JP3537487B2 - ムラサキイガイ接着蛋白質遺伝子 - Google Patents
ムラサキイガイ接着蛋白質遺伝子Info
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- adhesion protein
- protein
- mussel
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Adhesives Or Adhesive Processes (AREA)
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は水中や湿潤な環境で使用
できる接着剤の原料となるペプチドを組換えＤＮＡ技術
を用いて製造するために用いる遺伝子ＤＮＡに関する。
接着蛋白質をコードするＤＮＡを組み込んだ組換え体Ｄ
ＮＡを含む微生物や培養細胞を培養液中で培養し、該培
養物中に蓄積される該ポリペプチドを採集することによ
り、得られる該ペプチドは、接着剤の原料として広い用
途で利用されることが期待される。
できる接着剤の原料となるペプチドを組換えＤＮＡ技術
を用いて製造するために用いる遺伝子ＤＮＡに関する。
接着蛋白質をコードするＤＮＡを組み込んだ組換え体Ｄ
ＮＡを含む微生物や培養細胞を培養液中で培養し、該培
養物中に蓄積される該ポリペプチドを採集することによ
り、得られる該ペプチドは、接着剤の原料として広い用
途で利用されることが期待される。
【０００２】
【従来の技術】乾燥条件下で強い接着力を示す接着剤は
様々な種類のものが開発されている。そのうちの多くの
ものは一旦乾燥条件下で接着してしまえば湿潤環境にお
かれてもその強度を維持できる。しかし、湿潤な条件下
や水中で接着を開始した場合、有効な強度に達すること
ができる接着剤は存在しなかった。
様々な種類のものが開発されている。そのうちの多くの
ものは一旦乾燥条件下で接着してしまえば湿潤環境にお
かれてもその強度を維持できる。しかし、湿潤な条件下
や水中で接着を開始した場合、有効な強度に達すること
ができる接着剤は存在しなかった。
【０００３】ムラサキイガイは自己を良好な環境に固定
するために接着蛋白質を合成して自己を基物に接着させ
ることができる。この接着蛋白質には大まかには２種類
あり（Rzepecki, L.M., Hansen, K.M. and Waite, J.H.
Biological Bulletin 183:123-137, 1992）、両者の協
調作用により強固な接着が実現されることが想像され
る。一方の蛋白質（以降、第１蛋白質と称する）は主と
して数十個のAla-Lys-Pro-Ser-Tyr-Pro-Pro-Thr-Tyr-Ly
s という10アミノ酸の繰り返しにより構成される蛋白質
で、配列中のProおよびTyr残基はしばしば修飾されてそ
れぞれHydroxyprolineおよびDopa残基に変換されている
ことが知られており、Dopaのキノン架橋が接着に関与す
ることが推測されている（J.H.Wait, Int.J.Adhesion a
nd Adhesives, 7:9-14, 1987）。この蛋白質のｃＤＮＡ
についてはすでに明らかにされ、その一部の配列を用い
て、微生物に作らせる方法がすでに報告されている（特
開平1-104180号公報）。もう一方の蛋白質（以降、第２
蛋白質と称する）はCys残基をその組成中に含む蛋白質
で、Cys残基のジスルフィド結合により、硬化する蛋白
質であると想像されるが、ムラサキイガイ足中に多量に
含まれることが知られているにもかかわらず、そのポリ
ペプチドの配列は一部の断片ペプチドのアミノ酸配列以
外は明らかにされていなかった。
するために接着蛋白質を合成して自己を基物に接着させ
ることができる。この接着蛋白質には大まかには２種類
あり（Rzepecki, L.M., Hansen, K.M. and Waite, J.H.
