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JP2023534683A - 抗ｃｌｄｎ－１８．２抗体及びその用途 - Google Patents

抗ｃｌｄｎ－１８．２抗体及びその用途 Download PDF

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JP2023534683A
JP2023534683A JP2023501905A JP2023501905A JP2023534683A JP 2023534683 A JP2023534683 A JP 2023534683A JP 2023501905 A JP2023501905 A JP 2023501905A JP 2023501905 A JP2023501905 A JP 2023501905A JP 2023534683 A JP2023534683 A JP 2023534683A
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リウ、ホイ
リウ、ホンチョアン
ウー、ハイ
ヤオ、チエン
ホアン、ランチン
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Shanghai Junshi Biosciences Co Ltd
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Abstract

ＣＬＤＮ－１８．２に特異的に結合する抗体又はその抗原結合断片、及びそれを含む組成物を提供する。前記抗体又はその抗原結合断片をコードする核酸分子、前記抗体又はその抗原結合断片を発現するための発現ベクターと宿主細胞、及び前記抗体又はその抗原結合断片の治療又は診断方法と用途をさらに提供する。

Description

本発明は、ＣＬＤＮ－１８．２に特異的に結合する抗体又はその抗原結合断片、及びそれを含む組成物を提供する。本発明の抗体又はその抗原結合断片をコードする核酸分子、本発明の抗体又はその抗原結合断片を発現するための発現ベクターと宿主細胞、及び本発明の抗体又はその抗原結合断片の治療又は診断方法と用途をさらに提供する。
胃癌は、世界中で最も発症率の高い癌の一つである。世界保健機関の癌管理プロジェクトの統計データによると、世界中に毎年癌で死亡した患者は７００万人に達しており、そのうち胃癌で死亡した患者は７０万人を占めている。一般的な胃癌治療法に比べて、抗体ベースの治療法は、高特異性、低副作用を有するため、応用の可能性が高い。
Ｃｌａｕｄｉｎは、ＣＬＤＮとも呼ばれ、傍細胞障壁を確立し、細胞間分子の流れを制御する細胞表面タンパク質ファミリーであり、現在、少なくとも２６種が発見されている。Ｃｌａｕｄｉｎタンパク質ファミリーのメンバーは、緊密に連結された重要な構造要素であり、上皮細胞極性の維持、傍細胞拡散の制御、及び細胞増殖分化の調節において重要な役割を果たす。Ｃｌａｕｄｉｎ分子は、細胞膜を四回貫通し、Ｎ末端及びＣ末端がいずれも細胞質内に落ちている。異なるＣｌａｕｄｉｎのメンバーは、異なる組織で発現され、その機能の改変が癌の形成と関連している。Ｃｌａｕｄｉｎ １、Ｃｌａｕｄｉｎ １８とＣｌａｕｄｉｎ １０の発現レベルの変化は、それぞれ腸癌、胃癌と肝細胞癌に関連している。
Ｃｌａｕｄｉｎ １８（ＣＬＤＮ１８）には、二つの選択的スプライシング変異体ＣＬＤＮ－１８．１とＣＬＤＮ－１８．２がある。Ｃｌａｕｄｉｎ １８．１（ＣＬＤＮ－１８．１）は、正常な肺と胃上皮において選択的に発現される。正常な胃上皮短寿命細胞において、Ｃｌａｕｄｉｎ １８．２（ＣＬＤＮ－１８．２）は微量発現しているが、腫瘍細胞において、Ｃｌａｕｄｉｎ １８．２は、様々な癌タイプでいずれも強く発現し、例えば、７５％の胃癌患者はＣｌａｕｄｉｎ １８．２を高発現し、５０％の膵臓癌患者はＣｌａｕｄｉｎ １８．２を高発現し、３０％の食管癌患者はＣｌａｕｄｉｎ １８．２を高発現し、肺癌などにおいても高発現している。
現在、胃食道癌末期の第ＩＩ相臨床試験（ＷＯ２００７０５９９９７）においてＧａｎｙｍｅｄ社により開発されたＣｌａｕｄｉｘｉｍａｂ（ＩＭＡＢ３６２）があるが、親和性、特異性などの面で既知の抗体に比べて改善された新規な抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は依然として必要とされている。
本発明は、ヒトＣＬＤＮ－１８．２に対する高親和性と高特異性などの利点を有する抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体又はその抗原結合断片を提供する。本発明による抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体又はその抗原結合断片は、独立した療法として、又は他の療法／又は他の抗癌剤と併用して、癌などの治療に用いることができる。
一態様では、本発明は、重鎖可変領域と軽鎖可変領域とを含む抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体又はその抗原結合断片を提供し、ここで、
前記重鎖可変領域は、ＨＣＤＲ１と、ＨＣＤＲ２と、ＨＣＤＲ３とを含み、ここで、
前記ＨＣＤＲ１の配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１、１０、１６、２２、２８、３４と３７に示されるアミノ酸配列から選択され、
前記ＨＣＤＲ２の配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６２、６３、１７、２３、２９、３５、３８、７２と７４に示されるアミノ酸配列から選択され、前記ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６２に示されるＨＣＤＲ２において、Ｘ１はＣ又はＳであり、Ｘ２はＴ又はＳであり、前記ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６３に示されるＨＣＤＲ２において、Ｘ３はＤ又はＧであり、Ｘ４はＫ又はＴであり、
前記ＨＣＤＲ３の配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３、１２、１８、２４、３０、３６、３９、７３と７５に示されるアミノ酸配列から選択され、
前記軽鎖可変領域は、ＬＣＤＲ１と、ＬＣＤＲ２と、ＬＣＤＲ３とを含み、ここで、
前記ＬＣＤＲ１の配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４、７、１３、１９、２５と３１に示されるアミノ酸配列から選択され、
前記ＬＣＤＲ２の配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５、８、１４、２０、２６と３２に示されるアミノ酸配列から選択され、
前記ＬＣＤＲ３の配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６、９、１５、２１、２７と３３に示されるアミノ酸配列から選択される。
いくつかの実施形態では、本発明に記載の重鎖可変領域は、
（Ｉ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３、又は、
（ＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３、又は、
（ＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３、又は、
（ＩＶ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３、又は、
（Ｖ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３、又は、
（ＶＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３、又は、
（ＶＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３、又は、
（ＶＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３、又は、
（ＩＸ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３、又は、
（Ｘ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７２とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７３に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３、又は、
（ＸＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７２とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３、又は、
（ＸＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７４とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７５に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３、又は、
（ＸＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７４とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含み、
前記軽鎖可変領域は、
（Ｉ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３、又は、
（ＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３、又は、
（ＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３、又は、
（ＩＶ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２１に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３、又は、
（Ｖ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２６とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３、又は、
（ＶＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む。
いくつかの実施形態では、本発明に記載の抗体又はその抗原結合断片は、
（Ｉ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、又は、
（ＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、又は、
（ＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、又は、
（ＩＶ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２１に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、又は、
（Ｖ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２６とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、又は、
（ＶＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、又は、
（ＶＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２６とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、又は、
（ＶＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、又は、
（ＩＸ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２１に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、又は、
（Ｘ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、又は、
（ＸＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、又は、
（ＸＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、又は、
（ＸＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、又は、
（ＸＩＶ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７２とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７３に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、又は、
（ＸＶ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７２とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、又は、
（ＸＶＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７４とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、又は、
（ＸＶＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７４とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７５に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、本発明に記載の重鎖可変領域のアミノ酸配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２、４５、４７、４９、５１、５３、５４、７６、７８、８２と８３に示される配列から選択されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２、４５、４７、４９、５１、５３、５４、７６、７８、８２と８３に示される配列のうちのいずれか一つと少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
前記軽鎖可変領域のアミノ酸配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３、４４、４６、４８、５０と５２に示される配列から選択されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３、４４、４６、４８、５０と５２に示される配列のうちのいずれか一つと少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、本発明に記載の抗体又はその抗原結合断片は、
（Ｉ）アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２に示される重鎖可変領域及び、アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３に示される軽鎖可変領域、又は、
（ＩＩ）アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２に示される重鎖可変領域及び、アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４４に示される軽鎖可変領域、又は、
（ＩＩＩ）アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４５に示される重鎖可変領域及び、アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４６に示される軽鎖可変領域、又は、
（ＩＶ）アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４７に示される重鎖可変領域及び、アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４８に示される軽鎖可変領域、又は、
（Ｖ）アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４９に示される重鎖可変領域及び、アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５０に示される軽鎖可変領域、又は、
（ＶＩ）アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１に示される重鎖可変領域及び、アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２に示される軽鎖可変領域、又は、
（ＶＩＩ）アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５３に示される重鎖可変領域及び、アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５０に示される軽鎖可変領域、又は、
（ＶＩＩＩ）アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に示される重鎖可変領域及び、アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２に示される軽鎖可変領域、又は、
（ＩＸ）アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４５に示される重鎖可変領域及び、アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４８に示される軽鎖可変領域、又は、
（Ｘ）アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１に示される重鎖可変領域及び、アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４６に示される軽鎖可変領域、又は、
