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JP2018505885A - 置換ピラゾロ［１，５−ａ］−ピリジン−３−カルボキサミドおよびその使用 - Google Patents

置換ピラゾロ［１，５−ａ］−ピリジン−３−カルボキサミドおよびその使用 Download PDF

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JP2018505885A
JP2018505885A JP2017541348A JP2017541348A JP2018505885A JP 2018505885 A JP2018505885 A JP 2018505885A JP 2017541348 A JP2017541348 A JP 2017541348A JP 2017541348 A JP2017541348 A JP 2017541348A JP 2018505885 A JP2018505885 A JP 2018505885A
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アレクサンドロス・ファカロポウロス
ダミアン・ブロックシュニーダー
フランク・ヴンダー
ヨハネス−ペーター・シュタシュ
トビアス・マルクヴァルト
リーザ・ディーツ
フォルクハルト・ミン−ジアン・リ
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バイエル・ファルマ・アクティエンゲゼルシャフト
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Abstract

本出願は、新規な置換ピラゾロ［1，5−a］ピリジン−3−カルボキサミド、その調製法、疾患を治療および／または予防するためのその単独または組み合わせでのその使用、ならびに疾患を治療および／または予防するため、特に心血管障害を治療および／または予防するための医薬品を製造するためのその使用に関する。

Description

本出願は、新規な置換ピラゾロ［1，5−a］ピリジン−3−カルボキサミド、その調製法、疾患を治療および／または予防するためのその単独または組み合わせでのその使用、ならびに疾患を治療および／または予防するため、特に心血管障害を治療および／または予防するための医薬品を製造するためのその使用に関する。
哺乳動物細胞で最も重要な細胞伝達系の1つが環状グアノシン一リン酸（cGMP）である。内皮から放出され、ホルモンおよび機械的シグナルを伝達する一酸化窒素（NO）と合わせて、これはNO／cGMP系を形成する。グアニル酸シクラーゼは、グアノシン三リン酸（GTP）からのcGMPの生合成を触媒する。現在までに知られているこのファミリーの代表的なものは、構造的特徴またはリガンドの型のいずれかによって、ナトリウム利尿ペプチドによって刺激され得る粒子状グアニル酸シクラーゼ、およびNOによって刺激され得る可溶性グアニル酸シクラーゼの2つのグループに分けることができる。可溶性グアニル酸シクラーゼは、2個のサブユニットからなり、調節中心の一部である、ヘテロ二量体1個当たり1個のヘムをおそらく含む。これは活性化機構にとって非常に重要である。NOはヘムの鉄原子に結合し、したがって酵素の活性を著しく増加させることができる。対照的に、無ヘム製剤はNOによって刺激され得ない。一酸化炭素（CO）もヘムの中心鉄原子に結合することができるが、COによる刺激はNOによる刺激よりもずっと小さい。
cGMPの形成ならびに結果として生じるホスホジエステラーゼ、イオンチャネルおよびプロテインキナーゼの調節によって、グアニル酸シクラーゼは種々の生理学的過程、特に平滑筋細胞の弛緩および増殖、血小板凝集および血小板粘着、ならびに神経シグナル伝達、ならびに上記過程の破壊に基づく障害においても重要な役割を果たす。病態生理学的状態では、NO／cGMP系が抑制され、これが例えば、高血圧、血小板活性化、細胞増殖増加、内皮機能不全、粥状動脈硬化、狭心症、心不全、心筋梗塞、血栓症、脳卒中および性機能障害をもたらし得る。
予想される高い効率および低レベルの副作用のために、生物のcGMPシグナル経路の影響を標的化することによるこのような障害の考えられるNO非依存性治療は有望な手法である。
現在まで、可溶性グアニル酸シクラーゼの治療的刺激に、その効果がNOに基づく有機硝酸塩などの化合物がもっぱら使用されてきた。後者は生物変換によって形成され、ヘムの中心鉄原子を攻撃することによって溶性グアニル酸シクラーゼを活性化する。副作用に加えて、耐性の発達がこの治療様式の決定的な欠点の1つである。
近年、直接、すなわち、NOの事前放出なしに可溶性グアニル酸シクラーゼを刺激するいくつかの物質、例えば、3−（5’−ヒドロキシメチル−2’−フリル）−1−ベンジルインダゾール［YC−1；Wuら、Blood 84（1994）、4226；Mulschら、Brit．J．Pharmacol．120（1997）、681］、脂肪酸［Goldbergら、J．Biol．Chem．252（1977）、1279］、ジフェニルヨードニウムヘキサフルオロホスフェート［Pettiboneら、Eur．J．Pharmacol．116（1985）、307］、イソリキリチゲニン［Yuら、Brit．J．Pharmacol．114（1995）、1587］および種々の置換ピラゾール誘導体（国際公開第98／16223号パンフレット）が記載されている。
数ある文献の中でも、国際公開第2012／072512号パンフレットおよび国際公開第2010／117787号パンフレットは、障害の治療に使用することができる種々のピラゾロ［1，5−a］ピリジン誘導体を開示している。
国際公開第98／16223号パンフレット 国際公開第2012／072512号パンフレット 国際公開第2010／117787号パンフレット
YC−1；Wuら、Blood 84（1994）、4226 Mulschら、Brit．J．Pharmacol．120（1997）、681 Goldbergら、J．Biol．Chem．252（1977）、1279 Pettiboneら、Eur．J．Pharmacol．116（1985）、307 Yuら、Brit．J．Pharmacol．114（1995）、1587
可溶性グアニル酸シクラーゼの刺激物質として作用するので、疾患の治療および／または予防に適しており、例えば、そのインビボ特性、例えば、その薬物動態および薬力学的特性、その溶解度ならびに／あるいはその代謝プロファイルならびに／あるいはその用量−活性の関係に関して、先行技術から知られている化合物と比べて同一のまたは改善した治療プロファイルを有する新規な物質を提供することが本発明の目的であった。
本発明は、一般式（I）
Figure 2018505885
 （式中、
R1は式
Figure 2018505885
 （＊は窒素原子との付着点を表す）
の基を表し、
R2はメチルまたはシクロプロピルを表す）
の化合物、ならびにそのN−オキシド、塩、溶媒和物、N−オキシドの塩、ならびにN−オキシドおよび塩の溶媒和物に関する。
本発明の化合物は、式（I）に含まれ、以下に言及される化合物が既に塩、溶媒和物および塩の溶媒和物でない場合、式（I）の化合物およびその塩、溶媒和物と塩の溶媒和物、式（I）に含まれ、以下に言及される式の化合物およびその塩、溶媒和物と塩の溶媒和物、ならびに式（I）に含まれ、実施例として以下に引用される化合物およびその塩、溶媒和物と塩の溶媒和物である。
本発明の文脈において好ましい塩は、本発明による化合物の生理学的に許容される塩である。それ自体が製薬用途に適していないが、例えば、本発明による化合物を単離または精製するために使用することができる塩も包含される。
本発明の化合物の生理学的に許容される塩には、鉱酸、カルボン酸およびスルホン酸の酸付加塩、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、ギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸および安息香酸の塩が含まれる。
本発明の化合物の生理学的に許容される塩には、従来の塩基の塩、例としておよび好ましくは、アルカリ金属塩（例えば、ナトリウムおよびカリウム塩）、アルカリ土類金属塩（例えば、カルシウムおよびマグネシウム塩）、およびアンモニアまたは1〜16個の炭素原子を有する有機アミンに由来するアンモニウム塩、例としておよび好ましくは、エチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、エチルジイソプロピルアミン、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、ジシクロヘキシルアミン、ジメチルアミノエタノール、プロカイン、ジベンジルアミン、N−メチルモルホリン、アルギニン、リジン、エチレンジアミンおよびN−メチルピペリジンも含まれる。
本発明の文脈における溶媒和物は、溶媒分子による配位によって固体または液体状態で錯体を形成する本発明による化合物の形態として記載される。水和物は、配位が水によるものである溶媒和物の特別な形態である。水和物が本発明の文脈において好まれる溶媒和物である。
本発明の化合物は、その構造に応じて異なる立体異性型で、すなわち、配置異性体の形態でまたは適当な場合には、配座異性体（アトロプ異性体の場合を含む、エナンチオマーおよび／またはジアステレオマー）として存在し得る。そのため、本発明は、エナンチオマーおよびジアステレオマーならびにこれらのそれぞれの混合物を包含する。立体異性的に均質な成分を、既知の様式でエナンチオマーおよび／またはジアステレオマーのこのような混合物から単離することができ；この目的のためにクロマトグラフィー法、特にアキラルまたはキラル相でのHPLCクロマトグラフィーを用いることが好まれる。
本発明による化合物が互変異性型で生じ得る場合、本発明は全ての互変異性型を包含する。
本発明はまた、本発明による化合物の全ての適当な同位体変種も包含する。本発明の化合物の同位体変種は、ここでは、本発明の化合物中の少なくとも1個の原子が同じ原子番号であるが通常または主に自然に生じる原子質量とは異なる原子質量を有する別の原子と交換された化合物を意味すると理解される。本発明の化合物に組み込まれ得る同位体の例としては、水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素の同位体、例えば、2H（重水素）、3H（トリチウム）、13C、14C、15N、17O、18O、32P、33P、33S、34S、35S、36S、18F、36Cl、82Br、123I、124I、129Iおよび131Iがある。本発明による化合物の特定の同位体変種、特に1種または複数の放射性同位元素が組み込まれたものは、例えば、体内での作用機構または有効成分分布の調査に有益となり得、比較的容易な調製性および検出性のために、特に3Hまたは14Cで標識された化合物がこの目的に適している。さらに、同位体、例えば、重水素の組込みにより、化合物のより大きな代謝安定性の結果としての特定の治療上の利益、例えば、体内での半減期の延長または要求される活性剤用量の減少がもたらされ得るので、本発明による化合物のこのような修飾も、いくつかの場合、本発明の好ましい実施形態を構成し得る。本発明の化合物の同位体変種は、当業者に既知の方法、例えば、以下にさらに記載される方法および実施例に記載の手順によって、それぞれの試薬および／または出発材料の対応する同位体修飾を用いることにより調製することができる。
本発明はさらに、本発明による化合物のプロドラッグも包含する。「プロドラッグ」という用語は、本文脈において、それ自体は生物学的に活性であっても不活性であってもよいが、体内での滞留時間中に（例えば、代謝的にまたは加水分解的に）反応して本発明による化合物を与える化合物を指す。
本発明の文脈において、特に指定しない限り、置換基は以下の通り定義される：
R1が表し得る基の式において、記号＊が付けられた線の端点は炭素原子もCH2基も表さず、R1が結合しているそれぞれの付けられた原子との結合の一部である。
本発明の文脈において、「治療」または「治療すること」という用語は、疾患、状態、障害、傷害または健康問題の、このような状態および／またはこのような状態の症状の発達、経過または進行の阻害、遅延、検査、軽減、減弱、制限、減少、抑制、忌避または治癒を含む。ここでは、「療法」は「治療」という用語と同義であると理解される。
「防止」、「予防」および「妨害」という用語は本発明の文脈において同義的に使用され、疾患、状態、障害、傷害または健康問題に、あるいはこのような状態および／またはこのような状態の症状の発達または進行に罹患する、を経験する、を患うまたはこれらを有するリスクの回避または減少を指す。
疾患、状態、障害、傷害または健康問題の治療または予防は、部分的であっても完全であってもよい。
本発明の文脈においては、
R1が式
Figure 2018505885
 （＊は窒素原子との付着点を表す）
の基を表し、
R2がメチルを表す、
式（I）の化合物、ならびにそのN−オキシド、塩、溶媒和物、N−オキシドの塩、ならびにN−オキシドおよび塩の溶媒和物が好まれる。
本発明の文脈においては、組織名ent−7−［（2，6−ジフルオロベンジル）オキシ］−N−［（2S）−1−ヒドロキシ−2−（5−メチル−1，3，4−チアジアゾール−2−イル）プロパン−2−イル］−2，5−ジメチルピラゾロ［1，5−a］ピリジン−3−カルボキサミドおよび構造式
Figure 2018505885
 を有する化合物、ならびにその塩、その溶媒和物またはその塩の溶媒和物が好まれる。
本発明の文脈においては、組織名rac−7−［（2，6−ジフルオロベンジル）オキシ］−N−｛2−［2−（ジフルオロメチル）−2H−テトラゾール−5−イル］−1−ヒドロキシプロパン−2−イル｝−2，5−ジメチルピラゾロ［1，5−a］ピリジン−3−カルボキサミドおよび構造式
Figure 2018505885
 を有する化合物、ならびにその塩、その溶媒和物またはその塩の溶媒和物が好まれる。
本発明の文脈においては、組織名ent−N−［2−アミノ−2−メチル（4，4，4−2H3）ブチル］−7−［（2，6−ジフルオロベンジル）オキシ］−2，5−ジメチルピラゾロ−［1，5−a］ピリジン−3−カルボキサミド（エナンチオマーA）および構造式
Figure 2018505885
 を有する化合物、ならびにその塩、その溶媒和物またはその塩の溶媒和物が好まれる。
本発明の文脈においては、組織名ent−N−［2−アミノ−2−メチル−4−（トリメチルシリル）ブチル］−7−［（2，6−ジフルオロベンジル）オキシ］−2，5−ジメチルピラゾロ［1，5−a］ピリジン−3−カルボキサミド（エナンチオマーA）および構造式
Figure 2018505885
 を有する化合物、ならびにその塩、その溶媒和物またはその塩の溶媒和物が好まれる。
本発明の文脈においては、組織名ent−N−［2−アミノ−2−メチル−4−（トリメチルシリル）ブチル］−7−［（2，6−ジフルオロベンジル）オキシ］−2，5−ジメチルピラゾロ［1，5−a］ピリジン−3−カルボキサミド（エナンチオマーB）および構造式
Figure 2018505885
 を有する化合物、ならびにその塩、その溶媒和物またはその塩の溶媒和物が好まれる。
好ましいと言及される基の定義を、式（I）の化合物と対応して全ての中間体の両方に適用する。
本発明はさらに、
式（II）
Figure 2018505885
 （式中、R2は上に示される意味を有し、
T1は（C1〜C4）−アルキルまたはベンジルを表す）
の化合物を、適当な塩基または酸の存在下、不活性溶媒中で反応させて、式（III）
Figure 2018505885
 （式中、R2は上に示される意味を有する）
のカルボン酸を得て、その後、これをアミドカップリング条件下、不活性溶媒中で式（IV−A）、（IV−B）、（IV−C）または（IV−D）
Figure 2018505885
 （式中、R3はアミノ保護基、例えば、tert−ブトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニルまたはベンジルを表す）
のアミンと反応させ、次いで、存在するいずれの保護基も脱離させ、得られた式（I）の化合物を場合により適当な（i）溶媒および／または（ii）酸もしくは塩基を用いてその溶媒和物、塩および／または塩の溶媒和物に変換する、
