JP5225264B2

JP5225264B2 - 細胞増殖障害の処置

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Publication number: JP5225264B2
Application number: JP2009508544A
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Inventors: エリアフ・カプラン
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Description

本発明は、新規化合物および細胞増殖障害、より具体的にはＳｙｋチロシンキナーゼが介在する障害、におけるその使用に関する。

プロテインチロシンキナーゼ（ＰＴＫ）は、チロシン残基のリン酸化を触媒する酵素である。ＰＴＫには、受容体型ＰＴＫと、細胞型即ち非受容体型ＰＴＫ、の２つの主要なクラスがある。これらの酵素は、細胞内シグナル伝達経路に関与しており、増殖、分化および抗アポトーシス性シグナル伝達および神経突起伸長等の重要な細胞機能を調節する。点変異または過剰増殖等のメカニズムによるこれら酵素の無秩序な活性化は、様々な形態の癌ならびに良性の増殖状態に繋がる。

知られているオンコジーンおよびプロトオンコジーンの７０％以上が、ＰＴＫに対する癌コード（cancer code）に関与していた。炎症性疾患や糖尿病においてみられるＰＴＫシグナル伝達の異常の存在によって、健康および疾患におけるＰＴＫの重要性はますます強まっている。

受容体型ＰＴＫは、細胞外のリガンド結合領域、膜貫通領域および細胞内の触媒領域を有している。膜貫通領域は受容体を原形質膜に固定し、細胞外領域は成長因子と結合する。特徴として、細胞外領域は、システインに富む領域、フィブロネクチンＩＩＩ様領域、免疫グロブリン様領域、ＥＧＦ様領域、カドへリン様領域、クリングル様領域、第ＶＩＩＩ因子様領域、グリシンに富む領域、ロイシンに富む領域、酸性領域およびジスコイジン様領域を含む１又はそれ以上の特定可能な構造モチーフからなる。

受容体型ＰＴＫの細胞内キナーゼ領域は、キナーゼ領域を分離しているアミノ酸ストレッチを含む領域とキナーゼ領域が連続している領域の２つのクラスに分けることができる。キナーゼの活性化は、受容体の二量体化を誘導する細胞外領域へのリガンド結合により達成される。このようにして活性化された受容体は、触媒領域外のチロシン残基を自己リン酸化することができる。このようにして活性化された受容体は、交差リン酸化（cross-phosphorylation）による触媒領域外部のチロシン残基を自己リン酸化することができる。この自己リン酸化の結果として、活性な受容体コンホメーションが安定化され、細胞内でシグナルを伝達するタンパク質に対するホスホチロシンドッキングサイトができる。受容体型チロシンキナーゼの細胞内領域にホスホチロシン依存的に結合するシグナル伝達タンパク質としては、ＲａｓＧＡＰ、Ｐ１３−キナーゼ、ホスホリパーゼＣγ、ホスホチロシンホスファターゼＳＨＰおよびアダプタータンパク質（Ｓｈｃ、Ｇｒｂ２およびＣｒｋなど）が挙げられる。

受容体型ＰＴＫとは対照的に、細胞型ＰＴＫは、細胞質内、核内に局在している、または原形質膜の内部小葉に固定されている。それらは、ＳＲＣ、ＪＡＫ、ＡＢＬ、ＦＡＫ、ＦＰＳ、ＣＳＫ、ＳＹＫおよびＢＴＫの８つのファミリーに分けられる。ホモローガスなキナーゼ領域（Ｓｒｃホモロジー１またはＳＨ１領域）、およびいくつかのタンパク−タンパク相互作用領域（ＳＨ２およびＳＨ３領域）を除いて、それらは構造的にほとんど共通していない。ＳＲＣのように、その機能が知られているそれら細胞型ＰＴＫの多くが細胞増殖に関与している。対照的に、ＦＰＳ、ＰＴＫは分化に、ＡＢＬ、ＰＴＫは増殖阻害、およびＦＡＫ活性は細胞接着に関連している。サイトカインレセプター経路のいくつかのメンバーは、転写因子ＳＴＡＴをリン酸化するＪＡＫと相互作用する。さらに他のＰＴＫも経路を活性化するが、その構成要素および機能については解明途上にある。

Ｓｙｋは、Ｂ細胞受容体およびＩｇＥ受容体からのシグナル伝達に関与するＺＡＰ−７０に関連する非受容体型チロシンキナーゼである。Ｓｙｋは、これら受容体内のＩＴＡＭモチーフに結合し、Ｒａｓ、ＰＩ３−キナーゼおよびＰＬＣシグナル伝達を経由するシグナル伝達を開始する。Ｓｙｋはまた、造血細胞に広く発現している。それは、活性化された免疫受容体の、増殖、分化および食作用を含む様々な細胞の応答を媒介する下流のシグナル伝達イベントへのカップリングに関与している。Ｓｙｋの発現は、上皮由来の細胞系において報告されているが、これら細胞におけるその機能は知られていない。Ｓｙｋは、一般に正常なヒトの乳房組織、良性の乳房巣および低発癌性の乳癌細胞系において発現する。Ｓｙｋは、上皮細胞増殖の強力な調節物質であり、ヒトの乳癌における有力な腫瘍抑制物質と考えられている。

ＺＡＰ−７０は、Ｓｙｋファミリーの非受容体型チロシンキナーゼである。ＺＡＰ−７０は、抗原提示細胞によりＴ細胞が活性化されると、Ｔ細胞受容体複合体へのリクルートメントを介してＴ細胞受容体シグナル伝達に関与する。活性化されると。ＺＡＰ−７０はリン酸化して、ＳＬＰ−７６およびＬＡＴを含むいくつかの下流ターゲットを活性化する。ＺＡＰ−７０は、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）予後診断の最も新しいバイオマーカーとされている。

当分野において、細胞増殖障害、より具体的にはＳｙｋチロシンキナーゼ介在性の障害、を処置、予防および制御するのに有効な有力な化合物を開発することが必要である。

したがって、本発明の一態様は、式（Ｉ）

［式中、
点線は、単結合または二重結合を表し；
Ｒ₅およびＲ₅’は独立に、Ｈ、ＯＨまたはＯＲ₆であり、ここにＲ₆は直鎖又は分岐鎖のＣ₁−Ｃ₄アルキルであり；
Ｘは、Ｏ、−ＣＨ₂Ｏ、−ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ、−ＣＨ（ＣＨ₃）ＣＨ₂Ｏまたは−ＣＨ₂ＣＨ（ＣＨ₃）Ｏであり；
Ｚは、−ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ、−ＣＨ（ＣＨ₃）ＣＨ₂Ｏまたは−ＣＨ₂ＣＨ（ＣＨ₃）Ｏであり；
ｍは、０または１であり；
ｎは、０〜５０の整数である］
の構造式で示される化合物のＳ−エナンチオマーを用いて、細胞増殖障害、より具体的にはＳｙｋチロシンキナーゼ介在性の障害、を処置する方法を提供する。

本発明の更なる態様によれば、細胞増殖障害を処置する方法において使用するための、上記式（Ｉ）の構造式で示される化合物のＳ−エナンチオマーを提供する。当該細胞増殖障害は、Ｓｙｋチロシンキナーゼ介在性の障害であり得る。

本発明の更なる態様によれば、細胞増殖障害、特にＳｙｋチロシンキナーゼ介在性の障害、を処置するための医薬の製造における使用のための上記式（Ｉ）の構造式で示される化合物のＳ−エナンチオマーの使用を提供する。

いくつかの態様では、ｎは１〜２５の整数であってよい。例えば、ｎは１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４または２５であってよい。好ましくは、ｎは７または１７である。

さらに別の態様では、本発明は、式（Ｉ）の化合物の塩または水和物の使用を包含する。一態様では、Ｘは−ＣＨ₂Ｏであってよい。一態様では、ｍは０である。更なる態様ではｍは１である。