（ＸＩ）アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４９に示される重鎖可変領域及び、アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４６に示される軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、本発明に記載の抗体又はその抗原結合断片は、重鎖可変領域と軽鎖可変領域とを含み、ここで、
前記重鎖可変領域のアミノ酸配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５５、５７、５８、５９、６０、７６、７８、７９、８２と８３に示される配列から選択されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５５、５７、５８、５９、６０、７６、７８、７９、８２と８３に示される配列のうちのいずれか一つと少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
前記軽鎖可変領域的アミノ酸配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６、６１、７７、８０と８１に示される配列から選択されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６、６１、７７、８０と８１に示される配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、本発明に記載の抗体又はその抗原結合断片は、重鎖可変領域と軽鎖可変領域とを含み、ここで、前記重鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５５、５７、６０、７６、７８、７９、８２又は８３のうちのいずれか一つに示されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６、６１、７７、８０又は８１のうちのいずれか一つに示されるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、本発明に記載の抗体又はその抗原結合断片は、重鎖可変領域と軽鎖可変領域とを含み、ここで、前記重鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５５、５７、８２又は８３に示されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６に示されるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、本発明に記載の抗体又はその抗原結合断片は、重鎖可変領域と軽鎖可変領域とを含み、ここで、前記重鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６０、７６又は７８に示されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６１に示されるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、本発明に記載の抗体又はその抗原結合断片は、重鎖可変領域と軽鎖可変領域とを含み、ここで、
前記重鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５５に示されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６に示されるアミノ酸配列を含み、又は、
前記重鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７に示されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６に示されるアミノ酸配列を含み、又は、
前記重鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５８に示されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６に示されるアミノ酸配列を含み、又は、
前記重鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５９に示されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６に示されるアミノ酸配列を含み、又は、
前記重鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６０に示されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６１に示されるアミノ酸配列を含み、又は、
前記重鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７６に示されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７７に示されるアミノ酸配列を含み、又は、
前記重鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７９に示されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８０に示されるアミノ酸配列を含み、又は、
前記重鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５５に示されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８１に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、本発明に記載の抗体又はその抗原結合断片は、アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６４もしくはその変異体又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６８もしくはその変異体に示される重鎖と、アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６５もしくはその変異体又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６９もしくはその変異体に示される軽鎖とを含み、ここで、前記変異体は、その可変領域において１、２、３、４又は５個のアミノ酸変化を含み、
好ましくは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６４の変異体は、第５０又は６３位又はその組み合わせ位置におけるアミノ酸変化を含み、及び／又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６８の変異体は、第６３又は６５位又はその組み合わせ位置におけるアミノ酸変化を含み、
好ましくは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６４の変異体は、Ｓ５０Ｃ又はＳ６３Ｔ又はその組み合わせを含み、及び／又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６８の変異体は、Ｇ６３Ｄ又はＴ６５Ｋ又はその組み合わせを含む。
いくつかの実施形態では、本発明に記載の抗体又はその抗原結合断片は、重鎖と軽鎖とを含み、ここで、
前記重鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６４に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６４に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６５に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６５に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、又は、
前記重鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６８に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６８に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６９に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６９に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、又は、
前記重鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８４に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８４に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８５に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８５に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、又は、
前記重鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８６に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８６に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、又は、
前記重鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８８に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８８に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８９に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８９に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、又は、
前記重鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９０に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９０に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９１に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９１に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、又は、
前記重鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９２に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９２に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９３に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９３に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、又は、
前記重鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９４に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９４に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９５に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９５に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、又は、
前記重鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９６に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９６に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９７に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９７に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、又は、
前記重鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９８に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９８に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９９に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９９に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、又は、
前記重鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１００に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１００に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０１に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０１に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、本発明に記載の抗体又はその抗原結合断片は、
（Ｉ）アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６４に示される重鎖及びアミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６５に示される軽鎖、又は、
（ＩＩ）アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６８に示される重鎖及びアミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６９に示される軽鎖を含む。
いくつかの実施形態では、本発明に記載の抗体は、マウス抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、又は完全ヒト抗体である。
いくつかの実施形態では、本発明に記載の抗原結合断片は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’－ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂ又はダイアボディである。
いくつかの実施形態では、本発明に記載の抗体は、任意のＩｇＧサブタイプ、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４であり、好ましくは、前記抗体は、低フコシル化又は無フコシル化されている。
いくつかの実施形態では、本発明に記載の抗体は、低フコシル化されている。
いくつかの実施形態では、本発明に記載の抗体は、無フコシル化されている。
別の態様では、本発明は、単離された抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体又はその抗原結合断片を提供し、
（１）本明細書に記載の抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体又はその抗原結合断片と、同じ又は完全にもしくは部分的に重複するヒトＣＬＤＮ－１８．２タンパク質のエピトープに結合することと、
（２）ヒトＣＬＤＮ－１８．２タンパク質のエピトープへの結合について、本明細書に記載の抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体又はその抗原結合断片と競合することと、
（３）ヒトＣＬＤＮ－１８．２タンパク質に結合するが、ヒトＣＬＤＮ－１８．１タンパク質には結合しないことと、
（４）ヒトＣＬＤＮ－１８．２タンパク質を発現する細胞のＡＤＣＣ効果を誘導することと、
（５）ヒトＣＬＤＮ－１８．２タンパク質を発現する細胞のＣＤＣ効果を誘導することとのうちの一つ又は複数の特性を有する。
さらに別の態様では、本発明は、本明細書に記載の抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体又はその抗原結合断片をコードするポリヌクレオチドを提供する。
さらに別の態様では、本発明は、本明細書に記載のポリヌクレオチドを含む発現ベクターを提供し、好ましくは、前記ベクターは真核発現ベクターである。
さらに別の態様では、本発明は、本明細書に記載のポリヌクレオチド又は本明細書に記載の発現ベクターを含み、又は本発明に記載の抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体又はその抗原結合断片を発現する宿主細胞を提供し、好ましくは、前記宿主細胞は、真核細胞であり、さらに好ましくは、哺乳動物細胞である。
さらに別の態様では、本発明は、本明細書に記載の抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体又はその抗原結合断片を作製するための方法を提供し、前記方法は、前記抗体又はその抗原結合断片の発現に適した条件で、本明細書に記載の宿主細胞を培養し、発現された抗体又はその抗原結合断片を前記宿主細胞から回収することを含む。
さらに別の態様では、本発明は、本明細書に記載の抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体又はその抗原結合断片、本明細書に記載のポリヌクレオチド、本明細書に記載の発現ベクター、又は本明細書に記載の宿主細胞、及び薬学的に許容されるベクター又は賦形剤を含む薬物組成物を提供する。
さらに別の態様では、本発明は、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合断片、本明細書に記載のポリヌクレオチド、本明細書に記載の発現ベクター、本明細書に記載の宿主細胞、又は本明細書に記載の薬物組成物の、ＣＬＤＮ－１８．２により媒介される疾患又は病症を治療及び／又は予防するための薬物の作製における用途を提供し、好ましくは、前記疾患又は病症は癌である。