Biological Bulletin 183:123-137, 1992）、両者の協
調作用により強固な接着が実現されることが想像され
る。一方の蛋白質（以降、第１蛋白質と称する）は主と
して数十個のAla-Lys-Pro-Ser-Tyr-Pro-Pro-Thr-Tyr-Ly
s という10アミノ酸の繰り返しにより構成される蛋白質
で、配列中のProおよびTyr残基はしばしば修飾されてそ
れぞれHydroxyprolineおよびDopa残基に変換されている
ことが知られており、Dopaのキノン架橋が接着に関与す
ることが推測されている（J.H.Wait, Int.J.Adhesion a
nd Adhesives, 7:9-14, 1987）。この蛋白質のｃＤＮＡ
についてはすでに明らかにされ、その一部の配列を用い
て、微生物に作らせる方法がすでに報告されている（特
開平1-104180号公報）。もう一方の蛋白質（以降、第２
蛋白質と称する）はCys残基をその組成中に含む蛋白質
で、Cys残基のジスルフィド結合により、硬化する蛋白
質であると想像されるが、ムラサキイガイ足中に多量に
含まれることが知られているにもかかわらず、そのポリ
ペプチドの配列は一部の断片ペプチドのアミノ酸配列以
外は明らかにされていなかった。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、遺伝子工学
の手法を用いてムラサキイガイ接着蛋白質の第２蛋白質
を生産すべく、その生産に係る遺伝子を提供することを
目的とする。
の手法を用いてムラサキイガイ接着蛋白質の第２蛋白質
を生産すべく、その生産に係る遺伝子を提供することを
目的とする。
【０００５】
【課題を解決するための手段】ムラサキイガイ接着蛋白
質の第２蛋白質の配列を得るために、日本産のムラサキ
イガイより前記第２蛋白質をコードするｃＤＮＡを単離
した。日本産のムラサキイガイ（Mytilus galloprovinc
ialis）はチレニアイガイとも呼ばれる地中海系の種で
ある（Wilkins et al.Biol.J.Linnean Soc.,20:365-37
4,1983）。研究の結果、日本産ムラサキイガイの足から
抽出したｍＲＮＡから作成したｃＤＮＡライブラリーか
ら、６個のCys残基を一定の規則に基づいて含む３２〜
３４のアミノ酸残基からなるモチーフを、４〜９アミノ
酸残基のスペーサー領域を挟んで繰り返す構造から主と
して構成され、すでに知られているムラサキイガイ接着
蛋白質の第２蛋白質の断片配列と相同性のある配列を持
つｃＤＮＡを単離することに成功し、さらにその塩基配
列を決定して本発明を完成した。
質の第２蛋白質の配列を得るために、日本産のムラサキ
イガイより前記第２蛋白質をコードするｃＤＮＡを単離
した。日本産のムラサキイガイ（Mytilus galloprovinc
ialis）はチレニアイガイとも呼ばれる地中海系の種で
ある（Wilkins et al.Biol.J.Linnean Soc.,20:365-37
4,1983）。研究の結果、日本産ムラサキイガイの足から
抽出したｍＲＮＡから作成したｃＤＮＡライブラリーか
ら、６個のCys残基を一定の規則に基づいて含む３２〜
３４のアミノ酸残基からなるモチーフを、４〜９アミノ
酸残基のスペーサー領域を挟んで繰り返す構造から主と
して構成され、すでに知られているムラサキイガイ接着
蛋白質の第２蛋白質の断片配列と相同性のある配列を持
つｃＤＮＡを単離することに成功し、さらにその塩基配
列を決定して本発明を完成した。
【０００６】即ち、本発明の第一は、配列番号２で表さ
れるアミノ酸配列をコードするムラサキイガイ接着蛋白
質遺伝子である。この遺伝子のＤＮＡ配列としては、配
列番号１で表される塩基配列を例示することができる。
れるアミノ酸配列をコードするムラサキイガイ接着蛋白
質遺伝子である。この遺伝子のＤＮＡ配列としては、配
