KR100689923B1 - 트롬빈 억제제 - Google Patents

Abstract

본 발명은 화학식 A-B-D-E-F(식 중, A, B, D, E 및 F는 명세서에 주어진 의미를 가진다)의 화합물 및 그의 제법에 관한 것이다. 이들 신규한 화합물은 약제의 제조에 적합하다.

트롬빈 억제제, 칼리크레인, 키니노제나제, 세린 프로테아제 억제제, 비염, 천식, 관절염, 췌장염, 두드러기, 혈전증, 혈전색전증

Description

트롬빈 억제제{Thrombin Inhibitors}

본 발명은 신규한 5원의 헤테로시클릭 아미딘, 그의 제법 및 트립신 유사 세린 프로테아제, 특히 트롬빈 및 칼리크레인과 같은 키니노제나제의 경쟁적 억제제로서의 그의 용도에 관한 것이다. 본 발명은 또한 활성 성분으로 이 화합물을 함유하는 제약 조성물 및 이 화합물의 트롬빈 억제제, 항응고제 및 항염증제로서의 용도에 관한 것이다.

트롬빈은 세린 프로테아제군에 속하며 혈액 응고 캐스케이드에서 마지막 효소로서 중요한 역할을 한다. 내재적 및 외재적 응고 캐스케이드 모두가 다수의 증폭 단계를 통해 프로트롬빈으로부터 트롬빈을 형성한다. 이어서, 피브리노겐이 트롬빈 촉매하에 피브린으로 절단됨으로써 혈액 응고 및 혈소판 응집이 개시되며, 차례로 혈소판 인자 3과 응고 인자 XIII과의 결합 및 다수의 고활성 매개자로 인해 트롬빈 형성이 증진된다.

트롬빈의 형성 및 작용은 백색 동맥 및 적색 정맥 트롬빈 모두의 발생에서 중심을 이루며 따라서 잠재적으로 약물에 대한 공격의 효과적인 포인트이다. 트롬빈 억제제는 헤파린과는 대조적으로 보조인자와 독립적으로 유리 트롬빈의 효과 및 혈소판에 결합된 유리 트롬빈의 효과를 동시에 완전히 억제할 수 있다. 트롬빈 억제제는 경피 경관 관상 혈관성형술(PTCA) 및 세포용해 이후의 급성 혈전색전증 발병을 예방할 수 있고, 체외 순환(심폐기. 혈액 투석)에서 항응고제로 작용할 수 있으며, 또한 일반적으로 예를 들어 외과 수술 이후의 혈전증의 예방에도 사용할 수 있다.

합성 아르기닌 유도체가 프로테아제 트롬빈의 활성 세린 잔사와 상호작용하여 트롬빈의 효소적 활성에 영향을 미치는 것으로 알려져 있다. N-말단의 아미노산이 D 형태인 Phe-Pro-Arg를 기본으로 하는 펩타이드는 특히 이로운 것으로 판명되었다. D-Phe-Pro-Arg 이소프로필 에스테르는 경쟁적 트롬빈 억제제로 기술되어 있다(C. Mattson 등, Folia Haematol, 109 (1983) 43-51).

C-말단에서 아르기닌의 알데히드로의 유도는 억제 효과의 향상을 유발한다. 따라서 헤미아세탈에서 "활성" 세린의 히드록실기를 결합시킬 수 있는 다수의 아르기날이 기술되어 있다(EP 제185390호, 제479489호, 제526877호, 제542525호, WO 제93/15756호, 제93/18060호).

마찬가지로, 펩타이드 켑톤, 플루오르화 알킬 케톤 및 케토 에스테르, 붕산 유도체 및 인산 에스테르 및 α-케토 카르복사마이드의 트롬빈 억제 활성은 이러한 세린 상호작용에 의해 설명할 수 있다.(EP 제118280호, 제195212호, 제362002호, 제364344호, 제410411호, 제471651호, 제589741호, 제293881호, 제503203호, 제504064호, 제530167호, WO 제92/07869호, 제94/08941호).

올렉시스진(J. Oleksyszyn) 등의 문헌(J. Med. Chem. 37 (1994) 226-231)에 기술된 펩타이드 4-아마이디노페닐글라이신포스포네이트 디페닐 에스테르는 다른 세린 프로테아제에 비해 부적당한 선택성을 지닌 비가역적 트롬빈 억제제이다.

DE 제3,108,810호, WO 제93/11152호 및 EP 제601,459호에 기술된 아그마틴 및 그에 따른 아르기닌 유도체는 세린 프로테아제에서 활성 세린과 상호작용할 수 없다.

WO 제94/29336호, EP 제0,601,459호 및 WO 제95/23609호는 보다 발전된, 아릴아미딘 잔사로 대체된 아그마틴을 제시한다.

EP 제0,672,658호에는 아그마틴 또는 벤즈아미딘 잔사를 부착한 트롬빈 억제제 뿐 아니라 아마이디노티오펜(실시예 65)을 지니는 트롬빈 억제제를 기술한다.

키니노제나제는 키닌(브래디키닌, 칼리딘 및 Met-Lys-브래디키닌)이라 불리는 혈관작용성 펩타이드를 키니노겐으로부터 유리시키는 세린 프로테아제이다. 키니노겐은 응고 및 염증 캐스케이드에서 발생하는 다기능성 단백질이다. 억제제로서, 이들은 세포를 시스테인 프로테아제에 의한 손상으로부터 보호한다(Mueller Esterl, FFBS Lett. 182 (1985) 310-314). 중요한 키니노제나제는 혈장 칼리크레인, 조직 칼리크레인 및 비만 세포 트립타제이다.

브래디키닌 및 칼리딘과 같은 키닌은 다수의 생물학적 작용에 영향을 미치는 혈관작용성 펩타이드이다. 이들은 염증 반응에서 본질적인 부분을 담당한다. 이들은 혈관 투과성을 증가시켜 저혈압 및 부종을 유발한다. 또한 이들은 자연적으로 신체에 생성되는 매우 강력한 통증 생성 물질이며 천식, 알러지성 비염 및 관절염의 병리에서 세포의 매개체로서 매우 중요하다(K. D. Bhoola, C. D. Figueroa, K. Worthy, Pharmacological Reviews 44 (1) (1992) 1-80).

염증 과정의 기초를 이루는 메카니즘에 상관없이, 모든 단백질 시스템을 함 유하는 순환 혈액 중의 체액은 혈관으로부터 빠져나간다. 이는 혈관으로부터의 혈장 체액의 방출이 천식, 비염 및 염증성 체내 질병과 같은 질병에 수반된다는 것을 의미한다. 게다가, 비만 세포 트립타제는 특히 알러지성 과정에서 방출된다(Salomonsson 등, Am. Rev. Respir. Dis. 146 (1992) 1535-1542).

아르기닌 클로로메틸 케톤 H-(D)-Pro-Phe-Arg-CH₂Cl 및 H-(D)-Phe-Phe-Arg-CH₂-Cl은 케트너 및 쇼(Kettner, Shaw)에 의해 혈장 칼리크레인 억제제로서 기술되어 있다(Biochem. 17 (1978) 4778-4784 및 Meth. Enzym. 80 (1981) 826-842).

벤즈아미딘 및 벤질아민의 다양한 합성 유도체가 혈장 칼리크레인의 억제제로 판명되었으며 벤즈아미딘은 상당히 강한 억제 효과를 가진다(F. Markward, S. Drawert, P. Walsmann, Biochemical Pharmacology 23 (1974) 2247-2256).

PKSI-527, N-(트랜스-4-아미노메틸시클로헥실카르보닐)-L-페닐알라닌 4-카르복시메틸아닐리드 염산염도 또한 이 키니노제나제의 효과적인 억제제이다(Wanaka, Ohamoto 등, Thromb. Res., 57 (6) (1990) 889-895).

본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 및 그의 생리적으로 허용되는 산과의 염에 관한 것이다.

A-B-D-E-F

식 중,

A는

이고,

여기서, m은 0, 1 또는 2이고,

n은 0, 1 또는 2이며,

R¹은 HOOC-, C_1-6-알킬-OOC-, 아릴-C_0-4-알킬-OOC 또는 -OH이고,

R²는 H-, C_1-4-알킬- 또는 R¹-(CH₂)_m-이며,

R³은 H- 또는 C_1-4-알킬-이고,

B는

이고,

여기서, R⁴는 H-, C_1-4-알킬- 또는 R¹-(CH₂)_m-(R ¹ 및 m은 상기 언급한 의미를 가진다)이며,

p는 0 또는 1이고,

R⁵는 H- 또는 C_1-4-알킬-이며,

R⁶은 H-, C_1-8-알킬-, 2-티에닐-, 3-티에닐-, 3-인돌릴-, 4-이미다졸릴-, 2-피리딜-, 3-피리딜-, 4-피리딜-, 페닐-(이는 C_1-4-알킬-, CF₃-, C_1-4-알콕시-, HO-, BnO-. F- 또는 Cl-의 군으로부터 3개 이하의 동일한 또는 상이한 라디칼을 가질 수 있다), 또는 C_3-8-시클로알킬(이는 4개 이하의 동일한 또는 상이한 C_1-4-알킬 라디칼을 가질수 있고(있거나) 고리중의 1 또는 2개의 C-C 단일 결합이 C=C 이중 결합으로 대체될 수 있고(있거나) 페닐 고리가 융합되어 C₇-C₁₂-비시클로알킬- 또는 C₁₀ -트리시클로알킬-이 될 수 있다)이거나, 또는

R⁴ 및 R⁶은 함께 에틸렌 또는 프로필렌기이며,

R⁷은 H, C_1-8-알킬-, 페닐-(이는 C_1-4-알킬-, CF₃-, C_1-4 -알콕시-, F- 또는 Cl-의 군으로부터 3개 이하의 동일한 또는 상이한 라디칼을 가질 수 있다), 또는 C_3-8-시클로알킬-(이는 4개 이하의 동일한 또는 상이한 C_1-4-알킬 라디칼을 가질 수 있다)이고,

R⁸은 H 또는 C_1-4-알킬이며,

D는

II III IV

VI VII VIII IX

X XI 이고,

여기서, R²⁰은 H, C_1-4-알킬, Bn 또는 BnO(CO)-이되,

D가 II, III 또는 XI이면, E는 하기의 의미를 갖거나,

(식 중, a) X = S, O, NH 또는 NR¹²일 때, Y는 -CR¹³=, -CH=이고, Z는 -CR¹⁴= 이거나, 또는 Y는 -CR¹³=이고, Z는 -CH=이거나, 또는

b) X = NR¹²일 때, Y는 -CH=이고, Z는 -CH=이거나, 또는

c) X = S, O 또는 NH일 때, Y는 -CR¹⁵=이고, Z는 -N=이거나, 또는 Y는 -N=이고, Z는 -CR¹⁵=이거나, 또는

d) X = -NR¹²-일 때, Y는 -N=이고, Z는 -CH¹⁶=, -N=이거나, 또는 Y는 -CR¹⁶=이고, Z는 -N=이고,

R⁹는 H- 또는 C_1-3-알킬-이고,

R¹⁰는 H- 또는 C_1-4-알킬-이고,

R¹¹는 H- 또는 C_1-4-알킬-이고,

R¹²는 CH₃- 또는 C₂H₅-이고,

R¹³은 Cl-, CF₃- 또는 C_1-4-알킬-이고,

R¹⁴은 Cl-, CF₃- 또는 C_1-4-알킬-이고,

R¹⁵는 CF₃- 또는 C_1-4-알킬-이고,

R¹⁶은 H-, CF₃- 또는 C_1-4-알킬-이고,

R²⁰은 상기 정의한 바와 같다), 또는

D가 IV, VI, VII, VIII, IX 또는 X일 때, E는 하기와 같은 의미를 갖거나,

(식 중, X는 O, S 또는 -NR¹⁷-이고, Y는 -N=이고, Z는 -CR¹⁶= 또는 -N=이거나, 또는 Y는 -CR¹⁶=이고, Z는 -N=이거나, 또는 Y는 -CR¹⁸=이고, Z는 -CR¹⁹=이고,

R⁹, R¹⁰, R¹¹, R¹⁶ 및 R²⁰은 상기 정의한 바와 같고,

R¹⁷은 H, CH₃- 또는 C₂H₅-이고,

R¹⁸은 H-, Cl-, CF₃- 또는 C_1-4-알킬-이고,

R¹⁹는 H-, Cl-, CF₃- 또는 C_1-4-알킬-이다), 또는

D가 II, III, IV, VI, VII, VIII, IX, X 또는 XI일 때, E는 하기의 의미를 갖고,

또는

(식 중, a) X = S일 때, Y는 -CR¹⁸=이고, Z는 -CR¹⁹=이거나, 또는 Y는 -CR¹⁶= 이고, Z는 -N=이거나, 또는

b) X = O 또는 -NR¹²-일 때, Y는 -N=, -CR¹⁶=이고, Z는 -N=, -CR¹⁸=이고,

R⁹, R¹⁰, R¹¹, R¹², R¹⁶, R¹⁸, R¹⁹ 및 R²⁰은 상기에 언급한 의미와 같다),

F는

또는

이다.

B로 나타내는 아미노산 유도체는 바람직하게는 (D) 배열을 갖는다. D의 아제티딘카르복실산, 프롤린 및 피페콜산은 바람직하게는 (L) 배열을 갖는다.

바람직한 화학식 I의 화합물 및 그의 생리적으로 허용되는 산과의 염은 하기 의미의 A 내지 E를 갖는다.

A는

HOOC-(CH₂)_t(t=1, 2 또는 3), (HOOC-CH₂)₂-CH-,

HOOC-CH₂-CH(COOH)-, HOOC-CH(C_1-4-알킬)-,

HOOC-C(C_1-4-알킬)₂-, C_1-6-알킬-OOC-(CH₂)_t-이고,

B는

이고,

여기서, p는 0 또는 1이고,

R⁴는 H-, C_1-4-알킬 또는 HOOC-(CH₂)_m-(m=1, 2 또는 3)이며,

R⁵는 H-, 메틸-이고,

R⁶은 H-, C_1-8-알킬-, 2-티에닐-, 3-티에닐-, 3-인돌릴-, 4-이미다졸릴-, 2-피리딜-, 3-피리딜-, 4-피리딜-, 페닐-(이는 CH₃-, CF₃-, CH₃-O-, HO-, BnO-, F- 또는 Cl-의 군으로부터 3개 이하의 동일한 또는 상이한 라디칼을 지닐 수 있다) 또는 4개 이하의 메틸 라디칼을 가질 수 있는 C_3-8-시클로알킬, 비시클로[2.2.2]옥틸-, 비시클로[2.2.1]헵틸-, 아다만틸-, 인다닐-, 데칼리닐-이며,

R⁷은 H, C_1-8-알킬-, 페닐-(이는 CH₃-, CF₃-, CH₃-O-, F- 또는 Cl-의 군으로부터 3개 이하의 동일한 또는 상이한 라디칼을 가질 수 있다) 또는 4개 이하의 메틸 라디칼을 가질 수 있는 C_3-8-시클로알킬-이고,

R⁸은 H, C_1-4-알킬이며,

D는

II III IV

VI VII VIII IX

X XI 이고,

여기서, R²⁰은 H, CH₃, Bn 또는 BnO(CO)-이되,

D가 II, III 또는 XI일 때, E는 하기의 의미를 갖거나,

(식 중, a) X = S, O 또는 NR¹⁷일 때, Y는 -CR¹³= 또는 -CH=이고, Z는 -CR¹⁴= 이거나, 또는 Y는 -CR¹³=이고, Z는 -CH=이거나, 또는

b) X = NR¹²일 때, Y는 -CH=이고, Z는 -CH=이거나, 또는

c) X = S, O 또는 NH일 때, Y는 -CR¹⁵=이고, Z는 -N=이거나, 또는 Y는 -N=이고, Z는 -CR¹⁵=이거나, 또는

d) X = NR¹²일 때, Y는 -N=이고, Z는 -CH¹⁶=, -N=이거나, 또는 Y는 -CH¹⁶=이고, Z는 -N=이고,

R¹²는 CH₃- 또는 C₂H₅-이고,

R¹³은 Cl-, CF₃- 또는 C_1-4-알킬-이고,

R¹⁴는 Cl-, CF₃- 또는 C_1-4-알킬-이고,

R¹⁵는 CF₃- 또는 C_1-4-알킬-이고,

R¹⁶은 H-, CF₃- 또는 C_1-4-알킬-이고,

R¹⁷은 H, CH₃- 또는 C₂H₅-이고,

R²⁰은 상기 정의한 바와 같다), 또는

D가 IV, VI, VII, VIII, IX 또는 X일 때, E는 하기와 같은 의미를 갖거나,

(식 중, X는 O, S 또는 -NR¹⁷-이고, Y는 -N=이고, Z는 -CR¹⁶= 또는 -N=이거나, 또는 Y는 -CR¹⁶=이고, Z는 -N=이거나, 또는 Y는 -CR¹⁸=이고, Z는 -CR¹⁹=이고,

R¹⁶, R¹⁷, R²⁰은 상기 정의한 바와 같고,

R¹⁸은 H-, Cl-, CF₃- 또는 C_1-4-알킬-이며,

R¹⁹는 H-, Cl-, CF₃- 또는 C_1-4-알킬-이다), 또는

D가 II, III, IV, VI, VII, VIII, IX, X 또는 XI일 때, E는 하기의 의미를 갖고,

또는

(식 중, a) X = S일 때, Y는 -CR¹⁸=이고, Z는 -CR¹⁹=이거나, 또는 Y는 -CR¹⁶=이고, Z는 -N=이거나, 또는

b) X = O 또는 -NR¹²-이고, Y는 -N= 또는 -CR¹⁶=이고, Z는 -N= 또는 -CR¹⁸=이고,

R¹², R¹⁶, R¹⁸, R¹⁹ 및 R²⁰은 상기에 언급한 의미와 같다),

F는

또는

이다.

B로 나타내는 아미노산 유도체는 바람직하게는 (D) 배열을 갖는다. D의 아제티딘카르복실산, 프롤린 및 피페콜산은 바람직하게는 (L) 배열을 갖는다.

특히 바람직한 화학식 I의 화합물 및 그의 생리적으로 허용되는 산과의 염은 하기 의미의 A, B, D, E 및 F를 갖는다.

A: HOOC-CH₂, HOOC-CH₂-CH₂, HOOC-CH(CH₃), HOOC-CH(C₂ H₅)이고,

B:

이고,

여기서, p는 0 또는 1이고,

R⁴는 H-, CH₃-이며,

R⁵는 H-, CH₃-이고,

R⁶은 C_1-8-알킬, 4개 이하의 메틸 라디칼을 가질 수 있는 C_5-8-시클로알킬-, 2-티에닐-, 3-인돌릴-, 4-이미다졸릴-, 2-피리딜-, 3-피리딜-, 4-피리딜-, 페닐-(CH₃-, CF₃-, CH₃O-, HO-, BnO-, F- 또는 Cl-의 군으로부터 3개 이하의 동일한 또는 상이한 라디칼을 가질 수 있다), 비시클로[2.2.2]옥틸, 비시클로[2.2.1]헵틸, 아다만틸, 인다닐, 데칼리닐, 특히 시클로펜틸, 시클로헥실 및 시클로헵틸이며,

R⁷은 H, CH₃-이고,

R⁸은 H, CH₃-이며,

D는

II III IV

VI VII VIII IX

X XI 이고,

여기서, R²⁰은 H, BnO(CO)-이되,

D가 II, III 또는 XI일 때, E는 하기의 의미를 갖거나,

(식 중, a) X가 -S-일 때, Y는 -CH=이고, Z는 -CR¹³= 이거나, 또는 Y는 - CR¹³=이고, Z는 -CH=이거나, 또는 Y는 -CR¹⁵=이고, Z는 -N=이거나, 또는 Y는 -N=이고, Z는 -CR¹⁵=이고,

R¹³은 Cl-, CF₃- 또는 CH₃-이고,

R¹⁵는 CF₃- 또는 CH₃-이고,

R²⁰은 상기 정의한 바와 같다), 또는

D가 IV, VI, VII, VIII, IX 또는 X일 때, E는 하기와 같은 의미를 갖거나,

(식 중, X는 S일 때, Y는 -N=이고, Z는 -CR¹⁶=이거나, 또는 Y는 -CR¹⁶=이고, Z는 -N=이거나, 또는 Y는 -CR¹³=이고, Z는 -CH=이거나, 또는 Y는 -CH=이고, Z는 -CR¹³=이거나, 또는 Y는 -CH=이고, Z는 -CH=이고,

R¹³, R²⁰은 상기 정의한 바와 같고,

R¹⁶은 H, CF₃- 또는 CH₃-이다), 또는

D가 II, III, IV, VI, VII, VIII, IX, X 또는 XI일 때, E는 하기의 의미를 갖고,

또는

(식 중, a) X = S일 때, Y는 -CH=이고, Z는 -CR¹⁸=이거나, 또는 Y는 -CR¹⁶=이고, Z는 -N=이거나, 또는 Y는 -CR¹⁸=이고, Z는 -CH=이거나, 또는

b) X = O 또는 NCH₃일 때, Y는 -CH=이고, Z는 -CR¹⁶=이거나, 또는 Y는 -CR¹⁶=이고, Z는 -CH=이거나, 또는

c) X = -NR¹²-일 때, Y는 -N=이고, Z는 -CR¹⁸=이고,

R¹²는 CH₃- 또는 C₂H₅-이고,

R¹⁸은 H-, Cl-, CF₃- 또는 CH₃-이며,

R¹⁶ 및 R²⁰은 상기 언급한 바와 같다),

F는

또는

이다.

B로 나타내는 아미노산 유도체는 바람직하게는 (D) 배열을 갖는다. D의 아제티딘카르복실산, 프롤린 및 피페콜산은 바람직하게는 (L) 배열을 갖는다.

매우 특히 바람직한 화학식 I의 화합물 및 그의 생리적으로 허용되는 산과의 염은 하기 의미의 A, B, D, E 및 F를 갖는다.

A: HOOC-CH₂, HOOC-CH₂-CH₂, HOOC-CH(CH₃), HOOC-CH(C₂ H₅)이고,

B:

이고,

여기서, p는 0 또는 1이고,

R⁴는 H-이며,

R⁵는 H-이고,

R⁶은 C_1-8-알킬-, 2-티에닐-, 3-인돌릴-, 4-이미다졸릴-, 2-피리딜-, 3-피리딜-, 4-피리딜-, 4개 이하의 메틸 라디칼을 가질 수 있는 C_5-8-시클로알킬-, 페닐-(CH₃-, CF₃-, CH₃-O-, HO-, BnO-, F- 또는 Cl-의 군으로부터 3개 이하의 동일한 또는 상이한 라디칼을 가질 수 있다), 비시클로[2.2.2]옥틸, 비시클로[2.2.1]헵틸, 아다만틸, 인다닐, 데칼리닐, 특히 시클로펜틸, 시클로헥실 및 시클로헵틸이며,

R⁷은 H이고,

R⁸은 H이며,

D는

II III IV

VI VII VIII IX

X XI 이되,

D가 II, III 또는 XI일 때, E는 하기의 의미를 갖거나,

(식 중, a) X가 S일 때, Y는 -CR¹³=이고, Z는 -CH=이거나, 또는 Y는 -CH=이 고, Z는 -CR¹³=이거나, 또는 Y는 -CR¹⁵=이고, Z는 -N=이거나, 또는 Y는 -N=이고, Z는 -CR¹⁵=이고,

R¹³은 Cl-, CF₃- 또는 CH₃-이고,

R¹⁵는 CF₃- 또는 CH₃-이다), 또는

D가 IV, VI, VII, VIII, IX 또는 X일 때, E는 하기와 같은 의미를 갖거나,

(식 중, X가 S일 때, Y는 -N=이고, Z는 -CR¹⁶=이거나, 또는 Y는 -CR¹⁶=이고, Z는 -N=이거나, 또는 Y는 -CH=이고, Z는 -CR¹³=이거나, 또는 Y는 -CR¹³=이고, Z는 -CH=이거나, 또는 Y는 -CH=이고, Z는 -CH=이고,

R¹³은 상기 정의한 바와 같고,

R¹⁶은 H, CF₃- 또는 CH₃-이다), 또는

D가 II, III, IV, VI, VII, VIII, IX, X 또는 XI일 때, E는 하기의 의미를 갖고,

또는

(식 중, a) X = S일 때, Y는 -CH=이고, Z는 -CR¹⁸=이거나, 또는 Y는 -CR¹⁸=이고, Z는 -CH=이거나, 또는 Y는 -CR¹⁶=이고, Z는 -N=이거나, 또는

b) X = O 또는 NCH₃일 때, Y는 -CH=이고, Z는 -CR¹⁶=이거나, 또는 Y는 -CR¹⁶ =이고, Z는 -CH=이거나, 또는

c) X = NCH₃일 때, Y는 -N=이고, Z는 -CR¹⁶=이고,

R¹⁶은 상기 언급된 바와 같고,

R¹⁸은 H-, Cl-, CF₃- 또는 CH₃-이다),

F는

또는

이다.

B로 나타내는 아미노산 유도체는 바람직하게는 (D) 배열을 갖는다. D의 아제티딘카르복실산, 프롤린 및 피페콜산은 바람직하게는 (L) 배열을 갖는다.

실시예에 언급된 화합물외에 하기 물질도 매우 특히 중요한 것이 틀림없다.

약어 목록:

Adaala: 아다만틸알라닌

Adagly: 아다만틸글라이신

AIBN: 아조비스이소부티로니트릴

Ac: 아세틸

am: 아미디노

Aze: 아제티딘카르복실산

Bn: 벤질

bs: 광역 단일선

Boc: tert-부틸록시카르보닐

Bu: 부틸

Cbz: 벤질록시카르보닐

Cha: 시클로헥실알라닌

Chea: 시클로헵틸알라닌

Cheg: 시클로헵틸글라이신

Chg: 시클로헥실글라이신

Cog: 시클로옥틸글라이신

Cpa: 시클로펜틸알라닌

Cpg: 시클로펜틸글라이신

d: 2중선

TLC: 박층 크로마토그래피

DCC: 디시클로헥실카르보디이미드

Dch: 디시클로헥실알라닌

Dcha: 디시클로헥실아민

DCM: 디클로로메탄

Dep: 4,5-데히드로피페콜산

DMF: 디메틸포름아미드

DIPEA: 디이소프로필에틸아민

Dpa: 디페닐알라닌

EDC: N-에틸-N'-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드 염산염

Et: 에틸

Eq: 당량

Gly: 글라이신

fur: 푸란

ham: 히드록시아미디노

HOSucc: 히드록시숙신이미드

HPLC: 고성능 액체 크로마토그래피

imi: 이미다졸

iPr: 이소프로필

isox: 이속사졸

Leu: 류신

Lsg: 용액

Me: 메틸

α-MeCha: α-메틸시클로헥실알라닌

β,β-Me₂Cha: 2-아미노-3-시클로헥실-3-메틸부티르산 또는 β,β-디메틸시클로헥실알라닌

4-MeCha: (4-메틸시클로헥스-1-일)알라닌

γ-MeCha: (1-메틸시클로헥스-1-일)알라닌

3,3-Me₂Cha: (3,3-디메틸시클로헥스-1-일)알라닌

4-MeChg: (4-메틸시클로헥스-1-일)글라이신

3,3-Me₂Chg: (3,3-디메틸시클로헥스-1-일)글라이신

MPLC: 중압 액체 크로마토그래피

MTBE: 메틸 tert-부틸 에테르

NBS: N-브로모숙신이미드

Nog: 노르보르닐글라이신

Ohind: (2)-옥타히드로인돌-2-카르복실산

Oxadiaz: 1,2,4-옥사디아졸

Oxaz: 옥사졸

Ph: 페닐

Phe: 페닐알라닌

Pic: 피페콜산

PPA: 무수 프로필포스폰산

Pro: 프롤린

Py: 피리딘

pydaz: (35)-2,3,4,5-테트라히드로피리다진-3-카르복실산

Pyr: 3,4-디히드로프롤린

pyraz: 피라졸

pyrr: 피롤

pyzo-3: (3S)피라졸리딘-3-카르복실산

q: 4중선

RT: 실온

RP-18: 역상 C-18

s: 단일선

sbr: 단일선, 광역

t: 3중선

t: tert

tBu: tert-부틸

tert: tertiary

TBAB: 테트라부틸암모늄 브로마이드

TEA: 트리에틸아민

TFA: 트리플루오로아세트산

TFFA: 무수 트리플루오로아세트산

thiaz: 티아졸

thioph: 티오펜

Thz-2: 티아졸로딘-2-카르복실산

Thz-4: 티아졸리딘-4-카르복실산

5,5-Me₂Thz-4: (45)-5,5-디메틸티아졸리딘-4-카르복실산

TOTU: O-(시아노에톡시카르보닐메틸렌)아미노-N,N,N',N'-테트라메틸유로늄 테트라플루오로보레이트

triaz: 1,2,4-트리아졸

Z: 벤질록시카르보닐

명세서 및 청구항에서, 각각의 치환체는 하기와 같이 정의된다.

자체로서 또는 다른 치환체의 일부로서 "시클로알킬"이란 용어는 주어진 갯수의 탄소 원자를 함유하는 포화 또는 시클릭 탄화수소기를 포함함을 특징으로 한다. C_3-8-시클로알킬은 예를 들어 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥 실, 4-메틸시클로헥실, 시클로헵틸 또는 시클로옥틸과 같이 탄소 원자수 3 내지 8개의 포화된 지환족 고리를 가리킨다.

자체로서 또는 다른 치환체의 일부로서 "알킬"이란 용어는 각각의 경우에서 지시된 길이의 선형이거나 분지형의 알킬 사슬 라디칼을 나타낸다. 따라서 C_1-4-알킬은 예를 들어 메틸, 에틸, 1-프로필, 2-프로필, 2-메틸-2-프로필, 2-메틸-1-프로필, 1-부틸, 2-부틸이고, C_1-6-알킬은 예를 들어 C_1-4-알킬, 펜틸, 1-펜틸, 2-펜틸, 3-펜틸, 1-헥실, 2-헥실, 3-헥실, 4-메틸-1-펜틸 또는 3,3-디메틸부틸이다. 또한 C_1-8-알킬은 C_1-4-알킬에 대해 주어진 라디칼 이외에 예를 들어 C_1-6-알킬, 헵틸 또는 옥틸을 나타낸다.