さらに別の態様では、本発明は、ＣＬＤＮ－１８．２により媒介される疾患又は病症を治療及び／又は予防するための、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合断片、本明細書に記載のポリヌクレオチド、本明細書に記載の発現ベクター、本明細書に記載の宿主細胞、又は本明細書に記載の薬物組成物を提供し、好ましくは、前記疾患又は病症は癌である。
さらに別の態様では、本発明は、ＣＬＤＮ－１８．２により媒介される疾患又は病症を治療及び／又は予防する方法を提供し、この方法は、それを必要とする被験者に、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合断片、本明細書に記載のポリヌクレオチド、本明細書に記載の発現ベクター、本明細書に記載の宿主細胞、又は本明細書に記載の薬物組成物を投与することを含み、好ましくは、前記疾患又は病症は癌である。
いくつかの実施形態では、前記癌は、胃癌、食道癌、胃食道癌、膵臓癌、胆管癌、肺癌、卵巣癌、結腸癌、肝臓癌、頭頸癌、胆嚢癌、腸癌と膀胱癌から選択される。
さらに別の態様では、本発明は、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合断片、本明細書に記載のポリヌクレオチド、本明細書に記載の発現ベクター、本明細書に記載の宿主細胞、又は本明細書に記載の薬物組成物、及び一つ又は複数の別の治療剤を含む薬物組み合わせを提供する。
さらに別の態様では、本発明は、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合断片、本明細書に記載のポリヌクレオチド、本明細書に記載の発現ベクター、本明細書に記載の宿主細胞、又は本明細書に記載の薬物組成物を含むキットを提供し、好ましくは、投与装置をさらに含む。
さらに別の態様では、本発明は、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合断片を用いて、試料中のＣＬＤＮ－１８．２の存在を検出する方法を提供する。
フローサイトメトリーによって測定されたキメラ抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体の細胞レベル親和性を示す。 ２ａおよび２ｂは、レポーター遺伝子によって測定されたキメラ抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体のＡＤＣＣ活性を示す。 フローサイトメトリーによって測定されたキメラ抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体のＣＤＣ活性を示す。 フローサイトメトリーによって測定されたヒト化抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体の細胞レベル親和性を示す。 フローサイトメトリーによって測定されたヒト化抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体の細胞レベル親和性を示す。 フローサイトメトリーによって測定されたヒト化抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体の細胞レベル親和性を示す。 レポーター遺伝子によって測定されたヒト化抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体のＡＤＣＣ活性を示す。 レポーター遺伝子によって測定されたヒト化抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体のＡＤＣＣ活性を示す。 レポーター遺伝子によって測定されたヒト化抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体のＡＤＣＣ活性を示す。 フローサイトメトリーによって測定されたヒト化抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体のＣＤＣ活性を示す。 フローサイトメトリーによって測定されたヒト化抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体のＣＤＣ活性を示す。 フローサイトメトリーによって測定されたヒト化抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体のＣＤＣ活性を示す。 Ｍ－ＮＳＧマウス移植ヒト胃癌ＭＫＮ４５ ｈＣｌａｕｄｉｎ１８．２ Ｍｉｘｅｎｏ腫瘍増殖に対するヒト化抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体の阻害作用を示す。 ＣＢ－１７ ＳＣＩＤマウス移植ヒト膵臓癌ｈＣＬＤＮ１８．２ ＭＩＡ ＰａＣａ－２腫瘍増殖に対するヒト化抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体の阻害作用を示す。
定義
本発明の実施は別途指摘しない限り、当技術分野の技術の範囲内にある分子生物学（組換え技術を含む）、微生物学、細胞生物学、生化学、及び免疫学の従来の技術を用いる。
本発明をより容易に理解できるように、いくつかの技術用語を以下のように具体的に定義する。本明細書に使用される科学と技術用語は、本明細書の他の部分で特に定義されない限り、いずれも本発明の当業者に一般に理解される意味を有する。当技術分野における定義及び用語に関して、当業者は、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ａｕｓｕｂｅｌ）を具体的に参照することができる。アミノ酸残基の略語は、当技術分野で使用される、２０個の通常使用されるＬ－アミノ酸の一つを指す標準的な３文字及び／又は１文字コードである。本明細書（特許請求の範囲を含む）で使用される単数形は、文脈上別途明確に規定されていない限り、対応する複数形を含む。
「約」という用語は、数字や数値と併用される場合、指定された数字や数値よりも５％小さい下限から指定された数字や数値よりも５％大きい上限までの範囲内の数字や数値をカバーすることを意味する。
「及び／又は」という用語は、選択肢のうちのいずれか一つの選択肢、又は選択肢のうちのいずれか二つ以上の選択肢の組み合わせを意味すると理解されるべきである。
「ＣＬＤＮ－１８．２」又は「Ｃｌａｕｄｉｎ１８．２」という用語は、Ｃｌａｕｄｉｎ １８の二つのスプライシング変異体の一つである。該用語は、特に説明されていない限り、任意の脊椎動物（霊長類動物（例えば、ヒト）のような哺乳動物を含む）とげっ歯類動物（例えば、マウスとラット）からの任意の天然のＣＬＤＮ－１８．２を指す。該用語は、「全長」のプロセシングされていないＣＬＤＮ－１８．２及び細胞内でのプロセシングによって産生された任意の形態のＣＬＤＮ－１８．２又はその任意の断片をカバーする。該用語は、天然に存在するＣＬＤＮ－１８．２の変異体、例えば、スプライシング変異体又は対立遺伝子変異体をさらに含む。一好適な実施形態では、ＣＬＤＮ－１８．２は、ヒトとカニクイザルからのＣＬＤＮ－１８．２全長又はその断片（そのシグナルペプチドを欠く成熟断片など）を指す。
「アミノ酸配列同一性パーセント（％）」又は「同一性」と略称される用語は、最大の配列同一性パーセントを得るためにアミノ酸配列をアラインメントし（必要に応じてギャップを導入）、且ついかなる保存的置換も配列同一性の一部と考えないとした時の、候補アミノ酸配列におけるアミノ酸残基と参照アミノ酸配列における同じアミノ酸残基のパーセントとして定義される。アミノ酸配列同一性パーセントを測定するために当分野の様々な方法、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ－２、ＡＬＩＧＮ又はＭＥＧＡＬＩＧＮ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェアといった公的に入手可能なコンピュータソフトウェアを使用して、配列アラインメントを行うことができる。当業者は、比較される配列の全長にわたって最大のアライメントを得るために必要とされる任意のアルゴリズムを含む、アライメントを測定するために適切なパラメータを決定することができる。
「免疫応答」という用語は、例えば、リンパ球、抗原提示細胞、食細胞、顆粒球及び上記細胞又は肝臓により産生される可溶性高分子（抗体、サイトカインと補体を含む）による作用を指し、該作用により、侵襲性病原体、病原体に感染した細胞又は組織、癌細胞又は自己免疫もしくは病的炎症の状態での正常なヒト細胞又は組織を、人体から選択的に損傷、破壊又は除去する。
「シグナル形質導入経路」又は「シグナル形質導入活性」という用語は、通常受容体への成長因子の結合などのタンパク質間相互作用によって引き起こされる生化学的因果関係を指し、前記関係は、細胞のある部分から細胞の別の部分へのシグナル形質導入をもたらす。一般的には、形質導入は、シグナル形質導入を引き起こす一連の反応における一つ又は複数のタンパク質上の一つ又は複数のチロシン、セリン又はスレオニン残基の特定のリン酸化を含む。最後から二番目のプロセスには、通常細胞核イベントが含まれ、それによって遺伝子発現の変化をもたらす。
「活性」又は「生物学的活性」という用語、又は「生物学的特性」又は「生物学的特徴」という用語は、ここで互換可能に使用され、エピトープ／抗原親和性と特異性、インビボ又はインビトロでＣＬＤＮ－１８．２活性を中和または拮抗する能力、ＩＣ５０、抗体のインビボ安定性と抗体の免疫原性を含むが、これらに限定されない。当分野でよく知られている抗体の他の同定可能な生物学的特性又は特徴は、例えば、交差反応性（即ち、通常、標的ペプチドの非ヒトホモログ、又は他のタンパク質もしくは組織との交差反応性）、哺乳動物細胞におけるタンパク質の高発現レベルを維持する能力を含む。当分野でよく知られている技術を用いて、以上に言及した特性又は特徴を観察、測定又は評価し、前記技術は、ＥＬＩＳＡ、ＦＡＣＳ又はＢＩＡＣＯＲＥプラズマ共鳴分析、インビトロ又はインビボでの制限のない中和アッセイ、受容体結合、サイトカイン又は成長因子の産生及び／又は分泌、シグナル形質導入及び異なる起源（ヒト、霊長類又は任意の他の起源を含む）の組織切片の免疫組織化学を含むが、これらに限定されない。
「抗体」という用語は、必要な生物学的活性を有する任意の形態の抗体を指す。そのため、それは、最も広い意味で使用され、具体的には、モノクローナル抗体（全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、ヒト化抗体、完全ヒト抗体、キメラ抗体とラクダ由来の単一ドメイン抗体を含むが、これらに限定されない。
「単離された抗体」という用語は、結合化合物の精製状態を指し、且つこの場合に、該分子が、他の生物学的分子、例えば、核酸、タンパク質、脂質、糖、又は他の物質、例えば、細胞破砕物と増殖培地を実質的に含まないことを意味する。「単離（された）」という用語は、本明細書に記載の結合化合物の実験上又は治療上の使用に明らかに干渉する量で存在しない限り、そのような物質の完全な非存在、又は水、緩衝液もしくは塩の非存在を指すわけではない。
「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に均質な抗体の集団から得られる抗体を指し、即ち、該集団を構成する個々の抗体が、少量で存在し得る、天然に存在し得る突然変異を除いて同一であることを意味する。モノクローナル抗体は高度に特異的であり、単一の抗原エピトープに対するものである。それに対し、従来の（ポリクローナル）抗体作製物は、通常、異なるエピトープに対する（又は異なるエピトープに特異的な）多数の抗体を含む。「モノクローナル」という修飾語は、実質的に均質な抗体集団から得られる抗体の特徴を示し、任意の特定の方法による抗体の産生を必要とすると解釈すべきではない。
「全長抗体」という用語は、天然に存在する時に四本のペプチド鎖を含む免疫グロブリン分子を指す：二本の重（Ｈ）鎖（全長で約５０－７０ｋＤａ）と二本の軽（Ｌ）鎖（全長で約２５ｋＤａ）はジスルフィド結合によって互いに連結される。各本の重鎖は、重鎖可変領域（本明細書においてＶＨと略される）と重鎖定常領域（本明細書においてＣＨと略される）からなる。重鎖定常領域は、３つのドメインＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３からなる。各本の軽鎖は、軽鎖可変領域（本明細書においてＶＬと略される）と軽鎖定常領域からなる。軽鎖定常領域は、一つのドメインＣＬからなる。ＶＨとＶＬ領域は、高い可変性を有する相補性決定領域（ＣＤＲ）と、隔てられてより保存的で、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる領域とにさらに細分されてもよい。各ＶＨ又はＶＬ領域は、アミノ基末端からカルボキシル基末端へ、ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４の順序で並んだ３つのＣＤＲと４つのＦＲからなる。重鎖と軽鎖の可変領域は、抗原と相互作用する結合ドメインを含む。抗体の定常領域は、宿主組織又は因子（免疫系の種々の細胞（例えば、エフェクター細胞）と古典的補体系の第１の成分（Ｃｌｑ）を含む）への免疫グロブリンの結合を媒介することができる。
「Ｆｃ領域」という用語は、少なくとも一部の定常領域を含む免疫グロブリン重鎖のＣ－末端領域を定義するためのものである。該用語は、天然配列Ｆｃ領域と変異体Ｆｃ領域とを含む。一実施形態では、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は、重鎖のＣｙｓ２２６から又はＰｒｏ２３０からカルボキシル基末端まで延びる。しかしながら、Ｆｃ領域のＣ－末端リジン（Ｌｙｓ４４７）は存在しても又は存在しなくてもよい。Ｆｃ領域又は定常領域におけるアミノ酸残基の番号付けは、本明細書に特に明記しない限り、Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．ら，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，第５版，Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ（１９９１），ＮＩＨ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ ９１－３２４２に記載されるように、ＥＵインデックスとも呼ばれるＥＵ番号付けシステムに基づて行われる。
用語抗体（「親抗体」）の「抗原結合断片」は、抗体の断片又は誘導体を含み、通常、親抗体の抗原結合領域又は可変領域（例えば、一つ又は複数のＣＤＲ）の少なくとも一つの断片を含み、それは、親抗体の少なくともいくつかの結合特異性を維持する。抗原結合断片の例は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２及びＦｖ断片、ダイアボディ、線状抗体、ｓｃ－Ｆｖなどの一本鎖抗体分子、抗体断片からなるナノ抗体（ｎａｎｏｂｏｄｙ）と多重特異性抗体を含むが、これらに限定されない。抗体の抗原結合活性がモル濃度ベースで表される場合、結合断片又は誘導体は、通常、その抗体の抗原結合活性の少なくとも１０％を維持する。好ましくは、結合断片又は誘導体は、親抗体の抗原結合親和性の少なくとも２０％、５０％、７０％、８０％、９０％、９５％又は１００％以上を維持する。抗体の抗原結合断片は、その生物学的活性を有意に改変しない保存的又は非保存的アミノ酸置換（抗体の「保存的変異体」又は「機能保存的変異体」と呼ばれる）を含み得ることも考えられる。「結合化合物」という用語は、抗体及びその結合断片の両方を指す。
「一本鎖Ｆｖ」又は「ｓｃＦｖ」抗体という用語は、抗体のＶＨとＶＬドメインを含む抗体断片を指し、ここで、これらのドメインは単一ポリペプチド鎖に存在する。Ｆｖポリペプチドは、一般的には、ＶＨとＶＬドメインとの間のポリペプチドリンカーをさらに含み、それは、ｓｃＦｖが抗原結合に必要な構造を形成することを可能にする。
「ドメイン抗体」という用語は、重鎖可変領域又は軽鎖可変領域のみを含む免疫機能性免疫グロブリン断片である。いくつかの場合に、二つ以上のＶＨ領域とペプチドリンカーは共有結合して、二価ドメイン抗体を形成する。二価ドメイン抗体の２つのＶＨ領域は、同じ又は異なる抗原を標的化することができる。
「二価抗体」という用語は、２つの抗原結合部位を含む。いくつかの場合に、２つの結合部位は、抗原特異性が同じである。しかしながら、二価抗体は二重特異的であってもよい。
「ダイアボディ」という用語は、二つの抗原結合部位を有する小抗体断片を指し、前記断片は、同じポリペプチド鎖（ＶＨ－ＶＬ又はＶＬ－ＶＨ）において軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）に連結される重鎖可変ドメイン（ＶＨ）を含む。同じ鎖の二つのドメインの間の対合を可能にしないほど短いリンカーを使用することによって、該ドメインは別の鎖の相補的ドメインと対合し、二つの抗原結合部位を産生する。
「キメラ抗体」という用語は、第１の抗体の可変ドメインと第２の抗体の定常ドメインを有する抗体であり、ここで、第１の抗体と第２の抗体は異なる種に由来する。通常、可変ドメインは、げっ歯動物などの抗体（「親抗体」）から得られたが、定常ドメイン配列はヒト抗体から得られ、それにより親げっ歯動物抗体に比べて、得られたキメラ抗体は、ヒト被験者で有害な免疫応答を誘導する可能性が低い。
「ヒト化抗体」という用語は、ヒトと非ヒト（例えば、マウス、ラット）抗体に由来する配列を含む抗体形態を指す。一般的には、ヒト化抗体は、少なくとも一つ、通常二つの可変ドメインを含み、ここで、全て又は実質的に全ての超可変ループは、非ヒト免疫グロブリンの超可変ループと同等であるが、全て又は実質的に全てのフレームワーク（ＦＲ）領域は、ヒト免疫グロブリン配列のフレームワーク領域である。ヒト化抗体は、任意選択的に、少なくとも一部のヒト免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）を含んでもよい。
「完全ヒト抗体」という用語は、ヒト免疫グロブリンタンパク質配列のみを含む抗体を指す。マウスにおいて、マウス細胞又はマウス細胞に由来するハイブリドーマで産生される場合、完全ヒト抗体は、マウス糖鎖を含んでもよい。同様に、「マウス抗体」は、マウス免疫グロブリン配列のみを含む抗体を指す。又は、ラット、ラット細胞又はラット細胞に由来するハイブリドーマで産生される場合、完全ヒト抗体は、ラット糖鎖を含んでもよい。同様に、「ラット抗体」は、ラット免疫グロブリン配列のみを含む抗体を指す。
「アイソタイプ」抗体は、重鎖定常領域遺伝子により提供された抗体クラス（例えば、ＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４などのＩｇＧ）を指す。アイソタイプは、これらのクラスの一つの修飾形態をさらに含み、ここで、修飾は、Ｆｃ機能を改変するように、例えば、エフェクター機能又はＦｃ受容体への結合を強めるか又は弱めるように、産生されている。