ことを特徴とする、本発明による式（I）の本発明の化合物を調製する方法を提供する。
記載される調製法を、以下の合成スキーム（スキーム1）によって例として示すことができる：
スキーム1：
Figure 2018505885
 ［（a）水酸化ナトリウム、1，4−ジオキサン、90℃；（b）HATU、N，N−ジイソプロピルエチルアミン、DMF、室温；（c）水素、10％パラジウム活性炭素、TFA、エタノール］。
式（IV−A）、（IV−B）、（IV−C）および（IV−D）の化合物は商業的に入手可能である、または文献から既知である、または文献の方法と同様に調製することができる。
プロセスステップ（III）＋（IV）→（I）のための不活性溶媒は、例えば、エーテル（ジエチルエーテル、ジオキサン、テトラヒドロフラン、グリコールジメチルエーテルまたはジエチレングリコールジメチルエーテルなど）、炭化水素（ベンゼン、トルエン、キシレン、ヘキサン、シクロヘキサンまたは鉱油留分など）、ハロ炭化水素（ジクロロメタン、トリクロロメタン、テトラクロロメタン、1，2−ジクロロエタン、トリクロロエチレンまたはクロロベンゼンなど）、または他の溶媒（アセトン、酢酸エチル、アセトニトリル、ピリジン、ジメチルスルホキシド、N，N−ジメチルホルムアミド、N，N−ジメチルアセトアミド、N，N’−ジメチルプロピレン尿素（DMPU）またはN−メチルピロリドン（NMP）など）である。言及する溶媒の混合物を使用することも同様に可能である。ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、ジメチルホルムアミドまたはこれらの溶媒の混合物が好まれる。
プロセスステップ（III）＋（IV）→（I）におけるアミド形成のための縮合剤として使用するのに適しているのは、例えば、場合により1−ヒドロキシベンゾトリアゾール（HOBt）またはN−ヒドロキシスクシンイミド（HOSu）などのさらなる補助剤、および塩基としてのアルカリ金属炭酸塩、例えば、炭酸ナトリウムもしくは炭酸カリウムもしくは重炭酸ナトリウムもしくは重炭酸カリウム、またはトリアルキルアミン、例えば、トリエチルアミン、N−メチルモルホリン、N−メチルピペリジンもしくはN，N−ジイソプロピルエチルアミンなどの有機塩基とも組み合わせた、カルボジイミド（N，N’−ジエチル−、N，N’−ジプロピル−、N，N’−ジイソプロピル−、N，N’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（DCC）またはN−（3−ジメチルアミノプロピル）−N’−エチルカルボジイミド塩酸塩（EDC）など）、ホスゲン誘導体（N，N’−カルボニルジイミダゾール（CDI）など）、1，2−オキサゾリウム化合物（2−エチル−5−フェニル−1，2−オキサゾリウム3−硫酸塩または2−tert−ブチル−5−メチルイソオキサゾリウム過塩素酸塩など）、アシルアミノ化合物（2−エトキシ−1−エトキシカルボニル−1，2−ジヒドロキノリンまたはイソブチルクロロホルメートなど）、プロパンホスホン酸無水物（T3P）、1−クロロ−N，N，2−トリメチルプロパ−1−エン−1−アミン、ジエチルシアノホスホネート、ビス−（2−オキソ−3−オキサゾリジニル）ホスホリルクロリド、ベンゾトリアゾール−1−イルオキシトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート、ベンゾトリアゾール−1−イルオキシトリス（ピロリジノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（PyBOP）、O−（ベンゾトリアゾール−1−イル）−N，N，N’，N’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（TBTU）、O−（ベンゾトリアゾール−1−イル）−N，N，N’，N’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（HBTU）、2−（2−オキソ−1−（2H）−ピリジル）−1，1，3，3−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（TPTU）、O−（7−アザベンゾトリアゾール−1−イル）−N，N，N’，N’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（HATU）ま
たはO−（1H−6−クロロベンゾトリアゾール−1−イル）−1，1，3，3−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（TCTU）である。N−メチルモルホリンと組み合わせたTBTU、N，N−ジイソプロピルエチルアミンまたは1−クロロ−N，N，2−トリメチルプロパ−1−エン−1−アミンと組み合わせたHATUを用いることが好まれる。
縮合（III）＋（IV）→（I）は、一般的に−20℃〜＋100℃の温度範囲内で、好ましくは0℃〜＋60℃で行う。変換は、標準圧力、高圧または減圧（例えば、0．5〜5bar）で行うことができる。一般に、標準圧力を使用する。
あるいは、式（III）のカルボン酸を最初に対応する塩化カルボニルに変換することもでき、次いで、これを直接または式（IV）のアミンとの別の反応で本発明の化合物に変換することができる。カルボン酸からの塩化カルボニルの形成は、当業者に既知の方法、例えば、適当な塩基の存在下、例えば、ピリジンの存在下、塩化チオニル、塩化スルフリルまたは塩化オキサリルによる処理によって、また場合により適当な不活性溶媒中、ジメチルホルムアミドの添加によって行う。
式（II）の化合物のエステル基T1の加水分解は、不活性溶媒中、エステルを酸または塩基で処理することによって慣用的方法により行い、後者の場合、最初に形成する塩が酸で処理することによって遊離カルボン酸に変換される。tert−ブチルエステルの場合、エステル加水分解を、好ましくは酸を用いて行う。ベンジルエステルの場合、エステル開裂を、好ましくはパラジウム活性炭素またはラネーニッケルを用いて水素化分解によって行う。この反応に適した不活性溶媒は、水またはエステル加水分解のための慣用的な有機溶媒である。これらには、好ましくはアルコール（メタノール、エタノール、n−プロパノール、イソプロパノール、n−ブタノールまたはtert−ブタノールなど）、またはエーテル（ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、2−メチルテトラヒドロフラン、ジオキサンまたはグリコールジメチルエーテルなど）、または他の溶媒（アセトン、ジクロロメタン、ジメチルホルムアミドまたはジメチルスルホキシドなど）が含まれる。言及する溶媒の混合物を使用することも同様に可能である。塩基性エステル加水分解の場合、水とジオキサン、テトラヒドロフラン、メタノールおよび／またはエタノールの混合物を用いることが好まれる。
エステル加水分解に適した塩基は慣用的無機塩基である。これらには、好ましくはアルカリ金属もしくはアルカリ土類金属水酸化物、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化リチウム、水酸化カリウムもしくは水酸化バリウム、またはアルカリ金属もしくはアルカリ土類金属炭酸塩、例えば、炭酸ナトリウム、炭酸カリウムもしくは炭酸カルシウムが含まれる。水酸化ナトリウムまたは水酸化リチウムが特に好まれる。
エステル加水分解に適した酸は、一般的に、場合により水を添加した、硫酸、塩化水素／塩酸、臭化水素／臭化水素酸、リン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸もしくはトリフルオロメタンスルホン酸またはこれらの混合物である。tert−ブチルエステルの場合には塩化水素またはトリフルオロ酢酸、またメチルエステルの場合には塩酸が好まれる。
エステル加水分解は、一般的に0℃〜＋100℃の温度範囲内で、好ましくは＋0℃〜＋50℃で行う。
これらの変換は、大気圧、高圧または減圧（例えば、0．5〜5bar）で行うことができる。一般に、標準圧力を各場合に使用する。
使用するアミノ保護基は、好ましくはtert−ブトキシカルボニル（Boc）またはベンジルオキシカルボニル（Z）である。ヒドロキシまたはカルボキシル官能基のために使用する保護基は、好ましくはtert−ブチルまたはベンジルである。これらの保護基は、慣用的方法によって、好ましくは、ジオキサン、ジエチルエーテル、ジクロロメタンまたは酢酸などの不活性溶媒中、塩化水素、臭化水素またはトリフルオロ酢酸などの強酸との反応によって脱離し、追加の不活性溶媒を用いることなく脱離を行うことも場合により可能である。保護基としてのベンジルおよびベンジルオキシカルボニルの場合、これらをパラジウム触媒の存在下、水素化分解によって除去してもよい。言及する保護基の脱離を、場合によりワンポット反応で同時にまたは別々の反応ステップで行うこともできる。
式（II）の化合物は文献から知られている、あるいは
［A］式（V）
Figure 2018505885
 の化合物を不活性溶媒中、適当な塩基の存在下、式（VI）
Figure 2018505885
 （式中、
X1は適切な脱離基、特に塩素、臭素、ヨウ素、メシラート、トリフラートまたはトシラートを表す）
の化合物と反応させて、式（VII）
Figure 2018505885
 の化合物を得て、次いで、これをO−（2−メシチレンスルホニル）ヒドロキシルアミン（MSH）を用いて化合物（VIII）
Figure 2018505885
 に変換し、次いで、これを不活性溶媒中、式（IX）
Figure 2018505885
 （式中、T1およびR2は上に示される意味を有する）
の化合物と反応させる、
または
［B］式（X）
Figure 2018505885
 の化合物を、O−（2−メシチレンスルホニル）ヒドロキシルアミン（MSH）を用いて化合物（XI）
Figure 2018505885
 に変換し、次いで、これを不活性溶媒中、式（IX）
Figure 2018505885
 （式中、T1およびR2は上に示される意味を有する）
の化合物と反応させて、化合物（XII）
Figure 2018505885
 （式中、R2は上に示される意味を有し、
T1は（C1〜C4）−アルキルまたはベンジルを表す）
の化合物を得て、その後、当業者に公知の方法によりそこからベンジル基を脱離し、得られた化合物（XIII）
Figure 2018505885
 （式中、R2は上に示される意味を有し、
T1は（C1〜C4）−アルキルまたはベンジルを表す）
を不活性溶媒中、Mitsunobu条件下で式（XIV）
Figure 2018505885
 の化合物と反応させる
ことによって調製することができる。
記載される方法を、以下のスキーム（スキーム2〜3）によって例として示す：
スキーム2：
Figure 2018505885
 ［（a）Ag2CO3、THF、還流；（b）O−（2−メシチレンスルホニル）ヒドロキシルアミン（MSH）、ジクロロメタン、室温；（c）K2CO3、DMF、室温］。
スキーム3：
Figure 2018505885
 ［（a）O−（2−メシチレンスルホニル）ヒドロキシルアミン（MSH）、ジクロロメタン、室温；（b）K2CO3、DMF、室温；（c）シクロヘキセン、Pd／C、エタノール、還流；（d）トリフェニルホスフィン、ジイソプロピル（E）−ジアゼン−1，2−ジカルボキシレート（DIAD）、THF、室温］。
プロセスステップ（V）→（VI）→（VII）のための不活性溶媒は、例えば、エーテル（ジエチルエーテル、ジオキサン、テトラヒドロフラン、ジメトキシメタン、グリコールジメチルエーテルまたはジエチレングリコールジメチルエーテルなど）、または他の溶媒（アセトン、メチルエチルケトン、酢酸エチル、アセトニトリル、N，N−ジメチルホルムアミド、N，N−ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシド、N，N’−ジメチルプロピレン尿素（DMPU）、N−メチルピロリドン（NMP）など）である。言及する溶媒の混合物を使用することも同様に可能である。ジメトキシエタンを用いることが好まれる。
プロセスステップ（V）＋（VI）→（VII）に適した塩基は、慣用的無機または有機塩基である。これらには、好ましくは場合によりアルカリ金属ヨウ化物（例えば、ヨウ化ナトリウムまたはヨウ化カリウム）、アルカリ金属アルコキシド（ナトリウムメトキシドもしくはカリウムメトキシド、ナトリウムエトキシドもしくはカリウムエトキシド、またはナトリウムもしくはカリウムtert−ブトキシドなど）、アルカリ金属水素化物（水素化ナトリウムまたは水素化カリウムなど）、アミド（ナトリウムアミド、リチウムビス（トリメチルシリル）アミドまたはカリウムビス（トリメチルシリル）アミドまたはリチウムジイソプロピルアミドなど）、または有機アミン（トリエチルアミン、N−メチルモルホリン、N−メチルピペリジン、N，N−ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン、4−（N，N−ジメチルアミノ）ピリジン（DMAP）、1，5−ジアザビシクロ［4．3．0］ノナ−5−エン（DBN）、1，8−ジアザビシクロ［5．4．0］ウンデカ−7−エン（DBU）または1，4−ジアザビシクロ［2．2．2］オクタン（DABCO（登録商標））など）を添加した、アルカリ金属水酸化物（例えば、水酸化リチウム、水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウム）、アルカリ金属またはアルカリ土類金属炭酸塩（炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸カルシウムまたは炭酸セシウムなど）が含まれる。ナトリウムtert−ブトキシドまたはカリウムtert−ブトキシドを用いることが好まれる。
反応は、場合によりマイクロ波中、一般的に0℃〜＋120℃の温度範囲内で、好ましくは＋20℃〜＋80℃で行う。反応は、標準圧力、高圧または減圧（例えば、0．5〜5bar）で行うことができる。
プロセスステップ（VII）→（VIII）のための不活性溶媒は、例えば、ジクロロメタン、1，2−ジクロロエタンまたは他の溶媒（アセトン、メチルエチルケトン、酢酸エチル、アセトニトリル、N，N−ジメチルホルムアミド、N，N−ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシド、N，N’−ジメチルプロピレン尿素（DMPU）、N−メチルピロリドン（NMP）など）である。言及する溶媒の混合物を使用することも同様に可能である。ジクロロメタンを用いることが好まれる。
反応は、一般的に0℃〜＋120℃の温度範囲で、好ましくは＋20℃〜＋80℃で行う。反応は、大気圧、高圧または減圧（例えば、0．5〜5bar）で行うことができる。
イミダゾ［1，2−a］ピラジン基本骨格を与える閉環（VIII）＋（IX）→（II）のための不活性溶媒は慣用的な有機溶媒である。これらには、好ましくはアルコール（メタノール、エタノール、n−プロパノール、イソプロパノール、n−ブタノール、n−ペンタノールまたはtert−ブタノールなど）、またはエーテル（ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、2−メチルテトラヒドロフラン、ジオキサンまたはグリコールジメチルエーテルなど）、または他の溶媒（アセトン、ジクロロメタン、1，2−ジクロロエタン、アセトニトリル、ジメチルホルムアミドまたはジメチルスルホキシドなど）が含まれる。言及する溶媒の混合物を使用することも同様に可能である。エタノールを用いることが好まれる。
閉環は、場合によりマイクロ波中、一般的に＋50℃〜＋150℃の温度範囲内で、好ましくは＋50℃〜＋100℃で行う。
閉環（VIII）＋（IX）→（II）は、場合により脱水反応添加剤の存在下、例えば、モレキュラーシーブ（孔径3Åまたは4Å）の存在下で、または水分離器を用いて行う。反応（VIII）＋（IX）→（II）は、場合により塩基（例えば、重炭酸ナトリウム）を添加した（この場合、この試薬の添加を一度にまたは数回に分けて行うことができる）、過剰の式（VIII）の試薬、例えば、1〜20当量の試薬（VIII）を用いて行う。
