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JP2018518506A - 大環状ベンゾジアゼピン二量体、その結合体の製造および使用 - Google Patents

大環状ベンゾジアゼピン二量体、その結合体の製造および使用 Download PDF

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Abstract

式Ｉ：【化１】［式中、ＡおよびＢは、独立して、式ＩａまたはＩｂ：【化２】で表されるものである］によって表される構造を有する大環状ベンゾジアゼピン二量体、および式Ｉ、Ｉａ、Ｉｂにおける他の変数は、応用において定義される。そのような二量体は、特に、抗体−薬物結合体（ＡＤＣ）における薬物成分として用いられる場合、抗癌剤として有用である。

Description

（関連出願の相互参照）
本願は３５Ｕ．Ｓ．Ｃ．§１１９（ｅ）の下において、米国仮出願第６２／１８３，３５０号（２０１５年６月２３日出願）の優先権を主張し、この開示は引用によって本明細書に援用される。
（本発明の技術分野）
本発明は、大環状ベンゾジアゼピン二量体、それから誘導される二量体−リンカー化合物、およびそれらの結合体、およびそれらの製造方法、および使用に関する。
トメイマイシンおよびアントラマイシンなどの、いくつかの自然発生する細胞毒素は、ベンゾジアゼピン環系を含む。ジアゼピン環に縮合したピロリジン環の付加的な存在を反映して、これらの化合物は、頻繁に、ピロロベンゾジアゼピンまたはＰＢＤと称される。
ＰＢＤは抗生物質活性および抗腫瘍活性を有し、後者の特徴によって抗癌剤としての関心を集めている。機構的に、ＰＢＤは配列選択的に、ＤＮＡの副溝に結合し、ＤＮＡをアルキル化する。異なる置換基の構造−活性の関係（ＳＡＲ）が研究されてきた（Ａｎｔｏｎｏｗ ｅｔ ａｌ．２０１０；Ｔｈｕｒｓｔｏｎ ｅｔ ａｌ．１９９９）。
さらなる研究は、ＰＢＤ二量体がまた、抗癌剤としての特別な有望性を示すことを示している。典型的なＰＢＤ二量体の核構造は、式Ａ−１：

［式中、
Ｘは二量体の半分を連結する架橋基である］
によって表すことができる。
単量体ＰＢＤと同様に、二量体はＤＮＡ副溝結合剤−アルキル化剤である。二機能性のため、アルキル化によって架橋されたＤＮＡが生じ、ＤＮＡの修復がより困難になる。（ＤＮＡのアルキル化はイミン基を介して起こる。還元されたイミン基の１つを有するＰＤＢは、さらにＤＮＡをアルキル化することができるが、架橋させることはできない。これらはさらに、一般的には活性がより弱いが、生物学的に活性である。）天然に存在する単量体から、合成単量体、合成二量体への抗癌剤としてのＰＢＤの進化についての総説としては、Ｈａｒｔｌｅｙ ２０１１を参照されたい。
ＰＢＤ二量体のＳＡＲは、Ａ／Ａ’およびＣ／Ｃ’環上の置換基、Ｃ／Ｃ’環中の不飽和、架橋基Ｘの構造および長さ、並びに環Ｂ／Ｂ’中のイミン二重結合の酸化または還元、並びにこれらの特徴の組み合わせによって探索されている。Ｂｏｓｅ ｅｔ ａｌ．１９９２，Ｇｒｅｇｓｏｎ ｅｔ ａｌ．１９９９，Ｇｒｅｇｓｏｎ ｅｔ ａｌ．２００１ａおよび２００１ｂ，Ｇｒｅｇｓｏｎ ｅｔ ａｌ．２００４，Ｇｒｅｇｓｏｎ ｅｔ ａｌ．２００９，Ｈａｒｔｌｅｙ ｅｔ ａｌ．２０１２，Ｈｏｗａｒｄ ｅｔ ａｌ．２００７，Ｈｏｗａｒｄ ｅｔ ａｌ．２００９ａ．Ｈｏｗａｒｄ ｅｔ ａｌ．２０１０，Ｈｏｗａｒｄ ｅｔ ａｌ．２０１３ａおよび２０１３ｂ，Ｌｉｕ ｅｔ ａｌ．２００７，Ｔｈｕｒｓｔｏｎ ｅｔ ａｌ．１９９６，Ｔｈｕｒｓｔｏｎ ｅｔ ａｌ．２００６，並びにＴｈｕｒｓｔｏｎ ｅｔ ａｌ．２００８を参照されたい。ほとんどのＰＢＤ二量体は、前記で示されるように８／８’架橋を介して連結するが、７／７’架橋もまた開示されている（Ｈｏｗａｒｄ ｅｔ ａｌ．２００９ｂ）。
強い関心を集めている抗癌剤の種類は、抗体−薬物結合体（ＡＤＣ、免疫複合体とも称される）である。ＡＤＣにおいて、治療剤（薬物、ペイロード、または弾頭とも称される）は、癌細胞で過剰発現する抗原（腫瘍関連抗原）に対する抗体に共有結合する。抗体は、抗原にすることによって、ＡＤＣを癌部位に送達する。そこで、共有結合（リンカーと称される）の切断または抗体の分解によって、治療剤が放出される。逆に言うと、ＡＤＣが血液系を循環している間、治療剤は抗体に共有結合しているため、不活性に保たれる。このように、ＡＤＣにおいて用いられる治療剤は、局所的な放出のため、通常の化学療法剤よりも、はるかに有力（すなわち、細胞毒性）でありうる。ＡＤＣの総説としては、Ｓｃｈｒａｍａ ｅｔ ａｌ．２００６を参照されたい。
ＰＢＤ二量体は、ＡＤＣにおける薬物として提案されてきた。Ｃ／Ｃ’環に存在する官能基、架橋基Ｘを介して、またはＢ／Ｂ’環中のイミン基を隔てて付加することによって、抗体に結合するリンカーを付加することができる。Ｂｏｕｃｈａｒｄ ｅｔ ａｌ．２０１３，Ｃｏｍｍｅｒｃｏｎ ｅｔ ａｌ．２０１３ａおよび２０１３ｂ，Ｆｌｙｇａｒｅ ｅｔ ａｌ．２０１３，Ｇａｕｚｙ ｅｔ ａｌ．２０１２，Ｈｏｗａｒｄ ２１０４ａ−２０１４ｅ，Ｈｏｗａｒｄ ｅｔ ａｌ．２０１１，Ｈｏｗａｒｄ ｅｔ ａｌ．２０１３ｃおよび２０１３ｄ，Ｈｏｗａｒｄ ｅｔ ａｌ．２０１４ａ−２０１４ｄ，Ｊｅｆｆｒｅｙ ｅｔ ａｌ．２０１３，Ｊｅｆｆｒｅｙ ｅｔ ａｌ．２０１４ａおよび２０１４ｂ，並びにＺｈａｏ ｅｔ ａｌ．２０１４を参照されたい。
ベンゾジアゼピン二量体の他の種類もまた、ＡＤＣの薬物として提案されている。構造的に、この種類は、式Ａ−２およびＡ−３において示されるように、それぞれのＣ／Ｃ’環に縮合したフェニル環をさらに有するＰＢＤ二量体と見ることができる。Ｃｈａｒｉ ｅｔ ａｌ．２０１３，Ｌｉ ｅｔ ａｌ．２０１３，Ｆｉｓｈｋｉｎ ｅｔ ａｌ．２０１４，Ｌｉ ｅｔ ａｌ．２０１４を参照されたい。
テトラヒドロイソキノリノ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピンなどの他の環系を有するベンゾジアゼピン化合物もまた開示される。Ｋｏｔｈａｋｏｎｄａ ｅｔ ａｌ． ２００４．
本明細書の最後には、第一著者または発明者、および年によって本明細書に引用される文献の完全な引用を列挙する。
（本発明の簡潔な概要）
本発明は、式Ｉ：

［式中、
Ｘは

であり；
Ｘ１は、ＣＨ２、Ｏ、ＮＨ、Ｓ（Ｏ）０−２、（ＣＨ２）０−５Ｘ２もしくはＯ（ＣＨ２）２−５Ｘ２で置換されたもしくは置換されていない３から７員のシクロアルキレンもしくはヘテロシクロアルキレン、３から７員のシクロアルキレンもしくはヘテロシクロアルキレン、または（ＣＨ２）０−５Ｘ２またはＯ（ＣＨ２）２−５Ｘ２で置換されたもしくは置換されていない５から６員のアリーレンもしくはヘテロアリーレンであり；
Ｘ２はそれぞれ独立して、Ｍｅ、ＣＯ２Ｈ、ＮＨ２、ＮＨ（Ｃ１−Ｃ５アルキル）、Ｎ（Ｃ１−Ｃ５アルキル）２、ＳＨ、ＣＨＯ、Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２）２Ｎ（Ｃ１−Ｃ３アルキル）、Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２）２ＮＨ、ＮＨＮＨ２、またはＣ（＝Ｏ）ＮＨＮＨ２であり；
Ｙは（ＣＨ２）４−６ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）４−６、（ＣＨ２）４−６Ｘ１（ＣＨ２）４−６、または（ＣＨ２）２（ＯＣＨ２ＣＨ２）２−３であり；
Ｒ１およびＲ２はそれぞれ独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、Ｃ１−Ｃ３アルキル、Ｏ（Ｃ１−Ｃ３アルキル）、シアノ、（ＣＨ２）０−５ＮＨ２、またはＮＯ２であり（Ｒ１およびＲ２の両方は、好ましくはＨである）；
ジアゼピン環系における二重線

はそれぞれ独立して、単結合または二重結合を表し；
Ｎに接する、すなわち結合する二重線

が単結合である場合、Ｒ３はそれぞれＨであり、二重線が二重結合である場合、Ｒ３は存在せず；
Ｃに接する、すなわち結合する二重線

が単結合である場合、Ｒ４はそれぞれＨ、ＯＨ、ＳＯ３Ｎａ、またはＳＯ３Ｋであり、二重線が二重結合である場合、Ｒ４は存在せず；
ＡおよびＢは独立して、式ＩａまたはＩｂ：

［式Ｉａ中、
Ｙ’およびＹ’’は独立して、存在しない、ＣＨ２、Ｃ＝Ｏ、またはＣＨＲ１２であり；ここで、Ｒ１２はそれぞれ独立して、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＣ１−Ｃ３アルキルであり、但し、Ｙ’およびＹ’’は両方が存在しないことはなく；
Ｇはそれぞれ独立して、ＣまたはＮであり、但し、２つ未満のＧはＮであり；
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ５アルキル、Ｃ≡Ｃ（ＣＨ２）１−５Ｘ２、ＯＨ、Ｏ（Ｃ１−Ｃ５アルキル）、シアノ、ＮＯ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１−８（Ｃ１−３アルキル）、（ＣＨ２）０−５Ｘ２、Ｏ（ＣＨ２）２−５Ｘ２、（ＣＨ２）０−５Ｘ２もしくはＯ（ＣＨ２）２−５Ｘ２で置換されたもしくは置換されていない３から７員のシクロアルキレンもしくはヘテロシクロアルキレン３から７員のシクロアルキルもしくはヘテロシクロアルキル、（ＣＨ２）０−５Ｘ２もしくはＯ（ＣＨ２）２−５Ｘ２で置換されたもしくは置換されていない３から７員のシクロアルキレンもしくはヘテロシクロアルキレン５から６員のアリールもしくはヘテロアリール、

であるか；
あるいは、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、またはＲ８が、ＮであるＧに接している、すなわち結合している場合、そのようなＲ５、Ｒ６、Ｒ７、またはＲ８は存在しない］
［式Ｉｂ中、
点線はＣ１−Ｃ２、Ｃ２−Ｃ３、またはＣ２−Ｒ１０二重結合の任意の存在を表し；
Ｃ１−Ｃ２、Ｃ２−Ｃ３、またはＣ２−Ｒ１０が存在する場合、Ｒ９は存在せず、そうでない場合、Ｈであり；
Ｒ１０はＨ、＝Ｏ、＝ＣＨ２、＝ＣＨ（Ｃ１−Ｃ５アルキル）、ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）１−５Ｘ２、Ｃ≡Ｃ（ＣＨ２）１−５Ｘ２、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ＯＨ、Ｏ（Ｃ１−Ｃ５アルキル）、シアノ、ＮＯ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１−８（Ｃ１−３アルキル）、（ＣＨ２）０−５Ｘ２、（ＣＨ２）０−５Ｘ２、Ｏ（ＣＨ２）２−５Ｘ２で置換されたもしくは置換されていない４から７員のアリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、もしくはヘテロシクロアルキル、（ＣＨ２）０−５Ｘ２もしくはＯ（ＣＨ２）２−５Ｘ２で置換されたもしくは置換されていない３から７員のシクロアルキレンもしくはヘテロシクロアルキレン３から７員のシクロアルキルもしくはヘテロシクロアルキル、（ＣＨ２）０−５Ｘ２もしくはＯ（ＣＨ２）２−５Ｘ２で置換されたもしくは置換されていない３から７員のシクロアルキレンもしくはヘテロシクロアルキレン５から６員のアリールもしくはヘテロアリールである］
で表されるものである］
で表されるような大環状環構造を形成する、８／８’架橋および７／７’架橋の両方を有する、新たなベンゾジアゼピン二量体、またはその薬学的に許容可能な塩を提示する。
別の実施態様において、本発明は、標的細胞上の化学物質に特異的にまたは選択的に結合する、標的部位に共有結合する式（Ｉ）の二量体を含む結合体を提示し、ここで、標的細胞は好ましくは癌細胞である。好ましくは、標的部位は抗体、さらに好ましくはモノクローナル抗体であり；より好ましくはヒトモノクローナル抗体であり、化学物質は腫瘍関連抗原である。腫瘍関連抗原は、癌細胞の表面に提示されるものであってもよく、または癌細胞によって周囲の細胞外空間に分泌されるものであってもよい。好ましくは、腫瘍関連抗原は、正常細胞と比べて、癌細胞によって過剰発現するもの、または通常細胞ではなく癌細胞によって発現するものである。
別の実施態様において、標的部位に結合するのに適切な、反応性官能基を有するリンカー部位に共有結合する、式（Ｉ）に記載の二量体が提示される。
別の実施態様において、対象に治療上の有効量の本発明の二量体、またはその標的部位との結合体を投与することを特徴とする、癌を患っている対象における、癌の治療方法が提示される。別の実施態様において、そのような癌を患っている対象における癌の治療剤の製造のための、本発明の二量体、またはその標的部位との結合体の使用が提示される。本発明の二量体、またはその標的部位との結合体はまた、インビトロ、エクスビボ、またはインビボでの癌細胞の増殖を抑制するために用いることができる。特に、癌は肺癌、胃癌、または卵巣癌である。
図１Ａ−１Ｂ、２、３、４Ａ−４Ｂ、５、６、７、８、９、および１０は、本発明の二量体の合成のための反応スキームを示す。
図１１、１２、１３Ａ−１３Ｂ、１４、および１５は、ＡＤＣの合成に用いることのできる、二量体−リンカー化合物の製造のための反応スキームを示す。
図１６Ａ−１６Ｂは、組み合わせで、本発明の他の二量体の合成を示す。
図１７は、癌細胞に対する、本発明の２つのＡＤＣの活性を示す。
本発明の詳細な説明
定義
「抗体」は、全抗体および任意の抗原結合性フラグメント（すなわち、「抗原結合部位」）またはその一本鎖変異体を意味する。全抗体は、ジスルフィド結合によって相互に結合した少なくとも２つの重（Ｈ）鎖および２つの軽（Ｌ）鎖を含むタンパク質である。重鎖はそれぞれ、重鎖の可変領域（ＶＨ）および、ＣＨ１、ＣＨ２およびＣＨ３の３つのドメインを含む重鎖の定常領域を含む。軽鎖はそれぞれ、軽鎖可変領域（ＶＬまたはＶｋ）および、単一のドメインＣＬを含む軽鎖の定常領域を含む。ＶＨおよびＶＬ部位は、より保存されたフレームワーク領域（ＦＲ）が散在する、相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる超可変領域にさらに細分することができる。ＶＨおよびＶＬはそれぞれ、ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、およびＦＲ４の順で、アミノ末端からカルボキシ末端に配置された、３つのＣＤＲおよび４つのＦＲを含む。可変領域は、抗原と相互作用する結合ドメインを含む。定常領域は、免疫系の様々な細胞（例えば、エフェクター細胞）、および古典的補体系の第一成分（Ｃｌｑ）などの、宿主組織または因子への抗体の結合を媒介しうる。抗体は、抗体が抗原Ｘに、５×１０−８Ｍ以下、より好ましくは１×１０−８Ｍ以下、より好ましくは６×１０−９Ｍ以下、より好ましくは３×１０−９Ｍ以下、さらにより好ましくは２×１０−９Ｍ以下のＫＤで結合する場合、抗原Ｘに「特異的に結合する」という。抗体は、キメラ、ヒト化、または好ましくはヒトでありうる。重鎖の定常領域は、グリコシル化の種類または程度に影響を与え、抗体半減期を延長し、エフェクター細胞もしくは補体系との相互作用を増強もしくは減少させ、または他のいくつかの性質を調節するように、遺伝子操作することができる。遺伝子操作は、１つ以上のアミノ酸の置換、付加もしくは欠失によって、または他の免疫グロブリンの種類からのドメインでドメインを置換することによって、または前記の組み合わせによって達成することができる。
抗体の「抗原結合性フラグメント」および「抗原結合部位」（または、単に「抗体部位」もしくは「抗体フラグメント」）は、抗原に特異的に結合する能力を有する、抗体の１つ以上のフラグメントを意味する。抗体の抗原結合機能は、完全長の抗体のフラグメント、例えば、（ｉ）ＶＬ、ＶＨ、ＣＬおよびＣＨ１ドメインから成る一価のフラグメントである、Ｆａｂフラグメント；（ｉｉ）ヒンジ領域においてジスルフィド架橋で連結された、２つのＦａｂフラグメントを含む二価のフラグメントである、Ｆ（ａｂ’）２フラグメント；（ｉｉｉ）ヒンジ領域の一部を有する、本質的にＦａｂである、Ｆａｂ’フラグメント（例えば、Ａｂｂａｓ ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌｕｌａｒ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，６ｔｈ Ｅｄ．，Ｓａｕｎｄｅｒｓ Ｅｌｓｅｖｉｅｒ ２００７を参照されたい）；（ｉｖ）ＶＨおよびＣＨ１ドメインから成るＦｄフラグメント；（ｖ）抗体の単一のアームのＶＬおよびＶＨドメインから成るＦｖフラグメント；（ｖｉ）ＶＨドメインから成るｄＡｂフラグメント（Ｗａｒｄ ｅｔ ａｌ．，（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ ３４１：５４４−５４６）；（ｖｉｉ）単離した相補性決定領域（ＣＤＲ）；並びに（ｖｉｉｉ）単一の可変領域および２つの定常領域を含む重鎖の可変領域である、ナノボディ（ｎａｎｏｂｏｄｙ）などによって発揮することができることが示されている。好ましい抗原結合性フラグメントは、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂ’、Ｆｖ、およびＦｄフラグメントである。さらに、Ｆｖフラグメントの２つのドメイン、ＶＬおよびＶＨは、別の遺伝子にコードされているが、組み換え法を用いて、ＶＬおよびＶＨ領域を対にして、一価の分子を形成させる（一本鎖ＦｖまたはｓｃＦｖとして知られている）、単一のタンパク質鎖として作製することができる合成リンカーによって、これらを結合することができる；例えば、Ｂｉｒｄ ｅｔ ａｌ．（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２：４２３−４２６；およびＨｕｓｔｏｎ ｅｔ ａｌ．（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８５：５８７９−５８８３を参照されたい。このような一本鎖抗体もまた、用語、抗体の「抗原結合性部位」に含まれる。
「単離した抗体」は、異なる抗原特異性を有する他の抗体を実質的に含まない抗体を意味する（例えば、抗原Ｘに特異的に結合する、単離した抗体は、抗原Ｘ以外の抗原に特異的に結合する抗体を実質的に含まない）。抗原Ｘに特異的に結合する単離した抗体は、しかしながら、他の種の抗原Ｘ分子など、他の抗原に対して交差反応性を有しうる。いくつかの実施態様において、単離した抗体は、ヒト抗原Ｘに特異的に結合し、他の（非ヒト）抗原Ｘ抗原と交差反応しない。さらに、単離した抗体は、他の細胞物質および／または化学物質を実質的に含まなくてもよい。
「モノクローナル抗体」または「モノクローナル抗体組成物」は、特定のエピトープに対して単一の結合特異性および親和性を示す、単一の分子組成物の抗体分子の製造を意味する。
「ヒト抗体」は、フレームワークおよびＣＤＲ領域（および存在する場合、定常領域）が、ヒト生殖細胞系免疫グロブリン配列に由来する可変領域を有する抗体を意味する。ヒト抗体は、天然または合成の修飾などの、後の修飾を含みうる。ヒト抗体は、ヒト生殖細胞系免疫グロブリン配列によってコードされていないアミノ酸配列（例えば、インビトロでのランダムまたは部位特異的な突然変異誘発によって、またはインビボでの体細胞変異によって導入される変異）を含みうる。しかしながら、「ヒト抗体」は、マウスなどの他の哺乳動物種の生殖細胞系に由来するＣＤＲ配列が、ヒトのフレームワーク配列に移植された抗体を含まない。
「ヒトモノクローナル抗体」は、フレームワークおよびＣＤＲ領域がヒト生殖細胞系免疫グロブリン配列に由来する可変領域を有する、単一の結合特異性を示す抗体を意味する。ある実施態様において、ヒトモノクローナル抗体は、不死化細胞に融合したヒト重鎖導入遺伝子、および軽鎖導入遺伝子を含むゲノムを有する、遺伝子組み換え非ヒト動物、例えば、遺伝子組み換えマウスから得られるＢ細胞を含むハイブリドーマによって産生される。
「脂肪族」は、特定の数の炭素原子を有する（例えば、「Ｃ３脂肪族」、「Ｃ１−５脂肪族」、「Ｃ１−Ｃ５脂肪族」、または「Ｃ１からＣ５脂肪族」、後者３つの用語は、１から５個の炭素原子を有する脂肪族基と同義である）、または炭素原子の数が明確に特定されていない場合、１から４個の炭素原子（不飽和脂肪族基の例において、２から４個の炭素）を有する、直鎖または分岐鎖、飽和または不飽和、非芳香族炭化水素基を意味する。同様の認識が、Ｃ２−４アルケン、Ｃ４−Ｃ７環式脂肪族、などの他の種類の炭素数にも適用される。同様に、「(ＣＨ２)１−３」などの用語は、１、２または３である下付き文字を簡略化したものであると理解することができ、つまり、このような用語は、ＣＨ２、ＣＨ２ＣＨ２、およびＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２を表す。
「アルキル」は、適用される炭素原子の数を指定する同様の慣習で、飽和脂肪族基を意味する。例として、Ｃ１−Ｃ４アルキル（または、同義的に、Ｃ１−４アルキル）基としては、これらに限定はされないが、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、イソブチル、ｔ−ブチル、１−ブチル、２−ブチルなどが挙げられる。「アルキレン」は、ＣＨ２ＣＨ２、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２、およびＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２などのアルキル基の二価の対応物を意味する。
「アルケニル」は、適用される炭素原子の数を指定する同様の慣習で、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を含む脂肪族基を意味する。例として、Ｃ２−Ｃ４アルケニル基としては、これらに限定はされないが、エテニル（ビニル）、２−プロペニル（アリルまたはプロプ−２−エニル）、シス−１−プロペニル、トランス−１−プロペニル、Ｅ−（またはＺ−）２−ブテニル、３−ブテニル、１，３−ブタジエニル（ブト−１，３−ジエニル）などが挙げられる。
「アルキニル」は、適用される炭素原子の数を指定する同様の慣習で、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を含む脂肪族基を意味する。例として、Ｃ２−Ｃ４アルキニル基としては、エチニル（アセチレニル）、プロパルギル（プロプ−２−イニル）、１−プロピニル、ブト−２−イニルなどが挙げられる。
「環式脂肪族」は、１から３個の環を有し、それぞれの環が３から８個（好ましくは３から６個）の炭素原子を有する、飽和または不飽和、非芳香族炭化水素基を意味する。「シクロアルキル」は、環のそれぞれが飽和である、環式脂肪族基を意味する。「シクロアルケニル」は、少なくとも１つの環が、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を有する、環式脂肪族基を意味する。「シクロアルキニル」は、少なくとも１つの環が、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を有する、環式脂肪族基を意味する。例として、環式脂肪族基としては、これらに限定はされないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、シクロヘプチル、シクロオクチル、およびアダマンチルが挙げられる。好ましい環式脂肪族基としては、シクロアルキルであり、特に、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、およびシクロヘキシルである。「シクロアルキレン」は、シクロアルキル基の二価の対応物を意味する。
「ヘテロ環式脂肪族」は、少なくとも１つの環中の、最大で３個（好ましくは１から２個）の炭素が、独立して、Ｎ、Ｏ、またはＳから選択されるヘテロ原子で置換され、ＮおよびＳが適宜、酸化されていてもよく、Ｎが適宜、４級化していてもよい、環式脂肪族基を意味する。同様に、「ヘテロシクロアルキル」、「ヘテロシクロアルケニル」および「ヘテロシクロアルキニル」は、それぞれ、少なくとも１つの環が修飾されている、シクロアルキル、シクロアルケニル、またはシクロアルキニル基を意味する。ヘテロ環式脂肪族基の例としては、アジリジニル、アゼチジニル、１，３−ジオキサニル、オキセタニル、テトラヒドロフリル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、テトラヒドロチオピラニルスルホン、モルホリニル、チオモルホリニル、チオモルホリニルスルホキシド、チオモルホリニルスルホン、１，３−ジオキソラニル、テトラヒドロ−１，１−ジオキソチエニル、１，４−ジオキサニル、チエタニルなどが挙げられる。「ヘテロシクロアルキレン」は、ヘテロシクロアルキル基の二価の対応物を意味する。
「アルコキシ」、「アリールオキシ」、「アルキルチオ」および「アリールチオ」は、それぞれ、−Ｏ（アルキル）、−Ｏ（アリール）、−Ｓ（アルキル）、および−Ｓ（アリール）を意味する。例としては、それぞれ、メトキシ、フェノキシ、メチルチオ、およびフェニルチオである。
「ハロゲン」または「ハロ」は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素を意味する。
「アリール」は、環のそれぞれが３から７個の炭素原子を有し、少なくとも１つの環が芳香族である、単環式、二環式、または三環式環系を有する炭化水素基を意味する。環系中の環は、（ナフチルのように）互いに縮合しているか、あるいは（ビフェニルのように）互いに結合していてもよく、（インダニルまたはシクロヘキシルフェニルのように）非芳香環に縮合または結合していてもよい。さらに例として、アリール基としては、これらに限定はされないが、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インダニル、ビフェニル、フェナントリル、アントラセニル、およびアセナフチルが挙げられる。「アリーレン」は、例えば、１，２−フェニレン、１，３−フェニレン、または１，４−フェニレンである、アリールの二価の対応物を意味する。
「ヘテロアリール」は、環のそれぞれが３から７個の炭素原子を有し、少なくとも１つの環が、独立して、Ｎ、Ｏ、またはＳから選択される１から４個のヘテロ原子を含む芳香環であり、ＮおよびＳが適宜、酸化されていてもよく、Ｎが適宜４級化されていてもよい、単環式、二環式、または三環式環系を有する基を意味する。このような、芳香環を含む少なくとも１つのヘテロ原子は、（ベンゾフラニルまたはテトラヒドロイソキノリルのように）他の種類の環に縮合していてもよく、あるいは（フェニルピリジルまたは２−シクロペンチルピリジルのように）他の種類の環に直接結合していてもよい。さらに例として、ヘテロアリール基としては、ピロリル、フラニル、チオフェニル（チエニル）、イミダゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピリジル、Ｎ−オキソピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、キノリニル、イソキノリニル、キナゾリニル、シンノリニル、キノザリニル、ナフチリジニル、ベンゾフラニル、インドリル、ベンゾチオフェニル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、フェノチアゾリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾトリアゾリル、ジベンゾフラニル、カルバゾリル、ジベンゾチオフェニル、アクリジニルなどが挙げられる。「ヘテロアリーレン」は、ヘテロアリール基の二価の対応物を意味する。
「置換されていないまたは置換されたＣ１−Ｃ５アルキル」または「適宜置換されていてもよいヘテロアリール」などの句における、「置換されていないまたは置換された」または「適宜置換されていてもよい」を使用することなどによって、基が置換されていてもよいことが示されている場合、このような基は１つ以上の、好ましくは１から５の数の、さらに好ましくは１または２の数の、独立して選択される置換基を有していてもよい。置換基および置換パターンは、置換基が結合している基を考慮して、化学的に安定であり、当技術分野において既知の技術によって、および本明細書で説明される方法によって合成することができる化合物を生じるように、当業者が選択することができる。
「アリールアルキル」、「（ヘテロ環式脂肪族）アルキル」、「アリールアルケニル」、「アル−ルアルキニル」、「ビアリールアルキル」などは、場合によって、アリール、ヘテロ環式脂肪族、ビアリールなどの基で置換されていてもよいアルキル、アルケニル、またはアルキニル基、場合によって、例えば、ベンジル、フェネチル、Ｎ−イミダゾイルエチル、Ｎ−モルホリノエチルなどのように、アルキル、アルケニルまたはアルキニル基がオープンな（満たされていない）結合価を有する、アルキル、アルケニル、またはアルキニル基を意味する。逆に、「アルキルアリール」、「アルケニルシクロアルキル」などは、場合によって、例えばメチルフェニル（トリル）またはアリルシクロヘキシルなどのように、場合によって、アルキル、アルケニルなどの基で置換されていてもよいアリール、シクロアルキルなどの基を意味する。「ヒドロキシアルキル」、「ハロアルキル」、「アルキルアリール」、「シアノアリール」などは、場合によって、１つ以上の特定の置換基（場合によって、ヒドロキシル、ハロなどでありうる）で置換されていてもよい、アルキル、アリールなどの基を意味する。
例えば、許容される置換基としては、これらに限定はされないが、アルキル（特にメチルまたはエチル）、アルケニル（特にアリル）、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、環式脂肪族、ヘテロ環式脂肪族、ハロ（特にフルオロ）、ハロアルキル（特にトリフルオロメチル）、ヒドロキシル、ヒドロキシアルキル（特にヒドロキシエチル）、シアノ、ニトロ、アルコキシ、−Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−Ｏ（ハロアルキル）（特に−ＯＣＦ３）、−Ｏ（シクロアルキル）、−Ｏ（ヘテロシクロアルキル）、−Ｏ（アリール）、アルキルチオ、アリールチオ、＝Ｏ、＝ＮＨ、＝Ｎ（アルキル）、＝ＮＯＨ、＝ＮＯ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、−ＯＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）（ヒドロキシアルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、アジド、−ＮＨ２、−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ（アリール）、−ＮＨ（ヒドロキシアルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−ＯＳＯ２（アルキル）、−ＳＨ、−Ｓ（アルキル）、−Ｓ（アリール）、−Ｓ（シクロアルキル）、−Ｓ（＝Ｏ）アルキル、−ＳＯ２（アルキル）、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ（アルキル）、−ＳＯ２Ｎ（アルキル）２などが挙げられる。
置換されている基が脂肪族基である場合、好ましい置換基は、アリール、ヘテロアリール、環式脂肪族、ヘテロ環式脂肪族、ハロ、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、アルコキシ、−Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−Ｏ（ハロアルキル）、−Ｏ（シクロアルキル）、−Ｏ（ヘテロシクロアルキル）、−Ｏ（アリール）、アルキルチオ、アリールチオ、＝Ｏ、＝ＮＨ、＝Ｎ（アルキル）、＝ＮＯＨ、＝ＮＯ（アルキル）、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、−ＯＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）（ヒドロキシアルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、アジド、−ＮＨ２、−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ（アリール）、−ＮＨ（ヒドロキシアルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−ＯＳＯ２（アルキル）、−ＳＨ、−Ｓ（アルキル）、−Ｓ（アリール）、−Ｓ（＝Ｏ）アルキル、−Ｓ（シクロアルキル）、−ＳＯ２（アルキル）、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ（アルキル）、および−ＳＯ２Ｎ（アルキル）２である。さらに好ましい置換基は、ハロ、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、アルコキシ、−Ｏ（アリール）、＝Ｏ、＝ＮＯＨ、＝ＮＯ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、アジド、−ＮＨ２、−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ（アリール）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、および−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２である。特に、フェニル、シアノ、ハロ、ヒドロキシル、ニトロ、Ｃ１−Ｃ４アルキルオキシ、Ｏ（Ｃ２−Ｃ４アルキレン）ＯＨ、およびＯ（Ｃ２−Ｃ４アルキレン）ハロが好ましい。
置換されている基が環式脂肪族、ヘテロ環式脂肪族、アリール、またはヘテロアリール基である場合、好ましい置換基は、アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロ、ハロアルキル、ヒドロキシル、ヒドロキシアルキル、シアノ、ニトロ、アルコキシ、−Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−Ｏ（ハロアルキル）、−Ｏ（アリール）、−Ｏ（シクロアルキル）、−Ｏ（ヘテロシクロアルキル）、アルキルチオ、アリールチオ、−Ｃ（＝Ｏ）（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、−ＯＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）（ヒドロキシアルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、アジド、−ＮＨ２、−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ（アリール）、−ＮＨ（ヒドロキシアルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−ＯＳＯ２（アルキル）、−ＳＨ、−Ｓ（アルキル）、−Ｓ（アリール）、−Ｓ（シクロアルキル）、−Ｓ（＝Ｏ）アルキル、−ＳＯ２（アルキル）、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ（アルキル）、および−ＳＯ２Ｎ（アルキル）２である。さらに好ましい置換基は、アルキル、アルケニル、ハロ、ハロアルキル、ヒドロキシル、ヒドロキシアルキル、シアノ、ニトロ、アルコキシ、−Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、−ＯＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）（ヒドロキシアルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ２、−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ（アリール）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、および−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２である。特に、Ｃ１−Ｃ４アルキル、シアノ、ニトロ、ハロ、およびＣ１−Ｃ４アルコキシが好ましい。
「Ｃ１−Ｃ５アルキル」または「５から１０％」などのように、範囲が明示されている場合、このような範囲は、第一の例におけるＣ１およびＣ５、並びに、第二の例における５％および１０％などのように、範囲の端点を含む。
特定の立体異性体が（例えば、構造式中の関連する立体中心における太線もしくは点線の結合によって、構造式中のＥもしくはＺ配置を有する二重結合の描写によって、または立体化学指定命名法の使用によって）具体的に明示されない限り、全ての立体異性体が、純粋な化合物およびそれらの混合物として、本発明の範囲内に含まれる。特に明示されない限り、個々のエナンチオマー、ジアステレオマー、幾何異性体、並びにそれらの組み合わせおよび混合物は、全て本発明に含まれる。
化合物が、本明細書で用いられる構造式中に示されるものと等価である、互変異性形態（例えば、ケトおよびエノール型）、共鳴型、および双性イオン型を有していてもよく、構造式はそのような互変異性体型、共鳴型、または双性イオン型を含むことが当業者には理解される。
「薬学的に許容可能なエステル」は、インビボ（例えば、ヒトの体内）で加水分解して、親化合物もしくはその塩を生じる、またはそれ自体が親化合物と類似した活性を有するエステルを意味する。適切なエステルとしては、Ｃ１−Ｃ５アルキル、Ｃ２−Ｃ５アルケニルまたはＣ２−Ｃ５アルキニルエステル、特にメチル、エチルまたはｎ−プロピルが挙げられる。
「薬学的に許容可能な塩」は、医薬製剤に適切な化合物の塩を意味する。化合物が１つ以上の塩基性基を有する場合、当該塩は、サルフェート、ヒドロブロマイド、タートレート、メシレート、マレアート、シトレート、ホスフェート、アセテート、パモエート（エンボネート）、ヒドロアイオダイド、ニトレート、ヒドロクロライド、ラクテート、メチルサルフェート、フマレート、ベンゾアート、スクシネート、メシレート、ラクトビオネート、スベラート、トシレートなどの酸付加塩でありうる。化合物が１つ以上の酸性基を有する場合、当該塩は、カルシウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、メグルミン塩、アンモニウム塩、亜鉛塩、ピペラジン塩、トロメタミン塩、リチウム塩、コリン塩、ジエチルアミン塩、４−フェニルシクロヘキシルアミン塩、ベンザチン塩、ナトリウム塩、テトラメチルアンモニウム塩などの塩でありうる。多形結晶形態および溶媒和もまた、本発明の範囲内に含まれる。
本明細書の式において、結合を横切る波線