「エピトープ」という用語は、抗体が結合した抗原領域を指す。エピトープは、連続したアミノ酸から形成されてもよく、又はタンパク質の三次折り畳みによって並置された非連続アミノ酸から形成されてもよい。
「親和性」又は「結合親和性」は、結合対のメンバー間の相互作用を反映する固有の結合親和性を指す。分子Ｘの、そのパートナーＹに対する親和性は、通常、解離速度定数と結合速度定数（それぞれｋｄｉｓとｋｏｎである）との比である平衡解離定数（ＫＤ）によって表すことができる。親和性は、当分野の既知の一般的な方法によって測定することができる。親和性を測定するための一つの具体的な方法は、本明細書におけるＦｏｒｔｅＢｉｏ動力学結合アッセイである。
「結合しない」タンパク質又は細胞という用語は、タンパク質又は細胞と結合しないか、又は高い親和性でそれと結合しないことを指し、即ち、タンパク質又は細胞に結合するＫＤは、１．０×１０－６Ｍ以上であり、さらに好ましくは、１．０×１０－５Ｍ以上であり、さらに好ましくは、１．０×１０－４Ｍ以上であり、１．０×１０－３Ｍ以上であり、さらに好ましくは、１．０×１０－２Ｍ以上である。
「高親和性」という用語は、ＩｇＧ抗体にとっては、抗原に対するＫＤが１．０×１０－６Ｍ以下であり、好ましくは、５．０×１０－８Ｍ以下であり、さらに好ましくは、１．０×１０－８Ｍ以下であり、５．０×１０－９Ｍ以下であり、さらに好ましくは、１．０×１０－９Ｍ以下であることを指す。他の抗体サブタイプに対して、「高親和性」結合は変化し得る。例えば、ＩｇＭサブタイプの「高親和性」結合は、ＫＤが１０－６Ｍ以下であり、好ましくは、１０－７Ｍ以下であり、さらに好ましくは、１０－８Ｍ以下であることを指す。
「抗体依存性細胞傷害」、「抗体依存性細胞媒介性細胞傷害」又は「ＡＤＣＣ」という用語は、細胞媒介性免疫防御を指し、ここで、免疫系エフェクター細胞は、細胞膜表面抗原が抗体、例えばＣｌａｕｄｉｎ１８．２抗体に結合した標的細胞、例えば、癌細胞を能動的に溶解する。
「補体依存性細胞傷害」又は「ＣＤＣ」という用語は、表面抗原に結合した時に、膜攻撃複合体の形成及び標的細胞溶解を含む典型的な補体経路を引き起こすＩｇＧとＩｇＭ抗体のエフェクター機能を指す。本発明の抗体は、Ｃｌａｕｄｉｎ １８．２に結合すると、癌細胞に対するＣＤＣを引き起こす。
「核酸」又は「ポリヌクレオチド」という用語は、デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）又はリボ核酸（ＲＮＡ）及び一本鎖又は二本鎖形態のそのポリマーを指す。特に限定されない限り、用語は、参照核酸と似ている結合特性を有し、且つ天然に存在するヌクレオチドと似ている方式で代謝される、既知の天然ヌクレオチドの類似体を有する核酸を含む（Ｋａｒｉｋｏらの米国特許第Ｎｏ．８，２７８，０３６号を参照し、それは、ウリジンがシュードウリジンに置換されたｍＲＮＡ分子、前記ｍＲＮＡ分子を合成する方法及び治療性タンパク質をインビボ送達するための方法を開示した）。特に明記しない限り、特定の核酸配列は、保存的に修飾されたその変異体（例えば、縮重コドン置換）、対立遺伝子、オルソログ、ＳＮＰと相補的配列及び明示的に示された配列をさらに暗黙的に含む。具体的には、縮重コドン置換は、その中から選択された一つ又は複数の（又は全ての）コドンの第３位が混合塩基及び／又はデオキシイノシン残基に置換された配列を生成することによって実現し得る（Ｂａｔｚｅｒら，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄ Ｒｅｓ．１９：５０８１（１９９１）、Ｏｈｔｓｕｋａら，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６０：２６０５－２６０８（１９８５）、及びＲｏｓｓｏｌｉｎｉら，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｐｒｏｂｅｓ ８：９１－９８（１９９４））。
「構築体」は、任意の組換えポリヌクレオチド分子（例えば、プラスミド、コスミド、ウイルス、自律複製ポリヌクレオチド分子、ファージ、又は線状もしくは環状の一本鎖もしくは二本鎖ＤＮＡもしくはＲＮＡポリヌクレオチド分子）を指し、任意の起源から派生し、ゲノムとの組み込み又は自律複製によって、以下のポリヌクレオチド分子を構成することができ、そのうち、すでに機能的操作する方式で一つの又は複数のポリヌクレオチド分子に連結されている（即ち、操作可能に連結されている）。組換え構築体は、通常、宿主細胞におけるポリヌクレオチドの転写を誘導する、転写開始調節配列に操作可能に連結された本発明のポリヌクレオチドを含む。本発明の核酸の発現は、異種及び非異種（即ち、内因性）プロモーターの両方を使用して誘導され得る。
「ベクター」は、形質転換の目的（即ち、宿主細胞への異種ＤＮＡの導入する）に使用され得る任意の組換えポリヌクレオチド構築体を指す。一つのタイプのベクターは、「プラスミド」であり、環状二本鎖ＤＮＡループを指し、追加のＤＮＡ領域セグメントを該ループに連結することができる。別のタイプのベクターは、ウイルスベクターであり、ここで、追加のＤＮＡ領域セグメントをウイルスゲノムに連結することができる。いくつかのベクターは、導入された宿主細胞において自律複製可能である（例えば、細菌複製始点を有する細菌ベクター及び遊離型哺乳動物ベクター）。宿主細胞に導入された後、他のベクター（例えば、非遊離型哺乳動物ベクター）は、宿主細胞のゲノムに組み込まれ、そのため宿主ゲノムと共に複製される。また、いくつかのベクターは、操作可能に連結された遺伝子の発現を誘導することができる。本明細書において、このようなベクターは、「発現ベクター」と呼ばれる。
本明細書に使用される用語「発現ベクター」は、宿主細胞に形質転換、トランスフェクト又は形質導入された時に、目的遺伝子を複製し、発現し得る核酸分子を指す。発現ベクターは、ベクターを維持し、且つ必要な場合に宿主内で増殖を提供することを確保するために、一つ又は複数の表現型選択マーカー及び複製始点を含む。
細胞又は受容体のための「活性化」、「刺激」と「処理」は、文脈で別途または明示的に規定されていない限り、同じ意味、例えば、細胞又は受容体のリガンドによる活性化、刺激又は処理を有してもよい。「リガンド」は、天然と合成のリガンド、例えば、サイトカイン、サイトカイン変異体、類似体、突然変異タンパク質及び抗体に由来する結合化合物を含む。「リガンド」は、小分子、例えば、サイトカインのペプチド模倣体と抗体のペプチド模倣体をさらに含む。「活性化」は、内部メカニズム及び外部または環境因子によって調節される細胞活性化を指し得る。「応答／反応」、例えば、細胞、組織、器官又は生物の応答は、生化学的又は生理学的挙動（例えば、生物領域室内の濃度、密度、接着又は移動、遺伝子発現速度又は分化状態）の改変を含み、ここで、改変は、活性化、刺激又は治療に関連しており、又は、例えば、遺伝的プログラミングなどの内部メカニズムに関連している。
本明細書で使用されるように、任意の疾患又は病症の「治療」又は「医学的治療」という用語は、一実施形態において、疾患又は病症を改善する（即ち、疾患の進行又はその臨床的症状の少なくとも一つを遅らせるか、又は阻止するか、又は低減する）ことを指す。別の実施形態では、「治療」又は「医学的治療」は、患者が識別できない可能性のある物理的パラメータを含む、少なくとも一つの身体パラメータを軽減又は改善することを指す。別の実施形態では、「治療」又は「医学的治療」は、身体的（例えば、識別可能な症状の安定）、生理的（例えば、身体パラメータの安定）又はその両方において、疾患又は病症を調節することを指す。疾患の治療及び／又は予防を評価するための方法は、本明細書に明示的に記載されていない限り、通常、当分野で一般的に知られている。
「被験者」は、任意のヒト又は非ヒト動物を含む。「非ヒト動物」という用語は、全ての脊椎動物、例えば、非ヒト霊長類動物、ヒツジ、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ニワトリ、両生動物、爬虫動物などのような哺乳動物と非哺乳動物を含む。本明細書で使用されるように、「ｃｙｎｏ」又は「カニクイザル」という用語は、カニクイザルを指す。
一つ又は複数の他の治療剤の「併用」投与は、同時（共同）投与と任意の順序での連続投与を含む。
「治療有効量」、「治療有効用量」と「有効量」は、単独で又は他の治療薬物と組み合わせて細胞、組織又は被験者に投与される場合、本発明のＣＬＤＮ－１８．２抗体又はその抗原結合断片の、一つ又は複数の疾患もしくは病状の症状又は該疾患もしくは病状の進行を効果的に予防又は改善する量を指す。治療有効用量は、症状の改善を導くのに十分な抗体又はその抗原結合断片の量、例えば、関連する医学的病状を治療、治癒、予防又は改善するか、又はこのような病状の治療、治癒、予防又は改善の速度を向上させる量をさらに指す。個体に単独で投与される活性成分が投与される場合、治療有効用量は該成分のみを指す。組み合わせ投与の場合、治療有効用量は、組み合わせ、逐次投与、または同時投与にかかわらず、治療効果を導く活性成分の総合的な量を指す。治療剤の有効量は、診断基準又はパラメータを少なくとも１０％向上させることができ、通常、少なくとも２０％であり、好ましくは、少なくとも約３０％であり、さらに好ましくは、少なくとも４０％であり、最も好ましくは、少なくとも５０％である。
「癌」と「癌性」は、哺乳動物における、通常、細胞増殖が制御できないことを特徴とする生理学的疾患を指すか、又は記述する。この定義には、良性と悪性の癌及び休眠している腫瘍又は微小転移が含まれる。癌の例は、癌、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫、及び白血病を含むが、これらに限定されない。このような癌のより具体的な例は、扁平上皮癌、肺癌（小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺の腺癌、及び肺の扁平上皮癌を含む）、腹膜癌、肝細胞癌、胃の癌又は胃癌（胃腸癌を含む）、膵臓癌、膠芽細胞腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、ヘパトーマ（ｈｅｐａｔｏｍａ）、乳癌、結腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜又は子宮癌、唾液腺癌、腎臓癌または腎臓の癌、肝臓癌、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、肝臓の癌、及び様々なタイプの頭頸癌、及びＢ細胞リンパ腫（低悪性度／濾胞性非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、小リンパ球性（ＳＬ）ＮＨＬ、中悪性度／濾胞性ＮＨＬ、中悪性度びまん性ＮＨＬ、高悪性度免疫芽球性ＮＨＬ、高悪性度リンパ芽球性ＮＨＬ、高悪性度小型非切れ込み核細胞性ＮＨＬ、蓄積症（ｂｕｌｋｙ ｄｉｓｅａｓｅ）ＮＨＬ、マントル細胞リンパ腫、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、及びワルデンストレーム（Ｗａｌｄｅｎｓｔｒｏｍ）高ガンマグロブリン血症を含む）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、ヘアリー細胞白血病、慢性骨髄芽球性白血病と移植後リンパ増殖性障害（ＰＴＬＤ）、及び母斑症（ｐｈａｋｏｍａｔｏｓｅｓ）、浮腫（脳腫瘍に関連するものなど）とメイグス（Ｍｅｉｇｓ）症候群に関連する異常な血管増殖を含む。
抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体
一態様では、本発明は、抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体又はその抗原結合断片を提供する。「抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体」、「抗ＣＬＤＮ－１８．２」、「ＣＬＤＮ－１８．２抗体」又は「ＣＬＤＮ－１８．２に結合する抗体」という用語は、ＣＬＤＮ－１８．２を標的化する診断剤及び／又は治療剤として使用することができるように、十分な親和性でＣＬＤＮ－１８．２タンパク質又はその断片に結合することができる抗体を指す。
本発明の抗体は、抗体を産生するための任意の適切な方法を用いて産生され得る。任意の適切な形態のＣＬＤＮ－１８．２は、いずれも抗体を産生する免疫原（抗原）として使用することができる。限定ではなく例示により、任意のＣＬＤＮ－１８．２変異体又はその断片はいずれも免疫原として使用することができる。いくつかの実施形態では、マウスモノクローナル抗ヒトＣＬＤＮ－１８．２抗体を産生するハイブリドーマ細胞は、当分野でよく知られている方法によって産生し得る。げっ歯動物（例えばマウス）に由来する抗体は、インビボで治療薬物として使用される場合、望ましくない抗体免疫原性を引き起こす可能性があり、繰り返し使用すると、治療性抗体に対する免疫応答が人体に生じ、このような免疫応答は、少なくとも治療効果の喪失をもたらし、重篤な場合には潜在的に致死的なアレルギー反応を引き起こす。げっ歯動物抗体の免疫原性を低下させる一つの方法は、キメラ抗体の産生を含み、ここで、マウス可変領域をヒト定常領域と融合させる（Ｌｉｕら（１９８７）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８４：３４３９－４３）。しかしながら、キメラ抗体における完全なげっ歯動物可変領域の保存は、依然として、患者において有害な免疫原性を引き起こす可能性がある。げっ歯動物可変ドメインの相補的決定領域（ＣＤＲ）ループのヒトフレームワークへの移植（即ちヒト化）は、すでにげっ歯動物配列をさらに最小にするために用いられている（Ｊｏｎｅｓら（１９８６）Ｎａｔｕｒｅ ３２１：５２２、Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎら（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３９：１５３４）。
いくつかの実施形態では、本発明のキメラ又はヒト化抗体は、作製されたマウスモノクローナルハイブリドーマ抗体の配列に基づいて作製することができる。重鎖と軽鎖免疫グロブリンをコードするＤＮＡは、標的マウスハイブリドーマから得られ、且つ非マウス（例えば、ヒト）免疫グロブリン配列を含むように、標準的な分子生物学的技術を用いてエンジニアリングされる可能である。
いくつかの実施形態では、本発明に記載のキメラＣＬＤＮ－１８．２抗体は、当分野の既知の方法を用いてハイブリドーマ由来の免疫グロブリン重鎖と軽鎖可変領域をヒトＩｇＧ定常領域と効果的に連結して（例えば、Ｃａｂｉｌｌｙらの米国特許第Ｎｏ．４，８１６，５６７号を参照）、キメラ重鎖とキメラ軽鎖を得て作製することができる。いくつかの実施形態では、本発明のキメラ抗体に含まれる定常領域は、任意のヒトＩｇＧサブタイプ、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、好ましくは、ＩｇＧ４から選択されてもよい。
いくつかの実施形態では、本発明のキメラＣＬＤＮ－１８．２抗体は、キメラ軽鎖とキメラ重鎖の発現プラスミドが発現細胞を「混合及び一致」の形でトランスフェクトすることによって得ることができ、このような「混合及び一致」の抗体のＣＬＤＮ－１８．２結合は、上記結合アッセイと他の一般的な結合アッセイ（例えば、ＥＬＩＳＡ）で試験することができる。
本発明の前記抗体の可変領域ＣＤＲの正確なアミノ酸配列境界は、よく知られている多数のスキームのいずれかを用いて確定することができ、抗体の三次元構造とＣＤＲループのトポロジーに基づくＣｈｏｔｈｉａ（Ｃｈｏｔｈｉａら．（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ ３４２：８７７－８８３、Ａｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉら，「Ｓｔａｎｄａｒｄ ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｃａｎｏｎｉｃａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎｓ」，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，２７３，９２７－９４８（１９９７））、抗体配列可変性に基づくＫａｂａｔ（Ｋａｂａｔら，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，第４版，Ｕ．Ｓ． Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ（１９８７）），ＡｂＭ（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｂａｔｈ），Ｃｏｎｔａｃｔ（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｃｏｌｌｅｇｅ Ｌｏｎｄｏｎ），国際ＩｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓ ｄａｔａｂａｓｅ（ＩＭＧＴ）（１９９９ Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２７，２０９－２１２）、及び多数の結晶構造を利用する近傍伝播クラスタリング（ａｆｆｉｎｉｔｙ ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ）に基づくＮｏｒｔｈ ＣＤＲ定義を含む。本発明抗体のＣＤＲは、当業者により、当分野の任意のスキーム（例えば、異なる割り当てシステム又は組み合わせ）に基づいて境界を確定することができる。
注意すべきこととして、異なる割り当てシステムに基づいて得られた同一の抗体の可変領域のＣＤＲの境界は異なり得る。即ち、異なる割り当てシステムで定義された同一の抗体可変領域のＣＤＲ配列は異なる。そのため、本発明で定義された具体的なＣＤＲ配列で抗体を限定する場合、前記抗体の範囲は、以下のような抗体をさらにカバーしている。その可変領域配列が前記の具体的なＣＤＲ配列を含むが、異なるスキーム（例えば、異なる割り当てシステム又は組み合わせ）を適用したため、その記載されているＣＤＲ境界が本発明で定義された具体的なＣＤＲ境界と異なる。
異なる特異性（即ち、異なる抗原に対する異なる結合部位）を有する抗体は、異なるＣＤＲを有する。しかしながら、ＣＤＲは抗体間で異なるが、ＣＤＲ内には限られた数のアミノ酸位置のみが抗原結合に直接関与している。Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、ＡｂＭ、ＣｏｎｔａｃｔとＮｏｒｔｈ方法のうちの少なくとも二つを用いて、最小重複領域を確定することによって、抗原結合用の「最小結合単位」を提供することができる。最小結合単位はＣＤＲのサブパートであってもよい。当業者に明らかなように、抗体の構造とタンパク質の折り畳みによって、ＣＤＲ配列の他の部分の残基を確定することができる。そのため、本発明は、本明細書に提示される任意のＣＤＲの変異体も考慮する。例えば、一つのＣＤＲの変異体において、最小結合単位のアミノ酸残基は、そのままであってもよいが、Ｋａｂａｔ又はＣｈｏｔｈｉａに基づいて定義された他のＣＤＲ残基は、保存アミノ酸残基に置換されてもよい。