자체로서 또는 다른 치환체의 일부로서 "알콕시"란 용어는 각각의 경우 지시된 길이의 선형이거나 분지형의, 산소 원자를 통해 각각의 기본 화합물과 결합된 알킬 사슬 라디칼을 나타낸다. 따라서 C_1-4-알콕시는 예를 들어 메톡시, 에톡시, 1-프로폭시, 2-프로폭시, 2-메틸-2-프로폭시, 2-메틸-1-프로폭시, 1-부톡시, 2-부톡시를 나타낸다.

또한 본 발명은 하기의 구조 요소를 함유하는 화합물에 관한 것이다.

식 중, D 및 E는 상기 언급된 의미를 가지며, 수소 원자, 보호기, 치환되지 않거나 치환된, 천연 또는 비-천연 아미노산, 치환되지 않거나 치환된 카르복실산 또는 치환되지 않거나 치환된 알킬 라디칼은 빌딩 블록 D의 질소 원자 상에 위치한다. 구조 단편은 세린 프로테아제 억제제, 특히 트롬빈 및 칼리크레인 억제제의 성분으로 유용하다.

본 발명은 또한 하기의 구조 요소를 함유하는 화합물에 관한 것이다.

식 중, E는 상기 언급된 의미를 가지며, 수소 원자, 보호기, 치환되지 않거나 치환된, 천연 또는 비-천연 아미노산, 치환되지 않거나 치환된 카르복실산 또는 치환되지 않거나 치환된 알킬 라디칼은 NR⁹의 질소 원자 상에 위치한다.

마지막으로 본 발명은 또한 하기의 구조 요소 중의 하나를 가지는 화합물에 관한 것이다.

,

,

,

,

식 중, Q는 CH₃ 또는 Cl이고,

T는 NCH₃, O 또는 S이며,

W는 NCH₃ 또는 S이다.

또한 본 발명은 하기 화학식 Va 및 Vb의 중간체에 관한 것이다.

A-B-D-E-CN

A-B-D-E-CSNH₂

식 중, A, B, D 및 E는 상기 언급된 의미를 가진다.

신규한 중간체는 화합물 I의 제조에 사용되며 세린 프로테아제 억제제의 합성에 유용한 빌딩 블록이다.

화학식 I의 화합물은 그 자체로 또는 생리적으로 허용되는 산과의 염의 형태로 존재할 수 있다. 이러한 산의 예로는 염산, 시트르산, 타르타르산, 락트산, 인산, 메탄설폰산, 아세트산, 포름산, 말레산, 푸마르산, 숙신산, 히드록시숙신산, 황산, 글루타르산, 아스파르트산, 피루브산, 벤조산, 글루쿠론산, 옥살산, 아스코르브산, 아세틸 글라이신이 있다.

화학식 I의 화합물에서, R¹이 C_1-6-알킬-OOC, 아릴-C_0-4-알킬-OOC와 같고(같거나) F가 히드록시아미딘과 같은 경우, 이들 화합물은 생체 내에서 상응하는 카르복실산 R¹ = HOOC- 또는 상응하는 아미딘 F = -C(=NH)-NH₂를 효소적으로 형성하는 프로드러그로 작용할 수 있다.

화학식 I의 화합물의 프로드러그는 생체 내에서 대사되어 약리적으로 활성이 있는 화학식 I의 화합물을 제공하는 화합물을 의미하는 것으로 이해해야 한다. 이는 예를 들어 간에서의 초회 통과 대사에 의해 행해질 수 있다.

화학식 I의 신규한 화합물은 트립신 유사 세린 프로테아제, 특히 트롬빈의 경쟁적 억제제이며, 또한 칼리크레인과 같은 키니노제나제의 경쟁적 억제제이다. 이들은 하기의 징후에 사용할 수 있다.

-트롬빈의 단백질분해 효과로부터 직접적으로 또는 간접적으로 유도되는 병리적 메카니즘의 질병,

-수용체의 트롬빈 의존성 활성화 및 신호도입으로부터 유도되는 병리적 메카니즘의 질병,

-신체 세포의 유전자 발현의 자극(예: PAI-1, PDGF(혈소판 유도 성장 인자), P-셀렉틴, ICAM-1, 조직 인자에 의함) 또는 억제(예: 평활근 세포에서의 NO 합성)와 관련된 질병,

-트롬빈의 유사분열촉진 효과로부터 유도된 질병,

-상피 세포(예: 혈관 내피 세포)의 수축성 및 투과성의 트롬빈 의존성 변화로부터 유도된 질병,

-심정맥 혈전증, 폐성 색전증, 심근 또는 뇌 경색, 동맥 섬유화, 우회로 폐색과 같은 트롬빈 의존성 혈전색전증 발병,

-산재성 혈관내 응고(DIC),

-스트렙토키나제, 유로키나제, 프로유로키나제, t-PA, APSAC, 동물의 침샘에 서 나오는 플라스미노겐 활성화제 및 모든 이들 물질의 재조합 및 변형 형태와 같은 혈전용해제와의 병행 약물 처리시 재관류 시간의 감소를 요함 및 재폐색,

-PTCA 이후의 초기 재폐색 및 말기 재협착의 발생,

-평활근 세포의 트롬빈 의존성 증식,

-CNS(예: 알츠하이머 병에서)에서의 활성 트롬빈의 축적, 및

-종양 성장 및 종양 세포의 부착 및 전이의 예방을 위함.

신규 화합물은 특히 심정맥 혈전증, 폐성 색전증, 심근 및 뇌 경색 및 불안정성 앙기나와 같은 트롬빈 의존성 혈전색전증 병발의 치료 및 예방, 그리고 산재성 혈관내 응고(DIC)의 치료에 사용될 수 있다. 이들은 또한 재관류 시간을 줄이고 재폐색 시간을 늘리는 스트렙토키나제, 유로키나제, 프로유로키나제, t-PA, APSAC 및 다른 플라스미노겐 활성화제와 같은 혈전 용해제와의 조합 치료에 적합하다.

또한 바람직한 사용 영역은 경피 경관 관상 혈관성형술 이후의 트롬빈 의존성 초기 재폐색 및 말기 재협착의 예방, 평활근 세포의 트롬빈 유도 증식 예방, CNS(예: 알츠하이머 병에서)에서의 활성 트롬빈의 축적 예방, 종양 제어 및 종양 세포의 부착 및 전이 유도 메카니즘의 예방이다.

신규한 화합물은 또한 혈액 투석막, 관 시스템 및 이에 대한 필수 라인과 같은 인공 표면의 코팅, 혈관외 순환에서의 산소공급기, 스텐트 및 심장 판막의 코팅에 사용할 수 있다.

또한 신규한 화합물은 특히 칼리크레인과 같은 키니노제나제의 단백질분해 효과로부터 직접적으로 또는 간접적으로 유도된 병리적 메카니즘의 질병, 예를 들어 천식, 췌장염, 비염, 관절염, 두드러기 및 다른 체내 염증 질병과 같은 염증성 질병에 사용할 수 있다.

본 발명에 따른 화합물은 경구로 또는 비경구로(피하, 정맥내, 근육내, 복강내, 직장내) 통상의 방법으로 투여할 수 있다. 투여는 또한 비인강을 통해 증기 또는 분무로 할 수 있다.

투여량은 환자의 연령, 증상 및 체중 및 투여 방식에 따라 변한다. 원칙적으로 개체당 활성 물질의 일일 투여량은 경구 투여의 경우 약 10 내지 2000mg이고, 비경구 투여의 경우 약 1 내지 200mg이며, 저류물 형태로 하루 1회 투여 또는 하루 2 내지 4회 단일 투여할 수 있다.

신규한 화합물은 예를 들어 비코팅 또는 (필름)코팅 정, 캅셀, 분말, 과립, 당의정, 좌제, 용액제, 연고, 크림 또는 분무제와 같은 통상의 고상 또는 액상의 제약 형태로 사용할 수 있으며, 이는 통상의 방식으로 제조한다. 이러한 목적을 위해 활성 성분은 정제 결합제, 벌크화제, 방부제, 정제 붕해제, 유동 조절제, 가소제, 습윤제, 분산제, 유화제, 용매, 서방화제, 항산화제 및(또는) 추진제와 같은 통상의 제약 보조제와 혼합할 수 있다(문헌(H. Sucker 등, Pharmazeutische Technologie, Thieme-Verlag, Stuttgart, 1978)참조). 투여 형태는 이런 방식으로 하여 보통 활성 성분 0.1 내지 99 중량%를 함유하도록 얻는다.

<실험 부분>

화학식 I의 화합물은 반응식 I-III에 보이는 바와 같이 제조할 수 있다.

빌딩 블록 A, B, D 및 E는 바람직하게는 미리 각각 모으고, 적합하게 보호된 형태로 사용한다(반응식 I-III 참조).

(P = 보호기, (P) = 보호기 또는 H)

반응식 I은 아민 H-E-CN을 N-보호 아미노산 P-D-OH와 커플링하여 P-D-E-CN을 얻고, N-말단 보호기를 제거하여 H-D-E-CN을 얻어 이를 N-보호 아미노산 P-B-OH와 커플링시켜 P-B-D-E-CN을 얻고, 여기서 보호기 P를 제거하여 H-B-D-E-CN을 얻으며, 연속하여 보호되지 않거나 또는 보호된 (P)-A-U 빌딩 블록(U=이탈기)으로 알킬화하거나 또는 (P)-A'-U(U=알데히드, 케톤)로 환원적으로 알킬화하거나 또는 적합한 (P)-A''-C=C- 유도체로 미카엘 첨가 반응을 시켜 (P)-A-B-D-E-CN을 얻는 분자 I의 선형 조립을 기술한다. 니트릴 기능기의 아미딘 기로의 전환은 통상의 피너 합성(R. Boder, D. G. Neilson, Chem. Rev. 61 (1962) 179) 또는 중간체로 이미노 티오에스테르염을 거치는 수정된 피너 합성법(H. Vieweg 등, Pharmazie 39 (1984) 226) 또는 직접 문헌(A. Eschenmoser Helv. Chimica Acta 69 (1986) 1224)의 방법으로 수행할 수 있다. 연속하여 여전히 분자 내에 존재하는 보호기를 바람직하게는 산 가수분해로 제거한다.

빌딩 블록 E가 H-E-CONH₂로 합성에 사용된다면 아마이드의 니트릴 기능기로의 탈수 또는 티오아마이드 기능기로의 전환은 1개의 보호된 중간체 상에서 수행될 것이다. 또한, 빌딩 블록 E는 H-E-CSNH₂의 형태로 합성에 사용될 수 있다.

반응식 II는 H-B-P를 적절하게 적합한 비보호된 또는 보호된 A 빌딩 블록 위로 미카엘 첨가 반응을 시키거나 알킬화 또는 환원적 아미노화시켜 (P)-A-B-P를 얻고, C-말단의 보호기를 제거하여 (P)-A-B-OH를 얻고, 이를 H-D-P와 커플링시켜 (P)-A-B-D-P를 얻고, 여기서 C-말단의 보호기를 제거하여 (P)-A-B-D-OH를 얻은 후 이를 H-E-CN과 커플링하여 (P)-A-B-D-E-CN을 얻고, 이 중간체를 반응시켜 반응식 I에서와 같이 최종 생성물을 얻는 분자 I의 선형 조립을 기술한다.

화합물 (P)-A-B-P는 여전히 B에 유리 NH 기능기를 가지고 있으므로, C-말단 보호기를 제거하기 전에 적합한 보호기를 제공하여야 한다. 각 경우에 사용되는 보호기는 다른 것에 대해 수직이어야 한다.

H-E-CN 빌딩 블록 대신에, H-E-CONH₂, H-E-CSNH₂, H-E-C(NH)NH₂, H-E-C(NP)NH₂, H-E-C(NP)NHP를 사용하는 것도 가능하며, 커플링된 중간체 (P)-A-B-D-E-CONH₂는 (P)-A-B-D-E-CN으로 탈수하거나 또는 예를 들어 로손(Lawesson) 시약을 사용하여 직접 (P)-A-B-D-E-CSNH₂로 전환시킨다.

반응식 III은 수렴하는 합성으로 화합물 I을 제조하는 매우 효율적인 방법이다. 적절하게 보호된 빌딩 블록 (P)-A-B-OH 및 H-D-E-CN을 함께 커플링시키고 얻어진 중간체 (P)-A-B-D-E-CN을 반응시켜 반응식 I에서와 같이 최종 생성물을 얻는다.

또한 H-D-E-CONH₂ 또는 H-D-E-CSNH₂를 H-D-E-CN 대신 사용하는 것도 가능하며, 커플링된 중간체 (P)-A-B-D-E-CONH₂는 (P)-A-B-D-E-CN으로 탈수하거나 (P)-A-B-D-E-CSNH₂로 전환시킨다.

N-말단 보호기로는 Boc, Cbz 또는 Fmoc를 사용하며 Boc이 바람직하다. C-말단 보호기는 메틸, tert-부틸 및 벤질이다. 다수의 보호기가 분자내에 존재하고 동시에 제거되지 않는다면 이들은 서로 수직이어야 한다.

보호기를 도입하거나 제거하는데 필요한 커플링 반응 및 다른 반응은 펩타이드 화학의 표준 조건 하에서 수행한다(문헌(M. Bodanszky, A. Bodanszky, "The Practice of Peptide Synthesis", 제 2판, Springer Verlag Heidelberg, 1994)참조).

Boc 보호기는 디옥산/HCl 또는 TFA/DCM을 사용하여 제거하고 Cbz 보호기는 가수소분해하거나 HF로 제거한다. 에스테르 기능기의 가수분해는 알콜성 용매 또는 디옥산/물 중에서 수산화리튬으로 수행한다. TFA 또는 HCl은 t-부틸 에스테르를 절단하기 위해 사용한다.

반응물은 TLC로 확인하였으며 일반적으로 하기의 이동상을 사용한다.

A: DCM/MeOH 95:5

B. DCM/MeOH 9:1

C. DCM/MeOH 8:2

D. DCM/MeOH/50% HOAc 40:10:5

E. DCM/MeOH/50% HOAc 35:15:5

컬럼 크로마토그래피를 이용한 분리를 언급하는 경우, 이들은 실리카겔 상에서 상기 언급한 이동상을 사용한 분리를 말한다.

역상 HPLC 분리는 아세토니트릴/물 및 HOAc 완충액으로 수행하였다.

모든 반응은 질소 대기 하에서 통상적으로 수행하였다.

출발 화합물은 하기의 방법으로 제조할 수 있다:

알킬화에 사용되는 빌딩 블록 A의 예로는 t-부틸 α-브로모아세테이트, t-부틸 β-브로모프로피오네이트, t-부틸 α-브로모프로피오네이트, t-부틸 γ-브로모부티레이트, t-부틸 α-브로모부티레이트, THP로 보호한 브로모에탄올, THP로 보호한 γ-브로모프로판올, α-브로모-γ-부티롤락톤이 있으며, 환원적 아미노화의 경우에는 디히드록시아세톤, 디-t-부틸아세톤디카르복실레이트가 있고, 미카엘 첨가 반응의 경우에는 t-부틸 아크릴레이트, t-부틸 메트아크릴레이트, 디-t-부틸 푸마레이트가 있다. 구입할 수 없는 상기 t-부틸 에스테르들은 문헌(G. Uray, W. Lindner, Tetrahedron, 44 1988 4357-4362)과 유사한 방법으로 제조한다.

B 빌딩 블록:

문헌에 기재되어 있는 아미노산의 일반적이고 구체적인 합성이 다양하게 사용가능하다. 이들의 개관은 특히 문헌(Houben-Weyl, Volume E16d/Part 1, 406쪽 이하)에 제공되어 있다.

자주 사용되는 전구체는 벤조페논 이민 아세트산 에틸 에스테르, 디에틸 아세타마이도말로네이트 및 에틸 이소니트릴아세테이트이다.

예를 들어 에틸 이소니트릴아세테이트 및 적절한 케톤 또는 알데히드로부터다양한 라세미체 글라이신 및 알라닌 유도체가 제조되었다(문헌(H. -J. Praetorius, J. Flossdorf, M. -R. Kula Chem. Ber. 108 (1975) 3079)을 참조).

시클로옥틸글라이신, 시클로헵틸글라이신, 2-노르보르닐글라이신, 아다만틸알라닌, γ-메틸시클로헥실알라닌, 4-이소프로필-1-시클로헥실알라닌, 4-메틸-1-시클로헥실알라닌, 4-메틸-1-시클로헥실글라이신, 시클로헵틸알라닌 및 시클로펜틸알라닌의 합성은 적절한 카르보닐 화합물인 시클로옥타논, 시클로헵타논, 2-노르보르나논, 1-포르밀아다만탄, 1-포르밀-1-메틸시클로헥산, 1-포르밀-4-이소프로필시클로헥산, 1-포르밀-4-메틸시클로헥산 및 4-메틸-시클로헥산, 포르밀시클로헥산 및 포르밀시클로펜탄과 함께 에틸 이소시아노아세테이트로부터 출발하여 상응하는 에틸 2-포르밀아미노아크릴레이트를 통해(U. Schoellkopf 및 R. Meyer, Liebigs Ann. Chem. 1977, 1174 및 H. -J. Praetorius, J. Flossdorf, M. -R. Kula Chem. Ber. 108 (1985) 3079) 하기의 일반적 방법으로 수행하였다.

<에틸 2-포르밀아미노아크릴레이트의 일반적 합성 방법>

50㎖ THF 중의 100 mM 에틸 이소시아노아세테이트 용액을 150㎖ THF 중의 100 mM 포타슘 t-부톡사이드에 0 내지 -10^oC에서 적가하였다. 15분 후에, 동일 온도에서 50㎖ THF 중의 적절한 카르보닐 화합물 100mmol을 가하고, 반응 혼합물이 서서히 실온이 되도록 한 후, 용매를 회전식 증발기에서 제거하였다. 잔류물을 물 50㎖, 아세트산 100㎖ 및 DCM 100㎖와 혼합하고 생성물을 DCM으로 추출하였다. DCM 상을 황산나트륨 상에서 건조시키고 용매를 회전식 증발기에서 제거하였다. 얻어진 생성물은 거의 순수하나 필요한 경우 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 추가 정제할 수 있다(이동상: 에테르/석유 에테르 혼합물).

<에틸 2-포르밀아미노아크릴레이트로부터 출발하는 아미노산 염산염의 일반적인 방법>

100 mM 에틸 2-포르밀아미노아크릴레이트를 빙초산 200㎖ 중에서 Pd/C(10%) 및 수소로 반응이 완결될 때까지 수소화하였다. 이후, 촉매를 여과하고 아세트산을 회전식 증발기에서 가능한 한 제거하였으며, 잔류물은 50% 진한 염산 200㎖로 5시간 동안 환류시켰다. 염산을 회전식 증발기에서 제거하고, 생성물을 50^oC, 감압하에서 건조시킨 후 에테르로 수회 세척하였다. 미색 결정으로 염산염을 얻었다.

시클로옥타논 18.9g(150mmol)로부터 출발하여 시클로옥틸글라이신 염산염 25.0g을 얻었다. 시클로헵타논 22.4g(200mmol)로부터 출발하여 시클로헵틸글라이신 염산염 36.2g을 얻었다. 2-노르보르나논 16.5g(150mmol)로부터 출발하여 2-노르보르닐글라이신 염산염 26.6g을 얻었다. 1-포르밀아다만탄 19.7g(120mmol)으로부터 시작하여 아다만틸알라닌 염산염 26.0g을 얻었다. 1-포르밀-1-메틸시클로헥산 12.6g(100mmol)로부터 시작하여 γ-메틸시클로헥실알라닌 염산염 16.6g을 얻었다. 4-메틸시클로헥사논 16.8g(150mmol)로부터 시작하여 4-메틸시클로헥실글라이신 염산염 25.9g을 얻었다. 트랜스-1-포르밀-4-메틸시클로헥산 15g으로부터 시작하여 트랜스-4-메틸-1-시클로헥실알라닌 염산염 18g을 얻었다. 3,3-디메틸-1-포르밀시클로헥산 9g으로부터 시작하여 3,3-디메틸-1-시클로헥실알라닌 염산염 10g을 얻었다.

이 합성에 필요한 알데히드 1-포르밀-3,3-디메틸시클로헥산은 문헌(Moskal 및 Lensen, Rec. Trav. Chim. Pays-Bas 106 (1987) 137-141)의 방법을 기초로 하여 제조하였다.

n-헥산 중의 n-부틸리튬의 용액(72㎖, 115mmol)을 무수 디에틸 에테르 280㎖ 중의 디에틸 이소시아노메틸포스포네이트(17㎖, 105mmol)의 교반 용액에 -60^oC에서 10분에 걸쳐 적가하였다. 얻어진 현탁액을 이후 -60^oC에서 15분간 교반하고, 온도를 -45^oC미만으로 유지하면서, 무수 디에틸 에테르 100㎖ 중의 3,3-디메틸시클로헥 사논(13g, 105mmol)의 용액을 10분에 걸쳐 첨가하였으며 반응 혼합물을 0^oC가 되도록 하였으며, 이 온도에서 90분간 교반한 후 150-200㎖의 38% 농도 염산 수용액을 조심스럽게 가하였다. 혼합물을 실온에서 15시간 동안 가수분해가 완결되도록 세게 교반하였다. 유기상을 분리하고 물, 포화 중탄산나트륨 및 포화 염화나트륨 용액 각 200㎖로 세척하였다. 이를 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 회전식 증발기에서 농축하여 용매를 제거하였다. 얻어진 잔류물을 추가의 정제없이 아미노산 합성의 출발 물질로 사용하였다.

시클로펜틸글라이신은 문헌(J. T. Hill 및 F. W. Dunn, J. Org. Chem. 30(2965), 1321)에 기술된대로 미리 제조한 N-아세틸-(D,L)-시클로펜틸글라이신을 6N 염산으로 가수분해하여 제조하였다.

<Boc-(D)-α-메틸시클로헥실알라닌>

Boc-(D)-α-메틸-Phe-OH 3.4g(12.2mol)을 메탄올 100㎖중에서 산화알루미늄 상의 5% Rh 250mg의 존재 중에서 10bar, 50^oC로 수소를 사용하여 24시간동안 수소화하였다. 여과하고 용매를 제거하여 Boc-(D)-α-메틸-Cha-OH 2.8g을 얻었다.

¹H NMR (DMSO-d₆, δ(ppm) : 12(매우 넓은 신호, COOH); 1.7 - 0.8(25H; 1.35(s, Boc), 1.30(s, Me))

Boc-(3-Ph)-Pro-OH는 문헌(J. Y. L. Chung 등, J. Org. Chem. 55 (1990) 270)의 방법과 유사한 방법으로 합성하였다.

<Boc-1-테트랄리닐글라이신의 제조>

Boc-1-테트랄리닐글라이신은 1,2-디히드로나프탈렌으로부터 시작하여 제조하였다. 우선 HBr로 1,2-디히드로나프탈렌을 1-테트랄릴 브로마이드로 전환시켰다(문헌(J. Med. Chem. 37 (1994) 1586)과 유사하다). 브로마이드를 연속하여 디에틸 아세타마이도말로네이트와 반응시키고, 가수분해로 절단한 후 얻은 α-아미노산을 Boc으로 보호한 형태로 표준 조건 하에서 전환시켰다. 또다른 가능한 제법은 문헌(E. Reimann, D. Voss, Arch. Pharm. 310 (1977) 102)에 기술되어 있다.

<Boc-(D,L)Dch-OH의 제조>

Boc-(D,L)Dpa-OH(1mmol)는 메탄올 12㎖ 중에서 촉매량의 5% RH/Al₂O₃와 함께 5bar하에서 수소화하였다. 감압하에서 여과하여 용매를 제거해 정량의 생성물을 얻었다.

<H-D,L-Chea-OH의 제조>

시클로헵틸메탄올 및 메탄설포닐 클로라이드로부터 제조한 시클로헵틸메틸 메탄설포네이트(19.39mmol) 4.0g을 건조 아세토니트릴 50㎖중의 벤조페논 이민 글라이신 에틸 에스테르 4.9g(18.47mmol), 건조한 미분 탄산칼륨 8.9g(64.65mmol) 및 테트라부틸암모늄 브로마이드 1g(3mmol)과 함께 불활성 기체 대기 하에서 10시간 동안 환류하였다. 이후 탄산칼륨은 여과하고 여액을 증류시켜 건조하였으며, 조생성물을 직접 에탄올 40㎖ 중의 2N 염산 20㎖로 가수분해하고, 실온에서 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 희석하고, 이후 벤조페논을 산성 범위에서 에틸 아세 테이트로 추출하였으며, 연속하여 알칼리성 범위(pH = 9)에서 DCM으로 H-D,L-Chea-OEt를 추출하고, 용액을 황산마그네슘 상에서 건조시키고 회전식 증발기에서 농축시켰다. 수득량 3.7g (≒이론치의 95%).

Boc-(D,L)-(3,4,5-(MeO)₃)Phe-OH를 벤조페논 이민 글라이신 에틸 에스테르를 트리메톡시벤질 클로라이드로 알킬화하고, 연속하여 Boc 보호기를 도입하고 에스테르 가수분해를 하여 제조하였다.

H-(D,L)-β, β-Me₂Cha-OH는 문헌(U. Schoellkopf, R. Meyer, L. Ann. Chem. (1977) 1174-82)의 방법으로 제조하였다.

상기 아미노산은 각각의 경우 물/디옥산 중에서 디-t-부틸- 디카르보네이트로 통상의 방법에 따라 각각 Boc으로 보호된 형태로 전환하였으며, 연속하여 에틸 아세테이트/헥산 혼합물로부터 재결정화하거나 실리카겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다(이동상: 에틸 아세테이트/석유 에테르 혼합물).

B 빌딩 블록으로 사용된 Boc으로 보호된 아미노산을 반응식 I에 나타내었다.

상기 B 빌딩 블록으로서의 아미노산은 또한 몇몇 경우 상응하는 벤질 에스테르로 전환되었으며 적절하게 보호된 A 빌딩 블록과 연결되었다. 여전히 미결합 상태인 N-H 기능기를 가진 화합물의 경우 이는 연속적으로 Boc기로 보호되었고, 벤질 에스테르기는 수소화로 제거하였고 빌딩 블록 A-B-OH는 결정화, 염 침전 또는 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 이 경로는 하기의 tBuOOC-CH₂-(Boc)(D)Cha-OH에 대해 예로서 기술되었다.

<(D)-시클로헥실알라닌 벤질 에스테르의 합성>

톨루엔 2200㎖ 중의 p-톨루엔설폰산 일수화물 109.7g(577mmol), (D)-시클로헥실알라닌 염산염 100g(481mmol) 및 벤질 알콜 104g(962mmol)의 현탁액을 서서히 가열하여 물 분리기를 사용하여 환류시켰다. 염화 수소의 방출 및 현탁액을 용해시켜 얻어진 맑은 용액이 80 내지 90^oC의 온도 범위에서 관찰되었다. 더이상 물이 분리되지 않을 때(약 4시간), 톨루엔 500㎖를 증류시키고, 반응 혼합물을 밤새 냉각시켜 얻은 잔류물을 여과하였으며 헥산으로 2회 각 1000㎖로 세척하였다. 얻어진 잔류물(195g)은 이후 디클로로메탄 2000㎖ 중에 현탁하였으며 이후 물 1000㎖를 가하고, 교반하면서 50% 농도 수산화나트륨 용액을 점진적으로 가하여 pH를 9 내지 9.5로 조정하였다. 유기상은 분리하고 물로 2회 각 500㎖로 세척한 후 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 이를 여과하여 건조제를 제거한 후 여액을 농축시켜 미색 유상물로서 표제 생성물 115g(94%)을 얻었다.

<N-(t-부틸록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닌 벤질 에스테르>

(D)-시클로헥실알라닌 벤질 에스테르 115g(440mmol)을 아세토니트릴 2000㎖에 용해하고 실온에서 탄산칼륨 607.5g(4.40mol) 및 t-부틸 브로모아세테이트 94.3g(484mmol)을 가하였다. 혼합물을 이 온도에서 3일간 교반하였다. 탄산염을 여과하고 아세토니트릴로 세척하였으며 모액을 30^oC, 20mbar에서 농축하였다. 잔류물을 메틸 t-부틸 에테르 1000㎖에 흡수시키고 유기상을 5% 농도 시트르산 및 포화 중탄산나트륨 용액으로 추출하였다. 유기상을 황산나트륨 상에서 건조시키고 건조 제를 제거하고 농축하여 얻어진 유상물(168g)을 하기 반응에 직접 사용하였다.

<N-Boc-N-(t-부틸록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닌 벤질 에스테르>

상기 합성으로 얻은 유상물(168g, 447mmol)을 아세토니트릴 1400㎖ 중에 용해시키고 탄산칼륨 분말 618g(4.47mmol) 및 디-t-부틸 디카르보네이트 107.3g(492mmol)을 가한 후 실온에서 6일간 교반하였다. 탄산칼륨을 흡인여과하고 아세토니트릴 약 1000㎖로 세척하였다. 여액을 농축하여 필요한 생성물 230g을 얻었다.

<N-Boc-N-(t-부틸록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닌시클로헥실암모늄염>

N-Boc-N-(t-부틸록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닌 벤질 에스테르 115g을 순수한 에탄올 1000㎖ 중에 용해시키고, 9g의 10% Pd/활성탄 존재하에서 대기압하, 25 내지 30^oC로 2시간동안 수소로 수소화시켰다. 여과하고 회전식 증발기에서 용매를 제거하여 얻은 100g(260mmol)의 황색 유상물을 아세톤 1600㎖ 중에 흡수시키고 가열하여 환류시켰다. 가열 조를 제거하고 아세톤 중의 시클로헥실아민 27g(273mmol)의 용액을 재빨리 깔때기로 적가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켜 필요한 염을 결정으로 얻었다. 고상물을 여과하고 아세톤 200㎖로 세척한 후 최종 정제를 위해 아세톤으로부터 1회 더 재결정하였다 잔류물을 약 30^oC의 진공 오븐에서 건조시켜 흰 분말로 필요한 염 70.2g을 얻었다.