列番号１で表される塩基配列を例示することができる。
【０００７】また、本発明の第二は、ミチルス・エドゥ
リス(Mytilus edulis)又はミチルス・ガロプロヴィンシ
アリス(Mytilus galloprovincialis) を起源とし、塩基
配列の長さが1.5Kbであり、配列番号３、４、又は５で
表されるアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする
ムラサキイガイ接着蛋白質遺伝子である。
リス(Mytilus edulis)又はミチルス・ガロプロヴィンシ
アリス(Mytilus galloprovincialis) を起源とし、塩基
配列の長さが1.5Kbであり、配列番号３、４、又は５で
表されるアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする
ムラサキイガイ接着蛋白質遺伝子である。
【０００８】以下、本発明を詳細に説明する。本発明の
遺伝子を取得するための材料としては、日本産のムラサ
キイガイ（Mytilus galloprovincialis）を用いるのが
好ましいが、その他のムラサキイガイ、例えば、ミチル
ス・エドゥリス(Mytilus edulis)等を用いることもでき
る。本発明遺伝子は以下の手順で得ることができる。ま
ずムラサキイガイの足をチオシアン酸グアニジン等によ
り可溶化し、フェノール／クロロホルムによる抽出を行
い、イソプロパノールにより沈殿させることにより全Ｒ
ＮＡを得ることができる。全ＲＮＡを得る方法はこの方
法に限定されるものではなく、ＬｉＣｌ沈殿法や塩化セ
シウム溶液に重層して遠心することによっても得られ
る。全ＲＮＡから、オリゴｄＴセルロースカラムを用い
てポリアデニル酸鎖を有するＲＮＡ（ポリＡ−ＲＮＡ）
を調製する。このポリＡ−ＲＮＡを鋳型として逆転写酵
素を用いて２本鎖ＤＮＡを調製する。この２本鎖ＤＮＡ
の合成はＳ１ヌクレアーゼ法やオカヤマ−バーグ法によ
り行ない得るが、市販のｃＤＮＡ合成キットを用いて合
成することも可能である。次いで、得られたｃＤＮＡを
適当なベクターに挿入し、このベクターを適当な宿主に
導入して増幅させるとともに目的のＤＮＡを持つクロー
ンを選択する。ベクターはλファージ由来の各種ベクタ
ーたとえばλｇｔ１０やλＺＡＰＩＩなど、あるいはｐ
ＢＲ３２２等のプラスミドベクターを用いることができ
る。目的クローンの選択にはすでに知られているムラサ
キイガイ接着蛋白質の第２蛋白質の部分配列の一部に相
当するオリゴヌクレオチドを合成してプローブとして用
い、これに強く結合するクローンを選択すればよい。配
列の決定はサンガー法やマキサム−ギルバート法等の一
般的な方法によって決定できる。以上の手順により翻訳
開始コドンから終止コドン、さらにポリアデニル酸鎖付
加シグナルを含む第２蛋白質ｃＤＮＡの全長を単離する
ことができる。
遺伝子を取得するための材料としては、日本産のムラサ
キイガイ（Mytilus galloprovincialis）を用いるのが
好ましいが、その他のムラサキイガイ、例えば、ミチル
ス・エドゥリス(Mytilus edulis)等を用いることもでき
る。本発明遺伝子は以下の手順で得ることができる。ま
ずムラサキイガイの足をチオシアン酸グアニジン等によ
り可溶化し、フェノール／クロロホルムによる抽出を行
い、イソプロパノールにより沈殿させることにより全Ｒ
ＮＡを得ることができる。全ＲＮＡを得る方法はこの方
法に限定されるものではなく、ＬｉＣｌ沈殿法や塩化セ
シウム溶液に重層して遠心することによっても得られ
る。全ＲＮＡから、オリゴｄＴセルロースカラムを用い
てポリアデニル酸鎖を有するＲＮＡ（ポリＡ−ＲＮＡ）
を調製する。このポリＡ−ＲＮＡを鋳型として逆転写酵
素を用いて２本鎖ＤＮＡを調製する。この２本鎖ＤＮＡ
の合成はＳ１ヌクレアーゼ法やオカヤマ−バーグ法によ
り行ない得るが、市販のｃＤＮＡ合成キットを用いて合