本発明に記載のヒト化抗体は、当分野の既知の方法を用いてマウスＣＤＲ領域をヒト生殖系列フレームワーク領域に挿入することができる。Ｗｉｎｔｅｒらの米国特許第Ｎｏ．５，２２５，５３９号及びＱｕｅｅｎらの米国特許第Ｎｏ．５，５３０，１０１、５，５８５，０８９、５，６９３，７６２と６，１８０，３７０号を参照する。
いくつかの実施形態では、アミノ酸変化は、アミノ酸欠失、挿入又は置換を含む。いくつかの実施形態では、本発明の抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体又はその抗原結合断片は、アミノ酸欠失、挿入又は置換により突然変異しているが、依然として上記抗体と（特に上記配列に記載されたＣＤＲ領域において）少なくとも約９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列を有する抗体を含む。いくつかの実施形態では、本発明の抗体は、具体的な配列に記載されたＣＤＲ領域と比較した場合、ＣＤＲ領域において、アミノ酸欠失、挿入又は置換により突然変異されたアミノ酸は、１、２、３、４又は５個以下である。
いくつかの実施形態では、本発明の抗体をコードするポリヌクレオチドは、ヌクレオチド欠失、挿入又は置換により突然変異しているが、依然として上記配列に記載されたＣＤＲに対応するコード領域と少なくとも約６０、７０、８０、９０、９５又は１００％の同一性を有するポリヌクレオチドを含む。
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される抗体のＦｃ領域に一つ又は複数のアミノ酸修飾を導入し、それによりＦｃ領域変異体を産生することができる。Ｆｃ領域変異体は、一つ又は複数のアミノ酸位置にアミノ酸修飾（例えば、置換）が含まれるヒトＦｃ領域配列（例えば、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４ Ｆｃ領域）を含んでもよい。
いくつかの実施形態では、システイン操作された抗体、例えば「チオＭＡｂ」を産生することが望ましい場合があり、ここで、抗体の一つ又は複数の残基がシステイン残基で置換されている。
いくつかの実施形態では、抗体は、そのグリコシル化の程度を増加又は減少させ、及び／又はそのグリコシル化パターンを改変するように改変され得る。抗体のグリコシル化部位への付加又は欠失は、一つ又は複数のグリコシル化部位を産生又は除去するようにアミノ酸配列を改変することによって容易に実現することができる。例えば、一つ又は複数のグリコシル化部位を除去するように一つ又は複数のアミノ酸置換を実施することによって、該部位でグリコシル化を除去することができる。改変されたタイプのグリコシル化を有する抗体、例えば、フコシル残基の量が減少した低もしくは非フコース化抗体又はバイセクティングＧｌｃＮａｃ構造が増加した抗体を作製することができる。このような改変されたグリコシル化パターンは、抗体のＡＤＣＣ能力を向上させることが立証されている。
いくつかの好適な実施形態では、本発明は、以下のような抗体を提供し、この抗体は、低フコシル化又は無フコシル化されているため、抗体とエフェクター細胞における発現受容体との結合親和性を有意に増加させることができ、それによって抗体が増強された抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）活性を有する。フコースの量は、ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ質量分析によって測定された、Ａｓｎ ２９７に連結される全ての糖構造（例えば、複合体化、ハイブリッド及び高マンノース構造）の合計に対して、Ａｓｎ２９７位置の糖鎖内のフコースの平均量を計算することによってフコースの量を確定することができ、例えば、ＷＯ２００８／０７７５４６に記載のとおりである。Ａｓｎ２９７は、Ｆｃ領域中の約位置２９７（Ｆｃ領域残基のＥＵ番号）に位置するアスパラギン酸残基を指し、しかしながら、抗体における微小な配列変化のため、Ａｓｎ２９７は、位置２９７の上流又は下流約±３個のアミノ酸位置、すなわち、位置２９４から３００に位置する場合もある。例えば、ＵＳ２００３／０１５７１０８；ＵＳ２００４／００９３６２１を参照されたい。このような抗体変異体は、脱フコシル化又は低フコシル化抗体を産生することができる細胞株で産生され得る。このような細胞の例は、タンパク質フコシル化を欠損しているＬｅｃｌ３ ＣＨＯ細胞を含む（Ｒｉｐｋａ，Ｊ．ら，Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．２４９（１９８６）：５３３－５４５、ＵＳ２００３／０１５７１０８。いくつかの実施形態では、フコシダーゼを用いて抗体のフコース残基を切除する。いくつかの実施形態では、糖質調節剤を用いて抗体のフコース残基を制御する。糖質調節剤は、上海奥浦邁生物科技株式会社から購入できるＣＤＦＳ０１であってもよい。脱フコシル化は、当分野でよく知られている一般的な方法で行うことができる。
抗体のフコシル化のレベルは、構造的に定義され得る。本明細書に記載したように、「非フコシル化」又は「無フコシル化されている」は、抗体において、フコースの含有量が５％未満、例えば、約０％であり、１％未満、２％未満、３％未満、４％未満であることを指す。「低フコシル化」という用語は、抗体において、フコースの含有量が約５％以上３０％未満であることを指し、例えば、抗体におけるフコースの含有量は、約５％～１０％、１０％～１５％、１５％～２０％、２０％～２５％、２５％～３０％、１０％～２０％、２０％～３０％、１０％～３０％である。「低フコシル化又は無フコシル化されている」という用語は、抗体におけるフコースの含有量が３０％未満であることを指す。
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される抗体は、当分野で知られており且つ容易に得られる他の非タンパク質部分を含むように、さらに修飾されてもよい。抗体誘導体化に適した部分は、水溶性ポリマーを含むが、それに限られない。水溶性ポリマーの非限定的な例として、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、エチレングリコール／プロピレングリコールポリマー、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリ－１，３－ジオキサン、ポリ－１，３，６－トリオキサン、エチレン／無水マレイン酸コポリマー、ポリアミノ酸（ホモポリマー又はランダムコポリマー）、及びデキストラン又はポリ（ｎ－ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、プロピレングリコールホモポリマー、ポリプロピレンオキシド／エチレンオキシドコポリマー、ポリオキシエチル化ポリオール（例えば、グリセロール）、ポリビニルアルコール及びそれらの混合物が挙げられるが、それらに限らない。
抗体発現
さらに別の態様では、本発明は、本明細書に記載の抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体又はその抗原結合断片をコードするポリヌクレオチドを提供する。前記ポリヌクレオチドは、抗体の軽鎖可変領域及び／又は重鎖可変領域のアミノ酸配列をコードするポリヌクレオチド、又は抗体の軽鎖及び／又は重鎖のアミノ酸配列をコードするポリヌクレオチドを含んでもよい。
さらに別の態様では、本発明は、本明細書に記載のポリヌクレオチドを含む発現ベクターを提供し、好ましくは、前記ベクターは真核発現ベクターである。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のポリヌクレオチドは一つ又は複数の発現ベクターに含まれる。
さらに別の態様では、本発明は、本明細書に記載のポリヌクレオチド又は本明細書に記載の発現ベクターを含む宿主細胞を提供し、好ましくは、前記宿主細胞は、真核細胞であり、さらに好ましくは、哺乳動物細胞である。
さらに別の態様では、本発明は、本明細書に記載の抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体又はその抗原結合断片を作製するための方法を提供し、前記方法は、前記抗体又はその抗原結合断片発現に適した条件で、本明細書に記載の宿主細胞で前記抗体又はその抗原結合断片を発現し、発現された抗体又はその抗原結合断片を前記宿主細胞から回収することを含む。
本発明は、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（ＡＴＣＣ）から入手可能な複数の不死化細胞株を含む、本発明の組換え抗体を発現するための哺乳動物宿主細胞を提供する。これらは、特にチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ＮＳ０、ＳＰ２／０細胞、ＨｅＬａ細胞、ベビーハムスター腎臓（ＢＨＫ）細胞、サル腎臓細胞（ＣＯＳ）、ヒト肝細胞癌細胞、Ａ５４９細胞、２９３Ｔ細胞及び多くの他の細胞株を含む。哺乳動物宿主細胞は、ヒト、マウス、ラット、イヌ、サル、ブタ、ヤギ、ウシ、ウマとハムスター細胞を含む。特に好ましい細胞株は、どの細胞株が高い発現レベルを有するかを測定することによって選択される。
一実施形態では、本発明は、抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体を作製する方法を提供し、ここで、前記方法は、発現ベクターを哺乳動物宿主細胞に導入する時、宿主細胞内での抗体の発現を可能にするか、又はより好ましくは宿主細胞が増殖する培地中に抗体を分泌させることを可能にするように、宿主細胞を十分な時間培養して、抗体を産生することを含む。抗体は、標準タンパク質精製方法を用いて培地から回収することができる。
異なる細胞系により発現されるか、又はトランスジェニック動物において発現される抗体は、互いに異なるグリコシル化を有する可能性が高い。しかしながら、本明細書による核酸分子によってコードされるか、又は本明細書によるアミノ酸配列を含む全ての抗体は、抗体のグリコシル化にかかわらず、本発明の構成要素である。同様に、いくつかの実施形態では、非フコシル化抗体は、有利であり、これは、それらが、通常、インビトロとインビボにおいてそのフコシル化対応物よりも強力な効力を有し、それらの糖構造が天然ヒト血清ＩｇＧの正常な成分であるので、免疫原性である可能性が低いためである。
薬物組成物と薬物製剤
さらに別の態様では、本発明は、本明細書に記載の抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体又はその抗原結合断片、本明細書に記載のポリヌクレオチド、本明細書に記載の発現ベクター、本明細書に記載の宿主細胞、及び薬学的に許容されるベクター又は賦形剤を含む薬物組成物を提供する。
理解すべきこととして、本発明による抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体又はその薬物組成物は、製剤における適切なベクター、賦形剤及び他の試薬と組み込んで併用投与することによって、改善された転移、送達、耐性などを提供することができる。
「薬物組成物」という用語は、それに含まれる活性成分が生物学的に有効な形態で存在することを可能にし、前記製剤が投与される被験者に対して許容されない毒性を有する他の成分を含まない製剤を指す。
本明細書に記載の抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体を含む薬物製剤は、所望の純度を有する本発明の抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体を、一つ又は複数の任意選択的な医薬的アジュバント（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，第１６版，Ｏｓｏｌ，Ａ．による編集（１９８０））と混合することによって、好ましくは、水溶液又は凍結乾燥製剤の形態で作製することができる。
本発明の薬物組成物又は製剤は、治療される特定の適応症に必要とされる一つ又は複数の他の活性成分をさらに含んでもよく、好ましくは、互いに悪影響を及ぼしない、相補的活性を有するそれらの活性成分を有する。いくつかの実施形態では、他の活性成分は、化学療法剤、免疫チェックポイント阻害剤、増殖阻害剤、抗生物質、または既知の種々の抗腫瘍剤または抗癌剤であり、前記活性成分は、意図する目的に有効な量で組み合わせて適切に存在する。いくつかの実施形態では、本発明の薬物組成物は、抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体をコードするポリヌクレオチドの組成物をさらに含む。
さらに別の態様では、本発明は、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合断片、本明細書に記載のポリヌクレオチド、本明細書に記載の発現ベクター、本明細書に記載の宿主細胞、又は本明細書に記載の薬物組成物、及び一つ又は複数の別の治療剤を含む薬物組み合わせを提供する。
さらに別の態様では、本発明は、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合断片、本明細書に記載のポリヌクレオチド、本明細書に記載の発現ベクター、本明細書に記載の宿主細胞、又は本明細書に記載の薬物組成物を含むキットを提供し、好ましくは、投与装置をさらに含む。
医薬用途
さらに別の態様では、本発明は、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合断片、本明細書に記載のポリヌクレオチド、本明細書に記載の発現ベクター、本明細書に記載の宿主細胞、又は本明細書に記載の薬物組成物の、ＣＬＤＮ－１８．２により媒介される疾患又は病症を治療及び／又は予防するための薬物の作製における用途を提供し、好ましくは、前記疾患又は病症は癌である。
さらに別の態様では、本発明は、ＣＬＤＮ－１８．２により媒介される疾患又は病症を治療及び／又は予防するための、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合断片、本明細書に記載のポリヌクレオチド、本明細書に記載の発現ベクター、本明細書に記載の宿主細胞、又は本明細書に記載の薬物組成物を提供し、好ましくは、前記疾患又は病症は癌である。
さらに別の態様では、本発明は、ＣＬＤＮ－１８．２により媒介される疾患又は病症を治療及び／又は予防する方法を提供し、それを必要とする被験者に、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合断片、本明細書に記載のポリヌクレオチド、本明細書に記載の発現ベクター、本明細書に記載の宿主細胞、又は本明細書に記載の薬物組成物を投与することを含み、好ましくは、前記疾患又は病症は癌である。
いくつかの実施形態では、前記癌は、胃癌、食道癌、胃食道癌、膵臓癌、胆管癌、肺癌、卵巣癌、結腸癌、肝臓癌、頭頸癌、胆嚢癌、腸癌と膀胱癌から選択される。
いくつかの実施形態では、本発明の投与方式は、経口投与、静脈内投与、皮下投与、筋肉内投与、動脈内投与、関節内投与（例えば、関節炎関節における）、吸入による投与、エアロゾル送達又は腫瘍内投与などを含むが、これらに限定されない。
いくつかの実施形態では、本発明は、治療有効量で被験者に併用投与される一つ又は複数の療法（例えば、治療方式及び／又は他の治療剤）を提供する。いくつかの実施形態では、前記療法は、手術治療及び／又は放射線療法を含む。
いくつかの実施形態では、本発明による方法又は用途は、個体に一つ又は複数の療法（例えば、治療方式及び／又は他の治療剤）を投与することをさらに含む。本発明の抗体は、単独で、又は療法における他の治療剤と組み合わせて使用することができる。例えば、少なくとも一つの他の治療剤と共投与することができる。例えば、ＰＤ－１抗体、ＰＤ－Ｌ１抗体、ＬＡＧ－３抗体及び／又はＣＴＬＡ－４抗体である。
一実施形態では、本発明の癌疾患の治療方法は、ＣＬＤＮ－１８．２の発現を安定化又は増加するための薬剤を投与することをさらに含む。ＣＬＤＮ－１８．２は、好ましくは、癌細胞の細胞表面に発現される。ＣＬＤＮ－１８．２の発現を安定化又は増加するための薬剤は、オキサリプラチン及び／又は５－ＦＵであってもよい。
診断と検出のための方法
さらに別の態様では、本発明は、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合断片を用いて、試料中のＣＬＤＮ－１８．２の存在を検出する方法を提供する。「検出」という用語は、本明細書に使用される場合、定量的又は定性的な検出を含む。いくつかの実施形態では、前記試料は生物学的試料である。いくつかの実施形態では、生物学的試料は、血、血清又は生物由来の他の液体試料である。いくつかの実施形態では、生物学的試料は、細胞又は組織を含む。
本発明は、列挙された特定の実施形態の全ての組み合わせを含む。本発明のさらなる実施形態及び適用可能性の完全な範囲は、以下に提供される詳細な説明から明らかになるであろう。しかしながら、詳細な説明及び特定の実施例は、本発明の好ましい実施形態を示しているが、本発明の精神及び範囲内の様々な変更及び修正がこの詳細な説明から当業者に明らかになるので、あくまで例示としてこれらの説明及び実施例を提供することを理解すべきである。引用文献を含めて本明細書に引用された全ての刊行物、特許、及び特許出願は、全ての目的のために、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
実施例
以下の実施例は、本発明のいくつかの好ましい実施形態と態様を証明し、さらに説明するために提供され、その範囲を限定するものと解釈されるべきではない。
実施例１、抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体を作製するための組換えタンパク質ヒトＣＬＤＮ－１８．２（ｈＣＬＤＮ－１８．２）の作製
ヒトＣＬＤＮ－１８遺伝子ｃＤＮＡ配列を含むプラスミドＨＧ２００４７－Ｕを義翹神州社から購入し、フォワードプライマーの５’－ＧＴＡＣｇｃｔａｇｃｃａｃｃＴｇａａｇａｇｃｇｇａｔｃｃｇｃｔｃｔｔｃｔＴＧＣＣＣＴＧＡＡＡＴＧＣＡＴＣＣＧＣＡＴＴＧＧＣＡＧＣ－３’とリバースプライマーの５’－ＧＡＴＣｇｃｇｇｃｃｇｃｃｃｔｇｃａｇｇＴＴＡＣＡＣＡＴＡＧＴＣＧＴＧＣＴＴＧＧＡＡＧＧＡＴＡＡＧ－３’を用いたＰＣＲにより、ヒトＣＬＤＮ－１８の一部の遺伝子断片を増幅した。増幅された断片をＮｈｅＩとＳｂｆＩによりダブルダイジェストした後、真核発現プラスミド系（ＨＸＰ）にクローニングして、構築体ＨＸＰ－ＣＬＤＮ１８Ｐを得た。南京金斯瑞社に送ってｈＣＬＤＮ－１８．２の一部の遺伝子配列を遺伝子合成し、ＢＳＰＱＩダイジェストによって遺伝子配列をＨＸＰ－ＣＬＤＮ１８Ｐクローニングして、最終的に構築体ＨＸＰ－ｈＣＬＤＮ－１８．２を得た。