反応ステップ（XII）→（XIII）のベンジル基の除去を、ここでは、保護基の化学から既知の慣用的方法によって、好ましくは、不活性溶媒、例えば、エタノールまたは酢酸エチル中、パラジウム触媒、例えば、パラジウム活性炭素の存在下での水素化分解によって行う［例えば、T．W．GreeneおよびP．G．M．Wuts、Protective Groups in Organic Synthesis、Wiley、ニューヨーク、1999も参照］。
Mitsunobu縮合（XIII）＋（XIV）→（II）は、0℃〜使用する溶媒の沸点の間の温度で、不活性溶媒、例えば、THF、ジクロロメタン、トルエンまたはDMF中、活性化剤、例えば、ジエチル（E）−ジアゼン−1，2−ジカルボキシレート（DEAD）またはジイソプロピル（E）−ジアゼン−1，2−ジカルボキシレート（DIAD）、およびホスフィン試薬、例えば、トリフェニルホスフィンまたはトリブチルホスフィンの存在下で行う。
本発明の化合物は、有用な薬理学的特性を有し、ヒトおよび動物の疾患を予防および治療するために使用することができる。本発明の化合物はさらなる治療代替を提供するので、薬学の分野を拡大する。
本発明による化合物は、可溶性グアニル酸シクラーゼの強力な刺激物質として作用し、有用な薬理学的特性を有し、例えば、そのインビボ特性および／またはその薬物動態特性および／または代謝プロファイルに関して、改善した治療プロファイルを有する。そのため、これらの化合物は、ヒトおよび動物の疾患の治療および／または予防に適している。
本発明の化合物は血管弛緩および血小板凝集の阻害を引き起こし、血圧の低下および冠血流量の上昇をもたらす。これらの効果は、可溶性グアニル酸シクラーゼの直接刺激およびcGMPの細胞内増加によって媒介される。さらに、本発明による化合物は、例えばEDRF（内皮由来弛緩因子）、NOドナー、プロトポルフィリンIX、アラキドン酸またはフェニルヒドラジン誘導体などの、cGMP濃度を増加させる物質の効果を強化する。
本発明の化合物は、心血管、肺、血栓塞栓および線維障害の治療および／または予防に適している。
したがって、本発明による化合物を、心血管障害、例えば、血圧上昇（高血圧）、抵抗性高血圧、急性および慢性心不全、冠動脈心疾患、安定および不安定狭心症、末梢および心臓血管障害、不整脈、心房性および心室性不整脈ならびに伝導障害、例えば、I〜III度の房室ブロック（ABブロックI〜III）、上室性頻脈性不整脈、心房細動、心房粗動、心室細動、心室粗動、心室性頻脈性不整脈、多形性心室頻拍、心房性および心室性期外収縮、房室接合部期外収縮、洞不全症候群、失神、房室結節リエントリー性頻拍、ウォルフ・パーキンソン・ホワイト症候群、急性冠動脈症候群（ACS）、自己免疫心疾患（心膜炎、心内膜炎、弁膜炎、大動脈炎、心筋症）、ショック、例えば、心原性ショック、敗血症性ショックおよびアナフィラキシーショック、動脈瘤、ボクサー心筋症（心室性期外収縮（PVC））を治療および／または予防するための、血栓塞栓性障害および虚血、例えば、心筋虚血、心筋梗塞、卒中、心肥大、一過性および虚血性発作、子癇前症、炎症性心血管障害、冠動脈および末梢動脈の攣縮、浮腫形成、例えば、肺浮腫、脳浮腫、腎性浮腫または心不全によって引き起こされる浮腫、末梢循環障害、再灌流損傷、動脈および静脈血栓症、微量アルブミン尿、心筋不全、内皮機能不全を治療および／または予防するための、例えば、血栓溶解療法、経皮的血管形成術（PTA）、経管的冠動脈形成術（PTCA）、心臓移植およびバイパス手術後の再狭窄、ならびに微小および大血管損傷（血管炎）、フィブリノーゲンおよび低密度リポタンパク質（LDL）のレベル上昇ならびにプラスミノーゲン活性化因子阻害因子1（PAI−1）の濃度上昇を予防するための、ならびに勃起不全および女性性機能不全を治療および／または予防するための医薬品に使用することができる。
本発明の文脈において、「心不全」という用語は、心不全の急性徴候と慢性徴候の両方、およびより具体的なまたは関連する型の疾患、例えば、急性非代償性心不全、右心不全、左心不全、全心不全、虚血性心筋症、拡張型心筋症、肥大型心筋症、特発性心筋症、先天性心疾患、心臓弁奇形を伴う心不全、僧帽弁狭窄、僧帽弁閉鎖不全、大動脈弁狭窄、大動脈弁閉鎖不全、三尖弁狭窄、三尖弁閉鎖不全、肺動脈弁狭窄、肺動脈弁閉鎖不全、混合型心臓弁奇形、心筋炎症（心筋炎）、慢性心筋炎、急性心筋炎、ウイルス性心筋炎、糖尿病性心不全、アルコール性心筋症、心臓貯蔵障害、拡張期心不全および収縮期心不全、ならびに既存の慢性心不全の悪化の急性期（心不全憎悪）を包含する。
さらに、本発明による化合物を、動脈硬化、脂質代謝障害、低リポ蛋白血症、脂質異常症、高トリグリセリド血症、高脂血症、高コレステロール血症、無βリポ蛋白血症、シトステロール血症、黄色腫症、タンジール病、脂肪症、肥満ならびに混合型高脂血症およびメタボリックシンドロームを治療および／または予防するために使用することもできる。
本発明の化合物を、一次および二次レイノー現象、微小循環障害、跛行、末梢および自律神経ニューロパチー、糖尿病性細小血管症、糖尿病性網膜症、四肢の糖尿病性潰瘍、壊疽、CREST症候群、エリテマトーデス、爪真菌症、リウマチ性障害を治療および／または予防するためならびに創傷治癒を促進するために使用することもできる。
本発明による化合物は、泌尿器科障害、例えば、良性前立腺症候群（BPS）、良性前立腺肥大（BPH）、良性前立腺腫脹（BPE）、膀胱下尿道閉塞（BOO）、下部尿路症候群（LUTS、ネコ泌尿器科症候群（FUS）を含む）、神経性過活動膀胱（OAB）および（IC）、失禁（UI）、例えば、混合型尿失禁、切迫性尿失禁、ストレス性尿失禁または溢流性尿失禁（MUI、UUI、SUI、OUI）、骨盤痛を含む泌尿生殖器系の障害、男性および女性泌尿生殖器系の器官の良性および悪性障害を治療するのにさらに適している。
本発明の化合物は、腎障害、特に、急性および慢性腎機能不全、ならびに急性および慢性腎不全を治療および／または予防するのにも適している。本発明の文脈において、「腎機能不全」という用語は、腎機能不全の急性症状と慢性症状の両方、ならびに根底にあるまたは関連する腎障害、例えば、腎低灌流、透析時低血圧、閉塞性尿路疾患、糸球体症、糸球体腎炎、急性糸球体腎炎、糸球体硬化、尿細管間質障害、腎症障害、例えば、原発性および先天性腎疾患、腎炎、免疫学的腎障害、例えば、腎移植拒絶反応および免疫複合体誘発性腎障害、毒性物質によって誘発される腎症、造影剤によって誘発される腎症、糖尿病性および非糖尿病性腎症、腎盂腎炎、腎嚢胞、腎硬化症、高血圧性腎硬化症およびネフローゼ症候群（例えば、異常に低下したクレアチニンおよび／または水分排泄、異常に上昇した尿素、窒素、カリウムおよび／またはクレアチニンの血中濃度、例えば、グルタミルシンテターゼなどの腎臓酵素の変化した活性、変化した尿浸透圧または尿量、上昇した微量アルブミン尿、マクロアルブミン尿、糸球体および細動脈の病変、尿細管拡張、高リン酸塩血症ならびに／あるいは透析の必要性によって診断上特徴付けされ得る）を包含する。本発明はまた、腎機能不全、例えば、肺水腫、心不全、尿毒症、貧血、電解質障害（例えば、高カリウム血症、高ナトリウム血症）ならびに骨および炭水化物代謝の障害を治療および／または予防するための本発明の化合物の使用も包含する。
さらに、本発明の化合物は、喘息性障害、肺動脈高血圧（PAH）および他の型の肺高血圧（PH）（左心臓疾患、HIV、鎌状赤血球貧血、血栓塞栓症（CTEPH）、サルコイドーシス、COPDまたは肺線維症に関連する肺高血圧を含む）、慢性閉塞性肺疾患（COPD）、急性呼吸窮迫症候群（ARDS）、急性肺傷害（ALI）、α1−抗トリプシン欠乏症（AATD）、肺線維症、肺気腫（例えば、タバコの煙によって誘発される肺気腫）および嚢胞性線維症（CF）を治療および／または予防するのにも適している。
本発明に記載される化合物はまた、NO／cGMP系の障害によって特徴付けられる中枢神経系障害を制御するための活性化合物でもある。これらは、特に、例えば、軽度認知障害、加齢性学習および記憶障害、加齢性記憶喪失、血管性認知症、頭蓋脳損傷、脳卒中、脳卒中後に起こる認知症（脳卒中後認知症）、外傷後頭蓋脳損傷、一般的な集中力障害、学習および記憶の問題を有する小児の集中力障害、アルツハイマー病、レビー小体型認知症、ピック症候群を含む前頭葉変性を伴う認知症、パーキンソン病、進行性核性麻痺、大脳皮質基底核変性症を伴う認知症、筋萎縮性側索硬化症（ALS）、ハンチントン舞踏病、脱髄、多発性硬化症、視床変性、クロイツフェルト−ヤコブ認知症、HIV認知症、認知症を伴う統合失調症、またはコルサコフ精神病などの状態／疾患／症候群に関連して特に生じるものなどの認知障害後の知覚、集中力、学習または記憶を改善するのに適している。これらはまた、中枢神経系障害、例えば、不安、緊張およびうつ病、CNS関連性機能障害および睡眠障害の状態を治療および／または予防する、ならびに食物、嗜好品および習慣性物質の摂取の病理学的障害を制御するのにも適している。
さらに、本発明の化合物はまた、脳血流を制御するのにも適しており、偏頭痛を制御するのに有効な薬剤となる。これらはまた、脳梗塞（脳卒中）、例えば、卒中、脳虚血および頭蓋−脳外傷の続発症を予防および制御するのにも適している。本発明の化合物を疼痛の状態および耳鳴を制御するために使用することもできる。
さらに、本発明の化合物は、抗炎症作用を有するので、敗血症（SIRS）、多臓器不全（MODS、MOF）、腎臓の炎症性障害、慢性腸炎症（IBD、クローン病、UC）、膵炎、腹膜炎、リウマチ様障害、炎症性皮膚障害および炎症性眼障害を治療および／または予防するための抗炎症剤として使用することができる。
さらに、本発明の化合物を自己免疫疾患を治療および／または予防するために使用することもできる。
本発明の化合物は、内臓、例えば、肺、心臓、腎臓、骨髄および特に、肝臓の線維性障害、ならびに皮膚科学的線維症および線維性眼障害を治療および／または予防するのにも適している。本発明の文脈において、線維性障害という用語は、特に、以下の用語を含む：肝線維症、肝硬変、肺線維症、心内膜心筋線維症、腎症、糸球体腎炎、間質性腎線維症、糖尿病から生じる線維性損傷、骨髄線維症および同様の線維性障害、強皮症、限局性強皮症、ケロイド、肥厚性瘢痕（外科手技後も）、母斑、糖尿病網膜症、増殖性硝子体網膜症および結合組織の障害（例えば、サルコイドーシス）。
本発明の化合物は、例えば、緑内障手術の結果としての術後瘢痕を制御するのにも適している。
本発明の化合物を老化および角質化皮膚のために美容的に使用することもできる。
さらに、本発明による化合物は、肝炎、新生物、骨粗鬆症、緑内障および胃不全麻痺を治療および／または予防するのに適している。
本発明はさらに、障害、特に上記障害を治療および／または予防するための本発明の化合物の使用を提供する。
本発明はさらに、心不全、狭心症、高血圧、肺高血圧、虚血、血管障害、腎機能不全、血栓塞栓性障害、線維性障害、動脈硬化、認知症障害および勃起不全を治療および／または予防するための本発明の化合物の使用を提供する。
本発明はさらに、心不全、狭心症、高血圧、肺高血圧、虚血、血管障害、腎機能不全、血栓塞栓性障害、線維性障害および動脈硬化を治療および／または予防する方法に使用するための本発明の化合物を提供する。
本発明はさらに、障害、特に上記障害を治療および／または予防するための医薬品を製造するための本発明の化合物の使用を提供する。
本発明はさらに、心不全、狭心症、高血圧、肺高血圧、虚血、血管障害、腎機能不全、血栓塞栓性障害、線維性障害、動脈硬化、認知症障害および勃起不全を治療および／または予防するための医薬品を調製するための本発明の化合物の使用を提供する。
本発明はさらに、有効量の本発明の化合物の少なくとも1種を使用して、障害、特に上記障害を治療および／または予防する方法を提供する。
本発明はさらに、有効量の本発明の化合物の少なくとも1種を使用して心不全、狭心症、高血圧、肺高血圧、虚血、血管障害、腎機能不全、血栓塞栓性障害、線維性障害および動脈硬化を治療および／または予防する方法を提供する。
本発明による化合物は、単独で、または必要に応じて他の有効成分と組み合わせて使用することができる。本発明はさらに、特に上記障害を治療および／または予防するための、本発明の化合物の少なくとも1種と、1種または複数のさらなる活性化合物とを含む医薬品を提供する。適当な組み合わせ有効成分の好ましい例としては、
・有機硝酸塩およびNOドナー、例えば、ニトロプルシドナトリウム、ニトログリセリン、一硝酸イソソルビド、二硝酸イソソルビド、モルシドミンまたはSIN−1および吸入NO；
・環状グアノシン一リン酸（cGMP）の分解を阻害する化合物、例えば、ホスホジエステラーゼ（PDE）1、2および／または5の阻害剤、とりわけ、PDE−5阻害剤、例えば、シルデナフィル、バルデナフィルおよびタダラフィル；
・抗血栓剤、例としておよび好ましくは、血小板凝集阻害剤、抗凝固剤または線維素溶解促進性物質の群のもの；
・降圧活性物質、例としておよび好ましくは、カルシウム拮抗剤、アンジオテンシンAII拮抗剤、ACE阻害剤、エンドセリン拮抗剤、レニン阻害剤、α受容体遮断薬、β受容体遮断薬、ミネラルコルチコイド受容体拮抗剤および利尿剤の群のもの；および／または
・脂肪代謝を変化させる活性化合物、例としておよび好ましくは、甲状腺受容体作動薬、コレステロール合成阻害剤、例えば、例としておよび好ましくは、HMG−CoA還元酵素阻害剤またはスクアレン合成阻害剤、ACAT阻害剤、CETP阻害剤、MTP阻害剤、PPARα、PPARγおよび／またはPPARδ作動薬、コレステロール吸収阻害剤、リパーゼ阻害剤、重合胆汁酸吸着剤、胆汁酸再吸収阻害剤およびリポタンパク質拮抗剤の群のもの
を挙げることができる。
抗血栓剤は、好ましくは、血小板凝集阻害剤、抗凝固剤または線維素溶解促進性物質の群の化合物を意味すると理解される。
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、血小板凝集阻害剤、例としておよび好ましくは、アスピリン、クロピドグレル、チクロピジンまたはジピリダモールと組み合わせて投与する。
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、トロンビン阻害剤、例としておよび好ましくは、キシメラガトラン、ダビガトラン、メラガトラン、ビバリルジンまたはクレキサンと組み合わせて投与する。
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、GPIIb／IIIa拮抗剤、例としておよび好ましくは、チロフィバンまたはアブシキシマブと組み合わせて投与する。
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、第Xa因子阻害剤、例としておよび好ましくは、リバロキサバン（BAY59−7939）、エドキサバン（DU−176b）、アピキサバン、オタミキサバン、フィデキサバン、ラザキサバン、フォンダパリヌクス、イドラパリヌクス、PMD−3112、YM−150、KFA−1982、EMD−503982、MCM−17、MLN−1021、DX 9065a、DPC 906、JTV 803、SSR−126512またはSSR−128428と組み合わせて投与する。
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、ヘパリンまたは低分子量（LMW）ヘパリン誘導体と組み合わせて投与する。
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、ビタミンK拮抗剤、例としておよび好ましくは、クマリンと組み合わせて投与する。
降圧剤は、好ましくは、カルシウム拮抗剤、アンジオテンシンAII拮抗剤、ACE阻害剤、エンドセリン拮抗剤、レニン阻害剤、α受容体遮断薬、β受容体遮断薬、ミネラルコルチコイド受容体拮抗剤および利尿剤の群の化合物を意味すると理解される。
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、カルシウム拮抗剤、例としておよび好ましくは、ニフェジピン、アムロジピン、ベラパミルまたはジルチアゼムと組み合わせて投与する。
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、α1受容体遮断薬、例としておよび好ましくは、プラゾシンと組み合わせて投与する。
