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KR20240038008A - 암 치료 방법 및 조성물 - Google Patents

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KR20240038008A
KR20240038008A KR1020247005105A KR20247005105A KR20240038008A KR 20240038008 A KR20240038008 A KR 20240038008A KR 1020247005105 A KR1020247005105 A KR 1020247005105A KR 20247005105 A KR20247005105 A KR 20247005105A KR 20240038008 A KR20240038008 A KR 20240038008A
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amino acid
bispecific antibody
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acid sequence
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KR1020247005105A
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헨리 카오
크리스토프 마르커트
크리스틴 엠신타이어
레이몬드 디. 멩
메를린트 뮈케
폴커 타이흐그래버
로라 코다리 데크
Original Assignee
에프. 호프만-라 로슈 아게
제넨테크, 인크.
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Abstract

본 발명은 대상체에게 세포예정사 단백질 1(PD-1) 및 림프구 활성화 유전자-3(LAG3)을 표적으로 하는 이중특이성 항체를 투여함으로써 대상체의 암을 치료하는데 사용하기 위한 방법 및 조성물에 관한 것이다.

Description

암 치료 방법 및 조성물
서열 목록
본 출원에는, XML 형식으로 전자적으로 제출되어있고 그 전체 내용이 참조로 포함된 서열 목록이 포함되어 있다. 2022년 7월 27일에 생성된 이러한 XML 사본의 파일명은 50474-304WO2_Sequence_Listing_7_27_22이고 크기는 68,756바이트이다.
발명의 분야
본 발명은 대상체에게 세포예정사 단백질 1(PD-1) 및 림프구 활성화 유전자-3(LAG3)을 표적화하는 이중특이성 항체(PD1-LAG3)를, 선택적으로 항-TIGIT 길항제 항체(예를 들어, 티라골루맙) 또는 VEGF 길항제(예를 들어, 베바시주맙)와 함께 투여함으로써, 대상체에서 암을 치료하는데 사용하기 위한 방법 및 조성물에 관한 것이다.
발명의 배경
암은 세포 하위집단의 통제되지 않는 성장을 특징으로 한다. 암은 선진국에서는 사망 원인 1위이고, 개발도상국에서는 사망 원인 2위를 차지하며, 매년 1,400만 건 이상의 새로운 암 발병 사례가 진단되고 800만 건 이상의 암 사망이 발생한다. 따라서 암 치료는 상당히 그리고 지속적으로 증가하는 사회적 부담을 나타낸다.
흔하고 치료하기 어려운 암의 치료를 위한 치료법이 특히 절실히 필요하다.
흑색종은 멜라닌 세포의 악성 종양이다. 이러한 잠재적으로 치명적인 형태의 피부암은 가장 빠르게 성장하는 악성 종양 중 하나이다.
현재 전 세계적으로 매년 300,000명 이상의 사람들이 흑색종 진단을 받고 있으며, 57,000명이 이 질환으로 사망한다. 진행성 흑색종 환자의 대부분은 예후가 좋지 않다. 림프절 침범(III기) 환자는 수술 후 국소 및 원격 재발 위험이 높으며, 이 환자군의 5년 생존율은 32%-93%이다. 발현 시점에 전이성 질환(IV기)이 있는 환자는 거의 없지만 일부 환자는 초기 최종 치료 후 전이가 발생한다. 면역요법과 표적요법으로 이들 환자의 결과가 개선됐고, 5년 생존율은 약 50%에 이른다. 흑색종은 의료 수요가 높고 지난 30년 동안 발병률이 꾸준히 증가하는 심각한 건강 문제이다. 따라서, 이 집단에서는 새로운 치료 접근법에 대한 필요성이 여전히 상당하다.
간암은 전 세계적으로 다섯 번째로 흔한 암이자 두 번째로 흔한 암 관련 사망 원인으로, 연간 신규 발병 건수는 854,000건, 사망 건수는 810,000건이다. 간세포 암종(HCC)은 원발성 간암의 가장 흔한 형태이며 모든 원발성 간 악성종양의 약 90%를 차지한다. 덜 흔한 원발성 간암에는 간내 담관암종(iCCA), 혈관육종 및 간모세포종이 포함된다. 진단 시 대부분의 원발성 간암 환자는 완치요법을 통한 치료가 권장되지 않는 단계인 진행성 질환을 나타낸다. WHO는 2030년에 100만 명 이상이 간암으로 사망할 것으로 추정하고 있으며, 이는 전 세계적으로 중요한 공중 보건 문제를 부각시키고 있다.
따라서, 흑색종 및 간암을 비롯한 암 치료를 위한 효과적인 면역요법 및 이를 투여하는 방법의 개발에 대한 해당 분야의 필요성이 충족되지 않고 있다.
발명의 요약
한 양상에서, 본 발명은 암을 갖는 대상체를 치료하는 방법을 제공하며, 이 방법은 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하는, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체의 1회 이상의 투여 주기를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하고, 이 때 이 방법은 3주마다 600 mg 고정 용량의 이중특이성 항체를 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.
일부 양상에서, 암은 고형 종양이다.
일부 양상에서, 암은 국소 진행성 또는 전이성이다.
일부 양상에서, 암은 피부암, 간암, 폐암, 신장암, 방광암, 유방암 또는 식도암이다. 일부 양상에서, 피부암은 흑색종이다. 일부 양상에서, 피부암은 이전에 치료받지 않은 절제불가능 또는 전이성 흑색종이다. 일부 양상에서, 흑색종은 (a) 측정가능한 림프절 전이가 있는 III기 흑색종; (b) 절제불가능 III기 흑색종; 또는 (c) IV기 흑색종이며, 선택적으로 흑색종은 점막 흑색종 또는 포도막 흑색종이 아니다. 일부 양상에서, 간암은 간세포 암종(HCC)이다. 일부 양상에서, 폐암은 비소세포 폐암(NSCLC)이다. 일부 양상에서, 신장암은 신장 세포 암종(RCC)이다. 일부 양상에서, 방광암은 전이성 요로 상피 암종(mUC)이다. 일부 양상에서, 유방암은 삼중 음성 유방암(TNBC)이다. 일부 양상에서, 식도암은 식도 편평 세포 암종(ESCC)이다.
또 다른 양상에서, 본 발명은 흑색종을 갖는 대상체를 치료하는 방법을 제공하며, 이 방법은 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하는, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체의 1회 이상의 투여 주기를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하고, 이 때 이 방법은 3주마다 600 mg 고정 용량의 이중특이성 항체를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하고, 그리고 흑색종은 (a) 절제불가능 III기 흑색종; 또는 (b) IV기 흑색종이다. 일부 양상에서, 대상체는 안구 흑색종을 갖지 않는다.
또 다른 양상에서, 본 발명은 간암을 갖는 대상체를 치료하는 방법을 제공하며, 이 방법은 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하는, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체의 1회 이상의 투여 주기를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하고, 이 때 이 방법은 3주마다 600 mg 고정 용량의 이중특이성 항체를 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.
일부 양상에서, 간암은 간세포 암종(HCC)이다. 일부 양상에서, HCC는 국소 진행성, 전이성 및/또는 절제불가능이다.
일부 양상에서, 대상체는 이전에 전신 항암 요법을 받은 적이 없다.
일부 양상에서, 1회 이상의 투여 주기 각각의 길이는 21일이다. 일부 양상에서, 1회 이상의 투여 주기 각각의 1일차에 대상체에게 상기 이중특이성 항체를 투여하는 단계를 포함한다.
일부 양상에서, 상기 방법은 대상체에게 상기 이중특이성 항체를 정맥내 투여하는 단계를 포함한다.
일부 양상에서, 상기 방법은 대상체에게 3주마다 약 15 mg/kg의 용량의 베바시주맙을 투여하는 단계를 추가로 포함한다. 일부 양상에서, 1회 이상의 투여 주기 각각의 길이가 21일이고, 상기 방법은 1회 이상의 투여 주기 각각의 1일차에 대상체에게 베바시주맙을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 양상에서, 베바시주맙은 정맥내 투여된다.
일부 양상에서, 대상체는 이전에 전이성 또는 절제불가능한 질환에 대해 치료받은 적이 없다.
일부 양상에서, 대상체는 이전에 면역조절제를 포함하는 항암 요법으로 치료받은 적이 없다.
일부 양상에서, 대상체는 이전에 항-LAG3 요법으로 치료받은 적이 없다.
일부 양상에서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는 (i) 서열번호 25의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1 서열; (ii) 아미노산 서열 GGR을 포함하는 HVR-H2 서열; 및 (iii) 서열번호 26의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3 서열을 포함하는 VH 도메인; 및 (i) 서열번호 27의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1 서열; (ii) 아미노산 서열 RSS를 포함하는 HVR-L2 서열; 및 (iii) 서열번호 28의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3 서열을 포함하는 VL 도메인을 포함하는, PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인을 포함한다.
일부 양상에서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는 (i) 서열번호 31의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1 서열; (ii) 서열번호 32의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2 서열; 및 (iii) 서열번호 33의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3 서열을 포함하는 VH 도메인; 및 (i) 서열번호 34의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1 서열; (ii) 서열번호 35의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2 서열; 및 (iii) 서열번호 36의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3 서열을 포함하는 VL 도메인을 포함하는, LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함한다.
일부 양상에서, 제1 항원 결합 도메인은 서열번호 29의 아미노산 서열을 포함하는 VH 도메인 및 서열번호 30의 아미노산 서열을 포함하는 VL 도메인을 포함하고, 그리고 제2 항원 결합 도메인은 서열번호 37의 아미노산 서열을 포함하는 VH 도메인 및 서열번호 38의 아미노산 서열을 포함하는 VL 도메인을 포함한다.
일부 양상에서, 이중특이성 항체는 전장 항체이다.
일부 양상에서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는 IgG인 Fc 도메인을 포함하고, 선택적으로 IgG Fc 도메인은 IgG1 Fc 도메인 또는 IgG4 Fc 도메인이다. 일부 양상에서, Fc 도메인은 Fc 수용체에 대한 결합을 감소시키는 하나 이상의 아미노산 치환을 포함하고, 선택적으로 Fc 수용체는 Fcγ 수용체이다.
일부 양상에서, PD-1 및 LAG3을 표적화하는 이중특이성 항체는 (a) 아미노산 돌연변이 L234A, L235A 및 P329G(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링)를 갖는 인간 IgG1 하위분류의 Fc 도메인; 및/또는 (b) Fc 도메인의 제1 및 제2 서브유닛의 회합을 촉진하는 변형을 포함하는 Fc 도메인을 포함한다.
일부 양상에서, Fc 도메인의 제1 서브유닛은 아미노산 치환 S354C 및 T366W(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링)를 포함하고, Fc 도메인의 제2 서브유닛은 아미노산 치환 Y349C, T366S 및 Y407V(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링)를 포함한다.
일부 양상에서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는 Fc 도메인, 제1 항원 결합 도메인을 포함하는 제1 Fab 단편, 및 제2 항원 결합 도메인을 포함하는 제2 Fab 단편을 포함한다. 일부 양상에서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체의 Fab 단편들 중 하나에서 가변 도메인 VL 및 VH는 VH 도메인이 경쇄의 일부이고 VL 도메인이 중쇄의 일부가 되도록 서로 대체되며, 선택적으로 제1 Fab 단편에서 가변 도메인 VL 및 VH가 서로 대체된다. 일부 양상에서, Fab 단편들 중 하나의 불변 도메인 CL에서 위치 124의 아미노산은 리신(K), 아르기닌(R) 또는 히스티딘(H)에 의해 독립적으로 치환되고(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링), 불변 도메인 CH1에서 위치 147 및 213의 아미노산은 글루탐산(E) 또는 아스파르트산(D)에 의해 독립적으로 치환되고(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링), 선택적으로 제2 Fab 단편의 불변 도메인 CL에서 위치 124의 아미노산은 리신(K), 아르기닌(R) 또는 히스티딘(H)에 의해 독립적으로 치환되고(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링), 그리고 불변 도메인 CH1에서 위치 147 및 213의 아미노산은 글루탐산(E) 또는 아스파르트산(D)에 의해 독립적으로 치환된다(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링).
일부 양상에서, 이중특이성 항체는 서열번호 39의 서열에 적어도 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 제1 중쇄, 서열번호 40의 서열에 적어도 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 제1 경쇄, 서열번호 41의 서열에 적어도 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 제2 중쇄, 및 서열번호 42의 서열에 적어도 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 제2 경쇄를 포함한다. 일부 양상에서, 이중특이성 항체는 서열번호 39의 아미노산 서열을 포함하는 제1 중쇄, 서열번호 40의 아미노산 서열을 포함하는 제1 경쇄, 서열번호 41의 아미노산 서열을 포함하는 제2 중쇄, 및 서열번호 42의 아미노산 서열을 포함하는 제2 경쇄를 포함한다.
일부 양상에서, 이중특이성 항체가 종양에서 적어도 90%의 LAG3 수용체 점유율(RO)을 달성한다.
일부 양상에서, 대상체는 인간이다.
또 다른 양상에서 본 발명은 암을 갖는 대상체를 치료하는 방법에 사용하기 위한 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체를 제공하며, 이 때 이러한 이중특이성 항체는 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하고, 그리고 상기 방법은 대상체에게 3주마다 600 mg의 고정 용량의 이중특이성 항체를 투여하는 단계를 포함한다.
일부 양상에서, 암은 고형 종양이다.
일부 양상에서, 암은 국소 진행성 또는 전이성이다.
일부 양상에서, 암은 피부암, 간암, 폐암, 신장암, 방광암, 유방암 또는 식도암이다. 일부 양상에서, 피부암은 흑색종이다. 일부 양상에서, 피부암은 이전에 치료받지 않은 절제불가능 또는 전이성 흑색종이다. 일부 양상에서, 흑색종은 (a) 측정가능한 림프절 전이가 있는 III기 흑색종; (b) 절제불가능 III기 흑색종; 또는 (c) IV기 흑색종이며, 선택적으로 흑색종은 점막 흑색종 또는 포도막 흑색종이 아니다. 일부 양상에서, 간암은 간세포 암종(HCC)이다. 일부 양상에서, 폐암은 비소세포 폐암(NSCLC)이다. 일부 양상에서, 신장암은 신장 세포 암종(RCC)이다. 일부 양상에서, 방광암은 전이성 요로 상피 암종(mUC)이다. 일부 양상에서, 유방암은 삼중 음성 유방암(TNBC)이다. 일부 양상에서, 식도암은 식도 편평 세포 암종(ESCC)이다.
또 다른 양상에서, 본 발명은 흑색종을 갖는 대상체를 치료하는 방법에 사용하기 위한 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체를 제공하며, 이 때 이러한 이중특이성 항체는 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하고, 상기 방법은 대상체에게 3주마다 600 mg의 고정 용량의 이중특이성 항체를 투여하는 단계를 포함하고, 그리고 흑색종은 (a) 절제불가능 III기 흑색종; 또는 (b) IV기 흑색종이다. 일부 양상에서, 환자는 안구 흑색종을 갖지 않는다.
또 다른 양상에서 본 발명은 간암을 갖는 대상체를 치료하는 방법에 사용하기 위한 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체를 제공하며, 이 때 이러한 이중특이성 항체는 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하고, 그리고 상기 방법은 대상체에게 3주마다 600 mg의 고정 용량의 이중특이성 항체를 투여하는 단계를 포함한다. 일부 양상에서, 간암은 HCC이다. 일부 양상에서, HCC는 국소 진행성, 전이성 및/또는 절제불가능이다.
일부 양상에서, 대상체는 이전에 전신 항암 요법을 받은 적이 없다.
일부 양상에서, 1회 이상의 투여 주기 각각의 길이는 21일이다. 일부 양상에서, 1회 이상의 투여 주기 각각의 1일차에 대상체에게 상기 이중특이성 항체를 투여하는 단계를 포함한다.
일부 양상에서, 상기 방법은 대상체에게 상기 이중특이성 항체를 정맥내 투여하는 단계를 포함한다.
일부 양상에서, 상기 방법은 대상체에게 3주마다 약 15 mg/kg의 용량의 베바시주맙을 투여하는 단계를 추가로 포함한다. 일부 양상에서, 1회 이상의 투여 주기 각각의 길이가 21일이고, 상기 방법은 1회 이상의 투여 주기 각각의 1일차에 대상체에게 베바시주맙을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 양상에서, 베바시주맙은 정맥내 투여된다.
일부 양상에서, 대상체는 이전에 전이성 또는 절제불가능한 질환에 대해 치료받은 적이 없다.
일부 양상에서, 대상체는 이전에 면역조절제를 포함하는 항암 요법으로 치료받은 적이 없다.
일부 양상에서, 대상체는 이전에 항-LAG3 요법으로 치료받은 적이 없다.
일부 양상에서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는 (i) 서열번호 25의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1 서열; (ii) 아미노산 서열 GGR을 포함하는 HVR-H2 서열; 및 (iii) 서열번호 26의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3 서열을 포함하는 VH 도메인; 및 (i) 서열번호 27의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1 서열; (ii) 아미노산 서열 RSS를 포함하는 HVR-L2 서열; 및 (iii) 서열번호 28의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3 서열을 포함하는 VL 도메인을 포함하는, PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인을 포함한다.
일부 양상에서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는 (i) 서열번호 31의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1 서열; (ii) 서열번호 32의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2 서열; 및 (iii) 서열번호 33의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3 서열을 포함하는 VH 도메인; 및 (i) 서열번호 34의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1 서열; (ii) 서열번호 35의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2 서열; 및 (iii) 서열번호 36의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3 서열을 포함하는 VL 도메인을 포함하는, LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함한다.
일부 양상에서, 제1 항원 결합 도메인은 서열번호 29의 아미노산 서열을 포함하는 VH 도메인 및 서열번호 30의 아미노산 서열을 포함하는 VL 도메인을 포함하고, 그리고 제2 항원 결합 도메인은 서열번호 37의 아미노산 서열을 포함하는 VH 도메인 및 서열번호 38의 아미노산 서열을 포함하는 VL 도메인을 포함한다.
일부 양상에서, 이중특이성 항체는 전장 항체이다.
일부 양상에서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는 IgG인 Fc 도메인을 포함하고, 선택적으로 IgG Fc 도메인은 IgG1 Fc 도메인 또는 IgG4 Fc 도메인이다. 일부 양상에서, Fc 도메인은 Fc 수용체에 대한 결합을 감소시키는 하나 이상의 아미노산 치환을 포함하고, 선택적으로 Fc 수용체는 Fcγ 수용체이다.
일부 양상에서, PD-1 및 LAG3을 표적화하는 이중특이성 항체는 (a) 아미노산 돌연변이 L234A, L235A 및 P329G(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링)를 갖는 인간 IgG1 하위분류의 Fc 도메인; 및/또는 (b) Fc 도메인의 제1 및 제2 서브유닛의 회합을 촉진하는 변형을 포함하는 Fc 도메인을 포함한다.
일부 양상에서, Fc 도메인의 제1 서브유닛은 아미노산 치환 S354C 및 T366W(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링)를 포함하고, Fc 도메인의 제2 서브유닛은 아미노산 치환 Y349C, T366S 및 Y407V(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링)를 포함한다.
일부 양상에서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는 Fc 도메인, 제1 항원 결합 도메인을 포함하는 제1 Fab 단편, 및 제2 항원 결합 도메인을 포함하는 제2 Fab 단편을 포함한다. 일부 양상에서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체의 Fab 단편들 중 하나에서 가변 도메인 VL 및 VH는 VH 도메인이 경쇄의 일부이고 VL 도메인이 중쇄의 일부가 되도록 서로 대체되며, 선택적으로 제1 Fab 단편에서 가변 도메인 VL 및 VH가 서로 대체된다. 일부 양상에서, Fab 단편들 중 하나의 불변 도메인 CL에서 위치 124의 아미노산은 리신(K), 아르기닌(R) 또는 히스티딘(H)에 의해 독립적으로 치환되고(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링), 불변 도메인 CH1에서 위치 147 및 213의 아미노산은 글루탐산(E) 또는 아스파르트산(D)에 의해 독립적으로 치환되고(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링), 선택적으로 제2 Fab 단편의 불변 도메인 CL에서 위치 124의 아미노산은 리신(K), 아르기닌(R) 또는 히스티딘(H)에 의해 독립적으로 치환되고(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링), 그리고 불변 도메인 CH1에서 위치 147 및 213의 아미노산은 글루탐산(E) 또는 아스파르트산(D)에 의해 독립적으로 치환된다(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링).
일부 양상에서, 이중특이성 항체는 서열번호 39의 서열에 적어도 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 제1 중쇄, 서열번호 40의 서열에 적어도 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 제1 경쇄, 서열번호 41의 서열에 적어도 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 제2 중쇄, 및 서열번호 42의 서열에 적어도 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 제2 경쇄를 포함한다. 일부 양상에서, 이중특이성 항체는 서열번호 39의 아미노산 서열을 포함하는 제1 중쇄, 서열번호 40의 아미노산 서열을 포함하는 제1 경쇄, 서열번호 41의 아미노산 서열을 포함하는 제2 중쇄, 및 서열번호 42의 아미노산 서열을 포함하는 제2 경쇄를 포함한다.
일부 양상에서, 이중특이성 항체가 종양에서 적어도 90%의 LAG3 수용체 점유율(RO)을 달성한다.
일부 양상에서, 대상체는 인간이다.
또 다른 양상에서, 본 발명은 암을 갖는 대상체를 치료하기 위한 약제의 제조에 있어서 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체의 용도를 제공하며, 이 때 이러한 이중특이성 항체는 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하고, 그리고 이러한 이중특이성 항체는 대상체에게 3주마다 600 mg의 고정 용량으로 투여된다.
일부 양상에서, 암은 고형 종양이다.
일부 양상에서, 암은 국소 진행성 또는 전이성이다.
일부 양상에서, 암은 피부암, 간암, 폐암, 신장암, 방광암, 유방암 또는 식도암이다. 일부 양상에서, 피부암은 흑색종이다. 일부 양상에서, 피부암은 이전에 치료받지 않은 절제불가능 또는 전이성 흑색종이다. 일부 양상에서, 흑색종은 (a) 측정가능한 림프절 전이가 있는 III기 흑색종; (b) 절제불가능 III기 흑색종; 또는 (c) IV기 흑색종이며, 선택적으로 흑색종은 점막 흑색종 또는 포도막 흑색종이 아니다. 일부 양상에서, 간암은 간세포 암종(HCC)이다. 일부 양상에서, 폐암은 비소세포 폐암(NSCLC)이다. 일부 양상에서, 신장암은 신장 세포 암종(RCC)이다. 일부 양상에서, 방광암은 전이성 요로 상피 암종(mUC)이다. 일부 양상에서, 유방암은 삼중 음성 유방암(TNBC)이다. 일부 양상에서, 식도암은 식도 편평 세포 암종(ESCC)이다.
또 다른 양상에서, 본 발명은 흑색종을 갖는 대상체를 치료하기 위한 약제의 제조에 있어서 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체의 용도를 제공하며, 이 때 이러한 이중특이성 항체는 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하고, 그리고 이러한 이중특이성 항체는 3주마다 600 mg의 고정 용량으로 대상체에게 투여되고, 그리고 흑색종은 (a) 절제불가능 III기 흑색종; 또는 (b) IV기 흑색종이다. 일부 양상에서, 대상체는 안구 흑색종을 갖지 않는다.
또 다른 양상에서, 본 발명은 간암을 갖는 대상체를 치료하기 위한 약제의 제조에 있어서 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체의 용도를 제공하며, 이 때 이러한 이중특이성 항체는 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하고, 이러한 이중특이성 항체는 대상체에게 3주마다 600 mg의 고정 용량으로 투여된다. 일부 양상에서, 간암은 HCC이다. 일부 양상에서, HCC는 국소 진행성, 전이성 및/또는 절제불가능이다.
일부 양상에서, 대상체는 이전에 전신 항암 요법을 받은 적이 없다.
일부 양상에서, 1회 이상의 투여 주기 각각의 길이는 21일이다. 일부 양상에서, 이중특이성 항체는 1회 이상의 투여 주기 각각의 1일차에 대상체에게 투여된다.
일부 양상에서, 이중특이성 항체는 대상체에게 정맥내 투여된다.
일부 양상에서, 베바시주맙은 3주마다 약 15 mg/kg의 용량으로 대상체에게 투여된다. 일부 양상에서, 1회 이상의 투여 주기 각각의 길이는 21일이고, 베바시주맙은 1회 이상의 투여 주기 각각의 1일차에 대상체에게 투여된다. 일부 양상에서, 베바시주맙은 정맥내 투여된다.
일부 양상에서, 대상체는 이전에 전이성 또는 절제불가능한 질환에 대해 치료받은 적이 없다.
일부 양상에서, 대상체는 이전에 면역조절제를 포함하는 항암 요법으로 치료받은 적이 없다.
일부 양상에서, 대상체는 이전에 항-LAG3 요법으로 치료받은 적이 없다.
일부 양상에서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는 (i) 서열번호 25의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1 서열; (ii) 아미노산 서열 GGR을 포함하는 HVR-H2 서열; 및 (iii) 서열번호 26의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3 서열을 포함하는 VH 도메인; 및 (i) 서열번호 27의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1 서열; (ii) 아미노산 서열 RSS를 포함하는 HVR-L2 서열; 및 (iii) 서열번호 28의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3 서열을 포함하는 VL 도메인을 포함하는, PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인을 포함한다.
일부 양상에서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는 (i) 서열번호 31의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1 서열; (ii) 서열번호 32의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2 서열; 및 (iii) 서열번호 33의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3 서열을 포함하는 VH 도메인; 및 (i) 서열번호 34의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1 서열; (ii) 서열번호 35의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2 서열; 및 (iii) 서열번호 36의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3 서열을 포함하는 VL 도메인을 포함하는, LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함한다.
일부 양상에서, 제1 항원 결합 도메인은 서열번호 29의 아미노산 서열을 포함하는 VH 도메인 및 서열번호 30의 아미노산 서열을 포함하는 VL 도메인을 포함하고, 그리고 제2 항원 결합 도메인은 서열번호 37의 아미노산 서열을 포함하는 VH 도메인 및 서열번호 38의 아미노산 서열을 포함하는 VL 도메인을 포함한다.
일부 양상에서, 이중특이성 항체는 전장 항체이다.
일부 양상에서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는 IgG인 Fc 도메인을 포함하고, 선택적으로 IgG Fc 도메인은 IgG1 Fc 도메인 또는 IgG4 Fc 도메인이다. 일부 양상에서, Fc 도메인은 Fc 수용체에 대한 결합을 감소시키는 하나 이상의 아미노산 치환을 포함하고, 선택적으로 Fc 수용체는 Fcγ 수용체이다.
일부 양상에서, PD-1 및 LAG3을 표적화하는 이중특이성 항체는 (a) 아미노산 돌연변이 L234A, L235A 및 P329G(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링)를 갖는 인간 IgG1 하위분류의 Fc 도메인; 및/또는 (b) Fc 도메인의 제1 및 제2 서브유닛의 회합을 촉진하는 변형을 포함하는 Fc 도메인을 포함한다.
일부 양상에서, Fc 도메인의 제1 서브유닛은 아미노산 치환 S354C 및 T366W(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링)를 포함하고, Fc 도메인의 제2 서브유닛은 아미노산 치환 Y349C, T366S 및 Y407V(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링)를 포함한다.
일부 양상에서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는 Fc 도메인, 제1 항원 결합 도메인을 포함하는 제1 Fab 단편, 및 제2 항원 결합 도메인을 포함하는 제2 Fab 단편을 포함한다. 일부 양상에서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체의 Fab 단편들 중 하나에서 가변 도메인 VL 및 VH는 VH 도메인이 경쇄의 일부이고 VL 도메인이 중쇄의 일부가 되도록 서로 대체되며, 선택적으로 제1 Fab 단편에서 가변 도메인 VL 및 VH가 서로 대체된다. 일부 양상에서, Fab 단편들 중 하나의 불변 도메인 CL에서 위치 124의 아미노산은 리신(K), 아르기닌(R) 또는 히스티딘(H)에 의해 독립적으로 치환되고(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링), 불변 도메인 CH1에서 위치 147 및 213의 아미노산은 글루탐산(E) 또는 아스파르트산(D)에 의해 독립적으로 치환되고(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링), 선택적으로 제2 Fab 단편의 불변 도메인 CL에서 위치 124의 아미노산은 리신(K), 아르기닌(R) 또는 히스티딘(H)에 의해 독립적으로 치환되고(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링), 그리고 불변 도메인 CH1에서 위치 147 및 213의 아미노산은 글루탐산(E) 또는 아스파르트산(D)에 의해 독립적으로 치환된다(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링).
일부 양상에서, 이중특이성 항체는 서열번호 39의 서열에 적어도 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 제1 중쇄, 서열번호 40의 서열에 적어도 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 제1 경쇄, 서열번호 41의 서열에 적어도 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 제2 중쇄, 및 서열번호 42의 서열에 적어도 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 제2 경쇄를 포함한다. 일부 양상에서, 이중특이성 항체는 서열번호 39의 아미노산 서열을 포함하는 제1 중쇄, 서열번호 40의 아미노산 서열을 포함하는 제1 경쇄, 서열번호 41의 아미노산 서열을 포함하는 제2 중쇄, 및 서열번호 42의 아미노산 서열을 포함하는 제2 경쇄를 포함한다.
일부 양상에서, 이중특이성 항체가 종양에서 적어도 90%의 LAG3 수용체 점유율(RO)을 달성한다.
일부 양상에서, 대상체는 인간이다.
도면의 간단한 설명
도 1은 흑색종 환자를 대상으로 한 Ib/II상 임상 시험의 연구 설계를 보여주는 흐름도이다. Atezo = 아테졸리주맙; CIT = 암 면역요법; CLND = 완전 림프절 절제술; Ipi = 이필리무맙; Nivo = 니볼루맙; R = 무작위 배정; Tira = 티라골루맙.
도 2는 흑색종 환자를 대상으로 한 Ib/II상 임상 시험의 코호트 1에서의 연구 일정 및 활동들의 개요를 보여주는 연구 계획의 개략도이다. CLND = 완전 림프절 절제술; Comp. = 완료; CT = 컴퓨터 단층촬영; Discon. = 중단; M = 개월; R = 무작위 배정; Q3M = 3개월마다; SFU = 생존 추적 조사; Tx = 치료; W = 주.
도 3은 펨브롤리주맙에 대한 최소 생리학적 기반 약동학(mPBPK) 모델을 보여주는 도식도이다. Jt = 종양 구획으로의 펨브롤리주맙 흐름; kint = 펨브롤리주맙-PD-1 복합체 내재화 속도 상수; koff = 해리 속도 상수; kon = 결합 속도 상수; kdeg = PD-1의 분해 속도; Ksyn = PD-1의 합성 속도; Lt = 종양 구획으로부터의 림프 흐름; L1 = 단단한 조직 구획으로부터의 림프 흐름; L2 = 누출 조직 구획으로부터의 림프 흐름; mAb = 펨브롤리주맙 농도; Qt = 종양 혈장 유속; RC = 펨브롤리주맙-PD-1 복합 농도; Rmax = 총 PD-1 농도; Vleaky = 누출된 혈관 구조가 있는 조직 구획의 부피; Vlymph = 림프 구획의 부피; Vp = 혈장 구획의 부피; Vtight = 혈관 구조가 단단한 조직 구획의 부피; Vtumor = 종양 구획의 부피; σtight = 단단한 조직의 혈관 반사 계수; σleaky = 누출 조직의 혈관 반사 계수; σLy = 림프 반사 계수.
도 4는 PD1-LAG3에 대한 mPBPK 모델에 추가적인 LAG3 수용체가 추가되었음을 보여주는 개략도이다.
도 5는 NP41300 연구의 용량 증량(파트 A1, Q2W) 부분에서 안전성 평가가능 환자의 이상 반응 개요를 보여주는 표이다.
도 6은 NP41300 연구의 용량 증량(파트 A1, Q2W) 부분에서 안전성 평가가능 환자의 이상 반응 개요를 보여주는 표이다.
도 7은 600mg 또는 1200mg의 용량의 PD1-LAG3을 Q2W(2주마다) 또는 Q3W(3주마다) 투여 요법으로 1차 및 3차 투여 후 예측된 Ctrough를 보여주는 일련의 상자 도표이다. 아래쪽 및 위쪽 힌지는 제1 사분위수와 제3 사분위수(25번째 및 75번째 백분위수)에 해당한다. 위쪽 수염은 위쪽 힌지로부터 위쪽 힌지로부터의 1.5 * IQR을 넘지 않는 가장 큰 값까지 확장된다(이 때 IQR은 사분위수 간 범위이거나 제1 사분위수와 제3 사분위수 사이의 거리이다). 아래쪽 수염은 아래쪽 힌지로부터 아래쪽 힌지의 최대 1.5 * IQR의 가장 작은 값까지 확장된다. 수염들 단부 너머의 데이터를 "바깥" 점이라고 하며 개별적으로 표시된다. 집단 약동학 모델(비선형 혼합 효과 모델링 접근법)을 사용하여 시뮬레이션을 수행했다. 각 투약 요법에 대해, 원래 분석 데이터 세트에서 부트스트랩된(대체 포함) 공변량 세트를 사용하여 500명의 개체를 시뮬레이션했다.
도 8은 3주기 후 Q3W로 투여된 RO7247669 용량 범위에 걸쳐 시뮬레이션된 PD1 및 LAG3 관여를 보여주는 그래프이다.
도 9는 흑색종 환자를 대상으로 한 BP43963 시험의 연구 설계를 보여주는 흐름도이다.
도 10은 GO42216 임상시험의 연구 설계를 보여주는 흐름도이다. CIT = 암 면역요법; HCC = 간세포 암종; R = 무작위 배정.
도 11은 GO42216 임상시험의 상세한 연구 설계를 보여주는 흐름도이다. Bev = 베바시주맙; HCC = 간세포 암종; Q2W = 2주마다; Q3W = 3주마다; R = 무작위 배정.
발명의 상세한 설명
본 발명은 암 치료를 위한 치료 방법 및 조성물을 제공한다. 이러한 조합 및/또는 투여 요법을 포함하는 조성물, 용도 및 키트도 본원에 제공된다.
I. 정의
본원에서는 다음 약어가 사용된다:
본원에 사용된 용어 "약"은 기술 분야의 숙련된 기술자에게 널리 공지된 바와 같이, 각각의 값에 대한 통상적인 오차 범위를 나타낸다. 본원의 값 또는 매개변수에 대한 "약"의 지칭은 그 값 또는 매개변수 그 자체(per se)에 관한 양상들을 포함 (및 설명)한다. 예를 들면, "약 X"를 지칭하는 기재는 "X"의 기재를 포함한다.
본원에 사용된 용어 "TIGIT" 또는 "Ig 및 ITIM 도메인을 갖는 T 세포 면역수용체"는, 달리 지시가 없는 한, 영장류 (예를 들어, 인간) 및 설치류 (예를 들어, 마우스 및 래트)와 같은 포유동물을 포함한 임의의 척추동물 출처의 임의의 천연 TIGIT를 의미한다. TIGIT는 DKFZp667A205, FLJ39873, V-세트 및 면역글로불린 도메인 함유 단백질 9, V-세트 및 막횡단 도메인 함유 단백질 3, VSIG9, VSTM3 및 WUCAM으로도 알려져 있다. 이 용어는 "전장", 처리되지 않은 TIGIT(예를 들어, 서열번호 20의 아미노산 서열을 갖는 전장 인간 TIGIT)뿐만 아니라 세포에서의 처리로 인해 생성되는 임의의 형태의 TIGIT(예를 들어, 신호 서열이 없고 서열번호 21의 아미노산 서열을 갖는 처리된 인간 TIGIT)를 포함한다. 이 용어는 또한 TIGIT의 자연 발생 변이체, 예를 들어, 스플라이스 변이체 또는 대립유전자 변이체를 포함한다. 예시적인 인간 TIGIT의 아미노산 서열은 UniProt 접근 번호 Q495A1에서 찾아볼 수 있다.
본원에 사용된 "티라골루맙"은 TIGIT에 결합하고 서열번호 23의 중쇄 서열 및 서열번호 24의 경쇄 서열을 포함하는 오픈 모노클로날 테크놀로지(OMT) 랫트에서 유래된 완전 인간 IgG1/카파 MAb이다. 티라골루맙은 Fc 도메인에 2개의 N-연결 당화 부위(N306)를 포함한다. 티라골루맙은 또한 2017년 7월 7일 출판된, WHO 약물 정보(의약품의 국제 일반명), 제시된 INN: List 117, Vol. 31, No. 2에 기재되어 있다(343페이지 참조).
"항-TIGIT 길항제 항체"라는 용어는 TIGIT의 생물학적 활성을 실질적으로 또는 완전히 억제할 정도로 충분한 친화도로 TIGIT에 결합할 수 있는 항체 또는 이의 항원-결합 단편 또는 변이체를 의미한다. 예를 들어, 항-TIGIT 길항제 항체는 항원 자극에 대한 T세포의 기능적 반응(예를 들어, 증식, 사이토카인 생성, 표적 세포 사멸)을 기능 장애 상태에서 회복시키기 위해 PVR, PVRL2 및/또는 PVRL3을 통한 신호를 차단할 수 있다. 예를 들어, 항-TIGIT 길항제 항체는 PVR-CD226 상호작용에 영향을 주지 않고 PVR을 통한 신호전달을 차단할 수 있다. 일부 예들에서 항-TIGIT 길항제 항체가 또 다른 TIGIT 활성에 영향을 주지 않으면서 하나의 TIGIT 활성을 길항할 수 있다는 것이 당업자에 의해 이해될 것이다. 예를 들어, 본원에 기재된 특정 방법 또는 용도에 사용하기 위한 항-TIGIT 길항제 항체는, 어떠한 다른 TIGIT 상호 작용에도 영향을 미치지 않거나 최소한으로 영향을 미치면서, PVR 상호작용, PVRL3 상호작용 또는 PVRL2 상호작용 중 하나에 반응하여 TIGIT 활성을 길항하는 항-TIGIT 길항제 항체이다. 한 양상에서, 관련없는, 비-TIGIT 단백질에 대한 항-TIGIT 길항제 항체의 결합 정도는, 예를 들면, 방사면역분석(RIA)으로 측정한 TIGIT에 대한 항체 결합의 약 10% 미만이다. 특정 양상들에서, TIGIT에 결합하는 항-TIGIT 길항제 항체는 ≤　1μM, ≤　100 nM, ≤　10 nM, ≤　1 nM, ≤　0.1 nM, ≤　0.01 nM, 또는 ≤　0.001 nM(예를 들어, 10-8 M 또는 그 미만, 예를 들어, 10-8 M 내지 10-13 M, 예를 들어, 10-9 M 내지 10-13 M)의 해리 상수(KD)를 갖는다. 특정 양상에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 상이한 종으로부터의 TIGIT 사이에 보존되는 TIGIT의 에피토프 또는 종간 반응성을 허용하는 TIGIT의 에피토프에 결합한다. 일부 양상에서, 항-TIGIT 결합 항체는 온전한 Fc-매개 효과기 기능을 갖는다(예를 들어, 티라골루맙, 비보스톨리맙, 에티길리맙, EOS084448 또는 TJ-T6). 일부 양상에서, 항-TIGIT 결합 항체는 향상된 Fc-매개 효과기 기능(예를 들어, SGN-TGT)을 갖는다. 다른 양상에서, 항-TIGIT 결합 항체에는 Fc-매개 효과기 기능이 결여되어 있다(예를 들어, 돔바날리맙, BMS-986207, ASP8374 또는 COM902). 일부 양상에서, 항-TIGIT 결합 항체는 IgG1 분류 항체(예를 들어, 티라골루맙, 비보스톨리맙, 돔바날리맙, BMS-986207, 에티길리맙, BGB-A1217, SGN-TGT, EOS084448(EOS-448), TJ-T6, 또는 AB308)이다. 다른 양상에서, 항-TIGIT 결합 항체는 IgG4 분류 항체(예를 들어, ASP8374 또는 COM902)이다. 한 양상에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 티라골루맙이다.
용어 "PD-1 축 결합 길항제"는 상기 PD-1 신개선달 축에서의 신개선달로 인한 T 세포 기능이상을 제거하기 위하여, PD-1 축 결합 짝과 이의 하나 또는 그 이상의 결합 짝과의 상호작용을 억제하는 분자를 지칭하며, 그 결과 T-세포 기능 (에를 들어, 증식, 사이토카인 생산, 및/또는 표적 세포 사멸)이 복원 또는 강화된다. 본원에서 이용되는 PD-1 축 결합 길항제는 PD-L1 결합 길항제, PD-1 결합 길항제 및 PD-L2 결합 길항제를 포함한다. 일부 예들에서서, PD-1 축 결합 길항제는 PD-L1 결합 길항제 또는 PD-1 결합 길항제를 포함한다. 한 바람직한 양상에서, PD-1 축 결합 길항제는 PD-L1 결합 길항제이다.
용어 "PD-L1 결합 길항제"는 PD-L1과 이의 하나 또는 그 이상의 결합 짝, 예를 들어, PD-1 및/또는 B7-1과의 상호작용으로 인한 신호전달을 감소, 차단, 억제, 소멸 또는 간섭하는 분자를 의미한다. 일부 예들에서, PD-L1 결합 길항제는 PD-L1이 이의 결합 짝에 결합하는 것을 억제하는 분자다. 특정 양상에서, 상기 PD-L1 결합 길항제는 PD-L1이 PD-1 및/또는 B7-1에 결합하는 것을 억제한다. 일부 예들에서, PD-L1 결합 길항제는 PD-L1의 이의 결합 짝 중 하나 이상, 예를 들어 PD-1 및/또는 B7-1과의 상호작용으로부터 발생하는 신호 전달을 감소시키거나, 차단하거나, 저해하거나, 제거하거나 또는 간섭하는 항-PD-L1 항체, 이들의 항원 결합 단편, 면역부착소, 융합 단백질, 올리고펩티드 및 기타 분자를 포함한다. 한 경우에서, PD-L1 결합 길항제는 PD-L1을 통하여 T 림프구 매개된 신호 전달에서 발현된 세포 표면 단백질에 의해 또는 이를 통하여 매개된 음성 공동 자극 신호를 감소시켜, 이상기능 T 세포의 기능이상을 더 적게 한다(예를 들어, 항원 인지에 대한 효과기 반응을 강화). 일부 예들에서, 상기 PD-L1 결합 길항제는 PD-1에 결합한다. 일부 예들에서, PD-L1 결합 길항제는 항-PD-L1 항체(예를 들어, 항-PD-L1 길항제 항체)이다. 예시적인 항-PD-L1 길항제 항체는 아테졸리주맙, MDX-1105, MEDI4736(더발루맙), MSB0010718C(아벨루맙), SHR-1316, CS1001, 엔바폴리맙, TQB2450, ZKAB001, LP-002, CX-072, IMC-001, KL-A167, APL-502, 코시벨리맙, 로다폴리맙, FAZ053, TG-1501, BGB-A333, BCD-135, AK-106, LDP, GR1405, HLX20, MSB2311, RC98, PDL-GEX, KD036, KY1003, YBL-007, 및 Hs-636을 포함한다. 일부 양상에서, 항-PD-L1 항체는 아테졸리주맙, MDX-1105, MEDI4736(더발루맙) 또는 MSB0010718C(아벨루맙)이다. 한 특정 양상에서, PD-L1 결합 길항제는 MDX-1105이다. 또 다른 특정 양상에서, PD-L1 결합 길항제는 MEDI4736(더발루맙)이다. 또 다른 특정 양상에서, PD-L1 결합 길항제는 MSB0010718C(아벨루맙)이다. 다른 양상에서, PD-L1 결합 길항제는 소분자, 예를 들어, GS-4224, INCB086550, MAX-10181, INCB090244, CA-170 또는 ABSK041일 수 있으며, 이는 일부 예들에서 경구 투여될 수 있다. 다른 예시적인 PD-L1 결합 길항제는 AVA-004, MT-6035, VXM10, LYN192, GB7003 및 JS-003을 포함한다. 바람직한 양상에서, 상기 PD-L1 결합 길항제는 아테졸리주맙이다.
용어 "PD-1 결합 길항제"는 PD-1과 이의 하나 또는 그 이상의 결합 짝, 이를 테면 PD-L1 및/또는 PD-L2와의 상호작용으로 인한 신호전달을 감소, 차단, 억제, 소멸 또는 간섭하는 분자를 의미한다. PD-1 (예정사 1)은 또한 당업계에서 "세포 예정사 1," "PDCD1," "CD279," 및 "SLEB2"로도 지칭된다. 예시적인 인간 PD-1은 UniProtKB/Swiss-Prot 접근 번호 Q15116에 나타나있다. 일부 예들에서, PD-1 결합 길항제는 PD-1이 이의 결합 짝에 결합하는 것을 억제하는 분자다. 특정 양상에서, 상기 PD-1 결합 길항제는 PD-1이 PD-L1 및/또는 PD-L2에 결합하는 것을 억제한다. 예를 들면, PD-1 결합 길항제들은 PD-1과 PD-L1 및/또는 PD-L2와의 상호작용으로 인하여 생성되는 신호 전달을 감소, 차단, 억제, 소멸 또는 간섭하는 항-PD-1 항체, 이의 항원 결합 단편들, 면역접합체, 융합 단백질, 올리고펩티드 및 기타 분자를 포함한다. 한 예에서, PD-1 결합 길항제는 PD-1을 통하여 T 림프구 매개된 신호생성에서 발현된 세포 표면 단백질에 의해 또는 이를 통하여 매개된 음성 공동-자극 신호를 감소시켜, 이상기능 T-세포의 기능이상을 더 적게 한다 (에를 들어, 항원 인지에 대한 효과기 반응을 강화). 일부 예들에서, 상기 PD-1 결합 길항제는 PD-1에 결합한다. 일부 예들에서, PD-1 결합 길항제는 항-PD-1 항체(예를 들어, 항-PD-1 길항제 항체)이다. 예시적인 항-PD-1 길항제 항체는 니볼루맙, 펨브롤리주맙, MEDI-0680, PDR001(스파르탈리주맙), REGN2810(세미플리맙), BGB-108, 프롤골리맙, 캄렐리주맙, 신틸리맙, 티스렐리주맙, 토리팔리맙, 도스타리맙, 레티판리맙, 사산리맙, 펜풀리맙, CS1003, HLX10, SCT-I10A, 짐베렐리맙, 발스틸리맙, 게놀림주맙, BI 754091, 세트렐리맙, YBL-006, BAT1306, HX008, 부디갈리맙, AMG 404, CX-188, JTX-4014, 609A, Sym021, LZM009, F520, SG001, AM0001, ENUM 244C8, ENUM 388D4, STI-1110, AK-103 및 hAb21을 포함한다. 특정 양상에서, PD-1 결합 길항제는 MDX-1106 (니볼루맙)이다. 또 다른 특정 양상에서, PD-1 결합 길항제는 MK-3475 (펨브롤리주맙)이다. 또 다른 특정 양상에서, PD-1 결합 길항제는 PD-L2 Fc 융합 단백질, 예를 들어, AMP-224이다. 또 다른 특정 양상에서, PD-1 결합 길항제는 MED1-0680이다. 또 다른 특정 양상에서, PD-1 결합 길항제는 PDR001(스파르탈리주맙)이다. 또 다른 특정 양상에서, PD-1 결합 길항제는 REGN2810(세미플리맙)이다. 또 다른 특정 양상에서, PD-1 결합 길항제는 BGB-108이다. 또 다른 특정 양상에서, PD-1 결합 길항제는 프롤골리맙이다. 또 다른 특정 양상에서, PD-1 결합 길항제는 캄렐리주맙이다. 또 다른 구체적인 양상에서, PD-1 결합 길항제는 신틸리맙이다. 또 다른 구체적인 양상에서, PD-1 결합 길항제는 티슬렐리주맙이다. 또 다른 구체적인 양상에서, PD-1 결합 길항제는 토리팔리맙이다. 다른 추가적인 예시적인 PD-1 결합 길항제는 BION-004, CB201, AUNP-012, ADG104 및 LBL-006을 포함한다.
용어 "PD-L2 결합 길항제"는 PD-2와 이의 하나 또는 그 이상의 결합 짝, 예를 들어, PD-1과의 상호작용으로 인하여 신호전달을 감소, 차단, 억제, 소멸 또는 간섭하는 분자를 의미한다. PD-L2 (예정사 리간드 2)는 또한 당업계에서 "세포 예정사 1 리간드 2," "PDCD1LG2," "CD273," "B7-DC," "Btdc," 및 "PDL2"로 지칭된다. 예시적인 인간 PD-L2는 UniProtKB/Swiss-Prot 접근 번호 Q9BQ51에 나타나있다. 일부 예들에서, PD-L2 결합 길항제는 PD-L2가 하나 또는 그 이상의 이의 결합 짝에 결합하는 것을 억제하는 분자다. 특정 양상에서, 상기 PD-L2 결합 길항제는 PD-L2가 PD-1에 결합하는 것을 억제한다. 예시적인 PD-L2 길항제들은 PD-L2와 하나 또는 그 이상의 이의 결합 짝, 이를 테면 PD-1과의 상호작용으로 인하여 생성되는 신호 전달을 감소, 차단, 억제, 소멸 또는 간섭하는 항-PD-L2 항체, 이의 항원 결합 단편들, 면역접합체, 융합 단백질, 올리고펩티드 및 기타 분자를 포함한다. 한 실시형태에서, PD-L2 결합 길항제는 PD-L2를 통하여 T 림프구 매개된 신호생성에서 발현된 세포 표면 단백질에 의해 또는 이를 통하여 매개된 음성 공동-자극 신호를 감소시켜, 이상기능 T-세포의 기능이상을 더 적게 한다(예를 들어, 항원 인지에 대한 효과기 반응을 강화). 일부 양상에서, PD-L2 결합 길항제는 PD-L2에 결합한다. 일부 양상들에 있어서, PD-L2 결합 길항제는 면역접합체이다. 다른 양상에서, PD-L2 결합 길항제는 항-PD-L2 길항제 항체이다.
용어 "예정사 리간드 1" 및 "PD-L1"은 본원에서 천연 서열 인간 PD-L1 폴리펩티드를 의미한다. 천연 서열 PD-L1 폴리펩티드는 Uniprot 접근 번호 Q9NZQ7로 제공된다. 예를 들어, 천연 서열 PD-L1은 Uniprot 접근 번호 Q9NZQ7-1(이소형 1)(서열번호 22)에 기재된 아미노산 서열을 가질 수 있다. 다른 예에서, 천연 서열 PD-L1은 Uniprot 접근 번호 Q9NZQ7-2(이소형 2)에 기재된 아미노산 서열을 가질 수 있다. 또 다른 예에서, 천연 서열 PD-L1은 Uniprot 접근 번호 Q9NZQ7-3(이소형 3)에 기재된 아미노산 서열을 가질 수 있다. PD-L1은 또한 당업계에서 "세포 예정사 1 리간드 1," "PDCD1LG1," "CD274," "B7-H," 및 "PDL1"로 지칭된다.
Kabat 넘버링 체계는 일반적으로 가변 도메인의 잔기(경쇄의 대략 잔기 1-107과 중쇄의 잔기 1-113) 를 나타낼 때 사용된다(가령, Kabat 외, Sequences of Immunological Interest. 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1991)). "EU 넘버링 체계" 또는 "EU 인덱스"은 면역글로불린 중쇄 불변 영역에서 잔기를 지칭할 때 일반적으로 사용된다(예컨데, 상기 Kabat 외의 문헌에서 보고된 EU 인덱스). "Kabat에서와 같은 EU 인덱스"는 인간 IgG1 EU 항체의 잔기 넘버링을 나타낸다.
본원의 목적을 위해, "아테졸리주맙"은 PD-L1에 결합하는 Fc 조작, 인간화, 비당화 IgG1 카파 면역글로불린이고, 서열번호 62의 중쇄 서열 및 서열번호 63의 경쇄 서열을 포함한다. 아테졸리주맙은 Fc 영역 아미노산 잔기의 EU 넘버링을 사용하여 중쇄(N297A)의 위치 297에서 단일 아미노산 치환(아스파라긴에서 알라닌으로)을 포함하며, 이는 Fc 수용체에 대한 최소 결합을 갖는 비당화된 항체를 발생시킨다. 아테졸리주맙은 또한 WHO 약물 정보(제약 물질에 대한 국제 일반명칭), 추천 INN: 2015년 1월 16일 발행된 List. 112, Vol. 28, No. 4에 기재되어 있다(485페이지 참조).
용어 "암"은 신체의 일부에서 비정상 세포의 통제되지 않은 분열로 인해 발생하는 질환을 의미한다. 한 예에서, 암은 피부암(예를 들어, 흑색종, 기저 세포 암종(BCC), 편평 세포 암종, 피부 T 세포 림프종, 피부 섬유 육종(DFSP), 메르켈 세포 암종 또는 피지 암종)이다. 또 다른 예들에서, 암은 간암(예를 들어, 간세포 암종(HCC), 예를 들어, 국소 진행성 또는 전이성 HCC 및/또는 절제불가능 HCC)이다. 암에는 고형 종양암, 비고형 종양 암, 그리고 국소 진행성 또는 전이성 암(예를 들어, 국소 진행성 또는 전이성 종양)이 포함된다. 암의 예는, 비제한적으로, 암종, 림프종, 모세포종, 육종, 및 백혈병 또는 림프성 악성종양을 포함한다. 이러한 암의 보다 특정한 예는 국소 진행성 및 전이성 UC(mUC)를 포함하는 요로상피암종(UC), 방광암(예를 들어, 근육 침습성 방광암(MIBC) 및 비근육 침습성 방광암(NMIBC)), 예를 들어 BCG-불응성 NMIBC), MIBC 요로상피 방광암(UBC); 신장 또는 신장암(예를 들어, 신장 세포 암종(RCC)); 요로암; 폐암, 예를 들어, 광범위 단계 SCLC(ES-SCLC)를 포함하는 소세포 폐암(SCLC); 편평 NSCLC 또는 비편평 NSCLC를 포함하는 비소세포폐암(NSCLC)(국소 진행성 절제불가능 NSCLC(예를 들어, IIIB기 NSCLC), 또는 재발성 또는 전이성 NSCLC(예를 들어, IV기 NSCLC), 폐 선암종 또는 편평 세포암(예를 들어, 상피 편평 세포암(예를 들어, 폐의 편평 세포 암종) 포함); 췌장암(예를 들어, 췌관 선암종(PDAC), 예를 들어, 전이성 PDAC)); 두경부암(예를 들어, SCCHN, 예를 들어 재발성/전이성 PD-L1 양성 SCCHN, 및 두경부 편평 세포암(HNSCC)); 난소암(OC), 식도암, 복막암, 간세포암, 위장관 암(GC)(예를 들어, 위식도접합부(GEJ) 암) 또는 위암(위장관 암 및 위장관 간질암 포함), 교모세포종; 요로암; 간종양; 유방암(예를 들어, HER2+ 유방암 및 삼중 음성 유방암(에스트로겐 수용체(ER-), 프로게스테론 수용체(PgR-) 및 HER2(HER2-) 음성인 TNBC(예를 들어, 초기 TNBC(eTNBC))); 전립선암, 예를 들어, 거세 내성 전립선암(CRPC); 복막암; 간세포암; 위장관 암 또는 위암(위장관 암 및 위장관 간질암 포함); 췌장암(예를 들어, 췌관선암종(PDAC)); 교모세포종; 자궁경부암(예를 들어, IVB기, 전이성, 재발성, 또는 지속성 자궁경부암, 예를 들어, 전이성 및/또는 재발성 PD-L1-양성 자궁경부 암종); 난소 암; 간종양; 대장 암; 직장암; 결장직장암(CRC; 예를 들어, 미세부수체-안정성(MSS) 및 미세부수체 불안정성(MSI)이 낮은(MSI-저) CRC); 자궁내막 또는 자궁 암종; 타액선 암종; 전립선암; 외음부암; 갑상선 암; 간암종; 항문 암종; 음경 암종; 흑색종(표면 확산 흑색종, 악성 흑색종, 말단 흑자성 흑색종, 및 결절성 흑색종을 포함); 다발성 골수종 및 B세포 림프종(저 등급/여포성 비호지킨 림프종(NHL) 포함); 소림프구(SL) NHL; 중간 등급/소포성 NHL; 중간 등급 미만성 NHL; 고 등급 면역아세포성 NHL; 고 등급 림프구성 NHL; 고 등급 소형 비절단 세포 NHL; 거대 종양 NHL; 맨틀 세포 림프종; AIDS 관련 림프종; 및 발덴스트롬 마크로글로불린혈증); 만성 림프구성 백혈병(CLL); 급성 림프구성 백혈병(ALL); 급성 골수성 백혈병(AML); 털세포 백혈병; 만성 골수성 백혈병(CML); 이식후 림프증식성 장애(PTLD); 및 골수이형성 증후군(MDS), 뿐만 아니라 파코마토시스와 관련된 비정상적인 혈관 증식, 부종(예를 들어, 뇌종양과 관련된 부종), 메이그스 증후군, 뇌암, 두경부암 및 관련 전이를 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.
일부 예들에서, 암(예를 들어, 피부암(예를 들어, 흑색종) 또는 간암(예를 들어, HCC))은 LAG3-발현 CD8+ T 세포를 포함하는 종양 미세환경을 갖는 종양이다.
일부 예들에서, 암은 절제불가능일 수 있다(예를 들어, 절제불가능 국소 진행성 또는 전이성 암).
암의 추가적인 예는, 비제한적으로, 암종, 림프종, 모세포종, 육종, 및 백혈병 또는 림프성 악성종양을 포함한다. 암의 보다 구체적인 예는 식도암(예를 들어, 편평 세포 암종(예를 들어, 식도 편평 세포 암종(ESCC)), 선암종(예를 들어, 식도 선암종(EAC)), 또는 신경내분비 조직병리학을 갖는 식도암(예를 들어, 식도 신경내분비 암종(ENEC))을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다. 추가적인 예로는 전이성 식도암(예를 들어, 전이성 ESCC, 전이성 EAC 또는 전이성 ENEC)이 있다. 한 예에서, 암은 결장직장암(CRC)이다. 본원에 사용된 용어 "결장직장암", "CRC", "결장암" 또는 "장(bowl) 암"은 대장, 예를 들어, 결장 또는 직장에서 발생하는 암(예를 들어 결장직장 선종암종)을 의미한다. 암의 다른 예는 호지킨 림프종을 제외한 혈액암, 예를 들어, 성숙 B 세포 암을 포함하나(이에 제한되는 것은 아님), 비호지킨 림프종(NHL), 예를 들어, 재발성 또는 불응성 DLBCL 또는 리히터 형질전환일 수 있는 미만성 거대 B 세포 림프종(DLBCL)은 포함한다. 암의 구체적인 다른 예에는 또한 생식 중심 B 세포 유사(GCB) 미만성 거대 B 세포 림프종(DLBCL), 활성화된 B 세포 유사(ABC) DLBCL, 여포성 림프종(FL), 변형된 FL, 맨틀 세포 림프종(MCL), 급성 골수성 백혈병(AML), 만성 림프구양 백혈병(CLL), 변연부 림프종(MZL), 변형된 MZL, 고급 B 세포 림프종, 원발성 종격동(흉선) 거대 B 세포 림프종(PMLBCL), 소림프구성 백혈병(SLL), 림프형질구성 림프종(LL), 변형된 LL, 발덴스트롬 마크로글로불린혈증(WM), 중추신경계 림프종(CNSL), 버킷 림프종(BL), B 세포 전림프구성 백혈병, 비장 변연부 림프종, 털 세포 백혈병, 비장 림프종/백혈병, 비분류, 비장 미만성 적색 수질 소형 B 세포 림프종, 털 세포 백혈병 변이체, 중쇄 질환, α 중쇄 질환, γ 중쇄 질환, μ 중쇄 질환, 형질 세포 골수종, 뼈의 고립성 형질세포종, 골외 형질세포종, 점막 관련 림프 조직의 결절외 변연부 림프종(MALT 림프종), 결절 변연부 림프종, 소아 결절 변연부 림프종, 소아 여포성 림프종, 원발성 피부 여포 림프종, T 세포/조직구가 풍부한 B형 대세포 림프종, CNS의 원발성 DLBCL, 원발성 피부 DLBCL, 다리 유형, 노인의 EBV-양성 DLBCL, 만성 염증과 관련된 DLBCL, 림프종양 육아종증, 혈관내 B형 대세포 림프종, ALK 양성 B형 대세포 림프종, 형질모세포성 림프종, HHV8 관련 다발성 캐슬만병에서 발생하는 B형 대세포 림프종, 원발성 삼출성 림프종: DLBCL과 버킷 림프종 사이의 중간 특성을 갖는 분류 불가능한 B 세포 림프종, 및 DLBCL과 고전적 호지킨 림프종 사이의 중간 특성을 갖는 분류 불가능한 B 세포 림프종이 포함된다. 추가적인 암의 예는, 비제한적으로, 암종, 림프종, 모세포종, 육종, 및 백혈병 또는 B 세포 림프종을 비롯한 림프구양 악성종양을 포함한다. 이러한 암의 보다 구체적인 예는 다발성 골수종(MM); 저 등급/여포성 NHL; 소형 림프구성(SL) NHL; 중간 등급/여포성 NHL; 중간 등급 미만성 NHL; 고 등급 면역모세포성 NHL; 고 등급 림프구성 NHL; 고 등급 소형 비절개 세포 NHL; 거대 종양 NHL(bulky disease NHL); AIDS 관련 림프종; 및 급성 림프구성 백혈병(ALL); 만성 골수성 백혈병; 및 이식후 림프증식성 장애(PTLD)가 포함되나 이에 제한되는 것은 아니다.
용어 "B 세포 증식성 장애" 또는 "B 세포 악성종양"은 어느 정도의 비정상적인 B 세포 증식과 관련된 장애를 말하며, 예를 들어, 림프종, 백혈병, 골수종 및 골수이형성 증후군을 포함한다. 일부 예들에서, B 세포 증식성 장애는 림프종, 예를 들어, 여포성 림프종(FL)(예를 들어, 재발성 및/또는 불응성 FL 또는 형질전환 FL)을 포함하는 비호지킨 림프종(NHL), 미만성 대형 B 세포 림프종(DLBCL)(예를 들어, 재발성 또는 불응성 DLBCL 또는 리히터 형질전환), MCL, 고 등급 B 세포 림프종 또는 PMLBCL이다. 또 다른 실시형태에서, B 세포 증식성 장애는 만성 림프구성 백혈병(CLL)과 같은 백혈병이다. 한 실시양태에서, B 세포 증식성 장애는 재발성 및/또는 불응성 FL이다.
용어 "종양"은, 악성 또는 양성이든, 모든 신생물성 세포 성장 및 증식, 그리고 모든 전-암성 및 암성 세포 및 조직을 의미한다. 용어 "암", "암성", "세포 증식성 질환", "증식성 질환" 및 "종양"은 본원에서 이용된 바와 같이, 상호 배타적이지 않다.
본원에 사용된 "종양 세포"는 종양 또는 이의 샘플에 존재하는 임의의 종양 세포를 의미한다. 종양 세포는 당업계에 공지되고 및/또는 본원에 기재된 방법들을 사용하여 종양 샘플에 존재할 수있는 다른 세포, 예를 들어, 간질 세포 및 종양-침윤 면역 세포와 구분 될 수 있다.
"종양 면역성"은 종양이 면역 인식 및 제거를 회피하는 과정을 의미한다. 따라서 치료 개념으로서 종양 면역성은 이러한 회피가 약화되고 이러한 종양이 면역계에 의해 인식되고 공격받을 때 "치료"된다. 종양 인식의 예로는 종양 결합, 종양 수축 및 종양 제거가 포함된다.
본원에서 사용된 "전이"는 암이 원발 부위에서 신체의 다른 부위로 확산되는 것을 의미한다. 암세포는 원발성 종양에서 떨어져 나와 림프관과 혈관으로 침투하고 혈류를 통해 순환하며 신체의 다른 곳의 정상 조직에서 멀리 떨어진 지점에서 성장(전이)할 수 있다. 전이는 국소적일 수도 있고 멀리 떨어져 있을 수도 있다. 전이는 원발 종양에서 떨어져 나온 종양 세포가 혈류를 통해 이동하고 먼 부위에서 멈추는 순차적 과정이다. 새로운 부위에서 세포는 혈액 공급을 확립하고 성장하여 생명을 위협하는 덩어리를 형성할 수 있습. 종양 세포 내의 자극 및 억제 분자 경로는 모두 이러한 행동을 조절하며, 종양 세포와 먼 부위의 숙주 세포 사이의 상호 작용도 중요하다.
본원에 사용된 "치료하는 것"은 유효량의 치료제(예를 들어, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체)를 사용한 효과적인 암 치료를 포함한다. 본원에서의 치료에는, 특히, 보조 요법, 신보조 요법, 비전이성 암 요법(예를 들어, 국소 진행성 암 요법) 및 전이성 암 요법이 포함된다. 치료는 1차 치료(예를 들어, 환자가 이전에 치료를 받지 않았거나 선행 전신 요법을 받지 않았을 수 있음), 또는 2차 또는 그 이후의 치료일 수 있다.
본원에서, "유효량"은 치료 결과를 달성하는 치료제(예를 들어, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체 또는 치료제들의 복합제(예를 들어, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체 및 항-TIGIT 길항제 항체, 티라골루맙 또는 VEGF 길항제, 예를 들어 항-VEGF 항체(예를 들어, 베바시주맙))의 양을 의미한다. 일부 예에서, 치료제 또는 치료제들의 복합제의 유효량은 개선된 병리학적 반응률(PRR), 개선된 전체 반응률(ORR), 개선된 질환 통제율(DCR), 완전 반응(CR), 병리학적 완전 반응(pCR), 부분 반응(PR), 개선된 생존율(예를 들어, 무질환 생존(DFS) 및/또는 무진행 생존(PFS) 및/또는 전체 생존(OS)) 및/또는 개선된 반응 기간(DOR)의 임상적 평가변수를 달성하는 상기 제제 또는 제제들의 복합제의 양이다.
본원에서 사용되는 "완전 반응" 및 "CR"은 모든 표적 병변들이 사라짐을 의미한다.
본원에서 사용되는 "부분 반응" 및 "PR"은 치료 전 기준선 SLD를 참조로 하여 표적 병변들의 최장 직경들의 합(SLD)이 적어도 30% 감소한 것을 의미한다.
본원에서 사용된 "진행성 질환" 및 "PD"는 기준선을 포함하여 연구에서 가장 작은 합계(최저점)를 참조로 하여 표적 병변들의 SLD가 적어도 20% 증가한 것을 의미한다. 하나 이상의 새로운 병변이 나타나는 것도 PD로 간주 될 수 있다.
본원에서 사용된 "안정한 질환" 및 "SD"는 최소 합을 참조로 하여, PR로 판정하기에 충분한 수축도 아니고, PD로 판정하기에 충분한 증가도 아닌 것을 의미한다.
본원에 사용된 "질환 통제율" 및 "DCR"은 CR, PR 및 안정한 질환(SD)을 달성한 진행성 또는 전이성 암 환자의 백분율을 의미한다. 예를 들어, DCR은 RECIST v1.1에 따라 조사자가 결정한 대로 ≥12주 동안 SD를 보인 또는 CR 또는 PR을 보인 환자의 비율로 정의될 수 있다.
본원에 사용된 "전체 반응률", "객관적 반응률" 및 "ORR"은 호환적으로 CR 비율과 PR 비율의 합을 의미한다. 예를 들어, 객관적 반응률은 조사자 평가에 의해 결정되고 초기 기록 후 ≥4주의 반복 평가에 의해 검증된 고형 종양 반응 평가 기준(RECIST) v.1.1에 따른 CR 또는 PR로 정의될 수 있다. 또 다른 예에서, ORR은 RECIST v1.1에 따라 조사자가 결정한, ≥4주 간격으로 두 번의 연속 측정시 CR 또는 PR을 보인 환자들의 비율로 정의될 수 있다.
본원에 사용된 "병리학적 반응률" 및 "pRR"은, 예를 들어 수술 시, 병리학적 완전 반응(pCR, 예를 들어 치료된 종양층에서 생존 가능한 종양의 완전한 부재), 완전에 가까운 병리학적 반응(pnCR, 예를 들어, 상기 치료된 종양 층의 <10%가 생존 가능한 종양 세포에 의해 점유됨), 및 병리학적 부분 반응(pPR, 예를 들어, 치료된 종양 층의 <50%가 생존 종양 세포에 의해 점유됨)이 있는 환자들의 비율을 호환적으로 의미한다.
본원에 사용된 "무진행 생존" 및 "PFS"는 치료중인 질환 (예를 들어, 암)이 더 악화되지 않는 치료 중 및 치료 후 시간의 길이를 의미한다. PFS에는 환자가 CR 또는 PR을 경험한 시간의 양, 및 환자가 안정한 질환을 경험한 시간의 양이 포함될 수 있다. 예를 들어, PFS는 첫 번째 연구 치료 시점부터 RECIST v.1.1에 따라 조사자가 결정한 진행의 처음 발생 또는 임의의 원인으로 인한 사망(어느 것이든 먼저 발생하는 것)까지의 시간으로 정의될 수 있다. 또 다른 예에서, PFS는 연구 등록 시점부터 RECIST v.1.1에 따라 조사자가 결정한 진행의 처음 발생 또는 임의의 원인으로 인한 사망(어느 것이든 먼저 발생하는 것)까지의 시간으로 정의될 수 있다.
본원에 사용된 "전체 생존" 및 "OS"는 질환(예를 들어, 암)에 대한 진단 일자 또는 치료 시작 일자로부터 환자가 여전히 생존하는 시간의 길이를 의미한다. 예를 들어, OS는 첫 번째 연구 치료 시점부터 임의의 원인으로 인한 사망까지의 시간으로 정의될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "반응 기간" 및 "DOR"은 종양 반응의 문서화 시점부터 질환 진행 또는 임의의 원인으로 인한 사망(어느 것이든 먼저 발생하는 것)까지의 시간의 길이를 의미한다. 예를 들어, DOR은 RECIST v1.1에 따라 조사자가 결정한 문서화된 객관적인 반응의 처음 발생 시점부터 처음 문서화된 질환 진행 또는 임의의 원인으로 인한 사망(어느 것이든 먼저 발생하는 것)까지의 시간으로 정의될 수 있다.
