JP2014515026A - アカデシン誘導体、それを含有する製剤および組成物、その治療目的での使用、ならびにその合成法 - Google Patents

Abstract

本発明は、薬としてのアカデシン誘導体、ならびに癌治療、特に慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）治療用の本誘導体に関する。本発明はさらに、癌の治療における同時投与、分離投与、または順次投与用の組み合わせ製剤としての、本誘導体および少なくとも１種の第二の活性成分を含有する製剤、ならびに本誘導体および薬学的に許容可能なキャリアを含有する薬学的組成物に関する。最後に、本発明は、ｉｎ ｖｉｔｒｏで細胞を本誘導体と接触させることを含む、ｉｎ ｖｉｔｒｏで細胞増殖を阻害する方法、および本誘導体の合成法に関する。
【選択図】なし

Description

本発明は、薬化学の分野における、アカデシン誘導体、すなわちＡＩＣＡＲとも称する５−アミノイミダゾール−４−カルボキサミド−１−β−Ｄ−リボフラノシドに関する。より詳細には、本発明は、癌治療用のアカデシン誘導体に関する。さらにより詳細には、本発明は、骨髄血液疾患、具体的には慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）などを治療するためのアカデシン誘導体に関する。

悪性骨髄血液疾患は、骨髄系細胞の生存、増殖、または分化に関する性質の変更を特徴とする。これらの血液疾患は、一般に、特定の分化経路に関与する造血幹細胞または前駆細胞（分化したまたは「関与している」幹細胞）に影響を及ぼす後天性の遺伝子異常により引き起こされる。そのような血液疾患として、急性骨髄芽球性白血病（ＡＭＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、および骨髄増殖性疾患（ＭＰＳ）が挙げられる。慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）は、白血病幹細胞での異常に関連した悪性骨髄増殖性疾患（ＭＰＳ）であり、分化の全段階での顆粒球の産生の増加をもたらす。この病気は、染色体９および染色体２２の長腕間での遺伝子材料の相互転座、すなわちフィラデルフィア転座（ｔ９；２２）（ｑ３４−ｑ１１）またはフィラデルフィア染色体から生じる後天性の細胞遺伝学的欠陥により引き起こされる。この再配置による分子的結果として、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）の患者の９５％超でキメラタンパク質ｐ２１０ＢＣＲ−ＡＢＬが産生される。

ＢＣＲ−ＡＢＬは、常時活性型チロシンキナーゼであり、患者の幹細胞が自発性または誘導性アポトーシスに対してなぜ非感受性であるかの説明となる。こうした特徴により、ＢＣＲ−ＡＢＬは、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）における治療介入の格好の薬理学的標的となっている。

近年、癌治療には紛れもない進歩が刻まれている。より早い段階から治療が提供されるとともに、看護の方法も、腫瘍に対して非常に有効な新規薬学製剤が提供されることの恩恵を受けている。ここ２、３年だけでも、骨髄移植、および特に的を絞った治療の出現により、患者をより良く看護できるようになっている。実際、近年の顕著な進歩の１つに、メシル酸イマチニブ（グリベック（登録商標））が市場に登場したことがある。

グリベック（登録商標）、正式にはメシル酸イマチニブ（ＩＭ）は、ＢＣＲ−ＡＢＬ、ｃ−ＫＩＴ、およびＰＤＧＦ受容体の薬理学的阻害剤であり、このため、過去１０年間において慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）の基準治療となっていた。これが、現在の抗癌治療に用いられるチロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）の原型である。しかしながら、少なからぬ割合の患者で、この化合物に対する耐性が発現し、しかもその割合は、疾患の加速期および急性期には顕著に増加する。この耐性の原因となる機構は様々であるが、その１つとしてＢＣＲ−ＡＢＬのＡＴＰ結合部位での偶発変異が挙げられる。その変異のうち、変異Ｔ３１５Ｉにより多剤耐性が生じるとともに実質的な治療上の問題、ＢＣＲ−ＡＢＬ増幅の低頻度、このキナーゼの下流に位置する信号伝達経路の改変（ＳＲＣキナーゼの活性化など）がもたらされる。

グリベック（登録商標）は、現在、使用例の約９５％において、疾患の予後の改善および完全な寛解を達成することが可能である。したがって、イマチニブを用いた化学療法は、徐々に移植に代わる第一選択治療となってきており、移植の適用は、イマチニブで効果があがらなかった患者の場合に限られてきている。

しかしながら、患者によってはこの治療に反応しないか、耐性を発現する（特に疾患が急性移行期にあるとき）ため、ＢＣＲ−ＡＢＬを阻害し、下流の様々な信号伝達経路を遮断することを目的とする代替戦略（ＳＲＣキナーゼ阻害など）が検討されてきた。こうした戦略は、有効であることが明らかとなっており、代替製剤（Ｎｏｖａｒｔｉｓ（登録商標）社が開発したニロチニブ、およびＢｒｙｓｔｏｌ−Ｍｅｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ（登録商標）社が開発したダサチニブ（スプリセル（登録商標））など）がすでに審査されている。スプリセル（登録商標）は、現在、グリベック（登録商標）耐性の患者に処方されている。

しかしながら、患者によっては、特にｐ２１０ＢＣＲ−ＡＢＬのＡＴＰ結合部位にＴ３１５Ｉ変異がある患者では、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）の治療に用いられるチロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）のほとんど全てに対して不応性である。したがって、特にＴ３１５Ｉ変異があるか、または下流ＢＣＲ−ＡＢＬ耐性がある患者に、代替治療戦略が切実に必要とされている。

アカデシン、すなわち５−アミノイミダゾールカルボキサミドリボシド（ＡＩＣＡＲ）は、非常に多数の代謝作用を有するヌクレオシドである。アカデシンは、特にＡＭＰ活性化タンパク質キナーゼ（ＡＭＰＫ）として語られるものである。この活性素は、現在、冠血管バイパス手術中の心血管または脳血管合併症の危険性の低減に関して第三相臨床試験にある。また、最近の研究から、この化合物が、慢性リンパ性白血病のＢ細胞のアポトーシスを誘導することが示されており（Ｃａｍｐａｓ ｅｔ ａｌ．， ２００３）（非特許文献１）、この血液疾患に関しては、第一／第二相試験の段階にある。

したがって、既存療法に対して耐性のある患者、特にチロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）型治療に対して耐性のある患者の治療を特に可能にする目的で、既存の製剤または開発中の製剤の代替物を提供する新規化合物を開発する必要がある。また、治療効果の枯渇という問題に対応することを可能にする新規化合物の開発も必要である。治療効果の枯渇すなわち急速耐性は、一定期間薬を使用すると治療効果が薄れてくることを示す。また、慢性骨髄性白血病、さらにはより一般的に特定の癌を治療することを可能にする異なる作用機序を有する化合物の開発も必要である。最後に、現在利用可能な化合物よりも細胞毒性が低い新規化合物を開発することが現在必要とされている。

Ｃａｍｐａｓ ｅｔ ａｌ．，２００３

すなわち、上記の問題に対する解決策は、薬としての、以下の一般式：

（式中：
Ｒ_１は、以下：
・複数のＯＨ基を有するフラン型の環状五炭糖、複数のＯＨ基は無置換であるか、または随意に１つ以上のモノホスフェート基、ビホスフェート基、トリホスフェート基（もしくはそれらのプロドラッグ）、アセチル基、イソプロピリデン基、ベンゾイル基、またはｐ−トルオイル基で置換される、
・複数のＯＨ基を有するピラン型の六炭糖、複数のＯＨ基は無置換であるか、または随意に１つ以上のモノホスフェート基、ビホスフェート基、トリホスフェート基（もしくはそれらのプロドラッグ）、またはアセチル基で置換される、
・１〜４個の炭素原子を有するアルキルまたは置換アミン基で随意に置換される、ナフチル基、
・１〜４個の炭素原子を有するアルキルまたは置換アミン基で随意に置換される、ベンジル基、
・フェニル基、ビフェニル基、またはヘテロアリール基；
から選択され、
Ｒ_２は、以下：
・−ＣＯＮＨ_２、−ＣＯＮＨＭｅ、−ＣＯＮＨＥｔ、−ＣＯＮ（Ｍｅ）_２、または−ＣＯＮ（Ｅｔ）_２型アミド基、
・−ＣＯ_２Ｈ、ＣＯ_２Ｍｅ、もしくはＣＯ_２Ｅｔ型の酸もしくはエステル基、または−ＣＮ、−Ｃ（ＮＨ_２）ＮＨ、−Ｃ（ＮＨＭｅ）ＮＨ、もしくは−Ｃ（ＮＨＥｔ）ＮＨ型のシアノもしくはアミジン基、
・Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、およびＦから選択されるハロゲンで随意に置換される、フェニル基、
・チオフェン基、
・炭素原子を３〜１０個有する直鎖のまたは分岐した炭素鎖、および
・メトキシナフタレン基；
から選択され、および
Ｒ_３は、以下：
・ハロゲン基、
・フラン基または−ＣＯ−フラン基、
・チオフェン基または−ＣＯ−チオフェン基または−Ｃ≡Ｃ−チオフェン基、
・トルオイル基、
・アセチレン基、
・−ＣＯ−（ＣＨ_２）_ｎ−ＣＨ_３基、ただしｎは２〜９である、
・ハロゲンで随意に置換される、フェニル基または−Ｃ≡Ｃ−フェニル基、
・−Ｃ≡Ｃ−ＣＯ_２Ｍｅ基、−Ｃ≡Ｃ−ＣＯ_２Ｅｔ基、または−Ｃ≡Ｃ−ＣＯＮＨ_２基、
・−Ｃ≡Ｃ−（ＣＨ_２）_６ＣＨ_３基、および
・−Ｃ≡Ｃ−２−メトキシナフタレン基；
から選択される）
を有する化合物、そのラセミ体、鏡像異性体、ジアステレオ異性体、およびそれらの混合物、その互変異性体、およびその薬学的に許容可能な塩に関する。

期せずして、本出願人は、本発明による化合物が、イマチニブ感受性のＫ５６２白血病細胞株および／またはイマチニブ耐性のＩｍａＲ細胞株の生存能を低下させることができることを実証するのに成功した。このことは、具体的には実施例１および２で実証される。

また、本出願人は、本発明による化合物が、いろいろな種類のプログラム細胞死（ＰＣＤ）に作用することを実証するのに成功した。

用済みになった細胞はＰＣＤにより除去できることから、ＰＣＤは、あらゆる生命体で適切な機能を維持するのに根本的な役割を果たしている。

ＰＣＤは大きく分けて２種類が知られている：アポトーシスとも呼ばれるＩ型ＰＣＤ、およびオートファジーとも呼ばれるＩＩ型ＰＣＤである。

カスパーゼ（システインプロテアーゼ）は、アポトーシスの作用主体である。カスパーゼは、細胞の生存に必須である様々なタンパク質基質を開裂する。２つの主要な経路により、カスパーゼは活性化する。内因性の経路は、Ｂｃｌ−２ファミリーのタンパク質により組織化されており、カスパーゼ９、次いでカスパーゼ３の活性化の始まりにおいて、ミトコンドリアによるシトクロムＣの放出、続いて多タンパク質複合体（アポトソーム）が形成されることにより引き起こされる。外因性の経路は、形質膜における、膜受容体活性化、続いて、カスパーゼ８、次いでカスパーゼ３の活性化を可能にする多タンパク質複合体（ＤＩＳＣ）の形成により引き起こされる（Ｇｒｕｔｔｅｒ，２０００）。

オートファジーは、細胞を生存に導くことも細胞死に導くこともできる。最初の工程は、二重膜液胞（ファゴフォアの核形成、拡大、および成熟から生じるオートファゴソーム）の形成である。オートファゴソームは、細胞質ゾルおよび巨大分子および細胞小器官の除去すべき分を取り込む。オートファゴソームは、リソソームと融合してオートファゴリソソームを形成し、この中でリソソームヒドロラーゼ（カテプシン）が内容物を分解する。オートファゴソームの形成は、Ａｔｇタンパク質ならびにＬＣ３−ＩＩタンパク質およびｐ６２／ＳＱＳＴＭ１タンパク質の動員に依存する（Ｋｌｉｏｎｓｋｙ ｅｔ ａｌ．， ２００８； Ｍａｒｉｎｏ ａｎｄ Ｌｏｐｅｚ−Ｏｔｉｎ， ２００４）。ｍＴＯＲ経路は、その調節に関与している。実際、活性化ｍＴＯＲは、オートファジーを阻害するが、ＡＭＰＫによりｍＴＯＲを阻害すると、このプロセスが開始される。

実施例１で実証されるとおり、本発明による化合物は、上記の２種のプログラム細胞死（ＰＣＤ）に作用することが可能である。より詳細には、本発明による化合物が関与する作用機構は、オートファジーであるか、アポトーシスであるか、または２種の機構の組み合わせである。このことは、実施例１で実証される。

表題「Ａｃａｄｅｓｉｎｅ Ｋｉｌｌｓ Ｃｈｒｏｎｉｃ Ｍｙｅｌｏｇｅｎｏｕｓ Ｌｅｕｋｅｍｉａ （ＣＭＬ） Ｃｅｌｌｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ＰＫＣ−Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ Ａｕｔｏｐｈａｇｉｃ Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ」（Ｒｏｂｅｒｔ Ｇ ｅｔ ａｌ．， ＰｌｏＳ ＯＮＥ，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ ２００９， ｖｏｌｕｍｅ ４， Ｉｓｓｕｅ １１）という論文で、アカデシンは慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）の治療に有効であること、およびアカデシンはＩＩ型プログラム細胞死、すなわちオートファジー機構に作用することが、特に示されている。しかしながら、この論文は、アカデシン誘導体も、それらの慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）における治療活動の可能性も述べていない。