成することも可能である。次いで、得られたｃＤＮＡを
適当なベクターに挿入し、このベクターを適当な宿主に
導入して増幅させるとともに目的のＤＮＡを持つクロー
ンを選択する。ベクターはλファージ由来の各種ベクタ
ーたとえばλｇｔ１０やλＺＡＰＩＩなど、あるいはｐ
ＢＲ３２２等のプラスミドベクターを用いることができ
る。目的クローンの選択にはすでに知られているムラサ
キイガイ接着蛋白質の第２蛋白質の部分配列の一部に相
当するオリゴヌクレオチドを合成してプローブとして用
い、これに強く結合するクローンを選択すればよい。配
列の決定はサンガー法やマキサム−ギルバート法等の一
般的な方法によって決定できる。以上の手順により翻訳
開始コドンから終止コドン、さらにポリアデニル酸鎖付
加シグナルを含む第２蛋白質ｃＤＮＡの全長を単離する
ことができる。
【０００９】単離した配列は適当を発現ベクターに挿入
し、微生物や培養細胞に導入して発現させることによ
り、当該ペプチドを大量調製することが可能である。こ
の際、当該ＤＮＡはシグナル部分を含むため、当該ペプ
チドを宿主細胞外に分泌させることができる。また、シ
グナル部分を除去して適当なベクターに組み込んで用い
ることにより細胞内で生産させることも可能である。
し、微生物や培養細胞に導入して発現させることによ
り、当該ペプチドを大量調製することが可能である。こ
の際、当該ＤＮＡはシグナル部分を含むため、当該ペプ
チドを宿主細胞外に分泌させることができる。また、シ
グナル部分を除去して適当なベクターに組み込んで用い
ることにより細胞内で生産させることも可能である。
【００１０】
〔実施例１〕 ムラサキイガイ足ｃＤＮＡライブラリー
の作製 岩手県宮古市宮古湾で採集した殻長３−５ｃｍのムラサ
キイガイ１２個体の足をチオシアン酸グアニジン、クエ
ン酸ナトリウム、Ｎ−ラウリルザルコシン酸ナトリウ
ム、β−メルカプトエタノール等の溶液中で組織を機械
的に破砕し、フェノールおよびクロロホルムによる抽出
を行なって蛋白質等を除去したのち、イソプロパノール
を加えて沈殿させることにより全ＲＮＡを抽出し、オリ
ゴｄＴセルロースカラムに導通してポリアデニル酸鎖を
有するＲＮＡ（ポリＡ−ＲＮＡ）を調製した。この操作
により約２μｇのポリＡ−ＲＮＡが得られた。次にこの
ポリＡ−ＲＮＡを鋳型として逆転写酵素を用いて２本鎖
ｃＤＮＡを調製した。この操作はアマシャム社のｃＤＮ
Ａ合成キットを用いて添付のプロトコールにしたがって
行なった。ついで得られた２本鎖ＤＮＡにＥｃｏＲＩア
ダプターを付加し、ファージベクターλｇｔ１０（アマ
シャム〔Amersham〕社製）に挿入した。この操作は、ア
マシャム社のｃＤＮＡ合成システムを用いて添付のプロ
トコールにしたがって行なった。挿入の完了したファー
ジベクターは同キットに添付のインビトロパッケージン
グ溶液を用いて組換えＤＮＡをファージ内に封入させ
た。封入の完了した組換えファージは、大腸菌ＮＭ５１
４株（アマシャム〔Amersham〕社製）に感染させ、増幅
した。
の作製 岩手県宮古市宮古湾で採集した殻長３−５ｃｍのムラサ
キイガイ１２個体の足をチオシアン酸グアニジン、クエ
ン酸ナトリウム、Ｎ−ラウリルザルコシン酸ナトリウ
ム、β−メルカプトエタノール等の溶液中で組織を機械
的に破砕し、フェノールおよびクロロホルムによる抽出
を行なって蛋白質等を除去したのち、イソプロパノール
を加えて沈殿させることにより全ＲＮＡを抽出し、オリ
ゴｄＴセルロースカラムに導通してポリアデニル酸鎖を
有するＲＮＡ（ポリＡ−ＲＮＡ）を調製した。この操作
により約２μｇのポリＡ−ＲＮＡが得られた。次にこの
ポリＡ−ＲＮＡを鋳型として逆転写酵素を用いて２本鎖
ｃＤＮＡを調製した。この操作はアマシャム社のｃＤＮ
Ａ合成キットを用いて添付のプロトコールにしたがって
行なった。ついで得られた２本鎖ＤＮＡにＥｃｏＲＩア
ダプターを付加し、ファージベクターλｇｔ１０（アマ
