JP2019535751A - 抗がん作用を有する化合物およびその製造方法ならびにその使用 - Google Patents
抗がん作用を有する化合物およびその製造方法ならびにその使用 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2019535751A JP2019535751A JP2019527389A JP2019527389A JP2019535751A JP 2019535751 A JP2019535751 A JP 2019535751A JP 2019527389 A JP2019527389 A JP 2019527389A JP 2019527389 A JP2019527389 A JP 2019527389A JP 2019535751 A JP2019535751 A JP 2019535751A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- group
- cancer
- hydrogen
- alkyl
- independently selected
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 0 N*[C@](CCC(O)=O)C(O)=O Chemical compound N*[C@](CCC(O)=O)C(O)=O 0.000 description 3
- YTORTTNBNUPUBJ-PVCWFJFTSA-N CC(C)(CC(C)(C)NC(C[C@@H](C(NC(CCC(O)=O)C(O)=O)=O)N)=O)C(Nc1n[nH]c2c1c(-c(cc1)ccc1NC(Nc(cc(C)cc1)c1F)=O)ccc2)=O Chemical compound CC(C)(CC(C)(C)NC(C[C@@H](C(NC(CCC(O)=O)C(O)=O)=O)N)=O)C(Nc1n[nH]c2c1c(-c(cc1)ccc1NC(Nc(cc(C)cc1)c1F)=O)ccc2)=O YTORTTNBNUPUBJ-PVCWFJFTSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
- A61K31/415—1,2-Diazoles
- A61K31/416—1,2-Diazoles condensed with carbocyclic ring systems, e.g. indazole
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
- C07D231/54—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D231/56—Benzopyrazoles; Hydrogenated benzopyrazoles
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/02—Linear peptides containing at least one abnormal peptide link
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
本発明は式Ｉで表される構造を有する化合物およびその製造方法ならびにがんを治療する用途を提供する。本発明の化合物は様々ながん細胞に対して抑制作用を有し、インビトロ（血漿中）において活性薬物Ｌｉｎｉｆａｎｉｂに生物学的変換され、より低い用量で腫瘍細胞特に肝がん細胞の増殖を抑制することができる。【選択図】なし
Description
本発明は化合物およびその製造方法ならびにその使用に関し、具体的には生体内においてより強い抗がん活性に選択的に形質転換させることができる化合物およびその製造方法並びに使用に関する。
抗腫瘍薬を使って腫瘍細胞を選択的に殺すが正常細胞に対する毒性が比較的低いことは、ずっと腫瘍治療における難題である。近年よく使用されるようになった標的治療は主に腫瘍細胞上の特定の変異を標的とし、腫瘍患者に福音を伝えた。しかしながら、標的療法はまた受益患者数が少なくおよび投与後薬剤耐性が早く現れるなどいろいろな制限がある。これにより、生物医学研究開発には別の方法を見つけなければならなず、それによって多くの患者に新しい治療法を提供する。
Ｌｉｎｉｆａｎｉｂは多標的抗がん化合物であり、その標的は血管新生に関連するキナーゼであり、ＶＥＧＦＲｓ、ＰＤＧＦＲｓ、ＣＳＦ−１ＲおよびＦｌｔ−１／３に対していずれも比較的高い抑制作用を示す。肝がん治療に関する大規模なランダム化第ＩＩＩ相臨床試験において、Ｌｉｎｉｆａｎｉｂは肝がん患者のＴＴＰ（ｔｉｍｅ ｔｏ ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ、無増悪期間）およびＯＲＲ（ｏｖｅｒａｌｌ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｒａｔｅ、全奏効率）に対していずれも肝がんの唯一の認可された標的薬物Ｓｏｒａｆｅｎｉｂ（ＴＴＰ ５．４ヶ月ｖｓ４．０ヶ月、ＯＲＲ １３．０％ｖｓ６．９％）より優れるが、その毒性がＳｏｒａｆｅｎｉｂより高く、そんため、その全体的な有効性はＳｏｒａｆｅｎｉｂより高くなく、ＦＤＡの認可を取得していない（非特許文献１）。
Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ、２０１４、３３、１７２−１７９
上記の問題を解決するため、本発明はＬｉｎｉｆａｎｉｂまたはその誘導体を炭素鎖によってポリペプチドに結合させ、化合物Ｌｉｎｉｆａｎｉｂ−Ｃｘ−ＡＡｙ（即ち本発明式Ｉに示す化合物）を形成させ、ＰＳＭＡ（Ｐｒｏｓｔａｔｅ−Ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｍｅｍｂｒａｎｅ Ａｎｔｉｇｅｎ、前立腺特異的膜抗原）の固形腫瘍の腫瘍内皮細胞および一部の腫瘍細胞における高い発現を利用し、腫瘍部位においてＬｉｎｉｆａｎｉｂ−Ｃｘ−Ａａｙを特異的に分解して活性のある抗がん化合物Ｌｉｎｉｆａｎｉｂまたはその誘導体を形成させ、それによって腫瘍部位において抗がん化合物を特異的に濃縮するとともにその全身毒性を低下させる。
本発明の一態様によれば、本発明は式Ｉで表される構造を有する化合物、その薬学的に許容される塩、立体異性体、溶媒和物または結晶多形体を提供する。
式Ｉ
（ただし、
ＸはＯ、ＳおよびＮＲ９から選択され、
Ａは（ＣＨ２）ｅＮ（Ｒ７）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ８）（ＣＨ２）ｆおよびＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＲ７から選択され、ｅおよびｆは独立して０または１であり、これらそれぞれの基の左端がＲ３およびＲ４で置換される環に結合しており、
Ｌは−［Ｃｍ（Ｏ）（Ｚ）ｎ（ＮＨ）ｑ］−であり、ｍ、ｑはそれぞれ０または１であり、ｎは０〜１１、ｐは０〜８であり、Ｚは−ＣＲ１０−、−ＣＲ１０−Ｏ−ＣＲ１０−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＲ１０＝ＣＲ１０−、−ＣＲ１０≡ＣＲ１０−、−Ａｒ、−ＣＯ−ＮＨ−および−Ｎ＝ＣＲ１０−から任意に選択される１個の基または複数の基が従来の方法で結合したものであり、
Ｒ１およびＲ２は水素基、アルコキシ基、アルコキシアルコキシ基、アルコキシアルキル基、アルキル基、アリールオキシ基、アリールオキシアルキル基、ハロゲン基、ハロアルコキシ基、ハロアルキル基、ヘテロシクリル基、ヘテロサイクリックアルケニル基、ヘテロサイクリックアルコキシ基、ヘテロサイクリックアルキル基、ヘテロサイクリックオキシアルキル基、ヒドロキシ基、ヒドロキシアルコキシ基、ヒドロキシアルキル基、（ＮＲａＲｂ）アルコキシ基、（ＮＲａＲｂ）アルケニル基、（ＮＲａＲｂ）アルキル基、（ＮＲａＲｂ）カルボニルメチル基および（ＮＲａＲｂ）カルボニルアルキル基から独立して選択され、
Ｒ３およびＲ４は水素基、アルコキシ基、アルキル基、ハロゲン基、ハロアルコキシ基、ハロアルキル基およびヒドロキシ基から独立して選択され、
Ｒ５およびＲ６は水素基、アルコキシ基、アルコキシアルキル基、アルコキシカルボニル、アルキル基、アリールオキシ基、アリールアルキル基、カルボキシル、シアノ基、ハロゲン基、ハロアルコキシ基、ハロアルキル基、ヒドロキシ基、ヒドロキシアルキル基、ニトロ基および−ＮＲｃＲｄから独立して選択され、
Ｒ７およびＲ８は水素基およびアルキル基から独立して選択され、
Ｒ９は水素基、アルケニル基、アルコキシアルキル基、アルキル基、アルコキシカルボニル基、アリール基、ヘテロシクリルアルキル基、ヒドロキシアルキル基および（ＮＲａＲｂ）アルキル基から選択され、
Ｒ１０は水素基、アルキル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルケノキシ基、ニトロ基、ハロゲン基、第一級アミノ基、第二級アミノ基および第三級アミノ基から独立して選択され、
Ｒ１１は水素基、ヒドロキシ基、アミノ基、アルケニル基、アルキニル基、アルコキシ基、アルキルアミノ基、アルコキシアルキル基、アルキル基、アルコキシカルボニル基、アリール基、ヘテロシクロアルキル基から独立して選択され、
ＲａおよびＲｂは水素基、アルキル基、アルキルカルボニル基、アルキルスルホニル基、アリールスルホニル基、ハロアルキルスルホニル基およびヘテロサイクリックスルホニル基から独立して選択され、
ＲｃおよびＲｄは水素基、アルキル基、アルキルカルボニル基、アリール基、アリールアルキル基、シクロアルキル基、シクロアルキルアルキル基、ヘテロシクリル基およびヘテロサイクリックアルキル基から独立して選択される。）
（ただし、
ＸはＯ、ＳおよびＮＲ９から選択され、
Ａは（ＣＨ２）ｅＮ（Ｒ７）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ８）（ＣＨ２）ｆおよびＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＲ７から選択され、ｅおよびｆは独立して０または１であり、これらそれぞれの基の左端がＲ３およびＲ４で置換される環に結合しており、
Ｌは−［Ｃｍ（Ｏ）（Ｚ）ｎ（ＮＨ）ｑ］−であり、ｍ、ｑはそれぞれ０または１であり、ｎは０〜１１、ｐは０〜８であり、Ｚは−ＣＲ１０−、−ＣＲ１０−Ｏ−ＣＲ１０−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＲ１０＝ＣＲ１０−、−ＣＲ１０≡ＣＲ１０−、−Ａｒ、−ＣＯ−ＮＨ−および−Ｎ＝ＣＲ１０−から任意に選択される１個の基または複数の基が従来の方法で結合したものであり、
Ｒ１およびＲ２は水素基、アルコキシ基、アルコキシアルコキシ基、アルコキシアルキル基、アルキル基、アリールオキシ基、アリールオキシアルキル基、ハロゲン基、ハロアルコキシ基、ハロアルキル基、ヘテロシクリル基、ヘテロサイクリックアルケニル基、ヘテロサイクリックアルコキシ基、ヘテロサイクリックアルキル基、ヘテロサイクリックオキシアルキル基、ヒドロキシ基、ヒドロキシアルコキシ基、ヒドロキシアルキル基、（ＮＲａＲｂ）アルコキシ基、（ＮＲａＲｂ）アルケニル基、（ＮＲａＲｂ）アルキル基、（ＮＲａＲｂ）カルボニルメチル基および（ＮＲａＲｂ）カルボニルアルキル基から独立して選択され、
Ｒ３およびＲ４は水素基、アルコキシ基、アルキル基、ハロゲン基、ハロアルコキシ基、ハロアルキル基およびヒドロキシ基から独立して選択され、
Ｒ５およびＲ６は水素基、アルコキシ基、アルコキシアルキル基、アルコキシカルボニル、アルキル基、アリールオキシ基、アリールアルキル基、カルボキシル、シアノ基、ハロゲン基、ハロアルコキシ基、ハロアルキル基、ヒドロキシ基、ヒドロキシアルキル基、ニトロ基および−ＮＲｃＲｄから独立して選択され、
Ｒ７およびＲ８は水素基およびアルキル基から独立して選択され、
Ｒ９は水素基、アルケニル基、アルコキシアルキル基、アルキル基、アルコキシカルボニル基、アリール基、ヘテロシクリルアルキル基、ヒドロキシアルキル基および（ＮＲａＲｂ）アルキル基から選択され、
Ｒ１０は水素基、アルキル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルケノキシ基、ニトロ基、ハロゲン基、第一級アミノ基、第二級アミノ基および第三級アミノ基から独立して選択され、
Ｒ１１は水素基、ヒドロキシ基、アミノ基、アルケニル基、アルキニル基、アルコキシ基、アルキルアミノ基、アルコキシアルキル基、アルキル基、アルコキシカルボニル基、アリール基、ヘテロシクロアルキル基から独立して選択され、
ＲａおよびＲｂは水素基、アルキル基、アルキルカルボニル基、アルキルスルホニル基、アリールスルホニル基、ハロアルキルスルホニル基およびヘテロサイクリックスルホニル基から独立して選択され、
ＲｃおよびＲｄは水素基、アルキル基、アルキルカルボニル基、アリール基、アリールアルキル基、シクロアルキル基、シクロアルキルアルキル基、ヘテロシクリル基およびヘテロサイクリックアルキル基から独立して選択される。）
具体的には、各化合物の構造は以下の通りである。
（反応経路）
先ずポリペプチド（反応物１）とベンジル基からなる保護基を有するＬ（反応物２）を触媒および縮合剤の存在下で反応させ、保護基を有する中間体化合物１を得て、当該中間体化合物１をさらに極性溶媒中で接触水素化して保護基をはずして中間体化合物２を得る。
先ずポリペプチド（反応物１）とベンジル基からなる保護基を有するＬ（反応物２）を触媒および縮合剤の存在下で反応させ、保護基を有する中間体化合物１を得て、当該中間体化合物１をさらに極性溶媒中で接触水素化して保護基をはずして中間体化合物２を得る。
中間体化合物２とＬｉｎｉｆａｎｉｂまたはその誘導体を触媒および縮合剤の存在下で反応させ、保護基を有する中間体化合物３を得て、当該中間体化合物３をさらに酸性条件下で保護基をはずして式１で表される化合物を得る。
（反応経路図）
さらに、中間体化合物１を製造する方法において、反応温度は−２０℃から１２５℃までであり、有機溶媒は１−２０個の炭素原子を有するエーテル、アルコール、アルカン、芳香族炭化水素、ケトン、ハロアルカン、アミド、ニトリル、エステル又はその混合物から選択され、触媒は１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）であり、縮合剤は１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣＩ）、１、３−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）または４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）の中の１種または複数種である。当該工程において、反応における反応物１、２の反応モル比は１：１〜１：１０であり、反応物１と縮合剤のモル比は１：０．１〜１：１０である。
さらに、中間体化合物２を製造する方法において、反応温度は−２０℃から２５０℃までであり、有機溶媒は１−２０個の炭素原子を有するエーテル、アルコール、ハロアルカン、アミド、ニトリルまたはその混合物、または水と色々な割合で混合した混合物であり、触媒はパラジウム炭素、乾性または湿性水酸化パラジウムである。上記製造方法において、中間体化合物２と触媒の反応モル比は１：０．１〜１：１０である。
さらに、中間体化合物３を製造する方法において、反応温度は−２０℃から１２５℃までであり、有機溶媒は１−２０個の炭素原子を有するエーテル、アルコール、アルカン、芳香族炭化水素、ケトン、ハロアルカン、アミド、ニトリル、エステル又はその混合物から選択され、触媒は１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）であり、縮合剤は１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣＩ）、１、３−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）または４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）の中の１種または複数種である。当該工程において、Ｌｉｎｉｆａｎｉｂまたはその誘導体と中間体化合物２のモル比は１：１〜１：１０であり、Ｌｉｎｉｆａｎｉｂまたはその誘導体と縮合剤のモル比は１：０．１〜１：１０である。
さらに、上記式１で表される化合物を製造する方法において、反応温度は−２０℃から１２５℃までであり、有機溶媒は１−２０個の炭素原子を有するエーテル、アルコール、アルカン、芳香族炭化水素、ケトン、ハロアルカン、アミド、ニトリル、エステル又はそれらの色々な割合で混合した混合物から選択され、酸性試薬はギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸から選択される。上記製造方法において、中間体化合物３と酸性試薬の反応モル比は１：１〜１：１０である。
本発明のもう一つの態様によれば、本発明は、活性成分および薬学的に許容される担体から調製される薬物であって、活性成分が、式１で表される化合物、その薬学的に許容される塩、立体異性体、溶媒和物または結晶多形体である薬物を提供する。前記薬物は経口投与剤形、非経口投与剤形、外用剤形および直腸内投与剤形を含むがこれらに限られない。ある実施形態において、前記薬物は経口投与される錠剤、カプセル剤、丸剤、散剤、徐放性製剤、液剤および懸濁剤、非経口投与される滅菌液剤、懸濁剤または乳剤、外用軟膏剤またはクリーム剤であってもよい。ある実施形態において、前記薬物および少なくとも１種の治療薬はそれぞれ独立した剤形で組み合わせられる組み合わせ薬物であり、例えばキット製品である。
本発明のもう一つの態様によれば、本発明は、本発明の上記式１で表される構造を有する化合物またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、溶媒和物または結晶多形体と、薬学的に許容される担体とを含む薬物組成物を提供する。前記薬物組成物は経口投与剤形、非経口投与剤形、外用剤形および直腸内投与剤形を含むがこれらに限られない。ある実施形態において、前記薬物組成物は経口投与される錠剤、カプセル剤、丸剤、散剤、徐放性製剤、液剤および懸濁剤、非経口投与される滅菌液剤、懸濁剤または乳剤、外用軟膏剤またはクリーム剤であってもよい。ある実施形態において、前記薬物組成物および少なくとも１種の治療薬はそれぞれ独立した剤形で組み合わせられる組み合わせ薬物であり、例えばキット製品である。
本発明のもう一つの態様によれば、本発明は式１で表される化合物、その薬学的に許容される塩、立体異性体、溶媒和物、結晶多形体の、抗がん作用を有する薬物の調製における使用を提供する。前記がんは食道がん、子宮内膜がん、悪性リンパ腫、多発性骨髄腫、消化管間質腫瘍、結腸がん、直腸がん、乳がん、肝臓がん、胃がん、卵巣がん、子宮がん、子宮頸がん、膣がん、肺がん、腎臓がん、前立腺がん、膀胱がん、膵臓がん、脳がん、黒色腫などを含む。好ましくは肝がんに対し、効果が最も優れる。
本発明のもう一つの態様によれば、本発明は、治療的有効量を有する前記式１で表される化合物、その薬学的に許容される塩、立体異性体、溶媒和物、結晶多形体を、それを必要とする個体に使用することを含む、がんを治療する方法を提供する。ある実施形態において、前記がんは食道がん、子宮内膜がん、悪性リンパ腫、多発性骨髄腫、消化管間質腫瘍、結腸がん、直腸がん、乳がん、肝臓がん、胃がん、卵巣がん、子宮がん、子宮頸がん、膣がん、肺がん、腎臓がん、前立腺がん、膀胱がん、膵臓がん、脳がん、黒色腫などを含む。好ましくは肝がんに対し、効果が最も優れる。
本発明における「薬学的に許容される塩」とは特定の化合物の遊離酸および遊離塩基の生物学的効果を残し、且つ生物学上またはその他の方面において有害作用を有さない塩をいう。本発明における塩とは有機酸／無機酸から形成される酸性塩、および有機塩基／無機塩基から形成される塩基性塩をいう。
本発明における「溶媒和物」とは溶媒和作用により形成される本発明の化合物と溶媒分子との組み合わせをいう。例えば水和物、エタノール溶媒和物、メタノール溶媒和物などである。
本発明における「結晶多形体」または「多結晶体」とは異なる結晶化の形で存在する本発明の化合物をいう。
本発明における「立体異性体」とは分子の中の原子の空間的配置が異なることによって生じる異性体をいう。
本発明における「薬物組成物」とは少なくとも１種の薬学的に許容される任意の化学成分が含まれる生物学的活性化合物をいい、前記薬学的に許容される化学成分は担体、安定剤、希釈剤、分散剤、懸濁剤、増粘剤、および／または賦形剤を含むがこれらに限られない。前記「担体」とは比較的無毒性の化学試薬をいい、それは化合物を細胞または組織の中に導入することに寄与する。
本発明における「アルキル基」とは１〜１０個の炭素原子を有する直鎖状または分枝状の飽和炭化水素鎖をいい、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、第二級ブチル基、イソブチル基、第三級ブチル基、Ｎ−ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、ｎ−ヘキシル基、３−メチルヘキシル基、２、２−ジメチルペンチル基、２、３−ジメチルペンチル基、ｎ−ヘプチル基、ｎ−オクチル基、ｎ−デシル基およびｎ−デシル基を含むがこれらに限られない。
前記「アリール基」とは６〜１４個の炭素原子を有する芳香族炭素環式基をいう。アリール基は単環式または多環式であり得る。多環芳香族炭素環式基の場合、前記多環系のうち少なくとも１つの環が不飽和であり、他の一つまたは複数の環は飽和であってもよく、部分飽和または不飽和であってもよい。アリール基の例をあげれば、フェニル基、ナフチル基、アントラセニル基、インダニル基およびテトラヒドロナフチル基がある。
前記「ヘテロアリール基」とは少なくとも１個の炭素原子および１個または複数個の独立して選択される窒素原子、酸素原子または硫黄原子を有する５員または６員の芳香環をいう。具体的には、前記「ヘテロアリール基」とは５〜１４個の環原子を有する芳香族複素環基をいう。ヘテロアリール基は単環または２個もしくは３個の縮合環であってもよい。ヘテロアリール置換基の例をあげれば、６員環置換基（例えばピリジル基、ピラジニル基、ピリミジニル基、ピリダジニル基および１、３、５−、１、２、４−もしくは１、２、３−トリアジニル基など）、５員環置換基（例えばイミダゾリル基、フリル基、チエニル基、ピラゾリル基、オキサゾリル基、イソキサゾリル基、チアゾリル基、１、２、３−、１、２、４−、１、２、５−、もしくは１、３、４−オキサジアゾリル基およびイソチアゾリル基など）、６／５員縮合環置換基（例えばベンゾチオフェニル基、ベンゾイソオキサゾリル基、ベンゾオキサゾリル基、イミダゾリル基、インドリル基、ベンズイミダゾリル基、ピロロ［２、３−ｂ］ピリジニル基、プリニル基など）、および６／６員縮合環置換基（例えばベンゾピラニル基、キノリル基、イソキノリル基、シンノリニル基、キナゾリニル基、およびベンゾオキサジニル基など）などがある。
前記「シクロアルケニル」とは単環式または架橋炭化水素環系をいう。単環シクロアルケニルは４、５、６、７または８個の炭素原子および０個のヘテロ原子を有する。４員環系は１個の二重結合を有し、５員または６員環系は１個または２個の二重結合を有し、７員または８員環系は１個、２個または３個の二重結合を有する。単環シクロアルケニルの代表的な例としては、シクロブテニル基、シクロペンテニル基、シクロヘキセニル基、シクロヘプテニル基およびシクロオクテニル基を含むがこれらに限られない。
前記「ヘテロシクロアルキル基」とは計３〜１４個の環原子を有する飽和環構造をいう。環原子のうち少なくとも１個がヘテロ原子（即ち酸素、窒素または硫黄）であり、その他の環原子が炭素、酸素、窒素および硫黄から独立して選択される。例えばテトラヒドロフラニル基、テトラヒドロピラニル基、テトラヒドロチオフェニル基、ピロリル基、ピロリニル基、ピロリジニル基、イミダゾリル基、イミダゾリニル基、イミダゾリジニル基、ピラゾリル基、ピラゾリニル基、ピラゾリジニル基、トリアゾリル基、テトラゾリル基などが挙げられる。
前記「有効量」とは無毒性であるが、十分な量で必要な作用を提供できる薬物または薬剤をいう。本発明の薬物組成物またはキットにおいて、ある成分または製剤ユニットの「有効量」とは当該成分がその他の成分と併用する場合効果的に必要な作用を提供できる量をいう。「有効量」は被験者の選択、年齢と個体の背景、特定の活性薬物などによって異なる可能性がある。そのため、いつも正確な「有効量」を指すことはなく、しかしながら、如何なる個体病例に適する「有効量」は本分野の一般技術者が従来の実験法によって測定することができる。
前記「被験者」とは患者またはその他の本発明の化合物または薬物組成物の投与を受けることによって本発明に記載の疾病を治療、予防、軽減および／または緩和する動物をいい、特に哺乳類であり、例えば人、犬、猿、牛、馬などが挙げられる。
インビトロ実験を実施するために、本発明はさらに式Ｉで表される化合物の代謝産物式ＩＩで表される化合物を合成し、その反応経路は以下の通りである。
先ずＬｉｎｉｆａｎｉｂまたはその誘導物とＢｏｃ保護基を有するＬ（反応物３）を縮合剤および触媒の存在下で反応させて中間体化合物Ｍａを生成し、当該中間体化合物Ｍａをトリフルオロ酢酸の存在下でＢｏｃ保護基を脱保護して中間体化合物Ｍｂを生成し、当該中間体化合物Ｍｂをさらに保護基を有するアスパラギン酸と縮合して中間体化合物Ｍｃを得て、中間体化合物Ｍｃをトリフルオロ酢酸の存在下でＢｏｃ保護基を脱保護して中間体化合物Ｍｄを生成し、Ｍｄを貴金属担持触媒の存在下で接触水素化してベンジル基を除去して代謝産物式２で表される化合物を得る。
（反応経路図）
ただし、上図で、
ＸはＯ、ＳおよびＮＲ９から選択され、
Ａは（ＣＨ２）ｅＮ（Ｒ７）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ８）（ＣＨ２）ｆおよびＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＲ７から選択され、ｅおよびｆは独立して０または１であり、これらそれぞれの基の左端がＲ３およびＲ４で置換される環に結合しており、
Ｌは−［Ｃｍ（Ｏ）（Ｚ）ｎ（ＮＨ）ｑ］−であり、ｍ、ｑはそれぞれ０または１であり、ｎは０〜１１、ｐは０〜８であり、Ｚは−ＣＲ１０−、−ＣＲ１０−Ｏ−ＣＲ１０−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＲ１０＝ＣＲ１０−、−ＣＲ１０≡ＣＲ１０−、−Ａｒ、−ＣＯ−ＮＨ−および−Ｎ＝ＣＲ１０−から任意に選択される１個の基または複数の基が従来の方法で結合したものであり、