본원에서 사용된 용어 "화학요법제"는 암 치료에 유용한 화합물을 의미한다. 화학요법제의 예는 EGFR 억제제(소분자 억제제(예를 들어, 에를로티닙(TARCEVA®, Genentech/OSI Pharm.); PD 183805(CI 1033, 2-프로펜아미드, N-[4-[(3-클로로-4- 플루오로페닐)아미노]-7-[3-(4-모르폴리닐)프로폭시]-6-퀴나졸리닐]-, 디하이드로클로라이드, Pfizer Inc.); ZD1839, 게피티닙(IRESSA®) 4-(3'-클로로-4'-플루오로아닐리노)-7-메톡시-6-(3-모폴리노프로폭시)퀴나졸린, AstraZeneca); ZM 105180((6-아미노-4-(3-메틸페닐-아미노)-퀴나졸린, Zeneca); BIBX-1382(N8-(3- 클로로-4-플루오로-페닐)-N2-(1-메틸-피페리딘-4-일)-피리미도[5,4-d]피리미딘-2,8-디아민, Boehringer Ingelheim), PKI-166((R) -4-[4-[(1-페닐에틸)아미노]-1H-피롤로[2,3-d]피리미딘-6-일]-페놀); (R)-6-(4-하이드록시페닐)-4-[(1-페닐에틸)아미노]-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘); CL-387785(N-[4-[(3-브로모페닐)아미노]-6-퀴나졸리닐]-2-부틴아미드), EKB -569 (N-[4-[(3-클로로-4-플루오로페닐)아미노]-3-시아노-7-에톡시-6-퀴놀리닐]-4-(디메틸아미노)-2-부텐아미드) (Wyeth); AG1478 (Pfizer), AG1571(SU 5271; Pfizer); 및 이중 EGFR/HER2 티로신 키나제 억제제, 예를 들어, 라파티닙(TYKERB®, GSK572016 또는 N-[3-클로로-4-[(3 플루오로페닐)메톡시]페닐]-6[5[[[2메틸술포닐)에틸]아미노]메틸]-2-푸라닐]-4-퀴나졸린아민)); 티로신 키나제 억제제(예를 들어, EGFR 억제제; TAK165(Takeda)와 같은 소분자 HER2 티로신 키나제 억제제; CP-724,714, ErbB2 수용체 티로신 키나제의 경구 선택적 억제제(Pfizer 및 OSI); 이중 HER 억제제, 예를 들어, EGFR에 우선적으로 결합하지만 HER2 및 EGFR 과발현 세포 모두를 억제하는 EKB-569(Wyeth에서 입수 가능); PKI-166(Novartis); 카네티니브(CI-1033; Pharmacia)와 같은 범-HER 억제제; Raf-1 억제제, 예를 들어, Raf-1 신개선달을 억제하는 안티센스제 ISIS-5132(ISIS Pharmaceuticals); 비-HER-표적화 티로신 키나제 억제제, 예를 들어, 이마티닙 메실레이트(GLEEVEC®, Glaxo SmithKline); 다중 표적화 티로신 키나아제 억제제, 예를 들어, 수니티닙(SUTENT®, Pfizer); VEGF 수용체 티로신 키나제 억제제, 예를 들어, 바탈라닙(PTK787/ZK222584, Novartis/Schering AG); MAPK 세포외 조절 키나아제 I 억제제 CI-1040(Pharmacia); 퀴나졸린, 예를 들어, PD 153035,4-(3-클로로아닐리노) 퀴나졸린; 피리도피리미딘; 피리미도피리미딘; 피롤로피리미딘, 예를 들어, CGP 59326, CGP 60261 및 CGP 62706; 피라졸로피리미딘, 4-(페닐아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘; 커큐민(디페룰로일 메탄, 4,5-비스(4-플루오로아닐리노)프탈이미드); 니트로티오펜 모이어티를 함유하는 티르포스틴; PD-0183805(Warner-Lamber); 안티센스 분자(예를 들어, HER-인코딩 핵산에 결합하는 분자); 퀴녹살린(미국 특허 번호 5,804,396); 트리포스틴(미국 특허 번호 5,804,396); ZD6474(Astra Zeneca); PTK-787(Novartis/Schering AG); CI-1033(Pfizer)과 같은 범-HER 억제제; 아피니탁(ISIS 3521; Isis/Lilly); PKI 166(Novartis); GW2016(Glaxo SmithKline); CI-1033(Pfizer); EKB-569(Wyeth); 세막시닙(Pfizer); ZD6474(AstraZeneca); PTK-787(Novartis/Schering AG); INC-1C11(Imclone); 및 라파마이신(시롤리무스, RAPAMUNE®)); 보르테조밉(VELCADE®, Millennium Pharm.)과 같은 프로테아좀 억제제; 디설피람; 에피갈로카테킨 갈레이트; 살리노스포라미드 A; 카르필조밉; 17-AAG(겔다나마이신); 라디시콜; 젖산 탈수소효소 A(LDH-A); 풀베스트란트(FASLODEX®, AstraZeneca); 레트로졸(FEMARA®, Novartis), 피나수네이트(VATALANIB®, Novartis); 옥살리플라틴(ELOXATIN®, Sanofi); 5-FU(5-플루오로우라실); 류코보린; 로나파밉(SCH 66336); 소라페닙(NEXAVAR®, Bayer Labs); AG1478, 알킬화제, 예를 들어, 티오테파 및 CYTOXAN® 사이클로포스파미드; 알킬 설포네이트, 예를 들어, 부설판, 임프로설판 및 피포설판; 아지리딘, 예를 들어, 벤조도파, 카르보쿠온, 메투레도파 및 우레도파; 알트레타민, 트리에틸렌멜라민, 트리에틸렌포스포르아미드, 트리에틸렌티오포스포르아미드 및 트리메틸로멜라민을 포함하는 에틸렌이민 및 메틸아멜라민; 아세토제닌(특히 불라타신 및 불라타시논); 캄프토테신(토포테칸 및 이리노테칸 포함); 브리오스타틴; 칼리스타틴; CC-1065(아도젤레신, 카젤레신 및 비젤레신 합성 유사체 포함); 크립토피신(특히 크립토피신 1 및 크립토피신 8); 부신피질호르몬(프레드니손 및 프레드니솔론 포함); 사이프로테론 아세테이트; 피나스테리드 및 두타스테리드를 포함하는 5α-환원효소); 보리노스타트, 로미뎁신, 파노비노스타트, 발프로산, 모세티노스타트 돌라스타틴; 알데스류킨, 탈크 듀오카르마이신(합성 유사체, KW-2189 및 CB1-TM1 포함); 엘류테로빈; 판크라티스타틴; 사르코딕틴; 스폰기스타틴; 질소 머스타드, 예를 들어, 클로람부실, 클로마파진, 클로로포스파미드, 에스트라무스틴, 이포스파미드, 메클로레타민, 메클로레타민 옥사이드 하이드로클로라이드, 멜팔란, 노벰비친, 페네스테린, 프레드니무스틴, 트로포스파미드, 우라실 머스타드; 니트로소우레아, 예를 들어, 카르무스틴, 클로로조토신, 포테무스틴, 로무스틴, 니무스틴 및 라니무스틴; 항생제, 예를 들어, 엔다이인 항생제(예를 들어, 칼리케아미신, 특히 칼리케아미신 γ1 및 칼리케아미신 ω다이네미신 A를 포함하는 다이네미신; 클로드로네이트와 같은 비스포스포네이트; 에스페라마이신; 뿐만 아니라 네오카르지노스타틴 발색단 및 관련 발색단백 엔다이인 항생제 발색단), 아클라시노마이신, 악티노마이신, 아우트라마이신, 아자세린, 칵티노마이신, 카라비신, 카미노마이신, 카르지노필린, 크로모마이신, 닥티노마이신, 데토루비신, 6-디아조-5-옥소-L-노르류신, 모르폴리노-독소루비신, 시아노모르폴리노-독소루비신, 2-피롤리노-독소루비신 및 데옥시독소루비신), 에피루비신, 에소루비신, 이다루비신, 마르셀로마이신, 미토마이신 C와 같은 미토마이신, 미코페놀산, 노갈라마이신, 올리보마이신, 페플로마이신, 포르피로마이신, 푸로마이신, 쿠엘라마이신, 로도루비신, 스트렙토니그린, 스트렙토조신, 투베르시딘, 유베니멕스, 지노스타틴, 조루비신; 메토트렉세이트 및 5-플루오로우라실(5-FU)과 같은 항대사물질; 엽산 유사체, 예를 들어, 데놉테린, 메토트렉세이트, 프테롭테린, 트리메트렉세이트; 퓨린 유사체, 예를 들어, 플루다라빈, 6-머캅토퓨린, 티아미프린, 티오구아닌; 피리미딘 유사체, 예를 들어, 안시타빈, 아자시티딘, 6-아자우리딘, 카모푸르, 시타라빈, 디데옥시우리딘, 독시플루리딘, 에노시타빈, 플록수리딘; 안드로겐, 예를 들어, 칼루스테론, 드로모스타놀론 프로피오네이트, 에피티오스타놀, 메피티오스탄, 테스토락톤; 항부신제, 예를 들어, 아미노글루테티미드, 미토탄, 트리로스탄; 프롤린산 등의 엽산 보충제; 아세글라톤; 알도포스파미드 배당체; 아미노레불린산; 에닐루라실; 암사크린; 베스트라부실; 비산트렌; 에다트락세이트; 데포파민; 데메콜신; 디아지쿠온; 엘포미틴; 엘립티늄 아세테이트; 에포틸론; 에토글루시드; 갈륨 니트레이트; 하이드록시우레아; 렌티난; 로니다이닌; 메이탄신 및 안사미토신과 같은 메이탄시노이드; 미토구아존; 미톡산트론; 모피담놀; 니트라에린; 펜토스타틴; 페나메트; 피라루비신; 로속산트론; 포도필린산; 2-에틸하이드라지드; 프로카르바진; PSK® 다당류 복합체(JHS Natural Products); 라족산; 리족신; 시조푸란; 스피로게르마늄; 테누아존산; 트리아지쿠온; 2,2',2''-트리클로로트리에틸아민; 트리코테센(특히 T-2 독소, 베라쿠린 A, 로리딘 A 및 안귀딘); 우레탄; 빈데신; 다카르바진; 만노무스틴; 미토브로니톨; 미토락톨; 피포브로만; 가시토신; 아라비노사이드("Ara-C"); 사이클로포스파미드; 티오테파; 클로람부실; GEMZAR®(젬시타빈); 6-티오구아닌; 메르캅토퓨린; 메토트렉세이트; 에토포사이드(VP-16); 이포스파마이드; 미톡산트론; 노반트론; 테니포시드; 에다트렉세이트; 다우노마이신; 아미노프테린; 카페시타빈(XELODA®); 이반드로네이트; CPT-11; 토포이소머라제 억제제 RFS 2000; 디플루오로메틸오르니틴(DMFO); 레티노산과 같은 레티노이드; 및 상기 어느 하나의 약학적으로 허용되는 염, 산, 전구약물 및 유도체를 포함한다.
화학치료제는 또한 (i) 종양에 대한 호르몬 작용을 조절 또는 억제하는 작용을 하는 항-호르몬제, 예를 들어, 예를 들면, 타목시펜 (NOLVADEX®; 타목시펜 시트레이트 포함), 랄록시펜, 드롤록시펜, 아이오독시펜, 4-하이드록시타목시펜, 트라이옥시펜, 케옥시펜, LY117018, 오나프리스톤, 및 FARESTON® (토레미핀 시트레이트)를 비롯한 항-에스트로겐 및 선택적 에스트로겐 수용체 조절제 (SERMs); (ii) 부신에서의 에스트로겐 생성을 조절하는 효소 아로마타제를 억제하는 아로마타제 억제제, 예를 들어, 예를 들면, 4(5)-이미다졸, 아미노글루테티미드, MEGASE® (메게스트롤 아세테이트), AROMASIN® (엑세메스테인; Pfizer), 포르메스타니에, 파드로졸, RIVISOR® (보로졸), FEMARA® (레트로졸; Novartis), 및 ARIMIDEX® (아나스트로졸; AstraZeneca); (iii) 항-안드로겐, 예를 들어, 플루타미드, 닐루타미드, 바이칼루타미드, 류프롤리드 및 고세렐린; 부세렐린, 트립테렐린, 메드록시프로게스테론 아세테이트, 다이에틸스틸베스트롤, 프레마린, 플루옥시메스테론, 모든 트랜스레티오닉 애시드, 펜레티니드, 뿐만 아니라 트록사시타빈 (1,3-다이옥솔레인 뉴클레오시드 시토신 유사체); (iv) 단백질 키나아제 억제제; (v) 지질 키나아제 억제제; (vi) 안티센스 올리고뉴클레오타이드, 특히, 이상 세포 증식에 관여하는 신개선달 경로의 유전자, 예를 들어, 예를 들면, PKC-알파, Ralf 및 H-Ras의 발현을 억제하는 것들; (vii) 리보자임, 예를 들어, VEGF 발현 억제제 (예를 들어, ANGIOZYME®) 및 HER2 발현 억제제; (viii) 백신, 예를 들어, 유전자 치료 백신, 예를 들면, ALLOVECTIN®, LEUVECTIN®, 및 VAXID®; PROLEUKIN (ix) 빈카스(예를 들어, 빈크리스틴 및 빈블라스틴), NAVELBINE®(비노렐빈), 탁산(예를 들어, 파클리탁셀, nab-파클리탁셀 및 도세탁셀), 토포이소머라제 II 억제제(예를 들어, 독소루비신, 에피루비신, 다우노루비신, 에토포시드, 및 블레오마이신), 및 DNA 알킬화제(예를 들어, 타목시겐, 프레드니손, 다카르바진, 메클로레타민, 시스플라틴, 메토트렉세이트, 5-플루오로우라실 및 ara-C)를 포함하는 성장 억제제; 및 (x) 상기 어느 하나의 약학적으로 허용되는 염, 산, 전구약물, 및 유도체를 포함한다.
본원에서 사용되는 용어 "세포독성제"는 세포에 해로운(예를 들어, 세포 사멸을 유발하거나, 증식을 억제하거나, 그렇지 않으면 세포 기능을 방해함) 임의의 제제를 의미한다. 세포독성제들은 방사능 동위원소 (예를 들어, At211, I131, I125, Y90, Re186, Re188, Sm153, Bi212, P32, Pb212 및 Lu의 방사능 동위원소); 화학요법제; 효소 및 이의 단편들, 예를 들어, 핵산분해 효소; 및 독소, 예를 들어, 세균, 곰팡이, 식물 또는 동물 기원의 소분자 독소 또는 효소적 활성 독소, 및 이의 단편들 및/또는 변이체를 포함하나, 이에 제한되는 것은 아니다. 예시적인 세포독성제는 항-미세소관제, 백금 배위 착물, 알킬화제, 항생제, 토포이소머라제 II 억제제, 항대사제, 토포이소머라제 I 억제제, 호르몬 및 호르몬 유사체, 신호 전달 경로 억제제, 비수용체 티로신 키나제 혈관신생 억제제, 면역치료제, 프로아폽토시스제, LDH-A 억제제, 지방산 생합성 억제제, 세포 주기 신개선달 억제제, HDAC 억제제, 프로테아좀 억제제 및 암 대사 억제제에서 선택될 수 있다. 한 예에서, 세포독성제는 백금계 화학요법제(예를 들어, 카르보플라틴 또는 시스플라틴)이다. 한 예에서, 세포독성제는 EGFR의 길항제, 예를 들어, N-(3-에티닐페닐)-6,7-비스(2-메톡시에톡시)퀴나졸린-4-아민(예를 들어, 에를로티닙)이다. 한 예에서 세포독성제는 RAF 억제제, 예를 들어, BRAF 및/또는 CRAF 억제제이다. 한 예에서RAF 억제제는 베무라페닙이다. 한 예에서, 세포독성제는 PI3K 억제제이다.
"환자" 또는 "대상체"라는 용어는 인간 환자 또는 대상체를 의미한다. 예를 들어, 환자 또는 대상체는 성인일 수 있다.
본원에서 용어 "항체"는 원하는 생물학적 활성을 나타내는 한, 구체적으로 단클론 항체 (전장 단클론 항체 포함), 다클론 항체, 다중특이성 항체 (예를 들면, 이중특이성 항체), 및 항체 단편을 포괄한다. 한 예에서, 항체는 전장 단클론 항체이다.
본원에서 사용되는 용어 IgG "이소형" 또는 "하위분류"는 그의 불변 영역들의 화학적 및 항원성 특징에 의해 정의된 면역글로불린의 임의의 하위분류들을 의미한다.
항체 (면역글로불린)는 중쇄 불변 도메인의 아미노산 서열에 따라 상이한 분류에 할당될 수 있다. 5가지 주요 분류의 면역글로불린: IgA, IgD, IgE, IgG, 및 IgM이 있으며, 이들 중 몇몇은 하위분류(이소형), 예를 들어, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1, 및 IgA2로 더욱 세분될 수 있다. 면역글로불린의 상이한 분류에 상응하는 중쇄 불변 도메인은 각각 α, γ, ε, γ, 및 μ로 불린다. 상이한 분류의 면역글로불린의 서브유닛 구조 및 3차원 배열은 잘 알려져 있으며 일반적으로 예를 들어, Abbas 외 Cellular and Mol. Immunology, 4th ed. (W.B. Saunders, Co., 2000)에 기재되어 있다. 항체는 하나 이상의 다른 단백질 또는 펩티드와 항체의 공유 또는 비공유 결합에 의해 형성된 더 큰 융합 분자의 일부일 수 있다.
본원에서 사용된 용어들 "전장 항체", "온전한 항체" 및 "전체 항체"는 상호교환적으로 아래에서 정의된 바와 같은 항체 단편이 아니라, 이의 실질적으로 온전한 형태의 항체를 의미한다. 이 용어는 Fc 영역을 포함하는 항체를 말한다.
본원에서 용어 "Fc 영역"은 불변 영역의 적어도 일부를 함유하는 면역글로불린 중쇄의 C-말단 영역을 정의하는데 사용된다. 상기 용어는 천연 서열 Fc 영역 및 변이체 Fc 영역을 포함한다. 한 양상에서, 인간 IgG 중쇄 Fc 영역은 Cys226, 또는 Pro230에서 중쇄의 카르복실-말단까지 연장된다. 그러나, 숙주 제포에 의해 생성된 항체는 중쇄의 C-말단으로부터 하나 이상, 특히 1개 또는 2개의 아미노산의 번역후 절단을 거칠 수 있다. 따라서, 전장 중쇄를 인코딩하는 특이성 핵산 분자의 발현에 의해 숙주 세포에 의해 생성되는 항체는 전장 중쇄를 포함할 수 있고, 또는 전장 중쇄의 절단된 변이체를 포함할 수 있다. 이는 중쇄의 최종 2개의 C-말단 아미노산이 글리신(G446) 및 리신(K447)인 경우일 수 있다. 따라서, Fc 영역의 C-말단 리신(Lys447), 또는 C-말단 글리신(Gly446) 및 리신(Lys447)은 존재하거나 존재하지 않을 수 있다. Fc 영역을 포함하는 중쇄의 아미노산 서열은 본원에서 달리 지시가 없는 한, C-말단 리신(Lys447) 없이 표시된다. 하나의 양상에서, 본원에 개시된 항체에 포함되는 본원에 특정된 Fc 영역을 포함하는 중쇄는 또 다른 C-말단 글리신-리신 디펩티드(G446 및 K447)를 포함한다. 하나의 양상에서, 본원에 개시된 항체에 포함되는 본원에 특정된 Fc 영역을 포함하는 중쇄는 또 다른 C-말단 글리신 잔기(G446)를 포함한다. 하나의 양상에서, 본원에 개시된 항체에 포함되는 본원에 특정된 Fc 영역을 포함하는 중쇄는 또 다른 C-말단 리신 잔기(K447)를 포함한다. 한 실시형태에서, Fc 영역은 중쇄의 단일 아미노산 치환 N297A를 함유한다. 명시적으로 다른 언급이 없는 한, Fc 영역 또는 불변 영역에서 아미노산 잔기의 넘버링은 EU 넘버링 체계, Kabat 외, Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD, 1991에서 설명된 소위 EU 인덱스에 따른다.
"네이키드(naked) 항체"는 이종 모이어티(예를 들어, 세포독성 모이어티) 또는 방사성표지에 접합되지 않은 항체를 의미한다. 상기 네이키드 항체는 약학 조성물에 존재할 수 있다.
본원에서 사용되는 용어 "단클론 항체"는 실질적으로 동질성 항체 집단으로부터 획득된 항체를 말하는데, 가령, 개별 항체는 동일한 집단 및/또는 같은 에피토프에 결합하는 집단을 포함하는데, 다만, 변이체 항체, 가령, 자연 발생적 돌연변이 또는 단클론 항체 제재를 만드는 동안 발생되는 돌연변이를 갖는 변이체 항체 가능성이 있으며, 이러한 변이체들은 일반적으로 소량으로 존재한다. 상이한 결정부위(에피토프)에 대해 지시된 상이한 항체를 통상적으로 포함하는 다클론 항체 제제와 대조적으로, 단클론 항체 제제의 각각의 단클론 항체는 항원 상의 단일 결정부위에 대해 지시된다. 따라서, 수식어 "단클론(monoclonal)"은 실질적으로 동질성 항체 집단으로부터 수득되는 항체의 특성을 나타내며, 임의의 특정 방법에 의한 항체 제조를 필요로 하는 것으로 해석되어서는 안 된다. 예를 들면, 본 발명에 따른 단클론 항체는 하이브리도마 방법, 재조합 DNA 방법, 파지-디스플레이 방법 그리고 인간 면역 글로불린 좌위의 전부 또는 일부를 포함하는 유전자삽입 동물을 이용하는 방법들을 비롯한 (그러나 이에 제한되지 않음) 다양한 기술에 의해 제조될 수 있다.
본원에서 사용되는 용어 "초가변 영역" 또는 "HVR"은 서열에서 초가변적이고, 항원 결합 특이성을 결정하는 항체 가변 도메인 영역들 각각, 예를 들면, "상보성 결정 영역들" ("CDR들")을 의미한다.
일반적으로, 항체들은 6개의 HVR: VH에 3개(CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3), 및 VL에 3개(CDR-L1, CDR-L2, CDR-L3)를 포함한다. 본원에서 예시적인 CDR들은 다음을 포함한다:
(a) 아미노산 잔기 26-32 (L1), 50-52 (L2), 91-96 (L3), 26-32 (H1), 53-55 (H2), 및 96-101 (H3)에서 나타나는 초가변 루프 (Chothia 및 Lesk, J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987));
(b) 아미노산 잔기 24-34 (L1), 50-56 (L2), 89-97 (L3), 31-35b (H1), 50-65 (H2), 및 95-102 (H3)에서 나타나는 CDR (Kabat 외, Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991)); 및
(c)아미노산 잔기 27c-36 (L1), 46-55 (L2), 89-96 (L3), 30-35b (H1), 47-58 (H2), 및 93-101 (H3)에서 나타나는 항원 접촉부 (MacCallum 외 J. Mol. Biol. 262: 732-745 (1996)).
달리 지시되지 않는 한, CDR들은 상기 Kabat 외의 문헌에 따라 결정된다. 당업자는 CDR 표시가 또한 상기 Chothia, 상기 McCallum의 문헌, 또는 임의의 다른 과학적으로 허용되는 명명법에 따라 결정될 수 있음을 이해할 것이다.
"프레임워크" 또는 "FR"은 상보성 결정 영역(CDR) 이외의 가변 도메인 잔기를 의미한다. 가변 도메인의 FR은 일반적으로 4개의 FR 도메인들로 구성된다: FR1, FR2, FR3, 및 FR4. 따라서, CDR 및 FR 서열들은 일반적으로 VH (또는 VL)에서 다음의 순서로 나타난다: FR1-CDR-H1(CDR-L1)-FR2- CDR-H2(CDR-L2)-FR3- CDR-H3(CDR-L3)-FR4.
용어 "Kabat에서와 같은 가변 도메인 잔기 넘버링" 또는 "Kabat와 같은 아미노산 위치 넘버링", 및 이의 변형은 Kabat 외, 상기 문헌들에서 항체 컴파일에 관한 중쇄 가변 도메인 또는 경쇄 가변 도메인에 사용되는 넘버링 체계를 의미한다. 이러한 넘버링 체계를 이용하여, 실제 선형 아미노산 서열은 가변 도메인의 FR 또는 HVR의 단축, 또는 이것 내로 삽입에 상응하는 더욱 적은 또는 추가 아미노산을 내포할 수 있다. 예를 들면, 중쇄 가변 도메인은 H2의 잔기 52 다음에 단일 아미노산 삽입(Kabat에 따른 잔기 52a)과 중쇄 FR 잔기 82 다음에 삽입된 잔기(가령, Kabat에 따른 잔기 82a, 82b, 및 82c, 등등)를 포함할 수 있다. Kabat의 잔기 넘버링은 "표준" Kabat 넘버링 서열과 항체의 서열의 상동성 영역을 정렬하여 주어진 항체에 대하여 결정될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "단일특이적" 항체는 각각의 결합 부위가 동일한 항원의 동일한 에피토프에 결합하는 하나 이상의 상기 결합 부위를 갖는 항체를 나타낸다. 본원에서 사용되는 용어 "이중특이성" 항체는 항체가 적어도 2개의 별개의 항원들, 예를 들어, 동일한 항원 상의 상이한 항원들에 또는 상이한 에피토프들에 결합하는 한 쌍의 항체 중쇄 가변 도메인(VH) 및 항체 경쇄 가변 도메인(VL)에 의해 각각 형성된 2개의 결합 부위들에 특이적으로 결합할 수 있음을 의미한다. 이러한 이중특이성 항체는 1+1 형식이다. 다른 이중특이성 항체 형식은 2+1 형식(제1 항원 또는 에피토프에 대한 2개의 결합 부위 및 제2 항원 또는 에피토프에 대한 1개의 결합 부위 포함) 또는 2+2 형식(제1 항원 또는 에피토프에 대한 2개의 결합 부위 및 제2 항원 또는 에피토프에 대한 2개의 결합 부위를 포함함)이다. 전형적으로, 이중특이성 항체는 2개의 항원 결합 부위를 포함하며, 이들 각각은 상이한 항원에 대해 특이적이다.
본원에 사용된 "PD-L1-양성 종양 세포 분율"은 면역조직화학(IHC) 분석, 예를 들어 항체 SP142, SP263, 22C3 또는 28-8을 사용한 PD-L1에 대한 IHC 분석 염색과 관련하여 샘플의 염색 후 샘플에 존재하는 모든 생존 가능한 종양 세포에 비해 임의의 강도에서 부분 또는 전체 막 염색(세포질 염색 제외)을 나타내는 생존 종양 세포의 백분율이다. 따라서, PD-L1-양성 종양 세포 분율은 PD-L1 IHC SP142(벤타나) 분석을 사용하여, 예를 들어, 다음 공식: PD-L1-양성 종양 세포 분율 = (PD-L1-양성 종양 세포의 수)/(PD-L1 양성 및 PD-L1 음성 종양 세포의 총 수)으로 계산할 수 있으며, 이 때 종양 세포 및 모든 비종양 세포(예를 들어, 종양 침윤 면역 세포, 정상 세포, 괴사 세포 및 파편)의 PD-L1 세포질 염색은 평가 및 채점에서 제외된다. 임의의 주어진 진단용 PD-L1 항체는 PD-L1-양성 종양 세포 분율을 유도하는데 사용될 수 있는 특정 IHC 분석 프로토콜 및/또는 채점 용어와 상응할 수 있다는 것이 이해될 것이다. 예를 들어, SP263, 22C3, SP142 또는 28-8로 염색된 종양 세포 샘플로부터 각각 Benchmark ULTRA의 OPTIVIEW® 검출, AutostainerLink 48의 EnVision Flex, Benchmark ULTRA의 OPTIVIEW® 검출 및 증폭 또는 AutostainerLink 48의 EnVision Flex를 사용하여 PD-L1 양성 종양 세포 분율을 유도할 수 있다.
본원에 사용된 "벤타나 SP142 IHC 분석"은 전체 내용이 본원에 참고로 포함된 벤타나 PD-L1(SP142) 분석 사용 설명서(Tucson, AZ: Ventana Medical Systems, Inc.)에 따라 수행된다.
본원에 사용된 "벤타나 SP263 IHC 분석"은 전체 내용이 본원에 참고로 포함된 벤타나 PD-L1(SP263) 분석 사용 설명서(Tucson, AZ: Ventana Medical Systems, Inc.)에 따라 수행된다.
본원에 사용된 "pharmDx 22C3 IHC 분석"은 PD-L1 IHC 22C3 pharmDx 사용 설명서(Carpinteria, CA: Dako, Agilent Pathology Solutions)에 따라 수행되며, 이는 그 전문이 본원에 참고로 포함된다.
본원에 사용된 "pharmDx 28-8 IHC 분석"은 PD-L1 IHC 28-8 pharmDx 사용 설명서(Carpinteria, CA: Dako, Agilent Pathology Solutions)에 따라 수행되며, 이는 그 전문이 본원에 참고로 포함된다.
"사용 설명서(package insert)"라는 용어는 치료 제품의 사용에 관한 적응증, 사용법, 투여량, 투여, 조합 요법, 금기 및/또는 경고에 대한 정보를 포함하는 치료 제품의 시판 패키지에 관례적으로 포함되는 지침서를 지칭하는 데 사용된다.
본원에 사용된 "~와 병용하여"은 하나의 치료 방식을 또 다른 치료 방식, 예를 들어, 세포 예정사 단백질 1(PD-1) 및 림프구 활성화 유전자-3(LAG3) 및 항-TIGIT 길항제 항체(예를 들어, 티라골루맙) 또는 VEGF 길항제, 예를 들어 항-VEGF 항체(예를 들어 베바시주맙)를 표적으로 하는 이중특이성 항체의 투여를 포함하는 치료 요법에 더하여 투여하는 것을 의미한다. 따라서, "~와 병용하여"는 환자에게 하나의 치료 방식을 기타 치료 방식의 투여 전, 동안, 또는 후에 투여하는 것을 의미한다.
하나 이상의 다른 약물과 "동시" 투여되는 약물은 하나 이상의 다른 약물과 동일한 치료 주기 동안, 동일한 치료일에, 그리고 선택적으로 하나 이상의 다른 약물과 동시에 투여된다. 예를 들어, 3주마다 시행되는 암 치료의 경우, 동시에 투여되는 약물은 각각 3주 주기의 1일차에 투여된다.
본원에서 사용된 용어 "이상 반응" 또는 "AE"는 의학적 치료 또는 절차의 사용과 일시적으로 연관된 의도하지 않은 불리한 징후(비정상적인 실험실 소견 포함), 증상 또는 질환을 말하며, 이는 의학적 치료 또는 절차와 관련이 있는 것으로 간주되거나 그렇지 않을 수 있다. 이상 반응은 미국 국립 암 연구소의 이상 반응 v4.0 또는 v5.0(NIH CTCAE)에 대한 공통 용어 기준에 정의된 대로 "등급"으로 분류될 수 있다. 일부 양상에서, AE는 낮은 등급 AE, 예를 들어, 1등급 또는 2등급 AE이다. 1등급에는 무증상이거나 경미한 증상이 있는 AE가 포함된다. 2등급에는 중등도이고 연령에 적합한 일상 생활 도구 활동(예를 들어, 식사 준비, 식료품 또는 옷 쇼핑)이 제한되고 국소적 또는 비침습적 개입을 나타내는 AE가 포함된다. 다른 경우에, AE는 높은 등급 AE, 예를 들어, 3등급, 4등급 또는 5등급 AE이다. 일부 예들에서, AE는 3등급 또는 4등급 AE이다. 3등급에는 중증이거나 의학적으로 유의미하지만 즉시 생명을 위협하지는 않고 입원 또는 입원 연장을 나타내는 AE가 포함된다. 4등급에는 생명을 위협하는 결과를 초래하고 긴급 개입을 나타내는 AE가 포함된다. 5등급에는 사망을 초래하거나 사망과 관련된 AE가 포함된다.
본원에 사용된 용어 "치료 관련 AE"는 조사자가 치료, 예를 들어 PD-1 축 결합 길항제 요법(예를 들어, 아테졸리주맙 요법) 및/또는 항-TIGIT 길항제 항체 요법(예를 들어, 티라골루맙 요법)의 결과로 발생한 것으로 판단한 AE를 의미한다.
본 출원에서 사용되는 용어 "~가"는 항원 결합 분자 내 특정 수의 결합 도메인들의 존재를 나타낸다. 이에 따라 용어 "2가", "4가" 및 "6가"는 각각 항원 결합 분자 내의 2개의 결합 도메인, 4개의 결합 도메인 및 6개의 결합 도메인의 존재를 나타낸다. 본 발명에 따른 이중특이성 항체는 적어도 "2가"이며, "3가" 또는 "다가"(예를 들어 "4가" 또는 "6가")일 수 있다. 특정 양상에서, 본 발명의 항체는 2개 이상의 결합 부위를 가지며 이중특이성이다. 즉, 항체는 2개 이상의 결합 부위가 있는 경우에도(즉, 항체가 3가 또는 다가임) 이중특이성일 수 있다.
"항체 단편"은 온전한 항체가 결합하는 항원에 결합하는 온전한 항체의 일부를 포함하는 온전한 항체 이외의 분자를 의미한다. 항체 단편의 예는 Fv, Fab, Fab', Fab'-SH, F(ab')2; 디아바디, 트리아바디, 테트라바디, 교차-Fab 단편; 선형 항체; 단쇄 항체 분자(예를 들어 scFv); 항체 단편들로부터 형성된 다중특이성 항체 및 단일 도메인 항체를 포함하나 이에 제한되는 것은 아니다. 특정 항체 단편들에 대한 검토는 Hudson 등, Nat. Med. 9, 129-134 (2003)를 참조한다. scFv 단편들의 검토는, 예를 들어, Pluckth
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n, in The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, vol. 113, Rosenburg and Moore eds., Springer-Verlag, New York, pp. 269-315 (1994); WO 93/16185; 그리고 미국 특허 제 5,571,894 및 5,587,458을 또한 참고한다. 구조 수용체(salvage receptor) 결합 에피토프 잔기를 포함하고 생체내 반감기가 증가된 Fab 및 F(ab')2 단편에 대한 논의는 미국 특허 제 5,869,046을 참조하라. 디아바디는 2가 또는 이중특이성일 수 있는 2개의 항원 결합 도메인들을 갖는 항체 단편으로, 예를 들어, EP 404,097; WO 1993/01161; Hudson 등, Nat Med 9, 129-134 (2003); 및 Hollinger 등, Proc Natl Acad Sci USA 90, 6444-6448 (1993)를 참조하라. 트리아바디(Triabodies) 및 테트라바디(tetrabodies)는 또한 Hudson 외. Nat. Med. 9, 129-134 (2003)에 설명되어 있다. 단일-도메인 항체는 항체의 중쇄 가변 도메인의 전부 또는 일부 또는 경쇄 가변 도메인의 전부 또는 일부를 포함하는 항체 단편이다. 특정 실시형태들에서, 단일 도메인 항체는 인간 단일 도메인 항체이다 (Domantis, Inc., Waltham, MA; 예를 들어, 미국 특허 제 6,248,516 B1 참조). 또한, 항체 단편은 기능성 항원 결합 부위에 대해, VH 도메인의 특징을 갖는, 즉 VL 도메인과 함께 조립될 수 있는, 또는 VL 도메인의 특징을 갖는, 즉 VH 도메인과 함께 조립될 수 있고, 그리하여 전장 항체의 항원 결합 성질을 제공할 수 있는 단일 사슬 폴리펩티드를 포함한다. 항체 단편은 본원에 기재된 바와 같이, 온전한 항체의 단백질분해 소화, 뿐만 아니라 재조합 숙주 세포(예를 들어, 대장균 또는 파지)에 의한 생산을 포함한(그러나 이에 제한되지 않음) 다양한 기술에 의해 제조될 수 있다.
온전한 항체들의 파파인 분해는 각각 중쇄 및 경쇄 가변 도메인 및 경쇄의 불변 도메인 및 중쇄의 제1 불변 도메인(CH1) 또한 함유하는 2개의 동일한 항원-결합 단편들, 소위 "Fab" 단편들을 생성한다. 따라서, 본원에서 사용되는 용어 "Fab 단편"은 경쇄의 VL 도메인 및 불변 도메인(CL)을 포함하는 경쇄 단편, 및 중쇄의 VH 도메인 및 제1 불변 도메인(CH1)을 포함하는 항체 단편을 의미한다. Fab' 단편은 항체 힌지(hinge)의 영역으로부터의 하나 또는 그 이상의 시스테인을 포함하는 중쇄 CH1 도메인의 카르복시 말단에 몇 개 잔기들을 부가함에 의해, Fab 단편과 상이하다. Fab'-SH는 본원에서 불변 도메인의 시스테인 잔기(들)이 유리 티올기를 보유하는 Fab' 단편이다. 펩신 처리는 2개의 항원 결합 부위 (2개의 Fab 단편) 및 Fc 영역의 일부를 갖는 F(ab')2 단편을 생성한다.
용어 "교차-Fab 단편" 또는 "xFab 단편" 또는 "교차 Fab 단편"은 중쇄 및 경쇄의 가변 영역 또는 불변 영역이 교환된 Fab 단편을 의미한다. 교차 Fab 분자의 다음 2가지 서로 다른 사슬 조성이 가능하며 이는 본 발명의 이중특이성 항체에 포함된다: 하나는, 상기 Fab 중쇄 및 경쇄의 가변 영역들이 교환된다, 즉 상기 교차 Fab 분자는 경쇄 가변 영역(VL) 및 중쇄 불변 영역(CH1)으로 구성된 펩티드 사슬, 및 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 불변 영역(CL)으로 구성된 펩티드 사슬을 포함한다. 이러한 교차 Fab 분자를 또한 CrossFab(VLVH)로도 의미한다. 다른 하나는, 상기 Fab 중쇄 및 경쇄의 불변 영역이 교환될 때, 상기 교차 Fab 분자는 중쇄 가변 영역(VH) 및 경쇄 불변 영역(CL)으로 구성된 펩티드 사슬, 및 경쇄 가변 영역(VL) 및 중쇄 불변 영역(CH1)으로 구성된 펩티드 사슬을 포함한다. 이러한 교차 Fab 분자를 또한 CrossFab(CLCH1)로도 의미한다.
"단일 사슬 Fab 단편"또는 "scFab"은 항체 중쇄 가변 도메인 (VH), 항체 중쇄 불변 도메인 1 (CH1), 항체 경쇄 가변 도메인 (VL), 항체 경쇄 불변 도메인 (CL) 및 링커로 구성된 폴리펩티드로서, 이 때 상기 항체 도메인 및 상기 링커는 N-말단에서 C-말단 방향으로 다음 순서 중 하나를 가지며: a) VH-CH1-링커-VL-CL, b) VL-CL-링커-VH-CH1, c) VH-CL-링커-VL-CH1 또는 d) VL-CH1-링커-VH-CL, 이 때 상기 링커는 적어도 30개 아미노산, 바람직하게는 32 내지 50개 아미노산의 폴리펩티드이다. 상기 단일 사슬 Fab 단편은 CL 도메인과 CH1 도메인 사이의 자연 이황화 결합을 통해 안정화된다. 또한, 이들 단일 사슬 Fab 분자들은 (예를 들어, Kabat 넘버링에 따라 가변 중쇄에서 위치 44 및 가변 경쇄에서 위치 100) 시스테인 잔기의 삽입을 통한 사슬간 이황화 결합의 생성에 의해 추가로 안정화 될 수 있다.
"교차 단일 사슬 Fab 단편"또는 "x-scFab"는 항체 중쇄 가변 도메인 (VH), 항체 중쇄 불변 도메인 1 (CH1), 항체 경쇄 가변 도메인 (VL), 항체 경쇄 불변 도메인 (CL) 및 링커로 구성된 폴리펩티드로서, 이 때 상기 항체 도메인 및 상기 링커는 N-말단에서 C-말단 방향으로 다음 순서 중 하나를 가지며: a) VH-CL-링커-VL-CH1 및 b) VL-CH1-링커-VH-CL, 이 때 VH 및 VL은 함께 항원에 특이적으로 결합하는 항원 결합 도메인을 형성하고, 이 때 상기 링커는 적어도 30개의 아미노산의 폴리펩티드이다. 또한, 이들 x-scFab 분자들은 (예를 들어, Kabat 넘버링에 따라 가변 중쇄에서 위치 44 및 가변 경쇄에서 위치 100) 시스테인 잔기의 삽입을 통한 사슬간 이황화 결합의 생성에 의해 추가로 안정화 될 수 있다.
"단일-사슬 가변 단편(scFv)"은 10 내지 약 25개 아미노산의 짧은 링커 펩티드와 연결된, 항체의 중쇄(VH) 및 경쇄(VL)의 가변 영역의 융합 단백질이다. 이러한 링커는 일반적으로 가요성을 위해 글리신, 용해도를 위해 세린 또는 트레오닌이 풍부하며, VH의 N-말단을 VL의 C-말단과 연결할 수 있거나 그 반대일 수 있다. 이 단백질은 불변 영역의 제거와 링커의 도입에도 불구하고 원래 항체의 특이성을 유지한다. scFv 항체는 예를 들어 Houston, J.S., Methods in Enzymol. 203 (1991) 46-96에 기재되어 있다. 또한, 항체 단편은 기능성 항원 결합 부위에 대해, VH 도메인의 특징을 갖는, 즉 VL 도메인과 함께 조립될 수 있는, 또는 VL 도메인의 특징을 갖는, 즉 VH 도메인과 함께 조립될 수 있고, 그리하여 전장 항체의 항원 결합 성질을 제공할 수 있는 단일 사슬 폴리펩티드를 포함한다.
단일 도메인 항체는 단일 단량체 가변 항체 도메인으로 구성된 항체 단편이다. 첫 번째 단일 도메인은 낙타과 항체 중쇄의 가변 도메인(나노바디 또는 VHH 단편)에서 파생되었다. 또한, 단일 도메인 항체라는 용어는 자가 인간 중쇄 가변 도메인(aVH) 또는 상어로부터 유래된 VNAR 단편을 포함한다. 피브로넥틴은 항원에 결합하도록 조작될 수 있는 스캐폴드이다. 애드넥틴은 인간 피브로넥틴 III형(FN3)의 15개 반복 단위 중 10번째 도메인의 천연 아미노산 서열의 백본으로 구성된다. β-샌드위치의 한쪽 끝에 있는 3개의 루프는 애드넥틴이 관심 치료 표적을 구체적으로 인식할 수 있도록 조작될 수 있다. 자세한 내용은 Protein Eng. Des. Sel. 18, 435-444 (2005), US20080139791, WO2005056764 및 US6818418B1을 참조하라. 펩티드 앱타머는 활성 부위에 삽입된 구속 가변 펩티드 루프를 포함하는 불변 스캐폴드 단백질, 일반적으로 티오레독신(TrxA)으로 구성된 조합형 인식 분자이다. 자세한 내용은 Expert Opin. Biol. Ther. 5, 783-797 (2005)을 참조하라. 마이크로바디는 3-4개의 시스테인 다리를 포함하는 25-50개 아미노산 길이의 자연 발생 마이크로단백질에서 파생된다-마이크로단백질의 예로는 KalataBI 및 코노톡신 및 노틴이 있다. 마이크로단백질은 마이크로단백질의 전체 폴딩에 영향을 미치지 않으면서 최대 25개의 아미노산을 포함하도록 조작될 수 있는 루프를 가지고 있다. 조작된 노틴 도메인에 대한 보다 자세한 내용은 WO2008098796을 참조하라.
용어 "PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하는 이중특이성 항체", "PD-1 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 이중특이성 항체", "PD-1 및 LAG3에 특이적인 이중특이성 항원 결합 분자" 또는 "항-PD-1/항-LAG3 항체"는 본원에서 상호교환적으로 사용되며 항체가 PD-1 및 LAG3을 표적함에 있어서 진단 및/또는 치료제로서 유용하도록 충분한 친화도로 PD-1 및 LAG3에 결합할 수 있는 이중특이성 항체를 의미한다.
세포 예정사 단백질 1로도 알려진 용어 "PD-1"은 1992년에 처음 기술된 288개 아미노산의 1형 막 단백질이다(Ishida 외, EMBO J., 11 (1992), 3887-3895). PD-1은 확장된 CD28/CTLA-4 계열의 T 세포 조절인자의 구성원이며 2개의 리간드인 PD-L1(B7-H1, CD274) 및 PD-L2(B7-DC, CD273)를 가진다. 이 단백질의 구조는 세포외 IgV 도메인에 이어 막관통 영역과 세포내 꼬리를 포함한다. 세포내 꼬리에는 면역수용체 티로신 기반 억제 모티프와 면역수용체 티로신 기반 스위치 모티프에 위치한 두 개의 인산화 부위가 포함되어 있으며, 이는 PD-1이 TCR 신호를 음성적으로 조절함을 시사한다. 이는 리간드 결합 시 PD-1의 세포질 꼬리에 대한 SHP-1 및 SHP-2 포스파타제의 결합과 일치한다. PD-1은 나이브 T 세포에서 발현되지 않지만, T 세포 수용체(TCR)-매개 활성화 후에 상향조절되고 활성화된 T 세포와 고갈된 T 세포 모두에서 관찰된다(Agata 외, Int. Immunology 8 (1996), 765) -772). 이러한 고갈된 T 세포는 기능장애 표현형을 가지고 있으며 적절하게 반응할 수 없다. PD-1은 상대적으로 광범위한 발현 패턴을 갖지만, 이의 가장 중요한 역할은 T 세포에 대한 동시억제 수용체로서의 역할일 것이다(Chinai 외, Trends in Pharmacological Sciences 36 (2015), 587-595). 따라서 현재의 치료적 접근법은 T 세포 반응을 향상시키기 위해 PD-1과 이의 리간드의 상호작용을 차단하는 데 초점을 두고 있다. 용어 "예정사 1", "세포예정사 1", "단백질 PD-1", "PD-1", PD1," "PDCD1", "hPD-1" 및 "hPD-I"는 상호교환적으로 사용할 수 있으며, 인간 PD-1의 변이체, 이소형, 종 상동체 및 PD-1과 적어도 하나의 공통 에피토프를 갖는 유사체를 포함한다. 인간 PD-1의 아미노산 서열은 UniProt(www.uniprot.org) 접근 번호 Q15116에 제시되어 있다(서열번호 55).
본원에서 사용되는 용어 "LAG3" 또는 "Lag-3" 또는 "림프구 활성화 유전자-3" 또는 "CD223" 은, 달리 명시되지 않는 한, 영장류(예를 들어, 인간) 및 설치류(예를 들어, 마우스 및 래트)와 같은 포유동물을 포함한 임의의 척추동물 출처로부터의 임의의 천연 LAG3을 의미한다. 이 용어는 "전장"의, 비가공 LAG3, 뿐만 아니라 세포에서 가공하여 생성된 임의의 형태의 LAG3을 포함한다. 이 용어는 또한 LAG3의 자연 발생 변이체, 예를 들어, 스플라이스 변이체 또는 대립유전자 변이체를 포함한다. 한 바람직한 실시형태에서 용어 "LAG3"은 인간 LAG3을 의미한다. 예시적인 가공된(신호 서열 없는) LAG3의 아미노산 서열은 서열번호 56에 제시되어 있다. 예시적인 세포외 도메인(ECD) LAG3의 아미노산 서열은 서열번호 57에 제시되어 있다.
용어 "항-LAG3 항체" 및 "LAG3에 결합하는 항체"는 항체가 LAG3을 표적하는데 있어서 진단제 및/또는 치료제로서 유용하도록 하기에 충분한 친화도로 LAG3에 결합할 수 있는 항체를 나타낸다. 한 양상에서, 관련없는, 비-LAG3 단백질에 항-LAG3 항체의 결합 정도는, 예를 들면, 방사면역분석(RIA)으로 측정한 LAG3에 대한 항체 결합의 약 10% 미만이다. 특정 실시형태들에서, LAG3에 결합하는 항체는 ≤　1μM, ≤　100 nM, ≤　10 nM, ≤　1 nM, ≤　0.1 nM, ≤　0.01 nM, 또는 ≤　0.001 nM (예를 들어, 10-8 M 또는 그 미만, 예를 들어, 10-8 M 내지 10-13 M, 예를 들어, 10-9 M 내지 10-13 M)의 해리 상수(KD)를 갖는다. 특정 양상에 있어서, 항-LAG3 항체는 상이한 종의 LAG3에서 보존되는 LAG3의 에피토프에 결합한다. 한 바람직한 실시양태에서, "항-LAG3 항체", "인간 LAG3에 특이적으로 결합하는 항체" 및 "인간 LAG3에 결합하는 항체"는 인간 LAG3 항원 또는 그의 세포외 도메인(ECD)에 1.0 x 10-8 mol/l 이하의 KD-값, 한 실시형태에서 1.0　x　10-9　mol/l 이하의 KD-값, 한 실시형태에서 1.0　x　10-9　mol/l 내지 1.0　x　10-13 mol/l의 KD-값의 결합 친화도로 특이적으로 결합하는 항체를 의미한다. 이와 관련하여 결합 친화도는 표면 플라즈몬 공명 기술(BIAcore®, GE-Healthcare Uppsala, Sweden)과 같은 표준 결합 분석으로 예를 들어, LAG3 세포외 도메인을 사용하여 결정된다. 용어 "항-LAG3 항체"는 또한 LAG3 및 제2 항원에 결합할 수 있는 이중특이성 항체를 포함한다.
놉-인투-홀 기술은 예를 들어 US 5,731,168; US 7,695,936; Ridgway 외, Prot Eng 9, 617-621 (1996) 및 Carter, J Immunol Meth 248, 7-15 (2001)에 기재되어 있다. 일반적으로, 상기 방법은 제1 폴리펩티드의 경계면에 돌기 ("놉") 그리고 제2 폴리펩티드의 경계면에 이에 상응하는 구멍 ("홀")을 도입시켜 상기 돌기가 상기 구멍 안에 위치되게 함으로써 이종이량체 형성을 촉진시키고, 동형이량체 형성을 방해한다. 돌기(Protuberances)는 제1 폴리펩티드의 경계면의 작은 아미노산 측쇄를 더 큰 측쇄 (가령, 티로신 또는 트립토판)로 대체함으로써 제작된다. 상기 돌기와 동일 또는 유사한 크기의 상보적 공동(cavities)은, 제2 폴리펩티드의 경계면에서 큰 아미노산 측쇄를 더 작은 측쇄 (가령, 알라닌 또는 트레오닌)로 대체함으로써 생성된다. 상기 돌기 및 공동은 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산을, 예를 들어, 부위-특이적 돌연변이유발에 의해, 또는 펩티드 합성에 의해 변경함으로써 생성될 수 있다. 특정 실시형태에서 놉 변형은 Fc 도메인의 2개 서브유닛 중 하나에 아미노산 치환 T366W을 포함하고, 홀 변형은 Fc 도메인의 2개 서브유닛 중 다른 하나에 아미노산 치환 T366S, L368A 및 Y407V를 포함한다. 한 추가의 특정 실시형태에서, 놉 변형을 포함하는 Fc 도메인의 서브유닛은 아미노산 치환 S354C를 추가로 포함하고, 홀 변형을 포함하는 Fc 도메인의 서브유닛은 아미노산 치환 Y349C를 추가로 포함한다. 이들 2개 시스테인 잔기들의 도입은 Fc 영역의 상기 2개 서브유닛들 사이에 이황화물 가교를 형성시켜, 이러한 이량체를 더욱 안정화시킨다(Carter, J Immunol Methods 248, 7-15 (2001)).
용어 "효과기 기능"은 항체의 Fc 영역으로 인한 생물학적 활성을 지칭하며, 이는 항체 이소형에 따라 달라진다. 항체 효과기 기능들의 예에는 다음이 포함된다: C1q 결합 및 보체 의존적인 세포독성(CDC), Fc 수용체 결합, 항체-의존성 세포-매개 세포독성(ADCC), 항체-의존성 세포 식균작용(ADCP), 사이토카인 분비, 항원 제공 세포에 의한 면역 복합체-매개된 항원 흡수, 세포 표면 수용체(예를 들어 B 세포 수용체)의 하향조절, 및 B 세포 활성화.
"활성화 Fc 수용체"는 항체의 Fc 영역에 의한 결합 후 효과기 기능을 수행하도록 수용체-보유 세포를 자극하는 신호전달 사건을 이끌어 내는 Fc 수용체이다. 활성화 Fc 수용체는 FcγRIIIa (CD16a), FcγRI (CD64), FcγRIIa (CD32), 및 FcαRI (CD89)를 포함한다. 특정한 활성화 Fc 수용체는 인간 FcγRIIIa이다(UniProt 접근 번호 P08637, 버전 141을 참조).
용어 "펩티드 링커"는 하나 이상의 아미노산, 전형적으로 약 2 내지 20개 아미노산을 포함하는 펩티드를 의미한다. 펩티드 링커는 해당 분야에 공지이거나 본원에 기재된 바와 같다. 적합한 비면역원성 링커 펩티드는 예를 들어, (G4S)n, (SG4)n 또는 G4(SG4)n 펩티드 링커이며, 이 때 "n"은 일반적으로 1 내지 10, 전형적으로 2 내지 4의 수이고, 특히, 2이다, 즉, 펩티드는 GGGGS (서열번호 46) GGGGSGGGGS (서열번호 47), SGGGGSGGGG (서열번호 48) 및 GGGGSGGGGSGGGG (서열번호 49)로 구성된 그룹에서 선택된 펩티드로 구성된 그룹에서 선택되지만, 또한 GSPGSSSSGS (서열번호 50), (G4S)3 (서열번호 51), (G4S)4 (서열번호 52), GSGSGSGS (서열번호 53), GSGSGNGS (서열번호 54), GGSGSGSG (서열번호 55), GGSGSG (서열번호 56), GGSG (서열번호 57), GGSGNGSG (서열번호 58), GGNGSGSG (서열번호 59) 및 GGNGSG (서열번호 60)의 서열들도 포함할 수 있다. 특히 관심 대상인 펩티드 링커는 (G4S)(서열번호 46), (G4S)2 또는 GGGGSGGGGS(서열번호 47), (G4S)3(서열번호 51) 및 (G4S)4(서열번호 53), 더욱 특히 (G4S)2(서열번호 47) 또는 GGGGSGGGGS(서열번호 47)이다.
"~에 융합된" 또는 "~에 연결된"은 구성요소들(예를 들어, 항원 결합 도메인 및 FC 도메인)이 직접적으로 또는 하나 이상의 펩티드 링커를 통해 펩티드 결합에 의해 연결됨을 의미한다.
"VEGF 길항제" 또는 "VEGF 특이적 길항제"는 VEGF에 결합할 수 있는, VEGF 발현 수준을 감소시킬 수 있는, 또는 하나 또는 그 이상의 VEGF 수용체에 VEGF 결합, VEGF 신호전달, 그리고 VEGF 매개된 혈관형성 및 내피 세포 생존 또는 증식을 포함하지만 이들에 한정되지 않는 VEGF 생물학적 활성을 중화하거나, 차단하거나, 억제하거나, 제거하거나, 감소시키거나 또는 간섭할 수 있는 분자를 의미한다. 예를 들면, VEGF 생물학적 활성을 중화하거나, 차단하거나, 억제하거나, 제거하거나, 감소시키거나 또는 간섭할 수 있는 분자는 하나 또는 그 이상의 VEGF 수용체(VEGFR)(예를 들면, VEGFR1, VEGFR2, VEGFR3, 막-결합된 VEGF 수용체(mbVEGFR), 또는 가용성 VEGF 수용체(sVEGFR))에 결합함으로써 효과를 발휘할 수 있다. 이러한 길항제는 또한 본원에서 "VEGFR 억제제"로 지칭된다. VEGF에 특이적으로 결합하는 폴리펩티드, 항-VEGF 항체 및 이들의 항원 결합 단편, VEGF에 특이적으로 결합하여 하나 또는 그 이상의 수용체에 대한 이의 결합을 격리하는 수용체 분자 및 유도체, 융합 단백질(예를 들면, VEGF-트랩(Regeneron)), 그리고 VVEGF121-겔로닌(Peregrine)이 본 발명의 방법에서 유용한 VEGF 특이적 길항제로서 포함된다. VEGF 특이적 길항제는 또한 VEGF 폴리펩티드의 길항제 변이체, VEGF 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산 분자의 적어도 단편에 상보적인 안티센스 핵염기 올리고머; VEGF 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산 분자의 적어도 단편에 상보적인 작은 RNA; VEGF를 표적으로 하는 리보자임; VEGF에 대한 펩티바디; 및 VEGF 앱타머를 포함한다. VEGF 길항제는 또한, VEGFR에 결합하는 폴리펩티드, 항-VEGFR 항체(예를 들어, 베바시주맙) 및 이들의 항원 결합 단편, 그리고 VEGFR에 결합하여 VEGF 생물학적 활성(예를 들면, VEGF 신호전달)을 차단하거나, 억제하거나, 제거하거나, 감소시키거나 또는 간섭하는 유도체, 또는 융합 단백질을 포함한다. VEGF 특이적 길항제는 또한, VEGF 또는 VEGFR에 결합하고 VEGF 생물학적 활성을 차단하거나, 억제하거나, 제거하거나, 감소시키거나 또는 간섭할 수 있는 비펩티드 소형 분자를 포함한다. 따라서, "VEGF 생물학적 활성"이라는 용어는 구체적으로 VEGF의 VEGF 매개 생물학적 활성을 포함한다. 특정 실시형태에서, VEGF 길항제는 VEGF의 발현 수준 또는 생물학적 활성을 적어도 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% 또는 그 이상 감소시키거나 또는 억제한다. 일부 실시형태에서, VEGF 특이적 길항제에 의해 억제되는 VEGF는 VEGF(8-109), VEGF(1-109), 또는 VEGF165이다.
본원에 사용된 VEGF 길항제는 항-VEGFR2 항체 및 관련 분자(예를 들어, 라무시루맙, 타니비루맙, 애플리버셉트), 항-VEGFR1 항체 및 관련 분자(예를 들어, 이크루쿠맙, 애플리버셉트(VEGF 트랩-아이; EYLEA®) 및 ziv-애플리버셉트(VEGF Trap; ZALTRAP®)), 이중특이성 VEGF 항체(예를 들어, MP-0250, 바누시주맙(VEGF-ANG2) 및 US 2001/0236388에 개시된 이중특이성 항체), 항-VEGF, 항-VEGFR1 및 항-VEGFR2 팔들 중 2개의 조합을 포함하는 이중특이성 항체, 항-VEGFA 항체(예를 들어, 베바시주맙, 세바시주맙), 항-VEGFB 항체, 항-VEGFC 항체(예를 들어, VGX-100), 항-VEGFD 항체, 및 비펩티드 소분자 VEGF 길항제(예를 들어, 파조파닙, 악시티닙, 반데타닙, 스티바르가, 카보잔티닙, 렌바티닙, 닌테다닙, 오란티닙, 텔라티닙, 도비티니그, 세디라닙, 모테사닙, 설파티닙, 아파티닙, 포레티닙, 파미티닙 및 티보자닙)를 포함할 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다. 일부 예에서, VEGF 길항제는 수용체 티로신 키나제 억제제(예를 들어, 수니티닙 또는 악시티닙과 같은 다중-표적화 수용체 티로신 키나제 억제제)를 포함하는 티로신 키나제 억제제일 수 있다.
"항-VEGF 항체"는 충분한 친화도 및 특이성으로 VEGF에 결합하는 항체이다. 특정 실시형태에서, 이러한 항체는 VEGF에 대해 충분히 높은 결합 친화도를 가질 것이다, 예를 들어, 이러한 항체는 100nM 내지 1pM의 Kd 값으로 hVEGF에 결합할 수 있다. 항체 친화도는, 예를 들어, 표면 플라즈몬 공명 기반 분석(예를 들어, PCT 국제출원 공개공보 제 WO2005/012359에 기재된 바와 같은 BIAcore® 분석); ELISA(효소 결합 면역흡착 분석); 및 경쟁 분석(예를 들어, 방사면역분석(RIA))에 의해 결정될 수 있다.
특정 실시형태에서, 항-VEGF 항체는 질환 또는 병태를 표적으로 할 때 및 이를 방해할 때 치료제로서 사용될 수 있으며, 이 때 VEGF 활성이 수반된다. 또한, 항체는 예를 들면, 치료제로서 이의 유용성을 평가하기 위해, 다른 생물학적 활성 분석이 진행될 수도 있다. 이런 분석은 당해 분야에서 공지되어 있으며, 그리고 상기 항체에 대한 표적 항원 및 의도한 용도에 따라 달라진다. 실례는 HUVEC 억제 분석; 종양 세포 성장 억제 분석(예를 들면, WO 89/06692에서 설명됨); 항체-의존성 세포 세포독성(ADCC) 및 보체 매개된 세포독성(CDC) 분석(미국 특허제 5,500,362); 그리고 작용 활성 또는 조혈 분석(참조: WO 95/27062)을 포함한다. 항-VEGF 항체는 통상적으로 다른 VEGF 동족체 예컨대 VEGF-B 또는 VEGF-C, 뿐만 아니라 다른 성장 인자, 예컨대 PlGF, PDGF, 또는 bFGF에도 결합하지 않을 것이다. 한 실시형태에서, 항-VEGF 항체는 하이브리도마 ATCC HB 10709에 의해 생산된 단클론 항-VEGF 항체 A4.6.1과 동일한 에피토프에 결합하는 단클론 항체이다. 또 다른 실시형태에서, 항-VEGF 항체는 Presta 외의 문헌(Cancer Res. 57:4593-4599, 1997)에 따라 생성된 재조합 인간화 항-VEGF 단클론 항체로서, 베바시주맙(BV; AVASTIN®)으로 알려진 항체를 포함하지만, 이에 제한되는 것은 아니다.
"rhuMAb VEGF" 또는 "AVASTIN®"으로도 알려진 항-VEGF 항체 "베바시주맙(BV)"은 Presta 외의 문헌(Cancer Res. 57:4593-4599, 1997)에 따라 생성된 재조합 인간화 항-VEGF 단클론 항체이다. 이것은 돌연변이된 인간 IgG1 프레임워크 영역 및 인간 VEGF가 이의 수용체에 결합하는 것을 차단하는 뮤린 항-hVEGF 단클론 항체 A.4.6.1의 항원 결합 상보성 결정 영역을 포함한다. 프레임워크 영역의 대부분이 포함되는, 베바시주맙의 아미노산 서열 중 대략 93%는 인간 IgG1로부터 유래되고, 상기 서열의 약 7%는 뮤린 항체 A4.6.1로부터 유래된다. 베바시주맙은 약 149,000 달톤의 분자량을 가지며 당화되어 있다. 베바시주맙 및 기타 인간화 항-VEGF 항체는 2005년 2월 26일에 등록된 미국 특허 제6,884,879호에 기재되어 있으며, 그 전체 내용은 본원에 명시적으로 참조로 포함된다.
II. 암 치료 방법 및 조성물
A. PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체를 포함하는 방법
한 양상에서, 본 발명은 암을 갖는 대상체를 치료하는 방법을 제공하며, 이 방법은 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하는, 세포 예정사 단백질 1(PD-1) 및 림프구 활성화 유전자 3(LAG3)을 표적으로 하는 이중특이성 항체의 1회 이상의 투여 주기를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하고, 이 때 이 방법은 3주마다 약 600 mg 고정 용량(예를 들어, 600 mg 고정 용량)의 이중특이성 항체를 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.
D-1 및 LAG3을 표적으로 하는 예시적인 이중특이성 항체가 아래 섹션 VIII에 제공된다. PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체의 특별한 예는 본원에 정의된 PD1-LAG3이다.
D-1 및 LAG3의 이중 억제에 대한 임상적 개념 증명은 최근 이전에 치료받지 않은 전이성 또는 절제불가능한 흑색종 환자에서 렐라틀리맙과 니볼루맙의 조합에 의해 제공되었다(Tawbi 외, N Engl J Med, 386(1): 24-34, 2022). 기능 장애가 있는 종양 특이적 T 림프구 상의 PD-1과 LAG-3를 모두 표적으로 함으로써 PD-1과 LAG3를 표적으로 하는 이중특이성 항체는 효과적인 항-종양 면역 반응을 회복하고 암 환자에게 현재 사용 가능한 체크포인트 억제제보다 훨씬 더 많은 생존 혜택을 제공하는 것을 목표로 한다. PD-1/LAG-3 공동 발현 기능 장애 T 세포를 우선적으로 표적하고 종양 미세 환경에서 Treg를 발현하는 LAG-3의 감소된 표적화 가능성에 의해, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는 항-종양 면역 반응을 회복함과 동시에 Treg 매개 면역억제 효과를 재활성화시키지 않을 수 있다.
일부 양상에서, 1회 이상의 투여 주기 각각의 길이는 21일이다. 일부 양상에서, 1회 이상의 투여 주기 각각의 1일차에 대상체에게 상기 이중특이성 항체를 투여(예를 들어, 정맥내 투여)하는 단계를 포함한다.
암은 고형 종양(예를 들어, LAG3-발현 CD8+ T 세포를 포함하는 종양 미세환경을 갖는 고형 종양)일 수 있다. 예를 들어, 일부 양상에서, 암은 피부암(예를 들어, 흑색종), 간암(예를 들어, 간세포 암종(HCC)), 폐암(예를 들어, 비소세포폐암(NSCLC)), 콩팥암, 신장암(예를 들어, 신장세포 암종(RCC)), 방광암(예를 들어, 전이성 요로상피 암종(mUC)), 유방암(예를 들어, 삼중 음성 유방암(TNBC)), 식도암(예를 들어, 식도 편평 세포 암종(ESCC)), 췌장암, 자궁경부암, 두경부암, 위암, 대장암, 또는 난소암일 수 있다. 일부 양상에서, 암은 피부암(예를 들어, 흑색종), 간암(예를 들어, HCC), 폐암(예를 들어, NSCLC), 신장암, 신장암(예를 들어, RCC), 방광암(예를 들어, mUC), 유방암(예를 들어, TNBC) 또는 식도암(예를 들어, ESCC)이다. 암은 국소 진행성 또는 전이성 일 수 있다.
피부암이 흑색종인 양상에서, 흑색종은 예를 들어, 이전에 치료받지 않은 절제불가능 또는 전이성 흑색종(예를 들어, 미국 암 연합 위원회(AJCC) 병기 결정 시스템에 따라 조직학적으로 확인된 절제불가능 또는 전이성 흑색종(절제불가능 III 또는 IV기)일 수 있다.일부 양상에서, 흑색종은 (a) 측정가능한 림프절 전이가 있는 III기 흑색종; (b) 절제불가능 III기 흑색종; 또는 (c) IV기 흑색종이다. 일부 양상에서, 흑색종은 점막 흑색종 또는 포도막 흑색종이 아니다.
일부 양상에서, 대상체는 이전에 전신 항암 요법을 받은 적이 없다.
일부 양상에서, 대상체는 이전에 면역조절제를 포함하는 항암 요법으로 치료받은 적이 없다, 예를 들어, 체크포인트 억제제(CPI)를 포함하는 항암제로 치료받은 적이 없거나, 예를 들어, 항-세포예정사 리간드 1(PD-L1)/PD-1 제제로 치료받은 적이 없거나 또는 항-세포독성 T 림프구 관련 항원(CTLA-4) 제제로 치료받은 적이 없다. 다른 양상에서, 대상체는 이전에 보조제 또는 신보조 요법으로서 면역조절제(예를 들어, CPI)로 치료를 받은 적이 있다.
일부 양상에서, 대상체는 이전에 전이성 또는 절제불가능한 질환에 대해 치료받은 적이 없다.
일부 양상에서, 대상체는 이전에 항-LAG3 요법으로 치료받은 적이 없다.
일부 양상에서, 이중특이성 항체는 종양에서 적어도 90% LAG3 수용체 점유율(RO)을 달성한다, 예를 들어, 종양에서 적어도 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100% RO를 달성한다.
일부 양상에서, 대상체는 인간이다.
B. PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체와 베바시주맙을 포함하는 방법
일부 양상에서, 상기 방법은 대상체에게 VEGF 길항제, 예를 들어 항-VEGF 항체(예를 들어 베바시주맙)를 투여하는 단계(예를 들어, 정맥내 투여)를 추가로 포함한다. 예시적인 VEGF 길항제는 아래 섹션 IX에 제공된다.
일부 양상에서, VEGF 길항제는 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체 이전에 투여된다. 다른 양상에서, VEGF 길항제는 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체 이후에 투여된다. 추가 양상에서, VEGF 길항제 및 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는 동시에 투여된다.
일부 양상에서, 상기 방법은 대상체에게 VEGF 길항제(예를 들어, 베바시주맙)를 약 15 mg/kg의 용량(예를 들어, 15 mg/kg의 용량)으로 3주마다 투여하는 단계를 포함한다.
일부 양상에서, 1회 이상의 투여 주기 각각의 길이가 21일이고, 상기 방법은 1회 이상의 투여 주기 각각의 1일차에 대상체에게 VEGF 길항제(예를 들어, 베바시주맙)를 투여하는 단계를 포함한다.
따라서, 한 양상에서, 본 발명은 암을 갖는 대상체를 치료하는 방법을 제공하고, 이 방법은 대상체에게 (1) PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원-결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하는, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체(예를 들어, 아래 섹션 VIII에 제공된 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체) 및 (2) VEGF 길항제(예를 들어, 베바시주맙)를 1회 이상의 투여 주기로 투여하는 단계를 포함하고, 이 때 상기 방법은 상기 이중특이성 항체를 3주마다 600 mg의 고정 용량으로 그리고 VEGF 길항제를 3주마다 15 mg/kg의 용량으로 투여하는 단계를 포함한다.
다른 양상에서, 상기 방법은 대상체에게 VEGF 길항제(예를 들어, 베바시주맙)를 약 10 mg/kg의 용량(예를 들어, 10 mg/kg의 용량)으로 2주마다 투여하는 단계를 추가로 포함한다. 일부 양상에서, 1회 이상의 투여 주기 각각의 길이가 28일이고, 상기 방법은 1회 이상의 투여 주기 각각의 1일차 및 15일차에 대상체에게 VEGF 길항제(예를 들어, 베바시주맙)를 투여하는 단계를 포함한다.
또 다른 양상에서 본 발명은 암을 갖는 대상체를 치료하는 방법에 사용하기 위한 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체(예를 들어, 상기 방법 중 어느 하나에 사용하기 위한 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체)를 제공하며, 이 때 이러한 이중특이성 항체는 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하고, 그리고 상기 방법은 대상체에게 3주마다 600 mg의 고정 용량의 이중특이성 항체를 투여하는 단계를 포함한다. PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체의 특정한 예는 본원에 정의된 PD1-LAG3이다.
또 다른 양상에서, 본 발명은 암을 갖는 대상체를 치료하기 위한 약제의 제조에 있어서 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체의 용도를 제공하며, 이 때 이러한 이중특이성 항체는 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하고, 그리고 이러한 이중특이성 항체는 대상체에게 3주마다 600 mg의 고정 용량으로 투여된다.
C. PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체 및 항-TIGIT 길항제 항체를 포함하는 방법
일부 양상에서, 상기 방법은 대상체에게 항-TIGIT 길항제 항체(예를 들어, 티라골루맙)를 투여(예를 들어, 정맥내 투여)하는 단계를 추가로 포함한다.
예시적인 항-TIGIT 길항제 항체는 아래 섹션 VII에 제공된다.
일부 양상에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체 이전에 투여된다. 다른 양상에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체 이후에 투여된다. 추가 양상에서, 항-TIGIT 길항제 항체 및 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는 동시에 투여된다.
일부 양상에서, 상기 방법은 항-TIGIT 길항제 항체(예를 들어, 티라골루맙)를 3주마다 약 600 mg의 고정 용량(예를 들어, 600 mg의 고정 용량)으로 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.
일부 양상에서, 1회 이상의 투여 주기 각각의 길이가 21일이고, 상기 방법은 1회 이상의 투여 주기 각각의 약 1일차(예를 들어, 1일차)에 대상체에게 항-TIGIT 길항제 항체를 투여하는 단계를 포함한다.