または結合の端点のアスタリスク（＊）は、共有結合部位を示す。例えば、式：

において、Ｒが

であるとの記載は、

を意味する。
本明細書の式において、芳香環の２つの炭素間を横切る結合は、結合に付加する基が、芳香環の利用可能な部位のいずれかに位置しうることを意味する。例として、式：

は、

を表す。
二量体
好ましくは、式Ｉにおいて、Ｘは３から５個の原子の長さのＣ７／Ｃ７’架橋であり、Ｙは７、８、９、１０、１１、または１２個の原子の長さのＣ８／Ｃ８’架橋であり、ここで、それぞれの架橋における原子は、Ｃ、Ｏ、Ｎ、およびＳから選択され、特に、全ての原子はＣであるか、あるいは１つがＯ、Ｎ、またはＳである以外の全てがＣである。より好ましくは、Ｘが３個の原子の長さである場合、Ｙは７、８、９、または１０個の原子の長さであり（さらに好ましくは、８から１０個の原子の長さである）、Ｘが５個の原子の長さである場合、Ｙは１１または１２個の原子の長さである。
好ましい実施態様において、式ＩにおけるＸは（ＣＨ２）３または（ＣＨ２）５である。
別の好ましい実施態様において、式Ｉ、ＩＩａ、ＩＩｂ、またはＩＩｃ（以下に示される後者３つの式）におけるＹは（ＣＨ２）７−１２であり、さらに好ましくは（ＣＨ２）８である。
式Ｉにおいて、好ましいＸおよびＹの組み合わせは、Ｘが(ＣＨ２)３で、Ｙが(ＣＨ２）８−１０である、およびＸが（ＣＨ２）５で、Ｙが（ＣＨ２）１１−１２である。さらに好ましい組み合わせは、Ｘが（ＣＨ２）３であり、Ｙが（ＣＨ２）８である。
別の好ましい実施態様において、式Ｉ、ＩＩａ、ＩＩｂ、またはＩＩｃのＹは（ＣＨ２）２（ＯＣＨ２ＣＨ２）２−３、特に（ＣＨ２）２（ＯＣＨ２ＣＨ２）２である。
別の好ましい実施態様において、式Ｉ、ＩＩａ、ＩＩｂ、またはＩＩｃのＹは（ＣＨ２）４ＮＨ（ＣＨ２）４または（ＣＨ２）４Ｎ（ＣＨ２（ｐ−Ｃ６Ｈ４ＮＨ２））（ＣＨ２）４である。
式に存在する場合、Ｘ２は好ましくは、ＮＨ２、ＳＨ、またはＣＯ２Ｈである。
好ましくは、式ＩにおけるＸが

であり、Ｘ１がＯまたはＮＨである場合、Ｘは

である。
好ましい実施態様において、本発明の二量体は、式ＩＩａで表される構造を有し、ここで、ｘは３または５（好ましくは３）であり；Ｙは（ＣＨ２）７−１２、（ＣＨ２）２（ＯＣＨ２ＣＨ２）１−３、（ＣＨ２）２−４ＮＨ（ＣＨ２）２−４または（ＣＨ２）２−４ＮＨ（（ＣＨ２）０−１フェニル）（ＣＨ２）２−４であり、ここで、フェニル基は適宜、ＮＨ２で置換されていてもよく；Ａは以下に示されるＡ１、Ａ２、またはＡ３であり、Ｂは以下に示されるＢ１、Ｂ２、またはＢ３である。代表的な種を表１に列挙する。
別の好ましい実施態様において、本発明の二量体は式ＩＩｂで表される構造を有し、ここで、ｘは３または５（好ましくは３）であり、Ｙ’はそれぞれ独立して、存在しない、またはＣＨ２であり、Ｙは（ＣＨ２）７−１２、（ＣＨ２）２（ＯＣＨ２ＣＨ２）１−３、（ＣＨ２）２−４ＮＨ（ＣＨ２）２−４または（ＣＨ２）２−４ＮＨ（（ＣＨ２）０−１フェニル）（ＣＨ２）２−４であり、ここで、フェニル基は適宜、ＮＨ２で置換されていてもよく；並びに、Ｒ４０およびＲ４１は、独立して、Ｈ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、Ｏ（Ｃ１−３アルキル）、ＮＨ２、またはＣ１−３アルキルである。代表的な種を表２に列挙する。
別の好ましい実施態様において、本発明の二量体は式ＩＩｃで表される構造を有し、ここで、ｘは３または５（好ましくは３）であり、Ｙは（ＣＨ２）７−１２、（ＣＨ２）２（ＯＣＨ２ＣＨ２）１−３、（ＣＨ２）２−４ＮＨ（ＣＨ２）２−４または（ＣＨ２）２−４ＮＨ（（ＣＨ２）０−１フェニル）（ＣＨ２）２−４であり、ここで、フェニル基は適宜、ＮＨ２で置換されていてもよく；並びに、Ｒ４２およびＲ４３は独立して、Ｈ、ＯＭｅ、ＮＨ２、ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＭｅ、Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２）Ｏ、Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２）ＮＭｅ、またはＮ（ＣＨ２ＣＨ２）ＮＨである。代表的な種を表３に列挙する。
好ましくは、本発明の二量体は、二量体ＩＩｂ−６、ＩＩｃ−８、ＩＩｃ−９、ＩＩｃ−１０、ＩＩｃ−１１、ＩＩｄ−１、ＩＩｄ−２、およびＩＩｄ−３：


から成る群から選択される。
結合体
一般
本発明の二量体は、それ自体で治療剤として使用することができるが、好ましくは、癌細胞上の化学物質に特異的または選択的に結合する標的部位との結合体として使用される。好ましくは、標的部位は抗体またはその抗原結合部位であり、化学物質は腫瘍関連抗原である。
そのため、本発明の別の実施態様は、式（ＩＩ）：

［式中、
Ｚはリガンドであり、Ｄは本発明の二量体であり、−（ＸＤ）ａＣ（ＸＺ）ｂ−は、ＺおよびＤに結合しているため、まとめて、「リンカー部位」または「リンカー」と称される］
で表される、本発明の二量体およびリガンドを含む結合体である。リンカー内で、Ｃは二量体Ｄの意図された生物学的作用の部位において、またはその付近で切断されるように設計した切断可能な基であり；ＸＤおよびＸＺは、それぞれ、ＤおよびＣ、並びにＣおよびＺを隔てているため、スペーサー部位（または「スペーサー」）と称され；下付き文字ａ、ｂ、およびｃは、独立して、０または１である（すなわちＸＤ、ＸＺおよびＣの存在は任意である）。下付き文字ｍは１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０（好ましくは、１、２、３、または４）である。Ｄ、ＸＤ、Ｃ、ＸＺおよびＺは以下にさらに詳細に記述される。
リガンドＺ、例えば抗体は、標的機能を発揮する。抗原または受容体が存在している標的組織または細胞に結合することによって、リガンドＺはそこに結合体を誘導する。リガンドＺが抗体である場合、結合体は時に、抗体―薬物結合体（ＡＤＣ）または免疫複合体と称される。好ましくは、標的組織または細胞は癌細胞または組織であり、抗原または受容体は腫瘍関連抗原、すなわち、非癌細胞と比較して、癌細胞に特異的に発現している抗原、または癌細胞で過剰発現している抗原である。標的組織または細胞において、基Ｃが切断されることによって、二量体Ｄが放出され、局所的に細胞毒性効果が発揮される。いくつかの例において、結合体はエンドサイトーシスによって標的細胞に取り込まれ、切断は標的細胞内で起こる。このように、目的の作用部位に、二量体Ｄが正確に送達され、必要な用量は減少する。また、二量体Ｄは通常、結合体の状態では生物学的に不活性（または著しく低い活性）であり、そのため、非標的組織または細胞に対する望ましくない毒性は減少する。抗癌剤は一般に、細胞に対してしばしば高い毒性であるため、これは重要な考慮事項である。
下付き文字ｍによって示されるように、リガンドＺの分子のそれぞれは、リガンドＺが結合可能な部位の数、および用いられる実験条件に応じて、１つより多い二量体Ｄと結合することができる。リガンドＺのそれぞれの個々の分子は、整数個の二量体Ｄに結合するが、結合体の製造は、統計的な平均値を反映して、非整数比の二量体Ｄ対リガンドＺについて解析されることが当業者には理解される。この比は置換率（ＳＲ）、または同義的に、薬物−抗体比（ＤＡＲ）と称される。
リガンドＺ
好ましくは、リガンドＺは抗体である。便宜上および簡潔化のためであって、これらに限定されるものではないが、リガンドＺの結合体に関する本明細書の以下の詳細な議論は、抗体の文脈で書かれているが、変更すべきところは変更して、他の種類のリガンドＺを結合させることができることが当業者には理解される。例えば、リガンドとして葉酸を有する結合体は、細胞表面に葉酸受容体を有する細胞を標的にすることができる（Ｌｅａｍｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．２００８，６８（２３），９８３９）。同じ理由で、以下の詳細な議論は、主に、抗体Ｚ対類似体Ｄが１：１の比（ｍ＝１）に関して記述する。
好ましくは、リガンドＺは、癌細胞を選択的に標的にすることのできる、腫瘍関連抗原に対する抗体である。このような抗原の例として、以下が挙げられる：メソセリン、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ７０、Ｂ７Ｈ３、Ｂ７Ｈ４（Ｏ８Ｅとしても知られている）、タンパク質チロシンキナーゼ７（ＰＴＫ７）、グリピカン−３、ＲＧ１、フコシル−ＧＭ１、ＣＴＬＡ−４、およびＣＤ４４。抗体は、動物（例えば、マウス）、キメラ、ヒト化、または、好ましくはヒトでありうる。抗体は、好ましくはモノクローナル抗体、特にヒトモノクローナル抗体である。前記のいくつかの抗原に対するヒトモノクローナル抗体の調製は、以下で開示される：Ｋｏｒｍａｎ ｅｔ ａｌ．，ＵＳ８，６０９，８１６ Ｂ２（２０１３；Ｂ７Ｈ４，０８Ｅとしても知られている；特に抗体２Ａ７、１Ｇ１１、および２Ｆ９）；Ｒａｏ−Ｎａｉｋ ｅｔ ａｌ．、８，０９７，７０３ Ｂ２（２０１２；ＣＤ１９；特に、抗体５Ｇ７、１３Ｆ１、４６Ｅ８、２１Ｄ４、２１Ｄ４ａ、４７Ｇ４、２７Ｆ３、および３Ｃ１０）；Ｋｉｎｇ ｅｔ ａｌ．，ＵＳ８，４８１，６８３ Ｂ２（２０１３；ＣＤ２２；特に、抗体１２Ｃ５、１９Ａ３、１６Ｆ７、および２３Ｃ６）；Ｋｅｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，ＵＳ７，３８７，７７６ Ｂ２（２００８；ＣＤ３０；特に、抗体５Ｆ１１、２Ｈ９、および１７Ｇ１）；Ｔｅｒｒｅｔｔ ｅｔ ａｌ．，ＵＳ８，１２４，７３８ Ｂ２（２０１２；ＣＤ７０；特に、抗体２Ｈ５、１０Ｂ４、８Ｂ５、１８Ｅ７、および６９Ａ７）;Ｋｏｒｍａｎ ｅｔ ａｌ．，ＵＳ６，９８４，７２０ Ｂ１（２００６；ＣＴＬＡ−４；特に、抗体１０Ｄ１、４Ｂ６、および１Ｅ２）；Ｖｉｓｔｉｃａ ｅｔ ａｌ．，ＵＳ８，３８３，１１８ Ｂ２（２０１３、フコシル−ＧＭ１、特に、抗体５Ｂ１、５Ｂ１ａ、７Ｄ４、７Ｅ４、１３Ｂ８、および１８Ｄ５） Ｋｏｒｍａｎ ｅｔ ａｌ．，ＵＳ８，００８，４４９ Ｂ２（２０１１；ＰＤ−１；特に、抗体１７Ｄ８、２Ｄ３、４Ｈ１、５Ｃ４、４Ａ１１、７Ｄ３、および５Ｆ４）；Ｈｕａｎｇ ｅｔ ａｌ．，ＵＳ２００９／０２９７４３８ Ａ１（２００９；ＰＳＭＡ．特に、抗体１Ｃ３、２Ａ１０、２Ｆ５、２Ｃ６）；Ｃａｒｄａｒｅｌｌｉ ｅｔ ａｌ．，ＵＳ７，８７５，２７８ Ｂ２（２０１１；ＰＳＭＡ；特に、抗体４Ａ３、７Ｆ１２、８Ｃ１２、８Ａ１１、１６Ｆ９、２Ａ１０、２Ｃ６、２Ｆ５、および１Ｃ３）；Ｔｅｒｒｅｔｔ ｅｔ ａｌ．，ＵＳ８，２２２，３７５ Ｂ２（２０１２；ＰＴＫ７；特に、抗体３Ｇ８、４Ｄ５、１２Ｃ６、１２Ｃ６ａ、および７Ｃ８）；Ｔｅｒｒｅｔｔ ｅｔ ａｌ．，ＵＳ８，６８０，２４７ Ｂ２（２０１４；グリピカン−３；特に、抗体４Ａ６、１１Ｅ７、および１６Ｄ１０）；Ｈａｒｋｉｎｓ ｅｔ ａｌ．，ＵＳ７，３３５，７４８ Ｂ２（２００８；ＲＧ１；特に、抗体Ａ、Ｂ、Ｃ、およびＤ）；Ｔｅｒｒｅｔｔ ｅｔ ａｌ．，ＵＳ８，２６８，９７０ Ｂ２（２０１２；メソセリン；特に、抗体３Ｃ１０、６Ａ４、および７Ｂ１）；Ｘｕ ｅｔ ａｌ．，ＵＳ２０１０／００９２４８４ Ａ１（２０１０；ＣＤ４４；特に、抗体１４Ｇ９．Ｂ８．Ｂ４、２Ｄ１．Ａ３．Ｄ１２、および１Ａ９．Ａ６．Ｂ９）；Ｄｅｓｈｐａｎｄｅ ｅｔ ａｌ．，ＵＳ８，２５８，２６６ Ｂ２（２０１２；ＩＰ１０；特に、抗体１Ｄ４、１Ｅ１、２Ｇ１、３Ｃ４、６Ａ５、６Ａ８、７Ｃ１０、８Ｆ６、１０Ａ１２、１０Ａ１２Ｓ、および１３Ｃ４）；Ｋｕｈｎｅ ｅｔ ａｌ．，Ｕｓ８，４５０，４６４ Ｂ２（２０１３；ＣＸＣＲ４；特に、抗体Ｆ７、Ｆ９、Ｄ１、およびＥ２）；およびＫｏｒｍａｎ ｅｔ ａｌ．，ＵＳ７，９４３，７４３ Ｂ２（２０１１；ＰＤ−Ｌ１；特に、抗体３Ｇ１０、１２Ａ４、１０Ａ５、５Ｆ８、１０Ｈ１０、１Ｂ１２、７Ｈ１、１１Ｅ６、１２Ｂ７、および１３Ｇ４）；これらの開示は引用によって本明細書に援用される。前記の抗体のそれぞれは、本発明のｄ二量体と共に、ＡＤＣに用いることができる。
リガンドＺはまた、アフィボディ、ドメイン抗体（ｄＡｂ）、ナノボディ、ユニボディ、ＤＡＲＰｉｎ、アンチカリン、バーサボディ、デュオカリン、リポカリン、またはアヴィマー（ａｖｉｍｅｒ）などの抗体フラグメントまたは抗体模倣体であってもよい。
リガンドＺにおけるいくつかの異なる反応基のいずれか１つは、リシン残基のε−アミノ基、側鎖の糖基、カルボン酸基、ジスルフィド基、およびチオール基などの結合部位でありうる。反応性基の種類はそれぞれ、いくつかの利点およびいくつかの欠点を有するトレードオフを示す。結合に適切な抗体の反応性基に関する総説としては、例えば、Ｇａｒｎｅｔｔ，Ａｄｖ． Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｒｅｖ．５３（２００１），１７１−２１６およびＤｕｂｏｗｃｈｉｋ ａｎｄ Ｗａｌｋｅｒ，Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ＆ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ ８３（１９９９），６７−１２３を参照されたく、これらの開示は引用によって本明細書に援用される。
ある実施態様において、リガンドＺはリシンのε−アミノ基を介して結合する。抗体のほとんどは、多くのリシンε−アミノ基を有し、これによって、当技術分野において既知の技術を用いて、アミド、尿素、チオ尿素、またはカルバメート結合を介して結合することができる。しかしながら、反応するε−アミノ基およびその数を制御することは難しく、結合体の製造において、バッチ間での変動の可能性が生じる。また、結合によって、抗体の本来の立体構造を維持するために重要な、プロトン化されたε−アミノ基の中和が生じうるか、あるいは、抗原部位の近くまたは抗原部位におけるリシンにおいて結合が起こりうるが、いずれも好ましいことではない。
別の実施態様において、多くの抗体はグリコシル化されているため、リガンドＺは側鎖の糖鎖を介して結合することができる。側鎖の糖鎖は、過ヨウ素酸によって酸化されて、アルデヒド基を生じることができ、これが次いでアミンと反応して、セミカルバゾン、オキシムまたはヒドラゾンなどのようなイミン基を形成することができる。必要に応じて、イミン基は、シアノ水素化ホウ素ナトリウムで還元することによって、さらに安定なアミンに変換することができる。側鎖の糖鎖を介する結合のさらなる開示としては、例えば、Ｒｏｄｗｅｌｌ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ． ＵＳＡ ８３， ２６３２−２６３６（１９８６）を参照されたく；この開示は、引用によって本明細書に援用される。リシンε−アミノ基と同様に、結合部位の場所および化学量論の再現性に関する懸念が存在する。
さらに別の実施態様において、リガンドＺはカルボン酸基を介して結合することができる。ある実施態様において、末端のカルボン酸基は官能化されて、カルボヒドラジドを生じ、これは次いでアルデヒド含有結合基と反応する。Ｆｉｓｃｈ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ １９９２，３，１４７−１５３を参照されたい。
さらに別の実施態様において、抗体Ｚは、抗体Ｚのシステイン残基および結合体の他の部位における硫黄を架橋するジスルフィド基を介して結合することができる。いくつかの抗体は遊離のチオール（スルフヒドリル）基を欠くが、例えば、ヒンジ領域にジスルフィド基を有する。このような場合、遊離のチオール基は本来のジスルフィド基を還元することによって生成することができる。そのように生成されたチオール基は、次いで、結合に用いることができる。例えば、Ｐａｃｋａｒｄ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ １９８６，２５，３５４８−３５５２；Ｋｉｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５４，６１７６−６１８５（１９９４）；およびＤｏｒｏｎｉｎａ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２１（７），７７８−７８４（２００３）を参照されたく；これらの開示は引用によって本明細書に援用される。この場合も、結合部位の位置および化学量論、並びに抗体の本来の立体構造が崩壊する可能性に関する懸念が存在する。
本来のジスルフィド結合を破壊することなく、抗体に遊離のチオール基を導入するための、多くの方法が知られており、これらの方法は本発明のリガンドＺと共に実施することができる。使用される方法に応じて、所定の位置に予測通りの数の遊離のスルフヒドリルを導入することが可能でありうる。ある方法において、他のアミノ酸がシステインで置き換えられた変異抗体を生成する。例えば、Ｅｉｇｅｎｂｒｏｔ ｅｔ ａｌ．，ＵＳ７，５２１，５４１ Ｂ２（２００９）；Ｃｈｉｌｋｏｔｉ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．１９９４，５，５０４−５０７；Ｕｒｎｏｖｉｔｚ ｅｔ ａｌ．，ＵＳ４，６９８，４２０（１９８７）；Ｓｔｉｍｍｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ．， ２７５（３９），３０４４５−３０４５０（２０００）；Ｂａｍ ｅｔ ａｌ．，ＵＳ７，３１１，９０２ Ｂ２（２００７）；Ｋｕａｎ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ．，２６９（１０），７６１０−７６１８（１９９４）；Ｐｏｏｎ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ．，２７０（１５），８５７１−８５７７（１９９５）を参照されたい。別の方法において、さらにシステインをＣ末端に付加する。例えば、Ｃｕｍｂｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４９，１２０−１２６（１９９２）；Ｋｉｎｇ ｅｔ ａｌ， Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，５４，６１７６−６１８５（１９９４）；Ｌｉ ｅｔ ａｌ．， Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．，１３，９８５−９９５（２００２）；Ｙａｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，１６，７６１−７７０（２００３）；および、Ｏｌａｆｓｏｎ ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｄｅｓｉｇｎ ＆ Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，１７，２１−２７（２００４）を参照されたい。遊離のシステインを導入するための好ましい方法は、Ｌｉｕ ｅｔ ａｌ．，ＷＯ２００９／０２６２７４ Ａ１において教示され、システイン含有アミノ酸配列を、抗体の重鎖のＣ末端に付加する。この方法は、抗原結合部位から離れた既知の位置に、既知の数のシステイン残基（重鎖あたり１つ）を導入する。本段落に引用される文書の開示は全て、引用によって本明細書に援用される。
さらに別の実施態様において、リシンε−アミノ基は、２−イミノチオランまたはＮ−スクシンイミジル−３−（２−ピリジルジチオ）プロピオネート（ＳＰＤＰ）などの試薬によって修飾して、ε−アミノ基をチオールまたはジスルフィド基に変換することができ、言うなれば、システイン代替物を生成する。しかしながら、この方法は、適切なε−アミノ基に関する結合の位置および化学量論の同様の制限を伴う。
リンカー部位
前記の通り、本発明の結合体のリンカー部位は、最大で３つの要素を含む：切断可能な基Ｃ、および任意のスペーサーＸＺおよびＸＤ。
切断可能な基Ｃは、生理学的条件下で切断可能な基であり、好ましくは、当該結合体が、一般に、血漿中で循環している間は比較的安定であるが、結合体が目的の作用部位、すなわち、標的細胞の近く、標的細胞において、または標的細胞内に到達すると、容易に切断されるようなものから選択される。好ましくは、結合体は、標的細胞表面上に提示される抗原に、抗体Ｚが結合することで、標的細胞に内在化される。次いで、標的細胞の小胞体（初期エンドソーム、後期エンドソーム、または、特にリソソーム）において、基Ｃの切断が生じる。
ある実施態様において、基ＣはｐＨ感受性基である。血漿中のｐＨは、中性よりもわずかに高く、一方で、リソソーム内のｐＨは酸性で、およそ５である。このように、切断が酸によって触媒される基Ｃは、リソソーム内では、血漿中での速度よりも、数桁早い速度で切断される。適切な酸感受性基の例としては、シス−アコニチルアミドおよびヒドラゾンが挙げられ、Ｓｈｅｎ ｅｔ ａｌ．，ＵＳ４，６３１，１９０（１９８６）；Ｓｈｅｎ ｅｔ ａｌ．，ＵＳ５，１４４，０１１（１９９２）；Ｓｈｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１０２，１０４８−１０５４（１９８１）およびＹａｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ（ＵＳＡ），８５，１１８９−１１９３（１９８８）において記述され；これらの開示は引用によって本明細書に援用される。
別の実施態様において、基Ｃはジスルフィドである。ジスルフィドは、周囲のチオール濃度に依存する速度で、チオール−ジスルフィド交換機構によって切断することができる。グルタチオンおよび他のチオールの細胞内濃度は、血清中濃度よりも高いため、ジスルフィドの切断速度は細胞内でより高い。さらに、チオール−ジスルフィド交換の速度は、ジスルフィドの立体的および静電気的な特徴を調節（例えば、アルキル−アリールジスルフィド対アルキル−アルキルジスルフィド；アリール環の置換など）することによって調整することができ、血清安定性または特定の切断速度を向上させる、ジスルフィド結合の設計を可能にする。結合体中のジスルフィド切断可能な基に関する、さらなる開示としては、例えば、Ｔｈｏｒｐｅ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．４８，６３９６−６４０３（１９８８）；Ｓａｎｔｉ ｅｔ ａｌ．，ＵＳ７，５４１，５３０ Ｂ２（２００９）；Ｎｇ ｅｔ ａｌ．，ＵＳ６，９８９，４５２ Ｂ２（２００６）；Ｎｇ ｅｔ ａｌ．，ＷＯ２００２／０９６９１０ Ａ１；Ｂｏｙｄ ｅｔ ａｌ．，ＵＳ７，６９１，９６２ Ｂ２；およびＳｕｆｉ ｅｔ ａｌ．，ＵＳ２０１０／０１４５０３６ Ａ１を参照されたく；これらの開示は引用によって本明細書に援用される。
好ましい切断可能な基は、血清中でプロテアーゼによるものとは対照的に、標的細胞内でプロテアーゼによって選択的に切断されるペプチドである。一般に、切断可能なペプチド基は、１から２０個のアミノ酸、好ましくは、１から６個のアミノ酸、さらに好ましくは１から３個のアミノ酸を含む。アミノ酸は、中性および／または非中性のα−アミノ酸でありうる。天然アミノ酸は、遺伝情報によってコードされるもの、並びに、それに由来するアミノ酸、例えば、ヒドロキシプロリン、γ−カルボキシグルタメート、シトルリン、およびＯ−ホスホセリンである。これに関連して、用語「アミノ酸」はまた、アミノ酸類似体および模倣体を含む。類似体は、Ｒ基が天然アミノ酸に存在しない以外は、天然アミノ酸と同じＨ２Ｎ（Ｒ）ＣＨＣＯ２Ｈの一般的な構造を有する化合物である。類似体の例としては、ホモセリン、ノルロイシン、メチオニン−スルホキシド、およびメチオニンメチルスルホニウムが挙げられる。アミノ酸模倣体は、α−アミノ酸の一般的な化学構造とは異なる構造を有するが、それと同様の様式で機能する化合物である。アミノ酸は、遺伝的にコードされたアミノ酸の「Ｌ」立体化学、並びに、エナンチオマー性「Ｄ」立体化学でありうる。
好ましくは、群Ｃはプロテアーゼの切断認識配列であるアミノ酸配列を含む。多くの切断認識配列が、当技術分野において既知である。例えば、Ｍａｔａｙｏｓｈｉ ｅｔ ａｌ．Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４７：９５４（１９９０）；Ｄｕｎｎ ｅｔ ａｌ．Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ． ２４１：２５４（１９９４）；Ｓｅｉｄａｈ ｅｔ ａｌ．Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ． ２４４：１７５（１９９４）；Ｔｈｏｒｎｂｅｒｒｙ， Ｍｅｔｈ． Ｅｎｚｙｍｏｌ． ２４４：６１５（１９９４）；Ｗｅｂｅｒ ｅｔ ａｌ． Ｍｅｔｈ． Ｅｎｚｙｍｏｌ． ２４４：５９５（１９９４）；Ｓｍｉｔｈ ｅｔ ａｌ． Ｍｅｔｈ． Ｅｎｚｙｍｏｌ． ２４４：４１２（１９９４）；およびＢｏｕｖｉｅｒ ｅｔ ａｌ． Ｍｅｔｈ． Ｅｎｚｙｍｏｌ．２４８：６１４（１９９５）を参照されたく；これらの開示は引用によって本明細書に援用される。
細胞に内在化されることを意図していない結合体に関しては、群Ｃは、標的組織近傍の細胞外マトリクスに存在するプロテアーゼ、例えば、死細胞近傍から放出されるプロテアーゼ、または、腫瘍関連プロテアーゼによって切断されるものから選択することができる。細胞外腫瘍関連プロテアーゼの例としては、マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）、チメット（ｔｈｉｍｅｔ）オリゴペプチターゼ（ＴＯＰ）およびＣＤ１０が挙げられる。
細胞に内在化されるように設計されている結合体に関しては、群Ｃは好ましくは、エンドソームまたはリソソームプロテアーゼ、特に後者による切断のために選択されたアミノ酸配列を含む。そのようなプロテアーゼの限定されない例としては、カテプシンＢ、Ｃ、Ｄ、Ｈ、ＬおよびＳ、特にカテプシンＢが挙げられる。カテプシンＢは、配列−ＡＡ２−ＡＡ１−において、選択的にペプチドを切断し、ここで、ＡＡ１は塩基性または強い水素結合性のアミノ酸（リシン、アルギニン、またはシトルリンなど）であり、ＡＡ２は疎水性アミノ酸（フェニルアラニン、バリン、アラニン、ロイシン、またはイソロイシンなど）、例えば、Ｖａｌ−Ｃｉｔ（ここで、Ｃｉｔはシトルリンを表す）またはＶａｌ−Ｌｙｓである。（ここで、アミノ酸配列は、文脈で明らかに異なることが示されない限り、Ｈ２Ｎ−ＡＡ２−ＡＡ１−ＣＯ２Ｈのように、ＮからＣの方向で記述される。）いくつかの例において、切断速度が遅くなりうるが、Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ａｌａ、Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ａｌａ、Ｖａｌ−Ａｌａ、Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｃｉｔ、およびＡｓｐ−Ｖａｌ−Ｃｉｔもまた、カテプシンＢの基質のペプチドモチーフである。カテプシン−切断可能な基に関するさらなる情報としては、Ｄｕｂｏｗｃｈｉｋ ｅｔ ａｌ．， Ｂｉｏｒｇ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． Ｌｅｔｔ． ８，３３４１−３３４６（１９９８）；Ｄｕｂｏｗｃｈｉｋ ｅｔ ａｌ．， Ｂｉｏｏｒｇ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． Ｌｅｔｔ．， ８ ３３４７−３３５２（１９９８）；およびＤｕｂｏｗｃｈｉｋ ｅｔ ａｌ．， Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ． １３， ８５５−８６９（２００２）を参照されたく；これらの開示は引用によって本明細書に援用される。ペプチジルリンカーの切断に用いることのできる他の酵素は、Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｓｎにおいて選択的に切断するリソソームシステインプロテアーゼである、レグマインである。
ある実施態様において、群Ｃは２つのアミノ酸配列−ＡＡ２−ＡＡ１−から成るペプチドであり、ここで、ＡＡ１はリシン、アルギニン、またはシトルリンであり、ＡＡ２はフェニルアラニン、バリン、アラニン、ロイシンまたはイソロイシンである。別の実施態様において、ＣはＶａｌ−Ｃｉｔ、Ａｌａ−Ｖａｌ、Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｖａｌ、Ｌｙｓ−Ｌｙｓ、Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｖａｌ、Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ、Ｃｉｔ−Ｃｉｔ、Ｖａｌ−Ｌｙｓ、Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ｃｉｔ、Ｓｅｒ、およびＧｌｕから成る群から選択される、１から３個のアミノ酸の配列から成る。
単一のアミノ酸から成る切断可能基Ｃの製造および設計は、Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ．，ＵＳ８，６６４，４０７ Ｂ２ （２０１４）において開示され、この開示は引用によって本明細書に援用される。
群Ｃはまた、光開裂可能な基、例えば、光に曝露されることで切断されるニトロベンジルエーテルであってもよい。
群Ｃは、抗体Ｚまたは類似体Ｄに直接結合することができる；すなわち、スペーサーＸＺおよびＸＤは、場合によっては存在しなくてもよい。例えば、群Ｃがジスルフィドである場合、２つの硫黄のうち１つは抗体Ｚにおけるシステイン残基、またはその代理であってもよい。あるいは、群Ｃは、抗体の糖側鎖におけるアルデヒドに結合したヒドラゾンであってもよい。あるいは、群Ｃは、抗体Ｚのリシンε−アミノ基とで形成された、ペプチド結合であってもよい。好ましい実施態様において、二量体Ｄは、二量体Ｄのカルボキシルまたはアミン基とのペプチド結合を介して、群Ｃに直接結合している。
存在する場合、スペーサーＸＺは群Ｃおよび抗体Ｚの間を空間的に分離し、前者が後者による抗原結合を空間的に阻害しないように、または後者が前者の切断を空間的に阻害しないようにする。さらに、スペーサーＸＺは、溶解度を上昇させる、または結合体の凝集特性を減少させるために用いることができる。スペーサーＸＺは、任意の数の組み合わせで組み立てることのできる、１つ以上のモジュラーセグメントを含むことができる。スペーサーＸＺの適切なセグメントの例としては、