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、β受容体遮断薬、例としておよび好ましくは、プロプラノロール、アテノロール、チモロール、ピンドロール、アルプレノロール、オクスプレノロール、ペンブトロール、ブプラノロール、メチプラノロール、ナドロール、メピンドロール、カラザロール、ソタロール、メトプロロール、ベタキソロール、セリプロロール、ビソプロロール、カルテオロール、エスモロール、ラベタロール、カルベジロール、アダプロロール、ランジオロール、ネビボロール、エパノロールまたはブシンドロールと組み合わせて投与する。
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、アンジオテンシンAII拮抗薬、例としておよび好ましくは、ロサルタン、カンデサルタン、バルサルタン、テルミサルタン、エンバサルタン（embursartan）、イルベサルタン、オルメサルタン、エプロサルタンもしくはアジサルタン、または二重アンジオテンシンAII拮抗薬／NEP阻害剤、例えばおよび好ましくは、LCZ696（バルサルタン／サクビトリル）と組み合わせて投与する。
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、ACE阻害剤、例としておよび好ましくは、エナラプリル、カプトプリル、リシノプリル、ラミプリル、デラプリル、フォシノプリル、キノプリル、ペリンドプリルまたはトランドプリルと組み合わせて投与する。
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、エンドセリン拮抗剤、例としておよび好ましくは、ボセンタン、ダルセンタン、アンブリセンタンまたはシタクスセンタンと組み合わせて投与する。
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、レニン阻害剤、例としておよび好ましくは、SPP−600またはSPP−800と組み合わせて投与する。
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、ミネラルコルチコイド受容体拮抗剤、例としておよび好ましくは、スピロノラクトンまたはエプレレノンと組み合わせて投与する。
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、ループ利尿剤、例えば、フロセミド、トラセミド、ブメタニドおよびピレタニド、カリウム保持性利尿剤、例えば、アミロライドおよびトリアムテレン、アルドステロン拮抗剤、例えば、スピロノラクトン、カンレノ酸カリウムおよびエプレレノン、ならびにチアジド系利尿剤、例えば、ヒドロクロロチアジド、クロルタリドン、キシパミドおよびインダパミドと組み合わせて投与する。
脂肪代謝調節剤は、好ましくは、CETP阻害剤、甲状腺受容体作動薬、コレステロール合成阻害剤、例えば、HMG−CoA還元酵素阻害剤またはスクアレン合成阻害剤、ACAT阻害剤、MTP阻害剤、PPARα、PPARγおよび／またはPPARδ作動薬、コレステロール吸収阻害剤、重合胆汁酸吸着剤、胆汁酸再吸収阻害剤、リパーゼ阻害剤およびリポタンパク質拮抗剤の群の化合物を意味すると理解される。
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、CETP阻害剤、例としておよび好ましくは、ダルセトラピブ、BAY60−5521、アナセトラピブまたはCETPワクチン（CETi−1）と組み合わせて投与する。
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、甲状腺受容体作動薬、例としておよび好ましくは、D−チロキシン、3，5，3’−トリヨードチロニン（T3）、CGS23425またはアキシチロム（CGS26214）と組み合わせて投与する。
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、スタチンのクラスのHMG−CoA還元酵素阻害剤、例としておよび好ましくは、ロバスタチン、シンバスタチン、プラバスタチン、フラバスタチン、アトルバスタチン、ロスバスタチンまたはピタバスタチンと組み合わせて投与する。
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、スクアレン合成阻害剤、例としておよび好ましくは、BMS−188494またはTAK−475と組み合わせて投与する。
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、ACAT阻害剤、例としておよび好ましくは、アバシミブ、メリナミド、パクチミブ、エフルチミブまたはSMP−797と組み合わせて投与する。
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、MTP阻害剤、例としておよび好ましくは、インプリタピド、BMS−201038、R−103757またはJTT−130と組み合わせて投与する。
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、PPARγ作動薬、例としておよび好ましくは、ピオグリタゾンまたはロシグリタゾンと組み合わせて投与する。
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、PPARδ作動薬、例としておよび好ましくは、GW501516またはBAY68−5042と組み合わせて投与する。
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、コレステロール吸収阻害剤、例としておよび好ましくは、エゼチミブ、チクエシドまたはパマクエシドと組み合わせて投与する。
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、リパーゼ阻害剤、例としておよび好ましくは、オルリスタットと組み合わせて投与する。
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、重合胆汁酸吸着剤、例としておよび好ましくは、コレスチラミン、コレスチポール、コレソルバム、コレスタゲルまたはコレスチミドと組み合わせて投与する。
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、胆汁酸再吸収阻害剤、例としておよび好ましくは、ASBT（＝IBAT）阻害剤、例えば、AZD−7806、S−8921、AK−105、BARI−1741、SC−435またはSC−635と組み合わせて投与する。
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、リポタンパク質拮抗剤、例としておよび好ましくは、ゲムカベンカルシウム（CI−1027）またはニコチン酸と組み合わせて投与する。
本発明はさらに、典型的には1種または複数の不活性で、非毒性の、薬学的に適当な賦形剤と共に少なくとも1種の本発明の化合物を含む医薬品、および上記目的のためのその使用を提供する。
本発明の化合物は全身的におよび／または局所的に作用することができる。この目的のために、これらを適当な様式で、例えば、経口、非経口、肺、経鼻、舌下、舌、頬側、直腸、真皮、経皮、結膜もしくは耳経路により、またはインプラントもしくはステントとして投与することができる。
本発明の化合物をこれらの投与経路に適した投与形態で投与することができる。
経口投与に適した投与形態は、先行技術により作用し、本発明の化合物を速効性のおよび／または修正された様式で放出し、本発明の化合物を結晶および／または非晶質および／または溶解形態で含むもの、例えば、錠剤（非コーティングあるいは例えば、本発明の化合物の放出を制御する、胃液抵抗性または遅延溶解または不溶性コーティングによるコーティング錠）、口腔で急速に崩壊する錠剤またはフィルム／オブラート、フィルム／凍結乾燥物、カプセル剤（例えば、硬質または軟質ゼラチンカプセル）、糖衣錠、顆粒剤、ペレット剤、散剤、乳剤、懸濁剤、エアゾール剤または液剤である。
非経口投与は、（例えば、静脈内、動脈内、心臓内、髄腔内もしくは腰椎内経路により）吸収ステップを回避して、または（例えば、筋肉内、皮下、皮内、経皮もしくは腹腔内経路により）吸収を含めて達成することができる。非経口投与に適した投与形態には、液剤、懸濁剤、乳剤、凍結乾燥物または滅菌散剤の形態の注射および注入用製剤が含まれる。
他の投与経路については、適当な例に、吸入医薬形態（粉末吸入器、ネブライザーを含む）、点鼻薬、液またはスプレー、舌、舌下または頬側投与のための錠剤、フィルム／ウエハーまたはカプセル剤、坐剤、耳または眼製剤、膣カプセル剤、水性懸濁剤（ローション、振盪混合物）、親油性懸濁剤、軟膏、クリーム、経皮治療システム（例えば、パッチ）、ミルク、ペースト、フォーム、粉剤、インプラントまたはステントがある。
経口または非経口投与、特に、経口投与が好ましい。
本発明の化合物を言及する投与形態に変換することができる。これは、不活性で、非毒性の、薬学的に適当な補助剤と混合することによって、それ自体は既知の様式で達成することができる。これらの賦形剤には、担体（例えば、微結晶セルロース、乳糖、マンニトール）、溶媒（例えば、液体ポリエチレングリコール）、乳化剤および分散剤または湿潤剤（例えば、ドデシル硫酸ナトリウム、ポリオキシソルビタンオレエート）、結合剤（例えば、ポリビニルピロリドン）、合成および天然ポリマー（例えば、アルブミン）、安定剤（例えば、抗酸化剤、例えば、アスコルビン酸）、着色剤（例えば、無機顔料、例えば、酸化鉄）ならびに香味および／または臭気修正剤が含まれる。
一般に、非経口投与の場合、有効な結果を達成するために、約0．001〜1mg／kg、好ましくは約0．01〜0．5mg／kg体重の量を投与することが有利であることが分かった。経口投与の場合、用量は約0．001〜2mg／kg、好ましくは約0．001〜1mg／kg体重である。
それにもかかわらず、具体的には体重、投与経路、有効成分に対する個体の反応、製剤の性質および投与が行われる時間または間隔の関数として言及する量から逸脱することが必要となり得る場合もある。したがって、上記最小量未満で間に合わせることで十分となり得る場合がある一方で、言及する上限を超過しなければならない場合がある。より多量を投与する場合、これらを1日数回の個々の用量に分割することが賢明となり得る。
以下の実施例は本発明を説明する。
特に明言しない限り、以下の試験および実施例中の百分率は、重量百分率であり、部は重量部である。液体／液体溶液の溶媒比、希釈比および濃度データは各場合において体積に基づく。
A．実施例
Figure 2018505885
Figure 2018505885
LC−MSおよびHPLC法：
方法1（LC−MS）：
機器：Micromass Quattro Premier with Waters UPLC Acquity；カラム：Thermo Hypersil GOLD 1．9μ 50×1mm；移動相A：水1l＋50％濃度ギ酸0．5ml；移動相B：アセトニトリル1l＋50％濃度ギ酸0．5ml；勾配：0．0分90％A→0．1分90％A→1．5分10％A→2．2分10％A；オーブン：50℃；流量：0．33ml／分；UV検出：210nm。
方法2（LC−MS）：
機器：Waters ACQUITY SQD UPLCシステム；カラム：Waters Acquity UPLC HSS T3 1．8μ 50×1mm；移動相A：水1l＋99％濃度ギ酸0．25ml；移動相B：アセトニトリル1l＋99％濃度ギ酸0．25ml；勾配：0．0分90％A→1．2分5％A→2．0分5％A；オーブン：50℃；流量：0．40ml／分；UV検出：210〜400nm。
方法3（LC−MS）：
機器：Micromass Quattro Premier with Waters UPLC Acquity；カラム：Thermo Hypersil GOLD 1．9μ 50×1mm；移動相A：水1l＋50％濃度ギ酸0．5ml；移動相B：アセトニトリル1l＋50％濃度ギ酸0．5ml；勾配：0．0分97％A→0．5分97％A→3．2分5％A→4．0分5％A；オーブン：50℃；流量：0．3ml／分；UV検出：210nm。
方法4（分取HPLC）：
Chromatorex C18 10μ 250×20mm 勾配：A＝水＋0．5％ギ酸、B＝アセトニトリル、0分＝5％B、3分＝5％B物質を含まない予備洗浄、次いで注入、5分＝5％B、25分＝30％B、38分＝30％B、38．1分＝95％B、43．00分＝95％B、43．01分＝5％B、48．0分＝5％B；流量20ml／分、波長210nm。
方法5（分取HPLC）：
Chromatorex C18 10μ 250×20mm 勾配：A＝水＋0．5％ギ酸、B＝アセトニトリル、0分＝5％B、3分＝5％B物質を含まない予備洗浄、次いで注入、5分＝5％B、25分＝50％B、38分＝50％B、38．1分＝95％B、43．00分＝95％B、43．01分＝5％B、48．0分＝5％B；流量20ml／分、波長210nm。
方法6（分取HPLC）：
XBridge Prep．C18 5μ 50×19mm 勾配：A＝水＋0．5％水酸化アンモニウム、B＝アセトニトリル、0分＝5％B、3分＝5％B物質を含まない予備洗浄、次いで注入、5分＝5％B、25分＝50％B、38．0分＝50％B、38．1分＝95％B、43．00分＝95％B、43．01分＝5％B、48．0分＝5％B；流量15ml／分、波長210nm。
方法7（LC−MS）：
MS機器：Waters（Micromass）QM；HPLC機器：Agilent 1100シリーズ；カラム：Agilent ZORBAX Extend−C18 3．0×50mm 3．5ミクロン；移動相A：水1l＋0．01molの炭酸アンモニウム、移動相B：アセトニトリル1l；勾配：0．0分98％A→0．2分98％A→3．0分5％A→4．5分5％A；オーブン：40℃；流量：1．75ml／分；UV検出：210nm。
方法8（LC−MS）：
機器：Waters ACQUITY SQD UPLCシステム；カラム：Waters Acquity UPLC HSS T3 1．8μ 30×2mm；移動相A：水1l＋99％濃度ギ酸0．25ml；移動相B：アセトニトリル1l＋99％濃度ギ酸0．25ml；勾配：0．0分90％A→1．2分5％A→2．0分5％A；オーブン：50℃；流量：0．60ml／分；UV検出：208〜400nm。
方法9（分取HPLC）：
MS機器：Waters；HPLC機器：Waters（カラムWaters X−Bridge C18、18mm×50mm、5μm、溶離液A：水＋0．05％トリエチルアミン、移動相B：アセトニトリル（ULC）＋0．05％トリエチルアミン、勾配；流量：40ml／分；UV検出：DAD；210〜400nm）またはMS機器：Waters，HPLC機器：Waters（カラムPhenomenex Luna 5μ C18（2）100A、AXIA Tech．50×21．2mm、溶離液A：水＋0．05％ギ酸、移動相B：アセトニトリル（ULC）＋0．05％ギ酸、勾配；流量：40ml／分；UV検出：DAD；210〜400nm）。
方法10（LC−MS）：
MS機器：Waters SQD；HPLC機器：Waters UPLC；カラム：Zorbax SB−Aq（Agilent）、50mm×2．1mm、1．8μm；移動相A：水＋0．025％ギ酸、移動相B：アセトニトリル（ULC）＋0．025％ギ酸；勾配：0．0分98％A−0．9分25％A−1．0分5％A−1．4分5％A−1．41分98％A−1．5分98％A；オーブン：40℃；流量：0．600ml／分；UV検出：DAD；210nm。
方法11（MS）：
機器：Waters ZQ 2000；エレクトロスプレーイオン化；移動相A：水1l＋99％濃度ギ酸0．25ml、移動相B：アセトニトリル1l＋99％濃度ギ酸0．25ml；25％A、75％B；流量：0．25ml／分。
方法12（DCI−MS）：
機器：Thermo Fisher−Scientific DSQ；化学イオン化；反応ガスNH3；発生源温度：200℃；イオン化エネルギー70eV。
方法13（LC−MS）：