따라서, 한 양상에서, 본 발명은 암을 갖는 대상체를 치료하는 방법을 제공하고, 이 방법은 대상체에게 (1) PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원-결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하는, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체(예를 들어, 아래 섹션 VIII에 제공된 PD-1 및 LAG3; 특히 본원에 정의된 PD1-LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체) 및 (2) 항-TIGIT 길항제 항체(예를 들어, 티라골루맙)를 1회 이상의 투여 주기로 투여하는 단계를 포함하고, 이 때 상기 방법은 상기 이중특이성 항체를 3주마다 600 mg의 고정 용량으로 그리고 항-TIGIT 길항제 항체를 3주마다 600 mg/kg의 고정 용량으로 투여하는 단계를 포함한다.
III. 간암의 치료 방법 및 조성물
A. PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체를 포함하는 방법
한 양상에서, 본 발명은 간암을 갖는 대상체를 치료하는 방법을 제공하며, 이 방법은 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하는, 세포 예정사 단백질 1(PD-1) 및 림프구 활성화 유전자 3(LAG3)을 표적으로 하는 이중특이성 항체를 1회 이상의 투여 주기로 대상체에게 투여하는 단계를 포함하고, 이 때 이 방법은 3주마다 약 600 mg 고정 용량(예를 들어, 600 mg 고정 용량)의 이중특이성 항체를 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.
D-1 및 LAG3을 표적으로 하는 예시적인 이중특이성 항체가 아래 섹션 VIII에 제공된다. PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체의 특별한 예는 본원에 정의된 PD1-LAG3이다.
또 다른 양상에서, 본 발명은 간암을 갖는 대상체를 치료하는 방법을 제공하며, 이 방법은 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하는, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체를 1회 이상의 투여 주기로 대상체에게 투여하는 단계를 포함하고, 이 때 이 방법은 3주마다 1200 mg 고정 용량의 이중특이성 항체를 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.
일부 양상에서, 1회 이상의 투여 주기 각각의 길이는 21일이다. 일부 양상에서, 1회 이상의 투여 주기 각각의 1일차에 대상체에게 상기 이중특이성 항체를 투여(예를 들어, 정맥내 투여)하는 단계를 포함한다.
또 다른 양상에서, 본 발명은 간암을 갖는 대상체를 치료하는 방법을 제공하며, 이 방법은 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하는, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체를 1회 이상의 투여 주기로 대상체에게 투여하는 단계를 포함하고, 이 때 이 방법은 2주마다 2100 mg 고정 용량의 이중특이성 항체를 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.
일부 양상에서, 1회 이상의 투여 주기 각각의 길이는 28일이다. 일부 양상에서, 1회 이상의 투여 주기 각각의 1일차 및 15일차에 대상체에게 상기 이중특이성 항체를 투여(예를 들어, 정맥내 투여)하는 단계를 포함한다.
일부 양상에서, 간암은 간세포 암종(HCC)이다. 일부 양상에서, 간암(예를 들어, HCC)은 LAG3-발현 CD8+ T 세포를 포함하는 종양 미세환경을 갖는다. HCC는 예를 들어, 국소 진행성, 전이성 및/또는 절제불가능일 수 있다.
일부 양상에서, 대상체는 이전에 전신 항암 요법을 받은 적이 없다.
일부 양상에서, 대상체는 이전에 면역조절제를 포함하는 항암 요법으로 치료받은 적이 없다, 예를 들어, 체크포인트 억제제(CPI)를 포함하는 항암제로 치료받은 적이 없거나, 예를 들어, 항-세포예정사 리간드 1(PD-L1)/PD-1 제제로 치료받은 적이 없거나 또는 항-세포독성 T 림프구 관련 항원(CTLA-4) 제제로 치료받은 적이 없다. 다른 양상에서, 대상체는 이전에 보조제 또는 신보조 요법으로서 면역조절제(예를 들어, CPI)로 치료를 받은 적이 있다.
일부 양상에서, 대상체는 이전에 전이성 또는 절제불가능한 질환에 대해 치료받은 적이 없다.
일부 양상에서, 대상체는 이전에 항-LAG3 요법으로 치료받은 적이 없다.
일부 양상에서, 이중특이성 항체는 종양에서 적어도 90% LAG3 수용체 점유율(RO)을 달성한다, 예를 들어, 종양에서 적어도 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100% RO를 달성한다.
일부 양상에서, 대상체는 인간이다.
B. PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체와 베바시주맙을 포함하는 방법
일부 양상에서, 상기 방법은 대상체에게 VEGF 길항제, 예를 들어 항-VEGF 항체(예를 들어 베바시주맙)를 투여하는 단계(예를 들어, 정맥내 투여)를 추가로 포함한다. 예시적인 VEGF 길항제는 아래 섹션 IX에 제공된다.
일부 양상에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체 이전에 투여된다. 다른 양상에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체 이후에 투여된다. 추가 양상에서, 항-TIGIT 길항제 항체 및 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는 동시에 투여된다.
일부 양상에서, 상기 방법은 대상체에게 VEGF 길항제(예를 들어, 베바시주맙)를 약 15 mg/kg의 용량(예를 들어, 15 mg/kg의 용량)으로 3주마다 투여하는 단계를 포함한다.
일부 양상에서, 1회 이상의 투여 주기 각각의 길이가 21일이고, 상기 방법은 1회 이상의 투여 주기 각각의 1일차에 대상체에게 VEGF 길항제(예를 들어, 베바시주맙)를 투여하는 단계를 포함한다.
따라서, 한 양상에서, 본 발명은 간암을 갖는 대상체를 치료하는 방법을 제공하고, 이 방법은 대상체에게 (1) PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원-결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하는, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체(예를 들어, 아래 섹션 VIII에 제공된 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체 그리고 특히 PD1-LAG3) 및 (2) VEGF 길항제(예를 들어, 베바시주맙)를 1회 이상의 투여 주기로 투여하는 단계를 포함하고, 이 때 상기 방법은 상기 이중특이성 항체를 3주마다 600 mg의 고정 용량으로 그리고 VEGF 길항제를 3주마다 15 mg/kg의 용량으로 투여하는 단계를 포함한다.
또 다른 양상에서, 본 발명은 간암을 갖는 대상체를 치료하는 방법을 제공하고, 이 방법은 대상체에게 (1) PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원-결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하는, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체(예를 들어, 아래 섹션 VIII에 제공된 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체) 및 (2) VEGF 길항제를 1회 이상의 투여 주기로 투여하는 단계를 포함하고, 이 때 상기 방법은 상기 이중특이성 항체를 3주마다 1200 mg의 고정 용량으로 그리고 VEGF 길항제를 3주마다 15 mg/kg의 용량으로 투여하는 단계를 포함한다.
다른 양상에서, 상기 방법은 대상체에게 VEGF 길항제(예를 들어, 베바시주맙)를 약 10 mg/kg의 용량(예를 들어, 10 mg/kg의 용량)으로 2주마다 투여하는 단계를 추가로 포함한다. 일부 양상에서, 1회 이상의 투여 주기 각각의 길이가 28일이고, 상기 방법은 1회 이상의 투여 주기 각각의 1일차 및 15일차에 대상체에게 VEGF 길항제(예를 들어, 베바시주맙)를 투여하는 단계를 포함한다.
따라서, 또 다른 양상에서, 본 발명은 간암을 갖는 대상체를 치료하는 방법을 제공하고, 이 방법은 대상체에게 (1) PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원-결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하는, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체(예를 들어, 아래 섹션 VIII에 제공된 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체) 및 (2) VEGF 길항제(예를 들어, 베바시주맙)를 1회 이상의 투여 주기로 투여하는 단계를 포함하고, 이 때 상기 방법은 상기 이중특이성 항체를 2주마다 2100 mg의 고정 용량으로 그리고 VEGF 길항제를 2주마다 10 mg/kg의 용량으로 투여하는 단계를 포함한다.
IV. 흑색종에 대한 치료 방법 및 조성물
A. 항-TIGIT 길항제 항체 및 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체를 포함하는 방법
한 양상에서, 본 발명은 흑색종을 갖는 대상체를 치료하는 방법을 제공하고, 이 방법은 항-TIGIT 길항제 항체, 및 세포 예정사 단백질 1(PD-1)에 특이적으로 결합하는 제1 항원-결합 도메인 및 림프구 활성화 유전자 3(LAG3)에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하는 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체를 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-TIGIT 길항제 항체 및 이중특이성 항체는 1회 이상의 투여 주기를 포함하는 투여 요법으로 대상체에게 투여된다.
일부 양상에서, 상기 방법은 대상체에게 (a) 항-TIGIT 길항제 항체를 3주마다 약 600 mg의 고정 용량(예를 들어, 600 mg의 고정 용량)으로; 및 (b) 상기 이중특이성 항체를 3주마다 약 2100mg의 고정 용량(예를 들어, 2100mg의 고정 용량)으로 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.
특정 양상에서, 상기 방법은 대상체에게 (a) 항-TIGIT 길항제 항체를 3주마다 약 600 mg의 고정 용량(예를 들어, 600 mg의 고정 용량)으로; 및 (b) 상기 이중특이성 항체를 3주마다 약 600mg의 고정 용량(예를 들어, 600mg의 고정 용량)으로 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.
또 다른 양상에서, 본 발명은 흑색종을 갖는 대상체를 치료하는 방법을 제공하고, 이 방법은 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원-결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하는, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체(예를 들어, 아래 섹션 VIII에 제공된 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체, 특히 PD1-LAG3)를 1회 이상의 투여 주기로 대상체에게 투여하는 단계를 포함하고, 이 때 상기 방법은 대상체에게 상기 이중특이성 항체를 3주마다 600 mg의 고정 용량으로 투여하는 단계를 포함하고, 그리고 이 때 흑색종은 (a) 절제불가능 III기 흑색종; 또는 (b) IV기 흑색종(예를 들어, 미국 암 연합 위원회(AJCC) 병기 결정 시스템에 따라 조직학적으로 확인된 절제불가능 또는 전이성 흑색종(절제불가능 III기 또는 IV기))이다.
일부 양상에서, 1회 이상의 투여 주기 각각의 길이는 21일이다. 일부 양상에서, 1회 이상의 투여 주기 각각의 약 1일차(예를 들어, 1일차)에 대상체에게 상기 항-TIGIT 길항제 항체 및 상기 이중특이성 항체를 투여하는 단계를 포함한다.
일부 양상에서, 상기 방법은 대상체에게 상기 이중특이성 항체를 항-TIGIT 길항제 항체 이전에 투여하는 단계를 포함한다. 다른 양상에서, 상기 방법은 이중특이성 항체 이전에 항-TIGIT 길항제 항체를 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.
일부 양상에서, 상기 방법은 대상체에게 상기 이중특이성 항체 및 항-TIGIT 길항제 항체를 정맥내 투여하는 단계를 포함한다.
i. 신보조 요법
일부 양상에서, 1회 이상의 투여 주기는 신보조 요법으로서 투여된다.
일부 양상에서, 항-TIGIT 길항제 항체 및 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는 신보조 요법으로 투여된다.
일부 양상에서, 흑색종은 측정 가능한 림프절 전이가 있는 III기 흑색종이다.
일부 양상에서, 대상체는 치료 시작 전 6개월 이내에 통과 전이(in-transit metastases)를 경험하지 않았다.
일부 양상에서, 대상체는 이전에 암 면역요법으로 치료받은 적이 없다.
일부 양상에서, 흑색종은 점막 흑색종 또는 포도막 흑색종이 아니다.
일부 양상에서, 제1 투여 주기는 수술 전에 시작된다.
일부 양상에서, 적어도 1회의 투여 주기 또는 (예를 들어, 1회, 2회, 3회, 4회 또는 그 이상의 투여 주기) 또는 적어도 2회의 투여 주기(예를 들어, 2회, 3회, 4회 또는 그 이상의 투여 주기)는 수술 전에 완료된다. 일부 양상에서, 수술 전에 2회의 투여 주기가 완료된다.
일부 양상에서, 수술은 마지막 투여 주기 후 약 1주 이내에 수행된다.
일부 양상에서, 수술은 완전 림프절 절제술(CLND)이다.
일부 양상에서, 치료는 참조 pRR 대비 병리학적 반응률(pRR)의 증가를 초래한다. 일부 양상에서, 참조 pRR은 대조 요법을 받은 대상체 집단의 pRR이다. 일부 양상에서, 대조 요법은 항-TIGIT 길항제 항체를 포함하고 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체를 포함하지 않는 요법; PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체를 포함하고 항-TIGIT 길항제 항체를 포함하지 않는 요법; 또는 이필리무맙과 니볼루맙을 포함하는 요법이다.
일부 양상에서, 치료는 참조 EFS 대비 무사건 생존율(EFS)의 증가; 참조 RFS 대비 무재발 생존율(RFS)의 증가; 참조 OS 대비 전체 생존(OS)의 증가; 및/또는 참조 ORR 대비 전체 반응률(ORR)의 증가를 초래한다. 일부 양상에서, 참조 EFS, RFS, OS, 또는 ORR은 대조 요법을 받은 대상체 집단의 것이다. 일부 양상에서, 대조 요법은 항-TIGIT 길항제 항체를 포함하고 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체를 포함하지 않는 요법; PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체를 포함하고 항-TIGIT 길항제 항체를 포함하지 않는 요법; 또는 이필리무맙과 니볼루맙을 포함하는 요법이다.
ii. IV기 흑색종의 치료
일부 양상에서, 흑색종은 IV기 흑색종이다.
일부 양상에서, (a) 대상체는 이전에 2차 이하의 전신 치료를 받았고; 또는 (b) 흑색종은 BRAF-돌연변이체 흑색종이고 대상체는 이전에 3차 이하의 전신 치료를 받은 적이 있다.
일부 양상에서, 치료는 참조 ORR 대비 전체 반응률(ORR)의 증가를 초래한다. 일부 양상에서, 참조 ORR은 (a) PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체를 포함하고 항-TIGIT 길항제 항체를 포함하지 않는 치료; 및/또는 (b) 항-TIGIT 길항제 항체를 포함하고 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체를 포함하지 않는 치료를 받은 대상체 집단의 ORR이다.
일부 양상에서, 상기 치료는 참조 PFS 대비 무진행 생존(PFS)의 증가; 참조 DOR 대비 반응 기간(DOR)의 증가; 참조 OS 대비 OS의 증가; 참조 DCR 대비 질환 통제율(DCR, 예를 들어, 12주 이상 동안 안정한 질환, 완전 반응(CR) 또는 부분 반응(PR))의 증가를 초래한다. 일부 양상에서, 참조 PFS, OS, DOR, 또는 DCR은 대조 요법을 받은 대상체 집단의 것이다. 일부 양상에서, 대조 요법은 항-TIGIT 길항제 항체를 포함하고 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체를 포함하지 않는 요법; PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체를 포함하고 항-TIGIT 길항제 항체를 포함하지 않는 요법; 또는 이필리무맙과 니볼루맙을 포함하는 요법이다.
일부 양상에서, 대상체는 인간이다.
B. PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체를 포함하는 방법
또 다른 양상에서, 본 발명은 흑색종을 갖는 대상체를 치료하는 방법을 제공하고, 이 방법은 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원-결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하는 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체를 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시양태에서, 이중특이성 항체는 1회 이상의 투여 주기를 포함하는 투여 요법으로 대상체에게 투여된다. 일부 실시형태에서, 1회 이상의 투여 주기는 신보조 요법으로서 투여된다.
일부 양상에서, 상기 방법은 대상체에게 상기 이중특이성 항체를 3주마다 약 2100mg의 고정 용량(예를 들어, 2100mg의 고정 용량)으로 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.
특정 양상에서, 상기 방법은 대상체에게 상기 이중특이성 항체를 3주마다 약 600mg의 고정 용량(예를 들어, 600mg의 고정 용량)으로 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.
일부 양상에서, 1회 이상의 투여 주기 각각의 길이는 21일이다. 일부 양상에서, 1회 이상의 투여 주기 각각의 약 1일차(예를 들어, 1일차)에 대상체에게 상기 이중특이성 항체를 투여하는 단계를 포함한다.
일부 양상에서, 상기 방법은 대상체에게 상기 이중특이성 항체를 정맥내 투여하는 단계를 포함한다.
일부 양상에서, 흑색종은 측정 가능한 림프절 전이가 있는 III기 흑색종이다.
일부 양상에서, 대상체는 치료 시작 전 6개월 이내에 통과 전이(in-transit metastases)를 경험하지 않았다.
일부 양상에서, 대상체는 이전에 암 면역요법으로 치료받은 적이 없다.
일부 양상에서, 흑색종은 점막 흑색종 또는 포도막 흑색종이 아니다.
일부 양상에서, 제1 투여 주기는 수술 전에 시작된다.
일부 양상에서, 적어도 1회의 투여 주기 또는 (예를 들어, 1회, 2회, 3회, 4회 또는 그 이상의 투여 주기) 또는 적어도 2회의 투여 주기(예를 들어, 2회, 3회, 4회 또는 그 이상의 투여 주기)는 수술 전에 완료된다. 일부 양상에서, 수술 전에 2회의 투여 주기가 완료된다.
일부 양상에서, 수술은 마지막 투여 주기 후 약 1주 이내에 수행된다.
일부 양상에서, 수술은 완전 림프절 절제술(CLND)이다.
일부 양상에서, 치료는 참조 pRR 대비 병리학적 반응률(pRR)의 증가를 초래한다. 일부 양상에서, 참조 pRR은 대조 요법을 받은 대상체 집단의 pRR이다. 일부 양상에서, 대조 요법은 이필리무맙 및 니볼루맙을 포함하는 요법이다.
일부 양상에서, 치료는 참조 EFS 대비 무사건 생존율(EFS)의 증가; 참조 RFS 대비 무재발 생존율(RFS)의 증가; 참조 OS 대비 전체 생존(OS)의 증가; 및/또는 참조 ORR 대비 전체 반응률(ORR)의 증가를 초래한다. 일부 양상에서, 참조 EFS, RFS, OS, 또는 ORR은 대조 요법을 받은 대상체 집단의 것이다. 일부 양상에서, 대조 요법은 이필리무맙 및 니볼루맙을 포함하는 요법이다.
일부 양상에서, 대상체는 인간이다.
C. 항-TIGIT 길항제 항체 및 PD-1 축 결합 길항제를 포함하는 방법
또 다른 양상에서, 본 발명은 흑색종을 갖는 대상체를 치료하는 방법을 특징으로 하며, 이 방법은 대상체에게 항-TIGIT 길항제 항체 및 PD-1 축 결합 길항제를 1회 이상의 투여 주기로 투여하는 단계를 포함하며, 이 때 1회 이상의 투여 주기는 신보조 요법으로서 투여된다. 또 다른 양상에서, 본 발명은 흑색종을 갖는 대상체를 치료하는 방법을 특징으로 하며, 이 방법은 대상체에게 항-TIGIT 길항제 항체 및 PD-1 축 결합 길항제를 투여하는 단계를 포함하고, 이 때 항-TIGIT 길항제 항체 및 PD-1 축 결합 길항제는 신보조 요법으로서 투여된다.
일부 양상에서, 상기 방법은 대상체에게 (a) 항-TIGIT 길항제 항체를 3주마다 약 600 mg의 고정 용량(예를 들어, 600 mg의 고정 용량)으로; 및 (b) 상기 PD-1 축 결합 길항제를 3주마다 약 600mg의 고정 용량(예를 들어, 600mg의 고정 용량)으로 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.
일부 양상에서, 1회 이상의 투여 주기 각각의 길이는 21일이다.
일부 양상에서, 1회 이상의 투여 주기 각각의 약 1일차(예를 들어, 1일차)에 대상체에게 상기 항-TIGIT 길항제 항체 및 상기 PD-1 축 결합 길항제를 투여하는 단계를 포함한다.
일부 양상에서, 상기 방법은 대상체에게 상기 PD-1 축 결합 길항제를 항-TIGIT 길항제 항체 이전에 투여하는 단계를 포함한다. 다른 양상에서, 상기 방법은 대상체에게 PD-1 축 결합 길항제 이전에 항-TIGIT 길항제 항체를 투여하는 단계를 포함한다.
일부 양상에서, 상기 방법은 대상체에게 상기 PD-1 축 결합 길항제 및 항-TIGIT 길항제 항체를 정맥내 투여하는 단계를 포함한다.
일부 양상에서, 흑색종은 측정 가능한 림프절 전이가 있는 III기 흑색종이다.
일부 양상에서, 대상체는 치료 시작 전 6개월 이내에 통과 전이(in-transit metastases)를 경험하지 않았다.
일부 양상에서, 대상체는 이전에 암 면역요법으로 치료받은 적이 없다.
일부 양상에서, 흑색종은 점막 흑색종 또는 포도막 흑색종이 아니다.
일부 양상에서, 제1 투여 주기는 수술 전에 시작된다.
일부 양상에서, 적어도 1회의 투여 주기 또는 (예를 들어, 1회, 2회, 3회, 4회 또는 그 이상의 투여 주기) 또는 적어도 2회의 투여 주기(예를 들어, 2회, 3회, 4회 또는 그 이상의 투여 주기)는 수술 전에 완료된다. 일부 양상에서, 수술 전에 2회의 투여 주기가 완료된다.
일부 양상에서, 수술은 마지막 투여 주기 후 약 1주 이내에 수행된다.
일부 양상에서, 수술은 완전 림프절 절제술(CLND)이다.
일부 양상에서, 치료는 참조 pRR 대비 병리학적 반응률(pRR)의 증가를 초래한다. 일부 양상에서, 참조 pRR은 대조 요법을 받은 대상체 집단의 pRR이다. 일부 양상에서, 대조 요법은 항-TIGIT 길항제 항체를 포함하고 PD-1 축 결합 길항제를 포함하지 않는 요법; PD-1 축 결합 길항제를 포함하고 항-TIGIT 길항제 항체를 포함하지 않는 요법; 또는 이필리무맙과 니볼루맙을 포함하는 요법이다.
일부 양상에서, 치료는 참조 EFS 대비 무사건 생존율(EFS)의 증가; 참조 RFS 대비 무재발 생존율(RFS)의 증가; 참조 OS 대비 전체 생존(OS)의 증가; 및/또는 참조 ORR 대비 전체 반응률(ORR)의 증가를 초래한다. 일부 양상에서, 참조 EFS, RFS, OS, 또는 ORR은 대조 요법을 받은 대상체 집단의 것이다. 일부 양상에서, 대조 요법은 항-TIGIT 길항제 항체를 포함하고 PD-1 축 결합 길항제를 포함하지 않는 요법; PD-1 축 결합 길항제를 포함하고 항-TIGIT 길항제 항체를 포함하지 않는 요법; 또는 이필리무맙과 니볼루맙을 포함하는 요법이다.
일부 양상에서, 대상체는 인간이다.
D. 흑색종 치료 방법에 사용하기 위한 제제
i. PD-1 및 LAG3를 표적으로 하는 이중특이성 항체
D-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체 및 이에 대한 투여 요법의 추가 예는 아래 섹션 VIII에 제공된다. PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체의 특별한 예는 본원에 정의된 PD1-LAG3이다.
ii. 항-TIGIT 길항제 항체
예시적인 항-TIGIT 길항제 항체 및 이에 대한 투여 요법은 아래 섹션 VII에 제공된다.
iii. PD-1 축 결합 길항제
예시적인 PD-1 축 결합 길항제 및 이에 대한 투여 요법은 아래 섹션 X에 제공된다.
V. PD-L1 발현의 평가
D-L1의 발현은 본원에 기재된 임의의 방법 및 용도를 위한 조성물에 따라 치료되는 대상체에서 평가될 수 있다. 이러한 사용 방법 및 조성물은 암(예를 들어, 식도암(예를 들어, 전이성 식도암))을 갖는 대상체로부터 얻은 생물학적 샘플(예를 들어, 종양 샘플)에서 PD-L1의 발현 수준을 결정하는 단계를 포함할 수 있다. 다른 예들에서, 상기 대상체로부터 수득한 생물학적 샘플(예를 들어, 종양 샘플)에서 PD-L1의 발현 수준은 치료 시작 전 또는 치료 시작 후에 결정되었다. PD-L1 발현은 임의의 적합한 접근법을 사용하여 결정할 수 있다. 예를 들어, PD-L1 발현은 미국 특허 출원 제 15/787,988 및 15/790,680호에 기재된 바와 같이 결정할 수 있다. 임의의 적합한 종양 샘플은 포르말린 고정 및 파라핀 포매(FFPE) 종양 샘플, 보관 종양 샘플, 냉장 종양 샘플, 또는 냉동 종양 샘플일 수 있다.
예를 들어, PD-L1 발현은 종양 샘플 내에서 PD-L1의 검출가능한 발현 수준을 발현하는 종양 침윤성 면역 세포가 차지하는 백분율의 관점에서 PD-L1의 검출가능한 발현 수준을 발현하는 종양 샘플에서 종양 침윤성 면역 세포의 백분율로서, 및/또는 PD-L1의 검출가능한 발현 수준을 발현하는 종양 샘플 내 종양 세포의 백분율로서 결정될 수 있다. 임의의 선행하는 예들에서, 종양 샘플 내에서 종양 침윤성 면역 세포가 차지하는 백분율은, 예를 들어 항-PD-L1 항체(예를 들어, SP142 항체)를 이용한 IHC로 평가할 때, 대상체로부터 수득한 샘플의 절편에서 종양 침윤성 면역 세포에 의해 커버되는 종양 구역의 백분율의 관점에서일 수 있는 것으로 이해되어야 한다. 예를 들어, SP142 (벤타나), SP263 (벤타나), 22C3 (Dako), 28-8 (Dako), E1L3N (Cell Signaling Technology), 4059 (ProSci, Inc.), h5H1 (Advanced Cell Diagnostics), 및 9A11를 비롯한 임의의 적합한 항-PD-L1 항체가 사용될 수 있다. 일부 예들에서, 상기 항-PD-L1 항체는 SP142이다. 일부 예들에서, 상기 항-PD-L1 항체는 SP263이다.
일부 예들에서, 상기 대상체로부터 수득한 종양 샘플은 PD-L1의 검출가능한 발현 수준이 상기 종양 샘플 내 종양 세포의 1% 미만, 상기 종양 샘플 내 종양 세포의 1% 이상, 상기 종양 샘플 내 종양 세포의 1% 내지 5% 미만, 상기 종양 샘플 내 종양 세포의 5% 이상, 상기 종양 샘플 내 종양 세포의 5% 내지 50% 미만, 또는 상기 종양 샘플에서 종양 세포의 50% 이상이다.
일부 예들에서, 상기 대상체로부터 수득한 종양 샘플은 종양 침윤성 면역 세포 내 PD-L1의 검출가능한 발현 수준이 상기 종양 샘플의 1% 미만, 상기 종양 샘플의 1% 초과, 상기 종양 샘플의 1% 내지 5% 미만, 상기 종양 샘플의 5% 초과, 상기 종양 샘플의 5% 내지 10% 미만, 또는 상기 종양 샘플의 10% 초과를 포함한다.
일부 양상에서, 본원에 제공된 임의의 방법에 따라 치료된 대상체의 식도암은 PD-L1-양성 종양 세포(TC) 분율 또는 종양 침윤 면역 세포(IC) 분율이 <5%이다. 일부 양상에서, 식도암은 <1%의 PD-L1-양성 TC 분율을 갖는다. 다른 양상에서, 본원에 제공된 임의의 방법에 따라 치료된 대상체의 식도암은 PD-L1-양성 TC 분율 또는 IC 분율이 ≥5%이다. 일부 양상에서, PD-L1은 벤타나 SP142 IHC 분석, 벤타나 SP263 IHC 분석, pharmDx 22C3 IHC 분석, 또는 pharmDx 28-8 IHC 분석을 사용하여 검출된다.
일부 예들에서, 종양 샘플은 각각 표 2 및/또는 표 3에 제시된 진단 평가 기준에 따라 종양 침윤설 면역 세포 및/또는 종양 세포에서 PD-L1 양성에 대해 점수를 매길 수 있다.
표 2. 종양-침윤 면역 세포(IC) IHC 진단 기준
표 3. 종양 세포(TC) IHC 진단 기준
VI. TIGIT 발현 평가
TIGIT의 발현 수준은 본원에 기재된 임의의 방법, 용도 및 사용을 위한 조성물에 따라 치료받은 적이 있는, 암(예를 들어, 식도암(예를 들어, 전이성 식도암))을 갖는 대상체에서 평가될 수 있다. 상기 방법, 용도, 및 사용을 위한 조성물은 상기 대상체로부터 수득한 생물학적 샘플(예를 들어, 종양 샘플)에서 TIGIT의 발현 수준을 결정하는 단계를 포함할 수 있다. 다른 예들에서, 상기 대상체로부터 수득한 생물학적 샘플(예를 들어, 종양 샘플)에서 TIGIT의 발현 수준은 치료 시작 전 또는 치료 시작 후에 결정되었다. TIGIT 발현은 임의의 적합한 접근법을 사용하여 결정할 수 있다. 임의의 적합한 종양 샘플은 포르말린 고정 및 파라핀 포매(FFPE) 종양 샘플, 보관 종양 샘플, 냉장 종양 샘플, 또는 냉동 종양 샘플일 수 있다.
예를 들어, TIGIT 발현은 종양 샘플 내에서 TIGIT의 검출가능한 발현 수준을 발현하는 종양 침윤성 면역 세포가 차지하는 백분율의 관점에서 TIGIT의 검출가능한 발현 수준을 발현하는 종양 샘플에서 종양 침윤성 면역 세포의 백분율로서, 및/또는 TIGIT의 검출가능한 발현 수준을 발현하는 종양 샘플 내 종양 세포의 백분율로서 결정될 수 있다. 임의의 선행하는 예들에서, 종양 샘플 내에서 종양 침윤성 면역 세포가 차지하는 백분율은, 예를 들어, 항-TIGIT 길항제 항체를 이용한 IHC로 평가할 때, 대상체로부터 수득한 샘플의 절편에서 종양 침윤성 면역 세포에 의해 커버되는 종양 구역의 백분율의 관점에서일 수 있는 것으로 이해되어야 한다. 임의의 적합한 항-TIGIT 길항제 항체가 사용될 수 있다. 일부 예에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 10A7이다(WO 2009/126688A3; 미국 특허 제 9,499,596).
VII. 항-TIGIT 길항제 항체
본 발명은 암을 갖는 대상체(예를 들어, 인간)에서 암을 치료하는 데 유용한 항-TIGIT 길항제 항체를 제공한다.
일부 예들에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 티라골루맙(CAS 등록 번호: 1918185-84-8)이다. 티라골루맙(Genentech)은 MTIG7192A로도 알려져 있다.
특정 예들에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 (a) SNSAAWN(서열번호 1)의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1; (b) KTYYRFKWYSDYAVSVKG(서열번호 2)의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2; (c) ESTTYDLLAGPFDY(서열번호 3)의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3; (d) KSSQTVLYSSNNKKYLA(서열번호 4)의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1, (e) WASTRES(서열번호 5)의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2; 및/또는 (f) QQYYSTPFT(서열번호 6)의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3로부터 선택된 적어도 1, 2, 3, 4, 5개 또는 6개 HVR, 또는 상기 HVR들 중 하나 이상 및 서열번호 1-6 중 어느 하나에 적어도 약 90% 서열 동일성(예를 들어, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일성)을 가지는 이의 하나 이상의 변이체의 조합을 포함한다.
일부 예들에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 (a) SNSAAWN(서열번호 1)의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1; (b) KTYYRFKWYSDYAVSVKG(서열번호 2)의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2; (c) ESTTYDLLAGPFDY(서열번호 3)의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3; (d) KSSQTVLYSSNNKKYLA(서열번호 4)의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1; (e) WASTRES(서열번호 5)의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2; 및 (f) QQYYSTPFT(서열번호 6)의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3을 포함할 수 있다. 일부 예들에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 EVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVSSNSAAWNWIRQSPSRGLEWLGKTYYRFKWYSDYAVSVKGRITINPDTSKNQFSLQLNSVTPEDTAVFYCTRESTTYDLLAGPFDYWGQGTLVTVSS(서열번호 17)의 서열 또는 이에 적어도 90% 서열 동일성(예를 들어, 적어도 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 서열 동일성)을 가지는 아미노산 서열 또는 QVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVSSNSAAWNWIRQSPSRGLEWLGKTYYRFKWYSDYAVSVKGRITINPDTSKNQFSLQLNSVTPEDTAVFYCTRESTTYDLLAGPFDYWGQGTLVTVSS(서열번호 18)의 서열 또는 이에 적어도 90% 서열 동일성(예를 들어, 적어도 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 서열 동일성)을 가지는 아미노산 서열을 포함하는 VH 도메인; 및/또는 DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQTVLYSSNNKKYLAWYQQKPGQPPNLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYYSTPFTFGPGTKVEIK(서열번호 19)의 서열 또는 이에 적어도 90% 서열 동일성(예를 들어, 적어도 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 서열 동일성)을 가지는 아미노산 서열을 포함하는 VL 도메인을 가진다. 일부 예들에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 서열번호 17의 서열 또는 이에 적어도 90% 서열 동일성(예를 들어, 적어도 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 서열 동일성)을 가지는 아미노산 서열을 포함하는 VH 도메인 및/또는 서열번호 19의 서열 또는 이에 적어도 90% 서열 동일성(예를 들어, 적어도 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 서열 동일성)을 가지는 아미노산 서열을 포함하는 VL 도메인을 가진다. 일부 예들에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 서열번호 17의 아미노산 서열을 포함하는 VH 도메인 및 서열번호 19의 아미노산 서열을 포함하는 VL 도메인을 가진다. 일부 예들에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 서열번호 18의 서열 또는 이에 적어도 90% 서열 동일성(예를 들어, 적어도 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 서열 동일성)을 가지는 아미노산 서열을 포함하는 VH 도메인 및/또는 서열번호 19의 서열 또는 이에 적어도 90% 서열 동일성(예를 들어, 적어도 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 서열 동일성)을 가지는 아미노산 서열을 포함하는 VL 도메인을 가진다. 일부 예들에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 VH 도메인 및 서열번호 19의 아미노산 서열을 포함하는 VL 도메인을 가진다.
일부 예들에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 중쇄와 경쇄 서열을 포함하고, 이 때: (a) 중쇄는 아미노산 서열: EVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVSSNSAAWNWIRQSPSRGLEWLGKTYYRFKWYSDYAVSVKGRITINPDTSKNQFSLQLNSVTPEDTAVFYCTRESTTYDLLAGPFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(서열번호 23)를 포함하고; 그리고 (b) 경쇄는 아미노산 서열: DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQTVLYSSNNKKYLAWYQQKPGQPPNLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYYSTPFTFGPGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(서열번호 24)를 포함한다.
일부 예들에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 다음과 같은 경쇄 가변 영역 프레임워크 영역들(FR들) 중 적어도 1, 2, 3, 또는 4개: DIVMTQSPDSLAVSLGERATINC(서열번호 7)의 아미노산 서열을 포함하는 FR-L1; WYQQKPGQPPNLLIY(서열번호 8)의 아미노산 서열을 포함하는 FR-L2; GVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYC(서열번호 9)의 아미노산 서열을 포함하는 FR-L3; 및/또는 FGPGTKVEIK(서열번호 10)의 아미노산 서열을 포함하는 FR-L4, 또는 상기 FR들 중 하나 이상의 조합 그리고 서열번호 7-20 중 어느 하나에 적어도 약 90% 서열 동일성(예를 들어, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일성)을 가지는 하나 이상의 이의 변이체들을 추가로 포함한다. 일부 예들에서, 예를 들어, 상기 항체는 DIVMTQSPDSLAVSLGERATINC(서열번호 7)의 아미노산 서열을 포함하는 FR-L1; WYQQKPGQPPNLLIY(서열번호 8)의 아미노산 서열을 포함하는 FR-L2; GVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYC(서열번호 9)의 아미노산 서열을 포함하는 FR-L3; 및 FGPGTKVEIK(서열번호 10)의 아미노산 서열을 포함하는 FR-L4를 추가로 포함한다.
일부 예들에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 다음 중쇄 가변 영역 FR들 중 적어도 1, 2, 3 또는 4개: X1VQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVS(서열번호 11)의 아미노산 서열을 포함하는 FR-H1(이 때 X1은 E 또는 Q임); WIRQSPSRGLEWLG(서열번호 12)의 아미노산 서열을 포함하는 FR-H2; RITINPDTSKNQFSLQLNSVTPEDTAVFYCTR (서열번호 13)의 아미노산 서열을 포함하는 FR-H3; 및/또는 WGQGTLVTVSS(서열번호 14)의 아미노산 서열을 포함하는 FR-H4, 또는 상기 FR들 중 하나 이상의 조합 및 서열번호 11-14 중 어느 하나에 적어도 약 90% 서열 동일성(예를 들어, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일성)을 가지는 하나 이상의 이의 변이체들을 추가로 포함한다. 항-TIGIT 길항제 항체는, 예를 들어, 다음 중쇄 가변 영역 FR들 중 적어도 1, 2, 3 또는 4개: EVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVS(서열번호 15)의 아미노산 서열을 포함하는 FR-H1; WIRQSPSRGLEWLG(서열번호 12)의 아미노산 서열을 포함하는 FR-H2; RITINPDTSKNQFSLQLNSVTPEDTAVFYCTR(서열번호 13)의 아미노산 서열을 포함하는 FR-H3; 및/또는 WGQGTLVTVSS(서열번호 14)의 아미노산 서열을 포함하는 FR-H4, 또는 상기 FR들 중 하나 이상의 조합 및 서열번호 12-15 중 어느 하나에 적어도 약 90% 서열 동일성(예를 들어, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일성)을 가지는 하나 이상의 이의 변이체들을 추가로 포함할 수 있다. 일부 예들에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 EVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVS(서열번호 15)의 아미노산 서열을 포함하는 FR-H1; WIRQSPSRGLEWLG(서열번호 12)의 아미노산 서열을 포함하는 FR-H2; RITINPDTSKNQFSLQLNSVTPEDTAVFYCTR(서열번호 13)의 아미노산 서열을 포함하는 FR-H3; 및 WGQGTLVTVSS (서열번호 14)의 아미노산 서열을 포함하는 FR-H4를 포함한다. 또 다른 예에서, 예를 들어, 항-TIGIT 길항제 항체는 다음 중쇄 가변 영역 FR들 중 적어도 1, 2, 3 또는 4개: QVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVS(서열번호 16)의 아미노산 서열을 포함하는 FR-H1; WIRQSPSRGLEWLG(서열번호 12)의 아미노산 서열을 포함하는 FR-H2; RITINPDTSKNQFSLQLNSVTPEDTAVFYCTR(서열번호 13)의 아미노산 서열을 포함하는 FR-H3; 및/또는 WGQGTLVTVSS(서열번호 14)의 아미노산 서열을 포함하는 FR-H4, 또는 상기 FR들 중 하나 이상의 조합 및 서열번호 12-14 및 16 중 어느 하나에 적어도 약 90% 서열 동일성(예를 들어, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 동일성)을 가지는 하나 이상의 이의 변이체들을 추가로 포함할 수 있다. 일부 예들에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 QVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVS(서열번호 16)의 아미노산 서열을 포함하는 FR-H1; WIRQSPSRGLEWLG(서열번호 12)의 아미노산 서열을 포함하는 FR-H2; RITINPDTSKNQFSLQLNSVTPEDTAVFYCTR(서열번호 13)의 아미노산 서열을 포함하는 FR-H3; 및 WGQGTLVTVSS (서열번호 14)의 아미노산 서열을 포함하는 FR-H4를 포함한다.
또 다른 양상에서, 항-TIGIT 길항제 항체가 제공되며, 이 때 항체는 상기 제공된 예들 중 어느 하나에서와 같은 VH 및 상기 제공된 예들 중 어느 하나에서와 같은 VL을 포함하며, 이 때 상기 가변 도메인 서열들 중 하나 또는 둘 모두는 번역 후 변형을 포함한다.
일부 예들에서, 상기 기재된 항-TIGIT 길항제 항체 중 어느 하나는 인간 TIGIT 외에 토끼 TIGIT에도 결합할 수 있다. 일부 예들에서, 상기 기재된 항-TIGIT 길항제 항체 중 어느 하나는 인간 TIGIT 및 시노몰구스 원숭이(cyno) TIGIT 둘 모두에 결합할 수 있다. 일부 예들에서, 상기 기재된 항-TIGIT 길항제 항체 중 어느 하나는 인간 TIGIT, cyno TIGIT, 및 토끼 TIGIT에 결합할 수 있다. 일부 예들에서, 상기 기재된 항-TIGIT 길항제 항체 중 어느 하나는 인간 TIGIT, cyno TIGIT, 및 토끼 TIGIT에 결합할 수 있으나 뮤린 TIGIT에는 결합할 수 없다.
일부 예들에서서, 항-TIGIT 길항제 항체는 약 10 nM 이하의 KD로 인간 TIGIT에 결합하고 약 10 nM 이하의 KD로 cyno TIGIT에 결합한다(예를 들어, 약 0.1 nM 내지 약 1 nM의 KD로 인간 TIGIT에 그리고 약 0.5 nM 내지 약 1 nM의 KD로 cyno TIGIT에 결합한다, 예를 들어, 약 0.1 nM 이하의 KD로 인간 TIGIT에 그리고 약 0.5 nM 이하의 KD로 cyno TIGIT에 결합한다).
일부 예들에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 TIGIT에 특이적으로 결합하여 폴리오바이러스 수용체(PVR)와의 TIGIT 상호작용을 억제하거나 차단한다(예를 들어, 상기 길항제 항체는 PVR에 대한 TIGIT 결합에 의해 매개되는 세포내 신호전달을 억제한다). 일부 예들에서, 상기 길항제 항체는 10 nM 이하(예를 들어, 1 nM 내지 약 10 nM)의 IC50 값으로 인간 TIGIT의 인간 PVR에 대한 결합을 억제하거나 차단한다. 일부 예들에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 TIGIT에 특이적으로 결합하여 PVR-CD226 상호작용에 영향을 주지 않으면서 TIGIT와 PVR의 상호작용을 억제하거나 차단한다. 일부 예들에서, 상기 길항제 항체는 50 nM 이하(예를 들어, 1 nM 내지 약 50 nM, 예를 들어, 1 nM 내지 약 5 nM)의 IC50 값으로 cyno TIGIT의 cyno PVR에 대한 결합을 억제하거나 차단한다. 일부 예들에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 CD226과 TIGIT의 상호작용을 억제하고/하거나 차단한다. 일부 예들에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 CD226 동종이량체화를 방해하는 TIGIT의 능력을 억제하고/하거나 차단한다.
일부 예들에서, 본원에 설명된 방법 또는 용도는 TIGIT에 대한 결합에 대해 상기 설명된 임의의 항-TIGIT 길항제 항체와 경쟁하는 단리된 항-TIGIT 길항제 항체를 사용 또는 투여하는 단계를 포함할 수 있다. 예를 들어, 상기 방법은 다음 6개의 HVR: (a) SNSAAWN(서열번호 1)의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1; (b) KTYYRFKWYSDYAVSVKG(서열번호 2)의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2; (c) ESTTYDLLAGPFDY(서열번호 3)의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3; (d) KSSQTVLYSSNNKKYLA(서열번호 4)의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1, (e) WASTRES(서열번호 5)의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2; 및 (f) QQYYSTPFT(서열번호 6)의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3을 갖는 항-TIGIT 길항제 항체와 TIGIT에 대한 결합을 위해 경쟁하는 단리된 항-TIGIT 길항제 항체를 투여하는 단계를 포함할 수 있다. 본원에 기재된 방법은 또한 상기 기재된 항-TIGIT 길항제 항체와 동일한 에피토프에 결합하는 단리된 항-TIGIT 길항제 항체를 투여하는 단계를 포함할 수 있다.
일부 양상에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 Fc-매개 효과기 기능을 나타낸다, 예를 들어, 항체 의존성 세포 세포독성(ADCC)에 참여한다. 일부 양상에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 온전한 Fc-매개 효과기 기능(예를 들어, 티라골루맙, 비보스톨리맙, 에티길리맙, EOS084448 또는 TJ-T6) 또는 향상된 효과기 기능(예를 들어, SGN-TGT)을 갖는 항체이다.
다른 양상에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 Fc-매개 효과기 기능이 없는 항체이다(예를 들어, 돔바날리맙, BMS-986207, ASP8374 또는 COM902).
일부 양상에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 IgG 분류 항체이다. 일부 양상에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 IgG1 분류 항체, 예를 들어, 티라골루맙, 비보스톨리맙, 돔바날리맙, BMS-986207, 에티길리맙, BGB-A1217, SGN-TGT, EOS084448(EOS-448), TJ-T6, 또는 AB308이다. 일부 양상에서, 상기 항체는 Fc 영역을 포함하는 인간 단클론 전장 IgG1 분류 항체이다.
일부 양상에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 인간 IgG1 Fc 영역, 서열번호 17의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역(VH), 및 서열번호 19의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하는 인간 단클론 전장 IgG1 분류 항체이다.
다른 양상에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 IgG4 분류 항체, 예를 들어, ASP8374 또는 COM902이다.
이러한 항체들을 함유하는 조성물들을 비롯하여, 본 발명에 유용한 항-TIGIT 길항제 항체(예를 들어, 티라골루맙)는 PD-1 축 결합 길항제(예를 들어, PD-L1 결합 길항제(예를 들어, 항-PD-L1 길항제 항체, 예를 들어 아테졸리주맙), PD-1 결합 길항제(예를 들어, 항PD-1 길항제 항체, 예를 들어, 펨브롤리주맙) 및 PD-L2 결합 길항제(예를 들어, 항PD-L2 길항제 항체))와 조합하여 사용될 수 있다.
일부 실시양태에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 TIGIT 신호전달을 억제하는 기능을 한다. 일부 실시양태에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 TIGIT가 그 결합 짝에 결합하는 것을 억제한다. 예시적인 TIGIT 결합 짝에는 CD155(PVR), CD112(PVRL2 또는 Nectin-2) 및 CD113(PVRL3 또는 Nectin-3)이 포함된다. 일부 실시양태에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 TIGIT와 CD155 사이의 결합을 억제할 수 있다. 일부 실시양태에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 TIGIT와 CD112 사이의 결합을 억제할 수 있다. 일부 실시양태에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 TIGIT와 CD113 사이의 결합을 억제할 수 있다. 일부 실시양태에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 면역 세포에서 TIGIT 매개 세포 신호전달을 억제한다. 일부 실시양태에서, 항-TIGIT 길항제 항체는 조절 T 세포를 고갈시킴으로써(예를 들어, FcγR과 결합하는 경우) TIGIT를 억제한다.
일부 실시형태에서, 항-TIGIT 항체는 단클론 항체이다. 일부 실시형태들에서, 항-TIGIT 항체는 Fab, Fab'-SH, Fv, scFv, 및 F(ab')2 단편으로 구성된 군에서 선택된 항체 단편이다. 일부 실시형태들에서, 상기 항-TIGIT 항체는 인간화 항체다. 일부 실시형태들에서, 항-TIGIT 항체는 인간 항체이다. 일부 실시형태들에서, 본원에 기재된 항-TIGIT 항체는 인간 TIGIT 에 결합한다. 일부 실시형태에서, 항-TIGIT 항체는 Fc 융합 단백질이다.
일부 실시양태에서, 항-TIGIT 항체는 티라골루맙(MTIG7192A, RG6058 또는 RO7092284), 비보스톨리맙(MK-7684), ASP8374 (PTZ-201), EOS884448 (EOS-448), SEA-TGT(SGN-TGT)), BGB-A1217, BMS-986207 (ONO-4686), COM902 (CGEN-15137), IBI939, 돔바날리맙(AB154), M6223, AB308, AB154, TJ-T6, MG1131, NB6253, HLX301, HLX53, SL-9258 (TIGIT-Fc-LIGHT), STW264, 및 YBL-012로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시형태에서, 항-TIGIT 항체는 티라골루맙(MTIG7192A, RG6058 또는 RO7092284), 비보스톨리맙(MK-7684), ASP8374(PTZ-201), EOS-448 및 SEA-TGT(SGN-TGT)로 이루어진 군으로부터 선택된다. 항-TIGIT 항체는 티라골루맙(MTIG7192A, RG6058 또는 RO7092284)일 수 있다.
일부 실시형태에서, 항-TIGIT 항체는 본원에 개시된 임의의 항-TIGIT 항체의 적어도 1, 2, 3, 4, 5개 또는 6개의 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항-TIGIT 항체는 본원에 개시된 임의의 항-TIGIT 항체의 6개 CDR들을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항-TIGIT 항체는 티라골루맙, ASP8374(PTZ-201), BGB-A1217, BMS-986207(ONO-4686), COM902(CGEN-15137), M6223, IBI939, EOS884448(EOS-448), 돔바날리맙(AB154), 비보스톨리맙(MK-7684) 및 SEA-TGT(SGN-TGT))로 이루어진 군으로부터 선택된 항체 중 어느 하나의 6개 CDR을 포함한다.
일부 실시형태에서, 항-TIGIT 항체는 중쇄 및 경쇄를 포함하며, 이 때 중쇄는 본원에 개시된 항-TIGIT 항체 중 어느 하나의 중쇄 가변 영역(VH) 서열을 포함하고 경쇄는 동일한 항체의 경쇄 가변 영역(VL)을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항-TIGIT 항체는 티라골루맙, ASP8374(PTZ-201), BGB-A1217, BMS-986207(ONO-4686), COM902(CGEN-15137), M6223, IBI939, EOS884448(EOS-448), 돔바날리맙(AB154), 비보스톨리맙(MK-7684) 및 SEA-TGT(SGN-TGT))로 이루어진 군으로부터 선택된 항-TIGIT 항체의 VH 및 VL을 포함한다.
일부 실시형태에서, 항-TIGIT 항체는 본원에 개시된 임의의 항-TIGIT 항체의 중쇄 및 경쇄를 포함한다. 일부 실시형태에서, 항-TIGIT 항체는 티라골루맙, ASP8374(PTZ-201), BGB-A1217, BMS-986207(ONO-4686), COM902(CGEN-15137), M6223, IBI939, EOS884448(EOS-448), 돔바날리맙(AB154), 비보스톨리맙(MK-7684) 및 SEA-TGT(SGN-TGT))로 이루어진 군으로부터 선택된 항-TIGIT 항체의 중쇄 및 경쇄를 포함한다.
VIII. PD-1 및 LAG3를 표적으로 하는 이중특이성 항체
A. PD-1 및 LAG3에 결합하는 예시적인 이중특이성 항체
한 양상에서, 본 발명은 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원-결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원-결합 도메인을 포함하는 이중특이성 항체를 제공하며, 이 때 PD-1에 특이적으로 결합하는 상기 제1 항원-결합 도메인은 다음을 포함하는 VH 도메인:
(i) GFSFSSY(서열번호 25)의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1,
(ii) 아미노산 서열 GGR을 포함하는 HVR-H2, 및
(iii) TGRVYFALD(서열번호 26)의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3; 그리고
다음을 포함하는 VL 도메인:
(i) SESVDTSDNSF(서열번호 27)의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1;
(ii) 아미노산 서열 RSS을 포함하는 HVR-L2, 및
(iii) NYDVPW(서열번호 28)의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3을 포함한다.
한 양상에서, 이중특이성 항체는 IgG인 Fc 도메인, 특히, IgG1 Fc 도메인 또는 IgG4 Fc 도메인을 포함하고, Fc 도메인은 효과기 기능이 감소되었거나 심지어 제거되었다. 특히, Fc 도메인은 Fc 수용체, 특히, Fcγ 수용체에 대한 결합을 감소시키는 하나 이상의 아미노산 치환을 포함한다.
추가 양상에서, PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하는 이중특이성 항체가 제공되며, 이 때 이중특이성 항체는 IgG Fc 도메인, 특히, IgG1 Fc 도메인 또는 IgG4 Fc 도메인인 Fc 도메인을 포함하고, 이 때 Fc 도메인은 Fc 수용체, 특히, Fcγ 수용체에 대한 결합을 감소시키는 하나 이상의 아미노산 치환을 포함한다.
또 다른 양상에서, PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원-결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원-결합 도메인을 포함하는 이중특이성 항체가 제공되며, 이 때 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원-결합 도메인은 다음을 포함하는 VH 도메인:
(i) DYTMN(서열번호 31)의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1,
(i) VISWDGGGTYYTDSVKG(서열번호 32)의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2, 및
(iii) GLTDTTLYGSDY(서열번호 33)의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3; 그리고
다음을 포함하는 VL 도메인:
(i) RASQSISSYLN(서열번호 34)의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1,
(ii) AASTLQS(서열번호 35)의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2, 및
(iii) QQTYSSPLT(서열번호 36)의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3을 포함한다.
추가 양상에서, PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원-결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원-결합 도메인을 포함하는 이중특이성 항체가 제공되며, 이 때 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원-결합 도메인은 다음을 포함한다:
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFSFSSYTMSWVRQAPGKGLEWVATISGGGRDIYYPDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVLLTGRVYFALDSWGQGTLVTVSS(서열번호 29)의 아미노산 서열을 포함하는 VH 도메인 및 DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKASESVDTSDNSFIHWYQQKPGQSPKLLIYRSSTLESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQNYDVPWTFGQGTKVEIK(서열번호 30)의 아미노산 서열을 포함하는 VL 도메인.
또 다른 양상에서, PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원-결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원-결합 도메인을 포함하는 이중특이성 항체가 제공되며, 이 때 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원-결합 도메인은 다음을 포함한다:
EVQLLESGGGLVQPGGSLRL SCAASGFIFDDYTMNWVRQAPGKGLEWVAVISWDGGGTYYTDSVKGRFTISRDDFKNTLY LQMNSLRAEDTAVYYCAKGLTDTTLYGSDYWGQGTLVTVSS(서열번호 37)의 아미노산 서열을 포함하는 VH 도메인 및 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASTLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQ TYSSPLTFGGGTKVEIK(서열번호 38)의 아미노산 서열을 포함하는 VL 도메인.
한 양상에서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하고, 이 때 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인은 서열번호 29의 아미노산 서열에 적어도 90% 동일성을 가지는(예를 들어, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 99% 보다 많은 동일성을 가지는) VH 도메인 및 서열번호 30의 아미노산 서열에 적어도 90% 동일성을 가지는(예를 들어, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 99% 보다 많은 동일성을 가지는) VL 도메인을 포함한다. 한 양상에서, PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원-결합 도메인은 서열번호 29의 아미노산 서열을 포함하는 VH 도메인 및 서열번호 30의 아미노산 서열을 포함하는 VL 도메인을 포함한다.
한 양상에서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하고, 이 때 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인은 서열번호 37의 아미노산 서열에 적어도 90% 동일성을 가지는(예를 들어, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 99% 보다 많은 동일성을 가지는) VH 도메인 및 서열번호 38의 아미노산 서열에 적어도 90% 동일성을 가지는(예를 들어, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 99% 보다 많은 동일성을 가지는) VL 도메인을 포함한다. 한 양상에서, LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원-결합 도메인은 서열번호 37의 아미노산 서열을 포함하는 VH 도메인 및 서열번호 38의 아미노산 서열을 포함하는 VL 도메인을 포함한다.
한 양상에서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하고, 이 때 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인은 서열번호 29의 아미노산 서열에 적어도 90% 동일성을 가지는(예를 들어, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 99% 보다 많은 동일성을 가지는) VH 도메인 및 서열번호 30의 아미노산 서열에 적어도 90% 동일성을 가지는(예를 들어, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 99% 보다 많은 동일성을 가지는) VL 도메인을 포함하고 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인은 서열번호 37의 아미노산 서열에 적어도 90% 동일성을 가지는(예를 들어, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 99% 보다 많은 동일성을 가지는) VH 도메인 및 서열번호 38의 아미노산 서열에 적어도 90% 동일성을 가지는(예를 들어, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 99% 보다 많은 동일성을 가지는) VL 도메인을 포함한다.
또 다른 양상에서, PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원-결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원-결합 도메인을 포함하는 이중특이성 항체가 제공되며, 이 때
D-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인은 서열번호 29의 아미노산 서열을 포함하는 VH 도메인 및 서열번호 30의 아미노산 서열을 포함하는 VL 도메인을 포함하고,
그리고 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인은 서열번호 37의 아미노산 서열을 포함하는 VH 도메인 및 서열번호 38의 아미노산 서열을 포함하는 VL 도메인을 포함한다.
추가 양상에서, 본 발명은 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하는 이중특이성 항체는 인간, 인간화 또는 키메라 항체이다. 특히, 이러한 이중특이성 항체는 인간화 항체 또는 키메라 항체이다.
한 양상에서, 본 발명은 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하는 이중특이성 항체는 2가이다. 이것은 이중특이성 항체가 PD-1에 특이적으로 결합하는 하나의 항원 결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 하나의 항원 결합 도메인을 포함한다는 것을 의미한다(1+1 형식).
한 양상에서, PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하는 이중특이성 항체가 제공되며, 이 때 이중특이성 항체는 Fc 도메인, PD-1에 특이적으로 결합하는 항원 결합 도메인을 포함하는 제1 Fab 단편, 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 항원 결합 도메인을 포함하는 제2 Fab 단편을 포함한다. 특정 양상에서, Fab 단편들 중 하나에서 가변 도메인 VL 및 VH는 VH 도메인이 경쇄의 일부이고 VL 도메인이 중쇄의 일부가 되도록 서로에 의해 대체된다. 특정 양상에서, PD-1에 특이적으로 결합하는 항원 결합 도메인을 포함하는 제1 Fab 단편에서 가변 도메인 VL 및 VH는 서로에 의해 대체된다.
특정 양상에서, PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원-결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원-결합 도메인을 포함하는 이중특이성 항체가 제공되며, 이 때 이중특이성 항체는 서열번호 39의 서열에 적어도 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 제1 중쇄, 서열번호 40의 서열에 적어도 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 제1 경쇄, 서열번호 41의 서열에 적어도 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 제2 중쇄, 및 서열번호 42의 서열에 적어도 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 제2 경쇄를 포함한다. 예를 들어, 한 양상에서, 이중특이성 항체는 서열번호 39의 아미노산 서열을 포함하는 제1 중쇄, 서열번호 40의 아미노산 서열을 포함하는 제1 경쇄, 서열번호 41의 아미노산 서열을 포함하는 제2 중쇄, 및 서열번호 42의 아미노산 서열을 포함하는 제2 경쇄를 포함한다(PD1-LAG3).
한 양상에서, PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하는 이중특이성 항체가 제공되며, 이 때 이중특이성 항체는 Fc 도메인, PD-1에 특이적으로 결합하는 항원 결합 도메인을 포함하는 제1 Fab 단편, 및 Fc 도메인의 C-말단에 융합된, LAG3에 특이적으로 결합하는 항원 결합 도메인을 포함하는 제2 Fab 단편을 포함한다. 특히, LAG3에 특이적으로 결합하는 항원 결합 도메인을 포함하는 Fab 단편은 그의 VH 도메인을 통해 Fc 도메인의 C-말단에 융합된다(트랜스 1+1 형식).
한 양상에서, 이중특이성 항체는 서열번호 39의 서열에 적어도 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 제1 중쇄, 서열번호 40의 서열에 적어도 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 제1 경쇄, 서열번호 61의 서열에 적어도 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 제2 중쇄, 및 서열번호 42의 서열에 적어도 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 제2 경쇄를 포함한다. 더욱 특히, 이중특이성 항체는 서열번호 39의 아미노산 서열을 포함하는 제1 중쇄, 서열번호 40의 아미노산 서열을 포함하는 제1 경쇄, 서열번호 61의 아미노산서 열을 포함하는 제2 중쇄, 및 서열번호 42의 아미노산 서열을 포함하는 제2 경쇄를 포함할 수 있다.
i. Fc 수용체 결합 및/또는 효과기 기능을 감소시키는 Fc 도메인 변형
특정 양상에서, PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원-결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원-결합 도메인을 포함하는 이중특이성 항체가 제공되며, 이 때 이중특이성 항체는 Fc 수용체, 특히 Fcγ 수용체에 대한 결합을 감소시키고 효과기 기능을 감소시키거나 제거하는 하나 이상의 아미노산 변형을 포함하는 Fc 도메인을 포함한다.
특정 양상들에서, 하나 이상의 아미노산 변형이 본원에 제공된 항체의 Fc 영역 내로 도입되어 Fc 영역 변이체를 생성할 수 있다. 상기 Fc 영역 변이체는 하나 또는 그 이상의 아미노산 위치에서 아미노산 변형(예를 들어, 치환)을 포함하는 인간 Fc 영역 서열(예를 들어, 인간 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 Fc 영역)를 포함할 수 있다.
다음 섹션은 Fc 수용체 결합 및/또는 효과기 기능을 감소시키는 Fc 도메인 변형을 포함하는 본 발명의 이중특이성 항원 결합 분자의 바람직한 양상을 설명한다. 한 양상에서, 본 발명은 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하는 이중특이성 항체에 관한 것이며, 이 때 Fc 도메인은 Fc 수용체, 특히, Fcγ 수용체에 대한 결합을 감소시키는 하나 이상의 아미노산 치환을 포함한다. 특정 양상에서, Fc 도메인은 아미노산 돌연변이 L234A, L235A 및 P329G(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링)를 갖는 인간 IgG1 하위분류의 Fc 도메인이다.
Fc 도메인은 표적 조직에서의 양호한 축적 및 유리한 조직-혈액 분포 비율에 기여하는 긴 혈청 반감기를 포함하여 본 발명의 이중특이성 항체에 유리한 약동학적 특성을 부여한다. 그러나 동시에 이는 본 발명의 이중특이성 항체를 바람직한 항원-보유 세포 보다는 Fc 수용체를 발현하는 세포에 대한 바람직하지 않은 표적화를 초래할 수 있다. 따라서, 특정 실시양태에서 본 발명의 이중특이성 항체의 Fc 도메인은 천연 IgG Fc 도메인, 특히 IgG1 Fc 도메인 또는 IgG4 Fc 도메인과 비교하여 Fc 수용체에 대한 감소된 결합 친화도 및/또는 감소된 효과기 기능을 나타낸다. 보다 구체적으로, Fc 도메인은 IgG1 Fc 도메인이다.
한 이러한 양상에서 Fc 도메인(또는 상기 Fc 도메인을 포함하는 본 발명의 이중특이성 항원 결합 분자)은 천연 IgG1 Fc 도메인(또는 천연 IgG1 Fc 도메인을 포함하는 본 발명의 이중특이성 항원 결합 분자)에 비해 Fc 수용체에 대한 결합 친화도의 50% 미만, 바람직하게는 20% 미만, 더욱 바람직하게는 10% 미만 그리고 가장 바람직하게는 5% 미만, 및/또는 천연 IgG1 Fc 도메인(또는 천연 IgG1 Fc 도메인을 포함하는 본 발명의 이중특이성 항원 결합 분자)에 비해 효과기 기능의 50% 미만, 바람직하게는 20% 미만, 더욱 바람직하게는 10% 미만 그리고 가장 바람직하게는 5% 미만을 나타낸다. 한 양상에서, Fc 도메인(또는 상기 Fc 도메인을 포함하는 본 발명의 이중특이성 항원 결합 분자)은 Fc 수용체에 실질적으로 결합하지 않고/하거나 효과기 기능을 유도하지 않는다. 특정 양상에서, Fc 수용체는 Fcγ 수용체이다. 한 양상에서, Fc 수용체는 인간 Fc 수용체이다. 한 양상에서, Fc 수용체는 활성화 Fc 수용체이다. 한 구체적인 양상에서, Fc 수용체는 활성화 인간 Fcγ 수용체, 보다 구체적으로 인간 FcγRIIIa, FcγRI 또는 FcγRIIa, 가장 구체적으로 인간 FcγRIIIa이다. 한 양상에서, Fc 수용체는 억제성 Fc 수용체이다. 특정 양상에서, Fc 수용체는 억제성 인간 Fcγ 수용체, 보다 구체적으로 인간 FcγRIIB이다. 한 양상에서 효과기 기능은 CDC, ADCC, ADCP 및 사이토카인 분비 중 하나 이상이다. 특정 양상에서, 효과기 기능은 ADCC이다. 한 양상에서, Fc 도메인은 천연 IgG1 Fc 도메인과 비교하여 신생아 Fc 수용체(FcRn)에 대해 실질적으로 유사한 결합 친화도를 나타낸다. FcRn에 대해 실질적으로 유사한 결합은, Fc 도메인(또는 상기 Fc 도메인을 포함하는 본 발명의 이중특이성 항원 결합 분자)이 FcRn에 대하여 천연 IgG1 Fc 도메인(또는 천연 IgG1 Fc 도메인을 포함하는 본 발명의 이중특이성 항원 결합 분자)의 결합 친화도의 약 70% 초과, 특히 약 80% 초과, 보다 특히 약 90% 초과를 나타낼 때 달성된다.
특정 양상에서, Fc 도메인은 조작되지 않은 Fc 도메인과 비교하여 Fc 수용체에 대한 감소된 결합 친화도 및/또는 감소된 효과기 기능을 갖도록 조작된다. 특정 양상에서, 본 발명의 이중특이성 항원 결합 분자의 Fc 도메인은 Fc 수용체에 대한 Fc 도메인의 결합 친화도 및/또는 효과기 기능을 감소시키는 하나 이상의 아미노산 돌연변이를 포함한다. 전형적으로, 동일한 하나 이상의 아미노산 돌연변이가 상기 Fc 도메인의 2개의 서브유닛 각각에 존재한다. 한 양상에서, 아미노산 돌연변이는 Fc 수용체에 대한 Fc 도메인의 결합 친화도를 감소시킨다. 또 다른 양상에서, 아미노산 돌연변이는 Fc 수용체에 대한 Fc 도메인의 결합 친화도를 2배 이상, 5배 이상, 또는 10배 이상 감소시킨다. 한 양상에서, 조작된 Fc 도메인을 포함하는 본 발명의 이중특이성 항원 결합 분자는 조작되지 않은 Fc 도메인을 포함하는 본 발명의 이중특이성 항체와 비교하여 Fc 수용체에 대해 20% 미만, 특히 10% 미만, 더욱 특히 5% 미만의 결합 친화도를 나타낸다. 특정 양상에서, Fc 수용체는 Fcγ 수용체이다. 다른 양상에서, Fc 수용체는 인간 Fc 수용체이다. 한 양상에서, Fc 수용체는 억제성 Fc 수용체이다. 특정 양상에서, Fc 수용체는 억제성 인간 Fcγ 수용체, 보다 구체적으로 인간 FcγRIIB이다. 일부 양상에서 Fc 수용체는 활성화 Fc 수용체이다. 한 구체적인 양상에서, Fc 수용체는 활성화 인간 Fcγ 수용체, 보다 구체적으로 인간 FcγRIIIa, FcγRI 또는 FcγRIIa, 가장 구체적으로 인간 FcγRIIIa이다. 바람직하게는, 이들 수용체 각각에 대한 결합이 감소된다. 일부 양상에서, 보체 성분에 대한 결합 친화도, 특히 C1q에 대한 결합 친화도도 감소된다. 한 양상에서, 신생아 Fc 수용체(FcRn)에 대한 결합 친화도는 감소되지 않는다. FcRn에 대한 실질적으로 유사한 결합, 즉 상기 수용체에 대한 Fc 도메인의 결합 친화도의 보존은 Fc 도메인(또는 상기 Fc 도메인을 포함하는 본 발명의 이중특이성 항원 결합 분자)이 조작되지 않은 형태의 Fc 도메인(또는 상기 조작되지 않은 형태의 Fc 도메인을 포함하는 본 발명의 이중특이성 항원 결합 분자)의 FcRn에 대한 결합 친화도의 약 70% 초과를 나타낼 때 달성된다. Fc 도메인, 또는 상기 Fc 도메인을 포함하는 본 발명의 이중특이성 항원 결합 분자는 이러한 친화도의 약 80% 초과 및 심지어 약 90% 초과를 나타낼 수 있다. 특정 실시양태에서, 본 발명의 이중특이성 항원 결합 분자의 Fc 도메인은 조작되지 않은 Fc 도메인과 비교하여 감소된 효과기 기능을 갖도록 조작된다. 이러한 효과기 기능의 감소는 비제한적으로 다음 중 하나 이상을 포함할 수 있다: 보체 의존성 세포독성(CDC) 감소, 항체-의존성 세포-매개 세포독성(ADCC) 감소, 항체-의존성 세포 식균작용(ADCP) 감소, 사이토카인 분비 감소, 항원 제시 세포에 의한 면역 복합체-매개 항원 흡수 감소, NK 세포에 대한 결합 감소, 대식세포에 대한 결합 감소, 단핵세포에 대한 결합 감소, 다형핵세포에 대한 결합 감소, 직접적인 신호전달 유도 세포자멸사 감소, 수지상세포 성숙화 감소, 또는 T 세포 프라이밍 감소.
감소된 효과기 기능을 갖는 항체들은 Fc 영역 잔기 238, 265, 269, 270, 297, 327 및 329 중 하나 또는 그 이상의 치환을 갖는 것들을 포함한다(미국 특허 제 6,737,056). 이런 Fc 돌연변이체는 잔기 265 및 297의 알라닌으로의 치환을 갖는 이른바 "DANA" Fc 돌연변이체를 비롯하여, 아미노산 위치 265, 269, 270, 297 및 327 중 두 개 또는 그 이상에서 치환을 갖는 Fc 돌연변이체를 포함한다(미국 특허 제7,332,581). FcR에 대한 결합이 개선되거나 감소된 특정 항체 변이체가 기재되어 있다. (예를 들어, 미국 특허 제 6,737,056; WO 2004/056312, 및 Shields, RL 외, J. Biol. Chem. 276 (2001) 6591-6604).
본 발명의 한 양상에서, 상기 Fc 도메인은 E233, L234, L235, N297, P331 및 P329의 위치에서 아미노산 치환을 포함한다. 일부 양상에서, Fc 도메인은 아미노산 치환 L234A 및 L235A("LALA")를 포함한다. 이러한 한 실시형태에서, Fc 도메인은 IgG1 Fc 도메인, 특히 인간 IgG1 Fc 도메인이다. 한 양상에서, 상기 Fc 도메인은 위치 P329에서 아미노산 치환을 포함한다. 보다 구체적인 양상에서, 아미노산 치환은 P329A 또는 P329G, 특히 P329G이다. 한 실시양태에서 Fc 도메인은 위치 P329에서의 아미노산 치환 및 E233P, L234A, L235A, L235E, N297A, N297D 또는 P331S로 이루어진 군으로부터 선택된 추가 아미노산 치환을 포함한다. 보다 특정한 실시양태에서 Fc 도메인은 아미노산 돌연변이 L234A, L235A 및 P329G("P329G LALA")를 포함한다. 아미노산 치환의 "P329G LALA" 조합은 PCT 특허 출원 제 WO 2012/130831 A1에 기재된 바와 같이 인간 IgG1 Fc 도메인의 Fcγ 수용체 결합을 거의 완전히 제거한다. 상기 문헌은 또한 이러한 돌연변이체 Fc 도메인을 제조하는 방법 및 이의 특성, 예를 들어, Fc 수용체 결합 또는 효과기 기능을 결정하는 방법을 기재하고 있다. 이러한 항체는 돌연변이 L234A 및 L235A 또는 돌연변이 L234A, L235A 및 P329G(Kabat 외의 EU 인덱스에 따른 넘버링, Kabat 외, Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD, 1991)를 갖는 IgG1이다.