N-Boc-N-(t-부틸록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실글라이신 시클로헥실암 모늄염을 시클로헥실글라이신을 전구체로 하여 유사하게 제조하였다. N-Boc-N-(t-부틸록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헵틸글라이신 및 N-Boc-N-(t-부틸록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로펜틸글라이신 유도체는 상응하는 시클로헵틸- 및 시클로펜틸-글라이신 화합물로부터 제조하였다.

<N-Boc-N-(t-부틸록시카르보닐에틸렌)-(D)-시클로헥실알라닌 시클로헥실암모늄염:>

a) t-부틸 3-브로모프로피오네이트

질소 역류 중에서, 브로모프로피온산 16.64g(109mmol) 및 농축한 2-메틸프로펜 150㎖ 및 진한 황산 2㎖를 -30^oC에서 오토클래이브용 유리 용기에 넣고, 오토클래이브를 밀봉한 후 혼합물을 실온에서 72시간 동안 교반하였다. 작업의 마무리를 위해 반응 용기를 다시 -30^oC로 냉각하고, 반응 용액을 얼음으로 냉각한 포화 탄산수소나트륨 용액 200㎖에 조심스럽게 부었다. 과량의 2-메틸프로펜을 교반하며 증류시키고 잔류물을 디클로로메탄(50㎖씩 3회)으로 추출하고, 합친 유기상을 황산나트륨 상에서 건조시키고 여과하여 건조제를 제거한 후, 물 펌프 진공 하에서 농축하였다. 유상 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(이동상 n-헥산, 후에 n-헥산/디에틸 에테르 9:1)로 정제하였다. 이로써 표제 화합물 18.9g을 얻었다.

b) N-(t-부틸록시카르보닐에틸렌)-(D)-시클로헥실알라닌 벤질 에스테르

(D)-시클로헥실알라닌 벤질 에스테르 49.4g(189mmol)을 아세토니트릴 250㎖ 중에 용해시키고, 이 용액을 t-부틸 브로모프로피오네이트 31.6g(151mmol)로 실온 에서 처리하여 혼합물을 5일간 환류시켰다. 혼합물을 여과하여 형성된 침전물을 제거하고 이를 아세토니트릴로 반복하여 세척한 후, 여액을 물 펌프 진공 하에서 농축하였다. 잔류물을 디클로로메탄 350㎖ 중에 흡수시키고 유기상을 5% 농도의 시트르산 및 포화 탄산수소나트륨 용액으로 추출하였다. 유기상을 황산나트륨으로 건조시키고 여과하여 건조제를 제거한 후 농축시켰다. 유상의 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(이동상 디클로로메탄, 후에 디클로로메탄/메탄올 95:5)로 정제하였다. 이로써 다음 반응에 직접 사용할 약간 불순한 유상물을 얻었다.

c) N-Boc-N-(t-부틸록시카르보닐에틸렌)-(D)-시클로헥실알라닌 벤질 에스테르

상기 합성으로 얻은 유상물(30g, 최대 70mmol)을 아세토니트릴 150㎖ 중에 용해시키고 용액을 디이소프로필에틸아민 28㎖(160mmol) 및 디-t-부틸 디카르보네이트 19.2(88mmol)로 처리한 후 3일간 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 물 펌프 진공 하에, 회전식 증발기에서 농축시킨 후, 잔류물을 n-헥산 중에 흡수시키고, 혼합물을 5% 농도의 시트르산 용액(3㎖씩 5회)으로 세척하였다. 합친 유기상을 황산나트륨 상에서 건조시키고 여과하여 건조제를 제거한 후 농축하였으며 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(이동상 헥산/에틸 아세테이트 95:5)로 분리하였다. 이로써 필요한 생성물 32.66g(64mmol)을 얻었다.

d) N-Boc-N-(t-부틸록시카르보닐에틸렌)-(D)-시클로헥실알라닌 시클로헥실암모늄염

N-Boc-N-(t-부틸록시카르보닐에틸렌)-(D)-시클로헥실알라닌 벤질 에스테르 32.66g(64mmol)을 순수한 에탄올 325㎖ 중에 용해시키고, 10% 순수한 Pd/활성 목탄 존재 중에서 대기압 하에, 25 내지 30^oC로 14시간 동안 수소로 수소화시켰다. 용액을 셀라이트(Celite, 등록상표명)를 통과시켜 여과하고, 나중 것을 에탄올로 세척한 후, 회전식 증발기에서 용매를 제거하여 얻은 황색 유상물 26.7g을 아세톤에 흡수시키고 가열하여 환류시켰다. 가열 조를 제거하고 아세톤 중의 시클로헥실아민 7g(70mmol)의 용액을 깔때기를 통해 재빨리 적가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켜 필요한 염을 결정화하였다. 고상물을 여과하고 아세톤 25㎖로 세척한 후 최종 정제를 위해 아세톤으로부터 1회 더 재결정하였다. 잔류물을 30^oC의 진공 오븐에서 건조시켜 흰색 분말로 필요한 염 26.6g(54mmol)을 얻었다.

<N-Boc-N-(t-부틸록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닌-3,4-디히드로프롤린:>

a) N-Boc-Pyr-OH(5g, 23.45mmol)를 메탄올 50㎖ 중에 용해시키고, 디옥산 중의 염산(4N, 30㎖)을 가하였다. 혼합물을 연속하여 환류하에서 12시간 동안 가열하였다. 용매를 회전식 증발기에서 제거하여 생성물로서 H-Pyr-OMe-염산염을 얻었다. 수득량: 3.84g(100%).

b) N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Cha-OH(8g, 20.75mmol)를 디클로메탄(75㎖) 중에 용해시키고, 에틸디이소프로필아민(15.5㎖, 89.24mmol)을 -10^oC에서 가하였다. 혼합물을 동일 온도에서 5분간 교반하고, 디클로로메탄(25㎖) 중의 H-Pyr-OMe 염산 염(3.4g, 20.75mmol)의 용액을 적가하였다. 에틸 아세테이트(50% 농도, 20㎖, 26.96mmol) 중의 무수 프로판포스폰산 용액을 연속하여 적가하고 2시간 동안 -10 내지 0^oC에서 교반하였다. 배치를 디클로로메탄으로 희석하고 포화 탄산수소나트륨 용액(80㎖씩 2회), 5% 농도 시트르산 용액(15㎖씩 2회) 및 포화 염화나트륨 용액 (20㎖, 1회)으로 세척하였다. 유기상을 황산나트륨 상에서 건조시키고 용매를 회전식 증발기에서 제거하였다. 조생성물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카겔, 디클로로메탄/메탄올=95/5)로 정제하였다. 수득량: 6.2g(60%).

c) N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Cha-Pyr-OMe(5.5g, 11.12mmol)을 디옥산 (40㎖)중에 용해시키고, 수산화나트륨 수용액(1N, 22.2㎖, 22.24mmol)을 가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 디옥산을 회전식 증발기에서 제거하고 수상을 에틸 아세테이트로 세척하였으며 황산수소칼륨 용액(20% 농도)으로 pH 1 내지 2가 되도록 산성화하였다. 수상을 디클로로메탄으로 추출하고 합친 유기상을 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 수득량: 5g(94%), 무색 발포체. 물로 포화시킨 n-헥산으로 재결정화하여 무색 결정체로서 상응하는 카르복실산을 얻었다(융점: 158 내지 160^oC).

<N-Boc-N-(t-부틸록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실글라이실-3,4-디히드로프롤린:>

이 화합물은 N-Boc-N-(t-부틸록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실글라이신 및 3,4-디히드로프롤린 메틸 에스테르로부터 상기와 유사하게 합성하였다.

<N-Boc-N-(t-부틸록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닌-프롤린:>

a) N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Cha-OH(20g, 51.88mmol)을 건조 메틸렌 클로라이드(100㎖) 중에 용해시켰다. -5^oC로 냉각한 후, N-에틸디이소프로필아민(90㎖, 518.88mmol)을 적가하고 5분간 계속하여 교반하였다. H-Pro-OBn x HCl(12.54g, 51.88mmol)을 연속하여 -5^oC에서 가하고, 혼합물을 5분간 교반한 후, 메틸렌 클로라이드(45㎖)로 희석한, 에틸 아세테이트 중의 50% 농도의 무수 프로판포스폰산 용액(45.1㎖, 62.26mmol)을 30분에 걸쳐 적가하였다. 혼합물을 1시간 동안 0 내지 5^oC에서 교반한 후, 이를 서서히 실온으로 승온시키고, 12시간 동안 실온에서 교반하였다. 배치를 메틸렌 클로라이드로 희석하고 포화 탄산수소나트륨 용액, 5% 농도 시트르산 용액 및 포화 염화나트륨 용액으로 연속적으로 세척하였다. 황산나트륨 상에서 건조시킨 후 용매를 진공에서 증류시켰다. 수득량: 28.9g(연황색 유상물, 97%).

b) 상기 a)에 기술된대로 얻은 생성물(28.5g, 49.76mmol)을 메탄올(650㎖) 중에 용해시키고, 10% 순수 Pd/목탄(1.8g)을 가하고, 혼합물을 실온, 수소 1 기압 하에서 수소화시켰다. 촉매를 연속하여 셀라이트(등록상표명)를 통과시켜 여과하여 제거하고 여액을 진공에서 농축시켰다. 수득량: 22.2 g(무색 발포체, 92%).

<N-Boc-N-(t-부틸록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실글라이실-프롤린:>

이 화합물은 N-Boc-N-(t-부틸록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실글라이신 및 프롤린 메틸 에스테르로부터 상기와 유사하게 제조하였다.

<D 빌딩 블록 :>

D 빌딩 블록으로 사용되는 화합물인 (L)-프롤린, (L)-피페콜산 및 (L)-아제티딘카르복실산은 유리 아미노산으로, Boc으로 보호된 화합물로 또는 이에 상응하는 메틸 에스테르로서 상업적으로 이용가능하다. (L)-3,4-디히드로프롤린 또는 (D,L)-4,5-디히드로피페콜산 또는 이에 상응하는 보호된 유도체가 D 빌딩 블록으로 사용된다면 제조되는 화합물은 일반적으로 최종 단계에서 수소화시켜 상응하는 프롤린 유도체를 제공한다. (L)-3,4-디히드로프롤린(H-Pyr-OH)은 상업적으로 이용가능하며, (D,L)-4,5-데히드로피페콜산 (H-(D,L)-Dep-OH)은 문헌(A. Burgstahler, C. E. Aiman, J. Org. Chem. 25 (1960), 489) 또는 문헌(C. Herdeis, W. Engel, Arch. pharm 326 (1993), 297)의 방법에 따라 제조할 수 있다.

E 빌딩 블록은 하기와 같이 합성하였다:

<5-아미노메틸-2-시아노티오펜:>

이 빌딩 블록은 WO 제95/23609호에 기술된 대로 합성하였다.

<4-아미노메틸-2-시아노티오펜:>

a) 2-브로모-4-포르밀티오펜

3-포르밀티오펜 36g(320mmol)을 메틸렌 클로라이드 600㎖ 중에 용해시키고, 용액을 5^oC까지 냉각시킨 후, 알루미늄 트리클로라이드 100g(750mmol)을 한번에 소량씩 가한 후, 이 반응 혼합물을 연속하여 환류시켰다. 메틸렌 클로라이드 40㎖ 중의 브롬 59g(19㎖, 360mmol)의 용액을 45분에 걸쳐 적가하고, 혼합물을 4시간 동안 환류하에서 후반응시켰다. 냉각한 후, 반응 용액을 얼음물 600g에 붓고, 메틸렌 클로라이드로 추출하고 유기상을 포화 탄산수소나트륨 용액으로 세척한 후, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 회전식 증발기에서 진공으로 농축시켰다. 얻어진 조생성물 64.5g을 컬럼 크로마토그래피(실리카겔, 메틸렌 클로라이드/석유 에테르)로 정제하였다. 총 56.5g의 약간 불순한 생성물을 얻었다.

b) 2-시아노-4-포르밀티오펜

시안화구리(I) 7.6g(85mmol)을 DMF 25㎖ 중의 2-브로모-4-포르밀티오펜 13.53g(70.82mmol)의 용액에 가하고 반응 혼합물을 3.5시간 동안 환류시켰다. 환류 동안 원래 연녹색이었던 현탁액은 흑색 용액으로 변하였다. 물을 가한 후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 반복하여 추출하고, 유기상을 합친 후 포화 염화나트륨 용액으로 세척하고 황산나트륨 상에서 건조시킨 후, 약간의 감압하에서 농축시켰다. 잔류물(7g)을 에테르로 처리하여 순수한 생성물 1.6g을 얻었다. 다른 배치로부터의 조생성물과 함께 모액을 크로마토그래피(실리카겔, 메틸렌 클로라이드/석유 에테르 1:1)로 정제하였다. 전체 56.5g의 2-브로모-4-포르밀티오펜을 반응시켜 순수한 생성물로 2-시아노-4-포르밀티오펜 12.6g을 얻었다(수율 31%).

c) 2-시아노-4-히드록시메틸티오펜

소듐 보로하이드라이드 3.47g(91.8mmol)을 에탄올 200㎖ 중의 2-시아노-4-포르밀티오펜 12.6g(91.8mmol)의 현탁액에 한번에 소량씩 가하고, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이 과정이 진행되는 중에 반응 혼합물이 서서히 맑은 용액을 형성 하였다. 진공에서 농축한 후, 잔류물을 에틸 아세테이트에 흡수시키고, 포화 염화나트륨 용액, 5% 농도 시트르산 및 포화 염화나트륨 용액으로 연속적으로 세척하고, 유기상을 황산나트륨으로 건조시키고 진공에서 농축시켰다. 11.7g의 거의 순수한 생성물을 얻었다(수율 91.5%).

d) 4-브로모메틸-2-시아노티오펜

2-시아노-4-히드록시메틸티오펜 11.7g(84.07mmol)을 트리페닐포스핀 24.1g(91.87mmol)과 함께 실온에서 THF 100㎖중에 용해시키고, 테트라브로모메탄 30.47g(91.87mmol)을 한번에 소량씩 얼음 조에서 냉각시키며 가하였다. 3시간 동안 실온에서 교반한 후, 혼합물을 진공에서 농축하고 실리카겔 상에서 크로마토그래피(메틸렌 클로라이드/석유 에테르)로 정제하였다. 그 결과 석유 에테르를 여전히 함유하는 연황색 결정 18.8g을 얻었다.

e) 4-N,N-비스(t-부톡시카르보닐)아미노메틸-2-시아노티오펜

4-브로모메틸-2-시아노티오펜(조생성물, 최대 84.07mmol) 18.81g을 THF 160㎖ 중에 용해시키고, 용액을 5^oC까지 냉각한 후, 80% 수소화나트륨 현탁액 3.07g(102.4mmol)을 한번에 소량씩 가하였다. 디-t-부틸 이미노디카르복실레이트 22.25g(102.4mmol)을 THF 160㎖ 중에 용해시키고, 연속하여 5^oC에서 적가하고, 혼합물을 이후 밤새 실온에서 교반하였다. TLC에 반응이 완결되지 않은 것으로 나타나서, 배치를 4.5시간 동안 30 내지 35^oC로 가열하였다. 0 내지 5^oC로 냉각시킨 후, 포화 염화암모늄 용액 33㎖을 천천히 적가한 후, THF를 진공에서 증류시키고, 잔류 물을 에틸 아세테이트로 반복하여 추출하였다. 에틸 아세테이트 상을 포화 염화나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시킨 후 회전식 증발기에서 증류시켰다. 적색의 점성 잔류물(34.61g)을 후속 반응에 조생성물로 사용하였다.

f) 4-아미노메틸-2-시아노티오펜 염산염

4-N,N-비스(t-부톡시카르보닐)아미노메틸-2-시아노티오펜(조생성물, 최대 84.07mmol) 34.61g을 에틸 아세테이트 600㎖ 중에 용해시키고, 용액을 0 내지 5^oC로 냉각시킨 후, HCl 기체로 포화시켜 실온까지 승온시켰다. 3시간 후, 얻어진 현탁액을 회전식 증발기에서 증류시키고, 생성물을 메틸렌 클로라이드와 함께 반복하여 증류시켰다. 잔류물을 에테르로 교반하여 추출하고 진공에서 건조하였다. 미색 분말로 13.85g의 생성물을 얻었다. 두 단계를 거친 수율: 94.3%.

<2-아미노메틸-4-시아노티오펜:>

a) 4-시아노티오펜-2-카르브알데히드

4-브로모티오펜-2-카르브알데히드 49.3g(258.05mmol) 및 시안화구리(I) 27.8g(310.41mmol)을 무수 DMF 130㎖ 중에 현탁시키고, 현탁액을 8시간 동안 환류시켰다. 용매를 회전식 증발기에서 진공으로 하여 40^oC에서 증류시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트 중에 현탁하여, 현탁액을 속실레쓰 장치로 옮겼다. 잔류물을 밤새 추출하고, 황색 용액을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 회전식 증발기에서 진공으로 하여 증류시켜 얻은 황색 고상물을 에테르로부터 재결정하였다. 25.3g의 생성물을 얻었다(이론치의 80%).

b) 4-시아노티오펜-2-카르브알데히드 옥심

4-시아노티오펜-2-카르브알데히드 11.6g(84.6mmol)을 메탄올 140㎖에 용해시키고, 탄산나트륨 12.3g(116.1mmol)을 가하였다. 연속하여 히드록실아민 염산염 6.5g(93.5mmol)을 15^oC에서 냉각시키며 한번에 소량씩 가하고, 이 혼합물을 10^oC에서 2시간 동안 교반하였다. 물 80㎖를 가한 후, 반응 혼합물을 디에틸 에테르(50㎖씩 5회)를 사용하여 추출하였으며 유기상을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 용매는 진공에서 제거하였다. 황색 결정형 분말로서 필요한 생성물 12.5g을 얻었다(이론치의 96%).

c) 2-아미노메틸-4-시아노티오펜 염산염

트리플루오로아세트산 50㎖ 중의 4-시아노티오펜-2-카르브알데히드 옥심 4.65g(30.60mmol)의 용액에 미세한 아연 가루 11.22g(171.64mmol)을 주의깊게 여러번에 나누어 가하고, 0 내지 5^oC로 냉각하였으며, 이 과정이 진행되는 중에 온도는 15^oC를 넘지 않도록 하였다. 실온에서 3시간 동안 교반한 후, 과량의 아연을 가만히 따라내고, 진공(오일 펌프)에서 트리플루오로아세트산의 대부분을 제거하였으며, 남은 유상물은 0^oC까지 냉각하였다. 미리 0^oC까지 냉각시킨 3N 수산화나트륨 수용액 150㎖ 및 메틸렌 클로라이드 2ℓ의 혼합물을 한번에 소량씩 가하였다. 불용성 성분을 여과하여 제거한 후, 유기상을 분리하고 수상을 메틸렌 클로라이드(20㎖씩 8회)를 사용하여 추출하였고, 수집된 유시강을 황산나트륨 상에서 건조하였으 며, 연속하여 6M 메탄올성 염산 20㎖를 얼음으로 냉각하며 가하였다. 이 과정에서 생성물은 흰색 고상물의 염산염 형태로 침전되었으며, 현탁액을 밤새 4^oC까지 냉각시켜 결정화를 완결시켰다. 무색 침상물로 2.2g의 생성물을 얻었다(이론치의 50%).

<5-아미노메틸-3,4-디메틸티오펜-2-카르복사마이드 염산염:>

5-시아노-3,4-디메틸티오펜-2-카르복사마이드 19g(105.42mmol)을 메탄올 760㎖ 및 2N 염산 용액 110㎖에 현탁하고 10% Pd/목탄 9.5g을 가한 후, 혼합물을 실온에서 수소화시켰다. 수소 4.7ℓ를 흡수시킨 후(4시간), 메탄올을 진공에서 증류시키고, 수상을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 후 연속하여 동결 건조하였다. 그 결과 흰색 고상물로 필요한 생성물 16.3g을 얻었다(이론치의 70.4%).

<5-아미노메틸이속사졸-3-카르복사마이드:>

a) 에틸 5-클로로메틸이속사졸-3-카르복실레이트

트리에틸아민 21.2g(210mmol)을 10 내지 15^oC로 냉각한 에틸 2-클로로-2-히드록시이미노아세테이트 30g(198mmol) 및 프로파르길 클로라이드 150㎖의 혼합물에 교반하며 적가하고 실온에서 1시간동안 계속하여 교반하였다. 물을 연속하여 가하고, 혼합물을 에테르로 추출한 후, 유기상은 황산마그네슘 상에서 건조하고 회전식 증발기에서 진공으로 증류시켰다. 잔류물을 0.67mbar(0.5torr)의 진공에서 증류시키고, 생성물을 116 내지 122^oC에서 증류시켰다.

b) 5-클로로메틸이속사졸-3-카르복실산

에탄올 150㎖ 중의 에틸 5-클로로메틸이속사졸-3-카르복실레이트 47.3g(250mmol)에 수산화칼륨 14g(250mmol)을 가하고 반응 혼합물을 60 내지 70^oC에서 6시간 동안 교반하였다. 냉각시킨 후, 혼합물을 진공에서 농축하고, 잔류물을 물에 흡수시키고, 에테르로 추출하였다. 수상을 염산으로 산성화시키고, 연속하여 에테르로 반복해 추출하였다. 에테르상을 황산나트륨으로 건조시키고 진공(오일 펌프, 50^oC)에서 농축하여 필요한 생성물 31g을 얻었다(이론치의 77%).

c) 5-클로로메틸이속사졸-3-카르복실산 클로라이드

5-클로로메틸이속사졸-3-카르복실산 120g(743mmol)을 티오닐 클로라이드 500㎖ 및 피리딘 2적과 함께 10시간 동안 환류시키고, 연속하여 진공에서 농축시킨 후 27mbar(20torr)에서 증류시켰다. 생성물을 125 내지 133^oC에서 증류시켜 78g을 얻었다(이론치의 58%).

d) 5-클로로메틸이속사졸-3-카르복사마이드

메틸렌 클로라이드 100㎖ 중의 5-클로로메틸이속사졸-3-카르복실산 클로라이드 10g(55.56mmol)의 용액에 암모니아를 1시간 동안 10 내지 15^oC에서 통과시키고 연속하여 실온에서 1시간동안 계속하여 교반하였다. 용액을 0^oC로 냉각시킨 후, 침전물을 흡인여과하고 미량의 차가운 메틸렌 클로라이드로 세척하였다. 잔류물을 물로 2회 교반하며 추출하여 암모늄염을 제거하였다. 진공에서 건조시켜 미색 분말로 6.58g의 순수한 생성물을 얻었다(이론치의 74%).

e) 5-아미노메틸이속사졸-3-카르복사마이드 염산염

진한 암모니아 용액 100㎖ 및 메탄올 72㎖의 혼합물에 5-클로로메틸이속사졸-3-카르복사마이드 2.44g(15.2mmol)을 가하고, 반응 용액을 40^oC까지 승온시켰으며 이 과정 중에 암모니아 가스로 계속 포화시켰다. 6시간 후에 전구체가 반응되었다. 메탄올을 진공에서 제거하고 수상을 메틸렌 클로라이드를 사용하여 2회 추출하였으며, 연속하여 회전식 증발기의 온화한 조건 하에서 진공으로 하여 증류시켜 건조하였다. 조생성물의 형태로 흰색 고상 잔류물을 커플링 반응에 사용하였다.

2-아미노메틸록사졸-4-티오카르복사마이드 및 2-아미노메틸티아졸-4-티오카르복사마이드는 비데노프(G. Videnov), 카이어(D. Kaier), 켐프터(C. Kempter) 및 정 앤쥬(G. Jung Angew)의 문헌(Cheime (1996) 108, 1604)의 메틸렌 클로라이드 중의 에테르성 염산을 사용한 N-Boc으로 보호된 화합물의 탈보호화 방법에 따라 제조하였다.

<4-아미노메틸티아졸-2-티오카르복사마이드:>

a) 모노티오옥살릭 디아마이드

모노티오옥살릭 디아마이드는 발터 및 보데 리비히스(W. Walter, K. -D. Bode Liebigs)의 문헌(Ann. Chem. 660 (1962), 74-84)의 방법에 따라 에틸 티오옥사마이데이트로부터 출발하여 제조하였다.

b) 2-카르바모일-4-클로로메틸티아졸

에틸 티오옥사마이데이트 10g(96mmol)을 n-부탄올 170㎖에 가하고, 1,3-디클로로아세톤 26g(204mmol)을 가하였다. 혼합물을 90분동안 112^oC, 질소 하에서 가열하였다. 반응 혼합물을 이후 진공에서 농축하고 잔류물을 교반하며, n-헥산(120㎖)으로 추출하여 순수한 생성물 10g을 얻었다.

c) 4-Boc-아미노메틸-2-카르바모일티아졸

2-카르바모일-4-클로로메틸티아졸 10g(56.6mmol)을 메탄올 350㎖ 중의 암모니아로 포화시킨 용액 및 25% 농도 암모니아 수용액 80㎖에 가하였다. 반응 혼합물을 계속하여 암모니아로 포화시키며 6시간 동안 40 내지 42^oC까지 승온시키고, 이후 진공에서 농축하고 메탄올과 함께 증류시켰다. 연속하여 잔류물을 우선 에테르로, 이후에는 아세톤으로 교반하며 추출하였다. 여전히 소량의 염화암모늄을 함유하는 조생성물 7.6g을 분리하였다. 이 제2 생성물을 제거하기 위해 조생성물을 디옥산 수용액 중의 (Boc)₂O와 반응시키고, 보호된 화합물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 그 결과 순수한 생성물 4.95g을 얻었다.

d) 4-Boc-아미노메틸-2-시아노티아졸

4-Boc-아미노메틸-2-카르바모일티아졸 4.95g(19.24mmol)을 메틸렌 클로라이드 90㎖ 및 디이소프로필에틸아민 16.7㎖(97.44mmol)에 가하고, 혼합물을 0^oC까지 냉각하였다. 메틸렌 클로라이드 10㎖ 중의 무수 트리플루오로아세트산 6.35㎖ 의 용액을 0 내지 5^oC에서 적가하고, 혼합물을 연속하여 실온까지 승온시켰다(TLC로 확 인). 이후, 물 25㎖를 가하고, 혼합물을 30분간 실온에서 교반하고 10% 농도의 시트르산 용액으로 pH를 2.5로 하였다. 유기상을 반복하여 세척하고 황산마그네슘을 사용하여 건조시켰으며 진공에서 농축하였다. 이후 단계에서 추가의 정제없이 사용되는 점성의 연한 갈색의 조생성물 5.4g을 얻었다.

e) 4-Boc-아미노메틸-2-티오카르바모일티아졸

d)로부터 얻은 조생성물(최대 19.24mmol)을 피리딘 65㎖ 및 트리에틸아민 5㎖에 용해시키고 황화 수소로 포화시킨 후 실온에서 주말동안 정치시켰다. 반응 혼합물을 이후 회전식 증발기에서 진공으로 하여 증류시키고, 잔류물을 에테르 및 에틸 아세테이트의 혼합물에 흡수시켰다. 혼합물을 10% 농도의 시트르산 용액 및 물로 세척하고 황산마그네슘 상에서 건조시킨 후 회전식 증발기에서 진공으로 하여 증류시켜 연황색 고상 발포체로 6.0g을 얻었다.

f) 4-아미노메틸-2-티오카르바모일티아졸 염산염

상기 실험에서 얻은 생성물을 에틸렌 클로라이드 100㎖ 중에 흡수시키고, 약 5mol의 에테르성 염산 용액 30㎖를 가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하고 반응 혼합물을 이후 회전식 증발기에서 진공으로 하여 증류시켜 건조하였다. 이를 에테르와 함께 증류시키고 연속하여 메틸렌 클로라이드로 교반하며 추출하여 연황색 무정형 물질로 4.15g의 필요한 생성물을 얻었다.

4-아미디노-2-(N-Boc-아미노메틸)-5-메틸티아졸 X HOAc

a) α-아세틸글라이신 메틸 에스테르 염산염

포타슘 t-부틸레이트(17.8g, 157.9mmol)을 THF(120㎖) 중에 가하고, THF(60 ㎖) 중의 N-디페닐메틸리덴글라이신 메틸 에스테르(40g, 157.9mmol) 용액을 -70^oC에서 가하였다. 동일 온도에서 황색 용액을 30분간 교반하고 이를 -70^oC에서 THF(70㎖) 중의 아세틸 클로라이드(12.4g, 157.9mmol) 용액에 적가하였다. 혼합물을 동일 온도에서 1.75시간 동안 교반한 후, 3N 염산(160㎖)을 가하고 황색 현탁액을 실온에서 10분 더 교반하였다. THF를 실온에서 회전식 증발기로 제거하고 남은 수상을 디에틸 에테르로 3회 세척하였다. 수상을 동결 건조시키고 잔류물을 메탄올로 교반하며 추출하였다. 생성물의 메탄올성 용액을 35^oC, 회전식 증발기 상에서 농축하였다. 수득량: 26.4g(157.9mmol, 정량, 황색 고상물).

b) BOC-Gly-(α-아세틸-Gly)-OMe

BOC-Gly-OH(24.05g, 137.27mmol)을 THF(400㎖) 중에 가하고, 트리에틸아민(13.87g, 137.19mmol)의 용액을 가하였다. 무색 용액을 -20^oC까지 냉각하고, THF(20㎖) 중의 이소부틸 클로로포르메이트(18.75g, 137.28mmol) 용액을 동일 온도에서 적가하였다. 무색의 현탁액을 -20^oC에서 30분 더 교반하고 이후 α-아세틸글라이신 메틸 에스테르 염산염(23.0g, 137.3mmol)의 용액을 여러번에 나누어 가하였다. 혼합물을 -20^oC에서 30분간 교반한 후 THF(20㎖) 중의 트리에틸아민(13.87g, 137.19mmol)을 45분에 걸쳐 적가하였다. 혼합물을 -20^oC에서 4시간 동안 교반한 후 다시 실온에서 12시간 동안 더 교반을 계속하였다. 잔류물 을 흡인여과하고 THF로 세척하였으며 합친 THF상을 회전식 증발기에서 농축시켰다.