表題「Ｔａｎｄｅｍ Ａｚｉｄｅ−Ａｌｋｙｎｅ １，３−Ｄｉｐｏｌａｒ Ｃｙｃｌｏａｄｄｉｔｉｏｎ／Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｉｌｉｃ Ａｄｄｉｔｉｏｎ： Ａ ｃｏｎｃｉｓｅ Ｔｈｒｅｅ−Ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ Ｒｏｕｔｅ ｔｏ ４，５−Ｄｉｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ Ｔｒｉａｚｏｌｙｌ−Ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ」（Ｍａｌｎｕｉｔ Ｖ ｅｔ ａｌ．， Ｓｙｎｌｅｔｔ ２００９， Ｎｏ． １３， ｐａｇｅｓ ２１２３−２１２８）という論文には、薬としての本発明による化合物の記載はない。この論文は、アカデシン誘導体の合成を記載しているが、それらは本発明による化合物とは異なる一般式を有する。また、たとえこの論文により、それらの化合物が有用な生物学的性質を有する可能性が示唆されているとしても、この論文には、この種の化合物が薬として、より具体的には癌（例えば、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）など）の治療に利用可能であることを示唆するものはない。

第二に、本発明は、癌の治療における同時投与、分離投与、または順次投与用の組み合わせ製剤として本発明による化合物および少なくとも１種の第二の作用剤を含有する製剤にも関する。

第三に、本発明は、本発明による化合物および薬学的に許容可能なキャリアを含む薬学的組成物にも関する。

第四に、本発明は、ｉｎ ｖｉｔｒｏで細胞を本発明による化合物と接触させることを含む、ｉｎ ｖｉｔｒｏで細胞増殖を阻害する方法に関する。

最後に、第五に、本発明は、本発明による化合物の合成法に関する。

本発明に従って、上記のいろいろな化合物を、特に以下に記載のいろいろな方法に従って合成することができる。これらの方法において、Ｒ_１基、Ｒ_２基、およびＲ_３基は、上記で定義したとおりである。

第一の代替形態によれば、本発明の化合物はワンポット反応で得られる。この反応では、以下の反応スキームに従って、銅（触媒）の存在下、アジド（Ｒ_１Ｎ_３）をアルキン（Ｒ_２−Ｃ≡Ｃ−Ｈ）および求電子試薬（Ｒ_３−Ｘ、式中Ｘ＝ＢｒまたはＩ）と反応させて、三置換トリアゾール生成物とする：

第二の代替形態によれば、本発明による化合物は、Ｓｏｎｏｇａｓｈｉｒａ反応で得られる。この反応では、アルキン（Ｒ_４−Ｃ≡Ｃ−Ｈ）およびパラジウム触媒（例えば、Ｐｄ（ＰＰｈ_３）_４またはＰｄ（ＰＰｈ_３）_２Ｃｌ_２）など）の存在下でトリアゾール基質（Ｘ＝ＢｒまたはＩ）を反応させる。以下の反応スキームに従って、この反応により、１，４，５−三置換１，２，３−トリアゾール誘導体（Ｒ_１、Ｒ_２、および５位に上記のＲ_３の定義に該当するＲ_４−Ｃ≡Ｃ−基を含有し、式中、Ｒ_４＝Ｈ、ＳｉＭｅ_３、Ｐｈ、ＣＯ_２Ｍｅ、またはＣＯ_２Ｅｔである）を得ることが可能になる：

第三の代替形態によれば、本発明による化合物は、Ｓｔｉｌｌｅ（またはＳｕｚｕｋｉ−Ｍｉｙａｕｒａ）型パラジウムカップリング反応で得られる。以下の反応スキームに従って、この反応により、５位にＲ_３基（アリールまたはヘテロアリール）を含有する１，４，５−三置換１，２，３−トリアゾールを得る目的で、スズ誘導体（Ｒ_３−ＳｎＢｕ_３）またはボロン酸誘導体（Ｒ_３−Ｂ（ＯＨ）_２）を１，４−三置換５−ハロトリアゾール（Ｘ＝ＢｒまたはＩ）とカップリングさせることが可能になる：

第四の代替形態によれば、本発明による化合物は、銅系触媒および酸化剤（例えば、Ｈ_２Ｏ_２など）の存在下で、アジド（Ｒ_１Ｎ_３）とアルキン（Ｒ_２−Ｃ≡Ｃ−Ｈ）を反応させることで得られる。以下の反応スキームに従って、この反応により、１，４，５−三置換１，２，３−トリアゾール（Ｒ_１、Ｒ_２、および５位に上記のＲ_３の定義に該当するＲ_２−Ｃ≡Ｃ−基を含有する）の合成が可能になる：

本発明は、添付の図面を参照しながら、以下の記載を読むことで理解が深まるだろう。以下の記載は本発明を限定するものではない。図において：
図１は、本発明による化合物のうちのあるものについてその有効性および一般的な作用機構を求めることを目的とした、本発明による化合物のスクリーニング検査結果を示す； 図２は、本発明による化合物のうちのあるものについてその有効性および一般的な作用機構を求めることを目的として、本発明による化合物のスクリーニング検査結果を示す； 図３は、本発明による化合物のうちのあるものについてその有効性および一般的な作用機構を求めることを目的として、本発明による化合物のスクリーニング検査結果を示す； 図４は、本発明による化合物のうちのあるものについてその有効性および一般的な作用機構を求めることを目的として、本発明による化合物のスクリーニング検査結果を示す； 図５は、本発明による化合物のうちのあるものについてその有効性および一般的な作用機構を求めることを目的として、本発明による化合物のスクリーニング検査結果を示す； 図６は、本発明による化合物のうちのあるものについてその有効性および一般的な作用機構を求めることを目的として、本発明による化合物のスクリーニング検査結果を示す； 図７は、本発明による化合物のうちのあるものについてその有効性および一般的な作用機構を求めることを目的として、本発明による化合物のスクリーニング検査結果を示す； 図８は、本発明による化合物のうちのあるものについてその有効性および一般的な作用機構を求めることを目的として、本発明による化合物のスクリーニング検査結果を示す； 図９は、本発明による化合物のうちのあるものについてその有効性および一般的な作用機構を求めることを目的として、本発明による化合物のスクリーニング検査結果を示す； 図１０は、本発明による化合物のうちのあるものについてその有効性および一般的な作用機構を求めることを目的として、本発明による化合物のスクリーニング検査結果を示す； 図１１は、本発明による化合物のうちのあるものについてその有効性および一般的な作用機構を求めることを目的として、本発明による化合物のスクリーニング検査結果を示す； 図１２は、本発明による化合物のうちのあるものについてその有効性および一般的な作用機構を求めることを目的として、本発明による化合物のスクリーニング検査結果を示す； 図１３は、本発明による化合物のうちのあるものについてその有効性および一般的な作用機構を求めることを目的として、本発明による化合物のスクリーニング検査結果を示す； 図１４は、本発明による化合物のうちのあるものについてその有効性および一般的な作用機構を求めることを目的として、本発明による化合物のスクリーニング検査結果を示す； 図１５は、本発明による化合物のうちのあるものについてその有効性および一般的な作用機構を求めることを目的として、本発明による化合物のスクリーニング検査結果を示す； 図１６は、本発明による化合物のうちのあるものについてその有効性および一般的な作用機構を求めることを目的として、本発明による化合物のスクリーニング検査結果を示す； 図１７は、本発明による化合物のうちのあるものについてその有効性および一般的な作用機構を求めることを目的として、本発明による化合物のスクリーニング検査結果を示す； 図１８は、本発明による化合物のうちのあるものについてその有効性および一般的な作用機構を求めることを目的として、本発明による化合物のスクリーニング検査結果を示す； 図１９は、本発明による化合物のうちのあるものについてその有効性および一般的な作用機構を求めることを目的として、本発明による化合物のスクリーニング検査結果を示す； 図２０は、本発明による化合物のうちのあるものについてその有効性および一般的な作用機構を求めることを目的として、本発明による化合物のスクリーニング検査結果を示す。 図２１は、イマチニブ感受性のＣＭＬ（慢性骨髄性白血病）細胞株（Ｋ５６２）での、本発明による化合物のスクリーニング検査および用量依存性検査の結果を示す。 図２２は、イマチニブ感受性のＣＭＬ（慢性骨髄性白血病）細胞株（Ｋ５６２）での、本発明による化合物のスクリーニング検査および用量依存性検査の結果を示す。 図２３は、イマチニブ感受性のＣＭＬ（慢性骨髄性白血病）細胞株（Ｋ５６２）での、本発明による化合物のスクリーニング検査および用量依存性検査の結果を示す。

本発明による化合物は、薬としての、以下の一般式：

（式中：
Ｒ_１は、以下：
・複数のＯＨ基を有するフラン型の環状五炭糖、複数のＯＨ基は無置換であるか、または随意に１つ以上のモノホスフェート基、ビホスフェート基、トリホスフェート基（もしくはそれらのプロドラッグ）、アセチル基、イソプロピリデン基、ベンゾイル基、またはｐ−トルオイル基で置換される、
・複数のＯＨ基を有するピラン型の六炭糖、複数のＯＨ基は無置換であるか、または随意に１つ以上のモノホスフェート基、ビホスフェート基、トリホスフェート基（もしくはそれらのプロドラッグ）、またはアセチル基で置換される、
・１〜４個の炭素原子を有する１つ以上のアルキルまたは置換アミン基で随意に置換される、ナフチル基、
・１〜４個の炭素原子を有する１つ以上のアルキルまたは置換アミン基で随意に置換される、ベンジル基、および
・フェニル基、ビフェニル基、またはヘテロアリール基；
から選択され、
Ｒ_２は、以下：
・−ＣＯＮＨ_２、−ＣＯＮＨＭｅ、−ＣＯＮＨＥｔ、−ＣＯＮ（Ｍｅ）_２、または−ＣＯＮ（Ｅｔ）_２型アミド基、
・−ＣＯ_２Ｈ、ＣＯ_２Ｍｅ、もしくはＣＯ_２Ｅｔ型の酸もしくはエステル基、または−ＣＮ、−Ｃ（ＮＨ_２）ＮＨ、−Ｃ（ＮＨＭｅ）ＮＨ、もしくは−Ｃ（ＮＨＥｔ）ＮＨ型のシアノもしくはアミジン基、
・Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、およびＦから選択されるハロゲンで随意に置換される、フェニル基、
・チオフェン基、
・炭素原子を３〜１０個有する直鎖のまたは分岐した炭素鎖、および
・メトキシナフタレン基；
から選択され、および
Ｒ_３は、以下：
・ハロゲン基、
・フラン基または−ＣＯ−フラン基、
・チオフェン基または−ＣＯ−チオフェン基または−Ｃ≡Ｃ−チオフェン基、
・トルオイル基、
・アセチレン基、
・−ＣＯ−（ＣＨ_２）_ｎ−ＣＨ_３基、ただしｎは２〜９である、

・ハロゲンで随意に置換される、フェニル基または−Ｃ≡Ｃ−フェニル基、
・−Ｃ≡Ｃ−ＣＯ_２Ｍｅ基、−Ｃ≡Ｃ−ＣＯ_２Ｅｔ基、または−Ｃ≡Ｃ−ＣＯＮＨ_２基、
・−Ｃ≡Ｃ−（ＣＨ_２）_６ＣＨ_３基、および
・−Ｃ≡Ｃ−２−メトキシナフタレン基；
から選択される）
を有する化合物、そのラセミ体、鏡像異性体、ジアステレオ異性体、およびそれらの混合物、その互変異性体、およびその薬学的に許容可能な塩である。

薬学的に許容可能な塩とは、無機酸が付加した塩（塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩、二リン酸塩、および硝酸塩など）または有機酸が付加した塩（酢酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、メタンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、パモ酸塩、およびステアリン酸塩など）である。同じく本発明に包含されるものとして、使用可能な場合には、塩基（水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウム）で形成した塩がある。

好ましくは、本発明による化合物は、薬としての、以下の一般式：

式中：
Ｒ_１は、以下：

β−Ｄ−リボース
または

トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−リボース
または

β−Ｄ−グルコース
または

テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコース
または

β−Ｌ−リボース
または

トリ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｌ−リボース
Ｂｚ＝ベンゾイル＝Ｐｈ−ＣＯ
または

２’，３’−イソプロピリデン−β−Ｄ−リボース
または

５’−Ｏ−アセチル−２’，３’−イソプロピリデン−β−Ｄ−リボース
または

２’−デオキシ−αもしくはβ−Ｄ−リボース
または

３’，５’−ジ−Ｏ−トルオイル−２’−デオキシ−αもしくはβ−Ｄ−リボース
Ｔｏｌ＝４−Ｍｅ−Ｐｈ−ＣＯ
または

４−メチルベンジル
または

２−ナフチル（ナフタレン−２−イルメチル）
から選択され、
Ｒ_２は、−ＣＯＮＨ_２、−ＣＯ_２Ｍｅ、−ＣＯ_２Ｅｔ、フェニル、チオフェン、−（ＣＨ_２）_６ＣＨ_３、ｐ−フルオロフェニル、または２−メトキシナフタレンから選択され；ならびに
Ｒ_３は、Ｉ、Ｃｌ、フラン、ＣＯ−フラン、ＣＯ−チオフェン、アセチレン、ＣＯ−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３、トルオイル、−Ｃ≡Ｃ−ＣＯ_２Ｅｔ、チオフェン、フェニル、−Ｃ≡Ｃ−フェニル、−Ｃ≡Ｃ−チオフェン、−Ｃ≡Ｃ−（ＣＨ_２）_６ＣＨ_３、−Ｃ≡Ｃ−（ｐ−フルオロフェニル）、または−Ｃ≡Ｃ−２−メトキシナフタレンから選択される；
を有する化合物、そのラセミ体、鏡像異性体、ジアステレオ異性体、およびそれらの混合物、その互変異性体、およびその薬学的に許容可能な塩である。

また好ましくは、本発明による化合物は、薬としての、以下の一般式：

（式中
Ｒ_１は、以下：

β−Ｄ−リボース
または

トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−リボース
または

テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコース
または

トリ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｌ−リボース
Ｂｚ＝ベンゾイル＝Ｐｈ−ＣＯ
または

２’，３’−イソプロピリデン−β−Ｄ−リボース
または

５’−Ｏ−アセチル−２’，３’−イソプロピリデン−β−Ｄ−リボース
または

３’，５’−ジ−Ｏ−トルオイル−２’−デオキシ−αまたはβ−Ｄ−リボース
Ｔｏｌ＝４−Ｍｅ−Ｐｈ−ＣＯ
または

４−メチルベンジル
または

２−ナフチル（ナフタレン−２−イルメチル）
であり、
Ｒ_１がβ−Ｄ−リボースならば、以下：
・Ｒ_２＝ＣＯＮＨ_２であり、かつＲ_３＝Ｉ、Ｃｌ、ＣＯ−フラン、ＣＯ−チオフェン、トルオイル、またはアセチレンであるか；
または
・Ｒ_２＝ＣＯ_２Ｍｅであり、かつＲ_３＝Ｉ、フラン、またはアセチレンであるか；
または
・Ｒ_２＝フェニルであり、かつＲ_３＝Ｉであり；
Ｒ_１がトリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−リボース基ならば、以下：
・Ｒ_２＝ＣＯ_２Ｅｔであり、かつＲ_３＝Ｃｌ、ＣＯ−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３、ＣＯ−フラン、トルオイル、−Ｃ≡Ｃ−ＣＯ_２Ｅｔ、チオフェン、またはフェニルであるか；
または
・Ｒ_２＝フェニルであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−フェニルであるか；
または
・Ｒ_２＝チオフェンであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−チオフェンであるか；
または
・Ｒ_２＝（ＣＨ_２）_６ＣＨ_３であり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−（ＣＨ_２）_６ＣＨ_３であるか；
または
・Ｒ_２＝ｐ−フルオロフェニルであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−ｐ−フルオロフェニルであるか；
または
・Ｒ_２＝２−メトキシナフタレンであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−２−メトキシナフタレンであり；
Ｒ_１がテトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコース基ならば、Ｒ_２＝ＣＯ_２Ｅｔであり、かつＲ_３＝Ｉまたは−Ｃ≡Ｃ−ＣＯ_２Ｅｔであり；
Ｒ_１がトリ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｌ−リボース基ならば、Ｒ_２＝ＣＯ_２Ｅｔであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−ＣＯ_２Ｅｔであり；
Ｒ_１が２’，３’−イソプロピリデン−β−Ｄ−リボース基ならば、Ｒ_２＝ＣＯ_２Ｅｔであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−ＣＯ_２Ｅｔまたはチオフェンであり；
Ｒ_１＝５’−Ｏ−アセチル−２’，３’−イソプロピリデン−β−Ｄ−リボースならば、Ｒ_２＝ＣＯ_２Ｅｔであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−ＣＯ_２Ｅｔまたはチオフェンであり；
Ｒ_１が３’，５’−ジ−Ｏ−トルオイル−２’−デオキシ−β−Ｄ−リボース基ならば、Ｒ_２＝ＣＯ_２Ｅｔであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−ＣＯ_２Ｅｔであり；
Ｒ_１が４−メチルベンジル基ならば、以下：
・Ｒ_２＝ＣＯ_２Ｅｔであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−ＣＯ_２Ｅｔであるか；
または
・Ｒ_２＝フェニルであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−フェニルであり；
Ｒ_１が２−ナフチル（ナフタレン−２−イルメチル）基ならば、以下：
・Ｒ_２＝ＣＯ_２Ｅｔであり、かつＲ_３＝Ｉであるか；
または
・Ｒ_２＝ＣＯ_２Ｅｔであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−ＣＯ_２Ｅｔであるか；
または
・Ｒ_２＝フェニルであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−フェニルである）
を有する化合物、そのラセミ体、鏡像異性体、ジアステレオ異性体、およびそれらの混合物、その互変異性体、およびその薬学的に許容可能な塩である。

また好ましくは、本発明による化合物は、薬としての、以下の一般式：

（式中
Ｒ_１は、以下：

β−Ｄ−リボース
または

トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−リボース
または

４−メチルベンジル
または

２−ナフチル（ナフタレン−２−イルメチル）
であり、
Ｒ_１がβ−Ｄ−リボース基ならば、以下：
・Ｒ_２＝ＣＯＮＨ_２であり、かつＲ_３＝Ｃｌ、ＣＯ−フラン、ＣＯ−チオフェン、またはトルオイルであるか；
または
・Ｒ_２＝ＣＯ_２Ｍｅであり、かつＲ_３＝Ｉまたはアセチレンであるか；
または
・Ｒ_２＝フェニルであり、かつＲ_３＝Ｉであり；
Ｒ_１がトリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−リボース基ならば、以下：
・Ｒ_２＝ＣＯ_２Ｅｔであり、かつＲ_３＝ＣＯ−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３、ＣＯ−フラン、トルオイル、−Ｃ≡Ｃ−ＣＯ_２Ｅｔ、チオフェン、またはフェニルであるか；
または
・Ｒ_２＝フェニルであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−フェニルであるか；
または
・Ｒ_２＝チオフェンであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−チオフェンであるか；
または
・Ｒ_２＝（ＣＨ_２）_６ＣＨ_３であり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−（ＣＨ_２）_６ＣＨ_３であるか；
または
・Ｒ_２＝ｐ−フルオロフェニルであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−ｐ−フルオロフェニルであるか；
または
・Ｒ_２＝２−メトキシナフタレンであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−２−メトキシナフタレンであり；
Ｒ_１が４−メチルベンジル基ならば、以下：
・Ｒ_２＝ＣＯ_２Ｅｔであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−ＣＯ_２Ｅｔであるか；
または
・Ｒ_２＝フェニルであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−フェニルであり；
Ｒ_１が２−ナフチル（ナフタレン−２−イルメチル）基ならば、以下：
・Ｒ_２＝ＣＯ_２Ｅｔであり、かつＲ_３＝Ｉであるか；
または
・Ｒ_２＝ＣＯ_２Ｅｔであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−ＣＯ_２Ｅｔであるか；
または
・Ｒ_２＝フェニルであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−フェニルである）
を有する化合物、ならびにそのラセミ体、鏡像異性体、ジアステレオ異性体、およびそれらの混合物、その互変異性体、およびその薬学的に許容可能な塩である。

本発明による化合物の好適な例として以下の化合物を挙げることができるが、これらに限定されない：
・１’−（４−エトキシカルボニル−５−ヨード−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’，５’−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−リボフラノース；
・１’−（４−カルバモイル−５−ヨード−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−β−Ｄ−リボフラノース；
・１’−（４−メトキシカルボニル−５−エチニル−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−β−Ｄ−リボフラノース；
・１−（ナフチル−２−メチル）−４−エトキシカルボニル−５−ヨード−１，２，３−トリアゾール；
・１−（ナフチル−２−メチル）−４−エトキシカルボニル−５−エチル＝プロピオラート−１，２，３−トリアゾール；
・１’−（４−エトキシカルボニル−５−エチル＝プロピオラート−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’，５’−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−リボフラノース；
・１’−（４−エトキシカルボニル−５−（２−チエニル）−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’，５’−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−リボフラノース；
・１’−（４−エトキシカルボニル−５−フェニル−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’，５’−トリ−Ｏ−アセチル−β−リボフラノース；
・１−（４−メチルベンジル）−４−エトキシカルボニル−５−エチル＝プロピオラート−１，２，３−トリアゾール；
・１’−（４−ヘプチル−５−（ノニン−１−イン−１−イル−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’，５’−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−リボフラノース；
・１’−（４−エトキシカルボニル−５−エチル＝プロピオラート−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’，５’−トリ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｌ−リボフラノース；
・２’−デオキシ−１’−（４−エトキシカルボニル−５−エチル＝プロピオラート−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−３’，５’−ジ−Ｏ−（ｐ−トルオイル）−α−Ｄ−リボフラノース；
・１’−（４−エトキシカルボニル−５−エチル＝プロピオラート−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’，４’，６’−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノース；
・１’−（４−エトキシカルボニル−５−エチル＝プロピオラート−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデン−β−Ｄ−リボフラノース；
・１’−（４−エトキシカルボニル−５−エチル＝プロピオラート−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデン−５’−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−リボフラノース；
・１’−（４−エトキシカルボニル−５−（２−チエニル）−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデン−β−Ｄ−リボフラノース；および
・１’−（４−エトキシカルボニル−５−（２−チエニル）−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデン−５’−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−リボフラノース。

特に有利には、本発明による化合物は以下から選択される：
・１’−（４−エトキシカルボニル−５−（２−チエニル）−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’，５’−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−リボフラノース；
・１’−（４−エトキシカルボニル−５−エチル＝プロピオラート−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’，５’−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−リボフラノース；
・１’−（４−エトキシカルボニル−５−エチル＝プロピオラート−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデン−β−Ｄ−リボフラノース；
・１’−（４−エトキシカルボニル−５−エチル＝プロピオラート−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデン−５’−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−リボフラノース；および
・１−（４−メチルベンジル）−４−エトキシカルボニル−５−エチル＝プロピオラート−１，２，３−トリアゾール。

さらにより好ましくは、本発明による化合物は以下から選択される：
・１’−（４−エトキシカルボニル−５−（２−チエニル）−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’，５’−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−リボフラノース
・１’−（４−エトキシカルボニル−５−フェニル−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’，５’−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−リボフラノース
・１−（４−メチルベンジル）−４−エトキシカルボニル−５−エチル＝プロピオラート−１，２，３−トリアゾール
・１’−（４−エトキシカルボニル−５−エチル＝プロピオラート−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’，４’，６’−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノース、および
・１’−（４−エトキシカルボニル−５−（２−チエニル）−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデン−β−Ｄ−リボフラノース。

本発明によれば、化合物はプロドラッグの形を取ることもできる。プロドラッグという用語は、不活性型（またはその代謝産物よりも活性が低い型）で投与される薬理学的物質（薬）を示す。いったん投与されると、プロドラッグはｉｎ ｖｉｖｏで代謝されて活性代謝産物になる。より詳細には、プロドラッグは、どの部位で変換されて最終的な活性型になるかに基づいて２つのカテゴリーに分類することができる。

Ｉ型プロドラッグは、細胞内で変換されるものである。ＩＩ型プロドラッグは、細胞外、特に消化液または体循環中で変換されるものである。

これら２種は、さらなる基準に基づいて、さらにサブタイプＡおよびＢに分類することができる。プロドラッグのＩＡ型とＩＢ型は、活性化部位によって区別される。活性化部位とは、治療作用が生じる、または生じない部位である。ＩＩＡ型とＩＩＢ型の場合は、変換が胃腸管で起こるか体循環中で起こるかによって分類される。

有利なことに、本発明による化合物は、化合物の溶解性、化合物の細胞浸透性、および化合物の生体利用能を増加させることができる基を有することができる。

プロドラッグの例として、以下を挙げることができるが、これらに限定されない：
以下の一般式：

（式中：
・Ｒ_５は、好ましくは、アミノ酸、スルホニウム、またはホスホニウムであり；
・Ｒ_６およびＲ_７は、好ましくは、同一のまたは異なるアミノ酸であって、例えばグリシン、バリン、またはロイシンである）
を有する、Ｒ_５基、Ｒ_６基、またはＲ_７基、あるいはそれらの基を組み合わせて含有する、アミノ酸もしくはその類似体型、硫酸塩型、またはホスホニウム型のプロドラッグ；
以下の一般式：

（式中：
・Ｒ_８は、好ましくは、アミノ酸（アラニン、ロイシン、またはバリンなど）またはアミン類似体であり；
・Ｒ_９は、フェニルまたはフェニル類似体（ＣＨ_３ＰｈまたはＣＨ_３ＯＰｈなど）である）
を有する、Ｒ_８基およびＲ_９基、またはそれらの基を組み合わせて含有する、アミノ酸もしくはその類似体型、アルコール型、または硫黄型のリン酸塩またはモノリン酸塩プロドラッグ（ホスホロアミド酸など）。

実施例１で実証されるとおり、本発明による化合物は、上記の２種のプログラム細胞死（ＰＣＤ）に作用することができる。本発明による化合物が利用する信号伝達経路の中でも、ｍＴＯＲ経路が、特定の化合物によって阻害できるようである。

ｍＴＯＲタンパク質は、多数の代謝プロセス、例えば、特に、タンパク質合成、Ｇ１進行、細胞の生存、または細胞骨格などの中心にある。したがって、このタンパク質を経由する信号伝達経路は、現在、多数の癌および代謝疾患の治療において、新たなる治療標的とみなされ非常に関心が持たれている。

本発明による化合物が適していると思われる代謝疾患の例として、糖尿病、固形腫瘍、特にあらゆる起原の細胞腫、例えば、結腸腫瘍、乳房腫瘍、前立腺腫瘍、および黒色腫が挙げられるが、これらに限定されない。

好ましくは、本発明による化合物は、癌治療、すなわち腫瘍学および／または血液・腫瘍学への応用に適している。

本化合物が適している治療の例として、悪性血液疾患（慢性白血病（ＣＭＬ、ＣＬＬ）、急性骨髄芽球性白血病（ＡＭＬ）、ハイリスク型骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、多発性骨髄腫など）の治療、ＣＭＬでイマチニブ耐性および第二世代チロシンキナーゼ阻害剤耐性の場合の治療、ならびに骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）でＶｉｄａｚａ（５−Ａｚａ）耐性の場合の治療が挙げられるが、これらに限定されない。本発明による化合物は、上皮癌および代謝疾患の治療にも応用できる。本化合物は、他の薬、特にグリベック（登録商標）に対する耐性を回避するために用いることもできる。

具体的には、本発明による化合物は以下の治療に適している：
・フィラデルフィア染色体（ｂｃｒ−ａｂｌ）−陽性（Ｐｈ＋）慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）と新たに診断された成人および子供で、骨髄移植を第一選択治療として計画することができない場合；
・慢性期のＰｈ＋ ＣＭＬの成人および子供で、αインターフェロン治療が上手く行かなかった場合、または病気が移行期にあるか急性転化にある場合；
・フィラデルフィア染色体陽性急性リンパ性白血病（ＰＨ＋ ＡＬＬ）と新たに診断された成人患者において、化学療法と併用；
・不応性Ｐｈ＋ ＡＬＬまたは単独治療で再発した成人患者；
・ＰＤＧＦＲ（血小板由来成長因子受容体）遺伝子再編成が関連する骨髄異形成／骨髄増殖性疾患（ＭＤＳ／ＭＰＳ）の成人患者；
・ＦＩＰ１Ｌ１−ＰＤＧＦＲα再編成が関連する、進行期好酸球増加症候群（ＨＥＳ）および／または慢性好酸球性白血病（ＣＥＬ）の成人患者；
・Ｋｉｔ（ＣＤ１１７）陽性で手術不能および／または転移性悪性消化管間葉性腫瘍（ＧＩＳＴ）の成人患者；
・ＧＩＳＴ Ｋｉｔ（ＣＤ１１７）陽性消化管間葉性腫瘍を除去したが、再発の危険性が高い成人患者。危険性が低いまたは非常に低い場合は治療すべきではない；および
・手術不能の隆起性皮膚線維肉腫（ＤＦＳＰすなわちＤａｒｉｅｒ−Ｆｅｒｒａｎｄ疾患）の成人患者、および外科的処置による制御がきかない再発性および／または転移性のＤＦＳＰの成人患者。

有利なことに、本発明による化合物は、癌、特にチロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）耐性の癌の治療に特に適している。

特に有利なことに、本発明による化合物は、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、特にこの病気の治療に一般的に用いられるチロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）（例えば、イマチニブ、ダサチニブ、およびニロチニブなど）耐性のＣＭＬの治療に特に適している。

本発明は、癌の治療における同時投与、分離投与、または順次投与用の組み合わせ製剤として、本発明による化合物および少なくとも１種の第二の活性成分を含有する製剤にも関する。

有利なことに、第二の有効成分は、抗腫瘍剤、抗炎症剤、または本発明による化合物に関する副作用を減少させる作用剤である。

好ましくは、第二の活性成分は、アルキル化剤、代謝拮抗剤、植物アルカロイド、トポイソメラーゼ阻害剤、および抗腫瘍性抗生物質から選択される抗腫瘍化合物である。

本発明に従って使用可能な抗腫瘍剤として、具体的には、ボルテゾミブ、シスプラチン、カルボプラチン、イホスファミド、クロラムブシル、ブスルファン、チオテパ、５−フルオロウラシル（５ＦＵ）、フルダラビン、メトトレキセート、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビノレルビン、パクリタキセル、ドセタキセル、カンプトテシン誘導体、アムサクリン、アントラサイクリン、エピポドフィロトキシン誘導体、ドキソルビシン、ダウノルビシン、アクチノマイシンＤ、マイトマイシンＣ、プリカマイシン、およびブレオマイシンが挙げられるが、これらに限定されない。異なる腫瘍病態に使用されるＴＫＩ、例えば、イマチニブ、ダサチニブ、ニロチニブ、およびスニチニブなども挙げることができる。あるいは、本発明による併用製剤は、本発明による化合物と、少なくとも２種の他の抗腫瘍剤、または少なくとも３種もしくはそれ以上の他の抗腫瘍剤を組み合わせて含む。

本発明で使用される場合、治療上の同時使用という用語は、少なくとも２種の有効成分を、同一経路で同時にまたは実質的に同時に投与することを示す。

本発明で使用される場合、治療上の分離使用という用語は、少なくとも２種の有効成分を、異なる経路で同時にまたは実質的に同時に投与することを示す。

本発明で使用される場合、治療上の順次使用という用語は、少なくとも２種の有効成分を、異なる時間に投与することを示し、この場合の投与経路は同一でも異なっていてもよい。

より詳細には、この用語は、有効成分のうちの１種の投与が完了してから別種の投与を始める投与様式を示す。

したがって、有効成分のうちの１種を数ヶ月間投与してからその他の有効成分を投与することが可能である。この場合、併用治療になることはない。各有効成分を数週間ずつ交代させながら投与するという構想も可能である。

本発明はまた、本発明による化合物および薬学的に許容可能なキャリアを含む薬学的組成物にも関する。

本発明による組成物の投与経路は、経口、非経口、局所的、または点眼が可能である。好ましくは、薬学的組成物は、経口使用に適した形でパッケージ化されている。

すなわち、経口経路の場合、本組成物は、錠剤、カプセル剤、糖衣錠、シロップ、懸濁液、溶液、粉剤、顆粒剤、乳濁液、または徐放性になるようにマイクロビーズもしくはナノビーズもしくは脂質もしくは重合体ベシクルの懸濁液の形をとることができる。

あるいは、非経口経路で投与する場合、本発明による組成物は、灌流用、または筋肉内、静脈内、もしくは皮下注射用の溶液または懸濁液の形をとることができる。

またあるいは、本発明による組成物を局所的に投与する場合、本発明による薬学的組成物は、より具体的には、皮膚および粘膜の治療用であり、液状、ペースト状、または固形、より具体的には、軟膏、水溶液、水・アルコール溶液、もしくは油性溶液、ローション型の分散液、水性ゲル、無水ゲル、もしくは親油性ゲル、粉末、浸漬パッド、合成洗剤、ティッシュ、フォーム、スティック、シャンプー、湿布、クレンジング基剤、液状または均一乳化半液状の乳濁液（油相を水相に分散（Ｏ／Ｗ）、またはその逆（Ｗ／Ｏ）で得られる）、または軟質、半液状、もしくは固形で均一なクリーム状、ゲル状、もしくはポマード状の懸濁液もしくは乳濁液の形状が可能である。本発明による薬学的組成物は、徐放性になるようにマイクロビーズもしくはナノビーズもしくは脂質もしくは重合体ベシクルまたは重合体もしくはゲルパッチの懸濁液の形をとることもできる。

安定性および溶解性について検査を行った結果、本発明による化合物は、特に以下を含む溶液に対して安定であり溶解性を有すると思われる：
・ＤＭＡ（ジメチルアセトアミド）；
・Ｔｗｅｅｎ６０ポリソルベート６０（モノステアリン酸ポリオキシエチレン（２０）ソルビタン）またはＴｗｅｅｎ８０（モノオレイン酸ポリオキシエチレン（２０）ソルビタン）；および
・ＰＢＳ（リン酸緩衝食塩水）または水（Ｈ_２Ｏ）。

好ましくは、本発明による化合物は、以下を含む組成物で溶解させる：
・組成物の全重量に対して２％のＤＭＡ（ジメチルアセトアミド）；
・組成物の全重量に対して５％のＴｗｅｅｎ８０（モノオレイン酸ポリオキシエチレン（２０）ソルビタン）；および
・組成物の全重量に対して９３％のＰＢＳ（リン酸緩衝食塩水）。

本発明によれば、治療すべき対象は、好ましくはほ乳類であり、より好ましくは、ヒト、ウマ、イヌ、またはネコである。さらにより好ましくは、治療すべき患者とはヒトである。

本発明はまた、ｉｎ ｖｉｔｒｏで細胞を本発明による化合物と接触させることを含む、ｉｎ ｖｉｔｒｏで細胞増殖を阻害する方法にも関するものである。

最後に、本発明は、本発明による化合物の合成法に関する。

第一の実施形態によれば、本発明による化合物は、以下の反応スキームに従って、以下の工程を含む方法により合成することができる：
・銅（触媒）の存在下で式Ｒ_１Ｎ_３のアジドと式Ｒ_２−Ｃ≡Ｃ−Ｈのアルキンおよび求電子試薬Ｒ_３−Ｘ（Ｘは、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩから選択される）とをワンポットで反応させる工程；および
・１，４，５−三置換トリアゾール生成物を得る工程：

第二の実施形態によれば、本発明による化合物は、以下の反応スキームに従って、以下の工程を含む方法により合成することができる：
・式Ｒ_４−Ｃ≡Ｃ−Ｈのアルキンおよびパラジウム触媒の存在下でトリアゾール基質（Ｘは、ＢｒおよびＩから選択される）を反応させるＳｏｎｏｇａｓｈｉｒａ反応工程；および
・１，４，５−三置換１，２，３−トリアゾール誘導体（式中、５位のＲ_３に該当するのはＲ_４−Ｃ≡Ｃ−基であり、Ｒ_４は、Ｈ、ＳｉＭｅ_３、Ｐｈ、ＣＯ_２Ｍｅ、およびＣＯ_２Ｅｔから選択される）を得る工程：

第三の実施形態によれば、本発明による化合物は、以下の反応スキームに従って、以下の工程を含む方法により合成することができる：
・式Ｒ_３−ＳｎＢｕ_３のスズ誘導体または式Ｒ_３−Ｂ（ＯＨ）_２のボロン酸誘導体と１，４−三置換５−ハロトリアゾール（Ｘは、ＢｒおよびＩから選択される）とのＳｔｉｌｌｅまたはＳｕｚｕｋｉ−Ｍｉｙａｕｒａ型パラジウムカップリング反応工程；および
・５位にアリールまたはヘテロアリール型のＲ_３基を含有する１，４，５−三置換１，２，３−トリアゾールを得る工程：

第四の実施形態によれば、本発明による化合物は、以下の反応スキームに従って、以下の工程を含む方法により合成することができる：
・銅系触媒および酸化剤の存在下で、式Ｒ_１Ｎ_３のアジドと式Ｒ_２−Ｃ≡Ｃ−Ｈのアルキンを反応させる工程；および
・１，４，５−三置換１，２，３−トリアゾール（式中、５位のＲ_３に該当するのがＲ_２−Ｃ≡Ｃ−基である）を得る工程：

１６種の新規化合物、すなわち１６種のＡＩＣＡＲ（アカデシン）類似体を、２種の慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）細胞株（イマチニブ感受性型（Ｋ５６２）および耐性型（ＩｍａＲ））を用いて評価した。以下の表１に１６種の化合物を示す。

表１：

Ｋ５６２白血病細胞株は、ＣＭＬ患者の胸水から得られる。この細胞株は、この疾患を研究するのにうってつけのモデルである。イマチニブ耐性ＩｍａＲ細胞は、投薬量を増やしながらイマチニブに曝露させることでＫ５６２細胞から発生させる。Ｋ５６２細胞およびＩｍａＲ細胞は、ＲＰＭＩ １６４０培地（５％ウシ胎児血清を含有し、ピルビン酸ナトリウムおよび抗生物質（ペニシリン−ストレプトマイシン）を補充したもの）中、５％ＣＯ_２下、３７℃で培養する。

ａ．細胞生存能の測定による１６種の化合物のスクリーニング
本発明による１６種の化合物をスクリーニングするため、各化合物０．５ｍＭ（ＡＩＣＡＲの有効量）でそれぞれ処理したＫ５６２細胞およびＩｍａＲ細胞の２４時間後および４８時間後の代謝活性を調べる。図１〜図４に細胞生存能の検査結果を示す。

図１は、イマチニブ感受性Ｋ５６２細胞（Ｋ５６２）について、９６ウェルプレート中で、イマチニブ（１μＭ）、ＡＩＣＡＲ、または上記の表１に記載の本発明による１６種の化合物のうちの１種（０．５ｍＭ）を用いて刺激した場合としなかった場合の２４時間後の生存割合を示す。ＸＴＴ試薬を添加してから、４９０ｎｍで吸光度を測定する。

図２は、イマチニブ感受性Ｋ５６２細胞（Ｋ５６２）について、９６ウェルプレート中で、イマチニブ（１μＭ）、ＡＩＣＡＲ、または上記の表１に記載の本発明による１６種の化合物のうちの１種（０．５ｍＭ）を用いて刺激した場合としなかった場合の４８時間後の生存割合を示す。ＸＴＴ試薬を添加してから、４９０ｎｍで吸光度を測定する。

図３は、イマチニブ耐性細胞（ＩｍａＲ）について、９６ウェルプレート中で、イマチニブ（１μＭ）、ＡＩＣＡＲ、または上記の表１に記載の本発明による１６種の化合物のうちの１種（０．５ｍＭ）を用いて刺激した場合としなかった場合の２４時間後の生存割合を示す。ＸＴＴ試薬を添加してから、４９０ｎｍで吸光度を測定する。

図４は、イマチニブ耐性細胞（ＩｍａＲ）について、９６ウェルプレート中で、イマチニブ（１μＭ）、ＡＩＣＡＲ、または上記の表１に記載の本発明による１６種の化合物のうちの１種（０．５ｍＭ）を用いて刺激した場合としなかった場合の４８時間後の生存割合を示す。ＸＴＴ試薬を添加してから、４９０ｎｍで吸光度を測定する。

得られた結果から、２種のクローンについて、１６種の化合物は全て、刺激の２４時間後または４８時間後の細胞生存率を低下させていることがわかる。細胞生存率は、陽性対照よりも低下しており、イマチニブおよびＡＩＣＡＲ化合物に対しても、低下の度合いはより大きいか匹敵するほどである。したがって、これら１６種の化合物は、ＣＭＬ治療用の有効成分として興味深い候補であると思われる。

また、これら１６種の化合物のうち９種（１５、２３、８２、８６、１９１、４９、１７６、２５、１１２）は、刺激の２４時間後および４８時間後のそれぞれで、２種のクローンにおいて実に同等に、細胞生存率の顕著な低下を誘導する。実際、生存細胞の割合は、処理の２４時間後、１０％未満の値に変化する。そのうえ、予想どおりであるが、イマチニブは、Ｋ５６２株では、刺激から４８時間で細胞生存率の５０％超の低下を誘導するのに対して、ＩｍａＲ株では、細胞生存率がほとんど影響を受けない。

ＡＩＣＡＲは、対照的に、どのクローンであるかに関わらず細胞生存率の低下を導く（図１Ａ、図１Ｂ）。次いで、７種の好適化合物を用いて、２種のクローンで用量反応実験（５μＭから５０μＭまで濃度を増やしながら２４時間または４８時間処理）を行う（図１〜図４）。

ｂ．７種の化合物の用量反応実験：
図５は、イマチニブ（１μＭ）に２４時間曝露させたＫ５６２細胞（Ｋ５６２Ｓ細胞およびＫ５６２Ｒ細胞におけるイマチニブの効果の完全な用量反応については、Ｊａｃｑｕｅｌｅ ｅｔ ａｌ．， Ｏｎｃｏｇｅｎｅ ２００７， ２６， ２４４５−２４５８を参照）に対して、ＡＩＣＡＲ、または７種の化合物１５、２３、８２、８６、１９１、４９、および１１２から選択される１種の用量を増やしながら（５、１０、２５、および５０μΜ）行った用量反応実験を示す。

図６は、イマチニブ（１μＭ）に４８時間曝露させたＫ５６２細胞（Ｋ５６２Ｓ細胞およびＫ５６２Ｒ細胞におけるイマチニブの効果の完全な用量反応については、Ｊａｃｑｕｅｌｅ ｅｔ ａｌ．， Ｏｎｃｏｇｅｎｅ ２００７， ２６， ２４４５−２４５８を参照）に対して、ＡＩＣＡＲ、または７種の化合物１５、２３、８２、８６、１９１、４９、および１１２から選択される１種の用量を増やしながら（５、１０、２５、および５０μΜ）行った用量反応実験を示す。

図７は、イマチニブ（１μＭ）に２４時間曝露させたＩｍａＲ細胞（Ｋ５６２Ｓ細胞およびＫ５６２Ｒ細胞におけるイマチニブの効果の完全な用量反応については、Ｊａｃｑｕｅｌｅ ｅｔ ａｌ．， Ｏｎｃｏｇｅｎｅ ２００７， ２６， ２４４５−２４５８を参照）に対して、ＡＩＣＡＲ、または７種の化合物１５、２３、８２、８６、１９１、４９、および１１２から選択される１種の用量を増やしながら（５、１０、２５、および５０μΜ）行った用量反応実験を示す。

図８は、イマチニブ（１μＭ）に４８時間曝露させたＩｍａＲ細胞（Ｋ５６２Ｓ細胞およびＫ５６２Ｒ細胞におけるイマチニブの効果の完全な用量反応については、Ｊａｃｑｕｅｌｅ ｅｔ ａｌ．， Ｏｎｃｏｇｅｎｅ ２００７， ２６， ２４４５−２４５８を参照）に対して、ＡＩＣＡＲ、または７種の化合物１５、２３、８２、８６、１９１、４９、および１１２から選択される１種の用量を増やしながら（５、１０、２５、および５０μΜ）行った用量反応実験を示す。

図５〜図８の曲線は、これら７種の化合物の用量反応効果を示す。測定した濃度において不活性なＡＩＣＡＲは、参照としての役割を果たす。ＸＴＴ試薬を添加してから、４９０ｎｍで吸光度を測定する。

図５〜図８に示す結果から、７種の化合物は、刺激の２４時間後に生存細胞数を用量に依存して減少させることがわかる。これら７種の化合物（１５、２３、８２、８６、１９１、４９、１１２）は、この２種の細胞株に対して、わすか５μＭという低濃度でも非常に有効であることがわかる。ＩＣ５０は、化合物８２、８６、および１１２が約２．５μΜ、化合物１５、２３、１９１、および４９が約１０μΜである。比較すると、ＡＩＣＡＲは、測定したこれらの濃度において、不活性である。最後に、Ｋ５６２クローンは、これらの化合物に対して、ＩｍａＲクローンよりも感受性がわずかに高いようである。

ｃ．細胞周期のフローサイトメトリー分析：
２種の細胞株を、イマチニブ、ＡＩＣＡＲ、または化合物８２、８６、１１２、１５、２３、１９１、もしくは４９とともにインキュベートしてから、フローサイトメトリーにより細胞周期の各相（サブＧ１、アポトーシス細胞、Ｇ０／Ｇ１、Ｓ、およびＧ２／Ｍ、図３Ａ）にある細胞の割合を求める。

図９は、細胞周期の各相（サブＧ１、Ｇ０／Ｇ１、Ｓ、２／Ｍ）にある細胞の細胞分布モデルを示す。図９のグラフのｘ軸は、ヨウ化プロピジウムで染色されたＤＮＡの量を示し、ｙ軸は細胞数を示す。

図１０は、Ｋ５６２細胞を、イマチニブ（３μＭ）、ＡＩＣＡＲ（０．０１ｍＭ、および１ｍＭ）、化合物８２（２．５μＭ）、化合物８６（２．５μＭ）、化合物１１２（２．５μＭ）、化合物１５（１０μＭ）、化合物２３（１０μＭ）、化合物１９１（１０μＭ）、および化合物４９（１０μＭ）それぞれで２４時間刺激した場合の、細胞周期の各相にある細胞の割合（ｙ軸）を示す。核をヨウ化プロピジウムで染色し、次いで細胞周期の各相（サブＧ１、Ｇ０／Ｇ１、Ｓ、Ｇ２／Ｍ）にある細胞の割合を求める。

図１１は、ＩｍａＲ細胞を、イマチニブ（３μＭ）、ＡＩＣＡＲ（０．０１ｍＭ、および１ｍＭ）、化合物８２（２．５μＭ）、化合物８６（２．５μＭ）、化合物１１２（２．５μＭ）、化合物１５（１０μＭ）、化合物２３（１０μＭ）、化合物１９１（１０μＭ）、および化合物４９（１０μＭ）それぞれで２４時間刺激した場合の、細胞周期の各相にある細胞の割合（ｙ軸）を示す。核をヨウ化プロピジウムで染色し、次いで細胞周期の各相（サブＧ１、Ｇ０／Ｇ１、Ｓ、Ｇ２／Ｍ）にある細胞の割合を求める。

図１０および図１１に示す結果から、イマチニブで処理してから２４時間後、細胞周期のＧ０／Ｇ１相にある細胞の割合が増加していることがわかる。サブＧ１相にも少数の細胞が集積しており、アポトーシス現象を示唆している。予想どおり、これらの効果は、ＩｍａＲクローンでは観測されない。ＡＩＣＡＲについては、細胞周期を、Ｋ５６２クローンではＧ２／Ｍで、およびＩｍａＲ細胞ではＧ０／Ｇ１で止めるものと思われる。最後に、７種の化合物のうち５種（８２、８６、１５、２３、４９）は、Ｋ５６２細胞およびＩｍａＲ細胞でＧ２／Ｍ相にある細胞の割合の増加を誘導し、化合物１１２、１５、２３、および４９については、細胞をサブＧ１相に非常に顕著に集積させるとともにＧ０／Ｇ１にある細胞数を減少させる。

これらの化合物は、Ｋ５６２Ｓ細胞およびＫ５６２Ｒ細胞が細胞周期のＧ２／Ｍ相で止まるように誘導するが、細胞アポトーシスを伴うとも伴わないとも言えない。

ｄ．Ｋ５６２細胞およびＩｍａＲ細胞におけるカスパーゼ３、カスパーゼ８、およびカスパーゼ９の活性化の分析：
ｉ）カスパーゼ３活性の測定：
図１２は、イマチニブ感受性Ｋ５６２細胞を、イマチニブ（３μＭ）、ＡＩＣＡＲ（０．０１ｍＭおよび１ｍＭ）、化合物８２（２．５μＭ）、化合物８６（２．５μＭ）、化合物１１２（２．５μＭ）、化合物１５（１０μＭ）、化合物２３（１０μＭ）、化合物１９１（１０μＭ）、および化合物４９（１０μＭ）それぞれで２４時間刺激した場合のカスパーゼ３活性をＵ／ｍｇタンパク質の単位（ｙ軸）で示す。細胞を溶解させて、タンパク質１０μｇを、Ａｃ−ＤＥＶＤ−ＡＭＣの入った９６ウェルプレートに入れる。次いで、ＡＭＣの放出による４６０ｎｍの蛍光発光を記録する。

図１３は、イマチニブ耐性ＩｍａＲ細胞を、イマチニブ（３μＭ）、ＡＩＣＡＲ（０．０１ｍＭおよび１ｍＭ）、化合物８２（２．５μＭ）、化合物８６（２．５μＭ）、化合物１１２（２．５μＭ）、化合物１５（１０μＭ）、化合物２３（１０μＭ）、化合物１９１（１０μＭ）、および化合物４９（１０μＭ）それぞれで２４時間刺激した場合のカスパーゼ３活性をＵ／ｍｇタンパク質の単位（ｙ軸）で示す。細胞を溶解させて、タンパク質１０μｇを、Ａｃ−ＤＥＶＤ−ＡＭＣの入った９６ウェルプレートに入れる。次いで、ＡＭＣの放出による４６０ｎｍの蛍光発光を記録する。

これらの図１２および図１３の結果から、イマチニブ３μＭで２４時間処理した場合、ＩｍａＲ細胞では特に目立つ増加は誘導されず、一方Ｋ５６２細胞ではカスパーゼ３活性が約４倍に増加することがわかる。対照的に、ＡＩＣＡＲ（１ｍＭ）は、どちらのクローン株であっても、この活性化を誘導できない。図１２および図１３の結果は、フローサイトメトリーによる細胞周期の分析で観測された効果を裏付ける：化合物１１２、１５、および２３は、Ｋ５６２細胞およびＩｍａＲ細胞において、対照に対して２倍〜３倍の範囲でカスパーゼ３活性の増加を誘導する。興味深いことに、化合物４９は、ＩｍａＲクローンではカスパーゼ３活性の増加を誘導するがＫ５６２細胞では誘導しない。

以上の結果を受けて、３種の化合物１１２、１５、および２３について、カスパーゼ８およびカスパーゼ９の活性化を測定することにする。

ｉｉ）カスパーゼ８およびカスパーゼ９の活性の測定：
図１４は、イマチニブ感受性Ｋ５６２細胞（白棒）およびイマチニブ耐性ＩｍａＲ細胞（黒棒）それぞれを、イマチニブ（３μＭ）、化合物１１２（２．５μＭ）、化合物１５（１０μＭ）、または化合物２３（１０μＭ）で２４時間刺激した場合のカスパーゼ８活性をＵ／ｍｇタンパク質の単位（ｙ軸）で示す。細胞を溶解させて、カスパーゼ８活性を、タンパク質１０μｇおよびＡｃ−ＩＥＴＤ−ＡＭＣを用いて測定する。次いで、ＡＭＣの放出による４６０ｎｍの蛍光発光を記録する。

図１５は、イマチニブ感受性Ｋ５６２細胞（白棒）およびイマチニブ耐性ＩｍａＲ細胞（黒棒）それぞれを、イマチニブ（３μＭ）、化合物１１２（２．５μＭ）、化合物１５（１０μＭ）、または化合物２３（１０μＭ）で２４時間刺激した場合のカスパーゼ９活性をＵ／ｍｇタンパク質の単位（ｙ軸）で示す。細胞を溶解させて、タンパク質１０μｇおよびＡｃ−ＬＥＨＤ−ＡＭＣを用いてカスパーゼ９活性を測定する。次いで、ＡＭＣの放出による４６０ｎｍの蛍光発光を記録する。

図１４および図１５の結果から、それぞれの化合物を存在させてもカスパーゼ８活性の増加は特には誘導されないことがわかる（図１４）。対照的に、Ｋ５６２細胞をイマチニブで処理するとカスパーゼ９活性の大幅な増加が誘導されるが、ＩｍａＲ細胞ではこうはならない。化合物１１２、化合物１５、および化合物２３も、このカスパーゼの活性化を２種のクローンでほぼ同様に誘導する（図１５）。

ｅ．アポトーシスおよびオートファジーの特異的マーカーの発現およびリン酸化ならびにｍＴＯＲ経路の活性化状態の分析：
ｉ）アポトーシスおよびオートファジーの特異的マーカーの発現およびリン酸化の分析：
図１６は、アポトーシスおよびオートファジーの特異的マーカーの発現およびリン酸化のウエスタンブロット分析結果を示す。Ｋ５６２細胞およびＩｍａＲ細胞を、イマチニブ（３μΜ）、ＡＩＣＡＲ（０．０１ｍＭおよび１ｍＭ）、化合物８２（２．５μΜ）、化合物８６（２．５μΜ）、化合物１１２（２．５μΜ）、または化合物１５（１０μΜ）、化合物２３（１０μΜ）、化合物１９１（１０μΜ）、および化合物４９（１０μΜ）で２４時間刺激する。細胞を溶解させ、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ（１２％または１４％ポリアクリルアミドゲル）によりタンパク質３５μｇを分離し、マーカーそれぞれに特異的な抗体を用いてウエスタンブロット分析を行う。

図１６に示すウエスタンブロットの結果から、化合物８２、化合物８６、化合物１１２、化合物１５、化合物２３、化合物１９１、および化合物４９の細胞毒性が関与するプログラム細胞死（ＰＣＤ）の種類、すなわちアポトーシスおよびオートファジーの特異的マーカーの発現およびリン酸化を識別することができる。得られた結果から、ＡＩＣＡＲ（１ｍＭ）ならびに化合物８２、化合物８６、化合物１１２、化合物１５、化合物２３、および化合物１９１で処理されたＫ５６２細胞およびＩｍａＲ細胞では、オートファジーの初期段階で生じるｐ６２／ＳＱＳＴＭ１の発現が増加することがわかる。オートファジー中、ＬＣ３−Ｉは開裂してＬＣ３−ＩＩになり、ついでこの形で、ファゴフォアの膜に挿入されてオートファゴソームの拡張が可能になるようにする目的でホスファチジルエタノールアミンと結合する。したがって、ウエスタンブロットで示されるＬＣ３−ＩからＬＣ３−ＩＩへの凝集は、オートファジー誘導を実証する優れた手段となる。ＬＣ３は、ＡＩＣＡＲ（１ｍＭ）、または化合物８２、化合物８６、化合物１５、化合物２３、化合物１９１、および化合物４９の存在下で、２種のクローンに開裂する。また、アポトーシス中、一定数のタンパク質がカスパーゼにより開裂される。その中でも、ＰＡＲＰは、カスパーゼ３の主要基質である。イマチニブ、または化合物１１２、化合物１５、化合物２３、および化合物４９に曝露させた２種のクローン両方において、８５ｋＤａ（ＰＡＲＰ ｃｌ）に特徴的な開裂断片の出現が観測される。つまり、これらの観測も上記の結果を裏付ける。

最後に、オートファジープロセスの開始にＡＭＰＫ／ｍＴＯＲ経路がどう関与しているかを求めるため、Ｐ−ＡＭＰＫ（ＡＭＰＫタンパク質（遅延したゲル移動で示される））およびＰ−Ｓ６リボ（リボソームタンパク質Ｓ６、ｍＴＯＲの間接的基質）のリン酸化レベルを示した。興味深いことに、ＡＭＰＫは、ＡＩＣＡＲおよび注目している各化合物それぞれ１ｍＭの存在下で活性化されることがわかる。この活性化は、リボソームタンパク質Ｓ６の大量脱リン酸化により示されるｍＴＯＲ経路の阻害と相関する。

ｍＴＯＲ経路が各化合物の存在下で阻害されることを裏付けるため、ｍＴＯＲの直接基質であるタンパク質４Ｅ−ＢＰ１のリン酸化を行った。

ｉｉ）ｍＴＯＲ経路の活性化状態の分析
図１７は、ｍＴＯＲの直接基質である４Ｅ−ＢＰ１のリン酸化を調べることで行ったｍＴＯＲ経路の活性化状態のウエスタンブロット分析結果を示す。Ｋ５６２細胞およびＩｍａＲ細胞を、イマチニブ（３μΜ）、ＡＩＣＡＲ（０．０１ｍＭおよび１ｍＭ）、化合物８２（２．５μΜ）、化合物１１２（２．５μΜ）、または化合物１５（１０μΜ）、化合物２３（１０μΜ）、および化合物１９１（１０μΜ）それぞれで２４時間刺激する。細胞を溶解させ、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ（１３％ポリアクリルアミドゲル）によりタンパク質３０μｇを分離し、４Ｅ−ＢＰ１タンパク質に特異的な抗体を用いてウエスタンブロット分析を行う。観測される遅延したゲル移動は、４Ｅ−ＢＰ１のリン酸化レベルを反映する。

ウエスタンブロットは、４Ｅ−ＢＰ１のリン酸化度合いに応じた明瞭さの遅延したゲル移動を示す。こうして、ＡＩＣＡＲ（１ｍＭ）ならびに化合物８２および化合物２３で処理された２種の感受性および耐性クローンで４Ｅ−ＢＰ１リン酸化の全体的な減少、ならびに残りの化合物の場合での部分的減少が観測される。予想どおり、イマチニブは、親Ｋ５６２株で４Ｅ−ＢＰ１のリン酸化を完全に阻害するが、耐性の対応株では阻害しない。

ｆ．カテプシンＢ活性およびカテプシンＬ活性化の実証：
ｉ）カテプシンＢの測定：
図１８は、イマチニブ感受性Ｋ５６２細胞（白棒）またはイマチニブ耐性ＩｍａＲ細胞（黒棒）それぞれを、イマチニブ（３μΜ）、ＡＩＣＡＲ（０．０１ｍＭおよび１ｍＭ）、または化合物８２（２．５μΜ）、化合物１１２（２．５μΜ）、または化合物１５（１０μΜ）、化合物２３（１０μΜ）、または化合物１９１（１０μΜ）で２４時間刺激した場合のカテプシンＢ活性をＵ／ｍｇタンパク質の単位（ｙ軸）で示す。細胞を溶解させて、タンパク質５μｇを、ｚ−ＲＲ−ＡＭＣの入った９６ウェルプレートに入れる。次いで、ＡＭＣの放出による４６０ｎｍの蛍光発光を記録する。

ｐ６２およびＬＣ３−ＩＩタンパク質の蓄積に関する結果を受けて、カテプシンＢの活性、次いでカテプシンＬ活性化について調べることにする。これらは、オートファゴリソソームの内容物の消化中に生じるオートファジーのエフェクターであるエフェクターリソソーム酵素である。同じく、図１８に示されるとおり、ＡＩＣＡＲ（１ｍＭ）、または化合物８２、化合物１１２、化合物１５、化合物２３、化合物１９１のいずれかで処理すると、それぞれについて２種のクローンで同様に、カテプシンＢ活性の増加が、約２倍（化合物８２、化合物１９１）または３倍超（化合物１１２、化合物１５、化合物２３）観測される。

ｉｉ）カテプシンＬ活性化の実証：
図１９は、カテプシンＬ活性化のウエスタンブロット分析結果を示す。Ｋ５６２細胞およびＩｍａＲ細胞を、イマチニブ（３μΜ）、ＡＩＣＡＲ（０．０１ｍＭおよび１ｍＭ）、化合物８２（２．５μΜ）、化合物１１２（２．５μΜ）、または化合物１５（１０μΜ）、化合物２３（１０μΜ）、および化合物１９１（１０μΜ）で２４時間刺激する。細胞を溶解させ、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ（１３％ポリアクリルアミドゲル）によりタンパク質３０μｇを分離し、カテプシンＬに特異的な抗体を用いてウエスタンブロット分析を行う。

図１９に示すカテプシンＬ活性化に関する免疫ブロットは、Ｋ５６２クローンにカテプシンＬの活性型が蓄積されることを示しており、カテプシンＢの測定中になされた観測を裏付ける。興味深いことに、カテプシンＬは、ＩｍａＲクローンでは活性化されず、したがって、このクローンにおけるオートファゴソームの内容物の分解には関与していないように思われる。

結論：
上記の実施例１ａ〜１ｇに示す結果によれば、本発明による化合物は、イマチニブ感受性およびイマチニブ耐性どちらの白血病Ｋ５６２細胞株に対しても抗癌活性を有すると思われる。使用した１６種の化合物のうち、細胞生存率実験で最も効果が高かった７種の化合物は、非常に興味深い特徴を有しており、ＡＩＣＡＲより５０倍から５００倍強力であると思われる。また、特定の化合物は、オートファジーのみ（８２、８６、１９１）、アポトーシスのみ（１１２）、またはこの２種の機構両方（１５、２３、４９）を誘導すると思われる。しかしながら、これら７種の化合物は全て、共通の作用機構として、タンパク質基質が全て脱リン酸化することで示されるようにｍＴＯＲ経路を阻害し（図１６および図１７）、細胞周期をＧ２／Ｍ相で遮断する（図９、図１０、および図１１）。同じく興味深いこととして、化合物１１２、１５、２３、および４９により誘導されるアポトーシスが、ミトコンドリア透過処理およびカスパーゼ９活性化を必要とする内因性経路により基本的に中継されることを挙げておく。

１３種の新規化合物、すなわち１３種のＡＩＣＡＲ（アカデシン）類似体を、イマチニブ感受性ＣＭＬ（慢性骨髄性白血病）細胞株（Ｋ５６２）で評価した。これら１３種の化合物を以下の表２に示す。

表２：

ａ．本発明による１３種の化合物についての細胞生存率の測定：
本発明による１３種の化合物をスクリーニングするため、各化合物０．５ｍＭ（ＡＩＣＡＲの有効量）で処理したＫ５６２細胞の４８時間後の代謝活性を調べる。図２１は、イマチニブ感受性Ｋ５６２細胞（Ｋ５６２）について、９６ウェルプレート中で、ＡＩＣＡＲまたは上記の表１に記載の本発明による１３種の化合物のうちの１種（０．５ｍＭ）を用いて刺激した場合としなかった場合の４８時間後の生存割合を示す。ＸＴＴ試薬を添加してから、４９０ｎｍで吸光度を測定する。

得られた結果から、これらの１３種の化合物のうち、１３種が、刺激の４８時間後に、細胞生存率の低下を誘導することがわかる。細胞生存率は、陽性対照よりも低下しており、イマチニブおよびＡＩＣＡＲ化合物に対しても、低下の度合いはより大きいか匹敵するほどである。したがって、これら１３種の化合物は、ＣＭＬ治療用の有効成分として興味深い候補であると思われる。

また、これら１３種の化合物のうち６種（２０、２１、２２、２８、２９、および３２）は、刺激の４８時間後、細胞生存率の顕著な低下を誘導する。実際、生存細胞の割合は、処理の４８時間後、２０％未満の値に低下する。

ｂ．本発明による１５種の化合物についての用量反応実験：
図２２および図２３は、Ｋ５６２細胞に対して、９種の化合物２３、２４、２７、３０、２０、２１、２２、２４および２５から選択される１種の用量を増やしながら（５、１０、２５、および５０μΜ）４８時間曝露させて行った用量反応実験を示す。

図２２および図２３のヒストグラムは、これら９種の化合物それぞれの用量反応効果を示す。ＸＴＴ試薬を添加してから、４９０ｎｍで吸光度を測定する。

図２２および図２３に示す結果から、これら９種の化合物は、刺激の４８時間後に生存細胞数を用量に依存して減少させることがわかる。これら９種の化合物は、Ｋ５６２細胞に対して、５０μＭという濃度でも非常に有効であることがわかる。ＩＣ５０は、化合物２０、化合物２１、化合物２３、化合物２４、および化合物３０が５μＭのオーダーにあり、化合物２２、化合物２７、化合物２８、および化合物６１が約１０μΜである。

本発明による化合物の合成に関する手順：
１’，２’，３’，５’−テトラアセタト−β−Ｄ−リボースをジクロロメタン５０ｍｌに加えた溶液に、トリメチルシリル、次いでＢＦ_３−Ｅｔ_２Ｏを滴下する。反応物を室温で約１時間放置し、次いで飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗う。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、次いで溶媒を減圧蒸留する。得られる油状物をシリカカラムで精製して、化合物１を無色油状物として得る：

臭化４−メチルベンジルをジメチルホルムアミド５０ｍｌに加えた溶液に、アジ化ナトリウムを加える。反応物を室温で約２時間放置し、溶媒を減圧蒸留して、ジクロロメタン１００ｍｌを加える。有機相を水で２回、次いで飽和ＮａＣｌ溶液で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥させ、次いで溶媒を減圧蒸留する。得られる油状物をシリカカラムで精製して、化合物２を無色油状物として得る：

アジド１をテトラヒドロフラン（または２−メチルテトラヒドロフラン）５ｍｌに加えた溶液に、０℃で、プロピオール酸エチル、シアン化銅（Ｉ）、３５％酸素添加水およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを順番に加える。反応物を０℃で約１０分間撹拌し、次いで室温に昇温させる。反応が完了したら、反応物をセライト濾過して、溶媒を減圧蒸留する。得られる粗生成物をシリカカラムで精製して、化合物３を褐色油状物として得る。最適化された方法では、２−メチルテトラヒドロフランおよびブロモトリス（トリフェニルホスフィン）ＣｕＢｒ（ＰＰｈ_３）_３を用いる。

アジド２をテトラヒドロフラン５ｍｌに加えた溶液に、０℃で、プロピオール酸エチル、シアン化銅（Ｉ）、３５％酸素添加水、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを順番に加える。反応物を０℃で約１０分間撹拌し、次いで室温に昇温させる。反応が完了したら、反応物をセライト濾過して、溶媒を減圧蒸留する。得られる粗生成物をシリカカラムで精製して、化合物４を黄色固形物として得る。最適化された方法では、２−メチルテトラヒドロフランおよびブロモトリス（トリフェニルホスフィン）ＣｕＢｒ（ＰＰｈ_３）_３を用いる。

アジド１をテトラヒドロフラン（または２−メチルテトラヒドロフラン）２０ｍｌに加えた溶液に、プロピオール酸エチル、Ｉ_２、硝酸アンモニウムセリウム、ヨウ化銅（Ｉ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを加える。反応物を室温で約１５分間放置し、次いでセライト濾過する。溶媒を減圧蒸留し、得られる暗色油状物をシリカカラムで精製して、化合物５を褐色固形物として得る。最適化された方法では、ＴＨＦの代わりに２−メチルテトラヒドロフランを用いる。

アジド１をジクロロメタン１０ｍｌに加えた溶液に、プロピオール酸エチル、Ｎ−クロロスクシンイミド、塩化銅（Ｉ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを加える。反応物を室温で約２時間放置し、次いでセライト濾過する。溶媒を減圧蒸留し、得られる油状物をシリカカラムで精製して、化合物６を油状物として得る。

アジド１をテトラヒドロフラン（または２−メチルテトラヒドロフラン）５ｍｌに加えた溶液に、プロピオール酸エチル、塩化ｐ−トルオイル、ヨウ化銅（Ｉ）、およびＮ，Ｎ’−ジイソプロピルエチルアミンを加える。反応物を室温で約３０分間放置し、次いでセライト濾過する。溶媒を減圧蒸留し、得られる油状物をシリカカラムで精製して、化合物７を油状物として得る。

化合物５をトルエン２０ｍｌに加えた溶液に、エチニルトリエチルシラン、Ｐｄ（ＰＰｈ_３）_２Ｃｌ_２、ヨウ化銅（Ｉ）、およびトリエチルアミンを加える。反応物を９０分間６０℃に加熱し、次いでセライト濾過して、溶媒を減圧蒸留する。得られる油状物をシリカカラムで精製して、化合物８を油状物として得る。

化合物８をメタノール４０ｍｌに加えた溶液を氷水浴につける。アンモニアを数秒間吹き込み、次いで反応物を室温になるまで放置する。一晩後、溶媒を減圧蒸留し、得られる油状物をシリカカラムで精製して、化合物９および１０を発泡物として得る。

化合物５をトルエン１０ｍｌに加えた溶液に、２−（トリブチルスタンニル）チオフェン、Ｐｄ（ＰＰｈ_３）_２Ｃｌ_２、ヨウ化銅（Ｉ）、およびトリエチルアミンを加える。反応物を約３時間８０℃に加熱し、セライト濾過し、次いで溶媒を減圧蒸留する。得られる油状物をシリカカラムで精製して、化合物１１を褐色油状物として得る。

化合物１１をエタノール２０ｍｌに加えた溶液に、炭酸ナトリウムを加える。反応物を室温で１時間撹拌し、次いで溶媒を減圧蒸留し、得られる粗生成物をシリカカラムで精製して、化合物１２を黄色油状物として得る。

化合物１１をメタノール３０ｍｌに加えた溶液を氷水浴につける。アンモニアガスを数秒間吹き込み、次いで反応物を室温になるまで放置する。一晩後、溶媒を減圧蒸留し、得られる油状物をシリカカラムで精製して、化合物１３を黄色油状物として得る。

本発明による化合物の合成に関する手順：
アジド１（１−アジド−２，３’，４’−トリ−Ｏ−アセチルリボース）をメタノール２０ｍｌに加えた溶液に、炭酸ナトリウムを加える。反応物を室温で約１時間撹拌し、次いで溶媒を減圧蒸留し、得られる粗生成物をシリカカラムで精製して、化合物１４を無色油状物として得る。

アジド１４をアセトン２０ｍｌに加えた溶液に、０℃で、２，２−ジメトキシプロパン、次いで三フッ化ホウ素エチルエーテル錯塩を滴下する。混合物を０℃で３０分間撹拌し、次いで室温で１時間撹拌する。反応物を、０℃で、トリエチルアミンのアセトン溶液（１０％）２０ｍｌに注ぐ。１０分間撹拌後、中和された溶液を蒸留し、得られる黄色油状物をシリカカラムで精製（溶離液：ＣＨ_２Ｃｌ_２−ＭｅＯＨ：９８−２）して、化合物１５を無色油状物として得る。

アジド１５をテトラヒドロフラン（または２−メチルテトラヒドロフラン）５ｍｌに加えた溶液に、０℃で、プロピオール酸エチル、シアン化銅（Ｉ）、３５％酸素添加水、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを順番に加える。反応物を０℃で約１０分間撹拌し、次いで室温に昇温させる。反応が完了したら、反応物をセライト濾過して、溶媒を減圧蒸留する。得られる粗生成物をシリカカラムで精製（溶離液：シクロヘキサン−ＡｃＯＥｔ：７−３）して、化合物１６を油状物として得る。最適化された方法では、２−メチルテトラヒドロフランおよびブロモトリス（トリフェニルホスフィン）ＣｕＢｒ（ＰＰｈ_３）_３を用いる。

化合物１６を無水酢酸２ｍｌに加えた溶液に、４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）を加える。反応物を室温で２時間撹拌する。反応が完了したら、溶媒を減圧蒸留する。得られる粗生成物をシリカカラムで精製（溶離液：シクロヘキサン−ＡｃＯＥｔ：９−１）して、化合物１７を油状物として得る。

アジド１５をテトラヒドロフラン（または２−メチルテトラヒドロフラン）２０ｍｌに加えた溶液に、プロピオール酸エチル、Ｉ_２、硝酸アンモニウムセリウム、ヨウ化銅（Ｉ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを加える。反応物を室温で約２０分間放置し、次いでセライト濾過する。溶媒を減圧蒸留し、得られる暗色油状物をシリカカラムで精製（溶離液：シクロヘキサン−ＡｃＯＥｔ：８−２）して、化合物１８を褐色固形物として得る。

ａ．（Ｓｔｉｌｌｅカップリング）：化合物１８をトルエン１０ｍｌに加えた溶液に、２−（トリブチルスタンニル）チオフェン、Ｐｄ（ＰＰｈ_３）_４、およびヨウ化銅（Ｉ）を加える。反応物を２時間８０℃に加熱し、セライト濾過し、次いで溶媒を減圧蒸留する。得られる油状物をシリカカラムで精製（溶離液：シクロヘキサン−ＡｃＯＥｔ：８−２）して、化合物１９を油状物として得る。

ｂ．（Ｓｕｚｕｋｉカップリング）：化合物１８をジオキサン（２ｍｌ）に加えた溶液に、Ｎａ_２ＣＯ_３（１Ｍ）溶液０．５ｍｌ、次いでチオフェン−２−ボロン酸を加える。次いで、混合物を脱気してアルゴン下に置き、次いで触媒Ｐｄ（ＰＰｈ_３）_４を加える。混合物を撹拌しながら４時間８５℃に加熱する。反応物をＨＣｌ（１Ｍ）１０ｍｌで中和し、それから酢酸エチル２０ｍｌを加える。次いで、有機相をＮａＣｌ溶液で抽出し、それから減圧蒸留する。粗残渣をシリカカラムで精製（溶離液：シクロヘキサン−ＡｃＯＥｔ：８−２）して、化合物１９を油状物として得る。

化合物１９を無水酢酸２ｍｌに加えた溶液に、４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）を加える。反応物を室温で２時間撹拌する。反応が完了したら、溶媒を減圧蒸留する。得られる粗生成物をシリカカラムで精製（溶離液：シクロヘキサン−ＡｃＯＥｔ：９−１）して、化合物２０を油状物として得る。

１’−アセチルデオキシリボースをピリジン６０ｍｌに加えた溶液に、塩化トルオイルを加える。反応物を室温で３０分間放置する。ジクロロメタンで抽出してから、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧蒸留する。得られる油状物をシリカカラムで精製（溶離液：シクロヘキサン−ＡｃＯＥｔ：８−２）して、化合物２１を黄色油状物として得る。これは固化してベージュ色固形物となる。

化合物２１をジクロロメタン５０ｍｌに加えた溶液に、トリメチルシリルアジド、次いでＢＦ_３−Ｅｔ_２Ｏを滴下する。反応物を室温で約３時間放置し、次いで飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗う。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、次いで溶媒を減圧蒸留する。得られる油状物をシリカカラムで精製（溶離液：シクロヘキサン−ＡｃＯＥｔ：９−１）して、化合物２２を無色油状物として得る：

アジド２２をテトラヒドロフラン５ｍｌに加えた溶液に、０℃で、プロピオール酸エチル、シアン化銅（Ｉ）、３５％酸素添加水、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを順番に加える。反応物を０℃で約１０分間撹拌し、次いで室温に昇温させる。反応が完了したら、反応物をセライト濾過して、溶媒を減圧蒸留する。得られる粗生成物をシリカカラムで精製（溶離液：シクロヘキサン−ＡｃＯＥｔ：８−２）して、化合物２３を固形物として得る。最適化された方法では、２−メチルテトラヒドロフランおよびブロモトリス（トリフェニルホスフィン）ＣｕＢｒ（ＰＰｈ_３）_３を用いる。

１，２，３，５−テトラ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｌ−リボフラノースをジクロロメタン１００ｍｌに加えた溶液に、トリメチルシリルアジド、次いで三フッ化ホウ素エチルエーテル錯塩を滴下する。反応物を室温で２時間放置し、次いで飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗う。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、次いで溶媒を減圧蒸留する。得られる油状物をシリカカラムで精製（溶離液：シクロヘキサン−ＡｃＯＥｔ：９−１）して、化合物２４を白色固形物として得る：

アジド２４をテトラヒドロフラン５ｍｌに加えた溶液に、０℃で、プロピオール酸エチル、シアン化銅（Ｉ）、３５％酸素添加水、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを順番に加える。反応物を０℃で約１０分間撹拌し、次いで室温に昇温させる。反応が完了したら、反応物をセライト濾過して、溶媒を減圧蒸留する。得られる粗生成物をシリカカラムで精製（溶離液：シクロヘキサン−ＡｃＯＥｔ：８−２）して、化合物２５を褐色固形物として得る。最適化された方法では、２−メチルテトラヒドロフランおよびブロモトリス（トリフェニルホスフィン）ＣｕＢｒ（ＰＰｈ_３）_３を用いる。

いろいろな造血細胞株および固形癌に対する本発明による５種の化合物の有効性分析：
６種の悪性血液疾患細胞株に対して、以下の表３に示す本発明による５種の化合物の有効性およびＬＤ５０（半致死量）を求めた。

表３：

この実験の結果を以下の表４に示す。

表４：

起原の異なる９種の固形癌細胞株に対しても同様に、上記の表３に示すこれら５種の化合物の有効性およびＬＤ５０（半致死量）を求めた。この実験の結果を以下の表５に示す。

表５：

つまり、上記の表４に示す結果から、試験した分子全てについて悪性血液疾患に対する効果があることがわかる。最も効果が高い誘導体は、分子８２、分子１９６、および分子２３６である。

表５で気がつくことは、試験した分子種が概して固形癌よりも悪性血液疾患に対して効果が高かったことである。しかしながら、構造が非常によく似ている誘導体８２と２３６は、試験した癌の全てに対しても顕著な有効性を示す。

誘導体８６、誘導体１９６、および誘導体２３６の有効性の「ｉｎ ｖｉｖｏ」分析：
無胸腺ヌードマウスでイマチニブ耐性ＣＭＬ Ｋ５６２細胞を増殖させ、腫瘍の増殖１ｋｇあたり１ｍｇの量で３種の化合物（８６、１９６、および２３６）を試験した。各群のマウスの腫瘍の重量を、屠殺した日に測定し、それらの合計量を腫瘍増殖指数とした。この指数は、対照群での増殖に対する割合（２行目）で表される。

この「ｉｎ ｖｉｖｏ」分析の結果を以下の表６に示す。

表６：

上記の表６に示されるとおり、これらの分子種は全て、腫瘍量の増大に対して効果を示した。化合物１９６が最も効果が高くて腫瘍量増大を約６０％阻害し、続いて化合物２３６、そして最後に化合物８６の順で効果があると思われるとも言えるだろう。

また強調しておきたいのだが、処置したマウスは、処置を受けても全身の状態の変化をまったく示さない。マウスが良好な状態であることの指標として、各群の体重平均を表の３行目に示す。

Claims (21)

1. 薬としての、以下の一般式：
   （式中：
   Ｒ_１は、以下：
   ・複数のＯＨ基を有するフラン型の環状五炭糖、複数のＯＨ基は無置換であるか、または随意に１つ以上のモノホスフェート基、ビホスフェート基、トリホスフェート基、アセチル基、イソプロピリデン基、ベンゾイル基、またはｐ−トルオイル基で置換される、
   ・複数のＯＨ基を有するピラン型の六炭糖、複数のＯＨ基は無置換であるか、または随意に１つ以上のモノホスフェート基、ビホスフェート基、トリホスフェート基、またはアセチル基で置換される、
   ・１〜４個の炭素原子を有するアルキルまたは置換アミン基で随意に置換される、ナフチル基、
   ・１〜４個の炭素原子を有するアルキルまたは置換アミン基で随意に置換される、ベンジル基、
   ・フェニル基、ビフェニル基、またはヘテロアリール基；
   から選択され、
   Ｒ_２は、以下：
   ・−ＣＯＮＨ_２、−ＣＯＮＨＭｅ、−ＣＯＮＨＥｔ、−ＣＯＮ（Ｍｅ）_２、または−ＣＯＮ（Ｅｔ）_２型アミド基、
   ・−ＣＯ_２Ｈ、ＣＯ_２Ｍｅ、もしくはＣＯ_２Ｅｔ型の酸もしくはエステル基、または−ＣＮ、−Ｃ（ＮＨ_２）ＮＨ、−Ｃ（ＮＨＭｅ）ＮＨ、もしくは−Ｃ（ＮＨＥｔ）ＮＨ型のシアノもしくはアミジン基、
   ・Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、およびＦから選択されるハロゲンで随意に置換される、フェニル基、
   ・チオフェン基、
   ・炭素原子を３〜１０個有する直鎖のまたは分岐した炭素鎖、または
   ・メトキシナフタレン基；
   から選択され、および
   Ｒ_３は、以下：
   ・ハロゲン基、
   ・フラン基または−ＣＯ−フラン基、
   ・チオフェン基または−ＣＯ−チオフェン基または−Ｃ≡Ｃ−チオフェン基、
   ・トルオイル基、
   ・アセチレン基、
   ・−ＣＯ−（ＣＨ_２）_ｎ−ＣＨ_３基、ただしｎは２〜９である、
   ・ハロゲンで随意に置換される、フェニル基または−Ｃ≡Ｃ−フェニル基、
   ・−Ｃ≡Ｃ−ＣＯ_２Ｍｅ基、−Ｃ≡Ｃ−ＣＯ_２Ｅｔ基、または−Ｃ≡Ｃ−ＣＯＮＨ_２基、
   ・−Ｃ≡Ｃ−（ＣＨ_２）_６ＣＨ_３基、または
   ・−Ｃ≡Ｃ−２−メトキシナフタレン基；
   から選択される）
   を有する化合物、そのラセミ体、鏡像異性体、ジアステレオ異性体、およびそれらの混合物、その互変異性体、および、その薬学的に許容可能な塩。
2. 薬としての、請求項１に記載の化合物であって、式中：
   Ｒ_１は、以下：
   β−Ｄ−リボース
   または
   トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−リボース
   
   または
   β−Ｄ−グルコース
   または
   テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコース
   または
   β−Ｌ−リボース
   または
   トリ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｌ−リボース
   Ｂｚ＝ベンゾイル＝Ｐｈ−ＣＯ
   または
   ２’，３’−イソプロピリデン−β−Ｄ−リボース
   または
   ５’−Ｏ−アセチル−２’，３’−イソプロピリデン−β−Ｄ−リボース
   または
   ２’−デオキシ−αもしくはβ−Ｄ−リボース
   または
   ３’，５’−ジ−Ｏ−トルオイル−２’−デオキシ−αもしくはβ−Ｄ−リボース
   Ｔｏｌ＝４−Ｍｅ−Ｐｈ−ＣＯ
   または
   ４−メチルベンジル
   または
   ２−ナフチル（ナフタレン−２−イルメチル）
   から選択され、
   Ｒ_２は、−ＣＯＮＨ_２、−ＣＯ_２Ｍｅ、−ＣＯ_２Ｅｔ、フェニル、チオフェン、−（ＣＨ_２）_６ＣＨ_３、ｐ−フルオロフェニル、または２−メトキシナフタレンから選択され；および
   Ｒ_３は、Ｉ、Ｃｌ、フラン、ＣＯ−フラン、ＣＯ−チオフェン、アセチレン、ＣＯ−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３、トルオイル、−Ｃ≡Ｃ−ＣＯ_２Ｅｔ、チオフェン、フェニル、−Ｃ≡Ｃ−フェニル、−Ｃ≡Ｃ−チオフェン、−Ｃ≡Ｃ−（ＣＨ_２）_６ＣＨ_３、−Ｃ≡Ｃ−（ｐ−フルオロフェニル）、または−Ｃ≡Ｃ−２−メトキシナフタレンから選択される；
   である化合物、そのラセミ体、鏡像異性体、ジアステレオ異性体、およびそれらの混合物、その互変異性体、およびその薬学的に許容可能な塩。
3. 薬としての、請求項２に記載の化合物であって、式中Ｒ_１は、以下：
   β−Ｄ−リボース
   または
   トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−リボース
   または
   テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコース
   または
   トリ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｌ−リボース
   Ｂｚ＝ベンゾイル＝Ｐｈ−ＣＯ
   または
   ２’，３’−イソプロピリデン−β−Ｄ−リボース
   または
   ５’−Ｏ−アセチル−２’，３’−イソプロピリデン−β−Ｄ−リボース
   または
   ３’，５’−ジ−Ｏ−トルオイル−２’−デオキシ−αまたはβ−Ｄ−リボース
   Ｔｏｌ＝４−Ｍｅ−Ｐｈ−ＣＯ
   または
   ４−メチルベンジル
   または
   ２−ナフチル（ナフタレン−２−イルメチル）
   であり、
   Ｒ_１がβ−Ｄ−リボースならば、以下：
   ・Ｒ_２＝ＣＯＮＨ_２であり、かつＲ_３＝Ｉ、Ｃｌ、ＣＯ−フラン、ＣＯ−チオフェン、トルオイル、またはアセチレンであるか；
   または
   ・Ｒ_２＝ＣＯ_２Ｍｅであり、かつＲ_３＝Ｉ、フラン、またはアセチレンであるか；
   または
   ・Ｒ_２＝フェニルであり、かつＲ_３＝Ｉであり；
   Ｒ_１がトリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−リボース基ならば、以下：
   ・Ｒ_２＝ＣＯ_２Ｅｔであり、かつＲ_３＝Ｃｌ、ＣＯ−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３、ＣＯ−フラン、トルオイル、−Ｃ≡Ｃ−ＣＯ_２Ｅｔ、チオフェン、またはフェニルであるか；
   または
   ・Ｒ_２＝フェニルであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−フェニルであるか；
   または
   ・Ｒ_２＝チオフェンであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−チオフェンであるか；
   または
   ・Ｒ_２＝（ＣＨ_２）_６ＣＨ_３であり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−（ＣＨ_２）_６ＣＨ_３であるか；
   または
   ・Ｒ_２＝ｐ−フルオロフェニルであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−ｐ−フルオロフェニルであるか；
   または
   ・Ｒ_２＝２−メトキシナフタレンであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−２−メトキシナフタレンであり；
   Ｒ_１がテトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコース基ならば、Ｒ_２＝ＣＯ_２Ｅｔであり、かつＲ_３＝Ｉまたは−Ｃ≡Ｃ−ＣＯ_２Ｅｔであり；
   Ｒ_１がトリ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｌ−リボース基ならば、Ｒ_２＝ＣＯ_２Ｅｔであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−ＣＯ_２Ｅｔであり；
   Ｒ_１が２’，３’−イソプロピリデン−β−Ｄ−リボース基ならば、Ｒ_２＝ＣＯ_２Ｅｔであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−ＣＯ_２Ｅｔまたはチオフェンであり；
   Ｒ_１＝５’−Ｏ−アセチル−２’，３’−イソプロピリデン−β−Ｄ−リボースならば、Ｒ_２＝ＣＯ_２Ｅｔであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−ＣＯ_２Ｅｔまたはチオフェンであり；
   Ｒ_１が３’，５’−ジ−Ｏ−トルオイル−２’−デオキシ−β−Ｄ−リボース基ならば、Ｒ_２＝ＣＯ_２Ｅｔであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−ＣＯ_２Ｅｔであり；
   Ｒ_１が４−メチルベンジル基ならば、以下：
   ・Ｒ_２＝ＣＯ_２Ｅｔであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−ＣＯ_２Ｅｔであるか；
   または
   ・Ｒ_２＝フェニルであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−フェニルであり；
   Ｒ_１が２−ナフチル（ナフタレン−２−イルメチル）基ならば、以下：
   ・Ｒ_２＝ＣＯ_２Ｅｔであり、かつＲ_３＝Ｉであるか；
   または
   ・Ｒ_２＝ＣＯ_２Ｅｔであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−ＣＯ_２Ｅｔであるか；
   または
   Ｒ_２＝フェニルであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−フェニルである；
   を有する化合物、そのラセミ体、鏡像異性体、ジアステレオ異性体、およびそれらの混合物、その互変異性体、およびその薬学的に許容可能な塩。
4. 薬としての、請求項３に記載の化合物であって、式中Ｒ_１は、以下：
   β−Ｄ−リボース
   または
   トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−リボース
   または
   ４−メチルベンジル
   または
   ２−ナフチル（ナフタレン−２−イルメチル）
   であり、
   Ｒ_１がβ−Ｄ−リボース基ならば、以下：
   ・Ｒ_２＝ＣＯＮＨ_２であり、かつＲ_３＝Ｃｌ、ＣＯ−フラン、ＣＯ−チオフェン、またはトルオイルであるか；
   または
   ・Ｒ_２＝ＣＯ_２Ｍｅであり、かつＲ_３＝Ｉまたはアセチレンであるか；
   または
   ・Ｒ_２＝フェニルであり、かつＲ_３＝Ｉであり；
   Ｒ_１がトリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−リボース基ならば、以下：
   ・Ｒ_２＝ＣＯ_２Ｅｔであり、かつＲ_３＝ＣＯ−（ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３、ＣＯ−フラン、トルオイル、−Ｃ≡Ｃ−ＣＯ_２Ｅｔ、チオフェン、またはフェニルであるか；
   または
   ・Ｒ_２＝フェニルであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−フェニルであるか；
   または
   ・Ｒ_２＝チオフェンであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−チオフェンであるか；
   または
   ・Ｒ_２＝（ＣＨ_２）_６ＣＨ_３であり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−（ＣＨ_２）_６ＣＨ_３であるか；
   または
   ・Ｒ_２＝ｐ−フルオロフェニルであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−ｐ−フルオロフェニルであるか；
   または
   ・Ｒ_２＝２−メトキシナフタレンであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−２−メトキシナフタレンであり；
   Ｒ_１が４−メチルベンジル基ならば、以下：
   ・Ｒ_２＝ＣＯ_２Ｅｔであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−ＣＯ_２Ｅｔであるか；
   または
   ・Ｒ_２＝フェニルであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−フェニルであり；
   Ｒ_１が２−ナフチル（ナフタレン−２−イルメチル）基ならば、以下：
   ・Ｒ_２＝ＣＯ_２Ｅｔであり、かつＲ_３＝Ｉであるか；
   または
   ・Ｒ_２＝ＣＯ_２Ｅｔであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−ＣＯ_２Ｅｔであるか；
   または
   ・Ｒ_２＝フェニルであり、かつＲ_３＝−Ｃ≡Ｃ−フェニルである；
   を有する化合物、そのラセミ体、鏡像異性体、ジアステレオ異性体、およびそれらの混合物、その互変異性体およびその薬学的に許容可能な塩。
5. 以下：
   ・１’−（４−エトキシカルボニル−５−ヨード−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’，５’−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−リボフラノース；
   ・１’−（４−カルバモイル−５−ヨード−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−β−Ｄ−リボフラノース；
   ・１’−（４−メトキシカルボニル−５−エチニル−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−β−Ｄ−リボフラノース；
   ・１−（ナフチル−２−メチル）−４−エトキシカルボニル−５−ヨード−１，２，３−トリアゾール；
   ・１−（ナフチル−２−メチル）−４−エトキシカルボニル−５−エチル＝プロピオラート−１，２，３−トリアゾール；
   ・１’−（４−エトキシカルボニル−５−エチル＝プロピオラート−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’，５’−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−リボフラノース；
   ・１’−（４−エトキシカルボニル−５−（２−チエニル）−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’，５’−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−リボフラノース；
   ・１’−（４−エトキシカルボニル−５−フェニル−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’，５’−トリ−Ｏ−アセチル−β−リボフラノース；
   ・１−（４−メチルベンジル）−４−エトキシカルボニル−５−エチル＝プロピオラート−１，２，３−トリアゾール；
   ・１’−（４−ヘプチル−５−（ノニン−１−イン−１−イル−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’，５’−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−リボフラノース；
   ・１’−（４−エトキシカルボニル−５−エチル＝プロピオラート−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’，５’−トリ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｌ−リボフラノース；
   ・２’−デオキシ−１’−（４−エトキシカルボニル−５−エチル＝プロピオラート−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−３’，５’−ジ−Ｏ−（ｐ−トルオイル）−α−Ｄ−リボフラノース；
   ・１’−（４−エトキシカルボニル−５−エチル＝プロピオラート−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２，３’，４’，６’−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノース；
   ・１’−（４−エトキシカルボニル−５−エチル＝プロピオラート−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデン−β−Ｄ−リボフラノース；
   ・１’−（４−エトキシカルボニル−５−エチル＝プロピオラート−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデン−５’−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−リボフラノース；
   ・１’−（４−エトキシカルボニル−５−（２−チエニル）−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデン−β−Ｄ−リボフラノース；および
   ・１’−（４−エトキシカルボニル−５−（２−チエニル）−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデン−５’−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−リボフラノース
   から選択される、請求項４に記載の化合物。
6. 以下から選択される、請求項５に記載の化合物：
   ・１’−（４−エトキシカルボニル−５−（２−チエニル）−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’，５’−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−リボフラノース；
   ・１’−（４−エトキシカルボニル−５−エチル＝プロピオラート−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’，５’−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−リボフラノース；
   ・１’−（４−エトキシカルボニル−５−エチル＝プロピオラート−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデン−β−Ｄ−リボフラノース；
   ・１’−（４−エトキシカルボニル−５−エチル＝プロピオラート−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデン−５’−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−リボフラノース；および
   ・１−（４−メチルベンジル）−４−エトキシカルボニル−５−エチル＝プロピオラート−１，２，３−トリアゾール
   から選択される、請求項５に記載の化合物。
7. 以下から選択される、請求項５に記載の化合物：
   ・１’−（４−エトキシカルボニル−５−（２−チエニル）−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’，５’−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−リボフラノース；
   ・１’−（４−エトキシカルボニル−５−フェニル−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’，５’−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−リボフラノース；
   ・１−（４−メチルベンジル）−４−エトキシカルボニル−５−エチル＝プロピオラート−１，２，３−トリアゾール；
   ・１’−（４−エトキシカルボニル−５−エチル＝プロピオラート−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’，４’，６’−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノース；および
   ・１’−（４−エトキシカルボニル−５−（２−チエニル）−［１，２，３］−トリアゾール−１−イル）−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデン−β−Ｄ−リボフラノース。
   から選択される、請求項５に記載の化合物
8. 代謝疾患の治療用である、請求項１から７のいずれか１項に記載の化合物。
9. 癌の治療用である、請求項１から８のいずれか１項に記載の化合物。
10. 固形腫瘍の治療用である、請求項９に記載の化合物。
11. 悪性血液疾患の治療用である、請求項９に記載の化合物。
12. 慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）の治療用である、請求項１から１１のいずれか１項に記載の化合物。
13. チロシンキナーゼ阻害剤耐性癌の治療用である、請求項９に記載の化合物。
14. チロシンキナーゼ阻害剤耐性慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）の治療用である、請求項１２に記載の化合物。
15. 癌の治療における同時投与、分離投与、または順次投与用の組み合わせ製剤としての、請求項１から１４のいずれか１項に記載の化合物および少なくとも１種の第二の活性成分を含有する、製剤。
16. 請求項１から１４のいずれか１項に記載の化合物および薬学的に許容可能なキャリアを含む、薬学的組成物。
17. ｉｎ ｖｉｔｒｏで細胞を請求項１から１４のいずれか１項に記載の化合物と接触させることを含む、ｉｎ ｖｉｔｒｏで細胞増殖を阻害する方法。
18. 請求項１から１４のいずれか１項に記載の化合物の合成法であって、以下の反応スキームに従って、以下の工程：
    ・銅（触媒）の存在下で式Ｒ_１Ｎ_３のアジドと式Ｒ_２−Ｃ≡Ｃ−Ｈのアルキンおよび求電子試薬Ｒ_３−Ｘ（Ｘは、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩから選択される）とをワンポットで反応させる工程；および
    ・１，４，５−三置換トリアゾール生成物を得る工程：
    を含む方法。
19. 請求項１から１４のいずれか１項に記載の化合物の合成法であって、以下の反応スキームに従って、以下の工程を含む方法：
    ・式Ｒ_４−Ｃ≡Ｃ−Ｈのアルキンおよびパラジウム触媒の存在下でトリアゾール基質（Ｘは、ＢｒおよびＩから選択される）を反応させるＳｏｎｏｇａｓｈｉｒａ反応工程；および
    ・１，４，５−三置換１，２，３−トリアゾール誘導体（式中、５位のＲ_３に該当するのは該Ｒ_４−Ｃ≡Ｃ−基であり、Ｒ_４は、Ｈ、ＳｉＭｅ_３、Ｐｈ、ＣＯ_２Ｍｅ、およびＣＯ_２Ｅｔから選択される）を得る工程：
    
20. 請求項１から１４のいずれか１項に記載の化合物の合成法であって、以下の反応スキームに従って、以下の工程：
    ・式Ｒ_３−ＳｎＢｕ_３のスズ誘導体または式Ｒ_３−Ｂ（ＯＨ）_２のボロン酸誘導体と１，４−三置換５−ハロトリアゾール（Ｘは、ＢｒおよびＩから選択される）とのＳｔｉｌｌｅまたはＳｕｚｕｋｉ−Ｍｉｙａｕｒａ型パラジウムカップリング反応工程；および
    ・５位にアリールまたはヘテロアリール型のＲ_３基を含有する１，４，５−三置換１，２，３−トリアゾールを得る工程：
    を含む方法。
21. 請求項１から１４のいずれか１項に記載の化合物の合成法であって、以下の反応スキームに従って、以下の工程：
    ・銅系触媒および酸化剤の存在下で、式Ｒ_１Ｎ_３のアジドと式Ｒ_２−Ｃ≡Ｃ−Ｈのアルキンを反応させる工程；および
    ・１，４，５−三置換１，２，３−トリアゾール（式中、５位のＲ_３に該当するのが該Ｒ_２−Ｃ≡Ｃ−基である）を得る工程：
    を含む方法。