Ｒ１およびＲ２は水素基、アルコキシ基、アルコキシアルコキシ基、アルコキシアルキル基、アルキル基、アリールオキシ基、アリールオキシアルキル基、ハロゲン基、ハロアルコキシ基、ハロアルキル基、ヘテロシクリル基、ヘテロサイクリックアルケニル基、ヘテロサイクリックアルコキシ基、ヘテロサイクリックアルキル基、ヘテロサイクリックオキシアルキル基、ヒドロキシ基、ヒドロキシアルコキシ基、ヒドロキシアルキル基、（ＮＲａＲｂ）アルコキシ基、（ＮＲａＲｂ）アルケニル基、（ＮＲａＲｂ）アルキル基、（ＮＲａＲｂ）カルボニルメチル基および（ＮＲａＲｂ）カルボニルアルキル基から独立して選択され、
Ｒ３およびＲ４は水素基、アルコキシ基、アルキル基、ハロゲン基、ハロアルコキシ基、ハロアルキル基およびヒドロキシ基から独立して選択され、
Ｒ５およびＲ６は水素基、アルコキシ基、アルコキシアルキル基、アルコキシカルボニル、アルキル基、アリールオキシ基、アリールアルキル基、カルボキシル、シアノ基、ハロゲン基、ハロアルコキシ基、ハロアルキル基、ヒドロキシ基、ヒドロキシアルキル基、ニトロ基および−ＮＲｃＲｄから独立して選択され、
Ｒ７およびＲ８は水素基およびアルキル基から独立して選択され、
Ｒ９は水素基、アルケニル基、アルコキシアルキル基、アルキル基、アルコキシカルボニル基、アリール基、ヘテロシクリルアルキル基、ヒドロキシアルキル基および（ＮＲａＲｂ）アルキル基から選択され、
Ｒ１０は水素基、アルキル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルケノキシ基、ニトロ基、ハロゲン基、第一級アミノ基、第二級アミノ基および第三級アミノ基から独立して選択され、
ＲａおよびＲｂは水素基、アルキル基、アルキルカルボニル基、アルキルスルホニル基、アリールスルホニル基、ハロアルキルスルホニル基およびヘテロサイクリックスルホニル基から独立して選択され、
ＲｃおよびＲｄは水素基、アルキル基、アルキルカルボニル基、アリール基、アリールアルキル基、シクロアルキル基、シクロアルキルアルキル基、ヘテロシクリル基およびヘテロサイクリックアルキル基から独立して選択される。
ＸはＯ、ＳおよびＮＲ９から選択され、
Ａは（ＣＨ２）ｅＮ（Ｒ７）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ８）（ＣＨ２）ｆおよびＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＲ７から選択され、ｅおよびｆは独立して０または１であり、これらそれぞれの基の左端がＲ３およびＲ４で置換される環に結合しており、
Ｌは−［Ｃｍ（Ｏ）（Ｚ）ｎ（ＮＨ）ｑ］−であり、ｍ、ｑはそれぞれ０または１であり、ｎは０〜１１、ｐは０〜８であり、Ｚは−ＣＲ１０−、−ＣＲ１０−Ｏ−ＣＲ１０−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＲ１０＝ＣＲ１０−、−ＣＲ１０≡ＣＲ１０−、−Ａｒ、−ＣＯ−ＮＨ−および−Ｎ＝ＣＲ１０−から任意に選択される１個の基または複数の基が従来の方法で結合したものであり、
Ｒ１およびＲ２は水素基、アルコキシ基、アルコキシアルコキシ基、アルコキシアルキル基、アルキル基、アリールオキシ基、アリールオキシアルキル基、ハロゲン基、ハロアルコキシ基、ハロアルキル基、ヘテロシクリル基、ヘテロサイクリックアルケニル基、ヘテロサイクリックアルコキシ基、ヘテロサイクリックアルキル基、ヘテロサイクリックオキシアルキル基、ヒドロキシ基、ヒドロキシアルコキシ基、ヒドロキシアルキル基、（ＮＲａＲｂ）アルコキシ基、（ＮＲａＲｂ）アルケニル基、（ＮＲａＲｂ）アルキル基、（ＮＲａＲｂ）カルボニルメチル基および（ＮＲａＲｂ）カルボニルアルキル基から独立して選択され、
Ｒ３およびＲ４は水素基、アルコキシ基、アルキル基、ハロゲン基、ハロアルコキシ基、ハロアルキル基およびヒドロキシ基から独立して選択され、
Ｒ５およびＲ６は水素基、アルコキシ基、アルコキシアルキル基、アルコキシカルボニル、アルキル基、アリールオキシ基、アリールアルキル基、カルボキシル、シアノ基、ハロゲン基、ハロアルコキシ基、ハロアルキル基、ヒドロキシ基、ヒドロキシアルキル基、ニトロ基および−ＮＲｃＲｄから独立して選択され、
Ｒ７およびＲ８は水素基およびアルキル基から独立して選択され、
Ｒ９は水素基、アルケニル基、アルコキシアルキル基、アルキル基、アルコキシカルボニル基、アリール基、ヘテロシクリルアルキル基、ヒドロキシアルキル基および（ＮＲａＲｂ）アルキル基から選択され、
Ｒ１０は水素基、アルキル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルケノキシ基、ニトロ基、ハロゲン基、第一級アミノ基、第二級アミノ基および第三級アミノ基から独立して選択され、
ＲａおよびＲｂは水素基、アルキル基、アルキルカルボニル基、アルキルスルホニル基、アリールスルホニル基、ハロアルキルスルホニル基およびヘテロサイクリックスルホニル基から独立して選択され、
ＲｃおよびＲｄは水素基、アルキル基、アルキルカルボニル基、アリール基、アリールアルキル基、シクロアルキル基、シクロアルキルアルキル基、ヘテロシクリル基およびヘテロサイクリックアルキル基から独立して選択される。
具体的には、各代謝産物の構造は以下の通りである。
本発明によれば、前記式Ｉで表される化合物は様々ながん細胞に対して抑制作用を有し、インビトロ血漿において活性薬物Ｌｉｎｉｆａｎｉｂに生物学的変換され、より低い用量で腫瘍細胞特に肝がん細胞の増殖を抑制することができることが示される。
（実施例１〜２：目的化合物１の製造）
（実施例１：中間体化合物３の製造）
１−Ｎ Ｂｏｃ Ｌｉｎｉｆａｎｉｂ ７６０ｍｇ（１．６ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ３２４ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ ４６０ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）を秤量して５０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、撹拌して０．５ｈ反応させ、反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々に市販中間体化合物２ Ａｓｐ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−（ＯｔＢｕ） ９１２ｍｇ（１．９２ｍｍｏｌ）を加え、最後にＤＩＰＥＡ ５１６ｍｇ（４．０ｍｍｏｌ）を加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して１２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に１００ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに２５０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離する。有機相をさらに１５０ｍｌの飽和食塩水で洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝０：１〜１００：１）に付し、近似白色の固体粉末４９８ｍｇを得て、収率は３３．４％である。
（実施例１：中間体化合物３の製造）
１−Ｎ Ｂｏｃ Ｌｉｎｉｆａｎｉｂ ７６０ｍｇ（１．６ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ３２４ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ ４６０ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）を秤量して５０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、撹拌して０．５ｈ反応させ、反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々に市販中間体化合物２ Ａｓｐ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−（ＯｔＢｕ） ９１２ｍｇ（１．９２ｍｍｏｌ）を加え、最後にＤＩＰＥＡ ５１６ｍｇ（４．０ｍｍｏｌ）を加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して１２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に１００ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに２５０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離する。有機相をさらに１５０ｍｌの飽和食塩水で洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝０：１〜１００：１）に付し、近似白色の固体粉末４９８ｍｇを得て、収率は３３．４％である。
（実施例２：目的化合物１の製造）
実施例１で調製した中間体化合物３ ３５４ｍｇ（０．３８ｍｍｏｌ）を秤量して２０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、反応温度を−５〜５℃に制御して徐々にトリフルオロ酢酸３ｍｌ（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、当該反応温度を維持して撹拌して２０〜２４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に４０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、６０ｍｌの５％炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗浄し、１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄する。有機相を分離し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて赤褐色油状物を得る。当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、近似白色の固体粉末８８ｍｇを得て、収率は３７．２％である。ＨＰＬＣ純度：９４．１％（２１４ｎｍ）、９４．８％（２５４ｎｍ）。ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ ６２０．０ ［Ｍ＋１］＋
実施例１で調製した中間体化合物３ ３５４ｍｇ（０．３８ｍｍｏｌ）を秤量して２０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、反応温度を−５〜５℃に制御して徐々にトリフルオロ酢酸３ｍｌ（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、当該反応温度を維持して撹拌して２０〜２４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に４０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、６０ｍｌの５％炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗浄し、１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄する。有機相を分離し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて赤褐色油状物を得る。当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、近似白色の固体粉末８８ｍｇを得て、収率は３７．２％である。ＨＰＬＣ純度：９４．１％（２１４ｎｍ）、９４．８％（２５４ｎｍ）。ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ ６２０．０ ［Ｍ＋１］＋
構造式は以下の通りである。
（実施例３〜４：目的化合物２の製造）
（実施例３：中間体化合物３の製造）
１−Ｎ Ｂｏｃ Ｌｉｎｉｆａｎｉｂ ７６０ｍｇ（１．６ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ３２４ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ ４６０ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）を秤量して５０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、撹拌して０．５ｈ反応させ、反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々に市販中間体化合物２ Ａｓｐ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−（ＯｔＢｕ） １９７８ｍｇ（１．９２ｍｍｏｌ）を加え、最後にＤＩＰＥＡ ５１６ｍｇ（４．０ｍｍｏｌ）を加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して１２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に１００ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに２５０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離する。有機相をさらに１５０ｍｌの飽和食塩水で洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝０：１〜１００：１）に付し、近似白色の固体粉末５８８ｍｇを得て、収率は２４．７％である。
（実施例３：中間体化合物３の製造）
１−Ｎ Ｂｏｃ Ｌｉｎｉｆａｎｉｂ ７６０ｍｇ（１．６ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ３２４ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ ４６０ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）を秤量して５０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、撹拌して０．５ｈ反応させ、反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々に市販中間体化合物２ Ａｓｐ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−（ＯｔＢｕ） １９７８ｍｇ（１．９２ｍｍｏｌ）を加え、最後にＤＩＰＥＡ ５１６ｍｇ（４．０ｍｍｏｌ）を加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して１２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に１００ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに２５０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離する。有機相をさらに１５０ｍｌの飽和食塩水で洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝０：１〜１００：１）に付し、近似白色の固体粉末５８８ｍｇを得て、収率は２４．７％である。
（実施例４：目的化合物２の製造）
実施例３で調製した中間体化合物３ ５６５ｍｇ（０．３８ｍｍｏｌ）を秤量して２０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、反応温度を−５〜５℃に制御して徐々にトリフルオロ酢酸３ｍｌ（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、当該反応温度を維持して撹拌して２０〜２４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に４０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、６０ｍｌの５％炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗浄し、１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄する。有機相を分離し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて赤褐色油状物を得る。当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、近似白色の固体粉末１２９ｍｇを得て、収率は３３．８％である。ＨＰＬＣ純度：９５．９％（２１４ｎｍ）、９６．５％（２５４ｎｍ）。ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ １００７．０ ［Ｍ＋１］＋
実施例３で調製した中間体化合物３ ５６５ｍｇ（０．３８ｍｍｏｌ）を秤量して２０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、反応温度を−５〜５℃に制御して徐々にトリフルオロ酢酸３ｍｌ（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、当該反応温度を維持して撹拌して２０〜２４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に４０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、６０ｍｌの５％炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗浄し、１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄する。有機相を分離し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて赤褐色油状物を得る。当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、近似白色の固体粉末１２９ｍｇを得て、収率は３３．８％である。ＨＰＬＣ純度：９５．９％（２１４ｎｍ）、９６．５％（２５４ｎｍ）。ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ １００７．０ ［Ｍ＋１］＋
構造式は以下の通りである。
（実施例５〜６：目的化合物３の製造）
（実施例５：中間体化合物３の製造）
１−Ｎ Ｂｏｃ Ｌｉｎｉｆａｎｉｂ ７６０ｍｇ（１．６ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ３２４ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ ４６０ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）を秤量して５０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、撹拌して０．５ｈ反応させ、反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々に市販中間体化合物２ Ａｓｐ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−（ＯｔＢｕ） ３７５６ｍｇ（１．９２ｍｍｏｌ）を加え、最後にＤＩＰＥＡ ５１６ｍｇ（４．０ｍｍｏｌ）を加える。加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して１２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に１００ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに２５０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離する。有機相をさらに１５０ｍｌの飽和食塩水で洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝０：１〜１００：１）に付し、近似白色の固体粉末８３４ｍｇを得て、収率は２１．６％である。
（実施例５：中間体化合物３の製造）
１−Ｎ Ｂｏｃ Ｌｉｎｉｆａｎｉｂ ７６０ｍｇ（１．６ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ３２４ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ ４６０ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）を秤量して５０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、撹拌して０．５ｈ反応させ、反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々に市販中間体化合物２ Ａｓｐ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−（ＯｔＢｕ） ３７５６ｍｇ（１．９２ｍｍｏｌ）を加え、最後にＤＩＰＥＡ ５１６ｍｇ（４．０ｍｍｏｌ）を加える。加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して１２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に１００ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに２５０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離する。有機相をさらに１５０ｍｌの飽和食塩水で洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝０：１〜１００：１）に付し、近似白色の固体粉末８３４ｍｇを得て、収率は２１．６％である。
（実施例６：目的化合物３の製造）
実施例５で調製した中間体化合物３ ９１７ｍｇ（０．３８ｍｍｏｌ）を秤量して２０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、反応温度を−５〜５℃に制御して徐々にトリフルオロ酢酸３ｍｌ（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、当該反応温度を維持して撹拌して２０〜２４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に４０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、６０ｍｌの５％炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗浄し、１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄する。有機相を分離し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて赤褐色油状物を得る。当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、近似白色の固体粉末２０３ｍｇを得て、収率は３２．４％である。ＨＰＬＣ 純度：９２．５％（２１４ｎｍ）、９４．１％（２５４ｎｍ）。ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ １６５２．０ ［Ｍ＋１］＋
実施例５で調製した中間体化合物３ ９１７ｍｇ（０．３８ｍｍｏｌ）を秤量して２０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、反応温度を−５〜５℃に制御して徐々にトリフルオロ酢酸３ｍｌ（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、当該反応温度を維持して撹拌して２０〜２４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に４０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、６０ｍｌの５％炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗浄し、１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄する。有機相を分離し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて赤褐色油状物を得る。当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、近似白色の固体粉末２０３ｍｇを得て、収率は３２．４％である。ＨＰＬＣ 純度：９２．５％（２１４ｎｍ）、９４．１％（２５４ｎｍ）。ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ １６５２．０ ［Ｍ＋１］＋
構造式は以下の通りである。
（実施例７〜１０：目的化合物４の製造）
（実施例７：中間体化合物１の製造）