さらに、本発明は、式（ＩＩ）

［式中、
点線は、単結合または二重結合を表し；
Ｒ₅およびＲ₅’は独立に、Ｈ、ＯＨまたはＯＲ₆であり、ここにＲ₆は直鎖又は分岐鎖のＣ₁−Ｃ₄アルキルであり；
Ｚは、−ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ、−ＣＨ（ＣＨ₃）ＣＨ₂Ｏまたは−ＣＨ₂ＣＨ（ＣＨ₃）Ｏであり；
ｎは、１〜２５の整数である］
の構造式で示される化合物のＳ−エナンチオマーを用いて、細胞増殖障害、より具体的にはＳｙｋチロシンキナーゼ介在性の障害、を処置する方法を提供する。例えば、ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４または２５であってよい。好ましくは、ｎは７または１７である。さらに別の態様では、本発明は、式（ＩＩ）の構造式によって示される化合物の塩又は水和物を提供する。一態様では、Ｚは−ＣＨ（ＣＨ₃）ＣＨ₂Ｏである。

さらに、本発明は、式（ＩＩＩ）

［式中、
点線は、単結合または二重結合を表し；
Ｒ₅およびＲ₅’は独立に、Ｈ、ＯＨまたはＯＲ₆であり、ここにＲ₆は直鎖又は分岐鎖のＣ₁−Ｃ₄アルキルであり；
Ｚは、−ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ、−ＣＨ（ＣＨ₃）ＣＨ₂Ｏまたは−ＣＨ₂ＣＨ（ＣＨ₃）Ｏであり；
ｎは、１〜２５の整数である］
の構造式で示される化合物のＳ−エナンチオマーを用いて、細胞増殖障害、より具体的にはＳｙｋチロシンキナーゼ介在性の障害、を処置する方法を提供する。例えば、ｎは１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４または２５である。好ましくは、ｎは７または１７である。

さらなる態様では、本発明は、式（ＩＩＩ）の構造によって示される化合物の塩または水和物を提供する。一態様では、Ｒ₅はＨである。更なる態様では、Ｒ₅はＯＨである。一態様では、Ｒ₅’はＨである。更なる態様では、Ｒ₅’はＯＨである。

さらに、本発明は、式（ＩＶ）

［式中、
Ｒは、ｎ単位を有するポリアルキレングリコールポリマーであり、ｎは１〜５０の整数である］
で示される化合物のＳ−エナンチオマーを用いて、細胞増殖障害、より具体的にはＳｙｋチロシンキナーゼ介在性の障害、を処置する方法を提供する。一態様では、ポリアルキレングリコールポリマーはポリイソプロピレングリコールである。更なる態様では、ｎは１〜２５の整数である。例えば、ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４または２５である。好ましくは、ｎは７または１７である。

さらに、本発明は、式（Ｖ）

［式中、
Ｒは、ｎ単位を有するポリアルキレングリコールポリマーであり、ｎは１〜５０の整数である］
で示される化合物のＳ−エナンチオマーを用いて、細胞増殖障害、より具体的にはＳｙｋチロシンキナーゼ介在性の障害、を処置する方法を提供する。一態様では、ポリアルキレングリコールポリマーはポリイソプロピレングリコールである。例えば、ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４または２５であってよい。好ましくは、ｎは７または１７である。

さらに、本発明は、式（ＶＩ）

［式中、
Ｒは、ｎ単位を有するポリアルキレングリコールポリマーであり、ｎは１〜５０の整数である］
で示される化合物のＳ−エナンチオマーを用いて、細胞増殖障害、より具体的にはＳｙｋチロシンキナーゼ介在性の障害、を処置する方法を提供する。一態様では、ポリアルキレングリコールポリマーはポリイソプロピレングリコールである。例えば、ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４または２５である。好ましくは、ｎは７または１７である。

さらに、本発明は、式（ＶＩＩ）

さらに、一態様では、本発明は、１またはそれ以上の、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）または（ＶＩＩ）で示される化合物を含有する、細胞増殖障害、より具体的にはＳｙｋチロシンキナーゼ介在性の障害、を処置するための組成物を提供する。更なる態様では、本発明は、製薬的に許容し得る賦形剤または助剤とともに、活性成分として１またはそれ以上の、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）または（ＶＩＩ）で示される化合物を含有する、Ｓｙｋチロシンキナーゼ介在性の障害を処置するための医薬組成物を提供する。

さらに、一態様では、本発明は、１またはそれ以上の、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）または（ＶＩＩ）で示される化合物を投与することを含んでなる細胞増殖障害、より具体的にはＳｙｋチロシンキナーゼ介在性の障害、の処置、予防および制御のための方法および／または１又はそれ以上の式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）または（ＶＩＩ）で示される化合物を含有する医薬組成物を提供する。

特に定義しない場合、本明細書において用いられるすべての技術用語および科学用語は、本発明が属する分野における通常の技能を有する者が共通して理解している意味と同じ意味を有する。本明細書に記載されたものと同様または同等の方法および材料は、本発明の実施または試験において用いることができるが、適当な方法および材料を以下に記載する。本明細書において言及したすべての刊行物、特許出願、特許および他の文献は、その全体が本明細書の一部を構成する。矛盾する場合は、定義を含む本明細書が規制する。さらに、材料、方法、および実施例は、単なる説明であって限定を意図したものではない。

すべての分量および百分率は、特に記載しない限り重量を基準にする。

定義
便宜上、明細書、実施例および特許請求の範囲において用いる特定の用語をここに収集する。

「Ｓｙｋチロシンキナーゼ介在性の」状態は、Ｓｙｋチロシンキナーゼが関与しており、その作用の調節（例えば阻害）により、障害、それを取り巻いている状態等が処置されることが示されているまたはそう信じられているものを包含する。そのような状態としては、乳癌、卵巣癌、大腸癌、非小細胞肺癌、喘息、および内皮細胞増殖、ならびにＣＭＬ、ＡＭＬおよびＢ細胞リンパ腫等の悪性血液疾患、リンパ腫および白血病が挙げられる。

「処置」は、その状態、疾患、障害等の改善をもたらす任意の効果（例えば、減少、低減、調節または除去）を包含する。

本発明は、細胞増殖障害、より具体的にはＳｙｋチロシンキナーゼ介在性の障害、の処置に有用な化合物および医薬組成物を提供する。本発明はさらに、上記式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）または（ＶＩＩ）の構造式によって示される１又はそれ以上の化合物を患者に投与することを含んでなる、細胞増殖障害、より具体的にはＳｙｋチロシンキナーゼが介在性の障害、の処置、予防および制御のための方法を提供する。

化合物を入手および精製するための合成の方法論は以下に詳細に開示する。但し、本発明の化合物が任意の適した合成法により調製することができ、本明細書において記載した合成に何ら限定されるものではないということは当業者には明かである。これら化合物を調製および精製するための様々な合成法が当業者に知られるであろう。本発明の化合物は、科学のルールによって許容されるようにさらに修飾してもよい。そのような修飾には、様々な置換基の付加（例えば、ヒドロキシル化、カルボキシル化、メチル化等）、エナンチオマーの生成、酸付加塩又は塩基付加塩の作出等が包含される。他の修飾には、ポリアルキレングリコールポリマーの付加が包含される。

本発明の化合物は、ポリアルキレングリコール（ＰＡＧ）コンジュゲートとして合成することができる。コンジュゲーションに用いられる典型的なポリマーとしては、ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）、またはポリ（エチレンオキシド）（ＰＥＯ）およびポリプロピレングリコール（ポリイソプロピレングリコールを含む）が挙げられる。これらのコンジュゲートは、溶解度および安定性を増大するためおよび分子の血液循環半減期を長くするためによく用いられる。

最も一般的な形態において、ＰＥＧ等のポリアルキレングリコール（ＰＡＧ）は、両端にヒドロキシル基を有する直鎖状ポリマーである：
ＨＯ−ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ−（ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ）_n−ＣＨ₂ＣＨ₂−ＯＨ。