한 양상에서, 본 발명의 이중특이성 항체는 (모든 위치는 Kabat의 EU 인덱스에 따름) (i) 선택적으로 돌연변이 P329G, L234A 및 L235A가 있는 인간 IgG1 하위분류의 동종이량체 Fc-영역, 또는 (ii) 선택적으로 돌연변이 P329G, S228P 및 L235E가 있는 인간 IgG4 하위분류의 동종이량체 Fc-영역, 또는 (iii) 선택적으로 돌연변이 P329G, L234A, L235A, I253A, H310A, 및 H435A가 있는, 또는 선택적으로 돌연변이 P329G, L234A, L235A, H310A, H433A, 및 Y436A가 있는 인간 IgG1 하위분류의 동종이량체 Fc-영역, 또는 (iv) 하나의 Fc 영역 폴리펩티드는 돌연변이 T366W를 포함하고 다른 하나의 Fc 영역 폴리펩티드는 돌연변이 T366S, L368A 및 Y407V를 포함하거나, 또는 하나의 Fc 영역 폴리펩티드는 T366W 및 Y349C를 포함하고 다른 하나의 Fc 영역 폴리펩티드는 돌연변이 T366S, L368A, Y407V, 및 S354C를 포함하거나, 또는 하나의 Fc 영역 폴리펩티드는 돌연변이 T366W 및 S354C를 포함하고, 다른 하나의 Fc 영역 폴리펩티드는 돌연변이 T366S, L368A, Y407V 및 Y349C를 포함하는 이종이량체 Fc 영역, 또는 (v) 두 Fc 영역 폴리펩티드 모두가 돌연변이 P329G, L234A 및 L235A를 포함하고 하나의 Fc 영역 폴리펩티드는 돌연변이 T366W를 포함하고, 다른 하나의 Fc 영역 폴리펩티드는 돌연변이 T366S, L368A 및 Y407V를 포함하거나, 또는 하나의 Fc 영역 폴리펩티드는 돌연변이 T366W 및 Y349C를 포함하고, 다른 하나의 Fc 영역 폴리펩티드는 돌연변이 T366S, L368A, Y407V, 및 S354C를 포함하거나, 또는 하나의 Fc 영역 폴리펩티드는 돌연변이 T366W 및 S354C를 포함하고, 다른 하나의 Fc 영역 폴리펩티드는 돌연변이 T366S, L368A, Y407V 및 Y349C를 포함하는, 인간 IgG1 하위분류의 이종이량체 Fc 영역을 포함한다.
한 양상에서, 상기 Fc 도메인은 IgG4 Fc 도메인이다. 보다 구체적인 실시형태에서, Fc 도메인은 S228 위치에 아미노산 치환(Kabat 넘버링), 특히 아미노산 치환 S228P를 포함하는 IgG4 Fc 도메인이다. 보다 구체적인 실시형태에서, Fc 도메인은 아미노산 치환 L235E 및 S228P 및 P329G를 포함하는 IgG4 Fc 도메인이다. 이 아미노산 치환은 IgG4 항체의 생체내 Fab 팔 교환을 감소시킨다(Stubenrauch 외, Drug Metabolism and Disposition 38, 84-91 (2010) 참조). 따라서, 한 양상에서, (모든 위치는 Kabat의 EU 인덱스에 따름) 인간 IgG4 하위분류의 이종이량체 Fc-영역을 포함하는 이중특이성 항체가 제공되며, 이 때 두 Fc 영역 폴리펩티드 모두는 돌연변이 P329G, S228P 및 L235E를 포함하고 하나의 Fc 영역 폴리펩티드는 돌연변이 T366W를 포함하고, 다른 하나의 Fc 영역 폴리펩티드는 돌연변이 T366S, L368A 및 Y407V를 포함하거나, 또는 이 때 하나의 Fc 영역 폴리펩티드는 돌연변이 T366W 및 Y349C를 포함하고, 다른 하나의 Fc 영역 폴리펩티드는 돌연변이 T366S, L368A, Y407V 및 S354C를 포함하거나, 또는 하나의 Fc 영역 폴리펩티드는 돌연변이 T366W 및 S354C를 포함하고, 다른 하나의 Fc 영역 폴리펩티드는 돌연변이 T366S, L368A, Y407V 및 Y349C를 포함한다.
태아로의 모계 IgG 전달을 담당하는, 반감기가 증가되고 신생아의 Fc 수용체(FcRn)에 대한 결합이 개선된 항체들(Guyer, R.L. 외, J. Immunol. 117 (1976) 587-593, and Kim, J.K. 외, J. Immunol. 24 (1994) 2429-2434)은 US 2005/0014934에 기재되어 있다. 이들 항체는 FcRn에 대한 Fc 영역의 결합을 개선시키는 하나 또는 그 이상의 치환들을 갖는 Fc 영역을 내부에 포함한다. 이러한 Fc 변이체들은 다음과 같은 Fc 영역 잔기들: 238, 256, 265, 272, 286, 303, 305, 307, 311, 312, 317, 340, 356, 360, 362, 376, 378, 380, 382, 413, 424 또는 434 중 하나 이상에서 치환, 예를 들어, Fc 영역 잔기 434의 치환을 가지는 변이체들을 포함한다(미국 특허 제 7,371,826). 또한 Fc 영역 변이체의 다른 예에 관한 내용은 Duncan, AR 및 Winter, G., Nature 322(1988) 738-740; US 5,648,260; US 5,624,821; 및 WO 94/29351을 참조하라.
Fc 수용체에 대한 결합은 예를 들어 ELISA에 의해서 또는 BIAcore 기기(GE Healthcare)와 같은 표준 기기를 사용하는 표면 플라즈몬 공명(SPR)에 의해서 쉽게 측정할 수 있으며 이러한 Fc 수용체는 재조합 발현에 의해 얻을 수 있다. 적합한 이러한 결합 분석이 본원에 기재되어 있다. 또는, Fc 수용체에 대한 Fc 도메인 또는 Fc 도메인을 포함하는 세포 활성화 이중특이성 항원 결합 분자의 결합 친화도를 특정 Fc 수용체, 예를 들어, 인간 NK 세포 발현 FcγIIIa 수용체를 발현하는 것으로 공지된 세포주를 사용하여 평가할 수 있다. Fc 도메인, 또는 Fc 도메인을 포함하는 본 발명의 이중특이성 항체의 효과기 기능을 해당 분야에 공지된 방법에 의해 측정할 수 있다. ADCC를 측정하기에 적합한 분석이 본원에 기재되어 있다. 관심 분자의 ADCC 활성을 평가하기 위한 시험관내 분석의 다른 예들은 US 5,500,362; Hellstrom 외, Proc Natl Acad Sci USA 83, 7059-7063 (1986) 및 Hellstrom 등, Proc Natl Acad Sci USA 82, 1499-1502 (1985); US 5,821,337; Bruggemann 등, J Exp Med 166, 1351-1361 (1987)에 기재되어 있다. 대안으로, 비-방사능활성 분석 방법들이 이용될 수 있다(예를 들면, 유동 세포 분석을 위한 ACTI™비-방사능활성 세포독성 분석 (CellTechnology, Inc. Mountain View, CA); 그리고 CytoTox 96® 비-방사능활성 세포독성 분석 (Promega, Madison, WI) 참고). 이러한 분석에 유용한 효과기 세포들은 말초 혈액 단핵 세포들 (PBMC) 및 자연 살해(NK) 세포들을 포함한다. 대안으로, 또는 추가적으로, 관심 분자의 ADCC 활성은, 예를 들어, Clynes 외. Proc Natl Acad Sci USA 95, 652-656 (1998)에서 공개된 바와 같은 동물 모델에서 생체내에서 평가될 수 있다.
다음 섹션은 Fc 수용체 결합 및/또는 효과기 기능을 감소시키는 Fc 도메인 변형을 포함하는 본 발명의 이중특이성 항체의 바람직한 양상을 설명한다. 한 양상에서, 본 발명은 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하는 이중특이성 항체에 관한 것이며, 이 때 Fc 도메인은 Fc 수용체, 특히, Fcγ 수용체에 대한 이러한 항체의 결합 친화도를 감소시키는 하나 이상의 아미노산 치환을 포함한다. 또 다른 양상에서, 본 발명은 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하는 이중특이성 항체에 관한 것이며, 이 때 Fc 도메인은 효과기 기능을 감소시키는 하나 이상의 아미노산 치환을 포함한다. 특정 양상에서, Fc 도메인은 아미노산 돌연변이 L234A, L235A 및 P329G(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링)를 갖는 인간 IgG1 하위분류의 Fc 도메인이다.
ii. 이종이량체화를 촉진하는 Fc 도메인 변형
본 발명의 이중특이성 항원 결합 분자는 Fc 도메인의 2개의 서브유닛 중 하나 또는 다른 하나에 융합된 상이한 항원 결합 도메인들을 포함하므로, Fc 도메인의 2개의 서브유닛은 2개의 동일하지 않은 폴리펩티드 사슬에 포함될 수 있다. 이들 폴리펩티드의 재조합 공동발현 및 후속된 이량체화는 이들 2개 폴리펩티드의 몇 가지 가능한 조합을 유도한다. 따라서 재조합적 생성에서 본 발명의 이중특이성 항체의 수율 및 순도를 개선하기 위해, 본 발명의 이중특이성 항원 결합 분자의 Fc 도메인에 원하는 폴리펩티드들의 결합을 촉진하는 변형을 도입하는 것이 유리할 것이다.
따라서, 특정 양상에서 본 발명은 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원-결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원-결합 도메인을 포함하는 이중특이성 항체에 관한 것이며, 이 때 Fc 도메인은 Fc 도메인의 제1 및 제2 서브유닛의 결합을 촉진시키는 변형을 포함한다. 인간 IgG Fc 도메인의 두 서브유닛들 사이의 가장 광범위한 단백질-단백질 상호작용 부위는 Fc 도메인의 CH3 도메인에 있다. 따라서, 한 양상에서, 상기 변형은 Fc 도메인의 CH3 도메인에 있다.
특정 양상에서 상기 변형은 소위 "놉-인투-홀" 변형으로, Fc 도메인의 2개의 서브유닛 중 하나에 "놉" 변형 및 Fc 도메인의 2개의 서브유닛 중 다른 하나에 "홀" 변형을 포함한다. 따라서, 본 발명은 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 부위를 포함하는 이중특이성 항체에 관한 것이며, 이 때 Fc 도메인의 제1 서브유닛은 놉을 포함하고 Fc 도메인의 제2 서브유닛은 놉 인투 홀 방법에 따라 홀을 포함한다. 특정 양상에서, Fc 도메인의 제1 서브유닛은 아미노산 치환 S354C 및 T366W(EU 넘버링)를 포함하고 Fc 도메인의 제2 서브유닛은 아미노산 치환 Y349C, T366S 및 Y407V를 포함한다(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링).
놉-인투-홀 기술은 예를 들어 US 5,731,168; US 7,695,936; Ridgway 외, Prot Eng 9, 617-621 (1996) 및 Carter, J Immunol Meth 248, 7-15 (2001)에 기재되어 있다. 일반적으로, 상기 방법은 제1 폴리펩티드의 경계면에 돌기 ("놉") 그리고 제2 폴리펩티드의 경계면에 이에 상응하는 구멍 ("홀")을 도입시켜 상기 돌기가 상기 구멍 안에 위치되게 함으로써 이종이량체 형성을 촉진시키고, 동형이량체 형성을 방해한다. 돌기(Protuberances)는 제1 폴리펩티드의 경계면의 작은 아미노산 측쇄를 더 큰 측쇄 (가령, 티로신 또는 트립토판)로 대체함으로써 제작된다. 상기 돌기와 동일 또는 유사한 크기의 상보적 공동(cavities)은, 제2 폴리펩티드의 경계면에서 큰 아미노산 측쇄를 더 작은 측쇄 (가령, 알라닌 또는 트레오닌)로 대체함으로써 생성된다.
따라서, 한 양상에서, 본 발명의 이중특이성 항원 결합 분자의 Fc 도메인의 제1 서브유닛의 CH3 도메인에서 아미노산 잔기는 보다 큰 측쇄 부피를 갖는 아미노산 잔기로 대체되고, 이에 의해 제1 서브유닛의 CH3 도메인 내부에, 제2 서브유닛의 CH3 도메인 내부의 공동에 위치할 수 있는 돌기를 생성하고, Fc 도메인의 제2 서브유닛의 CH3 도메인에서 아미노산 잔기는 보다 작은 측쇄 부피를 갖는 아미노산 잔기로 대체되고, 이에 의해 제2 서브유닛의 CH3 도메인 내부에, 제1 서브유닛의 CH3 도메인 내부의 돌기가 위치할 수 있는 공동을 생성한다. 상기 돌기 및 공동은 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산을, 예를 들어, 부위-특이적 돌연변이유발에 의해, 또는 펩티드 합성에 의해 변경함으로써 생성될 수 있다. 특정 양상에서, Fc 도메인의 제1 서브유닛의 CH3 도메인에서 366번 위치의 트레오닌 잔기는 트립토판 잔기로 대체되고(T366W), Fc 도메인의 제2 서브유닛의 CH3 도메인에서 407번 위치의 티로신 잔기는 발린 잔기로 대체된다(Y407V). 한 양상에서, Fc 도메인의 제2 서브유닛에서, 추가로 366번 위치의 트레오닌 잔기는 세린 잔기로 대체되고(T366S), 368번 위치의 류신 잔기는 알라닌 잔기로 대체된다(L368A).
또한 추가 양상에서, Fc 도메인의 제1 서브유닛에서, 추가로 354번 위치의 세린 잔기는 시스테인 잔기로 대체되고(S354C), Fc 도메인의 제2 서브유닛에서 추가로 349번 위치의 티로신 잔기는 시스테인 잔기로 대체된다(Y349C). 이들 2개 시스테인 잔기들의 도입은 Fc 도메인의 상기 2개 서브유닛들 사이에 이황화물 가교결합을 형성시키므로, 이량체를 더욱 안정화시킨다 (Carter (2001), J Immunol Methods 248, 7-15). 특정 양상에서, Fc 도메인의 제1 서브유닛은 아미노산 치환 S354C 및 T366W(EU 넘버링)를 포함하고 Fc 도메인의 제2 서브유닛은 아미노산 치환 Y349C, T366S 및 Y407V를 포함한다(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링).
그러나 또한 EP 1 870 459에 기술된 바와 같은 다른 놉-인-홀 기술이 대안적으로 또는 추가적으로 사용될 수 있다. 한 실시양태에서 다중특이성 항체는 "놉 사슬"의 CH3 도메인에 돌연변이 R409D 및 K370E를 그리고 "홀-사슬"의 CH3 도메인에서 돌연변이 D399K 및 E357K를 포함한다(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링).
한 양상에서, 이중특이성 항체는 "놉 사슬"의 CH3 도메인에 T366W 돌연변이, "홀 사슬"의 CH3 도메인에 돌연변이 T366S, L368A 및 Y407V, 그리고 추가로 "놉 사슬"의 CH3 도메인에 돌연변이 R409D 및 K370E 및 "홀 사슬"의 CH3 도메인에 돌연변이 D399K 및 E357K를 포함한다(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링).
한 양상에서, 이중특이성 항체는 2개의 CH3 도메인 중 하나에 돌연변이 Y349C 및 T366W, 그리고 2개의 CH3 도메인 중 다른 하나에 돌연변이 S354C, T366S, L368A 및 Y407V를 포함하거나, 또는 다중특이성 항체는 2개의 CH3 도메인 중 하나에 돌연변이 Y349C 및 T366W, 그리고 2개의 CH3 도메인 중 다른 하나에 돌연변이 S354C, T366S, L368A 및 Y407V, 그리고 추가로 "놉 사슬"의 CH3 도메인에 돌연변이 R409D 및 K370E 그리고 "홀 사슬"의 CH3 도메인에 돌연변이 D399K 및 E357K를 포함한다(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링).
또 다른 양상에서, Fc 도메인의 제1 및 제2 서브유닛의 결합을 촉진하는 변형은, 예를 들어, PCT 공개 공보 WO 2009/089004에 설명된 정전기적 조향 효과를 매개하는 변형을 포함한다. 일반적으로, 이 방법은 2개의 Fc 도메인 서브유닛의 경계면에서 하나 이상의 아미노산 잔기의 하전된 아미노산 잔기로의 대체를 포함하므로 동종이량체 형성은 정전기적으로 바람직하지 않지만 이종이량체화는 정전기적으로 유리하게 된다.
"놉-인투-홀 기술"과는 별도로, 다중특이성 항체의 중쇄의 CH3 도메인을 변형하여 이종이량체화를 시행하기 위한 다른 기술이 당업계에 공지되어 있다. 이러한 기술, 특히, WO 96/27011, WO 98/050431, EP 1870459, WO 2007/110205, WO 2007/147901, WO 2009/089004, WO 2010/129304, WO 2011/90754, WO 2011/143545, WO 2012/058768, WO 2013/157954 및 WO 2013/096291에 기재된 기술들은 이중특이성 항체와 조합되는 "놉-인투-홀 기술"에 대한 대안으로서 본원에서 고려된다.
한 양상에서, 이중특이성 항체에서 EP 1870459에 기재된 접근법은 다중특이성 항체의 제1 중쇄 및 제2 중쇄의 이종이량체화를 보조하기 위해 사용된다. 이 접근법은 두 제1 및 제2 중쇄 사이의 CH3/CH3 도메인 경계면의 특정 아미노산 위치에서 반대 전하를 갖는 하전된 아미노산의 도입을 기반으로 한다.
따라서, 이 양상에서 다중특이성 항체의 3차 구조에서 제1 중쇄의 CH3 도메인 및 제2 중쇄의 CH3 도메인은 각각의 항체 CH3 도메인들 사이에 위치하는 경계면을 형성하고, 이 때 제1 중쇄의 CH3 도메인의 각 아미노산 서열 및 제2 중쇄의 CH3 도메인의 아미노산 서열은 각각 항체의 3차 구조에서 상기 경계면 내부에 위치하는 아미노산 세트를 포함하고, 이 때 하나의 중쇄의 CH3 도메인 내 경계면에 위치한 아미노산 세트로부터 첫 번째 아미노산은 양전하를 띤 아미노산으로 치환되고 다른 하나의 중쇄의 CH3 도메인의 경계면에 위치한 아미노산 세트로부터 두 번째 아미노산은 음전하를 띤 아미노산으로 치환된다. 이 양상에 따른 이중특이성 항체는 본원에서 "CH3(+/-)-조작된 이중특이성 항체"로도 지칭된다(이 때 약어 "+/-"는 각각의 CH3 도메인에 도입된 반대로 하전된 아미노산을 나타낸다).
한 양상에서, CH3(+/-)-조작된 이중특이성 항체에서 양전하 아미노산은 K, R 및 H에서 선택되고 음전하 아미노산은 E 또는 D에서 선택된다.
한 양상에서, CH3(+/-)-조작된 이중특이성 항체에서 양전하 아미노산은 K, 및 R에서 선택되고 음전하 아미노산은 E 또는 D에서 선택된다.
한 양상에서, CH3(+/-)-조작된 이중특이성 항체에서 양전하를 띤 아미노산은 K이고, 음전하를 띤 아미노산은 E이다.
한 양상에서, 하나의 중쇄의 CH3 도메인 내의 CH3(+/-) 조작된 이중특이성 항체에서 위치 409의 아미노산 R은 D로 치환되고 위치의 아미노산 K는 E로 치환되고, 다른 하나의 중쇄의 CH3 도메인에서 위치 399의 아미노산 D는 K로 치환되고 위치 357의 아미노산 E는 K로 치환된다(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링).
한 양상에서, WO 2013/157953에 기재된 접근법은 다중특이성 항체의 제1 중쇄 및 제2 중쇄의 이종이량체화를 보조하기 위해 사용된다. 한 실시양태에서 하나의 중쇄의 CH3 도메인에서 위치 366의 아미노산 T는 K로 치환되고, 다른 하나의 중쇄의 CH3 도메인에서 위치 351의 아미노산 L은 D로 치환된다(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링). 또 다른 실시양태에서 하나의 중쇄의 CH3 도메인에서 위치 366의 아미노산 T는 K로 치환되고 위치 351의 아미노산 L은 K로 치환되고, 다른 하나의 중쇄의 CH3 도메인에서 위치 351의 아미노산 L은 D로 치환된다(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링).
또 다른 양상에서 하나의 중쇄의 CH3 도메인에서 위치 366의 아미노산 T는 K로 치환되고 위치 351의 아미노산 L은 K로 치환되고, 다른 하나의 중쇄의 CH3 도메인에서 위치 351의 아미노산 L은 D로 치환된다(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링). 또한 다음 치환 중 적어도 하나가 다른 하나의 중쇄의 CH3 도메인에 포함된다: 위치 349의 아미노산 Y는 E로 치환되고, 위치 349의 아미노산 Y는 D로 치환되며, 위치 368의 아미노산 L은 E로 치환된다(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링). 한 실시양태에서 위치 368의 아미노산 L은 E로 치환된다(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링).
한 양상에서, WO 2012/058768에 기재된 접근법은 다중특이성 항체의 제1 중쇄 및 제2 중쇄의 이종이량체화를 보조하기 위해 사용된다. 한 양상에서, 하나의 중쇄의 CH3 도메인에서 위치 351의 아미노산 L은 Y로 치환되고 위치 407의 아미노산 Y는 A로 치환되고, 다른 하나의 중쇄의 CH3 도메인에서 위치 366의 아미노산 T는 A로 치환되고 위치 409의 아미노산 K는 F로 치환된다(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링). 또 다른 실시형태에서, 전술한 치환에 더하여, 다른 하나의 중쇄의 CH3 도메인에서 위치 411(원래 T), 399(원래 D), 400(원래 S), 405(원래 F), 390(원래 N) 및 392(원래 K)의 아미노산 중 적어도 하나가 치환된다(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링). 바람직한 치환은 다음과 같다:
- 위치 411의 아미노산 T를 N, R, Q, K, D, E 및 W로부터 선택된 아미노산으로 치환(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링),
- 위치 399의 아미노산 D를 R, W, Y, 및 K로부터 선택된 아미노산으로 치환(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링),
- 위치 400의 아미노산 S를 E, D, R 및 K로부터 선택된 아미노산으로 치환(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링),
- 위치 405의 아미노산 F를 I, M, T, S, V 및 W로부터 선택된 아미노산으로 치환(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링),
- 위치 390의 아미노산 N을 R, K 및 D로부터 선택된 아미노산으로 치환(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링), 및
- 위치 392의 아미노산 K를 V, M, R, L, F 및 E로부터 선택된 아미노산으로 치환(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링).
또 다른 양상에서, 이중특이성 항체는 WO 2012/058768에 따라 조작된다, 즉, 하나의 중쇄의 CH3 도메인에서 위치 351의 아미노산 L은 Y로 치환되고 위치 407의 아미노산 Y는 A로 치환되고, 다른 하나의 중쇄의 CH3 도메인에서 위치 366의 아미노산 T는 V로 치환되고 위치 409의 아미노산 K는 F로 치환된다(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링). 다중특이성 항체의 또 다른 실시형태에서, 하나의 중쇄의 CH3 도메인에서 위치 407의 아미노산 Y는 A로 치환되고, 다른 하나의 중쇄의 CH3 도메인에서 위치 366의 아미노산 T는 A로 치환되고 위치 409의 아미노산 K는 F로 치환된다(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링). 마지막 전술한 실시형태에서, 다른 하나의 중쇄의 CH3 도메인에서 위치 392의 아미노산 K는 E로 치환되고, 위치 411의 아미노산 T는 E로 치환되고, 위치 399의 아미노산 D는 R로 치환되고, 위치 400의 아미노산 S는 R로 치환된다(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링).
한 양상에서, WO 2011/143545에 기재된 접근법은 다중특이성 항체의 제1 중쇄 및 제2 중쇄의 이종이량체화를 보조하기 위해 사용된다. 한 양상에서, 두 중쇄의 CH3 도메인에서의 아미노산 변형은 위치 368 및/또는 409에 도입된다(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링).
한 양상에서, WO 2011/090762에서 기재된 접근법은 이중특이성 항체의 제1 중쇄 및 제2 중쇄의 이종이량체화를 보조하기 위해 사용된다. WO 2011/090762는 "놉-인투-홀"(KiH) 기술에 따른 아미노산 변형에 관한 것이다. 한 실시양태에서 하나의 중쇄의 CH3 도메인에서 위치 366의 아미노산 T는 W로 치환되고, 다른 하나의 중쇄의 CH3 도메인에서 위치 407의 아미노산 Y는 A로 치환된다(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링). 또 다른 실시양태에서 하나의 중쇄의 CH3 도메인에서 위치 366의 아미노산 T는 Y로 치환되고, 다른 하나의 중쇄의 CH3 도메인에서 위치 407의 아미노산 Y는 T로 치환된다(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링).
한 양상에서, WO 2009/089004에서 기재된 접근법은 이중특이성 항체의 제1 중쇄 및 제2 중쇄의 이종이량체화를 보조하기 위해 사용된다. 한 실시양태에서 하나의 중쇄의 CH3 도메인에서 위치 392의 아미노산 K 또는 N은 음전하를 띤 아미노산으로 치환되고(한 실시양태에서는 E 또는 D로, 한 바람직한 실시양태에서는 D로), 다른 하나의 중쇄의 CH3 도메인에서 위치 399에 있는 아미노산 D, 위치 356에 있는 아미노산 E 또는 D 또는 위치 357에 있는 아미노산 E는 양전하를 띤 아미노산으로 치환된다(한 실시예에서 K 또는 R, 한 바람직한 실시예에서 K, 한 바람직한 실시양태에서 위치 399 또는 356의 아미노산은 K로 치환된다)(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링). 한 추가 실시양태에서, 전술한 치환에 더하여, 하나의 중쇄의 CH3 도메인에서 위치 409의 아미노산 K 또는 R은 음전하를 띤 아미노산으로 치환된다(한 실시양태에서는 E 또는 D로, 하나의 바람직한 실시양태에서는 D로)(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링). 하나의 또 다른 추가 실시양태에서, 전술한 치환에 더하여 또는 이에 대안적으로, 하나의 중쇄의 CH3 도메인에서 위치 439의 아미노산 K 및/또는 위치 370의 아미노산 K는 서로 독립적으로 음전하를 띤 아미노산으로 치환된다(하나의 실시양태에서는 E 또는 D로, 하나의 바람직한 실시양태에서는 D로)(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링).
한 양상에서, WO 2007/147901에 기재된 접근법은 다중특이성 항체의 제1 중쇄 및 제2 중쇄의 이종이량체화를 보조하기 위해 사용된다. 한 실시양태에서 하나의 중쇄의 CH3 도메인에서 위치 253의 아미노산 K는 E로 치환되고, 위치 282의 아미노산 D는 K로 치환되고 위치 322의 아미노산 K는 D로 치환되고, 다른 하나의 중쇄의 CH3 도메인에서 위치 239의 아미노산 D는 K로 치환되고, 위치 240의 아미노산 E는 K로 치환되고, 위치 292의 아미노산 K는 D로 치환된다(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링).
본원에 보고된 이중특이성 항체 중쇄의 C-말단은 아미노산 잔기 PGK로 끝나는 완전한 C-말단 일 수 있다. 중쇄의 C-말단은 C 말단 아미노산 잔기 중 1개 또는 2개가 제거된 단축된 C-말단일 수 있다. 한 바람직한 양상에서, 중쇄의 C-말단은 PG로 끝나는 단축된 C-말단이다.
본원에 보고된 모든 양상들 중 한 양상에서, 본원에 명시된 바와 같은 C-말단 CH3 도메인을 포함하는 중쇄를 포함하는 이중특이성 항체는 C-말단 글리신-리신 디펩티드(G446 및 K447, Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링)를 포함한다. 본원에 보고된 모든 양상들 중 한 실시형태에서, 본원에 명시된 바와 같은 C-말단 CH3 도메인을 포함하는 중쇄를 포함하는 이중특이성 항체는 C-말단 글리신 잔기(G446, Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링)를 포함한다.
iii. Fab 도메인의 변형
한 양상에서, 본 발명은 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 Fab 단편 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 Fab 단편을 포함하는 이중특이성 항체에 관한 것이며, 이 때 Fab 단편 중 하나에서 가변 도메인 VH와 VL 또는 불변 도메인 CH1과 CL이 교환된다. 이중특이성 항체는 Crossmab 기술에 따라 제조된다.
하나의 결합 팔(CrossMabVH-VL 또는 CrossMabCH-CL)에서 도메인 대체/교환을 갖는 다중특이성 항체는 WO2009/080252, WO2009/080253 및 Schaefer, W. 외, PNAS, 108(2011) 11187-1191에 자세히 설명되어 있다. 이 항체들은 (이러한 도메인 교환이 없는 접근 방식에 비해) 제1 항원에 대한 경쇄와 제2 항원에 대한 잘못된 중쇄의 미스매칭으로 인한 부산물을 분명히 줄인다.
특정 양상에서, 본 발명은 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 Fab 단편 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 Fab 단편을 포함하는 이중특이성 항체에 관한 것이며, 이 때 Fab 단편들 중 하나에서 가변 도메인 VL 및 VH는 VH 도메인이 경쇄의 일부이고 VL 도메인이 중쇄의 일부가 되도록 서로에 의해 대체된다. 특정 양상에서, 이중특이성 항체는, PD-1에 특이적으로 결합하는 항원 결합 도메인을 포함하는 제1 Fab 단편에서 가변 도메인 VL 및 VH가 서로에 의해 대체되어 있는 항체이다.
또 다른 양상에서, 그리고 정확한 페어링을 추가로 개선하기 위해, PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 Fab 단편 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 Fab 단편을 포함하는 이중특이성 항체는 상이한 하전된 아미노산 치환(소위 "하전된 잔기")을 함유할 수 있다. 이러한 변형은 교차 또는 비-교차 CH1 및 CL 도메인에 도입된다. 이러한 변형은 예를 들어 WO2015/150447, WO2016/020309 및 PCT/EP2016/073408에 기재되어 있다.
특정 양상에서, 본 발명은 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 Fab 단편 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 Fab 단편을 포함하는 이중특이성 항체에 관한 것이며, 이 때 불변 도메인 CL 내의 Fab 단편들 중 하나에서 위치 124의 아미노산이 독립적으로 리신(K), 아르기닌(R) 또는 히스티딘(H)으로 치환되고(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링), 불변 도메인 CH1에서 위치 147 및 213의 아미노산이 글루탐산(E) 또는 아스파르트산(D)에 의해 독립적으로 치환된다(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링). 특정 양상에서, 이중특이성 항체는, TIM3에 특이적으로 결합하는 항원 결합 도메인을 포함하는 제2 Fab 단편에서 불변 도메인 CL에서 위치 124의 아미노산이 독립적으로 리신(K), 아르기닌(R) 또는 히스티딘(H)으로 치환되고(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링), 불변 도메인 CH1에서 위치 147 및 213의 아미노산이 글루탐산(E) 또는 아스파르트산(D)에 의해 독립적으로 치환되는 항체이다(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링).
특별한 양상에서, 본 발명은 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 Fab 단편 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 Fab 단편을 포함하는 이중특이성 항체에 관한 것이며, CL 도메인들 중 하나에서 위치 123(EU 넘버링)의 아미노산이 아르기닌(R)으로 대체되어 있고 위치 124(EU 넘버링)의 아미노산이 리신(K)으로 치환되어 있고, 그리고 CH1 도메인들 중 하나에서 위치 147(EU 넘버링) 및 위치 213(EU 넘버링)의 아미노산이 글루탐산(E)으로 치환되어 있다. 한 특정 양상에서, 이중특이성 항체는, LAG3에 특이적으로 결합하는 항원 결합 도메인을 포함하는 제2 Fab 단편에서 CL 도메인들 중 하나에서 위치 123(EU 넘버링)의 아미노산이 아르기닌(R)으로 대체되어 있고 위치 124(EU 넘버링)의 아미노산이 리신(K)으로 치환되어 있고, 그리고 CH1 도메인들 중 하나에서 위치 147(EU 넘버링) 및 위치 213(EU 넘버링)의 아미노산이 글루탐산(E)으로 치환되어 있는 항체이다.
추가 양상에서, 이중특이성 항체는 다음을 포함하는 2가 항체이고:
a) 제1 항원에 특이적으로 결합하는 항체의 제1 경쇄 및 제1 중쇄, 및
b) 제2 항원에 특이적으로 결합하는 항체의 제2 경쇄 및 제2 중쇄, 이 때 제2 경쇄 및 제2 중쇄의 가변 도메인 VL 및 VH는 서로에 의해 대체된다.
a)의 항체는 b)에 보고된 변형을 포함하지 않으며 a)의 중쇄 및 경쇄는 단리된 사슬이다.
경쇄 내부의 b)의 항체에서 가변 경쇄 도메인 VL은 상기 항체의 가변 중쇄 도메인 VH로 대체되고, 중쇄 내부에서 가변 중쇄 도메인 VH는 상기 항체의 가변 경쇄 도메인 VL로 대체된다.
한 양상에서, (i) a)의 제1 경쇄의 불변 도메인 CL에서 위치 124(Kabat에 따른 넘버링)의 아미노산은 양전하를 띤 아미노산으로 치환되고, 그리고 이 때 a)의 제1 중쇄의 불변 도메인 CH1에서 위치 147의 아미노산 또는 위치 213의 아미노산(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링)이 음전하를 띤 아미노산으로 치환되거나, 또는 (ii) b)의 제2 경쇄의 불변 도메인 CL에서 위치 124의 아미노산(Kabat에 따른 넘버링)은 양전하를 띤 아미노산으로 치환되고, 그리고 이 때 b)의 제2 중쇄의 불변 도메인 CH1에서 위치 147의 아미노산 또는 위치 213의 아미노산(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링)은 음전하를 띤 아미노산으로 대체된다.
또 다른 양상에서, (i) a)의 제1 경쇄의 불변 도메인 CL에서 위치 124의 아미노산은 독립적으로 리신(K), 아르기닌(R) 또는 히스티딘(H)으로(Kabat에 따른 넘버링)(하나의 바람직한 실시양태에서 독립적으로 리신(K) 또는 아르기닌(R)으로) 치환되고, 그리고 이 때 a)의 제1 중쇄의 불변 도메인 CH1에서 위치 147의 아미노산 또는 위치 213의 아미노산은 독립적으로 글루탐산(E) 또는 아스파르트산(D)으로 치환되고(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링), 또는 (ii) b)의 제2 경쇄의 불변 도메인 CL에서 위치 124의 아미노산은 독립적으로 리신(K), 아르기닌(R) 또는 히스티딘(H)으로(Kabat에 따른 넘버링)(하나의 바람직한 실시양태에서 독립적으로 리신(K) 또는 아르기닌(R)으로) 치환되고, 이 때 b)의 제2 중쇄의 불변 도메인 CH1에서 위치 147의 아미노산 또는 위치 213의 아미노산은 독립적으로 글루탐산(E) 또는 아스파르트산(D)으로 치환된다(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링).
한 양상에서, 제2 중쇄의 불변 도메인 CL에서 위치 124 및 123의 아미노산은 K로 치환된다(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링).
한 양상에서, 제2 중쇄의 불변 도메인 CL에서 위치 123의 아미노산은 R로 치환되고 위치 124의 아미노산은 K로 치환된다(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링).
한 양상에서, 제2 경쇄의 불변 도메인 CH1에서 위치 147 및 213의 아미노산은 E로 치환된다(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링).
한 양상에서, 제1 경쇄의 불변 도메인 CL에서 위치 124 및 123의 아미노산은 K로 치환되고, 제1 중쇄의 불변 도메인 CH1에서 위치 147 및 213의 아미노산은 E로 치환된다(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링).
한 양상에서, 제1 경쇄의 불변 도메인 CL에서 위치 123의 아미노산은 R로 치환되고 위치 124의 아미노산은 K로 치환되고, 제1 중쇄의 불변 도메인 CH1에서 위치 147 및 213의 아미노산은 모두 E로 치환된다(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링).
한 양상에서, 제2 중쇄의 불변 도메인 CL에서 위치 124 및 123의 아미노산은 K로 치환되고, 그리고 이때 제2 경쇄의 불변 도메인 CH1에서 위치 147 및 213의 아미노산은 E로 치환되고, 그리고 제1 경쇄의 가변 도메인 VL에서 위치 38의 아미노산은 K로 치환되고, 제1 중쇄의 가변 도메인 VH에서 위치 39의 아미노산은 E로 치환되고, 제2 중쇄의 가변 도메인 VL에서 위치 38의 아미노산은 K로 치환되고, 제2 경쇄의 가변 도메인 VH에서 위치 39의 아미노산은 E로 치환된다(Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링).
한 양상에서, 이중특이성 항체는 다음을 포함하는 2가 항체이고:
a) 제1 항원에 특이적으로 결합하는 항체의 제1 경쇄 및 제1 중쇄, 및
b) 제2 항원에 특이적으로 결합하는 항체의 제2 경쇄 및 제2 중쇄, 이 때 제2 경쇄 및 제2 중쇄의 가변 도메인 VL 및 VH는 서로에 의해 대체되고, 제2 경쇄 및 제2 중쇄의 불변 도메인 CL 및 CH1은 서로에 의해 대체된다.
a)의 항체는 b)에 보고된 변형을 포함하지 않으며 a)의 중쇄 및 경쇄는 단리된 사슬이다. 경쇄 내부의 b)의 항체에서 가변 경쇄 도메인 VL은 상기 항체의 가변 중쇄 도메인 VH로 대체되고, 불변 경쇄 도메인 CL은 상기 항체의 불변 중쇄 도메인 CH1으로 대체되며; 중쇄 내부에서 가변 중쇄 도메인 VH는 상기 항체의 가변 경쇄 도메인 VL로 대체되고, 불변 중쇄 도메인 CH1은 상기 항체의 불변 경쇄 도메인 CL로 대체된다.
한 양상에서, 이중특이성 항체는 다음을 포함하는 2가 항체이고:
a) 제1 항원에 특이적으로 결합하는 항체의 제1 경쇄 및 제1 중쇄, 및
b) 제2 항원에 특이적으로 결합하는 항체의 제2 경쇄 및 제2 중쇄, 이 때 제2 경쇄 및 제2 중쇄의 불변 도메인 CL 및 CH1은 서로에 의해 대체된다.
a)의 항체는 b)에 보고된 변형을 포함하지 않으며 a)의 중쇄 및 경쇄는 단리된 사슬이다. b)의 항체에서 경쇄 내의 불변 경쇄 도메인 CL은 상기 항체의 불변 중쇄 도메인 CH1로 대체되고; 중쇄 내의 불변 중쇄 도메인 CH1은 상기 항체의 불변 경쇄 도메인 CL로 대체된다.
한 양상에서, 이중특이성 항체는 다음을 포함하는 이중특이성 항체이고:
a) 제1 항원에 특이적으로 결합하고 2개의 항체 중쇄 및 2개의 항체 경쇄로 이루어진 전장 항체, 및
b) 제2 항원에 특이적으로 결합하는 1개, 2개, 3개 또는 4개의 단일 사슬 Fab 단편,
이 때 b)의 상기 단일 사슬 Fab 단편은 상기 전장 항체의 중쇄 또는 경쇄의 C- 또는 N-말단에서 펩티드 링커를 통해 a)의 상기 전장 항체에 융합된다.
한 양상에서, 제2 항원에 결합하는 1개 또는 2개의 동일한 단일 사슬 Fab 단편은 상기 전장 항체의 중쇄 또는 경쇄의 C 말단에서 펩티드 링커를 통해 전장 항체에 융합된다.
한 양상에서, 제2 항원에 결합하는 1개 또는 2개의 동일한 단일 사슬 Fab(scFab) 단편은 상기 전장 항체의 중쇄의 C 말단에서 펩티드 링커를 통해 전장 항체에 융합된다.
한 양상에서, 제2 항원에 결합하는 1개 또는 2개의 동일한 단일 사슬 Fab(scFab) 단편은 상기 전장 항체의 경쇄의 C 말단에서 펩티드 링커를 통해 전장 항체에 융합된다.
한 양상에서, 제2 항원에 결합하는 2개의 동일한 단일 사슬 Fab(scFab) 단편은 상기 전장 항체의 각 중쇄 또는 경쇄의 C 말단에서 펩티드 링커를 통해 전장 항체에 융합된다.
한 양상에서, 제2 항원에 결합하는 2개의 동일한 단일 사슬 Fab(scFab) 단편은 상기 전장 항체의 각 중쇄의 C 말단에서 펩티드 링커를 통해 전장 항체에 융합된다.
한 양상에서, 제2 항원에 결합하는 2개의 동일한 단일 사슬 Fab(scFab) 단편은 상기 전장 항체의 각 경쇄의 C 말단에서 펩티드 링커를 통해 전장 항체에 융합된다.
한 양상에서, 이중특이성 항체는 다음을 포함하는 3가 항체이고:
a) 제1 항원에 특이적으로 결합하고 2개의 항체 중쇄 및 2개의 항체 경쇄로 이루어진 전장 항체,
b) 다음으로 구성된 제1 폴리펩티드:
ba) 항체 중쇄 가변 도메인(VH), 또는
bb) 항체 중쇄 가변 도메인(VH) 및 항체 불변 도메인 1(CH1),
이 때 상기 제1 폴리펩티드는 그 VH 도메인의 N-말단이 상기 전장 항체의 2개의 중쇄 중 하나의 C-말단에 펩티드 링커를 통해 융합되고,
c) 다음으로 구성된 제2 폴리펩티드:
ca) 항체 경쇄 가변 도메인(VL), 또는
cb) 항체 경쇄 가변 도메인(VL) 및 항체 경쇄 불변 도메인(CL),
이 때 상기 제2 폴리펩티드는 VL 도메인의 N-말단이 상기 전장 항체의 2개의 중쇄 중 다른 것의 C-말단에 펩티드 링커를 통해 융합되고, 그리고
이 때 제1 폴리펩티드의 항체 중쇄 가변 도메인(VH) 및 제2 폴리펩티드의 항체 경쇄 가변 도메인(VL)은 함께 제2 항원에 특이적으로 결합하는 항원 결합 도메인을 형성한다.
한 양상에서, b)의 폴리펩티드의 항체 중쇄 가변 도메인(VH) 및 c)의 폴리펩티드의 항체 경쇄 가변 도메인(VL)은 다음 위치들 사이에 이황화 결합을 도입함으로써 사슬간 이황화 가교를 통해 연결되고 안정화된다:
(i) 중쇄 가변 도메인 위치 44 내지 경쇄 가변 도메인 위치 100, 또는
(ii) 중쇄 가변 도메인 위치 105 내지 경쇄 가변 도메인 위치 43, 또는
(iii) 중쇄 가변 도메인 위치 101 내지 경쇄 가변 도메인 위치 100(넘버링은 항상 Kabat EU 인덱스에 따름).
안정화를 위한 비천연 이황화 가교를 도입하는 기술은, 예를 들어, WO 94/029350, Rajagopal, V., 외, Prot. Eng. (1997) 1453-1459; Kobayashi, H., 외, Nucl. Med. Biol. 25 (1998) 387-393; 및 Schmidt, M., 외, Oncogene 18 (1999) 1711-1721에 기재되어 있다. 한 실시양태에서 b) 및 c)의 폴리펩티드의 가변 도메인들 사이의 선택적인 이황화 결합은 중쇄 가변 도메인 위치 44와 경쇄 가변 도메인 위치 100 사이에 존재한다. 한 실시양태에서 b) 및 c)의 폴리펩티드의 가변 도메인들 사이의 선택적인 이황화 결합은 중쇄 가변 도메인 위치 105와 경쇄 가변 도메인 위치 43 사이에 존재한다(넘버링은 항상 Kabat에 따름). 한 실시양태에서, 단일 사슬 Fab 단편들의 가변 도메인 VH와 VL 사이에 상기 선택적 이황화물 안정화가 없는 3가, 이중특이성 항체가 바람직하다.
한 양상에서, 이중특이성 항체는 다음을 포함하는 삼중특이성 또는 사중특이성 항체이다:
a) 제1 항원에 특이적으로 결합하는 전장 항체의 제1 경쇄 및 제1 중쇄, 및
b) 제2 항원에 특이적으로 결합하는 전장 항체의 제2 (변형) 경쇄 및 제2 (변형) 중쇄, 이 때 가변 도메인 VL 및 VH는 서로에 의해 대체되고/되거나 불변 도메인은 CL과 CH1은 서로에 의해 대체되고, 및
c) 이 때 1개 또는 2개의 추가 항원(즉, 제3 및/또는 제4 항원)에 특이적으로 결합하는 1개 내지 4개의 항원 결합 도메인은 펩티드 링커를 통해 a) 및/또는 b)의 경쇄 또는 중쇄의 C- 또는 N-말단에 융합된다.
a)의 항체는 b)에 보고된 변형을 포함하지 않으며 a)의 중쇄 및 경쇄는 단리된 사슬이다.
한 양상에서, 삼중특이성 또는 사중특이성 항체는 c)에서 1개 또는 2개의 추가 항원에 특이적으로 결합하는 1개 또는 2개의 항원 결합 도메인을 포함한다.
한 양상에서, 항원 결합 도메인은 scFv 단편 및 scFab 단편의 그룹으로부터 선택된다.
한 양상에서, 항원 결합 도메인은 scFv 단편이다.
한 양상에서, 항원 결합 도메인은 scFab 단편이다.
한 양상에서, 항원 결합 도메인은 a) 및/또는 b)의 중쇄의 C-말단에 융합된다.
한 양상에서, 삼중특이성 또는 사중특이성 항체는 c)에서 하나의 추가 항원에 특이적으로 결합하는 1개 또는 2개의 항원 결합 도메인을 포함한다.
한 양상에서, 삼중특이성 또는 사중특이성 항체는 c)에서 제3 항원에 특이적으로 결합하는 2개의 동일한 항원 결합 도메인을 포함한다. 한 바람직한 실시양태에서 이러한 2개의 동일한 항원 결합 도메인은 모두 동일한 펩티드 링커를 통해 a) 및 b)의 중쇄의 C-말단에 융합된다. 한 바람직한 구현예에서 2개의 동일한 항원 결합 도메인은 scFv 단편 또는 scFab 단편이다.
한 양상에서, 삼중특이성 또는 사중특이성 항체는 c)에서 제3 및 제4 항원에 특이적으로 결합하는 2개의 항원 결합 도메인을 포함한다. 한 실시양태에서 상기 2개의 항원 결합 도메인은 모두 동일한 펩티드 연결기(connector)를 통해 a) 및 b)의 중쇄의 C-말단에 융합된다. 한 바람직한 구현예에서 상기 2개의 항원 결합 도메인은 scFv 단편 또는 scFab 단편이다.
한 양상에서, 이중특이성 항체는 다음을 포함하는 이중특이성 4가 항체이고:
a) 제1 항원에 특이적으로 결합하는, 항체의 2개의 경쇄 및 2개의 중쇄(및 2개의 Fab 단편들을 포함함),
b) 제2 항원에 특이적으로 결합하는 항체의 2개의 추가 Fab 단편, 이 때 상기 추가 Fab 단편들은 모두 펩티드 링커를 통해 a)의 중쇄의 C-말단 또는 N-말단에 융합되고, 및
이 때 Fab 단편에서 다음과 같은 변형이 수행되었다:
(i) a)의 두 Fab 단편에서, 또는 b)의 두 Fab 단편에서, 가변 도메인 VL 및 VH가 서로에 의해 대체되고/되거나 불변 도메인 CL 및 CH1이 서로에 의해 대체되거나, 또는
(ii) a)의 두 Fab 단편에서 가변 도메인 VL과 VH가 서로에 의해 대체되고, 불변 도메인 CL과 CH1이 서로에 의해 대체되고, 그리고 b)의 두 Fab 단편에서 가변 도메인 VL과 VH가 서로에 의해 대체되거나, 또는 불변 도메인 CL 및 CH1이 서로에 의해 대체되고, 또는
(iii) a)의 두 Fab 단편에서 가변 도메인 VL과 VH가 서로에 의해 대체되고, 불변 도메인 CL과 CH1이 서로에 의해 대체되고, 그리고 b)의 두 Fab 단편에서 가변 도메인 VL과 VH는 서로에 의해 대체되거나, 또는 불변 도메인 CL 및 CH1이 서로에 의해 대체되고, 또는
(iv) a)의 두 Fab 단편에서 가변 도메인 VL 및 VH가 서로에 의해 대체되고, b)의 두 Fab 단편에서 불변 도메인 CL 및 CH1이 서로에 의해 대체되고, 또는
(v) a)의 두 Fab 단편에서 불변 도메인 CL 및 CH1이 서로에 의해 대체되고, b)의 두 Fab 단편에서 가변 도메인 VL 및 VH가 서로에 의해 대체된다.
한 양상에서, 상기 추가적인 Fab 단편들은 둘 모두 펩티드 링커를 통해 a)의 중쇄의 C-말단 또는 a)의 중쇄의 N-말단에 융합된다.
한 양상에서, 상기 추가 Fab 단편들은 둘 모두 펩티드 링커를 통해 a)의 중쇄들의 C-말단에 융합된다.
한 양상에서, 상기 추가 Fab 단편들은 둘 모두 펩티드 링커를 통해 a)의 중쇄들의 N-말단에 융합된다.
한 양상에서, Fab 단편에서 하기 변형이 수행된다: a)의 두 Fab 단편에서, 또는 b)의 두 Fab 단편에서, 가변 도메인 VL 및 VH가 서로에 의해 대체되고/되거나 불변 도메인 CL 및 CH1이 서로에 의해 대체된다.
한 양상에서, 이중특이성 항체는 다음을 포함하는 4가 항체이다:
a) 제1 항원에 특이적으로 결합하고 제1 VH-CH1 도메인 쌍을 포함하는, 제1 항체의 (변형된) 중쇄, 이 때 상기 중쇄의 C 말단에 상기 제1 항체의 제2 VH-CH1 도메인 쌍의 N-말단이 펩티드 링커를 통해 융합되고,
b) a)의 상기 제1 항체의 2개의 경쇄,
c) 제2 항원에 특이적으로 결합하고 제1 VH-CL 도메인 쌍을 포함하는 제2 항체의 (변형된) 중쇄, 이 때 상기 중쇄의 C-말단에 상기 제2 항체의 제2 VH-CL 도메인 쌍의 N-말단이 펩티드 링커를 통해 융합되고, 및
d) 각각 CL-CH1 도메인 쌍을 포함하는 c)의 상기 제2 항체의 2개의 (변형된) 경쇄.
한 양상에서, 이중특이성 항체는 다음을 포함하고:
a) 제1 항원에 특이적으로 결합하는 제1 전장 항체의 중쇄 및 경쇄, 및
b) 제2 항원에 특이적으로 결합하는 제2 전장 항체의 중쇄 및 경쇄, 이 때 중쇄의 N-말단은 펩티드 링커를 통해 경쇄의 C-말단에 연결된다.
a)의 항체는 b)에 보고된 변형을 포함하지 않으며 중쇄 및 경쇄는 단리된 사슬이다.
한 양상에서, 이중특이성 항체는 다음을 포함하고:
a) 제1 항원에 특이적으로 결합하고 2개의 항체 중쇄 및 2개의 항체 경쇄로 이루어진 전장 항체, 및
b) VH2 도메인 및 VL2 도메인을 포함하는 제2 항원에 특이적으로 결합하는 Fv 단편, 이 때 두 도메인은 이황화 가교를 통해 서로 연결되고,
이 때 VH2 도메인 또는 VL2 도메인만이 펩티드 링커를 통해, 제1 항원에 특이적으로 결합하는 전장 항체의 중쇄 또는 경쇄에 융합된다.
이중특이성 항체에서 a)의 중쇄 및 경쇄는 단리된 사슬이다.
한 양상에서, VH2 도메인 또는 VL2 도메인의 다른 하나는 펩티드 링커를 통해, 제1 항원에 특이적으로 결합하는 전장 항체의 중쇄 또는 경쇄에 융합되지 않는다.
본원에 보고된 모든 양상에서 제1 경쇄는 VL 도메인 및 CL 도메인을 포함하고 제1 중쇄는 VH 도메인, CH1 도메인, 힌지 영역, CH2 도메인 및 CH3 도메인을 포함한다.
한 양상에서, 이중특이성 항체는 다음을 포함하는 3가 항체이고:
a) 제1 항원에 특이적으로 결합하는 2개의 Fab 단편,
b) CH1 및 CL 도메인이 서로 교환되는, 제2 항원에 특이적으로 결합하는 하나의 CrossFab 단편,
c) 제1 Fc-영역 중쇄 및 제2 Fc 영역 중쇄를 포함하는 하나의 Fc-영역,
이 때 2개의 Fab 단편들의 CH1 도메인들의 C-말단은 중쇄 Fc 영역 폴리펩티드의 N-말단에 연결되고, CrossFab 단편의 CL 도메인의 C-말단은 Fab 단편들 중 하나의 VH 도메인의 N-말단에 연결된다.
한 양상에서, 이중특이성 항체는 다음을 포함하는 3가 항체이고:
a) 제1 항원에 특이적으로 결합하는 2개의 Fab 단편,
b) CH1 및 CL 도메인이 서로 교환되는, 제2 항원에 특이적으로 결합하는 하나의 CrossFab 단편,
c) 제1 Fc-영역 중쇄 및 제2 Fc 영역 중쇄를 포함하는 하나의 Fc-영역,
이 때 제1 Fab 단편의 CH1 도메인의 C-말단은 중쇄 Fc 영역 폴리펩티드 중 하나의 N-말단에 연결되고 CrossFab 단편의 CL-도메인의 C-말단은 다른 하나의 중쇄 Fc 영역 폴리펩티드의 N-말단에 연결되고, 이 때 제2 Fab 단편의 CH1 도메인의 C-말단은 제1 Fab 단편의 VH 도메인의 N-말단에 또는 CrossFab 단편의 VH 도메인의 N-말단에 연결된다.
한 양상에서, 이중특이성 항체는 다음을 포함하고:
a) 제1 항원에 특이적으로 결합하고 2개의 항체 중쇄 및 2개의 항체 경쇄로 이루어진 전장 항체, 및
b) 중쇄 단편 및 경쇄 단편을 포함하는 VH2 도메인 및 VL2 도메인을 포함하는 제2 항원에 특이적으로 결합하는 Fab 단편, 이 때 경쇄 단편 내 가변 경쇄 도메인 VL2는 상기 항체의 가변 중쇄 도메인 VH2로 대체되고, 그리고 중쇄 단편 내 가변 중쇄 도메인 VH2는 상기 항체의 가변 경쇄 도메인 VL2로 대체되며,
이 때 중쇄 Fab 단편은 전장 항체의 중쇄 중 하나의 CH1 도메인과 전장 항체의 각각의 Fc-영역 사이에 삽입되고, 경쇄 Fab 단편의 N-말단은 내부에 중쇄 Fab 단편이 삽입되어 있는 전장 항체의 중쇄와 쌍을 이루는 전장 항체의 경쇄의 C-말단에 접합된다.
한 양상에서, 이중특이성 항체는 다음을 포함하고:
a) 제1 항원에 특이적으로 결합하고 2개의 항체 중쇄 및 2개의 항체 경쇄로 이루어진 전장 항체, 및
b) 중쇄 단편 및 경쇄 단편을 포함하는 VH2 도메인 및 VL2 도메인을 포함하는 제2 항원에 특이적으로 결합하는 Fab 단편, 이 때 경쇄 단편 내 가변 경쇄 도메인 VL2는 상기 항체의 가변 중쇄 도메인 VH2로 대체되고, 그리고 중쇄 단편 내 가변 중쇄 도메인 VH2는 상기 항체의 가변 경쇄 도메인 VL2로 대체되고, 그리고 Fab 단편의 중쇄 단편의 C-말단은 전장 항체의 중쇄들 중 하나의 N-말단에 접합되고 Fab 단편의 경쇄 단편의 C-말단은 Fab 단편의 중쇄 단편이 접합되는 전장 항체의 중쇄와 쌍을 이루는 전장 항체의 경쇄의 N-말단에 접합된다.
B. PD-1 및 LAG3에 결합하는 이중특이성 항체의 투여
질환의 예방 또는 치료를 위해, 본 발명의 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원-결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원-결합 도메인을 포함하는 이중특이성 항체(단독으로 사용되거나 하나 이상의 다른 추가 치료제와 조합으로 사용되는 경우)의 적절한 투여량은 치료할 질환의 유형, 투여 경로, 대상체의 체중, 융합 단백질의 유형, 질환의 중증도 및 경과, 이중특이성 항체가 예방 또는 치료 목적으로 투여되는지 여부, 이전 또는 동시 치료 개입, 대상체의 임상 이력 및 융합 단백질에 대한 반응, 주치의의 재량에 따라 달리 투여될 것이다. 투여를 담당하는 의사는 어떤 경우에도 개별 대상체에 대한 조성물 내 활성 성분의 농도와 적절한 용량을 결정할 것이다. 단일 또는 다양한 시점에 걸친 다중 투여, 일시 투여 및 펄스 주입을 비롯한(그러나 이에 제한되지 않는) 다양한 투약 일정이 본원에서 고려된다.
본원에 정의된 바와 같이 PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원-결합 도메인 및 LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원-결합 도메인을 포함하는 이중특이성 항체는 대상체에게 한 번에 또는 일련의 치료에 걸쳐 적합하게 투여된다. 질환의 유형 및 중증도에 따르면, 약 1 μg/kg 내지 15 mg/kg(예를 들어, 0.1 mg/kg 내지 10 mg/kg)의 이중특이성 항체는, 예를 들어, 1회 이상의 개별 투여에 의해 또는 연속 주입에 의해 대상체에게 투여하기 위한 초기 후보 투여량일 수 있다. 상기 언급된 인자들에 따라, 하나의 전형적인 일일 투여량의 범위는 약 1 μg/kg 내지 100 mg/kg 또는 그 이상이 될 수 있다. 수일 또는 보다 장기에 걸친 반복된 투여를 위하여, 병태에 따라, 치료는 일반적으로 질환 증세가 바람직하게 억제될 때까지 지속될 것이다. 이러한 이중특이성 항체의 한 가지 예시적인 투여량은 약 0.005 mg/kg 내지 약 10 mg/kg 범위 일 것이다. 다른 예에서, 용량은 또한 투여 당 약 1 μg/kg 체중, 약 5 μg/kg 체중, 약 10 μg/kg 체중, 약 50 μg/kg 체중, 약 100 μg/kg 체중, 약 200 μg/kg 체중, 약 350 μg/kg 체중, 약 500 μg/kg 체중, 약 1 mg/kg 체중, 약 5 mg/kg 체중, 약 10 mg/kg 체중, 약 50 mg/kg 체중, 약 100 mg/kg 체중, 약 200 mg/kg 체중, 약 350 mg/kg 체중, 약 500 mg/kg 체중, 내지 약 1000 mg/kg 체중 이상 및 이들 범위에서 유래하는 임의의 범위를 포함할 수도 있다. 본원에 열거된 숫자들로부터 유래될 수 있는 범위의 예에서, 상기 숫자에 기초하여, 약 5 mg/kg 체중 내지 약 100 mg/kg 체중, 약 5 μg/kg 체중 내지 약 500 mg/kg 체중 등의 범위가 투여될 수 있다. 따라서, 약 0.5mg/kg, 2.0mg/kg, 5.0mg/kg 또는 10mg/kg (또는 이의 임의의 조합)의 하나 이상의 용량이 대상체에게 투여될 수 있다. 이러한 용량은 간헐적으로, 예를 들면 매주 또는 3주마다 투여될 수 있다 (예를 들면 상기 대상체는 약 2 내지 약 20회, 또는 예를 들면 약 6회 용량의 융합 단백질을 제공받는다). 초기에는 보다 높은 부하 용량, 후속하여 보다 낮은 하나 이상의 용량이 투여될 수 있다. 그러나, 다른 투여량 요법이 유용할 수 있다. 이 요법의 진행은 통상적인 기술 및 분석에 의해 용이하게 모니터된다.
한 특정 양상에서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는 3주마다(Q3W) 약 600 mg의 고정 용량, 예를 들어, Q3W로 600 mg의 고정 용량으로 대상체에게 투여된다.
또 다른 양상에서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는 3주마다 약 1200 mg의 고정 용량, 예를 들어, Q3W로 1200 mg의 고정 용량으로 대상체에게 투여된다.
또 다른 양상에서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는 2주마다(Q2W) 약 2100 mg의 고정 용량, 예를 들어, Q2W로 2100 mg의 고정 용량으로 대상체에게 투여된다.
IX. VEGF 길항제
VEGF 길항제에는 VEGF에 결합하거나, VEGF 발현 수준을 감소시키거나, VEGF 생물학적 활성을 중화, 차단, 억제, 제거, 감소 또는 방해할 수 있는 모든 분자가 포함된다. 예시적인 인간 VEGF는 UniProtKB/Swiss-Prot 접근 번호 P15692, Gene ID(NCBI): 7422로 표시된다.
일부 예에서, VEGF 길항제는 항-VEGF 항체이다. 일부 실시양태에서, 항-VEGF 항체는 "rhuMab VEGF" 또는 "AVASTIN®"으로도 알려진 베바시주맙이다. 베바시주맙은 Presta 외의 문헌(Cancer Res. 57:4593-4599, 1997)에 따라 생성된 재조합 인간화 항-VEGF 단클론 항체이다. 이것은 돌연변이된 인간 IgG1 프레임워크 영역 및 인간 VEGF가 이의 수용체에 결합하는 것을 차단하는 뮤린 항-hVEGF 단클론 항체 A.4.6.1의 항원 결합 상보성 결정 영역을 포함한다. 프레임워크 영역의 대부분이 포함되는, 베바시주맙의 아미노산 서열 중 대략 93%는 인간 IgG1로부터 유래되고, 상기 서열의 약 7%는 뮤린 항체 A4.6.1로부터 유래된다. 베바시주맙은 약 149,000 달톤의 분자량을 가지며 당화되어 있다. 베바시주맙 및 기타 인간화 항-VEGF 항체는 2005년 2월 26일에 등록된 미국 특허 제6,884,879호에 기재되어 있으며, 그 전체 내용은 본원에 명시적으로 참조로 포함된다.
추가적인 바람직한 항체는 PCT 국제출원 공개 공보 WO 2005/012359에 기재된 바와 같은 G6 또는 B20 계열 항체(예를 들어, G6-31, B20-4.1)를 포함한다. 추가적인 바람직한 항체에 대해 미국 특허 제 7,060,269, 6,582,959, 6,703,020; 6,054,297; WO98/45332; WO 96/30046; WO94/10202; EP 0666868B1; 미국 특허 출원 공개 번호 2006009360, 20050186208, 20030206899, 20030190317, 20030203409 및 20050112126; 그리고 Popkov 외의 문헌(Journal of Immunological Methods 288:149-164, 2004)을 참조한다. 다른 바람직한 항체는 잔기 F17, M18, D19, Y21, Y25, Q89, 191, K101, E103 및 C104를 포함하는, 또는 대안적으로, 잔기 F17, Y21, Q22, Y25, D63, 183 및 Q89를 포함하는 인간 VEGF 상의 기능적 에피토프에 결합하는 것들을 포함한다.
다른 예들에서, VEGF 길항제는 항-VEGFR2 항체 또는 관련 분자(예를 들어, 라무시루맙, 타니비루맙, 애플리버셉트); 항-VEGFR1 항체 또는 관련 분자(예를 들어, 이크루쿠맙, 애플리버셉트(VEGF Trap-Eye; EYLEA®) 또는 지브-애플리버셉트(VEGF Trap; ZALTRAP®)); 이중특이성 VEGF 항체(예를 들어, MP-0250, 바누시주맙(VEGF-ANG2), 또는 US 2001/0236388에 개시된 이중특이성 항체); 항-VEGF, 항-VEGFR1 및 항-VEGFR2 팔들 중 2개의 조합을 포함하는 이중특이성 항체; 항-VEGFA 항체(예를 들어, 베바시주맙, 세바시주맙); 항-VEGFB 항체; 항-VEGFC 항체(예를 들어, VGX-100), 항-VEGFD 항체; 또는 비 펩티드 소분자 VEGF 길항제(예를 들어, 파조파닙, 악시티닙, 반데타닙, 스티바르가, 카보잔티닙, 렌바티닙, 닌테다닙, 오란티닙, 텔라티닙, 도비티닙, 세디라닙, 모테사닙, 설파티닙, 아파티닙, 포레티닙, 파미티닙 또는 티보자닙)이다. 일부 예에서, VEGF 길항제는 수용체 티로신 키나제 억제제(예를 들어, 수니티닙 또는 악시티닙과 같은 다중-표적화 수용체 티로신 키나제 억제제)를 포함하는 티로신 키나제 억제제일 수 있다.
X. PD-1 축 결합 길항제
D-1 축 결합 길항제는 PD-L1 결합 길항제, PD-1 결합 길항제, 및 PD-L2 결합 길항제를 포함할 수 있다. 암을 갖는 대상체를 치료하기 위해 임의의 적합한 PD-1 축 결합 길항제가 사용될 수 있다.
A. PD-L1 결합 길항제
일부 예들에서, PD-L1 결합 길항제는 PD-L1이 하나 또는 그 이상의 이의 리간드 결합 짝에 결합하는 것을 억제한다. 다른 예들에서, 상기 PD-L1 결합 길항제는 PD-L1이 PD-1에 결합하는 것을 억제한다. 또 다른 예들에서, 상기 PD-L1 결합 길항제는 PD-L1이 B7-1에 결합하는 것을 억제한다. 일부 예들에서, 상기 PD-L1 결합 길항제는 PD-L1이 PD-1 및 B7-1 둘 모두에 결합하는 것을 억제한다. PD-L1 결합 길항제는, 제한 없이, 항체, 이의 항원 결합 단편, 면역부착소, 융합 단백질, 올리고펩티드 또는 소분자일 수 있다. 일부 예들에서, PD-L1 결합 길항제는 PD-L1을 억제하는 소분자(예를 들어, GS-4224, INCB086550, MAX-10181, INCB090244, CA-170 또는 ABSK041)이다. 일부 예들에서, PD-L1 결합 길항제는 PD-L1 및 VISTA를 억제하는 소분자이다. 일부 예들에서, PD-L1 결합 길항제는 CA-170(AUPM-170으로도 공지됨)이다. 일부 예들에서, PD-L1 결합 길항제는 PD-L1 및 TIM3을 억제하는 소분자이다. 일부 예들에서, 소분자는 WO 2015/033301 및/또는 WO 2015/033299에 기술된 화합물이다.
일부 예들에서, 상기 PD-L1 결합 길항제는 항-PD-L1 항체이다. 다양한 항-PD-L1 항체가 고려되며 본원에 기재되어 있다. 본원에서 임의의 예에서, 단리된 항-PD-L1 항체는 인간 PD-L1, 예를 들면, UniProtKB/Swiss-Prot 접근 번호 Q9NZQ7.1에서 도시된 바와 같은 인간 PD-L1, 또는 이의 변이체에 결합할 수 있다. 일부 예들에서, 항-PD-L1 항체는 PD-L1과 PD-1 사이 및/또는 PD-L1과 B7-1 사이의 결합을 억제 할 수 있다. 일부 예들에서, 항-PD-L1 항체는 단클론 항체이다. 일부 실시형태에서, 항-PD-L1 항체는 Fab, Fab'-SH, Fv, scFv, 및 F(ab')2 단편으로 구성된 그룹에서 선택된 항체 단편이다. 일부 예들에서, 항-PD-L1 항체는 인간화 항체이다. 일부 예들에서, 항-PD-L1 항체는 인간 항체이다. 예시적인 항-PD-L1 항체는 아테졸리주맙, MDX-1105, MEDI4736(더발루맙), MSB0010718C(아벨루맙), SHR-1316, CS1001, 엔바폴리맙, TQB2450, ZKAB001, LP-002, CX-072, IMC-001, KL-A167, APL-502, 코시벨리맙, 로다폴리맙, FAZ053, TG-1501, BGB-A333, BCD-135, AK-106, LDP, GR1405, HLX20, MSB2311, RC98, PDL-GEX, KD036, KY1003, YBL-007, 및 Hs-636을 포함한다. 본 발명의 방법에 유용한 항-PD-L1 항체의 예 및 이의 제조 방법은 국제 특허 출원 공보 제 WO 2010/077634호 및 미국 특허 제8,217,149호에 기재되어 있으며, 이는 그 전체가 본원에 참고로 포함된다.
일부 예들에서, 상기 항-PD-L1 항체는 다음을 포함한다:
(a) 각각 GFTFSDSWIH(서열번호 64), AWISPYGGSTYYADSVKG(서열번호 65) 및 RHWPGGFDY(서열번호 66)의 HVR-H1, HVR-H2 및 HVR-H3 서열, 및
(b) 각각 RASQDVSTAVA(서열번호 67), SASFLYS(서열번호 68) 및 QQYLYHPAT(서열번호 69)의 HVR-L1, HVR-L2 및 HVR-L3 서열.
한 실시형태에서, 항-PD-L1 항체는 다음을 포함한다:
(a) 다음 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역(VH): EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSDSWIHWVRQAPGKGLEWVAWISPYGGSTYYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCARRHWPGGFDYWGQGTLVTVSS (서열번호 70), 및
(b)다음 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역(VL): DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVSTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYLYHPATFGQGTKVEIKR (서열번호 71).
일부 예들에서, 항-PD-L1 항체는 (a) 서열번호 9의 서열 또는 이에 적어도 95% 서열 동일성 (예를 들어, 적어도 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 서열 동일성)을 가지는 아미노산 서열을 포함하는 VH; (b) 서열번호 10의 서열 또는 이에 적어도 95% 서열 동일성 (예를 들어, 적어도 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 서열 동일성)을 가지는 아미노산 서열을 포함하는 VL; 또는 (c) (a)의 VH 및 (b)의 VL을 포함한다.
한 실시형태에서, 항-PD-L1 항체는 다음을 포함하는 아테졸리주맙을 포함한다:
(a) 다음의 중쇄 아미노산 서열: EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSDSWIHWVRQAPGKGLEWVAWISPYGGSTYYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCARRHWPGGFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYASTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (서열번호 62), 및
(b) 다음의 경쇄 아미노산 서열: DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVSTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYLYHPATFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (서열번호 63).
일부 예에서, 항-PD-L1 항체는 아벨루맙(CAS 등록 번호: 1537032-82-8)이다. MSB0010718C로도 공지된 아벨루맙은 인간 단클론 IgG1 항-PD-L1 항체(Merck KGaA, Pfizer)이다.
일부 예에서, 항-PD-L1 항체는 더발루맙(CAS 등록 번호: 1428935-60-7)이다. MEDI4736으로도 공지된 더발루맙은 WO 2011/066389 및 US 2013/034559에 기재된 Fc 최적화 인간 단클론 IgG1 카파 항-PD-L1 항체(MedImmune, AstraZeneca)이다.
일부 예들에서, 상기 항-PD-L1 항체는 MDX-1105(Bristol Myers Squibb)이다. BMS-936559로도 공지된 MDX-1105는 WO2007/005874에 기재된 항-PD-L1 항체이다.
일부 예들에서, 상기 항-PD-L1 항체는 LY3300054(Eli Lilly)이다.