수득량: 44.1g(연한 갈색의 유상물).

¹H NMR(270MHz, CDCl₃) δ=1.45(s, 9H), 2.40(s, 3H), 3.85(s, 3H), 3.90(d, J=6.5Hz, 2H), 5.25(d, J=6.5Hz, 1H), 7.30(sbr, 1H).

c) 메틸 2-(N-Boc-아미노메틸)-5-메틸티아졸-4-카르복실레이트

BOC-Gly-(α-아세틸-Gly)-OMe(39.8g, 138.2mmol)을 THF 400㎖에 가하고, 로슨 시약(96.6g, 238.8mmol)을 실온에서 여러번에 나누어 가하였다. 황색 용액을 이후 1.5시간 동안 환류시키고, THF를 회전식 증발기에서 제거하였다. 잔류물(적갈색 유상물)을 디에틸 에테르(600㎖)로 교반하며 추출하였다. 에테르 상을 용해되지 않은 갈색 유상물로부터 가만히 따르고 5% 농도 시트르산(2회), 포화 탄산수소나트륨 수용액(9회), 및 물(2회)로 계속해서 세척하였다. 황산마그네슘으로 건조한 후, 용매를 회전식 증발기에서 제거하였다. 수득량: 22.0g(77mmol, 56%, 갈색 고상물).

(주회전체는 Boc기에 관련된다)

d) 2-(N-Boc-아미노메틸)-5-메틸티아졸-4-카르복실산

메틸 2-(N-Boc-아미노메틸)-5-메틸티아졸-4-카르복실레이트(22.0g, 77mmol)을 에탄올(100㎖) 중에 용해시키고, 물(50㎖) 중의 LiOH(2.2g, 92mmol)의 용액을 가하였다. 혼합물을 실온에서 30분간 교반한 후, 에탄올을 회전식 증발기에서 제 거하고, 남은 용액을 물(70㎖)로 희석하였다. 수상을 에틸 아세테이트(3회)로 세척하고 20% 농도의 황산수소나트륨 용액으로 pH를 2가 되게 하였으며, 이 과정이 진행되는 중에 연한 갈색의 유상물이 분리되었다. 수상을 디클로로메탄으로 추출하고 합친 유기상을 황산마그네슘으로 건조하고 진공에서 농축하였다. 연한 갈색의 잔류물을 디이소프로필 에테르로 교반하며 추출하였다. 남은 무색의 침전물을 흡인 여과하고 디이소프로필 에테르로 세척하였다. 수득량: 6.9g(25.4mmol, 33%, 무색 고상물).

e) 2-(N-Boc-아미노메틸)-5-메틸티아졸-4-카르복사마이드

2-(N-Boc-아미노메틸)-5-메틸티아졸-4-카르복실산(6.8g, 25mmol)을 THF(100㎖) 중에 용해시키고 트리에틸아민(2.53g, 25mmol)을 가하였다. 혼합물을 -20^oC로 냉각하고 THF(10㎖) 중의 이소부틸 클로로포르메이트(3.41g, 25mmol)를 적가하였다. 혼합물을 -20^oC에서 30분간 교반한 후, 암모니아 가스를 45분간 연한 갈색의 현탁액에 통과시켰다. 혼합물을 이후 실온까지 승온시켰다. 잔류물을 흡인여과하고 THF로 추출하였으며 여액을 농축하였다. 수득량: 6.9g(25mmol, 정량).

f) 4-시아노-2-(N-Boc-아미노메틸)-5-메틸티아졸

2-(N-Boc-아미노메틸)-5-메틸티아졸-4-카르복사마이드(6.8g, 25mmol)을 디클 로로메탄(120㎖) 중에 가하였다. 혼합물을 0^oC까지 냉각시킨 후, 디이소프로필에틸아민(15.84g, 122.8mmol)을 적가하였다. 이후, 디클로로메탄(20㎖) 중의 무수 트리플루오로아세트산(8.25g, 39.3mmol)의 용액을 -5^oC에서 30분에 걸쳐 가하였다. 혼합물을 0^oC에서 30분간 교반한 후, 실온까지 승온시키고, 다시 12시간 동안 교반을 계속하였다. 혼합물을 디클로로메탄(100㎖)으로 희석하고, 20% 농도의 시트르산, 포화 탄산수소나트륨 용액 및 포화 염화나트륨 용액으로 세척하였다. 유기상을 황산마그네슘으로 건조하고 진공에서 농축하였다. 수득량: 6.3g(25mmol, 정량).

g) 4-아마이디노-2-(N-Boc-아미노메틸)-5-메틸티아졸 x CH₃COOH

4-시아노-2-(N-Boc-아미노메틸)-5-메틸티아졸(5.5g, 21.74mmol)을 메탄올(15㎖) 중에 용해하고, N-아세틸시스테인(4.1g, 25.12mmol)을 가하였다. 혼합물을 이후 60^oC까지 승온시키고, 암모니아를 22시간 동안 통과시켰다. 배치를 메탄올로 희석하고 아세테이트 이온 교환기를 통과시켰다. 메탄올을 회전식 증발기에서 제거하고 잔류물을 아세톤으로 교반하며 추출하였다. 무색의 잔류물을 흡인여과하고 진공에서 건조시켰다. 수득량: 4.75g(14.4mmol, 66%, 무색의 고상물).

2-아미노메틸-5-아마이디노-4-메틸티아졸 x 2HCl

a) N-BOC-글라이신 티오아마이드

N-Boc-글라이시노니트릴(12.0g 76.8mmol) 및 디에틸아민(0.16㎖, 2.1mmol)을 톨루엔(100㎖) 중에 용해시켰다. 용액을 -10^oC까지 냉각하고, 황화 수소로 포화시킨 후, 연속하여 실온에서 밤새 교반하였다. 형성된 침전물을 흡인여과하고 톨루엔으로 세척하였다. 생성물을 45^oC, 진공에서 건조하였다. 수득량: 13.2g(69.4mmol, 90.3%, 황색 고상물).

b) 메틸 2-(N-BOC-아미노메틸)-4-메틸티아졸-5-카르복실레이트

N-BOC-글라이신 티오아마이드(10.0g, 52.6mmol)을 메탄올(70㎖) 중에 가하고, 메틸 2-클로로아세토아세테이트(7.9g, 52.6mmol)을 가하였다. 혼합물을 2시간 동안 60^oC에서 승온시키고, 연속하여 실온에서 48시간 동안 교반하였다. 메탄올을 회전식 증발기에서 제거하고 잔류물을 아세톤/디에틸 에테르로 교반하며 추출하였다. 남은 침전물을 흡인 여과하고 여액을 농축하였다. 여액으로부터 얻은 고상물로 생성물을 구성하였다(TLC 및 HPLC 이후에 순수). 수득량: 8.7g(30.4mmol, 57.8%).

ESI-MS: 287(M+H⁺).

c) 2-(N-BOC-아미노메틸)-4-메틸티아졸-5-카르복실산

메틸 2-(N-BOC-아미노메틸)-4-메틸티아졸-5-카르복실레이트(2.8g, 9.74mmol) 을 1,4-디옥산(30㎖)에 용해시키고, 1N 수산화나트륨 용액(19㎖)을 가하였다. 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반한 후, 1,4-디옥산을 회전식 증발기에서 제거하였다. 이를 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 세척하였다. 수상을 20% 농도 황산수소칼륨 용액으로 산성화하고, 이 과정중에 얻어진 침전물을 흡인 여과하고 물로 세척하였다. 그 결과 얻어진 생성물을 40^oC, 진공 건조 오븐에서 건조하였다. 수득량: 2.5g.

d) 2-(N-BOC-아미노메틸)-4-메틸티아졸-5-카르복사마이드

2-(N-BOC-아미노메틸)-4-메틸티아졸-5-카르복실산(12.6g, 46.27mmol)을 디클로로메탄(460㎖) 및 디메틸포름아마이드(0.4㎖) 중에 용해시켰다. 혼합물을 0^oC,까지 냉각한 후, 디클로로메탄(40㎖) 중의 옥살릴 클로라이드(6.46g, 50.90mmol) 용액을 30분에 걸쳐 적가하였다. 혼합물을 0^oC에서 2시간 동안 교반한 후, 이를 -20^oC까지 냉각하고, 동일 온도에서 암모니아를 반응이 완결될 때까지 통과시켰다. 혼합물을 연속적으로 실온까지 승온시키고 물로 세척하였다. 이 과정 중에 생성된 침전물을 흡인 여과하였다. 유기상을 5% 농도 시트르산 용액으로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조하였으며 회전식 증발기에서 농축하였다. 얻어진 고상물을 미리 여과한 침전물과 합쳐 50^oC에서 진공 건조 오븐에서 건조하였다. 수득량: 9.8g(36.12mmol, 78%).

e) 2-(N-BOC-아미노메틸)-5-시아노-4-메틸티아졸

2-(N-BOC-아미노메틸)-4-메틸티아졸-5-카르복사마이드(11.13g, 41.02mmol)를 디클로로메탄(75㎖) 중에 현탁시켜 0^oC까지 냉각하였다. 동일 온도에서 우선 에틸디이소프로필아민(17.86㎖, 102.55mmol)을 가하고, 이후 천천히 디클로로메탄(20㎖) 중의 무수 트리플루오로아세트산(6.56㎖, 47.17mmol) 용액을 가하였다. 1시간 동안 교반한 후, 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고 5% 농도의 시트르산 용액으로 세척하였다. 황산마그네슘으로 건조한 후, 용매를 회전식 증발기에서 제거하고 조생성물을 플래쉬 크로마토그래피로 정제하였다.

수득량: 6.5g(25.66mmol, 63%).

f) 2-(N-BOC-아미노메틸)-4-메틸티아졸-5-티오아마이드

2-(N-BOC-아미노메틸)-5-시아노-4-메틸티아졸(7.5g, 29.61mmol)을 피리딘(30㎖) 중에 용해하고, 트리에틸아민(27㎖)을 가하였다. 용액을 황화 수소로 0^oC에서 포화시키고, 이후 48시간 동안 실온에서 정치시켰다. 용매를 연속하여 회전식 증발기에서 제거하고 잔류물을 에틸 아세테이트에 흡수시키고, 20% 농도 황산수소칼륨 용액으로 세척한 후, 황산마그네슘 상에서 건조하였다. 용매를 회전식 증발기에서 제거하고 조생성물을 디클로로메탄에 용해하고 석유 에테르로 침전시켰다. 침전된 생성물을 흡인 여과하고 진공 건조 오븐에서 40^oC로 건조시켰다. 수득량: 7.1g(24.7mmol, 83%).

g) 5-아마이디노-2-(N-BOC-아미노메틸)-4-메틸티아졸 x HOAc

2-(N-BOC-아미노메틸)-4-메틸티아졸-5-티오아마이드(7.1g, 24.70mmol)을 디 클로로메탄(40㎖) 중에 용해하고, 요오도메탄(17.5g, 123.52mmol)을 가하였다. 혼합물을 실온에서 56시간 동안 교반한 후, 용매를 회전식 증발기에서 제거하였다. 잔류물을 10% 농도의 메탄올성 암모늄 아세테이트 용액(29㎖)에 용해하고 40^oC에서 반응이 완결될 때까지 교반하였다. 용매를 회전식 증발기에서 제거하고 잔류물을 디클로로메탄으로 교반하며 추출하여 얻어진 고상물을 흡인 여과하고 디클로메탄으로 세척하였다. 잔류물을 메탄올에 용해시키고 아세테이트를 채운 이온 교환기를 사용하여 상응하는 아세테이트로 전환시켰다. 용매를 회전식 증발기에서 제거하고 얻어진 적갈색 유상물을 디클로로메탄으로 교반하며 추출하였다. 이 과정 중에 얻어진 무색의 고상물을 40^oC, 진공에서 건조하였다. 수득량: 5.3g(16.04mmol, 65%).

h) 5-아마이디노-2-아미노메틸-4-메틸티아졸 x 2HCl

5-아마이디노-2-(N-BOC-아미노메틸)-4-메틸티아졸 x HOAc(1.6g, 4.84mmol)을 디클로로메탄(20㎖) 중에 현탁시키고, 1,4-디옥산(4.84㎖, 19.37mmol) 중의 4M 염산을 실온에서 가한 후, 혼합물을 동일 온도에서 3시간 동안 교반하였다. 생성물을 여과하고 디클로로메탄으로 세척하여 40^oC, 진공에서 건조하였다. 수득량: 0.73g(3.00mmol, 62%).

2-아미노메틸-5-아마이디노-4-트리플루오로메틸티아졸 x 2HCl

a) 에틸 2-(N-BOC-아미노메틸)-4-트리플루오로메틸티아졸-5-카르복실레이트

N-BOC-글라이신 티오아마이드(5.0g, 26.28mmol)을 아세토니트릴(60㎖) 중에 용해하고, 에틸 2-클로로-4,4,4-트리플루오로아세토아세테이트(6.38g, 26.28mmol) 용액을 5 내지 10^oC에서 적가하였다. 이후, 혼합물을 5^oC에서 다시 30분간 교반하고 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 배치를 이후 0^oC까지 냉각하고 트리에틸아민(12㎖, 86.77mmol)을 적가하였다. 혼합물을 20분 동안 0^oC에서 교반한 후, 황색 현탁액이 맑은 적갈색 용액으로 변하였다. 이후 티오닐 클로라이드(2.1㎖, 28.89mmol)를 0^oC에서 서서히 적가하였다. 혼합물을 0^oC에서 20분간 교반한 후, 이를 다시 1시간 동안 실온으로 승온시켰다. 용매를 회전식 증발기에서 제거하고 잔류물을 물(100㎖)에 흡수시키고 에틸 아세테이트로 반복하여 추출하였다. 합친 유기상을 황산나트륨으로 건조하고 농축하였다. 조생성물을 크로마토그래피(실리카겔, MeOH:DCM=2:98)로 정제하였다. 수득량: 2.2g(6.4mmol, 24.5%).

b) 2-(N-BOC-아미노메틸)4-트리플루오로메틸티아졸-5-카르복사마이드

에틸 2-(N-BOC-아미노메틸)-4-트리플루오로메틸티아졸-5-카르복실레이트(15g, 42.33mol)을 메탄올에 용해시켰다. 실온에서 모든 에스테르가 카르복사마이드로 전환될 때까지 암모니아를 통과시켰다. 용매를 회전식 증발기에서 제거하고 조생성물을 플래쉬 크로마토그래피로 정제하였다. 수득량: 4.6g(14.14mmol, 33%).

c) 2-(N-BOC-아미노메틸)-5-시아노-4-트리플루오로메틸티아졸

2-(N-BOC-아미노메틸)-4-트리플루오로메틸티아졸-5-카르복사마이드(4.6g, 14.14mmol)을 디클로로메탄(30㎖)에 용해하고 -5^oC까지 냉각하였다. 에틸디이소프로필아민(4.6g, 35.35mmol) 및 디클로로메탄(10㎖) 중의 무수 트리플루오로아세트산(3.4g, 16.26mmol)의 용액을 동일 온도에서 가하였다. 이후, 혼합물을 0^oC에서 2시간 더 교반하였다. 이를 포화 탄산수소나트륨 및 5% 농도의 시트르산 용액으로 흡인 여과하였다. 황산마그네슘으로 건조하고, 용매를 회전식 증발기에서 제거하였다. 조생성물을 디에틸 에테르/석유 에테르로 교반하여 추출하였다. 상층액을 유상으로부터 분리하고 회전식 증발기에서 농축하였다. 수득량: 1.9g(6.18mmol, 44%).

d) 2-(N-BOC-아미노메틸)-4-트리플루오로메틸티아졸-5-티오아마이드

2-(N-BOC-아미노메틸)-5-시아노-4-트리플루오로메틸티아졸(4.6g, 14.97mmol)을 피리딘 (20㎖) 중에 용해하고 트리에틸아민(24㎖)을 가하고, 용액을 황화 수소로 포화시켰다. 실온에서 이틀 후 용매를 회전식 증발기에서 제거하였다. 조생성물을 에틸 아세테이트에 흡수시키고 20% 농도 황산수소나트륨 용액 및 물로 세척하였다. 황산마그네슘으로 건조한 후, 용매를 회전식 증발기에서 증류시켰다. 조생성물을 플래쉬 크로마토그래피로 정제하였다. 수득량: 2.5g(7.32mmol, 49%).

e) 5-아마이디노-2-(N-BOC-아미노메틸)-4-트리플루오로메틸티아졸

2-(N-BOC-아미노메틸)-4-트리플루오로메틸티아졸-5-티오아마이드(2.5g, 7.32mmol)을 디클로로메탄(10㎖) 중에 용해하고 요오도메탄(10.4g, 73.24mmol)을 가하였다. 이후, 혼합물을 실온에서 48시간 동안 교반하였다. 용매를 회전식 증발기에서 제거한 후, 잔류물을 메탄올(5㎖)에 흡수시키고, 10% 농도의 메탄올성 암모늄 아세테이트 용액(8.5㎖, 10.98mmol)을 가하였다. 혼합물을 4일간 실온에서 교반한 후, 조생성물의 용액을 아세테이트를 채운 이온 교환기를 통과시키고 용매를 회전식 증발기에서 제거하였다. 조생성물을 플래쉬 크로마토그래피로 정제하였다. 수득량: 0.8g(2.08mmol, 28%).

f) 5-아마이디노-2-아미노메틸-4-트리플루오로메틸티아졸 x 2HCl

5-아마이디노-2-(N-BOC-아미노메틸)-4-트리플루오로메틸티아졸(0.8g, 2.08mmol)을 디클로로메탄에 용해시키고, 1,4-디옥산(2.1㎖, 4.2mmol) 중의 4M 염산 용액을 가한 후, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이후 용매를 회전식 증발기에서 제거하였다. 이러한 방법으로 얻어진 조생성물을 추가의 정제 없이 하기 반응에 사용하였다. 수득량: 0.6g(2.0mmol, 97%).

ESI-MS: 225(M+H⁺).

5-아미노메틸-3-메틸티오펜-2-카르보니트릴

a) 5-포르밀-3-메틸티오펜-2-카르보니트릴

n-헥산 중의 1.6mole의 n-부틸리튬 용액 112㎖(179mmol)을 20분에 걸쳐 -78^oC로 냉각한 테트라히드로푸란(400㎖) 중의 디이소프로필아민 25.1㎖(179mmol) 용액에 가하였다. 용액을 -35^oC까지 승온시키고, 이후 다시 -78^oC로 냉각하였으며, 테트라히드로푸란 80㎖ 중의 2-시아노-3-메틸티오펜 20.0g(162mmol) 용액을 서서히 동일 온도에서 적가하였다. 이 과정 중에 용액의 색이 암적색으로 변하였다. 45분간 계속하여 교반하면서 디메틸포름아마이드 63㎖(811mmol)을 서서히 적가하고 혼합물을 30분 더 교반한 후, 물 160㎖ 중의 시트르산 27g의 용액을 -70^oC에서 가하였다. 혼합물을 회전식 증발기에서 농축하고, 포화 염화나트륨 용액 540㎖를 가하였다. 배치를 디에틸 에테르(250㎖씩 3회)로 추출하였다. 합친 유기상을 황산마그네슘 상에서 건조하였다. 건조제를 여과하고 용매를 물 펌프 진공 하에서 증류시켰으며, 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(용리제-헥산/에틸 아세테이트 4/1)로 정제하여 표제 화합물 23g(94%)을 얻었다.

b) 5-히드록시메틸-3-메틸티오펜-2-카르보니트릴

소듐 보로하이드라이드 5.75g(152mmol)을 실온에서 무수 에탄올 300㎖ 중의 5-포르밀-3-메틸티오펜-2-카르보니트릴 23g(152mmol) 용액에 여러번에 나누어 가했다. 반응 혼합물을 5분간 교반하고, 물 펌프 진공 하에서 농축하였으며 에틸 아세테이트에 흡수시키고 5% 농도의 시트르산 용액 및 포화 염화나트륨 용액으로 추출하였다. 유기상을 황산마그네슘 상에서 건조하고 건조제를 여과하고 용매를 실온에서 물 펌프 진공 하에서 증류시켜 여전히 용매를 함유하는 암적색의 유상물 24g으로 하기 반응에 추가 정제없이 사용할 표제 화합물을 얻었다.

c) 5-브로모메틸-3-메틸티오펜-2-카르보니트릴

트리페닐포스핀 44g(167mmol)을 테트라히드로푸란 180㎖ 중의 5-히드록시메틸-3-메틸티오펜-2-카르보니트릴 24g(152mmol)의 용액에 가하였다. 이후 테트라히드로푸란 100㎖ 중의 테트라브로모메탄 55g(167mmol)의 용액을 가하였다. 혼합물을 실온에서 90분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 펌프 진공 하에서 회전식 증발기로 농축하고, 잔류물을 컬럼크로마토그래피(용리제-헥산: 아세틸 아세테이트 8:2)로 정제하였다. 이로써 여전히 용매를 소량 함유하는 표제 화합물 34g을 얻었다.

d) 5-N,N-비스(t-부톡시카르보닐)아미노메틸-3-메틸티오펜-2-카르보니트릴

수화나트륨(미네랄 오일 중에 80% 현탁액) 5.0g(167mmol)을 테트라히드로푸란 255㎖ 중의 5-브로모메틸-3-메틸티오펜-2-카르보니트릴 33.8g(152mmol)의 용액에 여러번에 나누어 가하고, 0^oC까지 냉각하였다. 이후 테트라히드로푸란 255㎖ 중의 디-t-부틸 이미노디카르복실레이트 36.4g(167mmol)의 용액을 적가하였으며, 이 과정이 진행되는 동안 온도가 5^oC를 넘지 않도록 하였다. 혼합물을 실온으로 승온시키고 밤새 교반하였다. 반응을 완결시키기 위해 혼합물을 다시 3시간 동안 35^oC에서 승온시키고 이후 실온까지 냉각 방치하였으며 포화 염화암모늄 용액 510㎖를 서서히 가하였다. 용매를 물 펌프 진공하에서 증류시키고 잔류물을 에틸 아세테이 트로 반복해 추출하고 합친 유기상을 포화 염화암모늄 용액으로 세척하였으며 황산마그네슘 상에서 건조하고 회전식 증발기에서 농축하였다. 이로써 여전히 디-t-부틸 이미노디카르복실레이트를 함유하며 하기 반응에서 조생성물로 사용되는 유상 잔류물 57.6g을 얻었다.

e) 5-아미노메틸-3-메틸티오펜-2-카르보니트릴 염산염

5-N,N-비스(t-부톡시카르보닐)아미노메틸-3-메틸티오펜-2-카르보니트릴(d)의 조생성물, 139mmol 이하) 52.6g을 에틸 아세테이트 950㎖에 용해시키고 용액을 0^oC까지 냉각하였다. 이를 HCl 가스로 포화시키고, 10분 후에 흰색 침전물이 분리되었다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 30^oC에서 1시간 동안 교반하였다. 언어진 현탁액을 연속하여 회전식 증발기에서 농축하고 잔류물을 디에틸 에테르로 교반하며 추출하였으며 용매를 여과하고 고상 잔류물을 진공, 실온에서 건조시켜 흰색 분말로서 표제 화합물 24.7g(94%)을 얻었다.

5-아미노메틸-3-클로로티오펜-2-카르보니트릴 염산염

이 화합물은 3-클로로티오펜-2-카르복사마이드를 무수 트리플루오로아세트산으로 탈수시켜 제조된 3-클로로-2-시아노티오펜을 사용하는데 기술된 것처럼 합성 하였다.

5-아미노메틸-4-메틸티오펜-3-티오카르복사마이드

a) 에틸 2-아미노-3-시아노-4-메틸티오펜-5-카르복실레이트

에틸 2-아미노-3-시아노-4-메틸티오펜-5-카르복실레이트는 에틸 아세토아세테이트 130g(1.0mol) 및 말로노니트릴 66g(1.0mol) 및 황 32g(1.0mol) 및 모르폴린 80g(0.92mol)로부터 출발하여 문헌(Organikum[Organic Chemistry], 제 19판, Dt. Verlag der Wissenschaften, Leipzig, Heidelberg, Berlin, 1993, Chapter 6, pp. 374-375) 에 기술된대로 합성하였다.

b) 에틸 4-시아노-3-메틸티오펜-2-카르복실레이트

아세토니트릴 및 디메틸포름아마이드의 1:1 혼합물 600㎖ 중의 에틸 2-아미노-3-시아노-4-메틸티오펜-5-카르복실레이트 20.5g(97.5mmol)의 용액을 5^oC로 냉각하고 t-부틸 질산염 15.7g(146mmol)을 적가하였으며, 이 과정 중에 반응 혼합물의 온도가 상승되었고 가스가 활발하게 나왔다. 혼합물을 실온에서 7시간 동안 교반하고 고진공 하, 회전식 증발기에서 농축하였으며 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(용리제-디클로로메탄)로 정제하여 황색 유상물로서 원하는 화합물 9.1g(48%)을 얻었다.

c) 5-히드록시메틸-4-메틸티오펜-3-카르보니트릴

수화 리튬 알루미늄 2.44g(64mmol)을 테트라히드로푸란 400㎖ 중의 에틸 3-시아노-4-메틸티오펜-5-카르복실레이트 25.1g(129mmol)용액에 여러번에 나누어 가하였다. 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하고, 0.5N 염산을 가하여 과량의 환원제를 분해하였다. 반응 혼합물을 물 펌프 진공 하에서 농축하고 물로 희석하고 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합친 유기상을 이후 0.5N 염산 및 포화 염화나트륨 용액으로 각각 1회씩 세척하였다. 유기상을 황산마그네슘 상에서 건조하고 건조제를 여과하고 용매를 실온, 물 펌프 진공 하에서 증류시켰다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(용리제-디클로로메탄/메탄올 95:5)로 정제하여 연황색 유상물로 원하는 화합물 16.1g(83%)을 얻었다.

d) 5-브로모메틸-4-메틸티오펜-3-카르보니트릴

트리페닐포스핀 30g(115mmol)을 5^oC에서 테트라히드로푸란 300㎖ 중의 5-히드록시메틸-4-메틸티오펜-3-카르보니트릴 16g(104mmol)의 용액에 가하였다. 이후 테트라히드로푸란 100㎖ 중의 테트라브로모메탄 38g(115mmol)의 용액을 가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 물 펌프 진공 하, 회전식 증발기에서 농축하고 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(용리제-석유 에테르:디클로로메탄 1:1)로 정제하여 황색 유상물로 표제 화합물 17g(76%)을 얻었다.

e) 5-N,N-비스(t-부톡시카르보닐)아미노메틸-4-메틸티오펜-3-카르보니트릴

유상이 없는 수화나트륨 3.5g(103mmol)을 테트라히드로푸란 250㎖ 중의 5-브로모메틸-4-메틸티오펜-2-카르보니트릴 17.2g(79.5mmol)의 용액에 여러번에 나누어 가하고, 0^oC까지 냉각하였다. 이후 테트라히드로푸란 100㎖ 중의 디-t-부틸 이미노디카르복실레이트 22.5g(103mmol)의 용액을 적가하였으며, 이 과정이 진행되는 동안 온도가 5^oC를 넘게 오르지 않았다. 혼합물을 실온으로 승온시키고 2시간 동안 교반하였다. 포화 염화암모늄 용액 400㎖를 서서히 가하였다. 용매를 물 펌프 진공하에서 증류시키고 잔류물을 소량의 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합친 유기상을 포화 염화암모늄 용액 및 포화 염화나트륨 용액으로 세척하였으며 황산마그네슘 상에서 건조하고 회전식 증발기에서 농축하였다. 이로써 여전히 디-t-부틸 이미노디카르복실레이트를 함유하며 하기 반응에서 조생성물로 사용되는 유상물 28g을 얻었다.

f) 5-N,N-비스(t-부톡시카르보닐)아미노메틸-4-메틸티오펜-3-티오카르복사마이드

e)에서 얻은 조생성물(79mmol 이하)을 피리딘 280㎖ 및 트리에틸아민 140㎖에 용해하고 이 용액을 실온에서 황화 수소로 포화시켰다. 시작시 황색이었던 용액의 색이 녹색으로 변하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응을 완결시키기 위해, 다시 15분 동안 황화 수소를 통과시키고 실온에서 2시간 동안 교반을 계속하였다. 과량의 황화 수소를 세척탑을 사용하여 질소 기류로 제거하였다. 이후 반응 혼합물을 회전식 증발기에서 농축하고 농축물을 에틸 아세테이트에 흡수시킨 후 20% 농도 황산수소나트륨 용액으로 반복해 세척하고 황산마그네슘 상에서 건조시켰으며 회전식 증발기로 농축하여 추가의 정제없이 하기 반응에 사용할 연황색 고상 발포체 27g을 얻었다.

g) 5-아미노메틸-4-메틸티오펜-3-티오카르복사마이드 염산염

5-N,N-비스(t-부톡시카르보닐)-아미노메틸-4-메틸티오펜-3-티오카르복사마이드(f)의 조생성물) 27g을 에틸 아세테이트 400㎖에 용해하고, 이 용액을 0^oC까지 냉각하였다. 이를 염화 수소 가스로 포화시켰으며, 10분 후 흰색 침전물이 분리되었다. 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하고 침전물을 여과하였으며 에틸 아세테이트로 세척하고 고상 잔류물을 실온, 진공에서 건조하여 흰색 분말로 표제 화합물 13.6g(87%)을 얻었다. EI-MS: M⁺ = 186.