ベンジル−（６−アミノ）ヘキサンエステル塩酸塩３０４ｍｇ（１．１８ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ２３８ｍｇ（１．７６ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ １９２ｍｇ（１．７６ｍｍｏｌ）を秤量して５０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、室温で溶かすまで撹拌する。反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々にＡｓｐ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−（ＯｔＢｕ） ５８４ｍｇ（１．２３ｍｍｏｌ）を加える。加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に１００ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに２５０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離する。有機相をさらに１５０ｍｌの飽和食塩水で洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／アセトン＝１０：１〜２：１）に付し、黄色の固体粉末３３８ｍｇを得て、収率は４２．３％ある。
（実施例７：中間体化合物１の製造）
ベンジル−（６−アミノ）ヘキサンエステル塩酸塩３０４ｍｇ（１．１８ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ２３８ｍｇ（１．７６ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ １９２ｍｇ（１．７６ｍｍｏｌ）を秤量して５０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、室温で溶かすまで撹拌する。反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々にＡｓｐ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−（ＯｔＢｕ） ５８４ｍｇ（１．２３ｍｍｏｌ）を加える。加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に１００ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに２５０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離する。有機相をさらに１５０ｍｌの飽和食塩水で洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／アセトン＝１０：１〜２：１）に付し、黄色の固体粉末３３８ｍｇを得て、収率は４２．３％ある。
（実施例８：中間体化合物２の製造）
実施例７で調製した中間体化合物１ ２８５ｍｇ（０．４２ｍｍｏｌ）を秤量し、６０ｍｌの無水メタノールに溶かし、窒素保護下で１０％Ｐｄ／Ｃ ２５ｍｇを加え、水素ガスを通して３回の置換を行い、水素雰囲気下で２ＭＰａ、２０〜６５℃に制御して６〜１２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。窒素保護下で、反応液をろ過し、パラジウム炭素を回収する。ろ液を低温で濃縮させて黄褐色油状物を得る。当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、淡黄色の固体粉末１１５ｍｇを得て、収率は４６．６％である。
実施例７で調製した中間体化合物１ ２８５ｍｇ（０．４２ｍｍｏｌ）を秤量し、６０ｍｌの無水メタノールに溶かし、窒素保護下で１０％Ｐｄ／Ｃ ２５ｍｇを加え、水素ガスを通して３回の置換を行い、水素雰囲気下で２ＭＰａ、２０〜６５℃に制御して６〜１２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。窒素保護下で、反応液をろ過し、パラジウム炭素を回収する。ろ液を低温で濃縮させて黄褐色油状物を得る。当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、淡黄色の固体粉末１１５ｍｇを得て、収率は４６．６％である。
（実施例９：中間体化合物３の製造）
１−Ｎ Ｂｏｃ Ｌｉｎｉｆａｎｉｂ ７６０ｍｇ（１．６ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ３２４ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ ４６０ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）を秤量して５０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、撹拌して０．５ｈ反応させ、反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々に実施例８で調製した中間体化合物２ １１２９ｍｇ（１．９２ｍｍｏｌ）を加え、最後にＤＩＰＥＡ ５１６ｍｇ（４．０ｍｍｏｌ）を加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して１２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に１００ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに２５０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離する。有機相をさらに１５０ｍｌの飽和食塩水で洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝０：１〜１００：１）に付し、近似白色の固体粉末５７９ｍｇを得て、収率は３４．６％である。
１−Ｎ Ｂｏｃ Ｌｉｎｉｆａｎｉｂ ７６０ｍｇ（１．６ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ３２４ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ ４６０ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）を秤量して５０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、撹拌して０．５ｈ反応させ、反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々に実施例８で調製した中間体化合物２ １１２９ｍｇ（１．９２ｍｍｏｌ）を加え、最後にＤＩＰＥＡ ５１６ｍｇ（４．０ｍｍｏｌ）を加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して１２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に１００ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに２５０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離する。有機相をさらに１５０ｍｌの飽和食塩水で洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝０：１〜１００：１）に付し、近似白色の固体粉末５７９ｍｇを得て、収率は３４．６％である。
（実施例１０：目的化合物４の製造）
実施例９で調製した中間体化合物３ ６５８ｍｇ（０．６３ｍｍｏｌ）を秤量して２０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、反応温度を−５〜５℃に制御して徐々にトリフルオロ酢酸３ｍｌ（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、当該反応温度を維持して撹拌して２０〜２４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に４０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、６０ｍｌの５％炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗浄し、１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄する。有機相を分離し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて赤褐色油状物を得る。当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、近似白色の固体粉末１８３ｍｇを得て、収率は３９．７％である。ＨＰＬＣ純度：９８．６７％（２１４ｎｍ）、９８．８７％（２５４ｎｍ）。ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ ７３３．０ ［Ｍ＋１］＋
実施例９で調製した中間体化合物３ ６５８ｍｇ（０．６３ｍｍｏｌ）を秤量して２０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、反応温度を−５〜５℃に制御して徐々にトリフルオロ酢酸３ｍｌ（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、当該反応温度を維持して撹拌して２０〜２４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に４０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、６０ｍｌの５％炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗浄し、１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄する。有機相を分離し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて赤褐色油状物を得る。当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、近似白色の固体粉末１８３ｍｇを得て、収率は３９．７％である。ＨＰＬＣ純度：９８．６７％（２１４ｎｍ）、９８．８７％（２５４ｎｍ）。ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ ７３３．０ ［Ｍ＋１］＋
構造式は以下の通りである。
（実施例１１〜１４：目的化合物５の製造）
（実施例１１：中間体化合物１の製造）
ベンジル−（６−アミノ）ヘキサンエステル塩酸塩３０４ｍｇ（１．１８ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ２３８ｍｇ（１．７６ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ １９２ｍｇ（１．７６ｍｍｏｌ）を秤量して５０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、室温で溶かすまで撹拌する。反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々にＡｓｐ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−（ＯｔＢｕ） １２６７ｍｇ（１．２３ｍｍｏｌ）を加え、加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に１００ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに２５０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離する。有機相をさらに１５０ｍｌの飽和食塩水で洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／アセトン＝１０：１〜２：１）に付し、黄色の固体粉末５４４を得て、収率は３７．４％ある。
（実施例１１：中間体化合物１の製造）
ベンジル−（６−アミノ）ヘキサンエステル塩酸塩３０４ｍｇ（１．１８ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ２３８ｍｇ（１．７６ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ １９２ｍｇ（１．７６ｍｍｏｌ）を秤量して５０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、室温で溶かすまで撹拌する。反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々にＡｓｐ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−（ＯｔＢｕ） １２６７ｍｇ（１．２３ｍｍｏｌ）を加え、加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に１００ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに２５０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離する。有機相をさらに１５０ｍｌの飽和食塩水で洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／アセトン＝１０：１〜２：１）に付し、黄色の固体粉末５４４を得て、収率は３７．４％ある。
（実施例１２：中間体化合物２の製造）
実施例１１で調製した中間体化合物１ ５１８ｍｇ（０．４２ｍｍｏｌ）を秤量し、６０ｍｌの無水メタノールに溶かし、窒素保護下で１０％Ｐｄ／Ｃ ２５ｍｇを加え、水素ガスを通して３回の置換を行い、水素雰囲気下で２ＭＰａ、２０〜６５℃に制御して６〜１２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。窒素保護下で、反応液をろ過し、パラジウム炭素を回収する。ろ液を低温で濃縮させて黄褐色油状物を得る。当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、淡黄色の固体粉末２４４ｍｇを得て、収率は５０．８％である。
実施例１１で調製した中間体化合物１ ５１８ｍｇ（０．４２ｍｍｏｌ）を秤量し、６０ｍｌの無水メタノールに溶かし、窒素保護下で１０％Ｐｄ／Ｃ ２５ｍｇを加え、水素ガスを通して３回の置換を行い、水素雰囲気下で２ＭＰａ、２０〜６５℃に制御して６〜１２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。窒素保護下で、反応液をろ過し、パラジウム炭素を回収する。ろ液を低温で濃縮させて黄褐色油状物を得る。当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、淡黄色の固体粉末２４４ｍｇを得て、収率は５０．８％である。
（実施例１３：中間体化合物３の製造）
１−Ｎ Ｂｏｃ Ｌｉｎｉｆａｎｉｂ ７６０ｍｇ（１．６ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ３２４ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ ４６０ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）を秤量して５０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、撹拌して０．５ ｈ反応させ、反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々に実施例１２で調製した中間体化合物２ ２１９５ｍｇ（１．９２ｍｍｏｌ）を加え、最後にＤＩＰＥＡ ５１６ｍｇ（４．０ｍｍｏｌ）を加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して１２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に１００ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに２５０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離する。有機相をさらに１５０ｍｌの飽和食塩水で洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝０：１〜１００：１）に付し、近似白色の固体粉末７２４ｍｇを得て、収率は２８．３％である。
１−Ｎ Ｂｏｃ Ｌｉｎｉｆａｎｉｂ ７６０ｍｇ（１．６ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ３２４ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ ４６０ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）を秤量して５０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、撹拌して０．５ ｈ反応させ、反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々に実施例１２で調製した中間体化合物２ ２１９５ｍｇ（１．９２ｍｍｏｌ）を加え、最後にＤＩＰＥＡ ５１６ｍｇ（４．０ｍｍｏｌ）を加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して１２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に１００ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに２５０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離する。有機相をさらに１５０ｍｌの飽和食塩水で洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝０：１〜１００：１）に付し、近似白色の固体粉末７２４ｍｇを得て、収率は２８．３％である。
（実施例１４：目的化合物５の製造）
実施例１３で調製した中間体化合物３ １００８ｍｇ（０．６３ｍｍｏｌ）を秤量して２０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、反応温度を−５〜５℃に制御して徐々にトリフルオロ酢酸３ｍｌ（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、当該反応温度を維持して撹拌して２０〜２４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に４０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、６０ｍｌの５％炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗浄し、１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄する。有機相を分離し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて赤褐色油状物を得る。当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、近似白色の固体粉末２３７ｍｇを得て、収率は３３．６％である。ＨＰＬＣ純度：９８．４％（２１４ｎｍ）、９９．１％（２５４ｎｍ）。ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ １１２０．０ ［Ｍ＋１］＋
実施例１３で調製した中間体化合物３ １００８ｍｇ（０．６３ｍｍｏｌ）を秤量して２０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、反応温度を−５〜５℃に制御して徐々にトリフルオロ酢酸３ｍｌ（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、当該反応温度を維持して撹拌して２０〜２４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に４０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、６０ｍｌの５％炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗浄し、１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄する。有機相を分離し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて赤褐色油状物を得る。当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、近似白色の固体粉末２３７ｍｇを得て、収率は３３．６％である。ＨＰＬＣ純度：９８．４％（２１４ｎｍ）、９９．１％（２５４ｎｍ）。ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ １１２０．０ ［Ｍ＋１］＋
構造式は以下の通りである。
（実施例１５〜１８：目的化合物６の製造）
（実施例１５：中間体化合物１の製造）
ベンジル−（６−アミノ）ヘキサンエステル塩酸塩３０４ｍｇ（１．１８ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ２３８ｍｇ（１．７６ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ １９２ｍｇ（１．７６ｍｍｏｌ）を秤量して５０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、室温で溶かすまで撹拌する。反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々にＡｓｐ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−（ＯｔＢｕ） ２４０６ｍｇ（１．２３ｍｍｏｌ）を加え、加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に１００ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに２５０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離する。有機相をさらに１５０ｍｌの飽和食塩水で洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／アセトン＝１０：１〜２：１）に付し、黄色の固体粉末７２４を得て、収率は２８．４％ある。
（実施例１５：中間体化合物１の製造）
ベンジル−（６−アミノ）ヘキサンエステル塩酸塩３０４ｍｇ（１．１８ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ２３８ｍｇ（１．７６ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ １９２ｍｇ（１．７６ｍｍｏｌ）を秤量して５０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、室温で溶かすまで撹拌する。反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々にＡｓｐ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−（ＯｔＢｕ） ２４０６ｍｇ（１．２３ｍｍｏｌ）を加え、加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に１００ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに２５０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離する。有機相をさらに１５０ｍｌの飽和食塩水で洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／アセトン＝１０：１〜２：１）に付し、黄色の固体粉末７２４を得て、収率は２８．４％ある。
（実施例１６：中間体化合物２の製造）
実施例１５で調製した中間体化合物１ ９０７ｍｇ（０．４２ｍｍｏｌ）を秤量し、６０ｍｌの無水メタノールに溶かし、窒素保護下で１０％Ｐｄ／Ｃ ２５ｍｇを加え、水素ガスを通して３回の置換を行い、水素雰囲気下で２ＭＰａ、２０〜６５℃に制御して６〜１２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。窒素保護下で、反応液をろ過し、パラジウム炭素を回収する。ろ液を低温で濃縮させて黄褐色油状物を得る。当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、淡黄色の固体粉末３５７ｍｇを得て、収率は４１．１％である。
実施例１５で調製した中間体化合物１ ９０７ｍｇ（０．４２ｍｍｏｌ）を秤量し、６０ｍｌの無水メタノールに溶かし、窒素保護下で１０％Ｐｄ／Ｃ ２５ｍｇを加え、水素ガスを通して３回の置換を行い、水素雰囲気下で２ＭＰａ、２０〜６５℃に制御して６〜１２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。窒素保護下で、反応液をろ過し、パラジウム炭素を回収する。ろ液を低温で濃縮させて黄褐色油状物を得る。当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、淡黄色の固体粉末３５７ｍｇを得て、収率は４１．１％である。
（実施例１７：中間体化合物３の製造）
