dbo:abstract
|
- pBR322 és un plasmidi que durant molt de temps va ser el principal en clonació en E. coli. Va ser creat el 1977. La P significa plasmidi mentre que la B i la R fa honor als seus creadors, Bolívar i Rodríguez. La seqüència del pBR322 és (ca)
- Das Plasmid pBR322 wurde 1977 von Francisco Bolivar und Raymond Rodriguez im Labor von Herbert Boyer an der University of San Francisco (UCSF) konstruiert und war eines der ersten künstlich hergestellten Plasmide.Es ist ein Derivat eines R-Plasmids, das einen Replikationsursprung ori (origin of replication), Gene für Ampicillin-Resistenz und Tetracyclin-Resistenz auf sich trägt. Im Unterschied zu gewöhnlichen R-Plasmiden fehlt ihm die Fähigkeit, sich auf andere Zellen selbständig zu übertragen (tra-Gene, (origin of transfer)). Es war ein vielbenutzter Vektor, insbesondere in den 1980er Jahren. pBR322 wird neuerdings durch fortschrittlichere, einfacher zu handhabende Vektoren ersetzt, wie zum Beispiel pUC19 oder pBluescriptII. (de)
- pBR322 plasmido bat da, eta gizakiak diseinatutako lehen klonazio-bektoreetako bat izan zen. 1977an sortu zuten Francisco Bolivar Zapata, doktoretza ondoko ikertzaileak, eta Raymond L. Rodríguez-ek Herbert Boyerren laborategian, Kaliforniako Unibertsitatean (San Frantziskon). Haiek eman zioten izena plasmidoari: P hizkiak "plasmido" esan nahi du, eta BR hizkiak, aldiz, "Bolívar" eta "Rodríguez" abizenei dagozkie. Zenbakiak antzeko plasmidoetatik bereizteko funtzioa dute. pBR322 R plasmidotik eratorria da. 4361 base pareko luzera du, eta erreplikazioaren jatorria den ori sekuentzia dauka. Horrez gain, antibiotikoekiko erresistentziaren bi gene ditu: bla genea, anpizilinarekiko erresistentziaren proteina (AmpR) kodetzen duena, eta tetA genea, tetraziklinarekiko erresistentziaren proteina kodetzen duena. R plasmido arruntekin alderatuz, desberdintasun bat bere kabuz zelula batetik bestera transferitzeko gaitasunik ez edukitzea izango litzateke. Klonazio-bektore hau asko erabili izan da, gehienbat 1980ko hamarkadan. Gaur egun, haren erabilera bektore berriago, aurreratuago eta erabilerrazago batzuek ordezkatu dute, esaterako, pUC19 eta pBluescriptII ditugu. (eu)
- pBR322 is a plasmid and was one of the first widely used E. coli cloning vectors. Created in 1977 in the laboratory of Herbert Boyer at the University of California, San Francisco, it was named after Francisco Bolivar Zapata, the postdoctoral researcher and Raymond L. Rodriguez. The p stands for "plasmid," and BR for "Bolivar" and "Rodriguez." pBR322 is 4361 base pairs in length and has two antibiotic resistance genes – the gene bla encoding the ampicillin resistance (AmpR) protein, and the gene tetA encoding the tetracycline resistance (TetR) protein. It contains the origin of replication of pMB1, and the rop gene, which encodes a restrictor of plasmid copy number. The plasmid has unique restriction sites for more than forty restriction enzymes. Eleven of these forty sites lie within the TetR gene. There are two sites for restriction enzymes HindIII and within the promoter of the TetR gene. There are six key restriction sites inside the AmpR gene.The source of these antibiotic resistance genes are from pSC101 for Tetracycline and RSF2124 for Ampicillin. The circular sequence is numbered such that 0 is the middle of the unique EcoRI site and the count increases through the TetR gene.If we have to remove ampicillin for instance, we must have to use restriction endonuclease or molecular scissors against PstI and then pBR322 will become anti- resistance to ampicillin .The same process of Insertional Inactivation can be applied to Tetracycline. The AmpR gene is penicillin beta-lactamase. Promoters P1 and P3 are for the beta-lactamase gene. P3 is the natural promoter, and P1 is artificially created by the ligation of two different DNA fragments to create pBR322. P2 is in the same region as P1, but it is on the opposite strand and initiates transcription in the direction of the tetracycline resistance gene. (en)
- pBR322 é um plasmídio e foi um dos mais utilizados vectores de clonagem em E. coli. Foi o primeiro plasmídio artificial. Criado em 1977, o seu nome deriva de p (plasmídio) e BR, Bolivar e Rodriguez, os criadores de origem mexicana. Possui 4361 pares de bases de comprimento e contém um região de replicão, o gene ampR, que codifica a proteína de resistência a ampicilina e o gene tetR, que codifica a proteína de resistência à tetraciclina. O plasmídio possui locais de restrição únicos para mais de 40 enzimas de restrição. 11 desses 40 sítios ficam no gene tetR. Existem 2 sítios para a enzima de restrição HindIII e dentro do promotor do gene tetR. Existem 6 locais de restrição chave dentro do gene ampR. A origem da replicação ou sítio ori neste plasmídio é pMB1. O ori codifica dois ARN (RNAI and RNAII) e uma proteína (chamada Rom ou Rop). A sequência circular é numerada de tal forma que 0 está no meio do sítio EcoRI e a contagem cresce através dos genes tet. Os promotores P1 e P3 são para o gene de beta-lactamase. P3 é o promotor natural, e P1 é artificialmente criado. P2 está na mesma região que o P1 mas na fita oposta e inicia a transcrição na direcção do gene de resistência à tetraciclina. (pt)