シャム〔Amersham〕社製）に挿入した。この操作は、ア
マシャム社のｃＤＮＡ合成システムを用いて添付のプロ
トコールにしたがって行なった。挿入の完了したファー
ジベクターは同キットに添付のインビトロパッケージン
グ溶液を用いて組換えＤＮＡをファージ内に封入させ
た。封入の完了した組換えファージは、大腸菌ＮＭ５１
４株（アマシャム〔Amersham〕社製）に感染させ、増幅
した。
【００１１】〔実施例２〕 接着蛋白質ｃＤＮＡを含む
組換えファージの選択 実施例１で得られた組換えファージを増幅させ、得られ
た５万個のプラークをナイロンメンブレン ハイボンド
Ｎ上に固定した。ついでムラサキイガイ第２接着蛋白質
の断片ペプチド配列の一部の相補鎖に相当するオリゴヌ
クレオチドプロープＴＡ（Ｔ，Ｃ）ＡＡ（Ｃ，Ｔ）ＧＡ
ＣＧＡＣＧＡＣおよびＴＡ（Ｔ，Ｃ）ＡＡ（Ｃ，Ｔ）Ｇ
ＡＴＧＡＴＧＡＴをミリジェンサイクロンＤＮＡ合成機
により合成し、それぞれα32Ｐ−ＡＴＰによる端末ラベ
ルにより標識して、プラークハイブリダイゼーションを
行なった。その結果、プローブＴＡ（Ｔ，Ｃ）ＡＡ
（Ｃ，Ｔ）ＧＡＣＧＡＣＧＡＣでスクリーニングした２
００００クローンより、１００個以上のプローブと結合
するプラークが得られた。これらのうち１０個のプラー
クを任意に選び、挿入されているｃＤＮＡの長さをアガ
ロース電気泳動により調べて、最も長い挿入断片をもつ
ものについてファージベクターから制限酵素ＥｃｏＲＩ
を用いて挿入断片を切り出し、プラスミドベクターpBlu
escriptIISK(+)（ストラタジーン〔Stratagene〕社製）
に挿入した。このプラスミドベクターをE.coli-Mgfp2-2
-7に導入した。E.coli-Mgfp2-2-7は、工業技術院生命工
学工業技術研究所に寄託番号FERM P-14288として寄託さ
れている（寄託日：平成６年４月２１日）。
組換えファージの選択 実施例１で得られた組換えファージを増幅させ、得られ
た５万個のプラークをナイロンメンブレン ハイボンド
Ｎ上に固定した。ついでムラサキイガイ第２接着蛋白質
の断片ペプチド配列の一部の相補鎖に相当するオリゴヌ
クレオチドプロープＴＡ（Ｔ，Ｃ）ＡＡ（Ｃ，Ｔ）ＧＡ
ＣＧＡＣＧＡＣおよびＴＡ（Ｔ，Ｃ）ＡＡ（Ｃ，Ｔ）Ｇ
ＡＴＧＡＴＧＡＴをミリジェンサイクロンＤＮＡ合成機
により合成し、それぞれα32Ｐ−ＡＴＰによる端末ラベ
ルにより標識して、プラークハイブリダイゼーションを
行なった。その結果、プローブＴＡ（Ｔ，Ｃ）ＡＡ
（Ｃ，Ｔ）ＧＡＣＧＡＣＧＡＣでスクリーニングした２
００００クローンより、１００個以上のプローブと結合
するプラークが得られた。これらのうち１０個のプラー
クを任意に選び、挿入されているｃＤＮＡの長さをアガ
ロース電気泳動により調べて、最も長い挿入断片をもつ
ものについてファージベクターから制限酵素ＥｃｏＲＩ
を用いて挿入断片を切り出し、プラスミドベクターpBlu
escriptIISK(+)（ストラタジーン〔Stratagene〕社製）
に挿入した。このプラスミドベクターをE.coli-Mgfp2-2
-7に導入した。E.coli-Mgfp2-2-7は、工業技術院生命工
学工業技術研究所に寄託番号FERM P-14288として寄託さ
れている（寄託日：平成６年４月２１日）。
【００１２】〔実施例３〕 接着蛋白質遺伝子の配列決
定 実施例２で得られた挿入断片の配列をアプライドバイオ
システムズ社製３７３ＡＤＮＡシーケンサーおよびシー
ケンシングキットを用いてＤＮＡ配列を決定した。その
結果、この挿入断片が接着蛋白質の全長を含むＤＮＡ配
列であることが判明した。得られた接着蛋白質遺伝子
は、配列番号１に示す通り、翻訳開始コドンから翻訳終
了コドンまで４７３アミノ酸配列をコードする全長１５
１５ｂｐの配列であり、４７３アミノ酸のうち最上流か
ら１７残基がシグナルペプチド、続く３１残基が非繰り
返し領域であり、その下流に６個のCys残基を一定の規