MS機器：Waters（Micromass）Quattro Micro；HPLC機器：Agilent 1100シリーズ；カラム：YMC−Triart C18 3μ 50×3mm；移動相A：水1l＋0．01molの炭酸アンモニウム、移動相B：アセトニトリル1l；勾配：0．0分100％A→2．75分5％A→4．5分5％A；オーブン：40℃；流量：1．25ml／分；UV検出：210nm。
方法14（GC−MS）：
機器：Thermo Scientific DSQII、Thermo Scientific Trace GC Ultra；カラム：Restek RTX−35MS、15m×200μm×0．33μm；一定ヘリウム流量：1．20ml／分；オーブン：60℃；入口：220℃；勾配：60℃、30℃／分→300℃（3．33分間維持）。
方法15（LC−MS、分析的）：
機器：Agilent MS Quad 6150；HPLC：Agilent 1290；カラム：Waters Acquity UPLC HSS T3 1．8μ 50×2．1mm；移動相A：水1l＋99％濃度ギ酸0．25ml、移動相B：アセトニトリル1l＋99％濃度ギ酸0．25ml；勾配：0．0分90％A→0．3分90％A→1．7分5％A→3．0分5％A オーブン：50℃；流量：1．20ml／分；UV検出：205〜305nm。
方法16（LC−MS、分析的）：
MS機器：Waters（Micromass）Quattro Micro；機器Waters UPLC Acquity；カラム：Waters BEH C18 1．7μ 50×2．1mm；移動相A：水1l＋0．01molのギ酸アンモニウム、移動相B：アセトニトリル1l；勾配：0．0分95％A→0．1分95％A→2．0分15％A→2．5分15％A→2．51分10％A→3．0分10％A；オーブン：40℃；流量：0．5ml／分；UV検出：210nm。
方法17（LC−MS）：
機器：Waters ACQUITY SQD UPLCシステム；カラム：Waters Acquity UPLC HSS T3 1．8μ 50×1mm；移動相A：水1l＋99％濃度ギ酸0．25ml、移動相B：アセトニトリル1l＋99％濃度ギ酸0．25ml；勾配：0．0分95％A→6．0分5％A→7．5分5％A；オーブン：50℃；流量：0．35ml／分；UV検出：210〜400nm。
さらなる詳細：
本発明の化合物を上記方法による分取HPLC（溶離液は添加剤、例えば、トリフルオロ酢酸、ギ酸またはアンモニアを含む）によって精製する場合、本発明の化合物が十分に塩基性または酸性の官能基を含む場合には、本発明の化合物を、塩型で、例えば、トリフルオロ酢酸塩、ギ酸塩またはアンモニウム塩として得ることができる。このような塩を、当業者に既知の種々の方法によって、対応する遊離塩基または酸に変換することができる。
例えば、トリフルオロ酢酸塩、ギ酸塩またはアンモニウム塩は、飽和重炭酸ナトリウム水溶液で有機溶液または懸濁液を抽出することによって、塩を含まない形態に変換することができる。
さらに、アミジンは、遊離化合物として、または（酢酸が関与する場合、調製に応じて）部分的に酢酸塩もしくは酢酸溶媒和物として存在することができる。
以下に記載する本発明の合成中間体および実施例の場合、対応する塩基または酸の塩の形態で指定されるいずれの化合物も、一般的にそれぞれの調製および／または精製法によって得られる未知の正確な化学量論的組成の塩である。そのため、より詳細に指定しない限り、「塩酸塩」、「トリフルオロアセテート」、「ナトリウム塩」または「xHCl」、「xCF3COOH」、「xNa＋」などの名称および構造式への追加は、このような塩の場合、化学量論的意味で理解されるべきでなく、その中に存在する塩形成成分に関する説明的性質を有するにすぎない。
対応して、合成中間体または実施例またはその塩を、記載される調製および／または精製法によって未知の化学量論的組成の溶媒和物、例えば、水和物の形態で得た場合（これらが定義された型のものである場合）、これを適用する。
さらに、本発明による二次化合物は、特にNMR試験において、回転異性体／異性体混合物として存在することができる。純度の数値は一般的に、LC／MSクロマトグラムにおける対応するピーク積分に基づくが、1H NMRスペクトルを用いてさらに決定したかもしれない。純度が示されていない場合、純度はLC／MSクロマトグラムでの自動化ピーク積分により概して100％である、または純度を明確に決定しなかった。
明言される理論値の収率（％）は、一般的に純度＜100％が示される場合、純度について補正している。溶媒含有または汚染バッチでは、正式な収率が「100％超」となり得、これらの場合、収率を溶媒または純度について補正していない。
全ての1H NMRスペクトルデータで、化学シフトδをppmで述べる。
以下の段落で報告される1H NMRスペクトルのプロトンシグナルの多重度は、各場合で観察されるシグナル型を表しており、いかなる高次シグナル現象も考慮していない。一般に、明言される化学シフトは当のシグナルの中心を指す。ブロードな多重項の場合、間隔が与えられる。溶媒または水によって隠されたシグナルは、仮で割り当てたまたは列挙しなかった。有意にブロードなシグナル−例えば、分子部分の急速な回転によってまたはプロトン交換のために引き起こされる−も同様に仮で割り当てた（通常、ブロードな多重項もしくはブロードな一重項と呼ぶ）または列挙しなかった。
1H NMRスペクトルにおいて、化学系「2−メチルピラゾロ［1，5−a］ピリジン」のメチル基は、一重項（頻繁に、DMSO−d6でおよび2．40〜2．60ppmの範囲で）として現れ、それ自体明確に識別可能である、溶媒シグナルによって重ね合わせられる、または完全に溶媒のシグナルの下にある。
融点および融点範囲は、明言する場合、未修正である。
その調製が以下で明示的に記載されていない全ての反応物質または試薬は、一般的に利用可能な供給業者から商業的に購入した。同様にその調製が以下で記載されておらず、商業的に入手可能でなく一般的に利用可能でない供給業者から得た全ての他の反応物質または試薬については、その調製が記載されている公開参考文献を参照する。
出発化合物および中間体：
実施例1A
2−［（2，6−ジフルオロベンジル）オキシ］−4−メチルピリジン
Figure 2018505885
 2，6−ジフルオロベンジルブロミド［CAS番号：85118−00−9］5．00g（24．2mmol、1．0当量）および2−ヒドロキシ−4−メチルピリジン［CAS番号：13466−41−6］3．16g（29．0mmol、1．2当量）の混合物をTHF50mlに溶解した。炭酸銀7．99g（29．0mmol、1．2当量）を溶液に添加し、混合物を一晩光を除いて還流で加熱した。その後、反応混合物を珪藻土を通して濾過し、酢酸エチルで溶出し、濾液を濃縮した。粗生成物をBiotage Isolera（100gシリカゲルカートリッジ、シクロヘキサン／酢酸エチル勾配、0％から10％酢酸エチル）によって精製した。これにより、標記化合物3．51g（理論値の61％）が得られた。
TLC（シリカゲル、シクロヘキサン／酢酸エチル10：1）：RF＝0．50
LC−MS（方法2）：Rt＝1．17分
MS（ESpos）：m／z＝236（M＋H）＋
1H−NMR（400MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝2．26（s，3H），5．35（s，2H），6．66（s，1H），6．86（d，1H），7．12−7．21（m，2H），7．47−7．56（m，1H），8．06（d，1H）．
実施例2A
1−アミノ−2−［（2，6−ジフルオロベンジル）オキシ］−4−メチルピリジニウム2，4，6−トリメチルベンゼンスルホネート
Figure 2018505885
 トリフルオロ酢酸3．4ml（43．9mmol、10当量）および水0．33mlの混合物を−5℃に冷却した。この温度で、エチル（1E）−N−［（メシチルスルホニル）オキシ］エタンイミドエート［CAS番号：38202−27−6］1．88g（6．59mmol、1．5当量）を少しずつ添加した。1．5時間後、氷水30mlを添加し、混合物を短時間攪拌し、得られたO−（2−メシチレンスルホニル）ヒドロキシルアミン（MSH）を、予冷却フリットを用いて濾別し、氷水30mlで洗浄した。水で湿ったO−（2−メシチレンスルホニル）ヒドロキシルアミンをジクロロメタン12mlに溶解し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濾液を実施例1Aからの2−［（2，6−ジフルオロベンジル）オキシ］−4−メチルピリジン1．03g（4．39mmol、1．0当量）のジクロロメタン2ml中溶液に直接滴加した。混合物を室温で一晩攪拌した。その後、ジエチルエーテルを滴加し、得られた沈殿を濾別し、ジエチルエーテルで洗浄し、乾燥させた。標記化合物1．3gを単離した（理論値の59％、純度90％）。
1H−NMR（400MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝2．17（s，3H），2．46−2．57（s，3H and s，6H superposed by the solvent signal），5．64（s，2H），6．74（s，2H），7．23−7．48（m，4H），7．60−7．70（m，1H），7．86（br s，1H），8．44（d，1H）．
実施例3A
エチル7−［（2，6−ジフルオロベンジル）オキシ］−2，5−ジメチルピラゾロ［1，5−a］ピリジン−3−カルボキシレート
Figure 2018505885
 実施例2Aからの1−アミノ−2−［（2，6−ジフルオロベンジル）オキシ］−4−メチルピリジニウム2，4，6−トリメチルベンゼンスルホネート1．62g（3．60mmol、1．0当量）をDMF36mlに溶解し、エチルブタ−2−イノエート［CAS番号：4341−76−8］0．84ml（7．19mmol、2．0当量）を添加した。炭酸カリウム0．994g（7．19mmol、2．0当量）を添加し、混合物を室温で1．5時間攪拌した。その後、混合物を水150mlに注ぎ入れ、短時間攪拌し、得られた固体を濾別し、水で洗浄し、乾燥させた。これにより、標記化合物440mg（理論値の45％、87％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．22分
MS（ESpos）：m／z＝361（M＋H）＋
実施例4A
7−［（2，6−ジフルオロベンジル）オキシ］−2，5−ジメチルピラゾロ［1，5−a］ピリジン−3−カルボン酸
Figure 2018505885
 1N水酸化ナトリウム水溶液4．9ml（4．88mmol、4．0当量）を、実施例3Aからのエチル7−［（2，6−ジフルオロベンジル）オキシ］−2，5−ジメチルピラゾロ［1，5−a］ピリジン−3−カルボキシレート0．440g（1．22mmol、1当量）のジオキサン12．7ml中溶液に添加し、混合物を90℃で36時間攪拌した。その後、反応混合物を濃縮し、得られた固体を濾別した。濾液を6N塩酸水溶液で酸性化し、短時間攪拌した。形成した固体を濾別し、水で洗浄し、乾燥させた。これにより標記化合物248mgが得られ（理論値の61％、純度60％）、これをさらに精製することなくさらに変換した。
LC−MS（方法2）：Rt＝0．96分
MS（ESpos）：m／z＝333（M＋H）＋
実施例5A
rac−2−アミノ−2−メチル（4，4，4−2H3）ブタノニトリル
Figure 2018505885
 （4，4，4−2H3）ブタン−2−オン［CAS登録番号：53389−26−7］2．0g（26．62mmol）を最初にメタノール中2Nアンモニア22．3mlに装入し、シアン化ナトリウム1．72g（35．14mmol）および塩化アンモニウム1．88g（35．14mmol）を室温で添加し、混合物を還流下で4時間攪拌した。反応混合物を冷却し、ジエチルエーテル40mlを添加し、存在する固体を濾別した。溶媒を標準圧力下で濾液から留去した。標記化合物2．75g（純度約50％で理論値の51％）が残渣として得られ、これをさらに精製することなく後の段階に使用した。
GC−MS（方法14）：Rt＝1．66分
MS（ESpos）：m／z＝86（M−CH3）＋
実施例6A
rac−ベンジル［2−シアノ（4，4，4−2H3）ブタン−2−イル］カルバメート
Figure 2018505885
 実施例5Aからのrac−2−アミノ−2−メチル（4，4，4−2H3）ブタノニトリル2．75g（純度約50％の13．59mmol）を、最初にテトラヒドロフラン／水＝9／1 33mlに装入し、炭酸カリウム5．82g（42．13mmol）を添加した。0℃で、クロロギ酸ベンジル2．32g（13．59mmol）をゆっくり滴加した。次いで、混合物を攪拌しながら徐々に室温まで加温させ、室温で一晩攪拌した。上清溶媒をデカントし、残渣を各々25mlのテトラヒドロフランと共に2回攪拌し、次いで、上清溶媒を都度デカントした。合わせた有機相を濃縮し、粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（移動相勾配：シクロヘキサンからシクロヘキサン／ジクロロメタン勾配1／1〜1／2）で精製した。これにより、標記化合物2．56g（理論値の78％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝0．89分
MS（ESpos）：m／z＝236（M＋H）＋
1H−NMR（400MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝1．51（s，3H），1．75−1．91（m，2H），5．08（s，2H），7．28−7．42（m，5H），7．96（br．s，1H）．
実施例7A
ent−ベンジル−［2−シアノ（4，4，4−2H3）ブタン−2−イル］カルバメート（エナンチオマーA）
Figure 2018505885
 実施例6Aからのrac−ベンジル［2−シアノ（4，4，4−2H3）ブタン−2−イル］カルバメート2．56gをキラル相［カラム：Daicel Chiralcel OJ−H、5μm、250×20mm、移動相：70％イソヘキサン、30％イソプロパノール、流量：15ml／分、温度：47℃、検出：220nm］で分取法によりエナンチオマーに分離した。
エナンチオマーA：1．03g（＞99％ee）
Rt＝7．11分［Daicel Chiralcel OJ−H、250×4．6mm、5μm、移動相：70％イソヘキサン、30％イソプロパノール、流量1ml／分、温度：50℃、検出：220nm］。
実施例8A
ent−ベンジル［2−シアノ（4，4，4−2H3）ブタン−2−イル］カルバメート（エナンチオマーB）
Figure 2018505885
 実施例6Aからのrac−ベンジル［2−シアノ（4，4，4−2H3）ブタン−2−イル］カルバメート2．56gをキラル相［カラム：Daicel Chiralcel OJ−H、5μm、250×20mm、移動相：70％イソヘキサン、30％イソプロパノール、流量：15ml／分、温度：47℃、検出：220nm］で分取法によりエナンチオマーに分離した。
エナンチオマーB：0．99g（＞99％ee）
Rt＝8．25分［Daicel Chiralcel OJ−H、250×4．6mm、5μm、移動相：70％イソヘキサン、30％イソプロパノール、流量1ml／分、温度：50℃、検出：220nm］。
実施例9A
ent−ベンジル［1−アミノ−2−メチル（4，4，4−2H3）ブタン−2−イル］カルバメート（エナンチオマーA）
Figure 2018505885
 実施例7Aからのent−ベンジル−［2−シアノ（4，4，4−2H3）ブタン−2−イル］カルバメート（エナンチオマーA）0．50g（2．13mmol）をメタノール中7Nアンモニア溶液10mlに溶解し、ラネーニッケル（50％水性スラリー）0．79gをアルゴン下で添加した。反応混合物をオートクレーブ中20〜30barで3時間水素付加した。反応混合物を珪藻土を通して濾過し、メタノールですすぎ、濃縮した。これにより標的化合物387mg（理論値の75％）が得られ、これをさらに精製することなく次のステップに使用した。
LC−MS（方法2）：Rt＝0．50分
MS（ESpos）：m／z＝240（M＋H）＋
実施例10A
ent−ベンジル［1−アミノ−2−メチル（4，4，4−2H3）ブタン−2−イル］カルバメート（エナンチオマーB）
Figure 2018505885