上記ポリマー、α、ω−ジヒドロキシルポリ（エチレングリコール）は、ＨＯ−ＰＥＧ−ＯＨとしても表することができ、ここで−ＰＥＧ−なる記号は以下の構造単位：
−ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ−（ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ）_n−ＣＨ₂ＣＨ₂−
［式中、ｎは典型的には約４〜１００００の範囲である］
を示すと理解されている。ＰＥＧは、一般には、一端が比較的不活性なメトキシ基であり他端が科学修飾されるようになっているヒドロキシル基である、メトキシ−ＰＥＧ−ＯＨ、即ちｍＰＥＧ、として用いられる。さらに、化学的にＰＥＧと密接に関連している種々のアルキレンオキシド（例えば、エチレンオキシドおよびプロピレンオキシド）のランダムまたはブロックコポリマーを、数多くのＰＥＧの応用において、ＰＥＧと代替することができる。

ＰＡＧは、水および多くの有機溶媒における溶解性を有し、毒性および免疫原性を有しない特性を典型的に有するポリマーである。ＰＡＧの一つの用途は、そのポリマーを不溶性分子と共有結合させて、得られたＰＡＧ−分子の「コンジュゲート」を可溶性にするというものである。例えば、水に不溶性の薬物であるパクリタキセルは、ＰＥＧとカップリングさせると水溶性になることが示されている。Greenwald, et al., J. Org. Chem., 60: 331-336 (1995)。

本発明のポリアルキル化された化合物は典型的には、１〜５００のモノマー単位を含む。他の本発明のＰＡＧ化合物は１〜２００のモノマー単位を含む。さらに他の本発明のＰＡＧ化合物は、１〜１００のモノマー単位を含む。例えば、ポリマーは、１、１０、２０、３０、４０、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５または１００のモノマー単位を含みうる。本発明のいくつかの化合物は、５〜７５または１〜５０のモノマー単位を含むポリマーを含む。例えば、ポリマーは２、３、５、６、７、８、１０、１１、１２、１３、１５、１６、１７、１８、２０、２５、３０、３３、３４、３５、４０、４５、５０、６０、６５、６８、６９、７０または７５のモノマー単離を含みうる。好ましくは、ｎは７、１２、１７、３４または６９である。ポリマーは直鎖状でも分岐していてもよい。

ＰＡＧ部分の付加により修飾された化合物は、様々な数のモノマー単位を有するポリマーの混合物を含み得ると理解される。典型的には、ＰＡＧ−修飾された化合物（例えばＰＡＧ−コンジュゲート）の合成は、コンジュゲートにおけるポリマーあたりのモノマー数のポアソン分布を有する分子の集団を生じる。ｎ＝７のモノマー単位のポリマーを有すると記載した化合物は、ｎ＝７のモノマー単位を有すると記載されたその集団における実際のポリマーを意味するだけでなく、分布のピークが７である分子の集団もまた意味する。与えられた集団におけるモノマー単位の分布は、決定することができる。与えられた集団におけるモノマー単位の分布は、例えば核磁気共鳴（ＮＭＲ）または質量分析（ＭＲ）により決定することができる。

本願にわたって、以下に、および当業者に知られた適当な教科書（例えば、Primciples in Biochemistry, Lehninger（編）、９９〜１００頁、Worth Publishers, Inc. (1982) New Your NY； Organic Chemistry, Morrison and Boyd, 第３版、第４章、Allyn and Bacon, Inc., Boston, MA (1978)参照）に記載されるように、異性体の表示に慣用の技術を用いる。

本発明の化合物の構造に不斉炭素原子を含むことは認識される。したがって、特に記載しない限り、そのような不斉により生じる異性体（例えばすべてのエナンチオマーおよびジアステレオマー）が本発明の範囲に包含されることは理解される。そのような異性体は、古典的な分離技術によりおよび立体化学的に制御された合成により、実質的に純粋な形態で得ることができる。さらに、本願において議論される構造ならびに他の化合物および部分もまた、そのすべての互変異性体を包含する。アルキレンは、必要に応じてＥ−またはＺ−配置のいずれかを含むことができる。

４つの異なる置換基を有する炭素原子はキラル中心と呼ばれる。キラル中心は、２つの異なる異性体に存在し得る。これらの形態は、平面偏光の回転を生じる向きを除いて、すべての化学的および物理的特性において同一である。これらの化合物は「光学活性」であると呼ばれる、即ち、この化合物は平面偏光をある方向にまたは逆方向に回転し得る。

炭素に結合する４つの異なる置換基は、２つの異なる空間配置を占有しうる。これらの配置は、互いに重ね合わせることのできる鏡像ではなく、光学異性体、エナンチオマーまたは立体異性体と称される。ある特定の化合物の１つの立体異性体の溶液は、平面偏光を左に回転し、左旋性の異性体と呼ばれる［（−）で示される］；この化合物の他方の立体異性体は、平面偏光を同じだけ右に回転し、右旋性の異性体と呼ばれる［（＋）で示される］。

ＲＳ体系は、化合物が２またはそれ以上のキラル中心を含む場合のあいまいさを避けるために考案された。一般に、この体系は、最も小さいまたは低いランクの基を観察者からみて向こう側に置いたときに、不斉炭素原子の周りの４つの異なる置換基の原子を、原子番号が小さくなる順または価数が小さくなる順に順番付けするようにする。順番が小さくなる並び方が時計回りであれば、キラル中心の周りの配置はＲとする；順番が小さくなる並び方が反時計回りであれば、配置はＳと表示する。各キラル中心はこの体系を用いて命名される。

本発明の化合物は不斉合成により、またはキラル補助剤による誘導体化によって得られるジアステレオマー混合物を分離し、純粋な所望のＳ−エナンチオマーが生じるように補助剤の基を開裂することにより、調製することができる。あるいは、分子が、アミノ等の塩基性の官能基またはカルボキシル等の酸性の官能基を含む場合には、適当な光学活性な酸又は塩基と共にジアステレオマー塩を形成し、次いで形成したジアステレオマーを当分野においてよく知られている分別結晶化またはクロマトグラフィー法により分割した後、純粋なエナンチオマーを回収する。

本発明の組成物および医薬組成物は、１またはそれ以上の、純粋な形態または部分的に純粋な形態の、本発明の化合物を含有し得る。同様に、本発明の方法は、純粋な形態、部分的に純粋な形態にある１又はそれ以上の化合物の使用を包含する。好ましくは本発明の医薬組成物は、少なくとも９５重量パーセント（例えば、９６、９７、９８または９９重量パーセント以上）の当該本発明の１又はそれ以上の化合物を含有する。

いくつかの態様では、本発明の医薬組成物は、本発明の１又はそれ以上の化合物以外に、例えばポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、またはポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）等の、ある割合のフリーのポリアルキレングリコールを含有し得る。該ポリアルキレングリコールはそれ自身生物学的に活性であってよい。ポリアルキレングリコールの鎖長は、１〜５０の範囲、特に１〜２５、の範囲であってよい。いくつかの態様では、該ポリアルキレングリコールは、３、７、１２および／または１７モノマー単位の鎖長であってよい。典型的には、前記医薬組成物は、種々の鎖長を有するある量のフリーのポリアルキレングリコールおよび／またはポリプロピレングリコールを含有し得る。いくつかの態様では、前記医薬組成物は、約５〜６０重量パーセントの本発明の１またはそれ以上の化合物および約９５〜４０重量パーセントのフリーのポリアルキレングリコールを含有し得る。典型的には、前記医薬組成物は、約４５〜５５重量パーゼントの前記１又はそれ以上の本発明化合物および約５５〜４５重量パーセントの前記１又はそれ以上のポリアルキレングリコールを含有し得る。あるいは、前記医薬組成物は、約８０〜９５重量パーセントの本発明の前記１又はそれ以上の化合物および約２０〜５重量パーセントの前記１又はそれ以上のポリアルキレングリコールを含有し得る。

一態様では、本発明の組成物は少なくとも１つの本発明化合物、即ち、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）または（ＶＩＩ）の構造で示される１又はそれ以上の化合物を含有する。別の態様では、本発明の組成物は、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）または（ＶＩＩ）の構造で示される少なくとも２つの化合物の混合物を含有する。別の態様では、本発明の組成物は、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）または（ＶＩＩ）の構造で示される少なくとも５つの化合物の混合物を含有する。別の態様では、本発明の組成物は、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）または（ＶＩＩ）の構造で示される少なくとも１０個の化合物の混合物を含有する。