5-아미노메틸-4-클로로티오펜-3-티오카르복사마이드

a) 5-포르밀-4-클로로티오펜-3-카르보니트릴

t-부틸 질산염 35g(325mmol)을 실온에서 아세토니트릴 및 디메틸포름아마이드 1:1 혼합물 600㎖ 중의 2-아미노-4-클로로-5-포르밀티오펜-3-카르보니트릴(특허 DB 3738910호에 기술된 이 화합물을 합성이 기술되어 있다) 53.0g(250mmol)의 용액 에 적가하였으며, 이 과정 중에 반응 혼합물의 온도는 20 내지 37^oC로 올랐으며, 가스가 활발히 나오기 시작했다. 혼합물을 25^oC까지 냉각하고 실온에서 7시간 동안 교반하였으며 고진공하, 회전식 증발기에서 흑색 용액을 농축하고, 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(용리제-디클로로메탄)로 정제하여 황색 유상물로 원하는 화합물 29g(68%)을 얻었다.

b) 5-히드록시메틸-4-클로로티오펜-3-카르보니트릴

소듐 보로하이드라이드 6.3g(166mmol)을 무수 메탄올 400㎖ 중의 5-포르밀-4-클로로티오펜-3-카르보니트릴 28.5g(166mmol)의 용액에 5^oC에서 여러 번에 나누어 가하였다. 반응 혼합물의 온도는 약간 올라갔으며 색은 암적색으로 변하였고 가스가 왕성하게 나오는 것이 관찰되었다. 10분 후에 반응 혼합물을 물 펌프 진공 하에서 농축하고, 에틸 아세테이트 200㎖ 중에 흡수시키고, 1M 염산 200㎖로 추출하였으며, 물 및 포화 염화나트륨 용액 각 250㎖로 두번 세척하였다. 유기상을 황산마그네슘 상에서 건조시키고 건조제를 여과하고 용매를 실온, 물 펌프 진공 하에서 증류시켜 암적색 유상물로서 추가 정제없이 하기 반응에 사용할 표제 화합물 22g(76%)을 얻었다.

c) 5-브로모메틸-4-클로로티오펜-3-카르보니트릴

트리페닐포스핀 36.1g(137mmol)을 테트라히드로푸란 250㎖ 중의 5-히드록시메틸-4-클로로티오펜-3-카르보니트릴 21.7g(125mmol) 용액에 5^oC에서 가하였다. 이후 테트라히드로푸란 100㎖ 중의 테트라브로모메탄 45.6g(137mmol)의 용액을 가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하고 침전물을 여과하고 여액을 물 펌프 진공하, 회전식 증발기에서 농축하였다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(용리제-석유 에테르: 디클로로메탄 1:1)로 정제하여 유상물로 표제 화합물 26.0g(88%)을 얻었다.

d) 5-N,N-비스(t-부톡시카르보닐)아미노메틸-4-클로로티오펜-3-카르보니트릴

유상이 없는 수화나트륨 6.9g(159mmol)을 테트라히드로푸란 300㎖ 중의 5-브로모메틸-4-클로로티오펜-2-카르보니트릴 25.0g(106mmol)의 용액에 여러번에 나누어 가하고, 0^oC까지 냉각하였다. 이후 테트라히드로푸란 100㎖ 중의 디-t-부틸 이미노디카르복실레이트 34.4g(159mmol)의 용액을 적가하였으며, 이 과정이 진행되는 동안 온도가 5^oC를 넘지 않았다. 혼합물을 실온으로 승온시키고 2시간 동안 교반하였다. 포화 염화암모늄 용액 300㎖를 서서히 가하였다. 용매를 물 펌프 진공하에서 증류시키고 잔류물을 소량의 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합친 유기상을 포화 염화암모늄 용액 및 포화 염화나트륨 용액으로 세척하였으며 황산마그네슘 상에서 건조하고 회전식 증발기에서 농축하였다. 이로써 여전 히 디-t-부틸 이미노디카르복실레이트 및 용매 잔류물을 함유하며 하기 반응에서 조생성물로 사용되는 유상 잔류물 51.3g을 얻었다.

e) 5-N,N-비스(t-부톡시카르보닐)아미노메틸-4-메틸티오펜-3-티오카르복사마이드

d)에서 얻은 조생성물의 일부(39.4g, 106mmol 이하)를 피리딘 400㎖ 및 트리에틸아민 40㎖에 용해하고 이 용액을 실온에서 황화 수소로 포화시켰다. 시작시 황색이었던 용액의 색이 녹색으로 변하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 과량의 황화 수소를 세척탑을 사용하여 질소 기류로 제거하였다. 이후 반응 혼합물을 얼음으로 냉각한 20% 농도 황산수소나트륨 용액에 붓고, 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 이후 유기상을 20% 농도의 황산수소나트륨 용액으로 반복하여 세척하고 황산마그네슘 상에서 건조시켰으며 회전식 증발기에서 농축하여 추가의 정제없이 하기 반응에 사용할 용매 함유 잔류물 49.0g을 얻었다.

f) 5-아미노메틸-4-클로로티오펜-3-티오카르복사마이드 염산염

e)의 조생성물 38.0g(93mmol 이하)을 에틸 아세테이트 400㎖에 용해하고, 이 용액을 0^oC까지 냉각하였다. 용액을 염화 수소 가스로 포화시켰으며, 10분 후에 흰색 침전물이 분리되었다. 반응이 완결되지 않았기 때문에 에틸 아세테이트 200㎖ 를 가하고 혼합물을 HCl 가스로 다시 포화하였으며 실온에서 밤새 교반하였다. 침전물을 여과하였으며 석유 에테르로 세척하고 실온, 진공에서 건조하여 불순물로 염화암모늄을 함유하는 흰색 분말로서 표제 화합물 21.1g을 얻었다.

EI-MS: M⁺=206.

5-아미노메틸-1-메틸-1H-[1,2,4]-트리아졸-3-카르복사마이드

a) 에틸 아미노티오옥소아세테이트

에틸 시아노포르메이트 29.1g(294mmol) 용액 및 벤젠 20㎖ 중의 디에틸아민 0.4g(0.57㎖, 5.1mmol)의 용액에 0^oC에서 황화수소를 통과시켜 포화하였다. 이 과정 중에 용액이 오렌지색으로 변하였다. 혼합물을 실온에서 주말 동안 교반하였으며 반응 혼합물을 0^oC까지 냉각하였다. 형성된 침전물(29.1g)을 여과하고 차가운 벤젠으로 세척하였다. 모액을 농축하고 다시 0^oC까지 냉각하였다. 혼합물을 여과하고 잔류뮬을 석유 에테르로 세척하여 연황색 고상물로 표제 화합물 5.7g 이상을 얻었다(Rf = 0.7, 디클로로메탄/메탄올 9:1). 총 수율: 89%.

b) 에틸 메틸옥사마이드라존카르복실레이트

에탄올 100㎖ 중의 메틸히드라진 11.93g(13.6㎖, 259mmol)의 용액을 실온에서 에탄올 400㎖ 중의 에틸 아미노티오옥소아세테이트 34.5g(259mmol)의 용액에 적 가하였으며, 이 과정 중에 반응 혼합물의 온도는 약간 상승되었다. 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하고 농축하였다. 잔류물을 추가 정제없이 반응 c)에서 사용하였다.

c) 에틸 아미노[(2-t-부톡시카르보닐아미노아세틸)메틸]-히드라조노아세테이트

Boc-Gly-OH의 활성화 및 b)와의 반응:

트리에틸아민 37.7g(51.7㎖, 373mmol)을 실온에서 테트라히드로푸란 400㎖ 중의 Boc-글라이신 54.46g(311mmol)의 용액에 가하였다. 혼합물을 -5oC까지 냉각하고 테트라히드로푸란 100㎖ 중의 에틸 클로로포르메이트 40.47g(35.5㎖, 311mmol)의 용액을 40분에 걸쳐 천천히 적가하였다. 혼합물을 -5^oC에서 30분간 교반하여 얻어진 침전물을 여과하고, 소량의 테트라히드로푸란으로 세척하고, 여액을 직접 실온에서 테트라히드로푸란 300㎖ 중의 b)로부터의 잔류물(259mmol)의 용액에 서서히 적가해 더 반응시켰다. 혼합물을 밤새 교반하고 감압하, 회전식 증발기에서 농축시켜 건조하고 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(실리카겔, 디클로로메탄/메탄올 95:5, Rf = 0.26)으로 정제하였다. 얻어진 유상물 15.7g을 디에틸 에테르에 흡수시키고 침전물을 여과하였다(8.5g, 11%).

d) 에틸 5-아미노메틸-1-메틸-1H-[1,2,4]-트리아졸-3-카르복실레이트

에틸 아미노[(2-t-부톡시카르보닐아미노아세틸)메틸]히드라조노아세테이트 7.0g(23.2mmol)을 30㎖의 크실렌에 현탁하고, 현탁액을 180oC로 예열한 실리콘 오일 조에 10분간 넣었다. 이후, 용매를 반응 혼합물로부터 직접 증류시키고 잔류물을 180^oC에서 10분 더 교반하였다. 용매 잔류물을 고진공하, 50^oC에서 제거하고 추가 정제없이 하기의 반응에 사용할 암색 유상물 6.8g(>95%)을 얻었다. 샘플을 실리카겔을 통해 여과하고 NMR 분광학으로 시험하였다.

e) 5-아미노메틸-1-메틸-1H-[1,2,4]-트리아졸-3-카르복사마이드

200㎖ 에탄올 중의 5-아미노메틸-1-메틸-1H-[1,2,4]-트리아졸-3-카르복실레이트 6.8g(23.2mmol 이하)의 용액에 -10^oC에서 20분간 암모니아 가스를 통과시켰다. 0^oC에서 1시간 및 실온에서 밤새 교반을 계속하였다. 반응이 완결되지 않았기 때문에, 기체 통과 과정을 두번 더(상기 기재된대로) 반복하였고, 혼합물을 0^oC에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 회전식 증발기에서 농축하고, 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄 + 5 내지 10% 메탄올, Rf = 0.3(디클로로메탄/메탄올 9:1))로 정제하여, 무색 유상물로 4.71g을 얻었다.

f) 5-아미노메틸-1-메틸-1H-[1,2,4]-트리아졸-3-카르복사마이드 염산염

600㎖ 에틸 아세테이트 중의 5-아미노메틸-1-메틸-1H-[1,2,4]-트리아졸-3-카 르복사마이드 4.7g(18.4mmol 이하)의 용액에 5^oC에서 염화수소 가스를 통과시켰으며, 이 과정에서 흰색 침전물이 형성되었다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하고 회전식 증발기에서 농축하였으며 디에틸 에테르를 가하였다. 혼합물을 농축하고 다시 디에틸 에테르에 흡수시켰다. 침전물을 여과하고 건조하여 여전히 염화 암모늄을 함유하는 흰색 고상물 3.7g을 얻었다.

5-아미노메틸-3-시아노푸란 염산염

a) 5-N,N-비스(t-부톡시카르보닐)아미노메틸-3-시아노푸란

테트라히드로푸란 50㎖ 중의 5-브로모메틸-3-시아노푸란(문헌(L. M. Pavzner, V. M. Ignat'ev, B. I. Ionin, Russ. J. of Gen. Chem. 1994, 64, 2, 125-128) 20.5g(0.11mol))의 0^oC로 냉각한 용액을 0^oC에서 30분에 걸쳐 교반하면서 테트라히드로푸란 30㎖ 중의 수화나트륨(미네랄 오일의 60% 분산액) 4.8g(0.12mol)에 가하였다. 테트라히드로푸란 50㎖ 중의 디-t-부틸 이미노디카르복실레이트 26.2g(121mmol)의 용액을 연속하여 적가하였으며 이 과정 중에 온도는 5^oC 위로 올라가지 않았다. 혼합물을 5 내지 10^oC에서 3시간 동안 교반하였고, 실온으로 승온시킨 후 밤새 교반하였다. 포화 염화 암모늄 용액 150㎖를 천천히 가하고, 용매를 물 펌프 진공 하에서 증류시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트(60㎖씩 4회)로 추출하였다. 합친 유기상을 포화 염화나트륨 용액으로 2회 세척하고 황산마그네슘 상에 서 건조시키고 회전식 증발기에서 농축하였다. 진공(1mmHg) 및 실온에서 3시간 동안 건조한 후 여전히 디-t-부틸이미노디카르복실레이트를 함유하는 암색 시럽 33.2g을 얻었으며 하기 반응에 조생성물로 사용하였다.

b) 5-아미노메틸-3-시아노푸란 염산염

5-N,N-비스(t-부톡시카르보닐)아미노메틸-3-시아노푸란(a)로부터의 조생성물) 12.89g을 에틸 아세테이트 80㎖ 중에 용해하고 -10^oC로 냉각하였다. 혼합물을 염화 수소 가스로 포화시켜 15분 후에 흰 침전물을 분리하였다. 혼합물을 실온으로 승온시켜 2시간 동안 교반한 후 얻은 현탁액을 연속하여 회전식 증발기에서 농축하였다. 잔류물(7g)을 디에틸 에테르와 함께 교반하고 용매를 여과하여 제거하였다 고상 잔류물을 실온, 진공에서 건조하여 미황토색 분말로 표제 화합물 5g(79%)을 얻었다.

5-아미노메틸-1-메틸피롤-2-카르보니트릴

a) 5-시아노-1-메틸피롤-2-카르브알데히드

1-메틸피롤을 아세토니트릴 중의 디메틸포름아마이드 및 클로로설포닐 이소시아네이트와 반응시켜 2-시아노-1-메틸피롤로 전환시켰다(예: 로더(C.E. Loader) 등, Can. J. Chem. (1981), 59, 2673-6 참조).

디이소프로필아민(17.5㎖, 124.38mmol)을 질소 하에서 THF(100㎖)에 가하였다. 헥산 중의 N-부틸리튬용액(15% 농도, 75.9㎖, 124.38mmol)을 -78^oC에서 적가하였다. 혼합물을 연속하여 45분간 -20^oC에서 교반하고, 이후 다시 -78^oC로 냉각하였다. 동일 온도에서 THF(50㎖) 중의 1-메틸피롤-2-카르보니트릴(12g, 113.07mmol)의 용액을 적가하였다. -78^oC에서 45분간 교반한 후, DMF(43.9㎖, 546.46mmol)를 적가하고 혼합물을 동일 온도에서 2시간 더 교반하였다. 시트르산 일수화물(20.56g)을 가한 후 혼합물을 실온까지 승온시키고, 물(112㎖)을 가하였다. THF를 회전식 증발기에서 제거하고 수상을 염화나트륨으로 포화시키고 디에틸 에테르(200㎖씩 3회)로 추출하였다. 합친 유기상을 포화 염화나트륨 용액으로 세척하고 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 용매를 회전식 증발기에서 제거하고 조생성물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카겔, 디클로로메탄)로 정제하였다. 수득량: 8.25g(54%).

b) 5-히드록시메틸-1-메틸피롤-2-카르보니트릴

a)에 따라 얻은 생성물(8.2g, 61.1mmol)을 에탄올(200㎖) 중에 용해하고, 소듐 보로하이드라이드(2.31g, 61.13mmol)을 -10oC에서 가하였다. 0 내지 5^oC에서 1.5시간 동안 교반한 후, 용매를 회전식 증발기에서 제거하고 얼음물 및 20% 농도 황산수소나트륨 용액을 잔류물에 가하였다. 수상을 에틸 아세테이트로 추출하였 다. 합친 유기상을 포화 탄산수소나트륨 용액 및 물로 세척하여 중성이 되도록 하였으며 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 용매를 회전식 증발기에서 제거하고 조생성물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카겔, 디클로로메탄/메탄올=97.5/2.5)로 정제하였다. 수득량: 7.6g(91%).

c) 5-아지도메틸-1-메틸피롤-2-카르보니트릴

b)에 따라 얻은 생성물(7.5g, 55.08mmol)을 DMF(220㎖) 중에 용해하고, 트리페닐포스핀(43.34g, 165.25mmol)을 0^oC에서 가하였다. 동일 온도에서 5분간 교반한 후 테트라브로모메탄(54.8g, 165.25mmol)을 가하였다. 혼합물을 연속하고 0^oC에서 30분간, 실온에서 1.5시간 동안 교반하였다. 0oC까지 냉각한 후, 소듐 아자이드(4.37g, 67.21mmol)를 가하였다. 혼합물을 실온에서 4.5시간 동안 연속하여 교반하였다. 포화 염화나트륨 용액을 0^oC에서 적가하고, 배치를 에틸 아세테이트로 희석하였다. 유기상을 분리하고 수상을 디에틸 에테르로 추출하였다. 합친 유기상을 물로 세척하고 황산나트륨으로 건조하였다. 용매를 회전식 증발기에서 제거하고 조생성물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카겔, 에틸 아세테이트/헥산=1/20)로 정제하였다. 수득량: 5.6g(63%).

d) 5-아미노메틸-1-메틸피롤-2-카르보니트릴

c)에 따라 얻은 생성물(4.71g, 29.25mmol)을 메탄올 100㎖ 중에 용해하고 10% Pd/C(1g)를 가하였다. 혼합물을 연속하여 1대기압하에서 4시간 동안 수소로 수소화시켰다. 촉매를 셀라이트(등록상표명)를 통해 여과시켜 제거하고 여액을 회전식 증발기에서 증류시켰다. 잔류물을 디클로로메탄/디에틸에테르=1/1로 교반하여 추출하였다. 생성물을 흡인여과하고 35^oC의 진공 건조 오븐에서 건조하였다. 수득량: 2.7g(68%).

4-아미노메틸-1-메틸피롤-2-카르보니트릴

a) 5-시아노-1-메틸피롤-3-카르브알데히드

알루미늄 트리클로라이드(24.24g, 180.86mmol)을 니트로메탄/디클로로메탄(1/1, 320㎖)에 용해하였다. 용액을 -20^oC까지 냉각하였으며 1-메틸피롤-2-카르보니트릴(8g, 75.36mmol)을 가하였다. 디클로로 메탄 (42㎖)에용해시킨 α, α-디클로로디메틸 에테르(10.4g, 90.43mmol)를 연속하여 적가하였다. 0^oC에서 4시간 동안 교반한 후, 배치를 얼음(200g)에 부었다. 수상을 디에틸 에테르로 추출하였다. 합친 유기상을 중성이 될 때까지 포화 탄산수소나트륨 용액, 물 및 포화 염화나트륨 용액으로 세척하였다. 황산나트륨 상에서 건조시킨 후 용매를 회전식 증발기에서 제거하였다. 조생성물을 추가의 정제 없이 하기 반응에 사용하였다. 수득량: 9.2g(91%).

b) 5-시아노-1-메틸피롤-3-카르브알데히드, 4-아미노메틸-1-메틸피롤-2-카르보니트릴로부터 출발하여 5-아미노메틸-1-메틸피롤-2-카르보니트릴의 합성과 동일하게 합성하였다. 그러나 4-아지도메틸-1-메틸피롤-2-카르보니트릴은 스토딩거(Staudinger) 반응에서 유리하게 환원되었다(문헌(S. Nagarajan et al., J. Org. Chem. 1987, 52, 5044-6 참조).

5-아미노메틸-1-메틸피롤-3-카르보니트릴

a) 4-시아노-1-메틸피롤-2-카르브알데히드

1-메틸피롤-2-카르브알데히드(10g, 91.6mmol)을 아세토니트릴(100㎖)에 용해하고 -45^oC까지 냉각하였다. 아세토니트릴(40㎖) 중의 클로로설포닐 이소시아네이트(38.9g, 274.9mmol)를 40분에 걸쳐 적가하였다. 혼합물을 연속하여 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 디메틸포름아마이드(35㎖)를 적가한 후, 혼합물을 1시간 동안 50^oC로 승온시켰다. 이를 실온까지 냉각한 후, 반응 혼합물을 얼음(200㎖) 및 2N 수산화나트륨 용액(286㎖)에 부었다. 형성된 침전물을 흡인 여과하고 여액을 디에틸 에테르로 추출하였다. 합친 에테르상을 묽은 탄산수소나트륨용액 및 물로 중성이 될 때까지 세척하고 황산나트륨 상에서 건조하였다. 용매를 물 펌프 진공 에서 증류시키고 잔류물을 상기에서 얻은 침전물과 합하였다. 이를 석유 에테르로부터 재결정하여 4-시아노-1-메틸피롤-2-카르브알데히드(4.3g)을 얻었다(예: 로더(C. E. Loader) 등, Can. J. Chem. (1981), 59, 2673-6 참조).

b) 4-시아노-1-메틸피롤-2-카르브알데히드, 5-아미노메틸-1-메틸피롤-3-카르보니트릴로부터 출발하여 5-아미노메틸-1-메틸피롤-2-카르보니트릴의 합성과 동일하게 합성하였다.

5-아미노메틸-3-시아노-1,2,4-옥사디아졸 염산염

a) N-Boc-5-아미노메틸-3-시아노-1,2,4-옥사디아졸

에틸 N-Boc-5-아미노메틸-1,2,4-옥사디아졸-2-카르복실레이트(보그(S. Borg) 등, J. Org. Chem. 1995, 60, 3112-20)를 메탄올(50㎖)에 용해하였다. 이 용액에 -10^oC 내지 실온에서 반응이 완결될 때까지 암모니아를 통과시켰다. 용매를 회전식 증발기에서 제거하였다. 얻어진 조생성물을 디클로로메탄(70㎖)에 용해시키고 디이소프로필에틸아민(2.9㎖, 16.55mmol)을 -5^oC에서 가하였다. 디클로로메탄(10㎖)에 용해시킨 무수 트리플루오로아세트산(1.06㎖, 7.61mmol)을 연속하여 적가하였다. 0^oC에서 1.5시간 동안 교반한 후, 배치를 디클로메탄으로 희석하고 포화 탄산 수소나트륨 용액(2회), 5% 농도 시트르산 용액(2회) 및 포화 염화나트륨 용액(1회)으로 세척하고 황산나트륨 상에서 건조하였다. 용매를 회전식 증발기에서 건조하고 조생성물을 크로마토그래피(실리카겔, 디클로로메탄:메탄올=97.5:2.5)로 정제하였다. 수득량: 1.2g(80%).

b) 5-아미노메틸-3-시아노-1,2,4-옥사디아졸 염산염

a)에 따라 얻은 생성물(0.9g, 4.0mmol)을 디클로로메탄(45㎖)에 용해하고 디옥산(3.9㎖, 15.61mmol) 중의 4M 염산을 실온에서 가하였다. 실온에서 16시간 동안 교반한 후, 용매를 회전식 증발기에서 제거하였다. 수득량: 645mg(100%).

1-메틸-5-아미노피라졸-3-카르복사마이드

a) 메틸 1-메틸-아미노메틸피라졸-3-카르복실레이트

1-메틸-3-메톡시카르보닐피라졸-5-카르복실산 염화물(1-메틸-3-메톡시카르보닐-3-카르복살산 3.7g, 20.09mmol로부터 제조, J. Org. Chem. 1989, 54, 428)을 톨루엔에 용해하고, 용액을 -10^oC로 냉각하였다. 반응이 완결될 때까지 -10^oC 내지 0^oC에서 암모니아를 연속하여 통과시켰다. 용매를 회전식 증발기에서 제거하였다. 잔류물을 에탄올 중에 흡수시켰다. 15분간 교반한 후, 에탄올을 회전식 증발기에서 제거하고 잔류물은 미온수에 용해시켰으며 용액을 0^oC까지 냉각하여 침전시켰다. 침전물을 흡인 여과하고 아세톤으로 세척하고 45^oC, 진공에서 건조하였다. 수득량: 1.5g(41%).

b) 메틸 1-메틸-5-시아노피라졸-3-카르복실레이트

a)에 따라 얻은 생성물(1.5g, 8.19mmol)을 디클로로메탄(20㎖)에 흡수시키고, 디이소프로필에틸아민(3.85㎖, 22.11mmol)을 -10^oC에서 가하였다. 디클로로메탄(5㎖) 중의 무수 트리에틸아민(1.3㎖, 9.44mmol)의 용액을 동일 온도에서 45분에 걸쳐 적가하였다. 연속하여 0^oC에서 1시간 동안 교반을 계속하였다. 배치를 디클로로메탄으로 희석하고, 포화 탄산수소나트륨 용액(2회), 5% 농도 시트르산 용액(2회), 포화 염화나트륨 용액(1회)으로 세척하였다. 이를 황산나트륨 상에서 건조하고 용매를 회전식 증발기에서 제거하였다. 수득량: 1.35g(100%).

c) 1-메틸-5-시아노피라졸-3-카르복사마이드

b)에 따라 얻은 생성물(1.35g, 8.19mmol)을 메탄올(50㎖)에 가하고 -10^oC로 냉각하였다. 암모니아를 8시간에 걸쳐 연속하여 통과시켰다. 실온에서 12시간 동안 교반한 후, 전구체 반응을 완결하였다. 침전된 생성물을 흡인 여과하고, 차가운 메탄올로 세척하고 진공에서 건조하였다. 수득량: 1.22g(100%).

d) 1-메틸-5-아미노메틸피라졸-3-카르복사마이드

c)에 따라 얻은 생성물(0.4g, 2.66mmol)을 아세트산(30㎖)에 용해하고 10% Pd/C(78mg)을 가하였다. 혼합물을 연속하여 실온, 대기압 하에서 반응이 와결될 때까지 수소화시켰다. 촉매를 셀라이트(등록상표명)를 통과시켜 여과해 제거하고 용매를 회전식 증발기에서 제거하였다. 수득량: 0.4g(100%).

FAB-MS(M+H⁺): 155.

1-메틸-3-아미노메틸-피라졸-5-카르복사마이드

a) 메틸 1-메틸-3-아미노피라졸-5-카르복실레이트

1-메틸-5-메톡시카르보닐피라졸-3-카르복실산 염화물(1-메틸-5-메톡시카르보닐-3-카르복살산 4.17g, 22.6mmol로부터 합성, J. Org. Chem. 1989, 54, 428)을 톨루엔에 용해하고, 용액을 -10^oC로 냉각하였다. 반응이 완결될 때까지 -10^oC 내지 0^oC에서 암모니아를 통과시켰다. 용매를 회전식 증발기에서 제거하였다. 잔류물을 에탄올 중에 흡수시켰다. 혼합물을 15분간 교반한 후, 에탄올을 회전식 증발기에서 제거하고 잔류물을 미온수에 용해시키고 용액을 0^oC까지 냉각하여 침전시켰다. 침전물을 흡인 여과하고 아세톤으로 세척하고 45^oC, 진공에서 건조하였다. 수득량: 3.36g(18.4mmol, 81%).

b) 메틸 1-메틸-3-시아노피라졸-5-카르복실레이트

a)에 따라 얻은 생성물(3.36g, 18.4mmol)을 상기 기술한 메틸 1-메틸-시아노피라졸-3-카르복실레이트의 합성 방법과 유사하게 반응시켰다. 수득량: 2.59g(15.7mmol, 85%).

c) 1-메틸-3-시아노피라졸-5-카르복사마이드

b)에 따라 얻은 생성물(2.56g, 15.5mmol)을 상기 기술한 1-메틸-5-시아노피라졸-3-카르복사마이드의 합성 방법과 유사하게 반응시켰다. 수득량: 2.3g(15.3mmol, 99%).

d) 1-메틸-3-아미노메틸피라졸-5-카르복사마이드 x HCl

c)에 따라 얻은 생성물(1.0g, 6.7mmol)을 상기 기술한 1-메틸-5-아미노메틸피라졸-3-카르복사마이드의 합성 방법과 유사하게 반응시켰다. 수득량: 1.5g(5.6mmol, 83%).

생성물을 1,4-디옥산 중의 HCl로 반복적으로 처리하여 이 혼합물을 연속적으로 농축하므로써 상응하는 염산염으로 변환시킬 수 있다.

실시예 1: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐프롤릴-[2-(4-아마이디노)티아졸릴메틸]아마이드 염산염

a) N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-BOC-(D)-Cha-Pro-NH-CH₂-2-(4-CSNH₂)-thiaz

N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-BOC-(D)-Cha-Pro-OH(2.0g, 4.14mmol), 2-H₂N-CH₂ -thiaz-4-CSNH₂(1.0g, 4.56mmol) 및 디이소프로필에틸아민(5.5㎖, 32.53mmol)을 메틸렌 클로라이드 25㎖에 용해하였으며 용액을 0^oC까지 냉각하였다. 에틸 아세테이트 중의 무수 프로판포스폰산 50% 농도 용액 4.8㎖(6.21mmol)을 적가하였다. 반응 혼합물을 0^oC에서 1시간 동안, 실온에서 1시간 동안 교반한 후 연속하여 진공에서 농축하였다. 잔류물을 물에 흡수시키고 혼합물을 에테르로 반복하여 추출하여, 유기상을 황산마그네슘으로 건조하고 진공에서 농축하였다. 소량의 불순물이 있으므로 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획물을 에테르로부터 결정화하여 필요한 생성물 총 1.9g을 얻엇다.

b) N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-BOC-(D)-Cha-Pro-NH-CH₂-2-(4-C(SCH₃)NH)-thiaz 히드로요오다이드

N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-BOC-(D)-Cha-Pro-NH-CH₂-2-(4-CSNH₂)-thiaz(1.7g, 2.67mmol)을 메틸렌 클로라이드 30㎖ 중의 요오드화메틸 3.7㎖와 함께 실온에서 밤새 교반하고, 연속하여 온화한 조건 하, 진공에서 농축하여 조생성물 형태로서 연속된 반응에 사용하였다(2.08g, 2.67mmol 이하).

c) N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-BOC-(D)-Cha-Pro-NH-CH₂-2-(4-C(NH₂)NH)-thiaz 히드로 아세테이트

N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-BOC-(D)-Cha-Pro-NH-CH₂-2-(4-C(SCH₃)NH)-thiaz 히드로요오다이드(2.08g, 최대 2.67mmol)을 아세토니트릴 20㎖ 중에 용해하고, 알루미늄 아세테이트 0.6g(5.01mmol)을 가한 후 혼합물을 40 내지 50^oC에서 1.5시간 동안 교반하였다. 용매를 회전식 증발기에서 진공으로 하여 증류시키고, 잔류물을 메틸렌 클로라이드에 흡수시키고 불용성인 과량의 암모늄 아세테이트를 여과하여 제거하였다. 메틸렌 클로라이드 용액을 농축하고 잔류물을 에테르에 흡수시켜 필요한 생성물을 무정형 고상 물질로서 n-헥산으로 침전시켰다. 조생성물(2.1g)을 메탄올 20㎖에 용해하고 아세테이트 이온 교환기(3.7g, 플루카사(Fluka), 제품 번호 00402호)를 사용하여 상응하는 아세테이트로 전환시켰다.

d) HOOC-CH₂-(D)-Cha-Pro-NH-CH₂-2-(4-am)-thiaz 이염산염

N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-BOC-(D)-Cha-Pro-NH-CH₂-2-(4-C(NH₂)NH)-thiaz x CH₃COOH(2.0g, 최대 2.67mmol)를 디옥산 10㎖ 및 5N 염산 수용액 20㎖의 혼합물 중에서 4시간 동안 40 내지 50^oC로 가열하였다. 혼합물을 연속하여 메틸 클로라이드로 반복해 추출하고 수상은 진공에서 약간 농축하였으며 연속하여 동결 건조시켰다. 흰색 무정형 고상 물질로 HOOC-CH₂-(D)-Cha-Pro-NH-CH₂-2-(4-am)-thiaz 이염산염 1.4g을 얻었다. FAB-MS (M+H⁺): 465.