１−Ｎ Ｂｏｃ Ｌｉｎｉｆａｎｉｂ ７６０ｍｇ（１．６ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ３２４ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ ４６０ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）を秤量して２５０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、撹拌して０．５ｈ反応させ、反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々に実施例１６で調製した中間体化合物２ ３９７２ｍｇ（１．９２ｍｍｏｌ）を加え、最後にＤＩＰＥＡ ５１６ｍｇ（４．０ｍｍｏｌ）を加える。加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して１２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に１００ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに２５０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離する。有機相をさらに１５０ｍｌの飽和食塩水で洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝０：１〜１００：１）に付し、近似白色の固体粉末９１０ｍｇを得て、収率は２２．５％である。
１−Ｎ Ｂｏｃ Ｌｉｎｉｆａｎｉｂ ７６０ｍｇ（１．６ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ３２４ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ ４６０ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）を秤量して２５０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、撹拌して０．５ｈ反応させ、反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々に実施例１６で調製した中間体化合物２ ３９７２ｍｇ（１．９２ｍｍｏｌ）を加え、最後にＤＩＰＥＡ ５１６ｍｇ（４．０ｍｍｏｌ）を加える。加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して１２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に１００ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに２５０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離する。有機相をさらに１５０ｍｌの飽和食塩水で洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝０：１〜１００：１）に付し、近似白色の固体粉末９１０ｍｇを得て、収率は２２．５％である。
（実施例１８：目的化合物６の製造）
実施例１７で調製した中間体化合物３ １５９２ｍｇ（０．６３ｍｍｏｌ）を秤量して６０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、反応温度を−５〜５℃に制御して徐々にトリフルオロ酢酸３ｍｌ（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、当該反応温度を維持して撹拌して２０〜２４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に４０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、６０ｍｌの５％炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗浄し、１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄する。有機相を分離し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて赤褐色油状物を得る。当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、近似白色の固体粉末２５５ｍｇを得て、収率は２２．９％である。ＨＰＬＣ純度：９６．５％（２１４ｎｍ）、９７．７％（２５４ｎｍ）。ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ １７６５．０ ［Ｍ＋１］＋
実施例１７で調製した中間体化合物３ １５９２ｍｇ（０．６３ｍｍｏｌ）を秤量して６０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、反応温度を−５〜５℃に制御して徐々にトリフルオロ酢酸３ｍｌ（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、当該反応温度を維持して撹拌して２０〜２４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に４０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、６０ｍｌの５％炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗浄し、１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄する。有機相を分離し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて赤褐色油状物を得る。当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、近似白色の固体粉末２５５ｍｇを得て、収率は２２．９％である。ＨＰＬＣ純度：９６．５％（２１４ｎｍ）、９７．７％（２５４ｎｍ）。ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ １７６５．０ ［Ｍ＋１］＋
構造式は以下の通りである。
（実施例１９〜２２：目的化合物７の製造）
（実施例１９：中間体化合物１の製造）
ベンジル−（１２−アミノ）ドデカン酸エステル塩酸塩４０４ｍｇ（１．１８ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ２３８ｍｇ（１．７６ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ １９２ｍｇ（１．７６ｍｍｏｌ）を秤量して５０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、室温で溶かすまで撹拌する。反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々にＡｓｐ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−（ＯｔＢｕ） ５８４ｍｇ（１．２３ｍｍｏｌ）を加える。加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に１００ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに２５０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離する。有機相をさらに１５０ｍｌの飽和食塩水で洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／アセトン＝１０：１〜２：１）に付し、黄色の固体粉末３２０ｍｇを得て、収率は３５．６％ある。
（実施例１９：中間体化合物１の製造）
ベンジル−（１２−アミノ）ドデカン酸エステル塩酸塩４０４ｍｇ（１．１８ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ２３８ｍｇ（１．７６ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ １９２ｍｇ（１．７６ｍｍｏｌ）を秤量して５０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、室温で溶かすまで撹拌する。反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々にＡｓｐ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−（ＯｔＢｕ） ５８４ｍｇ（１．２３ｍｍｏｌ）を加える。加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に１００ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに２５０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離する。有機相をさらに１５０ｍｌの飽和食塩水で洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／アセトン＝１０：１〜２：１）に付し、黄色の固体粉末３２０ｍｇを得て、収率は３５．６％ある。
（実施例２０：中間体化合物２の製造）
実施例１９で調製した中間体化合物１ ２６１４ｍｇ（３．４３ｍｍｏｌ）を秤量し、１００ｍｌの無水メタノールに溶かし、窒素保護下で１０％Ｐｄ／Ｃ ５０ｍｇを加え、水素ガスを通して３回の置換を行い、水素雰囲気下で２ＭＰａ、２０〜６５℃に制御して６〜１２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。窒素保護下で、反応液をろ過し、パラジウム炭素を回収する。ろ液を低温で濃縮させて黄褐色油状物を得る。当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、淡黄色の固体粉末１２９３ｍｇを得て、収率は５６．１％である。
実施例１９で調製した中間体化合物１ ２６１４ｍｇ（３．４３ｍｍｏｌ）を秤量し、１００ｍｌの無水メタノールに溶かし、窒素保護下で１０％Ｐｄ／Ｃ ５０ｍｇを加え、水素ガスを通して３回の置換を行い、水素雰囲気下で２ＭＰａ、２０〜６５℃に制御して６〜１２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。窒素保護下で、反応液をろ過し、パラジウム炭素を回収する。ろ液を低温で濃縮させて黄褐色油状物を得る。当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、淡黄色の固体粉末１２９３ｍｇを得て、収率は５６．１％である。
（実施例２１：中間体化合物３の製造）
１−Ｎ Ｂｏｃ Ｌｉｎｉｆａｎｉｂ ７６０ｍｇ（１．６ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ３２４ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ ４６０ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）を秤量して５０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、撹拌して０．５ｈ反応させ、反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々に実施例２０で調製した中間体化合物２ １０９８ｍｇ（１．９２ｍｍｏｌ）を加え、最後にＤＩＰＥＡ ５１６ｍｇ（４．０ｍｍｏｌ）を加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して１２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に１００ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに２５０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離する。有機相をさらに１５０ｍｌの飽和食塩水で洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝０：１〜１００：１）に付し、近似白色の固体粉末５１１ｍｇを得て、収率は２８．３％である。
１−Ｎ Ｂｏｃ Ｌｉｎｉｆａｎｉｂ ７６０ｍｇ（１．６ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ３２４ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ ４６０ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）を秤量して５０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、撹拌して０．５ｈ反応させ、反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々に実施例２０で調製した中間体化合物２ １０９８ｍｇ（１．９２ｍｍｏｌ）を加え、最後にＤＩＰＥＡ ５１６ｍｇ（４．０ｍｍｏｌ）を加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して１２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に１００ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに２５０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離する。有機相をさらに１５０ｍｌの飽和食塩水で洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝０：１〜１００：１）に付し、近似白色の固体粉末５１１ｍｇを得て、収率は２８．３％である。
（実施例２２：目的化合物７の製造）
実施例２１で調製した中間体化合物３ ７１１ｍｇ（０．６３ｍｍｏｌ）を秤量して２０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、反応温度を−５〜５℃に制御して徐々にトリフルオロ酢酸３ｍｌ（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、当該反応温度を維持して撹拌して２０〜２４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に４０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、６０ｍｌの５％炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗浄し、１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄する。有機相を分離し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて赤褐色油状物を得る。当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、近似白色の固体粉末１９３ｍｇを得て、収率は３７．４％である。ＨＰＬＣ純度：９４．７３％（２１４ｎｍ）、９８．５７％（２５４ｎｍ）。ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ ８１７．１ ［Ｍ＋１］＋
実施例２１で調製した中間体化合物３ ７１１ｍｇ（０．６３ｍｍｏｌ）を秤量して２０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、反応温度を−５〜５℃に制御して徐々にトリフルオロ酢酸３ｍｌ（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、当該反応温度を維持して撹拌して２０〜２４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に４０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、６０ｍｌの５％炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗浄し、１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄する。有機相を分離し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて赤褐色油状物を得る。当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、近似白色の固体粉末１９３ｍｇを得て、収率は３７．４％である。ＨＰＬＣ純度：９４．７３％（２１４ｎｍ）、９８．５７％（２５４ｎｍ）。ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ ８１７．１ ［Ｍ＋１］＋
構造式は以下の通りである。
（実施例２３〜２６：目的化合物８（Ｌｉｎｉｆａｎｉｂ−Ｃ１２−ＡＡ５）の製造）
（実施例２３：中間体化合物１の製造）
ベンジル−（１２−アミノ）ドデカン酸エステル塩酸塩４０４ｍｇ（１．１８ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ２３８ｍｇ（１．７６ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ １９２ｍｇ（１．７６ｍｍｏｌ）を秤量して２５０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、室温で溶かすまで撹拌する。反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々にＡｓｐ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−（ＯｔＢｕ） １２６７ｍｇ（１．２３ｍｍｏｌ）を加え、加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に１００ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに２５０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離する。有機相をさらに１５０ｍｌの飽和食塩水で洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／アセトン＝１０：１〜２：１）に付し、黄色の固体粉末５５３ｍｇを得て、収率は３５．６％ある。
（実施例２３：中間体化合物１の製造）
ベンジル−（１２−アミノ）ドデカン酸エステル塩酸塩４０４ｍｇ（１．１８ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ２３８ｍｇ（１．７６ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ １９２ｍｇ（１．７６ｍｍｏｌ）を秤量して２５０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、室温で溶かすまで撹拌する。反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々にＡｓｐ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−（ＯｔＢｕ） １２６７ｍｇ（１．２３ｍｍｏｌ）を加え、加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に１００ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに２５０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離する。有機相をさらに１５０ｍｌの飽和食塩水で洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／アセトン＝１０：１〜２：１）に付し、黄色の固体粉末５５３ｍｇを得て、収率は３５．６％ある。
（実施例２４：中間体化合物２の製造）
実施例２３で調製した中間体化合物１ ４０００ｍｇ（３．０ｍｍｏｌ）を秤量し、１００ｍｌの無水メタノールに溶かし、窒素保護下で１０％Ｐｄ／Ｃ ５０ｍｇを加え、水素ガスを通して３回の置換を行い、水素雰囲気下で２ＭＰａ、２０〜６５℃に制御して６〜１２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。窒素保護下で、反応液をろ過し、パラジウム炭素を回収する。ろ液を低温で濃縮させて黄褐色油状物を得る。当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、淡黄色の固体粉末１５９５ｍｇを得て、収率は４２．８％である。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ１．２７（ｂｒｓ，１４Ｈ），１．４６〜１．４７（ｍ，５４Ｈ），１．６５〜１．８５（ｍ，８Ｈ），２．３４〜２．３５（ｂｒｓ，１６Ｈ），３．０６〜３．３６（ｂｒｓ，２Ｈ），４．４６−４．５２（ｍ，５Ｈ），６．３１（ｂｒｓ，１Ｈ，−ＮＨ−Ｃ＝Ｏ），６．６８（ｂｒｓ，１Ｈ，−ＮＨ−Ｃ＝Ｏ），６．９１（ｂｒｓ，２Ｈ，−ＮＨ−Ｃ＝Ｏ），７．１９（ｂｒｓ，１Ｈ，−ＮＨ−Ｃ＝Ｏ），７．５４（ｂｒｓ，１Ｈ，−ＮＨ−Ｃ＝Ｏ）。１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ１９２．９７，１９０．３４，１７３．０２，１７２．２２，１７２．００，１７１．８１，１７１．２２，１７１．０８，１７０．７６，８２．４２，８２．２７，８２．０８，８２．０２，８０．６４，８０．５３，５２．３５，５１．８３，５１．４４，３９．８４，３３．７９，３２．５２，３２．１５，３１．６１，３１．１１，２９．２６，２９．１１，２８．９７，２８．９２，２８．８６，２８．７８，２８．７１，２８．４８，２８．３３，２８．１０，２８．０１，２７．９８，２７．７６，２７．６５，２６．６８，２４．６１，１２．１０。
実施例２３で調製した中間体化合物１ ４０００ｍｇ（３．０ｍｍｏｌ）を秤量し、１００ｍｌの無水メタノールに溶かし、窒素保護下で１０％Ｐｄ／Ｃ ５０ｍｇを加え、水素ガスを通して３回の置換を行い、水素雰囲気下で２ＭＰａ、２０〜６５℃に制御して６〜１２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。窒素保護下で、反応液をろ過し、パラジウム炭素を回収する。ろ液を低温で濃縮させて黄褐色油状物を得る。当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、淡黄色の固体粉末１５９５ｍｇを得て、収率は４２．８％である。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ１．２７（ｂｒｓ，１４Ｈ），１．４６〜１．４７（ｍ，５４Ｈ），１．６５〜１．８５（ｍ，８Ｈ），２．３４〜２．３５（ｂｒｓ，１６Ｈ），３．０６〜３．３６（ｂｒｓ，２Ｈ），４．４６−４．５２（ｍ，５Ｈ），６．３１（ｂｒｓ，１Ｈ，−ＮＨ−Ｃ＝Ｏ），６．６８（ｂｒｓ，１Ｈ，−ＮＨ−Ｃ＝Ｏ），６．９１（ｂｒｓ，２Ｈ，−ＮＨ−Ｃ＝Ｏ），７．１９（ｂｒｓ，１Ｈ，−ＮＨ−Ｃ＝Ｏ），７．５４（ｂｒｓ，１Ｈ，−ＮＨ−Ｃ＝Ｏ）。１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ１９２．９７，１９０．３４，１７３．０２，１７２．２２，１７２．００，１７１．８１，１７１．２２，１７１．０８，１７０．７６，８２．４２，８２．２７，８２．０８，８２．０２，８０．６４，８０．５３，５２．３５，５１．８３，５１．４４，３９．８４，３３．７９，３２．５２，３２．１５，３１．６１，３１．１１，２９．２６，２９．１１，２８．９７，２８．９２，２８．８６，２８．７８，２８．７１，２８．４８，２８．３３，２８．１０，２８．０１，２７．９８，２７．７６，２７．６５，２６．６８，２４．６１，１２．１０。
構造式は以下の通りである。
（実施例２５：中間体化合物３の製造）
１−Ｎ Ｂｏｃ Ｌｉｎｉｆａｎｉｂ ７６０ｍｇ（１．６ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ３２４ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ ４６０ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）を秤量して２５０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、撹拌して０．５ｈ反応させ、反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々に実施例２４で調製した中間体化合物２ ２３４０ｍｇ（１．９ｍｍｏｌ）を加え、最後にＤＩＰＥＡ ５１６ｍｇ（４．０ｍｍｏｌ）を加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して１２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に１００ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに２５０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離する。有機相をさらに１５０ｍｌの飽和食塩水で洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝０：１〜１００：１）に付し、近似白色の固体粉末８８２ｍｇを得て、収率は３２．７％である。
１−Ｎ Ｂｏｃ Ｌｉｎｉｆａｎｉｂ ７６０ｍｇ（１．６ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ３２４ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ ４６０ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）を秤量して２５０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、撹拌して０．５ｈ反応させ、反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々に実施例２４で調製した中間体化合物２ ２３４０ｍｇ（１．９ｍｍｏｌ）を加え、最後にＤＩＰＥＡ ５１６ｍｇ（４．０ｍｍｏｌ）を加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して１２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に１００ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに２５０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離する。有機相をさらに１５０ｍｌの飽和食塩水で洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝０：１〜１００：１）に付し、近似白色の固体粉末８８２ｍｇを得て、収率は３２．７％である。