実施例２、マウスハイブリドーマ細胞の作製
２．１、免疫動物
実施例１で得られたＨＸＰ－ｈＣＬＤＮ－１８．２を等量の免疫アジュバント（フロインドアジュバント）と混合し、生後８週間の雌ＢＡＬＢ／ｃマウス５匹を取って、筋肉内注射免疫を行った。初回免疫には、マウス１匹あたり１００μｇのＤＮＡプラスミドを用いた。その後、マウス１匹あたり５０μｇのＤＮＡプラスミドを用いて、２週間ごとまたは３週間ごとに強化免疫を合計５回行った。最後の強化免疫において、ＣＬＤＮ－１８．２を過剰発現する安定化ＣＨＯ細胞を重ねて用い、１ｅ＋７細胞を各マウスに腹腔内注射した。
２．２、細胞融合
最後の強化免疫の４日間後、マウスの鼠径リンパ節、膝窩リンパ節及び脾臓を取り、ＤＭＥＭ培地で粉砕した後、リンパ球の豊富な懸濁液を取り、一般的なエレクトロポレーションによってそれをマウス骨髄腫細胞Ｓｐ２／０（ＡＴＣＣ）と融合させた。融合生成物を１：５０ ＨＡＴ（ヒポキサンチン、メトトレキサート、及びチミジン）含有のＤＭＥＭ完全培地で５日間培養して、融合に成功した細胞（即ち、ハイブリドーマ細胞）をスクリーニングした。そして、スクリーニングが終了したまで、１：５０ ＨＴ（ヒポキサンチンとチミジン）含有のＤＭＥＭ完全培地に交換した。
ＤＭＥＭ完全培地の配合比率は、１５％ＦＢＳ（ウシ胎児血清）＋１：５０ Ｌ－グルタミン＋１００Ｕ／ｍＬストレプトマイシン＋１：１００ ＯＰＩ（オキサロ酢酸、ピルビン酸及びインスリン）であり、培養箱条件は８％ ＣＯ２、３７℃であった。
実施例３、マウスハイブリドーマ細胞のスクリーニング及び得られた抗ＣＬＤＮ－１８．２マウス抗体の性能検出
３８４０株の異なるポリクローナルハイブリドーマ細胞株から、ヒトＣＬＤＮ－１８．２タンパク質に結合できるが、ヒトＣＬＤＮ１８．１タンパク質に結合しない抗体を発現するハイブリドーマ細胞株を、細胞レベルの結合反応に基づいてスクリーニングした。サブクローニングによりモノクローナルハイブリドーマ細胞株を得た後、インビトロＡＤＣＣとＣＤＣに基づいて機能性スクリーニングを行い、最終的には７株のモノクローナルハイブリドーマ細胞株を得て、対応して発現する抗体１Ｈ１７、２Ｂ１９、４Ｇ３、９Ｊ２４、９Ｏ２４、１０Ｌ８と１０Ｎ１０は、ヒトＣＬＤＮ－１８．２組換えタンパク質に特異的に結合するが、ヒトＣＬＤＮ－１８．１組換えタンパク質に結合せず、高いＡＤＣＣとＣＤＣ活性を有する。
実施例４、抗ＣＬＤＮ－１８．２マウス抗体の可変領域配列のアッセイ（Ｋａｂａｔ又はＩＭＧＴに基づいて表される）
縮重プライマーＰＣＲに基づく方法を用いて、抗ＣＬＤＮ－１８．２マウス抗体の可変領域に対応するＤＮＡコード配列を測定した。候補ハイブリドーマ細胞を培養し、１０００ｒｐｍで遠心して細胞を収集し、Ｔｒｉｚｏｌで総ＲＮＡを抽出した。これをテンプレートとして第１鎖ｃＤＮＡを合成し、その後に第１鎖ｃＤＮＡを後続テンプレートとして、対応する可変領域ＤＮＡコード配列をＰＣＲ増幅した。増幅反応に使用されるプライマー配列、抗体の可変領域の第１のフレームワーク領域及び定常領域と相補的である（Ｌａｒｒｉｃｋ，Ｊ．Ｗ．ら，１９９０，Ｓｃａｎｄ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，３２，１２１－１２８とＣｏｌｏｍａ，Ｊ．Ｊ．ら，（１９９１）ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，１１，１５２－１５６）。５０μｌの反応系に、それぞれｃＤＮＡ １μｌ、１０×ＰＣＲ緩衝液５μｌ、上流及び下流プライマーそれぞれ１μｌ（２５ｐｍｏｌ）、ｄＮＴＰ １μｌ、２５ｍｍｏｌ ＰＬ ＭｇＣｌ２ １μｌ、Ｈ２Ｏ ３９μｌを加え、９５℃で１０ｍｉｎ予備変性し、Ｔａｑ酵素１μｌを加え、温度サイクルに入り、ＰＣＲ増幅を行った。反応条件として、９４℃で１ｍｉｎ変性し、５８℃で１ｍｉｎアニーリングし、７２℃で１５ｓ延伸し、合計３２サイクル後に、７２℃で１０ｍｉｎ保温した。ＰＣＲ生成物を回収し、精製した。増幅生成物をシーケンシングし、抗ＣＬＤＮ－１８．２マウス抗体の重鎖可変領域と軽鎖可変領域のアミノ酸配列を得た。
ＮＣＢＩ Ｉｇ－Ｂｌａｓｔ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｐｒｏｊｅｃｔｓ／ｉｇｂｌａｓｔ／）を用いて、生殖系列と再構成Ｉｇ可変領域配列データベースから共有配列を検索した。Ｋａｂａｔ（Ｗｕ，Ｔ．Ｔ及びＫａｂａｔ，Ｅ．Ａ．１９７０ Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１３２：２１１－２５０）及びＩＭＧＴ系（Ｌｅｆｒａｎｃ Ｍ．－Ｐ．ら，１９９９ Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２７，２０９－２１２）に基づいて、配列解析及びインターネットに基づく配列分析（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．Ｉｍｇｔ．ｏｒｇ／ＩＭＧＴ＿ｖｑｕｅｓｔ／ｓｈａｒｅ／ｔｅｘｔｅｓ／ｉｎｄｅｘ．ｈｔｍｌとｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｉｇｂｌａｓｔ／）により、相補的決定領域（ＣＤＲ）アミノ酸配列を確定した。
抗ＣＬＤＮ－１８．２マウス抗体の軽鎖と重鎖可変領域及びＣＤＲのアミノ酸配列は、以下の表に示される：
実施例５、抗ＣＬＤＮ－１８．２キメラ抗体の構築
ハイブリドーマ細胞により発現された抗体の発現量、活性、タイプなどを考慮して、抗ＣＬＤＮ－１８．２マウス抗体１Ｈ１７、１Ｈ１７－２、２Ｂ１９、４Ｇ３、９Ｊ２４と９Ｏ２４を選択して行い続けた。
ヒト血細胞（北京血液研究所から）から重鎖定常領域Ｆｃと軽鎖定常領域κのコード配列をクローニングし、ｐＣＤＮＡ３．１プラスミドに導入した。前述抗ＣＬＤＮ－１８．２マウス抗体の重鎖と軽鎖可変領域のコード配列はＧｅｎｓｃｒｉｐｔ社により合成されるものである。様々な抗ＣＬＤＮ－１８．２マウス抗体の重鎖可変領域コード配列と軽鎖可変領域コード配列をＢｓｐｑ Ｉダイジェストした後、表２に示される様々な組み合わせを用いて、定常領域コード配列が導入されたｐＣＤＮＡ３．１プラスミドに導入し、シーケンシングによって正確なクローンを確定した。様々なキメラ重鎖と軽鎖発現プラスミドを混合しトランスフェクト発現細胞と対合し、５つの抗ＣＬＤＮ－１８．２キメラ抗体を得て、その番号と対応する可変領域アミノ酸配列は、具体的には表２に示されるとおりである。後続の実験材料は、いずれもこの一連のプラスミドによってトランスフェクトされた細胞から抽出して得られた。
実施例６、キメラ抗体の検出
６．１抗体結合親和性：
ヒトＣＬＤＮ－１８．２を過剰発現する胃癌細胞株ＮＵＧＣ４－ＣＬＤＮ－１８．２細胞を、一連の濃度に段階希釈した前述抗ＣＬＤＮ－１８．２キメラ抗体Ｃｈｉ－ＪＳ０１２－２、Ｃｈｉ－ＪＳ０１２－９、Ｃｈｉ－ＪＳ０１２－１０、Ｃｈｉ－ＪＳ０１２－２１及びＣｈｉ－ＪＳ０１２－２７とそれぞれ４℃で３０ｍｉｎインキュベートし、そして、洗浄し、蛍光標識された二次抗体と共にインキュベートした。最後に、ＢＤ ＣａｎｔｏＩＩフローサイトメトリーで蛍光強度を検出した。蛍光シグナルが強いほど、抗体と標的との親和性が高いことを示す。ＧｒａｐｈＰａｄによって、抗体用量依存性結合グラフ（図１）をフィッティングし、ＥＣ５０（表３）を計算し、陽性対照と陰性対照は、それぞれＩＭＡＢ３６２と抗ＫＬＨ ｈｕ－ＩｇＧ１抗体である。
図１と表３に示されるように、Ｃｈｉ－ＪＳ０１２－２、Ｃｈｉ－ＪＳ０１２－９、Ｃｈｉ－ＪＳ０１２－１０、Ｃｈｉ－ＪＳ０１２－２１とＣｈｉ－ＪＳ０１２－２７は、いずれも胃癌細胞株ＮＵＧＣ４－ＣＬＤＮ－１８．２細胞表面に高発現しているヒトＣＬＤＮ－１８．２に結合することができる。
６．２抗体依存性細胞媒介性細胞傷害作用（ＡＤＣＣ）：
一連の濃度に段階希釈された前述抗ＣＬＤＮ－１８．２キメラ抗体Ｃｈｉ－ＪＳ０１２－２、Ｃｈｉ－ＪＳ０１２－９、Ｃｈｉ－ＪＳ０１２－１０、Ｃｈｉ－ＪＳ０１２－２１とＣｈｉ－ＪＳ０１２－２７を、それぞれ、ヒトＣＬＤＮ－１８．２を過剰発現する標的細胞ＣＨＯ－ＣＬＤＮ－１８．２（５００００個の細胞）、及びＮＦＡＴ－ＬｕｃとＦｃγＲＩＩＩａＲを発現するエフェクター細胞Ｊｕｒｋａｔ ＡＤＣＣ（１０００００個の細胞）と共に、３７℃で６ｈインキュベートし、そして、基質ｏｎｅ－ｇｌｏを加え、マイクロプレートリーダーでルシフェラーゼシグナルを検出した。蛍光読み取り値が高いほど、ＡＤＣＣ効果が強いことを示す。ＧｒａｐｈＰａｄによって抗体用量依存性ＡＤＣＣ効果グラフ（図２ａと２ｂ）をフィッティングし、陽性対照と陰性対照は、それぞれＩＭＡＢ３６２と抗ＫＬＨ ｈｕ－ＩｇＧ１抗体である。
図２ａと２ｂに示されるように、Ｃｈｉ－ＪＳ０１２－２、Ｃｈｉ－ＪＳ０１２－９、Ｃｈｉ－ＪＳ０１２－１０、Ｃｈｉ－ＪＳ０１２－２１とＣｈｉ－ＪＳ０１２－２７により媒介されたＡＤＣＣ効果のＥＣ５０値は、それぞれ５６．０８ｎｇ／ｍＬ、４３．６ｎｇ／ｍＬ、４９．５１ｎｇ／ｍＬ、６３．０９ｎｇ／ｍＬと４３．２１ｎｇ／ｍＬであり、陽性対照ＩＭＡＢ３６２（図２ａ：３５．９８、図２ｂ：３４．４１ｎｇ／ｍＬ）と同等であった。
６．３補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）：
ヒトＣＬＤＮ－１８．２を過剰発現する標的細胞ＣＨＯ－ＣＬＤＮ－１８．２細胞（１０００００個の細胞）を、一連の濃度に段階希釈された前述抗ＣＬＤＮ－１８．２キメラ抗体Ｃｈｉ－ＪＳ０１２－２、Ｃｈｉ－ＪＳ０１２－９、Ｃｈｉ－ＪＳ０１２－１０及びＣｈｉ－ＪＳ０１２－２７とそれぞれ混合し、十倍希釈された補体血清（Ｑｕｉｄｅｌ、ｃａｔ＃ Ａ１１３）を加え、そして３７℃で１ｈインキュベートした。最後に、ＰＢＳで細胞を再懸濁し、ＰＩ染料を加え、４℃で５ｍｉｎインキュベートした後に、ＢＤ ＣａｎｔｏＩＩフローサイトメトリーで蛍光強度を検出した。ＧｒａｐｈＰａｄによって抗体用量依存性補体殺傷グラフ（図３）をフィッティングした。陽性対照と陰性対照は、それぞれＩＭＡＢ３６２と抗ＫＬＨ ｈｕ－ＩｇＧ１抗体である。
図３に示されるように、Ｃｈｉ－ＪＳ０１２－２、Ｃｈｉ－ＪＳ０１２－９、Ｃｈｉ－ＪＳ０１２－１０とＣｈｉ－ＪＳ０１２－２７により媒介されたＣＤＣ効果のＥＣ５０値は、それぞれ４６１．２ｎｇ／ｍＬ、３１６ｎｇ／ｍＬ、３５８．３ｎｇ／ｍＬと２６４．５ｎｇ／ｍＬであり、陽性対照ＩＭＡＢ３６２（３５３．６ｎｇ／ｍＬ）と同等であった。
実施例７、抗体可変領域のヒト化改変
抗体の免疫原性を低下させるなどの目的のために、抗体可変領域に対してヒト化改変最適化を行い、最適化結果は以下のとおりである：
それによって、一連のヒト化抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体を得た。
ヒト化抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体ＪＳ０１２－Ｃｈｉ９－ｈｕ７、ＪＳ０１２－Ｃｈｉ９－ｈｕ７－ｖ２、ＪＳ０１２－Ｃｈｉ２７－ｈｕ３－ｖ２、ＪＳ０１２－Ｃｈｉ２７－ｈｕ６－ｖ３－２とＪＳ０１２－Ｃｈｉ２－ｈｕ２－ｖ３－２を用いて後続の実験を行った。上記抗体のＣＤＲ／可変領域配列は表４－１と４－２に示されるとおりであり、重／軽鎖のアミノ酸配列とヌクレオチドコード配列は表５に示されるとおりである。
ヒト化抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体の重鎖と軽鎖可変領域コード配列は、Ｇｅｎｓｃｒｉｐｔ社により合成され、様々な合成されたヒト化抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体の重鎖可変領域コード配列と軽鎖可変領域コード配列を、Ｂｓｐｑ Ｉによりダイジェストした後に定常領域コード配列を含んでいるｐＣＤＮＡ３．１プラスミドに導入し、シーケンシングによって正確なクローンを確定した。様々なヒト化重鎖と軽鎖発現プラスミドを混合し、トランスフェクト発現細胞（ＣＨＯＫ１ １８、蘇州君盟）と対合し、発現された抗体を遠心回収した後に、一般的な方法で抗体精製を行い、表４－１及び４－２におけるヒト化抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体を得た。
ここで、細胞培養において糖質調節剤（ＣＤＦＳ０１、上海奥浦邁生物科技株式会社）を加えることによって、ヒト化抗体ＪＳ０１２－Ｃｈｉ２－ｈｕ２－ｖ３－２に対してプロセス最適化を行い、脱フコース化抗体ＪＳ０１２－Ｃｈｉ２－ｈｕ２－ｖ３－２ａを得た。抗体ＪＳ０１２－Ｃｈｉ２－ｈｕ２－ｖ３－２ａは、フコース化が３０％未満のト化抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体である。
実施例８、ヒト化抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体の検出
抗体と細胞表面に発現されているＣＬＤＮ－１８．２との結合の活性をＦＡＣＳで検出することによって、５つのヒト化抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体ＪＳ０１２－Ｃｈｉ９－ｈｕ７、ＪＳ０１２－Ｃｈｉ９－ｈｕ７－ｖ２、ＪＳ０１２－Ｃｈｉ２７－ｈｕ３－ｖ２、ＪＳ０１２－Ｃｈｉ２７－ｈｕ６－ｖ３－２とＪＳ０１２－Ｃｈｉ２－ｈｕ２－ｖ３－２の結合活性を検出した。ＮＵＧＣ４－ＣＬＤＮ－１８．２細胞を、段階希釈された、異なる濃度の前述ヒト化抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体と共にインキュベートし、そして、洗浄し、蛍光標識された二次抗体と共にインキュベートした。ＦＡＣＳによって蛍光シグナルを検出し、検出された蛍光シグナルが強いほど、抗体親和性が高く、即ち、標的結合活性が高いことを示す。ＧｒａｐｈＰａｄによって抗体結合グラフ（図４ａ、４ｂと４ｃ）をフィッティングし、陽性対照と陰性対照は、それぞれＩＭＡＢ３６２と抗ＫＬＨ ｈｕ－ＩｇＧ１抗体である。
図４ａ、４ｂと４ｃに示されるように、ＪＳ０１２－Ｃｈｉ９－ｈｕ７－ｖ２、ＪＳ０１２－Ｃｈｉ９－ｈｕ７、ＪＳ０１２－Ｃｈｉ２７－ｈｕ３－ｖ２、ＪＳ０１２－Ｃｈｉ２－ｈｕ２－ｖ３－２とＪＳ０１２－Ｃｈｉ２７－ｈｕ６－ｖ３－２は、いずれも胃癌細胞株ＮＵＧＣ４細胞表面に高発現しているヒトＣＬＤＮ－１８．２に結合することができ、ここで、ＪＳ０１２－Ｃｈｉ９－ｈｕ７－ｖ２、ＪＳ０１２－Ｃｈｉ９－ｈｕ７、ＪＳ０１２－Ｃｈｉ２７－ｈｕ３－ｖ２とＪＳ０１２－Ｃｈｉ２－ｈｕ２－ｖ３－２のＥＣ５０は、陽性対照と同等であった。
実施例９、ヒト化抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体のＡＤＣＣ
ヒト化抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体は、ヒトＩｇＧ１サブタイプであり、ＡＤＣＣ効果を媒介することができ、抗体Ｆｃ端がＮＫ細胞表面のＦｃγＩＩＩａＲ受容体に結合し、ＮＫ細胞を活性化して標的細胞を殺傷した。ＦｃγＩＩＩａＲを発現するＮＦＡＴ通路ルシフェラーゼ系を利用し、レポーター遺伝子系によってインビボＡＤＣＣ効果を模倣した。ヒト化抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体を、標的細胞ＣＨＯ－ＣＬＤＮ－１８．２細胞及びＪｕｒｋａｔ ＡＤＣＣエフェクター細胞と共にインキュベートし、基質ｏｎｅ－ｇｌｏを加えた後に、マイクロプレートリーダーでシグナルを検出した。ＧｒａｐｈＰａｄでデータを分析し、用量依存性抗体のＡＤＣＣ効果（図５ａ、５ｂと５ｃ）を比較した。陽性対照と陰性対照は、それぞれＩＭＡＢ３６２と抗ＫＬＨ ｈｕ－ＩｇＧ１抗体である。
図５ａ、５ｂと５ｃに示されるように、ＪＳ０１２－Ｃｈｉ９－ｈｕ７－ｖ２、ＪＳ０１２－Ｃｈｉ９－ｈｕ７、ＪＳ０１２－Ｃｈｉ２７－ｈｕ３－ｖ２、ＪＳ０１２－Ｃｈｉ２－ｈｕ２－ｖ３－２とＪＳ０１２－Ｃｈｉ２７－ｈｕ６－ｖ３－２により媒介されたＡＤＣＣ効果のＥＣ５０値は、それぞれ２２．５ｎｇ／ｍＬ、２３．６３ｎｇ／ｍＬ、３５．７５ｎｇ／ｍＬ、１４．１８ｎｇ／ｍＬと７４．２４ｎｇ／ｍＬであり、いずれも陽性対照ＩＭＡＢ３６２よりもはるかに高かった。
実施例１０、ヒト化抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体のＣＤＣ
ヒト化抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体は、さらに、ＣＤＣ効果を媒介し、膜侵襲複合体を形成することによって標的細胞を殺傷することができる。補体血清（１：１０希釈）を、ヒト化抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体及び標的細胞ＣＨＯ－ＣＬＤＮ－１８．２（１０００００個の細胞）と共に、３７℃で培養箱において１ｈインキュベートし、よう化プロピジウム（ＰＩ）染色によって標的細胞の生存殺傷状況を検出し、相対的な殺傷率を計算した。ヒト化抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体の用量依存性ＣＤＣ効果は、相対的な殺傷率で反映される（図６ａ、６ｂと６ｃ）。陽性対照と陰性対照は、それぞれＩＭＡＢ３６２と抗ＫＬＨ ｈｕ－ＩｇＧ１抗体である。
図６ａ、６ｂと６ｃに示されるように、ＪＳ０１２－Ｃｈｉ９－ｈｕ７－ｖ２、ＪＳ０１２－Ｃｈｉ９－ｈｕ７、ＪＳ０１２－Ｃｈｉ２７－ｈｕ３－ｖ２、ＪＳ０１２－Ｃｈｉ２－ｈｕ２－ｖ３－２とＪＳ０１２－Ｃｈｉ２７－ｈｕ６－ｖ３－２により媒介されたＣＤＣ効果のＥＣ５０値は、それぞれ１３４．２ｎｇ／ｍＬ、８６．０４ｎｇ／ｍＬ、１６８．９ｎｇ／ｍＬ、１６６．５ｎｇ／ｍＬと７１４．９ｎｇ／ｍＬであり、ここで、ＪＳ０１２－Ｃｈｉ９－ｈｕ７－ｖ２、ＪＳ０１２－Ｃｈｉ９－ｈｕ７、ＪＳ０１２－Ｃｈｉ２７－ｈｕ３－ｖ２とＪＳ０１２－Ｃｈｉ２－ｈｕ２－ｖ３－２は、陽性対照ＩＭＡＢ３６２よりもはるかに優れていた。
実施例１１：Ｍ－ＮＳＧマウス移植ヒト胃癌ＭＫＮ４５ ｈＣｌａｕｄｉｎ１８．２ Ｍｉｘｅｎｏ腫瘍増殖に対するヒト化抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体の阻害作用
１．試験目的
本発明のＪＳ０１２－Ｃｈｉ２－ｈｕ２ ｖ３－２ａの、ヒト胃癌ＭＫＮ４５ ｈＣｌａｕｄｉｎ１８．２ Ｍｉｘｅｎｏ皮下移植モデルにおける抗腫瘍作用を評価する。
２．試験過程
５×１０６個のＭＫＮ４５ ｈＣｌａｕｄｉｎ１８．２腫瘍細胞（上海諾百生物）を、５×１０６個のＰＢＭＣ細胞（上海澳能生物）と混合し、０．２ｍｌ／匹（細胞と５０％のマトリゲルを含む培地ＲＰＭＩ１６４０（Ｇｉｂｃｏ））で、Ｍ－ＮＳＧマウス（上海南方模式生物科学技術株式会社）の右背部に皮下接種し、体重に応じて、５０匹を選択し、各グループに１０匹、合計５グループにランダムに分け、それぞれ、
Ａｎｔｉ－ＫＬＨ ｈＩｇＧ１陰性対照群、１０ｍｇ／ｋｇ、
ＪＳ０１２－Ｃｈｉ２－ｈｕ２ ｖ３－２ａ治療群、１ｍｇ／ｋｇ、