실시예 2: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐프롤릴-[4-(2- 아마이디노)티에닐메틸)아마이드 히드로아세테이트

a) N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-BOC-(D)-Cha-Pro-NH-CH₂-4-(2-CN)-Thioph

N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-BOC-(D)-Cha-Pro-OH(6.35g, 13.17mmol) 및 4-H₂N-CH ₂-Thioph-2-CN(2.3g, 13.17mmol)로부터 출발하여 실시예 1과 동일하게 커플링을 수행하고 크로마토그래피로 정제하여 필요한 생성물 N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-BOC-(D)-Cha-Pro-NH-CH₂-4-(2-CN)-Thioph 6.95g을 얻었다.

b) N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-BOC-(D)-Cha-Pro-NH-CH₂-4-(2-CSNH₂)-Thioph

N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-BOC-(D)-Cha-Pro-NH-CH₂-4-(2-CN)-Thioph(6.95g, 11.53mmol)을 피리딘 40㎖ 및 트리에틸 아민 7㎖ 중에 용해시키고 용액을 0 내지 5^oC에서 황화 수소로 포화시키고(녹색 용액), 주말동안 실온에서 정치시켰다. 35^oC/35mbar의 진공에서 농축한 후에, 황색 유상 잔류물을 에테르 200㎖에 흡수시키고 20% 포화 황산수소나트륨 용액(20㎖씩 4회), 포화 탄산수소나트륨 용액(20㎖씩 2회) 및 물(20㎖씩 1회)로 세척하고 유기상을 황산나트륨 상에서 건조시키고 진공에서 농축하여 황색 고상 발포체로서 6.74g을 얻었다.

c) N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-BOC-(D)-Cha-Pro-NH-CH₂-4-(2-C(SCH₃)NH)-Thioph 히드로요오다이드

N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-BOC-(D)-Cha-Pro-NH-CH₂-4-(2-CSNH₂)-Thioph(6.74g, 10.58mmol)의 조생성물을 메틸렌 클로라이드 65㎖ 중에 가하고, 요오드화 메틸 9.01g(4.0㎖, 63.5mmol)을 가하였다. 혼합물을 밤새 실온에 정치시키고 이후 온화한 조건 하, 진공에서 농축하여 황색 고상 발포체로 8.36g을 얻었다.

d) N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-BOC-(D)-Cha-Pro-NH-CH₂-4-(2-C(NH₂)NH)-Thioph 히드로요오다이드

N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-BOC-(D)-Cha-Pro-NH-CH₂-4-(2-C(SCH₃)NH)-Thioph 히드로요오다이드(8.36g, 최대 10.58mmol)의 조생성물을 메탄올 중의 10% 농도의 암모늄 아세테이트 용액 16.3g(21.16mmol)과 함께 밤새 실온에서 교반하였다. 전구체가 완전히 반응되지 않아 10% 농도의 암모늄 아세테이트 용액 1.68g을 더 가하고 혼합물을 밤새 다시 교반하였다. 용매를 회전식 증발기에서 진공으로 하여 증류시킨 후, 잔류물을 메틸렌 클로라이드에 흡수시켰다. 불용성인 과량의 암모늄 아세테이트를 여과하여 제거하고 액체를 다시 진공에서 농축시켜, 황색 고상 발포체로 필요한 생성물 7.12g을 얻었다.

e) HOOC-CH₂-(D)-Cha-Pro-NH-CH₂-4-(2-am)-Thioph 히드로아세테이트

상기 실시예에서 얻은 N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-BOC-(D)-Cha-Pro-NH-CH₂-4-(2-C(NH₂)NH)-Thioph 히드로요오다이드의 조생성물을 메틸렌 클로라이드 100㎖에 용해시키고 에테르성 염산 용액(약 5N) 24.5㎖를 가하였다. 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 얻어진 현탁액을 진공에서 농축시키고, 메틸렌 클로라이드로 2회 함 께 증류시키고 잔류물을 아세테이트 이온 교환기(플루카사(Fluka), 제품 번호 00402호)를 사용하여 얻은 4.92g을 아세테이트 염으로 전환시켰다. 이 물질 2.5g을 MPLC(RP-18, 아세토니트릴/물)를 사용하여 정제하고 분획물을 동결 건조시켜 무정형 흰색 고상물로 목적한 생성물 1.23g을 얻었다.

FAB-MS (M+H⁺): 464.

실시예 3: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐피페콜산 [5-(2-아마이디노)티에닐메틸)아마이드 히드로아세테이트

a) H-Pic-NH-CH₂-5-(2-CN)-Thioph

Boc-Pic-OH(10.1g, 44.05mmol), 및 5-H₂N-CH₂-Thioph-2-CN 염산염(8.54g, 48.88mmol)을 디클로로메탄 150㎖에 용해하고, 에틸 디이소프로필아민(53.2㎖, 311.08mmol) 및 에틸 아세테이트 중의 무수 프로판포스폰산의 50% 농도 용액(46㎖, 217mmol)을 0^oC에서 가하였다. 반응 혼합물을 0^oC에서 1시간 동안, 실온에서 1시간 동안 교반한 후, 디클로로메탄으로 희석하고, 20% 농도의 황산수소나트륨 용액(4회), 탄산수소나트륨 용액(3회) 및 포화 염화나트륨 용액(1회)으로 세척하였다. 황산나트륨 상에서 건조시킨 후 건조제를 여과하여 제거하고 용매를 물 펌프 진공 하에서 증류시켰다. Boc기를 제거하기 위해 잔류물(18.41g)을 이소프로판올 200㎖ 및 6.8N 이소프로판올성 염산 용액 50㎖로 처리하고 밤새 실온에서 교반하였다. 이후 혼합물을 증류시켜 건조하고 디클로메탄으로 2회 함꼐 증류시키고 잔류물을 에테르로 교반하며 추출하여 연한 갈색의 분말로 필요한 생성물 12.7g을 얻었다.

b) HOOC-CH₂-(D)-Cha-Pic-NH-CH₂-5-(2-am)-Thioph 히드로아세테이트

이 화합물을 N-(t-Bu₂OC-CH₂)-N-Boc-(D)-Cha-OH 및 H-Pic-NH-CH₂-5-(2-CN)-Thioph의 두 빌딩 블록을 실시예 2a)에서와 동일하게 커플링하여 제조하였다. 실시예 2b) 내지 d)와 동일하게 수행하여 최종 생성물 HOOC-CH₂-(D)-Cha-Pic-NH-CH₂-5-(2-am)-Thioph 히드로아세테이트를 얻었다. FAB-MS (M+H⁺): 478

실시예 4: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실글라이실프롤릴-[2-(4-아마이디노)티에닐메틸]아마이드 염산염

a) HOOC-CH₂-(D)-Chg-Pyr-NH-CH₂-4-(2-am)-Thioph 이염산염

이 화합물은 Boc-Pyr-OH, 4-H₂N-CH₂-Thioph-2-CN x HCl 및 N-(t-BuO₂C-CH ₂)-N-Boc-(D)-Chg-OH로부터 출발하여 실시예 2 및 3과 동일하게 몇몇 단계를 거쳐 제조하였다.

b) HOOC-CH₂-(D)-Chg-Pro-NH-CH₂-4-(2-am)-Thioph 이염산염

HOOC-CH₂-(D)-Chg-Pyr-NH-CH₂-4-(2-am)-Thioph 이염산염 1.1g(2.11mmol)을 물 30㎖ 및 빙초산 10㎖의 혼합물에 용해하고, 10% Pd/C 0.5g을 가하였다. 혼합물을 실온 및 약간 고압 하에서 8시간 동안 수소화시켰다. 촉매를 교환한 후, 8시간 동안 수소화를 계속하였다. 촉매를 흡인 여과하고 혼합물을 셀라이트(등록상표명)를 통해 여과하고 수성 유기상을 연속하여 동결 건조하였다. 흰색 무정형 고상물로 필요한 생성물 0.86g을 얻었다.

FAB-MS (M+H⁺): 450.

본 명세서에 기술된 방법과는 별볍으로 Boc-(L)-3,4-디히드로프롤린 대신 Boc-프롤린을 직접 사용할 수 있으며, 이 때 수소화 단계는 생략된다.

실시예 5: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실글라이실프롤릴-[2-(4-아마이디노)티아졸릴메틸]아마이드

이 혼합물을 N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Chg-Pro-OH 및 2-H₂N-CH₂ -thiaz-4-CSNH₂로부터 출발하여 실시예 1과 동일하게 제조할 수 있다.

실시예 6: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐프롤릴-[4-(2-아마이디노)티에닐메틸]아마이드

이 혼합물을 N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Cha-Pro-OH 및 4-H₂N-CH₂ -Thioph-2-CN으로부터 출발하여 실시예 2와 동일하게 또는 HOOC-CH₂-(D)-Cha-Pyr-NH-CH₂-4-(2-am)-Thioph을 수소화시켜 실시예 4와 동일하게 제조할 수 있다.

실시예 7: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐프롤릴-[5-(2-아마이디노-3,4-디메틸)티에닐메틸]아마이드

5-H₂N-CH₂-(3,4-Me₂)-Thioph-2-CONH₂ 및 N-(t-BuO₂C-CH ₂)-N-Boc-(D)-Cha-Pro-OH로부터 출발하여 실시예 2a)와 동일하게 N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Cha-Pro-NH- CH₂-5-(2-CONH₂-3,4-Me₂)-Thioph로 전환할 수 있다. 아마이드를 무수트리플루오로아세트산 및 메틸렌 클로라이드 중의 디이소프로필에틸아민으로 탈수시켜 니트릴 기능기를 얻었다. 아미딘 기능기는 실시예 2와 동일하게 만들었고 이어서 보호기를 제거하였다.

실시예 8a: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헵틸글라이실프롤릴-[4-(2-아마이디노)티에닐메틸]아마이드 히드로아세테이트:

실시예 8b: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(L)-시클로헵틸글라이실프롤릴-[4-(2-아마이디노)티에닐메틸]아마이드 히드로아세테이트:

4-H₂N-CH₂-Thioph-2-CN, Boc-Pyr-OH 및 N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D,L)-Cheg-OH로부터 출발하여 실시예 3과 동일하게 제조하고 실시예 4의 최종 단계와 동일하게 수소화시키고 MPLC(RP 18, 아세토니트릴/물)로 연속하여 분리하여 할 수 있다. Boc-Pyr-OH 대신에 Boc-Pro-OH를 합성에 사용할 수 있으며, 이 때 수소화 단계는 생략된다.

실시예 9a: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로펜틸글라이실프롤릴-[4-(2-아마이디노)티에닐메틸]아마이드 히드로아세테이트:

실시예 8b: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(L)-시클로펜틸글라이실프롤릴-[4-(2-아마이디노)티에닐메틸]아마이드 히드로아세테이트:

4-H₂N-CH₂-Thioph-2-CN, Boc-Pyr-OH 및 N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D,L)-Cpg-OH로부터 출발하여 실시예 3과 동일하게 제조하고 실시예 4의 최종 단계와 동일하게 수소화시키고 MPLC(RP 18, 아세토니트릴/물)로 연속하여 분리하여 할 수 있다. Boc-Pyr-OH 대신에 Boc-Pro-OH를 합성에 사용할 수 있으며, 이 때 수소화 단계는 생략된다.

실시예 10: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐프롤릴-[4-(2-아마이디노)티아졸릴메틸]아마이드

이 화합물은 N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Cha-Pro-OH 및 4-H₂N-CH₂ -thiaz-2-CSNH₂로부터 출발하여 실시예 1과 동일하게 제조할 수 있다.

실시예 11: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실글라이실프롤릴-[4-(2-아마이디노)티아졸릴메틸]아마이드

이 화합물은 N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Chg-Pro-OH 및 4-H₂N-CH₂ -thiaz-2-CSNH₂로부터 출발하여 실시예 1과 동일하게 제조할 수 있다.

실시예 12: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐프롤릴-5-(3-아마이디노)이속사졸릴메틸]아마이드

N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Cha-Pro-OH 및 5-H₂N-CH₂-isox-3-CONH ₂로부터 출발하여 실시예 2a)와 동일하게 N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Cha-Pro-NH-CH₂-5-(3-CONH₂)-isox로 전환할 수 있다. 무수트리플루오로아세트산 및 메틸렌 클로라이드 중의 디이소프로필에틸아민으로 아마이드를 탈수시켜 니트릴 기능기를 얻었다. 아미딘 기능기는 암모니아 및 아세틸시스테인을 반응시켜 실시예 20과 동일하게 만들 었고 이후 보호기를 제거할 수 있다.

실시예 13: N-[5-(3-아마이디노)티에닐메틸]-1-[N-(히드록시카르보닐메틸렌) -(D)-시클로헥실글라이실]아제티딘-2-카르복사마이드

a) N-[5-(3-시아노)티에닐메틸]-1-[N-t-부톡시카르보닐-(D)-시클로헥실글라이실]아제티딘-2-카르복사마이드

디이소프로필에틸아민 5.9g(45.8mmol) 및 에틸 아세테이트 중의 50% 무수 프로판포스폰 용액 11.5㎖(14.9mmol)을 -5^oC에서 차례로 적가하고 메틸렌 클로라이드 40㎖ 중의 5-아미노메틸-3-시아노티오펜 염산염 2g(11.5mmol) 및 1-[N-(t-부톡시카르보닐)-(D)-시클로헥실글라이실]아제티딘-2-카르복사실산 3.9g(11.5mmol)(WO 94/29336호)의 용액에 가하였다. 2시간 동안 교반을 계속하였으며 이 과정 중에 온도는 10^oC를 넘었다. 유기상을 물, 5% 중탄산나트륨 용액, 5% 농도의 시트르산 용액으로 세척하고, 황산나트륨으로 건조하고 증류시켜 건조하였다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(실리카겔 상, 용리제-에틸 아세테이트)로 정제하여 흰색의 무정형 분말 4.5g(이론치의 85%)을 얻었다.

FAB MS: 461(M+H⁺).

b) N-[5-(3-시아노)티에닐메틸]-1-[N-t-부톡시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실글라이실]아제티딘-2-카르복사마이드

상기 화합물 4.5g(3.8mmol)을 이소프로판올 70㎖에 용해하고, 디옥산 중의 4N 염산을 가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 정치하였다. 용매를 증류시킨 후, 잔 류물을 메틸렌 클로라이드에 용해하고 혼합물을 물로 3회 추출하였다. 합친 수 추출물을 1N 수산화나트륨 용액으로 알칼라인으로 만들고, 분리된 유상 염기 를 메틸렌 클로라이드로 3회 추출하였으며 용매를 연속하여 증류시켜 유상물 2.9g(8mmol)을 얻었다. 이를 메틸렌 클로라이드 50㎖ 및 아세토니트릴 10㎖에 용해하고 디이소프로필에틸아민 2.1g(16mmol) 및 t-부틸 브로모 아세테이트 1.5g(7.6mmol)를 가하고 실온에서 24시간 동안 정치시켰다.

유기상은 각각 5% 농도의 시트르산 용액, 5% 농도의 탄산수소나트륨 용액 및 물로 2회씩 세척하고 황산나트륨 상에서 건조하였으며 용매를 증류시켜 연황색 유상물 3.3g(이론치의 92%)을 얻었다. FAB-MS: 475(M+H⁺).

c) N-[5-(3-아마이디노)티에닐메틸]-1-[N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실글라이실)아제티딘-2-카르복사마이드

상기 생성물은 실시예 2와 동일하게 아미딘으로 전환시켰다. 얻어진 조 아미딘은 2차 산물을 상당량 함유하며 컬럼 크로마토그래피(실리카겔, 용리제-메틸렌 클로라이드:메탄올:아세트산=24:6:1.5)로 정제해야 했다. 흰색의 무정형 분말로 0.9g을 분리하였다. Boc 보호기 및 t-부틸 에스테르기를 3N 염산 중에서 12시간 동안 정치시켜 분말로부터 제거하였으며 최종적으로 톨루엔을 가해 증류시켜 염산을 제거하였다. 염산 잔류물은 실리카겔 상에서 메탄올/25% 암모니아 용리제(50/2.5)로 크로마토그래피하여 베타인으로 전환시켰다. 흰색, 무정형 분말 0.45g을 얻었다, FAB-MS: 463(M+H⁺).

실시예 14: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐프롤릴-[5-(3-아마이디노)푸릴메틸]아마이드 히드로아세테이트

a) 프롤릴-[5-(3-시아노)푸릴메틸]아마이드 염산염

Boc-Pro-OH 305g(14mmol) 및 에틸디이소프로필아민 6.11g(47.3mmol)을 실온에서 디클로로메탄 50㎖ 중의 5-아미노메틸-3-시아노푸란 염산염 2.5g(15.8mmol)에 가하였다. 에틸 아세테이트 중의 50% 농도의 무수 프로판포스폰산 용액 15.8㎖(74.5mmol)을 5^oC에서 천천히 냉각하며 적가하였다. 실온에서 30분간 교반한 후, 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고 5% 농도의 시트르산 용액으로 3회, 포화 염화나트륨 용액으로 1회 세척하였다. 황산나트륨 상에서 건조시킨 후 여과하여 건조제를 제거하고 용매를 물 펌프 진공하에서 증류시켜 연황색 유상물로 4.3g(86%)를 얻었으며 이를 이후에 직접 반응시켰다.

a)에 따라 얻은 유상물(4.3g, 13.5mmol),을 에틸 아세테이트 40㎖에 용해시켜 Boc기를 제거하고 0^oC에서 염화 수소로 포화시켰다. 반응 혼합물을 밤새 교반하고 회전식 증발기에서 증류시켜 건조하였다. 이로써 표제 화합물 3.4g(99%)을 얻었다.

b) N-(tert-부톡시카르보닐메틸렌)-(N-Boc)-(D)-시클로헥실알라닐프롤릴-[5-(3-시아노)푸릴메틸]아마이드

t-BuO₂C-CH₂-Boc-(D)-Cha-OH 2.58g(6.7mmol) 및 프롤릴-[5-(3-시아노)푸릴메틸]아마이드 염산염 1.7g(6.7mmol)을 디클로로메탄 20㎖에 현탁하고 에틸디이소프 로필아민 3.45g(26.8mmol)을 가하였다. 반응 혼합물을 약 5^oC까지 냉각하고 50% 농도의 에틸 아세테이트 중의 무수 프로판포스폰산 6.7㎖를 적가하였으며 이 과정 중에 용액은 맑은 용액으로 변하였다. 실온에서 밤새 교반한 후, 혼합물을 에틸 아세테이트고 희석하고 20% 농도의 황산수소나트륨 용액, 포화 탄산수소나트륨 용액으로 각 3회, 포화 염화나트륨 용액으로 1회 세척하였다. 황산나트륨 상에서 건조시킨 후 건조제를 제거하고 용매를 물 펌프 진공 하에서 증류시켜 유상물로서 필요한 생성물 3.7g을 얻었다.

c) N-(tert-부톡시카르보닐메틸렌)-(N-Boc)-(D)-시클로헥실알라닐프롤릴-[5-(3-아마이도티오카르보닐)푸릴메틸]아마이드

b)에 따라 얻은 생성물을 피리딘(30㎖) 및 트리에틸아민 (15㎖)에 용해하였다. 반응 혼합물을 실온에서 황화 수소로 포화시키고 실온에서 밤새 교반하였다. 과량의 황화 수소를 질소로 치환하고 반응 혼합물을 얼음으로 냉각한 5% 농도의 황산수소나트륨 용액 300㎖에 부었다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출하고 합친 유기상을 5% 농도의 황산수소나트륨 용액으로 1회 이상 세척하였다. 황산나트륨 상에서 건조한 후 용매를 물 펌프 진공 하에서 증류시키고 얻은 조생성물(3.3g)을 추가의 정제없이 다음 단계에 사용하였다.

d) N-(tert-부톡시카르보닐메틸렌)-(N-Boc)-(D)-시클로헥실알라닐프롤릴-[5-(3-S-메틸이미노티오카르보닐)푸릴메틸]-아마이드 히드로요오다이드

c)에 따라 얻은 조생성물을 아세톤 50㎖에 용해시키고 요오드화 메틸 8.3g(58.7mmol)을 가하였다. 실온에서 밤새 교반한 후, 용매를 물 펌프 진공 하에서 증류시켰다. 잔류물을 소량의 에틸 아세테이트에 용해시키고 용액을 디이소프로필 에테르에 적가하였으며, 이 과정중에 형성된 침전물을 흡인 여과하고 디이소프로필 에테르로 세척하였다. 진공하 실온에서 건조시켜 고상 발포체로서 3.3g을 얻었다.

e) N-(tert-부톡시카르보닐메틸렌)-(N-Boc)-(D)-시클로헥실알라닐프롤릴-[5-(3-아마이디노)푸릴메틸)아마이드 히드로아세테이트

d)에 따라 얻은 조생성물(3.3g, 4.3mmol)을 아세토니트릴 40㎖에 용해하고, 암모늄 아세테이트 0.99g(12.9mmol)을 가하였다. 혼합물을 40^oC에서 2시간 동안 교반하였다. 이후 용매를 물 펌프 진공 하에서 증류시키고, 잔류물을 디에틸 에테르에 흡수시켰으며, 염을 흡인 여과하고, 여액을 농축하였다. 조생성물을 역상 HPLC(아세토니트릴/물 및 아세트산 완충액)를 사용하여 정제시켜 황색 고상 발포체로서 991mg을 얻었다.

f) N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐프롤릴-[5-(3-아마이디노)푸릴메틸)아마이드 히드로아세테이트

e)에 따라 얻은 생성물(991mg, 1.68mmol)에 1N 염산 수용액 20㎖를 가하였다. 45^oC에서 3시간 동안 교반한 후, 혼합물을 물로 희석하고 얻어진 혼합물을 동결 건조하였다. 얻어진 조생성물을 메탄올에 용해시키고 이온 교환기(플루카사(Fluka), 제품 번호 00402호)를 사용하여 아세테이트 염으로 전환 시켜 필요한 생성물 484mg을 얻었다.

FAB-MS(M+H⁺): 446.

실시예 15: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실글라이실프롤릴-[5-(3-아마이디노)푸릴메틸)아마이드 히드로아세테이트

FAB-MS(M+H⁺): 434.

이는 b)의 N-(tert-부톡시카르보닐메틸렌)-(N-Boc)-(D)-시클로헥실알라닌 대신 N-(tert-부톡시카르보닐메틸렌)-(N-Boc)-(D)-시클로헥실글라이신을 사용하여 실시예 14와 동일하게 제조할 수 있다.

실시예 16: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐프롤릴-[5-(2-아마이디노-1-메틸)피롤릴메틸)아마이드

a) N-BOC-N-(tert-부틸록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐프롤린(2.

5g, 5.18mmol)을 건조 메틸렌 클로라이드(30㎖) 중에 용해하고 -10^oC까지 냉각한 후, 동일 온도에서 N-에틸 디이소프로필아민(3.9㎖, 22.27mmol)을 가하였다. 5분간 교반한 후, 메틸렌 클로라이드(15㎖) 중의 5-아미노메틸-1-메틸피롤-2-카르보니트릴(0.7g, 5.18mmol) 용액을 가하였다. 에틸 아세테이트(4.6㎖, 6.21mmol) 중의 50% 농도의 무수 프로판포스폰산 용액을 20분에 걸쳐 연속하여 적가하였다. -10^oC 내지 0^oC에서 90분간 교반한 후, 혼합물을 메틸렌 클로라이드로 희석하고 포화 탄산수소나트륨(15㎖씩 2회), 5% 농도 시트르산 용액(15㎖씩 2회) 및 포화 염화나트륨 용액(15㎖, 1회)으로 세척하였다. 황산나트륨 상에서 건조한 후, 혼합물을 진공에서 건조시키고, 조생성물을 크로마토그래피(실리카겔, 메틸렌 클로라이드:메탄올=95:5)로 정제하였다. 수득량: 2.3g(74%).

b) a)에 따라 얻은 생성물(2.3g, 3.83mmol)을 건조 메틸렌 클로라이드 및 메탄올(1:1, 50㎖)의 혼합물에 용해시키고, 히드록실아민 염산염(664mg, 9.56mmol) 및 N-에틸디이소프로필아민(4㎖, 23.0mmol)을 가하였다. 혼합물을 40^oC에서 7시간 동안 교반하고 이어서 실온에서 48시간 동안 교반하였다. 용매를 진공에서 증류시키고 잔류물에 물을 가한 후, 혼합물을 아세트산으로 pH 5가 되도록 산성화하였다. 수용액을 메틸렌 클로라이드(2회) 및 에틸 아세테이트(1회)로 추출하였다. 합친 유기상을 황산나트륨 상에서 건조시키고 용매를 진공에서 증류시켰다. 조생성물을 크로마토그래피(실리카겔, 메틸렌 클로라이드:메탄올=95:5)로 정제하였다. 수득량: 1.6g(흰색 발포체, 66%).

FAB-MS(M+H⁺): 633.

c) b)에 따라 얻은 생성물(1.6g, 2.53mmol)을 건조 메탄올(35㎖)에 용해하고, 아세트산(0.3㎖, 5.06mmol) 및 라니 니켈(84mg)을 가하였다. 혼합물을 수소 1대기압 하, 50^oC에서 2.5시간 동안 수소화시켰다. 냉각한 후, 촉매를 셀라이트(등록상표명)를 통해 여과하여 제거하고, 여액을 진공에서 농축하였다. 수득량: 1.7g(흰색 발포체, 99%). FAB-MS(M+H⁺): 617.

d) c)에 따라 얻은 생성물(1.7g, 2.50mmol)을 건조 메틸렌 클로라이드(50㎖) 중에 용해시키고, 용액을 0^oC까지 냉각한 후 건조 HCl 가스로 포화시켰다. 2시간 동안 교반한 후, 용매를 진공에서 증류시키고, 조 생성물을 크로마토그래피(RP18, 아세토니트릴:물=1:9 및 0.1% 아세트산 첨가)로 정제하였다. 수득량: 760mg(57%), 융점: 184 - 185^oC, FAB-MS(M+H⁺): 461

실시예 17: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐프롤릴-[2-(4-아마이디노-1-메틸)피롤메틸]아마이드는 실시예 16과 동일하게 제조하였다, FAB-MS(M+H⁺): 461.

실시예 18: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐프롤릴-[4-(2-아마이디노-1-메틸)피롤릴메틸]아마이드는 실시예 16과 동일하게 제조할 수 있다.

실시예 19: N-(tert-부톡시카르보닐메틸렌)-(N-Boc)-(D)-시클로헥실알라닐프롤릴-[2-(4-아마이도)옥사졸릴메틸]아마이드 염산염을 N-(t-BuO₂C-CH₂N-Boc-(D)-Cha-Pro-OH 및 2-아미노메틸-4-티오카르복사마이드옥사졸로부터 실시예 1과 동일하게 제조할 수 있다.

실시예 20: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐프롤릴-[5-(3-아마이디노-1-메틸)피라졸릴메틸]아마이드 염산염

a) N-(tert-부톡시카르보닐메틸렌)-(N-Boc)-(D)-시클로헥실알라닐프롤릴-[5-(3-아마이도-1-메틸)피라졸릴메틸]아마이드

N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Cha-Pro-OH(1.25g. 2.59mmol) 을 디클로로메탄(30㎖) 중에 가하였다. 디이소프로필에틸아민(1.95㎖, 11.16mmol)을 -10^oC에서 적가하였다. 테트라히드로푸란(20㎖) 중의 1-메틸-5-아미노메틸피라졸-3-카르복사마이드(0.4g, 2.59mmol)의 용액을 연속하여 가하였다. 5분간 교반한 후 50% 농도의 무수 프로판포스폰산 에틸 아세테이트 용액(2.36㎖, 3.11mmol)뿐 아니라 디클로로메탄(5㎖)을 5분에 걸쳐 적가하였다. 0^oC에서 45분간 교반한 후, 혼합물을 12시간 동안 실온에서 승온시켰다. 용매를 회전식 증발기에서 제거하고 잔류물을 디클로로메탄에 흡수시키고 혼합물을 포화 탄산수소나트륨 용액(2회), 5% 농도의 시트르산 용액(2회) 및 포화 염화나트륨 용액(1회)으로 세척하였다. 황산나트륨 상에서 건조시킨 후 용매를 회전식 증발기에서 제거하였다. 조생성물을 크로마토그래피(RP-18, 아세토니트릴, 물)로 정제하였다. 수득량: 220mg(14%).