今回、意外にも、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）または（ＶＩＩ）の構造で示される１又はそれ以上の化合物が、Ｓｙｋチロシンキナーゼが介在する障害に対して効果的であることが見出された。したがって、一態様において、本発明は、ヒトならびに動物への適用におけるＳｙｋチロシンキナーゼが介在する障害の処置、予防および制御のための方法を提供する。一態様では、本方法は、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）または（ＶＩＩ）の構造で示される１又はそれ以上の化合物を患者に投与することを含んでなる。別の態様では、本方法は、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）または（ＶＩＩ）の構造で示される１又はそれ以上の化合物を含有する医薬組成物を患者に投与することを含んでなる。

投与の方法は当業者によく知られている。投与の方法には、非経口、経皮、筋肉内、静脈内、皮内、鼻内、皮下、腹腔内、脳室内または直腸が挙げられるがこれらに限定されない。投与の方法および手段は当業者に知られている（例えば、その全体が本願明細書の一部を構成する米国特許第５６９３６２２号；同第５５８９４６６号；同第５５８０８５９号；同第５５６６０６４号）。

さらに、本発明は、活性成分として１又はそれ以上の本発明化合物を、１又はそれ以上の製薬的に許容し得る賦形剤と共に含有する医薬組成物を提供する。本明細書において用いられる「医薬組成物」は、免疫アレルギー疾患、自己免疫疾患および臓器又は組織移植拒絶反応の処置に有用な、適当な賦形剤および／または担体と一緒になった治療上有効な量の本発明の１又はそれ以上の化合物を意味しうる。本明細書において用いられる「治療上有効な量」は、ある状態および投与レジメに関して治療効果をもたらす量を意味する。そのような組成物を、上記に記載した方法のいずれか１つによって投与することができる。

本発明の更なる態様は、本発明の化合物を本発明の他の化合物と組み合わせて含有する。また、本発明の化合物を、抗炎症剤、免疫抑制剤、抗ウイルス剤などと組み合わせて投与してもよい。さらに、本発明の化合物を、アルキル化剤、代謝拮抗剤、有糸分裂阻害剤または細胞傷害抗生物質等の上記の化学療法剤と組み合わせて投与してもよい。一般に、そのような組合せにおいて使用するための既知の治療剤の現在可能な投与形態が適当であろう。

「組合せ治療（combination therapy）」（または「共同治療（co-therapy）」）は、本発明の化合物と少なくとももう一つの物質とを、これら治療物質の共同作用による有益な効果をもたらすために、企図する具体的な治療レジメの一部として投与することを含む。この組合せの有益な効果としては、治療物質の組合せからもたらされる薬物動態のまたは薬力学的な共同作用が含まれるがこれに限定されない。これら治療物質の組合せでの投与は典型的には規定した期間にわたり行われる（通常、選択した組合せに依存して、分、時間、日または週）。「組合せ治療」は、一般的にはそうではないが、本発明の組合せを偶然におよび恣意的にもたらす別個の単独治療レジメの一部として、これら治療物質の２またはそれ以上の投与を包含することを企図してもよい。

「組合せ治療」は、これら治療物質の逐次的な投与（即ち、各治療物質を異なる時間に投与する）、ならびにこれら治療物質、即ち少なくとも２つの治療物質、の実質的に同時の投与を包含するものと意図される。実質的に同時の投与は、例えば、各治療物質が決められた割合で入った単一のカプセル、または各治療物質毎に入れられた複数のカプセルを患者に投与することによって行うことができる。

各治療物質の逐次的または実質的に同時の投与は、経口、静脈内、筋肉内および粘膜組織を介する直接吸収を含むがこれに限定されない任意の適当な経路で行うことができる。
治療物質は、同じ経路または異なる経路で投与することができる。例えば、選択した組合せのある治療物質を静脈内注射によって投与し、この組合せの他の治療物質を経口投与してもよい。あるいは、例えば、すべての治療物質を経口投与する、またはすべての治療物質を静脈内注射することもできる。治療物質を投与する順番はそれほど重要ではない。

「組合せ治療」はまた、上記の治療物質をさらに他の生物学的に活性な薬剤および非薬剤治療（例えば、外科手術または放射線治療）と組み合わせて投与することを包含し得る。この組合せ治療がさらに非薬剤治療を包含する場合は、治療物質とその非薬剤治療の組合せの共同作用により有益な効果が達成される限り、その非薬剤治療は任意の適当なときに行うことができる。例えば、適当な場合では、非薬剤治療が、治療物質の投与から時間的に離れていても（数日、場合によっては数週間）なお有益な効果が達成される。

本発明の化合物および他の薬理学的に活性な物質を、同時に、逐次的に、または組み合わせて患者に投与することができる。本発明の組み合わせを用いる場合、本発明の化合物と他の薬理学的に活性な物質は、同じ製薬的に許容し得る担体中に存在してよく、したがって同時に投与してよいことは認識されよう。それらは、同時に服用される、経口投与形態のような別個の慣用の製薬的担体に存在していてもよい。「組合せ」なる語はさらに、化合物が別個の投与形態にて提供され、逐次的に投与される場合も意味する。

本発明の化合物は、場合により、例えば癌治療のための、トラスツズマブ（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ）、ゲフィチニブ（ＩＲＥＳＳＡ）、エルロチニブ（ＴＡＲＣＥＶＡ）およびラパチニブを含む、他のチロシンキナーゼ阻害剤との組合せ治療において投与することができる。チロシンキナーゼ阻害剤は、Ｓｙｋに対して活性でも活性でなくてもよい。

本発明の組成物および組合せ治療は、安定化剤、担体および／または本明細書に記載したカプセル化製剤を含む様々な製薬的な賦形剤と組み合わせて投与することができる。

一態様では、本発明の組成物は、経口または非経口の投与形態、例えばコーティングされていない錠剤、コーティングされた錠剤、丸剤、カプセル剤、粉末剤、顆粒剤、分散剤または懸濁剤、として製剤化される。別の態様では、本発明の組成物は静脈内投与用に製剤化される。別の態様では、本発明の化合物を、経皮投与のための、軟膏、クリーム、ジェルの形態に製剤化する。別の態様では、本発明の化合物を経鼻投与のためのエアロゾルまたはスプレーとして製剤化する。別の態様では、本発明の化合物を液体の投与形態に製剤化する。適当な液体の投与形態の例としては、水、製薬的に許容し得る脂質および油、アルコールまたは他の有機溶媒（エステル、エマルジョン、シロップ、エリキシル、溶液および／または懸濁液を含む）中の液体または懸濁液が挙げられる。

適当な賦形剤および担体は、固体でも液体でもよく、一般に、その種類は用いる投与の種類に基づいて選択される。リポソームもまた組成物を送達するために使用することができる。適当な固体の担体の例としては、ラクトース、スクロース、ゼラチンおよび寒天が挙げられる。経口投与形態は、適当な結合剤、滑沢剤、希釈剤、崩壊剤、着色料、香料、流動誘導剤（flow-inducing agent）、および融解剤を含有する。液体の剤型は、例えば、適当な溶媒、保存剤、乳化剤、懸濁剤、希釈剤、甘味料、増粘剤および融解剤を含有してよい。非経口および静脈内の剤型はまた、ミネラル類や選択した注射またはデリバリーシステムのタイプに適合させるための他の物質を含有する。