則に基づいて含む３２−３４個のアミノ酸残基からなる
モチーフ、すなわち配列番号３、４又は５で表されるア
ミノ酸配列を４−９アミノ酸残基のスペーサー領域を挟
んで繰り返す繰り返し領域、さらに下流には１３アミノ
酸残基の非繰り返し領域が存在した。翻訳終了コドンの
下流側の非翻訳領域にはポリアデニル酸鎖付加シグナル
ＡＴＴＡＡＡが存在し、そのさらに下流にポリアデニル
酸鎖が存在した。
定 実施例２で得られた挿入断片の配列をアプライドバイオ
システムズ社製３７３ＡＤＮＡシーケンサーおよびシー
ケンシングキットを用いてＤＮＡ配列を決定した。その
結果、この挿入断片が接着蛋白質の全長を含むＤＮＡ配
列であることが判明した。得られた接着蛋白質遺伝子
は、配列番号１に示す通り、翻訳開始コドンから翻訳終
了コドンまで４７３アミノ酸配列をコードする全長１５
１５ｂｐの配列であり、４７３アミノ酸のうち最上流か
ら１７残基がシグナルペプチド、続く３１残基が非繰り
返し領域であり、その下流に６個のCys残基を一定の規
則に基づいて含む３２−３４個のアミノ酸残基からなる
モチーフ、すなわち配列番号３、４又は５で表されるア
ミノ酸配列を４−９アミノ酸残基のスペーサー領域を挟
んで繰り返す繰り返し領域、さらに下流には１３アミノ
酸残基の非繰り返し領域が存在した。翻訳終了コドンの
下流側の非翻訳領域にはポリアデニル酸鎖付加シグナル
ＡＴＴＡＡＡが存在し、そのさらに下流にポリアデニル
酸鎖が存在した。
【００１３】
【発明の効果】本発明はムラサキイガイ接着蛋白質遺伝
子を提供する。本発明の遺伝子から作られる蛋白質は、
接着剤の原料として極めて有用である。
子を提供する。本発明の遺伝子から作られる蛋白質は、
接着剤の原料として極めて有用である。
【００１４】
【００１５】配列番号 １
配列の長さ：１５１５
配列の型 ：核酸
鎖の数 ：２本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：mRNA to cDNA
起源
生物名 ：ムラサキイガイ(Mytilus galloprovincial
is) 配列
is) 配列
【００１６】配列番号 ２
配列の長さ：４７３
配列の型 ：アミノ酸
トポロジー：不明
配列の種類：タンパク質
起源
生物名 ：ムラサキイガイ(Mytilus galloprovincial
is) 配列
is) 配列
【００１７】配列番号 ３
配列の長さ：３２
配列の型 ：アミノ酸
トポロジー：不明
配列の種類：ペプチド
起源
生物名 ：ムラサキイガイ(Mytilus galloprovincial
is) 配列
is) 配列
【００１８】配列番号 ４
配列の長さ：３３
配列の型 ：アミノ酸
トポロジー：不明
配列の種類：ペプチド
起源
生物名 ：ムラサキイガイ(Mytilus galloprovincial
is) 配列
is) 配列
【００１９】配列番号 ５
配列の長さ：３４
配列の型 ：アミノ酸
トポロジー：不明
配列の種類：ペプチド
起源
生物名 ：ムラサキイガイ(Mytilus galloprovincial
is) 配列
is) 配列
─────────────────────────────────────────────────────
フロントページの続き
(58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名)
C07K 1/00 - 19/00
ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ／ＰＩＲ／ＧｅｎｅＳ
ｅｑ
ＧｅｎＢａｎｋ／ＥＭＢＬ／ＤＤＢＪ／Ｇ
ｅｎｅＳｅｑ
Claims (3)
- 【請求項１】 配列番号２で表されるアミノ酸配列をコ
ードするムラサキイガイ接着蛋白質遺伝子。 - 【請求項２】 ＤＮＡ配列が配列番号１で表される請求
項１記載のムラサキイガイ接着蛋白質遺伝子。 - 【請求項３】 ミチルス・ガロプロヴィンシアリス（ My