（実施例２６：目的化合物８（Ｌｉｎｉｆａｎｉｂ−Ｃ１２−ＡＡ５）の製造）
実施例２５で調製した中間体化合物３ １０６２ｍｇ（０．６３ｍｍｏｌ）を秤量して６０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、反応温度を−５〜５℃に制御して徐々にトリフルオロ酢酸３ｍｌ（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、当該反応温度を維持して撹拌して２０〜２４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に４０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、６０ｍｌの５％炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗浄し、１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄する。有機相を分離し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて赤褐色油状物を得る。当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、近似白色の固体粉末２４０ｍｇを得て、収率は３１．７％である。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１２．９４（ｓ，１Ｈ），９．４０（ｓ，１Ｈ），９．２２（ｓ，１Ｈ），８．６７（ｓ，１Ｈ），８．５５（ｓ，１Ｈ），８．１６（ｓ，１Ｈ），８．０４−８．０７（ｍ，４Ｈ），７．４４−７．４８（ｍ，３Ｈ），７．３３−７．４０（ｍ，３Ｈ），７．１０（ｍ，１Ｈ），６．９８−６．９９（ｍ，１Ｈ），６．７９５（ｍ，１Ｈ），４．１７（ｍ，６Ｈ），２．９９（ｍ，５Ｈ），２．５５（ｍ，４Ｈ），１．７６−２．２７（ｍ，２５Ｈ），１．１３−１．３２（ｍ，２２Ｈ）。ＨＰＬＣ純度：９９．８３１％（２１４ｎｍ）、９８．２４２％（２５４ｎｍ）。ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ １２０４．５ ［Ｍ＋１］＋
実施例２５で調製した中間体化合物３ １０６２ｍｇ（０．６３ｍｍｏｌ）を秤量して６０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、反応温度を−５〜５℃に制御して徐々にトリフルオロ酢酸３ｍｌ（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、当該反応温度を維持して撹拌して２０〜２４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に４０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、６０ｍｌの５％炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗浄し、１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄する。有機相を分離し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて赤褐色油状物を得る。当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、近似白色の固体粉末２４０ｍｇを得て、収率は３１．７％である。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１２．９４（ｓ，１Ｈ），９．４０（ｓ，１Ｈ），９．２２（ｓ，１Ｈ），８．６７（ｓ，１Ｈ），８．５５（ｓ，１Ｈ），８．１６（ｓ，１Ｈ），８．０４−８．０７（ｍ，４Ｈ），７．４４−７．４８（ｍ，３Ｈ），７．３３−７．４０（ｍ，３Ｈ），７．１０（ｍ，１Ｈ），６．９８−６．９９（ｍ，１Ｈ），６．７９５（ｍ，１Ｈ），４．１７（ｍ，６Ｈ），２．９９（ｍ，５Ｈ），２．５５（ｍ，４Ｈ），１．７６−２．２７（ｍ，２５Ｈ），１．１３−１．３２（ｍ，２２Ｈ）。ＨＰＬＣ純度：９９．８３１％（２１４ｎｍ）、９８．２４２％（２５４ｎｍ）。ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ １２０４．５ ［Ｍ＋１］＋
構造式は以下の通りである。
（実施例２７〜３０：目的化合物９の製造）
（実施例２７：中間体化合物１の製造）
ベンジル−（１２−アミノ）ドデカン酸エステル塩酸塩４０４ｍｇ（１．１８ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ２３８ｍｇ（１．７６ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ １９２ｍｇ（１．７６ｍｍｏｌ）を秤量して２５０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、室温で溶かすまで撹拌する。反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々にＡｓｐ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−（ＯｔＢｕ）２４０６ｍｇ（１．２３ｍｍｏｌ）を加える。加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に１００ｍｌの ジクロロメタンを加えて希釈し、さらに２５０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離する。有機相をさらに１５０ｍｌの飽和食塩水で洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／アセトン＝１０：１〜２：１）に付し、黄色の固体粉末６２７ｍｇを得て、収率は２３．７％ある。
（実施例２７：中間体化合物１の製造）
ベンジル−（１２−アミノ）ドデカン酸エステル塩酸塩４０４ｍｇ（１．１８ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ２３８ｍｇ（１．７６ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ １９２ｍｇ（１．７６ｍｍｏｌ）を秤量して２５０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、室温で溶かすまで撹拌する。反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々にＡｓｐ（Ｂｏｃ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−（ＯｔＢｕ）２４０６ｍｇ（１．２３ｍｍｏｌ）を加える。加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に１００ｍｌの ジクロロメタンを加えて希釈し、さらに２５０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離する。有機相をさらに１５０ｍｌの飽和食塩水で洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／アセトン＝１０：１〜２：１）に付し、黄色の固体粉末６２７ｍｇを得て、収率は２３．７％ある。
（実施例２８：中間体化合物２の製造）
実施例２７で調製した中間体化合物１ ６７３２ｍｇ（３．０ｍｍｏｌ）を秤量し、２００ｍｌの無水メタノールに溶かし、窒素保護下で１０％Ｐｄ／Ｃ ５０ｍｇを加え、水素ガスを通して３回の置換を行い、水素雰囲気下で２ＭＰａ、２０〜６５℃に制御して６〜１２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。窒素保護下で、反応液をろ過し、パラジウム炭素を回収する。ろ液を低温で濃縮させて黄褐色油状物を得る。当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、淡黄色の固体粉末２４８０ｍｇを得て、収率は３８．４％である。
実施例２７で調製した中間体化合物１ ６７３２ｍｇ（３．０ｍｍｏｌ）を秤量し、２００ｍｌの無水メタノールに溶かし、窒素保護下で１０％Ｐｄ／Ｃ ５０ｍｇを加え、水素ガスを通して３回の置換を行い、水素雰囲気下で２ＭＰａ、２０〜６５℃に制御して６〜１２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。窒素保護下で、反応液をろ過し、パラジウム炭素を回収する。ろ液を低温で濃縮させて黄褐色油状物を得る。当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、淡黄色の固体粉末２４８０ｍｇを得て、収率は３８．４％である。
（実施例２９：中間体化合物３の製造）
１−Ｎ Ｂｏｃ Ｌｉｎｉｆａｎｉｂ ７６０ｍｇ（１．６ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ３２４ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ ４６０ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）を秤量して２５０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、撹拌して０．５ｈ反応させ、反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々に実施例２８で調製した中間体化合物２ ４１３４ｍｇ（１．９２ｍｍｏｌ）を加え、最後にＤＩＰＥＡ ５１６ｍｇ（４．０ｍｍｏｌ）を加える。加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して１２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に１００ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに２５０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離する。有機相をさらに１５０ｍｌの飽和食塩水で洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝０：１〜１００：１）に付し、近似白色の固体粉末７７７ｍｇを得て、収率は１８．６％である。
１−Ｎ Ｂｏｃ Ｌｉｎｉｆａｎｉｂ ７６０ｍｇ（１．６ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ３２４ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ ４６０ｍｇ（２．４ｍｍｏｌ）を秤量して２５０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、撹拌して０．５ｈ反応させ、反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々に実施例２８で調製した中間体化合物２ ４１３４ｍｇ（１．９２ｍｍｏｌ）を加え、最後にＤＩＰＥＡ ５１６ｍｇ（４．０ｍｍｏｌ）を加える。加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して１２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に１００ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに２５０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離する。有機相をさらに１５０ｍｌの飽和食塩水で洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝０：１〜１００：１）に付し、近似白色の固体粉末７７７ｍｇを得て、収率は１８．６％である。
（実施例３０：目的化合物９の製造）
実施例２９で調製した中間体化合物３ １６４５ｍｇ（０．６３ｍｍｏｌ）を秤量して６０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、反応温度を−５〜５℃に制御して徐々にトリフルオロ酢酸３ｍｌ（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、当該反応温度を維持して撹拌して２０〜２４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に４０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、６０ｍｌの５％炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗浄し、１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄する。有機相を分離し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて赤褐色油状物を得る。当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、近似白色の固体粉末３７９ｍｇを得て、収率は３２．５％である。ＨＰＬＣ純度：９４．６％（２１４ｎｍ）、９６．９％（２５４ｎｍ）。ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ １８４９．７ ［Ｍ＋１］＋
実施例２９で調製した中間体化合物３ １６４５ｍｇ（０．６３ｍｍｏｌ）を秤量して６０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、反応温度を−５〜５℃に制御して徐々にトリフルオロ酢酸３ｍｌ（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、当該反応温度を維持して撹拌して２０〜２４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に４０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、６０ｍｌの５％炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗浄し、１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄する。有機相を分離し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて赤褐色油状物を得る。当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、近似白色の固体粉末３７９ｍｇを得て、収率は３２．５％である。ＨＰＬＣ純度：９４．６％（２１４ｎｍ）、９６．９％（２５４ｎｍ）。ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ １８４９．７ ［Ｍ＋１］＋
構造式は以下の通りである。
（実施例３１−３３：目的化合物１０の製造）
（実施例３１：代謝産物中間体Ｍｃの製造）
Ｂｏｃ−Ｌ−アスパラギン酸１−ベンジルエステル１３７ｍｇ（０．４２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ７７．８ｍｇ（０．５８ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ １１０ｍｇ（０．５８ｍｍｏｌ）を秤量して１０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、撹拌して０．５ｈ反応させ、反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々に１−Ｎ Ｂｏｃ Ｌｉｎｉｆａｎｉｂ １８１ｍｇ（０．３８ｍｍｏｌ）を加え、最後にＤＩＰＥＡ １２４ｍｇ（０．９６ｍｍｏｌ）を加える。加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に５０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１００ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離して無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１：０〜３０：１）に付し、黄色油状物１６２ｍｇを得て、収率は５４．７％である。
（実施例３１：代謝産物中間体Ｍｃの製造）
Ｂｏｃ−Ｌ−アスパラギン酸１−ベンジルエステル１３７ｍｇ（０．４２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ７７．８ｍｇ（０．５８ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ １１０ｍｇ（０．５８ｍｍｏｌ）を秤量して１０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、撹拌して０．５ｈ反応させ、反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々に１−Ｎ Ｂｏｃ Ｌｉｎｉｆａｎｉｂ １８１ｍｇ（０．３８ｍｍｏｌ）を加え、最後にＤＩＰＥＡ １２４ｍｇ（０．９６ｍｍｏｌ）を加える。加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に５０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１００ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離して無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１：０〜３０：１）に付し、黄色油状物１６２ｍｇを得て、収率は５４．７％である。
（実施例３２：代謝産物中間体Ｍｄの製造）
実施例３１で調製した中間体化合物Ｍｃ ２２６ｍｇ（０．２９ｍｍｏｌ）を秤量して２０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、反応温度を−５〜５℃に制御して徐々にトリフルオロ酢酸３ｍｌ（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、当該反応温度を維持して撹拌して１．５〜２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する反応液に５０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、６０ｍｌの５％炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗浄し、１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄する。有機相を分離し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて黄色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、黄色油状物１１８ｍｇを得て、収率は７０．４％である。
実施例３１で調製した中間体化合物Ｍｃ ２２６ｍｇ（０．２９ｍｍｏｌ）を秤量して２０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、反応温度を−５〜５℃に制御して徐々にトリフルオロ酢酸３ｍｌ（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、当該反応温度を維持して撹拌して１．５〜２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する反応液に５０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、６０ｍｌの５％炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗浄し、１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄する。有機相を分離し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて黄色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、黄色油状物１１８ｍｇを得て、収率は７０．４％である。
（実施例３３：目的化合物１０の製造）
実施例３２で調製した中間体化合物Ｍｄ ３３６ｍｇ（０．５８ｍｍｏｌ）を秤量し、３０ｍｌの無水メタノールに溶かし、窒素保護下で１０％Ｐｄ／Ｃ ２５ｍｇを加え、水素ガスを通して３回の置換を行い、水素雰囲気下で２ＭＰａ、２０〜６５℃に制御して６〜１２ｈ反応させ、（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。窒素保護下で、反応液をろ過し、パラジウム炭素を回収する。ろ液を低温で濃縮させて淡黄色油状物を得る当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、白色の固体粉末１５３ｍｇを得て、収率は５３．７％である。ＨＰＬＣ純度：９４．６％（２１４ｎｍ）、９７．３％（２５４ｎｍ）。ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ ４９１．０ ［Ｍ＋１］＋
実施例３２で調製した中間体化合物Ｍｄ ３３６ｍｇ（０．５８ｍｍｏｌ）を秤量し、３０ｍｌの無水メタノールに溶かし、窒素保護下で１０％Ｐｄ／Ｃ ２５ｍｇを加え、水素ガスを通して３回の置換を行い、水素雰囲気下で２ＭＰａ、２０〜６５℃に制御して６〜１２ｈ反応させ、（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。窒素保護下で、反応液をろ過し、パラジウム炭素を回収する。ろ液を低温で濃縮させて淡黄色油状物を得る当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、白色の固体粉末１５３ｍｇを得て、収率は５３．７％である。ＨＰＬＣ純度：９４．６％（２１４ｎｍ）、９７．３％（２５４ｎｍ）。ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ ４９１．０ ［Ｍ＋１］＋
構造式は以下の通りである。
（実施例３４〜３８：目的化合物１１の製造）
（実施例３４：代謝産物中間体Ｍａの製造）
６−（ＢＯＣ−アミノ）ヘキサン酸１３６ｍｇ（０．５９ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ １０７ｍｇ（０．８ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ １５２ｍｇ（０．８ｍｍｏｌ）を秤量して１０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、撹拌して０．５ｈ反応させ、反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々に１−Ｎ Ｂｏｃ Ｌｉｎｉｆａｎｉｂ ２５２ｍｇ（０．５３ｍｍｏｌ）を加え、最後にＤＩＰＥＡ １７１ｍｇ（１．３ｍｍｏｌ）を加える。加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に５０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１００ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離して無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１：０〜３０：１）に付し、黄色油状物１６７ｍｇを得て、収率は４５．８％である。
（実施例３４：代謝産物中間体Ｍａの製造）
６−（ＢＯＣ−アミノ）ヘキサン酸１３６ｍｇ（０．５９ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ １０７ｍｇ（０．８ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ １５２ｍｇ（０．８ｍｍｏｌ）を秤量して１０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、撹拌して０．５ｈ反応させ、反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々に１−Ｎ Ｂｏｃ Ｌｉｎｉｆａｎｉｂ ２５２ｍｇ（０．５３ｍｍｏｌ）を加え、最後にＤＩＰＥＡ １７１ｍｇ（１．３ｍｍｏｌ）を加える。加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に５０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１００ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離して無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１：０〜３０：１）に付し、黄色油状物１６７ｍｇを得て、収率は４５．８％である。
（実施例３５：代謝産物中間体Ｍｂの製造）