ＪＳ０１２－Ｃｈｉ２－ｈｕ２ ｖ３－２ａ治療群、３ｍｇ／ｋｇ、
ＪＳ０１２－Ｃｈｉ２－ｈｕ２ ｖ３－２ａ治療群、１０ｍｇ／ｋｇ、
ＩＭＡＢ３６２陽性対照群、１０ｍｇ／ｋｇである。
グループ分けの当日に腫瘍細胞を接種した後４ｈに投与し、全てのグループの投与経路はいずれも腹腔内注射であり、週に２回、連続して９回投与し、最後の投与の３日間後に実験を終了した。腫瘍体積及び体重を週に２回測定し、マウス体重と腫瘍体積を記録した。実験終了時に、マウスを安楽死させ、腫瘍阻害率ＴＧＩ％（ＴＧＩ ％＝［１－Ｔ／Ｃ］×１００％）を計算した。（Ｔ：治療群又は陽性対照群の実験終了時点における腫瘍体積平均値、Ｃ：陰性対照群の実験終了時点における腫瘍体積平均値）。
図７に示されるように、実験終了時点に、ａｎｔｉ－ＫＬＨ ｈＩｇＧ１陰性対照群の平均腫瘍体積は１２７６±２２８ｍｍ３であった。ＪＳ０１２－Ｃｈｉ２－ｈｕ２ａ ｖ３－２は、１、３と１０ｍｇ／ｋｇの用量条件で、平均腫瘍体積がそれぞれ２３５±２５ｍｍ３、２４３±３３ｍｍ３と３４３±６３ｍｍ３であり、ＴＧＩがそれぞれ８１．６％、８１．０％と７３．１％であり、有意な腫瘍抑制作用を示した。ＩＭＡＢ３６２は、１０ｍｇ／ｋｇの用量で、平均腫瘍体積が３６１±７３ｍｍ３であり、ＴＧＩが７１．７％であった。同じ用量条件（１０ｍｇ／ｋｇ）で、ＪＳ０１２－Ｃｈｉ２－ｈｕ２ ｖ３－２ａの腫瘍抑制作用は、ＩＭＡＢ３６２よりやや優れていた。
実施例１２：ＣＢ－１７ ＳＣＩＤマウス移植ヒト膵臓癌ｈＣＬＤＮ１８．２ ＭＩＡ ＰａＣａ－２腫瘍増殖に対するヒト化抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体の阻害作用
１．試験目的
本発明のＪＳ０１２－Ｃｈｉ２－ｈｕ２ ｖ３－２ａの、ヒト膵臓癌ｈＣＬＤＮ１８．２ ＭＩＡ ＰａＣａ－２皮下移植モデルにおける抗腫瘍作用を評価する。
２．試験過程
５×１０６個のｈＣＬＤＮ１８．２ ＭＩＡ ＰａＣａ－２細胞（Ａｃｃｕｒｕｓｂｉｏ－Ｃ３００２）を、０．２ｍｌ／匹（細胞と５０％のマトリゲルを含む培地ＤＭＥＭ（Ｇｉｂｃｏ））で、ＣＢ－１７ ＳＣＩＤマウス（上海吉輝実験動物飼育株式会社）の右背部に皮下接種し、平均腫瘍体積が約８９ｍｍ３になった時、腫瘍体積に応じて、４０匹の動物を選択し、各グループに８匹、合計５グループにランダムに分け、それぞれ、
Ａｎｔｉ－ＫＬＨ ｈＩｇＧ１陰性対照群、３ｍｇ／ｋｇ、
ＩＭＡＢ３６２陽性対照群、３ｍｇ／ｋｇ、
ＪＳ０１２－Ｃｈｉ２－ｈｕ２ ｖ３－２ａ治療群、０．３ｍｇ／ｋｇ、
ＪＳ０１２－Ｃｈｉ２－ｈｕ２ ｖ３－２ａ治療群、１ｍｇ／ｋｇ、
ＪＳ０１２－Ｃｈｉ２－ｈｕ２ ｖ３－２ａ治療群、３ｍｇ／ｋｇである。
グループ分けの当日に投与し、全てのグループの投与経路はいずれも腹腔内注射であり、週に２回、連続して６回投与し、最後の投与の４日間後に実験を終了した。腫瘍体積及び体重を週に３回測定し、マウス体重と腫瘍体積を記録した。実験終了時に、マウスを安楽死させ、腫瘍阻害率ＴＧＩ％（ＴＧＩ ％＝［１－（Ｔｉ－Ｔ０）／（Ｖｉ－Ｖ０）］×１００％）を計算した。（Ｔｉ：治療群又は陽性対照群の投与ｉ日目の腫瘍体積平均値、Ｔ０：治療群又は陽性対照群の投与０日目の腫瘍体積平均値、Ｖｉ：陰性対照群の投与ｉ日目の腫瘍体積平均値、Ｖ０：陰性対照群の投与０日目の腫瘍体積平均値）。
図８に示されるように、実験終了時点に、ａｎｔｉ－ＫＬＨ ｈＩｇＧ１群の平均腫瘍体積は２２３５±１４５ｍｍ３であった。ＩＭＡＢ３６２は、３ｍｇ／ｋｇの用量での平均腫瘍体積が４６５±７４ｍｍ３であり、ＴＧＩが８２．５％であった。ＪＳ０１２－Ｃｈｉ２－ｈｕ２ ｖ３－２ａは、０．３、１と３ｍｇ／ｋｇの用量条件での平均腫瘍体積がそれぞれ１４５５±１４２ｍｍ３、６７３±１５３ｍｍ３と７４±１９ｍｍ３であり、ＴＧＩがそれぞれ３６．３％、７２．８％と１００．６％であり、有意な腫瘍抑制作用を示した。同じ用量条件（３ｍｇ／ｋｇ）で、ＪＳ０１２－Ｃｈｉ２－ｈｕ２ ｖ３－２ａの腫瘍抑制作用は、ＩＭＡＢ３６２より有意に優れていた。
配列表

Claims (16)

  1. 重鎖可変領域と軽鎖可変領域とを含む抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体又はその抗原結合断片であって、
    前記重鎖可変領域は、ＨＣＤＲ１と、ＨＣＤＲ２と、ＨＣＤＲ３とを含み、ここで、
    前記ＨＣＤＲ１の配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１、１０、１６、２２、２８、３４と３７に示されるアミノ酸配列から選択され、
    前記ＨＣＤＲ２の配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６２、６３、１７、２３、２９、３５、３８、７２と７４に示されるアミノ酸配列から選択され、前記ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６２に示されるＨＣＤＲ２において、Ｘ１はＣ又はＳであり、Ｘ２はＴ又はＳであり、前記ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６３に示されるＨＣＤＲ２において、Ｘ３はＤ又はＧであり、Ｘ４はＫ又はＴであり、
    前記ＨＣＤＲ３の配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３、１２、１８、２４、３０、３６、３９、７３と７５に示されるアミノ酸配列から選択され、
    前記軽鎖可変領域は、ＬＣＤＲ１と、ＬＣＤＲ２と、ＬＣＤＲ３とを含み、ここで、
    前記ＬＣＤＲ１の配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４、７、１３、１９、２５と３１に示されるアミノ酸配列から選択され、
    前記ＬＣＤＲ２の配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５、８、１４、２０、２６と３２に示されるアミノ酸配列から選択され、
    前記ＬＣＤＲ３の配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６、９、１５、２１、２７と３３に示されるアミノ酸配列から選択される、抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体又はその抗原結合断片。
  2. 前記重鎖可変領域は、
    （Ｉ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３、又は、
    （ＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３、又は、
    （ＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３、又は、
    （ＩＶ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３、又は、
    （Ｖ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３、又は、
    （ＶＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３、又は、
    （ＶＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３、又は、
    （ＶＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３、又は、
    （ＩＸ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３、又は、
    （Ｘ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７２とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７３に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３、又は、
    （ＸＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７２とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３、又は、
    （ＸＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７４とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７５に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３、又は、
    （ＸＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７４とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含み、
    前記軽鎖可変領域は、
    （Ｉ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３、又は、
    （ＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３、又は、
    （ＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３、又は、
    （ＩＶ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２１に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３、又は、
    （Ｖ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２６とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３、又は、
    （ＶＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む、請求項１に記載の抗体又はその抗原結合断片。
  3. （Ｉ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、又は、
    （ＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、又は、
    （ＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、又は、
    （ＩＶ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２１に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、又は、
    （Ｖ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２６とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、又は、
    （ＶＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、又は、
    （ＶＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２６とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、又は、
    （ＶＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、又は、
    （ＩＸ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２１に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、又は、
    （Ｘ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、又は、
    （ＸＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、又は、
    （ＸＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、又は、
    （ＸＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、又は、
    （ＸＩＶ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７２とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７３に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、又は、
    （ＸＶ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７２とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、又は、
    （ＸＶＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７４とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、又は、
    （ＸＶＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７４とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７５に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、請求項２に記載の抗体又はその抗原結合断片。
  4. 重鎖可変領域と軽鎖可変領域とを含み、ここで、
    （１）前記重鎖可変領域のアミノ酸配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２、４５、４７、４９、５１、５３、５４、７６、７８、８２と８３に示される配列から選択されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２、４５、４７、４９、５１、５３、５４、７６、７８、８２と８３に示される配列のうちのいずれか一つと少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
    前記軽鎖可変領域のアミノ酸配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３、４４、４６、４８、５０と５２に示される配列から選択されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３、４４、４６、４８、５０と５２に示される配列のうちのいずれか一つと少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、又は、
    （２）前記抗体又はその抗原結合断片は、
    アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２に示される重鎖可変領域及び、アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３に示される軽鎖可変領域、又は、
    アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２に示される重鎖可変領域及び、アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４４に示される軽鎖可変領域、又は、
    アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４５に示される重鎖可変領域及び、アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４６に示される軽鎖可変領域、又は、
    アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４７に示される重鎖可変領域及び、アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４８に示される軽鎖可変領域、又は、
    アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４９に示される重鎖可変領域及び、アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５０に示される軽鎖可変領域、又は、
    アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１に示される重鎖可変領域及び、アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２に示される軽鎖可変領域、又は、
    アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５３に示される重鎖可変領域及び、アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５０に示される軽鎖可変領域、又は、
    アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に示される重鎖可変領域及び、アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２に示される軽鎖可変領域、又は、
    アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４５に示される重鎖可変領域及び、アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４８に示される軽鎖可変領域、又は、
    アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１に示される重鎖可変領域及び、アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４６に示される軽鎖可変領域、又は、
    アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４９に示される重鎖可変領域及び、アミノ酸配列がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４６に示される軽鎖可変領域を含む、請求項１～３のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片。