일부 예들에서, 상기 항-PD-L1 항체는 STI-A1014(Sorrento)이다. STI-A1014는 인간 항-PD-L1 항체이다.
일부 예들에서, 상기 항-PD-L1 항체는 KN035(Suzhou Alphamab)이다. KN035는 낙타 파지 디스플레이 라이브러리로부터 생성된 단일 도메인 항체(dAB)이다.
일부 예들에서, 상기 항-PD-L1 항체는 절단될 때(예를 들어, 종양 미세 환경에서 프로테아제에 의해) 항체 항원 결합 도메인을 활성화하여, 예를 들어 비 결합 입체 모이어티를 제거함으로써 이의 항원에 결합하도록 하는 절단성 모이어티 또는 링커를 포함한다. 일부 예들에서, 상기 항-PD-L1 항체는 CX-072(CytomX Therapeutics)이다.
일부 예들에서, 항-PD-L1 항체는 6개의 HVR 서열(예를 들어, 3개의 중쇄 HVR 및 3개의 경쇄 HVR) 및/또는 US 20160108123, WO 2016/000619, WO 2012/145493, 미국 특허 9,205,148, WO 2013/181634, 또는 WO 2016/061142에 기재된 항-PD-L1 항체로부터의 중쇄 가변 도메인 및 경쇄 가변 도메인을 포함한다.
다른 추가의 특정 양상에서, 상기 항-PD-L1 항체는 감소된 또는 최소의 효과기 기능을 갖는다. 다른 추가의 특정 양상에서, 상기 최소의 효과기 기능은 "효과기-없는 Fc 돌연변이" 또는 비당화 돌연변이로부터 발생한다. 또 다른 추가 예에서, 효과기-없는 Fc 돌연변이는 불변 영역에서 N297A 또는 D265A/N297A 치환이다. 다른 추가의 경우에서, 상기 효과기 없는 Fc 돌연변이는 불변 영역에서 N297A 치환이다. 일부 예들에서서, 단리된 항-PD-L1 항체는 탈당화된다. 항체들의 당화는 전형적으로 N-연결 또는 O-연결된다. N-연결은 아스파라긴 잔기의 측쇄에 대한 탄수화물 잔기의 부착을 의미한다. 트리펩티드 서열 아스파라긴-X-세린 및 아스파라긴-X-트레오닌(이 때 X는 프롤린을 제외한 임의의 아미노산임)은 아스파라긴 측쇄에 탄수화물 잔기가 효소적으로 부착하기 위한 인식 서열이다. 따라서, 폴리펩티드에 이러한 트리펩티드 서열 중 하나가 존재하면 잠재적인 당화 부위가 생성된다. O-연결된 당화는 당 N-아세틸갈락토사민, 갈락토스 또는 자일로스 중 하나가 하이드록시아미노산(가장 일반적으로 세린 또는 트레오닌)에 부착되는 것을 말하며 5-하이드록시프롤린 또는 5-하이드록시리신도 사용될 수 있다. 항체로부터의 당화 부위 제거는 (N-연결된 당화 부위에 대해) 상기 기재된 트리펩티드 서열들 중 하나가 제거되도록 아미노산 서열을 변경함으로써 편리하게 이루어진다. 상기 변경은 당화 부위 내의 아스파라긴, 세린 또는 트레오닌 잔기를 다른 아미노산 잔기로 치환(예를 들어, 글리신, 알라닌 또는 보존적 치환)함으로써 이루어질 수 있다.
B. PD-1 결합 길항제
일부 예들에서, PD-1 축 결합 길항제는 PD-1 결합 길항제이다. 예를 들어, PD-1 결합 길항제는 PD-1이 하나 또는 그 이상의 이의 리간드 결합 짝에 결합하는 것을 억제한다. 일부 예들에서, PD-1 결합 길항제는 PD-1이 PD-L1에 결합하는 것을 억제한다. 다른 예들에서, PD-1 결합 길항제는 PD-1이 PD-L2에 결합하는 것을 억제한다. 또 다른 예들에서, PD-1 결합 길항제는 PD-1이 PD-L1 및 PD-L2 모두에 결합하는 것을 억제한다. PD-1 결합 길항제는, 제한 없이, 항체, 이의 항원 결합 단편, 면역부착소, 융합 단백질, 올리고펩티드 또는 소분자일 수 있다. 일부 예들에서, PD-1 결합 길항제는 면역부착소(예를 들어, 불변 영역(예를 들어, 면역글로불린 서열의 Fc 영역)에 융합된 PD-L1 또는 PD-L2의 세포외 또는 PD-1 결합 부분을 포함하는 면역부착소)이다. 예를 들어, 일부 예들에서, PD-1 결합 길항제는 Fc-융합 단백질이다. 일부 예들에서, PD-1 결합 길항제는 AMP-224이다. B7-DCIg로도 공지된 AMP-224는, WO 2010/027827 및 WO 2011/066342에 기재된 PD-L2-Fc 융합 가용성 수용체이다. 일부 예들에서, PD-1 결합 길항제는 펩티드 또는 소분자 화합물이다. 일부 예들에서, PD-1 결합 길항제는 AUNP-12(PierreFabre/Aurigene)이다. 예를 들어, WO 2012/168944, WO 2015/036927, WO 2015/044900, WO 2015/033303, WO 2013/144704, WO 2013/132317 및 WO 2011/161699를 참고한다. 일부 예들에서, PD-1 결합 길항제는 PD-1을 억제하는 소분자이다.
일부 예들에서, PD-1 결합 길항제는 항-PD-1 항체이다. 다양한 항-PD-1 항체가 본원에 개시된 방법에서 그리고 용도로 이용될 수 있다. 본원의 임의의 예들에서, PD-1 항체는 인간 PD-1 또는 이의 변이체에 결합할 수 있다. 일부 예들에서, 항-PD-1 항체는 단클론 항체이다. 일부 실시형태에서, 항-PD-1 항체는 Fab'-SH, Fv, scFv, 및 F(ab')2 단편으로 구성된 그룹에서 선택된 항체 단편이다. 일부 예들에서, 항-PD-1 항체는 인간화 항체이다. 다른 예들에서, 항-PD-1 항체는 인간 항체이다. 예시적인 항-PD-1 길항제 항체는 니볼루맙, 펨브롤리주맙, MEDI-0680, PDR001(스파르탈리주맙), REGN2810(세미플리맙), BGB-108, 프롤골리맙, 캄렐리주맙, 신틸리맙, 티스렐리주맙, 토리팔리맙, 도스타리맙, 레티판리맙, 사산리맙, 펜풀리맙, CS1003, HLX10, SCT-I10A, 짐베렐리맙, 발스틸리맙, 게놀림주맙, BI 754091, 세트렐리맙, YBL-006, BAT1306, HX008, 부디갈리맙, AMG 404, CX-188, JTX-4014, 609A, Sym021, LZM009, F520, SG001, AM0001, ENUM 244C8, ENUM 388D4, STI-1110, AK-103 및 hAb21을 포함한다.
일부 예들에서, 항-PD-1 항체는 니볼루맙(CAS 등록 번호: 946414-94-4)이다. MDX-1106-04, MDX-1106, ONO-4538, BMS-936558 및 OPDIVO®로도 알려진 니볼루맙(Bristol-Myers Squibb/Ono)은 WO2006/121168에 설명된 항-PD-1 항체이다.
일부 예들에서, 항-PD-1 항체는 펨브롤리주맙(CAS 등록 번호: 1374853-91-4)이다. MK-3475, Merck 3475, 람브롤리주맙, SCH-900475 및 KEYTRUDA®로도 알려진 펨브롤리주맙(Merck)은 WO 2009/114335에 설명된 항-PD-1 항체이다.
일부 예들에서, 항-PD-1 항체는 MEDI-0680(AMP-514; AstraZeneca)이다. MEDI-0680은 인간화 IgG4 항 PD-1 항체이다.
일부 예들에서, 항-PD-1 항체는 PDR001(CAS 등록 번호 1859072-53-9; Novartis)이다. PDR001은 PD-L1과 PD-L2가 PD-1에 결합하는 것을 차단하는 인간화 IgG4 항-PD-1 항체이다.
일부 예들에서서, 항 PD-1 항체는 REGN2810(Regeneron)이다. REGN2810은 인간 항 PD-1 항체이다.
일부 예들에서, 항-PD-1 항체는 BGB-108(BeiGene)이다.
일부 예들에서, 항-PD-1 항체는 BGB-A317(BeiGene)이다.
일부 예들에서, 항-PD-1 항체는 JS-001(Shanghai Junshi)이다. JS-001은 인간화 항 PD-1 항체이다.
일부 예들에서, 항-PD-1 항체는 STI-A1110(Sorrento)이다. STI-A1110은 인간 항 PD-1 항체이다.
일부 예들에서, 항-PD-1 항체는 INCSHR-1210(Incyte)이다. INCSHR-1210은 인간 IgG4 항 PD-1 항체이다.
일부 예들에서, 항-PD-1 항체는 PF-06801591 (Pfizer)이다.
일부 예들에서, 항-PD-1 항체는 TSR-042(ANB011로도 알려짐; Tesaro/AnaptysBio)이다.
일부 예들에서서, 항 PD-1 항체는 AM0001(ARMO Biosciences)이다.
일부 예들에서, 항-PD-1 항체는 ENUM 244C8(Enumeral Biomedical Holdings)이다. ENUM 244C8은 PD-L1의 PD-1의 결합을 차단하지 않으면서 PD-1 기능을 억제하는 항 PD-1 항체이다.
일부 예들에서, 항-PD-1 항체는 ENUM 388D4(Enumeral Biomedical Holdings)이다. ENUM 388D4는 PD-L1과 PD-1의 결합을 경쟁적으로 억제하는 항PD-1 항체이다.
일부 예들에서, 항-PD-L1 항체는 6개의 HVR 서열(예를 들어, 3개의 중쇄 HVR 및 3개의 경쇄 HVR) 및/또는 WO 2015/112800, WO 2015/112805, WO 2015/112900, US 20150210769, WO2016/089873, WO 2015/035606, WO 2015/085847, WO 2014/206107, WO 2012/145493, US 9,205,148, WO 2015/119930, WO 2015/119923, WO 2016/032927, WO 2014/179664, WO 2016/106160, 및 WO 2014/194302에 기재된 항-PD-1 항체의 중쇄 가변 도메인 및 경쇄 가변 도메인을 포함한다.
다른 추가의 특정 양상에서, 상기 항-PD-1 항체는 감소된 또는 최소의 효과기 기능을 갖는다. 다른 추가의 특정 양상에서, 상기 최소의 효과기 기능은 "효과기-없는 Fc 돌연변이" 또는 비당화 돌연변이로부터 발생한다. 또 다른 추가 예에서, 효과기-없는 Fc 돌연변이는 불변 영역에서 N297A 또는 D265A/N297A 치환이다. 일부 예들에서서, 단리된 항-PD-1 항체는 탈당화된다.
C. PD-L2 결합 길항제
일부 예들에서, PD-1 축 결합 길항제는 PD-L2 결합 길항제이다. 일부 예들에서, PD-L2 결합 길항제는 PD-L2의 그 리간드 결합 짝에 대한 결합을 억제하는 분자이다. 특정 양상에서, PD-L2 결합 리간드 짝은 PD-1이다. PD-L2 결합 길항제는, 제한 없이, 항체, 이의 항원 결합 단편, 면역부착소, 융합 단백질, 올리고펩티드 또는 소분자일 수 있다.
일부 예들에서, 상기 PD-L2 결합 길항제는 항-PD-L2 항체이다. 본원의 임의의 예들에서, 항-PD-L2 항체는 인간 PD-L2 또는 이의 변이체에 결합할 수 있다. 일부 예들에서, 항-PD-L2 항체는 단클론 항체이다. 일부 실시형태에서, 항-PD-L2 항체는 Fab'-SH, Fv, scFv, 및 F(ab')2 단편으로 구성된 그룹에서 선택된 항체 단편이다. 일부 예들에서, 항-PD-L2 항체는 인간화 항체이다. 다른 예들에서, 항-PD-L2 항체는 인간 항체이다. 다른 추가의 특정 양상에서, 상기 항-PD-L2 항체는 감소된 또는 최소의 효과기 기능을 갖는다. 다른 추가의 특정 양상에서, 상기 최소의 효과기 기능은 "효과기-없는 Fc 돌연변이" 또는 비당화 돌연변이로부터 발생한다. 또 다른 추가 예에서, 효과기-없는 Fc 돌연변이는 불변 영역에서 N297A 또는 D265A/N297A 치환이다. 일부 예들에서서, 단리된 항-PD-L2 항체는 탈당화된다.
XI. 약학 조성물 및 제형
또한 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체, 및 선택적으로 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약학 조성물 및 제형이 본원에 제공된다. 본 발명은 또한 다음을 제공한다: (i) PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체 및 항-VEGF 항체(예를 들어, 베바시주맙), 및 선택적으로 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약학 조성물 및 제형; 및 (ii) 항-TIGIT 길항제 항체 및 PD-1과 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체, 및 선택적으로 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약학 조성물 및 제형. PD-1과 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체 및/또는 본원에 기재된 다른 제제(예를 들어, 덱사메타손)의 약학 조성물 및 제형은 원하는 순도를 가지는 제제 또는 제제들을 하나 이상의 선택적인 약학적으로 허용되는 담체(Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed. (1980))와 혼합하여, 동결건조된 제형 또는 수용액의 형태로 제조될 수 있다. 일부 실시형태에서, 모수네투주맙은 피하 투여용으로 제형화된다. 일부 실시형태에서, 모수네투주맙은 정맥내 투여용으로 제형화된다.
본원에 기재된 바와 같은 약학 조성물 및 제제는 원하는 순도를 갖는 활성 성분들(예를 들어, PD-1과 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체, 항-TIGIT 길항제 항체, 및/또는 항-VEGF 항체)을 하나 이상의 임의의 약학상 허용되는 담체(예를 들어, Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed. (1980) 참고)와 혼합하여 예를 들어, 동결건조된 제형 또는 수용액의 형태로 제조 할 수 있다.
예시적인 티라골루맙 제형은 폴리소르베이트 20, 수크로스, L-메티오닌 및 WFI를 함유하는 히스티딘 용액을 포함한다. 티라골루맙은 대략 60mg/mL의 티라골루맙 항체 농도로 10mL의 티라골루맙 의약품이 들어 있는 15mL 바이얼로 제공될 수 있다.
약학적으로 허용되는 담체는 이용되는 투여량 및 농도에서 수용자에 비독성이며, 다음을 포함하나, 이에 제한되지 않는다: 완충액, 가령, 포스페이트, 시트레이트 및 다른 유기산; 아스코르브산 및 메티오닌을 포함하는 항산화제; 보존제(가령, 옥타데실디메틸벤질 암모늄 클로라이드; 헥사메토니움 클로라이드; 벤잘코니움 클로라이드; 벤제토늄 클로라이드; 페놀, 부탈 또는 벤질 알코올; 알킬 파라벤 가령, 메틸 또는 프로필 파라벤; 카테콜; 레소르치놀; 사이클로헥사놀; 3-펜타놀; 그리고 m-크레졸); 낮은 분자량의(약 10개 잔기 미만) 폴리펩티드; 단백질, 가령, 혈청 알부민, 젤라틴, 또는 면역글로블린; 친수성 중합체 가령, 폴리비닐피롤리돈; 아미노산 가령, 글리신, 글루타민, 아스파라긴, 히스티딘, 아르기닌, 또는 리신; 모노사카라이드, 디사카라이드, 그리고 글루코스, 만노스, 또는 덱스트린을 포함하는 기타 탄수화물; 킬레이트 물질 가령, EDTA; 당, 가령, 슈크로스, 만니톨, 트레할로스 또는 소르비톨; 염-형성 카운터-이온, 가령, 나트륨; 금속 복합체(예를 들어, Zn-단백질 복합체); 및/또는 비-이온성 계면활성제 가령, 폴리에틸렌 글리콜(PEG). 본원에서 예시적인 약학적으로 허용되는 담체는 세포간(insterstitial) 약물 분산 물질, 예를 들어, 가용성 중성-활성 히알루로니다제 당단백질(sHASEGP), 예를 들면, 인간 가용성 PH-20 히알루로니다제 당단백질, 예를 들어, rHuPH20(HYLENEX®, Baxter International, Inc.)을 포함한다. rHuPH20를 포함하는 특정 예시적인 sHASEGP 및 이를 이용하는 방법은 미국 공개 특허 출원 제2005/0260186 및 2006/0104968에 기재되어 있다. 한 양상에서, sHASEGP는 하나 또는 그 이상의 추가 글리코사미노글리카나제, 예를 들어, 콘드로이티나제와 조합된다.
예시적인 동결건조된 항체 제형은 미국 특허 제 6,267,958에 기재되어 있다. 수용액 항체 제제는 미국 특허 제 6,171,586 및 WO2006/044908에서 기재된 것들을 포함하며, 후자 제제는 히스티딘-아세테이트 완충액을 포함한다.
본원의 제형은 또한 치료되는 특정 적응증에 필요한 둘 이상의 활성 성분, 바람직하게는 서로 불리하게 영향을 미치지 않는 상보적 활성을 갖는 성분을 함유 할 수 있다. 예를 들어, 추가 치료제(예를 들어, 화학요법제, 세포독성제, 성장 억제제, 및/또는 항-호르몬제, 예를 들어, 상기 본원에 언급된 것들)를 추가로 제공하는 것이 바람직할 수 있다. 이러한 활성 성분은 의도한 목적에 유효한 양으로 조합되어 적절하게 존재한다.
활성 성분은 콜로이드성 약물 전달 시스템 (예를 들어, 리포좀, 알부민 미소구, 마이크로에멀젼, 나노입자 및 나노캡슐)에서 각각 코아세르베이션 기술에 의해 또는 계면 중합, 예를 들어 하이드록시메틸셀룰로스 또는 젤라틴-마이크로캡슐 및 폴리-(메틸 메타크릴레이트) 마이크로캡슐에 의해 준비된 마이크로캡슐 또는 마크로에멀젼 (macroemulsions)안에 포집될 수 있다. 이러한 기술은 Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed. (1980)에 기재되어 있다.
서방형 제재가 제조될 수 있다. 서방형 제재의 적합한 예들에는 상기 항체를 함유하는 고체 소수성 중합체의 반투과성 매트릭스가 포함되며, 이러한 매트릭스는 성형된 제품 형태, 예를 들어, 필름, 또는 마이크로캡슐 형태로 존재한다.
생체내 투여에 사용되는 제제는 일반적으로 멸균이다. 멸균은 예를 들어, 멸균 여과막을 통한 여과에 의해 용이하게 구현될 수 있다.
XII. 제조 물품 또는 키트
A. PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체 및 항-TIGIT 길항제 항체를 포함하는 키트
또 다른 양상에서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체 및 항-TIGIT 길항제 항체(예를 들어, 티라골루맙)를 포함하는 제조 물품 또는 키트가 본원에 제공된다. 일부 예들에서, 제조 물품 또는 키트는 대상체에서 암을 치료하거나 진행을 지연시키기 위해 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체와 조합하여 항-TIGIT 길항제 항체를 사용하기 위한 지침을 포함하는 사용 설명서를 추가로 포함한다. 본원에 기술된 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 임의의 이중특이성 항체 및/또는 항-TIGIT 길항제 항체가 제조 물품 또는 키트에 포함될 수 있다.
본 발명의 또 다른 실시형태에서, 본원에 기재된 임의의 방법에 따라 암을 갖는 대상체를 치료하기 위해 항-TIGIT 길항제 항체와 조합하여 사용하기 위한 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체를 포함하는 키트가 제공된다. 일부 예들에서, 이러한 키트는 항-TIGIT 길항제 항체를 추가로 포함한다. 일부 예들에서, 제조 물품 또는 키트는 대상체에서 암을 치료하거나 진행을 지연시키기 위해 항-TIGIT 길항제 항체(예를 들어 티라골루맙)와 조합하여 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체를 사용하기 위한 지침을 포함하는 사용 설명서를 추가로 포함한다.
일부 예들에서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체와 항-TIGIT 길항제 항체는 동일한 용기 또는 별도의 용기에 들어 있다. 적합한 용기는, 예를 들어, 병, 바이얼, 백 및 주사기를 포함한다. 용기는 다양한 재료, 가령, 유리, 플라스틱 (예를 들어, 폴리비닐 클로라이드 또는 폴리올레핀) 또는 금속 합금 (예를 들어, 스테인리스 강 또는 하스텔로이)으로 형성 될 수 있다. 일부 예들에서, 용기는 제제를 보유하며 용기 위의 라벨 또는 용기와 관련된 라벨은 사용지침을 표시할 수 있다. 제조 물품 또는 키트는 다른 완충제, 희석제, 필터, 바늘, 주사기 및 사용 지침이 있는 사용 설명서를 비롯하여, 상업적 및 사용자 관점에서 필요한 다른 물질을 추가로 포함 할 수 있다. 일부 예들에서, 제조 물품은 하나 이상의 또 다른 제제(예를 들어, 추가 화학요법제, 또는 항-종양제)를 추가로 포함한다. 하나 이상의 제제에 적합한 용기는, 예를 들어, 병, 바이얼, 백, 및 주사기를 포함한다.
본원에 기술된 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 임의의 이중특이성 항체 및/또는 항-TIGIT 길항제 항체가 제조 물품 또는 키트에 포함될 수 있다. 임의 제조 물품 또는 키트는 본원에 기재된 임의의 방법, 예를 들어, 섹션 III에 명시되어 있는 임의의 방법에 따라 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체 및/또는 항-TIGIT 길항제 항체를 대상체에게 투여하기 위한 지침을 포함할 수 있다.
B. PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체와 항-VEGF 항체를 포함하는 키트 또 다른 양상에서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체 및 항-VEGF 항체(예를 들어, 베바시주맙)를 포함하는 제조 물품 또는 키트가 본원에 제공된다. 일부 예들에서, 제조 물품 또는 키트는 대상체에서 암을 치료하거나 진행을 지연시키기 위해 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체와 조합하여 항-VEGF 항체를 사용하기 위한 지침을 포함하는 사용 설명서를 추가로 포함한다. 본원에 기술된 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 임의의 이중특이성 항체 및/또는 항-VEGF 항체가 제조 물품 또는 키트에 포함될 수 있다.
본 발명의 또 다른 실시형태에서, 본원에 기재된 임의의 방법에 따라 암을 갖는 대상체를 치료하기 위해 항-VEGF 항체와 조합하여 사용하기 위한 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체를 포함하는 키트가 제공된다. 일부 예들에서, 이러한 키트는 항-VEGF 항체를 추가로 포함한다. 일부 예들에서, 제조 물품 또는 키트는 대상체에서 암을 치료하거나 진행을 지연시키기 위해 항-VEGF 항체와 조합하여 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체를 사용하기 위한 지침을 포함하는 사용 설명서를 추가로 포함한다.
일부 예들에서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체와 항-VEGF 항체는 동일한 용기 또는 별도의 용기에 들어 있다. 적합한 용기는, 예를 들어, 병, 바이얼, 백 및 주사기를 포함한다. 용기는 다양한 재료, 가령, 유리, 플라스틱 (예를 들어, 폴리비닐 클로라이드 또는 폴리올레핀) 또는 금속 합금 (예를 들어, 스테인리스 강 또는 하스텔로이)으로 형성 될 수 있다. 일부 예들에서, 용기는 제제를 보유하며 용기 위의 라벨 또는 용기와 관련된 라벨은 사용지침을 표시할 수 있다. 제조 물품 또는 키트는 다른 완충제, 희석제, 필터, 바늘, 주사기 및 사용 지침이 있는 사용 설명서를 비롯하여, 상업적 및 사용자 관점에서 필요한 다른 물질을 추가로 포함 할 수 있다. 일부 예들에서, 제조 물품은 하나 이상의 또 다른 제제(예를 들어, 추가 화학요법제, 또는 항-종양제)를 추가로 포함한다. 하나 이상의 제제에 적합한 용기는, 예를 들어, 병, 바이얼, 백, 및 주사기를 포함한다.
본원에 기술된 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 임의의 이중특이성 항체 및/또는 항-VEGF 항체가 제조 물품 또는 키트에 포함될 수 있다. 임의 제조 물품 또는 키트는 본원에 기재된 임의의 방법, 예를 들어, 섹션 III에 명시되어 있는 임의의 방법에 따라 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체 및/또는 항-VEGF 항체를 대상체에게 투여하기 위한 지침을 포함할 수 있다.
실시예
실시예 1: 흑색종 환자를 대상으로 여러 치료 조합의 효능과 안전성을 평가하는 공개 라벨, 다기관, 무작위 배정 우산형 Ib/II상 연구
흑색종은 잠재적으로 치명적인 형태의 피부암이며 가장 빠르게 성장하는 악성 종양 중 하나이다(Algazi 외, Cancer Manag Res. 2: 197-211, 2010; Finn 외, BMC Med. 10: 23, 2012). 현재 전 세계적으로 매년 300,000명 이상의 사람들이 흑색종 진단을 받고 있으며, 57,000명이 이 질환으로 사망한다. 흑색종 환자의 임상 결과는 발병 단계에 따라 크게 좌우된다. 더욱 진행된 흑색종을 나타내는 대부분의 사람들은 예후가 좋지 않다(Finn 외, BMC Med. 10:23, 2012). 림프절 침범(III기) 환자는 수술 후 국소 및 원격 재발 위험이 높으며, 이 환자군의 5년 생존율은 32%-93%이다(Gershenwald 외, CA Cancer J Clin. 67: 472-492, 2017). 발현 시점에, 전이성 질환(IV기)이 있는 환자는 거의 없지만 일부 환자는 초기 최종 치료 후 전이가 발생한다. 면역요법과 표적요법으로 이들 환자의 결과가 개선됐고, 5년 생존율은 약 50%에 달한다(Larkin 외, N Engl J Med. 373: 23-34, 2015; Wolchok 외, N Engl J Med. 377: 1345-1356, 2017; Larkin 외, N Engl J Med. 381: 1535-1546, 2019; Robert 외, Lancet Oncol. 20: 1239-1251, 2019; Long 외, J Clin Oncol. 38(Suppl 15): 10013, 2020). 최근의 치료적 발전에도 불구하고, 흑색종은 높은 의학적 필요성과 지난 30년 동안 발병률이 꾸준히 증가하면서 계속해서 심각한 건강 문제가 되고 있다(Bataille. Expert Rev Dermatol. 4: 533-539, 2009).
BO43328은 절제 가능한 III기(코호트 1) 또는 IV기(코호트 2) 흑색종 환자를 대상으로 한 Ib/II상 공개 라벨, 다기관, 무작위 배정 연구이다. 이 연구는 새로운 치료법이 출시되거나, 최소한의 임상 활성 또는 허용할 수 없는 독성을 나타내는 기존 치료군들을 종료하거나(예를 들어, 이전 항암 치료 또는 바이오마커 상태와 관련하여) 환자 집단을 수정하거나, 또는 다른 유형의 흑색종 환자 집단을 추가로 도입함에 따라 새로운 치료군들을 개설할 수 있는 유연성을 갖도록 설계되었다.
A. 연구 설계의 개요
본 연구는 암 면역요법(CIT) 경험이 없는 절제 가능한 III기 흑색종 환자(코호트 1)와 IV기 흑색종 환자(코호트 2)에서 치료 조합의 효능, 안전성 및 약동학을 평가한다. 코호트 1(표 5 참조) 및 코호트 2(표 6 참조)에 대한 연구의 특정 목표 및 해당 평가변수들은 아래에 요약되어 있다.
표 5. 코호트 1의 목표 및 해당 평가변수
ADA = 항-약물 항체; ASTCT = 미국 이식 및 세포 치료 학회; CLND = 완전 림프절 절제술; CR = 완전 반응; CRS = 사이토카인 방출 증후군; EFS = 무사건 생존율; NCI CTCAE v5.0 = 국립 암 연구소(National Cancer Institute)의 이상 반응에 대한 공통 용어 기준, 버전 5.0; ORR = 객관적인 반응률; OS = 전체 생존; pCR = 병리학적 완전 반응; PK = 약동학; pnCR = 병리학적으로 거의 완전한 반응; pPR = 병리학적 부분 반응; PR = 부분 반응; pRR = 병리학적 반응률; RECIST v1.1 = 고형 종양의 반응 평가 기준, 버전 1.1; RFS = 무재발 생존율.
표 6. 코호트 2의 목표 및 해당 평가변수
ADA = 항-약물 항체; ASTCT = 미국 이식 및 세포 치료 학회; CR = 완전 반응; CRS = 사이토카인 방출 증후군; DOR = 반응 기간; iRECIST = 면역 기반 치료제에 대해 수정된 RECIST v1.1; NCI CTCAE v5.0 = 국립 암 연구소(National Cancer Institute)의 이상 반응에 대한 공통 용어 기준, 버전 5.0; ORR = 객관적 반응률; OS = 전체 생존; PFS = 무진행 생존; PK = 약동학; PR = 부분 반응; RECIST v1.1 = 고형 종양의 반응 평가 기준, 버전 1.1.
비고: 하나의 시점에서의 전체 반응은 RECIST v1.1을 사용하여 조사자가 평가한다.
본 연구에는 2개의 코호트가 동시에 등록되었다. 코호트 1에는 생검이 가능하고 고형 종양의 반응 평가 기준 버전 1.1(RECIST v1.1)에 따라 측정 가능한 림프절 전이가 있고 절제 가능한 III기 흑색종이 있고 지난 6개월 이내에 통과 전이 병력이 없으며, 자신의 질환에 대해 전신 CIT(예를 들어, PD-1/PD-L1 및/또는 CTLA-4 차단제 또는 기타 제제)를 받지 않은 환자가 등록된다.
코호트 2에는 전이성 질환에 대한 적어도 1차 이상 2차 이하의 치료 도중 또는 치료 이후에 질환 진행을 경험한 IV기 흑색종 환자가 등록된다. 체크포인트 억제 요법(단독 요법 또는 조합 요법)은 최대 2차까지 허용된다. BRAF-돌연변이 질환 환자는 추가 회차의 표적 치료(체크포인트 억제 치료 이전, 이러한 치료와 간헐적으로, 또는 이후)을 받았거나 표적 치료와 체크포인트 억제 치료를 하나의 조합 치료로 동시에 받았을 수 있다.
치료 배정
코호트 1에서 환자는 대조군(니볼루맙 + 이필리무맙(Nivo + Ipi)) 또는 RO7247669(PD-1 및 LAG3에 결합하는 이중특이성 항체), 아테졸리주맙과 티라골루맙의 조합(Atezo+ Tira), 또는 RO7247669와 티라골루맙(RO7247669 + Tira)의 조합으로 구성된 실험군에 무작위로 배정된다. 환자는 지리적 지역(호주 대 기타 국가) 및 기준선 LDH(≥ 정상 상한(ULN) 대 > ULN)에 따라 계층화된다. 치료 요법들에 대한 자세한 내용은 표 7과 도 1에 제공되어 있다.
코호트 2에서, 환자는 RO7247669와 티라골루맙의 조합(RO7247669 + Tira)으로 구성된 실험군에 등록된다. 등록은 6명 환자의 안전성 준비 단계(run-in phase)로 시작된다.
코호트 2의 안전성 준비 단계에 등록된 약 6명의 환자를 포함하여, 연구 기간 동안 약 61-191명의 환자가 등록된다. 실험군 내 등록은 예비 단계, 그 후 확장 단계의 두 단계로 진행된다. 대략 15-20명의 환자가 예비 단계 동안 각 치료군에 등록된다. 예비 단계 동안 실험군에서 임상 활성(코호트 1의 병리학적 반응)이 관찰되는 경우, 확장 단계 동안 약 20명의 추가 환자가 해당군에 등록될 수 있다.
후원자는 특정 치료군 내에서 등록을 연기하거나 보류하기로 결정할 수 있다. 임상 활성이 불충분하거나 독성이 허용되지 않는 실험군들은 확장되지 않는다. 추가 하위군 분석을 가능하게 하기 위해, 치료군들 간 잠재적인 예측 바이오마커를 포함하여 인구통계학적 그리고 기본 특성과 관련된 균형을 보장하기 위해 추가 환자를 등록할 수 있다.
무작위 배정 비율은 사용 가능한 실험군의 수에 따라 달라지며(예를 들어, 하나의 군이 추가되거나 하나의 군에의 등록이 보류되는 경우, 예비 단계의 결과 분석이 보류됨). 대조군에 할당될 확률이 35%를 넘지 않아야 한다는 규정이 있다. 무작위 배정은 군-별 제외 기준을 고려한다. 환자가 특정 군에 대해 설명된 제외 기준 중 하나라도 충족하는 경우 해당 군에 대한 자격이 없다.
치료 요법들에 대한 자세한 내용은 표 7에 제공되어 있다.
표 7. 치료 요법
a 후원자는 특정 치료군 내에서 등록을 연기하거나 보류하기로 결정할 수 있다. 따라서 모든 실험 군들이 동시에 등록을 위해 열릴 수는 없다.
b 안전성 준비 단계 동안, 환자는 가능한 치료 군들에 배정된다. 치료 배정 비율은 등록이 가능한 실험군 수에 따라 달라진다.
c 무작위 배정 비율은 무작위 배정 가능한 실험군의 수에 따라 달라지며(예를 들어, 하나의 군이 추가되거나 하나의 군으로의 무작위 배정이 보류되는 경우, 예비 단계의 결과 분석이 보류됨). 대조군에 할당될 확률이 35%를 넘지 않아야 한다는 규정이 있다.
d 예비 단계 동안 실험군에서 임상 활성이 관찰되는 경우, 확장 단계 동안 약 20명의 추가 환자가 해당군에 등록된다. 임상 활성이 최소이거나 독성이 허용되지 않는 실험군은 확장을 거치지 않는다.
e 최소 6명의 환자에 대한 안전성 평가를 허용하기 위해 코호트 1 RO7247669, Atezo + Tira 및 RO7247669 + Tira 군들에서 등록이 보류되었다.
f RO7247669 + Tira 군에의 등록은 코호트 2에서 해당 치료 조합의 안전성 평가 후 코호트 1에서 시작된다.
코호트 1에서, 대조군과 실험군의 환자는 6주 동안 신보조 치료를 받는다. 신보조 치료 완료 후 또는 이를 독성으로 인해 중단하고 질환 진행이 없는 경우, 환자는 7주차에 수술(완전 림프절 절제술(CLND))을 받는다. 조사자의 재량에 따라, 본 연구 외의 환자들은 이후 보조 요법을 시작하거나 13주차부터 관찰을 시작한다(도 2).
CIT에 의한 T 세포 반응(가상진행이라고 함)의 맥락에서 면역 세포 침윤으로 인해 전이성 림프절 크기가 초기에 증가할 가능성이 있기 때문에 RECIST v1.1에 따라 의심되는 임상적 또는 방사선학적 진행은 실제 질환 진행을 나타내지 않을 수도 있다. 허용할 수 없는 독성이 없는 경우, CIT 약물로 치료를 받는 동안 RECIST v1.1에 따른 질환 진행 기준을 충족하는 환자는 수술까지 연구 치료를 계속하는 것이 허용된다. 연구 치료 중단 및/또는 수술 취소 전, 추가 전문 검토자의 생검 또는 반복 방사선 평가를 통해 진행을 확인한다. 원격 전이가 없고 외과 의사가 질환이 완전히 절제 가능하다고 판단하는 경우 모든 환자는 수술을 진행할 것으로 예상된다.
코호트 2에서, 환자는 조사자가 방사선 및 생화학 데이터, 국소 생검 결과(가능한 경우), 임상 상태(예를 들어, 질환에 수반되는 통증 등 증상 악화)를 통합적으로 평가한 후 결정한 대로 허용할 수 없는 독성 또는 임상적 이익의 상실이 발생할 때까지 치료를 계속 받는다. 아테졸리주맙 및 기타 CIT를 사용한 T 세포 반응(가상진행이라고 함)의 설정에서 면역 세포 침윤으로 인한 종양 부담의 초기 증가 가능성으로 인해, RECIST v1.1에 따른 방사선학적 진행은 실제 질환 진행을 나타내지 않을 수 있다. 허용할 수 없는 독성이 없는 경우, CIT 조합으로 치료를 받는 동안 RECIST v1.1에 따른 질환 진행 기준을 충족하는 환자는 다음 기준을 모두 충족하는 경우 치료를 계속하는 것이 허용된다:
● 임상적 이점의 증거, 이용 가능한 모든 데이터를 검토한 후 조사자가 결정.
● 질환의 명백한 진행을 나타내는 증상 및 징후(새롭거나 악화되는 고칼슘혈증과 같은 실험실 수치 포함) 없음.
● 질환 진행으로 인해 발생할 수 있는 동부 종양학 협력 그룹(ECOG) 수행능력 상태 점수의 저하 없음.
● 프로토콜에 허용된 의료 처치로 관리할 수 없는 중요한 해부학적 부위(예를 들어, 연수막 질환)에서 종양 진행 없음.
진행 이후의 치료에 적격인 환자에게 선행 치료를 계속 받는 동안 임상적 이점을 제공하는 것으로 알려진 다른 치료 옵션을 포기할 수 있다는 사실을 조사자가 통보한다. 환자는 언제든지 어떤 이유로든 자발적으로 연구를 철회할 권리가 있다. 또한, 조사자는 환자가 연구를 계속할 경우 환자의 안전을 위태롭게 할 수 있다고 조사자 또는 후원자가 판단하는 의학적 상태로 인해 환자를 연구에서 철회할 권리가 있다.
후속 종양 평가에서 가상진행이 배제되고 질환의 진행이 확인되면 환자는 연구 치료를 중단한다.
안전성 평가 단계(코호트 1)
신보조 환경에서 실험적 치료법의 독성을 평가하기 위해, 안전성 평가를 할 수 있도록 약 6명의 환자를 등록한 후 등록이 보류된다. 안전성 평가는 적어도 1회 용량의 치료제(즉, 주어진 조합에 대해 각 제제의 1회 용량)를 받고 수술시까지 안전성 추적 평가를 완료한 최소 6명의 환자로부터 얻은 안전성 데이터를 기반으로 한다. 특히, 적시 수술 실시(CLND)는 치료 내약성을 나타내는 지표이다. 6명의 환자 안전성 평가 도중 또는 안전성 평가 후 언제든지, 환자의 ≥ 30%가 적어도 선행 치료와 관련이 있을 수 있다고 간주되는 다음 사건 중 하나 이상을 경험하는 경우, 후원자가 해당 치료의 유익성-위해성 프로파일을 평가하는 동안 해당 조합에 대한 등록이 보류된다:
● 2주 이내에 2등급 이상으로 개선되지 않는(치료 유무에 무관) 치료 관련 등급 ≥ 3의 이상 반응.
● >2주의 수술 지연을 유발하는 치료 관련 이상 반응.
● 치료와 관련된 심각한 이상 반응.
● 연구 약물의 영구적 중단을 요구하는 치료 관련 이상 반응.
● 사망, 단, 질환의 진행이나 사고와 같은 외부 원인과 명백히 관련되어 있는 경우는 제외.
새로운 안전 신호가 감지되지 않으면 해당 군에서 등록이 재개된다.
안전성 준비 단계(코호트 2)
처음으로 임상적으로 검사되는 새로운 조합의 안전성과 내약성을 평가하기 위해, 초기 안전성 준비 단계가 코호트 2에서 실시된다. 전이성 질환이 있는 약 6명의 환자를 새로운 조합(즉, RO7247669 + Tira)으로 치료하고 최소 28일 동안 안전성과 내약성을 평가했다.
코호트 2의 최소 6명의 환자는 초기 안전성 준비 단계를 완료해야 한다. RO7247669 + Tira 조합이 허용 가능하다고 판단되면 예비 단계 등록이 시작될 수 있고, 코호트 1의 RO7247669 + Tira 군의 등록이 시작될 수 있다. 안전성 준비 단계의 환자는 첫 번째 환자와 나머지 환자 사이에 최소 1주일의 간격을 두고 순차적인 방식으로 등록 및 치료된다.
상기 평가는 적어도 1회 용량의 치료제(즉, 각 제제의 1회 용량)를 받고 적어도 28일 동안 안전성 추적 평가를 완료한 최소 6명의 환자로부터 얻은 안전성 데이터를 기반으로 한다. 환자의 ≥ 30%가 적어도 선행 치료와 관련이 있을 수 있다고 간주되는 다음 사건 중 하나 이상을 경험하는 경우, 후원자가 해당 치료의 유익성-위해성 프로파일을 평가하는 동안 해당 조합에 대한 등록이 보류된다:
● 2주 이내에 2등급 이상으로 개선되지 않는(치료 유무에 무관) 치료 관련 등급 ≥ 3의 이상 반응.
● 치료와 관련된 심각한 이상 반응.
● 연구 약물의 영구적 중단을 요구하는 치료 관련 이상 반응.
● 사망, 단, 질환의 진행이나 사고와 같은 외부 원인과 명백히 관련되어 있는 경우는 제외.
새로운 안전 신호가 감지되지 않으면, 코호트 1에서도 상기 조합 치료가 개시된다.
B. 연구 종료 및 연구 기간
본 연구의 종료는 마지막 환자가 전화 또는 진료소에 의해 이루어지는 생존 추적 조사 방문을 비롯한 마지막 방문을 완료한 일자로 정의된다. 첫 번째 환자의 스크리닝 시점부터 연구 종료시까지의 총 연구 기간은 약 5년이 될 것으로 예상된다.
C. 연구 설계의 이론적 근거
환자 집단에 대한 이론적 근거
코호트 1에는 생검이 가능하고 RECIST v1.1에 따라 측정 가능한 림프절 전이가 있고 절제 가능한 III기 흑색종이 있고 지난 6개월 이내에 통과 전이 병력이 없는 환자가 등록된다. 등록된 환자는 해당 질환에 대해 이전에 면역요법을 받은 적이 없어야 한다.
이와 동일한 환자 집단이 PRADO 확장 코호트를 포함하여 OpACIN 및 OpACIN-neo 연구에 등록되었다. 이들 연구에서는 절제 가능한 흑색종 환자를 대상으로 니볼루맙과 이필리무맙의 신보조(및 보조) 조합요법을 평가했다. 신보조 요법은 보조 요법과 비교하여 통계적으로 유의하고 임상적으로 의미 있는 이점을 갖는 것으로 밝혀졌다(Rozeman 외, Lancet Oncol. 20: 948-960, 2019; Blank 외, J Clin Oncol. 38: 15S, 2020; Rozeman 외, Nat Med. 27: 256-263, 2021). 또한, 치료의 안전성 프로파일은 최적화된 치료 일정에서 내약성이 있는 것으로 나타났다.
최근 입증된 체크포인트 억제 요법의 이점에도 불구하고, 절제 가능한 흑색종 환자에게 더 효과적이고(즉, 수술 표본에서 더 광범위하고 더 깊은 병리학적 반응) 내약성이 더 우수한 치료 요법들에 대한 지속적인 요구가 있다. 본 연구의 다중 치료 옵션들은 다양한 메커니즘을 통해 면역 체계를 자극할 것으로 예상된다. 목표는 현재의 체크포인트 억제 효과를 능가하는 CIT의 이점을 절제 가능한 흑색종을 가지는 더 큰 집단으로 확장시키는 것이다.
코호트 2에는 전이성 질환에 대한 적어도 1차 이상 2차 이하의 치료 도중 또는 치료 이후에 질환 진행을 경험한 IV기 흑색종 환자가 등록된다. 체크포인트 억제 요법(단독 요법 또는 조합 요법)은 최대 2차까지 허용된다. BRAF-돌연변이 질환 환자는 추가 회차의 표적 치료(체크포인트 억제 치료 이전, 이러한 치료와 간헐적으로, 또는 이후)을 받았거나 표적 치료와 체크포인트 억제 치료를 하나의 조합 치료로 동시에 받았을 수 있다.
아직 임상적으로 검사되지 않은 항-흑색종 활성에 대한 임상적 및/또는 생물학적 근거를 갖는 화합물들의 새로운 조합이 코호트 2에서 조사되었다. 중요한 것은 새로운 조합으로 고려되는 개개의 화합물들의 경우, 안전성과 내약성이 이미 다른 연구에서 확립되었으며 안전한 복용량과 일정을 이용가능하다는 것이다. 코호트 2 안전성 준비 단계에서는 잠재적인 중복 독성과 관련하여 새로운 조합의 안전성을 평가한다.
D. 포함 기준
코호트 1 및 코호트 2에 대한 공통 포함 기준
환자는 코호트 1 및 코호트 2에 대한 자격을 갖추려면 다음 기준을 모두 충족해야 한다:
● 사전 동의서 서명 당시 연령≥ 18세.
● 중앙 검사를 통해 PD-L1 및/또는 추가 바이오마커 상태를 확인하는 데 적합한 대표적인 종양 표본이 있을 것.
- 기준선 종양 조직 샘플은 스크리닝 시 전이성 림프절(코호트 1) 또는 기타 전이성 병변(코호트 2)의 생검을 통해 모든 환자(코호트 2 안전성 준비 단계의 환자는 제외)로부터 수집된다.
- 또한 가능한 경우 모든 환자로부터 얻은 보관된 원발성 종양 조직을 제출한다. 보관된 일차 조직을 이용할 수 없는 경우(예를 들어, 알려지지 않은 일차 종양이 있는 환자의 경우) 등록이 허용된다. 보관 조직의 경우, 충분한 크기와 종양 함량 표시가 있는 파라핀 블록(바람직함)의 포르말린 고정 파라핀 포매(FFPE) 종양 표본(바람직하게는 침습적 경계선 포함) 또는 염색되지 않고 새로 절단된 일련의 절단면들을 포함하는 적어도 16개 슬라이드가 관련 병리학 보고서와 함께 제출되어야 한다. 10-15개의 슬라이드만 사용할 수 있는 경우에도 환자는 여전히 연구에 적합하다.
● 연구 치료 시작 전 14일 이내에 얻은 다음과 같은 실험실 검사 결과로 정의되는 적절한 혈액학적 및 말단 기관 기능: 절대 호중구 수(ANC) ≥ 1.5 × 109/L(1500/μL); 림프구 수 ≥ 0.5 × 109 개 세포/L(500/μL)(경계선 기계 림프구 수는 수동 계수로 확인할 수 있음); 혈소판 수 ≥ 100 × 109/L(100,000/μL); 헤모글로빈 ≥ 90g/L(9g/dL); AST, ALT 및 ALP ≤ 2.5 × ULN(간 전이가 문서화되어 있는 참가자는 AST 및 ALT ≤ 5 × ULN을 가질 수 있고 간 또는 뼈 전이가 문서화되어 있는 참가자는 ALP ≤ 5 × ULN을 가질 수 있음); 총 빌리루빈 ≤ 1.5 × ULN(알려진 길버트병 환자의 빌리루빈 수준은 ≤ 3 × ULN일 수 있음); 크레아티닌 ≤ 1.5 × ULN 또는 크레아티닌 청소율 ≥ 30mL/분(콕크로프트-골트 공식을 사용하여 계산); 혈청 알부민 ≥ 25g/L(2.5g/dL). 치료적 항응고제를 투여받지 않는 환자의 경우 INR 및 aPTT ≤ 1.5 × ULN 일 수 있다.
● 치료적 항응고 치료를 받는 환자의 경우: 안정적인 항응고 요법(즉, 연구 치료 시작 전 3개월 이내에 새로운 혈전증, 혈전색전증 사건 또는 출혈 에피소드가 없음).
● 스크리닝 시 HIV 검사 음성. 이전에 HIV 검사 양성 결과가 없었던 환자는 현지 규정에 따라 허용되지 않는 한 스크리닝 시 HIV 검사를 받는다.
● 스크리닝 시 B형 간염 표면 항체(HBsAb) 음성, 총 B형 간염 핵심 항체(HBcAb) 검사 음성. 환자가 스크리닝 시 B형 간염 표면 항원(HBsAg) 검사 음성이고 총 HBcAb 검사 양성인 경우, 활동성 HBV를 배제하기 위해 B형 간염 바이러스(HBV) DNA 검사도 실시해야 한다.
● 스크리닝 시 C형 간염 바이러스(HCV) 항체 검사 음성, 또는 스크리닝 시 HCV 항체 검사 양성 후 HCV RNA 검사 음성. HCV RNA 검사는 HCV 항체 검사가 양성인 환자에게만 시행된다.
● 가임 여성의 경우: 금욕을 유지(이성간 성관계를 자제)하거나 피임 방법을 사용하는 데 동의.
● 남성의 경우: 각 특정 치료군에 대해 명시된 바와 같이, 금욕을 유지하기로 동의(이성간 성관계를 자제) 또는 피임 방법을 사용하기로 동의하고 정자 기증을 자제함에 동의.
코호트 1의 포함 기준
환자는 코호트 1에 대한 자격을 갖추려면 다음 기준을 모두 충족해야 한다:
● 0 또는 1의 ECOG 수행능력 상태 점수(PS).
● 조직학적으로 확인된 절제 가능한 III기 흑색종(AJCC-8(Gershenwald 외, CA Cancer J Clin. 67: 472) -492, 2017)에 따른 T: T0, Tx 또는 T1-4; N: cN1-3, pN1b/2b/3b; M: M0) 및 지난 6개월 이내에 통과 전이 병력 없음.
- 환자는 국소 림프절 전이가 동반된 원발성 흑색종, 원발성 흑색종의 병력 또는 임상적으로 검출된 국소 림프절 재발이 있는 알려지지 않은 원발성 흑색종을 나타낼 수 있으며 다음 그룹 중 하나에 속할 수 있다: 임상적/방사선학적으로 뚜렷한 국소 림프절 전이가 동시에 발생한 원발성 피부 흑색종; 근위부 림프절 분지에서 임상적으로/방사선학적으로 발견된 재발성 흑색종; 또는 알려지지 않은 원발성에서 발생한 임상적/방사선학적으로 발견된 결절 흑색종(단일 부위인 경우).
● CLND에 적합 및 이의 예정(현지 지침에 따라 무작위 배정 전에 외과의사가 평가).
● RECIST v1.1에 따라 측정 가능한 질환(적어도 하나의 표적 병변). 생검을 받을 육안적 림프절 전이가 하나 이상(RECIST v1.1에 따라 측정 가능).
코호트 2의 포함 기준
환자는 코호트 2에 대한 자격을 갖추려면 다음 기준을 모두 충족해야 한다:
● 0, 1 또는 2의 ECOG PS.
● 조사자가 결정한 기대 수명 ≥ 3개월.
● AJCC-8에 따라 조직학적으로 확인된 IV기(전이성) 흑색종(Gershenwald 외, CA Cancer J Clin. 67: 472-492, 2017).
● 전이성 질환에 대한 적어도 1차 및 2차 이하의 치료 도중 또는 이후에 질환 진행. 체크포인트 억제 요법(단독 요법 또는 조합 요법)은 최대 2차까지 허용된다. BRAF-돌연변이 질환 환자는 추가 회차의 표적 치료(체크포인트 억제 치료 이전, 이러한 치료와 간헐적으로, 또는 이후)을 받았거나 표적 치료와 체크포인트 억제 치료를 하나의 조합 치료로 동시에 받았을 수 있다.
● 국소 흑색종에 대한 보조 요법 완료 중 또는 완료 후 6개월 이내에 재발하거나 전신적으로 진행되는 환자는 적격일 수 있다.
● RECIST v1.1에 따라 측정 가능한 질환(적어도 하나의 표적 병변).
적어도 하나의 전이(RECIST v1.1에 따라 측정 가능).
E. 제외 기준
환자가 아래 치료 군에서 지정된 바와 같이, 후속 섹션에 설명된 해당 기준 중 하나라도 충족하는 경우 특정 군 등록에서 제외된다:
코호트 1 및 코호트 2에 대한 제외 기준
다음 기준 중 어느 하나를 충족하는 환자는 연구 참가에서 제외된다:
● 점막 및 포도막 흑색종.
- 말단 흑자성 흑색종은 코호트 1에서 제외된다.
- 코호트 2의 경우 말단 흑자성 흑색종이 허용되나; 환자의 비율은 반응 평가 환자의 20%를 초과해서는 안 된다.
● 연구 치료 시작 전 28일 이내에 연구 요법으로 치료.
● 연구 치료 시작 전 4주 또는 5회의 약물 제거 반감기(둘 중 더 긴 기간) 이내에 전신 면역자극제(IFN 및 IL-2를 포함하되 이에 제한되지 않음)로 치료.
● 이전 동종 줄기세포 또는 고형 장기 이식.
● 알려진 면역결핍 또는 전신성 면역억제 약물(사이클로포스파미드, 아자티오프린, 메토트렉세이트, 탈리도마이드 및 항-종양 괴사인자-α 제제를 포함하나 이에 제한되지 않음) 치료가 필요한 상태, 또는 연구 치료 중 전신성 면역억제 약물이 필요할 것으로 예상되는 경우, 다음은 예외: 뇌하수체하수체 또는 부신 부전을 관리하기 위해 코르티코스테로이드 대체 투여중인 환자는 연구에 적합하다; 급성, 저용량, 전신성 면역억제 약물 또는 1회 펄스 투여의 전신성 면역억제제 약물(예를 들어, 조영제 알레르기에 대해 코르티코스테로이드 48시간 투여)를 받은 환자는 의료 모니터(Medical Monitor)와 논의한 후 연구에 참여할 수 있다; 미네랄코르티코이드(예를 들어, 플루드로코르티손), 만성 폐쇄성 폐질환이나 천식을 위한 코르티코스테로이드, 기립성 저혈압이나 부신 기능 부전을 위한 저용량 코르티코스테로이드를 투여받은 환자는 연구에 적합하다.
● 연구 치료 시작 전 4주 이내에 약독화 생백신으로 치료하거나, 연구 치료 동안 또는 연구 치료 최종 투여 후 5개월 이내에 이러한 백신이 필요할 것으로 예상되는 경우.
● 중증 근무력증, 근염, 자가면역 간염, 전신성 홍반 루푸스, 류마티스 관절염, 염증성 장 질환, 항인지질항체증후군, 베게너 육아종증, 쇼그렌 증후군, 길랭-바레 증후군, 또는 다발성 경화증을 포함하나 이에 제한되지 않는 자가면역 질환 또는 면역 결핍의 활성 또는 병력, 다음은 예외:
자가면역 관련 갑상선 기능저하증의 병력이 있고 갑상선 대체 호르몬을 투여받고 있는 환자;
안정적인 인슐린 요법을 받고 있는 조절된 제1형 당뇨병 환자는 연구에 참여할 수 있다.
- - 습진, 건선, 만성 단순 태선 또는 피부과적 징후만 있는 백반증이 있는 환자(예를 들어, 건선성 관절염 환자는 제외됨)는 다음 조건이 모두 충족되는 경우 본 연구에 적합하다: 발진이 체표면적의 <10%을 차지해야 함; 질환은 기준선에서 잘 조절되며 효능이 낮은 국소 코르티코스테로이드만 필요함; 지난 12개월 이내에 소랄렌 + 자외선 A 방사선, 메토트렉세이트, 레티노이드, 생물학적 제제, 경구 칼시뉴린 억제제, 또는 고역가 또는 경구 코르티코스테로이드를 필요로 하는 기저 조건의 급성 악화가 발생하지 않았음;
● 특발성 폐섬유증, 조직성 폐렴(예를 들어, 폐쇄성 세기관지염), 약물 유발성 폐렴 또는 특발성 폐렴의 병력, 또는 스크리닝 흉부 컴퓨터 단층촬영(CT) 스캔에서 활동성 폐렴의 증거. CIT-관련 폐렴 등급 < 2의 병력이 있는 환자는 의료 모니터와 논의한 후 적격이 될 수 있음.
● 전이 또는 사망 위험이 미미한 악성 종양(예를 들어, 5년 OS 비율 > 90%)을 제외하고, 스크리닝 전 2년 이내에 악성 흑색종 이외의 악성 종양 병력, 예를 들어, 적절하게 치료된 자궁경부 상피내 암종, 비-흑색종 피부암종, 국소 전립선암, 상피 내관 암종, 또는 I기 자궁암.
● 활동성 결핵(TB).
● 연구 치료 시작 전 4주 이내에 심각한 감염(감염 합병증으로 인한 입원, 균혈증 또는 중증 폐렴, 또는 조사자의 의견으로 환자 안전에 영향을 미칠 수 있는 모든 활동성 감염을 포함하나 이에 제한되지 않음).
● 연구 치료 시작 전 2주 이내에 치료적 또는 예방적 경구 또는 IV 항생제로 치료.
● 심각한 심혈관 질환, 예를 들어, 뉴욕심장협회 심장질환(분류 II 이상), 연구 치료 시작 전 3개월 이내의 심근경색 또는 뇌혈관 사고, 불안정 부정맥 또는 불안정 협심증.
● 통제되지 않는 고혈압(2회 이상의 연속 측정에서 휴식기 수축기 혈압 > 150mmHg 및/또는 확장기 혈압 > 100mmHg로 정의됨).
● 연구 치료 시작 전 4주 이내에 진단 목적 이외의 주요 수술 절차, 또는 연구 기간 동안 CLND 이외의 주요 수술 절차가 필요할 것으로 예상되는 경우.
- 중심 정맥 접근 카테터(예를 들어, 포트 또는 유사)의 배치는 주요 수술 절차로 간주되지 않으므로 허용된다.
● 연구 약물의 사용을 금지하는 기타 질환, 대사 장애, 신체 검사 소견 또는 임상 실험실 소견은 결과 해석에 영향을 미치거나, 환자의 연구 참여 능력을 손상시키거나, 환자의 치료 합병증으로 인한 위험을 높일 수 있다.
● 키메라 또는 인간화 항체 또는 융합 단백질에 대한 심각한 알레르기 반응의 병력.
● 중국 햄스터 난소 세포 제품 또는 재조합 인간 항체에 대한 과민증이 알려진 경우.
● 연구 약물 또는 그 부형제에 대해 알레르기 또는 과민증이 알려진 경우.
● 사전투약에 필요한 약물(아세트아미노펜, 라니티딘, 디펜히드라민, 메틸프레드니솔론)에 대한 불내증이 알려진 경우.
● 임신 또는 모유 수유, 또는 연구 기간 동안 임신할 의도.
- 가임 여성은 연구 치료 시작 전 14일 이내에 혈청 임신 검사 결과가 음성이어야 한다.
● 대조군의 경우에만 적격.
코호트 1에 대한 제외 기준
다음 기준 중 하나라도 충족하는 환자는 코호트 1에서 제외된다:
● 멀리 전이된 흑색종
● 지난 6개월 이내의 통과 전이 병력
● 선행 방사선 치료
● 항-CTLA-4, 항-PD-1, 항-PD-L1 치료 항체를 포함한 선행 면역요법, 및 흑색종에 대한 기타 전신 요법
코호트 2에 대한 제외 기준
다음 기준 중 하나라도 충족하는 환자는 코호트 2에서 제외된다:
● 증상이 있거나 치료되지 않았거나 진행중인 CNS 전이.
- 치료된 CNS 병변이 있는 무증상 환자는 다음 기준이 모두 충족되는 경우 적격이다: RECIST v1.1에 따라 측정 가능한 질환은 CNS 외부에 존재해야 하고; 환자는 두개내 출혈 또는 척수 출혈의 병력이 없으며; CNS 전이가 연구 시작 전 ≥ 4주 동안 안정적이거나, 신경외과적 절제술이 연구 치료 시작 전 ≥ 28일에 발생했고; 환자는 연구 치료 시작 전 적어도 14일 동안 CNS 질환에 대한 치료법으로 코르티코스테로이드를 필요로 하지 않으며; 안정적인 용량의 항경련제 치료가 허용됨.
● 활동성 암종성 수막염/연수막 질환 또는 이의 병력.
● 통제되지 않는 종양 관련 통증. 진통제가 필요한 환자는 스크리닝 시 안정 요법 중에 있어야 한다. 완화적 방사선 치료가 가능한 증상이 있는 병변(예를 들어, 뼈 전이 또는 신경 충돌을 유발하는 전이)은 등록 전에 치료해야 한다. 환자는 방사선의 영향에서 회복되어야 한다. 최소 필요 회복 기간은 없다. 추가 성장시 기능적 결함이나 난치성 통증을 유발할 가능성이 있는 무증상 전이성 병변 (예를 들어, 현재 척수 압박과 관련이 없는 경막외 전이)은 등록 전에 적절한 경우 국소 치료를 고려해야 한다.
● 반복적인 배액 절차(월 1회 또는 그 보다 더 자주)가 필요한, 통제되지 않는 흉막 삼출, 심낭 삼출 또는 복수; 유치 카테터(예를 들어, PLEURX®)를 사용하는 환자는 허용된다.
● 통제되지 않거나 증상이 있는 고칼슘혈증(이온화 칼슘 > 1.5mmol/L, 칼슘 > 12mg/dL 또는 교정 칼슘 > ULN).
● 이전 CIT(대체 요법으로 관리된 내분비병증 또는 혈청 아밀라제 또는 리파제의 무증상 상승 제외)로 인해 이전 면역치료제를 영구적으로 중단하게 된 4등급의 면역 매개 이상 반응의 병력.
● 기준선으로 완전히 해결되지 않은, 이전 면역조절 요법과 관련된 모든 면역 매개 이상 반응(대체 요법으로 관리된 내분비병증 또는 안정한 백반증 제외). 부신 기능 부전을 위한 코르티코스테로이드 대체 요법을 제외하고(단, 환자가 ≤ 10mg/일의 프레드니손 또는 이에 상응하는 용량을 투여받는 경우) 면역 매개 이상 반응에 대해 코르티코스테로이드로 치료를 받는 환자는 코르티코스테로이드 중단 후 4주 이상 관련 증상이나 징후가 없어야 한다.
● 이전 방사선 요법, 화학 요법, 표적 요법, CPI 요법 또는 수술 절차와 관련된 이상 반응은 안정적인 용량의 호르몬 대체 요법(예를 들어, 티록신, 하이드로코르티손, 프레드니솔론 등) 투여 시 탈모증(모든 등급), 2등급 말초 신경병증, 갑상선 기능 저하증 및/또는 뇌하수체 기능 저하증을 제외하고 1등급 이상으로 해결되어야 한다.
RO7247669-포함 군들(코호트 1 및 코호트 2)에 대한 제외 기준
다음 기준 중 하나라도 충족하는 환자는 RO7247669 포함 군에서 제외된다.
● 항-LAG-3 제제를 사용한 선행 치료.
● 심근염의 병력(병인과 무관).
● 연구 치료 시작 전 6개월 이내에 경흉부 심장초음파검사(TTE) 또는 다중 게이트 획득(MUGA) 스캔(TTE 선호 검사)으로 평가한 좌심실 박출률(LVEF) < 50%.
● 트로포닌 T(TnT) 또는 트로포닌 I(TnI) > 기관 ULN. > 1에서 < 2 × ULN 사이의 TnT 또는 TnI 수준을 갖는 환자는 24시간 내 반복 수준이 ≤ 1 × ULN인 경우 적격이다. 24시간 내 반복 수준이 > 1에서 < 2 × ULN 사이인 경우, 환자는 심장 평가를 받아야 하며 임상적으로 유의미한 소견이 없으면 치료를 고려할 수 있다.
티라골루맙 포함군들(코호트 1 및 코호트 2)에 대한 제외 기준
다음 기준 중 어느 하나를 충족하는 환자는 티라골루맙-포함 군에서 제외된다:
● 이전 항-TIGIT 제제로 치료.
● 스크리닝 시 활동성 엡스타인-바 바이러스(EBV) 감염 또는 만성 활동성 EBV 감염이 알려졌거나 의심되는 경우. 스크리닝 시 EBV 바이러스 캡시드 항원(VCA) IgM 검사에서 양성인 환자는 티라골루맙 포함군에서 제외된다. EBV PCR 검사는 활동성 감염 또는 의심되는 만성 활동성 감염을 스크리닝하기 위해 임상적으로 지시된 대로 수행되어야 한다. EBV PCR 검사에서 양성인 환자는 티라골루맙 포함군에서 제외된다.
F. 연구 치료
본 연구를 위한 연구용 의약품은 아테졸리주맙, 티라골루맙, RO7247669, 니볼루맙 및 이필리무맙이다.
대조군(니볼루맙 + 이필리무맙)
니볼루맙 + 이필리무맙(Nivo + Ipi) 대조군의 환자는 수술시까지 또는 수용할 수 없는 독성 발생 또는 임상적 이점이 상실될 때까지(어느 것이든 먼저 발생하는 것) 표 8에 설명된 대로 2주기(6주) 동안 치료를 받는다. 무작위 배정 후 늦어도 7일 이내에 치료를 시작하는 것이 좋다.
표 8. 니볼루맙 + 이필리무맙 군의 치료 요법
니볼루맙은 각 21일 주기의 1일차(Q3W)에 3mg/kg 용량으로 IV 주입으로 투여된다. 이필리무맙은 각 21일 주기의 1일차(Q3W)에 1 mg/kg 용량으로 IV 주입으로 투여된다.
RO7247669 군
RO7247669 군의 환자는 수술시까지 또는 수용할 수 없는 독성 발생 또는 임상적 이점이 상실될 때까지(어느 것이든 먼저 발생하는 것) 표 9에 설명된 대로 2주기(6주) 동안 치료를 받는다. 무작위 배정 후 늦어도 7일 이내에 치료를 시작하는 것이 좋다.
표 9. RO7247669 군의 치료 요법
RO7247669는 2100mg Q3W(각 21일 주기의 1일차에 2100mg)의 고정 용량으로 투여된다. RO7247669의 투여는 훈련된 직원과 잠재적인 심각한 반응들을 관리하기에 적절한 장비 및 의약품에 즉시 접근할 수 있는 모니터링 환경에서 수행된다. RO7247669 주입은 표 10에 요약된 지침에 따라 투여된다.
표 10. 1차 및 2차 RO7247669 주입 투여
IRR = 주입 관련 반응.
2등급 주입 관련 반응(IRR)을 경험한 환자의 경우, 후속 주입 전에 파라세타몰 500-1000mg 경구(PO) 또는 IV 및 디펜히드라민 25-50mg PO 또는 IV(또는 적절한 용량의 대체 히스타민 H1/2 길항제)의 사전투약이 필요하다. 선행 치료와 관련된 3등급 또는 4등급 IRR의 경우, 환자는 선행 치료를 영구적으로 중단해야 한다.
RO7247669에 대한 용량 변경은 허용되지 않는다.
아테졸리주맙 + 티라골루맙
아테졸리주맙 + 티라골루맙 (Atezo + Tira) 군의 환자는 수술시까지 또는 수용할 수 없는 독성 발생 또는 임상적 이점이 상실될 때까지(어느 것이든 먼저 발생하는 것) 표 11에 설명된 대로 2주기(6주) 동안 치료를 받게 될 것이다. 무작위 배정 후 늦어도 7일 이내에 치료를 시작하는 것이 좋다.
표 11. 아테졸리주맙 + 티라골루맙 군의 치료 요법
아테졸리주맙은 3주마다(Q3W) 1200mg의 고정 용량으로 투여된다(각 21일 주기의 1일차에 1200mg). 아테졸리주맙의 투여는 훈련된 직원과 잠재적인 심각한 반응들을 관리하기에 적절한 장비 및 의약품에 즉시 접근할 수 있는 모니터링 환경에서 수행된다. 아테졸리주맙 주입은 표 12에 요약된 지침에 따라 투여된다.
아테졸리주맙에 대한 용량 변경은 허용되지 않는다.
표 12. 1차 및 2차 아테졸리주맙 주입 투여
IRR = 주입 관련 반응.
티라골루맙은 600mg IV Q3W(각 21일 주기의 1일차에 600mg)의 고정 용량으로 투여된다. 티라골루맙의 투여는 훈련된 직원과 잠재적인 심각한 반응들을 관리하기에 적절한 장비 및 의약품에 즉시 접근할 수 있는 모니터링 환경에서 수행된다. 티라골루맙 주입은 표 13에 요약된 지침에 따라 투여된다.
표 13. 티라골루맙의 1차 투여 및 후속 주입.
IRR = 주입 관련 반응.
선행 치료와 관련이 있는 것으로 간주되는 독성을 경험하는 환자의 경우 아테졸리주맙 및 티라골루맙 치료를 일시적으로 보류할 수 있다. 독성 치료를 위해 코르티코스테로이드를 시작하는 경우, 타당하다면 선행 치료를 재개하기 전에 ≥1개월에 걸쳐 ≤ 10mg/일에 해당하는 양의 경구 프레드니손을 감량해야 한다. 신보조 환경에서 연구 치료는 수술 전 기간인 6주로 제한된다. 환자가 독성을 경험하지 않는 한 이 기간 동안 치료를 중단해서는 안 된다. 독성이 아테졸리주맙 및/또는 티라골루맙을 중단/보류하는 기준을 충족하는 경우, 아테졸리주맙 및/또는 티라골루맙을 중단/보류해야 한다. 독성이 해소된 후, 이익/위험 프로파일이 수용 가능하고 수술이 예정 일자로부터 2주 이내에 실시될 수 있는 경우에만 후속 치료 주기를 고려해야 한다. 그렇지 않은 경우, 환자가 더 이상 지체하지 않고 바로 수술을 진행할 수 있도록 후속 치료 주기를 생략해야 한다.
이용 가능한 작용 기전의 특성 분석에 기초하여, 티라골루맙은 아테졸리주맙과 유사하지만 독립적인 이상 반응들을 일으킬 수 있다. 티라골루맙은 또한 아테졸리주맙 관련 이상 반응의 빈도나 중증도를 악화시킬 수 있거나 아테졸리주맙과 중복되지 않는 독성을 가질 수 있다. 이러한 시나리오는 임상 환경에서 서로 구별되지 않을 수 있으므로 일반적으로 이상 반응은 두 약물 모두에 기인해야 하며, 이상 반응에 대한 투여 중단 또는 치료 중단은 티라골루맙과 아테졸리주맙 모두에 적용되어야 한다. 아테졸리주맙을 보류하거나 중단하는 경우 티라골루맙도 보류하거나 중단해야 한다. 티라골루맙을 보류하거나 중단하는 경우, 아테졸리주맙도 보류하거나 중단해야 한다.
RO7247669 + 티라골루맙(코호트 1 및 2)
RO7247669 + 티라골루맙(RO7247669 + Tira)군의 환자는 표 14에 요약된 대로 치료를 받는다.
코호트 1의 환자는 수술시까지 또는 수용할 수 없는 독성 발생 또는 임상적 이점이 상실될 때까지(어느 것이든 먼저 발생하는 것) 2주기(6주) 동안 치료를 받는다.
코호트 2의 환자는 조사자가 방사선 및 생화학 데이터, 국소 생검 결과(가능한 경우), 및 임상 상태(예를 들어, 질환에 수반되는 통증 등 증상의 악화)를 통합적으로 평가한 후 결정한 바에 따라 허용할 수 없는 독성 또는 임상 이익의 상실이 발생할 때까지 치료를 받는다.
무작위 배정(코호트 1) 또는 등록(코호트 2) 후 늦어도 7일 이내에 치료를 시작하는 것이 좋다.
표 14. RO7247669 + 티라골루맙 군에 대한 치료 요법
a 안전성 준비 단계가 완료된 후, 후원자는 더 적은 용량(예를 들어, 1200mg 및 600mg)을 탐색하기로 결정할 수 있다.