およびこれらの組み合わせが挙げられ、ここで、下付文字ｇは０または１であり、下付文字ｈは１から２４であり、好ましくは２から４である。これらのセグメントは、以下に例示すように、組み合わせることができる：
。
スペーサーＸＤは、存在する場合、群Ｃおよび二量体Ｄの間を空間的に分離し、後者が前者の切断を空間的または電気的に阻害しないようにする。スペーサーはＸＤまた、結合体中にさらに分子量および化学官能基を導入するのに役立つことができる。一般に、増加した分子量および官能基は、結合体の血清半減期および他の性質に影響する。したがって、スペーサー基の賢明な選択によって、結合体の血清半減期を調節することができる。スペーサーＸＤはまた、スペーサーＸＺの文脈において前記の通り、モジュラーセグメントから組み立てることができる。
スペーサーＸＺおよび／またはＸＤは、存在する場合、好ましくは、それぞれ、ＺおよびＣ、またはＤおよびＣの間で、４から２５個の原子、さらに好ましくは４から２０個の原子の直線上の分離を生じる。
リンカーは、抗体および薬物を共有結合させることに加えて、他の機能を発揮することができる。例えば、リンカーは、結合体化学の反応の間、または最終ＡＤＣ生成物のいずれかにおける、溶解度を上昇させる、ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）基を含むことができる。ＰＥＧ基が存在する場合、スペーサーＸＺもしくはＸＤ、または両方に組み込まれていてもよい。ＰＥＧ基における繰り返し単位の数は、２から２０、好ましくは４から１０の間でありうる。
スペーサーＸＺもしくはＸＤのいずれか、または両方は、自己犠牲基を含みうる。自己犠牲基は、場合によっては、（１）群Ｃおよび、抗体Ｚまたは二量体Ｄのいずれかに結合し、（２）群Ｃからの切断によって、反応の連鎖が開始され、自己犠牲基が抗体Ｚまたは二量体Ｄから脱離するような構造を有する基である。言い換えれば、（群Ｃから切断された）抗体Ｚまたは二量体Ｄから遠位の部位における反応が、ＸＺ−ＺまたはＸＤ−Ｄ結合の開裂をも引き起こす。結合体の切断の後、スペーサーＸＤまたはその一部が二量体Ｄに結合し続けている場合、後者の生物学的活性が損なわれる可能性があるため、自己犠牲基の存在は、スペーサーＸＤの場合において好ましい。自己犠牲基を用いることは、特に切断可能な群Ｃがポリペプチドである場合に好ましく、その場合、自己犠牲基は一般にそれに隣接して位置する。
パートナー分子Ｄにおけるヒドロキシルまたはアミノ基に結合した自己犠牲基（ｉ）−（ｖ）の例を、以下に示す：
自己犠牲基は、点線ａおよびｂの間の構造であり、その前後を提供するために、隣接する構造的特徴が示されている。自己犠牲基（ｉ）および（ｖ）は、二量体Ｄ−ＮＨ２に結合しており（すなわち、二量体Ｄはアミノ基を介して結合している）、一方で自己犠牲基（ｉｉ）、（ｉｉｉ）および（ｉｖ）は二量体Ｄ−ＯＨに結合している（すなわち、二量体Ｄはヒドロキシルまたはカルボキシル基を介して結合している）。点線ｂにおいてアミド結合を切断することによって（例えば、ペプチダーゼによって）、アミン窒素としてアミド窒素が放出され、場合によっては、点線ａにおける結合の切断、およびその結果としてＤ−ＯＨまたはＤ−ＮＨ２の放出を生じる反応連鎖が開始される。あるいは、自己犠牲反応を引き起こす切断は、異なる種類の酵素、例えば、構造（ｖｉ）の場合のように、β−グルクロニダーゼによって行われうる。自己犠牲基に関するさらなる開示としては、Ｃａｒｌ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．， ２４ （３）， ４７９−４８０ （１９８１）； Ｃａｒｌ ｅｔ ａｌ．， ＷＯ ８１／０１１４５ （１９８１）； Ｄｕｂｏｗｃｈｉｋ ｅｔ ａｌ．， Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ＆ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ， ８３， ６７−１２３ （１９９９）； Ｆｉｒｅｓｔｏｎｅ ｅｔ ａｌ．， ＵＳ ６，２１４，３４５ Ｂ１ （２００１）； Ｔｏｋｉ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ． ６７， １８６６−１８７２ （２００２）； Ｄｏｒｏｎｉｎａ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ２１ （７）， ７７８−７８４ （２００３） （ｅｒｒａｔｕｍ， ｐ．９４１）； Ｂｏｙｄ ｅｔ ａｌ．， ＵＳ ７，６９１，９６２ Ｂ２； Ｂｏｙｄ ｅｔ ａｌ．， ＵＳ ２００８／０２７９８６８ Ａ１； Ｓｕｆｉ ｅｔ ａｌ．， ＷＯ ２００８／０８３３１２ Ａ２； Ｆｅｎｇ， ＵＳ ７，３７５，０７８ Ｂ２； Ｊｅｆｆｒｅｙ ｅｔ ａｌ．， ＵＳ ８０３９，２７３；およびＳｅｎｔｅｒ ｅｔ ａｌ．， ＵＳ ２００３／００９６７４３ Ａ１を参照されたい；これらの開示は引用によって本明細書に援用される。好ましい自己犠牲基は、構造（ｉ）に示される、ｐ−アミノベンジルオキシカルボニル（ＰＡＢＣ）基である。
別の実施態様において、抗体標的部位および二量体Ｄは、切断不可能なリンカーによって結合されている、すなわち、要素Ｃは存在しない。抗体の分解は、最終的にリンカーを、二量体Ｄの生物学的活性を妨げない小さな付属部位に縮小する。
結合技術
本発明の結合体は、好ましくは、第一に、本発明の類似体（以下の式においてＤで表される）およびリンカー（ＸＤ）ａ（Ｃ）ｃ（ＸＺ）ｂ（ここで、ＸＤ、Ｃ、ＸＺ、ａ、ｂ、およびｃは、式（ＩＩ）で定義されるものである）を含む化合物を製造し、式（ＩＩＩ）：

［式中、
Ｒ３1は、抗体Ｚの相補的な官能基と反応して結合体を生成するのに適切な官能基である］
によって表される、類似体−リンカー組成物を生成することによって合成される。適切な基Ｒ３1の例としては、アミノ、アジド、シクロオクチン、

［式中、
Ｒ３２はＣｌ、Ｂｒ、Ｆ、メシレート、またはトシレートであり、Ｒ３３はＣｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｆ、ＯＨ、−Ｏ−Ｎ−スクシンイミジル、−Ｏ−（４−ニトロフェニル）、−Ｏ−ペンタフルオロフェニル、または−Ｏ−テトラフルオロフェニルである］
が挙げられる。適切な基Ｄ−（ＸＤ）ａＣ（ＸＺ）ｂ−Ｒ３１を合成するために一般的に用いることのできる化学は、Ｎｇ ｅｔ ａｌ．， ＵＳ ７，０８７，６００ Ｂ２ （２００６）； Ｎｇ ｅｔ ａｌ．， ＵＳ ６，９８９，４５２ Ｂ２ （２００６）； Ｎｇ ｅｔ ａｌ．， ＵＳ ７，１２９，２６１ Ｂ２ （２００６）； Ｎｇ ｅｔ ａｌ．， ＷＯ ０２／０９６９１０ Ａ１； Ｂｏｙｄ ｅｔ ａｌ．， ＵＳ ７，６９１，９６２ Ｂ２； Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ．， ＵＳ ７，５１７，９０３ Ｂ２ （２００９）； Ｇａｎｇｗａｒ ｅｔ ａｌ．， ＵＳ ７，７１４，０１６ Ｂ２ （２０１０）； Ｂｏｙｄ ｅｔ ａｌ．， ＵＳ ２００８／０２７９８６８ Ａ１； Ｇａｎｇｗａｒ ｅｔ ａｌ．， ＵＳ ７，８４７，１０５ Ｂ２ （２０１０）； Ｇａｎｇｗａｒ ｅｔ ａｌ．， ＵＳ ７，９６８，５８６ Ｂ２ （２０１１）； Ｓｕｆｉ ｅｔ ａｌ．， ＵＳ ２０１０／０１４５０３６ Ａ１；およびＣｈｅｎ ｅｔ ａｌ．， ＵＳ ２０１０／０１１３４７６ Ａ１において開示され；これらの開示は引用によって本明細書に援用される。
好ましい反応性官能基−Ｒ３１は、−ＮＨ２、−ＯＨ、−ＣＯ２Ｈ、−ＳＨ、マレイミド、シクロオクチン、アジド（−Ｎ３）、ヒドロキシルアミノ（−ＯＮＨ２）またはＮ−ヒドロキシスクシンイミドである。特に好ましい官能基−Ｒ３1は、

である。
−ＯＨ基は、抗体の、例えば、アスパラギンまたはグルタミン酸の側鎖におけるカルボキシ基によってエステル化することができる。
−ＣＯ２Ｈ基は、−ＯＨ基によってエステル化するか、あるいは、抗体の（例えば、リシンの側鎖における）アミノ基でアミド化することができる。
Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド基は、機能的に活性なカルボキシ基であり、（例えばリシンからの）アミノ基と反応することによって簡便にアミド化することができる。
マイケル付加反応において、マレイミド基を抗体の−ＳＨ基（例えば、抗体のシステインまたはスルフヒドリル官能基を導入するための化学修飾から）と結合させることができる。
様々な技術によって、−ＳＨ基を抗体に導入することができる。好ましいものとして、抗体の側鎖のリシン残基におけるε−アミノ基を、２−イミノチオランと反応させて、遊離のチオール（−ＳＨ）基を導入する。チオール基は、マレイミドまたは他の求核受容性基と反応して、結合体を生じることができる：
一般に、抗体に対して２から３個のチオールのチオール化量が達成される。代表的な方法としては、Ｃｏｎｇ ｅｔ ａｌ．２０１４を参照されたく、この開示は引用によって本明細書に援用される。このように、ある実施態様において、本発明の二量体と結合するための抗体は、イミノチオランとの反応によって修飾される１つ以上（好ましくは２または３個）のリシン残基を有する。
抗体がマレイミド基を導入するように改変されている場合は、上記の「鏡像」であるマイケル付加反応において、−ＳＨ基を結合に用いることもできる。抗体は、Ｎ−スクシンイミジル ４−（マレイミドメチル）−シクロヘキサンカルボキシレート（ＳＭＣＣ）またはそのスルホン化バリアントであるスルホ−ＳＭＣＣによって、マレイミド基を持つように改変することができ、いずれの試薬もＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈから購入することができる。
別の結合技術は、シクロオクチンの歪んだアルキン結合にアジド基が付加されて、１，２，３−トリアゾール環を形成する、銅フリーの「クリックケミストリー」を用いる。例えば、Ａｇａｒｄ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ａｍｅｒ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． ２００４， １２６， １５０４６； Ｂｅｓｔ， Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２００９， ４８， ６５７１を参照されたく、これらの開示は引用によって本明細書に援用される。アジドは抗体上に、シクロオクチンは薬物部位上に位置することができ、またはその逆であってもよい。好ましいシクロオクチン基は、ジベンゾシクロオクチン（ＤＩＢＯ）である。ＤＩＢＯ基を有する様々な試薬は、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ／Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｅｕｇｅｎｅ，Ｏｒｅｇｏｎから購入することができる。以下の反応は、ＤＩＢＯ基が抗体（Ａｂ）に結合している場合のクリックケミストリー結合を示す：
さらに別の結合技術は、非天然アミノ酸を抗体に導入することを含み、非天然アミノ酸が薬物部位における反応性官能基との結合のための官能性を提供する。例えば、Ｔｉａｎ ｅｔ ａｌ．，ＷＯ ２００８／０３０６１２ Ａ２ （２００８）において教示されているように、非天然アミノ酸、ｐ−アセチルフェニルアラニンは、抗体または他のポリペプチドに導入することができる。ｐ−アセチルフェニルアラニンにおけるケトン基は、リンカー−薬物部位におけるヒドロキシルアミノ基と共に、オキシム形成を介した結合部位でありうる。あるいは、非天然アミノ酸、ｐ−アジドフェニルアラニンは、抗体に導入されて、前記のように、クリックケミストリーを介した結合のためのアジド官能基を提供することができる。非天然アミノ酸はまた、Ｇｏｅｒｋｅ ｅｔ ａｌ．， ＵＳ ２０１０／００９３０２４ Ａ１ （２０１０）、およびＧｏｅｒｋｅ ｅｔ ａｌ．， Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ． Ｂｉｏｅｎｇ． ２００９， １０２ （２）， ４００−４１６において教示されるように、無細胞法を用いて、抗体または他のポリペプチドに導入することができる。前記の開示は引用によって本明細書に援用される。このように、ある実施態様において、本発明の二量体との結合体の製造に用いるための抗体は、非天然アミノ酸で置換される１つ以上のアミノ酸を含み、好ましくは、ｐ−アセチルフェニルアラニンまたはｐ−アジドフェニルアラニン、さらに好ましくはｐ−アセチルフェニルアラニンである。
さらに別の結合技術は、Ｊｅｇｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ａｎｇｅｗ． Ｃｈｅｍ． Ｉｎｔ． Ｅｄ． ２０１０， ４９， ９９９５によって、酵素トランスグルタミナーゼ（好ましくは、細菌トランスグルタミナーゼまたはＢＴＧ）を用いる。ＢＴＧはグルタミンの側鎖のカルボキサミド（アミン受容体）と、例えば、リシンのε−アミノ基または５−アミノ−ｎ−ペンチル基でありうる、アルキレンアミノ基（アミン供与体）との間にアミド結合を形成する。典型的な結合反応において、以下に示すように、グルタミン残基は抗体に位置し、一方でアルキレンアミノ基は、リンカー−薬物部位に位置する：
ポリペプチド鎖のグルタミン残基の位置決定は、ＢＴＧ介在トランスアミド化に対する感受性に大きく影響する。抗体のグルタミン残基のいずれも、通常はＢＴＧの基質ではない。しかしながら、抗体が脱グリコシル化されている場合、グリコシル化部位はアスパラギン２９７（Ｎ２９７）であるが、近隣のグルタミン２９５（Ｑ２９５）は、ＢＴＧ感受性である。抗体はＰＮＧａｓｅ Ｆ（ペプチド−Ｎ−グリコシダーゼＦ）で処理することによって酵素的に脱グリコシル化することができる。あるいは、定常領域においてＮ２９７Ａ変異を導入し、Ｎ２９７グリコシル化部位を除去することによって、グリコシドを含まない抗体を合成することができる。さらに、抗体中のＮ２９７Ｑ置換は、グリコシル化を排除するだけでなく、アミン受容体でもある第二のグルタミン残基（２９７位）もまた導入することが示されている。このように、ある実施態様において、本発明の二量体と結合する抗体は脱グリコシル化されている。別の実施態様において、抗体はＮ２９７Ｑ置換を有する。翻訳後修飾による、またはＮ２９７Ａ変異を導入することによる脱グリコシル化は、抗体ごとに２つのＢＴＧ−反応性グルタミン残基（重鎖ごとに１つ、２９５位）を生じ、一方で、Ｎ２９７Ｑ置換を有する抗体は４つのＢＴＧ−反応性グルタミン残基（重鎖ごとに２つ、２９５および２９７位）を有することが当事者に理解される。
Ｌｅｖａｒｙ ｅｔ ａｌ．， ＰＬｏＳ Ｏｎｅ ２０１１， ６（４）， ｅ１８３４２； Ｐｒｏｆｔ， Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ． Ｌｅｔｔ． ２０１０， ３２， １−１０； Ｐｌｏｅｇｈ ｅｔ ａｌ．， ＷＯ ２０１０／０８７９９４ Ａ２ （２０１０）；およびＭａｏ ｅｔ ａｌ．， ＷＯ ２００５／０５１９７６ Ａ２ （２００５）において教示されるように、結合はまた、酵素ソルテースＡを用いて達成することができる。ソルテースＡ認識モチーフ（一般にＬＰＸＴＧであり、ここで、Ｘはいずれかの天然アミノ酸）は、リガンドＺに位置していてもよく、求核性受容体モチーフ（一般にＧＧＧ）は式（ＩＩＩ）における基Ｒ３1に位置していてもよく、またはその逆であってもよい。
抗体はまた、Ｚｈｕ ｅｔ ａｌ．， ｍＡｂｓ ２０１４， ６， １において教示されるように、グリコシル基を修飾して、オキシム形成による結合部位として機能するケト基を導入することによって、結合に用いることもできる。別の糖鎖工学のバリエーションにおいて、抗体のグリコシル基は、「クリックケミストリー」による結合のためのアジド基を導入するために用いることができる。Ｈｕａｎｇ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ａｍ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． ２０１２， １３４， １２３０８、およびＷａｎｇ， ＵＳ ８，９００，８２６ Ｂ２ （２０１４）および ＵＳ ７，８０７，４０５ Ｂ２ （２０１０）を参照されたい。
さらに別の結合技術は、一般に、ジスルフィド架橋と呼ぶことができる：抗体のジスルフィド結合が切断され、チオール（−ＳＨ）基の対を形成する。抗体は、次いで、２つのチオール反応性部位を含む、薬物−リンカー化合物によって処理される。チオール基と２つの部位との反応は、元のジスルフィド架橋を、一応は、再構築して抗体の３次構造を維持して再架橋し、薬物−リンカー部位の結合を達成する。例えば、Ｂｕｒｔ ｅｔ ａｌ．， ＷＯ ２０１３／１９０２９２ Ａ２ （２０１３）およびＪａｃｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ．， ＵＳ ２０１３／０２２４２２８ Ａ１ （２０１３）を参照されたい。
二量体−リンカー化合物
一般に、本発明の二量体のＡＤＣは、二量体の官能基に結合したリンカーを含み、リンカーは当該抗体に結合している。利用可能な結合技術の多様性を反映して、本発明の二量体は、抗体への結合に適した、多くの異なる二量体−リンカー化合物に変化させることができる。
一般に、以下の図（簡略化のために示されていないいくつかの変数を有する、式Ｉの簡略化されたバージョンである）において説明されるように、リンカーを本発明の二量体へ結合させるための、異なる３つの様式が存在する：
（ａ）および（ａ’）の種類の二量体−リンカー化合物において、リンカーの結合のための官能基は、２つの二量体の半分の間の架橋ＸまたはＹに存在する。（ｂ）の種類の二量体−リンカー化合物において、リンカーは付加生成物として、イミン二重結合を介して結合する。（ｃ）の種類の二量体−リンカー化合物において、リンカーの結合のための官能基は、ＡまたはＢのいずれかに位置する。
好ましい二量体−リンカー化合物は、式ＩＩＩ：

［式中、
Ｒ６０は式ＩＩＩａ、ＩＩＩａ’、またはＩＩＩａ’’：

に記載のものであり；
Ｙは（ＣＨ２）６−１０（好ましくは（ＣＨ２）８）であり；
ｘは３または５（好ましくは３）であり；
ｙはそれぞれ独立して、２、３、または４（好ましくはいずれも４）であり；
ＡおよびＢは独立して式ＩａまたはＩｂ：

［式Ｉａ中、
Ｙ’およびＹ’’は独立して、存在しない、ＣＨ２、Ｃ＝Ｏ、またはＣＨＲ１２であり；ここで、Ｒ１２はそれぞれ独立して、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＣ１−Ｃ３アルキルであり、但し、Ｙ’およびＹ’’はいずれも存在しないことはなく；
Ｇはそれぞれ独立してＣまたはＮであり、但し、２つ未満のＧがＮであり；
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８はそれぞれ独立して、Ｈ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ１−３アルキル、ＮＯ２、ＣＮ、ＮＨ２、Ｏ（Ｃ１−３アルキル）、または（ＯＣＨ２ＣＨ２）１−２Ｏ（Ｃ１−３アルキル）（好ましくはＨ）であるか；
あるいは、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、またはＲ８が、ＮであるＧに接している、すなわち結合している場合、そのようなＲ５、Ｒ６、Ｒ７、またはＲ８は存在しない］
［式Ｉｂ中、
点線はＣ１−Ｃ２、Ｃ２−Ｃ３、またはＣ２−Ｒ１０二重結合の任意の存在を示し；
Ｃ１−Ｃ２、Ｃ２−Ｃ３、またはＣ２−Ｒ１０二重結合が存在する場合、Ｒ９は存在せず、そうでない場合、Ｈであり；
Ｒ１０はＨ、Ｃｌ、Ｂｒ、＝ＣＨ２、＝ＣＨ（Ｃ１−５アルキル）、Ｃ１−３アルキル、ＮＯ２、ＣＮ、またはＮＨ２（好ましくはＨ）である］
に記載のものであり；
Ａ’は

であり；
Ｒ５０はＨ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ１−３アルキル、ＮＯ２、ＣＮ、ＮＨ２、Ｏ（Ｃ１−３アルキル）、または（ＯＣＨ２ＣＨ２）１−２Ｏ（Ｃ１−３アルキル）（好ましくはＨ）であり；
Ｒ５１はＨ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ１−３アルキル、ＮＯ２、ＣＮ、またはＮＨ２（好ましくはＨ）であり；
Ｔは自己犠牲基であり；
ｔは０または１であり；
ＡＡａおよびそれぞれのＡＡｂは独立して、アラニン、β−アラニン、γ−アミノ酪酸、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、γ−カルボキシグルタミン酸、シトルリン、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、ノルロイシン、ノルバリン、オルニチン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、チロシン、およびバリンから成る群から選択され；
ｐは１、２、３、または４であり；
ｑは１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０（好ましくは２、３、４、または８）であり；
ｒは１、２、３、４、または５（好ましくは２、３、４、または５）であり；
ｓは０または１であり；
Ｒ３1は

である］
に記載の構造を有する。
式ＩＩＩに記載の好ましい二量体−リンカー化合物において、Ｒ６０は、以下の構造：

の二量体−リンカーに対応する、ＩＩＩａである。
別の好ましい、式ＩＩＩに記載の二量体−リンカー化合物において、Ｒ６０は、以下の構造：

の二量体−リンカー化合物に対応する、ＩＩＩａ’である。
さらに別の好ましい、式ＩＩＩに記載の二量体−リンカー化合物において、Ｒ６０は、以下の構造：

の二量体−リンカーに対応する、ＩＩＩａ’’である。
式ＩＩＩにおけるＲ３1は、前記のように、抗体の相補的な官能基と反応して結合を生じさせることのできる反応性官能基である。
式ＩＩＩにおいて、−ＡＡａ−［ＡＡｂ］ｐ−は、長さがｐの値によって決定されるポリペプチド（ｐが１である場合、ジペプチド、ｐが３である場合、テトラペプチドなど）を表す。ＡＡａはポリペプチドのカルボキシ末端にあり、そのカルボキシル基は二量体のアミン窒素とペプチド（アミド）結合を形成する。逆に、最後のＡＡｂはポリペプチドのアミノ末端にあり、そのα−アミノ基は、ｓが１または０であるかによって、それぞれ

とペプチド結合を形成する。好ましいポリペプチド−ＡＡａ−［ＡＡｂ］ｐ−は、Ｖａｌ−Ｃｉｔ、Ｖａｌ−Ｌｙｓ、Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ａｌａ、Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ａｌａ、Ｖａｌ−Ａｌａ、Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｃｉｔ、Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｃｉｔ、Ｖａｌ−Ｇｌｙ、Ｖａｌ−Ｇｌｎ、およびＡｓｐ−Ｖａｌ−Ｃｉｔであり、Ｈ２Ｎ−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−ＣＯ２Ｈのように、通常のＮからＣの方向で記載されている。さらに好ましくは、ポリペプチドはＶａｌ−Ｃｉｔ、Ｖａｌ−Ｌｙｓ、またはＶａｌ−Ａｌａである。好ましくは、ポリペプチド−ＡＡａ−［ＡＡｂ］ｐ−は、標的（癌）細胞内部に存在する酵素、例えば、カテプシン、および特にカテプシンＢによって切断可能である。
下付文字ｔが０または１に等しいと示されるように、自己犠牲基Ｔは、場合によって、式ＩＩＩの二量体−リンカー化合物中に存在していてもよい。存在する場合、自己犠牲基Ｔは、好ましくは、ｐ−アミノベンジルオキシカルボニル（ＰＡＢＣ）基であり、その構造は以下：

に示され、アスタリスク（＊）は二量体のアミン窒素に結合したＰＡＢＣの末端を示し、波線

はポリペプチド−ＡＡａ−［ＡＡｂ］ｐ−に結合した末端を示す。
好ましい二量体リンカー化合物は、式ＩＩＩａ−１、ＩＩＩａ−２、ＩＩＩａ−３、ＩＩＩａ−４、ＩＩＩａ−５、ＩＩＩａ−６、およびＩＩＩａ−７：


