색을 형성함) 및 기타 소금으로 분해하는 속도는 마이코박테리아 특정 균주를 구별하는 데 사용됩니다.3일 arylsulfatase 테스트는 M. portuitum, M. chelonae와 같은 잠재적인 병원성 급속 재배자를 식별하기 위해 사용된다.천천히 성장하는 M. marinum과 M. szulgai는 14일간의 아릴술파타아제 [2]테스트에서 양성입니다.

카탈라아제, 반정량 활성

대부분의 마이코박테리아는 카탈라아제 효소를 생산하지만, 생산량은 다양합니다.또한 68℃에서 20분간 가열함으로써 일부 형태의 카탈라아제가 불활성화된다(다른 형태는 안정적이다.카탈라아제 효소를 생성하는 유기체는 과산화수소를 물과 유리산소로 분해하는 능력을 가지고 있다.이 테스트는 강력한 세제 용액(10% 폴리소르베이트 80)[1]에서 과산화수소를 30% 사용하여 다른 유형의 박테리아에서 카탈라아제를 검출하는 데 사용한 것과 다릅니다.

구연산염

단독 탄소원[1]

배지

뢰웬슈타인-옌센 배지(LJ 배지) 성장률

L-글루탐산염

유일한 탄소 및 질소[1] 공급원

성장률

성장률은 고체 매체에서 확대 없이 볼 수 있는 성숙한 집락을 형성하는 데 필요한 시간입니다.하위 배양 시 7일 이내에 육안으로 볼 수 있는 군락을 형성하는 마이코박테리아는 급속 생육자로 알려져 있으며, 더 긴 기간이 필요한 마이코박테리아는 저속 [3]생육자로 알려져 있다.

철흡수

무기 철분이 함유된 시약에서 철분을 흡수하는 능력은 몇몇 종류의 마이코박테리아를 [1]구별하는 데 도움을 준다.

레베크 배지

Lebek는 마이코박테리아 분리물의 산소 선호도를 테스트하는 데 사용되는 반고립 매체입니다.호기성 성장은 튜브 유리벽 표면(및 그 위)에서의 성장으로 나타나고, 미소호기성 성장은 [4]표면 아래에서의 성장으로 나타난다.

크리스털 바이올렛이 없는 맥콩키 한천
[5]
니아신 축적(종이 스트립법)
다음 항목도 참조하십시오.니아신 시험

니아신은 모든 마이코박테리아에 의해 대사 부산물로 형성되지만, 일부 종은 유리 니아신을 니아신 리보뉴클레오티드로 변환하는 효소를 가지고 있다.결핵균(및 일부 다른 종)은 이 효소가 부족하여 배양 [1]배지에 수용성 부산물로 니아신을 축적합니다.

질산염 환원

아질산염에서 아질산염으로의 환원을 촉매하는 아질산염을 포함한 마이코박테리아.시험 매체 중 아질산염의 존재는 술파닐아미드와 n-나프틸에틸엔디아민을 첨가하여 검출한다.질산염이 있으면 적색 디아조늄 색소가 [1]형성된다.

마이코박테리아 광반응

어떤 마이코박테리아는 빛 없이 카로티노이드 색소를 생성한다; 다른 것들은 색소 생성을 위해 광활성화가 필요하다.광색소체는 어둠 속에서 성장하면 비염색 집락을 형성하고, 빛에 노출되어 재삽입하면 색소 집락을 형성한다.스코토크로모겐은 빛과 어둠 중 어느 한 곳에서 자라나면 짙은 노란색에서 오렌지색 군락을 형성한다.비포토크로노겐은 빛과 어둠 속에서 비염색되거나 옅은 황색, 담황색 또는 황갈색 색소를 가지고 있어 빛 [3]노출 후에도 강하지 않다.

피크레이트 공차

3주[1] 후 피클린산 함유 Sauton 한천(0.2% w/v)에서 성장

색소 침착

어떤 마이코박테리아는 빛 없이 카로티노이드 색소를 생산하고, 다른 것들은 색소 생성을 위해 광활성화를 필요로 한다.[3]

피라진아미드 감수성(PZA)

피라진아미드를 피라진산(약물 피라진아미드의 활성 성분으로 가정)으로 4일 동안 탈아미드화하는 것은 M. 결핵 복합체 구성원을 구별할 [1]수 있는 유용한 생리학적 특성이다.

염화나트륨 내성

5% NaCl[1] 함유 LJ 배지의 성장률

티오펜-2카르본산히드라지드(TCH) 감수성

M. bovis 및 M. africanum subtype II의 성장은 티오펜-2 카르본산 히드라지드에 의해 억제되며, M. 결핵 및 M. africanum subtype I의 성장은 [1]억제되지 않는다.

폴리소르베이트 80 가수분해

폴리소르베이트 80(세제인 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노울레이트)을 이용한 리파아제 시험.특정 마이코박테리아는 리파아제를 가지고 있어 올레산과 폴리옥시에틸화 소르비톨로 분해된다.테스트 용액에는 또한 폴리소르베이트 80에 의해 안정화되는 페놀 레드가 포함되어 있습니다. 후자의 80이 가수분해되면 페놀 레드는 노란색에서 [1]분홍색으로 바뀝니다.

우레아제(마이코박테리아 적응)

접종 루프를 이용하여 여러 루프풀의 마이코박테리아 테스트 콜로니를 우레아제 기질 0.5mL로 옮겨 혼합하여 35°C에서 3일간 배양한 후 (황색-노란색에서 분홍색-빨간색으로) 색변화를 꾀한다.[1]

레퍼런스

  1. ^ a b c d e f g h i j k l m Koneman, E. (1988). Diagnostic Microbiology. Philadelphia: J.B. Lippincott.
  2. ^ ACHARYA, TANKESHWAR. "Key biochemical methods used to distinguish Mycobacterial group". Retrieved 21 November 2014.
  3. ^ a b c Metchock, B.G; Nolte, F.S.; Wallace, R.J. (1999). "Mycobacterium". In Murray, P.R.; Baron, E.J.; Pfaller, M.A.; Tenover, F.C.; Yolken, R.H. (eds.). Manual of Clinical Microbiology. Washington, D.C.: ASM Press. pp. 399–427.
  4. ^ Deutsches Institut für Normung (1993). "Part 9: minimum requirements for the identification of tubercle bacilli". Medical Microbiology: Diagnosis of Tuberculosis. Berlin: Beuth Verlag (DIN 58943-9).
  5. ^ M. Tsukamura. "Adansonian classification of mycobacteria". Journal of General Microbiology. 45: 252–273. doi:10.1099/00221287-45-2-253.