実施例３４で調製した中間体化合物Ｍａ ２２７ｍｇ（０．３３ｍｍｏｌ）を秤量して２０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、反応温度を−５〜５℃に制御して徐々にトリフルオロ酢酸３ｍｌ（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、当該反応温度を維持して撹拌して１．５〜２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に５０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、６０ｍｌの５％炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗浄し、１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄する。有機相を分離し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて赤褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、黄色油状物１４３ｍｇを得て、収率は８８．６％である。
実施例３４で調製した中間体化合物Ｍａ ２２７ｍｇ（０．３３ｍｍｏｌ）を秤量して２０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、反応温度を−５〜５℃に制御して徐々にトリフルオロ酢酸３ｍｌ（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、当該反応温度を維持して撹拌して１．５〜２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に５０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、６０ｍｌの５％炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗浄し、１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄する。有機相を分離し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて赤褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、黄色油状物１４３ｍｇを得て、収率は８８．６％である。
（実施例３６：代謝産物中間体Ｍｃの製造）
Ｂｏｃ−Ｌ−アスパラギン酸１−ベンジルエステル１３７ｍｇ（０．４２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ７７．８ｍｇ（０．５８ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ １１０ｍｇ（０．５８ｍｍｏｌ）を秤量して１０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、撹拌して０．５ｈ反応させ、反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々に実施例３５で調製した中間体Ｍｂ １８５ｍｇ（０．３８ｍｍｏｌ）を加え、最後にＤＩＰＥＡ １２４ｍｇ（０．９６ｍｍｏｌ）を加える。加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に５０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１００ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離して無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１：０〜３０：１）に付し、黄色油状物１０６ｍｇを得て、収率は３５．２％である。
Ｂｏｃ−Ｌ−アスパラギン酸１−ベンジルエステル１３７ｍｇ（０．４２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ７７．８ｍｇ（０．５８ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ １１０ｍｇ（０．５８ｍｍｏｌ）を秤量して１０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、撹拌して０．５ｈ反応させ、反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々に実施例３５で調製した中間体Ｍｂ １８５ｍｇ（０．３８ｍｍｏｌ）を加え、最後にＤＩＰＥＡ １２４ｍｇ（０．９６ｍｍｏｌ）を加える。加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に５０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１００ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離して無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１：０〜３０：１）に付し、黄色油状物１０６ｍｇを得て、収率は３５．２％である。
（実施例３７：代謝産物中間体Ｍｄの製造）
実施例３６で調製した中間体化合物Ｍｃ ２３０ｍｇ（０．２９ｍｍｏｌ）を秤量して２０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、反応温度を−５〜５℃に制御して徐々にトリフルオロ酢酸３ｍｌ（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、当該反応温度を維持して撹拌して１．５〜２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する反応液に５０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、６０ｍｌの５％炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗浄し、１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄する。有機相を分離し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて黄色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、黄色油状物１３１ｍｇを得て、収率は６５．４％である。
実施例３６で調製した中間体化合物Ｍｃ ２３０ｍｇ（０．２９ｍｍｏｌ）を秤量して２０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、反応温度を−５〜５℃に制御して徐々にトリフルオロ酢酸３ｍｌ（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、当該反応温度を維持して撹拌して１．５〜２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する反応液に５０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、６０ｍｌの５％炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗浄し、１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄する。有機相を分離し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて黄色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、黄色油状物１３１ｍｇを得て、収率は６５．４％である。
（実施例３８：目的化合物１１の製造）
実施例３７で調製した中間体化合物Ｍｄ ４２５ｍｇ（０．６１ｍｍｏｌ）を秤量し、３０ｍｌの無水メタノールに溶かし、窒素保護下で１０％Ｐｄ／Ｃ ２５ｍｇを加え、水素ガスを通して３回の置換を行い、水素雰囲気下で２ＭＰａ、２０〜６５℃に制御して６〜１２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。窒素保護下で、反応液をろ過し、パラジウム炭素を回収する。ろ液を低温で濃縮させて淡黄色油状物を得る当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、白色の固体粉末１９８ｍｇを得て、収率は５３．７％である。ＨＰＬＣ純度：９５．８％（２１４ｎｍ）、９９．５％（２５４ｎｍ）。ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ ６０４．３ ［Ｍ＋１］＋
実施例３７で調製した中間体化合物Ｍｄ ４２５ｍｇ（０．６１ｍｍｏｌ）を秤量し、３０ｍｌの無水メタノールに溶かし、窒素保護下で１０％Ｐｄ／Ｃ ２５ｍｇを加え、水素ガスを通して３回の置換を行い、水素雰囲気下で２ＭＰａ、２０〜６５℃に制御して６〜１２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。窒素保護下で、反応液をろ過し、パラジウム炭素を回収する。ろ液を低温で濃縮させて淡黄色油状物を得る当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、白色の固体粉末１９８ｍｇを得て、収率は５３．７％である。ＨＰＬＣ純度：９５．８％（２１４ｎｍ）、９９．５％（２５４ｎｍ）。ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ ６０４．３ ［Ｍ＋１］＋
構造式は以下の通りである。
（実施例３９〜４３：目的化合物１２（Ｌ−Ｃ１２−Ａｓｐ）の製造）
（実施例３９：代謝産物中間体Ｍａの製造）
１２−（ＢＯＣ−アミノ）ドデカン酸１８６ｍｇ（０．５９ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ １０７ｍｇ（０．８ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ １５２ｍｇ（０．８ｍｍｏｌ）を秤量して１０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、撹拌して０．５ｈ反応させ、反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々に１−Ｎ Ｂｏｃ Ｌｉｎｉｆａｎｉｂ ２５２ｍｇ（０．５３ｍｍｏｌ）を加え、最後にＤＩＰＥＡ １７１ｍｇ（１．３ｍｍｏｌ）を加える。加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に５０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１００ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離して無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１：０〜３０：１）に付し、黄色油状物１７３ｍｇを得て、収率は４２．２％である。
（実施例３９：代謝産物中間体Ｍａの製造）
１２−（ＢＯＣ−アミノ）ドデカン酸１８６ｍｇ（０．５９ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ １０７ｍｇ（０．８ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ １５２ｍｇ（０．８ｍｍｏｌ）を秤量して１０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、撹拌して０．５ｈ反応させ、反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々に１−Ｎ Ｂｏｃ Ｌｉｎｉｆａｎｉｂ ２５２ｍｇ（０．５３ｍｍｏｌ）を加え、最後にＤＩＰＥＡ １７１ｍｇ（１．３ｍｍｏｌ）を加える。加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に５０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１００ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離して無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１：０〜３０：１）に付し、黄色油状物１７３ｍｇを得て、収率は４２．２％である。
（実施例４０：代謝産物中間体Ｍｂの製造）
実施例３９で調製した中間体化合物Ｍａ ２５５ｍｇ（０．３３ｍｍｏｌ）を秤量して２０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、反応温度を−５〜５℃に制御して徐々にトリフルオロ酢酸３ｍｌ（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、当該反応温度を維持して撹拌して１．５〜２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に５０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、６０ｍｌの５％炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗浄し、１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄する。有機相を分離し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて赤褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、黄色油状物１５５ｍｇを得て、収率は８２％である。
実施例３９で調製した中間体化合物Ｍａ ２５５ｍｇ（０．３３ｍｍｏｌ）を秤量して２０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、反応温度を−５〜５℃に制御して徐々にトリフルオロ酢酸３ｍｌ（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、当該反応温度を維持して撹拌して１．５〜２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に５０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、６０ｍｌの５％炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗浄し、１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄する。有機相を分離し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて赤褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、黄色油状物１５５ｍｇを得て、収率は８２％である。
（実施例４１：代謝産物中間体Ｍｃの製造）
Ｂｏｃ−Ｌ−アスパラギン酸１−ベンジルエステル１３７ｍｇ（０．４２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ７７．８ｍｇ（０．５８ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ １１０ｍｇ（０．５８ｍｍｏｌ）を秤量して１０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、撹拌して０．５ｈ反応させ、反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々に実施例４０で調製した中間体Ｍｂ ２２０ｍｇ（０．３８ｍｇ（を加え、最後にＤＩＰＥＡ １２４ｍｇ（０．９６ｍｍｏｌ）を加え、加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に５０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１００ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離して無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１：０〜３０：１）に付し、黄色油状物１８３ｍｇを得て、収率は５４．９％である。
Ｂｏｃ−Ｌ−アスパラギン酸１−ベンジルエステル１３７ｍｇ（０．４２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ ７７．８ｍｇ（０．５８ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ １１０ｍｇ（０．５８ｍｍｏｌ）を秤量して１０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、撹拌して０．５ｈ反応させ、反応温度を２０〜４０℃に制御して徐々に実施例４０で調製した中間体Ｍｂ ２２０ｍｇ（０．３８ｍｇ（を加え、最後にＤＩＰＥＡ １２４ｍｇ（０．９６ｍｍｏｌ）を加え、加えた後、当該反応温度を維持して撹拌して４ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。反応液に５０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１００ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、有機相を分離して無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて褐色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１：０〜３０：１）に付し、黄色油状物１８３ｍｇを得て、収率は５４．９％である。
（実施例４２：代謝産物中間体Ｍｄの製造）
実施例４１で調製した中間体化合物Ｍｃ ２５０ｍｇ（０．２９ｍｍｏｌ）を秤量して２０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、反応温度を−５〜５℃に制御して徐々にトリフルオロ酢酸３ｍｌ（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、当該反応温度を維持して撹拌して１．５〜２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する反応液に５０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、６０ｍｌの５％炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗浄し、１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄する。有機相を分離し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて黄色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、黄色油状物１５３ｍｇを得て、収率は６７．６％である。
実施例４１で調製した中間体化合物Ｍｃ ２５０ｍｇ（０．２９ｍｍｏｌ）を秤量して２０ｍｌのジクロロメタンに溶かし、反応温度を−５〜５℃に制御して徐々にトリフルオロ酢酸３ｍｌ（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、当該反応温度を維持して撹拌して１．５〜２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する反応液に５０ｍｌのジクロロメタンを加えて希釈し、さらに１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄し、６０ｍｌの５％炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗浄し、１２０ｍｌの脱イオン水で２回洗浄する。有機相を分離し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤をろ過除去し、ろ液を低温で濃縮させて黄色油状物を得る。当該油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、黄色油状物１５３ｍｇを得て、収率は６７．６％である。
（実施例４３：目的化合物１２（Ｌｉｎｉｆａｎｉｂ−Ｃ１２−Ａｓｐ）の製造）
実施例４２で調製した中間体化合物Ｍｄ ２１０ｍｇ（０．２７ｍｍｏｌ）を秤量し、３０ｍｌの無水メタノールに溶かし、窒素保護下で１０％Ｐｄ／Ｃ ２５ｍｇを加え、水素ガスを通して３回の置換を行い、水素雰囲気下で２ＭＰａ、２０〜６５℃に制御して６〜１２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。窒素保護下で、反応液をろ過し、パラジウム炭素を回収する。ろ液を低温で濃縮させて淡黄色油状物を得る当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、白色の固体粉末９１ｍｇを得て、収率は４９．２％である。１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ：１．１０９−１．１２７（ｍ，１６Ｈ），１．２３４−１．３５２（ｍ，２Ｈ），１．９０２−１．９２０（ｍ，２Ｈ），２．２７８（ｓ，３Ｈ），２．６４２−２．７４１（ｍ，２Ｈ），２．９９３−３．０４０（ｍ，２Ｈ），３．７４０−３，８０６（ｍ，１Ｈ），６．７９６−６．８０８（ｍ，１Ｈ），６．９７１−６．９８８（ｍ，１Ｈ），７．０８９−７．１１８（ｍ，１Ｈ），７．３２０−７．４０７（ｍ，３Ｈ），７．４５３−７．５０５（ｍ，３Ｈ），８．０２２−８．０４２（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），８．１２１−８．１４８（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），８．５２４（ｓ，１Ｈ），９．２１９（ｓ，１Ｈ），９．４２４（ｓ，１Ｈ），１２．９５６（ｓ，１Ｈ）。ＨＰＬＣ純度：９６．６％（２１４ｎｍ）、９９．９％（２５４ｎｍ）。ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ ６８８．４ ［Ｍ＋１］＋
実施例４２で調製した中間体化合物Ｍｄ ２１０ｍｇ（０．２７ｍｍｏｌ）を秤量し、３０ｍｌの無水メタノールに溶かし、窒素保護下で１０％Ｐｄ／Ｃ ２５ｍｇを加え、水素ガスを通して３回の置換を行い、水素雰囲気下で２ＭＰａ、２０〜６５℃に制御して６〜１２ｈ反応させ、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝４０：１）によって反応が完了したかどうかを確認する。窒素保護下で、反応液をろ過し、パラジウム炭素を回収する。ろ液を低温で濃縮させて淡黄色油状物を得る当該油状物を分取クロマトグラフィーに付し、白色の固体粉末９１ｍｇを得て、収率は４９．２％である。１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ：１．１０９−１．１２７（ｍ，１６Ｈ），１．２３４−１．３５２（ｍ，２Ｈ），１．９０２−１．９２０（ｍ，２Ｈ），２．２７８（ｓ，３Ｈ），２．６４２−２．７４１（ｍ，２Ｈ），２．９９３−３．０４０（ｍ，２Ｈ），３．７４０−３，８０６（ｍ，１Ｈ），６．７９６−６．８０８（ｍ，１Ｈ），６．９７１−６．９８８（ｍ，１Ｈ），７．０８９−７．１１８（ｍ，１Ｈ），７．３２０−７．４０７（ｍ，３Ｈ），７．４５３−７．５０５（ｍ，３Ｈ），８．０２２−８．０４２（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），８．１２１−８．１４８（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），８．５２４（ｓ，１Ｈ），９．２１９（ｓ，１Ｈ），９．４２４（ｓ，１Ｈ），１２．９５６（ｓ，１Ｈ）。ＨＰＬＣ純度：９６．６％（２１４ｎｍ）、９９．９％（２５４ｎｍ）。ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ ６８８．４ ［Ｍ＋１］＋
構造式は以下の通りである。
（実施例４４：腫瘍細胞株の増殖に対するＬｉｎｉｆａｎｉｂ関連化合物の効果）
本発明は細胞増殖実験（Ａｌａｍａｒ Ｂｌｕｅ検出プラットフォーム）を通じて１３個の化合物（化合物１−１２およびＬｉｎｉｆａｎｉｂ）について５４株の市販腫瘍細胞株（２６株の肝がん細胞株を含む）における半数阻害濃度（ＩＣ５０値）を測定し、化合物１−１２と活性薬物Ｌｉｎｉｆａｎｉｂの活性の相違点について考察する。
本発明は細胞増殖実験（Ａｌａｍａｒ Ｂｌｕｅ検出プラットフォーム）を通じて１３個の化合物（化合物１−１２およびＬｉｎｉｆａｎｉｂ）について５４株の市販腫瘍細胞株（２６株の肝がん細胞株を含む）における半数阻害濃度（ＩＣ５０値）を測定し、化合物１−１２と活性薬物Ｌｉｎｉｆａｎｉｂの活性の相違点について考察する。
１．計器および材料
Ｔｈｅｒｍｏ ３１１のＣＯ２インキュベーター、Ｈａｉｅｒバイオセーフティキャビネット、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓマイクロプレートリーダー、ＸｉａｎｇｙｉＬ ５３０の卓上低速遠心分離機、Ｏｌｙｍｐｕｓ ＩＸ５１の倒立型蛍光顕微鏡、ＤＭＥＭ、ＲＰＭＩ １６４０、ＭＥＭ、ＤＭＥＭ／Ｆ１２ １：１培地、ウシ胎児血清、０．２５％トリプシン溶液、リン酸塩緩衝液（サーモフィッシャー上海有限公司）、ｓｉｇｍａジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、レサズリンと、
５４株の市販腫瘍細胞株（２６株の肝がん細胞株を含む）。