- pBR322 — плазмида, используемая в бактериях E. coli как вектор клонирования. Создана в 1977 году мексиканскими биологами Франциско Боливаром и Раймондом Родригесом. pBR322 содержит 4361 нуклеотидную пару и состоит из участка репликации ori (взят из плазмиды pMB1); гена ampR, кодирующего белок, обеспечивающий устойчивость к ампициллину (взят из плазмиды RSF2124) и гена tetR, обеспечивающего устойчивость к тетрациклину (взят из плазмиды pSC101). Плазмида содержит уникальные сайты рестрикции для более чем 40 рестриктаз. 11 из этих 40 сайтов находятся внутри гена tetR, причём 2 сайта (HindIII и ClaI) расположены внутри промотора этого гена. 6 сайтов находятся внутри гена ampR. Участок репликации ori, заимствованный из плазмиды pMB1, сходен по структуре с ColE1. Он кодирует две РНК (RNAI и RNAII) и один белок (Rom или Rop). Молекулярная масса плазмиды составляет 2,83⋅106 дальтон. Код в базе данных GenBank — J01749. Нумерацию нуклеотидных пар принято начинать с центральной линии уникального сайта рестрикции EcoRI в направлении гена tet. Ген устойчивости к ампициллину – пенициллиновая бета-лактамаза (англ. penicillin beta-lactamase) с промотерами P1 и P3. P3 является естественным промотором, а P1 создан искусственно лигированием двух различных фрагментов ДНК. Промотер P2 аналогичен P1, однако расположен на противоположной стороне плазмиды и инициирует транскрипцию в направлении гена устойчивости к тетрациклину. (ru)
|
rdfs:comment
|
- pBR322 és un plasmidi que durant molt de temps va ser el principal en clonació en E. coli. Va ser creat el 1977. La P significa plasmidi mentre que la B i la R fa honor als seus creadors, Bolívar i Rodríguez. La seqüència del pBR322 és (ca)
- Das Plasmid pBR322 wurde 1977 von Francisco Bolivar und Raymond Rodriguez im Labor von Herbert Boyer an der University of San Francisco (UCSF) konstruiert und war eines der ersten künstlich hergestellten Plasmide.Es ist ein Derivat eines R-Plasmids, das einen Replikationsursprung ori (origin of replication), Gene für Ampicillin-Resistenz und Tetracyclin-Resistenz auf sich trägt. Im Unterschied zu gewöhnlichen R-Plasmiden fehlt ihm die Fähigkeit, sich auf andere Zellen selbständig zu übertragen (tra-Gene, (origin of transfer)). Es war ein vielbenutzter Vektor, insbesondere in den 1980er Jahren. pBR322 wird neuerdings durch fortschrittlichere, einfacher zu handhabende Vektoren ersetzt, wie zum Beispiel pUC19 oder pBluescriptII. (de)
- pBR322 plasmido bat da, eta gizakiak diseinatutako lehen klonazio-bektoreetako bat izan zen. 1977an sortu zuten Francisco Bolivar Zapata, doktoretza ondoko ikertzaileak, eta Raymond L. Rodríguez-ek Herbert Boyerren laborategian, Kaliforniako Unibertsitatean (San Frantziskon). Haiek eman zioten izena plasmidoari: P hizkiak "plasmido" esan nahi du, eta BR hizkiak, aldiz, "Bolívar" eta "Rodríguez" abizenei dagozkie. Zenbakiak antzeko plasmidoetatik bereizteko funtzioa dute. (eu)
- pBR322 is a plasmid and was one of the first widely used E. coli cloning vectors. Created in 1977 in the laboratory of Herbert Boyer at the University of California, San Francisco, it was named after Francisco Bolivar Zapata, the postdoctoral researcher and Raymond L. Rodriguez. The p stands for "plasmid," and BR for "Bolivar" and "Rodriguez." (en)
- pBR322 é um plasmídio e foi um dos mais utilizados vectores de clonagem em E. coli. Foi o primeiro plasmídio artificial. Criado em 1977, o seu nome deriva de p (plasmídio) e BR, Bolivar e Rodriguez, os criadores de origem mexicana. Possui 4361 pares de bases de comprimento e contém um região de replicão, o gene ampR, que codifica a proteína de resistência a ampicilina e o gene tetR, que codifica a proteína de resistência à tetraciclina. (pt)
- pBR322 — плазмида, используемая в бактериях E. coli как вектор клонирования. Создана в 1977 году мексиканскими биологами Франциско Боливаром и Раймондом Родригесом. pBR322 содержит 4361 нуклеотидную пару и состоит из участка репликации ori (взят из плазмиды pMB1); гена ampR, кодирующего белок, обеспечивающий устойчивость к ампициллину (взят из плазмиды RSF2124) и гена tetR, обеспечивающего устойчивость к тетрациклину (взят из плазмиды pSC101). Плазмида содержит уникальные сайты рестрикции для более чем 40 рестриктаз. 11 из этих 40 сайтов находятся внутри гена tetR, причём 2 сайта (HindIII и ClaI) расположены внутри промотора этого гена. 6 сайтов находятся внутри гена ampR. Участок репликации ori, заимствованный из плазмиды pMB1, сходен по структуре с ColE1. Он кодирует две РНК (RNAI и RNAI (ru)
|