によって表される構造を有する群から選択される。
結合体の製造
この一般的な方法は、リシンのε−アミノ基を２−イミノチオランと反応させて、次いで、前記のような、マレイミド含有薬物−リンカー部位と反応させることによって、遊離のチオール基を抗体に導入することに基づく。最初に、抗体を、５０ｍＭ ＮａＣｌおよび２ｍＭ ジエチレントリアミンペンタ酢酸（ＤＴＰＡ）を含む、０．１Ｍ ホスフェート緩衝液（ｐＨ８．０）中で緩衝液交換し、５−１０ｍｇ／ｍＬに濃縮する。チオール化は抗体に２−イミノチオランを加えることによって達成する。加える２−イミノチオランの量は、予備実験によって決定することができ、抗体によって変化する。予備実験において、２−イミノチオランを徐々に増やして滴定して抗体に加え、次いで、抗体と共に１時間、ＲＴ（室温、約２５℃）でインキュベートし、抗体をＳＥＰＨＡＤＥＸ（登録商標）Ｇ−２５カラムを用いて、５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、５ｍＭ グリシン、２ｍＭ ＤＴＰＡ、ｐＨ５．５中に脱塩し、導入されたチオール基の数を速やかに、ジチオジピリジン（ＤＴＤＰ）との反応によって決定する。チオール基のＤＴＤＰとの反応によって、チオピリジンが遊離し、これを分光学的に３２４ｎｍにおいて追跡することができる。０．５−１．０ｍｇ／ｍＬのタンパク質濃度のサンプルを一般的に用いる。２８０ｎｍにおける吸光度を用いて、サンプル中のタンパク質濃度を正確に決定することができ、次いで、それぞれのサンプルの分割量（０．９ｍＬ）を、０．１ｍＬ ＤＴＤＰ（エタノール中の５ｍＬストック溶液）と共に、１０分間室温でインキュベートする。緩衝液のみおよびＤＴＤＰのブランクサンプルもまた、並行してインキュベートする。１０分後、３２４ｎｍにおける吸光度を測定し、チオール基の数を、チオピリジンの１９，８００Ｍ−１の吸光計数を用いて定量する。
一般に、抗体につき約２から３個のチオール基のチオール化量が望ましい。例えば、いくつかの抗体では、これは２−イミノチオランの１５倍過剰モルを加えて、次いで、室温で１時間インキュベートすることによって達成することができる。抗体を次いで、望ましいモル比において２−イミノチオランと共にインキュベートし、次いで、結合緩衝液（５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、５ｍＭ グリシン、２ｍＭ ＤＴＰＡ、ｐＨ５．５）中で脱塩した。導入されたチオールの数を前記のように定量しながら、チオール化された物質を氷上に維持する。
導入されたチオールの数を確認した後、薬物（二量体）−リンカー部位を、チオールに対して２．５倍過剰モルで加えた。結合反応は、最終濃度で２５％プロピレングリコールおよび５％トレハロースを含む結合緩衝液中で進行させる。通常、薬物−リンカーストック溶液は、１００％ＤＭＳＯ中に溶解する。ストック溶液をチオール化抗体に直接添加する。
結合反応混合物を、穏やかに攪拌しながら室温で２時間インキュベートする。１０倍過剰モルのＮ−エチルマレイミド（ＤＭＳＯ中の１００ｍＭストック）を、次いで、結合体混合物に加え、さらに１時間攪拌して、未反応のチオールをブロックする。
サンプルを次いで、０．２μのフィルターを介して濾過する。当該物質を、ＴＦＦ ＶｉｖａＦｌｏｗ ５０ Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ ３０ ＭＷＣＯ ＰＥＳ膜を介して、１０ｍ／ｍＬ グリシン、２０ｍｇ／ｍＬ ソルビトール、１５％アセトニトリル（ＭｅＣＮ） ｐＨ５．０（５×ＴＦＦ緩衝液交換体積）に緩衝液交換し、未反応の薬物を除去する。最終的な製剤化は、ＴＦＦによって、２０ｍｇ／ｍＬ ソルビトール、１０ｍｇ／ｍＬ グリシン、ｐＨ５．０中で実施する。
前記の条件および方法は例であり、限定されず、結合のための他の方法が当技術分野において既知であり、本発明において用いることができることが当業者には理解される。
本発明の好ましい結合体は、式ＩＶ：

［式中、
Ａｂは抗体であり；
ｍは１、２、３、または４であり；
Ｒ４０は

［式中、
Ａｂに結合するＲ４０のオープンな結合価はアスタリスク（＊）によって表され、（ＣＨ２）ｒに結合するＲ４０のオープンな結合価は波線

によって表される］
であり；
Ｒ６０は式ＩＩＩａ、ＩＩＩａ’、またはＩＩＩａ’’：

に記載のものであり；
Ｙは（ＣＨ２）６−１０（好ましくは（ＣＨ２）８）であり；
ｘは３または５（好ましくは３）であり；
ｙはそれぞれ独立して、２、３、または４（好ましくはいずれも４）であり；
ＡおよびＢは独立して、式ＩａまたはＩｂ：

［式Ｉａ中、
Ｙ’およびＹ’’は独立して、存在しない、ＣＨ２、Ｃ＝Ｏ、またはＣＨＲ１２であり；ここで、Ｒ１２はそれぞれ独立して、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＣ１−Ｃ３アルキルであり、但し、Ｙ’およびＹ’’はいずれも存在しないことはなく；
Ｇはそれぞれ独立して、ＣまたはＮであり、但し、２つ未満のＧがＮであり；
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８はそれぞれ独立して、Ｈ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ１−３アルキル、ＮＯ２、ＣＮ、ＮＨ２、Ｏ（Ｃ１−３アルキル）、または（ＯＣＨ２ＣＨ２）１−２Ｏ（Ｃ１−３アルキル）（好ましくはＨ）であるか；
あるいは、
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、またはＲ８がＮであるＧに接している、すなわち結合している場合、そのようなＲ５、Ｒ６、Ｒ７、またはＲ８は存在しない］
［式Ｉｂ中、
点線はＣ１−Ｃ２、Ｃ２−Ｃ３、またはＣ２−Ｒ１０二重結合の任意の存在を示し；
Ｃ１−Ｃ２、Ｃ２−Ｃ３、またはＣ２−Ｒ１０二重結合が存在する場合、Ｒ９は存在せず、そうでない場合、Ｈであり；
Ｒ１０はＨ、Ｃｌ、Ｂｒ、＝ＣＨ２、＝ＣＨ（Ｃ１−５アルキル）、Ｃ１−３アルキル、ＮＯ２、ＣＮ、またはＮＨ２（好ましくはＨ）である］
であり；
Ａ’は

であり；
Ｒ５０はＨ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ１−３アルキル、ＮＯ２、ＣＮ、ＮＨ２、Ｏ（Ｃ１−３アルキル）、または（ＯＣＨ２ＣＨ２）１−２Ｏ（Ｃ１−３アルキル）（好ましくはＨ）であり；
Ｒ５１はＨ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ１−３アルキル、ＮＯ２、ＣＮ、ＮＨ２（好ましくはＨ）であり；
Ｔは自己犠牲基であり；
ｔは０または１であり；
ＡＡａおよびそれぞれのＡＡｂは、独立して、アラニン、β−アラニン、γ−アミノ酪酸、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、γ−カルボキシグルタミン酸、シトルリン、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、ノルロイシン、ノルバリン、オルニチン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、チロシン、およびバリンから成る群から選択され；
ｐは１、２、３、または４であり；
ｑは１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０（好ましくは２、３、４、または８）であり；
ｒは１、２、３、４、または５（好ましくは２、３、４、または５）であり；
ｓは０または１である］
によって示される構造を有する。
式ＩＶに記載の好ましい結合体において、Ｒ６０は、式ＩＶａ：