 実施例8Aからのent−ベンジル−［2−シアノ（4，4，4−2H3）ブタン−2−イル］カルバメート（エナンチオマーB）0．50g（2．13mmol）をメタノール中7Nアンモニア溶液10mlに溶解し、ラネーニッケル（50％水性スラリー）0．79gをアルゴン下で添加した。反応混合物をオートクレーブ中20〜30barで3時間水素付加した。反応混合物を珪藻土を通して濾過し、メタノールですすぎ、濃縮した。これにより標的化合物487mg（理論値の94％）が得られ、これをさらに精製することなく次のステップに使用した。
LC−MS（方法2）：Rt＝0．53分
MS（ESpos）：m／z＝240（M＋H）＋
実施例11A
rac−2−アミノ−2−メチル−4−（トリメチルシリル）ブタノニトリル
Figure 2018505885
 4−（トリメチルシリル）ブタン−2−オン［商業的に入手可能またはR．AcereteらJournal of Organic Chemistry 2011、76、10129〜10139により合成的に入手可能］13．0g（90．10mmol）を最初にメタノール中7Nアンモニア25mlに装入し、シアン化ナトリウム5．83g（118．93mmol）および塩化アンモニウム6．36g（118．93mmol）を室温で添加し、混合物を還流下で3時間攪拌した。反応混合物を冷却し、存在する固体を濾別した。濾液をさらに精製することなく次のステップに使用した。
実施例12A
rac−ベンジル［2−シアノ−4−（トリメチルシリル）ブタン−2−イル］カルバメート
Figure 2018505885
 実施例11Aからのrac−2−アミノ−2−メチル−4−（トリメチルシリル）ブタノニトリルの粗溶液を最初に水16mlに装入し、炭酸カリウム37．36g（270．35mmol）を添加した。0℃で、クロロギ酸ベンジル23．06g（135．18mmol）をゆっくり滴加した。次いで、混合物を攪拌しながら徐々に室温まで加温させ、室温で一晩攪拌した。反応混合物を濾過し、残渣をテトラヒドロフランで繰り返し洗浄した。濾液を濃縮し、粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（移動相：シクロヘキサン／酢酸エチル＝9／1）によって精製した。これにより、標記化合物11．60g（2ステップにわたって理論値の42％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．23分
MS（ESpos）：m／z＝305（M＋H）＋
1H−NMR（400MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝−0．01（s，9H），0．45−0．67（m，2H），1．52（s，3H），1．73−1．90（m，2H），2．24−2．52（m，2H），5．08（s，2H），7．29−7．44（m，5H），7．94（br．s，1H）．
実施例13A
ent−ベンジル［2−シアノ−4−（トリメチルシリル）ブタン−2−イル］カルバメート（エナンチオマーA）
Figure 2018505885
 実施例12Aからのrac−ベンジル［2−シアノ−4−（トリメチルシリル）ブタン−2−イル］カルバメート10．0gをキラル相［カラム：Daicel Chiralpak AY−H、5μm、250×20mm、移動相：15％エタノール、85％イソヘキサン、流量：20ml／分、温度：30℃、検出：220nm］で分取法によりエナンチオマーに分離した。
エナンチオマーA：4．19g（＞99％ee）
Rt＝5．24分［Daicel Chiralpak AY−H、250×4．6mm、5μm、移動相：10％エタノール、90％イソヘキサン、流量：1ml／分、温度：45℃、検出：220nm］。
実施例14A
ent−ベンジル［2−シアノ−4−（トリメチルシリル）ブタン−2−イル］カルバメート（エナンチオマーB）
Figure 2018505885
 実施例12Aからのrac−ベンジル［2−シアノ−4−（トリメチルシリル）ブタン−2−イル］カルバメート10．0gをキラル相［カラム：Daicel Chiralpak AY−H、5μm、250×20mm、移動相：15％エタノール、85％イソヘキサン、流量：20ml／分、温度：30℃、検出：220nm］で分取法によりエナンチオマーに分離した。
エナンチオマーB：4．24g（＞99％ee）
Rt＝6．89分［Daicel Chiralpak AY−H、250×4．6mm、5μm、移動相：10％エタノール、90％イソヘキサン、流量：1ml／分、温度：45℃、検出：220nm］。
実施例15A
ent−ベンジル［1−アミノ−2−メチル−4−（トリメチルシリル）ブタン−2−イル］カルバメート（エナンチオマーA）
Figure 2018505885
 実施例13Aからのent−ベンジル［2−シアノ−4−（トリメチルシリル）ブタン−2−イル］カルバメート（エナンチオマーA）2．0g（6．57mmol）をメタノール中7Nアンモニア溶液31mlに溶解し、ラネーニッケル（50％水性スラリー）2．44gをアルゴン下で添加した。反応混合物をオートクレーブ中20〜30barで3時間水素付加した。反応混合物を珪藻土を通して濾過し、メタノールですすぎ、濃縮した。これにより標的化合物1．80g（理論値の87％）が得られ、これをさらに精製することなく次のステップに使用した。
LC−MS（方法16）：Rt＝1．66分
MS（ESpos）：m／z＝309（M＋H）＋
実施例16A
ent−ベンジル［1−アミノ−2−メチル−4−（トリメチルシリル）ブタン−2−イル］カルバメート（エナンチオマーB）
Figure 2018505885
 実施例14Aからのent−ベンジル［2−シアノ−4−（トリメチルシリル）ブタン−2−イル］カルバメート（エナンチオマーB）2．0g（6．57mmol）をメタノール中7Nアンモニア溶液31mlに溶解し、ラネーニッケル（50％水性スラリー）2．44gをアルゴン下で添加した。反応混合物をオートクレーブ中20〜30barで3時間水素付加した。反応混合物を珪藻土を通して濾過し、メタノールですすぎ、濃縮した。これにより標的化合物1．72g（理論値の83％）が得られ、これをさらに精製することなく次のステップに使用した。
LC−MS（方法2）：Rt＝0．78分
MS（ESpos）：m／z＝309（M＋H）＋
実施例17A
ent−ベンジル｛1−［（｛7−［（2，6−ジフルオロベンジル）オキシ］−2，5−ジメチルピラゾロ［1，5−a］ピリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］−2−メチル（4，4，4−2H3）ブタン−2−イル｝カルバメート（エナンチオマーA）
Figure 2018505885
 実施例4Aからの7−［（2，6−ジフルオロベンジル）オキシ］−2，5−ジメチルピラゾロ［1，5−a］ピリジン−3−カルボン酸75mg（0．19mmol、純度84％）を最初にHATU87mg（0．23mmol）およびN，N−ジイソプロピルエチルアミン0．1ml（0．57mmol）と合わせてDMF0．70mlに装入し、混合物を室温で10分間攪拌した。その後、実施例9Aからのent−ベンジル［1−アミノ−2−メチル（4，4，4−2H3）ブタン−2−イル］カルバメート（エナンチオマーA）60mg（0．25mmol）を反応溶液に添加し、混合物を室温で一晩攪拌した。ent−ベンジル−［1−アミノ−2−メチル（4，4，4−2H3）ブタン−2−イル］カルバメート（エナンチオマーA）さらに23mg（0．095mmol）を添加し、混合物を室温で1時間攪拌した。次いで、水7mlを混合物に添加した。形成した沈殿を濾別し、高真空下で乾燥させた。これにより、標的化合物111mg（理論値の80％、純度76％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．17分
MS（ESpos）：m／z＝554（M＋H）＋
実施例18A
ent−ベンジル｛1−［（｛7−［（2，6−ジフルオロベンジル）オキシ］−2，5−ジメチルピラゾロ［1，5−a］ピリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］−2−メチル−4−（トリメチルシリル）ブタン−2−イル｝カルバメートトリフルオロアセテート（エナンチオマーA）
Figure 2018505885
 実施例4Aからの7−［（2，6−ジフルオロベンジル）オキシ］−2，5−ジメチルピラゾロ［1，5−a］ピリジン−3−カルボン酸75mg（0．19mmol、純度84％）を最初にHATU94mg（0．25mmol）およびN，N−ジイソプロピルエチルアミン99μl（0．57mmol）と合わせてDMF0．62mlに装入し、混合物を室温で20分間攪拌した。その後、実施例15Aからのent−ベンジル［1−アミノ−2−メチル−4−（トリメチルシリル）ブタン−2−イル］カルバメート（エナンチオマーA）78mg（0．25mmol）を反応溶液に添加し、混合物を室温で一晩攪拌した。次いで、水7mlを混合物に添加した。形成した沈殿を濾別し、アセトニトリルおよび水で希釈し、TFAを添加し、混合物を分取HPLC（RP18カラム、移動相：0．1％TFAを添加したアセトニトリル／水勾配）によって精製した。生成物分画を合わせ、濃縮した。これにより、標的化合物70mg（理論値の50％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．39分；
MS（ESpos）：m／z＝623（M−TFA＋H）＋
実施例19A
ent−ベンジル｛1−［（｛7−［（2，6−ジフルオロベンジル）オキシ］−2，5−ジメチルピラゾロ［1，5−a］ピリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］−2−メチル−4−（トリメチルシリル）ブタン−2−イル｝カルバメートト（エナンチオマーB）
Figure 2018505885
 実施例4Aからの7−［（2，6−ジフルオロベンジル）オキシ］−2，5−ジメチルピラゾロ［1，5−a］ピリジン−3−カルボン酸75mg（0．19mmol、純度84％）を最初にHATU94mg（0．25mmol）およびN，N−ジイソプロピルエチルアミン99μl（0．57mmol）と合わせてDMF0．62mlに装入し、混合物を室温で20分間攪拌した。その後、実施例16Aからのent−ベンジル［1−アミノ−2−メチル−4−（トリメチルシリル）ブタン−2−イル］カルバメート（エナンチオマーB）78mg（0．25mmol）を反応溶液に添加し、混合物を室温で2時間攪拌した。ent−ベンジル−［1−アミノ−2−メチル−4−（トリメチルシリル）ブタン−2−イル］カルバメート（エナンチオマーB）さらに29mg（0．095mmol）を添加し、混合物を室温で1時間攪拌した。次いで、水7mlを混合物に添加した。形成した沈殿を濾別し、高真空下で乾燥させた。これにより、標的化合物134mg（理論値の99％、純度88％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．39分；
MS（ESpos）：m／z＝623（M＋H）＋
実施例20A
rac−2−アミノ−2−［2−（ジフルオロメチル）−2H−テトラゾール−5−イル］プロパン−1−オール
Figure 2018505885
 標的化合物は、文献から公知である方法に従って、室温で、THF中テトラブチルアンモニウムフルオリド（TBAF）を用いて、1−｛［tert−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−2−［2−（ジフルオロメチル）−2H−テトラゾール−5−イル］プロパン−2−アミン（ラセミ出発材料から国際公開第2014／084312号パンフレットの中間体300と同様に調製可能である）の脱保護により調製することができる。
実施例
実施例1
7−［（2，6−ジフルオロベンジル）オキシ］−N−［（2S）−1−ヒドロキシ−2−（5−メチル−1，3，4−チアジアゾール−2−イル）プロパン−2−イル］−2，5−ジメチルピラゾロ［1，5−a］ピリジン−3−カルボキサミドトリフルオロアセテート
Figure 2018505885
 実施例4Aからの7−［（2，6−ジフルオロベンジル）オキシ］−2，5−ジメチルピラゾロ［1，5−a］ピリジン−3−カルボン酸20mg（0．05mmol）を最初にHATU21mg（0．06mmol）およびN，N−ジイソプロピルエチルアミン70μl（0．40mmol）を合わせてDMF0．2mlに装入し、混合物を室温で10分間攪拌した。次いで、（2S）−2−アミノ−2−（5−メチル−1，3，4−チアジアゾール−2−イル）プロパン−1−オール（国際公開第2014／084312号パンフレット中の中間体307と同様に調製可能）44mg（0．15mmol）を反応溶液に添加し、混合物を室温で2時間攪拌した。次いで、混合物を40℃で20分間および60℃で1．5時間攪拌した。次いで、混合物をアセトニトリルおよび水で希釈し、TFAを添加し、混合物を分取HPLC（RP18カラム、移動相：0．1％TFAを添加したアセトニトリル／水勾配）によって精製した。生成物分画を合わせ、濃縮した。これにより、標的化合物10mg（理論値の31％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝0．89分
MS（ESpos）：m／z＝488（M−TFA＋H）＋
1H−NMR（400MHz，DMSO−d6）：δ＝1．81（s，3H），2．40（s，3H），2．68（s，3H），3．77−3．85（m，2H），5．46（s，2H），6．58（s，1H），7．21−7．30（m，2H），7．35（s，1H），7．57−7．67（m，2H），［さらなるシグナルは溶媒ピークの下に隠れされている］。
実施例2
rac−7−［（2，6−ジフルオロベンジル）オキシ］−N−｛2−［2−（ジフルオロメチル）−2H−テトラゾール−5−イル］−1−ヒドロキシプロパン−2−イル｝−2，5−ジメチルピラゾロ［1，5−a］ピリジン−3−カルボキサミド
Figure 2018505885
 実施例4Aからの7−［（2，6−ジフルオロベンジル）オキシ］−2，5−ジメチルピラゾロ［1，5−a］ピリジン−3−カルボン酸40mg（0．10mmol）を最初にHATU40mg（0．11mmol）およびN，N−ジイソプロピルエチルアミン88μl（0．51mmol）を合わせてDMF0．4mlに装入し、混合物を室温で10分間攪拌した。次いで、実施例20Aのrac−2−アミノ−2−［2−（ジフルオロメチル）−2H−テトラゾール−5−イル］プロパン−1−オール21mg（0．11mmol）を反応溶液に添加し、混合物を60℃で6時間攪拌した。次いで、混合物をアセトニトリルおよび水で希釈し、TFAを添加し、混合物を分取HPLC（RP18カラム、移動相：0．1％TFAを添加したアセトニトリル／水勾配）によって精製した。生成物分画を合わせ、濃縮した。その後、残渣をジクロロメタンおよび少量のメタノールに溶解し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液で2回洗浄した。水相をジクロロメタンで2回抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、濃縮および凍結乾燥した。これにより、標的化合物40mg（理論値の74％、純度95％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝0．98分
MS（ESpos）：m／z＝508（M＋H）＋
1H−NMR（400MHz，DMSO−d6）：δ＝1．83（s，3H），2．40（s，3H），3．79−3．88（m，2H），5．32（t，1H），5．46（s，2H），6．57（s，1H），7．21−7．30（m，2H），7．31（s，1H），7．57−7．67（m，2H），8．56（t，1H），［さらなるシグナルは溶媒ピークの下に隠れされている］。
実施例3
ent−N−［2−アミノ−2−メチル（4，4，4−2H3）ブチル］−7−［（2，6−ジフルオロベンジル）オキシ］−2，5−ジメチルピラゾロ［1，5−a］ピリジン−3−カルボキサミド（エナンチオマーA）
Figure 2018505885