以下、添付の本発明の態様の図面を参照し、単なる例示を目的として記載する。

図１は、ＤＭＳＯ担体中の種々の濃度の本発明化合物ＡＶ６１ＳによるＰＨＡ活性化ＰＢＭＣを処置する阻害効果を示す。図２は、ＰＢＳ担体中の種々の濃度の本発明化合物ＡＶ６１ＳによるＰＨＡ活性化ＰＢＭＣを処置する阻害効果を示す。図３は、７日間の期間後のＥ６．１Jurkat細胞の生存に対してＡＶ６１Ｓの効果はないことを示す。図４は、７日間の期間後のJurkat細胞の生存に対するＡＶ６１ＳおよびＡＶ７４Ｓの効果を示す。図５は、種々の濃度の本発明化合物ＡＶ６１ＳによるＰＨＡ活性化ＰＢＭＣを処置する効果を示す。図６は、種々の濃度のＡＶ６１ＳによるＰＨＡ活性化ＰＢＭＣを処置する効果を示す。図７は、種々の濃度の本発明化合物ＡＶ７４ＳによるＰＨＡ活性化ＰＢＭＣを処置する効果を示す。図８は、種々の濃度のＡＶ７４ＳによるＰＨＡ活性化ＰＢＭＣを処置する効果を示す。図９は、活性化されたＰＢＭＣに対する化合物ＡＶ６１Ｓについての用量応答曲線を示す。図１０は、活性化されたＰＢＭＣに対する化合物ＡＶ７４Ｓについての用量応答曲線を示す。図１１は、Ｔ細胞およびＢ細胞に対するＡＶ６１ＳおよびＡＶ７４Ｓ処置の効果の、そのＲ型との比較を示す。図１２は、単球に対するＡＶ７４Ｓ処置の効果を示す。図１３は、２日後のJurkat細胞に対してＰＰＧの阻害効果がないことを示す（ある量のＰＰＧが化合物合成の後に存在する可能性がある）。図１４は、４日後のJurkat細胞に対してＰＰＧの阻害効果がないことを示す。図１５は、シクロスポリンで処置したＰＢＭＣと比較した、２４時間後のＡＶ６１ＳまたはＡＶ７４Ｓの種々の濃度で処置したＰＢＭＣの生存率を示す。図１６は、シクロスポリンで処置したＰＢＭＣと比較した、４８時間後の、種々の濃度のＡＶ６１ＳまたはＡＶ７４Ｓで処置したＰＢＭＣの生存率を示す。図１７は、シクロスポリンで処置したＰＢＭＣと比較した、７２時間後の、種々の濃度のＡＶ６１ＳまたはＡＶ７４Ｓで処置したＰＢＭＣの生存率、および種々の濃度のＡＶ６１ＳとＡＶ７４Ｓを組み合わせて投与した場合の生存率を示す。図１８は、シクロスポリンで処置したJurkat細胞と比較した、２４時間後の、種々の濃度のＡＶ６１ＳまたはＡＶ７４Ｓで処置したＥ６．１Jurkat細胞の生存率を示す。図１９は、シクロスポリンで処置したJurkat細胞と比較した、４８時間後の、種々の濃度のＡＶ６１ＳまたはＡＶ７４Ｓで処置したＥ６．１Jurkat細胞の生存率を示す。図２０Ａ〜Ｉは、異なる９つの細胞系に対して試験したときの、ＡＶ７４Ｓについての用量応答曲線を示す。図２１は、図２０Ａ〜Ｉのすべての細胞系に対するＡＶ７４Ｓの用量応答曲線を示す。

記載１：ポリアルキレングリコール化合物の合成
一般に、ポリアルキレングリコール化合物は、適当なアルコール化合物（例えば、実施例１に記載の化合物の１つ、またはそのヒドロキシル化誘導体）の調製後、このアルコールを所望の長さのポリアルキレン（ＰＡＧ）ポリマー（例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）またはポリプロピレン（ＰＰＧ）グリコール）とのコンジュゲーションによって合成した。

化合物１、フェニルアルコール
１．２ｇ、３２ｍＭのＬｉＡＨ₄を、乾燥エーテル中の２．３ｇ、１０ｍＭのフェニルアラニンエチルエステルＨＣｌに加えた。室温で２時間攪拌した後、水およびＫＯＨを加え、反応生成物を酢酸エチルで抽出した。留去後、０．８ｇの化合物１（明黄色の油状物）を得た。

静置して化合物１を結晶化させた。Mp-70. NMR CDCl₃ 7.30(5H,m), 3.64(1H,dd,J=10.5,3.8 Hz) 3.40(1H,dd,J=10.5,7.2 Hz) 3.12(1H,m), 2.81(1H,dd,J=13.2, 5.2 Hz), 2.52(1H, dd, J=13.2, 8.6 Hz) NMR アセトンd₆ 7.30(5H, m), 3.76(1H, dt) 3.60(1H, m) 3.30 (1H, t),2.85(2H, m). Helv. Chim. Acta, 31, 1617(1948). Biels. -E3,Vol. 13,p 1757.

化合物２、チロシノール

乾燥エーテル５０ｍL中のＬ−チロシンエチルエステルＨＣｌ（３ｇ、１２ｍＭ）に、ＬｉＡlＨ₄（１．２ｇ、３２ｍＭ）を加えた。室温で３時間攪拌した後、水およびＫＯＨを加え、反応物を酢酸エチルで抽出した。留去して明黄色の油状物１．１ｇ（収率５４％）を得、これを静置して結晶化した。mp-85.
NMR CDCl₃ 7.20(4H,AB q,J=8.6 Hz), 3.50(2H,m) 3.20(1H,m), 2.81(2H,m). NMR チロシンエチルエステル遊離塩基 CDCl₃ 7.0, 6.56(4H, AB q, J=8.8 Hz), 4.20(2H, q, J=7, 0 Hz), 3.70, 3.0, 2.80(3H, 12 line ABXm), 1.28. (3H, t, J=7.0 Hz). JACS 71, 305(1949). Biels. -E3, Vol. 13, p 2263.

化合物３、トリプトファノール

乾燥エーテル５０ｍL中のＬ−トリプトファンメチルエステルＨＣｌ（３ｇ、１２．９ｍＭ）に、ＬｉＡlＨ₄（１．２ｇ、３２ｍＭ）を加えた。室温で６時間攪拌した後、水およびＫＯＨを加え、反応物を酢酸エチルで抽出した。留去して、明黄色の油状物１．２３ｇ（収率５０％）を得た。静置して結晶化させた。Mp-65.
NMR CDCl₃ 7.30(5H, m), 3.64(1H, dd, J=10.5, 3.8 Hz), 3.40(1H, dd, J=10.5, 7.2 Hz), 3.12 (1H, m), 2.81(1H, dd, J=13.2, 5.2 Hz), 2.52(1H, dd, J=13.2, 8.6 Hz) J. Het. Chem, 13, 777 (1976). Biels. -E5, 22, Vol. 12, p 90.

化合物４、ＡＶ２２
シクロヘキサン３０ｍL中の４−ヒドロキシヒドロ桂皮酸０．６６ｇおよび塩化チオニル４ｍLを２時間還流した。留去後、白色の固体を得、これにジクロロメタン３０ｍLおよびトリエチルアミン０．４ｍL中の化合物１の油状物０．６５ｇ（４．３ｍＭ）を加えた。室温で２時間攪拌した後、pＨを中和するため水およびＫＯＨを加えた。反応生成物をジクロロメタンで抽出した。留去して０．８ｇの化合物４（明黄色の粘稠な油状物）を得た。この生成物の一部をトリチュレートし、エタノールで再結晶化して白色の固体を得た。Mp-149.
NMR CDCl₃ 7.30-6.9(9H, m), 3.50(2H, m) 3.30(2H, t, J=7.2 Hz) 2.90 (3H, m), 2.60(2H, t, J=7.2 Hz).

化合物５、ＡＶ５７

シクロヘキサン３０ｍL中のヒドロ桂皮酸（０．７５ｇ、５ｍＭ）および塩化チオニル４ｍLを２時間還流した。留去して白色の固体を得、これにジクロロメタン３０ｍLおよびトリエチルアミン０．５ｍL中のフェニルアラニノール（０．８３ｇ、５．５ｍＭ）を加えた。室温で３時間攪拌した後、pＨを中和するために水およびＫＯＨを加え、反応物をジクロロメタンで抽出した。留去して黄色の粘稠な油状物０．５７ｇ（収率４０％）を得た。
NMR CDCl₃ 7.40-7.10(10H, m), 3.60(2H, m), 3.35(2H, t, J=7.2 Hz), 2.95 (3H, m), 2.50(2H, t, J=7.2 Hz).