FAB-MS(M+H⁺): 619.

b) N-(tert-부톡시카르보닐메틸렌)-(N-Boc)-(D)-시클로헥실알라닐프롤릴-[5-(3-시아노-1-메틸)피라졸릴메틸]아마이드

a)에 따라 얻은 생성물(220mg, 0.36mmol)을 디클로로메탄(15㎖)에 용해하고, 디이소프로필에틸아민(0.17㎖, 0.96mmol)을 -10^oC에서 가하였다. 5분간 교반한 후, 디클로로메탄(1㎖)중의 무수 트리플루오로아세트산(0.057㎖, 0.41mmol)을 적가하였다. 0^oC에서 1시간 후에, 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고 포화 탄산수소나트 륨 용액(2회), 5% 농도 시트르산 용액(2회) 및 포화 염화나트륨 용액(1회)으로 세척하였다. 황산나트륨 상에서 건조한 후 용매를 회전식 증발기에서 제거하였다. 수득량: 180mg(84%).

c) N-(tert-부톡시카르보닐메틸렌)-(N-Boc)-(D)-시클로헥실알라닐프롤릴-[5-(3-아마이디노-1-메틸)피라졸릴메틸]아마이드 히드로아세테이트

b)에 따라 얻은 생성물(180mg, 0.3mmol)을 메탄올(1㎖)에 용해하고, 아세틸시스테인(52.8mg, 0.32mmol)을 가하였다. 연속하여 암모니아를 반응이 완결될 때까지 35^oC에서 통과시켰다. 용매를 회전식 증발기에서 제거하고 조생성물을 이온 교환기(중합체 지지대 상의 아세테이트 플루카 00402)를 사용사여 사에테이트로 전환하였다. 조생성물을 크로마토그래피(RP-18, 아세토니트릴, 물)로 정제하였다. 수득량: 50mg(16%), FAB-MS(M+H⁺): 618.

d) N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐프롤릴-[5-(3-아마이디노-1-메틸)피라졸릴메틸]아마이드 염산염

c)에 따라 얻은 생성물(50mg, 0.081mmol)을 디클로로메탄(5㎖)에 용해하고 디에틸 에테르 중의 5M 염산(0.147㎖)을 가하였다. 실온에서 12시간 동안 교반한 후, 용매를 회전식 증발기에서 제거하였으며 생성물을 물에 흡수시키고 동결건조하였다. 수득량: 40mg(92%), FAB-MS(M+H⁺): 462.

실시예 21: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐프롤릴-[5-(3- 아마이디노-1,2,4-옥사디아졸릴메틸]아마이드 염산염은 t-BuO₂C-CH₂-(Boc)-(D)-Cha-Pro-OH 및 5-아미노-3-시아노-1,2,4-옥사디아졸로부터 출발하여 실시예 20과 동일하게 제조할 수 있다.

실시예 22: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실글라이실프롤릴-[5-(2-아마이디노-3-메틸)티에닐메틸]아마이드

이 화합물은 N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Chg-Pro-OH 및 5-아미노메틸-3-메틸티오펜-2-카르보니트릴 염산염으로부터 출발하여 실시예 2의 a) 내지 e)에 기술된 것과 비슷한 방법으로 합성하였다.

FAB-MS(M+H⁺): 464.

실시예 23: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐프롤릴-[5-(2-아마이디노-3-메틸)티에닐메틸]아마이드

이 화합물은 N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Cha-Pro-OH 및 5-아미노메틸-3-메틸티오펜-2-카르보니트릴 염산염으로부터 출발하여 실시예 2a) 내지 e)에 기술된 것과 비슷한 방법으로 합성하였다.

FAB-MS(M+H⁺); 478.

실시예 24: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐프롤릴-[5-(3-아마이디노-1-메틸)트리아질메틸]아마이드

이 화합물은 N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Cha-Pyr-OH 및 5-아미노메틸-1-메틸-1H-[1,2,4]트리아졸-3-카르복사마이드로부터 출발하여 합성하였다. 우선 실시예 20의 a) 내지 d)에 기술된 것과 유사한 방법으로 N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐디히드로프롤릴-[5-(3-아마이디노-1-메틸)트리아질메틸]아마이드를 얻었다. 이 화합물을 실시예 4b)에 기술된 것과 유사한 방법으로 하여 표제 화합물로 전환시켰다.

FAB-MS(M+H⁺): 463.

실시예 25: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실글라이실프롤릴-[5-(3-아마이디노-1-메틸)트리아질메틸]아마이드

이 화합물은 N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Chg-Pro-OH 및 5-아미노메틸-1-메틸-1H-[1,2,4]트리아졸-3-카르복사마이드로부터 출발하여 합성하였다. 우선 실시예 20의 a) 내지 d)에 기술된 것과 유사한 방법으로 N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실글라이실디히드로프롤릴-[5-(3-아마이디노-1-메틸)트리아질메틸]아마이드를 얻었다. 이 화합물을 실시예 4b)에 기술된 것과 유사한 방법으로 하여 표제 화합물로 전환시켰다.

FAB-MS(M+H⁺): 449.

실시예 26: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐프롤릴-[5-(3-아마이디노-4-클로로)티에닐메틸]아마이드

이 화합물은 N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Cha-Pro-OH 및 5-아미노메틸-4-클로 로티오펜-3-티오카르복사마이드 염산염으로부터 출발하여 실시예 1의 a) 내지 d)에 따라 합성하였다.

ESI-MS(M+H⁺): 498.

실시예 27: N-(에톡시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐프롤릴-[5-(3-아마이디노-4-클로로)티에닐메틸]아마이드

이 화합물은 0^oC로 냉각한 에탄올 10㎖ 중의 N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐프롤릴-[5-(3-아마이디노-4-메틸)티에닐]메틸아마이드(상기 실시예 26) 100mg의 용액에 염화 수소를 통과시켜 포화하고, 실온에서 5시간 동안 교반하여 합성하였다. 혼합물을 농축하고 톨루엔(소량씩 3회)과 함께 증류시켜 잔류 염솨 수소를 제거하였다. 잔류물(89mg, 85%)을 에탄올에 용해시키고 아세테이트 이온교환기(플루카사(Fluka), 제품 번호 00402호)를 사용하여 상응하는 아세테이트로 전환시켰다.

FAB-MS(M+H⁺): 506.

실시예 28: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐프롤릴-[5-(3-아마이디노-4-메틸)티에닐메틸]아마이드

이 화합물은 N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Cha-Pro-OH 및 5-아미노메틸-4-메틸티오펜-3-티오카르복사마이드 염산염으로부터 출발하여 실시예 1의 a) 내지 d)에 따라 합성하였다.

ESI-MS(M+H⁺): 478.

실시예 29: N-(에톡시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐프롤릴-[5-(3-아마이디노-4-메틸)티에닐메틸]아마이드

이 화합물은 0^oC로 냉각한 에탄올 10㎖ 중의 N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐프롤릴-[5-(3-아마이디노-4-메틸)티에닐]메틸아마이드(상기 실시예 28) 100mg의 용액에 염화 수소를 통과시켜 포화하고, 실온에서 5시간 동안 교반하여 합성하였다. 혼합물을 농축하고 톨루엔(소량씩 3회)과 함께 증류시켜 잔류 염화 수소를 제거하였다. 잔류물(89mg, 85%)을 에탄올에 용해시키고 아세테이트 이온교환기(플루카사(Fluka), 제품 번호 00402호)를 사용하여 상응하는 아세테이트로 전환시켰다.

FAB-MS(M+H⁺): 506.

실시예 30: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐프롤릴-[5-(2-아마이디노-3-클로로)티에닐메틸]아마이드

이 화합물은 N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Cha-Pro-OH 및 5-H₂N-CH₂ -(2-CN-3-Cl)-Thioph을 커플링시켜 N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Cha-Pro-NH-CH₂-5-(2-CN-3-Cl)-Thioph을 얻었고, 실시예 2에 기술된 것과 유사한 방법으로 아미딘 기를 형성하고 연속하여 보호기를 제거하여 제조할 수 있다.

실시예 31: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실글라이실프롤릴-[5- (2-아마이디노-3-클로로)티에닐메틸]아마이드

이 화합물은 N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Chg-Pro-OH 및 5-H₂N-CH₂ -(2-CN-3-Cl)-Thioph을 커플링시켜 N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Chg-Pro-NH-CH₂-5-(2-CN-3-Cl)-Thioph을 얻었고, 실시예 2에 기술된 것과 유사한 방법으로 아미딘 기를 형성하고 연속하여 보호기를 제거하여 제조할 수 있다.

실시예 32: N-(메톡시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐프롤릴-[4-(2-아마이디노)티에닐메틸]아마이드

N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Cha-Pro-NH-CH₂-4-(2-am)-Thioph로부터 보호기를 제거하고 에스테르기를 이동시켜 합성할 수 있다(실온에서 메탄올 중의 HCl).

실시예 33: N-(메톡시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실글라이실프롤릴-[4-(2-아마이디노)티에닐메틸]아마이드

N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Chg-Pro-NH-CH₂-4-(2-am)-Thioph로부터 보호기를 제거하고 에스테르기를 이동시켜 합성할 수 있다(실온에서 메탄올 중의 HCl).

실시예 34: N-(메톡시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐아제티딘-2-카르복실산 4-(2-아마이디노)티에닐메틸아마이드

N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Cha-Aze-NH-CH₂-4-(2-am)-Thioph로부터 보호기를 제거하고 에스테르기를 이동시켜 합성할 수 있다(실온에서 메탄올 중의 HCl).

실시예 35: N-(메톡시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실글라이실-아제티딘-2- 카르복실산 2-(4-아마이디노)티에닐메틸아마이드

N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Chg-Aze-NH-CH₂-4-(2-am)-Thioph로부터 보호기를 제거하고 에스테르기를 이동시켜 합성할 수 있다(실온에서 메탄올 중의 HCl).

실시예 36: N-(메톡시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐프롤릴-[2-(4-아마이디노)티아졸릴메틸아마이드

N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Cha-Pro-NH-CH₂-2-(4-am)-thiaz로부터 보호기를 제거하고 에스테르기를 이동시켜 합성할 수 있다(실온에서 메탄올 중의 HCl).

실시예 37: N-(메톡시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실글라이실프롤릴-[2-(4-아마이디노)티아졸릴메틸아마이드

N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Chg-Pro-NH-CH₂-2-(4-am)-thiaz로부터 보호기를 제거하고 에스테르기를 이동시켜 합성할 수 있다(실온에서 메탄올 중의 HCl).

실시예 38: N-(메톡시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐-아제티딘-2-카르복실산-2-(4-아마이디노)티아졸릴메틸아마이드

N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Cha-Aze-NH-CH₂-2-(4-am)-thiaz로부터 보호기를 제거하고 에스테르기를 이동시켜 합성할 수 있다(실온에서 메탄올 중의 HCl).

실시예 39: N-(메톡시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실글라이실-아제티딘-2-카르복실산-2-(4-아마이디노)티아졸릴메틸아마이드

N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Chg-Aze-NH-CH₂-2-(4-am)-thiaz로부터 보호기를 제거하고 에스테르기를 이동시켜 합성할 수 있다(실온에서 메탄올 중의 HCl).

실시예 40: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐-프롤릴-[4-(2-히드록시아마이디노)티에닐메틸]아마이드

(t-BuO₂C-CH₂)-(Boc)-(D)-Cha-Pro-NH-CH₂-(2-CN)-4-Thioph 및 히드록실아민 염산염(메탄올, 디이소프로필에틸아민, 실온)을 반응시키고 연속하여 보호기를 제거하여 합성할 수 있다(실온에서 디클로로메탄 중의 HCl).

실시예 41: N-(메톡시시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐-프롤릴-[4-(2-히드록시아마이디노)티에닐메틸]아마이드

(t-BuO₂C-CH₂)-(Boc)-(D)-Cha-Pro-NH-CH₂-(2-CN)-4-Thioph 및 히드록실아민 염산염(메탄올, 디이소프로필에틸아민, 실온)을 반응시키고 연속하여 보호기를 제거하고 에스테르기를 이동시켜 합성할 수 있다(실온에서 메탄올 중의 HCl).

실시예 42: N-(에톡시시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐-프롤릴-[4-(2-히드록시아마이디노)티에닐메틸]아마이드

(t-BuO₂C-CH₂)-(Boc)-(D)-Cha-Pro-NH-CH₂-(2-CN)-4-Thioph 및 히드록실아민 염산염(메탄올, 디이소프로필에틸아민, 실온)을 반응시키고 연속하여 보호기를 제거하고 에스테르기를 이동시켜 합성할 수 있다(실온에서 에탄올 중의 HCl).

실시예 43: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실글라이실-프롤릴-[4-(2-히드록시아마이디노)티에닐메틸]아마이드

(t-BuO₂C-CH₂)-(Boc)-(D)-Chg-Pro-NH-CH₂-(2-CN)-4-Thioph 및 히드록실아민 염산염(메탄올, 디이소프로필에틸아민, 실온)을 반응시키고 연속하여 보호기를 제거하여 합성할 수 있다(실온에서 디클로로메탄 중의 HCl).

실시예 44: N-(메톡시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실글라이실-프롤릴-[4-(2-히드록시아마이디노)티에닐메틸]아마이드

(t-BuO₂C-CH₂)-(Boc)-(D)-Chg-Pro-NH-CH₂-(2-CN)-4-Thioph 및 히드록실아민 염산염(메탄올, 디이소프로필에틸아민, 실온)을 반응시키고 연속하여 보호기를 제거하고 에스테르기를 이동시켜 합성할 수 있다(실온에서 메탄올 중의 HCl).

실시예 45: N-(에톡시시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실글라이실-프롤릴-[4-(2-히드록시아마이디노)티에닐메틸]아마이드

(t-BuO₂C-CH₂)-(Boc)-(D)-Chg-Pro-NH-CH₂-(2-CN)-4-Thioph 및 히드록실아민 염산염(메탄올, 디이소프로필에틸아민, 실온)을 반응시키고 연속하여 보호기를 제거하고 에스테르기를 이동시켜 합성할 수 있다(실온에서 에탄올 중의 HCl).

실시예 46: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실글라이실-아제티딘-2-카르복실산 [4-(2-히드록시아마이디노)티에닐메틸]아마이드

(t-BuO₂C-CH₂)-(Boc)-(D)-Chg-Aze-NH-CH₂-(2-CN)-4-Thioph 및 히드록실아민 염산염(메탄올, 디이소프로필에틸아민, 실온)을 반응시키고 연속하여 보호기를 제거하여 합성할 수 있다(실온에서 디클로로메탄 중의 HCl).

실시예 47: N-(메톡시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실글라이실-아제티딘-2-카르복실산 [4-(2-히드록시아마이디노)티에닐메틸]아마이드

(t-BuO₂C-CH₂)-(Boc)-(D)-Chg-Aze-NH-CH₂-(2-CN)-4-Thioph 및 히드록실아민 염산염(메탄올, 디이소프로필에틸아민, 실온)을 반응시키고 연속하여 보호기를 제거하고 에스테르기를 이동시켜 합성할 수 있다(실온에서 메탄올 중의 HCl).

실시예 48: N-(에톡시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실글라이실-아제티딘-2-카르복실산 [4-(2-히드록시아마이디노)티에닐메틸]아마이드

(t-BuO₂C-CH₂)-(Boc)-(D)-Chg-Aze-NH-CH₂-(2-CN)-4-Thioph 및 히드록실아민 염산염(메탄올, 디이소프로필에틸아민, 실온)을 반응시키고 연속하여 보호기를 제거하고 에스테르기를 이동시켜 합성할 수 있다(실온에서 에탄올 중의 HCl).

실시예 49: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐-아제티딘-2-카르복실산 [4-(2-히드록시아마이디노)티에닐메틸]아마이드

(t-BuO₂C-CH₂)-(Boc)-(D)-Cha-Aze-NH-CH₂-(2-CN)-4-Thioph 및 히드록실아민 염산염(메탄올, 디이소프로필에틸아민, 실온)을 반응시키고 연속하여 보호기를 제거하여 합성할 수 있다(실온에서 디클로로메탄 중의 HCl).

실시예 50: N-(메톡시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐-아제티딘-2-카르복실산 [4-(2-히드록시아마이디노)티에닐메틸]아마이드

(t-BuO₂C-CH₂)-(Boc)-(D)-Cha-Aze-NH-CH₂-(2-CN)-4-Thioph 및 히드록실아민 염산염(메탄올, 디이소프로필에틸아민, 실온)을 반응시키고 연속하여 보호기를 제거하고 에스테르기를 이동시켜 합성할 수 있다(실온에서 메탄올 중의 HCl).

실시예 51: N-(에톡시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐-아제티딘-2-카 르복실산 [4-(2-히드록시아마이디노)티에닐메틸]아마이드

(t-BuO₂C-CH₂)-(Boc)-(D)-Cha-Aze-NH-CH₂-(2-CN)-4-Thioph 및 히드록실아민 염산염(메탄올, 디이소프로필에틸아민, 실온)을 반응시키고 연속하여 보호기를 제거하고 에스테르기를 이동시켜 합성할 수 있다(실온에서 에탄올 중의 HCl).

실시예 52: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐-프롤릴-[2- (4-히드록시아마이디노)티아졸릴메틸]아마이드

(t-BuO₂C-CH₂)-(Boc)-(D)-Cha-Pro-NH-CH₂-(4-CN)-2-thiaz 및 히드록실아민 염산염(메탄올, 디이소프로필에틸아민, 실온)을 반응시키고 연속하여 보호기를 제거하여 합성할 수 있다(실온에서 디클로로메탄 중의 HCl).

실시예 53: N-(메톡시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐-프롤릴-[2- (4-히드록시아마이디노)티아졸릴메틸]아마이드

(t-BuO₂C-CH₂)-(Boc)-(D)-Cha-Pro-NH-CH₂-(4-CN)-2-thiaz 및 히드록실아민 염산염(메탄올, 디이소프로필에틸아민, 실온)을 반응시키고 연속하여 보호기를 제거하고 에스테르기를 이동시켜 합성할 수 있다(실온에서 메탄올 중의 HCl).

실시예 54: N-(에톡시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐-프롤릴-[2-(4-히드록시아마이디노)티아졸릴메틸]아마이드

(t-BuO₂C-CH₂)-(Boc)-(D)-Cha-Pro-NH-CH₂-(4-CN)-2-thiaz 및 히드록실아민 염산염(메탄올, 디이소프로필에틸아민, 실온)을 반응시키고 연속하여 보호기를 제거하고 에스테르기를 이동시켜 합성할 수 있다(실온에서 에탄올 중의 HCl).

실시예 55: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실글라이실-프롤릴-[2- (4-히드록시아마이디노)티아졸릴메틸]아마이드

(t-BuO₂C-CH₂)-(Boc)-(D)-Chg-Pro-NH-CH₂-(4-CN)-2-thiaz 및 히드록실아민 염산염(메탄올, 디이소프로필에틸아민, 실온)을 반응시키고 연속하여 보호기를 제거하여 합성할 수 있다(실온에서 디클로로메탄 중의 HCl).

실시예 56: N-(메톡시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실글라이실-프롤릴-[2- (4-히드록시아마이디노)티아졸릴메틸]아마이드

(t-BuO₂C-CH₂)-(Boc)-(D)-Chg-Pro-NH-CH₂-(4-CN)-2-thiaz 및 히드록실아민 염산염(메탄올, 디이소프로필에틸아민, 실온)을 반응시키고 연속하여 보호기를 제거하고 에스테르기를 이동시켜 합성할 수 있다(실온에서 메탄올 중의 HCl).

실시예 57: N-(에톡시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실글라이실-프롤릴-[2- (4-히드록시아마이디노)티아졸릴메틸]아마이드

(t-BuO₂C-CH₂)-(Boc)-(D)-Chg-Pro-NH-CH₂-(4-CN)-2-thiaz 및 히드록실아민 염산염(메탄올, 디이소프로필에틸아민, 실온)을 반응시키고 연속하여 보호기를 제거하고 에스테르기를 이동시켜 합성할 수 있다(실온에서 에탄올 중의 HCl).

실시예 58: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실글라이실-아제티딘-2-카르복실산 [2-(4-히드록시아마이디노)티아졸릴메틸]아마이드

(t-BuO₂C-CH₂)-(Boc)-(D)-Chg-Aze-NH-CH₂-(4-CN)-2-thiaz 및 히드록실아민 염산염(메탄올, 디이소프로필에틸아민, 실온)을 반응시키고 연속하여 보호기를 제거 하여 합성할 수 있다(실온에서 디클로로메탄 중의 HCl).

실시예 59: N-(메톡시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실글라이실-아제티딘-2-카르복실산 [2-(4-히드록시아마이디노)티아졸릴메틸]아마이드

(t-BuO₂C-CH₂)-(Boc)-(D)-Chg-Aze-NH-CH₂-(4-CN)-2-thiaz 및 히드록실아민 염산염(메탄올, 디이소프로필에틸아민, 실온)을 반응시키고 연속하여 보호기를 제거하고 에스테르기를 이동시켜 합성할 수 있다(실온에서 메탄올 중의 HCl).

실시예 60: N-(에톡시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실글라이실-아제티딘-2-카르복실산 [2-(4-히드록시아마이디노)티아졸릴메틸]아마이드

(t-BuO₂C-CH₂)-(Boc)-(D)-Chg-Aze-NH-CH₂-(4-CN)-2-thiaz 및 히드록실아민 염산염(메탄올, 디이소프로필에틸아민, 실온)을 반응시키고 연속하여 보호기를 제거하여 합성할 수 있다(실온에서 에탄올 중의 HCl).

실시예 61: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐-아제티딘-2-카르복실산 [2-(4-히드록시아마이디노)티아졸릴메틸]아마이드

(t-BuO₂C-CH₂)-(Boc)-(D)-Cha-Aze-NH-CH₂-(4-CN)-2-thiaz 및 히드록실아민 염산염(메탄올, 디이소프로필에틸아민, 실온)을 반응시키고 연속하여 보호기를 제거하여 합성할 수 있다(실온에서 디클로로메탄 중의 HCl).

실시예 62: N-(메톡시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐-아제티딘-2-카르복실산 [2-(4-히드록시아마이디노)티아졸릴메틸]아마이드

(t-BuO₂C-CH₂)-(Boc)-(D)-Cha-Aze-NH-CH₂-(4-CN)-2-thiaz 및 히드록실아민 염 산염(메탄올, 디이소프로필에틸아민, 실온)을 반응시키고 연속하여 보호기를 제거하고 에스테르기를 이동시켜 합성할 수 있다(실온에서 메탄올 중의 HCl).

실시예 63: N-(에톡시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐-아제티딘-2-카르복실산 [2-(4-히드록시아마이디노)티아졸릴메틸]아마이드

(t-BuO₂C-CH₂)-(Boc)-(D)-Cha-Aze-NH-CH₂-(4-CN)-2-thiaz 및 히드록실아민 염산염(메탄올, 디이소프로필에틸아민, 실온)을 반응시키고 연속하여 보호기를 제거하고 에스테르기를 이동시켜 합성할 수 있다(실온에서 에탄올 중의 HCl).

실시예 64: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(R)-시클로헥실알라닐-(3S)-2,3,4,5-테트라히드로피리다진-3-카르복실산 [4-(2-아마이디노)티에닐메틸]아마이드 염산염

a) N-Boc-N-(tert-부톡시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐-(3S)-2,3,4,5-테트라히드로피리다진-3-카르복실산

디이소프로필에틸아민 3.3g(25.8mmol) 및 디메틸아미노피리딘 1.5g(12.3mmol)을 CH₂Cl₂ 80㎖ 중의 EDC 염산염 7.4g(38.7mmol) 및 N-Boc-N-(tert-부톡시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닌 9.95g(25.8mmol), (S)-4-벤질-3-[(S)-2,3,4,5-테트라히드로-3-피리다지닐]-2-옥사졸리디논(문헌(Y. Nakamura, C. Shin, Chem. Lett. 1991, 1953) 7.4g(25.8mmol)에 -5^oC에서 가하였다. 혼합물을 -5^oC에서 2시간 동안, 그리고 실온에서 12시간 동안 교반하였다.

반응 혼합물을 에테르 200㎖에 희석하고 5% 농도의 시트르산 용액, 5% 농도의 탄산수소나트륨 용액 및 물로 세척하였으며 혼합물을 건조시킨 후, 용매를 제거하고 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(메틸렌 클로라이드/아세톤, 50/2.5)로 정제하여 황색 유상물 4.0g(이론치의 24%)을 얻었다. FAB-MS(M+H⁺): 655. 이를 0^oC에서 THF 80㎖ 및 물 27㎖ 중에 용해시키고 30% 농도의 과산화수소 2.8㎖ 및 1N 수산화나트륨 12.6㎖를 가하고 2.5시간 동안 교반하였다. 포화 Na₂S₂O₃ 수용액 15g을 가한 후 혼합물을 에테르로 추출하고 알칼리상을 분리하여 1M KHSO₄ 용액으로 산성화하였다. 에테르로 반복해 추출한 후, 건조하고 용매를 증류시켜 제거하여 흰색 무정형 분말 2.2g을 얻었다.

b) HOOC-CH₂-(D)-Cha-(3S)-2,3,4,5-테트라히드로피리다진-3-카르복실산 [2-(4-am)티에닐메틸]아마이드 염산염

상기 산 0.7g(1.4mmol) 및 2-아미노메틸-4-아마이디노티오펜 이염산염 0.3g을 DMF 4㎖에 현탁시켰다. 거의 완전한 용액이 될 때까지 N-메틸모르폴린 0.145g(1.44mmol)을 0^oC에서 가한 후, o-[(시아노에톡시카르보닐메틸렌)아미노]-N,N,N',N'-테트라메틸유로늄테트라플루오로보레이트(TOTU) 0.475g(1.45mmol) 및 N-메틸모르폴린 0.14g을 더 가하였다. 반응 혼합물을 0^oC, 질소하에서 3시간 동안 더 교반하고 연속하여 조 온도를 35^oC로 하여 ~1mbar에서 DMF 대부분을 증류시켰다. 잔류물을 컬럼 크로바토그래피(용리제-CH₂Cl₂/MeOH, 45/5, 50% 농도의 아세트산의 0.7부를 가하여 종결)로 정제하여 연황색의 무정형 분말 0.75g을 얻었다.

나중 것을 CH₂Cl₂ 5㎖ 및 트리플루오로아세트산 10㎖에 용해하고 용액을 밤새 실온에서 정치시켰다. 톨루엔 30㎖를 가한 후, 혼합물을 진공에서 농축하였다. 잔류물을 에테르로 처리하고 연속하여 실리카겔 컬럼(용리제-MeOH/25% 농도의 NH₃, 50/2) 상에서 베타인으로 전환시켰다. 베타인을 물 20㎖에 용해하고 1N 염산으로 pH 4.5로 조정한 후 동결 건조시켜 무정형 분말 0.36g을 얻었다, FAB-MAS (M+H⁺): 476.

실시예 65: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(R)-시클로헥실알라닐-(3S)-피라졸리딘-3-카르복실산 [4-(2-아마이디노티에닐메틸]아마이드 염산염

N-Boc-N-(tert-부톡시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닌 8.36g(21.7mm

ol) 및 메틸 (3S)-1-tert-부톡시카르보닐피라졸린-3-카르복실레이트(문헌(H. O. Kim, C. Lum, M. S. Lee (1997), THL 38(28), 4935) 5g(21.7mmol)을 CH₂Cl₂ 60㎖에 용해하였다. EDC·HCl 6.1g(31.8mmol)을 -8^oC에서 교반하며 가하였고, 20분이 더 지난 후, 디이소프로필에틸아민 4.0g(31mmol)을 가하였다. 혼합물을 40분간 교반하고 DMAP 0.8g을 가하였다. 혼합물을 2일 동안 실온에서 정치시켰다. 에테르 200㎖를 가한 후 혼합물을 5% 농도의 시트르산, 5% 농도의 탄산수소나트륨 용액 및 물로 세척하고 건조시킨 후 에테르를 증류시켰다. 컬럼 크로마토그래피(용리제- CH₂Cl₂/아세톤, 50/2)로 정제하여 흰색의 무정형 분말 8.2g(이론치의 63%)을 분리하였다.

가수분해: 에스테르 8.0g(13.4mmol)을 디옥산 60㎖ 및 물 12㎖에 용해하고 1N 수산화나트륨 15㎖를 10^oC에서 가하였다. 1.5시간 후, pH를 8이 되도록 1N HCl로 조정하고 디옥산을 증류시켰다. 잔류물을 물 250㎖로 희석하고 에테르로 추출하였다. 수상을 1N KHSO₄ 용액으로 pH가 2.5가 되도록 조정하고 분리된 산을 에테르로 추출하였다. 에테르를 제거하여 7.7g의 무정형 산을 얻었다. 물로 포화한 n-헥산으로부터 샘플을 재결정화시켜 115 내지 120^oC에서 녹였으며, 이는 [α]_D ²⁰인 +112.4^oC(CHCl₃, c=1)인 회전각을 가졌다.

4-아미노메틸-2-아마이디노티오펜 디히드로클로라이드와의 커플링은 실시예 64의 단계b)에 기술된 것과 유사한 방법으로 수행하였다. 컬럼 크로마토그래피(용리제=CH₂Cl₂/MeOH/50% 농도의 아세트산, 40/10/0.7)로 정제한 후, N-Boc-N-(tert-부톡시카르보닐메틸렌)-(R)-시클로헥실알라닐-(3S)-피라졸리딘-3-카르복실산 [4-(2-아마이디노)티에닐메틸]아마이드 아세테이트를 상기 산 4.15g으로부터 출발하여 얻었다.

보호기 제거: 상기 화합물을 디옥산 12㎖에 용해하고 1N 염산 20㎖를 가하였으며 혼합물을 75^oC에서 4.5시간 동안 가열하였다. 용액을 물 50㎖로 희석하고, 이 온교환기(3A-4 수지, 바이오래드사(Biorad))에서 pH 4로 조절하였으며, 물을 증류시켰다. 잔류물을 이소프로판올에 용해하고 염산염을 에테르를 가해 침전시켰다. 이를 컬럼 크로마토그래피(용리제-CH₂Cl₂/MeOH/50% 농도 아세트산, 35/15/7)로 정제하였으며 잔류물을 물에 용해하고, 1N 염산으로 pH를 4로 조정하였으며 동결건조시켜 1.6g의 무정형 염산염을 얻었다, FAB-MS(M+H⁺): 465.