RO7247669는 IV 주입으로 각 21일 주기의 1일차에 2100mg의 고정 용량으로 투여된다. 티라골루맙은 표 13에 기재된 바와 같이 각 21일 주기의 1일차에 그리고 주입 후 관찰 기간600mg의 고정 용량으로 IV 주입으로 투여된다.
RO7247669의 투여는 훈련된 직원과 잠재적인 심각한 반응들을 관리하기에 적절한 장비 및 의약품에 즉시 접근할 수 있는 모니터링 환경에서 수행된다. RO7247669 주입은 표 15에 요약된 지침에 따라 투여된다.
표 15. 1차, 2차 및 후속 RO7247669 주입의 투여
IRR = 주입 관련 반응.
등급 ≥ 2의 주입 관련 반응(IRR)을 경험한 환자의 경우, 후속 주입 전에 파라세타몰 500-1000mg 경구(PO) 또는 IV 및 디펜히드라민 25-50mg PO 또는 IV(또는 적절한 용량의 대체 히스타민 H1/2 길항제)의 사전투약이 필요하다. 선행 치료와 관련된 3등급 또는 4등급 IRR의 경우, 환자는 선행 치료를 영구적으로 중단해야 한다.
RO7247669에 대한 용량 변경은 허용되지 않는다. 그러나 새로운 안전성 및 효능 데이터를 기반으로 후원자는 더 낮은 용량(예를 들어, 1200mg 및 600mg)을 모색할 수 있다. RO7247669 치료는 독성 이외의 이유(예를 들어, 수술 절차)로 중단될 수 있다.
조사관과 의료 모니터는 허용 가능한 치료 중단 길이를 결정한다.
연구 치료와 관련이 있는 것으로 간주되는 독성을 경험하는 환자의 경우 RO7247669 및 티라골루맙 치료를 일시적으로 보류할 수 있다. 독성 치료를 위해 코르티코스테로이드를 시작하는 경우, 타당하다면 선행 치료를 재개하기 전에 ≥1개월에 걸쳐 ≤ 10mg/일에 해당하는 양의 경구 프레드니손을 감량해야 한다.
코호트 1의 경우, 신보조 환경에서 연구 치료는 수술 전 기간인 6주로 제한된다. 환자가 독성을 경험하지 않는 한 이 기간 동안 치료를 중단해서는 안 된다. 독성이 RO7247669 및 티라골루맙을 중단/보류하는 기준을 충족하는 경우, RO7247669 및 티라골루맙을 중단/보류해야 한다. 독성이 해소된 후, 이익/위험 프로파일이 수용 가능하고 수술이 예정 일자로부터 2주 이내에 실시될 수 있는 경우에만 후속 치료 주기를 고려해야 한다. 그렇지 않은 경우, 환자가 더 이상 지체하지 않고 바로 수술을 진행할 수 있도록 후속 치료 주기를 생략해야 한다.
코호트 2의 경우, RO7247669와 티라골루맙이 독성으로 인해 12주 이상 보류되는 경우, 환자는 RO7247669와 티라골루맙을 중단해야 한다. 그러나 환자가 치료를 재개하기 전에 코르티코스테로이드를 감량할 수 있도록 RO7247669와 티라골루맙은 12주 이상 보류될 수 있다. RO7247669 및 티라골루맙은 12주 이상 보류된 후 의료 모니터가 환자가 임상적 이점을 얻을 가능성이 있다고 동의하는 경우 재개될 수 있다. RO7247669 및 티라골루맙 치료는 독성 이외의 이유(예를 들어, 수술 절차)로 보류될 수 있다. 연장된 기간의 허용 가능한 길이는 조사자와 의료 모니터가 합의해야 한다.
이용 가능한 작용 기전의 특성 분석에 기초하여, 티라골루맙은 RO7247669와 유사하지만 독립적인 이상 반응들을 일으킬 수 있다. 티라골루맙은 또한 RO7247669 관련 이상 반응의 빈도나 중증도를 악화시킬 수 있거나 RO7247669와 중복되지 않는 독성을 가질 수 있다. 이러한 시나리오는 임상 환경에서 서로 구별되지 않을 수 있으므로 일반적으로 이상 반응은 두 약물 모두에 기인해야 하며, 이상 반응에 대한 투여 중단 또는 치료 중단은 티라골루맙과 RO7247669 모두에 적용되어야 한다. RO7247669를 보류하거나 중단하는 경우 티라골루맙도 보류하거나 중단해야 한다. 티라골루맙을 보류하거나 중단하는 경우, RO7247669도 보류하거나 중단해야 한다.
G. 병용 요법
병용 요법은 연구 치료 시작 7일 전부터 치료 중단 방문시까지 프로토콜에 따른 연구 치료 외에 환자가 사용하는 모든 약물(예를 들어, 처방약, 일반 의약품, 백신, 한약 또는 동종요법 약물, 영양 보충제)로 구성된다.
일반적으로 조사자는 현지 표준 관행에 따라 임상적으로 지시된 주의 또는 금기 요법들로 정해진 요법들 이외의 보조 요법을 사용하여 환자 치료(care)(기존 질환 포함)를 관리해야 한다. 주입 관련 증상을 경험하는 환자는 아세트아미노펜, 이부프로펜, 디펜히드라민 및/또는 H2 수용체 길항제(예를 들어, 파모티딘, 시메티딘) 또는 현지 표준 관행에 따라 동등한 약물로 증상에 따라 치료할 수 있다. 호흡 곤란, 저혈압, 천명음, 기관지 경련, 빈맥, 산소 포화도 감소 또는 호흡곤란으로 나타나는 심각한 주입 관련 반응은 임상적으로 지시된 대로 보조 요법(예를 들어, 산소 보충 및 β2-아드레날린 작용제)로 관리해야 한다.
RO7247669, Atezo + Tira 및 RO7247669 + Tira Arms에 대해 허용된 요법
환자는 연구 기간 동안 다음 요법들을 사용하는 것이 허용된다:
● 연간 실패율 < 1%인 경구 피임약.
● 호르몬 대체 요법.
● 예방적 또는 치료적 항응고 요법(예를 들어, 안정적인 용량의 와파린 또는 저분자량 헤파린).
● 비활성화된 예방접종(예를 들어, 인플루엔자).
● 식욕 자극제로 투여되는 메게스트롤 아세테이트
● 미네랄코르티코이드(예를 들어, 플루드로코르티손)
● 만성 폐쇄성 폐질환(COPD)이나 천식에 투여되는 코르티코스테로이드.
● 기립성 저혈압 또는 부신피질 부전증에 투여되는 저용량 코르티코스테로이드.
● 국소 요법(예를 들어, 수술(완전 림프절 절제술(CLND) 이외) 및 흑색종 특이적 아님)).
RO7247669 군의 경우, 조사자의 재량에 따라 2차 RO7247669 주입 시에만 항히스타민제, 해열제 및/또는 진통제를 사용한 사전투약이 투여될 수 있다.
아테졸리주맙 + 티라골루맙 군의 경우, 조사자의 재량에 따라 2차 아테졸리주맙 + 티라골루맙 주입 시에만 항히스타민제, 해열제 및/또는 진통제를 사용한 사전투약이 투여될 수 있다.
코호트 2의 RO7247669 + Tira 군에 대해 추가로 허용되는 요법
환자는 연구 기간 동안 다음 요법들을 사용하는 것이 허용된다:
● 다음과 같은 완화적 방사선 요법(예를 들어, 알려진 뼈 전이의 치료 또는 증상에 따른 통증 완화): 완화적 방사선요법은 종양 표적 병변의 평가를 방해하지 않는 한 허용된다(예를 들어, 조사될 병변이 측정 가능한 질환의 유일한 부위가 아니어야 함). 완화적 방사선요법 도중에 티라골루맙 치료를 계속할 수 있다. RO7247669를 사용한 치료는 한 가지 예외를 제외하고 완화적 방사선요법 중에 계속될 수 있다: 완화적 방사선요법은 RO7247669가 투여되는 날에는 허용되지 않는다.
● 다음과 같은 국소 요법(예를 들어, 수술, 정위 방사선 수술, 방사선 요법, 고주파 절제): 3개 이하의 병변을 조절하기 위해 국소 치료가 필요한 혼합 반응을 경험하는 환자는 의료 모니터의 승인을 얻은 후에도 여전히 연구 치료를 계속할 적격이 있을 수 있다. 표적 병변을 겨냥한 국소 치료를 받은 환자는 더 이상 방사선 반응에 대해 평가할 수 없지만 진행에 대해서는 평가할 수 있다.
항히스타민제, 해열제 및/또는 진통제를 사용한 사전투약은 조사자의 재량에 따라 2차 및 후속 RO7247669 및 티라골루맙 주입에 대해서만 투여될 수 있다.
H. 평가
모든 환자는 연구 기간 동안 이상 반응에 대해 면밀히 모니터링된다. 이상 반응은 국립 암 연구소(National Cancer Institute)의 이상 반응에 대한 공통 용어 기준, 버전 5.0(NCI CTCAE v5.0)에 따라 등급분류된다. 사이토카인 방출 증후군(CRS) 중증도는 미국 이식 및 세포 치료 학회(ASTCT) CRS 합의 등급 척도에 따라 등급분류된다.
코호트 1의 환자는 2주기(6주) 동안 신보조 치료를 받고 7주차에 수술(CLND)을 받는다. 원격 전이가 없고 외과 의사가 질환이 완전히 절제 가능하다고 판단하는 경우 모든 환자는 수술을 진행할 것으로 예상된다. 병리학적 반응은 국소적으로 그리고 독립적인 병리학적 검토를 통해 평가된다.
허용불가능한 독성으로 인해 치료를 중단하고 계속해서 전이성 질환의 증거가 없는 환자는 여전히 수술에 적격하며, 이상 반응이 해결되고 병기 재지정을 통해 III기 질환임이 확인된 후 CLND를 진행한다. 환자가 질환 진행을 확인한 경우, 환자 관리 및 치료제 선택은 치료 의사의 재량에 따른다. 이들 환자는 추적 조사를 위해 연구에 남아 있다.
환자는 수술 (CLND) 전 6주차(주기 1의 1일차부터)에 방사선학적 종양 평가를 받는다. 반응은 RECIST v1.1에 따라 조사자가 평가하고 결정하지만 이후 영상화 연구를 통한 확인은 필요하지 않다.
코호트 2의 환자는 처음 54주 동안 9주마다(주기 1의 1일차부터) 종양 평가를 받고 그 이후에는 12주마다 종양 평가를 받는다. 반응은 조사자가 RECIST v1.1을 사용하여 평가한다. 면역 기반 치료법에 대해 수정된 RECIST v1.1(iRECIST)에 따른 반응은 조사자가 평가한 개별 병변 데이터를 기반으로 후원자가 프로그래밍 방식으로 결정한다.
코호트 1 및 코호트 2의 경우, 실험군에서 임상 활성이 입증된 경우, 후원자는 독립 검토 시설의 평가를 위해 해당 군에 대한 종양 평가 스캔을 제출하도록 요청할 수 있다.
종양 및 반응 평가
측정 가능하고 평가 가능한 모든 병변을 스크리닝 시 평가하고 문서화해야 한다. 사전 동의를 얻기 전과 무작위 배정/등록 전 14일 이내에 표준 치료로 수행된 종양 평가는 스크리닝 시 반복되어야 하는 것은 아니다.
기준선에서 확인된 모든 측정 가능 및/또는 평가 가능 병변은 코호트 1 및 2에 대한 후속 종양 평가에서 재평가되어야 한다. 스크리닝에서 질환 부위를 평가하는 데 사용된 동일한 방사선 촬영 절차를 후속 종양 평가에도 사용해야 한다(예를 들어, CT 스캔의 경우 동일한 조영 프로토콜).
코호트 1 종양 및 반응 평가
코호트 1의 환자는 치료에 대한 병리학적 및 방사선학적 반응을 평가한다. 환자들은 기준선에서 그리고 수술 시 치료 6주 후(CLND) 병리학적 종양 평가를 받는다. 7주차의 III기 림프절 완전 절제(CLND)는 치료적 림프절 절제를 위한 적절한 수술 절차 기준에 따라 수행되어야 한다. 환자가 면역 매개 이상 반응 관리를 위해 코르티코스테로이드 또는 기타 항염증 약물을 투여받고 있는 경우, CLND는 계획대로 수행되어야 하며, 단, 이러한 약물은 안정적이거나 점진적인 용량으로 투여되고 이상 반응의 중증도는 2등급 이상이어야 한다. 연구 치료 관련 이상 반응이 예정된 수술 시점에 충분히 개선되지 않은 경우 CLND는 최대 2주까지 연기될 수 있다. 병리학적 반응은 INMC 지침(Tetzlaff 외, Ann Oncol. 29: 1861-1868, 2018)에 따라 국소적이고 독립적인 병리학적 검토에 의해 결정된다.
수술 합병증은 클라비엥-딘도(Clavien-Dindo) 분류에 따라 채점된다. CLND를 겪은 환자에 대해 모든 등급의 합병증 발생률이 보고되고 점수가 매겨진다.
환자는 RECIST v1.1에 따라 기준선, 수술(CLND) 전 치료 6주 후, 치료 완료/중단 시점인 13주차에 방사선학적 종양 평가를 받는다.
하나의 시점에서의 전체 반응은 RECIST v1.1을 사용하여 조사자가 평가한다.
질환 추적-관찰 및 질환의 진행 또는 재발 확인
신보조 치료 동안 질환 진행의 진단은 임상적, 실험실적, 방사선학적 및/또는 조직학적 소견을 통해 확인되어야 한다. 수술 후, 보조 치료 또는 관찰을 시작하기 전, 13주차에 종양 평가를 수행하여 신보조 요법-수술 중재 기간을 마무리한다.
그 후, 보조 치료/관찰 단계(즉, 13주차에 시작) 동안 연구 외부에서 모든 환자를 추적하여 각 군에 대해 설명된 바와 같이 질환 재발 및 생존을 평가해야 한다.
치료기간을 마친 환자는 수술 후 3개월이 지나면 첫 생존 추적조사를 받게 된다. 연구 약물을 조기에 중단한 환자는 선행 치료의 최종 투여 후 3개월 후에 첫 번째 생존 추적조사 방문을 갖는다. 국소, 구역 또는 원격 질환 재발은 임상적, 실험실적, 방사선학적 및/또는 조직학적 소견이 진단을 확증하는 경우에만 지정될 수 있다.
수술 후 기간 동안 질환 상태는 기관 지침에 따라(예를 들어, 처음 2년 동안은 3개월마다, 3년차에는 6개월마다, 4년차 이후에는 1년에 한 번) 임상적으로 평가되고 문서화되어야 한다. 또한, 전이성 질환을 배제하기 위해 임상적으로 필요한 경우 간 기능 검사, 뼈 스캔, 흉부 X선/진단 CT 스캔, 간 영상 및/또는 기타 방사선 촬영 방식을 고려할 수 있다.
진행 또는 재발의 진단은 임상적으로 가능할 때마다 조직학적으로 확인되어야 한다. 질환 진행 또는 재발성 질환 진단의 가장 빠른 일자를 사용하고 기록해야 한다. 이 일자는 객관적인 임상적, 방사선학적, 조직학적, 세포학적 증거를 기반으로 해야 한다. 재발성 질환에는 국소 재발, 구역 재발, 원격 재발이 포함된다.
추적 조사시 질환 재발, 사망 및 기타 주목할 만한 사건을 확인하기 위한 정의 및 절차는 다음과 같다. 재발을 문서화하려면 재발 패턴을 확립하는 것에 관련된 모든 부위를 지정해야 한다. 다음의 치료 실패 기준은 허용 가능한 유일한 질환 재발 증거를 구성한다.
● 폐: 하나의 새로운 병변의 존재 또는 전이성 질환과 일치하는 여러 병변이 나타나는 경우 양성 세포검사 또는 생검
● 간: 하나의 새로운 병변의 존재 또는 전이성 질환과 일치하는 여러 병변이 나타나는 경우 양성 세포검사 또는 생검
● 중추 신경계: 양성 뇌 CT, MRI 스캔 또는 CSF 세포검사
● 피부, 피하 및 림프절 재발: 하나의 새로운 병변의 존재 또는 전이성 질환과 일치하는 여러 병변이 나타나는 경우 양성 세포검사 또는 생검
● 뼈 및 기타 기관: 두 가지 다른 방사선 연구(예를 들어, 양성 핵골 스캔 또는 PET 스캔 및 조영 GI 시리즈 또는 복부 질환의 경우 복부 초음파, X선 또는 CT)에서 확인된 전이성 질환과 일치하는 새로운 단일 병변의 존재 또는 여러 병변들이 나타나는 경우 양성 세포검사 또는 생검.
코호트 2 종양 및 반응 평가
코호트 2의 환자는 투여 지연에 관계없이, 처음 54주 동안 9주(± 1)마다(주기 1의 1일차부터) 종양 평가를 받고 그 이후에는 12주(± 2)마다 종양 평가를 받는다. 방사선학적 질환이 진행된 후에도 치료를 계속하는 환자는 예외이다. 이러한 환자는 조사자가 결정하여 임상적 이점이 상실될 때까지 9주마다 종양 평가를 받는다. 따라서, 프로토콜에 명시되지 않은 새로운 항암 치료를 시작하더라도 임상 이익의 상실 이외의 이유로 치료를 중단한 환자의 경우 일정에 따라 종양 평가가 계속된다. 진행성 질환이 의심되는 경우 조사자의 재량에 따라 언제든지 종양 평가를 반복할 수 있다.
방사선요법이나 수술로 치료된 뇌전이는 측정 가능 또는 평가 가능한 것으로 간주되지 않지만 스크리닝 시 전이성 질환 부위로 문서화된다. 방사선요법이나 수술로 치료받은 적이 있는, 기준선에서 확인된 뇌 전이는 뇌에 질환 진행이 의심되는 경우(즉, 환자가 증상을 보이는 경우)가 아니면 측정가능 또는 평가 가능한 것으로 간주되지 않는다. 따라서 임상적으로 지시되지 않는 한 후속 머리 스캔은 필요하지 않다.
코호트 2에서 iRECIST에 따른 반응 평가를 용이하게 하려면, 진행 이후 치료를 받는 환자의 경우 RECIST v1.1에 따라 질환 진행 후에도 종양 평가를 계속해야 한다. 여기에는 모든 후속 평가에서 표적 병변의 지속적인 측정, 비표적 병변의 평가(명백한 진행을 보인 비표적 병변의 추가 악화에 대한 모니터링 포함), 새로 확인된 병변의 평가(병변을 측정할 수 있는 경우 측정 포함)가 포함된다.
하나의 시점에서의 전체 반응은 RECIST v1.1을 사용하여 조사자가 평가한다.
바이오마커 평가
기준선 종양 조직 샘플은 스크리닝 시 전이성 림프절(코호트 1) 또는 기타 전이성 병변(코호트 2)의 생검을 통해 모든 환자(코호트 2 안전성 준비 단계의 환자는 제외)로부터 수집된다. 코호트 1의 환자의 경우, 치료 중의 조직 샘플을 주기 2의 1일차와 수술 시(CLND) 생검으로 수집한다. 코호트 2에 등록된 환자의 경우, 치료 중의 조직 샘플을 주기 2의 8일차에 생검으로 수집한다.
탐색적 바이오마커 분석은 효능 및 안전성 평가변수를 고려하여 바이오마커와 연구 약물에 대한 반응의 연관성을 이해하려는 노력의 일환으로 수행된다. 탐색적 바이오마커 연구에는 종양 면역생물학, PD-L1, 림프구 하위 집단, T 세포 수용체 레퍼토리 또는 T 세포 활성화와 관련된 사이토카인과 관련된 유전자 또는 유전자 시그니처 분석이 포함될 수 있지만 이에 제한되지는 않는다. 연구에는 DNA 또는 RNA 추출, 체세포 돌연변이 분석, 차세대 시퀀싱(NGS)(전체 엑솜 시퀀싱(WES) 포함) 사용이 포함될 수 있다. 연구에는 DNA, 무세포 DNA 또는 RNA의 추출; 돌연변이, 단일 뉴클레오티드 다형성 및 기타 게놈 변이체들의 분석; 및 포괄적인 유전자 패널의 NGS를 사용한 게놈 프로파일링이 포함될 수 있다. 혈액에서 추출한 DNA를 조직에서 추출한 DNA와 비교하여 생식세포 변이체와 체세포 변이체를 구별함으로써 체세포 변이체를 식별할 수 있다.
NGS 방법에는 전체 게놈 시퀀싱(WGS) 또는 조직 및 혈액 샘플의 WES가 포함될 수 있다. 참가 사이트에서는, WGS 또는 WES가 연구 약물에 대한 반응을 예측하거나, 더 심각한 질환 상태로의 진행과 연관되거나, 연구 약물에 대해 획득된 내성과 연관되거나, 이상 반응 발생에 대한 취약성과 관련이 있거나, 이상 반응 모니터링 또는 조사를 개선시킬 수 있거나 질환 생물학 및 약물 안전성에 대한 지식과 이해를 높일 수 있는 변이체들을 식별하기 위해 DNA 추출을 위해 혈액 샘플을 수집한다. 혈액에서 추출한 DNA를 조직에서 추출한 DNA와 비교하여 생식세포 변이체와 체세포 변이체를 구별함으로써 체세포 변이체를 식별할 수 있다.
I. 분석
최종 연구는 연구 중단 시점까지 수집된 환자 데이터를 기반으로 한다. 달리 명시되지 않는 한, 효능 분석은 배정된 치료 요법에 대해 각 약물을 적어도 1회 투여받은 모든 환자로 정의된 효능-평가 가능 집단을 기반으로 하며, 안전성 분석은 임의의 양의 선행 치료를 투여 받은 모든 환자로 정의된 안전성-평가 가능 집단을 기반으로 한다.
등록은 지역, 국가, 치료군별 조사자별로 요약된다. 환자 성향은 치료군별로 요약된다. 포함 및 제외 기준과 관련된 주요 편차를 포함한 주요 프로토콜 편차는 치료군별로 요약된다.
안전성-평가 가능 환자의 경우, 연구 약물 투여 데이터를 치료군별로 표로 작성하거나 나열하고 용량 변경을 표시한다. 평균과 표준편차는 각 연구 약물의 총 용량과 용량 강도를 요약하는 데 사용된다. 연구 약물 중단 이유가 표로 정리되어 있다.
인구통계학적 및 기본 특성(연령, 성별, 인종/민족, 체중, 악성 기간, 전이성 질환 부위(해당하는 경우) 및 기준선 ECOG PS 포함)이 치료군별로 전체적으로 요약된다.
샘플 크기의 결정
본 연구는 가설 검정을 위해 명시적인 검정력 및 제1종 오류를 고려하도록 설계되지 않았다. 대신, 본 연구는 흑색종 환자에게 투여할 때 치료 또는 치료 조합들에 대한 예비 효능, 안전성 및 PK 데이터를 얻기 위해 설계되었다. 코호트 1은 해당 질환에 대해 선행 전신 치료를 받은 적이 없는 절제 가능 III기 흑색종 환자로 구성된다. 코호트 2는 전이성 질환에 대한 적어도 1차 이상 2차 이하의 치료 도중 또는 치료 이후에 질환 진행을 경험한 IV기 흑색종 환자로 구성된다.
코호트 1에서, 연구 기간 동안 대략 55-145명의 환자가 대조군과 실험군에 무작위로 할당된다. 코호트 2에서, 대략 6-46명의 환자가 실험군에 배정된다.
효능 분석
코호트 1의 일차 효능 평가변수
코호트 1의 일차 효능 평가변수는 수술 시점의 pRR이다. pRR은 CLND 시점에 신보조 치료 완료(7주차) 후에 평가된다. pRR은 독립적인 병리학적 검토로 결정하여 pCR(치료된 종양상에서 생존 가능한 종양이 전혀 없음), 병리학적으로 거의 완전 반응(pnCR; 치료된 종양상에서 생존 가능 종양의 < 10%); 및 결정된 병리학적 부분 반응(pPR; 치료된 종양상의 < 50%가 생존 가능 종양 세포에 의해 점유됨)을 달성한 환자의 비율로 정의된다. pRR은 각 군에 대해 90% CI로 계산된다. 실험군과 대조군 간의 pRR 차이도 90% CI로 계산된다. 신뢰 구간은 표본 크기에 따라 정확한 방법이나 Wald 방법을 사용하여 추정된다.
코호트 1의 이차 효능 평가변수
코호트 1의 2차 효능 평가변수는 국소 병리학적 평가, 무사건 생존율(EFS), RFS, OS 및 수술 전 ORR에 의해 결정된 수술 시점의 pRR이다. pRR은 표 5에 정의되어 있다.
EFS는 무작위 배정 시점부터 다음 사건(어느 것이든 먼저 발생하는 것)까지의 시간으로 정의된다: RECIST v1.1에 따라 조사자가 평가한 수술이 불가능한 질환 진행; 국소, 구역 또는 원격 질환 재발; 또는 임의의 원인으로 인한 사망. 이러한 사건을 경험하지 않은 환자는 마지막 종양-후 종양 평가 시점에 중도절단된다.
RFS는 수술 시점부터 처음 문서화된 질환의 재발 또는 임의의 원인으로 인한 사망까지의 시간으로 정의된다. 질환의 재발 또는 사망이 문서화되지 않은 환자의 경우 RFS는 마지막 종양 평가일에 중도절단된다.
OS는 무작위 배정 시점부터 임의의 원인으로 인한 사망까지의 시간으로 정의된다. OS 분석 당시 생존해 있는 환자는 생존한 것으로 알려진 마지막 일자를 기준으로 중도절단된다.
카플란-마이어(카플란-마이어) 방법은 RFS, EFS 및 OS의 중앙값을 추정하는 데 사용되며, 90% CI는 브룩마이어와 크롤리(Brookmeyer and Crowley) 방법을 사용하여 구성된다. 특정 시점의 RFS, EFS 및 OS 비율도 카플란-마이어 방법을 사용하여 추정되며, 90% CI는 그린우드(Greenwood)의 분산 추정치를 기반으로 계산된다.
RECIST v1.1에 따른 ORR은 신보조 치료 완료 후(7주차) 평가되며 RECIST v1.1에 따라 조사자가 결정한 CR 또는 PR이 있는 환자의 비율로 정의된다. 반응 평가가 누락되거나 없는 환자들은 비반응자로 분류된다. ORR은 확인되지 않은 수술 전 방사선학적 반응을 사용하여 결정된다. RECIST v1.1에서는 초기 반응 후 최소 4주 후에 확증 영상 평가를 완료해야 하지만, CLND 시점으로 인해 이러한 반응들은 후속 영상으로 확인할 수 없다.
ORR은 클로퍼-피어슨(Clopper-Pearson) 방법을 사용하여 각 군에 대해 90% CI로 계산된다. 실험군과 대조군 간의 ORR 차이도 90% CI로 계산된다. CI는 표본 크기에 따라 정확한 방법이나 왈드(Wald)법을 사용하여 추정된다.
코호트 1의 탐색적 효능 평가변수
코호트 1의 탐색적 효능 평가변수는 특정 시점(1, 2, 3 및 5년)의 랜드마크 EFS, 랜드마크 RFS 및 랜드마크 OS이다.
랜드마크 EFS 비율, 랜드마크 RFS 비율 및 랜드마크 OS 비율은 카플란-마이어 방법을 사용하여 각 연구군에 대해 추정되며 90% CI는 그린우드 공식을 사용하여 계산된다.
코호트 2의 일차 효능 평가변수
코호트 2의 일차 효능 평가변수는 표 6에 정의된 ORR이다. ORR은 RECIST v1.1에 따라 조사자가 결정한다. 반응 평가가 누락되거나 없는 환자들은 비반응자로 분류된다.
완전 또는 부분 반응을 보인 환자의 비율인 ORR은 90% CI(클로퍼-피어슨 방법)로 각 군에 대해 계산된다. CI는 표본 크기에 따라 정확한 방법이나 왈드(Wald)법을 사용하여 추정된다.
코호트 2의 이차 효능 평가변수
코호트 2의 이차 효능 평가변수는 표 6에 정의된 바와 같이 PFS, OS, 특정 시점(예를 들어, 6개월)의 OS, 반응 기간(DOR) 및 질환 통제이다. PFS, DOR 및 질환 통제는 RECIST v1.1에 따라 조사자가 결정한다.
DOR은 CR 또는 PR이 있는 효능 평가가 가능한 환자에서 유도된다.
문서화된 질환 진행 또는 사망이 없는 환자의 경우, PFS 및 DOR은 마지막 종양 평가일에 중도절단된다.
OS 분석 당시 생존해 있는 환자는 생존한 것으로 알려진 마지막 일자를 기준으로 중도절단된다.
카플란-마이어 방법은 PFS, OS 및 DOR의 중앙값을 추정하는 데 사용되며, 90% CI는 브룩마이어 및 크롤리 방법을 사용하여 구성된다. 특정 시점의 OS 비율도 카플란-마이어 방법을 사용하여 추정되며, 90% CI는 그린우드(Greenwood)의 분산 추정치를 기반으로 계산된다.
질환 통제율(≥12주 동안 SD 환자의 비율), PR 또는 CR이 각 치료군에 대해 계산되며, 90% CI는 클로퍼-피어슨의 정확한 방법을 사용하여 추정된다.
코호트 2의 탐색적 효능 평가변수
탐색적 효능 평가변수는 iRECIST에 따라 조사자가 결정한, ORR, PFS, DOR 및 질환 통제이다.
ORR, PFS, DOR 및 질환 통제는 위 섹션 "코호트 2의 일차 효능 평가변수" 및 "코호트 2의 이차 효능 평가변수"에 설명된 것과 동일한 방법을 사용하여 분석된다. DOR은 완전 또는 부분 반응이 있는 효능 평가 가능한 환자에서 유도된다.
안전성 분석
이상 반응에 대한 축약 용어들은 국제 의약 용어 동의어(Medical Dictionary for Regulatory Activities thesaurus terms)에 대해 매핑되며, 이상 반응 중증도는 NCI CTCAE v5.0 및 CRS에 대한 ASTCT CRS 합의 등급 척도에 따라 등급분류된다.
안전성은 이상 반응, 실험실 검사 결과의 변화, 활력징후 및 ECG의 변화, 연구 약물에 대한 노출에 관한 요약을 통해 평가된다. 조합 치료에 대한 노출 및 안전성 추적 조사 기간은 치료군별로 요약된다.
모든 이상 반응 축약 용어는 국제 의약 용어 동의어에 대해 매핑된다. 이상 반응 중증도는 NCI CTCAE v5.0에 따라 등급분류되며, CRS의 중증도는 ASTCT 합의 등급(Lee 외, Biol Blood Marrow Transplant. 25: 625-638, 2019)에 따라 조사자에 의해 등급분류 된다. 선행 치료의 1차 투여 당시 또는 그 이후에 발생한 모든 이상 반응, 심각한 이상 반응, 사망을 가져오는 이상 반응, 특별 관심 대상의 이상 반응, 및 연구 치료 중단을 가져오는 이상 반응(즉, 치료로 인한 이상 반응)은 매핑된 용어, 적절한 동의어 수준 및 중증도 등급 별로 요약된다. 중증도가 다양한 반응의 경우, 가장 높은 등급이 요약에 사용된다. 사망 및 사망 원인이 요약되어 있다.
관련 실험실, 활력징후(맥박수, 호흡수, 혈압, 맥박산소측정 및 체온) 및 ECG 데이터가 시간별로 표시되며 적절한 경우 등급이 표시된다. 또한 선택된 실험실 검사 결과의 시프트 테이블은 기준선 및 기준선 이후 최대 중증도 등급을 요약하는 데 사용된다. 활력 징후 및 ECG의 변화가 요약되어 있다.
또한, 코호트 1에서는 처음 12주 동안 등급 ≥3의 면역 관련 이상 반응의 발생률, 특성, 치료 관련 이상 반응으로 인한 수술 지연 비율 및 기간이 치료군별로 요약될 것이다. 연구 치료 관련 이상 반응이 예정된 수술 시점에 충분히 개선되지 않은 경우 CLND는 최대 2주까지 연기될 수 있다.
추가적으로, 수술 합병증은 클라비엥-딘도(Clavien-Dindo) 분류에 따라 채점된다. CLND를 겪은 환자에 대해 모든 등급의 합병증 발생률이 보고되고 점수가 매겨진다.
면역원성 분석
면역원성은 아테졸리주맙 및 기타 선행 치료에 대해 적절하게 평가될 수 있다. 면역원성 분석에는 적어도 한 번의 항-약물 항체(ADA) 평가를 받은 모든 환자가 포함된다. 환자들은 받은 치료에 따라 분류되거나, 연구 중단 이전에 치료를 받지 않은 경우 배정된 치료에 따라 분류된다.
아테졸리주맙의 경우, 기준선(기준선 유병률) 및 약물 투여 후(기준선 이후 발생률)에서 ADA 양성 환자 및 ADA 음성 환자의 수와 비율을 치료군별로 요약할 것이다. 기준선 이후 발생율을 결정할 때, 환자가 기준선에서 ADA 음성이거나 데이터가 누락되었지만 연구 약물 노출 후 ADA 반응을 발생시킨 경우(치료 유도 ADA 반응); 또는 기준선에서 ADA 양성이고 하나 이상의 기준선 이후 샘플의 역가가 기준선 샘플의 역가보다 0.60 역가 단위 이상 큰 경우 (치료 강화 ADA 반응), 환자는 ADA 양성인 것으로 간주된다. 환자가 기준선에서 ADA 음성이거나 데이터가 누락되었고 기준선 이후의 모든 샘플들이 음성인 경우, 또는 기준선에서 ADA 양성이지만 역가가 기준선 샘플의 역가보다 0.60 역가 단위 이상 큰 기준선 이후 샘플들을 갖지 않는 경우 (치료에 영향받지 않음), 환자는 ADA 음성으로 간주된다.
ADA가 검사되는 다른 연구 치료의 경우, 양성 여부는 해당 약물에 대해 이전 연구에서 확립된 표준 방법에 따라 결정된다.
ADA 상태와 안전성, 효능, PK 및 바이오마커 평가변수들 사이의 관계를 분석하고 기술 통계를 통해 보고할 수 있다.
중간 분석
본 연구의 탐색적 특성을 고려할 때, 연구 기간 동안 중간 분석이 수행될 것으로 예상되며, 가장 초기의 중간 분석은 적어도 하나의 실험군이 예비 단계에 등록을 완료하고 환자가 병리학적 반응 평가를 완료한 경우(코호트 1) 또는 적어도 하나의 실험군이 예비 단계 등록을 완료하고 환자가 일차 평가변수 분석(ORR)을 위해 최소 9주 동안 추적 조사된 경우(코호트 2)에 이루어진다. 후원자가 적절하다고 판단하는 경우 추가 중간 분석이 수행될 수 있다. 코호트 1에서는 대조군과 비교한 실험군의 임상 활동성에 대한 중간 분석을 기반으로 추가 등록을 안내하기 위해 사후 확률을 사용할 수 있다. 중간 분석에서 실험군의 활동이 대조군의 활동보다 높은 것으로 나타나면 실험군에 20명의 환자를 추가로 등록할 수 있다(확장 단계).
코호트 2에서는 표준 치료 대비 개선으로 정의된 사전 정의된 ORR 역치와 비교하여 실험군의 임상 활동성에 대한 중간 분석을 기반으로 치료군에 추가 등록을 안내하기 위해 사후 확률을 사용할 수 있다. 예를 들어, 사용 가능한 데이터가 10%의 표준 치료 ORR을 제시하고 10%의 ORR 개선이 임상적으로 의미 있는 변화로 간주되는 경우, 사후 확률 계산에서 ORR 역치는 20%가 된다.
표준 치료에 대한 ORR은 분석 당시 적어도 2차의 선행 치료를 받은 코호트 2의 환자 집단에 대한 동급(in-class) 면역 조절 연구용 및 기타 화합물들에 대한 새로운 내부 및 외부 데이터를 기반으로 한다.
후원자는 관찰된 반응 기간, PFS 및 잠재적인 초기 OS 데이터를 포함한(그러나 이에 제한되지 않음) 사용 가능한 데이터 전체를 기반으로 소정 군의 등록을 확장하기로 결정할 수 있다. 적절한 유익성-위해성 평가의 관점에서 안전성 및 바이오마커 데이터(이러한 결정을 내리는 시점에서 이용 가능)도 고려된다.
실시예 2: 600 mg Q3W 용량 및 일정에 대한 이론적 근거
A. 도입
RO7247669(PD1-LAG3)는 염증이 있는 고형 종양 유형의 치료를 위해 연구 중인 새로운 이중특이성 항체이다. 이는 두 가지 공동-억제 체크포인트 수용체인 PD-1과 LAG-3를 차단하여 T세포를 활성화하는 것을 목표로 한다. RO7247669는 PD-1에 대한 1가의 고친화성 결합과 LAG-3에 대한 1가의 고친화성 결합(PD-1에 대한 것보다 20배 낮음)을 포함하므로, 결합력 매개 선택성을 얻을 수 있게 한다. LAG-3은 다른 T 세포보다 조절 T 세포에서 더 높은 수준으로 발현되며, 단일특이성 항-LAG3 항체에 의한 이의 차단은 이들의 억제 활성을 유해하게 강화시키는 것으로 보고된 바 있다. 그러나 Tregs는 기능 장애 T 세포보다 낮은 수준의 PD-1을 발현하므로 RO7247669 치료에 반응하여 표적화되고 "활성화"될 가능성이 적으며, 이 때 PD-1에 대한 결합은 핸들 역할도 한다. LAG3는 항-PD-1 항체인 니볼루맙과 조합된 항-LAG3 항체 렐라틀리맙이 최근 승인되면서 흑색종의 1차(1L) 치료에서 임상 표적으로 검증되었다.
종양학에 있어서 용량 최적화 및 용량 선택 패러다임은 최근 들어 세포 독성 제제에서 암 면역 요법 및 분자 표적화 제제로의 전환이 필요했다. 등록 시험에 앞서 용량과 일정을 적절하게 특성화할 필요가 있음에도 불구하고, 더 많은 용량이 더 높은 효능을 제공한다는 사고방식이 여전히 존재한다.
억제성 체크포인트 수용체를 차단하는 물질의 약리학적 효과는 면역 세포의 수용체와 결합함으로써 발생한다. 따라서 표적 결합(TE)의 포화는 약리학 포화, 즉, 하류 신호 전달에 대한 최대 효과 대신 사용될 수 있다. 따라서 표적 수용체가 포화된 이후에는 추가적인 약물 투여로 추가적인 약리학적 효과가 나타날 것으로 예상되지는 않는다. 따라서 종양의 표적 포화에 필요한 용량이 권장 2상 용량으로 제안될 수 있다.
B. 방법
i. 임상 연구
RO7247669는 현재 I상 연구 NP41300에서 단일 제제로서 평가되고 있다. 연구 NP41300은 국소 진행성 및/또는 전이성 고형 종양 환자를 대상으로 RO7247669의 안전성/내약성, 약동학(PK), 약력학 및 예비 항-종양 활성을 평가하기 위한 공개 라벨, 다기관, 용량 증량 제I상 연구이다. 이 연구는 두 가지 일정의 용량 증량 군(파트 A)과 종양 특이적 확장 군(파트 B)으로 구성된다. 파트 A는 고형 종양 환자에서 RO7247669의 최대 허용 용량(MTD) 및/또는 확장에 대한 권장 용량(RDE)을 결정하기 위해 파트 A1(2주마다 1회(Q2W) 투여)과 파트 A2(3주마다 1회(Q3W) 투여) 용량 증량 설계로 구성된다. 파트 B는 선택된 고형 종양 적응증이 있는 환자들의 하위집합에서 MTD 및/또는 RDE로 그리고 추후 복용을 위한 기타 관심 용량으로 투여되는 RO7247669의 종양 특이적 확장으로 구성된다. 진행성 및/또는 전이성 고형 종양이 있는 성인 환자들이 상기 프로토콜에 따라 등록되었다.
ii. 임상 약동학
검증된 표적-결합 적격 PK 분석을 사용하여 RO7247669 혈청 농도를 결정했다. RO7247669 PK의 평가를 위해, NP41300 연구에서 사전 지정된 정기적인 시점들에서 환자의 혈청 샘플을 수집했다. 여기에는 최고(주입 종료 후 30분 이내) 및 최저(다음 투여 전 24시간 이내) 샘플과 주기 1 및 5에서의 풍부한 샘플링이 모두 포함되었다.
집단 PK 분석은 비선형 혼합 효과 모델링 접근법을 사용하여 수행되었다. 1-구획 및 2-구획 모델들을 평가한 후, 다양한 잔차 오차(residual error) 구조를 검사했다. 그런 다음 각 PK 매개변수에 대한 개체간 변동성을 검사하고, 간결한 오메가 구조의 개발을 안내하기 위해 무작위 효과 값들 간의 상관관계를 검사하여 모델을 개선했다. 모델 선택은 로그-우도 기준, 적합도 플롯 및 과학적 타당성을 기반으로 했다.
iii. 종양 수용체 점유율 모델링
D1-LAG3의 약리학적 효과는 CD8+ T 세포에 대한 PD1 및 LAG3의 결합에 의해 유도된다. 따라서 CD8 세포에 대한 이들 수용체의 포화는 하류 신호전달에 대한 최대 효과를 위해 대신 사용될 수 있으며; 추가적인 PD1-LAG3은 추가적인 약리학적 효과를 가져올 것으로 예상되지 않는다.
종양 수용체 점유율 모델링이 수행되었다. 목표는 RO7247669 농도 및 용량의 함수로서 종양 내 PD1 및 LAG3 결합을 특성화하는 것이었다. PK 데이터로 표적을 포화시키는 데 필요한 용량을 추정하기 위해, 최소 생리학적 기반 약동학(mPBPK) 모델을 사용했다. 이 모델은 서로 다른 조직/기관을 RO7247669 전신 농도를 설명하기에 충분한 두 가지 유형의 조직으로 단순화하고 종양 내 RO7247669 농도와 PD1 및 LAG3 결합을 설명하는 종양 구획을 포함하므로, 목적에 맞는 접근 방식을 제공한다. 두 개의 종양 하위구획들은 혈관 및 간질 공간을 나타낸다. PD1-LAG3은 종양 혈류량에 따라 종양 혈관 공간에 들어가고 나온다. 종양 내부로 들어가면, PD1-LAG3은 종양 관련 면역 세포의 PD-1 및/또는 LAG3에 결합하거나 표적 매개 약물 배치(TMDD)를 통해 제거되거나 대류 흐름에 의해 제거될 수 있다. RO7247669의 종양 흡수를 설명하기 위해 종양 구획도 모델에 추가되었다. 펨브롤리주맙에 대한 권장 2상 용량을 예측하기 위한 보다 단순한 모델(단 하나의 표적 포함)이 Li 외, Clinical Pharmacology and Therapeutics, 110(1): 200-209, 2021에 의해 이전에 기술된 바 있다(도 3). 추후 무작위 용량 비교 연구를 통해 Li 외,의 문헌에서 제시된 RP2D가 종양 유형 전반에 걸쳐 중추적인 용량으로 확인되었다. PD1-LAG3에 대한 모델에 추가된 추가 LAG3 수용체가 도 4에 도시되어 있다. 집단 PK 모델 매개변수는 표 16에 나타낸다. Li 등의 문헌에 보고된 펨브롤리주맙 모델에 추가된 모델 매개변수들은 표 17에 제공되어 있다.
표 16. 집단 PK 모델 매개변수
CL: 청소율; V1: 중심 용적; Q: 구획간 청소율; V2: 주변 용적; IIV: 개체간 가변성.
표 17. 펨브롤리주맙 모델에 추가된 모델 매개변수
C. 결과
i. 임상적 효능 및 안전성
임상 데이터 마감 시점(2022년 3월 1일) 현재 총 35명의 환자가 6가지 RO7247669 용량 수준을 통해 파트 A1(Q2W)으로 치료를 받았다. 파트 B에서는 총 83명의 환자가 치료를 받았다. 표 18은 NP41300에서 RO7247669를 투여받은 환자의 요약을 제공한다.
50mg에서 2100mg까지 Q2W로 용량을 증량하는 동안 최대 허용 용량(MTD)에 도달하지 않았으며 용량 제한 독성(DLT)도 관찰되지 않았다. RO7247669 50mg을 처음 투여한 후 말초 CD8+ 세포에서 90% 이상의 PD-1 및 LAG3 수용체의 점유율이 관찰되었으며 2100mg까지의 모든 용량에서 포화가 관찰되었다. 환자의 20% 미만에서 RO7247669에 대한 지속적인 ADA의 형성이 관찰되었다. 300mg 이하를 투여받은 일부 ADA 양성 환자에서는 노출 감소가 발생했다. 용량 증량 단계 동안, 600mg 이상의 용량에서 임상 반응이 관찰되었다.
평균 노출은 임상 용량 범위(50 내지 2100mg Q2W)에 걸쳐 용량 비례 방식으로 용량에 따라 증가했다.
표 18. NP41300에서 RO7247669를 투여받은 환자 요약
2022년 3월 1일 현재, 연구 NP41300의 파트 A에서 질환 통제율(DCR)은 51.4%(18/35명의 환자)였으며 객관적 반응률(ORR)은 17.1%(6/35명의 환자)였다. 2100mg Q2W의 RDE를 투여받은 환자들 중에서, 환자 13명 중 7명(53.8%)이 안정한 질환 또는 그 이상의 최적의 반응(DCR 53.8%)을 보였으며 ORR은 30.8%(4/13명의 환자)였다.
이러한 RDE에서 관찰된 확인된 부분 반응(cPR) 외에도, 600mg 용량 수준에서 2개의 cPR이 있었다(ORR 50.0%).
상기 연구의 파트 B에서는 2022년 3월 1일 기준으로 2100mq Q2W의 RDE로 치료받은 연구 환자들에서의 DCR은 48.3%(28/58), ORR은 5.2%(3/58)였다(파트 B1, B2 및 B3). 600mg Q2W로 치료받은 환자(파트 B5)에서, DCR은 40%(4/10), ORR은 10%(1/10)였다. 600mg Q3W로 치료받은 환자들에서, DCR은 28.6%(2/7), ORR은 14.3%(1/7)였다.
2022년 3월 1일 현재, 파트 B1, 체크포인트 억제제(CPI)-경험 흑색종 환자들에서 DCR은 43.8%(14/32), ORR은 6.3%(2/32)였다. 파트 B2의 CPI-경험 NSCLC에서, 환자의 50%가 임상적 이점(9/10 DCR)을 경험했지만 이들 중 누구도 반응을 보이지 않았다. 파트 B3, CPI-경험이 없는 식도 편평 세포 암종(ESCC)에서, DCR은 62.5%, ORR은 12.5%(1/8명의 환자)였다. 바이오마커 코호트에서, DCR은 40%(44/10) 및 28.6%(2/7)인 반면, ORR은 파트 B5 및 파트 B6에서 각각 10%(1/10) 및 14.3%(1명의 부분 반응(PR)/7)이었다.
파트 A1(Q2W 투여)에서, 대다수의 환자(94.3%)가 하나 이상의 이상 반응(AE)을 보고했다. 가장 빈번하게 보고된 AE(최소 20%의 환자에서 발생)는 빈혈(37.1%), 변비(31.4%), 호흡 곤란(28.6%), 피로(25.7%), 무력증, 식욕 감소(각각 22.9%), 설사, 및 발열(각각 20.0%)였다. 전체적으로 환자의 62.9%가 치료 관련 AE를 보고했다. 심각한 이상 반응(SAE) 발생률은 25.7%였으며, 치료 관련 SAE는 6건(17.1%)이었다. 총 6명의 환자가 조사자에 의해 연구 치료와 관련된 것으로 간주되는 SAE를 경험했다. 치료 관련 SAE에는 150mg 코호트에서 혈액 빌리루빈 증가 AE 1건, 600mg 코호트에서 근염 1건 AE, 1200mg 코호트에서 2건의 AE(호흡곤란 1회, 갑상선 기능항진증 1회), 2100 mg 코호트에서 2건의 AE(흉막 삼출 1회 AE 및 빈혈 1회 AE)가 포함된다.
임상 마감일인 2022년 3월 1일 현재, 파트 A1 및 파트 B에서 RO7247669 단독요법을 Q2W 또는 Q3W로 투여받은 고형 종양 환자 118명에 대한 예비 안전성 데이터가 제공되었다. 총 748건의 이상 반응(AE)이 118명의 환자 중 112명(94.9%)에서 보고되었다. 전체적으로, 19명(54.3%)의 환자가 최대 중증도로서 1등급 또는 2등급의 AE를 보고했고, 14명(40.0%)의 환자는 21건의 3등급 AE를 보고했다. 4-5등급 AE는 관찰되지 않았다. 21건의 3등급 AE 중 6건의 3등급 AE가 6명(17.1%)의 환자에서 보고되었으며 연구 치료와 관련된 것으로 간주되었다. 이들 6건의 관련 3등급 AE 중에서 4건의 AE가 심각한 것으로 간주되었다. 도 5와 6은 상기 연구의 용량 증량(파트 A1, Q2W) 부분에서 안전성 평가가능 환자의 이상 반응 개요를 보여주는 표이다.
ii. 임상 약동학
opPK 모델은 Q2W 및 Q3W 투여 요법 모두에 대해 600mg 및 1200mg에 대한 Ctrough를 시뮬레이션하는 데 사용되었다. 도 7에서 보는 바와 같이, 600mg과 1200mg의 Q3W 및 Q2W 이후 최저 농도는 1차 및 3차 투여 이후 중복될 것으로 예측된다.
제한된 데이터 세트로 인해 PD1-LAG3 PopPK 모델에서는 종양 유형을 포함한 공변량 분석이 아직 수행되지 않았다. 그러나 니볼루맙과 펨브롤리주맙의 분석에서는 종양 유형이 약동학에 미치는 영향이 미미한 것으로 보고되었다. 니볼루맙 분석에서 청소율(CL)은 종양 유형, NSCLC, 흑색종 및 RCC 전반에 걸쳐 유사했으며, 이는 PK가 종양 유형과 무관함을 나타낸다. (Bajaj 외, CPT Pharmacometrics Syst Pharmacol, 6(1): 49-57, 2017). 펨브롤리주맙 분석에서 PopPK 모델에는 진행성 흑색종, 비소세포 폐암(NSCLC) 및 기타 고형 종양 유형의 환자 데이터가 포함되었다. NSCLC 환자는 다른 종양 유형에 비해 청소율이 13.9% 증가했다; 그러나 이는 임상적으로 관련이 없었다. (Ahamadi 외, CPT Pharmacometrics Syst Pharmacol, 6(1): 58-66, 2017).
iii. 종양 수용체 결합 모델링
D1 및 LAG3 결합은 Q3W으로 투여된, 0.015 내지 1500mg을 비롯한 광범위한 RO7247669의 용량에 대해 시뮬레이션되었다(도 8). 시뮬레이션 결과는 60mg Q3W에서 PD1과 LAG3이 종양에서 포화될 것으로 예측됨을 보여주며, 60mg에서는 90%의 LAG3 수용체 점유율(RO), 2.37mg Q3W에서는 90%의 PD1 RO이었다. 집단 PK 모델에서 청소율은 이 용량에서 선형이었는데, 이는 표적-매개된 약물 분포(TMDD)가 포화되었음을 시사하며, 이는 종양 수용체 결합 모델 예측과 일치한다.
종양이 공간적으로 이질적이라는 사실과 RO7247669가 다양한 범위의 종양 침투를 가질 것이라는 예측을 설명하기 위해, 상기 모델은 다양한 혈관분포에 대해 시뮬레이션되었으며, 이 때 혈관이 잘 형성되지 않은 부위가 혈관이 잘 형성된 부위보다 25배 낮게 나타났다. 또한, RO7247669 노출에 있어서 대상체간 가변적인 수준이 예상된다: 따라서 600mg Q3W는 종양 흡수 수준에 관계없이 대다수의 환자에서 최소 90%의 LAG3 RO를 보장할 것으로 예측된다.
D. 논의
권장 RO7247669 용량과 600mg Q3W의 일정은 고형 종양에 대한 용량 증량 연구인 NP41003의 임상 및 PK 데이터를 사용하여 추정되었다. 공개된 모델을 기반으로 하고 RO7247669 PopPK 모델과 PD1 및 LAG3 표적의 특성에 대한 데이터를 통합한 정량적 모델을 사용하여 Q3W 요법에서 다양한 임상 용량에 걸쳐 표적 결합을 시뮬레이션했다. 종양의 노출 및 혈관신생 모두에서 대상체간 및 대상체내 가변성을 고려하면, 600mg Q3W는 종양의 CD8 세포에 있는 PD1 및 LAG3 수용체를 모두 포화시키는 것으로 예측되었다. 억제성 체크포인트 수용체를 차단하는 약리학적 효과는 면역 세포의 수용체와 결합함으로써 발생한다; 따라서 표적 결합의 포화는 약리학 포화, 즉, 하류 신호전달에 대한 최대 효과 대신 사용될 수 있다. 따라서 표적 수용체가 포화된 이후에는 추가적인 약물 투여로 추가적인 약리학적 효과가 나타날 것으로 예상되지는 않는다.
이 결론은 NP41300의 임상 데이터에 의해 뒷받침되었으며, 이 때 반응은 600mg Q2W 이상의 용량 코호트에서 관찰되었다. 또한, 600 mg Q2W는 용량 증량 코호트에서 내약성이 우수했다. 600mg Q2W 및 Q3W에 대한 예측된 Ctrough는 중복되었으므로 두 일정 간에 임상적으로 관련된 차이가 있을 것으로 예상되지 않는다. 따라서 추가 조사를 위해 600mg Q3W의 보다 환자 중심적인 일정이 선택되었다.
실시예 3: 이전에 치료받지 않은 절제불가능 또는 전이성 흑색종 환자를 대상으로 RO7247669의 다회 투여에 관한 무작위 배정, 공개 라벨, 다기관, II상 연구
A. 연구 설계
암은 환자에게 생존 혜택을 제공하는 여러 가지 새로운 약물에도 불구하고 전 세계적으로 여전히 사망의 주요 원인이다. 많은 암 적응증은 예후가 좋지 않으며 종양 재발률이 높거나 원격 전이가 발생하기 때문에 가장 진행된 고형 종양의 관리가 여전히 어렵다. 흑색종을 비롯한 다양한 종양 유형에서 현재 이용 가능한 체크포인트 억제제(CPI) 요법들의 효과에도 불구하고, 환자가 결국 초기 반응 후 진행하거나 PD-1/L1 또는 세포독성 T 림프구-관련 항원-4(CTLA-4) 체크포인트 차단에 반응하지 않기 때문에 면역 체크포인트를 표적으로 하는 추가 치료 옵션이 필요하다.
전이성 흑색종에 대한 현재 표준 치료에는 면역체크포인트억제제(CPI)를 단독 또는 조합하여 이용하는 치료, 뿐만 아니라 표적화된 v-Raf 뮤린 육종 바이러스 종양유전자 상동체 B1(BRAF) 및 미토겐 활성화 단백질 키나제(MEK) 요법들이 포함된다. 인터루킨-2(IL-2), 종양 용해성 바이러스 및 인터페론(IFN) 치료는 여전히 하위집합의 환자들에 대한 옵션이다. 전반적으로, 치료 옵션의 발전에도 불구하고 전이성 흑색종 환자는 열악한 장기 임상 결과를 계속하여 경험하고 있는데, 이는 질환의 공격적인 특성과 복잡한 병인을 반영하고 충족되지 않은 지속적인 의학적 요구를 두드러지게 하는 것이다.
항-세포 예정사 단백질 1(PD-1)/림프구 활성화 유전자 3(LAG3) 이중특이성 항체(BsAb)인 RO7247669(PD1-LAG3)는 충족되지 않은 의학적 요구가 많은 암 환자들에서 효과적인 항-종양 면역 반응을 확립 또는 회복시키기 위해 기능 장애가 있는 종양 항원-특이적 T 림프구를 표적하도록 설계되었다. 기능 장애가 있는 종양 특이적 T 림프구 상의 PD-1과 LAG3를 모두 표적으로 함으로써, RO7247669는 효과적인 항-종양 면역 반응을 회복하고 현재 사용 가능한 제제가 제공하는 것보다 더 많은 암 환자에게 생존 혜택을 제공하는 것을 목표로 하고 있다. LAG3와 PD-1의 복합적 차단은 PD-1 단독 차단에 비해 유의미한 독성을 추가하지 않고도 효능을 향상시키고 흑색종 환자를 위한 치료 옵션이 될 수 있는 가능성이 있다.
D-1 및 LAG3의 이중 억제에 대한 임상적 개념 증명은 최근 이전에 치료받지 않은 전이성 또는 절제불가능한 흑색종 환자에서 렐라틀리맙과 니볼루맙의 조합에 의해 제공되었다(Tawbi 외, N Engl J Med, 386(1): 24-34, 2022). 두 가지 면역 체크포인트를 모두 억제하면 PD-1 단독 억제에 비해 무진행 생존(PFS) 양상에서 더 큰 이점을 제공한다.
본 실시예 BP43963에 설명된 연구의 목적은 절제불가능 또는 전이성 흑색종이 있는 참가자를 대상으로 추가 복용을 위한 권장 용량을 선택하기 위해 RO7247669의 두 가지 용량 수준의 효능, 안전성, 약동학(PK) 및 약력학을 평가하는 것이다. 연구의 목적과 평가변수들은 표 19에 요약되어 있다.
표 19. BP43963 연구의 목적과 평가변수
주요 목표는 표 20에 설명된 5가지 속성들을 통한 추정대상모수 프레임워크로 표현된다.
표 20. 추정대상모수
ORR: 객관적 반응률; PFS: 무진행 생존; Q3W: 3주마다; TA: 종양 평가.
i. 전체 설계
BP43963은 전이성 또는 절제불가능 질환에 대한 선행 전신 요법를 받은 적이 없는 절제불가능 또는 전이성 흑색종 참가자를 대상으로 RO7247669의 두 가지 다른 용량 수준의 안전성과 임상 활성을 평가하기 위해 설계된 무작위 배정, 공개 라벨, 글로벌, 다기관 II상 연구이다. 연구 설계의 개요는 도 9에 제공된다.
이 연구에는 동부 종양학 협력 그룹(ECOG) 수행능력 상태 점수가 0 또는 1인 ≥18세의 참가자 약 80명이 등록되었다. 참가자는 1:1 비율로 무작위 배정되어 3주마다(Q3W) 600mg 또는 1200mg Q3W로 RO7247669를 투여받는다. 선행 보조 또는 신보조 CPI 치료(유 대 무) 및 PD-L1의 발현(항체 클론 22C3, SP263 또는 28-8을 사용한 면역조직화학(IHC)을 기반으로 한 ≥1% 대 <1% 발현)을 계층화 인자로 사용한다.
최대 24개월 동안 방사선 촬영 데이터, 생검 결과(이용 가능한 경우) 및 임상 상태의 통합 평가 후 질환 진행으로 인한 허용할 수 없는 독성이나 증상 악화가 없는 경우, 조사자가 평가하여 참가자가 임상적 이점을 경험하는 한 치료를 계속할 수 있다. RECIST v1.1에 따른 질환 진행 기준을 충족하는 참가자는 진행 이후 치료 기준을 모두 충족하는 경우 연구 치료를 계속할 수 있다.
참가자는 주기 1, 1일차(C1D1)를 기준으로 12주차(± 1주)에 1차 종양 평가를 받는다. 후속 종양 평가는 치료 지연과 관계없이 C1D1 일자를 기준으로 최대 48주차까지 9주(± 1주)마다, 그 이후에는 12주(± 1주)마다 수행된다.
반응은 RECIST v1.1에 따라 평가된다. 단일 시점에서의 객관적 반응은 RECIST v1.1에 따라 조사자가 결정한다. RECIST v1.1에 따른 연구 치료 중단 및 질환 진행 후, 생존 추적 조사 정보는 사망, 추적 조사 중단, 연구 종료 또는 무작위 배정 후 최대 24개월(어느 것이든 먼저 발생하는 것)까지 약 3개월마다 전화 통화, 참가자 의료 기록 및/또는 진료소 방문을 통해 수집된다.
연구 중에, RO7247669 PK를 평가하고 RO7247669에 대한 항체의 존재를 검출하기 위해 혈청 샘플을 수집한다. 보관 및 신선한 종양 조직, 혈청, 혈장 및 혈액 샘플을 포함한 참가자 샘플도 바이오마커 평가를 위해 수집된다.
안전성 평가에는 이상 반응(AE)의 발생률, 특성 및 중증도와 상기 연구의 안전성 평가에 중요하다고 간주되는 실험실 이상과 같은 기타 프로토콜별 검사가 포함된다.
연구 기간 및 연구 종료
스크리닝 시점부터 안전성 추적 조사 방문시까지 참가자당 연구 기간은 최대 약 25개월이다(장기 추적 조사(LTFU) 제외).
각 참가자의 연구 기간은 다음과 같다:
●스크리닝: 무작위 배정 전 최대 28일
●치료 기간: 주기 1, 1일차(C1D1) 내지 최대 24개월.
●생존 추적 조사: 선행 치료 마지막 투여 후 90(± 1주)일; 그 후 사망, 추적 조사 중단, 연구 종료 또는 무작위 배정 후 최대 24개월까지 3개월(± 2주) 마다.
연구 종료는 마지막 참가자 마지막 관찰(LPLO)이 발생한 일자로 정의된다. LPLO는 마지막 참가자가 무작위 배정된 후 늦어도 24개월 후에 발생할 것으로 예상된다.
참가자 집단
참가자 집단은 절제불가능 또는 전이성 질환에 대한 선행 전신 항암 치료 경험이 없는 절제불가능 또는 전이성 흑색종을 갖는 여성 및 남성 참가자로 구성된다.
참가자 수
연구 치료에 무작위 배정된 계획된 참가자 수는 80명이므로 약 80명의 참가자가 일차 평가변수 분석을 위해 평가될 수 있다.
병용 약물
예외에 대한 근거가 논의되고 명확하게 문서화되어 있지 않는 한, 일반적으로 흑색종 치료를 위한 병용 약물은 허용되지 않는다, 단, 한이상 반응(AE)을 치료하기 위한 약물은 예외이다.
흑색종에 대한 배경 정보
피부암은 모든 암 중에서 가장 흔하다. 전체 피부암의 1%에 불과한 흑색종은 멜라닌 세포에서 발생하는 피부암 중 가장 공격적이고 위험한 형태이다. 미국 암학회(American Cancer Society)에 따르면, 2022년 미국에서 약 100,000명의 새로운 침습성 흑색종 사례가 진단될 것으로 예상된다. 즉시 진단된 표면 종양의 결과는 좋지만, 전이성 환경에서 흑색종은 5년 생존율이 27%에 달하는 가장 치명적인 암 중 하나이다(Surveillance, Epidemiology, and End Results(SEER) 2021, 미국 암학회 웹페이지에서 확인 가능). 2011년 이전에는, 전이성 흑색종 치료를 위해 승인된 치료법이 제한적이었고 화학요법과 면역요법(IL-2)이 포함되었다. 그 이후로 티로신 키나제 경로를 표적으로 하는 약물, CTLA-4 및 PD-1 수용체를 표적으로 하는 CPI 치료법, 백신을 포함하는 새로운 치료 옵션이 승인되었다.
항-CTLA-4 항체 이필리무맙은 임상 결과에서 상당한 개선을 보인 최초의 CPI였으며 결과적으로 절제불가능 또는 전이성 흑색종에 사용하도록 승인되었다(Hodi 외, N Engl J Med, 363: 711-723, 2010). 이어서, PD-1 수용체(펨브롤리주맙 또는 니볼루맙)에 결합하는 단클론 항체는 개선된 결과와 감소된 독성을 나타냈다(Robert 외, N Engl J Med, 372: 320-330, 2010; Robert 외, N Engl J Med, 372(26): 2521-2532, 2010; Weber 외, Lancet Oncol, 16(4): 375-384, 2015). 결합된 CTLA-4/PD-1 차단은 각 하나의 제제의 활성에 비해 더 높은 반응률과 더 긴 OS를 초래하였다. 그러나 조합 요법은 독성 증가를 동반했다(Wolchok 외, Abstract 9506 ASCO Annual Meeting 2021).
이전에 치료받지 않은 전이성 또는 절제불가능 흑색종을 대상으로 한 2/3상 연구(RELATIVITY-047)의 최근 결과에 따르면 PD-1(니볼루맙을 통해)과 LAG3(렐라틀리맙을 통해)의 복합 차단이 PD-1 단독 억제에 비해 PFS를 개선하는 것으로 나타났다(Tawbi 외, N Engl J Med, 386(1): 24-34, 2022). 이 조합에 대해 관찰된 PFS 이점은 니볼루맙과 이필리무맙 조합의 이점과 비교하여 유사한 것으로 보이지만 더 유리한 안전성 프로파일을 가진다(Tawbi 외, N Engl J Med, 386(1): 24-34, 2022, Wolchok 외, Abstract 9506 ASCO Annual Meeting 2021). 동시에, 렐라틀리맙과 니볼루맙 조합은 니볼루맙 단독요법에 비해 새로운 안전성 신호를 나타내지 않았다.
전이성 흑색종에 대한 현재 표준 치료에는 CPI를 단독 또는 조합하여 이용하는 치료, 뿐만 아니라 표적화된 BRAF 및 MEK 요법들이 포함된다. IL-2, 종양 용해성 바이러스 및 IFN 요법은 여전히 환자들의 일부 하위집합에 대한 옵션이다.
전반적으로, 치료 옵션의 발전에도 불구하고 전이성 흑색종 환자는 열악한 장기 임상 결과를 계속하여 경험하고 있는데, 이는 질환의 공격적인 특성과 복잡한 병인을 반영하고 충족되지 않은 지속적인 의학적 요구를 두드러지게 하는 것이다.
RO7247669에 대한 배경 정보
RO7247669는 두 가지 CPI: PD-1 및 LAG3 각각에 대한 1가 결합을 포함하는 1+1 형식의 새로운 Fc-침묵 IgG1-기반 이중특이성 항체이다. RO7247669는 PD-1과 LAG3을 모두 공동발현하거나, 이 보다 적은 정도로 PD-1 또는 LAG3 하나를 발현하는 종양 미세환경의 T 세포에 우선적으로 결합하도록 설계됐다. 종양 미세환경에서 T 세포에 대한 우선적 결합은 종양 및 주변부(높은 수준의 PD-1을 발현하지 않음)의 조절 T 세포와 같은 다른 LAG3 발현 세포의 표적화를 방지한다. LAG3에 대한 1가 결합은 T 세포 표면에 결합 시 항체(Ab)의 내재화를 감소시킨다. PD-1 BsAb의 추가 특징은 조작된 IgG1-기반 Fc 영역으로서, 이는 LALA P329G 돌연변이 도입에 의해 Fc 감마 수용체에 대한 결합을 방지한다. 이는 펨브롤리주맙 및 니볼루맙과 같은 IgG4 기반 항체에서 관찰된 약물 쉐이빙(drug-shaving) 및 그에 따른 종양 관련 대식세포 내성 메커니즘을 방지한다(Arlauckas 외, Sci Transl Med, 9(389): eaal3604, 2017).
RO7247669는 현재 진행 중인 다음과 같은 4가지 임상 연구에서 평가되고 있다:
1. 2차 흑색종 확장 코호트를 포함하여 진행성 및/또는 전이성 고형 종양이 있는 참가자를 대상으로 한 인간 대상 I상 연구(연구 NP41300);
2. 진행성 또는 전이성 식도 편평 세포 암종을 갖는 2차 참가자를 대상으로 한 II상 연구(연구 BP42772)
3. 베바시주맙과 병용하여 진행성 간세포암종을 갖는 1차 참가자를 대상으로 한 Ib/II상 연구(연구 GO42216); 그리고
4. 티라골루맙 유무에 관계없이 신보조 절제 가능한 III기 및 이후 회차의 IV기 흑색종 참가자를 대상으로 한 Ib/II상 연구(연구 BO43328).
모든 연구에서 RO7247669는 검사된 최대 용량(2100mg Q2W)까지 내약성이 좋았으며 RO7247669와 관련된 구체적인 안전성 문제는 확인되지 않았다. 연구 NP41300에서 용량 증가 부분 동안 용량 제한 독성(DLT)이 관찰되지 않았고 최대 허용 용량(MTD)도 확인되지 않았다.
연구 BP42772는 맹검 연구이며, 연구 GO42216 및 BO43328에 대한 모집은 최근에야 시작되었다. 관련 효능 데이터는 현재 연구 NP41300에서 이용 가능하다. 데이터 마감일인 2022년 1월 14일 현재, 연구의 용량 증량에서 질환 통제율(DCR)은 51%(평가 가능한 참가자 35명 중 18명)였으며 객관적 반응률(ORR)은 17%(참가자 35명 중 6명)였다. 다양한 종양 유형에 걸쳐 CPI 경험이 없는 참가자와 CPI 경험이 있는 참가자 모두에서 2주마다 600mg(Q2W) 및 2100mg Q2W에서 반응이 관찰되었다. < 600mg의 용량(N = 12)에서는 반응자가 없었지만, ≥ 600mg Q2W의 용량에서는 7/23명의 반응자가 있었는데, 이는 용량-반응 관계를 나타낸다. ≥ 600mg Q2W 용량에서는 노출과 최적의 전체 반응(BOR) 사이에 뚜렷한 관계가 관찰되지 않았다. 진행성 질환 환자의 평균 Cavess(정상 상태에서의 평균 농도)는 600 및 2100 mg 코호트 내에서 부분 반응을 보인 환자와 유사했다.
2022년 1월 14일 현재, 28명의 CPI 경험이 있는 포도막(참가자 28명 중 9명)과 비-포도막(28명 중 19명) PDL-1 및 LAG3 전체 흑색종 참가자가 NP41300의 확장 코호트에서 2100mg Q2W의 효능에 대해 평가되었다. 비-포도막 흑색종 참가자들에서, ORR은 21%(19명 중 4명)였고 DCR은 58%(19명 중 11명)였다.
이전에 펨브롤리주맙을 투여받은 참가자 2명, 니볼루맙을 투여받은 참가자 1명, 니볼루맙과 이필리무맙의 조합 치료를 받은 참가자 1명에게서 반응이 관찰되었다. 아직 등록이 진행 중이다.
유익성-위해성 평가
RO7247669에 대한 제한된 임상 경험에도 불구하고, 항-PD-1/PD-L1 단클론 항체의 임상 효능 및 안전성 프로파일은 잘 특성화되고 확립되어 있다. 최근 몇 년 동안 세 가지 CPI, 즉, 펨브롤리주맙, 니볼루맙 및 이필리무맙이 절제불가능 또는 전이성 흑색종 치료용으로 식품의약청(FDA) 및 기타 보건 당국의 승인을 받았다.진행성 흑색종 환자의 전체 생존(OS) 중앙값은 니볼루맙과 이필리무맙 조합 요법의 경우 72.1개월, 니볼루맙 단독 요법의 경우 36.9개월, 이필리무맙 단독 요법의 경우 19.9개월인 것으로 보고되었다(Wolchok 외, Abstract 9506 ASCO Annual Meeting 2021).
차세대 병용요법은 진행성 흑색종 환자에서 항-PD-1과 항-CTLA-4 조합에서 나타난 바와 같이 임상적으로 의미 있는 개선된 안전성 프로파일을 통해 더 높은 반응률, 더 심도 있는 반응, 더 길거나 유사한 OS를 초개할 가능성이 있다. 따라서, 단일특이성 PD-1 지시 항체와 비교하여, 주로 PD-1 및 LAG3-매개 면역 내성 메커니즘 둘 모두를 표적으로 하는 것으로부터 더 나은 효능이 나올 것으로 기대할 수 있다.
상기 논의한 바와 같이, PD-1 및 LAG3의 이중 억제에 대한 임상적 개념 증명은 최근 이전에 치료받지 않은 전이성 또는 절제불가능한 흑색종 환자에서 렐라틀리맙과 니볼루맙의 조합에 의해 제공되었다(Tawbi 외, N Engl J Med, 386(1): 24-34, 2022). 두 가지 면역 체크포인트를 모두 억제하면 PD-1 단독 억제에 비해 PFS 양상에서 더 큰 이점을 제공한다. 동시에, 렐라틀리맙과 니볼루맙 조합요법은 새로운 안전성 신호를 나타내지 않았으며, 후향적으로 니볼루맙과 이필리무맙 조합요법과 비교했을 때 유의하게 향상된 안전성 프로파일을 보였다(Tawbi 외, N Engl J Med, 386(1): 24-34, 2022, Wolchok 외, Abstract 9506 ASCO 연례 회의 2021).
상기 논의한 바와 같이, RO7247669는 니볼루맙과 이필리무맙의 조합 치료를 포함한 CPI 요법에 대한 내성이 입증된 흑색종 및 기타 종양 유형의 환자에서 반응을 유도할 수 있는 것으로 나타났다. 특히, 연구 NP41300에서 관찰된 비-포도막 흑색종 참가자에서 관찰된 21%의 ORR은 비슷한 환자 모집단에서 렐라틀리맙과 니볼루맙 조합에 대한 11.5%의 과잉 반응률과 잘 비교된다(Ascierto 외, Ann Oncol, v611-v612, 2017).
RO7247669는 최대 2100mg Q2W의 용량까지 내약성이 있었다; AE는 관리 가능했으며 안전성 프로파일은 승인된 PD-1 지시 항체뿐만 아니라 다양한 고형 종양 적응증 전반에 걸쳐 일관된 것으로 관찰되었다. 요약하면, RO7247669는 유사한 안전성 프로파일을 갖고 있는 니볼루맙 단독요법에 비해 혜택이 증가할 가능성이 있다.
예비 효능과 관리 가능한 안전성 프로파일은 물론 이중 체크포인트 억제 작용 메커니즘으로 인한 결과 개선 가능성을 고려할 때 RO7247669를 사용한 치료는 흑색종과 같은 고형 종양에 대한 치료 가능성이 있다. 위의 고려 사항, 현재 이용 가능한 데이터, 계획된 안전성 모니터링 및 관리 지침을 기반으로 할 때, 상기 제안된 연구 치료법은 본 연구에 포함된 집단에 대해 적절한 유익성/위험성 프로파일을 갖는 것으로 간주된다.
B. 이론적 근거
연구 집단의 이론적 근거
본 연구에는 절제불가능 또는 전이성 흑색종을 가지며 절제불가능 또는 전이성 질환에 대한 선행 전신 항암 요법을 받은 적이 없는 참가자가 등록된다. 단일특이성 항-PD-1 항체와 조합된 단일특이성 항-LAG3 항체의 임상적 검증이 최근 이러한 요법 환경에서 이루어졌다(Tawbi 외, N Engl J Med, 386(1): 24-34, 2022). 연구 NP41300에서 진행 중인 CPI 경험이 있는 흑색종 코호트의 새로운 효능 데이터와 함께, RO7247669를 사용한 치료가 이러한 적응증에 임상적 이점을 제공할 것으로 예상된다.
1차 흑색종은 또한 화학요법을 사용하지 않는 CPI 치료가 이 집단의 현재 표준 치료라는 점을 고려하여 단일요법 RO7247669의 두 가지 다른 용량 수준을 검사할 수 있기 때문에 선택되었다. 결과적으로, 조합 짝들의 교란 효과 가능성 없이 용량 의존적 효과를 평가하는 것이 가능하다.
본 연구의 질환별 적격성 기준은 RELATIVITY-047에서 사용된 기준과 유사하다. 니볼루맙 단독 치료와 비교하여 렐라틀리맙과 니볼루맙 조합 치료의 이점은 종양 PD-L1 및 LAG3 발현과 무관하게 환자의 BRAF 돌연변이 상태와 관계없이 관찰되었다. 이러한 이유로 참가자는 종양 PD-L1 및 LAG3와 무관하게 본 연구에 적격이다.
발현 및 BRAF 돌연변이 상태. 현재 가이드라인에서는 BRAF 및 MEK 억제제로 치료하기 전에 면역치료를 고려하는 것이 치료 중단 후에도 매우 장기적인 질환 통제를 제공할 수 있기 때문에 BRAF-돌연변이된 흑색종 참가자를 포함시키는 것도 타당하다고 간주된다(Keilholz 외, Ann Oncol, 31(11): 1435-1448, 2020).
일차 평가변수에 대한 이론적 근거
OS가 임상적 이점 입증을 위한 최적 표준으로 남아 있지만, 이 평가변수를 측정하려면 다른 평가변수보다 더 많은 환자 수와 더 긴 추적 조사 시간이 필요하며 후속 요법으로 인해 혼란을 겪을 수 있다(Pazdur 외, Oncologist, 13 Suppl. 2: 19-21, 2008). 대조적으로,
FS(랜드마크 PFS 포함)는 과거 1차 흑색종의 치료 이점을 차별화할 수 있었던 조기 판독값이다(Wolchok 외, Abstract 9506 ASCO Annual Meeting 2021). 결과적으로, PFS는 허용 가능한 규제 평가변수로 인식되었다. 예를 들어, 다브라페닙과 트라메티닙은 단독 요법으로 그리고 조합으로 일차 평가변수가 PFS인 제3상 임상 시험을 기반으로 절제불가능 또는 전이성 흑색종 치료용으로 FDA의 승인을 받았다(Flaherty 외, N Engl J Med, 367: 107-114, 2012; Hauschild 외, Lancet, 380: 358-365, 2012; Long 외, ASCO Annual Meeting Abstracts; 32:9011, 2014).
PFS는 또한 RELATIVITY-047 시험의 일차 평가변수였으며, 치료 6개월 후에 이미 이점이 입증되었다(Tawbi 외, N Engl J Med, 386(1): 24-34, 2022).
OS와 비교하여, PFS는 연구 후 치료 요법에 의해 혼동되지 않는다. 따라서, 절제불가능 또는 전이성 흑색종 환자에서 임상적으로 활성인 치료 옵션들(예를 들어, 니볼루맙, 이필리무맙, 베무라페닙, 다브라페닙, 트라메티닙)이 점점 더 많이 사용되고 있고 현재 연구에서 질환 진행 후 이러한 치료 옵션을 사용하면 OS 평가변수에 혼란을 줄 수 있기 때문에 일부 환자군에서 PFS를 우선적으로 고려하고 있다.
이러한 이유로 6개월에서의 PFS가 효능에 대한 일차 평가변수로 선택되었다.
계층화 인자들에 대한 이론적 근거
치료군 간 불균형 가능성을 최소화하기 위해 임상시험에서는 다음과 같은 두 가지 계층화 인자를 활용했다: 선행 보조 또는 신보조 체크포인트 억제제 치료(유 vs. 무) 및 PD-L1 발현(항체 클론 22C3, SP263 또는 28-8을 사용하는 IHC를 기반으로 한 ≥ 1% 종양 세포 표면 발현 대 < 1% 종양 세포 표면 발현).
선행 보조 또는 신보조 CPI 치료(유 vs. 무)가 선택되었는데, 이는 이러한 CPI 치료를 사용하면 고위험 II/III기 흑색종을 완전히 절제한 후 무재발 생존율(RFS)이 향상되었기 때문이다. CPI를 이용한 보조 및 신보조 치료는 흑색종 치료의 표준 치료의 일부이거나 일부가 될 것이다. 이러한 이유로, 마지막 투여와 재발 일자 사이에 최소 6개월 동안 보조 또는 신보조 항-PD-1 또는 항-CTLA-4 요법을 완료한 참가자는 연구에 참여할 수 있다. 절제불가능하거나 전이성 질환에서 항-PD-1 및 항-LAG3 조합 요법에 대한 반응성에 대한 선행 보조 또는 신보조 항-PD-1 또는 항-CTLA-4 요법의 효과가 아직 알려지지 않았기 때문에 현재 시험의 참가자는 그에 따라 계층화되었다.
D-L1 발현과 관련하여, 니볼루맙 단독요법을 사용한 이전의 임상 연구에서는 PD-L1 양성 종양 환자가 불확정 발현 환자보다 더 높은 반응률을 가질 수 있음을 보여주었다(Robert 외, N Engl J Med, 372: 320-330, 2010). 마찬가지로, 렐라틀리맙과 니볼루맙 조합요법으로 치료받은 환자의 PFS 중앙값은 PD-L1 발현이 1% 이상인 환자에서는 12.6개월로 보고된 반면, PD-L1 발현이 1% 미만인 환자에서 렐라틀리맙과 니볼루맙 조합요법에 대한 PFS 중앙값은 6.4개월인 것으로 보고되었다(Tawbi 외, N Engl J Med, 386(1): 24-34, 2022).
바이오마커 평가의 이론적 근거
이 연구의 주요 가설은 PD-1-LAG3을 통한 추가적인 체크포인트 차단이 고갈된 T 세포를 다시 활성화하고 종양 미세 환경에서 CD8 T 세포 침윤 및 증식을 증가시킨다는 것이다.
따라서, 치료 유발 바이오마커 탐색은 종양 미세환경 및 말초 혈액 모두에서 PD-1-LAG3과 관련된 기준선으로부터의 변화에 중점을 둘 것이다. 면역 세포 프로파일의 역학적 변화를 평가하기 위해 말초 혈액의 연속 혈액 샘플링도 수행되며, 이 프로파일은 추후 RO7247669 치료와의 연관성에 관해 조사될 것이다.
RO7247669에 대한 반응의 예측 마커들을 탐색하기 위해 초기 가설은 반응과 기준선 PD-L1, CD8, LAG3 및/또는 PD-1 발현의 연관성에 중점을 둔다. 다른 탐색적 바이오마커에는 말초 혈액 및 종양 미세환경 또는 기타 가용성 마커(예를 들어, 혈액 종양 돌연변이 부하, 순환 종양 데옥시리보핵산(ctDNA) 등)의 기준선 면역 세포 하위 집합/효과기 유전자 시그니처 평가가 포함된다. 초기 데이터가 이러한 측정에 대한 강력한 과학적 근거로 이어지는 경우 추가 바이오마커를 측정할 수 있다.
용량에 대한 정당성
RO7247669는 600mg 또는 1200mg의 용량으로 Q3W(각 21일 주기의 1일차) 투여된다.
실시예 2에서 논의된 바와 같이, 연구 NP41300에서 RO7247669는 내약성이 있었으며 RO7247669와 관련된 새로운 안전성 문제는 확인되지 않았다. 최고 용량인 2100 mg Q2W까지 DLT는 관찰되지 않았으며 MTD도 확인되지 않았다.
●방사선 사진 PR로 측정한 항-종양 활성은 600mg 및 2100mg Q2W에서 관찰되었다(연구 NP41300).
●RO7247669의 PK는 연구 NP41300에서 검사된 용량 범위 내에서 용량 선형적이었다.
●종양내 RO7247669 농도를 설명하기 위해 최소 생리학적 기반 약동학 모델을 사용하여 종양에서 PD-1 및 LAG3 표적 결합의 추가 모델링 및 RO7247669의 결합 특성을 특징으로 하는 표적 매개된 약물 분포의 추정이 수행되었다. 600 mg Q3W RO7247669는 PK의 참가자 간 가변성과 RO7247669 종양 내 분포의 공간적 이질성을 모두 고려하여 대다수의 참가자에서 치료 기간 전체에 걸쳐 종양 부위에서 > 90%의 PD-1 및 LAG3 표적 결합을 가져올 것으로 추정되었다. 유사한 접근법을 사용하여 펨브롤리주맙에 대해 핵심 용량으로 권장되는 II상 용량을 확인했다(Li 외, Clinical Pharmacology and Therapeutics, 110(1): 200-209, 2021).
●종양 수용체 점유율 시뮬레이션을 600mg Q2W 및 600mg Q3W에 대해 수행하였으며 두 요법 모두 치료 기간 동안 > 90%의 PD-1 및 LAG3 수용체 점유율을 가져왔으므로, 참가자의 치료 부담을 최소화하기 위해 덜 빈번한 Q3W 요법을 선택했다.
●RO7247669의 면역원성과 항-약물 항체(ADA) 복용이 노출 및 효능에 미치는 영향이 아직 완전히 이해된 것은 아니다. 그러나 연구 NP41300에서는 ≤ 300mg의 용량에서 관찰된 노출에 대한 ADA 매개 영향에 대한 증거가 있다. 현재까지 600mg에서는 ADA가 관찰되지 않았으며, 이는 600mg 노출에 대한 잠재적인 ADA 매개 영향에 대한 불확실성을 남긴다.
현재까지 1200mg과 2100mg의 ADA를 복용한 참가자의 경우 노출에 미치는 영향이 관찰되지 않았으므로, 1200mg은 순환하는 ADA를 포화시켜 노출에 미치는 영향을 최소화할 것으로 예상된다.
따라서, 이 연구 참가자에게 투여하기 위한 600mg 및 1200mg Q3W의 용량과 요법이 선택되었다.
다. 포함 및 제외 기준
참가자 집단은 절제불가능 또는 전이성 질환에 대한 선행 전신 항암 요법이 없고, 주어진 포함 기준을 모두 충족하고 제외 기준은 전혀 충족하지 않는 절제불가능 또는 전이성 흑색종 진단을 받은 참가자로 구성된다.
포함 기준
참가자는 다음 기준이 모두 적용되는 경우에만 연구에 포함될 수 있다:
일반
1. 서면 동의서를 제공하고 국제 조화 협의회(ICH) 및 현지 규정에 따라 연구 프로토콜을 준수할 수 있고 그럴 의향이 있음.
2. 연령 ≥ 18세
참가자 유형 및 질환 특성
3. 참가자는 AJCC 병기 결정 시스템(절제불가능 III기 또는 IV기)에 따라 조직학적으로 절제불가능 또는 전이성 흑색종이 확인되어야 한다.
4. RECIST v1.1에 따라 방사선학적으로 측정 가능한 질환. 이전에 방사선 조사를 받았던 병변들은 방사선 치료 후 명확하게 진행되지 않는 한 표적 병변으로 간주되어서는 안 된다.
5. ECOG 수행능력 상태 점수 0-1.
6. 참가자는 공지된 BRAF V600 돌연변이 상태를 가져야 한다.
7. 참가자는 공지된 PD-L1 상태를 가져야 한다.
●PD-L1 발현은 항체 클론 22C3, SP263 또는 28-8을 사용하여 승인된 IHC 분석을 사용하여 임의의 강도의 원형질막 PD-L1 염색을 나타내는 종양 세포의 백분율로 정의된다.
●PD-L1 발현은 등록 전 3개월 이내에 획득한 조직 샘플에서 결정되어야 하며 획득 시점과 PD-L1 검사 사이에 중간 치료가 없어야 한다.
8. 바이오마커 분석을 위해 절제불가능 또는 전이성 질환 부위의 종양 조직이 제공되어야 한다.
9. 참가자는 치료 의사의 임상 판단에 따라 생검 가능한 비표적 종양 병변이 하나 이상 있어야 하며 치료 중 생검을 의무적으로 받는 것에 동의해야 한다.
의학적 조건
10. 적절한 심혈관 기능.
11. 탈모증(모든 등급), 백반증, 대체 요법으로 관리된 내분비병증 및 2등급 말초 신경병증을 제외하고 선행 방사선 요법, 화학 요법 또는 수술 절차로 인한 AE는 등급 ≤ 1로 해결되어야 한다.
12. 적절한 혈액학적 기능.
13. 적절한 간 기능.
14. 적절한 신장 기능.
15. 다음과 같이 수득된 추가적인 적절한 실험실 매개변수:
●혈청 알부민 ≥ 25 g/L (2.5 g/dL)
●치료용 항응고제를 투여받지 않는 참가자의 경우: 프로트롬빈 시간(PT) 및 활성화된 부분 트롬보플라스틴 시간 ≤ 1.5 x ULN
●치료용 항응고제를 투여받는 참가자의 경우: 안정한 항응고제 요법.
피임
16. 남성 및/또는 여성 참가자:
피임 및 금욕 요건은 배아가 선행 치료에 노출되는 것을 방지하기 위한 것이다. 남성 및/또는 여성 등록 적격성에 대한 금욕의 신뢰성은 임상 연구 기간 및 참가자가 선호하는 일반적인 생활 방식과 관련하여 평가되어야 한다. 주기적 금욕(예를 들면, 일정표, 배란, 증상체온, 또는 배란후 방법) 및 철회는 허용가능한 피임 방법이 아니다.
●여성 참가자: 여성 참가자는 임신 중이 아니고 모유 수유 중이 아니며 다음 조건 중 하나 이상에 해당하는 경우 참가할 수 있다:
●가임 여성(WOCBP)이 아님.
●다음과 같은 WOCBP:
●치료 기간 동안 그리고 연구 약물의 마지막 투여 후 적어도 4주 동안 금욕을 유지(이성간 성관계를 자제)하는 것 또는 실패율이 연간 < 1%인 피임 방법을 사용하는 것에 동의.
●여성은 이러한 동일한 기간 동안 난자를 기증하는 것을 자제해야 한다.
●무작위 배정 전 7일 이내에 임신 검사(혈액) 음성.
●남성 참가자: 치료 기간 동안 및 연구 약물 마지막 투여 후 적어도 4개월 동안 다음에 동의:
●배아 노출을 피하기 위해 금욕을 유지(이성간 성관계를 자제)하거나 WOCBP 또는 임신한 여성 파트너와 함께 콘돔과 같은 피임 수단을 사용할 것.
●정자 기증 금지.
제외 기준
다음 기준 중 하나라도 해당되는 경우 참가자는 연구에서 제외된다:
일반
1. 임신, 수유 또는 모유 수유.
2. 차이니즈 햄스터 난소 세포 생성물 또는 기타 재조합 인간 또는 인간화 항체에 대한 과민증을 포함하는(그러나 이에 제한되지는 않음), RO7247669의 구성성분들에 대한 공지된 과민증.
참가자 유형 및 질환 특성
3. 참가자는 안구 흑색종이 없어야 한다.
의학적 조건
4. 증상이 있는 중추신경계(CNS) 전이. 이전에 뇌 전이 치료를 받은 참가자는 다음과 같은 조건으로 참여할 수 있다:
●안정적임(무작위 배정 전 적어도 28일 동안 컴퓨터 단층촬영(CT) 또는 자기공명영상(MRI) 상으로 진행의 증거가 없음).
●무작위 배정 전 적어도 28일 동안 뇌 전이가 새로 발생하거나 확대되었다는 증거가 없어야 함.
●무작위 배정 전 최소 28일 동안 전신 스테로이드 치료를 받지 않았음.
5. 수술 및/또는 방사선으로 확실하게 치료되지 않았거나 무작위 배정 전 14일 이상 동안 질환이 임상적으로 안정되었다는 증거가 없는 척수 압박.
6. 활동성 암종성 수막염/연수막 질환 또는 이의 병력.
7. 무작위 배정 전 지난 28일 동안 스테로이드 또는 효소 유도 항경련제가 필요한 경우 무증상 CNS 원발성 종양 또는 전이.
8. 통제되지 않는 종양 관련 통증. 진통제가 필요한 참가자는 연구 시작 시 안정적인 요법 중에 있어야 한다.
9. 활동성 2차 악성 종양이 있는 참가자. 동시 악성종양 예외에는 완치적으로 치료된 자궁경부 상피내암종, 예후가 좋은 유방 상피내암종, 기저세포 또는 편평세포 피부암, 또는 저등급, 초기 단계의 국소 전립선암 및 최소 2년 동안 관해 상태에 있었던 이전에 치료받은 조기 비혈액학적 악성종양.
10. 당뇨병, 관련 폐질환 병력, 알려진 자가면역 질환 또는 면역 결핍증, 진행 중인 섬유증(예를 들어, 피부경화증, 폐섬유증, 폐기종, 신경섬유종증, 손바닥/발바닥 섬유종증 등).
11. 사전 동의 전 1년 동안 뇌염, 수막염 또는 통제되지 않는 발작.
12. 무작위 배정 전 6개월 이내에 다음 중 하나를 포함하는 유의한 심혈관/뇌혈관 질환:
●고혈압 위기/뇌병증.
●불안정 협심증.
●일과성 허혈성 발작/뇌졸중.
●울혈성 심부전증.
●치료가 필요한 심각한 심장 부정맥(심방 세동, 발작성 심실상 빈맥은 예외).
●혈전색전증 병력(예를 들어, 심근경색, 뇌졸중 또는 폐색전증)
13. 무작위 배정 전 28일 이내에 활성 또는 통제되지 않는 것으로 알려진 박테리아, 바이러스, 진균, 마이코박테리아(결핵 및 일반적인 마이코박테리아 질환을 포함하되 이에 국한되지 않음), 기생충 또는 기타 감염(손발톱바닥의 진균 감염 제외) 또는 IV 항생제 치료가 필요한 주요 감염 사례 또는 입원(종양 발열의 경우를 제외하고 항생제 치료 과정 완료와 관련).
14. 알코올성 간염, 간경변, 유전성 간질환을 비롯한 임상적으로 중요한 공지된 간 질환.
15. 무작위 배정 전 28일 이내에 대수술 절차 또는 중대한 외상성 손상(생검 제외), 또는 연구 과정 동안 대수술이 필요할 것으로 예상되는 경우.
16. 연구용 약물의 사용을 금하거나 결과 해석에 영향을 미칠 수 있거나 환자를 치료 합병증으로 인한 고위험에 빠뜨릴 수 있는 질환 또는 병태에 대한 합리적인 의심을 제공하는 기타 질환, 대사 기능장애, 신체 검사 소견 또는 임상 실험실 소견.
17. 사전 동의를 방해하는 치매 또는 정신 상태의 변화.
18. 통제되지 않는 흉막삼출(유치 카테터(예를 들어, PLEURX®)를 사용하는 참가자 제외), 심낭삼출 또는 반복적인 배액 절차가 필요한 복수(월 1회 이상 발생할 것으로 예상됨).
19. 자가면역 질환 또는 면역 결핍의 활성 또는 병력, 다음과 같은 예외를 제외:
●자가면역 매개 갑상선 기능 저하증 또는 내분비병증 병력이 있고 갑상선 대체 호르몬이나 적절한 대체 요법을 꾸준히 받고 있는 참가자는 연구에 적격이다.
●인슐린 요법을 받고 있는 통제된 제1형 당뇨병이 있는 참가자들은 연구에 적격이다.
● 습진, 건선, 만성 단순 태선 또는 피부과적 징후만 있는 백반증을 갖는 참가자들(예를 들면, 건선성 관절염 참가자는 제외)는 아래의 조건이 모두 충족되는 경우 연구에 적격이다:
●발진은 체표면적의 < 10%를 차지해야 한다.
●질환은 기준선에서 잘 통제되며, 저역가 국소 코르티코스테로이드만 필요하다.
●지난 12개월 이내에 소랄렌 + 자외선 A 방사선, 메토트렉세이트, 레티노이드, 생물학적 제제, 경구 칼시뉴린 억제제, 또는 고역가 또는 경구 코르티코스테로이드를 필요로 하는 기저 조건의 급성 악화가 발생하지 않았음.
20. 스크리닝 시 인간 면역결핍 바이러스(HIV) 검사 양성.
21. 스크리닝 시 B형 간염 표면 항원(HBsAg) 검사 양성 또는 B형 간염 핵심 항체(HBcAb) 검사 양성. 스크리닝 시 HBsAg 또는 총 HBcAb 검사 양성이고 이어서 B형 간염 바이러스(HBV) 디옥시리보핵산(DNA) 검사 음성인 참가자는 적격이다.
22. 스크리닝시 C형 간염 바이러스(HCV) 항체 검사 양성. 스크리닝 시 HCV 항체 검사 양성이고 이어서 HCV 리보핵산(RNA) 검사 음성인 참가자는 적격이다.
선행/병용 요법
23. 절제불가능 또는 전이성 흑색종에 대한 선행 전신 항암 치료.
24. CPI를 포함한 면역조절제(예를 들어, 항-PD-L1/PD-1 및 항-CTLA-4)를 사용한 선행 항암 요법. 모든 관련 AE가 기준선으로 회복되거나 안정화된 경우 다음과 같은 선행 보조 또는 신보조 흑색종 요법들이 허용된다:
●마지막 투여와 재발 일자 사이에 적어도 6개월이 소요되는 항-PD-1 및/또는 항-CTLA-4 기반 요법. (신)보조 치료 중 또는 완료 후 6개월 이내에 재발한 참가자는 적격이 아니다.
●무작위 배정 전 적어도 6주 동안 마지막 용량을 사용한 IFN 요법.
25. 항-LAG3 요법으로 선행 치료.
26. 선행 면역 요법(예를 들어, 항-CTLA-4 또는 항-PD-1/PD-L1 치료 또는 T 세포 공동 자극 또는 면역 체크포인트 경로를 특이적으로 표적하는 기타 항체 또는 약물)과 관련된 생명을 위협하는 독성의 병력, 표준 치료(예를 들어, 부신 위기 후 호르몬 대체요법)로 재발할 가능성이 낮은 경우 제외.
27. 무작위 배정 전 28일 이내에 생백신을 접종하거나, 연구 중에 약독화 생백신이 필요할 것으로 예상되는 경우.
28. 무작위 배정 전 14일 이내에 치료용 경구 또는 IV 항생제로 치료.
29. 무작위 배정 전 < 28일 또는 5 약물 반감기(둘 중 더 짧은 기간) 이내에 다른 연구용 약물(현재 규제 당국이 승인한 적응증이 없는 치료로 정의됨)을 사용한 동시 요법.
30. 무작위 배정 전 < 5 반감기 또는 28일(둘 중 더 짧은 기간)에 면역조절제 및 면역억제제/약물로 치료한 경우, 단, 다음은 예외:
●흡입용 코르티코스테로이드와 미네랄코르티코이드(예를 들어, 플루드로코르티손)의 사용은 허용된다.
●급성 및/또는 저용량 전신 면역억제 약물(예를 들어, 메스꺼움에 대한 덱사메타손의 제한된 사용 또는 프레드니손 또는 동일한 용량의 코르티코스테로이드의 ≤ 10mg/일의 만성 사용)를 투여받은 참가자는 허용된다.
31. 정기적인 면역억제 요법(예를 들어, 장기 이식, 만성 류마티스 질환).
32. 제한된 완화 방사선 요법을 제외하고 RO7247669로 치료 시작 전 마지막 28일 이내에 방사선 요법은 허용되지 않는다.
33. 키메라 항원 수용체 T세포(CAR-T) 요법과 같은 입양 세포 요법을 사용한 선행 치료.
D. 선행 치료
표 21에는 투여된 치료제가 요약되어 있다.
표 21. 투여된 치료제 요약
IMP = 연구용 의약품; NIMP = 비 연구용 의약품
RO7247669 는 정맥내로(IV) 투여된다. 투여하는 동안 주입 세트와 함께 0.2μm 또는 0.22μm 인라인 필터를 사용해야 한다.
RO7247669의 초기 용량은 60±10분(주입 관련 증상을 경험하는 참가자의 경우 주입이 느려지거나 중단될 수 있음)에 걸쳐 투여되고, 이후 60분의 관찰 기간이 이어진다. 60분 주입이 주입 관련 AE 없이 내약성이 있는 경우, 모든 후속 주입은 30 ± 10분에 걸쳐 실시된 다음 30분 관찰 기간이 이어질 수 있다.
사전투약
RO7247669의 최초 투여 이전의 사전투약은 예정되지 않는다.
이전의 주입에서 2등급 주입 관련 반응(IRR)을 경험한 참가자는 후속 주입을 위해 사전투약을 받아야 한다. 향후 주기에 대한 사전투약 요법은 참가자가 현재의 주입으로 2등급 이상의 IRR 사건을 경험하지 않는 경우에는 줄일 수 있다.
허용된 요법
참가자는 연구 기간 동안 다음 요법을 사용할 수 있다:
●연간 실패율 < 1%인 경구 피임약.
●호르몬 대체 요법.
●예방적 또는 치료적 항응고 요법(예를 들어, 안정적인 용량의 와파린 또는 저분자량 헤파린).
●비활성화된 인플루엔자 예방 접종.
●식욕 자극제로 투여되는 메게스트롤 아세테이트.
●흡입용 코르티코스테로이드와 미네랄코르티코이드(예를 들어, 플루드로코르티손).
●급성 및/또는 저용량 전신 면역억제 약물(예를 들어, 메스꺼움에 대한 덱사메타손의 1회 투여 또는 프레드니손 또는 동일한 용량의 코르티코스테로이드의 ≤ 10mg/일의 만성 사용).
●제한된 구역의 완화 방사선 요법은 RO7247669가 투여되는 날을 제외하고 연구 기간 중 언제든지 허용된다.
한약 요법의 병용 사용은 PK, 안전성 프로파일 및 잠재적인 약물 간 상호 작용이 일반적으로 공지되어 있지 않기 때문에 권장되지 않는다. 하지만, 암 치료가 목적이 아닌 한약 요법은 연구 동안 사용할 수 있다.
금지된 요법
일반적으로 AE 치료용 약물을 제외하고 병용 약물은 허용되지 않는다.
아래에 달리 명시되지 않는 한, 연구 기간 동안(생존 추적 조사 제외), 그리고 무작위 배정 전과 연구 치료 동안 최소 28일 또는 약물의 5 반감기(이들 중 더 짧은 기간) 동안 다음 요법의 사용이 금지된다:
●연구용 또는 허가받지 않은/승인받지 않은 제제.
●암 치료를 목적으로 하는 요법(화학 요법, 호르몬 요법, 면역 요법, 표적 병변의 외과적 제거 및 방사선 요법(제한된 고식적 방사선 요법 제외), 라벨에 항암 활성이 있는 한약 또는 한약재를 포함하되 이에 제한되지 않음).
●기준선에서 ≤ 10mg 프레드니손 /일(또는 이에 상응하는 양)의 스테로이드의 만성 사용(흡입 및 국소 스테로이드는 허용됨). 전신 코르티코스테로이드의 동시 고용량 투여.
●약독화 생백신의 투여 또는 연구 기간 동안 또는 연구 약물의 최종 용량 투여 후 4개월 이내에 이러한 약독화 생백신이 필요할 것으로 예상되는 경우.
●전신 면역자극제(IFN 및 IL-2를 포함하나 이에 제한되지 않음), CPI와 조합 투여 시 자가면역 질환의 위험을 잠재적으로 증가시킬 수 있기 때문.
●전신 면역억제제(사이클로포스파미드, 아자티오프린, 메토트렉세이트 및 탈리도마이드를 포함하지만 이에 국한되지 않음), 이러한 제제가 연구 약물의 효능 및 안전성을 잠재적으로 변경할 수 있기 때문.
●CAR-T 요법과 같은 입양 세포 요법.
E. 효능 평가
참가자는 무작위 배정 일자를 기준으로 12주차(± 1주)에 1차 종양 평가를 받는다. 후속 종양 평가는 치료 지연과 관계없이 무작위 배정 일자를 기준으로 최대 48주차까지 9주(± 1주)마다, 그 이후에는 12주(± 1주)마다 수행된다. 종양 평가는 방사선 촬영 시까지 치료 지연에 관계없이 상기 기재된 간격으로 수행된다.
RECIST v1.1에 따른 질환 진행, 새로운 항암 요법의 시작, 동의 철회, 사망, 연구 종료 또는 무작위 배정 후 최대 24개월(어느 것이든 먼저 발생하는 것). 따라서, 질환의 진행이나 임상적 이점 상실 이외의 이유로 치료를 중단한 참가자에 대해서는 일정에 따라 종양 평가를 계속한다. RECIST v1.1에 따라 진행성 질환 이후 치료를 계속하는 참가자의 경우, 연구 치료가 중단될 때까지 일정에 따라 종양 평가가 계속된다.
F. 동부 종양학 협력 그룹 수행능력 상태 점수
ECOG 수행능력 상태 점수는 스크리닝 시, 각 선행 치료 투여 전 및 중단 방문 시 평가된다. 가능하다면 연구 기간 내내 동일한 사람이 참가자의 수행능력 상태 점수를 평가하는 것이 좋다.
G. 주입 관련 반응
치료용 항체의 투여는 발열, 오한, 현기증, 고혈압, 저혈압, 호흡 곤란, 불안, 발한, 홍조, 발진, 빈맥, 빈호흡, 두통, 종양 통증, 메스꺼움 및/또는 구토와 같은 증상을 특징으로 하는 IRR을 유발할 수 있다. 기관지경련, 후두 및 인후 자극, 천명음, 후두부종, 심방세동 등 호흡기 및 심장 증상도 나타날 수 있다. 이러한 반응은 일반적으로 주입 중이나 주입 직후 또는 선행 치료 주입 후 24시간 이내에 주로 1차 주입 시 발생한다. 발병률과 중증도는 일반적으로 후속 주입에 따라 감소한다.
참가자는 또한 면역글로불린(Ig)E-매개 과민 반응을 일으킬 수도 있다. IRR은 아나필락시스 반응과 구별되지 않을 수 있으나; IgE-매개 과민증의 경우, 증상은 일반적으로 이전 노출 이후에 발생하며 1차 주입에서는 매우 드물게 발생한다. IgE-매개 과민반응이 확인된 경우, 치료를 영구적으로 중단해야 한다. 주입 관련 반응 예방 및 관리에 대한 권장 사항은 표 22에 나와 있다.
표 22. 주입 관련 반응 예방 및 관리에 대한 권장 사항
IRR = 주입 관련 반응; NCI CTCAE = 국립 암 연구소 공통 용어
이상 반응에 대한 기준.
a증상 등급분류에 대해 NCI-CTCAE, v5.0 척도를 참조한다.
b 지지 치료: 참가자는 지난 4시간 동안 투여받지 않은 경우 아세트아미노펜/파라세타몰 및 디펜히드라민과 같은 항히스타민제로 치료를 받아야 한다. 임상적으로 지시된 바와 같이 정맥 수액(예를 들어, 생리 식염수)을 투여할 수 있다. 기관지 경련, 두드러기 또는 호흡곤란의 경우, 항히스타민제, 산소, 코르티코스테로이드(예를 들어, 100mg IV 프레드니솔론 또는 이와 동등한 약물) 및/또는 기관지 확장제가 기관 진료에 따라 투여될 수 있다.
H. 통계적 고려사항
샘플 크기 결정
계획된 등록 참가자 수는 80명이며, RO7247669를 600mg 또는 1200mg 용량으로 Q3W 투여하도록 1:1 비율로 무작위 배정되었다. 일차 평가변수 평가를 위해, 마지막 참여자 이후 적어도 6개월까지 참가자를 추적하여, 6개월 PFS를 계산할 때 투여 중도절단이 없는지 확인한다. 이 연구는 두 가지 용량 수준을 질적으로 특성화하고 용량들 간의 명백한 차이를 평가하는 것을 목표로 한다. 그러나 이 연구는 임상적으로 의미 있는 모든 차이를 검출하기에는 적절하지 않다.
일부 샘플 크기 고려 사항은 6개월 이전에 중도절단이 발생하지 않는다는 가정 하에 6개월 근방의 PFS 평가변수에서 이루어질 수 있다. 중도절단 없이, 6개월 PFS는 첫 6개월 이내에 진행이나 사망을 경험하지 않은 참가자의 비율과 일치하며, 이는 이항 분포를 통해 설명할 수 있다.
표 23은 최저 효능 군의 6개월에 진행 또는 사망을 경험하지 않은 참가자의 비율이 약 43%(RELATIVITY-047 시험의 니볼루맙군에서 관찰된 6개월 PFS)라고 가정할 때 6개월 PFS에서 가능한 몇 가지 실제 기본 차이에 대한 검정력을 보여준다.
표에서는 6개월 PFS에서 20%의 차이(20% 양측 알파를 가정)를 검출하는 검정력이 70%인 반면, 15% 차이가 존재하는 경우 검정력은 53%로 떨어진다는 것을 보여준다.
표 23. 몇 가지 가능한 실제 6개월 PFS 비율에 대한 검정력(6개월 이전에 중도절단이 없다고 가정)
PFS = 무진행 생존
분석을 위한 세트
분석을 위해, 집단은 표 24에 제시된 대로 정의된다.
표 24. 분석 집단
인구통계 및 기준선 특성
연구 등록, 연구 약물 투여, 연구 약물 중단 이유 및 연구 중단 이유가 치료군별로 요약되어 있다. 인구통계(연령, 성별, 자가 보고된 인종/민족 포함) 및 기준선 질환 특성(예를 들어, ECOG 수행능력 상태 점수)이 전체 및 치료군별로 요약된다. 적절하게, 연속형 데이터의 경우 기술통계(평균, 중앙값, 표준편차, 및 범위)가 표시되고, 범주형 데이터의 경우 빈도와 백분율이 표시된다.
기준선 측정값은 참가자가 연구 치료를 받기 전에 얻은 이용 가능한 마지막 데이터이다.
효능 분석
일차 및 이차 효능 분석에는 치료 의향(ITT) 집단의 모든 참가자가 포함되며 참가자는 무작위로 할당된 용량 수준에 따라 그룹화된다. 효능 통계분석 방법은 표 25와 같다.
표 25. 효능 통계분석 방법
CI = 신뢰 구간; CR = 완전 반응; DCR = 질환 통제율; DoR = 반응 기간; EORTC = 유럽 암 연구 및 치료 기구; HR = 위험 비율; ORR = 객관적 반응률; OS = 전체 생존; PFS = 무진행 생존; PR = 부분 반응; RECIST = 고형 종양의 반응 평가 기준.
실시예 4: 진행성 간암(MORPHEUS-Liver) 환자를 대상으로 다양한 면역요법 기반 치료 조합의 효능과 안전성을 평가하는 공개 라벨, 다기관, 무작위 배정 Ib/II상 연구
A. 연구 설계
GO42216는 진행성 간암 환자에서 면역요법 기반 치료 조합의 효능, 안전성 및 약동학을 평가하는 Ib/II상, 라벨 공개, 다기관, 무작위 배정 우산형 연구이다. 이 연구는 새로운 치료법이 출시되거나, 최소한의 임상 활성 또는 허용할 수 없는 독성을 나타내는 기존 치료군들을 종료하거나, 환자 집단을 (예를 들어, 선행 항암 치료 또는 바이오마커 상태와 관련하여) 수정하거나, 또는 다른 유형의 진행성 원발성 간암(예를 들어, 간내 담관암종(iCCA)) 환자의 코호트를 추가로 도입함에 따라 새로운 치료군들을 개설할 수 있는 유연성을 갖도록 설계되었다.
코호트 1은 해당 질환에 대해 선행 전신 치료를 받은 적이 없는 국소 진행성 또는 전이성 간세포암종(HCC) 환자를 등록한다(도 10 및 11). 적격 환자는 먼저 여러 치료군들 중 하나에 무작위로 배정된다(1단계). 1단계에서 임상적 이점의 상실이나 허용할 수 없는 독성을 경험한 환자는 다른 치료 조합으로 치료(2단계) 받기에 적격일 수 있다.
1단계
1단계 동안, 환자는 대조군(아테졸리주맙 + 베바시주맙(Atezo + bev)) 또는 베바시주맙과 RO7247669(RO7247669 + bev)를 조합한 실험군에 무작위로 배정된다. 구체적인 연구 목적 및 해당 평가변수를 표 26에 요약한다.
표 26. 효능 통계분석 방법
ADA = 항-약물 항체; DOR = 반응 기간; HCC = 간세포 암종; HCC mRECIST = HCC-특이적 변형 RECIST; NCI CTCAE v5.0 = 국립 암 연구소(National Cancer Institute)의 이상 반응에 대한 공통 용어 기준, 버전 5.0; ORR = 객관적 반응률; OS = 전체 생존; PFS = 무진행 생존; PK = 약동학; RECIST v1.1 = 고형 종양의 반응 평가 기준, 버전 1.1. 비고: 하나의 시점에서의 전체 반응은 RECIST v1.1 및 HCC mRECIST를 사용하여 조사자가 평가한다.
약 170명 내지 320명의 환자가 1단계 동안 등록된다. 실험군 내 등록은 예비 단계에 이어 확장 단계의 두 단계로 진행된다. 대부분의 군에서, 약 20명의 환자가 예비 단계에서 등록된다. 예비 단계 동안 실험군에서 임상 활동성이 관찰되면, 확장 단계 동안 약 20명의 추가 환자가 해당 군에 등록될 수 있다. 일부 군에서, 최소 6명의 환자를 대상으로 안전성 평가를 실시하기 위해 무작위 배정을 중단한다. 임상 활성이 최소이거나 독성이 허용되지 않는 실험군은 확장을 거치지 않는다. 추가 하위군 분석을 가능하게 하기 위해, 치료군들 간 잠재적인 예측 바이오마커를 포함하여 인구통계학적 그리고 기본 특성과 관련된 균형을 보장하기 위해 추가 환자를 등록할 수 있다.
연구 과정 중에 프로토콜을 수정하여 새로운 실험군을 추가할 수 있다. 1단계의 환자는 치료군에 무작위로 배정되고, 무작위 배정 비율은 등록 가능한 실험군의 수에 따라서 달라지며(예를 들어, 군이 추가되거나 군의 등록이 보류되는 경우, 예비 단계의 결과 분석이 보류됨), 대조군에 배정될 가능성은 35%를 넘지 않을 것이다. 무작위 배정은 군-별 제외 기준을 고려한다. 환자가 특정 군에 대해 설명된 제외 기준 중 하나라도 충족하는 경우 해당 군에 대한 자격이 없다. 치료 할당 및 무작위 배정에 대한 세부사항은 표 27에 제공된다.
표 27. 1단계 치료 요법
Atezo = 아테졸리주맙; Bev = 베바시주맙; Q2W = 2주마다; Q3W = 3주마다.
a최소 6명의 환자에 대한 안전성 평가를 실시하기 위해 RO7247669 2100mg Q2W + Bev군에서 등록이 보류되었다.
대조군 및 실험 군들의 환자는 방사선 및 생화학 데이터, 국소 생검 결과(가능한 경우), 및 임상 상태(예를 들어, 질환에 수반되는 통증 등 증상의 악화)를 통합적으로 평가한 후 결정한 바에 따라 허용할 수 없는 독성 또는 임상 이익의 상실이 발생할 때까지 치료를 계속 받는다. 암 면역요법(CIT)을 사용한 T 세포 반응(가성 진행이라고 명명함) 설정에서 면역 세포 침윤으로 인한 종양 부담의 초기 증가 가능성으로 인해, 고형 종양의 반응 평가 기준, 버전 1.1(RECIST v1.1)에 따른 방사선학적 진행은 실제 질환 진행을 나타내지 않을 수 있다. 허용할 수 없는 독성이 없는 경우, CIT 조합으로 치료를 받는 동안 RECIST v1.1에 따른 질환 진행 기준을 충족하는 환자는 다음 기준을 모두 충족하는 경우 치료를 계속하는 것이 허용될 것이다:
●임상적 이점의 증거, 이용 가능한 모든 데이터를 검토한 후 결정.
●질환의 명백한 진행을 나타내는 증상 및 징후(새롭거나 악화되는 고칼슘혈증과 같은 실험실 수치 포함) 없음.
●질환 진행으로 인해 발생할 수 있는 동부 종양학 협력 그룹(ECOG) 수행능력 상태 점수의 저하 없음.
●프로토콜에 허용된 의료 처치로 관리할 수 없는 중요한 해부학적 부위(예를 들어, 연수막 질환)에서 종양 진행 없음.
안전성 평가 단계
RO7247669 2주마다(Q2W) 2100 mg + Bev 군에서 잠재적인 중복 독성을 설명하기 위해, 약 6명의 환자가 안전성 평가를 위하여 등록된 이후 등록이 보류된다.
안전성 평가는 적어도 1회 용량의 치료(즉, 주어진 조합에 대해 각 제제의 1회 용량)를 받고 적어도 1회의 전체 치료 주기 동안 안전성 추적 평가를 완료한 최소 6명의 환자로부터 얻은 안전성 데이터를 기반으로 한다. 상기 조합이 충분히 안전한 것으로 결정되면, 해당 군의 등록을 재개한다. 등록을 재개하지 않기로 한 결정은 관리하기 어렵고 환자의 적어도 1/3에서 모든 연구 약물을 중단하게 하는 연구 치료-관련 등급 ≥ 3의 사건에 근거한다.
2단계
1단계 동안 (상기 설명한 바와 같은) 임상적 이점의 상실을 경험한 대조군 또는 실험군의 환자들에게는 적격성 기준을 충족하고 2단계군에 등록 가능한 경우 2단계 동안 다른 치료 조합을 투여받을 수 있는 옵션이 제공된다. 1단계에서 허용할 수 없는 독성을 경험한 환자는 2단계에서 치료 받을 자격이 있을 수 있다.
2단계 치료는 환자가 1단계에서 임상적 이점의 상실 또는 허용할 수 없는 독성을 경험한 후 3개월 이내에 시작해야 하며 허용할 수 없는 독성 또는 임상적 이점의 상실이 발생할 때까지 계속되어야 한다. 그러나, 환자는 가능한 빨리 2단계 치료를 시작하도록 권장된다. 현재 이용가능한 2단계 치료 요법은 없다.
평가 및 모니터링
모든 환자는 연구 전반에 걸쳐 이상 반응에 대해 면밀히 모니터링되며, 이상 반응은 국립 암 연구소의 이상 반응에 대한 공통 용어 기준, 버전 5.0(NCI CTCAE v5.0)에 따라 등급분류 된다. 사이토카인 방출 증후군(CRS)의 중증도는 미국 이식 및 세포 치료 학회 CRS 합의 등급 척도(American Society for Transplantation and Cellular Therapy CRS Consensus Grading Scale)에 따라 등급분류 된다.
환자는 처음 48주 동안 6주마다(주기 1의 1일차부터) 종양 평가를 받고 그 이후에는 6 또는 12주마다 종양 평가를 받는다.
반응은 RECIST v1.1 및 HCC 특이적으로 변형된 RECIST(HCC mRECIST)를 사용하여 평가된다.
기준선 종양 조직 샘플은 바람직하게는 연구 시작 시 실시한 생검을 통해 모든 환자로부터 수집된다. 이들 샘플은 바이오마커 연구에 활용된다.
치료제의 약동학적(PK) 특성 및/또는 면역원성을 특성화하기 위해, 선행 치료 투여 전 및 동안 다양한 시점에서 혈액 샘플을 채취한다.
실시간 안전성 데이터 및 입수 가능한 PK 데이터의 검토를 기반으로, 적절하다고 판단되면 치료 요법을 수정할 수 있다.
표적 집단
1단계 포함 기준
환자는 1단계에 대한 자격을 갖추려면 다음 기준을 모두 충족해야 한다:
●연령 ≥ 18세.
●무작위 배정 전 7일 이내에 0 또는 1의 ECOG 수행능력 상태 점수.
●간경변 환자에게서 조직학/세포학 또는 임상적으로 미국 간 질환 연구 협회(AASLD) 기준에 의해 진단이 확인된 국소 진행성 또는 전이성 및/또는 절제불가능 HCC. 조직학적 진단 확인이 없는 간경변 환자의 경우, AASLD 기준에 따라 임상 확인이 필요하다.
●무작위 배정 전 7일 이내 차일드-푸 분류 A
●근치적 외과 및/또는 국소 요법을 받을 수 없는 질환. 수술 및/또는 국소 요법 후 진행성 질환이 있는 환자가 적격이다.
●HCC에 대한 선행 전신 치료(전신 임상시험용 제제 포함) 없음. 한약을 포함하여 라벨에 항암 활성이 표시된 한약 요법을 이용한 선행 치료는 이러한 약물이 무작위 배정 이전에 중단된 경우 허용된다.
●기대 수명 ≥ 3 개월.
●중앙 검사를 통해 PD-L1 및/또는 추가 바이오마커 상태를 확인하는 데 적합한 대표적인 종양 표본이 있을 것. 기준선 종양 조직 샘플은 바람직하게는 연구 시작 시 실시한 생검을 통해 모든 환자로부터 수집된다.
1단계 및 2단계 포함 기준
환자가 1단계 자격과 2단계 자격을 갖추려면 다음 기준을 모두 충족해야 한다:
●연구 프로토콜을 준수하는 능력.
●RECIST v1.1에 따라 측정 가능한 질환(적어도 하나의 표적 병변). 선행 국소 요법(예를 들어, 고주파 절제술, 경피 에탄올 또는 아세트산 주사, 냉동절제술, 고강도 집속 초음파, 경동맥 화학색전술, 경동맥 색전술 등)를 받은 환자는 표적 병변이 이전에 국소 요법으로 치료되지 않았거나 또는 국소 요법 부위 내 표적 병변이 이후 RECIST v1.1에 따라 진행되었다면 적격이다.
●연구 치료 시작 전 7일 이내에 얻은 다음과 같은 실험실 검사 결과로 정의되는 적절한 혈액학적 및 말단 기관 기능:
- 과립구 집락 자극 인자 지원 없이 ANC ≥ 1.5 x 109/L (≥ 1500/μL).
- 림프구 수 ≥ 0.5 x 109/L (≥ 500/μL).
- 수혈 없이, 혈소판 수 ≥ 75 x 109/L (≥ 75,000/μL).
- 수혈 없이 헤모글로빈 ≥ 90 g/L (≥ 9.0 g/dL).
- 이 기준을 충족하려면 환자는 스크리닝 도중 또는 스크리닝 전 2주 이내에 수혈이 필요하지 않아야 한다.
- AST, ALT, 및 ALP ≤ 5 x 정상 상한치(ULN).
- 빌리루빈 ≤ 3 x ULN.
- 크레아티닌 ≤ 1.5 x ULN 또는 크레아티닌 청소율 ≥ 50 mL/분(콕크로프트-골트 공식을 사용하여 계산).
- 수혈 없이, 알부민 ≥ 28 g/L (≥ 2.8 g/dL).
- 항응고제를 투여받지 않는 환자의 경우: INR 또는 aPTT ≤ 1.5 x ULN.
●B형 간염 바이러스(HBV) 및 C형 간염 바이러스(HCV)에 대한 스크리닝 검사를 통해 확인된 문서화된 간염 바이러스 상태. 활동성 HBV 환자의 경우: 스크리닝 중 HBV DNA < 500 IU/mL, 무작위 배정 최소 14일 전 항-HBV 치료 시작 및 연구 기간 동안 항-HBV 치료를 계속할 의지(예를 들어, 엔테카비르 등 현지 표준 치료 기준). 해결된 감염(검출 가능한 항체로 입증됨) 또는 만성 감염(검출 가능한 HCV RNA로 입증됨)이 있는 HCV 환자는 적격이다.
●스크리닝 시 HIV 검사 음성.
●가임 여성의 경우: 금욕을 유지(이성간 성관계를 자제)하거나 피임을 사용하는 데 동의.
●남성의 경우: 금욕을 유지하거나(이성간 성관계를 자제) 또는 피임법을 이용하고, 정자를 기증하는 것을 자제함에 동의.
2단계 포함 기준
환자는 2단계에 대한 자격을 갖추기 위해 다음 기준을 모두 충족해야 한다:
●0, 1 또는 2의 ECOG 수행능력 상태 점수
●아테졸리주맙 또는 RO7247669와 관련되지 않은 허용할 수 없는 독성을 경험하거나 1단계 치료를 받는 동안 임상적 이점의 상실을 경험한 후 3개월 이내에 2단계 치료를 시작할 수 있을 것.
●1단계 중단 시 수행된 생검으로부터 얻은 종양 표본이 있을 것(임상적으로 가능한 경우).
제외 기준
아래에 설명된 기준 중 하나라도 충족하는 환자는 1단계 동안 특정 군의 등록 또는 2단계 동안 등록에서 제외된다.
1단계 제외 기준
●다음 기준 중 어느 하나를 충족시키는 환자는 1단계에서 제외된다:
●항 CTLA-4, 항 PD-1, 및 항 PD-L1 치료 항체를 비롯한 CD137 작용제 또는 면역 관문 차단 요법을 사용한 선행 치료.
●연구 치료 시작 전 28일 이내에 연구 요법으로 치료.
●연구 치료 시작 전 28일 이내에 간에 대한 국소 요법(예를 들어, 고주파 절제술, 경피 에탄올 또는 아세트산 주입, 냉동절제술, 고강도 집속 초음파, 경동맥 화학색전술, 경동맥 색전술 등)으로 치료하거나 또는 이러한 절차의 부작용으로부터 회복되지 않은 경우.
●출혈이 있거나 출혈 위험이 높은 식도 및/또는 위 정맥류를 치료하지 않거나 불완전하게 치료한 경우.
●환자는 식도위십이지장경검사(EGD)를 받아야 하며 등록하기 전에 모든 크기의 정맥류(소형에서 대형까지)를 현지 표준 치료에 따라 평가하고 치료해야 한다. 연구 치료 시작 전 6개월 이내에 EGD를 받은 환자는 해당 절차를 반복할 필요가 없다.
●연구 치료 시작 전 6개월 이내에 식도 및/또는 위 정맥류로 인한 선행 출혈 사건.
●1등급 이상으로 해결되지 않은 선행 항암 치료로 인한 이상 반응, 모든 등급의 탈모증은 예외.
●부적절하게 조절되는 고혈압, 수축기 혈압(BP) > 150mmHg 및/또는 확장기 혈압 > 100mmHg(2번 이상의 세션에서 최소 3회 판독값의 평균)로 정의. 이러한 매개변수를 달성하기 위한 항고혈압 요법이 허용된다.
●고혈압 위기 또는 고혈압 뇌병증의 병력.
●선행 치료 시작 전 6개월 이내에 유의미한 혈관 질환(예를 들어, 외과적 치료가 필요한 대동맥류 또는 최근 말초 동맥 혈전증).
●선행 치료 시작 전 1개월 이내의 객혈 이력(각 에피소드 당 ≥2.5 mL의 밝은 적혈구)
●출혈 체질 또는 (치료용 항응고제 부재시) 상당한 응고 장애의 증거.
●현재 또는 최근(연구 치료 시작 전 ≤ 10일) 아스피린(> 325mg/일) 사용 또는 클로피도그렐, 디피라미돌, 티클로피딘 또는 실로스타졸로 치료 중.
●현재 또는 최근(연구 치료 시작 전 ≤ 10일) 치료(예방 목적이 아닌) 목적으로 전량 경구 또는 비경구 항응고제 또는 혈전용해제를 사용하고 있는 경우. 정맥 접근 장치의 개통을 위한 예방적 항응고제는 이러한 제제의 활성이 INR <1.5 x ULN으로 나타나고 aPTT가 연구 치료 시작 전 14일 이내에 정상 한계치 내에 있는 경우 허용된다. 항응고제 또는 혈전용해제의 예방적 사용의 경우, 승인된 용량은 다음과 같다:
●현지 라벨에 기재된 용량이 사용될 수 있다.
●연구 치료 시작 전 3일 이내에 혈관 접근 장치의 배치를 제외한 핵심 생검 또는 기타 경미한 수술 절차.
●연구 치료 시작 전 6개월 이내에 복부 또는 기관식도 누공, 위장(GI) 천공 또는 복강내 농양의 병력.
●기저 질환과 관련된 폐색하부 또는 폐쇄성 증후군 또는 일상적인 비경구 수분공급, 비경구 영양, 또는 관 영양 공급이 필요한 경우를 포함한 장 폐쇄의 병력 및/또는 GI 폐쇄의 임상 징후 또는 증상. 폐색하부 또는 폐쇄성 증후군의 징후 또는 증상이 있거나 초기 진단 당시 장폐색이 있는 환자는 증상 해결을 위한 최종(외과적) 치료를 받은 경우 등록할 수 있음.
●천자 또는 최근 수술 절차로 설명되지 않는 복강 내 유동 공기의 증거.
●치유되지 않는 심각한 상처, 활동성 궤양, 또는 치료받지 않은 골절.
●딥스틱 소변검사에서 ≥2+ 단백질과 24시간 소변 수집에서 ≥1.0g의 단백질로 입증되는 등급 ≥2의 단백뇨. 스크리닝 시 딥스틱 소변검사에서 ≥2+의 단백질을 갖는 모든 환자는 단백질을 위해 24시간 소변 수집을 받아야 한다. 딥스틱 소변 검사에서 <2+의 단백질을 갖는 환자는 연구에 적격이다.
●주요 기도나 혈관, 또는 중앙에 위치한 큰 부피의 종격동 종양 덩어리(용골에서 < 30 mm)를 침범하는 전이성 질환 문맥 또는 간 정맥의 혈관 침범이 있는 환자는 등록될 수 있다.
●소화성 궤양 질환, 게실염 또는 대장염을 포함한(그러나 이에 제한되지 않음) 연구 치료 시작 전 6개월 이내의 복강 내 염증 과정의 병력.
●연구 치료 시작 전 28일 이내에 방사선요법 또는 60일 이내에 복부/골반 방사선요법, 연구 치료 시작 전 7일 이내에 뼈 병변에 대한 완화적 방사선 요법은 예외.
●연구 치료 시작 전 28일 이내의 주요 수술 절차, 개방 생검 또는 심각한 외상성 손상 또는 연구 치료 시작 전 60일 이내에 복부 수술, 복부 처치 또는 심각한 복부 외상성 손상; 또는 연구 과정 중 주요 수술 절차가 필요하거나 임의의 상기 절차의 부작용으로부터 회복되지 않을 것으로 예상되는 경우.
●비스테로이드성 항염증제(NSAID)를 이용한 만성 일일 치료. 두통이나 발열과 같은 질환의 증상 완화를 위해 NSAID를 가끔 사용하는 것은 허용된다.
1단계 및 2단계 제외 기준
다음 기준 중 하나라도 충족하는 환자는 1단계 및 2단계로부터 제외된다:
●알려진 섬유층판 간세포암종, 육종양 간세포암종, 또는 담관암종과 HCC가 혼합된 경우.
●간성 뇌병증(hepatic encephalopathy)의 병력.
●중등도 또는 중증 복수.
●HBV 및 HCV로 동시 감염. HCV 감염 병력이 있으나 중합효소 연쇄 반응(PCR) 결과 HCV RNA에 대해 음성인 환자는 HCV에 감염되지 않은 것으로 간주된다.
●증상이 있거나, 치료되지 않았거나, 활발히 진행 중인 중추신경계(CNS) 전이. 치료된 CNS 병변이 있는 무증상 환자는 다음 기준이 모두 충족되는 경우 적격이다:
- RECIST v1.1에 따라 측정 가능한 질환은 CNS 외부에 있어야 한다.
- 환자는 두개내 출혈 또는 척수 출혈의 병력이 없다.
- 환자는 연구 치료 시작 전 7일 이내에 정위 방사선요법, 연구 치료 시작 전 14일 이내에 전뇌 방사선요법, 또는 연구 치료 시작 전 28일 이내에 신경외과적 절제술을 받지 않았다.
- 환자는 CNS 질환에 대한 요법으로서 지속적인 코르티코스테로이드 필요성이 없다. 안정적인 용량의 항경련제 요법이 허용된다.
- 전이가 소뇌 또는 천막 상부 영역으로 한정됨(즉, 중뇌, 교뇌, 수질 또는 척수로 전이되지 않음).
-CNS 지시 요법의 완료와 연구 치료 시작 사이에 중간 진행의 증거가 없다. 스크리닝 시 새롭게 발견된 CNS 전이가 있는 무증상 환자는 스크리닝 뇌 스캔을 반복할 필요 없이 방사선요법또는 수술을 받은 후 연구에 대해 적격이다.
●연수막 질환의 병력.
●통제되지 않는 종양 관련 통증. 진통제가 필요한 환자들은 연구 시작 시 안정적인 요법 중에 있어야 한다. 완화적 방사선 치료가 가능한 증상이 있는 병변(예를 들어, 뼈 전이 또는 신경 충돌을 유발하는 전이)은 등록 전에 치료해야 한다. 환자는 방사선의 영향에서 회복되어야 한다. 최소 필요 회복 기간은 없다. 추가 성장시 기능적 결함이나 난치성 통증을 유발할 가능성이 있는 무증상 전이성 병변 (예를 들어, 현재 척수 압박과 관련이 없는 경막외 전이)은 등록 전에 적절한 경우 국소 요법을 고려해야 한다.
●반복적인 배액 절차(월 1회 또는 그 보다 더 자주)가 필요한, 통제되지 않는 흉막 삼출, 심낭 삼출 또는 복수. 유치 카테터(예를 들어, PLEURX®)를 사용하는 환자는 허용된다.
●통제되지 않거나 증상이 있는 고칼슘혈증(이온화 칼슘 > 1.5 mmol/L, 칼슘 > 12 mg/dL, 또는 교정 칼슘 > ULN).
●중증 근무력증, 근염, 자가면역 간염, 전신성 홍반 루푸스, 류마티스 관절염, 염증성 장 질환, 항인지질항체증후군, 베게너 육아종증, 쇼그렌 증후군, 길랭-바레 증후군, 또는 다발성 경화증을 포함하나 이에 제한되지 않는 자가면역 질환 또는 면역 결핍의 활성 또는 병력, 다음은 예외:
-자가면역 관련 갑상선 기능저하증의 병력이 있고 갑상선 대체 호르몬을 투여받고 있는 환자;
-인슐린 요법을 받고 있는 통제된 제1형 진성 당뇨병 환자는 본 연구에 적합하다.
- 습진, 건선, 만성 단순 태선 또는 피부과적 징후만 있는 백반증이 있는 환자(예를 들어, 건선성 관절염 환자는 제외됨)는 다음 조건이 모두 충족되는 경우 본 연구에 적합하다:
- 발진은 체표면적의 < 10%를 차지해야 한다.
- 질환은 기준선에서 잘 통제되며, 저역가 국소 코르티코스테로이드만 필요하다.
- 지난 12개월 이내에 소랄렌 + 자외선 A 방사선, 메토트렉세이트, 레티노이드, 생물학적 제제, 경구 칼시뉴린 억제제, 또는 고역가 또는 경구 코르티코스테로이드를 필요로 하는 기저 조건의 급성 악화가 발생하지 않았음.
●특발성 폐섬유증, 조직성 폐렴(예를 들어, 폐쇄성 세기관지염), 약물 유발성 폐렴 또는 특발성 폐렴의 병력, 또는 스크리닝 흉부 컴퓨터 단층촬영 스캔에서 활동성 폐렴의 증거. 방사선 분야에서 방사선 폐렴(섬유증) 병력은 허용됨.
●활동성 결핵(TB), 정제 단백질 유도(PPD) 피부 검사 양성 또는 TB 혈액 검사로 문서화되고 연구 치료 시작 전 3개월 이내에 흉부 X선 검사 양성으로 확인된 경우. PPD 피부 검사 또는 TB 혈액 검사에서 양성 반응을 보인 후 흉부 X선 검사에서 음성 반응을 보인 환자는 연구 적격일 수 있다.
●연구 치료 시작 전 3개월 이내의 심각한 심혈관 질환(예를 들어, 뉴욕심장협회 분류 II 이상의 심장 질환, 심근경색 또는 뇌혈관 사고), 불안정 부정맥 또는 불안정 협심증.
●연구 치료 시작 전 4주 이내에 진단 목적 이외의 주요 수술 절차, 또는 연구 기간 동안 주요 수술 절차가 필요할 것으로 예상되는 경우.
●스크리닝 이전 5년 이내에 HCC 이외의 악성 종양의 병력, 적절하게 치료된 자궁경부의 상피내 암종, 비흑색종 피부 암종, 국소 전립선암, 관내 상피내 암종, 또는 I기 자궁암과 같은 전이 또는 사망 위험이 무시될 수 있는 악성 종양(예를 들어, 5년 OS 비율 > 90%)은 예외.
●연구 치료 시작 전 4주 이내에 심각한 감염(감염 합병증으로 인한 입원, 균혈증 또는 중증 폐렴, 또는 환자 안전에 영향을 미칠 수 있는 모든 활동성 감염을 포함하나 이에 제한되지 않음).
●연구 치료 시작 전 2주 이내의 치료적 경구 또는 IV 항생제를 사용한 치료.
(예를 들어, 요로 감염 또는 만성 폐쇄성 폐질환 악화를 예방하기 위해) 예방적 항생제를 투여받는 환자는 연구에 적격이다.
●선행 동종 줄기세포 또는 고형 장기 이식.
●임상시험용 약물의 사용을 금하거나, 결과 해석에 영향을 미칠 수 있거나, 또는 치료 합병증으로 인해 환자를 높은 위험에 처하게 할 수 있는 임의의 기타 질환, 대사 기능 장애, 신체 검사 소견 또는 임상 검사 소견.
●임신 또는 모유 수유 중이거나 연구 기간 동안 임신할 계획이 있는 경우.
●연구 치료 시작 전 4주 이내에 약독화 생백신으로 치료.
●키메라 또는 인간화 항체 또는 융합 단백질에 대한 중증 알레르기 아나필락시스 반응의 병력.
●중국 햄스터 난소 세포 제품 또는 재조합 인간 항체에 대한 과민증이 알려진 경우.
●연구 약물 또는 그 부형제에 대해 알레르기 또는 과민증이 알려진 경우.
●연구 치료 시작 전 4주 또는 5회의 약물 제거 반감기(둘 중 더 긴 기간) 이내에 전신 면역자극제(인터페론 및 인터루킨-2를 포함하되 이에 제한되지 않음)로 치료.
●연구 치료 시작 전 2주 이내에 전신 면역억제제(코르티코스테로이드, 사이클로포스파미드, 아자티오프린, 메토트렉세이트, 탈리도마이드, 및 항-종양 괴사 인자 제제)를 포함하나 이에 국한되지 않음)로 치료하거나, 연구 치료 동안 전신 면역억제제가 필요할 것으로 예상되는 경우로서, 하기는 예외:
-급성 저용량 전신 면역억제 약물 또는 1회 펄스 용량의 전신 면역억제 약물(예를 들어, 조영제 알레르기에 대해 코르티코스테로이드 48시간)을 투여받은 환자.
- 무기질 코르티코이드(예를 들어, 플루드로코르티손), 만성 폐쇄성 폐질환 또는 천식에 대한 코르티코스테로이드, 또는 기립성 저혈압 또는 부신피질 기능부전에 대한 저용량 코르티코스테로이드를 투여받은 환자는 연구에 적격이다.
●연구 치료 시작 전 8주 이내의 등급 ≥ 3의 출혈 또는 출혈 사건.
●2단계 진입 환자: 동의 시점에 1등급 이상 또는 기준선으로 해결되지 않은 면역요법 관련 이상 반응, 다음은 예외: 보충 요법으로 적절하게 관리되는 진행 중인 내분비 사건이 있는 환자는 적격이다.
RO7247669 포함 군 대한 제외 기준
1단계 동안 다음 기준 중 하나라도 충족하는 환자는 RO7247669 포함 군에서 제외된다:
●항-림프구 활성화 유전자-3(LAG-3) 제제를 사용한 선행 치료.
●첫 번째 연구 약물 투여 시점부터 6개월 이내에 경흉부 심장초음파검사(TTE) 또는 다중 게이트 획득(MUGA) 스캔(TTE 선호 검사)으로 평가한 좌심실 박출률(LVEF) < 50%.
●트로포닌 T(TnT) 또는 트로포닌 I(TnI) > 기관 ULN. > 1에서 < 2 × ULN 사이의 TnT 또는 TnI 수준을 갖는 환자는 24시간 내 반복 수준이 ≤ 1 × ULN인 경우 적격이다. 24시간 내 반복 수준이 > 1에서 < 2 × ULN인 경우, 환자는 심장 평가를 받고 치료를 고려할 수 있다.
연구 종료 및 연구 기간
본 연구의 종료는 마지막 환자가 전화 또는 진료소에 의해 이루어지는 생존 추적 조사 방문을 비롯한 마지막 방문을 완료한 일자로 정의된다. 첫 번째 환자의 스크리닝 시점부터 연구 종료시까지의 총 연구 기간은 약 3-5년이 될 것으로 예상된다.
RO7247669 용량 및 일정에 대한 이론적 근거
HCC 환자 치료를 위한, 베바시주맙과 조합 투여 시 RO7247669의 최적화된 용량을 확인하기 위해, RO7247669는 600mg Q3W(각 21일 주기의 1일차에 600mg), 2100mg Q2W(각 28일 주기의 1일차 및 15일차에 2100mg) 또는 1200mg Q3W(각 21일 주기의 1일차에 1200mg)의 고정 용량으로 투여된다. 연구 NP41300에서 이용 가능한 임상 약동학, 효능 및 안전성 데이터를 기반으로 600mg Q3W의 고정 투여 요법이 선택되었다. 본 연구의 용량 증량 파트 A 단계 동안, RO7247669는 환자의 내약성이 우수하였으며 RO7247669와 관련된 특별한 안전성 문제는 확인되지 않았다. 2주마다(Q2W) 2100 mg의 최고 용량까지 DLT는 관찰되지 않았으며 MTD도 확인되지 않았다. 방사선 사진 PR로 측정한 항-종양 활성은 600 mg Q2W 용량부터 관찰되었다. RO7247669의 약동학은 연구 NP41300에서 검사된 용량 범위 내에서 용량 선형적이었다. 추정된 표적 특성을 사용하여 종양내 PD-1 및 LAG3 표적 결합의 추가 모델링을 수행했다. RO7247669에 대한 600mg Q3W의 용량과 일정은 치료 기간 전체에 걸쳐 종양 부위에서 > 90%의 PD-1 및 LAG3 표적 결합을 가져올 것으로 추정되었다. 또한 RO7247669는 우수 실험실 운영규정(GLP, Good Laboratory Practice) 독성학 및 용량 범위 측정 원숭이 독성학 연구 모두에서 최고 용량인 100mg/kg까지 내약성이 뛰어났다. 용독성학 연구 결과는 시판 CPI를 사용한 시노몰구스 원숭이 연구에서 보고된 결과와 일치했다.
베바시주맙 용량 및 일정의 이론적 근거
Q3W 치료군에서, 베바시주맙은 베바시주맙에 대해 승인된 투여량인 15mg/kg Q3W(각 21일 주기의 1일차에 15mg/kg)의 용량으로 투여된다.
Q2W 치료군에서, 베바시주맙은 베바시주맙에 대해 승인된 투여량인 10mg/kg Q2W(각 28일 주기의 1일차 및 15일차에 10mg/kg)의 용량으로 투여된다.
대조군(atezo + bev)
아테졸리주맙 + 베바시주맙 군(Atezo + bev) 환자는 방사선 사진 및 생화학적 데이터, 국소 생검 결과(가능한 경우) 및 임상 상태(예를 들어, 질환에 따른 통증과 같은 증상 악화)의 통합 평가 후 결정한 허용할 수 없는 독성 또는 임상적 이점의 상실이 있을 때까지 표 28에 요약된 치료를 받는다. 무작위 배정 후 7일 이내에 치료를 개시하는 것을 권고한다; 하지만, 1차 연구 치료제 투여는 핵심 생검 또는 기타 수술 절차 후 3일 이내에 실시해서는 안 된다.
표 28. atezo + bev군의 치료 요법
Atezo + Bev = 아테졸리주맙 + 베바시주맙.
a 각 주기의 1일차에, 베바시주맙은 아테졸리주맙 주입 완료 후 최소 5분 후에 투여된다.
RO7247669 2100 mg Q2W + bev
RO7247669 2100 Q2W + bev 군 환자는 방사선 사진 및 생화학적 데이터, 국소 생검 결과(가능한 경우) 및 임상 상태(예를 들어, 질환에 따른 통증과 같은 증상 악화)의 통합 평가 후 결정한 허용할 수 없는 독성 또는 임상적 이점의 상실이 있을 때까지 표 29에 요약된 바와 같이 치료 받게 될 것이다.
무작위 배정 후 7일 이내에 치료를 개시하는 것을 권고한다; 하지만, 1차 연구 치료제 투여는 핵심 생검 또는 기타 수술 절차 후 3일 이내에 실시해서는 안 된다.
표 29. RO7247669 2100 mg Q2W + bev 군의 치료 요법
Q2W =2주마다. RO7247669 + Bev = RO7247669 + 베바시주맙.
a주기 1의 1일차에 베바시주맙은 RO7247669 주입 완료 후 최소 90분 후에 투여된다. 1차 주입에서 주입 관련 반응(IRR) 없이 내약성이 있는 경우, RO7247669 주입 후 최소 60분 후에 베바시주맙을 투여한다. 2차 주입에서 IRR 없이 내약성이 있는 경우, 모든 후속 RO7247669 주입 후 최소 30분 후에 베바시주맙을 투여한다.
RO7247669 1200 mg Q3W + bev
RO7247669 1200 Q3W + bev 군 환자는 방사선 사진 및 생화학적 데이터, 국소 생검 결과(가능한 경우) 및 임상 상태(예를 들어, 질환에 따른 통증과 같은 증상 악화)의 통합 평가 후 결정한 허용할 수 없는 독성 또는 임상적 이점의 상실이 있을 때까지 표 30에 요약된 바와 같이 치료 받는다. 무작위 배정 후 7일 이내에 치료를 개시하는 것을 권고한다; 하지만, 1차 연구 치료제 투여는 핵심 생검 또는 기타 수술 절차 후 3일 이내에 실시해서는 안 된다.
표 30. RO7247669 1200 mg Q3W + bev 군의 치료 요법
Q3W =3주마다. RO7247669 + Bev = RO7247669 + 베바시주맙.
a주기 1의 1일차에 베바시주맙은 RO7247669 주입 완료 후 최소 90분 후에 투여된다. 1차 주입에서 주입 관련 반응(IRR) 없이 내약성이 있는 경우, RO7247669 주입 후 최소 60분 후에 베바시주맙을 투여한다. 2차 주입에서 IRR 없이 내약성이 있는 경우, 모든 후속 RO7247669 주입 후 최소 30분 후에 베바시주맙을 투여한다.
RO7247669 600 mg Q3W + bev
RO7247669 600 Q3W + bev 군 환자는 방사선 사진 및 생화학적 데이터, 국소 생검 결과(가능한 경우) 및 임상 상태(예를 들어, 질환에 따른 통증과 같은 증상 악화)의 통합 평가 후 결정한 허용할 수 없는 독성 또는 임상적 이점의 상실이 있을 때까지 표 31에 요약된 바와 같이 치료 받는다. 무작위 배정 후 7일 이내에 치료를 개시하는 것을 권고한다; 하지만, 1차 연구 치료제 투여는 핵심 생검 또는 기타 수술 절차 후 3일 이내에 실시해서는 안 된다.
표 31. RO7247669 600 mg Q3W + bev 군의 치료 요법
Q3W =3주마다. RO7247669 + bev = RO7247669 + 베바시주맙.
a주기 1의 1일차에 베바시주맙은 RO7247669 주입 완료 후 최소 90분 후에 투여된다. 1차 주입에서 주입 관련 반응(IRR) 없이 내약성이 있는 경우, RO7247669 주입 후 최소 60분 후에 베바시주맙을 투여한다. 2차 주입에서 IRR 없이 내약성이 있는 경우, 모든 후속 RO7247669 주입 후 최소 30분 후에 베바시주맙을 투여한다.
B. 통계적 방법
일차 분석
일차 효능 평가변수는 표 26에 정의된 바와 같이 1단계 동안의 객관적 반응률(ORR)이다.
ORR은 RECIST v1.1에 따라 결정된다. 반응 평가가 누락되거나 없는 환자들은 비반응자로 분류된다. 완전 또는 부분 반응을 보인 환자의 비율인 ORR은 95% CI(클로퍼-피어슨 방법)로 각 군에 대해 계산된다. 실험군과 대조군 간의 ORR 차이도 이항 분포의 정규 근사치를 사용하여 95% CI로 계산된다.
샘플 크기의 결정
이 연구는 진행성 간암 환자에게 투여시 면역요법 기반 치료 조합에 대한 예비 효능, 안전성 및 PK 데이터를 얻기 위해 설계되었다. 코호트 1은 해당 질환에 대해 선행 전신 치료를 받은 적이 없는 국소 진행성 또는 전이성 HCC 환자로 구성된다. 연구 기간 동안 대략 170-320명의 환자가 대조군과 실험군에 무작위로 할당된다.
중간 분석
중간 분석은 연구 기간 동안 수행되며, 가장 빠른(1단계) 중간 분석은 적어도 하나의 실험군이 예비 단계에서 등록을 완료하고 환자를 최소 6주 동안 추적 조사된 경우 수행될 것으로 예상된다. 대조군과 비교한 실험군의 임상 활동성에 대한 중간 분석을 기반으로 치료군에 추가 등록을 안내하기 위해 사후 확률을 사용할 수 있다. 중간 분석에서 실험군의 활동이 대조군의 활동보다 높은 것으로 나타나면 실험군에 20명의 환자를 추가로 등록할 수 있다.
중간 분석은 또한 약 15명의 환자가 2단계 치료군에 등록되고 최소 6주 동안 추적 조사된 후에도 수행된다.
2단계 치료군에서 임상 활동성이 관찰되지 않으면, 해당 군의 추가 등록이 중단된다.
C. 배경 및 이론적 근거
환자 집단에 대한 이론적 근거
이 연구에는 PD-L1 발현이나 HCC의 병인과 관계없이 해당 질환에 대해 이전에 전신 치료를 받은 적이 없는 국소 진행성 또는 전이성 HCC 환자가 등록된다. 이러한 광범위한 집단은 HCC 환자를 대상으로 아테졸리주맙과 베바시주맙의 조합요법을 평가하는 다음 두 가지 연구에 등록된 집단과 유사하다: 초기 Ib상 연구인 연구 GO30140, 및 소라페닙 대비 조합요법의 통계적으로 유의하고 임상적으로 의미 있는 이점을 입증한 무작위 배정 III상 연구인 연구 YO40245.
진행성 HCC은 충족되지 않은 의학적 요구가 높은 난치병이다. 소라페닙은 현재 진행성 HCC 환자의 1차 치료로 승인되어 있으며 이러한 질환 환경에서 표준 치료로 간주된다. 그러나 예후는 여전히 좋지 않아 OS 중앙값이 6.5-10.7개월이고 치료는 상당한 독성과 관련되어 있다. 최근 입증된 아테졸리주맙과 베바시주맙의 임상적 이점에도 불구하고, 국소 진행성 또는 전이성 HCC 환자를 위한 보다 효과적이고 내약성이 우수한 조합 치료 요법에 대한 수요는 지속적으로 존재한다.
연구에 등록하는 환자는 또한 차일드-푸 분류 A로 정의되는 적절한 간 기능을 보유해야 한다. 차일드-푸 분류 B 또는 분류 C 간 기능이 있는 환자는 잠재적으로 혼란을 야기할 수 있는 기저 간경변증으로 인해 사망 위험이 증가하며, 이는 치료 관련 항-종양 효능의 적절한 평가를 혼란스럽게 하므로; 이들 환자는 연구에서 제외된다. 제안된 연구 집단은 미국 간 질환 연구 협회(AASLD)가 소집한 전문가 패널이 언급한 바와 같이 HCC에 대한 새로운 제제 또는 제제들의 조합의 초기 연구에서 권장되는 환자 집단이다(Llovet 외, N Engl J Med, 359: 378-380, 2008).
초기 방사선학적 진행 이후 면역요법 기반 치료의 이론적 근거
면역 치료제 연구에서, 완전 반응, 부분 반응 및 안정적인 질환은 각각 종양 부하의 명백한 증가에 대한 방사선학적 증거 이후에 발생하는 것으로 나타났다. T 세포 반응의 설정에서 면역 세포 침윤으로 인한 이러한 종양 부하의 초기 증가는 가성 진행(pseudo-progression)으로 명명되었다(Hales 외, Ann Oncol, 21: 1944-1951, 2010). 여러 종양 유형에서 종양 성장에 따른 반응의 증거가 관찰되었다. 또한, 방사선학적 진행의 증거가 있는 일부 반응 환자에서, 새로운 병변의 생검 또는 기존 병변의 새로운 성장 부위에는 면역 세포가 있고 생존 가능한 암세포가 없는 것으로 나타났다. 가성진행 후 반응 가능성이 있기 때문에, 이 연구에서는 유익성-위해성 비율이 유리한 것으로 판단되는 경우 면역요법 기반 치료군에 무작위로 배정된 환자가 RECIST v1.1에 따라 명백한 방사선학적 진행 후 조합 치료를 계속하도록 허용한다.
HCC-특이적으로 변형된 RECIST 사용의 이론적 근거
진행성 HCC의 경우, RECIST는 SHARP 시험 및 소라페닙에 대한 다른 임상 연구에서 입증된 임상적 이점과 낮은 상관관계가 있는 것으로 밝혀졌다(Llovet 외, N Engl J Med, 359: 378-380, 2008; Liu 외, Clin Cancer Res, 20: 1623-1631, 2014; Takada 외, BMC Res Notes, 8: 609, 2015). HCC에 대한 국소 요법, 예를 들어, 고주파 절제술 및 화학색전술 이후에도 비슷한 결과가 나타났다. 이러한 요법들은 종양의 혈관성을 감소시켜 전체 종양 크기를 변화시키지 않으면서 괴사를 유발한다. HCC의 임상 시험 설계를 위한 공통 프레임워크를 제공하기 위해 AASLD는 종양의 생존 가능한 부분만 정량화하여 평가하기 위한 개선된 평가변수들을 제공하는 수정된 기준(HCC mRECIST)을 제안했다(Llovet 외, J Natl Cancer Inst, 100: 698-711, 2008; Lencioni and Llovet, Semin Liver Des, 30: 52-60, 2010; Lencioni 외, J Hepatol, 66: 1166-1172, 2017).
베바시주맙의 항-혈관신생 작용 방식을 고려할 때, 탐색적 효능 평가변수에는 HCC mRECIST에 기반한 분석이 포함된다. 이러한 분석을 통해 국소 진행성 또는 전이성 HCC 환자의 표준 RECIST v1.1에 비해 개선된 효능 척도로 HCC mRECIST를 평가할 수 있다.
간암의 배경
간암은 전 세계적으로 다섯 번째로 흔한 암이자 두 번째로 흔한 암 관련 사망 원인으로, 연간 신규 발병 건수는 854,000건, 사망 건수는 810,000건이다. 간세포 암종(HCC)은 원발성 간암의 가장 흔한 형태이며 모든 원발성 간 악성종양의 약 90%를 차지한다. 덜 흔한 원발성 간암에는 간내 담관암종(iCCA), 혈관육종 및 간모세포종이 포함된다. 진단 시 대부분의 원발성 간암 환자는 완치요법을 통한 치료가 권장되지 않는 단계인 진행성 질환을 나타낸다. WHO는 2030년에 100만 명 이상이 간암으로 사망할 것으로 추정하고 있으며, 이는 전 세계적으로 중요한 공중 보건 문제를 부각시키고 있다(Villanueva, N Engl J Med, 380: 1450-1462, 2019).
간세포 암종의 배경
대부분의 HCC은 B형 간염 바이러스(HBV)나 C형 간염 바이러스(HCV) 감염 또는 알코올 남용으로 인해 기저 간 질환이 있는 환자에게서 발생한다. HBV 감염은 전 세계적으로 HCC 사례의 대부분을 차지한다; 그러나 서방 국가와 일본에서는 HCV가 HCC의 주요 원인이다(Villanueva, N Engl J Med, 380: 1450-1462, 2019). 보편적인 HBV 백신 접종과 HCV에 대한 직접 작용 항바이러스제의 광범위한 시행은 HCC의 병인학적 환경을 변화시킬 가능성이 있다. 그러나 HCC의 위험인자인 비알코올성 지방간 질환(NAFLD)의 발병률은 전 세계적으로 증가하고 있으며, NAFLD는 곧 서구 국가에서 간암의 주요 원인이 될 것이다(Villanueva, N Engl J Med, 380: 1450-1462, 2019).
HCC는 모든 고형 종양 중에서 사망률 대 발병률 비율(0.98)이 가장 높은 매우 치명적인 질환이다(Kamangar 외, J Clin Oncol, 24: 2137-2150, 2006). HCC로 처음 내원한 환자의 최대 80%는 증상의 늦은 출현으로 인해 절제불가능 또는 전이성 질환으로 진행되어 있다. HCC 환자의 대다수가 악성종양과 간경변증 모두의 관리가 필요한 기저 간경변증을 갖고 있기 때문에 이는 의학적으로 복잡하고 치료가 어려운 질환이다. 미국에서, 간세포암종(HCC) 환자의 5년 전체생존(OS) 비율은 17%이고 원격 전이가 있는 경우 3%로 상당히 떨어진다(Siegel 외, CA Cancer J Clin, 66: 7-30, 2016). 중국에서, HCC 환자의 5년 OS 비율은 10.1%이다(Chen 외, CA Cancer J Clin, 66: 115-132, 2016).
진행성 간세포암종의 1차 치료제
소라페닙은 현재 진행성 HCC 환자의 1차 치료를 위한 글로벌 표준 치료로 간주되는 경구용 멀티키나제 억제제이다. 소라페닙의 효능은 두 개의 대규모 다기관, 무작위 배정, 이중 맹검, 위약 대조 III상 시험, 즉, 소라페닙 HCC 평가 무작위 배정 프로토콜(SHARP, Sorafenib HCC Assessment Randomized Protocol) 시험과 아시아 태평양 지역에서 실시된 시험에서 입증되었다. 두 연구 모두 위약 대비 소라페닙의 생존 이점을 입증했다. SHARP 시험에서 OS 중앙값은 소라페닙의 경우 10.7개월 대 위약의 경우 7.9개월이었으며; 아시아 태평양 시험에서 OS 중앙값은 6.5개월 대 4.2개월이었다.
방사선 사진상 진행시까지의 시간 중앙값에 있어서의 이점도 입증되었다: SHARP 시험에서는 5.5개월 대 2.8개월, 아시아 태평양 시험에서는 2.8개월 대 1.4개월이다. 객관적 반응률(고형 종양의 반응 평가 기준, 버전 1.0(RECIST v1.0) 기준)은 SHARP 시험에서 2.3%(환자 299명 중 7명), 아시아태평양 시험에서는 3.3%(환자 150명 중 5명)였다. 아시아 태평양 시험에서 수치적으로 더 짧은 OS 및 이점 지속 기간은 환자 모집 당시 질환이 더 진행되었다는 사실과 잠재적으로 병인 및 지지 요법의 지역적 차이에 기인할 수 있다(Llovet 외, N Engl J Med, 359: 378-380, 2008; Cheng 외, Eur J Cancer, 48: 1452-1465, 2009; Cheng 외, Lancet Oncol, 10: 25-34, 2012).
이 두 가지 III상 연구에서 보고된 생존 이점에도 불구하고 알려진 독성으로 인해 소라페닙의 전반적인 유익성-위해성 비율은 보통 수준이다. 두 소라페닙 연구에서 공통적으로 보고된 이상 반응에는 수족 피부 반응, 설사, 고혈압, 체중 감소, 피로, 거식증, 탈모증, 메스꺼움, 발진/박리 등이 포함되었다. 소라페닙 승인 이후 수니티닙, 브리바닙, 리니파닙을 포함하여 소라페닙과 일대일로 직접 비교한 다수의 부정적인 3상 연구가 진행된 바 있다(Cheng 외, J Clin Oncol, 31: 4067-4075, 2013; Johnson 외, J Clin Oncol, 31: 3517-3524, 2013; Cainap 외, J Clin Oncol, 33: 172-179, 2015).
다중 표적 수용체 티로신 키나제 억제제인 렌바티닙을 사용한 1차 치료는 OS에 있어서 소라페닙에 비해 열등하지 않은 것으로 나타났지만, 표준 치료와 비교하여 OS에서 임상적으로 의미 있는 차이는 최근까지도 파악하기 어려운 상황이다(Kudo 외, 2018).
연구 YO40245(IMbrave150)는 진행성 또는 전이성 HCC 환자를 대상으로 아테졸리주맙 + 베바시주맙 대 소라페닙을 1차 치료제로서 평가하는 무작위 배정 III상 연구이다. 이 연구는 소라페닙과의 일대일 직접 비교에서 새로운 치료 조합에 대해 OS 및 무진행 생존(PFS)에서 통계적으로 유의하고 임상적으로 의미 있는 개선을 입증한 최초의 연구이다. 일차 분석 당시 소라페닙군에 비해 아테졸리주맙 + 베바시주맙 군에서 사망 위험이 42% 감소했다(계층화된 위험비(HR) = 0.58(95% CI: 0.42 내지 0.79); p = 0.0006, OS 중앙값, 추정 불가능(NE) 대 13.24개월). RECIST v1.1에 따라 독립 심사 기관에서 평가한 PFS는 또한 상기 조합 치료에 유리한 통계적으로 유의하고 임상적으로 의미 있는 개선을 보여주었다(계층화된 HR = 0.59(95% CI: 0.47 내지 0.76]; p < 0.0001; PFS 중앙값, 6.83 대 4.27 개월). 전반적으로, HCC에서 아테졸리주맙 + 베바시주맙은 관리 가능한 독성으로 일반적으로 내약성이 우수했으며 안전성 프로필일은 개별 연구 치료제 및 기저 질환의 공지된 위험과 일치하였다 (Finn 외, N Engl J Med, 382: 1894-1905, 2020).
연구의 이론적 근거
암 면역요법(CIT)은 여러 진행성 악성 종양에서 상당한 생존 이점이 관찰되는 등 명확한 임상 효능을 입증했다. 현재 널리 퍼져 있는 CIT 접근 방식은 PD-L1/PD-1과 같은 T-세포 억제 인자를 표적으로 하여 면역 회피 메커니즘을 우회하고 항-종양 반응을 활성화하는 것이다. 이러한 표적이 다양한 암 적응증에 대해 놀라운 임상적 치료 성공을 거두었지만, 진행 중인 연구는 지속적인 항-종양 면역 반응의 생성에 필요한 일련의 단계적 사건을 나타낸다(Chen and Mellman, Immunity, 39: 1-10, 2013). 각 사건은 효과적인 반응에 중요하며, 각각은 여러 종양 면역 회피 메커니즘에도 민감하다. 따라서 효과적인 항암 면역 반응의 부재를 설명하는 다양한 인자들을 식별하고 우회하는 것이 암 면역을 전파하고 표적 치료 요법을 결합하여 CIT 분야를 발전시키는 데 중요할 것이다.
본 발명의 Ib/II상 우산형 연구는 진행성 간암 환자의 초기 신호를 식별하고 개념 증명 임상 데이터를 확립함으로써 CIT 조합의 개발을 가속화하도록 설계되었다.
이 연구는 면역 세포 프라이밍 및 활성화, 종양 침투 및/또는 제거하기 위한 종양 세포 인식을 통해 다양한 면역 탈출 메커니즘을 동시에 표적으로 하는 것의 중요성을 평가한다.
실험군에서 임상 신호 검출의 신뢰도를 높이기 위해 본 연구에는 대조군이 포함되었다. 또한, 초기 치료 요법(1단계)에서 질환 진행을 경험한 환자는 다른 치료 요법(2단계)으로 치료를 계속할 수 있으며, 이는 CIT 요법으로 치료하는 동안 반응하지 않은 또는 질환 진행을 경험한 환자의 면역 탈출 메커니즘에 대한 과학적 이해를 향상시킬 수 있다.
본 연구는 먼저 해당 질환에 대해 선행 전신 요법을 받은 적이 없는 국소 진행성 또는 전이성 HCC 환자를 등록한다. 최근 입증된 아테졸리주맙 + 베바시주맙의 임상적 이점에도 불구하고, 절제불가능한 국소 진행성 또는 전이성 HCC 환자에 대한 충족되지 않은 의학적 수요가 여전히 높아, 새롭고 보다 효과적인 치료 조합에 대한 추가 평가가 필요하다.
각 실험 의약품(IMP)에 대한 표적 및 제안된 작용 메커니즘 분류는 표 32에 요약되어 있다.
표 32. 실험 연구용 의약품의 표적 및 제안된 작용 메커니즘 분류
IMP = 연구용 의약품; LAG-3 = 림프구 활성화 유전자-3; NK = 자연살해자; VEGF = 혈관 내피 성장 인자.
a Wallin 외, Nat Commun, 7: 12624, 2016.
D. 안전성 평가
안전성 평가는 중대한 이상 반응 및 특정 관심대상의 이상 반응을 포함한 이상 반응 모니터링 및 보고, 프로토콜-명시된 안전 검사실 평가 수행, 프로토콜-명시된 활력 징후 측정 및 연구의 안전성 평가에 중요하다고 간주되는 기타 프로토콜-명시된 검사 수행으로 구성된다.
우수 의료 관행에 대한 ICH 지침에 따르면, 이상 반응은 인과관계와 관계없이 의약품을 투여받은 임상 연구 대상체에게서 발생하는 뜻밖의 의학적 사건이다. 따라서 이상 반응은 다음 중 하나일 수 있다:
●의약품과 관련된 것으로 고려되는지 여부에 관계없이 의약품의 사용과 일시적으로 관련된 임의의 바람직하지 않고 의도하지 않은 징후(비정상적인 실험 소견 포함), 증상 또는 질환.
●임의의 새로운 질환 또는 기존 질환의 악화(공지된 장애의 특징, 빈도 또는 중증도의 악화).
●기준선에서 존재하지 않았던 간헐적 의학적 병태(예를 들어, 두통)의 재발.
●증상과 연관되거나, 또는 연구 치료 또는 병행 치료에서 변화 또는 연구 약물로부터 중단을 야기하는, 실험실 값 또는 다른 임상 시험(예를 들어, ECG, X-선)에 있어서의 임의의 악화.
●연구 치료의 배정 이전에 발생하는 것들(예를 들어, 생검과 같은 침습적 절차의 스크리닝)을 포함하여, 프로토콜에서 요구하는 처치와 관련된 이상 반응.
E. 통계적 고려사항 및 분석 계획
최종 연구는 연구 중단 시점까지 수집된 환자 데이터를 기반으로 한다. 달리 명시되지 않는 한, 효능 분석은 배정된 치료 요법에 대해 각 약물을 적어도 1회 투여받은 모든 환자로 정의된 효능-평가 가능 집단을 기반으로 하며, 안전성 분석은 임의의 양의 선행 치료를 투여 받은 모든 환자로 정의된 안전성-평가 가능 집단을 기반으로 한다.
분석 결과는 환자가 실제로 받는 치료 요법 그리고 단계(1단계 또는 2단계)별로 요약된다. 데이터는 샘플 크기 별로 기재 및 요약된다. 연속 변수는 평균, 표준 편차, 중앙값, 및 범위를 사용하여 요약된다. 범주형 변수는 계수 및 백분율을 사용하여 요약된다. 샘플 크기가 작은 경우에는 표 대신 목록을 사용한다.
2단계 효능 및 안전성 분석을 위해 새로운 기준선 값이 설정된다.
일차 효능 평가변수
일차 효능 평가변수는 상기 정의된 바와 같이 1단계 동안의 ORR이다. ORR은 RECIST v1.1에 따라 결정된다. 반응 평가가 누락되거나 없는 환자들은 비반응자로 분류될 것이다.
완전 또는 부분 반응을 보인 환자의 비율인 ORR은 95% CI(클로퍼-피어슨 방법)로 각 군에 대해 계산된다. 실험군과 대조군 간의 ORR 차이도 이항 분포의 정규 근사치를 사용하여 95% CI로 계산된다.
이차 효능 평가변수
이차 효능 평가변수는 상기 정의된 바와 같이 1단계 동안의 PFS, OS, 특정 시점(예를 들어, 6개월)의 OS, 반응 기간(DOR) 및 질환 통제이다. PFS, DOR 및 질환 통제는 RECIST v1.1에 따라 결정된다.
DOR은 완전 또는 부분 반응이 있는 효능 평가 가능한 환자에서 유도된다. 연구 단계에서 문서화된 질환 진행 또는 사망이 없는 환자의 경우, PFS 및 DOR은 마지막 종양 평가일에 중도절단된다. OS 분석 당시 생존해 있는 환자는 생존한 것으로 알려진 마지막 일자를 기준으로 중도절단된다.
카플란-마이어 방법은 브룩마이어 및 크로울리 방법을 사용하여 구성된 95% CI를 사용하여 PFS, OS 및 DOR의 중앙값을 추정하는 데 사용된다. 특정 시점의 OS 비율도 카플란-마이어 방법을 사용하여 추정되며, 95% CI는 그린우드(Greenwood)의 분산 추정치를 기반으로 계산된다. 질환 통제율(≥12주 동안 안정한 질환 환자의 비율), 부분 반응 또는 완전 반응이 각 치료군에 대해 계산되며, 95% CI는 클로퍼-피어슨의 정확한 방법을 사용하여 추정된다.
탐색적 효능 평가변수
탐색적 효능 평가변수는 HCC mRECIST에 따라 결정된 1단계 동안의 ORR, PFS, DOR 및 질환 통제; RECIST v1.1 및 HCC mRECIST에 따라 결정된 2단계 동안의 ORR, PFS, DOR 및 질환 통제이다. ORR, PFS, DOR 및 질환 통제는 위에서 설명한 것과 동일한 방법을 사용하여 분석된다. DOR은 완전 또는 부분 반응이 있는 효능 평가 가능한 환자에서 유도된다.
F. RO7247669 + bev 군에 특이적인 연구 세부 사항
RO7247669에 대한 배경
RO7247669는 두 가지 면역 체크포인트 단백질인 PD-1과 림프구 활성화 유전자-3(LAG-3)에 대한 1가 결합을 포함하는 1+1 형식의 새로운 단편 결정화가능한(Fc)-침묵 IgG1-기반 이중특이성 항체(bsAb)이다. RO7247669는 기능 장애가 있는 종양 항원 특이적 T 림프구(PD-1 및 LAG-3 발현)를 표적으로 하여 암 환자에게 효과적인 항-종양 면역 반응을 확립하거나 재설정하도록 설계되었으며, 이는 현재 이용 가능한 치료법에 비해 향상된 치료 반응을 가져올 수 있다.
또한 RO7247669는 Fc-감마 수용체에 대한 결합을 방지하도록 설계되어 펨브롤리주맙 및 니볼루맙과 같은 IgG4 기반 항-PD-1 항체에서 관찰된 종양 관련 대식세포 내성 메커니즘을 잠재적으로 회피할 수 있다(Arlauckas 외, Sci Transl Med, 9: 389, 2017).
RO7247669에 대한 임상 평가는 이전에 체크포인트 억제제(CPI) 노출이 있거나 없는 환자를 대상으로 단일 제제로서 최초인 인간 대상 용량 측정 연구(NP41300)에서 진행 중이다.
베바시주맙에 대한 배경
베바시주맙은 혈관 내피 성장 인자(VEGF)의 모든 이소형들을 인식하는 재조합 인간화 단클론 항체이다. 이것은 종양 미세환경에 결합하고 이로부터 VEGF를 제거함으로써 직접적인 항-혈관신생 효과를 발휘할 수 있다. 추가적인 항-종양 활성은 종양 혈관구조, 간질압 및 혈관 투과성에 대한 것으로, 종양 세포에 향상된 화학요법 전달을 제공할 수 있다(Jain, Nat Med, 7: 987-989, 2001).
베바시주맙은 전이성 결장직장암(mCRC)의 일차 및 이차 치료제, 진행성 비소세포 폐암(NSCLC), 전이성 유방암, 진행성 신세포암종(RCC), 및 난소암의 1차 치료제, 및 재발성 교모세포종의 치료제로 승인됐다. 베바시주맙은 현재 I-III상 임상 시험에서 아테졸리주맙과 조합하여 검사되고 있다. 베바시주맙은 일반적으로 내약성이 우수했으며 이상 반응은 관리 가능했다.
RO7247669 600 mg Q3W + bev 군에 대한 이론적 근거
D-1/PD-L1 경로
종양 면역요법 분야의 고무적인 임상 데이터는 암에 대한 T 세포 반응 강화에 초점을 맞춘 치료법이 진행성 악성종양 환자에서 상당한 생존 이점을 가져올 수 있음을 입증했다(Hodi 외, N Engl J Med, 363: 711-723, 2010; Kantoff 외, N Engl J Med, 363: 411-422, 2010; Chen 외, Clin Cancer Res, 18: 6580-6587, 2012).
D-1/PD-L1 경로는 만성 감염이나 암과 같은 만성 항원 자극 상태에서 면역 반응을 일시적으로 약화시키는 면역 체크포인트 역할을 한다. PD-1은 돌연변이된 종양 항원들(신생항원들)을 인식하는 종양 침윤 CD8+ T 세포를 포함하여, 활성화되고 고갈된 T 세포에서 발현되는 억제 수용체이다. PD-L1과 PD-1의 결합은 T 세포 증식, 활성화, 사이토카인 생성 및 세포용해 활성을 억제하여, 기능적으로 비활성화되고 고갈된 T 세포 상태를 초래한다(Butte 외, Immunity, 27: 111-122. 2007; Yang 외, J Immunol, 187: 1113-1119, 2011).
항-종양 T 세포 반응을 향상시키기 위한 PD-1/PD-L1 경로의 치료 표적화는 여러 고형 종양에 걸쳐 단일 제제로서, 그리고 화학요법 및 기타 표적 제제와의 조합으로서 임상적으로 검증되었다. 암 면역요법(CIT) 제제, 특히, 면역 CPI는 최근 몇 년간 진행성 악성 종양 환자의 치료에 상당한 영향을 미쳤다.
그러나 이들 요법들의 놀라운 임상적 효능에도 불구하고 많은 환자들에게 단독요법으로는 충분히 효과가 없다는 것이 분명해졌다. 현재까지 PD-1/PD-L1 경로를 표적으로 하는 단일 제제 CPI를 사용한 치료는 간세포암종(HCC) 환자 치료에서 최소한의 활성을 보였다.
LAG-3 경로
LAG-3은 항-종양 면역 및 만성 감염 조절에 관여하는 면역 체크포인트 단백질이다. LAG-3은 활성화된 T 세포, B 세포, 자연 살해(NK) 세포 및 관용원성 형질세포양 수지상 세포(DC)의 하위집합에서 발현되고, T-조절 세포에서 항시적으로 발현된다(Huard 외, Immunogenetics, 39: 213-217, 1994). CD4와 구조적으로 유사한 LAG-3은 Ig 슈퍼패밀리의 구성원이며 주조직 적합성 복합체 클래스 II(MHC-II)에 결합한다. LAG-3과 MHC-II의 상호작용은 T 세포 증식, 활성화, 세포용해 기능 및 전염증성 사이토카인 생성을 억제한다(Goldberg and Drake, Curr Top Microbiol Immunol, 344: 269-278, 2011).
T-조절 세포에 대한 LAG-3 발현의 효과는 논란의 여지가 있다. 초기 보고서에서는 LAG-3이 T-조절 세포-매개 면역 억제를 촉진한다고 결론내렸다(Camisaschi 외, J Immunol, 184: 6545-6551, 2010). 그러나 동일한 저자의 보다 최근 보고서에서는 LAG-3가 T 조절 세포 매개 면역 억제를 제한한다고 설명한다(Zhang 외, Sci Immunol, 2eaah4569, 2017).
LAG-3의 발현은 유방암, 난소암, NSCLC, 흑색종, RCC, 전립선암 및 HCC를 포함한 다양한 종양 유형에 걸쳐 보고되었으며 불량한 예후와 관련이 있다(Matsuzaki 외, Proc Natl Acad Sci USA, 107: 7875-7800, 2010; Baitsch 외, J Clin Invest, 121: 2350-2360, 2011; Thommen 외, Cancer Immunol Res, 31344-55, 2015; He 외, Cancer Sci, 107: 1193-1197, 2016; Norstrom 외, Oncotarget, 7: 23581-23593, 2016). 단일 제제로서 그리고 다른 CPI와 조합하여 투여되는 항-LAG-3 제제의 임상 평가는 진행성 고형 종양 환자를 대상으로 한 여러 초기 단계 연구에서 진행 중이다(Long 외, Genes Cancer, 9(5-6): 176-189, 2018).
예비 데이터는 항-LAG-3 치료법이 단일 제제로서 그리고 항-PD-1 요법들과 조합시 내약성이 우수하고 안전성 프로파일이 다른 CPI와 일치함을 보여준다(Ascierto 외, Ann Onco, 28(Suppl 5): c611-612, 2017; Hong 외, J Clin Oncol, 36: 3012, 2018; Stratton 외, Society for Immunotherapy of Cancer (SITC) Abstract P325 2018).
새로운 임상 데이터는 HCC의 발병기전에서 LAG-3 경로의 역할을 강조한다. LAG-3의 발현은 말초 혈액 림프구와 비교하여 B형 간염 바이러스 감염된 HCC 환자의 종양 침윤 림프구(TIL)에서 유의하게 증가하며 이는 종양 부위의 심각한 기능적 T 세포 결함과 관련이 있다(Li 외, Immunol Lett, 150: 1116-1122, 2013). 해당 질환에 대해 선행 전신 치료를 받지 않은 HCC 환자의 경우, TIL에서 LAG-3 발현의 유사한 상승이 보고되었으며, LAG-3 발현과 바이러스 상태를 포함한 모든 질환 관련 특성 사이에는 아무런 관계가 확인되지 않았다(Yarchoan 외, Clin Cancer Res, 23: 7333-7339, 2017).
LAG-3 발현은 또한 최근 HCC 환자의 불량한 생존 결과에 대한 예후 인자(혈관 침범, 종양 크기 및 간경변에 추가로)로서 확인되었다(Guo 외, J Transl Med, 18:306, 2020).
종합하면, LAG-3의 치료 표적화는 HCC 환자 치료를 위한 매력적인 전략을 나타낼 수 있다.
VEGF 경로
VEGF-A는 내피, 종양 및 종양 관련 대식세포에 의해 생성되는 혈관신생 촉진 분자이다. 종양 혈관신생을 촉진하는 것 외에도, VEGF 경로가 여러 메커니즘을 통해 면역억제 종양 미세환경을 발휘하고 유지함으로써 암 면역 회피에 중요한 역할을 한다는 증거가 늘어나고 있다.
VEGF-A는 수지상 세포(DC)의 성숙을 억제하고, 종양 내 CD8+ T 세포에서 억제성 면역 체크포인트 분자의 발현을 촉진하며, 내피 세포에서 Fas 리간드(FasL) 발현을 유도하여 효과기 CD8 + T 세포(T 조절 세포는 아님)를 사멸시키는 능력을 획득했다(Gabrilovich 외, Nat Med, 2: 1096-1103, 1996; Huang 외, Blood, 110: 624-631, 2007; Motz 외, Nat Med, 20: 607-615, 2014; Voron 외, J Exp Med, 212: 139-148, 2015). 활성화된 내피 세포를 사용한 실험은 또한 VEGF가 종양 미세환경에서 혈관벽에 대한 림프구 부착을 감소시켜 종양 부위로의 면역 세포 모집 감소에 기여할 수 있음을 시사한다(Bouzin 외, J Immunol, 178: 1505-1511, 2007). 또한, VEGF는 일반적으로 상처 치유에 관여하는 M2 분극 상태를 갖는 종양 미세환경으로 대식세포를 모집한다. 이러한 M2 종양 관련 대식세포는 궁극적으로 면역억제성 미세환경을 확립하고 유지하는 데 도움을 준다 (Chen and Mellman, Immunity, 39: 1-10, 2013).
베바시주맙과 같은 제제를 사용하여 VEGF 경로를 표적하는 것은 여러 진행성 악성 종양이 있는 환자에서 입증된 항-종양 활성에 의해 임상적으로 검증되었다. 그러나 HCC 환자에게 단일 제제로 투여되었을 때 베바시주맙은 최소한의 활성만을 나타냈다(Siegel 외, J Clin Oncol, 26: 2992-2998, 2008; Boige 외, Oncologist, 17: 1063-1072, 2012).
항-PD-1/LAG-3 이중특이성 항체와 항-VEGF 제제의 조합 치료
지속적인 임상적 이점은 단일 제제 PD-L1/PD-1 억제제로 치료받은 소수의 환자에게만 국한된다. 고형암 환자의 결과를 개선하려면 항-PD-L1/PD-1 요법에 대한 내성 메커니즘을 표적으로 하는 치료법이 필요하다. 강력한 과학적 근거와 새로운 임상 데이터는 조합된 PD-1, LAG-3 및 VEGF 억제가 수많은 종양 유형들에서 임상적으로 유익할 수 있음을 시사한다.
항-VEGF 제제는 종양 혈관구조의 정상화를 촉진하여 치료제의 접근을 증가시킨다(Jain, Nat Med, 7: 987-989, 2001). 또한, 베바시주맙은 DC의 항원 제시 능력을 회복 및/또는 유지할 수 있어 종양 내 T 세포 침윤이 강화된다(Oelkrug and Ramage, Clin Exp Immunol, 178: 1-8, 2014; Wallin 외, Nat Commun, 7: 12624, 2016). 항-VEGF-A의 투여는 종양 내피 FasL 발현을 약화시키고 종양 거부 CD8+T 세포의 유입을 상당히 증가시켜 종양 성장 억제를 유도하는 것으로 나타났다(Motz 외, Nat Med, 20: 607-615, 2014).
항-VEGF 요법은 또한 골수 유래 억제 세포의 빈도를 감소시키고 억제성 사이토카인의 생성을 감소시킬 수 있다(Roland 외, PLoS One, 4: e7669, 2009). 또한, VEGF-A는 CD8+ T 세포에서 PD-1, 그리고 TIM-3 및 LAG-3을 포함한 기타 억제성 면역 체크포인트 단백질의 발현을 유도하는 것으로 나타났으며 이는 VEGF 억제에 의해 역전될 수 있다(Voron 외, J Exp Med, 212: 139-148, 2015).
베바시주맙의 면역조절 효과는 CD8+ T 세포 모집을 증가시키고 종양 내 면역억제를 완화시켜, 면역요법의 효과를 높일 것으로 예상된다. 실제로, 임상 데이터는 PD-L1/PD-1 경로 차단의 맥락에서 항혈관신생 및 면역조절의 유익한 효과를 입증했다. 초기 단계 연구에서는 항-PD-1 요법인 니볼루맙과 펨브롤리주맙을 다양한 항-혈관신생제와 조합하여 치료하면 전이성 요로상피암종, RCC, 난소암 및 자궁내막암 환자에서 반응을 유도할 수 있음이 입증되었다(Apolo 외, J Clin Oncol, 35(Suppl. 6): 293, 2017; Lee 외, Ann Oncol, 28(Suppl. 5): v295-v329, 2017; Makker 외, J Clin Oncol, 35(Suppl 15): 5598, 2017; Liu 외, JAMA Oncol, 5: 1731-1738, 2019; Dudek 외, J Clin Oncol, 38: 1138-1145, 2020). 항-PD-L1 요법인 아테졸리주맙 및 베바시주맙을 사용한 병용 치료의 활성은 NSCLC, RCC 및 HCC 환자를 대상으로 한 다수의 대규모 무작위 배정 III상 임상 연구에서도 입증되었다(Socinski 외, N Engl J Med, 378: 2288-2301, 2018; Rini 외, Lancet, 393: 2404-2415, 2019; Finn 외, N Engl J Med, 382: 1894-1905, 2020). PD-L1/PD-1 차단에 대한 내성으로 인해 효과기 T 세포 표면에 다중 공동 억제 면역 체크포인트가 발현될 수 있다. LAG-3은 종종 종양 침윤 림프구(TIL)에서 PD-1과 공동 발현되며, PD-1 및 LAG-3의 이중 차단은 비임상 모델에서 CD8+ T 세포 효과기 기능을 강화하고 항-종양 면역을 강화시키는 것으로 나타났다. 결장, 섬유육종 또는 난소 종양이 있는 마우스에서 이들 두 수용체를 차단하면 동물의 약 80%에서 종양 관해가 발생한 반면, 단일 제제를 사용한 경우에는 10 내지 40%의 종양 관해가 나타났다(Woo 외, Cancer Res, 72: 917-927, 2012; Huang 외, Oncotarget, 6: 27359-27377, 2015). 난소암 환자의 TIL은 PD-1 및 LAG-3을 공동 발현하는 항원 특이적 CD8+ T 세포가 하나의 체크포인트 분자를 발현하는 CD8+ T 세포에 비해 동족 항원 자극에 반응하는 능력이 더 크게 손상됨을 보여주었다(Matsuzaki 외, Proc Natl Acad Sci USA, 107: 7875-7880, 2010). NSCLC 환자의 경우, TIL에 대한 LAG-3의 과발현은 PD-1/PD-L1 발현과 상관관계가 있었고 더 높은 재발 위험 및 불량한 생존 결과와 연관되었다(He 외, J Thorac Oncol, 12: 814-823, 2017). 치료받지 않은 HCC 환자의 임상 샘플에서 대다수는 배경 간 조직에서의 발현과 비교하여 TIL 중에서 더 높은 발현을 갖는 LAG-3 및 PD-1에 대한 공동 염색을 보여주었다(Yarchoan 외, Clin Cancer Res, 23: 7333-7339, 2017). 위에서 설명한 데이터를 바탕으로, bsAb RO7247669를 사용한 PD-1 및 LAG-3 경로의 동시 표적화가 베바시주맙의 면역조절 효과와 조합되어 항-종양 면역 반응을 증가시켜, 결과적으로 HCC 환자의 임상적 이점은 개선되고 더 오래 지속될 수 있게 된다.
기타 실시형태
전술한 발명을 이해를 명확히 하기 위해 예시 및 실시예를 예로 들어 상세히 설명하였으나, 이러한 예시 및 실시예는 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 해석되어서는 안된다.

Claims (129)

  1. 암을 갖는 대상체를 치료하는 방법이며,
    PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및
    LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인
    을 포함하는, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체를 1회 이상의 투여 주기로 대상체에게 투여하는 단계를 포함하고,
    3주마다 600 mg 고정 용량의 이중특이성 항체를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 방법.
  2. 제1항에 있어서, 암은 고형 종양인 방법.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 암은 국소 진행성 또는 전이성인 방법.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 암은 피부암, 간암, 폐암, 신장암, 방광암, 유방암 또는 식도암인 방법.
  5. 제4항에 있어서, 피부암은 흑색종인 방법.
  6. 제4항 또는 제5항에 있어서, 피부암은 이전에 치료받지 않은 절제불가능 또는 전이성 흑색종인 방법.
  7. 제5항에 있어서,
    흑색종은
    (a) 측정 가능한 림프절 전이가 있는 III기 흑색종,
    (b) 절제불가능 III기 흑색종, 또는
    (c) IV기 흑색종이고,
    선택적으로 흑색종은 점막 흑색종 또는 포도막 흑색종이 아닌 것인 방법.
  8. 제5항에 있어서, 간암은 간세포 암종(HCC)인 방법.
  9. 제5항에 있어서, 폐암은 비소세포 폐암(NSCLC)인 방법.
  10. 제5항에 있어서, 신장암은 신장 세포 암종(RCC)인 방법.
  11. 제5항에 있어서, 방광암은 전이성 요로상피 암종(mUC)인 방법.
  12. 제5항에 있어서, 유방암은 삼중 음성 유방암(TNBC)인 방법.
  13. 제5항에 있어서, 식도암은 식도 편평 세포 암종(ESCC)인 방법.
  14. 흑색종을 갖는 대상체를 치료하는 방법이며,
    PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및
    LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인
    을 포함하는, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체를 1회 이상의 투여 주기로 대상체에게 투여하는 단계를 포함하고,
    3주마다 600 mg 고정 용량의 이중특이성 항체를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하고,
    흑색종은
    (a) 절제불가능 III기 흑색종, 또는
    (b) IV기 흑색종인 방법.
  15. 제14항에 있어서, 대상체는 안구 흑색종을 갖지 않는 것인 방법.
  16. 간암을 갖는 대상체를 치료하는 방법이며,
    PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및
    LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인
    을 포함하는, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체를 1회 이상의 투여 주기로 대상체에게 투여하는 단계를 포함하고,
    3주마다 600 mg 고정 용량의 이중특이성 항체를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 방법.
  17. 제16항에 있어서, 간암은 간세포 암종(HCC)인 방법.
  18. 제17항에 있어서, HCC는 국소 진행성, 전이성 및/또는 절제불가능인 방법.
  19. 제16항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체는 이전에 전신 항암 요법을 받은 적이 없는 것인 방법.
  20. 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 1회 이상의 투여 주기 각각의 길이는 21일인 방법.
  21. 제20항에 있어서, 1회 이상의 투여 주기 각각의 1일차에 대상체에게 상기 이중특이성 항체를 투여하는 단계를 포함하는 방법.
  22. 제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체에게 상기 이중특이성 항체를 정맥내 투여하는 단계를 포함하는 방법.
  23. 제1항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체에게 3주마다 약 15 mg/kg 용량의 베바시주맙을 투여하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
  24. 제23항에 있어서,
    1회 이상의 투여 주기 각각의 길이는 21일이고,
    상기 방법은 1회 이상의 투여 주기 각각의 1일차에 대상체에게 베바시주맙을 투여하는 단계를 포함하는 방법.
  25. 제23항 또는 제24항에 있어서, 베바시주맙은 정맥내 투여되는 것인 방법.
  26. 제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체는 이전에 전이성 또는 절제불가능한 질환에 대해 치료받은 적이 없는 것인 방법.
  27. 제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체는 이전에 면역조절제를 포함하는 항암 요법으로 치료받은 적이 없는 것인 방법.
  28. 제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체는 이전에 항-LAG3 요법으로 치료받은 적이 없는 것인 방법.
  29. 제1항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는
    (i) 서열번호 25의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1 서열,
    (ii) 아미노산 서열 GGR을 포함하는 HVR-H2 서열, 및
    (iii) 서열번호 26의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3 서열
    을 포함하는 VH 도메인, 및
    (i) 서열번호 27의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1 서열,
    (ii) 아미노산 서열 RSS을 포함하는 HVR-L2 서열, 및
    (iii) 서열번호 28의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3 서열
    을 포함하는 VL 도메인
    을 포함하는, PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인을 포함하는 것인 방법.
  30. 제29항에 있어서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는
    (i) 서열번호 31의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1 서열,
    (ii) 서열번호 32의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2 서열, 및
    (iii) 서열번호 33의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3 서열
    을 포함하는 VH 도메인, 및
    (i) 서열번호 34의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1 서열,
    (ii) 서열번호 35의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2 서열, 및
    (iii) 서열번호 36의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3 서열
    을 포함하는 VL 도메인
    을 포함하는, LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하는 것인 방법.
  31. 제29항 또는 제30항에 있어서,
    제1 항원 결합 도메인은
    서열번호 29의 아미노산 서열을 포함하는 VH 도메인 및
    서열번호 30의 아미노산 서열을 포함하는 VL 도메인
    을 포함하고,
    제2 항원 결합 도메인은
    서열번호 37의 아미노산 서열을 포함하는 VH 도메인 및
    서열번호 38의 아미노산 서열을 포함하는 VL 도메인
    을 포함하는 것인 방법.
  32. 제29항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, 이중특이성 항체는 전장 항체인 방법.
  33. 제32항에 있어서,
    PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는 IgG인 Fc 도메인을 포함하고,
    선택적으로 IgG Fc 도메인은 IgG1 Fc 도메인 또는 IgG4 Fc 도메인인 방법.
  34. 제33항에 있어서,
    Fc 도메인은 Fc 수용체에 대한 결합을 감소시키는 하나 이상의 아미노산 치환을 포함하고,
    선택적으로 Fc 수용체는 Fcγ수용체인 방법.
  35. 제29항 내지 제34항 중 어느 한 항에 있어서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는
    (a) 아미노산 돌연변이 L234A, L235A 및 P329G (Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링)를 갖는 인간 IgG1 하위분류의 Fc 도메인, 및/또는
    (b) Fc 도메인의 제1 및 제2 서브유닛의 회합을 촉진하는 변형을 포함하는 Fc 도메인
    을 포함하는 것인 방법.
  36. 제33항 내지 제35항 중 어느 한 항에 있어서,
    Fc 도메인의 제1 서브유닛은 아미노산 치환 S354C 및 T366W (Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링)를 포함하고,
    Fc 도메인의 제2 서브유닛은 아미노산 치환 Y349C, T366S 및 Y407V (Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링)를 포함하는 것인 방법.
  37. 제29항 내지 제36항 중 어느 한 항에 있어서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는
    Fc 도메인,
    제1 항원 결합 도메인을 포함하는 제1 Fab 단편, 및
    제2 항원 결합 도메인을 포함하는 제2 Fab 단편
    을 포함하는 것인 방법.
  38. 제37항에 있어서,
    PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체의 Fab 단편들 중 하나에서 가변 도메인 VL 및 VH는, VH 도메인이 경쇄의 일부이고 VL 도메인이 중쇄의 일부가 되도록 서로 대체되며,
    선택적으로 제1 Fab 단편에서 가변 도메인 VL 및 VH가 서로 대체되는 것인 방법.
  39. 제37항 또는 제38항에 있어서,
    Fab 단편들 중 하나의 불변 도메인 CL에서 위치 124의 아미노산은 리신(K), 아르기닌(R) 또는 히스티딘(H)에 의해 독립적으로 치환되고 (Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링),
    불변 도메인 CH1에서 위치 147 및 213의 아미노산은 글루탐산(E) 또는 아스파르트산(D)에 의해 독립적으로 치환되고 (Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링),
    선택적으로,
    제2 Fab 단편의 불변 도메인 CL에서 위치 124의 아미노산은 리신(K), 아르기닌(R) 또는 히스티딘(H)에 의해 독립적으로 치환되고 (Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링),
    불변 도메인 CH1에서 위치 147 및 213의 아미노산은 글루탐산(E) 또는 아스파르트산(D)에 의해 독립적으로 치환되는 (Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링) 것인 방법.
  40. 제29항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, 이중특이성 항체는
    서열번호 39의 서열에 적어도 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 제1 중쇄,
    서열번호 40의 서열에 적어도 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 제1 경쇄,
    서열번호 41의 서열에 적어도 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 제2 중쇄, 및
    서열번호 42의 서열에 적어도 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 제2 경쇄
    를 포함하는 것인 방법.
  41. 제40항에 있어서, 이중특이성 항체는
    서열번호 39의 아미노산 서열을 포함하는 제1 중쇄,
    서열번호 40의 아미노산 서열을 포함하는 제1 경쇄,
    서열번호 41의 아미노산 서열을 포함하는 제2 중쇄, 및
    서열번호 42의 아미노산 서열을 포함하는 제2 경쇄
    를 포함하는 것인 방법.
  42. 제2항 내지 제41항 중 어느 한 항에 있어서, 이중특이성 항체가 종양에서 적어도 90%의 LAG3 수용체 점유율(RO)을 달성하는 것인 방법.
  43. 제1항 내지 제42항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체는 인간인 방법.
  44. 암을 갖는 대상체를 치료하는 방법에 사용하기 위한, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체이며,
    PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및
    LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인
    을 포함하고,
    상기 방법은 대상체에게 3주마다 600 mg의 고정 용량의 이중특이성 항체를 투여하는 단계를 포함하는 것인 이중특이성 항체.
  45. 제44항에 있어서, 암은 고형 종양인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  46. 제44항 또는 제45항에 있어서, 암은 국소 진행성 또는 전이성인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  47. 제44항 내지 제46항 중 어느 한 항에 있어서, 암은 피부암, 간암, 폐암, 신장암, 방광암, 유방암 또는 식도암인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  48. 제47항에 있어서, 피부암은 흑색종인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  49. 제47항 또는 제48항에 있어서, 피부암은 이전에 치료받지 않은 절제불가능 또는 전이성 흑색종인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  50. 제48항에 있어서,
    흑색종은
    (a) 측정 가능한 림프절 전이가 있는 III기 흑색종,
    (b) 절제불가능 III기 흑색종, 또는
    (c) IV기 흑색종이고,
    선택적으로 흑색종은 점막 흑색종 또는 포도막 흑색종이 아닌 것인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  51. 제47항에 있어서, 간암은 간세포 암종(HCC)인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  52. 제47항에 있어서, 폐암은 비소세포 폐암(NSCLC)인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  53. 제47항에 있어서, 신장암은 신장 세포 암종(RCC)인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  54. 제47항에 있어서, 방광암은 전이성 요로상피 암종(mUC)인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  55. 제47항에 있어서, 유방암은 삼중 음성 유방암(TNBC)인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  56. 제47항에 있어서, 식도암은 식도 편평 세포 암종(ESCC)인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  57. 흑색종을 갖는 대상체를 치료하는 방법에 사용하기 위한, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체이며,
    PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및
    LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인
    을 포함하고,
    상기 방법은 대상체에게 3주마다 600 mg의 고정 용량의 이중특이성 항체를 투여하는 단계를 포함하고,
    흑색종은
    (a) 절제불가능 III기 흑색종, 또는
    (b) IV기 흑색종인 이중특이성 항체.
  58. 제57항에 있어서, 환자는 안구 흑색종을 갖지 않는 것인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  59. 간암을 갖는 대상체를 치료하는 방법에 사용하기 위한, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체이며,
    PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및
    LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인
    을 포함하고,
    상기 방법은 대상체에게 3주마다 600 mg의 고정 용량의 이중특이성 항체를 투여하는 단계를 포함하는 것인 이중특이성 항체.
  60. 제59항에 있어서, 간암은 HCC인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  61. 제60항에 있어서, HCC는 국소 진행성, 전이성 및/또는 절제불가능인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  62. 제59항 내지 제61항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체는 이전에 전신 항암 요법을 받은 적이 없는 것인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  63. 제44항 내지 제62항 중 어느 한 항에 있어서, 1회 이상의 투여 주기 각각의 길이는 21일인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  64. 제63항에 있어서, 1회 이상의 투여 주기 각각의 1일차에 대상체에게 상기 이중특이성 항체를 투여하는 단계를 포함하는 것인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  65. 제44항 내지 제64항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방법은 대상체에게 상기 이중특이성 항체를 정맥내 투여하는 단계를 포함하는 것인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  66. 제44항 내지 제65항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방법은 대상체에게 3주마다 약 15 mg/kg 용량의 베바시주맙을 투여하는 단계를 추가로 포함하는 것인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  67. 제66항에 있어서,
    1회 이상의 투여 주기 각각의 길이는 21일이고,
    상기 방법은 1회 이상의 투여 주기 각각의 1일차에 대상체에게 베바시주맙을 투여하는 단계를 포함하는 것인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  68. 제66항 또는 제67항에 있어서, 베바시주맙은 정맥내 투여되는 것인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  69. 제44항 내지 제68항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체는 이전에 전이성 또는 절제불가능한 질환에 대해 치료받은 적이 없는 것인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  70. 제44항 내지 제69항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체는 이전에 면역조절제를 포함하는 항암 요법으로 치료받은 적이 없는 것인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  71. 제44항 내지 제70항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체는 이전에 항-LAG3 요법으로 치료받은 적이 없는 것인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  72. 제44항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는
    (i) 서열번호 25의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1 서열,
    (ii) 아미노산 서열 GGR을 포함하는 HVR-H2 서열, 및
    (iii) 서열번호 26의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3 서열
    을 포함하는 VH 도메인, 및
    (i) 서열번호 27의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1 서열,
    (ii) 아미노산 서열 RSS을 포함하는 HVR-L2 서열, 및
    (iii) 서열번호 28의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3 서열
    을 포함하는 VL 도메인
    을 포함하는, PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인을 포함하는 것인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  73. 제72항에 있어서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는
    (i) 서열번호 31의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1 서열,
    (ii) 서열번호 32의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2 서열, 및
    (iii) 서열번호 33의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3 서열
    을 포함하는 VH 도메인, 및
    (i) 서열번호 34의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1 서열,
    (ii) 서열번호 35의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2 서열, 및
    (iii) 서열번호 36의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3 서열
    을 포함하는 VL 도메인
    을 포함하는, LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하는 것인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  74. 제72항 또는 제73항에 있어서,
    제1 항원 결합 도메인은
    서열번호 29의 아미노산 서열을 포함하는 VH 도메인 및
    서열번호 30의 아미노산 서열을 포함하는 VL 도메인
    을 포함하고,
    제2 항원 결합 도메인은
    서열번호 37의 아미노산 서열을 포함하는 VH 도메인 및
    서열번호 38의 아미노산 서열을 포함하는 VL 도메인
    을 포함하는 것인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  75. 제72항 내지 제74항 중 어느 한 항에 있어서, 이중특이성 항체는 전장 항체인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  76. 제75항에 있어서,
    PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는 IgG인 Fc 도메인을 포함하고,
    선택적으로 IgG Fc 도메인은 IgG1 Fc 도메인 또는 IgG4 Fc 도메인인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  77. 제76항에 있어서,
    Fc 도메인은 Fc 수용체에 대한 결합을 감소시키는 하나 이상의 아미노산 치환을 포함하고,
    선택적으로 Fc 수용체는 Fcγ수용체인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  78. 제72항 내지 제77항 중 어느 한 항에 있어서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는
    (a) 아미노산 돌연변이 L234A, L235A 및 P329G (Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링)를 갖는 인간 IgG1 하위분류의 Fc 도메인, 및/또는
    (b) Fc 도메인의 제1 및 제2 서브유닛의 회합을 촉진하는 변형을 포함하는 Fc 도메인
    을 포함하는 것인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  79. 제76항 내지 제78항 중 어느 한 항에 있어서,
    Fc 도메인의 제1 서브유닛은 아미노산 치환 S354C 및 T366W (Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링)를 포함하고,
    Fc 도메인의 제2 서브유닛은 아미노산 치환 Y349C, T366S 및 Y407V (Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링)를 포함하는 것인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  80. 제72항 내지 제79항 중 어느 한 항에 있어서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는
    Fc 도메인,
    제1 항원 결합 도메인을 포함하는 제1 Fab 단편, 및
    제2 항원 결합 도메인을 포함하는 제2 Fab 단편
    을 포함하는 것인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  81. 제80항에 있어서,
    PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체의 Fab 단편들 중 하나에서 가변 도메인 VL 및 VH는, VH 도메인이 경쇄의 일부이고 VL 도메인이 중쇄의 일부가 되도록 서로 대체되며,
    선택적으로 제1 Fab 단편에서 가변 도메인 VL 및 VH가 서로 대체되는 것인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  82. 제80항 또는 제81항에 있어서,
    Fab 단편들 중 하나의 불변 도메인 CL에서 위치 124의 아미노산은 리신(K), 아르기닌(R) 또는 히스티딘(H)에 의해 독립적으로 치환되고 (Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링),
    불변 도메인 CH1에서 위치 147 및 213의 아미노산은 글루탐산(E) 또는 아스파르트산(D)에 의해 독립적으로 치환되고 (Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링),
    선택적으로,
    제2 Fab 단편의 불변 도메인 CL에서 위치 124의 아미노산은 리신(K), 아르기닌(R) 또는 히스티딘(H)에 의해 독립적으로 치환되고 (Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링),
    불변 도메인 CH1에서 위치 147 및 213의 아미노산은 글루탐산(E) 또는 아스파르트산(D)에 의해 독립적으로 치환되는 (Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링) 것인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  83. 제44항 내지 제82항 중 어느 한 항에 있어서, 이중특이성 항체는
    서열번호 39의 서열에 적어도 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 제1 중쇄,
    서열번호 40의 서열에 적어도 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 제1 경쇄,
    서열번호 41의 서열에 적어도 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 제2 중쇄, 및
    서열번호 42의 서열에 적어도 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 제2 경쇄
    를 포함하는 것인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  84. 제83항에 있어서, 이중특이성 항체는
    서열번호 39의 아미노산 서열을 포함하는 제1 중쇄,
    서열번호 40의 아미노산 서열을 포함하는 제1 경쇄,
    서열번호 41의 아미노산 서열을 포함하는 제2 중쇄, 및
    서열번호 42의 아미노산 서열을 포함하는 제2 경쇄
    를 포함하는 것인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  85. 제44항 내지 제84항 중 어느 한 항에 있어서, 이중특이성 항체가 종양에서 적어도 90%의 LAG3 수용체 점유율(RO)를 달성하는 것인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  86. 제44항 내지 제85항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체는 인간인, 상기 방법에 사용하기 위한 이중특이성 항체.
  87. 암을 갖는 대상체를 치료하기 위한 약제의 제조에 있어서 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체의 용도로서,
    이러한 이중특이성 항체는
    PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및
    LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인
    을 포함하고,
    이러한 이중특이성 항체는 대상체에게 3주마다 600 mg의 고정 용량으로 투여되는 것인 용도.
  88. 제87항에 있어서, 암은 고형 종양인 용도.
  89. 제87항 또는 제88항에 있어서, 암은 국소 진행성 또는 전이성인 용도.
  90. 제87항 내지 제89항 중 어느 한 항에 있어서, 암은 피부암, 간암, 폐암, 신장암, 방광암, 유방암 또는 식도암인 용도.
  91. 제90항에 있어서, 피부암은 흑색종인 용도.
  92. 제90항 또는 제91항에 있어서, 피부암은 이전에 치료받지 않은 절제불가능 또는 전이성 흑색종인 용도.
  93. 제91항에 있어서,
    흑색종은
    (a) 측정 가능한 림프절 전이가 있는 III기 흑색종,
    (b) 절제불가능 III기 흑색종, 또는
    (c) IV기 흑색종이고,
    선택적으로 흑색종은 점막 흑색종 또는 포도막 흑색종이 아닌 것인 용도.
  94. 제90항에 있어서, 간암은 간세포 암종(HCC)인 용도.
  95. 제90항에 있어서, 폐암은 비소세포 폐암 (NSCLC)인 용도.
  96. 제90항에 있어서, 신장암은 신장 세포 암종(RCC)인 용도.
  97. 제90항에 있어서, 방광암은 전이성 요로상피 암종(mUC)인 용도.
  98. 제90항에 있어서, 유방암은 삼중 음성 유방암(TNBC)인 용도.
  99. 제90항에 있어서, 식도암은 식도 편평 세포 암종(ESCC)인 용도.
  100. 흑색종을 갖는 대상체를 치료하기 위한 약제의 제조에 있어서 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체의 용도로서,
    이러한 이중특이성 항체는
    PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및
    LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인
    을 포함하고,
    이러한 이중특이성 항체는 3주마다 600 mg의 고정 용량으로 대상체에게 투여되고,
    흑색종은
    (a) 절제불가능 III기 흑색종, 또는
    (b) IV기 흑색종인 용도.
  101. 제100항에 있어서, 대상체는 안구 흑색종을 갖지 않는 것인 용도.
  102. 간암을 갖는 대상체를 치료하기 위한 약제의 제조에 있어서 PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체의 용도로서,
    이러한 이중특이성 항체는
    PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인 및
    LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인
    을 포함하고,
    이러한 이중특이성 항체는 3주마다 600 mg의 고정 용량으로 대상체에게 투여되는 것인 용도.
  103. 제102항에 있어서, 간암은 HCC인 용도.
  104. 제103항에 있어서, HCC는 국소 진행성, 전이성 및/또는 절제불가능인 용도.
  105. 제102항 내지 제104항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체는 이전에 전신 항암 요법을 받은 적이 없는 것인 용도.
  106. 제87항 내지 제105항 중 어느 한 항에 있어서, 1회 이상의 투여 주기 각각의 길이는 21일인 용도.
  107. 제106항에 있어서, 이중특이성 항체는 1회 이상의 투여 주기 각각의 1일차에 대상체에게 투여되는 것인 용도.
  108. 제87항 내지 제107항 중 어느 한 항에 있어서, 이중특이성 항체는 대상체에게 정맥내 투여되는 것인 용도.
  109. 제87항 내지 제108항 중 어느 한 항에 있어서, 베바시주맙은 3주마다 약 15 mg/kg의 용량으로 대상체에게 투여되는 것인 용도.
  110. 제109항에 있어서,
    1회 이상의 투여 주기 각각의 길이는 21일이고,
    베바시주맙은 1회 이상의 투여 주기 각각의 1일차에 대상체에게 투여되는 것인 용도.
  111. 제109항 또는 제110항에 있어서, 베바시주맙은 정맥내 투여되는 것인 용도.
  112. 제87항 내지 제111항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체는 이전에 전이성 또는 절제불가능한 질환에 대해 치료받은 적이 없는 것인 용도.
  113. 제87항 내지 제111항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체는 이전에 면역조절제를 포함하는 항암 요법으로 치료받은 적이 없는 것인 용도.
  114. 제87항 내지 제111항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체는 이전에 항-LAG3 요법으로 치료받은 적이 없는 것인 용도.
  115. 제87항 내지 제114항 중 어느 한 항에 있어서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는
    (i) 서열번호 25의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1 서열,
    (ii) 아미노산 서열 GGR을 포함하는 HVR-H2 서열, 및
    (iii) 서열번호 26의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3 서열
    을 포함하는 VH 도메인, 및
    (i) 서열번호 27의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1 서열,
    (ii) 아미노산 서열 RSS을 포함하는 HVR-L2 서열, 및
    (iii) 서열번호 28의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3 서열
    을 포함하는 VL 도메인
    을 포함하는, PD-1에 특이적으로 결합하는 제1 항원 결합 도메인을 포함하는 것인 용도.
  116. 제115항에 있어서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는
    (i) 서열번호 31의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1 서열,
    (ii) 서열번호 32의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2 서열, 및
    (iii) 서열번호 33의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3 서열
    을 포함하는 VH 도메인, 및
    (i) 서열번호 34의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1 서열,
    (ii) 서열번호 35의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2 서열, 및
    (iii) 서열번호 36의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3 서열
    을 포함하는 VL 도메인
    을 포함하는, LAG3에 특이적으로 결합하는 제2 항원 결합 도메인을 포함하는 것인 용도.
  117. 제115항 또는 제116항에 있어서,
    제1 항원 결합 도메인은
    서열번호 29의 아미노산 서열을 포함하는 VH 도메인 및
    서열번호 30의 아미노산 서열을 포함하는 VL 도메인
    을 포함하고,
    제2 항원 결합 도메인은
    서열번호 37의 아미노산 서열을 포함하는 VH 도메인 및
    서열번호 38의 아미노산 서열을 포함하는 VL 도메인
    을 포함하는 것인 용도.
  118. 제115항 내지 제117항 중 어느 한 항에 있어서, 이중특이성 항체는 전장 항체인 용도.
  119. 제118항에 있어서,
    PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는 IgG인 Fc 도메인을 포함하고,
    선택적으로 IgG Fc 도메인은 IgG1 Fc 도메인 또는 IgG4 Fc 도메인인 용도.
  120. 제119항에 있어서,
    Fc 도메인은 Fc 수용체에 대한 결합을 감소시키는 하나 이상의 아미노산 치환을 포함하고,
    선택적으로 Fc 수용체는 Fcγ수용체인 용도.
  121. 제115항 내지 제120항 중 어느 한 항에 있어서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는
    (a) 아미노산 돌연변이 L234A, L235A 및 P329G (Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링)를 갖는 인간 IgG1 하위분류의 Fc 도메인, 및/또는
    (b) Fc 도메인의 제1 및 제2 서브유닛의 회합을 촉진하는 변형을 포함하는 Fc 도메인
    을 포함하는 것인 용도.
  122. 제119항 내지 제121항 중 어느 한 항에 있어서,
    Fc 도메인의 제1 서브유닛은 아미노산 치환 S354C 및 T366W (Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링)를 포함하고,
    Fc 도메인의 제2 서브유닛은 아미노산 치환 Y349C, T366S 및 Y407V (Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링)를 포함하는 것인 용도.
  123. 제115항 내지 제122항 중 어느 한 항에 있어서, PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체는
    Fc 도메인,
    제1 항원 결합 도메인을 포함하는 제1 Fab 단편, 및
    제2 항원 결합 도메인을 포함하는 제2 Fab 단편
    을 포함하는 것인 용도.
  124. 제123항에 있어서,
    PD-1 및 LAG3을 표적으로 하는 이중특이성 항체의 Fab 단편들 중 하나에서 가변 도메인 VL 및 VH는, VH 도메인이 경쇄의 일부이고 VL 도메인이 중쇄의 일부가 되도록 서로 대체되며,
    선택적으로 제1 Fab 단편에서 가변 도메인 VL 및 VH가 서로 대체되는 것인 용도.
  125. 제123항 또는 제124항에 있어서,
    Fab 단편들 중 하나의 불변 도메인 CL에서 위치 124의 아미노산은 리신(K), 아르기닌(R) 또는 히스티딘(H)에 의해 독립적으로 치환되고 (Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링),
    불변 도메인 CH1에서 위치 147 및 213의 아미노산은 글루탐산(E) 또는 아스파르트산(D)에 의해 독립적으로 치환되고 (Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링),
    선택적으로,
    제2 Fab 단편의 불변 도메인 CL에서 위치 124의 아미노산은 리신(K), 아르기닌(R) 또는 히스티딘(H)에 의해 독립적으로 치환되고 (Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링),
    불변 도메인 CH1에서 위치 147 및 213의 아미노산은 글루탐산(E) 또는 아스파르트산(D)에 의해 독립적으로 치환되는 (Kabat EU 인덱스에 따른 넘버링) 것인 용도.
  126. 제115항 내지 제125항 중 어느 한 항에 있어서, 이중특이성 항체는
    서열번호 39의 서열에 적어도 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 제1 중쇄,
    서열번호 40의 서열에 적어도 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 제1 경쇄,
    서열번호 41의 서열에 적어도 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 제2 중쇄, 및
    서열번호 42의 서열에 적어도 95% 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 제2 경쇄
    를 포함하는 것인 용도.
  127. 제126항에 있어서, 이중특이성 항체는
    서열번호 39의 아미노산 서열을 포함하는 제1 중쇄,
    서열번호 40의 아미노산 서열을 포함하는 제1 경쇄,
    서열번호 41의 아미노산 서열을 포함하는 제2 중쇄, 및
    서열번호 42의 아미노산 서열을 포함하는 제2 경쇄
    를 포함하는 것인 용도.
  128. 제87항 내지 제127항 중 어느 한 항에 있어서, 이중특이성 항체가 종양에서 적어도 90%의 LAG3 수용체 점유율(RO)을 달성하는 것인 용도.
  129. 제87항 내지 제128항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체는 인간인 용도.
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