化合物６、ＡＶ５８

シクロヘキサン３０ｍL中の４−ヒドロキシヒドロ桂皮酸（０．６６ｇ、４ｍＭ）および塩化チオニル４ｍLを３時間還流した。留去して明黄色の固体を得、これにジクロロメタン３０ｍLおよびトリエチルアミン０．５ｍL中のチロシノール（０．７２ｇ、４．３ｍＭ）を加えた。室温で３時間攪拌した後、pＨを中和するために水およびＫＯＨを加え、反応物をジクロロメタンで抽出した。留去して明黄色の粘稠な油状物０．５３ｇ（収率４２％）を得た。
NMR CDCl₃ 7.30, 7.20 (8H, 2 ABq, J=8.6 Hz), 3.40(2H, m), 3.30(2H, t, J=7.2 Hz), 2.90 (3H, m), 2.60(2H, t, J=7.2 Hz).

化合物８、ＡＶ７２

シクロヘキサン３０ｍL中のヒドロ桂皮酸（０．４５ｇ、３ｍＭ）および塩化チオニル３ｍLを２時間還流した。留去して明黄色の固体を得、これにジクロロメタン３０ｍLおよびトリエチルアミン０．４ｍL中のチロシノール（０．５８ｇ、３．５ｍＭ）を加えた。室温で２．５時間攪拌した後、水およびＫＯＨを加えて中性pＨにし、反応物をジクロロメタンで抽出した。留去して明黄色の粘稠な油状物０．５７ｇ（収率６３％）を得た。
NMR CDCl₃ 7.40-7.10 (9H, m), 3.60(2H, m), 3.35 (2H, t, J=7.2 Hz), 2.95 (3H, m), 2.50 (2H, t, J=7.2 Hz).

化合物１０
化合物４（ＡＶ２２）０．３ｇ、トリフェニルホスフィン０．８ｇおよびエチルジアゾカルボキシレート０．５５ｇを、ジクロロメタン６０ｍL中、１ｇのポリ（プロピレングリコール）（平均分子量約１０００）に加えた。室温で２時間攪拌し、留去およびクロマトグラフィーにより、化合物１０（０．６５ｇ）を粘稠な油状物として得た。

フェニルアラニノールから合成された化合物
これらの化合物には、式（ＶＩＩＩ）の構造：

で示される化合物が包含される。
この化合物はまた、式Ａ：

［式中、Ｒはポリプロピレングリコールポリマーであり、ｎは該ポリマーにおけるポリプロピレンモノマーの総数である］
として表される。

ＡＶ６１Ｓ：
Ｒ＝ＰＰＧ（ポリプロピレングリコール）ｎ＝７、ＭＷ−７０６
ＡＶ２２（０．３ｇ、１ｍＭ）、トリフェニルホスフィン（０．８ｇ、３ｍＭ）およびエチルジアゾカルボキシレート（０．５５ｇ、３．２ｍＭ）を、６０ｍLのジクロロメタン中、１ｇのポリ（プロピレングリコール）（平均分子量４２４、Ｎ＝７）に加えた。室温で４時間攪拌した後、留去およびクロマトグラフィーにより、粘稠な油状物０．５５ｇ（収率７３％）を得た。ＮＭＲＣＤＣｌ₃ ７．３０〜６．９（９Ｈ，ｍ）、４．１〜３．０（ｍ），２．６０（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），１．２−１．１（ｍ）。この生成物（０．１ｇ，０．３３mmol）、炭酸カリウム（０．０６９ｇ，０．５mmol，細かく粉砕）、およびＴＨＦ（３ｍL、ＫＯＨペレット上で乾燥）を、マグネティックスターラーおよびＣａＣｌ₂乾燥チューブを取り付けた丸底フラスコに入れた。混合物を氷塩浴（−１０℃）にて冷却し、予め冷却した２ｍLＴＨＦ（乾燥）中のジ−tert−ブチルジカーボネート（０．０６６ｇ、０．３０mmol）の溶液を滴加した。混合物を氷温にて１時間、次いで室温にて２日間攪拌した。次いで、反応混合物を留去し、水（５ｍL）を加え、生成物を１０ｍLの酢酸エチルで２回抽出した。集めた抽出液を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ紙で濾過し、溶媒を留去した。油状の残留物を少量のｎ−ヘキサンでトリチュレートし、形成した固体を減圧濾過により回収した（収量０．１２ｇ、収率９０％）。あるいは、この油状の残留物を酢酸エチルとヘキサンの１．１の混合物に溶解し、生成物を再結晶した。

ＡＶ６２
Ｒ＝ＰＰＧｎ＝１２ＭＷ−９９６
０．２ｇのＡＶ２２から上記と同様に製造し、０．３ｇ（収率４６％）を得た。

ＡＶ６０Ｓ
Ｒ＝ＰＰＧｎ＝１７ＭＷ−１２８６
ＰＰＧ７の代わりにＰＰＧ１７を用い、上記のＡＶ６１Ｓと同じ手順を用いて製造した。

化合物５、ＡＶ５７から合成した化合物

ＡＶ８６
Ｒ＝ＰＰＧｎ＝７ＭＷ−６９０
０．２２ｇのＡＶ５７から上記と同様に製造し、０．２５ｇ（収率４７％）を得た。

ＡＶ８７
Ｒ＝ＰＰＧｎ＝１７ＭＷ−１２７０
０．２ｇのＡＶ５７から上記と同様に製造し、０．３３ｇ（収率３３％）を得た。

チロシノールから合成した化合物
化合物６、ＡＶ５８から合成した化合物

ＡＶ６４
Ｒ＝ＰＰＧｎ＝７ＭＷ−７２２
０．２ｇのＡＶ５８から上記と同様に製造し、０．２１ｇ（収率４６％）を得た。

ＡＶ６５
Ｒ＝ＰＰＧｎ＝１７ＭＷ−１３０２
０．２３ｇのＡＶ５８から上記と同様に製造し、０．２８ｇ（収率２９％）を得た。

化合物８、ＡＶ７２から合成した化合物

ＡＶ７４Ｓ
Ｒ＝ＰＰＧｎ＝７ＭＷ−７０６
ａ．ＰＰＧのメシル化
ＰＰＧ_４２５（１０６ｍg、０．２５mmol）を、９０モルパーセントの塩化メシル（２５ｍg、２滴）および０．４mmolのピリジン（３１．６ｍg、２滴）と反応させてモノメシル化ＰＰＧ（Ａ）を得た。ＰＰＧ、塩化メシルおよびピリジンを混合した後、メシル化反応を０℃にて攪拌しながら３０分間行ない、次いで反応を室温にてさらに６０分間行った。混合中、反応混合物は無色から乳白色に変化した。次いで、混合物を５ｍLの塩化メチレンに溶解し、有機相を１ＭのＨＣｌ溶液で２回、次いで１ＭのＮａＯＨ溶液で２回、そして水で１回洗浄した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、溶媒を留去した。
ｂ．ナトリウム活性化
上記の生成物０．１ｇ（０．２５mmol）を無水エタノール５ｍLに溶解した後、無水エタノール中の等モル量のナトリウムエトキシド（ナトリウム原子０．２５ｍgと過剰量の無水エタノールとの反応により予め調製した）と反応させた。混合した溶液中のエタノールを留去してナトリウム塩を得た（Ｂ）。
ｃ．ＡとＢの反応
Ａを水酸化カリウム乾燥したアセトニトリル５ｍLに溶解し、この溶液を、マグネティックスターラーを入れた丸底フラスコに入れた。Ｂの乾燥アセトニトリル溶液５ｍLをこのフラスコに入れた後、触媒量（結晶数個）のヨウ化カリウムを加えた。還流冷却器とその先端部に取り付けた気泡発生器を、反応容器に連結して反応混合物を攪拌しながら２４時間窒素雰囲気下で還流した。次いで、反応混合物を濾紙で濾過し、溶媒を留去した。残留物を２ｍLの酢酸エチルに溶解した後、シリカゲルカラムを通し、酢酸エチルを用いて溶出した。Ｒ_ｆ＝０．５５のＴＬＣ（酢酸エチルで溶出）ＵＶ吸収スポットから、所望の生成物３（異なるＰＰＧサブユニット長を含む分子の混合物）を含有するが未反応のＰＰＧもいくらか含有していることが判明した。他のフラクションは、未反応のメシル化ＰＰＧおよび二重にメシル化されたＰＰＧを含有していた。

ＡＶ７８Ｓ
Ｒ＝ＰＰＧｎ＝１７ＭＷ−１０００
ＰＰＧ７の代わりにＰＰＧ１７を用い、上記ＡＶ７４Ｓと同様の手順を用いて製造した。

実施例１
以下の実験は、Ｓｙｋチロシンキナーゼ関連障害の処置における、本発明の化合物の有用性を実証するために行った。

プロテインチロシンキナーゼは、細胞のシグナル伝達経路におけるセントラル・スイッチ・メカニズム（central switch mechanism）をもたらし、増殖、代謝、生存およびアポトーシス等の多くの細胞のプロセスに関与している。いくつかのＰＴＫは、癌細胞において活性化され、腫瘍の成長と疾患の進行を推し進めることが知られている。したがって、チロシンキナーゼ活性をブロックすることは、癌治療への合理的なアプローチである。

脾臓のチロシンキナーゼは、当初、骨髄細胞、マクロファージ、赤血球、血小板およびＢ細胞のような造血細胞でしか発現がみとめられていなかったが、現在では造血細胞でない細胞で発現し、様々なサイトカインのシグナル伝達を媒介していることが分かっている。したがって、Ｓｙｋは免疫系の発達と機能において、および血管の統合性（vascular integrity）のために不可欠なものである。近年、Ｓｙｋが、乳癌、大腸癌、非小細胞肺癌等の様々な腫瘍、ならびにＣＭＬ、ＡＭＬ、およびＢ細胞リンパ腫等の血液悪性疾患、の腫瘍形成において重要な役割を担っていることが示された。

図４は、Ｓｙｋを含有するJurkat細胞が、１０μg／ｍLの低い濃度でＡＶ７４Ｓにより、５０μg／ｍLで６１Ｓにより死滅（ほぼ１００％）し；７４Ｒは１００μg／ｍLの濃度で死滅効果（約８５％）を有するが５０μg／ｍLではその効果は減少し；ＡＶ６１Ｒは１００μg／ｍLおよび５０μg／ｍLの濃度の両方で約７０％の死滅効果を有することを示している。jurkatＥ６．１細胞系は、Ｓｙｋ欠失細胞系であり、実際、ＡＶ６１Ｓは７日後のこの細胞系に対して効果がなかった（即ち、アポトーシスも阻害もみられない、図３参照）。さらに、図１８および１９にみられるように、これらの細胞は生存能力があり、両化合物（ＡＶ６１ＳおよびＡＶ７４Ｓ）によって死滅しない。２４時間および４８時間のインキュベーション後に生存試験を行い、１時間、３時間および６時間以内の３点で評価した。図１８は、２４時間のインキュベーション後６時間以内の結果を示す。図１９は、４８時間のインキュベーション後１時間以内の結果を示す。これらの実験は、Ｓｙｋが形質転換細胞（例えば、Ｔ細胞白血病Jurkat細胞）内に存在する場合、ＡＶ化合物によって細胞が死滅することを示している。ＡＶ化合物は正常細胞（異なるドナーから常時採取されるＰＢＭＣのように）に対して死滅効果を有しない。異なるリンパ球増殖バイオアッセイを異なるドナーで少なくとも４回行ったが、むしろ細胞周期は停止する（恐らくＳ期の前、細胞周期におけるチミジン取込はＳ期で起こるので）。形質転換細胞においてＳｙｋが欠失している場合、ＡＶ化合物は全く効果がなく、阻害効果も有しない。

別の２つの実験によりこの観察結果が確認された。第一に、ＨＬ６０細胞（ヒト骨髄球細胞白血病細胞株）はＳｙｋを含み、ＣＣＲＦ細胞は、Ｔ細胞白血病細胞株−チロシンキナーゼタンパク質を含まない−を本発明のＡＶ６０ＳおよびＡＶ７８Ｓで４日間にわたり処理した。データを表１に示す。ＡＶ６０ＳおよびＡＶ７８ＳはＨＬ６０細胞を阻害することがみとめられるが、ＣＣＲＦ細胞系に対する効果はないようである。

第二に、本発明の化合物の効果は、Ｓｙｋのニュートラルな阻害剤であるピセアタンノールと比較することができる。表２にデータを示すように、ピセアタンノールは、１００μg／ｍLの濃度で存在するとき、ＡＶ７４Ｓの阻害効果を少なくとも部分的にブロックするが、７４Ｓは、５０μg／ｍLおよび３０μＭ／ｍLのピセアタンノールのアポトーシス効果をブロックする。

以下に限定されることを意図しないが、本発明の化合物は、細胞を死滅させる（アポトーシス）ことによるのではなく、細胞増殖をブロック（即ち、細胞周期を停止）することにより作用（Ｓｙｋチロシンキナーゼが介在する障害を阻害）すると考えられる。図１５〜１９は、これに関してシクロスポリン（ＣｓＡ）を比較対照として用いた実験を示す。対照的に、図１８および１９に示されるように、この効果は、Jurkat細胞において有意にはみとめられない。

本発明の化合物の効力は、特に図５〜８を参照して示される。図５は、種々の濃度の本発明化合物ＡＶ６１ＳによるＰＨＡ活性化ＰＢＭＣを処置する効果を示し；図６は種々の濃度のＡＶ６１ＲによるＰＨＡ活性化ＰＢＭＣを処置する効果を示す。図７は、種々の濃度の本発明化合物ＡＶ７４ＳによるＰＨＡ活性化ＰＢＭＣを処置する効果を示し、図８は、種々の濃度のＡＶ７４ＲによるＰＨＡ活性化ＰＢＭＣを処置する効果を示す。上記図面から分かるように、各化合物のＳ型（即ち本発明化合物）は、その対応するＲ型と比較して、ＰＢＭＣの遙かに優れた阻害剤である。

図１および２は、本発明の化合物に対する希釈の効果を示す。図１は、種々の濃度の本発明化合物（ＤＭＳＯ担体中のＡＶ６１Ｓ）によるＰＨＡ活性化ＰＢＭＣの処置の阻害効果を示し、図２はＰＢＳ担体中の同化合物のより低い阻害効果を示す。

図１１および１２は、本発明化合物（ＡＶ６１ＳおよびＡＶ７４Ｓ）の効果を、ヒトＰＢＭＣＴ細胞およびＢ細胞（図１１）対ヒトＰＢＭＣ単球（図１２）で比較したものである。これらの図は、本発明化合物の効果が、Ｔ細胞およびＢ細胞と比較して（Ｓｙｋを含んでいる）単球に対してより著しいことを示している。Ｔ細胞は、ＳｙｋではなくＺＡＰ−７０を含んでいるが、Ｂリンパ球はＳｙｋを含んでいる。ＰＰＧ７およびＰＰＧ１７（即ち、本発明のＡＶ化合物ではない）は、阻害的ではないと考えられる。したがって、Ｂ細胞およびＴ細胞に対してみられた効果は、Ｔ細胞ではなく、Ｂ細胞に対する活性に起因するものと考えられる。

阻害効果を得るための投与のための適当な濃度の範囲は、約２０μg／ｍL〜１００μg／ｍLである。

したがって、本発明の化合物は、チロシンキナーゼ（Ｓｙｋ）依存性腫瘍、およびＳｙｋが関与する他の疾患の治療に用いることができる。

１．３×１０^５の濃度のＨＬ−６０細胞を、ＡＶ分子の存在下と非存在下で４日間試験した。
２．この系におけるＤＭＳＯの濃度は０．１％であった。
３．インキュベーション期間終了時に、ＸＴＴ法により細胞の生存率を測定し、ＥＬＩＳＡリーダーで読み取った。

Pic：ピセアタンノール
ＮＤ：検出されず

実施例２
ＮＣＩインビトロ抗癌剤ディスカバリースクリーンにしたがい、化合物ＡＶ７４Ｓを９種類の細胞系パネルに対して試験した（B. Teicher編，Humana Press, Totowa, New Jersey, 2004のPart I "Anticancer Drug Development Guide: Preclinical Screening, Clinical Trials and Approval (2nd edition)"のChapter 3, "The NCI Human Tumor Cell Line (60-Cell) Screen: Concept, Implementation and Applications"(by Michael R. Boyd）を参照）。この９種類のパネルは、それぞれ以下の細胞系から構成される：

白血病非小細胞肺癌大腸癌
ＣＣＲＦ−ＣＥＭＥＫＶＸＣＯＬＯ２０５
ＨＬ−６０（ＴＢ）ＨＯＰ−６２ＨＴＣ−２９９８
ＭＯＬＴ−４ＨＯＰ−９２ＨＣＴ−１６
ＲＰＭＩ−８２２６ＮＣＩ−Ｈ２２６ＨＣＴ−１５
ＳＲＮＣＩ−Ｈ２３ＨＴ２９
ＮＣＩ−Ｈ３２２ＭＫＭ１２
ＮＣＩ−Ｈ４６０ＳＷ−６２０
ＮＣＩ−Ｈ５２２

ＣＮＳ癌メラノーマ卵巣癌
ＳＦ−２６８ＬＯＸＩＭＶＩＩＧＲＯＶ１
ＳＳ−２９５ＭＡＬＭＥ−３ＭＯＶＣＡＲ−３
ＳＳ−５３９Ｍ１４ＯＶＣＡＲ−４
ＳＮＢ−１９ＳＫ−ＭＥＬ−２ＯＶＣＡＲ−５
ＳＮＢ−７５ＳＫ−ＭＥＬ−２８ＯＶＣＡＲ−８
Ｕ２５１ＳＫ−ＭＥＬ−５ＳＫ−ＯＶ−３
ＵＡＣＣ−２５７
ＵＡＣＣ−６２

腎臓癌前立腺癌乳癌
７８６−０ＰＣ−３ＭＣＦ７
Ａ４９８ＤＵ−１４５ＮＣＩ／ＡＤＲ−ＲＥＳ
ＡＣＨＮＭＤＡ−ＭＢ−２３１／ＡＴＣＣ
ＣＡＫＩ−１ＨＳ５７８Ｔ
ＲＸＦ３９３ＭＤＡ−ＭＢ−４３５
ＳＮ１２ＣＢＴ−５４９
ＴＫ−１０Ｔ−４７Ｄ
ＵＯ−３１

細胞系パネルを標準的な９６ウェルマイクロタイタープレート上（０日目，約２００００細胞／ウェル）でインキュベーションした後、化合物の非存在下で２４時間プレインキュベーションした。次いで、ＡＶ７４Ｓを、−４．０のlog₁₀濃度（７０．６μg／ｍLまたは１００μmol／ｍLに対応）から５つの１０倍希釈系列で加え、さらに４８時間インキュベーションした。このあと、細胞をin situで固定し、洗浄し、乾燥した。スルホローダミンＢ（ＳＲＢ）を加えた後、染色した付着細胞塊をさらに洗浄および乾燥した。結合した染料を可溶化し吸光計で測定した。結果を以下の表３に示し、添付の図面の図２０Ａ〜Ｉにグラフを示す。

ＡＶ７４Ｓは、試験した細胞系のうちの１１個について−４．００よりも低いｌｏｇ_１０ＧＩ_５０を示した。

均等
当業者は、本明細書に記載した具体的な手順と等価な数多くのものを、認識あるいは常套的な実験を用いるだけで確認することができるであろう。そのような等価物は、本発明の範囲に含まれるとされる。本発明の精神と範囲から逸脱することなく、本発明に対する様々な置換、変更および修飾を行うことができる。他の態様、利点および修飾は本発明の範囲に含まれる。本願を介して引用された、すべての参考文献、発行された特許および公開された特許出願の内容は、本明細書の一部を構成する。これらの特許、出願および他の文書の適当な構成要素、製造方法および方法を、本発明およびその態様のために選択することができる。

Claims

式（Ｉ）

［式中、
点線は、単結合または二重結合を表し；
Ｒ₅およびＲ₅’は独立に、Ｈ、ＯＨまたはＯＲ₆であり、ここにＲ₆は直鎖又は分岐鎖のＣ₁−Ｃ₄アルキルであり；
Ｘは、Ｏ、−ＣＨ₂Ｏ、−ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ、−ＣＨ（ＣＨ₃）ＣＨ₂Ｏまたは−ＣＨ₂ＣＨ（ＣＨ₃）Ｏであり；
Ｚは、−ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ、−ＣＨ（ＣＨ₃）ＣＨ₂Ｏまたは−ＣＨ₂ＣＨ（ＣＨ₃）Ｏであり；
ｍは、０であって、且つ
ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９または５０であるか、または
ｍは、１であって、且つ
ｎは、０，１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９または５０である］
で示される化合物のＳ−エナンチオマーまたはその製薬的に有効な塩を含有する、乳癌、卵巣癌、リンパ腫、白血病、大腸癌、非小細胞肺癌、ＣＭＬ、ＡＭＬ、Ｂ細胞リンパ腫、ＣＮＳ癌、メラノーマ、腎臓癌および前立腺癌からなる群から選択される細胞増殖障害を処置するための医薬組成物。
Ｚが−ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏである請求項１記載の医薬組成物。
Ｒ₅およびＲ₅’の一方が−ＯＨであり、他方が−Ｈである請求項１記載の医薬組成物。
Ｒ₅およびＲ₅’がいずれも−ＯＨである請求項１記載の医薬組成物。
Ｘが−ＣＨ₂Ｏである請求項１記載の医薬組成物。
Ｚが−ＣＨ（ＣＨ₃）ＣＨ₂Ｏである請求項１記載の医薬組成物。
ｍが１である請求項１記載の医薬組成物。
ｎが１、２または７である請求項１記載の医薬組成物。
前記化合物が、式（ＩＩ）

[式中、ＲはＰＰＧであり、ｎは７である］
のＳ−エナンチオマーである、請求項１記載の医薬組成物。
乳癌、卵巣癌、リンパ腫、白血病、大腸癌、非小細胞肺癌、ＣＭＬ、ＡＭＬ、Ｂ細胞リンパ腫、ＣＮＳ癌、メラノーマ、腎臓癌および前立腺癌からなる群から選択される細胞増殖障害の処置又は予防において使用するための医薬の製造における、式（Ｉ）

［式中、
点線は、単結合または二重結合を表し；
Ｒ₅およびＲ₅’は独立に、Ｈ、ＯＨまたはＯＲ₆であり、ここにＲ₆は直鎖又は分岐鎖のＣ₁−Ｃ₄アルキルであり；
Ｘは、Ｏ、−ＣＨ₂Ｏ、−ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ、−ＣＨ（ＣＨ₃）ＣＨ₂Ｏまたは−ＣＨ₂ＣＨ（ＣＨ₃）Ｏであり；
Ｚは、−ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ、−ＣＨ（ＣＨ₃）ＣＨ₂Ｏまたは−ＣＨ₂ＣＨ（ＣＨ₃）Ｏであり；
ｍは、０であって、且つ
ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９または５０であるか、または
ｍは、１であって、且つ
ｎは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９または５０である］
で示される化合物のＳ−エナンチオマーまたはその製薬的に有効な塩の使用。
Ｚが−ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏである、請求項１０記載の使用。
Ｒ₅およびＲ₅’の一方が−ＯＨであり、他方が−Ｈである、請求項１０記載の使用。
Ｒ₅およびＲ₅’がいずれも−ＯＨである、請求項１０記載の使用。
Ｘが−ＣＨ₂Ｏである、請求項１０記載の使用。
Ｚが−ＣＨ（ＣＨ₃）ＣＨ₂Ｏである、請求項１０記載の使用。
ｍが１である、請求項１０記載の使用。
ｎが１、２または７である、請求項１０記載の使用。
化合物が式（ＩＩ）

[式中、ＲはＰＰＧであり、ｎは７である］
のＳ−エナンチオマーである、請求項１０記載の使用。