하기 화합물은 실시예 65에서 기술한 것과 유사한 방법으로 얻었다.

실시예 66: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(R)-시클로헥실알라닐-(3R)-피라졸리딘-3-카르복실산 [4-(2-아마이디노)티에닐메틸]아마이드 염산염

흰색 무정형 분말. FAB-MS(M+H⁺): 465

실시예 67: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(R)-시클로헥실글라이실-(3R)-피라졸리딘-3-카르복실산 [4-(2-아마이디노)티에닐메틸]아마이드 염산염

흰색 무정형 분말. FAB-MS(M+H⁺): 451

실시예 68: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(R)-시클로헥실글라이실-(3S)-피라졸리딘-3-카르복실산 [4-(2-아마이디노)티에닐메틸]아마이드 염산염

흰색 무정형 분말. FAB-MS(M+H⁺): 451

실시예 69: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(R)-시클로헥실글라이실-(-)-티아졸리딘-2-카르복실산 [4-(2-아마이디노)티에닐메틸]아마이드 염산염

출발 물질: 메틸 (-)-티이졸리딘-2-카르복실레이트(문헌(R. L. Johnson, E. E. Smissman(1978), J. Med. Chem. 21, 165)).

실시예 70: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(R)-시클로헥실알라닐-(-)-티아졸리딘-2-카르복실산 [4-(2-아마이디노)티에닐메틸]아마이드

흰색 무정형 분말. FAB-MS(M+H⁺): 482

실시예 71: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(R)-시클로헥실알라닐-(L)-옥타히드로인돌-2-카르복실산 [4-(2-아마이디노)티에닐메틸]아마이드 염산염

흰색 무정형 분말. FAB-MS(M+H⁺): 518

실시예 72: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(R)-시클로헥실글라이실-(L)-옥타히드로인돌-2-카르복실산 [4-(2-아마이디노)티에닐메틸]아마이드 염산염

흰색 무정형 분말. FAB-MS(M+H⁺): 504

실시예 73: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실알라닐-5,5-디메틸티아졸리딘-4-카르복실산 [2-(4-아마이디노)티에닐메틸]아마이드

이 화합물은 N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Cha-Pro-OH 및 5,5-Me₂-thz-4-OMe(문헌(J. Samanen u.a. (1990), Int. J. Peptide Protein Res. 35, 501(1990))를 커플링시켜 N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Cha-(5,5-Me₂-thz-4)-OMe를 얻고, 메틸 에스테르를 알칼리 가수분해하여 얻어진 산을 H₂N-CH₂-(4-CN)-4-Thioph과 커플링시켜 N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Cha-(5,5-Me₂-thz-4)-NH-CH₂-2-(4-CN)-Thioph을 얻고, 실시예 2b 내지 e에 기술된 것과 유사한 방법으로 아미딘 기를 형성한 후에 보호기를 제거하여 제조할 수 있다. FAB-MS (M+H⁺): 505, 융점: 184 내지 187^oC(분해).

실시예 74: N-(히드록시카르보닐메틸렌)-(D)-시클로헥실글라이실--5,5-디메틸티아졸리딘-4-카르복실산 [4-(2-아마이디노)티에닐메틸]아마이드

이 화합물은 N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Chg-OH 및 5,5-Me₂-thz-4-OMe를 커플링시켜 N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Chg-(5,5-Me₂-thz-4)-OMe를 얻고, 메틸 에스테르를 알칼리 가수분해하여 얻어진 산을 H₂N-CH₂-(2-CN)-4-Thioph과 커플링시켜 N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Chg-(5,5-Me₂-thz-4)-NH-CH₂-4-(2-CN)-Thioph을 얻고, 실시예 2b 내지 e에 기술된 것과 유사한 방법으로 아미딘 기를 형성한 후에 보호기를 제거하여 제조할 수 있다. FAB-MS (M+H⁺): 491, 융점: 164 내지 166^oC(분해).

실시예 75 내지 90

하기 화합물은 WO 98/06741호의 실시예 14에 기술된 것과 유사한 방법을 사용하여 상응하는 A-B-D- 및 E-F- 단위로부터 합성할 수 있다.

75. HOOC-CH₂-(D)-(p-OMe-Phe)-Pro-NH-CH₂-2-(4-am)-Thioph

76. HOOC-CH₂-(D)-(p-OMe-m-Cl-Phe)-Pro-NH-CH₂-2-(4-am)-Thioph

77. HOOC-CH₂-(D)-(p-OMe-Phe)-Pro-NH-CH₂-5-(2-am-3-Me)-Thioph

78. HOOC-CH₂-(D)-(p-CF₃-Phe)-Pro-NH-CH₂-5-(2-am-3-Me)-Thioph

79. HOOC-CH₂-(D)-(p-Cl-m-Cl-Phe)-Pro-NH-CH₂-5-(2-am-3-Me)-Thioph

80. HOOC-CH₂-(D)-(p-CF₃-Phe)-Pro-NH-CH₂-2-(4-am)-Thioph

81. HOOC-CH₂-(D)-Cha-Pro-NH-CH₂-2-(4-am-5-Me)-thiaz

82. HOOC-CH₂-(D)-Chg-Pro-NH-CH₂-2-(4-am-5-Me)-thiaz

83. HOOC-CH₂-(D)-(p-OMe-Phe)-Pro-NH-CH₂-2-(4-am-5-Me)-thiaz

84. HOOC-CH₂-(D)-(p-OMe-Phe)-Pro-NH-CH₂-2-(4-am-)-thiaz

85. HOOC-CH₂-(D)-(p-CF₃-Phe)-Pro-NH-CH₂-2-(4-am)-thiaz

86. HOOC-CH₂-(D)-(p-CF₃-Phe)-Pro-NH-CH₂-2-(4-am-5-Me)-thiaz

87. HOOC-CH₂-(D)-(p-iPr-m-Me-Phe)-Pro-NH-CH₂-2-(4-am)-thiaz

88. HOOC-CH₂-(D)-(p-OMe-m-Cl-Phe)-Pro-NH-CH₂-2-(4-am)-thiaz

89. HOOC-CH₂-(D)-(p-Cl-m-Cl-Phe)-Pro-NH-CH₂-2-(4-am)-thiaz

90. HOOC-CH₂-(D)-(p-Cl-m-Cl-Phe)-Pro-NH-CH₂-2-(5-am-4-Me)-thiaz

<실시예 91>

하기 화합물은 상응하는 E- 단위 및 N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Cha-Pro-OH로부터 실시예 20에 기술된 것과 유사한 방법에 따라 합성할 수 있다.

HOOC-CH₂-(D)-Cha-Pro-NH-CH₂-3-(5-am-1-Me)-pyraz

<실시예 92>

HOOC-CH₂-(D)-Cha-Thz-4-NH-CH₂-5-(2-am)-Thioph을 Boc-Thz-4-OH, 5-H₂N-CH ₂-Thioph-2-CN 및 N-(t-BuO₂C-CH₂)-N-Boc-(D)-Cha-Pro-OH로부터 실시예 3에 기술된 것과 유사한 방법에 따라 합성할 수 있다.

<약리학적 실시예>

<실시예 A>

칼리크레인 억제제에 대한 발색 시험

시약:

인체 혈장 칼리크레인(번호 K 3126, 시그마사(Sigma, 독일 다이젠호펜 소재))

기질: 크로모자임(Chromozym) GK (번호 709875, 뵈링거사(Boehringer, 독일 만하임 소재))

완충액: 20mM 트리스 염산 pH=8.50

실험 과정:

칼리크레인 활성을 측정하기 위한 발색 시험은 마이크로플레이트에서 수행하였다. DMSO 중의 기질 용액 2㎕를 완충액 93㎕에 가하고 이를 최종 농도 0.01단위/㎖의 칼리크레인과 혼합하고 20 내지 25^oC에서 10분간 인큐베이션하였다. 기질 100㎕(500μmol/ℓ 최종 농도)를 가하여 시험을 시작하였다. 30분간 더 인큐베이션한 후, 광도계를 이용하여 405nm에서의 흡광도를 측정하였다.

<실시예 B>

<트롬빈 시간>

시약: 트롬빈 시약(제품 번호 126 594, 뵈링거사(Boehringer, 독일 만하임 소재))

시트레이트 혈장의 제조:

요측피정맥으로부터의 인체의 정맥 혈액 9부를 소듐 시트레이트 용액 1부(0.11mol/ℓ)와 혼합하였다. 혼합물을 연속하여 원심분리하였다. 혈장은 -20^oC에서 저장할 수 있다.

실험 과정:

시험 물질의 용액 50㎕ 및 시트레이트 혈장 50㎕를 37^oC에서 2분 동안 배양하였다(CL8, 볼 유형, 벤더 앤드 호바인(Bender & Hobein), 뮌헨, FRG). 이어서, 트롬빈 시약 100㎕(37^oC)을 가하였다. 피브린 응고물이 형성될 때까지 걸리는 시간을 측정하였다.

<실시예 C>

<트롬빈 억제제에 대한 발색 시험>

시약:

인체 혈장 트롬빈(번호 T-8885, 시그마사(Sigma, 독일 다이젠호펜 소재))

기질: H-D-Phe-Pip-Arg-pNA2HCl(S-2238, 크로모제닉스사(Chromogenix), 스웨덴, 묄른달 소재)

완충액: 트리스 50mmol/ℓ, 염화나트륨 154mmol/ℓ, pH=8.0

실험 과정:

발색 시험은 마이크로타이터 플레이트에서 수행하였다. DMSO 중의 물질의 용액 10㎕를 트롬빈(최종 농도 0.1NIH 단위/㎖)과 함께 완충액 250㎕에 가하고, 혼합물을 20 내지 28^oC에서 5분간 인큐베이션하였다. 완충액 중의 기질 용액 (100μmol/ℓ 최종 농도) 50㎕를 가하여 시험을 시작하였다. 혼합물을 28^oC에서 인큐베이션하고, 5분 후 시트르산(35% 강도) 50㎕를 가하여 반응을 중단시켰다. 405/630nm에서 흡광도를 측정하였다.

<실시예 D>

<혈소판이 풍부한 혈장에서의 혈소판 응집>

시약: 인간 혈장 트롬빈(번호 T-8885, 시그마사(Sigma, 독일 다이젠호펜 소재))

시트레이트 및 혈소판이 풍부한 혈장의 제조:

건강하고 약물 복용 중이 아닌 대상의 요측피정맥으로부터 정맥 혈액을 얻었다. 혈액을 9:1로 0.13mol의 트리소듐 시트레이트와 혼합하였다. 250 x g(실온에서 10분간)로 원심 분리하여 혈소판 풍부 혈장(PRP)을 제조하였다. 혈소판 부족 혈장(PPP)은 3600 x g로 20분간 원심 분리하여 제조하였다. PRP 및 PPP는 밀폐된 PE 용기에서 실온에서 3시간 동안 저장할 수 있다. 혈소판 농도는 구계도로 측정하였으며 2.5 내지 2.8×10⁸/㎖로 나타났다.

실험 과정: 혈소판 응집은 37^oC에서 탁도계로 측정하였다(PAP 4, 바이오데이터사(Biodata Corporation, 미국 펜실베니아 주 홀샴 소재)). 트롬빈을 가하기 전, PRP 215.6㎕를 시험 물질 2.2㎕와 함께 3분간 배양하고, 혼합물을 이후 1000rpm으로 2분간 교반하였다. 최종 농도 0.15NIH 단위/㎖에서 트롬빈 용액 2.2㎕가 37^oC/1000rpm에서 최대 응집 효과를 보였다. 시험 물질의 억제 효과는 물질이 없을 때의 트롬빈 응집률(기울기)과 물질이 있을때의 트롬빈 응집률을 다양한 농도에서 비교하여 측정하였다.

Claims (13)

1. 하기 화학식 I의 화합물 및 그의 생리적으로 허용되는 산과의 염.

   <화학식 I>

   A-B-D-E-F

   식 중,

   A는

   

   이고,

   여기서, m은 0, 1 또는 2이고,

   n은 0, 1 또는 2이며,

   R¹은 HOOC-, C_1-6-알킬-OOC-, 아릴-C_0-4-알킬-OOC 또는 -OH이고,

   R²는 H-, C_1-4-알킬- 또는 R¹-(CH₂)_m-이며,

   R³은 H- 또는 C_1-4-알킬-이고,

   B는

   

   이고,

   여기서, R⁴는 H-, C_1-4-알킬- 또는 R¹-(CH₂)_m-(R¹ 및 m은 상기 언급한 의미를 가진다)이며,

   p는 0 또는 1이고,

   R⁵는 H- 또는 C_1-4-알킬-이며,

   R⁶은 H-, C_1-8-알킬-, 2-티에닐-, 3-티에닐-, 3-인돌릴-, 4-이미다졸릴-, 2-피리딜-, 3-피리딜-, 4-피리딜-, 페닐-(이는 C_1-4-알킬-, CF₃-, C_1-4-알콕시-, HO-, BnO-. F- 또는 Cl-의 군으로부터 3개 이하의 동일한 또는 상이한 라디칼을 가질 수 있다), 또는 C_3-8-시클로알킬(이는 4개 이하의 동일한 또는 상이한 C_1-4-알킬 라디칼을 가질수 있고(있거나) 고리중의 1 또는 2개의 C-C 단일 결합이 C=C 이중 결합으로 대체될 수 있고(있거나) 페닐 고리가 융합되어 C₇-C₁₂-비시클로알킬- 또는 C₁₀-트리시클로알킬-이 될 수 있다)이거나, 또는

   R⁴ 및 R⁶은 함께 에틸렌 또는 프로필렌기이며,

   R⁷은 H, C_1-8-알킬-, 페닐-(이는 C_1-4-알킬-, CF₃-, C_1-4-알콕시-, F- 또는 Cl-의 군으로부터 3개 이하의 동일한 또는 상이한 라디칼을 가질 수 있다), 또는 C_3-8-시클로알킬-(이는 4개 이하의 동일한 또는 상이한 C_1-4-알킬 라디칼을 가질 수 있다)이고,

   R⁸은 H 또는 C_1-4-알킬이며,

   D는

   

   

   

   II III IV

   

   

   

   

   VI VII VIII IX

   

   

   X XI 이고,

   여기서, R²⁰은 H, C_1-4-알킬, Bn 또는 BnO(CO)-이되,

   D가 II, III 또는 XI이면, E는 하기의 의미를 갖거나,

   

   (식 중, a) X = S, O, NH 또는 NR¹²일 때, Y는 -CR¹³=, -CH=이고, Z는 -CR¹⁴= 이거나, 또는 Y는 -CR¹³=이고, Z는 -CH=이거나, 또는

   b) X = NR¹²일 때, Y는 -CH=이고, Z는 -CH=이거나, 또는

   c) X = S, O 또는 NH일 때, Y는 -CR¹⁵=이고, Z는 -N=이거나, 또는 Y는 -N=이고, Z는 -CR¹⁵=이거나, 또는

   d) X = -NR¹²-일 때, Y는 -N=이고, Z는 -CH¹⁶=, -N=이거나, 또는 Y는 -CR¹⁶=이고, Z는 -N=이고,

   R⁹는 H- 또는 C_1-3-알킬-이고,

   R¹⁰는 H- 또는 C_1-4-알킬-이고,

   R¹¹는 H- 또는 C_1-4-알킬-이고,

   R¹²는 CH₃- 또는 C₂H₅-이고,

   R¹³은 Cl-, CF₃- 또는 C_1-4-알킬-이고,

   R¹⁴은 Cl-, CF₃- 또는 C_1-4-알킬-이고,

   R¹⁵는 CF₃- 또는 C_1-4-알킬-이고,

   R¹⁶은 H-, CF₃- 또는 C_1-4-알킬-이고,

   R²⁰은 상기 정의한 바와 같다), 또는

   D가 IV, VI, VII, VIII, IX 또는 X일 때, E는 하기와 같은 의미를 갖거나,

   

   (식 중, X는 O, S 또는 -NR¹⁷-이고, Y는 -N=이고, Z는 -CR¹⁶= 또는 -N=이거나, 또는 Y는 -CR¹⁶=이고, Z는 -N=이거나, 또는 Y는 -CR¹⁸=이고, Z는 -CR¹⁹=이고,

   R⁹, R¹⁰, R¹¹, R¹⁶ 및 R²⁰은 상기 정의한 바와 같고,

   R¹⁷은 H, CH₃- 또는 C₂H₅-이고,

   R¹⁸은 H-, Cl-, CF₃- 또는 C_1-4-알킬-이고,

   R¹⁹는 H-, Cl-, CF₃- 또는 C_1-4-알킬-이다), 또는

   D가 II, III, IV, VI, VII, VIII, IX, X 또는 XI일 때, E는 하기의 의미를 갖고,

   

   또는

   

   (식 중, a) X = S일 때, Y는 -CR¹⁸=이고, Z는 -CR¹⁹=이거나, 또는 Y는 -CR¹⁶=이고, Z는 -N=이거나, 또는

   b) X = O 또는 -NR¹²-일 때, Y는 -N=, -CR¹⁶=이고, Z는 -N=, -CR¹⁸=이고,

   R⁹, R¹⁰, R¹¹, R¹², R¹⁶, R¹⁸, R¹⁹ 및 R²⁰은 상기에 언급한 의미와 같다),

   F는

   

   또는

   

   이다.
2. 제1항에 있어서, A 내지 E가 하기의 의미를 갖는 화학식 I의 화합물 및 그의 생리적으로 허용되는 산과의 염.

   A는

   HOOC-(CH₂)_t- (t=1, 2 또는 3), (HOOC-CH₂)₂-CH-,

   HOOC-CH₂-CH(COOH)-, HOOC-CH(C_1-4-알킬)-,

   HOOC-C(C_1-4-알킬)₂-, C_1-6-알킬-OOC-(CH₂)_t-이고,

   B는

   

   이고,

   여기서, p는 0 또는 1이고,

   R⁴는 H-, C_1-4-알킬- 또는 HOOC-(CH₂)_m-(m=1, 2 또는 3)이며,

   R⁵는 H-, 메틸-이고,

   R⁶은 H-, C_1-8-알킬-, 2-티에닐-, 3-티에닐-, 3-인돌릴-, 4-이미다졸릴-, 2-피리딜-, 3-피리딜-, 4-피리딜-, 페닐-(이는 CH₃-, CF₃-, CH₃-O-, HO-, BnO-, F- 또는 Cl-의 군으로부터 3개 이하의 동일한 또는 상이한 라디칼을 지닐 수 있다) 또는 4개 이하의 메틸 라디칼을 가질 수 있는 C_3-8-시클로알킬, 비시클로[2.2.2]옥틸-, 비시클로[2.2.1]헵틸-, 아다만틸-, 인다닐-, 데칼리닐-이며,

   R⁷은 H, C_1-8-알킬-, 페닐-(이는 CH₃-, CF₃-, CH₃-O-, F- 또는 Cl-의 군으로부터 3개 이하의 동일한 또는 상이한 라디칼을 가질 수 있다) 또는 4개 이하의 메틸 라디칼을 가질 수 있는 C_3-8-시클로알킬-이고,

   R⁸은 H, C_1-4-알킬이며,

   D는

   

   

   

   II III IV

   

   

   

   

   VI VII VIII IX

   

   

   X XI 이고,

   여기서, R²⁰은 H, CH₃, Bn 또는 BnO(CO)-이되,

   D가 II, III 또는 XI일 때, E는 하기의 의미를 갖거나,

   

   (식 중, a) X = S, O 또는 NR¹⁷일 때, Y는 -CR¹³= 또는 -CH=이고, Z는 -CR¹⁴= 이거나, 또는 Y는 -CR¹³=이고, Z는 -CH=이거나, 또는

   b) X = NR¹²일 때, Y는 -CH=이고, Z는 -CH=이거나, 또는

   c) X = S, O 또는 NH일 때, Y는 -CR¹⁵=이고, Z는 -N=이거나, 또는 Y는 -N=이고, Z는 -CR¹⁵=이거나, 또는

   d) X = NR¹²일 때, Y는 -N=이고, Z는 -CH¹⁶=, -N=이거나, 또는 Y는 -CH¹⁶=이고, Z는 -N=이고,

   R¹²는 CH₃- 또는 C₂H₅-이고,

   R¹³은 Cl-, CF₃- 또는 C_1-4-알킬-이고,

   R¹⁴는 Cl-, CF₃- 또는 C_1-4-알킬-이고,

   R¹⁵는 CF₃- 또는 C_1-4-알킬-이고,

   R¹⁶은 H-, CF₃- 또는 C_1-4-알킬-이고,

   R¹⁷은 H, CH₃- 또는 C₂H₅-이고,

   R²⁰은 상기 정의한 바와 같다), 또는

   D가 IV, VI, VII, VIII, IX 또는 X일 때, E는 하기와 같은 의미를 갖거나,

   

   (식 중, X는 O, S 또는 -NR¹⁷-이고, Y는 -N=이고, Z는 -CR¹⁶= 또는 -N=이거나, 또는 Y는 -CR¹⁶=이고, Z는 -N=이거나, 또는 Y는 -CR¹⁸=이고, Z는 -CR¹⁹=이고,

   R¹⁶, R¹⁷, R²⁰은 상기 정의한 바와 같고,

   R¹⁸은 H-, Cl-, CF₃- 또는 C_1-4-알킬-이며,

   R¹⁹는 H-, Cl-, CF₃- 또는 C_1-4-알킬-이다), 또는

   D가 II, III, IV, VI, VII, VIII, IX, X 또는 XI일 때, E는 하기의 의미를 갖고,

   

   또는

   

   (식 중, a) X = S일 때, Y는 -CR¹⁸=이고, Z는 -CR¹⁹=이거나, 또는 Y는 -CR¹⁶=이고, Z는 -N=이거나, 또는

   b) X = O 또는 -NR¹²-이고, Y는 -N= 또는 -CR¹⁶=이고, Z는 -N= 또는 -CR¹⁸=이고,

   R¹², R¹⁶, R¹⁸, R¹⁹ 및 R²⁰은 상기에 언급한 의미와 같다),

   F는

   

   또는

   

   이다.
3. 제1항 또는 제2항에 있어서, A, B, D, E 및 F가 하기의 의미를 갖는 화학식 I의 화합물 및 그의 생리적으로 허용되는 산과의 염.

   A: HOOC-CH₂, HOOC-CH₂-CH₂, HOOC-CH(CH₃), HOOC-CH(C₂H₅)이고,

   B:

   

   이고,

   여기서, p는 0 또는 1이고,

   R⁴는 H-, CH₃-이며,

   R⁵는 H-, CH₃-이고,

   R⁶은 C_1-8-알킬, 4개 이하의 메틸 라디칼을 가질 수 있는 C_5-8-시클로알킬-, 2-티에닐-, 3-인돌릴-, 4-이미다졸릴-, 2-피리딜-, 3-피리딜-, 4-피리딜-, 페닐-(CH₃-, CF₃-, CH₃O-, HO-, BnO-, F- 또는 Cl-의 군으로부터 3개 이하의 동일한 또는 상이한 라디칼을 가질 수 있다), 비시클로[2.2.2]옥틸, 비시클로[2.2.1]헵틸, 아다만틸, 인다닐, 데칼리닐, 특히 시클로펜틸, 시클로헥실 및 시클로헵틸이며,

   R⁷은 H, CH₃-이고,

   R⁸은 H, CH₃-이며,

   D는

   

   

   

   II III IV

   

   

   

   

   VI VII VIII IX

   

   

   X XI 이고,

   여기서, R²⁰은 H, BnO(CO)-이되,

   D가 II, III 또는 XI일 때, E는 하기의 의미를 갖거나,

   

   (식 중, a) X가 -S-일 때, Y는 -CH=이고, Z는 -CR¹³= 이거나, 또는 Y는 -CR¹³=이고, Z는 -CH=이거나, 또는 Y는 -CR¹⁵=이고, Z는 -N=이거나, 또는 Y는 -N=이고, Z는 -CR¹⁵=이고,

   R¹³은 Cl-, CF₃- 또는 CH₃-이고,

   R¹⁵는 CF₃- 또는 CH₃-이고,

   R²⁰은 상기 정의한 바와 같다), 또는

   D가 IV, VI, VII, VIII, IX 또는 X일 때, E는 하기와 같은 의미를 갖거나,

   

   (식 중, X는 S일 때, Y는 -N=이고, Z는 -CR¹⁶=이거나, 또는 Y는 -CR¹⁶=이고, Z는 -N=이거나, 또는 Y는 -CR¹³=이고, Z는 -CH=이거나, 또는 Y는 -CH=이고, Z는 -CR¹³=이거나, 또는 Y는 -CH=이고, Z는 -CH=이고,

   R¹³, R²⁰은 상기 정의한 바와 같고,

   R¹⁶은 H, CF₃- 또는 CH₃-이다), 또는

   D가 II, III, IV, VI, VII, VIII, IX, X 또는 XI일 때, E는 하기의 의미를 갖고,

   

   또는

   

   (식 중, a) X = S일 때, Y는 -CH=이고, Z는 -CR¹⁸=이거나, 또는 Y는 -CR¹⁶=이고, Z는 -N=이거나, 또는 Y는 -CR¹⁸=이고, Z는 -CH=이거나, 또는

   b) X = O 또는 NCH₃일 때, Y는 -CH=이고, Z는 -CR¹⁶=이거나, 또는 Y는 -CR¹⁶=이고, Z는 -CH=이거나, 또는

   c) X = -NR¹²-일 때, Y는 -N=이고, Z는 -CR¹⁸=이고,

   R¹²는 CH₃- 또는 C₂H₅-이고,

   R¹⁸은 H-, Cl-, CF₃- 또는 CH₃-이며,

   R¹⁶ 및 R²⁰은 상기 언급한 바와 같다),

   F는

   

   또는

   

   이다.
4. 제1항 또는 제2항에 있어서, A, B, D, E 및 F가 하기의 의미를 갖는 화학식 I의 화합물 및 그의 생리적으로 허용되는 산과의 염.

   A: HOOC-CH₂, HOOC-CH₂-CH₂, HOOC-CH(CH₃), HOOC-CH(C₂H₅)이고,

   B:

   

   이고,

   여기서, p는 0 또는 1이고,

   R⁴는 H-이며,

   R⁵는 H-이고,

   R⁶은 C_1-8-알킬-, 2-티에닐-, 3-인돌릴-, 4-이미다졸릴-, 2-피리딜-, 3-피리딜-, 4-피리딜-, 4개 이하의 메틸 라디칼을 가질 수 있는 C_5-8-시클로알킬-, 페닐-(CH₃-, CF₃-, CH₃-O-, HO-, BnO-, F- 또는 Cl-의 군으로부터 3개 이하의 동일한 또는 상이한 라디칼을 가질 수 있다), 비시클로[2.2.2]옥틸, 비시클로[2.2.1]헵틸, 아다만틸, 인다닐, 데칼리닐, 특히 시클로펜틸-, 시클로헥실- 및 시클로헵틸-이며,

   R⁷은 H이고,

   R⁸은 H이며,

   D는

   

   

   

   II III IV

   

   

   

   

   VI VII VIII IX

   

   

   X XI 이되,

   D가 II, III 또는 XI일 때, E는 하기의 의미를 갖거나,

   

   (식 중, a) X가 S일 때, Y는 -CR¹³=이고, Z는 -CH=이거나, 또는 Y는 -CH=이고, Z는 -CR¹³=이거나, 또는 Y는 -CR¹⁵=이고, Z는 -N=이거나, 또는 Y는 -N=이고, Z는 -CR¹⁵=이고,

   R¹³은 Cl-, CF₃- 또는 CH₃-이고,

   R¹⁵는 CF₃- 또는 CH₃-이다), 또는

   D가 IV, VI, VII, VIII, IX 또는 X일 때, E는 하기와 같은 의미를 갖거나,

   

   (식 중, X가 S일 때, Y는 -N=이고, Z는 -CR¹⁶=이거나, 또는 Y는 -CR¹⁶=이고, Z는 -N=이거나, 또는 Y는 -CH=이고, Z는 -CR¹³=이거나, 또는 Y는 -CR¹³=이고, Z는 -CH=이거나, 또는 Y는 -CH=이고, Z는 -CH=이고,

   R¹³은 상기 정의한 바와 같고,

   R¹⁶은 H, CF₃- 또는 CH₃-이다), 또는

   D가 II, III, IV, VI, VII, VIII, IX, X 또는 XI일 때, E는 하기의 의미를 갖고,

   

   또는

   

   (식 중, a) X = S일 때, Y는 -CH=이고, Z는 -CR¹⁸=이거나, 또는 Y는 -CR¹⁸=이고, Z는 -CH=이거나, 또는 Y는 -CR¹⁶=이고, Z는 -N=이거나, 또는

   b) X = O 또는 NCH₃일 때, Y는 -CH=이고, Z는 -CR¹⁶=이거나, 또는 Y는 -CR¹⁶=이고, Z는 -CH=이거나, 또는

   c) X = NCH₃일 때, Y는 -N=이고, Z는 -CR¹⁶=이고,

   R¹⁶은 상기 언급된 바와 같고,

   R¹⁸은 H-, Cl-, CF₃- 또는 CH₃-이다),

   F는

   

   또는

   

   이다.
5. 삭제
6. 삭제
7. 삭제
8. 삭제
9. 삭제
10. 삭제
11. 제1항 또는 제2항에 기재된 화학식 I의 화합물을 포함함을 특징으로 하는 표면 코팅제.
12. 하기 화학식 Va 또는 Vb의 화합물.

    <화학식 Va>

    A-B-D-E-CN

    <화학식 Vb>

    A-B-D-E-CSNH₂

    식 중, A, B, D 및 E는 제1항 또는 제2항에서 언급된 의미를 가진다.
13. 제1항 또는 제2항에 기재된 화학식 I의 화합물 및 통상의 보조제 및 부형제를 포함하는 트롬빈 억제제.