Ｔｈｅｒｍｏ ３１１のＣＯ２インキュベーター、Ｈａｉｅｒバイオセーフティキャビネット、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓマイクロプレートリーダー、ＸｉａｎｇｙｉＬ ５３０の卓上低速遠心分離機、Ｏｌｙｍｐｕｓ ＩＸ５１の倒立型蛍光顕微鏡、ＤＭＥＭ、ＲＰＭＩ １６４０、ＭＥＭ、ＤＭＥＭ／Ｆ１２ １：１培地、ウシ胎児血清、０．２５％トリプシン溶液、リン酸塩緩衝液（サーモフィッシャー上海有限公司）、ｓｉｇｍａジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、レサズリンと、
５４株の市販腫瘍細胞株（２６株の肝がん細胞株を含む）。
被験薬物：化合物１−１２および活性薬物Ｌｉｎｉｆａｎｉｂ、化学療法用薬物ドキソルビシン（Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ）（ＨＹ−１５１４２、上海皓元生物医薬科技有限公司）。
２．実験方法
２．１ 異なる細胞株の培養
５４株の細胞株をウシ胎児血清含有の培地で培養し、３７℃、５％のＣＯ２インキュベーターでインキュベートする。細胞は培養容器に接着した状態で増殖し、倒立型蛍光顕微鏡で成長の様子を観察し、細胞密集度が８０％−９０％に達したら継代培養を行う。継代の割合と数は実験ニーズに従い、今回の細胞株継代の培養割合は一般的に１：２〜１：３である。
２．１ 異なる細胞株の培養
５４株の細胞株をウシ胎児血清含有の培地で培養し、３７℃、５％のＣＯ２インキュベーターでインキュベートする。細胞は培養容器に接着した状態で増殖し、倒立型蛍光顕微鏡で成長の様子を観察し、細胞密集度が８０％−９０％に達したら継代培養を行う。継代の割合と数は実験ニーズに従い、今回の細胞株継代の培養割合は一般的に１：２〜１：３である。
２．２ 異なる腫瘍細胞株に対する増殖抑制作用
細胞測定：対数増殖期にある５４株の細胞株を使用し、５００〜１Ｘ１０４／ウェル（予備実験において決定される各細胞株の最適な播種密度）の数に従って９６ウェルの培養プレートに接種し、５％ＣＯ２を含有した加湿インキュベーターで３７℃の条件で４ｈ培養した後、各ウェルに１０μＬの化合物１−１２または活性薬物Ｌｉｎｉｆａｎｉｂを加え、各化合物について９つの薬物濃度勾配を測定し（最高測定濃度を３．１６倍勾配に希釈する）、各化合物の溶解度に基づく出発濃度はそれぞれ１００または３０μＭである。且つ各細胞株を測定すると同時にＱＣ参照化合物Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎを加え、その最終的な薬物濃度は順にそれぞれ１０、３．１６、１、０．３１、０．１、０．０３、０．０１、０．００３および０．００１μＭである。それと同時に陽性対照群（１００％抑制）および陰性対照群（０％抑制）を設置し、薬物群は各濃度２ウェル繰り返し、陽性対照群および陰性対照群は６ウェル繰り返し、継続してインキュベーターで６日間培養した後、後続のＡｌａｍａｒＢｌｕｅ測定操作に入る。
細胞測定：対数増殖期にある５４株の細胞株を使用し、５００〜１Ｘ１０４／ウェル（予備実験において決定される各細胞株の最適な播種密度）の数に従って９６ウェルの培養プレートに接種し、５％ＣＯ２を含有した加湿インキュベーターで３７℃の条件で４ｈ培養した後、各ウェルに１０μＬの化合物１−１２または活性薬物Ｌｉｎｉｆａｎｉｂを加え、各化合物について９つの薬物濃度勾配を測定し（最高測定濃度を３．１６倍勾配に希釈する）、各化合物の溶解度に基づく出発濃度はそれぞれ１００または３０μＭである。且つ各細胞株を測定すると同時にＱＣ参照化合物Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎを加え、その最終的な薬物濃度は順にそれぞれ１０、３．１６、１、０．３１、０．１、０．０３、０．０１、０．００３および０．００１μＭである。それと同時に陽性対照群（１００％抑制）および陰性対照群（０％抑制）を設置し、薬物群は各濃度２ウェル繰り返し、陽性対照群および陰性対照群は６ウェル繰り返し、継続してインキュベーターで６日間培養した後、後続のＡｌａｍａｒＢｌｕｅ測定操作に入る。
ＡｌａｍａｒＢｌｕｅ測定操作：各ウェルに１０μＬのＡｌａｍａｒＢｌｕｅ試薬を加えて１−４ｈインキュベートし、１−２ｍｉｎ振盪し、ＭＤマイクロプレートリーダーＥＸ：５６０ｎｍ、ＥＭ：５９０ｎｍ波長で蛍光値を測定し、結果を記録し、本発明の化合物が細胞に対する抑制率（％）＝（Ａ０％抑制−Ａ投与）／（Ａ０％抑制−Ａ１００％抑制）×１００％を計算し、さらにＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ５．０またはＭＡＴＩＬＡＢソフトウェアにおいて非線形回帰を使用する方法（一般的に４パラメータフィッティングカーブ方程式）により、ドローイングをして薬物用量反応曲線を得て、それによって本発明の化合物ががん細胞株に作用するＩＣ５０値を得る。
３．結果と分析
３．１ １３個の被験試薬（化合物１−１２およびＬｉｎｉｆａｎｉｂ）が５４株の市販腫瘍細胞株におけるＩＣ５０をまとめた結果を表１および表２に示す。
３．１ １３個の被験試薬（化合物１−１２およびＬｉｎｉｆａｎｉｂ）が５４株の市販腫瘍細胞株におけるＩＣ５０をまとめた結果を表１および表２に示す。
表１および表２の結果から、様々な腫瘍細胞株が化合物１−３と１０およびＬｉｎｉｆａｎｉｂに対するＩＣ５０はほとんど変わらず、その他の８個の化合物（化合物４−９，１１および１２）は、いずれもＬｉｎｉｆａｎｉｂの腫瘍細胞増殖の抑制活性を遮断することに成功したことがわかる。大部分の腫瘍細胞がこの８個の化合物およびＬｉｎｉｆａｎｉｂに対するＩＣ５０は５倍以上の差があることがわかる。Ｌｉｎｉｆａｎｉｂに感受性のある細胞は３株あり、それぞれＫＡＳＵＭＩ−１（白血病細胞）、ＮＣＩ−Ｈ１７０３（肺がん細胞）およびＡＮ３−ＣＡ（子宮内膜腫細胞）であり、そのＩＣ５０はそれぞれ０．０１、０．０２および０．１９μＭであり、その前駆体Ｌｉｎｉｆａｎｉｂ−Ｃ１２−ＡＡ５に対するＩＣ５０はそれぞれ０．３９、０．１９および５．６８μＭであり、それぞれ３９、８．５および２９．９倍の差がある。
５４株の市販腫瘍細胞株のうち２６株が肝がん細胞株であり、ほぼ半数の肝がん細胞株（１２／２６、４６％）がＬｉｎｉｆａｎｉｂに対して中等度の感受性を有し、ＩＣ５０＜５μＭ、且つ大部分の肝がん細胞株（２３／２６，８８％）が前駆体Ｌｉｎｉｆａｎｉｂ−Ｃ１２−ＡＡ５（化合物８）およびＬｉｎｉｆａｎｉｂに対するＩＣ５０は８倍以上の差があり、ほとんどすべての肝がん細胞が中間体に対して応答を示さず、表１および表２を参照する。
（実施例４５：血漿での安定性に関する研究）
本実施例は化合物８のラット血漿、でのインキュベーション安定性（化合物８が代謝されて中間体化合物１２およびＬｉｎｉｆａｎｉｂを生成し、中間体化合物１２はさらに代謝されてＬｉｎｉｆａｎｉｂを生成する）について考察し、且つ代謝産物の定量解析を行い、それと同時に陽性薬物でインキュベーションシステムの安定性を検証し、化合物の薬物形成特性の評価のために参照を提供することを目的とする。
本実施例は化合物８のラット血漿、でのインキュベーション安定性（化合物８が代謝されて中間体化合物１２およびＬｉｎｉｆａｎｉｂを生成し、中間体化合物１２はさらに代謝されてＬｉｎｉｆａｎｉｂを生成する）について考察し、且つ代謝産物の定量解析を行い、それと同時に陽性薬物でインキュベーションシステムの安定性を検証し、化合物の薬物形成特性の評価のために参照を提供することを目的とする。
１ 計器および材料
計器：液体クロマトグラフ質量分析計、ＡＢＩ
材料：ＳＤ系雄ラット（２００−２５０ ｇ）、北京維通利華
試料：陽性薬物とその代謝産物Ｍ１およびＭ２、化合物８とその代謝産物化合物１２およびＬｉｎｉｆａｎｉｂ。
計器：液体クロマトグラフ質量分析計、ＡＢＩ
材料：ＳＤ系雄ラット（２００−２５０ ｇ）、北京維通利華
試料：陽性薬物とその代謝産物Ｍ１およびＭ２、化合物８とその代謝産物化合物１２およびＬｉｎｉｆａｎｉｂ。
２ 化合物８の血漿中での安定性に関する研究
実験動物
種類：ＳＤ系ラット；数量：２
性別：雄；体重：２００−２５０ｇ
実験動物
種類：ＳＤ系ラット；数量：２
性別：雄；体重：２００−２５０ｇ
実験手順
１．動物の血を採取し、血液サンプルをＥＤＴＡ抗凝固剤入りの採血管に入れ、４℃の条件下で、３０００ｇで１５ｍｉｎ遠心し、血漿を分離し、２つの血液サンプルを等容量で混合する。
２．一定量の化合物８を秤量してＤＭＳＯ：ＭｅＯＨ（２：８）に溶かし、純度換算により２００μＭの母液を調製し、血漿内に化合物を入れてその最終濃度が１μｇ／ｍＬになるようにし、体系中の有機相の割合は０．５％以下である。
３．３７℃の水浴でインキュベートし、採取時期を０、０．５、１、２、４、６、８ｈに設定する。各採取時期において１００μＬのサンプルを採取し、３００μＬのアセトニトリル（内標準物質を含む）を加えて沈殿処理を行い、１２０００ｒｐｍで５ｍｉｎ遠心し、上澄液２００μＬを取ってＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析に供する。
４．標準曲線を作成し、化合物８、化合物１２およびＬｉｎｉｆａｎｉｂを定量的に測定する。
１．動物の血を採取し、血液サンプルをＥＤＴＡ抗凝固剤入りの採血管に入れ、４℃の条件下で、３０００ｇで１５ｍｉｎ遠心し、血漿を分離し、２つの血液サンプルを等容量で混合する。
２．一定量の化合物８を秤量してＤＭＳＯ：ＭｅＯＨ（２：８）に溶かし、純度換算により２００μＭの母液を調製し、血漿内に化合物を入れてその最終濃度が１μｇ／ｍＬになるようにし、体系中の有機相の割合は０．５％以下である。
３．３７℃の水浴でインキュベートし、採取時期を０、０．５、１、２、４、６、８ｈに設定する。各採取時期において１００μＬのサンプルを採取し、３００μＬのアセトニトリル（内標準物質を含む）を加えて沈殿処理を行い、１２０００ｒｐｍで５ｍｉｎ遠心し、上澄液２００μＬを取ってＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析に供する。
４．標準曲線を作成し、化合物８、化合物１２およびＬｉｎｉｆａｎｉｂを定量的に測定する。
血漿中での安定性研究結果
陽性薬物は予想通り時間の経過とともに血漿において代謝産物に代謝され、血漿体系が安定であり、後続の測定結果が信頼性あることを明らかにする。
陽性薬物は予想通り時間の経過とともに血漿において代謝産物に代謝され、血漿体系が安定であり、後続の測定結果が信頼性あることを明らかにする。
被験化合物８の血漿中での安定性研究結果を表３に示す。
表３から、化合物８が血漿中におけるインキュベーションは比較的安定し、生成した中間体化合物１２とＬｉｎｉｆａｎｉｂの量が非常に少なく、そのピークに達した時のモル濃度はわずか化合物８の１／１００および１／１０００である。
上記血漿での安定性研究結果から、化合物８が血漿中での安定性がとても高く、代謝によって生成される化合物１２とＬｉｎｉｆａｎｉｂの量はいずれも非常に少ないことがわかる。
［付記］
［付記１］
式Ｉで表される構造を有する化合物、その薬学的に許容される塩、立体異性体、溶媒和物または結晶多形体と、薬学的に許容される担体とを含む薬物組成物。
式Ｉ
（ただし、
ＸはＯ、ＳおよびＮＲ９から選択され、
Ａは（ＣＨ２）ｅＮ（Ｒ７）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ８）（ＣＨ２）ｆおよびＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＲ７から選択され、ｅおよびｆは独立して０または１であり、これらそれぞれの基の左端がＲ３およびＲ４で置換される環に結合しており、
Ｌは−［Ｃｍ（Ｏ）（Ｚ）ｎ（ＮＨ）ｑ］−であり、ｍ、ｑはそれぞれ０または１であり、ｎは０〜１１、ｐは０〜８であり、Ｚは−ＣＲ１０−、−ＣＲ１０−Ｏ−ＣＲ１０−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＲ１０＝ＣＲ１０−、−ＣＲ１０≡ＣＲ１０−、−Ａｒ、−ＣＯ−ＮＨ−および−Ｎ＝ＣＲ１０−から任意に選択される１個の基または複数の基が従来の方法で結合したものであり、
Ｒ１およびＲ２は水素基、アルコキシ基、アルコキシアルコキシ基、アルコキシアルキル基、アルキル基、アリールオキシ基、アリールオキシアルキル基、ハロゲン基、ハロアルコキシ基、ハロアルキル基、ヘテロシクリル基、ヘテロサイクリックアルケニル基、ヘテロサイクリックアルコキシ基、ヘテロサイクリックアルキル基、ヘテロサイクリックオキシアルキル基、ヒドロキシ基、ヒドロキシアルコキシ基、ヒドロキシアルキル基、（ＮＲａＲｂ）アルコキシ基、（ＮＲａＲｂ）アルケニル基、（ＮＲａＲｂ）アルキル基、（ＮＲａＲｂ）カルボニルメチル基および（ＮＲａＲｂ）カルボニルアルキル基から独立して選択され、
Ｒ３およびＲ４は水素基、アルコキシ基、アルキル基、ハロゲン基、ハロアルコキシ基、ハロアルキル基およびヒドロキシ基から独立して選択され、
Ｒ５およびＲ６は水素基、アルコキシ基、アルコキシアルキル基、アルコキシカルボニル、アルキル基、アリールオキシ基、アリールアルキル基、カルボキシル、シアノ基、ハロゲン基、ハロアルコキシ基、ハロアルキル基、ヒドロキシ基、ヒドロキシアルキル基、ニトロ基および−ＮＲｃＲｄから独立して選択され、
Ｒ７およびＲ８は水素基およびアルキル基から独立して選択され、
Ｒ９は水素基、アルケニル基、アルコキシアルキル基、アルキル基、アルコキシカルボニル基、アリール基、ヘテロシクリルアルキル基、ヒドロキシアルキル基および（ＮＲａＲｂ）アルキル基から選択され、
Ｒ１０は水素基、アルキル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルケノキシ基、ニトロ基、ハロゲン基、第一級アミノ基、第二級アミノ基および第三級アミノ基から独立して選択され、
Ｒ１１は水素基、ヒドロキシ基、アミノ基、アルケニル基、アルキニル基、アルコキシ基、アルキルアミノ基、アルコキシアルキル基、アルキル基、アルコキシカルボニル基、アリール基、ヘテロシクロアルキル基から独立して選択され、
ＲａおよびＲｂは水素基、アルキル基、アルキルカルボニル基、アルキルスルホニル基、アリールスルホニル基、ハロアルキルスルホニル基およびヘテロサイクリックスルホニル基から独立して選択され、
ＲｃおよびＲｄは水素基、アルキル基、アルキルカルボニル基、アリール基、アリールアルキル基、シクロアルキル基、シクロアルキルアルキル基、ヘテロシクリル基およびヘテロサイクリックアルキル基から独立して選択される。）
［付記１］
式Ｉで表される構造を有する化合物、その薬学的に許容される塩、立体異性体、溶媒和物または結晶多形体と、薬学的に許容される担体とを含む薬物組成物。
（ただし、
ＸはＯ、ＳおよびＮＲ９から選択され、
Ａは（ＣＨ２）ｅＮ（Ｒ７）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ８）（ＣＨ２）ｆおよびＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＲ７から選択され、ｅおよびｆは独立して０または１であり、これらそれぞれの基の左端がＲ３およびＲ４で置換される環に結合しており、
Ｌは−［Ｃｍ（Ｏ）（Ｚ）ｎ（ＮＨ）ｑ］−であり、ｍ、ｑはそれぞれ０または１であり、ｎは０〜１１、ｐは０〜８であり、Ｚは−ＣＲ１０−、−ＣＲ１０−Ｏ−ＣＲ１０−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＲ１０＝ＣＲ１０−、−ＣＲ１０≡ＣＲ１０−、−Ａｒ、−ＣＯ−ＮＨ−および−Ｎ＝ＣＲ１０−から任意に選択される１個の基または複数の基が従来の方法で結合したものであり、
Ｒ１およびＲ２は水素基、アルコキシ基、アルコキシアルコキシ基、アルコキシアルキル基、アルキル基、アリールオキシ基、アリールオキシアルキル基、ハロゲン基、ハロアルコキシ基、ハロアルキル基、ヘテロシクリル基、ヘテロサイクリックアルケニル基、ヘテロサイクリックアルコキシ基、ヘテロサイクリックアルキル基、ヘテロサイクリックオキシアルキル基、ヒドロキシ基、ヒドロキシアルコキシ基、ヒドロキシアルキル基、（ＮＲａＲｂ）アルコキシ基、（ＮＲａＲｂ）アルケニル基、（ＮＲａＲｂ）アルキル基、（ＮＲａＲｂ）カルボニルメチル基および（ＮＲａＲｂ）カルボニルアルキル基から独立して選択され、
Ｒ３およびＲ４は水素基、アルコキシ基、アルキル基、ハロゲン基、ハロアルコキシ基、ハロアルキル基およびヒドロキシ基から独立して選択され、
Ｒ５およびＲ６は水素基、アルコキシ基、アルコキシアルキル基、アルコキシカルボニル、アルキル基、アリールオキシ基、アリールアルキル基、カルボキシル、シアノ基、ハロゲン基、ハロアルコキシ基、ハロアルキル基、ヒドロキシ基、ヒドロキシアルキル基、ニトロ基および−ＮＲｃＲｄから独立して選択され、
Ｒ７およびＲ８は水素基およびアルキル基から独立して選択され、
Ｒ９は水素基、アルケニル基、アルコキシアルキル基、アルキル基、アルコキシカルボニル基、アリール基、ヘテロシクリルアルキル基、ヒドロキシアルキル基および（ＮＲａＲｂ）アルキル基から選択され、
Ｒ１０は水素基、アルキル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルケノキシ基、ニトロ基、ハロゲン基、第一級アミノ基、第二級アミノ基および第三級アミノ基から独立して選択され、
Ｒ１１は水素基、ヒドロキシ基、アミノ基、アルケニル基、アルキニル基、アルコキシ基、アルキルアミノ基、アルコキシアルキル基、アルキル基、アルコキシカルボニル基、アリール基、ヘテロシクロアルキル基から独立して選択され、
ＲａおよびＲｂは水素基、アルキル基、アルキルカルボニル基、アルキルスルホニル基、アリールスルホニル基、ハロアルキルスルホニル基およびヘテロサイクリックスルホニル基から独立して選択され、
ＲｃおよびＲｄは水素基、アルキル基、アルキルカルボニル基、アリール基、アリールアルキル基、シクロアルキル基、シクロアルキルアルキル基、ヘテロシクリル基およびヘテロサイクリックアルキル基から独立して選択される。）
［付記２］
前記式Ｉで表される化合物の構造式は、
または、
または、
または、
または、
または、
または、
または、
または、
である、付記１に記載の薬物組成物。
前記式Ｉで表される化合物の構造式は、
［付記３］
前記式Ｉで表される化合物の製造方法が、
ポリペプチドとベンジル基からなる保護基を有するＬを触媒および縮合剤の存在下で反応させ、保護基を有する中間体化合物１を得るステップａ、
前記中間体化合物１を極性溶媒中で接触水素化して保護基をはずして中間体化合物２を得るステップｂ、
前記中間体化合物２とＬｉｎｉｆａｎｉｂまたはその誘導体を触媒および縮合剤の存在下で反応させ、保護基を有する中間体化合物３を得るステップｃ、および
前記中間体化合物３を酸性条件下で保護基をはずして式１で表される化合物を得るステップｄ、
を含む、
付記１又は２に記載の薬物組成物。
前記式Ｉで表される化合物の製造方法が、
ポリペプチドとベンジル基からなる保護基を有するＬを触媒および縮合剤の存在下で反応させ、保護基を有する中間体化合物１を得るステップａ、
前記中間体化合物１を極性溶媒中で接触水素化して保護基をはずして中間体化合物２を得るステップｂ、
前記中間体化合物２とＬｉｎｉｆａｎｉｂまたはその誘導体を触媒および縮合剤の存在下で反応させ、保護基を有する中間体化合物３を得るステップｃ、および
前記中間体化合物３を酸性条件下で保護基をはずして式１で表される化合物を得るステップｄ、
を含む、
付記１又は２に記載の薬物組成物。
［付記４］
ステップａにおける反応温度は−２０℃から１２５℃であり、前記触媒は１−ヒドロキシベンゾトリアゾールであり、前記縮合剤は１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩、１、３−ジシクロヘキシルカルボジイミドまたは４−ジメチルアミノピリジンの中の１種または複数種である、付記３に記載の薬物組成物。
ステップａにおける反応温度は−２０℃から１２５℃であり、前記触媒は１−ヒドロキシベンゾトリアゾールであり、前記縮合剤は１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩、１、３−ジシクロヘキシルカルボジイミドまたは４−ジメチルアミノピリジンの中の１種または複数種である、付記３に記載の薬物組成物。
［付記５］
ステップｂにおける反応温度は−２０℃から１２５℃であり、前記触媒はパラジウム炭素、乾性または湿性水酸化パラジウムである、付記３に記載の薬物組成物。
ステップｂにおける反応温度は−２０℃から１２５℃であり、前記触媒はパラジウム炭素、乾性または湿性水酸化パラジウムである、付記３に記載の薬物組成物。
［付記６］
ステップｃにおける反応温度は−２０℃から１２５℃であり、前記触媒は１−ヒドロキシベンゾトリアゾールであり、前記縮合剤は１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩、１、３−ジシクロヘキシルカルボジイミドまたは４−ジメチルアミノピリジンの中の１種または複数種である、付記３に記載の薬物組成物。
ステップｃにおける反応温度は−２０℃から１２５℃であり、前記触媒は１−ヒドロキシベンゾトリアゾールであり、前記縮合剤は１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩、１、３−ジシクロヘキシルカルボジイミドまたは４−ジメチルアミノピリジンの中の１種または複数種である、付記３に記載の薬物組成物。
［付記７］
ステップｄにおける反応温度は−２０℃から１２５℃であり、前記酸性試薬はギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸である、付記３に記載の薬物組成物。
ステップｄにおける反応温度は−２０℃から１２５℃であり、前記酸性試薬はギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸である、付記３に記載の薬物組成物。
［付記８］
付記１または２に記載の薬物組成物の抗がん作用を有する薬物の調製における使用であって、
がんは食道がん、子宮内膜がん、悪性リンパ腫、多発性骨髄腫、消化管間質腫瘍、結腸がん、直腸がん、乳がん、肝臓がん、胃がん、卵巣がん、子宮がん、子宮頸がん、膣がん、肺がん、腎臓がん、前立腺がん、膀胱がん、膵臓がん、脳がんおよび黒色腫を含む
使用。
付記１または２に記載の薬物組成物の抗がん作用を有する薬物の調製における使用であって、
がんは食道がん、子宮内膜がん、悪性リンパ腫、多発性骨髄腫、消化管間質腫瘍、結腸がん、直腸がん、乳がん、肝臓がん、胃がん、卵巣がん、子宮がん、子宮頸がん、膣がん、肺がん、腎臓がん、前立腺がん、膀胱がん、膵臓がん、脳がんおよび黒色腫を含む
使用。
［付記９］
前記がんは肝がんである、付記８に記載の使用。
前記がんは肝がんである、付記８に記載の使用。
［付記１０］
被験者に治療的有効量の付記１または２に記載の薬物組成物を投与することを含む、がんを治療する方法。
被験者に治療的有効量の付記１または２に記載の薬物組成物を投与することを含む、がんを治療する方法。
［付記１１］
活性成分および薬学的に許容される担体から調製される薬物であって、
前記活性成分は、式Ｉで表される化合物、その薬学的に許容される塩、立体異性体、溶媒和物または結晶多形体である薬物。
式Ｉ
（ただし、
ＸはＯ、ＳおよびＮＲ９から選択され、
Ａは（ＣＨ２）ｅＮ（Ｒ７）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ８）（ＣＨ２）ｆおよびＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＲ７から選択され、ｅおよびｆは独立して０または１であり、こららそれぞれの基の左端がＲ３およびＲ４で置換される環に結合しており、
Ｌは−［Ｃｍ（Ｏ）（Ｚ）ｎ（ＮＨ）ｑ］−であり、ｍ、ｑはそれぞれ０または１であり、ｎは０〜１１、ｐは０〜８であり、Ｚは−ＣＲ１０−、−ＣＲ１０−Ｏ−ＣＲ１０−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＲ１０＝ＣＲ１０−、−ＣＲ１０≡ＣＲ１０−、−Ａｒ、−ＣＯ−ＮＨ−および−Ｎ＝ＣＲ１０−から任意に選択される１個の基または複数の基が従来の方法で結合したものであり、
Ｒ１およびＲ２は水素基、アルコキシ基、アルコキシアルコキシ基、アルコキシアルキル基、アルキル基、アリールオキシ基、アリールオキシアルキル基、ハロゲン基、ハロアルコキシ基、ハロアルキル基、ヘテロシクリル基、ヘテロサイクリックアルケニル基、ヘテロサイクリックアルコキシ基、ヘテロサイクリックアルキル基、ヘテロサイクリックオキシアルキル基、ヒドロキシ基、ヒドロキシアルコキシ基、ヒドロキシアルキル基、（ＮＲａＲｂ）アルコキシ基、（ＮＲａＲｂ）アルケニル基、（ＮＲａＲｂ）アルキル基、（ＮＲａＲｂ）カルボニルメチル基および（ＮＲａＲｂ）カルボニルアルキル基から独立して選択され、
Ｒ３およびＲ４は水素基、アルコキシ基、アルキル基、ハロゲン基、ハロアルコキシ基、ハロアルキル基およびヒドロキシ基から独立して選択され、
Ｒ５およびＲ６は水素基、アルコキシ基、アルコキシアルキル基、アルコキシカルボニル、アルキル基、アリールオキシ基、アリールアルキル基、カルボキシル、シアノ基、ハロゲン基、ハロアルコキシ基、ハロアルキル基、ヒドロキシ基、ヒドロキシアルキル基、ニトロ基および−ＮＲｃＲｄから独立して選択され、
Ｒ７およびＲ８は水素基およびアルキル基から独立して選択され、
Ｒ９は水素基、アルケニル基、アルコキシアルキル基、アルキル基、アルコキシカルボニル基、アリール基、ヘテロシクリルアルキル基、ヒドロキシアルキル基および（ＮＲａＲｂ）アルキル基から選択され、
Ｒ１０は水素基、アルキル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルケノキシ基、ニトロ基、ハロゲン基、第一級アミノ基、第二級アミノ基および第三級アミノ基から独立して選択され、
Ｒ１１は水素基、ヒドロキシ基、アミノ基、アルケニル基、アルキニル基、アルコキシ基、アルキルアミノ基、アルコキシアルキル基、アルキル基、アルコキシカルボニル基、アリール基、ヘテロシクロアルキル基から独立して選択され、
ＲａおよびＲｂは水素基、アルキル基、アルキルカルボニル基、アルキルスルホニル基、アリールスルホニル基、ハロアルキルスルホニル基およびヘテロサイクリックスルホニル基から独立して選択され、
ＲｃおよびＲｄは水素基、アルキル基、アルキルカルボニル基、アリール基、アリールアルキル基、シクロアルキル基、シクロアルキルアルキル基、ヘテロシクリル基およびヘテロサイクリックアルキル基から独立して選択される。）
活性成分および薬学的に許容される担体から調製される薬物であって、
前記活性成分は、式Ｉで表される化合物、その薬学的に許容される塩、立体異性体、溶媒和物または結晶多形体である薬物。
（ただし、
ＸはＯ、ＳおよびＮＲ９から選択され、