によって表される構造を有する結合体に対応する、ＩＩＩａである。
別の好ましい、式ＩＶに記載の結合体において、Ｒ６０は、式ＩＶａ’：

によって表される構造を有する結合体に対応する、ＩＩＩａ’である。
別の好ましい、式ＩＶに記載の結合体において、Ｒ６０は、式ＩＶａ’’：

によって表される構造を有する結合体に対応する、ＩＩＩａ’’である。
医薬組成物
別の局面において、本開示は、薬学的に許容可能な担体または賦形剤と共に製剤化された、本発明の化合物、またはその結合体を含む医薬組成物を提示する。それは、適宜、抗体または他の薬物などの、１つ以上のさらなる薬学的に活性な成分を含みうる。医薬組成物は、他の治療剤、特に他の抗癌剤との併用療法において投与することができる。
医薬組成物は１つ以上の賦形剤を含みうる。用いられうる賦形剤としては、担体、界面活性剤、増粘または乳化剤、固体結合剤、分散または懸濁補助剤、可溶化剤、着色剤、風味剤、コーティング剤、崩壊剤、滑沢剤、甘味剤、防腐剤、等張剤、およびそれらの組み合わせが挙げられる。適切な賦形剤の選択および使用は、Ｇｅｎｎａｒｏ， ｅｄ．， Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ： Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ， ２０ｔｈ Ｅｄ．（Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ ２００３）において教示され、この開示は引用によって本明細書に援用される。
好ましくは、医薬組成物は、静脈内、筋肉内、皮下、非経口、脊髄または上皮投与（例えば、注射または注入による）に適切である。投与経路によっては、活性化合物は、それを不活性化しうる酸および他の自然条件の作用から保護するために、材料中でコーティングされうる。語句「非経口投与」は、経腸および局所投与以外の、通常は注射による投与様式を意味し、これらに限定はされないが、静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、関節内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、被膜下、くも膜下、髄腔内、硬膜外および胸骨内注射並びに注入が挙げられる。あるいは、医薬組成物は、例えば、鼻腔内、経口、膣、直腸、舌下、または局所投与などの、局所、上皮または粘膜性投与経路などの経口経路を介して投与することができる。
医薬組成物は、無菌水溶液または分散液の形態でありうる。それらはまた、マイクロエマルジョン、リポソーム、または薬物の高濃度を達成するのに適切な他の規則構造でありうる。組成物はまた、投与前に水中で再構成するための、凍結乾燥物の形態で提供されることもできる。
単一剤形を製造するために担体物質と組み合わせることのできる活性成分の分量は、治療される対象および特定の投与様式によって変化し、一般に、治療効果を生じる組成物の分量である。一般に、１００分率で、この分量は、薬学的に許容可能な担体との組み合わせにおいて、約０．０１パーセントから約９９パーセントの活性成分、好ましくは約０．１パーセントから約７０パーセント、最も好ましくは約１パーセントから約３０パーセントの活性成分の範囲である。
投与レジメンは、治療応答を生じるように調整する。例えば、単一のボーラスを投与してもよく、いくつかの分割用量を長期間投与してもよく、あるいは状況の緊急性によって示されるように、用量を比例的に減少または増加させてもよい。投与の容易さおよび用量の均一性のために、単位投与剤形で非経口組成物を処方することが特に有利である。「単位投与剤形」は、治療される対象の単位用量として適切な、物理的に別個の単位をいい；それぞれの単位は、必要な薬学的担体との組み合わせで、目的の治療応答を生じるように計算された、所定の量の活性化合物を含む。
用量は、宿主体重の約０．０００１から１００ｍｇ／ｋｇ、およびより通常は０．０１から５ｍｇ／ｋｇの範囲である。例えば、用量は、０．３ｍｇ／ｋｇ体重、１ｍｇ／ｋｇ体重、３ｍｇ／ｋｇ体重、５ｍｇ／ｋｇ体重もしくは１０ｍｇ／ｋｇ体重、または１−１０ｍｇ／ｋｇ、もしくはその他に、０．１から５ｍｇ／ｋｇの範囲内でありうる。例示的な治療レジメンは、週に１回、各２週に１回、各３週に１回、各４週に１回、月に１回、各３ヶ月に１回、または各３から６ヶ月に１回の投与である。好ましい投与レジメンとしては、以下の投与スケジュールのいずれか１つを用いた静脈内投与による、１ｍｇ／ｋｇ体重または３ｍｇ／ｋｇ体重が挙げられる：（ｉ）各４週に６回の投与、次いで、各３ヶ月；（ｉｉ）各３週間；（ｉｉｉ）３ｍｇ／ｋｇ体重で１回、次いで、各３週間、１ｍｇ／ｋｇ体重。いくつかの方法において、用量は、約１−１０００μｇ／ｍＬ、いくつかの方法においては約２５−３００μｇ／ｍＬの血漿抗体濃度を達成するように調整する。
本発明の化合物の「治療上の有効量」は、好ましくは、疾患症状の重症度の低下、疾患状態のない期間の頻度および持続期間の増加、または疾患の苦痛による機能障害もしくは無力感の予防をもたらす。例えば、腫瘍を有する対象の治療のための「治療上の有効量」は、好ましくは、腫瘍の増殖を、未治療の対象に対して、少なくとも約２０％、より好ましくは少なくとも約４０％、さらにより好ましくは少なくとも約６０％、さらにより好ましくは少なくとも約８０％抑制する。治療上の有効量の治療化合物は、対象において、腫瘍の大きさを減少させるか、そうでなければ症状を改善することができ、対象は一般にヒトであるが、他の哺乳動物であってもよい。
医薬組成物は、植込錠、経皮パッチ、およびマイクロカプセル化送達システムなどの放出制御製剤または徐放性製剤であってもよい。エチレン酢酸ビニル、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、およびポリ乳酸などの、生分解性、生体適合性ポリマーを用いることができる。例えば、Ｓｕｓｔａｉｎｅｄ ａｎｄ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ， Ｊ．Ｒ． Ｒｏｂｉｎｓｏｎ， ｅｄ．， Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ， Ｉｎｃ．， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９７８を参照されたい。
治療組成物は、（１）無針皮下注入デバイス（例えば、ＵＳ５，３９９，１６３；５，３８３，８５１；５，３１２，３３５；５，０６４，４１３；４，９４１，８８０；４，７９０，８２４；および４，５９６，５５６）；（２）マイクロ注入ポンプ（ＵＳ４，４８７，６０３）；（３）経皮デバイス（ＵＳ４，４８６，１９４）；（４）注入装置（ＵＳ４，４４７，２３３および４，４４７，２２４）；および（５）浸透圧デバイス（ＵＳ４，４３９，１９６および４，４７５，１９６）などの医療デバイスによって投与することができ；これらの開示は引用によって本明細書に援用される。
いくつかの実施態様において、医薬組成物はインビボでの適切な分布を確保するように製剤化することができる。例えば、本発明の治療化合物が血液脳関門を通過することを確実にするために、特定の細胞または臓器への選択的な輸送を増強するための標的部位をさらに含みうる、リポソーム中に製剤化することができる。例えば、ＵＳ ４，５２２，８１１； ５，３７４，５４８； ５，４１６，０１６；および５，３９９，３３１；Ｖ．Ｖ． Ｒａｎａｄｅ （１９８９） Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． ２９：６８５； Ｕｍｅｚａｗａ ｅｔ ａｌ．， （１９８８） Ｂｉｏｃｈｅｍ． Ｂｉｏｐｈｙｓ． Ｒｅｓ． Ｃｏｍｍｕｎ． １５３：１０３８； Ｂｌｏｅｍａｎ ｅｔ ａｌ． （１９９５） ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ． ３５７：１４０； Ｍ． Ｏｗａｉｓ ｅｔ ａｌ． （１９９５） Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ． ３９：１８０； Ｂｒｉｓｃｏｅ ｅｔ ａｌ． （１９９５） Ａｍ． Ｊ． Ｐｈｙｓｉｏｌ． １２３３：１３４； Ｓｃｈｒｅｉｅｒ ｅｔ ａｌ． （１９９４） Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． ２６９：９０９０； Ｋｅｉｎａｎｅｎ ａｎｄ Ｌａｕｋｋａｎｅｎ （１９９４） ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ． ３４６：１２３；およびＫｉｌｌｉｏｎ ａｎｄ Ｆｉｄｌｅｒ （１９９４） Ｉｍｍｕｎｏｍｅｔｈｏｄｓ ４：２７３を参照されたい。
使用
本発明の化合物またはその結合体は、これらに限定はされないが、以下の過剰増殖性疾患などの疾患を治療するために用いることができる：頭、首、鼻腔、副鼻腔、上咽頭、口腔、中咽頭、喉頭、下咽頭、唾液腺、および傍神経節腫の腫瘍などの頭頸部癌；肝臓および胆管の癌、特に肝細胞癌；腸癌、特に大腸癌；卵巣癌；小細胞および非小細胞性肺癌（ＳＣＬＣおよびＮＳＣＬＣ）；線維肉腫、悪性線維性組織球腫、胎児性横紋筋肉腫、平滑筋肉腫、神経線維肉腫、骨肉腫、滑膜肉腫、脂肪肉腫、および胞巣状軟部肉腫などの乳癌肉腫；急性前骨髄球性白血病（ＡＰＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、および慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）などの白血病；中枢神経形の新生物、特に脳癌；多発性骨髄腫（ＭＭ）、ホジキンリンパ腫、リンパ形質細胞性リンパ腫、濾胞性リンパ腫、粘膜関連リンパ組織リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、およびＴ細胞未分化大細胞型リンパ腫などの、リンパ腫。臨床的に、本明細書に記載の方法の実施および組成物の使用によって、（適用可能な場合）癌性腫瘍の大きさもしくは数の減少、および／または関連症状の軽減が生じる。病理学的に、本明細書に記載の方法および組成物の使用の実施によって、以下などの病理学的に関連する応答が生じる：癌細胞増殖の阻害、癌または腫瘍の大きさの縮小、さらなる転移の予防、および腫瘍血管新生の阻害。このような疾患の治療方法は、対象に、治療上の有効量の本発明の組み合わせを投与することを特徴とする。当該方法は必要に応じて繰り返しうる。特に、癌は腎臓、肺、胃、または卵巣癌でありうる。
本発明の化合物またはそれらの結合体は、抗体、アルキル化剤、血管新生阻害剤、代謝拮抗剤、ＤＮＡ開裂剤、ＤＮＡクロスリンカー、ＤＮＡインターカレーター、ＤＮＡ副溝結合剤、エンジイン、熱ショックタンパク質９０阻害剤、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤、免疫調節剤、微小管安定化剤、ヌクレオシド（プリンまたはピリミジン）類似体、核外移行阻害剤、プロテアソーム阻害剤、トポイソメラーゼ（ＩまたはＩＩ）阻害剤、チロシンキナーゼ阻害剤、およびセリン／スレオニンキナーゼ阻害剤などの他の治療剤との組み合わせで投与することができる。特定の治療剤としては、アダリムマブ、アンサマイトシン Ｐ３、オーリスタチン、ベンダムスチン、ベバシズマブ、ビカルタミド、ブレオマイシン、ボルテゾミブ、ブスルファン、カリスタチン Ａ（ｃａｌｌｉｓｔａｔｉｎ Ａ）、カンプトテシン、カペシタビン、カルボプラチン、カルムスチン、セツキシマブ、シスプラチン、クラドリビン、シタラビン、クリプトフィシン、ダカルバジン、ダサチニブ、ダウノルビシン、ドセタキセル、ドキソルビシン、デュオカルマイシン、ジネミシン Ａ、エポチロン、エトポシド、フロクスウリジン、フルダラビン、５−フルオロウラシル、ゲフィチニブ、ゲムシタビン、イピリムマブ、ヒドロキシ尿素、イマチニブ、インフリキシマブ、インターフェロン、インターロイキン、β−ラパコン、レナリドマイド、イリノテカン、メイタンシン、メクロレタミン、メルファラン、６−メルカプトプリン、メトトレキサート、マイトマイシン Ｃ、ニロチニブ、オキサリプラチン、パクリタキセル、プロカルバジン、スベロイルアニリドヒドロキサム酸（ＳＡＨＡ）、６−チオグアニン、チオテパ、テニポシド、トポテカン、トラスツズマブ、トリコスタチン Ａ、ビンブラスチン、ビンクリスチン、およびビンデシンが挙げられる。
本発明の実施は、以下の実施例を参照することによってさらに理解することができるが、それらは限定するためではなく、例示するために提示される。以下の一般的な方法は例であり、同等の代替方法を用いることができることが当業者には理解される。
実施例１−二量体ＩＩａ−９
本実施例は図１Ａ−１Ｂおよび二量体ＩＩａ−９の合成に関する。
４−（ベンジルオキシ）−５−メトキシ−２−ニトロベンゾイルクロライド１は、対応するメチルエステルから、以下のように合成した：テトラヒドロフラン（ＴＨＦ、３５０ｍＬ）中のメチル ４−（ベンジルオキシ）−５−メトキシ−２−ニトロベンゾアート（Ｈａｒｖｅ Ｃｈｅｍ、１５ｇ、４７．３ｍｍｏｌ）溶液に、ＮａＯＨ（５６．７ｍＬ、１４２ｍｍｏｌ、２．５Ｍ）の水溶液を加えた。反応液を５０℃で５時間攪拌した。反応液を室温（ＲＴ）に冷却し、次いで真空で濃縮して、ＴＨＦを留去した。残った水層をＨＣｌ（６Ｎ）水溶液でｐＨ２まで酸性にした。得られた黄色の析出物を濾過し、水で洗浄し、真空で乾燥させて、４−（ベンジルオキシ）−５−メトキシ−２−ニトロ安息香酸（１４．３２ｇ、１００％収率）を得た。LCMS (M＋H) ＝ 304.08; 1H NMR (400MHz, メタノール−d4) δ 7.60 (s, 1H), 7.53 − 7.45 (m, 2H), 7.45 − 7.31 (m, 3H), 7.29 (s, 1H), 5.23 (s, 2H), 3.98 (s, 3H).
前記のＴＨＦ（３０ｍＬ）中のニトロ安息香酸（１．２ｇ、３．９６ｍｍｏｌ）の溶液に、塩化オキサリル（０．４１６ｍＬ、４．７５ｍｍｏｌ）を滴下して加え、次いで、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ、２０ｕＬ）を加えた。得られた溶液を室温で３５時間攪拌し、その後、真空で濃縮して、酸クロライド１を黄色の固形物として得た。
酸クロライド１を、ＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解し、ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のＳ−メチル ピロリジン−２−カルボキシレート２塩酸塩（０．７６８ｇ、４．７５ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（ＮＥｔ３、１．６５ｍＬ、１１．８７ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃で滴下して加えた。反応混合物を室温まで昇温させ、室温で１時間攪拌し、その後ＬｉＣｌ水溶液で反応を停止させ、濃縮してＴＨＦを留去した。得られた混合物をＥｔＯＡｃ（３×）で抽出した。有機層を合わせて、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、次いでブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空で濃縮した。粗生成物の混合物をＩＳＣＯシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇカラム、１５分で０％から１００％ＥｔＯＡｃ／ジクロロメタン（ＤＣＭ）の勾配）を用いて精製し、エステル３（１．１８ｍｇ、収率７２％）を得た。LCMS (M＋H) ＝ 415.4; 1H NMR (400MHz, クロロホルム−d) δ 7.77 (s, 1H), 7.51 − 7.32 (m, 5H), 6.92 − 6.80 (m, 1H), 5.25 − 5.20 (m, 2H), 4.80 − 4.73 (m, 1H), 4.03 − 3.93 (m, 3H), 3.82 (s, 2H), 3.56 (s, 1H), 3.38 − 3.30 (m, 1H), 3.21 (s, 1H), 2.41 − 2.30 (m, 1H), 2.16 − 2.07 (m, 1H), 2.04 − 1.87 (m, 2H).
エステル３（９００ｍｇ、２．１７２ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＯＨ）２（２０％／炭素、９０ｍｇ）のＥｔＯＨ（１５ｍＬ）中の懸濁液を、Ｈ２（５０ｐｓｉ）下で３時間攪拌した。反応混合物をセライト（登録商標）パッドを介して濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。濾液を合わせて濃縮して、ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中に溶解した。ＡｃＯＨを１滴加えた後、反応液を８０℃で５時間加熱した。反応液をついで室温まで冷却し、濃縮した。残留物をＩＳＣＯシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇカラム、０−１００％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンの勾配）を用いて精製し、化合物４を得た。LCMS (M＋H) ＝ 263; 1H NMR (400MHz, クロロホルム−d) δ 10.18 (s, 1H), 9.89 (br. s., 1H), 7.22 (s, 1H), 6.55 (s, 1H), 4.17 − 3.96 (m, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.63 − 3.37 (m, 2H), 1.96 − 1.63 (m, 4H).
化合物４（０．８ｇ、３．０５ｍｍｏｌ）および１，３−ブロモプロパン４ａ（０．３０８ｇ、１．５２５ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（５２７ｍｇ、３．８１ｍｍｏｌ）の、ＤＭＳＯ（８ｍＬ）中の懸濁液を、室温で１２時間攪拌した。反応混合物をＮＨ４Ｃｌ水溶液で希釈し、クロロホルム（３×）で抽出した。有機層を合わせてブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空で濃縮した。粗生成物の混合物をＩＳＣＯシリカゲルクロマトグラフィー（０％から１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭの勾配）を用いて精製し、化合物５（６７０ｍｇ、７８％収率）を得た。LCMS (M＋H) ＝ 565; 1H NMR (400MHz, クロロホルム−d) δ 7.45 (s, 2H), 6.54 (s, 2H), 4.19 (d, J＝7.5 Hz, 4H), 4.03 (d, J＝5.9 Hz, 2H), 3.89 (s, 6H), 3.82 − 3.72 (m, 2H), 3.64 − 3.55 (m, 2H), 2.73 (br. s., 2H), 2.37 − 2.32 (m, 2H), 2.07 − 1.95 (m, 6H).
化合物５（６５０ｍｇ、１．１５１ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２ｍＬ）中の溶液に、−７８℃で、三臭化ホウ素（１０．０４ｍＬ、１０．４ｍｍｏｌ、ＤＣＭ中に１Ｍ）の溶液を滴下して加えた。反応液をゆっくりと−５℃に昇温させ、３０分間攪拌した。反応液を次いで、リン酸二カリウム緩衝液（５ｍＬ）で反応を停止させ、次いで濃縮してＤＣＭを留去した。残ったスラリーを濾過して、灰色の固形物を得て、これをＩＳＣＯシリカゲルクロマトグラフィー（１２０ｇカラム、０％から１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭの勾配）を用いて精製し、化合物６（２０２ｍｇ、３３％収率）を得た。LCMS (M＋H) ＝ 537; 1H NMR (400MHz, DMSO−d6) δ 10.10 (br. s., 2H), 9.44 − 9.01 (m, 2H), 7.17 (s, 2H), 6.66 (s, 2H), 4.13 (br. s., 5H), 4.03 (d, J＝6.4 Hz, 2H), 3.51 (br. s., 6H), 2.46 (br. s., 1H), 2.32 − 2.16 (m, 2H), 2.06 − 1.66 (m, 7H).
化合物６（８６ｍｇ、０．１６０ｍｍｏｌ）、６−ブロモへキス−１−エン６ａ（５２．３ｍｇ、０．３２１ｍｍｏｌ）、およびＫ２ＣＯ３（６６．５ｍｇ、０．４８１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１．５ｍＬ）中の懸濁液を、室温で１５時間攪拌した。反応混合物を濾過し、ＩＳＣＯシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇカラム、０％から１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭの勾配）を用いて精製し、化合物７（５５ｍｇ、収率４９％）を得た。LCMS (M＋H) ＝ 701.7.
バイアルに化合物７（５２ｍｇ、０．０７４ｍｍｏｌ）を加えた。グラブス−ＩＩ触媒（６．３０ｍｇ、７．４２μｍｏｌ）のＤＣＥ（１０ｍＬ）溶液を、次いで加えた。得られた溶液を脱気して、７５℃で１時間加熱した。反応混合物を次いで濃縮し、ＩＳＣＯシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇカラム、０％から１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭの勾配）を用いて精製し、２１員のマクロサイクロ８（４４ｍｇ、８８％、〜１０％の２０員のマクロサイクル副生成物９と共に）を得た。LCMS (M＋H) ＝ 673.7.
化合物８および９（１８ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）の混合物のＤＭＦ（１ｍＬ）溶液に、０℃で、ＮａＨ（４．０１ｍｇ、０．０６７ｍｍｏｌ）を加えた。得られた懸濁液を０℃で３０分間攪拌し、次いで、２−（クロロメトキシ）エチル）トリメチルシラン（ＳＥＭ−Ｃｌ、０．０１４ｍＬ、０．０８０ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を次いで、０℃で１時間攪拌し、その後、ブラインで反応を停止させた。混合物をＥｔＯＡｃ（３×）で抽出した。有機層を合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮し、ＩＳＣＯシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇカラム、０％から１００％ＭｅＯＨ／ＤＣＭの勾配）を用いて精製し、化合物１０を得た。LCMS (M＋H) ＝ 933; 1H NMR (400MHz, クロロホルム−d) δ 7.37 (s, 2H), 7.22 (s, 2H), 5.48 (m, 2H), 5.43 (t, J＝3.5 Hz, 2H), 4.70 (m, 2H), 4.29 − 4.21 (m, 4H), 4.14 − 4.03 (m, 6H), 3.84 − 3.65 (m, 7H), 3.62 − 3.50 (m, 2H), 2.79 − 2.67 (m, 2H), 2.35 (m, 2H), 2.12 − 1.96 (m, 10H), 1.80 (m, 4H), 1.58 − 1.47 (m, 2H), 0.98 (m, 4H), 0.04 − 0.02 (s, 18H).
化合物１０のＴＨＦ／ＥｔＯＨ（１：１、１ｍＬ）溶液に、０℃で、水素化ホウ素リチウムの溶液（０．２６８ｍＬ、０．５３５ｍｍｏｌ、ＴＨＦ中に２Ｍ）を加えた。得られた溶液を０℃で１時間攪拌し、その後、室温まで昇温させ、５分間攪拌した。反応液を次いで、ブラインで反応を停止させ、ＣＨＣｌ３（３×）で抽出した。有機層を合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残留物を次いで、ＣＨＣｌ３／ＥｔＯＨ（１：１、２ｍＬ）中に取り込んだ。シリカゲル（０．９ｇ）、次いで水（１ｍＬ）を加えた。得られた懸濁液を室温で４８時間攪拌し、次いで濾過し、１０％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３で洗浄した。濾液を濃縮して、逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８ ２０×１００ｍｍ；移動相Ａ：０．１％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を含む、１０：９０ ＭｅＣＮ：水；移動相Ｂ：０．１％ＴＦＡ酸を含む、９０：１０ ＭｅＣＮ：水；勾配：１５分にわたり、０−８０％Ｂ；流量：２０ｍＬ／分；検出：２２０ｎｍにおけるＵＶ）を用いて精製し、得た。目的の画分を含む画分を合わせて、ＮａＨＣＯ３水溶液で中性化し、次いでクロロホルムで抽出し、乾燥させ、二量体ＩＩａ−９を得た（７．１ｍｇ、２ステップにわたり３９％）。LCMS (M＋H) ＝ 641.3; 1H NMR (400MHz, クロロホルム−d) δ 7.68 (d, J＝4.4 Hz, 2H), 7.53 (s, 2H), 6.85 (s, 2H), 5.46 (m, 2H), 4.36 − 4.23 (m, 4H), 4.20 − 4.12 (m, 2H), 4.11 − 4.03 (m, 2H), 3.87− 3.82 (m, 2H), 3.75 (dt, J＝7.5, 4.0 Hz, 2H), 3.60 (dt, J＝11.8, 7.8 Hz, 2H), 2.41 − 2.30 (m, 6H), 2.14 − 2.01 (m, 8H), 1.88 − 1.77 (m, 4H), 1.67 − 1.58 (m, 4H).
実施例２−二量体ＩＩａ−３およびＩＩａ−４
本実施例は図２および二量体ＩＩａ−３およびＩＩａ−４の二量体の合成に関する。
化合物８および９（２４ｍｇ、０．０３６ｍｍｏｌ）の混合物、およびＭｅＯＨ（３ｍＬ）中の１０％Ｐｄ／Ｃ（６ｍｇ）の懸濁液を、Ｈ２バルーン下で３時間攪拌した。反応混合物をＮ２でパージし、セライト（登録商標）パッドを介して濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。濾液を合わせて濃縮して、２１員のマクロサイクル１１（２４ｍｇ、収率１００％、〜１０％のマクロサイクル１２と共に）を得た。LCMS (M＋H) ＝ 675.4.
マクロサイクル１１および１２（２４ｍｇ、０．０３６ｍｍｏｌ）の混合物の、ＤＭＦ（１ｍＬ）中の溶液に、０℃でＮａＨ（５．３３ｍｇ、０．０８９ｍｍｏｌ）を加えた。得られた懸濁液を０℃で３０分攪拌し、その後、ＳＥＭ−Ｃｌ（０．０１９ｍＬ、０．１０７ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を０℃で１時間攪拌し、その後ブラインで反応を停止させた。混合物をＥｔＯＡｃ（３×）で抽出した。有機層を合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮し、ＩＳＣＯシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇカラム、０％から１００％ＭｅＯＨ／ＤＣＭの勾配）を用いて精製し、ＳＥＭ−マクロサイクルの混合物（２１員マクロサイクル： LCMS (M＋H) ＝ 935．２０員マクロサイクル： LCMS (M＋H) ＝ 921）を得た。
前記のＳＥＭ−マクロサイクルの混合物の、ＴＨＦ／ＥｔＯＨ（１：１、１ｍＬ）中の溶液に、０℃で、ＬｉＢＨ４（０．３５６ｍＬ、０．７１ｍｍｏｌ、ＴＨＦ中の２Ｍ）の溶液を加えた。得られた溶液を０℃で１時間攪拌し、その後、室温まで昇温させ、１５分間攪拌した。反応液をブラインで反応を停止させ、ＣＨＣｌ３（３×）で抽出した。有機層を合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残留物をＣＨＣｌ３／ＥｔＯＨ（１：１、２ｍＬ）中に取り込んだ。シリカゲル（０．９ｇ）を加え、水（１ｍＬ）を加えた。得られた懸濁液を室温で４８時間攪拌し、濾過し、１０％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３で洗浄した。濾液を濃縮して、逆相ＨＰＬＣを用いて精製し、二量体ＩＩａ−４およびＩＩａ−３を得た（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８ ２０×１００ｍｍ；移動相Ａ：０．１％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を含む、１０：９０ ＭｅＣＮ：水；移動相Ｂ：０．１％ＴＦＡ酸を含む、９０：１０ ＭｅＣＮ：水；勾配：１５分にわたり、０−８０％Ｂ；流量：２０ｍＬ／分；検出：２２０ｎｍにおけるＵＶ）。
二量体ＩＩａ−４：（７．５ｍｇ，収率３１％）； LCMS (M＋H) ＝ 643.4; 1H NMR (400MHz, クロロホルム−d) δ 7.68 (d, J＝4.4 Hz, 2H), 7.53 (s, 2H), 6.84 (s, 2H), 4.33 − 4.16 (m, 6H), 4.13 − 4.06 (m, 2H), 3.88 − 3.80 (m, 2H), 3.79 − 3.71 (m, 2H), 3.64 − 3.57 (m, 2H), 2.44 − 2.30 (m, 6H), 2.15 − 2.04 (m, 4H), 1.85 − 1.77 (m, 4H), 1.61 − 1.52 (m, 4H), 1.44 − 1.38 (m, 8H).
二量体ＩＩａ−３：（１ｍｇ，収率４％）； LCMS (M＋H) ＝ 629.4; 1H NMR (400MHz, クロロホルム−d) δ 7.68 (d, J＝4.4 Hz, 2H), 7.55 (s, 2H), 6.86 (s, 2H), 4.37 − 4.24 (m, 4H), 4.21 − 4.14 (m, 2H), 4.12 − 4.06 (m, 2H), 3.87−3.80 (m, 2H), 3.79 − 3.70 (m, 4H), 3.63 − 3.56 (m, 2H), 2.42 − 2.31 (m, 6H), 2.14 − 2.06 (m, 4H), 1.83−1.78 (m, 4H), 1.61 − 1.52 (m, 4H), 1.43 − 1.33 (m, 6H).
実施例３−二量体ＩＩａ−１
本実施例は図３および二量体ＩＩａ−１の合成に関する。
化合物６（２９ｍｇ、０．０５４ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（７．４７ｍｇ、０．０５４ｍｍｏｌ）の、ＤＭＦ（１．５ｍＬ）中の懸濁液に、１，７−ジブロモヘプタン（１４．６４ｍｇ、０．０５７ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を５０℃で２時間加熱した。反応液を室温に冷却した。反応混合物を濾過し、ＩＳＣＯシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇカラム、０から１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭの勾配）を用いて精製し、マクロサイクル１３を得た。LCMS (M＋H) ＝ 633.5.
マクロサイクル１３のＤＭＦ（０．８ｍＬ）中の溶液に、０℃でＮａＨ（４．３２ｍｇ、０．１０８ｍｍｏｌ）を加えた。得られた懸濁液を０℃で３０分間攪拌し、その後、ＳＥＭ−Ｃｌ（０．０１９ｍＬ、０．１１ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を０℃で１時間攪拌し、その後、ブラインで反応を停止させた。混合物をＥｔＯＡｃ（３×）で抽出した。有機層を合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、ＩＳＣＯシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇカラム、０％から１００％ＭｅＯＨ／ＤＣＭの勾配）を用いて精製し、ＳＥＭ−マクロサイクル１４（９ｍｇ、１０．０８μｍｏｌ、２ステップにわたり収率１８．６％）を得た。LCMS (M＋H) ＝ 893.4.
ＳＥＭ−マクロサイクル１４（９ｍｇ、１０．０８μｍｏｌ）のＴＨＦ／ＥｔＯＨ（１：１、１ｍＬ）中の溶液に、０℃で、ＬｉＢＨ４の溶液（１０１μＬ、０．２０２ｍｍｏｌ、ＴＨＦ中に２Ｍ）を加えた。得られた溶液を０℃で１時間攪拌し、その後、室温まで昇温させ、１５分間攪拌した。反応液をブラインで反応を停止させ、ＣＨＣｌ３（３×）で抽出した。有機層を合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残留物をＣＨＣｌ３／ＥｔＯＨ（１：１、２ｍＬ）中に取り込んだ。シリカゲル（０．７ｇ）、次いで、水（０．６ｍＬ）を加えた。得られた懸濁液を室温で２４時間攪拌し、濾過し、１０％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３で洗浄した。濾液を濃縮して、逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８ ２０×１００ｍｍ；移動相Ａ：０．１％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を含む、１０：９０ ＭｅＣＮ：Ｈ２Ｏ；移動相Ｂ：０．１％ＴＦＡ酸を含む、９０：１０ ＭｅＣＮ：水；勾配：１５分にわたり、０−７０％Ｂ；流量：２０ｍＬ／分；検出：２２０ｎｍにおけるＵＶ）を用いて精製し、二量体ＩＩａ−１（１．８ｍｇ、２．７０μｍｏｌ、収率２６．８％）を得た。LCMS (M＋H) ＝ 601.2; 1H NMR (400MHz, クロロホルム−d) δ 7.68 (d, J＝4.4 Hz, 2H), 7.54 (s, 2H), 6.90 (s, 2H), 4.35 − 4.25 (m, 4H), 4.18 (dt, J＝9.5, 5.7 Hz, 2H), 4.15 − 4.05 (m, 2H), 3.86 − 3.78 (m, 2H), 3.77 − 3.72 (m, 2H), 3.65 − 3.54 (m, 2H), 2.42 − 2.28 (m, 6H), 2.14 − 2.03 (m, 4H), 1.91 − 1.80 (m, 4H), 1.70 − 1.61 (m, 4H), 1.49 − 1.41 (m, 2H).
実施例４−二量体ＩＩｂ−５
本実施例は図４Ａ−４Ｂおよび二量体ＩＩｂ−５の合成に関する。
メチル ４−ヒドロキシ−３−メトキシベンゾアート１４（１８ｇ、９９ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（２０．４８ｇ、１４８ｍｍｏｌ）および１，３−ジブロモプロパン１５（５．０４ｍｌ、４９．４ｍｍｏｌ）の、ＤＭＳＯ（３００ｍＬ）中の懸濁液を、室温で１６時間攪拌した。この反応混合物に水を加え、得られた溶液を室温で２０分間攪拌した。得られた析出物を濾過し、水で洗浄し、真空で乾燥させた。得られた白色の固形物を、ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭで粉砕し、濾過して、化合物１６（１０．４５ｇ、５２．４％）および暗褐色の濾液を得た。濾液をＩＳＣＯ（１５分にわたり、０％−５０％のＥｔＯＡＣ／ＤＣＭ、１２０ｇカラム）で精製して、さらに化合物１６（３．５５ｇ、１７．７％）を得た。LCMS (M＋H) ＝ 405; 1H NMR (400MHz, DMSO−d6) δ 7.58 (dd, J＝8.4, 2.0 Hz, 2H), 7.46 (d, J＝2.0 Hz, 2H), 7.12 (d, J＝8.6 Hz, 2H), 4.22 (t, J＝6.2 Hz, 4H), 3.83 (s, 6H), 3.81 (s, 6H), 2.24 (t, J＝6.2 Hz, 2H)．
塩化スズ（ＩＶ）（１９．９１ｍＬ、１９．９１ｍｍｏｌ、ＤＣＭ中の１Ｍ）の溶液に、０℃で、濃硝酸（１．３７５ｍＬ、２７．７ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。得られた混合物を、化合物１６（３．５ｇ、８．６５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１５ｍＬ）溶液に、−２５℃で滴下して加えた。反応液を−２５℃で３０分間攪拌し、その後、水（１００ｍＬ）で反応を停止させた。有機層を分離した。水層をＥｔＯＡｃ（２×）で抽出した。有機層を合わせて濃縮して、粗生成物を得て、これを熱ＤＣＭ／ヘキサンから再結晶させて、化合物１７（３．５ｇ、収率８２％）を灰白色の結晶として得た。LCMS (M＋H) ＝ 495; 1H NMR (400MHz, DMSO−d6) δ 7.68 (s, 2H), 7.32 (s, 2H), 4.29 (t, J＝6.2 Hz, 4H), 3.91 (s, 6H), 3.83 (s, 6H), 2.35 − 2.13 (m, 2H).
フラスコに化合物１７（３．１ｇ、６．２７ｍｍｏｌ）およびＮａＯＨ水溶液（２５．０８ｍＬ、６２．７ｍｍｏｌ、２．５Ｍ）を加えた。反応混合物を１００℃で１６時間加熱した。不均一な混合物が、反応の終わりに赤色の溶液になった。反応混合物を室温に冷却し、ＨＣｌ水溶液でｐＨ２まで酸性にした。得られた沈殿を濾過し、水で洗浄し、乾燥させて、化合物１８（２．６５ｇ、６．０５ｍｍｏｌ、収率９６％）を得た。1H NMR (400MHz, DMSO−d6) δ 13.41 (br. s., 2H), 10.62 (br. s., 2H), 7.59 (s, 2H), 7.10 (s, 2H), 4.31 (t, J＝6.2 Hz, 4H), 2.25 (quin, J＝6.1 Hz, 2H).
化合物１８（２．９ｇ、６．６２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）溶液に、室温で、塩化オキサリル（１．３９０ｍＬ、１５．８８ｍｍｏｌ）、次いで、２滴のＤＭＦを加えた。反応液を室温で２時間攪拌し、その後濃縮し、ＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中に溶解させた。得られた溶液を室温で３０分間攪拌し、濃縮した。粗生成物を水で粉砕し、濾過し、乾燥させて、化合物１９（３ｇ、６．４３ｍｍｏｌ、収率９７％）を得た。LCMS (M＋H) ＝ 467; 1H NMR (400MHz, DMSO−d6) δ 10.80 (br. s., 2H), 7.65 (s, 2H), 7.10 (s, 2H), 4.33 (t, J＝5.9 Hz, 4H), 3.80 (s, 6H), 2.39 − 2.15 (m, 2H).
化合物１９（１ｇ、２．１４４ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（０．８８９ｇ、６．４３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）中の懸濁液に、１，４−ジブロモブタン１９ａ（３．７０ｇ、１７．１５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を８０℃で２時間加熱し、その後、室温に冷却し、水で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３×）で抽出した。有機層を合わせて濃縮し、ＩＳＣＯシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇカラム、０％から５０％のＥｔＯＡＣ／ヘキサンの勾配）を用いて精製し、化合物２０（０．９５ｇ、収率６０．２％）を得た。LCMS (M＋H) ＝ 521; 1H NMR (400MHz, クロロホルム−d) δ 7.47 (s, 2H), 7.04 (s, 2H), 4.31 (s, 5H), 4.11 (s, 4H), 3.89 (s, 6H), 3.51 (t, J＝6.3 Hz, 4H), 2.42 (s, 2H), 2.14 − 1.92 (m, 8H).
化合物２０（０．９５ｇ、１．２９０ｍｍｏｌ）、２−ニトロベンゼンスルホンアミド２１ａ（０．２６１ｇ、１．２９０ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（０．５３５ｇ、３．８７ｍｍｏｌ）の、ＤＭＦ（２０ｍＬ）中の懸濁液を、８０℃で２時間加熱した。反応液を水で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３×）で抽出した。有機層を合わせて濃縮し、ＩＳＣＯシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇカラム、０％から８０％ＥｔＯＡＣ／ヘキサンの勾配）を用いて精製し、マクロサイクル２１（３３０ｍｇ、収率３２．９％）を得た。LCMS (M＋H) ＝ 777.5; 1H NMR (400MHz, クロロホルム−d) δ 7.97 (dd, J＝7.6, 1.7 Hz, 1H), 7.74 − 7.64 (m, 2H), 7.63 − 7.56 (m, 1H), 7.51 (s, 2H), 7.07 (s, 2H), 4.36 − 4.28 (m, 4H), 4.17 − 4.07 (m, 4H), 3.90 (s, 6H), 3.36 (br. s., 4H), 2.31 (t, J＝6.1 Hz, 2H), 1.86 − 1.80 (m., 8H).
マクロサイクル２１（３２０ｍｇ、０．４１２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３ｍＬ）溶液に、２−メルカプトエタノール（３２２ｍｇ、４．１２ｍｍｏｌ）および１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（ＤＢＵ、３１０μＬ、２．０６０ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で２時間攪拌し、ＤＣＭで希釈し、水、次いでブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。残留物をＤＣＭ（４ｍＬ）中に取り込み、０℃に冷却した。次いで、トリエチルアミン（１１５μｌ、０．８２４ｍｍｏｌ）、次いで、クロロギ酸アリル（Ａｌｌｏｃ−Ｃｌ、９９ｍｇ、０．８２４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を０℃で３０分間攪拌し、その後、水で反応を停止させ、ＤＣＭで抽出し、乾燥させ、濃縮した。粗生成物をＩＳＣＯシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇカラム、０％から７０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンの勾配）を用いて精製し、マクロサイクル２２（１４０ｍｇ、０．２０７ｍｍｏｌ、収率５０．３％）を得た。LCMS (M＋H) ＝ 676.2．
マクロサイクル２２の、ＭｅＯＨ（１ｍＬ）およびＴＨＦ（６ｍＬ）中の懸濁液に、ＮａＯＨ水溶液（１Ｍ、１ｍＬ）を加えた。得られた混合物を室温で１２時間攪拌した。反応混合物を濃縮して、ＴＨＦおよびＭｅＯＨを留去した。残留物をＨＣｌ水溶液（１Ｎ）で酸性にし、ＥｔＯＡｃ（３×）で抽出した。有機層を合わせて、ブラインで洗浄し、乾燥させ、濃縮して、酸２３（１３５ｍｇ、０．２０８ｍｍｏｌ、収率９７％）を得た。LCMS (M＋H) ＝ 485．
酸２３（１３５ｍｇ、０．２０８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２ｍＬ）中の溶液に、塩化オキサリル（４５．６μＬ、０．５２１ｍｍｏｌ）、次いで、ＤＭＦ（５ｕＬ）を加えた。反応混合物を室温で２時間攪拌し、濃縮した。残留物をＴＨＦ（１０ｍＬ）中に溶解し、０℃に冷却した。（Ｓ）−ベンジル １，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３−カルボキシレート ｐ−トルエンスルホン酸塩２３ａ（Ａｃｃｅｌａ、２７５ｍｇ、０．６２５ｍｍｏｌ）およびＮＥｔ３（０．２９ｍＬ、２．０９ｍｍｏｌ）の、ＴＨＦ（５ｍＬ）中の溶液を、滴下して加えた。反応混合物をゆっくりと室温まで昇温させて、１５分間攪拌し、その後水で反応を停止させた。得られた混合物をＥｔＯＡｃ（３×）で抽出した。有機層を合わせて乾燥させ、濃縮して、ＩＳＣＯシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇカラム、０％から１００％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンの勾配）を用いて精製し、化合物２４（１９０ｍｇ、０．１６６ｍｍｏｌ、収率８０％）を得た。LCMS (M＋H) ＝ 1146.8 .
化合物２４（１９０ｍｇ、０．１６６ｍｍｏｌ）、亜鉛粉末（１０８ｍｇ、１．６５８ｍｍｏｌ）、およびＮＨ４Ｃｌ（１３３ｍｇ、２．４８６ｍｍｏｌ）の、ＭｅＯＨ（４ｍＬ）中の懸濁液を、５０℃に加熱し、８時間攪拌した。反応混合物を室温まで冷却し、ＭｅＯＨで希釈し、セライト（登録商標）パッドを介して濾過し、ＭｅＯＨ、次いでＥｔＯＡｃで洗浄した。濾液を合わせて濃縮し、ＩＳＣＯシリカゲルクロマトグラフィー（２４ｇカラム、０％から１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭの勾配）を用いて精製し、化合物２５（１２５ｍｇ、０．１４４ｍｍｏｌ、収率８７％）を得た。LCMS (M+H) ＝ 870.1; 1H NMR (400MHz, クロロホルム−d) δ 7.40−7.36 (m, 3H), 7.35 − 7.21 (m, 9H), 6.52 (br. s., 2H), 6.01 − 5.76 (m, 1H), 5.25 (dd, J＝17.2, 1.5 Hz, 1H), 5.16 (dd, J＝10.5, 1.4 Hz, 1H), 5.06 (d, J＝15.2 Hz, 2H), 4.55 (d, J＝5.5 Hz, 2H), 4.45 (d, J ＝15.4 Hz, 2H), 4.24 − 4.05 (m, 4H), 4.00 (br. s., 2H), 3.49 (dd, J＝15.4, 7.0 Hz, 2H), 3.31 (br. s., 4H), 3.01 (dd, J＝15.4, 6.4 Hz, 2H), 2.19 (d, J＝5.5 Hz, 2H), 1.84−1.76 (m., 8H).
化合物２５（１２０ｍｇ、０．１３８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）中の溶液に、０℃でＮａＨ（９．９３ｍｇ、０．４１４ｍｍｏｌ）を加えた。得られた懸濁液を３０分間攪拌し、その後ＳＥＭ−Ｃｌ（０．０７３ｍＬ、０．４１４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を次いで、ゆっくりと室温まで昇温させ、２時間攪拌し、その後ブラインで反応を停止させた。得られた混合物をＥｔＯＡＣ（３×）で抽出した。有機層を合わせて乾燥させ、濃縮し、ＩＳＣＯシリカゲルクロマトグラフィー（２４ｇカラム、ＥｔＯＡｃ／ヘキサンの勾配）を用いて精製し、中間体ＳＥＭ−マクロサイクル（８２ｍｇ、０．０７３ｍｍｏｌ、収率５２．６％）を得た。
前記の中間体ＳＥＭマクロサイクル（８２ｍｇ、０．０７３ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解した。溶液をＮ２でパージし、その後、Ｐｄ（Ｐｈ３Ｐ）４（７．９７ｍｇ、６．９０μｍｏｌ）およびモルホリン（０．０６０ｍＬ、０．６９０ｍｍｏｌ）を順次加えた。反応混合物を室温で一晩攪拌し、その後濃縮して、ＩＳＣＯシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇカラム、０％から２０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭの勾配）を用いて精製し、マクロサイクル２６（５６ｍｇ、０．０５４ｍｍｏｌ、収率３８．８％）を得た。LCMS (M＋H) ＝ 1046.3; 1H NMR (400MHz, クロロホルム−d) δ 7.40 − 7.27 (m, 12H), 5.51 (d, J＝10.1 Hz, 2H), 5.11 (d, J＝15.4 Hz, 2H), 4.66 (d, J＝10.1 Hz, 2H), 4.45 (d, J＝15.4 Hz, 2H), 4.35 − 4.24 (m, 6H), 4.21 − 4.14 (m, 2H), 4.08 − 3.99 (m, 2H), 3.79 (d, J＝6.8 Hz, 2H), 3.73 − 3.62 (m, 2H), 3.54 (s, 2H), 3.32 − 3.13 (m, 4H), 3.04 (s, 2H), 2.30 (br. s., 2H), 2.18 (d, J＝6.2 Hz, 4H), 1.95 (br. s., 4H), 1.65 (br. s., 4H), 0.97 (dd, J＝4.2, 3.1 Hz, 4H), 0.03 (s, 18H).