tilus galloprovincialis ）を起源とし、塩基配列の長
さが1.5kbであり、配列番号４で表されるアミノ酸配列
を含むポリペプチドをコードするムラサキイガイ接着蛋
白質遺伝子。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP09026694A JP3537487B2 (ja) | 1994-04-27 | 1994-04-27 | ムラサキイガイ接着蛋白質遺伝子 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP09026694A JP3537487B2 (ja) | 1994-04-27 | 1994-04-27 | ムラサキイガイ接着蛋白質遺伝子 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07289261A JPH07289261A (ja) | 1995-11-07 |
| JP3537487B2 true JP3537487B2 (ja) | 2004-06-14 |
Family
ID=13993709
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP09026694A Expired - Fee Related JP3537487B2 (ja) | 1994-04-27 | 1994-04-27 | ムラサキイガイ接着蛋白質遺伝子 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3537487B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1776463A2 (en) * | 2004-08-09 | 2007-04-25 | Battelle Energy Alliance, LLC | Cloning and expression of recombinant adhesive protein mefp-2 of the blue mussel mytilus edulis |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100868047B1 (ko) * | 2002-08-13 | 2008-11-10 | 주식회사 포스코 | 홍합 접착단백질 Ｍｇｆｐ-5 및 이의 생산방법 |
| US7892788B2 (en) | 2005-02-07 | 2011-02-22 | Basf Se | Hydrophobin fusion products, production and use thereof |
| BRPI0607594A2 (pt) * | 2005-03-31 | 2010-04-06 | Basf Ag | compósito multi-camadas ou substrato revestido, processo para a preparação dos mesmos, e, uso de hidrofobinas |
| WO2006103252A2 (de) | 2005-04-01 | 2006-10-05 | Basf Aktiengesellschaft | Verwendung von hydrophobin als phasen-stabilisator |
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- 1994-04-27 JP JP09026694A patent/JP3537487B2/ja not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (1)
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