 実施例17Aからのent−ベンジル｛1−［（｛7−［（2，6−ジフルオロベンジル）オキシ］−2，5−ジメチルピラゾロ［1，5−a］ピリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］−2−メチル（4，4，4−2H3）ブタン−2−イル｝カルバメート（エナンチオマーA）111mg（0．15mmol、純度76％）をエタノール4mlに溶解し、TFA59μl（0．76mmol）および10％パラジウム活性炭素5mg（0．005mmol）をアルゴン下で添加し、混合物を標準圧力で3．5時間水素化した。反応溶液をMilliporeフィルタを用いて濾過し、エタノールで洗浄し、濾液を、ロータリーエバポレーターを用いて濃縮した。アセトニトリル、水およびTFAを残渣に添加し、生成物を分取HPLC（RP18カラム、移動相：0．1％TFAを添加したアセトニトリル／水勾配）によって精製した。生成物分画を合わせ、濃縮した。その後、残渣をジクロロメタンおよび少量のメタノールに溶解し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液で2回洗浄した。水相をジクロロメタンで2回抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過および濃縮した。残渣を厚層クロマトグラフィー（移動相：ジクロロメタン／メタノール中2Nアンモニア＝15／1）によって再度精製した。これにより、標的化合物32mg（理論値の50％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝0．70分
MS（ESpos）：m／z＝420（M＋H）＋
1H−NMR（500MHz，DMSO−d6）：δ＝0．96（s，3H），1．27−1．38（m，2H），1．48（br．s，2H），2．39（s，3H），3．10−3．22（m，2H），5．46（s，2H），6．55（s，1H），7．20（t，1H），7．23−7．29（m，2H），7．39（s，1H），7．58−7．67（m，1H），［さらなるシグナルは溶媒ピークの下に隠れされている］。
実施例4
ent−N−［2−アミノ−2−メチル−4−（トリメチルシリル）ブチル］−7−［（2，6−ジフルオロベンジル）オキシ］−2，5−ジメチルピラゾロ［1，5−a］ピリジン−3−カルボキサミド（エナンチオマーA）
Figure 2018505885
 実施例18Aからのent−ベンジル｛1−［（｛7−［（2，6−ジフルオロベンジル）オキシ］−2，5−ジメチルピラゾロ［1，5−a］ピリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］−2−メチル−4−（トリメチルシリル）ブタン−2−イル｝カルバメートトリフルオロアセテート（エナンチオマーA）70mg（0．09mmol）をエタノール2．5mlに溶解し、TFA36μl（0．47mmol）および10％パラジウム活性炭素3mg（0．003mmol）をアルゴン下で添加し、混合物を標準圧力で2時間水素化した。反応溶液をMilliporeフィルタを用いて濾過し、エタノールで洗浄し、濾液を、ロータリーエバポレーターを用いて濃縮した。残渣を厚層クロマトグラフィー（移動相：ジクロロメタン／メタノール中2Nアンモニア＝20／1）によって精製した。その後、残渣をジクロロメタンおよび少量のメタノールに溶解し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液で2回洗浄した。水相をジクロロメタンで2回抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過および濃縮した。これにより、標的化合物30mg（理論値の65％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝0．87分
MS（ESpos）：m／z＝489（M＋H）＋
1H−NMR（500MHz，DMSO−d6）：δ＝−0．04（s，9H），0．43−0．57（m，2H），0．96（s，3H），1．25−1．37（m，2H），1．85（br．s，2H），2．40（s，3H），3．16−3．23（m，2H），5．46（s，2H），6．55（s，1H），7．21（t，1H），7．22−7．29（m，2H），7．38（s，1H），7．58−7．67（m，1H），［さらなるシグナルは溶媒ピークの下に隠れされている］。
実施例5
ent−N−［2−アミノ−2−メチル−4−（トリメチルシリル）ブチル］−7−［（2，6−ジフルオロベンジル）オキシ］−2，5−ジメチルピラゾロ［1，5−a］ピリジン−3−カルボキサミド（エナンチオマーB）
Figure 2018505885
 実施例19Aからのent−ベンジル｛1−［（｛7−［（2，6−ジフルオロベンジル）オキシ］−2，5−ジメチルピラゾロ［1，5−a］ピリジン−3−イル｝カルボニル）アミノ］−2−メチル−4−（トリメチルシリル）ブタン−2−イル｝カルバメート（エナンチオマーB）134mg（0．19mmol、純度88％）をエタノール5mlに溶解し、TFA73μl（0．95mmol）および10％パラジウム活性炭素6mg（0．006mmol）をアルゴン下で添加し、混合物を標準圧力で5時間水素化した。反応溶液をMilliporeフィルタを用いて濾過し、エタノールで洗浄し、濾液を、ロータリーエバポレーターを用いて濃縮した。アセトニトリル、水およびTFAを残渣に添加し、生成物を分取HPLC（RP18カラム、移動相：0．1％TFAを添加したアセトニトリル／水勾配）によって精製した。生成物分画を合わせ、濃縮した。その後、残渣をジクロロメタンおよび少量のメタノールに溶解し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液で2回洗浄した。水相をジクロロメタンで2回抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過および濃縮した。これにより、標的化合物58mg（理論値の62％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝0．84分
MS（ESpos）：m／z＝489（M＋H）＋
1H−NMR（500MHz，DMSO−d6）：δ＝−0．04（s，9H），0．43−0．57（m，2H），0．96（s，3H），1．25−1．37（m，2H），1．42（br．s，2H），2．40（s，3H），3．15−3．24（m，2H），5．45（s，2H），6．55（s，1H），7．20（t，1H），7．22−7．29（m，2H），7．38（s，1H），7．59−7．67（m，1H），［さらなるシグナルは溶媒ピークの下に隠れされている］。
B．薬理学的有効性の評価
以下の略語を使用する：
Figure 2018505885
本発明の化合物の薬理作用を以下のアッセイで証明することができる：
B−1．PPi検出によるsGC酵素活性の測定
可溶性グアニリルシクラーゼ（sGC）は、刺激されると、GTPをcGMPおよびピロリン酸（PPi）に変換する。PPiは、国際公開第2008／061626号パンフレットに記載されている方法を用いて検出する。アッセイで生じるシグナルは、反応が進行するにつれて増加するので、sGC酵素活性の尺度として働く。PPi基準曲線を用いて、酵素を既知の様式で、例えば、変換速度、刺激性またはミカエリス定数に関して、特徴付けることができる。
試験の遂行
試験を行うために、酵素溶液29μl（50mM TEA、2mM塩化マグネシウム、0．1％BSA（分画V）、0．005％Brij 35、pH7．5中0〜10nM可溶性グアニリルシクラーゼ（Honickaら、Journal of Molecular Medicine 77（1999）14〜23により調製））を最初にマイクロプレートに装入し、刺激溶液1μl（DMSO中0〜10μM 3−モルホリノシドノンイミン、SIN−1、Merck）を添加した。マイクロプレートを室温で10分間インキュベートした。次いで、検出混合物20μl（50mM TEA、2mM塩化マグネシウム、0．1％BSA（分画V）、0．005％Brij 35、pH7．5中1．2nMホタルルシフェラーゼ（フォティナス・ピラリス（Photinus pyralis）ルシフェラーゼ、Promega）、29μMデヒドロルシフェリン（Bitler＆McElroy、Arch．Biochem．Biophys．72（1957）358により調製）、122μMルシフェリン（Promega）、153μM ATP（Sigma）および0．4mM DTT（Sigma））を添加した。基質溶液20μl（50mM TEA、2mM塩化マグネシウム、0．1％BSA（分画V）、0．005％Brij 35、pH7．5中1．25mMグアノシン5’三リン酸（Sigma））を添加することによって、酵素反応を開始し、ルミノメータで連続的に分析した。
B−2．組換えグアニル酸シクラーゼレポーター細胞系に対する効果
本発明による化合物の細胞活性を、F．Wunderら、Anal．Biochem．339、104〜112（2005）に記載されているように、組換えグアニル酸シクラーゼレポーター細胞系を用いて測定する。
本発明の化合物についての代表的なMEC値（MEC＝最小有効濃度）を（いくつかの場合、個々の測定からの平均値として）以下の表に示す：
Figure 2018505885
B−3．インビトロでの血管弛緩効果
ウサギを首への強打によって気絶させ、失血させる。大動脈を取り出し、接着組織を取り除き、幅1．5mmの輪に分割し、これらを以下の組成（それぞれmM）：塩化ナトリウム：119；塩化カリウム：4．8；塩化カルシウム二水和物：1；硫酸マグネシウム七水和物：1．4；リン酸二水素カリウム：1．2；重炭酸ナトリウム：25；グルコース：10を有する37℃のカルボゲン注入クレブス−ヘンゼライト液を含む5ml臓器浴に予応力下で個々に入れる。収縮力をStatham UC2セルで測定し、増幅し、A／D変換器（DAS−1802 HC、Keithley Instruments Munich）を用いてデジタル化し、線形レコーダーで並行して記録する。収縮を生み出すために、フェニレフリンを増加する濃度で累積的に浴に添加する。数回の対照サイクル後、試験する物質を実行毎に増加する投与量で添加し、収縮の大きさをその直前の実行時に得られた収縮の大きさと比較する。これを、対照値の大きさを50％減少させるために要する濃度（IC50値）を計算するために使用する。標準投与体積は5μlであり、浴溶液中のDMSO含量は0．1％に相当する。
B−4．麻酔されたラットにおける血圧測定
体重300〜350gの雄ウィスターラットにチオペンタールで麻酔をかける（100mg／kg腹腔内）。気管切開後、カテーテルを大腿動脈に導入して血圧を測定する。試験する物質を、経管栄養を用いて経口的にまたは大腿静脈を介して静脈内に溶液として投与する（StaschらBr．J．Pharmacol．2002；135：344〜355）。
B−5．意識のある自然発症高血圧ラットにおける血圧のラジオテレメトリー測定
DATA SCIENCES INTERNATIONAL DSI、米国から商業的に入手可能なテレメトリシステムを、下記の意識のあるラットでの血圧測定に使用する。
システムは3つの主要部品からなる：
埋め込み型送信機（Physiotel（登録商標）テレメトリ送信機）
データ取得コンピュータ
に多重化装置（DSI Data Exchange Matrix）を介して接続している受信機（Physiotel（登録商標）受信機）。
テレメトリシステムによって、その通常の生育環境にいる意識のある動物の血圧、心拍数および体動を連続的に記録することが可能になる。
動物材料
試験は、体重200g超の成体雌、自然発症高血圧ラット（SHR岡本）で行う。岡本 京都大学医学部、1963のSHR／NCrlは、血圧が非常に上昇した雄ウィスター京都ラットと血圧がわずかに上昇した雌の交雑種で、米国国立衛生研究所にF13で渡した。
送信機埋め込み後、実験動物を別々にMakrolonケージ3型に収容する。これらの動物は標準的な飼料および水を自由に入手できる。
実験室の昼／夜リズムは、午前6：00時と午後7：00時に室内照明によって変化させる。
送信機埋め込み
使用するTA11PA−C40テレメトリ送信機を、最初の実験使用の少なくとも14日前に無菌状態で実験動物に外科的に埋め込む。創傷が治癒し、埋込みが定着した後、このような計装動物を繰り返し使用することができる。
埋込みのために、絶食動物にペントバルビタール（Nembutal、Sanofi：50mg／kg腹腔内）で麻酔をかけ、腹部の広域にわたって剪毛および消毒する。白線に沿って腹腔を開いた後、システムの液体充填測定カテーテルを、下行大動脈に頭蓋方向に分岐より上に挿入し、組織接着剤（VetBonD（商標）、3M）で固定する。送信機ハウジングを腹壁筋に腹腔内固定し、創傷を一層ずつ閉じる。
感染症を予防するために抗生物質（Tardomyocel COMP Bayer 1ml／kg皮下）を術後に投与する。
物質および溶液
特に名言しない限り、試験する物質を、それぞれ動物の群（n＝6）に経管栄養によって経口投与する。5ml／kg体重の投与量によると、試験物質を適当な溶媒混合物に溶解する、または0．5％チロースに懸濁する。
溶媒で処理した動物群を対照として使用する。
実験手順
本テレメトリ測定装置を24匹の動物に設定する。各実験を実験番号で記録する（V年月日）。
システムで生きている計装ラットの各々に受信アンテナ（1010 Receiver、DSI）を割り当てる。
埋込み送信機を組み込まれたマグネチックスイッチを用いて外部から起動することができる。実験の準備期間にこれらを送信に切り替える。発信シグナルは、データ取得システム（WINDOWS（登録商標）用のDataquest（商標）A．R．T．、DSI）によってオンラインで検出し、適宜処理することができる。データをこの目的のために作成され、実験番号を有するファイルにそれぞれ保存する。
標準的な手順では、それぞれ10秒間、以下を測定する：
収縮期血圧（SBP）
拡張期血圧（DBP）
平均動脈圧（MAP）
心拍数（HR）
活動（ACT）。
測定値の取得を5分間隔でコンピュータ制御下で繰り返す。絶対値として得たソースデータを、現在測定されている大気圧（Ambient Pressure Reference Monitor；APR−1）を用いた図表で補正し、個々のデータとして保存する。さらなる技術的詳細は、製造企業（DSI）の広範なドキュメントに示される。
特に指示しない限り、試験物質を実験日の午前9：00に投与する。投与後、上記パラメータを24時間にわたって測定する。
評価
実験終了後、取得した個々のデータを分析ソフトウェア（DATAQUEST（商標）A．R．T．（商標）ANALYSIS）を用いてソーティングする。ブランク値はここでは投与2時間前の時間と仮定されるので、選択されたデータセットは実験日の午前7：00〜翌日の午前9：00の期間を包含する。
データを、平均値（15分平均）を決定することによって事前定義可能な（predefinable）期間にわたって平滑化し、テキストファイルとして記憶媒体に移す。このように予めソーティングし、圧縮した測定値をエクセルテンプレートに移し、表にする。各実験日について、得られたデータを実験番号を有する専用ファイルに保存する。結果および試験プロトコルをファイルに数字でソーティングした紙の形状で保存する。
文献：
Klaus Witte、Kai Hu、Johanna Swiatek、Claudia Mussig、Georg ErtlおよびBjorn Lemmer：Experimental heart failure in rats：effects on cardiovascular circadian rhythms and on myocardial β−adrenergic signaling．Cardiovasc Res 47（2）：203〜405、2000；Kozo Okamoto：Spontaneous hypertension in rats．Int Rev Exp Pathol 7：227〜270、1969；Maarten van den Buuse：Circadian Rhythms of Blood Pressure，Heart Rate，and Locomotor Activity in Spontaneously Hypertensive Rats as Measured With Radio−Telemetry．Physiology＆Behavior 55（4）：783〜787、1994。
B−6．静脈内投与および経口投与後の薬物動態パラメータの測定
本発明による化合物の薬物動態パラメータを、雄CD−1マウス、雄ウィスターラットおよび雌ビーグルで測定する。マウスおよびラットの場合の静脈内投与は、種特異的血漿／DMSO製剤によって行い、イヌの場合には、水／PEG400／エタノール製剤によって行う。全ての種において、溶解した物質の経口投与は、水／PEG400／エタノール製剤に基づいて、経管栄養を介して行う。ラットからの血液採取は、物質投与前に、シリコーンカテーテルを右外頚静脈に挿入することによって単純化する。手術は、イソフルラン麻酔および鎮痛剤（アトロピン／リマダイル（3／1）0．1ml皮下）の投与により、実験の少なくとも1日前に行う。血液は、物質投与の少なくとも24〜最大で72時間後の終端時点を含む時間窓内で採取する（一般的には10時点超）。血液をヘパリン処理チューブに取り出す。次いで、血漿を遠心分離によって得て、必要に応じて、これをさらなる処理まで−20℃で保管する。
内部標準（化学的に関連のない物質でもあり得る）を本発明の化合物の試料、較正試料および修飾物質に添加し、それに続いて過剰のアセトニトリルを用いてタンパク質を沈殿させる。LC濃度に適合した緩衝液を添加し、その後ボルテックスし、引き続いて1000gで遠心分離する。C18逆相カラムおよび可変的移動相混合物を用いるLC−MS／MSによって上清を分析する。特定の選択したイオンモニタリング実験の抽出イオンクロマトグラムからのピーク高さまたは面積を介して物質を定量化する。
測定した血漿濃度／時間プロットを使用して、検証された薬物動態計算プログラムを用いて、AUC、Cmax、t1／2（終端半減期）、F（生物学的利用能）、MRT（平均滞留時間）およびCL（クリアランス）などの薬物動態パラメータを計算する。
物質定量化を血漿で行うので、薬物動態パラメータを対応して調整することができるようにするために、物質の血液／血漿分布を決定することが必要である。この目的のために、定義された量の物質を揺動ローラーミキサーにおいて20分間当の種のヘパリン処理全血でインキュベートする。1000gでの遠心分離後、血漿濃度を（LC−MS／MS；上記参照によって）測定し、C血液／C血漿の比の値を計算することによって決定する。
B−7．代謝試験
本発明の化合物の代謝プロファイルを決定するため、極めて実質的に完全な肝I相およびII相代謝、ならびに代謝に関与する酵素についての情報を得て、これらを比較するために、本発明による化合物を組換えヒトチトクロムP450（CYP）酵素、種々の動物種（例えば、ラット、イヌ）およびヒト起源からの肝ミクロソームまたは新鮮な初代培養肝細胞と共にインキュベートする。
本発明の化合物を約0．1〜10μMの濃度でインキュベートした。このために、アセトニトリル中0．01〜1mMの濃度を有する本発明の化合物のストック溶液を調製し、次いで、インキュベーション混合物に1：100希釈でピペットを用いて移す。肝ミクロソームおよび組換え酵素を、1mM NADP＋、10mMグルコース−6−リン酸および1ユニットのグルコース−6−リン酸脱水素酵素からなるNADPH産生系を含むおよび含まない50mMリン酸カリウム緩衝液pH7．4中37℃でインキュベートした。初代培養肝細胞を37℃で同様にウィリアムE培地中懸濁でインキュベートした。0〜4時間のインキュベーション時間後、インキュベーション混合物をアセトニトリル（最終濃度約30％）を用いて停止し、タンパク質を約15000×gで遠心分離した。こうして停止した試料を直接分析した、または分析まで−20℃で保存した。
紫外線および質量分析検出を含む高速液体クロマトグラフィー（HPLC−UV−MS／MS）によって分析を行う。このために、インキュベーション試料の上清を、適当なC18逆相カラムおよびアセトニトリルと10mMギ酸アンモニウム水溶液または0．05％ギ酸の可変性移動相混合物を用いてクロマトグラフにかける。質量分析データと合わせたUVクロマトグラムは、代謝産物の同定、構造決定および定量的評価、ならびにインキュベーション混合物中の本発明の化合物の定量的代謝還元に役立つ。
B−8．Caco−2透過性試験
Caco−2細胞系、胃腸障壁での透過性予測のための確立されたインビトロモデルを用いて試験物質の透過性を測定した（Artursson，P．およびKarlsson，J．（1991）．Correlation between oral drug absorption in humans and apparent drug permeability coefficients in human intestinal epithelial（Caco−2）cells．Biochem．Biophys．175（3）、880〜885）。Caco−2細胞（ACC番号169、DSMZ、Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen、Braunschweig、ドイツ）をインサートを含む24ウェルプレートに蒔き、14〜16日間培養した。透過性試験のために、試験物質をDMSOに溶解し、輸送バッファ（ハンクス緩衝塩類溶液、Gibco／Invitrogen、19．9mMグルコースおよび9．8mM HEPESを含む）を用いて最終試験濃度に希釈した。試験物質の頂端側から基底側への透過性（PappA−B）を測定するために、試験物質を含む溶液を、Caco−2細胞単層の頂端側に適用し、輸送バッファを基底側に適用した。試験物質の基底側から頂端側への透過性（PappB−A）を測定するために、試験物質を含む溶液を、Caco−2細胞単層の基底側に適用し、輸送バッファを頂端側に適用した。質量バランスを確保するために、実験の開始時に、試料をそれぞれのドナー区画から採った。37℃で2時間のインキュベーション時間後、試料を2つの区画から採った。試料をLC−MS／MSを用いて分析し、見かけの透過係数（Papp）を計算した。各細胞単層について、ルシファーイエローの透過性を測定して細胞層完全性を確認した。各試験実行において、アテノロール（低透過性についてのマーカー）およびスルファサラジン（活性排泄についてのマーカー）の透過性も品質管理として測定した。
B−9．hERGカリウム電流アッセイ
hERG（ヒトether−a−go−go関連遺伝子）カリウム電流は、ヒト心筋活動電位の再分極に有意に寄与する（Scheelら、2011）。医薬品によるこの電流の阻害は、稀に、潜在的に致死性の不整脈を引き起こすので、薬物開発中の早期の段階で試験される。
ここで使用される機能的hERGアッセイは、KCNH2（HERG）遺伝子を安定的に発現している組換えHEK293細胞系に基づく（Zhouら、1998）。これらの細胞を、膜電圧を制御し、室温でhERGカリウム電流を測定する自動化システム（Patchliner（商標）；Nanion、Munich、ドイツ）で、「細胞全体電位固定」技術（Hamillら、1981）を用いて試験する。PatchControlHT（商標）ソフトウェア（Nanion）は、Patchlinerシステム、データ収集およびデータ分析を制御する。PatchMasterPro（商標）ソフトウェアによって制御される2つのEPC−10クアドロ増幅器（共にHEKA Elektronik、Lambrecht、ドイツ）によって電圧を制御する。中抵抗のNPC−16チップ（約2MΩ；Nanion）は、電位固定実験のための平面基板として働く。
NPC−16チップを細胞内および細胞外液（Himmel、2007参照）ならびに細胞懸濁液で充填する。ギガオームシールを形成し、全細胞モード（いくつかの自動化品質管理ステップを含む）を確立した後、細胞膜を−80mV保持電位で固定する。その後の電位固定プロトコルは、指令電圧を＋20mV（1000ms間）、−120mV（500ms間）に変化させ、−80mVの保持電位に戻す；これを12秒毎に繰り返す。初期安定化期（約5〜6分）後、試験物質溶液を、増加する濃度で（例えば、0．1、1および10μmol／l）（暴露約5〜6分／濃度）ピペットによって導入し、引き続いて数回の洗浄ステップを行う。
電位を＋20mVから−120mVに変化させることによって生み出される内向き「尾」電流の振幅が、hERGカリウム電流を定量化するのに役立ち、時間の関数として記載される（IgorPro（商標）ソフトウェア）。種々の時間間隔（例えば、試験物質の前の安定化期、試験物質の第1／第2／第3の濃度）の最後での電流振幅が、そこから試験物質の半数阻害濃度IC50が計算される濃度／効果曲線を確立するのに役立つ。
Hamill OP、Marty A、Neher E、Sakmann B、Sigworth FJ．Improved patch−clamp techniques for high−resolution current recording from cells and cell−free membrane patches．Pfluegers Arch 1981；391：85〜100。
Himmel HM．Suitability of commonly used excipients for electrophysiological in−vitro safety pharmacology assessment of effects on hERG potassium current and on rabbit Purkinje fiber action potential．J Pharmacol Toxicol Methods 2007；56：145〜158。
Scheel O、Himmel H、Rascher−Eggstein G、Knott T．Introduction of a modular automated voltage−clamp platform and its correlation with manual human ether−a−go−go related gene voltage−clamp data．Assay Drug Dev Technol 2011；9：600〜607。
Zhou ZF、Gong Q、Ye B、Fan Z、Makielski JC、Robertson GA、January CT．Properties of hERG channels stably expressed in HEK293 cells studied at physiological temperature．Biophys J 1998；74：230〜241。

Claims (14)

  1. 式（I）
    Figure 2018505885
     （式中、
    R1は式
    Figure 2018505885
     （＊は窒素原子との付着点を表す）
    の基を表し、
    R2はメチルまたはシクロプロピルを表す）
    の化合物、ならびにそのN−オキシド、塩、溶媒和物、N−オキシドの塩、ならびにN−オキシドおよび塩の溶媒和物。
  2. R1が式
    Figure 2018505885
     （＊は窒素原子との付着点を表す）
    の基を表し、
    R2がメチルを表す、
    請求項1に記載の式（I）の化合物、ならびにそのN−オキシド、塩、溶媒和物、N−オキシドの塩、ならびにN−オキシドおよび塩の溶媒和物。
  3. 組織名ent−7−［（2，6−ジフルオロベンジル）オキシ］−N−［（2S）−1−ヒドロキシ−2−（5−メチル−1，3，4−チアジアゾール−2−イル）プロパン−2−イル］−2，5−ジメチルピラゾロ［1，5−a］ピリジン−3−カルボキサミドおよび構造式
    Figure 2018505885
     を有する請求項1または2に記載の化合物、ならびにその塩、その溶媒和物またはその塩の溶媒和物。
  4. 組織名rac−7−［（2，6−ジフルオロベンジル）オキシ］−N−｛2−［2−（ジフルオロメチル）−2H−テトラゾール−5−イル］−1−ヒドロキシプロパン−2−イル｝−2，5−ジメチルピラゾロ［1，5−a］ピリジン−3−カルボキサミドおよび構造式
    Figure 2018505885
     を有する請求項1または2に記載の化合物、ならびにその塩、その溶媒和物またはその塩の溶媒和物。
  5. 組織名ent−N−［2−アミノ−2−メチル（4，4，4−2H3）ブチル］−7−［（2，6−ジフルオロベンジル）オキシ］−2，5−ジメチルピラゾロ−［1，5−a］ピリジン−3−カルボキサミド（エナンチオマーA）および構造式
    Figure 2018505885
     を有する請求項1または2に記載の化合物、ならびにその塩、その溶媒和物またはその塩の溶媒和物。
  6. 組織名ent−N−［2−アミノ−2−メチル−4−（トリメチルシリル）ブチル］−7−［（2，6−ジフルオロベンジル）オキシ］−2，5−ジメチルピラゾロ［1，5−a］ピリジン−3−カルボキサミド（エナンチオマーA）および構造式
    Figure 2018505885
     を有する請求項1または2に記載の化合物、ならびにその塩、その溶媒和物またはその塩の溶媒和物。
  7. 組織名ent−N−［2−アミノ−2−メチル−4−（トリメチルシリル）ブチル］−7−［（2，6−ジフルオロベンジル）オキシ］−2，5−ジメチルピラゾロ［1，5−a］ピリジン−3−カルボキサミド（エナンチオマーB）および構造式
    Figure 2018505885
     を有する請求項1または2に記載の化合物、ならびにその塩、その溶媒和物またはその塩の溶媒和物。
  8. 式（II）
    Figure 2018505885
     （式中、R2は上に示される意味を有し、
    T1は（C1〜C4）−アルキルまたはベンジルを表す）
    の化合物を、適当な塩基または酸の存在下、不活性溶媒中で反応させて、式（III）
    Figure 2018505885
     （式中、R2は上に示される意味を有する）
    のカルボン酸を得て、その後、これをアミドカップリング条件下、不活性溶媒中で式（IV−A）、（IV−B）、（IV−C）または（IV−D）
    Figure 2018505885
     （式中、R3はアミノ保護基、例えば、tert−ブトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニルまたはベンジルを表す）
    のアミンと反応させ、次いで、存在するいずれの保護基も脱離させ、得られた式（I）の化合物を場合により適当な（i）溶媒および／または（ii）酸もしくは塩基を用いてその溶媒和物、塩および／または塩の溶媒和物に変換する、
    ことを特徴とする、請求項1から7のいずれか一項に記載の式（I）の化合物を調製する方法。
  9. 疾患を治療および／または予防するための請求項1から7のいずれか一項に記載の化合物。
  10. 心不全、狭心症、高血圧、肺高血圧、虚血、血管障害、腎機能不全、血栓塞栓性障害、線維性障害、動脈硬化、認知症障害および勃起不全を治療および／または予防するための医薬品を製造するための請求項1から7のいずれか一項に記載の式（I）の化合物の使用。
  11. 1種または複数の不活性で、非毒性の薬学的に適した賦形剤と組み合わせて請求項1から7のいずれか一項に記載の化合物を含む医薬品。
  12. 有機硝酸塩、NOドナー、cGMP−PDE阻害剤、抗血栓剤、降圧剤および脂肪代謝調節剤からなる群から選択されるさらなる活性化合物と組み合わせて請求項1から7のいずれか一項に記載の化合物を含む医薬品。
  13. 心不全、狭心症、高血圧、肺高血圧、虚血、血管障害、腎機能不全、血栓塞栓性障害、線維性障害、動脈硬化、認知症障害および勃起不全を治療および／または予防するための請求項11または12に記載の医薬品。
  14. 有効量の少なくとも1種の請求項1から7のいずれか一項に記載の式（I）の化合物、または請求項11から13のいずれか一項に記載の医薬品を用いて、ヒトおよび動物の心不全、狭心症、高血圧、肺高血圧、虚血、血管障害、腎機能不全、血栓塞栓性障害、動脈硬化、認知症障害および勃起不全を治療および／または予防する方法。
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