マクロサイクル２６（４６ｍｇ、４４μｍｏｌ）のＴＨＦ（１ｍＬ）中の溶液に、−７８℃で、水素化トリエチルホウ素リチウムの溶液（ＳＵＰＥＲ−ＨＹＤＲＩＤＥ（登録商標）、０．１３ｍＬ、０．１２３ｍｍｏｌ、ＴＨＦ中の１Ｍ）を加えた。得られた溶液を−７８℃で２時間攪拌し、その後、ブラインで反応を停止させ、ＣＨＣｌ３（３×）で抽出した。有機層を合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残留物を次いで、ＣＨＣｌ３／ＥｔＯＨ（１：１、２ｍＬ）中に取り込んだ。シリカゲル（０．８ｇ）、次いで水（０．６ｍＬ）を加えた。得られた懸濁液を室温で２４時間攪拌し、次いで濾過し、１０％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３で洗浄した。濾液を濃縮して、逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８ ２０×１００ｍｍ；移動相Ａ：０．１％ＴＦＡを含む、１０：９０ ＭｅＣＮ：水；移動相Ｂ：０．１％ＴＦＡを含む、９０：１０ ＭｅＣＮ：水；勾配：１５分にわたり、１０−７０％Ｂ；流量：２０ｍＬ／分；検出：２２０ｎｍにおけるＵＶ）を用いて精製して、二量体ＩＩｂ−５（２０ｍｇ、２４μｍｏｌ、収率５４．３％）を得た。LCMS (M＋H) ＝ 754.2; 1H NMR (400MHz, クロロホルム−d) δ 7.54 (s, 2H), 7.49 (d, J＝5.3 Hz, 2H), 7.42 − 7.30 (m, 8H), 6.84 (s, 2H), 5.03 (d, J＝15.6 Hz, 2H), 4.56 (d, J＝15.4 Hz, 2H), 4.37 − 4.20 (m, 4H), 4.15 − 4.07 (m, 2H), 4.02 − 3.94 (m, 2H), 3.36 − 3.25 (m, 2H), 3.23 − 3.13 (m, 2H), 3.05 −2.95 (m, 6H), 2.42 − 2.30 (m, 2H), 1.96 (br. s., 8H).
実施例５−中間体化合物４８
本実施例は、図５および中間体化合物４８の合成に関する。
室温の、化合物１９（１０．３６ｇ、２２．２１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１７８ｍＬ）中の溶液に、Ｋ２ＣＯ３（１２．２８ｇ、８９ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を１００℃に加熱し、次いで、１，８−ジヨードオクタン１９ｂ（５．３０ｍＬ、２６．７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４４．４ｍＬ）中の溶液を、１．５時間かけて滴下して加えた。反応混合物を１００℃で３時間以上攪拌し、室温に冷却し、Ｈ２Ｏ（２０００ｍＬ）の入った攪拌フラスコにゆっくりと加えた。得られた沈殿を真空濾過で回収した（Ｈ２Ｏで洗浄した）。粗製物質をフラッシュクロマトグラフィー（２２０ｇシリカゲル；０−１０％ＥｔＯＡｃ−ＤＣＭの直線状勾配）によって精製し、マクロサイクル４３（５．９９４ｇ、４７％）を白色の固形物として得た。LC−MS m/z 594 [M＋18]＋; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.53 (s, 2H), 7.08 (s, 2H), 4.33 (t, J＝6.1 Hz, 4H), 4.15 (t, J＝5.3 Hz, 4H), 3.91 (s, 6H), 2.36 (quin, J＝6.0 Hz, 2H), 1.86 − 1.78 (m, 4H), 1.61 − 1.52 (m, 4H), 1.49 − 1.42 (m, 4H).
室温のマクロサイクル４３（５．９９４ｇ、１０．４０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（７８ｍＬ）中の懸濁液に、ＭｅＯＨ（２６．０ｍＬ）、次いで、１ＭのＮａＯＨ水溶液（１０４ｍＬ、１０４ｍｍｏｌ）を加えた。黄色の懸濁液を５０℃で４時間攪拌し、徐々に透明な黄色の溶液になった。反応混合液を室温まで冷却し、一部濃縮し、１ＭのＨＣｌ水溶液で酸性にした。得られた固形物を真空濾過によって回収し（Ｈ２Ｏで洗浄した）、マクロサイクル４４（５．４１ｇ、９５％）を黄色の固形物として得た。LC-MS m/z 566 [M＋18]＋; 1H NMR (400MHz, DMSO−d6) δ 13.58 (br s, 2H), 7.64 (s, 2H), 7.30 (s, 2H), 4.27 (t, J＝6.2 Hz, 4H), 4.16 (t, J＝5.1 Hz, 4H), 2.20 (quin, J＝6.1 Hz, 2H), 1.74 − 1.65 (m, 4H), 1.53 − 1.44 (m, 4H), 1.42 − 1.32 (m, 4H).
室温の、マクロサイクル４４（５．１４４ｇ、９．３８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（９４ｍＬ）溶液に、塩化オキサリル（２．１４０ｍＬ、２２．５１ｍｍｏｌ）、次いで、ＤＭＦ（７．２９μＬ、０．０９４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１時間攪拌し、次いで真空で濃縮した。残留物をＴＨＦ（９４ｍＬ）中に取り込み、０℃に冷却した。ＮＥｔ３（７．８４ｍＬ、５６．３ｍｍｏｌ）および化合物４４ａ（５．８４ｇ、２２．５１ｍｍｏｌ）を加えた。冷却槽を除き、反応混合物を室温で３時間攪拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（２５０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２５０ｍＬ）の混合物の添加によって反応を停止させ、ＥｔＯＡｃ（２×２５０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、飽和ＮａＣｌ（２５０ｍＬ）水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。粗製物質をフラッシュクロマトグラフィー（１２０ｇシリカゲル；０−１００％ＥｔＯＡｃ−ヘキサンの直線状勾配）によって精製し、化合物４５（９．２７４ｇ、９６％）を黄色の泡状物として得た。LC−MS m/z 1031 [M＋H]＋.
０℃の、化合物４５（９．２７４ｇ、８．９９ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（５６．２ｍＬ）およびＴＨＦ（５６．２ｍＬ）中の溶液に、ＮＨ４Ｃｌ（９．６２ｇ、１８０ｍｍｏｌ）および亜鉛末（１１．７６ｇ、１８０ｍｍｏｌ）を加えた。得られた懸濁液を５０℃で２２時間攪拌した。反応液を室温に冷却し、セライト（登録商標）で濾過した（３００ｍＬのＥｔＯＡｃで洗浄した）。濾液を真空で濃縮した。粗製物質をＤＣＭ（４００ｍＬ）中に取り込み、Ｈ２Ｏ（４００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮して、化合物４６（８．２ｇ、定量的収率）を、黄色の泡状物として得た。LC−MS m/z 907 [M＋H]＋; 1H NMR (400MHz, DMSO−d6) δ 10.25 (s, 2H), 7.27 (s, 2H), 6.73 (s, 2H), 4.46 (quin, J＝5.2 Hz, 2H), 4.24 − 4.12 (m, 6H), 4.06 − 3.96 (m, 4H), 3.60 − 3.53 (m, 2H), 3.50 − 3.43 (m, 2H), 2.69 − 2.56 (m, 2H), 2.26 − 2.16 (m, 2H), 1.98 − 1.89 (m, 2H), 1.72 − 1.62 (m, 4H), 1.54 − 1.43 (m, 4H), 1.41 − 1.32 (m, 4H), 0.87 − 0.83 (m, 18H), 0.08 (s, 12H).
０℃の、化合物４６（８．１６ｇ、８．９９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（９０ｍＬ）溶液に、ＮａＨ（１．７９８ｇ、鉱油中に６０％ｗ／ｗ、４５．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を０℃で３０分間攪拌し、ＳＥＭ−Ｃｌ（６．３８ｍＬ、３６．０ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。反応混合物を０℃で３０分間攪拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液を滴下して加えて反応を停止させ、次いで、室温まで昇温させ、ＥｔＯＡｃ（４００ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（２×４００ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ水溶液（２００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。粗製物質をフラッシュクロマトグラフィー（２２０ｇシリカゲル；０−１００％ＥｔＯＡｃ−ヘキサンの直線状勾配）によって精製し、化合物４７（７．９８０ｇ、７６％）を白色の泡状物として得た。LC−MS m/z 1168[M＋H]＋; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.36 (s, 2H), 7.24 (s, 2H), 5.48 (d, J＝10.0 Hz, 2H), 4.69 (d, J＝9.9 Hz, 2H), 4.58 (quin, J＝5.7 Hz, 2H), 4.31 − 4.21 (m, 6H), 4.19 − 4.06 (m, 4H), 3.82 − 3.63 (m, 6H), 3.56 (dd, J＝11.9, 5.6 Hz, 2H), 2.90 − 2.81 (m, 2H), 2.33 (quin, J＝6.0 Hz, 2H), 2.07 − 1.98 (m, 2H), 1.84 − 1.75 (m, 4H), 1.62 − 1.54 (m, 4H), 1.50 − 1.40 (m, 4H), 1.01 − 0.95 (m, 4H), 0.88 (s, 18H), 0.10 (s, 12H), 0.04 (s, 18H).
室温の、化合物４７（７．９７９ｇ、６．８３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６８．３ｍＬ）中の溶液に、テトラブチルアンモニウムフルオリド（ＴＢＡＦ、１７．０８ｍＬ、ＴＨＦ中の１Ｍ溶液、１７．０８ｍｍｏｌ）を加えた。透明な黄色の溶液を、室温で１５時間攪拌した。反応混合物をＤＣＭ（４００ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（４００ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ水溶液（４００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。粗製物質をフラッシュクロマトグラフィー（２５ｇのあらかじめ詰め込まれた充填カートリッジと１２０ｇのシリカゲル；０−１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２の直線状勾配）によって精製し、化合物４８（５．３６０ｇ）の白色の泡状物を得た。後処理の水層を合わせて、ＤＣＭ（２５０ｍＬ）で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。この物質をフラッシュクロマトグラフィー（３×）（２５ｇのあらかじめ詰め込まれた充填カートリッジと８０ｇのシリカゲル；０−１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２の直線状勾配）によって精製し、さらに０．６１７ｇの化合物４８を得た。２つの単離物を合わせて、化合物４８（５．９９７ｇ、９３％）を白色の泡状物として得た。LC−MS m/z 939 [M＋H]＋; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.37 (s, 2H), 7.25 (s, 2H), 5.48 (d, J＝10.0 Hz, 2H), 4.70 (d, J＝10.0 Hz, 2H), 4.69 − 4.64 (m, 2H), 4.33 − 4.25 (m, 6H), 4.16 − 4.03 (m, 4H), 3.85 (dd, J＝12.7, 2.1 Hz, 2H), 3.78 (td, J＝9.6, 7.1 Hz, 2H), 3.72 − 3.63 (m, 4H), 2.97 (dt, J＝13.6, 5.5 Hz, 2H), 2.32 (quin, J＝6.1 Hz, 2H), 2.16 − 2.07 (m, 2H), 1.95 − 1.87 (m, 2H), 1.84 − 1.74 (m, 4H), 1.63 − 1.53 (m, 4H), 1.48 − 1.42 (m, 4H), 0.99 (ddd, J＝9.5, 6.9, 2.3 Hz, 4H), 0.08 − −0.01 (m, 18H).
実施例６−二量体ＩＩｃ−７およびＩＩｃ−８
本実施例は、図６および二量体ＩＩｃ−７およびＩＩｃ−８の合成に関する。
０℃の、化合物４８（５．９９７ｇ、６．３８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３１．９ｍＬ）およびＤＭＳＯ（３１．９ｍＬ）中の溶液に、ＮＥｔ３（８．９０ｍＬ、６３．８ｍｍｏｌ）、次いでＳＯ３−ピリジン複合体（４．０６ｇ、２５．５ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を１６時間攪拌しながら、室温まで昇温させた。反応液をＤＣＭ（４００ｍＬ）で希釈し、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（４００ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（２×４００ｍＬ）、および飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（４００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。粗製物質をフラッシュクロマトグラフィー（２５ｇのあらかじめ詰め込まれた充填カートリッジと１２０ｇのシリカゲル；０−１００％ＥｔＯＡｃ−ＣＨ２Ｃｌ２の直線状勾配）によって精製し、化合物５４（４．８２２ｇ、８１％）を白色の泡状物として得た。LC−MS m/z 935 [M＋H]＋; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.36 (s, 2H), 7.28 (s, 2H), 5.52 (d, J＝10.1 Hz, 2H), 4.76 (d, J＝10.0 Hz, 2H), 4.65 (dd, J＝9.8, 3.0 Hz, 2H), 4.36 − 4.28 (m, 4H), 4.28 − 4.20 (m, 2H), 4.18 − 4.06 (m, 4H), 3.94 − 3.86 (m, 2H), 3.78 (td, J＝9.8, 6.7 Hz, 2H), 3.69 (td, J＝9.8, 6.6 Hz, 2H), 3.58 (dd, J＝19.1, 2.9 Hz, 2H), 2.85 − 2.73 (m, 2H), 2.39 − 2.31 (m, 2H), 1.86 − 1.77 (m, 4H), 1.64 − 1.53 (m, 4H), 1.50 − 1.42 (m, 4H), 0.99 (ddd, J＝9.8, 6.6, 4.7 Hz, 4H), 0.04 (s, 18H).
−７８℃の、化合物５４（４．８２２ｇ、５．１６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１２９ｍＬ）溶液に、２，６−ルチジン（３．７２ｍＬ、３２．０ｍｍｏｌ）およびトリフルオロメタンスルホン酸無水物（Ｔｆ２Ｏ、３０．９ｍＬ、ＤＣＭ中の１Ｍ溶液、３０．９ｍｍｏｌ）を、３０分かけて滴下して加えた。淡黄色の溶液を、１．５時間かけて−２０℃に昇温させ、次いで、−２０℃でさらに１時間攪拌した。反応液を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（４００ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（２×２００ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、Ｈ２Ｏ（２００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。粗製物質をフラッシュクロマトグラフィー（２×）（２５ｇのあらかじめ詰め込まれた充填カートリッジと１２０ｇのシリカゲル；０−１００％ＥｔＯＡｃ−ヘキサンの直線状勾配）によって精製し、化合物５５（４．０１８ｇ、６５％）を橙色の泡状物として得た。1H NMR (400MHz, DMSO−d6) δ 7.38 (t, J＝2.0 Hz, 2H), 7.28 (s, 2H), 7.25 (s, 2H), 5.33 − 5.26 (m, 2H), 5.21 (d, J＝10.5 Hz, 2H), 4.91 (dd, J＝10.8, 3.5 Hz, 2H), 4.31 − 4.18 (m, 4H), 4.10 − 4.03 (m, 4H), 3.65 − 3.57 (m, 2H), 3.53 − 3.38 (m, 4H), 3.18 (ddd, J＝16.3, 11.0, 2.1 Hz, 2H), 2.26 − 2.18 (m, 2H), 1.75 − 1.66 (m, 4H), 1.55 − 1.46 (m, 4H), 1.44 − 1.35 (m, 4H), 0.85 − 0.70 (m, 4H), −0.08 (s, 18H).
化合物５５（６５ｍｇ、０．０５４ｍｍｏｌ）、（４−メトキシフェニル）ボロン酸（１８．１２ｍｇ、０．１１９ｍｍｏｌ）、および［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）（ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）、１．９８３ｍｇ、２．７１μｍｏｌ）の混合物を排気し、Ｎ２を充填し、次いで、ＴＨＦ（１０８４μＬ）およびリン酸三カリウム（５４２μＬ、Ｈ２Ｏ中の０．５Ｍ溶液、０．２７１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物をＮ２で５分間パージし、次いで、室温で１．５時間攪拌した。反応液をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（５０ｍＬ）水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。粗製物質をフラッシュクロマトグラフィー（５ｇのあらかじめ詰め込まれた充填カートリッジと２４ｇのシリカゲル；０−１００％ＥｔＯＡｃ−ヘキサンの直線状勾配）によって精製し、化合物５６ａ（５０．３ｍｇ、８３％）を白色の泡状物として得た。LC-MS m/z 1116 [M＋H]＋; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.42 (s, 2H), 7.40 − 7.36 (m, 4H), 7.34 − 7.32 (m, 2H), 7.29 (s, 2H), 6.91 − 6.87 (m, 4H), 5.53 (d, J＝10.1 Hz, 2H), 4.76 (d, J＝10.1 Hz, 2H), 4.65 (dd, J＝10.5, 3.4 Hz, 2H), 4.32 (t, J＝6.2 Hz, 4H), 4.19 − 4.06 (m, 4H), 3.98 − 3.91 (m, 2H), 3.83 (s, 6H), 3.84 − 3.77 (m, 2H), 3.71 (td, J＝9.6, 7.0 Hz, 2H), 3.15 (ddd, J＝16.1, 10.7, 2.1 Hz, 2H), 2.35 (quin, J＝5.9 Hz, 2H), 1.85 − 1.77 (m, 4H), 1.64 − 1.55 (m, 4H), 1.50 − 1.42 (m, 4H), 1.00 (ddd, J＝9.5, 7.0, 2.2 Hz, 4H), 0.04 (s, 18H).
−７８℃の、化合物５６ａ（５０．３ｍｇ、０．０４５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５０３μＬ）中の溶液に、水素化トリエチルホウ素リチウム（２２５μＬ、ＴＨＦ中の１Ｍ溶液、０．２２５ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。反応混合物を−７８℃で１時間攪拌した。反応混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（２×１０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。残留物をＣＨＣｌ３（１．０ｍＬ）およびＥｔＯＨ（１．０ｍＬ）中に取り込み、次いで、シリカゲル（０．５０ｇ）およびＨ２Ｏ（０．５０ｍＬ）を加えた。反応液を室温で３日間攪拌した。混合物を、セライト（登録商標）を介して濾過し（ＣＨＣｌ３で洗浄した）、濾液を真空で濃縮した。粗製物質を分取ＨＰＬＣ（３回注入、それぞれ２ｍＬのＤＭＳＯ中；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８ ２１．２×１００ｍｍ；１２分にわたり、０．１％ ｖ／ｖ ＴＦＡを含む、４２−９０％ＭｅＣＮ−Ｈ２Ｏの直線状勾配；２０ｍＬ／分；２２０ｎｍで検出）によって精製した。生成物を含む画分を速やかに飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１００ｍＬ）で希釈し、ＣＨＣｌ３（２×５０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮して、二量体ＩＩｃ−７（６．０ｍｇ、１５％）を橙色の固形物として得た。LC−MS m/z 823 [M＋H]＋; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.89 (d, J＝4.0 Hz, 2H), 7.54 (s, 2H), 7.40 (s, 2H), 7.37 − 7.33 (m, 4H), 6.94 − 6.89 (m, 4H), 6.88 (s, 2H), 4.47 − 4.40 (m, 2H), 4.39 − 4.25 (m, 4H), 4.22 − 4.16 (m, 2H), 4.14 − 4.05 (m, 2H), 3.84 (s, 6H), 3.59 (ddd, J＝16.3, 11.5, 1.9 Hz, 2H), 3.43 − 3.34 (m, 2H), 2.42 − 2.29 (m, 2H), 1.86 − 1.76 (m, 4H), 1.64 − 1.55 (m, 4H), 1.49 − 1.43 (m, 4H).
二量体ＩＩｃ−８は、前記の二量体ＩＩｃ−７について記載される合成方法によって、同様に合成した。二量体ＩＩｃ−８についての分析データは：LC−MS m/z 960 [M+H]+; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.88 (d, J＝4.0 Hz, 2H), 7.55 − 7.52 (m, 2H), 7.39 − 7.36 (m, 2H), 7.34 − 7.30 (m, 4H), 6.94 − 6.90 (m, 4H), 6.89 − 6.87 (m, 2H), 4.45 − 4.38 (m, 2H), 4.37 − 4.25 (m, 4H), 4.21 − 4.15 (m, 2H), 4.14 − 4.05 (m, 2H), 3.62 − 3.53 (m, 2H), 3.42 − 3.33 (m, 2H), 3.29 − 3.22 (m, 8H), 2.62 − 2.56 (m, 8H), 2.37 (s, 6H), 2.38 − 2.30 (m, 2H), 1.84 − 1.76 (m, 4H), 1.62 − 1.52 (m, 4H), 1.48 − 1.40 (m, 4H).
実施例７−二量体ＩＩｃ−９、ＩＩｃ−１０、ＩＩｃ−１１、およびＩＩｄ−１
本実施例は、図７および二量体ＩＩｃ−９、ＩＩｃ−１０、ＩＩｃ−１１およびＩＩｄ−１の合成に関する。
化合物５５（０．５１ｇ、０．４２５ｍｍｏｌ）、（４−アミノフェニル）ボロン酸（５８ｍｇ、０．４２５ｍｍｏｌ）、およびＰｃＣｌ２（ｄｐｐｆ）（１６ｍｇ、２１μｍｏｌ）の混合物を排気し、Ｎ２を充填した。ＴＨＦ（８．５ｍＬ）およびリン酸三カリウム（４．２５ｍＬ、Ｈ２Ｏ中に０．５Ｍ溶液、２．１２６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物にＮ２を５分間パージし、次いで、室温で１時間撹拌した。反応混合物をＤＣＭ（３０ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＣｌ水溶液（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。粗製物質をフラッシュクロマトグラフィー（４０ｇカラム；０−１００％ＥｔＯＡｃ−ヘキサンの直線状勾配）によって精製し、化合物５７ｂ（２０５ｍｇ、４２％）を黄色の泡状物として得た。LC−MS m/z 1142 [M＋H]＋.
化合物５７ｂ（７０ｍｇ、０．０６１ｍｍｏｌ）、（４−メトキシフェニル）ボロン酸（１２．１ｍｇ、０．０８０ｍｍｏｌ）、およびＰｃＣｌ２（ｄｐｐｆ）（２．２４ｍｇ、３．１μｍｏｌ）の混合物を排気し、Ｎ２を充填した。ＴＨＦ（１２２６μＬ）およびリン酸三カリウム（６１３μＬ、Ｈ２Ｏ中の０．５Ｍ溶液、０．３０６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物にＮ２を５分間パージし、次いで、室温で３０分間撹拌した。反応液をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＣｌ水溶液（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。粗製物質をフラッシュクロマトグラフィー（４０ｇカラム；０−１００％ＥｔＯＡｃ−ヘキサンの直線状勾配）によって精製し、化合物５８ａ（６０ｍｇ、８９％）を黄色の泡状物として得た。LC−MS m/z 1100.8 [M＋H]＋.
以下の化合物５８ｄから化合物５７ｂの合成によって説明されるように、ボロン酸を用いる代わりに、グリニャール試薬を用いることもできる：−３０℃の、化合物５７ｂ（１１２ｍｇ、０．０９８ｍｍｏｌ）および鉄（ＩＩＩ）アセチルアセトナート（３．４６ｍｇ、９．８０μｍｏｌ）の、ＴＨＦ（１３３４μＬ）およびＮＭＰ（６６．７μＬ）の溶液に、メチルマグネシウムブロミド（１３１μＬ、Ｅｔ２Ｏ中の３．０Ｍ溶液、０．３９２ｍｍｏｌ）をゆっくりと滴下して加えた。反応液を−３０℃で１０分間撹拌し、次いで飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（３０ｍＬ）を加えて反応を停止させ、ＥｔＯＡｃ（２×３０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、飽和ＮａＣｌ水溶液（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて、濾過し、真空で濃縮した。粗製物質をフラッシュクロマトグラフィー（５ｇのあらかじめ詰め込まれた充填カートリッジと１２ｇのシリカゲル；０−１００％ＥｔＯＡｃ−ＣＨ２Ｃｌ２の直線状勾配）で精製し、化合物５８ｄ（５０ｍｇ、５１％）を黄色の泡状物として得た。LC−MS m/z 1008 [M＋H]＋; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.42 − 7.38 (m, 2H), 7.29 − 7.24 (m, 5H), 6.70 − 6.64 (m, 3H), 5.55 − 5.48 (m, 2H), 4.77 − 4.71 (m, 2H), 4.62 (dd, J＝10.6, 3.2 Hz, 1H), 4.48 (dd, J＝10.4, 3.3 Hz, 1H), 4.35 − 4.27 (m, 4H), 4.18 − 4.05 (m, 4H), 3.95 − 3.88 (m, 1H), 3.84 − 3.64 (m, 6H), 3.49 − 3.42 (m, 1H), 3.12 (ddd, J＝16.1, 10.5, 2.0 Hz, 1H), 2.83 − 2.72 (m, 1H), 2.34 (quin, J＝6.0 Hz, 2H), 1.84 (d, J＝1.1 Hz, 3H), 1.83 − 1.76 (m, 4H), 1.63 − 1.56 (m, 4H), 1.49 − 1.43 (m, 4H), 0.99 (ddd, J＝9.6, 6.9, 2.4 Hz, 4H), 0.04 (s, 18H).
−７８℃の、粗製化合物５８ａ（３０ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１ｍＬ）中の溶液に、水素化トリエチルホウ素リチウム（２７３μＬ、ＴＨＦ中の１Ｍ溶液、０．２７３ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。反応液を−７８℃で１時間撹拌した。反応液をブラインで希釈し、ＥｔＯＡｃ（３×）で抽出した。有機層を合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。粗製物質をＥｔＯＨ／ＴＨＦ（１：１、２ｍＬ）中に取り込み、ギ酸水溶液（０．０５５、１ｍＬ）を加えた。得られた溶液を室温で２時間撹拌し、その後、ＮａＨＣＯ３水溶液で中性にした。得られた混合物をクロロホルム（３×）で抽出した。有機層をあわせてＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。粗製生成物を次いで、フラッシュクロマトグラフィー（１２ｇカラム、０−１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）によって精製し、二量体ＩＩｃ−１１（１１ｍｇ、４５％）を得た。LC−MS m/z 808.4 [M＋H]＋.
二量体ＩＩｃ−９、ＩＩｃ−１０、およびＩＩｄ−１は、前記の二量体ＩＩｃ−１１について記載される合成方法に従って、同様に合成した。これらの分析データを以下に示す。
二量体ＩＩｃ−９： LC−MS m/z 876 [M＋H]＋; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.90 − 7.86 (m, 2H), 7.56 − 7.52 (m, 2H), 7.39 − 7.36 (m, 1H), 7.35 − 7.33 (m, 1H), 7.31 (d, J＝8.6 Hz, 2H), 7.22 (d, J＝8.6 Hz, 2H), 6.92 (d, J＝9.0 Hz, 2H), 6.88 (s, 2H), 6.68 (d, J＝8.6 Hz, 2H), 4.45 − 4.37 (m, 2H), 4.36 − 4.25 (m, 4H), 4.22 − 4.15 (m, 2H), 4.13 − 4.06 (m, 2H), 3.79 − 3.69 (m, 2H), 3.63 − 3.52 (m, 2H), 3.41 − 3.32 (m, 2H), 3.31 − 3.23 (m, 4H), 2.65 − 2.57 (m, 4H), 2.38 (s, 3H), 2.41 − 2.30 (m, 2H), 1.84 − 1.76 (m, 4H), 1.62 − 1.54 (m, 4H), 1.49 − 1.40 (m, 4H).
二量体ＩＩｃ−１０： LC−MS m/z 946 [M＋H]＋; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.88 (d, J＝4.0 Hz, 2H), 7.56 − 7.51 (m, 2H), 7.39 − 7.36 (m, 2H), 7.35 − 7.29 (m, 4H), 6.94 − 6.90 (m, 4H), 6.89 − 6.86 (m, 2H), 4.45 − 4.38 (m, 2H), 4.37 − 4.24 (m, 4H), 4.22 − 4.15 (m, 2H), 4.13 − 4.05 (m, 2H), 3.62 − 3.52 (m, 2H), 3.42 − 3.33 (m, 2H), 3.29 − 3.22 (m, 4H), 3.22 − 3.15 (m, 4H), 3.07 − 3.02 (m, 4H), 2.61 − 2.55 (m, 4H), 2.39 − 2.29 (m, 6H), 1.84 − 1.76 (m, 4H), 1.64 − 1.51 (m, 4H), 1.48 − 1.40 (m, 4H).
二量体ＩＩｄ−１： LC−MS 716 [M＋H]＋; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.87 (d, J＝4.0 Hz, 1H), 7.80 (d, J＝4.0 Hz, 1H), 7.55 − 7.50 (m, 2H), 7.35 − 7.32 (m, 1H), 7.24 − 7.20 (m, 2H), 6.88 − 6.84 (m, 2H), 6.76 − 6.73 (m, 1H), 6.70 − 6.66 (m, 2H), 4.44 − 4.36 (m, 1H), 4.35 − 4.22 (m, 5H), 4.22 − 4.14 (m, 2H), 4.13 − 4.05 (m, 2H), 3.84 − 3.69 (m, 2H), 3.61 − 3.48 (m, 1H), 3.40 − 3.31 (m, 1H), 3.23 − 3.11 (m, 1H), 3.00 − 2.91 (m, 1H), 2.34 (quin, J＝6.1 Hz, 2H), 1.84 (d, J＝1.1 Hz, 3H), 1.82 − 1.75 (m, 4H), 1.63 − 1.53 (m, 4H), 1.48 − 1.40 (m, 4H).
実施例８−二量体ＩＩｂ−６
本実施例は、図８および二量体ＩＩｂ−６の合成に関する。
室温の、化合物４４（１．００６ｇ、１．８３４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１２．２３ｍＬ）溶液に、Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）ウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ、１．７４３ｇ、４．５９ｍｍｏｌ）、次いで（Ｓ）−エチル ７−ニトロ−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３−カルボキシレート４４ｂ（０．４５９ｇ、１．８３４ｍｍｏｌ）を少量ずつ加え、次いで、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ、１．９１７ｍＬ、１１．００ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。得られた透明な褐色の溶液を室温で３０分間撹拌し、次いで、（Ｓ）−ベンジル １，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３−カルボキシレート ４−メチルベンゼンスルホネート４４ｃ（０．８０６ｇ、１．８３４ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を室温でさらに１時間撹拌した。反応混合物を、０℃で、Ｈ２Ｏ（１２５ｍＬ）の撹拌フラスコにゆっくりと加え、得られた析出物を真空濾過によって回収した（Ｈ２Ｏで洗浄した）。固形物をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）に溶解させ、飽和ＮａＣｌ水溶液（１５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。粗製物質をフラッシュクロマトグラフィー（２５ｇのあらかじめ詰め込まれた充填カートリッジと２２０ｇのＲｅｄｉＳｅｐ Ｇｏｌｄ シリカゲル；０−１００％ＥｔＯＡｃ−ヘキサンの直線状勾配）で精製し、化合物６７（５３８ｍｇ、２９％）を褐色の泡状物として得た。LC−MS m/z 1030 [M＋H]＋.
室温の、化合物６７（５３８ｍｇ、０．５２２ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（３２６４μＬ）およびＴＨＦ（３２６４μＬ）中の溶液に、ＮＨ４Ｃｌ（５５９ｍｇ、１０．４５ｍｍｏｌ）、亜鉛末（６８３ｍｇ、１０．４５ｍｍｏｌ）、およびＨＯＡｃ（１滴）を加えた。得られた懸濁液を６０℃で１８時間撹拌した。反応液を室温に冷却し、セライト（登録商標）を介して濾過した（ＥｔＯＡｃ、ＤＣＭ、ＭｅＯＨ、およびＤＣＭ中の％５ ｖ／ｖ Ｅｔ３Ｎで洗浄した）。濾液を真空で濃縮した。粗製物質をＤＣＭ（２００ｍＬ）中に取り込み、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２００ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮して、化合物６８（２５０ｍｇ、６１％）を橙色の固形物として得た。LC−MS m/z 786 [M＋H]＋.
０℃の化合物６８（２５０ｍｇ、０．３１８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３１８１μＬ）溶液に、ＮａＨ（６３．６ｍｇ、鉱油中の６０％ ｗ／ｗ、１．５９１ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を０℃で３０分間撹拌し、次いでＳＥＭ−Ｃｌ（２２６μＬ、１．２７２ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を０℃で３０分間撹拌した。反応液に飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液を加えて反応を停止させ、次いで、室温まで昇温させ、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ水溶液（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。粗製物質をフラッシュクロマトグラフィー（５ｇのあらかじめ詰め込まれた充填カートリッジと４０ｇのシリカゲル；０−１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２の直線状勾配）によって精製し、化合物６９（２８９ｍｇ、８７％）を黄色の泡状物として得た。LC−MS m/z 1047 [M＋H]＋.
−７８℃の化合物６９（４３．９ｍｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１３９８μＬ）溶液に、水素化トリエチルホウ素リチウム（２１０μＬ、ＴＨＦ中の１Ｍ溶液、０．２１０ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。反応液を−７８℃で１．５時間撹拌した。反応液をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、ＣＨＣｌ３（２×１０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。残留物をＣＨＣｌ３（１ｍＬ）およびＥｔＯＨ（１ｍＬ）中に取り込み、次いで、シリカゲル（０．５ｇ）およびＨ２Ｏ（０．５ｍＬ）を加えた。反応液を室温で２日間撹拌した。混合物を、セライト（登録商標）を介して濾過し（アセトン、ＣＨＣｌ３、および１０％ＭｅＯＨ−ＣＨＣｌ３で洗浄した）、濾液を真空で濃縮した。この物質をＣＨＣｌ３およびＨ２Ｏ中に取り込み、層を分離した。水層をＣＨＣｌ３で抽出して、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。粗製物質を分取ＨＰＬＣ（２回注入、それぞれ、２ｍＬの１：１ ＭｅＣＮ−ＤＭＳＯ中；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８ ２１．２×１００ｍｍ；１２分にわたり、０．１％ ｖ／ｖ ＴＦＡを含む、２６−９０％ ＭｅＣＮ−Ｈ２Ｏの直線状勾配；２０ｍＬ／分；２２０ｎｍでの検出）によって精製した。生成物を含む画分を、速やかに飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１００ｍＬ）で希釈し、ＣＨＣｌ３（２×５０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて、濾過し、真空で濃縮して、二量体ＩＩｂ−６（６．６ｍｇ、１９％）を灰白色の固形物として得た。LC−MS m/z 754 [M＋H]＋; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.54 − 7.52 (m, 2H), 7.49 − 7.45 (m, 2H), 7.39 − 7.29 (m, 4H), 7.13 (d, J＝8.1 Hz, 1H), 6.86 − 6.83 (m, 2H), 6.66 − 6.62 (m, 2H), 5.01 (d, J＝15.6 Hz, 1H), 4.90 (d, J＝15.6 Hz, 1H), 4.56 (d, J＝15.6 Hz, 1H), 4.44 (d, J＝15.4 Hz, 1H), 4.35 − 4.23 (m, 4H), 4.22 − 4.15 (m, 2H), 4.08 (dt, J＝9.6, 4.9 Hz, 2H), 3.98 − 3.93 (m, 1H), 3.92 − 3.87 (m, 1H), 3.78 − 3.65 (m, 2H), 3.31 − 3.24 (m, 1H), 3.20 − 3.12 (m, 2H), 3.05 − 2.99 (m, 1H), 2.33 (quin, J＝6.1 Hz, 2H), 1.84 − 1.74 (m, 4H), 1.62 − 1.50 (m, 4H), 1.48 − 1.39 (m, 4H).
実施例９−二量体ＩＩｄ−２
本実施例は、図９および二量体ＩＩｄ−２の合成に関する。
図９に示す反応スキームに従い、二量体ＩＩｄ−２は、前記の実施例の方法と同様に合成した。LC−MS m/z 704 [M＋H]＋.
実施例１０−二量体ＩＩｄ−３およびＩＩｄ−４
本実施例は、図１０および二量体ＩＩｄ−３およびＩＩｄ−４の合成に関する。
−７８℃の、二量体ＩＩｃ−８（４６．２ｍｇ、０．０４８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４８２μＬ）中の懸濁液に、ＬｉＢＨＥｔ３（４８．２μＬ、ＴＨＦ中の１Ｍ溶液、０．０４８ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。反応混合物を−７８℃で１５分間撹拌した。次いで、Ｈ２Ｏを加えて反応を停止させ、室温に昇温させ、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２５ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２５ｍＬ）で希釈し、１０％ＭｅＯＨ−ＣＨＣｌ３（２×５０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。粗製物質を分取ＨＰＬＣ（ＤＭＳＯ中１ｍＬの４回の注入；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８ ２１．２×１００ｍｍ；２５分にわたり、０−５０％ＭｅＣＮ−Ｈ２Ｏ ｗ／０．０５％ ｖ／ｖ ＨＣＯ２Ｈの直線状勾配；２０ｍＬ／分；２２０ｎｍでの検出）で精製した。モノおよびビス還元生成物を含む画分を、別々に凍結乾燥させて、次いで分取ＨＰＬＣによって再精製し、二量体ＩＩｄ−３（２．７ｍｇ、６％）を淡黄色の固形物として、二量体ＩＩｄ−４（１．２４ｍｇ、３％）もまた淡黄色の固形物として得た。これらの分析データを以下に示す。
二量体IId−3: LC−MS m/z 961 [M＋H]＋; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.87 (d, J＝4.0 Hz, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.54 − 7.52 (m, 1H), 7.52 − 7.50 (m, 1H), 7.39 − 7.37 (m, 1H), 7.34 − 7.29 (m, 4H), 6.94 − 6.86 (m, 5H), 6.13 (s, 1H), 4.41 (dt, J＝11.1, 4.7 Hz, 1H), 4.37 − 4.22 (m, 5H), 4.18 (dt, J＝9.8, 5.1 Hz, 1H), 4.13 − 3.96 (m, 3H), 3.62 − 3.52 (m, 3H), 3.41 − 3.32 (m, 2H), 3.31 − 3.24 (m, 8H), 2.75 − 2.69 (m, 1H), 2.70 − 2.64 (m, 8H), 2.41 (s, 6H), 2.35 − 2.28 (m, 2H), 1.84 − 1.70 (m, 4H), 1.62 − 1.51 (m, 4H), 1.47 − 1.38 (m, 4H).
二量体IId−4: LC−MS m/z 963 [M＋H]＋; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.56 (s, 2H), 7.51 − 7.50 (m, 2H), 7.30 − 7.26 (m, 4H), 6.90 (d, J＝8.8 Hz, 4H), 6.10 (s, 2H), 4.36 − 4.29 (m, 2H), 4.24 − 4.17 (m, 4H), 4.10 − 3.97 (m, 4H), 3.59 − 3.50 (m, 4H), 3.40 − 3.32 (m, 2H), 3.27 − 3.21 (m, 8H), 2.72 (dd, J＝16.0, 3.4 Hz, 2H), 2.62 − 2.55 (m, 8H), 2.36 (s, 6H), 2.34 − 2.26 (m, 2H), 1.77 − 1.68 (m, 4H), 1.64 − 1.50 (m, 4H), 1.43 − 1.36 (m, 4H).
実施例１１−二量体−リンカーＩＩＩａ−１
本実施例は、図１１および二量体−リンカーＩＩＩａ−１の合成に関する。
０℃の、ジペプチド６９ａ（７０．４ｍｇ、０．１４２ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（５３．９ｍｇ、０．１４２ｍｍｏｌ）の混合物に、ＤＭＦ（９４５μＬ）を加えた。混合物を０℃で１０分間撹拌し、２，６−ルチジン（２２．０２μＬ、０．１８９ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を、０℃で、バイアル中の化合物６９（９８．９ｍｇ、０．０９５ｍｍｏｌ）に滴下して加えた。反応液を室温まで昇温させて、２２時間撹拌した。次いで、これを０℃のバス内にある、Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）の入った撹拌フラスコに滴下して加えた。析出物を真空濾過によって回収し（Ｈ２Ｏで洗浄した）、ＤＣＭ（５０ｍＬ）中に取り込み、Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）で洗浄した。水層をＤＣＭ（５０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。粗製物質をフラッシュクロマトグラフィー（５ｇのあらかじめ詰め込まれた充填カートリッジと２４ｇのシリカゲル；０−１０％ＭｅＯＨ−ＤＣＭの直線状勾配）で精製した。画分を混合して、フラッシュクロマトグラフィー（５ｇのあらかじめ詰め込まれた充填カートリッジと２４ｇのＲｅｄｉＳｅｐ Ｇｏｌｄ シリカゲル；０−１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２の直線状勾配）で再精製し、２つのカラムの生成物を合わせて、化合物７０（６８．８ｍｇ、４８％）を得た。LC−MS m/z 1525 [M＋H]＋.
室温の、化合物７０（３９．９ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０４７μＬ）中の溶液に、シリカ担持ピペラジン（５７５ｍｇ、０．９１ｍｍｏｌ／ｇ充填、０．５２３ｍｍｏｌ）を加えた充填。懸濁液を室温で１８時間撹拌し、次いで濾過し（〜２ｍＬのＤＭＦで洗浄した）、濾液を真空で濃縮した。粗製の化合物７１を、他のバッチ（０．０１９ｍｍｏｌスケール）からの粗製の化合物７１と合わせて、さらに精製を行うことなく用いた。LC−MS m/z 1303 [M＋H]＋.
−７８℃の、粗製化合物７１のＴＨＦ（１３５６μＬ）溶液に、ＬｉＢＨＥｔ３（２０３μＬ、ＴＨＦ中の１Ｍ溶液、０．２０３ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。反応液を−７８℃で１．５時間撹拌し、次いで飽和ＮａＣｌ水溶液（５０ｍＬ）で希釈して、ＤＣＭ（２×５０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。残留物をＣＨＣｌ３（１ｍＬ）およびＥｔＯＨ（１ｍＬ）中に取り込み、次いで、シリカゲル（０．５ｇ）およびＨ２Ｏ（０．５ｍＬ）を加えた。反応混合物を室温で２日間撹拌し、次いで、セライト（登録商標）を介して濾過し（１０％ＥｔＯＨ−ＣＨＣｌ３で洗浄した）、濾液を真空で濃縮した。粗製精製物を分取ＨＰＬＣ（２回注射、それぞれ２ｍＬのＤＭＳＯ中；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８ ２１．２×１００ｍｍ；１２分にわたり、０．１％ ｖ／ｖ ＴＦＡを含む、１８−９０％ＭｅＣＮ−Ｈ２Ｏの直線状勾配；２０ｍＬ／分；２２０ｎｍでの検出）で精製した。生成物を含む画分を、重力下で、ＰＬ−ＨＣＯ３ ＭＰ樹脂を充填したＳＰＥカートリッジ（Ａｇｉｌｅｎｔ、５００ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ／ｇ充填）（３ｍＬの１：１ ＭｅＣＮ−Ｈ２Ｏで洗浄)を介して濾過し、溶出液を凍結乾燥して、化合物７２（４．９ｍｇ、１２％）を白色の固形物として得た。LC−MS m/z 1011 [M＋H]＋.
室温の、化合物７２（４．９ｍｇ、４．８５μｍｏｌ）のＤＭＳＯ（１２９μＬ）中の溶液に、化合物７１ａ（６．６９ｍｇ、９．７０μｍｏｌ）のＤＭＳＯ（６４．７μＬ）溶液、次いで、２，６−ルチジン（１．１３０μＬ、９．７０μｍｏｌ）を加えた。透明な無色の溶液を室温で４時間撹拌した。反応液を分取ＨＰＬＣ（１回の注入；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８ ２１．２×１００ｍｍ；１２分にわたり、０．１％ ｖ／ｖ ＴＦＡを含む、１８−９０％ＭｅＣＮ−Ｈ２Ｏの直線状勾配；２０ｍＬ／分；２２０ｎｍ検出）で精製した。生成物を含む画分を、重力下で、ＰＬ−ＨＣＯ３ ＭＰ樹脂を充填したＳＰＥカートリッジ（Ａｇｉｌｅｎｔ、２００ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ／ｇ充填）（２ｍＬの１：１ ＭｅＣＮ−Ｈ２Ｏで洗浄）を介して濾過し、溶出液を凍結乾燥して、二量体−リンカー化合物ＩＩＩａ−１（２．４ｍｇ、３１％）を白色の固形物として得た。LC−MS m/z 1585 [M＋H]＋.
実施例１２−二量体ＩＩＩａ−２、ＩＩＩａ−３、およびＩＩＩａ−４
本実施例は、図１２および二量体−リンカーＩＩＩａ−２、ＩＩＩａ−３、およびＩＩＩａ−４の合成に関する。
室温の、二量体ＩＩｂ−６（７ｍｇ、９．２９μｍｏｌ）のＤＭＦ（９３μＬ）中の溶液に、化合物７２ａ（１２．４７ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（９３μＬ）溶液、次いで、ＤＩＥＡ（４．８５μＬ、０．０２８ｍｍｏｌ）を加えた。透明な橙色の溶液を室温で１５分間撹拌し；次いで、１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（１．５１７ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で２９時間撹拌し、次いで、ＤＭＳＯで希釈し、分取ＨＰＬＣで精製した（１回の注入；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８ ２１．２×１００ｍｍ；１５分にわたり、０．１％ ｖ／ｖ ＴＦＡを含む、１８−９０％ＭｅＣＮ−Ｈ２Ｏの直線状勾配；２０ｍＬ／分；２２０ｎｍでの検出）。生成物を含む画分を、重力下で、ＰＬ−ＨＣＯ３ ＭＰ樹脂を充填したＳＰＥカートリッジ（Ａｇｉｌｅｎｔ、２００ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ／ｇ充填）（２ｍＬの１：１ ＭｅＣＮ−Ｈ２Ｏで洗浄）を介して濾過し、溶出液を凍結乾燥して、二量体−リンカーＩＩＩａ−２（４．４３ｍｇ、２８％）を白色の固形物として得た。LC−MS m/z 1734 [M＋H]＋.
二量体−リンカーＩＩＩａ−３およびＩＩＩａ−４を同様に合成した。二量体−リンカーＩＩＩａ−３: LC−MS m/z 1684 [M＋H]＋. 二量体−リンカーＩＩＩａ−４: LC−MS m/z 1925 [M＋H]＋.
実施例１３−二量体−リンカーＩＩＩａ−１１
本実施例は、図１３Ａ−１３Ｂおよび二量体−リンカーＩＩＩａ−１１の合成に関する。
０℃の、化合物４４ｅ（２．０６５ｇ、８．０９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２５．７ｍＬ）溶液に、化合物４４（２．１１４ｇ、３．８５ｍｍｏｌ）、次いで、ＤＩＥＡ（５．３７ｍＬ、３０．８ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（３．２２ｇ、８．４８ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。反応液を０℃で５分間、および室温で１時間撹拌した。次いで、これをゆっくりと、０℃のバス内にある、Ｈ２Ｏ（２００ｍＬ）の入った攪拌フラスコに加えた。得られた沈殿を真空濾過（Ｈ２Ｏ洗浄）によって回収し、ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）中に溶解させ、飽和ＮａＣｌ水溶液（２００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。粗製物質をフラッシュクロマトグラフィー（２５ｇのあらかじめ詰め込まれた充填カートリッジと４０ｇのＲｅｄｉＳｅｐ Ｇｏｌｄ シリカゲル；０−１００％ＥｔＯＡｃ−ＣＨ２Ｃｌ２の直線状勾配）で精製し、化合物７６（３．１ｇ、定量的）を橙色のフィルム状物質として得た。LC−MS m/z 795 [M＋H]＋.
０℃の、化合物７６（３．１ｇ、３．９０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３９．０ｍＬ）溶液に、ＬｉＢＨ４（５．８５ｍＬ、ＴＨＦ中の２．０Ｍ溶液、１１．７０ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。反応液を０℃で３０分間攪拌し、次いで室温まで昇温させ、さらに３時間攪拌した。反応液を０℃に冷却し、１Ｍ ＨＣｌ水溶液（１００ｍＬ）を加えて反応を停止させ、Ｈ２Ｏ（４００ｍＬ）で希釈し、１０％ＭｅＯＨ−ＥｔＯＡｃ（４００ｍＬ）およびＥｔＯＡｃ（４００ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、飽和ＮａＣｌ水溶液（２００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。粗生成物７７をさらに精製を行うことなく用いた。LC−MS m/z 739 [M＋H]＋.
０℃の、粗精製物７７のＤＣＭ（７７ｍＬ）に、ＮＥｔ３（１．６０７ｍＬ、１１．５３ｍｍｏｌ）、次いで塩化アセチル（０．７１３ｍＬ、９．９９ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を室温に昇温させて、２０時間攪拌し、ＤＣＭ（４００ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（４００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。粗製物質をフラッシュクロマトグラフィー（２５ｇのあらかじめ詰め込まれた充填カートリッジと８０ｇのシリカゲル；０−１００％ＥｔＯＡｃ−ヘキサンの直線状勾配）で精製し、化合物７８（１．５９ｇ、５０％）を白色の泡状物として得た。LC−MS m/z 823 [M＋H]＋.
室温の、化合物７８（１．５９ｇ、１．９３２ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（６１．８ｍＬ）中の溶液に、ＡｃＯＨ（１５．４６ｍＬ）、次いで、亜鉛末（３．７９ｇ、５８．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を還流して１時間攪拌し、次いで、室温に冷却し、セライト（登録商標）を介して濾過した（４００ｍＬのＤＣＭで洗浄した）。濾液をＨ２Ｏ（４００ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（４００ｍＬ）、およびＨ２Ｏ（４００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて、濾過し、真空で濃縮した。粗製物質をフラッシュクロマトグラフィー（２．５ｇのあらかじめ詰め込まれた充填カートリッジと４０ｇのシリカゲル；０−１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２の直線状勾配）で精製した。画分を混合して、フラッシュクロマトグラフィー（２．５ｇのあらかじめ詰め込まれた充填カートリッジと１２ｇのシリカゲル；０−１０％ＭｅＯＨ−ＤＣＭの直線状勾配）で再精製し、両方のカラムからの生成物を合わせて、化合物７９（１．１６２ｇ、７９％）を白色の泡状物として得た。LC−MS m/z 763 [M＋H]＋; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 6.80 (s, 2H), 6.27 (s, 2H), 5.04 − 5.00 (m, 2H), 4.99 − 4.95 (m, 2H), 4.86 − 4.75 (m, 2H), 4.37 (br s, 4H), 4.24 − 4.08 (m, 12H), 3.94 (t, J＝5.5 Hz, 4H), 2.83 − 2.72 (m, 2H), 2.50 − 2.42 (m, 2H), 2.31 (quin, J＝6.4 Hz, 2H), 2.04 (s, 6H), 1.76 − 1.65 (m, 4H), 1.61 − 1.52 (m, 4H), 1.44 − 1.37 (m, 4H).
０℃のトリホスゲン（１１７ｍｇ、０．３９６ｍｍｏｌ）およびＮＥｔ３（４８７μＬ、３．４９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３６９５μＬ）溶液に、化合物７９（４４４ｍｇ、０．５８２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３６９５μＬ）溶液を滴下して加えた。濁った混合物を０℃で１０分間攪拌し、次いで、化合物７９ａ（２３１ｍｇ、０．６１１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５５４３μＬ）中の懸濁液を滴下して加え、次いで、アリルアルコール（４１．７μＬ、０．６１１ｍｍｏｌ）を加えた。懸濁液を０℃で１時間攪拌し、次いで、室温まで昇温させて５時間攪拌した。反応液をＨ２Ｏ（１２５ｍＬ）で希釈し、ＣＨ２Ｃｌ２（２×１２５ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。粗製物質をフラッシュクロマトグラフィー（５ｇのあらかじめ詰め込まれた充填カートリッジと８０ｇのＲｅｄｉＳｅｐ Ｇｏｌｄ シリカゲル；０−１０％ＭｅＯＨ−ＤＣＭの直線状勾配）で精製し、化合物８０（２１４ｍｇ、２９％）を灰白色の固形物として得た。LC−MS m/z 1250 [M＋H]＋; 1H NMR (400MHz, DMSO−d6) δ 9.98 (s, 1H), 9.13 − 9.02 (m, 2H), 8.14 (d, J＝6.8 Hz, 1H), 7.58 (d, J＝8.6 Hz, 2H), 7.31 (d, J＝8.7 Hz, 2H), 7.23 (d, J＝8.7 Hz, 1H), 7.20 − 7.12 (m, 2H), 6.99 − 6.89 (m, 2H), 5.98 − 5.85 (m, 2H), 5.36 − 5.26 (m, 2H), 5.22 − 5.13 (m, 2H), 5.06 − 4.93 (m, 6H), 4.62 − 4.50 (m, 4H), 4.50 − 4.46 (m, 2H), 4.45 − 4.38 (m, 1H), 4.22 − 3.80 (m, 17H), 2.78 − 2.67 (m, 2H), 2.44 − 2.35 (m, 2H), 2.21 − 2.13 (m, 2H), 2.04 − 1.90 (m, 7H), 1.69 − 1.62 (m, 4H), 1.54 − 1.46 (m, 4H), 1.40 − 1.35 (m, 4H), 1.30 (d, J＝7.0 Hz, 3H), 0.88 (d, J＝6.8 Hz, 3H), 0.83 (d, J＝6.6 Hz, 3H).
室温の、化合物８０（２１３ｍｇ、０．１７０ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（３０９７μＬ）溶液に、Ｈ２Ｏ（３１０μＬ）およびＫ２ＣＯ３（１１８ｍｇ、０．８５２ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を室温で１時間攪拌し、Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、飽和ＮａＣｌ水溶液（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。粗製物質をフラッシュクロマトグラフィー（５ｇのあらかじめ詰め込まれた充填カートリッジと４０ｇのシリカゲル；０−１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２の直線状勾配）で精製し、化合物８１（１５９ｍｇ、８０％）を白色の固形物として得た。LC−MS m/z 1166 [M＋H]＋; 1H NMR (400MHz, DMSO−d6) δ 9.99 (s, 1H), 9.17 − 8.86 (m, 2H), 8.15 (d, J＝7.0 Hz, 1H), 7.58 (d, J＝8.6 Hz, 2H), 7.32 (d, J＝8.7 Hz, 2H), 7.27 − 7.16 (m, 3H), 7.03 − 6.96 (m, 2H), 5.98 − 5.85 (m, 2H), 5.35 − 5.26 (m, 2H), 5.23 − 5.14 (m, 2H), 5.07 − 4.76 (m, 8H), 4.56 − 4.52 (m, 2H), 4.50 − 4.46 (m, 2H), 4.45 − 4.39 (m, 1H), 4.37 − 4.30 (m, 1H), 4.18 − 4.11 (m, 4H), 4.08 − 3.80 (m, 10H), 3.57 − 3.46 (m, 1H), 3.39 − 3.26 (m, 2H), 3.22 − 3.03 (m, 1H), 2.65 − 2.46 (m, 4H), 2.21 − 2.12 (m, 2H), 2.03 − 1.93 (m, 1H), 1.70 − 1.61 (m, 4H), 1.55 − 1.46 (m, 4H), 1.42 − 1.34 (m, 4H), 1.30 (d, J＝7.0 Hz, 3H), 0.88 (d, J＝6.8 Hz, 3H), 0.84 (d, J＝6.7 Hz, 3H).
室温の、化合物８１（１５７ｍｇ、０．１３５ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（３３６５μＬ）溶液に、デス−マーチンペルヨージナン（ＤＭＰ、１２０ｍｇ、０．２８３ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を室温で４時間攪拌し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５０ｍＬ）で希釈し、ＣＨ２Ｃｌ２（２×５０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。粗製物質をフラッシュクロマトグラフィー（５ｇのあらかじめ詰め込まれた充填カートリッジと４０ｇのシリカゲル；０−１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２の直線状勾配）で精製した。画分を合わせて、フラッシュクロマトグラフィー（５ｇのあらかじめ詰め込まれた充填カートリッジと４０ｇのＲｅｄｉＳｅｐ シリカゲル；０−１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２の直線状勾配）で再精製し、両方のカラムからの生成物を合わせて、化合物８２（１１５ｍｇ、７４％）を白色の固形物として得た。LC−MS m/z 1162 [M＋H]＋.
室温の化合物８２（９６．５ｍｇ、０．０８３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１６６１μＬ）中の懸濁液に、モルホリン（３６．５μＬ、０．４１５ｍｍｏｌ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（４．８０ｍｇ、４．１５μｍｏｌ）を加えた。反応液を室温で２時間攪拌し、Ｎ２気流の下で濃縮し、フラッシュクロマトグラフィー（１２ｇシリカゲル；０−１０％ＭｅＯＨ−ＤＣＭの直線状勾配）で精製した。画分を合わせて、フラッシュクロマトグラフィー（１２ｇシリカゲル；０−１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２の直線状勾配）で精製し、両方のカラムからの生成物を合わせて、化合物８３（５４．９ｍｇ、６８％）を得た。LC−MS m/z 976 [M＋H]＋.
室温の、化合物８３（４２．３ｍｇ、０．０４３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（８６７μＬ）溶液に、２，６−ルチジン（１５．１４μＬ、０．１３０ｍｍｏｌ）、次いで化合物８３ａ（２０．０４ｍｇ、０．０６５ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を室温で２日間攪拌し、ＤＭＳＯで希釈し、分取ＨＰＬＣ（５回の１ｍＬの注入；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８ ２１．２×１００ｍｍ；２５分にわたり、０．０５％ ｖ／ｖ ＨＣＯ２Ｈを含む、２０−８０％ＭｅＣＮ−Ｈ２Ｏの直線状勾配；２０ｍＬ／分；２２０ｎｍでの検出）で精製した。生成物を含む画分を凍結乾燥して、フラッシュクロマトグラフィー（１２ｇ ＲｅｄｉＳｅｐ Ｇｏｌｄ シリカゲル；０−２０％ＭｅＯＨ−ＤＣＭの直線状勾配）で精製し、二量体−リンカーＩＩＩａ−１１（３．６７ｍｇ、７％）を灰白色の固形物として得た。LC−MS m/z 1170 [M＋H]＋.
実施例１４−二量体−リンカーＩＩＩａ−５
本実施例は図１４および二量体−リンカーＩＩＩａ−５の合成に関する。
化合物５７ａ（８２．５ｍｇ、０．０６７ｍｍｏｌ）、化合物８４（４５．３ｍｇ、０．０７４ｍｍｏｌ）、ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）（２．４６３ｍｇ、３．３７μｍｏｌ）、およびＮａ２ＣＯ３（３５．７ｍｇ、０．３３７ｍｍｏｌ）の混合物を排気し、Ｎ２を充填した。ＴＨＦ（８９８μＬ）およびＨ２Ｏ（４４９μＬ）を加えた。混合物をＮ２で５分間パージし、室温で３０分間攪拌した。反応混合物をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（２×５０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。粗製物質をフラッシュクロマトグラフィー（５ｇのあらかじめ詰め込まれた充填カートリッジと２４ｇのシリカゲル；０−２０％ＭｅＯＨ−ＤＣＭの直線状勾配）で精製し、化合物８５（９８．９ｍｇ、９４％）を橙色のフィルム状物質として得た。LC−MS m/z 1561 [M＋H]＋.
−７８℃の、化合物８５（９８．９ｍｇ、０．０６３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２１１２μＬ）溶液に、ＬｉＢＨＥｔ３（３１７μＬ、ＴＨＦ中の１Ｍ溶液、０．３１７ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。反応混合物を−７８℃で１時間攪拌し、Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈し、ＣＨＣｌ３（５０ｍＬ）および１０％ＭｅＯＨ−ＣＨＣｌ３（５０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。残留物を、ＴＨＦ（４２１７μＬ）、ＭｅＣＮ ｗ／０．０５％ ｖ／ｖ ＨＣＯ２Ｈ（２１０９μＬ）、およびＨ２Ｏ ｗ／０．０５％ ｖ／ｖ ＨＣＯ２Ｈ（２１０９μＬ）の混合物中に取り込んで、室温で１時間攪拌した。反応液に飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５０ｍＬ）を加えて反応を停止させ、ＣＨＣｌ３（２×５０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。粗製物質をフラッシュクロマトグラフィー（２４ｇの塩基性アルミナ；０−２０％ＭｅＯＨ−ＣＨＣｌ３の直線状勾配）で精製し、化合物８６（５４．６ｍｇ、６８％）を橙色の固形物として得た。LC−MS m/z 1286 [M＋18]＋.
室温の化合物８６（２９．０ｍｇ、０．０２３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４５７μＬ）中の溶液に、ピペリジン（４５．３μＬ、０．４５７ｍｍｏｌ）を加えた。透明な橙色の溶液を室温で４５分間攪拌して、次いで、真空で濃縮した。粗製物質をＭｅＣＮ（２ｍＬ）およびＭｅＯＨ（２ｍＬ）の混合物中に取り込み、ヘプタン（４×２ｍＬ）で洗浄した。ＭｅＣＮ−ＭｅＯＨ層を真空で濃縮した。残留物をＣＨＣｌ３中に取り込み、濃縮して（２×）、化合物８７を得て、これをさらに精製を行うことなく用いた。LC−MS m/z 1065 [M＋H]＋.
室温の、粗製物質８７および化合物７１ａ（２３．６５ｍｇ、０．０３４ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（４５７μＬ）中の溶液に、２，６−ルチジン（６．６６μＬ、０．０５７ｍｍｏｌ）を加えた。透明な黄色の溶液を室温で１．５時間撹拌し、ＤＭＳＯで希釈し、分取ＨＰＬＣ（１ｍＬの３回の注入；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８ ２１．２×１００ｍｍ；２５分にわたり、２０−６０％ＭｅＣＮ−Ｈ２Ｏ ｗ／０．０５％ ｖ／ｖ ＨＣＯ２Ｈの直線状勾配；２０ｍＬ／分；２２０ｎｍでの検出）で精製した。生成物を含む画分を凍結乾燥して、二量体−リンカーＩＩＩａ−５（６．９７ｍｇ、１９％）を淡黄色の固形物として得た。LC−MS m/z 1621 [M＋H]＋.
実施例１５−二量体−リンカーＩＩＩａ−６
本実施例は図１５および二量体−リンカーＩＩＩａ−６の合成に関する。
０℃の、化合物５８ｄ（５０．０ｍｇ、０．０５０ｍｍｏｌ）および化合物８８（２４．４２ｍｇ、０．０６０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４９６μＬ）中の溶液に、ＨＡＴＵ（２２．６２ｍｇ、０．０６０ｍｍｏｌ）、次いで、２，６−ルチジン（１４．４４μＬ、０．１２４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を０℃で１０分間、室温で２時間撹拌し、０℃のバス内にある、Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）の入った撹拌フラスコに滴下して加えた。得られた析出物を真空濾過によって回収し（Ｈ２Ｏで洗浄した）、次いで、ＤＣＭ（５０ｍＬ）および飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５０ｍＬ）中に取り込んだ。層を分離して、水層をＤＣＭ（５０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（１２ｇのシリカゲル；０−１０％ＭｅＯＨ−ＤＣＭの直線状勾配）で精製して、化合物８９（６１．５ｍｇ、８９％）を黄色の固形物として得た。LC−MS m/z 1401 [M＋H]＋.
−７８℃の、化合物８９（６１．５ｍｇ、０．０４４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１４６３μＬ）溶液に、ＬｉＢＨＥｔ３（２２０μＬ、ＴＨＦ中の１Ｍ溶液、０．２２０ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。反応混合物を−７８℃で１時間撹拌し、Ｈ２Ｏを加えて反応を停止させ、室温まで昇温させ、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２５ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２５ｍＬ）の混合物で希釈し、１０％ＭｅＯＨ−ＣＨＣｌ３（２×５０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。この残留物を、ＴＨＦ（５８６７μＬ）、ＥｔＯＨ（５８６７μＬ）、およびＨ２Ｏ ｗ／０．０５％ ｖ／ｖ ＨＣＯ２Ｈ（２９３３μＬ）の混合物中に取り込み、室温で２時間撹拌した。反応液を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５０ｍＬ）で希釈し、ＣＨＣｌ３（５０ｍＬ）、次いで、１０％ＭｅＯＨ−ＣＨＣｌ３（５０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（１２ｇシリカゲル；０−２０％ＭｅＯＨ−ＤＣＭの直線状勾配）で精製して、化合物９０（４９ｍｇ、定量的）を黄色の固形物として得た。LC−MS m/z 1109 [M＋H]＋.
室温の、化合物９０（４９ｍｇ、０．０４４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（８８４μＬ）溶液に、ピペリジン（８８μＬ、０．８８４ｍｍｏｌ）を加えた。透明な橙色の溶液を、室温で１時間撹拌し、真空で濃縮した。粗生成物をＭｅＣＮ（２ｍＬ）およびＭｅＯＨ（２ｍＬ）の混合物中に取り込み、ヘプタン（４×２ｍＬ）で洗浄した。ＭｅＣＮ−ＭｅＯＨ層を真空で濃縮した。この生成物９１をＣＨＣｌ３中に取り込み、濃縮して（２×）、次いで、さらに精製を行うことなく用いた。LC−MS m/z 887 [M＋H]＋.
室温の、粗生成物９１および化合物７１ａ（２２．７６ｍｇ、０．０３３ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（４４０μＬ）溶液に、２，６−ルチジン（６．４１μＬ、０．０５５ｍｍｏｌ）を加えた。透明な、黄色の溶液を室温で３０分間撹拌した。化合物７１ａ（３．２μＬ、０．０２７ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（０．２２０ｍＬ）溶液をさらに加えて、反応混合物をさらに１．５時間撹拌し、ＤＭＳＯで希釈し、分取ＨＰＬＣ（１ｍＬの３回の注入；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８ ２１．２×１００ｍｍ；２５分にわたり、２０−６０％ＭｅＣＮ−Ｈ２Ｏ ｗ／０．０５％ ｖ／ｖ ＨＣＯ２Ｈの直線状勾配；２０ｍＬ／分；２２０ｎｍでの検出）で精製した。生成物を含む画分を凍結乾燥して、二量体−リンカーＩＩＩａ−６（６．５１ｍｇ、２０％）を黄色の固形物として得た。LC−MS m/z 1461 [M＋H]＋.
実施例１６−二量体ＩＩｂ−８
本実施例は、図１６Ａおよび１６Ｂ、並びに二量体ＩＩｂ−８の合成に関する。
化合物１９（１０ｇ、２１．４４ｍｍｏｌ）のアセトン（８０ｍＬ）溶液に、臭化ベンジル（５．２３ｍｌ、４４．０ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ）、次いで、Ｋ２ＣＯ３（１１．８５ｇ、８６ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ）を加えた。得られた淡黄色の反応混合物を、８０℃で一晩撹拌した。黄色の反応混合物を２００ｍＬの冷水に注いだ。固体の析出物を濾過で回収し、水およびエーテルで洗浄し、真空で乾燥させ、淡黄色の固形物（１２．８ｇ、９２％）を得た。
直前のステップ（１２．８ｇ、１９．８０ｍｍｏｌ）からの析出物の、ＴＨＦ（７５ｍｌ）およびＭｅＯＨ（２５ｍＬ）中の懸濁液に、ＮａＯＨ（３９．６ｍｌ、１１９ｍｍｏｌ、３．０Ｎ）を加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌して、淡褐色の均一な溶液を得た。反応混合物を真空で濃縮して、有機溶媒の大部分を留去した。残留物を１．０ＮのＨＣｌで、ｐＨ２−３に中性化した。生成した固形物を濾過で回収し、水およびエーテルで洗浄し、灰白色の固形物を得た。固体を真空で一晩乾燥させ、化合物９２を白色の固形物（１０．２１ｇ、８３％）として得た。1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.47 (s, 2H), 7.42 − 7.36 (m, 10H), 7.16 (s, 2H), 5.18 (s, 4H), 4.31 (t, J ＝ 5.9 Hz, 4H), 2.41 (t, J ＝ 5.9 Hz, 2H). MS (ESI＋) m/z 619.5 (M ＋ H)＋.
化合物９２を、実施例１４および図４Ａに記述される方法によって、化合物９３および９４を介して、化合物９５に変換した。
Ｐｄ（ＯＨ）２／炭素（０．０６０ｇ、０．０８５ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ）を含む圧力フラスコに、化合物９５（０．９４ｇ、０．８５３ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１０ｍＬ）およびＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）溶液を加えた。得られた反応混合物を２０ｐｓｉの圧力のＨ２下で２時間、および４０ｐｓｉの圧力でさらに２時間攪拌した。反応混合物をセライト（登録商標）パッドを介して濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。濾液を真空で濃縮して、６５０ｍｇの化合物９６を淡い橙色の固形物（６５０ｍｇ、８３％）として得た。MS (ESI＋) m/z 921.6 (M ＋ H)＋.
化合物９６（１０１ｍｇ、０．１１０ｍｍｏｌ）および１，４−ジブロモブタン９６ａ（１８９ｍｇ、０．８７７ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ）の、ＤＭＦ（１ｍＬ）中の溶液に、Ｋ２ＣＯ３（４５．５ｍｇ、０．３２９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で一晩攪拌した。反応液を水で希釈した。生成した固形物を濾過によって回収し、フラッシュクロマトグラフィーで精製して、化合物９７（１１０ｍｇ、８４％）を半固体として得た。MS (ESI＋) m/z 1191.6 (M ＋ H)＋.
化合物９７（４７０ｍｇ、０．３９５ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチル（４−（アミノメチル）フェニル）カルバメート９７ａ（８８ｍｇ、０．３９５ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ）の、ＤＭＦ（４ｍＬ）中の溶液に、Ｋ２ＣＯ３（１６４ｍｇ、１．１８４ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を８５℃で３時間加熱した。反応液を水で希釈し、ＤＣＭ（３×）で抽出した。有機層を合わせて乾燥させ、濃縮し、フラッシュクロマトグラフィーで精製して、化合物９８（１７５ｍｇ、３５％）を、半固体として得た。MS (ESI＋) m/z 1251.5 (M ＋ H)＋.
化合物９８（７８．５ｍｇ、０．０６３ｍｍｏｌ）および２，６−ルチジン（０．０２２ｍＬ、０．１８８ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ）の、ＤＣＭ（１．０ｍＬ）中の溶液に、室温で、トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル（ＴＭＳ−ＯＴｆ、０．０３４ｍＬ、０．１８８ｍｍｏｌ、Ａｉｄｒｉｃｈ）を加えた。反応混合物を室温で１時間攪拌した。反応混合物をＤＣＭで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄した。有機層を乾燥させ、濃縮し、フラッシュクロマトグラフィーで精製して、化合物９９（２３ｍｇ、３２％）を半固体として得た。MS (ESI＋) m/z 1152.6 (M ＋ H)＋.
−７８℃の、化合物９９（４６ｍｇ、０．０４０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１ｍＬ）中の溶液に、ＳＵＰＥＲ−ＨＹＤＲＩＤＥ（登録商標）の溶液（０．３９９ｍＬ、０．３９９ｍｍｏｌ、ＴＨＦ中に１Ｍ、Ａｌｄｒｉｃｈ）を加えた。反応液を−７８℃で１時間攪拌した。反応液を水で反応を停止させ、クロロホルム（２×）、次いで、クロロホルム中の１０％ＭｅＯＨ（２×）で抽出した。有機層を合わせて乾燥させ、濃縮して、分取ＨＰＬＣで精製した。生成物を含む画分を合わせて、ＮａＨＣＯ３で中性にして、クロロホルム（２×）およびクロロホルム中の１０％ＭｅＯＨ（２×）で抽出した。有機抽出液を合わせて、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。生成物を次いで、週末にわたって高真空下に置き、二量体ＩＩｂ−８（１２ｍｇ、３２％）を白色の固形物として得た。1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.61 − 7.55 (m, 4H), 7.49 (d, J＝7.9 Hz, 2H), 7.42 − 7.31 (m, 6H), 7.09 (d, J＝7.9 Hz, 2H), 6.86 − 6.82 (m 2H), 6.55 (s, 2H), 5.03 (d, J＝15.5 Hz, 2H), 4.57 (d, J＝15.5 Hz, 2H), 4.37 − 4.29 (m, 8H), 4.01 − 3.88 (m, 4H), 3.37 − 3.07 (m, 4H), 2.52 (t, J ＝ 5.9 Hz, 2H), 1.93 - 1.85 (m 6H), 1.71 −1.60 (m, 8H). MS (ESI＋) m/z 859.2 (M ＋ H)＋.
実施例１７−さらなる二量体および二量体−リンカー
前記の合成原理に従って、以下のさらなる二量体および二量体リンカーを合成した：
二量体ＩＩａ−２: LCMS (M＋H) ＝ 615.2 1H NMR (400MHz, CHLOROFORM−d) δ 7.68 (d, J＝4.4 Hz, 2H), 7.54 (s, 2H), 6.88 (s, 2H), 4.39 − 4.25 (m, 4H), 4.23 − 4.15 (m, 2H), 4.14 − 4.06 (m, 2H), 3.83 (ddd, J＝11.7, 7.2, 4.3 Hz, 2H), 3.76 (dt, J＝7.6, 4.0 Hz, 2H), 3.65 − 3.55 (m, 2H), 2.40 − 2.29 (m, 6H), 2.13 − 2.01 (m, 4H), 1.84 − 1.7 (m, 4H), 1.64−1.52 (m., 4H), 1.48 − 1.42 (m, 4H).
二量体ＩＩａ−５: LCMS (M＋H) ＝ 657.4 1H NMR (400MHz, CHLOROFORM−d) δ 7.69 (d, J＝4.4 Hz, 2H), 7.55 (s, 2H), 6.84 (s, 2H), 4.36 − 4.17 (m, 6H), 4.15 − 4.08 (m, 2H), 3.84 (ddd, J＝11.7, 7.2, 4.3 Hz, 2H), 3.78 − 3.72 (m, 2H), 3.67 − 3.56 (m, 2H), 2.46 − 2.30 (m, 6H), 2.16 − 2.03 (m, 4H), 1.88 − 1.78 (m, 4H), 1.65 − 1.50 (m, 6H), 1.48 − 1.34 (m, 8H).
二量体ＩＩａ−６: LCMS (M＋H) ＝ 671.4 1H NMR (400MHz, CHLOROFORM−d) δ 7.68 (d, J＝4.4 Hz, 2H), 7.53 (s, 2H), 6.84 (s, 2H), 4.34 − 4.15 (m, 6H), 4.12 − 4.05 (m, 2H), 3.84 (ddd, J＝11.7, 7.2, 4.3 Hz, 2H), 3.78 − 3.73 (m, 2H), 3.66 − 3.56 (m, 2H), 2.52 − 2.30 (m, 6H), 2.17 − 2.02 (m, 4H), 1.92 − 1.77 (m, 4H), 1.65 − 1.50 (m, 6H), 1.43 − 1.27 (m, 10 H).
二量体ＩＩａ−７: LCMS (M＋H) ＝ 685.3 1H NMR (400MHz, CHLOROFORM−d) δ 7.68 (d, J＝4.4 Hz, 2H), 7.54 (s, 2H), 6.83 (s, 2H), 4.22 − 4.03 (m, 10H), 3.84 (ddd, J＝11.7, 7.1, 4.5 Hz, 3H), 3.76 (dt, J＝7.5, 4.0 Hz, 2H), 3.61 (dt, J＝11.8, 7.8 Hz, 2H), 2.34 (td, J＝6.7, 2.6 Hz, 4H), 2.08 (d, J＝5.1 Hz, 4H), 1.99 − 1.92 (m, 5H), 1.88 − 1.76 (m, 8H), 1.59 − 1.50 (m, 14H), 1.47 − 1.38 (m, 7H).
二量体ＩＩａ−８. LCMS (M＋H) ＝ 699.5 1H NMR (400MHz, CHLOROFORM−d) δ 7.68 (d, J＝4.4 Hz, 2H), 7.52 (s, 2H), 6.81 (s, 2H), 4.23 − 4.01 (m, 10H), 3.84 (ddd, J＝11.7, 7.2, 4.3 Hz, 2H), 3.78 − 3.71 (m, 2H), 3.61 (dt, J＝11.9, 7.6 Hz, 2H), 2.34 (td, J＝6.7, 2.9 Hz, 4H), 2.09 (dd, J＝6.9, 4.7 Hz, 4H), 2.00 − 1.92 (m, 5H), 1.88 − 1.72 (m, 8H), 1.58 (br. s., 13H), 1.39 (d, J＝6.2 Hz, 12H).
二量体ＩＩａ−１０: LC−MS m/z 665 [M＋H]＋; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.68 (d, J＝4.4 Hz, 2H), 7.50 (s, 2H), 6.84 (s, 2H), 5.47 − 5.43 (m, 2H), 5.23 − 5.14 (m, 4H), 4.34 − 4.20 (m, 8H), 4.18 − 4.11 (m, 2H), 4.10 − 4.02 (m, 2H), 3.93 − 3.86 (m, 2H), 3.18 − 3.08 (m, 2H), 2.99 − 2.90 (m, 2H), 2.40 − 2.29 (m, 2H), 2.09 − 2.01 (m, 4H), 1.87 − 1.76 (m, 4H), 1.64 − 1.56 (m, 4H).
二量体ＩＩａ−１１: LC−MS m/z 667 [M＋H]＋.
二量体ＩＩａ−１２: LC−MS m/z 639 [M＋H]＋; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.68 (d, J＝4.4 Hz, 2H), 7.51 (s, 2H), 6.86 (s, 2H), 5.22 − 5.15 (m, J＝4.0 Hz, 4H), 4.36 − 4.23 (m, 8H), 4.21 − 4.14 (m, 2H), 4.12 − 4.05 (m, 2H), 3.93 − 3.87 (m, 2H), 3.17 − 3.07 (m, 2H), 2.99 − 2.90 (m, 2H), 2.34 (quin, J＝6.2 Hz, 2H), 1.84 − 1.75 (m, 4H), 1.63 − 1.54 (m, 4H), 1.48 − 1.40 (m, 4H).
二量体ＩＩａ−１３: LC−MS m/z 643 [M＋H]＋; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.67 (d, J＝4.4 Hz, 2H), 7.49 (s, 2H), 6.86 (s, 2H), 5.22 − 5.13 (m, 4H), 4.40 − 4.25 (m, 10H), 4.23 − 4.17 (m, 2H), 3.94 − 3.85 (m, 6H), 3.84 − 3.77 (m, 4H), 3.18 − 3.05 (m, 2H), 2.97 − 2.89 (m, 2H), 2.32 (quin, J＝6.0 Hz, 2H).
二量体ＩＩａ−１４: LC−MS m/z 672.5 [M＋H2O＋H]＋.
二量体ＩＩｂ−１: LC−MS m/z 739 [M＋H]＋; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.55 (s, 2H), 7.49 (d, J＝5.3 Hz, 2H), 7.41 − 7.30 (m, 8H), 6.87 (s, 2H), 5.02 (d, J＝15.6 Hz, 2H), 4.57 (d, J＝15.6 Hz, 2H), 4.38 − 4.24 (m, 4H), 4.24 − 4.16 (m, 2H), 4.10 (dt, J＝9.7, 5.1 Hz, 2H), 4.01 − 3.94 (m, 2H), 3.34 − 3.24 (m, 2H), 3.22 − 3.11 (m, 2H), 2.35 (quin, J＝6.1 Hz, 2H), 1.91 − 1.74 (m, 4H), 1.59 (d, J＝5.9 Hz, 6H), 1.50 − 1.40 (m, 4H), 0.97 − 0.82 (m, 2H).
二量体ＩＩｂ−２: LC−MS m/z 767 [M＋H]＋; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.53 (s, 2H), 7.47 (d, J＝5.3 Hz, 2H), 7.39 − 7.29 (m, 8H), 6.81 (s, 2H), 5.01 (d, J＝15.6 Hz, 2H), 4.56 (d, J＝15.6 Hz, 2H), 4.33 − 4.14 (m, 6H), 4.11 − 4.04 (m, 2H), 3.99 − 3.93 (m, 2H), 3.31 − 3.24 (m, 2H), 3.19 − 3.13 (m, 2H), 2.39 (quin, J＝6.7 Hz, 2H), 1.83 − 1.75 (m, 4H), 1.62 − 1.52 (m, 4H), 1.41 − 1.32 (m, 8H).
二量体ＩＩｂ−３: LC−MS m/z 739 [M＋H]＋; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.27 (d, J＝7.9 Hz, 2H), 7.88 (d, J＝4.4 Hz, 2H), 7.56 (s, 2H), 7.32 − 7.20 (m, 4H), 7.14 − 7.08 (m, 2H), 6.86 (s, 2H), 4.50 (dt, J＝10.9, 4.2 Hz, 2H), 4.38 − 4.05 (m, 8H), 3.78 − 3.67 (m, 2H), 3.55 − 3.46 (m, 2H), 2.47 − 2.36 (m, 2H), 1.83 − 1.76 (m, 4H), 1.59 (s, 4H), 1.42 − 1.31 (m, 8H).
二量体ＩＩｂ−４: LC−MS m/z 743.2 (M ＋ H)＋; 1H NMR (400MHz, CDCl3−d) δ 7.53 (s, 2H), 7.47 (d, J ＝ 5.1 Hz, 2H), 7.40 − 7.29 (m, 8H), 6.86 (s, 2H), 5.01 (d, J ＝ 15.6 Hz, 2H), 4.54 (d, J ＝ 15.6 Hz, 2H), 4.37 − 4.27 (m, 6H), 4.24 − 4.18 (m, 2H), 3.97 − 3.88 (m, 6H), 3.82 (d, J ＝ 1.1 Hz, 4H), 3.31 − 3.23 (m, 2H), 3.19 − 3.11 (m, 2H), 2.37 − 2.29 (m, 2H).
二量体ＩＩｂ−７. LC−MS m/z 758.6 (M ＋ H)＋; 1H NMR (400MHz, DMSO−d6) δ 7.48 (s, 2H), 7.43 (d, J ＝ 5.3 Hz, 2H), 7.38 (d, J ＝ 5.3 Hz, 2H), 7.36 − 7.26 (m, 4H), 7.04 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H), 6.87 (s, 2H), 6.52 (br. s., 2H), 4.91 (d, J ＝ 15.3 Hz, 2H), 4.53 (d, J ＝ 15.0 Hz, 2H), 4.30 − 4.20 (m, 6H), 4.20 − 4.16 (m, 2H), 3.91 − 3.88 (m, 6H), 3.65 (s, 4H), 3.46 − 3.45 (m, 2H), 3.10 − 3.06 (m., 2H), 2.25 − 2.17 (m, 2H).
二量体ＩＩｃ−１: LC−MS m/z 791 [M＋H]＋; 1H NMR (400MHz, CHLOROFORM−d) δ 7.91 (d, J＝3.7 Hz, 2H), 7.56 − 7.51 (m, 4H), 7.49 − 7.32 (m, 10H), 6.86 (s, 2H), 4.51 − 4.42 (m, 2H), 4.37 − 3.84 (m, 8H), 3.68 − 3.58 (m, 2H), 3.48 − 3.38 (m, 2H), 2.49 − 2.36 (m, 2H), 1.87 − 1.74 (m, 4H), 1.69 − 1.20 (m, 12H).
二量体ＩＩｃ−２: LC−MS m/z 907 [M＋H]＋; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.89 (d, J＝4.0 Hz, 2H), 7.53 (s, 2H), 7.41 − 7.39 (m, 2H), 7.37 − 7.33 (m, 4H), 6.94 − 6.89 (m, 4H), 6.82 (s, 2H), 4.47 − 4.38 (m, 2H), 4.21 − 3.96 (m, 8H), 3.84 (s, 6H), 3.59 (ddd, J＝16.2, 11.4, 1.9 Hz, 2H), 3.39 (ddd, J＝16.4, 5.2, 1.5 Hz, 2H), 2.03 − 1.92 (m, 4H), 1.86 − 1.70 (m, 6H), 1.62 − 1.51 (m, 4H), 1.45 − 1.30 (m, 12H).
二量体ＩＩｃ−３: LC−MS m/z 996 [M＋H]＋; 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.89 (d, J=4.0 Hz, 2H), 7.52 (s, 2H), 7.42 − 7.38 (m, 2H), 7.35 − 7.32 (m, 4H), 6.97 − 6.91 (m, 4H), 6.82 (s, 2H), 4.46 − 4.38 (m, 2H), 4.20 − 4.03 (m, 12H), 3.80 − 3.75 (m, 4H), 3.63 − 3.54 (m, 2H), 3.48 − 3.47 (m, 6H), 3.42 − 3.34 (m, 2H), 2.04 − 1.92 (m, 4H), 1.86 − 1.71 (m, 6H), 1.60 − 1.51 (m, 4H), 1.45 − 1.29 (m, 12H).
二量体ＩＩｃ−４: LC−MS m/z 1017 [M＋H]＋; 1H NMR (400MHz, CHLOROFORM−d) δ 7.88 (d, J＝4.0 Hz, 2H), 7.52 (s, 2H), 7.39 (s, 2H), 7.33 (d, J＝8.6 Hz, 4H), 6.91 (d, J＝9.0 Hz, 4H), 6.82 (s, 2H), 4.46 − 4.37 (m, 2H), 4.21 − 4.01 (m, 8H), 3.91 − 3.85 (m, 8H), 3.63 − 3.53 (m, 2H), 3.42 − 3.35 (m, 2H), 3.23 − 3.16 (m, 8H), 1.97 (quin, J＝6.9 Hz, 4H), 1.86 − 1.72 (m, 6H), 1.56 (s, 4H), 1.44 − 1.22 (m, 12H).
二量体ＩＩｃ−５: LC−MS m/z 1061 [M＋H2O]＋; 1H NMR (400MHz, CHLOROFORM−d) δ 7.88 (d, J＝4.0 Hz, 2H), 7.55 − 7.51 (m, 2H), 7.38 (s, 2H), 7.31 (d, J＝8.8 Hz, 4H), 6.92 (d, J＝8.8 Hz, 4H), 6.81 (s, 2H), 4.45 − 4.37 (m, 2H), 4.20 − 4.01 (m, 8H), 3.62 − 3.52 (m, 2H), 3.43 − 3.33 (m, 2H), 3.30 − 3.23 (m, 8H), 2.63 − 2.57 (m, 8H), 2.37 (s, 6H), 1.97 (quin, J＝7.0 Hz, 4H), 1.87 − 1.71 (m, 6H), 1.66 − 1.48 (m, 4H), 1.43 − 1.22 (m, 12H).
二量体ＩＩｃ−６: LC−MS m/z 767 [M＋H]＋.
二量体−リンカーＩＩＩａ−７: LC−MS m/z 777 [M＋2H]＋.
二量体−リンカーＩＩＩａ−８: LC−MS m/z 1352.8 [M＋H]＋.
二量体−リンカーＩＩＩａ−９: LC−MS m/z 1734.2 [M＋H]＋.
二量体−リンカーＩＩＩａ−１０: LC−MS m/z 1633 [M＋H]＋.
二量体−リンカーＩＩＩａ−１２: LC−MS m/z 1707 [M＋H]＋.
実施例１８−生物学的活性（二量体）
本発明の二量体の、様々な異なる癌細胞株に対する細胞毒性活性を、表４に示す。Ｈ２２６はヒト肺癌細胞株である。Ｎ８７はヒト胃癌細胞株である。ＯＶＣＡＲ３はヒト卵巣癌細胞株である。ＨＣＴ１１６はヒト大腸癌細胞株である。ＨＣＴ１１６／ＶＭ４６は多剤耐性およびパクリタキセル耐性である、ヒト大腸癌細胞株である。

実施例１９−生物学的活性（ＡＤＣ）
図１７は、二量体−リンカーＩＩＩａ−７で合成した２つのＡＤＣ、１つは抗ＣＤ７０抗体、および１つは抗メソセリン抗体とで合成した２つのＡＤＣの活性を示す。ＡＤＣは一般に前記の方法で合成した。それぞれは、約２の薬物−抗体比を有した。活性は、３Ｈチミジン取り込みアッセイを用いて測定し、ここで、放射性標識チミジンの取り込みの減少は、細胞増殖の阻害を示す（Ｃｏｎｇ ｅｔ． ａｌ．，ＵＳ８，９８０，８２４ Ｂ２（２０１５））。図から理解できるように、いずれのＡＤＣも活性であり、ＥＣ５０値はナノモル以下の範囲であった。
実施例２０−比較活性
表５は、本発明の二量体の細胞毒性活性を、式Ａ−４に示す構造を有する非大環状ＰＢＤのものと比較する。注目すべきは、同等の、および場合によっては、優れた細胞毒性の可能性から明らかなとおり、両方のベンゾジアゼピン環がＤＮＡ副溝に滑り込む能力に干渉する立体的制約を大環状環が導入しないようであることである。

本発明の前記の詳細な説明は、主にまたは専ら、本発明の特定の部分または局面に関する節を含む。これは明確化および簡便化のためであり、特定の特徴は開示された文のみではないものに関連してもよく、本明細書の開示は、異なる文に存在する情報の適切な組み合わせの全てを含むことが理解される。同様に、本明細書の様々な図および説明は、本発明の特定の実施態様に関連するが、特定の特徴が、特定の図または実施態様の文脈において開示される場合、そのような特徴もまた、適切な範囲で、他の図または実施態様の文脈において、他の特徴と組み合わせて、または一般に本発明において用いることができることが理解される。
さらに、本発明は、いくつかの好ましい実施態様の関連から特に記載されるが、本発明はそのような好ましい実施態様に限定されない。さらに、本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲によって定義される。
参考文献
前記の本明細書において、第一著書（または発明者）および日付によって簡潔に引用された、以下の参考文献の完全な引用を以下に示す。これらの参考文献のそれぞれは、全ての目的について、引用によって本明細書に援用される。
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Claims (19)

  1. 式Ｉ：

    ［式中、
    Ｘは、

    であり；
    Ｘ１は、ＣＨ２、Ｏ、ＮＨ、Ｓ（Ｏ）０−２、（ＣＨ２）０−５Ｘ２もしくはＯ（ＣＨ２）２−５Ｘ２で置換されたもしくは置換されていない３から７員のシクロアルキレンもしくはヘテロシクロアルキレン、または（ＣＨ２）０−５Ｘ２もしくはＯ（ＣＨ２）２−５Ｘ２で置換されたもしくは置換されていない３から７員のシクロアルキレンもしくはヘテロシクロアルキレン５から６員のアリーレンもしくはヘテロアリーレンであり；
    Ｘ２は、それぞれ独立して、Ｍｅ、ＣＯ２Ｈ、ＮＨ２、ＮＨ（Ｃ１−Ｃ５アルキル）、Ｎ（Ｃ１−Ｃ５アルキル）２、ＳＨ、ＣＨＯ、Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２）２Ｎ（Ｃ１−Ｃ３アルキル）、Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２）２ＮＨ、ＮＨＮＨ２、またはＣ（＝Ｏ）ＮＨＮＨ２であり；
    Ｙは、（ＣＨ２）４−６ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）４−６、（ＣＨ２）４−６Ｘ１（ＣＨ２）４−６、または（ＣＨ２）２（ＯＣＨ２ＣＨ２）２−３であり；
    Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、Ｃ１−Ｃ３アルキル、Ｏ（Ｃ１−Ｃ３アルキル）、シアノ、（ＣＨ２）０−５ＮＨ２、またはＮＯ２であり；
    ジアゼピン環系中の二重線

    は、それぞれ独立して、単結合または二重結合を表し；
    Ｎに結合する二重線

    が単結合である場合、Ｒ３はそれぞれＨであり、二重線が二重結合である場合、Ｒ３は存在せず；
    Ｃに結合する二重線

    が単結合である場合、Ｒ４はＨ、ＯＨ、ＳＯ３Ｎａ、またはＳＯ３Ｋであり、二重線が二重結合である場合、Ｒ４は存在せず；
    ＡおよびＢは、独立して、式ＩａまたはＩｂ：

    ［式Ｉａ中、
    Ｙ’およびＹ’’は独立して、存在しない、ＣＨ２、Ｃ＝Ｏ、またはＣＨＲ１２であり；ここで、Ｒ１２はそれぞれ独立して、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＣ１−Ｃ３アルキルであり、但し、Ｙ’およびＹ’’はいずれも存在しないことはなく；
    Ｇはそれぞれ独立して、ＣまたはＮであり、但し、２つ未満のＧがＮであり；
    Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ５アルキル、Ｃ≡Ｃ（ＣＨ２）１−５Ｘ２、ＯＨ、Ｏ（Ｃ１−Ｃ５アルキル）、シアノ、ＮＯ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１−８（Ｃ１−３アルキル）、（ＣＨ２）０−５Ｘ２、Ｏ（ＣＨ２）２−５Ｘ２、（ＣＨ２）０−５Ｘ２もしくはＯ（ＣＨ２）２−５Ｘ２で置換されたもしくは置換されていない３から７員のシクロアルキレンもしくはヘテロシクロアルキレン３から７員のシクロアルキルもしくはヘテロシクロアルキル、（ＣＨ２）０−５Ｘ２もしくはＯ（ＣＨ２）２−５Ｘ２で置換されたもしくは置換されていない３から７員のシクロアルキレンもしくはヘテロシクロアルキレン５から６員のアリールもしくはヘテロアリール、

    であるか；あるいは、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、またはＲ８がＮであるＧに結合している場合、そのようなＲ５、Ｒ６、Ｒ７、またはＲ８は存在しない］
    ［式Ｉｂ中、
    点線はＣ１−Ｃ２、Ｃ２−Ｃ３、またはＣ２−Ｒ１０二重結合の任意の存在を表し；
    Ｒ１０は、Ｈ、＝Ｏ、＝ＣＨ２、＝ＣＨ（Ｃ１−Ｃ５アルキル）、ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ２）１−５Ｘ２、Ｃ≡Ｃ（ＣＨ２）１−５Ｘ２、Ｃ１−Ｃ５アルキル、ＯＨ、Ｏ（Ｃ１−Ｃ５アルキル）、シアノ、ＮＯ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１−８（Ｃ１−３アルキル）、（ＣＨ２）０−５Ｘ２、（ＣＨ２）０−５Ｘ２、Ｏ（ＣＨ２）２−５Ｘ２で置換されたもしくは置換されてない４から７員のアリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、もしくはヘテロシクロアルキル、（ＣＨ２）０−５Ｘ２またはＯ（ＣＨ２）２−５Ｘ２で置換されたもしくは置換されていない３から７員のシクロアルキルもしくはヘテロシクロアルキル、（ＣＨ２）０−５Ｘ２もしくはＯ（ＣＨ２）２−５Ｘ２で置換されたもしくは置換されていない３から７員のシクロアルキレンもしくはヘテロシクロアルキレン、５から６員のアリールもしくはヘテロアリールであり；
    Ｃ１−Ｃ２、Ｃ２−Ｃ３、またはＣ２−Ｒ１０二重結合が存在する場合、Ｒ９は存在せず、そうでない場合、Ｈである］
    である］
    によって表される構造を有する、ベンゾジアゼピン二量体、またはその薬学的に許容可能な塩。
  2. 式ＩＩａ：

    ［式中、
    ｘは３または５であり；
    Ｙは（ＣＨ２）７−１２、（ＣＨ２）２（ＯＣＨ２ＣＨ２）１−３、（ＣＨ２）２−４ＮＨ（ＣＨ２）２−４または（ＣＨ２）２−４ＮＨ（（ＣＨ２）０−１フェニル）（ＣＨ２）２−４であり、ここで、フェニル基は適宜、ＮＨ２で置換されていてもよく；
    ＡはＡ１、Ａ２、またはＡ３：

    であり；
    ＢはＢ１、Ｂ２、またはＢ３：
    である］
    で表される構造を有する、請求項１に記載のベンゾジアゼピン二量体。
  3. 式ＩＩｂ：

    ［式中、
    ｘは３または５であり；
    Ｙ’は、それぞれ独立して、存在しない、またはＣＨ２であり；
    Ｙは（ＣＨ２）７−１２、（ＣＨ２）２（ＯＣＨ２ＣＨ２）１−３、（ＣＨ２）２−４ＮＨ（ＣＨ２）２−４または（ＣＨ２）２−４ＮＨ（（ＣＨ２）０−１フェニル）（ＣＨ２）２−４であり、ここで、フェニル基は適宜、ＮＨ２で置換されていてもよく；
    Ｒ４０およびＲ４1は、独立して、Ｈ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、Ｏ（Ｃ１−３アルキル）、ＮＨ２、またはＣ１−３アルキルである］
    で表される構造を有する、請求項１に記載のベンゾジアゼピン二量体。
  4. 式ＩＩｃ：

    ［式中、
    ｘは３または５であり；
    Ｙは（ＣＨ２）７−１２、（ＣＨ２）２（ＯＣＨ２ＣＨ２）１−３、（ＣＨ２）２−４ＮＨ（ＣＨ２）２−４または（ＣＨ２）２−４ＮＨ（（ＣＨ２）０−１フェニル）（ＣＨ２）２−４であり、ここで、フェニル基は適宜、ＮＨ２で置換されていてもよく；
    Ｒ４２およびＲ４３は、独立して、Ｈ、ＯＭｅ、ＮＨ２、ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＭｅ、Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２）Ｏ、Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２）ＮＭｅ、またはＮ（ＣＨ２ＣＨ２）ＮＨである］
    で表される構造を有する、請求項１に記載のベンゾジアゼピン二量体。
  5. 式ＩＩｂ−６、ＩＩｃ−８、ＩＩｃ−９、ＩＩｃ−１０、ＩＩｃ−１１、ＩＩｄ−１、ＩＩｄ−２、またはＩＩｄ−３で表される構造を有する、請求項１に記載のベンゾジアゼピン二量体。
  6. 式ＩＩＩ：

    ［式中、
    Ｒ６０は、式ＩＩＩａ、ＩＩＩａ’、またはＩＩＩａ’’：

    で表されるものであり；
    Ｙは（ＣＨ２）６−１０であり；
    ｘは３または５であり；
    ｙは、それぞれ独立して、２、３または４であり；
    ＡおよびＢは、独立して、式ＩａまたはＩｂ：

    ［式Ｉａ中、
    Ｙ’およびＹ’’は、独立して、存在しない、ＣＨ２、Ｃ＝Ｏ、またはＣＨＲ１２であり；ここで、Ｒ１２はそれぞれ独立して、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＣ１−Ｃ３アルキルであり、但し、Ｙ’およびＹ’’はいずれも存在しないことはなく；
    Ｇはそれぞれ独立して、ＣまたはＮであり、但し、２つ未満のＧがＮであり；
    Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ１−３アルキル、ＮＯ２、ＣＮ、ＮＨ２、Ｏ（Ｃ１−３アルキル）、または（ＯＣＨ２ＣＨ２）１−２Ｏ（Ｃ１−３アルキル）であるか；あるいは、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、またはＲ８がＮであるＧに結合している場合、そのようなＲ５、Ｒ６、Ｒ７、またはＲ８は存在しない］
    ［式Ｉｂ中、
    点線は、Ｃ１−Ｃ２、Ｃ２−Ｃ３、またはＣ２−Ｒ１０二重結合の任意の存在を表し；
    Ｃ１−Ｃ２、Ｃ２−Ｃ３、またはＣ２−Ｒ１０二重結合が存在する場合、Ｒ９は存在せず、そうでない場合、Ｈであり；
    Ｒ１０はＨ、Ｃｌ、Ｂｒ、＝ＣＨ２、＝ＣＨ（Ｃ１−５アルキル）、Ｃ１−３アルキル、ＮＯ２、ＣＮ、またはＮＨ２である］
    で表されるものであり、
    Ａ’は、

    であり；
    Ｒ５０はＨ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ１−３アルキル、ＮＯ２、ＣＮ、ＮＨ２、Ｏ（Ｃ１−３アルキル）、または（ＯＣＨ２ＣＨ２）１−２Ｏ（Ｃ１−３アルキル）（好ましくはＨ）であり；
    Ｒ５１はＨ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ１−３アルキル、ＮＯ２、ＣＮ、またはＮＨ２であり；
    Ｔは自己犠牲基であり；
    ｔは０または１であり；
    ＡＡａおよび、ＡＡｂのそれぞれは、独立して、アラニン、β−アラニン、γ−アミノ酪酸、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、γ−カルボキシグルタミン酸、シトルリン、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、ノルロイシン、ノルバリン、オルニチン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、チロシン、およびバリンから成る群から選択され；
    ｐは１、２、３、または４であり；
    ｑは１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０であり；
    ｒは１、２、３、４、または５であり；
    ｓは０または１であり；
    Ｒ３1は

    である］
    で表される構造を有する、ベンゾジアゼピン二量体−リンカー化合物。
  7. Ｒ６０がＩＩＩａである、請求項６に記載のベンゾジアゼピン二量体−リンカー化合物。
  8. Ｒ６０がＩＩＩａ’である、請求項６に記載のベンゾジアゼピン二量体−リンカー化合物。
  9. Ｒ６０がＩＩＩａ’’である、請求項６に記載のベンゾジアゼピン二量体−リンカー化合物。
  10. 式ＩＩＩａ−１、ＩＩＩａ−２、ＩＩＩａ−３、ＩＩＩａ−４、ＩＩＩａ−５、ＩＩＩａ−６、またはＩＩＩａ−７で表される構造を有する、請求項６に記載のベンゾジアゼピン二量体リンカー化合物。
  11. 抗体に結合した、請求項１に記載のベンゾジアゼピン二量体を含む結合体。
  12. 式ＩＶ：

    ［式中、
    Ａｂは抗体であり；
    ｍは１、２、３、または４であり；
    Ｒ４０は

    ［式中、
    Ａｂに結合するＲ４０のオープンな結合価は、アスタリスク（＊）によって表され、（ＣＨ２）ｒに結合するＲ４０のオープンな結合価は、破線

    によって表される］
    Ｒ６０は、式ＩＩＩａ、ＩＩＩａ’、またはＩＩＩａ’’：

    によって表されるものであり；
    Ｙは（ＣＨ２）６−１０であり；
    ｘは３または５であり；
    ｙはそれぞれ独立して、２、３、または４であり；
    ＡおよびＢは、それぞれ独立して、式ＩａまたはＩｂ：

    ［式Ｉａ中、
    Ｙ’およびＹ’’は、独立して、存在しない、ＣＨ２、Ｃ＝Ｏ、またはＣＨＲ１２であり；ここで、Ｒ１２はそれぞれ独立して、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＣ１−Ｃ３アルキルであり、但し、Ｙ’およびＹ’’はいずれも存在しないことはなく；
    Ｇは、それぞれ独立して、ＣまたはＮであり、但し、２つ未満のＧがＮであり；
    Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ１−３アルキル、ＮＯ２、ＣＮ、ＮＨ２、Ｏ（Ｃ１−３アルキル）、または（ＯＣＨ２ＣＨ２）１−２Ｏ（Ｃ１−３アルキル）（好ましくはＨ）であるか；あるいは、
    Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、またはＲ８が、ＮであるＧに結合する場合、そのようなＲ５、Ｒ６、Ｒ７、またはＲ８は存在しない］
    ［式Ｉｂ中、
    点線は、Ｃ１−Ｃ２、Ｃ２−Ｃ３、またはＣ２−Ｒ１０二重結合の任意の存在を表し；
    Ｃ１−Ｃ２、Ｃ２−Ｃ３、またはＣ２−Ｒ１０が存在する場合、Ｒ９は存在せず、そうでない場合、Ｈであり；
    Ｒ１０はＨ、Ｃｌ、Ｂｒ、＝ＣＨ２、＝ＣＨ（Ｃ１−５アルキル）、Ｃ１−３アルキル、ＮＯ２、ＣＮ、またはＮＨ２である］
    Ａ’は

    であり；
    Ｒ５０はＨ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ１−３アルキル、ＮＯ２、ＣＮ、ＮＨ２、Ｏ（Ｃ１−３アルキル）、または（ＯＣＨ２ＣＨ２）１−２Ｏ（Ｃ１−３アルキル）であり；
    Ｒ５１はＨ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ１−３アルキル、ＮＯ２、ＣＮ、ＮＨ２であり；
    Ｔは自己犠牲基であり；
    ｔは０または１であり；
    ＡＡａおよび、ＡＡｂのそれぞれは、独立して、アラニン、β−アラニン、γ−アミノ酪酸、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、γ−カルボキシグルタミン酸、シトルリン、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、ノルロイシン、ノルバリン、オルニチン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、チロシン、およびバリンから成る群から選択され；
    ｐは１、２、３、または４であり；
    ｑは１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０であり；
    ｒは１、２、３、４、または５であり；
    ｓは０または１である］
    で表されるものである］
    によって表される構造を有する、請求項１１に記載の結合体。
  13. Ｒ６０がＩＩＩａである、請求項１２に記載の結合体。
  14. Ｒ６０がＩＩＩａ’である、請求項１２に記載の結合体。
  15. Ｒ６０がＩＩＩａ’’である、請求項１２に記載の結合体。
  16. 請求項１１または１２に記載の結合体、および薬学的に許容可能な賦形剤を含む、医薬製剤。
  17. 治療上の有効量の請求項１に記載のベンゾジアゼピン二量体、または請求項１１もしくは１２に記載の結合体を、対象に投与することを特徴とする、癌を患っている対象における、癌を治療する方法。
  18. 請求項１２に記載のベンゾジアゼピン二量体の結合体を投与する、請求項１７に記載の方法。
  19. 癌が、肺癌、胃癌、または卵巣癌である、請求項１８に記載の方法。
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