  5. 重鎖可変領域と軽鎖可変領域とを含み、ここで、
    （１）前記重鎖可変領域のアミノ酸配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５５、５７、５８、５９、６０、７６、７８、７９、８２と８３に示される配列から選択されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５５、５７、５８、５９、６０、７６、７８、７９、８２と８３に示される配列のうちのいずれか一つと少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
    前記軽鎖可変領域のアミノ酸配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６、６１、７７、８０と８１に示される配列から選択されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６、６１、７７、８０と８１に示される配列のうちのいずれか一つと少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、又は、
    （２）前記重鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５５、５７、６０、７６、７８、７９、８２又は８３のうちのいずれか一つに示されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６、６１、７７、８０又は８１のうちのいずれか一つに示されるアミノ酸配列を含み、又は、
    （３）前記重鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５５、５７、８２又は８３に示されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６に示されるアミノ酸配列を含み、又は、
    （４）前記重鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６０、７６又は７８に示されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６１に示されるアミノ酸配列を含み、又は、
    （５）前記重鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５５に示されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６に示されるアミノ酸配列を含み、又は、
    （６）前記重鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７に示されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６に示されるアミノ酸配列を含み、又は、
    （７）前記重鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５８に示されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６に示されるアミノ酸配列を含み、又は、
    （８）前記重鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５９に示されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６に示されるアミノ酸配列を含み、又は、
    （９）前記重鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６０に示されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６１に示されるアミノ酸配列を含み、又は、
    （１０）前記重鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７６に示されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７７に示されるアミノ酸配列を含み、又は、
    （１１）前記重鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７９に示されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８０に示されるアミノ酸配列を含み、又は、
    （１２）前記重鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５５に示されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８１に示されるアミノ酸配列を含む、請求項１～３のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片。
  6. 重鎖と軽鎖とを含み、ここで、
    （１）前記重鎖のアミノ酸配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６４もしくはその変異体又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６８もしくはその変異体に示し、前記軽鎖のアミノ酸配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６５又はその変異体又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６９又はその変異体に示し、ここで、前記変異体は、その可変領域において１、２、３、４又は５個のアミノ酸変化を含み、好ましくは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６４の変異体は、第５０又は６３位又はその組み合わせ位置におけるアミノ酸変化を含み、及び／又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６８の変異体は、第６３又は６５位又はその組み合わせ位置におけるアミノ酸変化を含み、好ましくは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６４の変異体は、Ｓ５０Ｃ又はＳ６３Ｔ又はその組み合わせを含み、及び／又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６８の変異体は、Ｇ６３Ｄ又はＴ６５Ｋ又はその組み合わせを含み、又は、
    （２）前記重鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６４に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６４に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６５に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６５に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、又は、
    （３）前記重鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６８に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６８に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６９に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６９に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、又は、
    （４）前記重鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８４に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８４に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８５に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８５に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、又は、
    （５）前記重鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８６に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８６に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、又は、
    （６）前記重鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８８に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８８に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８９に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８９に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、又は、
    （７）前記重鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９０に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９０に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９１に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９１に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、又は、
    （８）前記重鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９２に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９２に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９３に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９３に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、又は、
    （９）前記重鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９４に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９４に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９５に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９５に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、又は、
    （１０）前記重鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９６に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９６に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９７に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９７に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、又は、
    （１１）前記重鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９８に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９８に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９９に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９９に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、又は、
    （１２）前記重鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１００に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１００に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０１に示されるアミノ酸配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０１に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１～３のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片。
  7. 前記抗体は、マウス抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、又は完全ヒト抗体であり、前記抗原結合断片は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’－ＳＨ、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｄＡｂ又はダイアボディである、請求項１～６のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片。
  8. 前記抗体は、任意のＩｇＧサブタイプ、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４であり、好ましくは、前記抗体は、低フコシル化又は無フコシル化されている、請求項１～６のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片。
  9. 単離された抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体又はその抗原結合断片であって、
    （１）請求項１～８のいずれか一項に記載の抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体又はその抗原結合断片と、同じ又は完全にもしくは部分的に重複するヒトＣＬＤＮ－１８．２タンパク質のエピトープに結合することと、
    （２）ヒトＣＬＤＮ－１８．２タンパク質のエピトープへの結合について、請求項１～８のいずれか一項に記載の抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体又はその抗原結合断片と競合することと、
    （３）ヒトＣＬＤＮ－１８．２タンパク質に結合するが、ヒトＣＬＤＮ－１８．１タンパク質には結合しないことと、
    （４）ヒトＣＬＤＮ－１８．２タンパク質を発現する細胞のＡＤＣＣ効果を誘導することと、
    （５）ヒトＣＬＤＮ－１８．２タンパク質を発現する細胞のＣＤＣ効果を誘導することとのうちの一つ又は複数の特性を有する、単離された抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体又はその抗原結合断片。
  10. 請求項１～９のいずれか一項に記載の抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体又はその抗原結合断片をコードする、ポリヌクレオチド。
  11. 請求項１０に記載のポリヌクレオチドを含む発現ベクターであって、好ましくは、前記発現ベクターは、真核発現ベクターである、発現ベクター。
  12. 請求項１０に記載のポリヌクレオチド、又は請求項１１に記載の発現ベクターを含み、又は請求項１～９のいずれか一項に記載の抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体又はその抗原結合断片を発現する宿主細胞であって、好ましくは、前記宿主細胞は、真核細胞であり、さらに好ましくは、哺乳動物細胞である、宿主細胞。
  13. 請求項１～６のいずれか一項に記載の抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体又はその抗原結合断片を作製するための方法であって、前記抗体又はその抗原結合断片の発現に適した条件で、請求項１２に記載の宿主細胞を培養し、発現された前記抗体又はその抗原結合断片を前記宿主細胞から回収することを含む、方法。
  14. 請求項１～９のいずれか一項に記載の抗ＣＬＤＮ－１８．２抗体又はその抗原結合断片と、請求項１０に記載のポリヌクレオチドと、請求項１１に記載の発現ベクターと、請求項１２に記載の宿主細胞と、薬学的に許容されるベクター又は賦形剤とを含む、薬物組成物。
  15. 請求項１～９のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片、請求項１０に記載のポリヌクレオチド、請求項１１に記載の発現ベクター、請求項１２に記載の宿主細胞、又は請求項１４に記載の薬物組成物の、ＣＬＤＮ－１８．２により媒介される疾患又は病症を治療及び／又は予防するための薬物の作製における用途であって、好ましくは、前記疾患又は病症は癌であり、
    さらに好ましくは、前記癌は、胃癌、食道癌、胃食道癌、膵臓癌、胆管癌、肺癌、卵巣癌、結腸癌、肝臓癌、頭頸癌、胆嚢癌、腸癌と膀胱癌から選択される、用途。
  16. 請求項１～９のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片、請求項１０に記載のポリヌクレオチド、請求項１１に記載の発現ベクター、請求項１２に記載の宿主細胞、又は請求項１４に記載の薬物組成物、及び一つ又は複数の別の治療剤を含む、薬物組み合わせ。
JP2023501905A 2020-07-13 2021-07-13 抗ｃｌｄｎ－１８．２抗体及びその用途 Pending JP2023534683A (ja)

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