Ａは（ＣＨ２）ｅＮ（Ｒ７）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ８）（ＣＨ２）ｆおよびＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＲ７から選択され、ｅおよびｆは独立して０または１であり、こららそれぞれの基の左端がＲ３およびＲ４で置換される環に結合しており、
Ｌは−［Ｃｍ（Ｏ）（Ｚ）ｎ（ＮＨ）ｑ］−であり、ｍ、ｑはそれぞれ０または１であり、ｎは０〜１１、ｐは０〜８であり、Ｚは−ＣＲ１０−、−ＣＲ１０−Ｏ−ＣＲ１０−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＲ１０＝ＣＲ１０−、−ＣＲ１０≡ＣＲ１０−、−Ａｒ、−ＣＯ−ＮＨ−および−Ｎ＝ＣＲ１０−から任意に選択される１個の基または複数の基が従来の方法で結合したものであり、
Ｒ１およびＲ２は水素基、アルコキシ基、アルコキシアルコキシ基、アルコキシアルキル基、アルキル基、アリールオキシ基、アリールオキシアルキル基、ハロゲン基、ハロアルコキシ基、ハロアルキル基、ヘテロシクリル基、ヘテロサイクリックアルケニル基、ヘテロサイクリックアルコキシ基、ヘテロサイクリックアルキル基、ヘテロサイクリックオキシアルキル基、ヒドロキシ基、ヒドロキシアルコキシ基、ヒドロキシアルキル基、（ＮＲａＲｂ）アルコキシ基、（ＮＲａＲｂ）アルケニル基、（ＮＲａＲｂ）アルキル基、（ＮＲａＲｂ）カルボニルメチル基および（ＮＲａＲｂ）カルボニルアルキル基から独立して選択され、
Ｒ３およびＲ４は水素基、アルコキシ基、アルキル基、ハロゲン基、ハロアルコキシ基、ハロアルキル基およびヒドロキシ基から独立して選択され、
Ｒ５およびＲ６は水素基、アルコキシ基、アルコキシアルキル基、アルコキシカルボニル、アルキル基、アリールオキシ基、アリールアルキル基、カルボキシル、シアノ基、ハロゲン基、ハロアルコキシ基、ハロアルキル基、ヒドロキシ基、ヒドロキシアルキル基、ニトロ基および−ＮＲｃＲｄから独立して選択され、
Ｒ７およびＲ８は水素基およびアルキル基から独立して選択され、
Ｒ９は水素基、アルケニル基、アルコキシアルキル基、アルキル基、アルコキシカルボニル基、アリール基、ヘテロシクリルアルキル基、ヒドロキシアルキル基および（ＮＲａＲｂ）アルキル基から選択され、
Ｒ１０は水素基、アルキル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルケノキシ基、ニトロ基、ハロゲン基、第一級アミノ基、第二級アミノ基および第三級アミノ基から独立して選択され、
Ｒ１１は水素基、ヒドロキシ基、アミノ基、アルケニル基、アルキニル基、アルコキシ基、アルキルアミノ基、アルコキシアルキル基、アルキル基、アルコキシカルボニル基、アリール基、ヘテロシクロアルキル基から独立して選択され、
ＲａおよびＲｂは水素基、アルキル基、アルキルカルボニル基、アルキルスルホニル基、アリールスルホニル基、ハロアルキルスルホニル基およびヘテロサイクリックスルホニル基から独立して選択され、
ＲｃおよびＲｄは水素基、アルキル基、アルキルカルボニル基、アリール基、アリールアルキル基、シクロアルキル基、シクロアルキルアルキル基、ヘテロシクリル基およびヘテロサイクリックアルキル基から独立して選択される。）
［付記１２］
前記式Ｉで表される化合物の構造式は、
または、
または、
または、
または、
または、
または、
または、
または、
である、付記１１に記載の薬物。
前記式Ｉで表される化合物の構造式は、
［付記１３］
付記１１又は１２に記載の薬物の抗がん作用を有する薬物の調製における使用であって、
がんは食道がん、子宮内膜がん、悪性リンパ腫、多発性骨髄腫、消化管間質腫瘍、結腸がん、直腸がん、乳がん、肝臓がん、胃がん、卵巣がん、子宮がん、子宮頸がん、膣がん、肺がん、腎臓がん、前立腺がん、膀胱がん、膵臓がん、脳がんおよび黒色腫を含む、使用。
付記１１又は１２に記載の薬物の抗がん作用を有する薬物の調製における使用であって、
がんは食道がん、子宮内膜がん、悪性リンパ腫、多発性骨髄腫、消化管間質腫瘍、結腸がん、直腸がん、乳がん、肝臓がん、胃がん、卵巣がん、子宮がん、子宮頸がん、膣がん、肺がん、腎臓がん、前立腺がん、膀胱がん、膵臓がん、脳がんおよび黒色腫を含む、使用。
［付記１４］
前記がんは肝がんである、付記１３に記載の使用。
前記がんは肝がんである、付記１３に記載の使用。
［付記１５］
被験者に治療的有効量の付記１１または１２に記載の薬物を投与することを含む、がんを治療する方法。
被験者に治療的有効量の付記１１または１２に記載の薬物を投与することを含む、がんを治療する方法。
Claims (15)
- 式Ｉで表される構造を有する化合物、その薬学的に許容される塩、立体異性体、溶媒和物または結晶多形体と、薬学的に許容される担体とを含む薬物組成物。
（ただし、
ＸはＯ、ＳおよびＮＲ９から選択され、
Ａは（ＣＨ２）ｅＮ（Ｒ７）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ８）（ＣＨ２）ｆおよびＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＲ７から選択され、ｅおよびｆは独立して０または１であり、これらそれぞれの基の左端がＲ３およびＲ４で置換される環に結合しており、
Ｌは−［Ｃｍ（Ｏ）（Ｚ）ｎ（ＮＨ）ｑ］−であり、ｍ、ｑはそれぞれ０または１であり、ｎは０〜１１、ｐは０〜８であり、Ｚは−ＣＲ１０−、−ＣＲ１０−Ｏ−ＣＲ１０−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＲ１０＝ＣＲ１０−、−ＣＲ１０≡ＣＲ１０−、−Ａｒ、−ＣＯ−ＮＨ−および−Ｎ＝ＣＲ１０−から任意に選択される１個の基または複数の基が従来の方法で結合したものであり、
Ｒ１およびＲ２は水素基、アルコキシ基、アルコキシアルコキシ基、アルコキシアルキル基、アルキル基、アリールオキシ基、アリールオキシアルキル基、ハロゲン基、ハロアルコキシ基、ハロアルキル基、ヘテロシクリル基、ヘテロサイクリックアルケニル基、ヘテロサイクリックアルコキシ基、ヘテロサイクリックアルキル基、ヘテロサイクリックオキシアルキル基、ヒドロキシ基、ヒドロキシアルコキシ基、ヒドロキシアルキル基、（ＮＲａＲｂ）アルコキシ基、（ＮＲａＲｂ）アルケニル基、（ＮＲａＲｂ）アルキル基、（ＮＲａＲｂ）カルボニルメチル基および（ＮＲａＲｂ）カルボニルアルキル基から独立して選択され、
Ｒ３およびＲ４は水素基、アルコキシ基、アルキル基、ハロゲン基、ハロアルコキシ基、ハロアルキル基およびヒドロキシ基から独立して選択され、
Ｒ５およびＲ６は水素基、アルコキシ基、アルコキシアルキル基、アルコキシカルボニル、アルキル基、アリールオキシ基、アリールアルキル基、カルボキシル、シアノ基、ハロゲン基、ハロアルコキシ基、ハロアルキル基、ヒドロキシ基、ヒドロキシアルキル基、ニトロ基および−ＮＲｃＲｄから独立して選択され、
Ｒ７およびＲ８は水素基およびアルキル基から独立して選択され、
Ｒ９は水素基、アルケニル基、アルコキシアルキル基、アルキル基、アルコキシカルボニル基、アリール基、ヘテロシクリルアルキル基、ヒドロキシアルキル基および（ＮＲａＲｂ）アルキル基から選択され、
Ｒ１０は水素基、アルキル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルケノキシ基、ニトロ基、ハロゲン基、第一級アミノ基、第二級アミノ基および第三級アミノ基から独立して選択され、
Ｒ１１は水素基、ヒドロキシ基、アミノ基、アルケニル基、アルキニル基、アルコキシ基、アルキルアミノ基、アルコキシアルキル基、アルキル基、アルコキシカルボニル基、アリール基、ヘテロシクロアルキル基から独立して選択され、
ＲａおよびＲｂは水素基、アルキル基、アルキルカルボニル基、アルキルスルホニル基、アリールスルホニル基、ハロアルキルスルホニル基およびヘテロサイクリックスルホニル基から独立して選択され、
ＲｃおよびＲｄは水素基、アルキル基、アルキルカルボニル基、アリール基、アリールアルキル基、シクロアルキル基、シクロアルキルアルキル基、ヘテロシクリル基およびヘテロサイクリックアルキル基から独立して選択される。） - 前記式Ｉで表される化合物の構造式は、
- 前記式Ｉで表される化合物の製造方法が、
ポリペプチドとベンジル基からなる保護基を有するＬを触媒および縮合剤の存在下で反応させ、保護基を有する中間体化合物１を得るステップａ、
前記中間体化合物１を極性溶媒中で接触水素化して保護基をはずして中間体化合物２を得るステップｂ、
前記中間体化合物２とＬｉｎｉｆａｎｉｂまたはその誘導体を触媒および縮合剤の存在下で反応させ、保護基を有する中間体化合物３を得るステップｃ、および
前記中間体化合物３を酸性条件下で保護基をはずして式１で表される化合物を得るステップｄ、
を含む、
請求項１又は２に記載の薬物組成物。 - ステップａにおける反応温度は−２０℃から１２５℃であり、前記触媒は１−ヒドロキシベンゾトリアゾールであり、前記縮合剤は１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩、１、３−ジシクロヘキシルカルボジイミドまたは４−ジメチルアミノピリジンの中の１種または複数種である、請求項３に記載の薬物組成物。
- ステップｂにおける反応温度は−２０℃から１２５℃であり、前記触媒はパラジウム炭素、乾性または湿性水酸化パラジウムである、請求項３に記載の薬物組成物。
- ステップｃにおける反応温度は−２０℃から１２５℃であり、前記触媒は１−ヒドロキシベンゾトリアゾールであり、前記縮合剤は１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩、１、３−ジシクロヘキシルカルボジイミドまたは４−ジメチルアミノピリジンの中の１種または複数種である、請求項３に記載の薬物組成物。
- ステップｄにおける反応温度は−２０℃から１２５℃であり、前記酸性試薬はギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸である、請求項３に記載の薬物組成物。
- 請求項１または２に記載の薬物組成物の抗がん作用を有する薬物の調製における使用であって、
がんは食道がん、子宮内膜がん、悪性リンパ腫、多発性骨髄腫、消化管間質腫瘍、結腸がん、直腸がん、乳がん、肝臓がん、胃がん、卵巣がん、子宮がん、子宮頸がん、膣がん、肺がん、腎臓がん、前立腺がん、膀胱がん、膵臓がん、脳がんおよび黒色腫を含む
使用。 - 前記がんは肝がんである、請求項８に記載の使用。
- 被験者に治療的有効量の請求項１または２に記載の薬物組成物を投与することを含む、がんを治療する方法。
- 活性成分および薬学的に許容される担体から調製される薬物であって、
前記活性成分は、式Ｉで表される化合物、その薬学的に許容される塩、立体異性体、溶媒和物または結晶多形体である薬物。
（ただし、
ＸはＯ、ＳおよびＮＲ９から選択され、
Ａは（ＣＨ２）ｅＮ（Ｒ７）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ８）（ＣＨ２）ｆおよびＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＲ７から選択され、ｅおよびｆは独立して０または１であり、こららそれぞれの基の左端がＲ３およびＲ４で置換される環に結合しており、
Ｌは−［Ｃｍ（Ｏ）（Ｚ）ｎ（ＮＨ）ｑ］−であり、ｍ、ｑはそれぞれ０または１であり、ｎは０〜１１、ｐは０〜８であり、Ｚは−ＣＲ１０−、−ＣＲ１０−Ｏ−ＣＲ１０−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＲ１０＝ＣＲ１０−、−ＣＲ１０≡ＣＲ１０−、−Ａｒ、−ＣＯ−ＮＨ−および−Ｎ＝ＣＲ１０−から任意に選択される１個の基または複数の基が従来の方法で結合したものであり、
Ｒ１およびＲ２は水素基、アルコキシ基、アルコキシアルコキシ基、アルコキシアルキル基、アルキル基、アリールオキシ基、アリールオキシアルキル基、ハロゲン基、ハロアルコキシ基、ハロアルキル基、ヘテロシクリル基、ヘテロサイクリックアルケニル基、ヘテロサイクリックアルコキシ基、ヘテロサイクリックアルキル基、ヘテロサイクリックオキシアルキル基、ヒドロキシ基、ヒドロキシアルコキシ基、ヒドロキシアルキル基、（ＮＲａＲｂ）アルコキシ基、（ＮＲａＲｂ）アルケニル基、（ＮＲａＲｂ）アルキル基、（ＮＲａＲｂ）カルボニルメチル基および（ＮＲａＲｂ）カルボニルアルキル基から独立して選択され、
Ｒ３およびＲ４は水素基、アルコキシ基、アルキル基、ハロゲン基、ハロアルコキシ基、ハロアルキル基およびヒドロキシ基から独立して選択され、
Ｒ５およびＲ６は水素基、アルコキシ基、アルコキシアルキル基、アルコキシカルボニル、アルキル基、アリールオキシ基、アリールアルキル基、カルボキシル、シアノ基、ハロゲン基、ハロアルコキシ基、ハロアルキル基、ヒドロキシ基、ヒドロキシアルキル基、ニトロ基および−ＮＲｃＲｄから独立して選択され、
Ｒ７およびＲ８は水素基およびアルキル基から独立して選択され、
Ｒ９は水素基、アルケニル基、アルコキシアルキル基、アルキル基、アルコキシカルボニル基、アリール基、ヘテロシクリルアルキル基、ヒドロキシアルキル基および（ＮＲａＲｂ）アルキル基から選択され、
Ｒ１０は水素基、アルキル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルケノキシ基、ニトロ基、ハロゲン基、第一級アミノ基、第二級アミノ基および第三級アミノ基から独立して選択され、
Ｒ１１は水素基、ヒドロキシ基、アミノ基、アルケニル基、アルキニル基、アルコキシ基、アルキルアミノ基、アルコキシアルキル基、アルキル基、アルコキシカルボニル基、アリール基、ヘテロシクロアルキル基から独立して選択され、
ＲａおよびＲｂは水素基、アルキル基、アルキルカルボニル基、アルキルスルホニル基、アリールスルホニル基、ハロアルキルスルホニル基およびヘテロサイクリックスルホニル基から独立して選択され、
ＲｃおよびＲｄは水素基、アルキル基、アルキルカルボニル基、アリール基、アリールアルキル基、シクロアルキル基、シクロアルキルアルキル基、ヘテロシクリル基およびヘテロサイクリックアルキル基から独立して選択される。） - 前記式Ｉで表される化合物の構造式は、
- 請求項１１又は１２に記載の薬物の抗がん作用を有する薬物の調製における使用であって、
がんは食道がん、子宮内膜がん、悪性リンパ腫、多発性骨髄腫、消化管間質腫瘍、結腸がん、直腸がん、乳がん、肝臓がん、胃がん、卵巣がん、子宮がん、子宮頸がん、膣がん、肺がん、腎臓がん、前立腺がん、膀胱がん、膵臓がん、脳がんおよび黒色腫を含む、使用。 - 前記がんは肝がんである、請求項１３に記載の使用。
- 被験者に治療的有効量の請求項１１または１２に記載の薬物を投与することを含む、がんを治療する方法。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201611027194 | 2016-11-17 | ||
| CN201611027194.X | 2016-11-17 | ||
| PCT/CN2017/111649 WO2018090974A1 (zh) | 2016-11-17 | 2017-11-17 | 一种具有抗癌作用的化合物及其制备方法和应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2019535751A true JP2019535751A (ja) | 2019-12-12 |
| JP6999960B2 JP6999960B2 (ja) | 2022-01-19 |
Family
ID=62145241
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2019527389A Active JP6999960B2 (ja) | 2016-11-17 | 2017-11-17 | 抗がん作用を有する化合物およびその製造方法ならびにその使用 |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US11712434B2 (ja) |
| EP (1) | EP3542796B1 (ja) |
| JP (1) | JP6999960B2 (ja) |
| CN (1) | CN110167554B (ja) |
| WO (2) | WO2018090976A1 (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109400597B (zh) * | 2018-11-08 | 2020-07-28 | 西安交通大学 | 一种基于vegfr-2抑制剂abt-869的蛋白降解靶向嵌合体及制备方法和应用 |
| WO2022026380A1 (en) * | 2020-07-29 | 2022-02-03 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Urea inhibitors of micro-rna |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004062662A1 (fr) * | 2002-12-12 | 2004-07-29 | Aventis Pharma S.A. | Derives d'aminoindazoles et leur utilisation comme inhibiteurs de kinases |
| CN101072581A (zh) * | 2004-10-05 | 2007-11-14 | 健泰科生物技术公司 | 具有减少的毒性的治疗剂 |
| ES2914593T3 (es) * | 2008-08-01 | 2022-06-14 | Univ Johns Hopkins | Agentes de unión a PSMA y usos de los mismos |
| US20100143296A1 (en) * | 2008-12-10 | 2010-06-10 | Auspex Pharmaceuticals, Inc. | Podophyllotoxin inhibitors of topoisomerase ii |
| CN102153551B (zh) * | 2010-04-02 | 2012-04-25 | 济南海乐医药技术开发有限公司 | 基于吲唑或氮杂吲唑的双芳基脲或硫脲类结构抗肿瘤药物 |
| US20120190563A1 (en) * | 2010-05-07 | 2012-07-26 | Abbott Laboratories | Methods for predicting sensitivity to treatment with a targeted tyrosine kinase inhibitor |
| CN103275178B (zh) * | 2013-05-21 | 2015-04-29 | 首都医科大学 | 正十二酸-rgd-正十四醇介导利尼法尼靶向脂质体的制备及抗肿瘤活性评价 |
| CA2914815A1 (en) | 2013-06-11 | 2014-12-18 | Kala Pharmaceuticals, Inc. | Urea derivatives and uses thereof |
| CN104725319A (zh) * | 2015-03-11 | 2015-06-24 | 西安交通大学 | 一种具有抗肿瘤活性的1h-吲唑-3-氨基联苯脲类化合物及其制备方法和应用 |
-
2017
- 2017-11-17 CN CN201780071039.4A patent/CN110167554B/zh active Active
- 2017-11-17 WO PCT/CN2017/111654 patent/WO2018090976A1/zh active Application Filing
- 2017-11-17 EP EP17872409.2A patent/EP3542796B1/en active Active
- 2017-11-17 JP JP2019527389A patent/JP6999960B2/ja active Active
- 2017-11-17 WO PCT/CN2017/111649 patent/WO2018090974A1/zh unknown
- 2017-11-17 US US16/461,842 patent/US11712434B2/en active Active
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| BRITISH JOURNAL OF CANCER, 2016, VOL. 114, P. 986-994, JPN6020015126, ISSN: 0004468531 * |
| DRUGS IN R&D, 2010, VOL. 10, NO. 2, P. 111-122, JPN6020015124, ISSN: 0004468529 * |
| SCI TRANSL MED. 2012, VOL. 4, NO. 140, P. 140RA86., JPN6020015125, ISSN: 0004468530 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2018090976A1 (zh) | 2018-05-24 |
| CN110167554A (zh) | 2019-08-23 |
| EP3542796A1 (en) | 2019-09-25 |
| CN110167554B (zh) | 2023-05-23 |
| US20190365711A1 (en) | 2019-12-05 |
| JP6999960B2 (ja) | 2022-01-19 |
| EP3542796A4 (en) | 2020-08-19 |
| EP3542796B1 (en) | 2024-03-27 |
| WO2018090974A1 (zh) | 2018-05-24 |
| US11712434B2 (en) | 2023-08-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN113896685B (zh) | 吲哚胺-2,3-双加氧酶(ido)抑制剂 | |
| ES2775614T3 (es) | Sales de derivado de quinazolina y método de preparación de las mismas | |
| TW200406387A (en) | Compounds, methods and compositions | |
| JP2021523168A (ja) | がん幹細胞を標的化するがん治療 | |
| CN116096372B (zh) | 一种egfr抑制剂、其制备方法和在药学上的应用 | |
| FR3066761A1 (fr) | Nouveaux composes inhibiteurs des canaux ioniques | |
| WO2021052501A1 (zh) | 杂环酰胺类化合物、其可药用的盐及其制备方法和用途 | |
| JP6999960B2 (ja) | 抗がん作用を有する化合物およびその製造方法ならびにその使用 | |
| CN115803325B (zh) | 一种egfr抑制剂及其制备方法和应用 | |
| JP2016540801A (ja) | フルオロフェニルピラゾール化合物 | |
| CN110577526A (zh) | 溴域结构蛋白抑制剂的盐及其制备方法和应用 | |
| JP6993721B2 (ja) | 抗がん作用を有する化合物およびその製造方法ならびにその応用 | |
| US20220402867A1 (en) | Sulfo-substituted biaryl compound or salt thereof, preparation method therefor, and use thereof | |
| WO2020155931A1 (zh) | 一种jak抑制剂及其制备方法 | |
| TW201922690A (zh) | 環－amp反應元素結合蛋白的抑制劑 | |
| TWI721255B (zh) | 一種具有抗癌作用的化合物及其製備方法和應用（一） | |
| TWI703134B (zh) | 一種具有抗癌作用的化合物及其製備方法和應用（二） | |
| WO2019184919A1 (zh) | 一种含有金刚烷的化合物及其在治疗癌症中的用途 | |
| WO2023213264A1 (zh) | 酰胺化合物的合成及其用途 | |
| CN112851678B (zh) | 2，4，7-三取代嘧啶并吲哚化合物抗肿瘤转移作用 | |
| CN108912035B (zh) | 一种具备抗肿瘤活性的吲哚酰胺类化合物 | |
| JP6227149B2 (ja) | 新規のイミダゾリジン−２，４−ジオン誘導体 | |
| CN102336740B (zh) | 一类咪唑类化合物及其用途 | |
| EA029007B1 (ru) | Новые гетероариламидные производные, обладающие антиандрогенными свойствами |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20190605 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20200512 |
|
| A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20200811 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20201012 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20210323 |
|
| A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20210622 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20210716 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20211130 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20211216 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6999960 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |