JP2009275017A - バイオサーファクタント含有水中油型乳化化粧品組成物 - Google Patents

Abstract

【課題】バイオサーファクタントを油分とする水中油型乳化化粧料において、本来の皮膚が持つ保湿機能に近い状態を持続的に付与できるようにする。
【解決手段】バイオサーファクタント、好ましくはマンノース骨格の１位の水酸基に糖アルコールがグリコシド結合しているバイオサーファクタント、より好ましくはマンノシルエリスリトールリピッド（ＭＥＬ）と、リン脂質、多価アルコール及び水を含むことを特徴とする水中油型乳化化粧品組成物を提供する。
【選択図】 なし

Description

本発明は、水中油型乳化化粧品組成物に関し、さらに詳細には皮膚の水分バリア能に優れた水中油型乳化化粧品組成物に関する。

水中油型乳化化粧品組成物としては、例えば特許文献１に示すように、流動パラフィン、シリコーンオイルなどを乳化したものがある。しかしながら、これらの油剤はこれら自身が抱水性を持っているわけではなく、皮膚に塗擦したときに、油性の皮膜を形成し水分の蒸発を抑制することにより乾燥を防ぐものである。本来の皮膚の保湿機能は、細胞間脂質が水分を結合することによって機能しており、そのような本来の皮膚の機能に近い保湿性能を持つ水中油型乳化化粧品組成物が必要とされていた。

細胞間脂質成分に近い作用を持つものとしては、アミノ酸系油剤（特許文献２，３）が知られている。しかしながらそれらは確かに従来の油剤に比べて乳化安定性に優れているものの未だ満足のいくものではない。さらに、近年では安全性に対する懸念から消費者の天然物指向が高まっており、合成品ではなく天然物由来の素材がスキンケア分野では求められている。例えば、レシチンやサポニン等を使用した乳化組成物の開発が盛んに行われている。

代表的な糖脂質系バイオサーファクタントの一つにマンノシルエリスリトールリピッド（ＭＥＬ）がある。ＭＥＬは、Ustilago nuda（ウスチラゴ ヌーダ）とShizonella melanogramma（シゾネラ メラノグラマ）から発見された物質である（非特許文献１及び２参照）。その後、イタコン酸生産の変異株であるCandida属酵母（特許文献４及び非特許文献３参照）、Candida antarctica（キャンデダ アンタークチカ）（現在はPseudozyma antarctica（シュードザイマ アンタークチカ））（非特許文献４及び５参照）、Kurtzmanomyces（クルツマノマイセス）属（非特許文献６参照）等の酵母らによっても生産されることが報告されている。現在では、長時間の連続培養・生産を行うことで３００ｇ／Ｌ以上の生産が可能となっている。

ＭＥＬには糖骨格のエリスリトールの光学異性体として、以下の式（１）に示されるような４−Ｏ−β−Ｄ−マンノピラノシル−ｍｅｓｏ−エリスリトール構造と１−Ｏ−β−Ｄ−マンノピラノシル−ｍｅｓｏ−エリスリトール構造（下記式（２））が存在する。

この１−Ｏ−β−Ｄ−マンノピラノシル−ｍｅｓｏ−エリスリトール構造を有するＭＥＬの１種を合成し、これとの比較によって従来のＭＥＬの糖骨格が上記式（２）の構造であることが証明されている（非特許文献７）。ごく最近、従来の４−Ｏ−β−Ｄ−マンノピラノシル−ｍｅｓｏ−エリスリトール構造を有するＭＥＬに対して、その光学異性体である上記式（２）の１−Ｏ−β−Ｄ−マンノピラノシル−ｍｅｓｏ−エリスリトール構造を有するＭＥＬをシュードザイマ・ツクバエンシス（Pseudozyma tsukubaensis）等の微生物を用いて生産することによって、量産できることが判明した（特許文献５）。

従来の４−Ｏ−β−Ｄ−マンノピラノシル−ｍｅｓｏ−エリスリトール構造を有するＭＥＬについては、抗菌性、抗腫瘍性、糖タンパク結合能をはじめ、様々な生理活性を有することが報告されている（非特許文献８）。また、この従来のＭＥＬは極めて特異な自己集合特性を示し、分子構造の僅かな違いが自己集合体の形成に多大な影響を与えるばかりでなく、それを活用したベシクル形成について、希薄溶液（6.3×10^−２ wt%以下）においてのみ報告されている（非特許文献９）。さらに、従来のＭＥＬの両連続スポンジ構造を用いた液晶乳化技術（特許文献６）についても報告している。

特開２００２−３０８７２９号公報 特開２００８−０１９２３０号公報 特開２００６−０８９４２０号公報 特公昭５７−１４５８９６号公報 ＷＯ／２００８／０１８４４８ 特開２００７−１８１７８９号公報 アール．エイチ．ハスキンス（R. H. Haskins），ジェイ．エー．トーン（J. A. Thorn），B. Boothroyd，「カナデアン ジャーナル オブ ケミストリー（Can. J. Microbiol.）」，１巻，ｐ７４９−７５６（１９５５）． ジー．デム（G. Deml），ティ．アンケ（T. Anke），エフ．オーバーウインカー（F. Oberwinkler），ビー．エム．ジアネッティー（B. M. Giannetti），ダブリュ．ステグリッチ（W. Steglich），「フィトケミストリー（Phytochemistry）」，１９巻，ｐ８３−８７（１９８０）． ティ．ナカハラ（T. Nakahara），エイチ．カワサキ（H. Kawasaki），ティ．スギサワ（T. Sugisawa），ワイ．タカモリ（Y. Takamori），ティ．タブチ（T. Tabuchi），「ジャーナル オブ ファーメンテーション テクノロジー（J. Ferment.Technol.）」，（日本），日本発酵工学会，６１巻，ｐ１９−２３（１９８３）． ディ．キタモト（D. Kitamoto），エス．アキバ（S. Akiba），シー．ヒオキ（C. Hioki），ティ．タブチ（T. Tabuchi）「アグリカリチュラル アンド バイオロジカル ケミストリー（Agric. Biol. Chem.）」，（日本），日本農芸化学会，５４巻．ｐ３１−３６（１９９０）． エイチ．エス．キム（H.-S. Kim），ビー．ディ．ユーン（B.-D. Yoon），ディ．エイチ．チョン（D.-H. Choung），エイチ．エム．オー（H.-M. Oh），ティ．カツラギ（T. Katsuragi），ワイ．タニ（Y. Tani）「アプライド マイクロバイオロジー アンド バイオテクノロジー（Appl. Microbiol. Biotechnol.）」，（ドイツ），スプリンガー−バーラグ（Springer-Verlag），５２巻，ｐ７１３−７２１（１９９９）． 角川（K. kakukawa），玉井（M. Tamai），今村（K. Imamura），宮本（K. Miyamoto），三好（S. Miyoshi），森永（Y. Morinaga），鈴木（O. Suzuki），宮川（T. Miyakawa）「バイオサイエンス，バイオテクノロジーアンド バイオケミストリー（Biosci. Biotechnol. Biochem.）」，（日本），日本農芸化学会，６６巻，ｐ１８８−１９１（２００２）． ディ．クリッチ（D. Crich），エム．エー．モーラ（M. A. Mora），アール．クルツ（R. Cruz）「テトラヘドロン（Tetrahedron）」，（オランダ），エルゼビア（Elsevier），５８巻，ｐ３５−４４（２００２）． 北本 大「オレオサイエンス」，（日本），日本油化学会，３巻，ｐ６６３−６７２（２００３）． ティ．イムラ（T. Imura），エヌ．オオタ（N. Ohta），ケー．イノウエ（K. Inoue），エヌ．ヤギ（N. Yagi），エイチ．ネギシ（H. Negishi），エイチ．ヤナギシタ（H. Yanagishita），ディ．キタモト（D. Kitamoto）「ケミストリーア ヨーロピアン ジャーナル（Chem. Eur. J）」，（米国），ワイリー（Wiley），１２巻，ｐ２４３４−２４４０（２００６）．

本発明の目的は、本来の皮膚が持つ保湿機能に近い状態を持続的に付与することができる天然物由来の水中油型乳化化粧品組成物を提供することにある。

上記目的を達成するために、本発明の水中油型乳化化粧品組成物は、バイオサーファクタント、リン脂質、多価アルコール及び水を含む水中油型乳化化粧品組成物であり、具体的は以下の特徴を有する。

１．バイオサーファクタント、リン脂質、多価アルコール及び水を含むことを特徴とする水中油型乳化化粧品組成物。
２．バイオサーファクタントが、マンノース骨格を有することを特徴とする１に記載の水中油型乳化化粧品組成物。
３．マンノース骨格を有するバイオサーファクタントのマンノース骨格の１位の水酸基に糖アルコールがグリコシド結合していることを特徴とする２に記載の水中油型乳化化粧品組成物。
４．マンノース骨格を有するバイオサーファクタントがマンノシルエリスリトールリピッド（ＭＥＬ）、マンノシルマンニトールリピッド（ＭＭＬ）、マンノシルソルビトールリピッド（ＭＳＬ）、マンノシルアラビトールリピッド（ＭＡｒａＬ）又は／及びマンノシルリビトールリピッド（MRL）であることを特徴とする３に記載の水中油型乳化化粧品組成物。
５．ＭＥＬが、マンノシルエリスリトールリピッドＡ（ＭＥＬ−Ａ）、マンノシルエリスリトールリピッドＢ（ＭＥＬ−Ｂ）、マンノシルエリスリトールリピッドＣ（ＭＥＬ−Ｃ）、マンノシルエリスリトールリピッドＤ（ＭＥＬ−Ｄ）、ＭＥＬ−Ａのトリアシル体、ＭＥＬ−Ｂのトリアシル体、ＭＥＬ−Ｃのトリアシル体及びＭＥＬ−Ｄのトリアシル体からなる群より選ばれた１種以上の化合物であることを特徴とする４に記載の水中油型乳化化粧品組成物。
６．バイオサーファクタントが、飽和脂肪酸及び／又は不飽和脂肪酸をエステル骨格を有することを特徴とする１〜５のいずれかに記載の水中油型乳化化粧品組成物。
７．バイオサーファクタントが、液晶を形成していることを特徴とする１〜６のいずれかに記載の水中油型乳化化粧品組成物。
８．バイオサーファクタントが形成する液晶がラメラ構造又は／及びベシクル構造であることを特徴とする１〜７のいずれかに記載の水中油型乳化化粧品組成物。
９．バイオサーファクタントが形成するラメラ構造又は／及びベシクルの内部に、共存する有効成分が包埋されることを特徴とする８に記載の水中油型乳化化粧品組成物。
１０．リン脂質が、ホスファチジルコリン（レシチン）、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルセリン、ホスファチジン酸、及びこれらのリゾ体あるいは水素添加物あるいは水酸化物からなる群から選択される一種以上のリン脂質であることを特徴とする１〜９のいずれかに記載の水中油型乳化化粧品組成物。
１１．多価アルコールが、１，２−ヘキサンジオール、グリセリン、１，３−ブチレングリコール、１，２−ペンタンジオール及び１，２−へプタンジオールからなる群から選択される一種以上の多価アルコールであることを特徴とする１〜１０のいずれかに記載の水中油型乳化化粧品組成物。
１２．バイオサーファクタントの含有量が０．００１〜４０質量％、リン脂質の含有量が０．０１〜５質量％、多価アルコールの含有量が１〜４０質量％の範囲にあることを特徴とする１〜１１のいずれかに記載の水中油型乳化化粧品組成物。

本発明によれば、微生物由来のバイオサーファクタントを安定に含有し、皮膚水分バリア能に優れた水中油型乳化化粧品組成物を提供することができる。

本発明のバイオサーファクタントを含有する水中油型乳化化粧品組成物により、保湿作用、コラーゲン生成促進作用、細胞賦活作用、抗老化作用、育毛作用及び肌荒れ改善作用などの効果を有する、化粧品、医薬部外品 、医療用品、衛生用品、医薬品を提供することできる。

また、バイオサーファクタントは生物由来の天然界面活性剤であるため安全性に優れており、本発明に係る水中油型乳化化粧品組成物は長期にわたる使用に十分に耐え得るという効果を奏する。さらに、バイオサーファクタントは、微生物の培養により製造できるため原料コストが安価であり、大量生産可能である。したがって、本発明係る水中油型乳化化粧品組成物は低価格で提供できるという効果を奏する。バイオサーファクタントは、プレミックス品として使用してもよい。

バイオサーファクタントを含有する水中油型乳化化粧品組成物は、洗浄性と、保湿作用、コラーゲン生成促進作用、細胞賦活作用、抗老化作用、育毛作用及び肌荒れ改善作用などを併せ持つので、洗浄用化粧料の配合成分としても有用である。

「バイオサーファクタント」とは生物によって生み出される界面活性能力や乳化能力を有する物質の総称であり、優れた界面活性や、高い生分解性を示すばかりでなく、様々な生理作用を有していることから合成界面活性剤とは異なる挙動・機能を発現する可能性がある。なお、バイオサーファクタントは微生物の培養により大量に製造可能であり、プレミックス品として使用してもよい。

「プレミックス品」とは機能性の素材の他に、分散剤などを添加したり、溶媒で化粧品製造時に使いやすいように希釈したりしたものである。

特に「バイオサーファクタント」としては、マンノシルエリスリトールリピッド（ＭＥＬ）、ＭＥＬ以外のマンノシルアルジトールリピッド（ＭＡＬ）としては、マンノシルマンニトールリピッド（ＭＭＬ）、マンノシルソルビトールリピッド（ＭＳＬ）、マンノシルアラビトールリピッド（ＭＡｒａＬ）、マンノシルリビトールリピッド（MRL）などが挙げられ、なかでも、ラメラ構造又は／及びベシクルを形成するバイオサーファクタントを利用するのが好ましく、ＭＥＬが特に好ましい。

（ＭＥＬ)
ＭＥＬは、マンノースの４位及び６位のアセチル基の有無から分類すると、ＭＥＬ−Ａ、ＭＥＬ−Ｂ、ＭＥＬ−Ｃ及びＭＥＬ−Ｄの４種類が知られている。式（３）にＭＥＬ−Ａの構造を示す。式（３）中、Ｒ１及びＲ２は炭化水素基を示す。すなわち、ＭＥＬ−Ａは、式（３）中、マンノースの２位、３位に炭素数６〜２０のアルカノイル基を有し、マンノースの４位、６位にアセチル基を有する化合物である。なお、ＭＥＬ−Ｂは式（３）においてマンノースの４位のアセチル基（ＣＨ_３ＣＯ）がＨであり、ＭＥＬ−Ｃは式（３）においてマンノースの６位のアセチル基（ＣＨ_３ＣＯ）がＨであり、ＭＥＬ−Ｄは式（３）においてマンノースの４位及び６位のアセチル基（ＣＨ_３ＣＯ）がいずれもＨである。

〔Ｒ^１、Ｒ^２は同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜１８、好ましくは炭素数２〜１６、より好ましくは炭素数４〜１２の直鎖又は分枝を有するアルキル基、あるいは、炭素数２〜１８、好ましくは炭素数２〜１６、より好ましくは炭素数２〜１４の直鎖又は分枝を有するアルケニル基もしくはアルカジエニル基もしくはアルカトリエニル基を表す。〕

式（３）に対応させれば、ＭＥＬはマンノースの２位、３位に炭素数１〜１９、好ましくは炭素数１〜１７、より好ましくは炭素数１〜１５の飽和又は不飽和の直鎖又は分枝を有するアルカノイル基を有し、マンノースの４位、６位がアセチル基である化合物である（マンノースの４位、６位のアセチル基のどちらか一方、あるいは両方が水酸基になっていてもよい。）。なお、2位と3位のアルカノイル基の合計の炭素数は好ましくは１０〜３８、より好ましくは１４〜３０である。

R¹、R²の好ましい基としては、CH₃(CH₂)₆、CH₃(CH₂)₈、CH₃(CH₂)₁₀などのC₇〜C₁₁のアルキル基が挙げられる。R¹、R²がC₇〜C₁₁のアルキル基である式(３)のＭＥＬ−Ａは、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸またはそのエステル(モノアルキルエステル、モノ−、ジ−、トリ−グリセライド、或いはこれらの飽和またはモノ不飽和脂肪酸を含む油脂等)などの原料を培地に添加することにより得ることができる。同様に、R¹、R²がアルケニル基、アルカジエニル基もしくはアルカトリエニル基である式(３)のＭＥＬ-Aは、原料として二重結合を２個以上有するリノール酸、リノレン酸、アラキドン酸またはそのエステル(モノアルキルエステル、モノ−、ジ−、トリ−グリセライド、或いはこれらの高度不飽和脂肪酸を含む油脂等)などの原料を培地に添加することにより得ることができる。R¹、R²で表される好ましいアルカノイル基は、C₇H₁₄、C₉H₁₈、C₁₁H₂₂などのC₇〜C₁₁のアルケニル基が挙げられる。R¹、R²で表される好ましいアルカジエニル基は、C₇H₁₂、C₉H₁₆、C₁₁H₂₀などのC₇〜C₁₁のアルカジエニル基が挙げられる。R¹、R²で表される好ましいアルカトリエニル基は、C₇H₁₀、C₉H₁₄、C₁₁H₁₈などのC₇〜C₁₁のアルカトリエニル基が挙げられる。

ＭＥＬ以外のＭＡＬの構造は式(４)に示す（式中、マンノースの４位、６位のアセチル基のどちらか一方、あるいは両方が水酸基になっていてもよい。）。エリスリトール以外の糖アルコール（アルジトール）としては、マンニトール、アラビトール、リビトール、ソルビトールが付加している(n=４：マンニトール、ソルビトール、n=２：アラビトール、リビトール)。式（４）に対応させれば、ＭＡＬはマンノースの２位、３位に炭素数２〜２０、好ましくは炭素数４〜１８、より好ましくは炭素数６〜１４の飽和又は不飽和の直鎖又は分枝を有するアルカノイル基を有し、マンノースの４位、６位がアセチル基である化合物である（式中、マンノースの４位、６位のアセチル基のどちらか一方、あるいは両方が水酸基になっていてもよい。）

〔Ｒ^１、Ｒ^２は同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜１８、好ましくは炭素数２〜１６、より好ましくは炭素数４〜１２の直鎖又は分枝を有するアルキル基、あるいは、炭素数２〜１８、好ましくは炭素数２〜１６、より好ましくは炭素数２〜１４の直鎖又は分枝を有するアルケニル基もしくはアルカジエニル基もしくはアルカトリエニル基を表す。〕

（トリアシル体）
本発明に用いられるバイオサーファクタントは、ＭＥＬのトリアシル体及びＭＥＬ以外のＭＡＬ のトリアシル体でもよい。トリアシル体のバイオサーファクタントは、ＭＥＬやＭＥＬ以外のＭＡＬよりもさらに高い疎水性を有するバイオサーファクタントである。例えば、ＭＥＬ生産菌の培養液にも存在するし、大量に得る時は、酵素を用いてＭＥＬを種々の植物油と反応することによって製造することもできる。

ＭＥＬのトリアシル体、すなわちトリアシルマンノシルエリスリトールリピッド（トリアシルＭＥＬと称することがある）は、式（５）のような構造を示す。

式（５）中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３はそれぞれ独立して炭化水素基または酸素原子含有炭化水素基を示し、マンノースの４位及び６位の水酸基のいずれか一方、あるいは両方の水素原子がアセチル基に置換されていてもよい。炭化水素基は飽和結合のみを有していてもよく、不飽和結合を有していてもよい。不飽和結合を有している場合、複数の二重結合を有していてもよい。炭素鎖は直鎖状であってもよく分岐鎖状であってもよい。また、酸素原子含有炭化水素基の場合、含まれる酸素原子の数及び位置は限定されない。

式（５）中、Ｒ１、Ｒ２は炭素数が１〜１８であることが好ましく、脂肪族アシル基（ＲＣＯ−）としてマンノースの２位及び３位の水酸基とエステル結合をしており、残りの水酸基にはアセチル基がエステル結合していてもよい。Ｒ３は炭素数が２〜２０の脂肪族アシル基であることが好ましく、脂肪族アシル基（ＲＣＯ−）としてエリスリトールの一級水酸基とエステル結合をしている。

トリアシルＭＥＬは脂肪酸エステルが付加した構造であり高い疎水性を有することからエモリエント剤として従来のＭＥＬと比べても種々のオイル成分と馴染みやすい点で優れている。

これらのバイオサーファクタントは、単独で使用してもよいが、２種以上のバイオサーファクタントを併用することもできる。

（バイオサーファクタントの製造方法）
バイオサーファクタントの製造方法は特に制限されるものはないが、微生物を用いた発酵方法を任意に選択して行えば良い。例えばＭＥＬ (ＭＥＬ-A, ＭＥＬ-B, ＭＥＬ-C)の培養生産は常法に従って、Pseudozymaantarctica NBRC 10736により生産することができ、微生物としてはPseudozyma antarctica、Pseudozyma sp.、等を用いることができる。いずれの微生物でも容易にＭＥＬ混合物が得られることは周知の事実である。ＭＥＬ混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて精製し、ＭＥＬ−Ａ、ＭＥＬ−Ｂ及びＭＥＬ−Ｃを単離することが出来る。また、ＭＥＬ−Ｂを生産する菌としては、Pseudozyma antarctica 、及びPseudozyma tsukubaensisが知られており、その菌を用いてもよい。ＭＥＬ−Ｃを生産する菌としては、Pseudozyma hubeiensisが知られており、その菌を用いてもよい。ＭＥＬを生産する能力を有する微生物としては特に限定するものではなく、目的に応じて適宜使用することができる。

バイオサーファクタントを生産するときの発酵培地は、酵母エキス、ペプトン等のＮ源、グルコース、フルクトース等のＣ源、及び硝酸ナトリウム、リン酸水素二カリウム、硫酸マグネシウム７水塩等の無機塩類からなる一般的な組成の培地を用いることができ、これにオリーブ油、ダイズ油、ヒマワリ油、トウモロコシ油、キャノーラ油、ココナッツ油等の油脂類、並びに、流動パラフィン、テトラデカン等の炭化水素等の非水溶性基質の単独或いは２種以上を添加したものを使用することができる。

ｐＨや温度等の発酵条件や培養時間等は任意に設定でき、発酵後の培養液をそのまま本発明のバイオサーファクタントとして使用することが可能である。また、発酵後の培養液を必要に応じて濾過、遠心分離、抽出、精製、滅菌等の任意の操作を適宜加えることも可能であり、得られたエキスを希釈、濃縮、乾燥することもできる。

原料とする油脂類としては植物油脂が好ましい。植物油脂は特に限定されず、目的に応じて適宜選定することができる。例えば、大豆油、菜種油、コーン油、ピーナッツ油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、パーム油などが挙げられ、これらの中でも、大豆油、オリーブ油がバイオサーファクタント（特にＭＥＬ）の生産効率（生産量、生産速度、及び収率）を向上させることができる点で特に好ましい。これらは、１種を単独で、または２種以上を併用しても構わない。

無機窒素源としては特に制限はなく、目的に応じて適宜選定することができるが、例えば、硝酸アンモニウム、尿素、硝酸ナトリウム、塩化アンモニウム、硫安等が挙げられる。

バイオサーファクタントの回収、精製方法には特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。例えば、培養液を遠心分離して油分を回収し、酢酸エチル等の有機溶媒で抽出濃縮することにより回収することができる。

抽出溶媒としては、水、アルコール類（例えば、メタノール、無水エタノール、エタノールなどの低級アルコール、またはプロピレングリコール、１，３-ブチレングリコールなどの多価アルコール）、アセトンなどのケトン類、ジエチルエーテル、ジオキサン、アセトニトリル、酢酸エチルなどのエステル類、キシレン、ベンゼン、クロロホルムなどの有機溶媒を、単独であるいは２種類以上の混液を任意に組み合わせて使用することができ、また、各々の溶媒抽出物が組み合わされたものでも使用することができる。

抽出方法は特に制限されるものはないが、通常、常温から常圧下での溶媒の沸点の範囲であればよく、抽出後は濾過またはイオン交換樹脂を用い、吸着・脱色・精製して溶液状、ペースト状、ゲル状、粉末状とすればよい。多くの場合は、そのままの状態で利用できるが、必要であれば、その効力に影響のない範囲でさらに脱臭、脱色などの精製処理を加えてもよい。脱臭・脱色等の精製処理手段としては、活性炭カラムなどを用いればよく、抽出物質により一般的に適用される通常の手段を任意に選択して行えばよい。必要に応じて、シリカゲルカラムを用いて精製することにより、純度の高いバイオサーファクタントを得ることができる。

（トリアシル体製造方法）
バイオサーファクタントのトリアシル体を得る方法を、ＭＥＬのトリアシル体を製造する方法を例として説明するが、本発明に用いられるバイオサーファクタントのトリアシル体はトリアシルＭＥＬに限定されない。

例えば、トリアシルＭＥＬを得るためには、上記のようにして微生物を発酵して製造した培養液からトリアシルＭＥＬ画分を精製して得ることができる。また、大量に得るためには、ＭＥＬを有機溶媒に溶かし、植物油などの脂肪酸誘導体を添加、加水分解酵素の存在下でエステル化反応またはエステル交換反応を行う。

ＭＥＬのエリスリトール部に導入される脂肪酸は長鎖炭化水素の1価のカルボン酸であればよい。また、飽和脂肪酸であっても不飽和脂肪酸であってもよい。不飽和脂肪酸の場合、複数の二重結合を有していてもよい。炭素鎖は直鎖状であってもよく分岐鎖状であってもよい。さらに、脂肪酸の誘導体である脂肪酸誘導体を本発明に使用してもよいし、脂肪酸と脂肪酸誘導体の混合物を本発明に使用してもよい。ＭＥＬのエリスリトール部に導入される脂肪酸または脂肪酸誘導体は、油類、高級脂肪酸、合成エステル由来であることが好ましい。

「油類」としては、植物油、動物油、鉱物油及びその硬化油であればよい。具体的には、アボカド油、オリーブ油、ゴマ油、ツバキ油、月見草油、タートル油、マカデミアンナッツ油、トウモロコシ油、ミンク油、ナタネ油、卵黄油、パーシック油、小麦胚芽油、サザンカ油、ヒマシ油、アマニ油、サフラワー油、綿実油、エノ油、大豆油、落花生油、茶実油、カヤ油、コメヌカ油、キリ油、ホホバ油、カカオ脂、ヤシ油、馬油、パーム油、パーム核油、牛脂、羊脂、豚脂、ラノリン、鯨ロウ、ミツロウ、カルナウバロウ、モクロウ、キャンデリラロウ、スクワラン等の動植物油及びその硬化油。流動パラフィン、ワセリン等の鉱物油、トリパルミチン酸グリセリン等の合成トリグリセリンが挙げられる。好ましくはアボカド油、オリーブ油、ゴマ油、ツバキ油、月見草油、タートル油、マカデミアンナッツ油、トウモロコシ油、ミンク油、ナタネ油、卵黄油、パーシック油、小麦胚芽油、サザンカ油、ヒマシ油、アマニ油、サフラワー油、綿実油、エノ油、大豆油、落花生油、茶実油、カヤ油、コメヌカ油、より好ましくはオリーブ油、大豆油である。

「高級脂肪酸」としては、例えばカプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、ステアリン酸、ベヘン酸、１２−ヒドロキシステアリン酸、イソステアリン酸、ウンデシン酸、トール酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸などが挙げられる。好ましくはラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、ステアリン酸、ウンデシレン酸、より好ましくはオレイン酸、リノール酸、ウンデシレン酸である。

「合成エステル」としては、例えば、カプロン酸メチル、カプリル酸メチル、カプリン酸メチル、ラウリン酸メチル、ミリスチン酸メチル、パルミチン酸メチル、オレイン酸メチル、リノール酸メチル、リノレン酸メチル、ステアリン酸メチル、ウンデシン酸メチル、カプロン酸エチル、カプリル酸エチル、カプリン酸エチル、ラウリン酸エチル、ミリスチン酸エチル、パルミチン酸エチル、オレイン酸エチル、リノール酸エチル、リノレン酸エチル、ステアリン酸エチル、ウンデシン酸エチル、カプロン酸ビニル、カプリル酸ビニル、カプリン酸ビニル、ラウリン酸ビニル、ミリスチン酸ビニル、パルミチン酸ビニル、オレイン酸ビニル、リノール酸ビニル、リノレン酸ビニル、ステアリン酸ビニル、ウンデシン酸ビニル、オクタン酸セチル、ミリスチン酸オクチルドデシル、ミリスチン酸イソプロピル、ミリスチン酸ミリスチル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、ラウリン酸ヘキシル、オレンイ酸デシル、ジメチルオクタン酸、乳酸セチル、乳酸ミリスチル等が挙げられる。好ましくはラウリン酸メチル、ミリスチン酸メチル、パルミチン酸メチル、オレイン酸メチル、リノール酸メチル、リノレン酸メチル、ステアリン酸メチル、ウンデシレン酸メチル、より好ましくはオレイン酸メチル、リノール酸メチル、ウンデシレン酸メチルである。

トリアシルＭＥＬは、上述のようにＭＥＬを有機溶媒に溶解して反応させることにより生産することができる。有機溶媒としては、ＭＥＬを可溶化できるものであれば限定されない。全部を可溶化できなくても一部を可溶化できるものであればよい。また、有機溶媒は複数の有機溶媒の混合物でもよい。具体的には、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、アセトン、プロパノン、ブタノン、ペンタン−２−オン、１，２−エタンジオール、２，３−ブタンジオール、ジオキサン、アセトニトリル、２−メチル−ブタン−２−オール、第３級ブタノール、２−メチルプロパノール、４−ヒドロキシ−２−メチルペンタノン、テトラヒドロフラン、ヘキサン、ＤＭＦ、ＤＭＳＯ、ピリジン、メチルエチルケトンなどを挙げることができる。好ましくはアセトン、テトラヒドロフラン、第３級ブタノール、アセトニトリル、ジオキサン、より好ましくはアセトンである。

加水分解酵素としては、リパーゼ、プロテアーゼ、エステラーゼが挙げられる。これらの中から選択される少なくとも１種を用いることが好ましく、複数の加水分解酵素を用いてもよい。好ましくはリパーゼ、エステラーゼ、より好ましくはリパーゼである。

具体的には、例えば、ＭＥＬ生産微生物の培養液から精製したＭＥＬを有機溶媒（例えば、アセトン）に溶解し、これに市販のリパーゼ（例えば、ノボザイム４３５（ノボザイムズ社製）など）及び植物油脂を添加する。

この製造方法の場合、反応温度は１０〜１００℃、好ましくは２０〜５０℃、より好ましくは２５〜４０℃で、１日〜７日間攪拌すればよい。また、反応液にモレキュラーシーブスを添加してもよい。この製造方法により、材料として添加したＭＥＬがほぼ定量的にトリアシル体となる。

トリアシルＭＥＬの精製は、上述のＭＥＬの精製に準じて行うことができる。

（飽和脂肪酸側鎖有するＭＥＬの製造方法）
飽和側鎖有するＭＥＬの製造は、上述のバイオサーファクタントの製造方法に準じて行うことができる。その際、原料とする油脂類としては、オリーブ油、飽和脂肪酸あるいはそのエステル体、流動パラフィン、テトラデカン等の炭化水素等の非水溶性基質の単独あるいは２種以上を添加することにより行う。
飽和側鎖有するＭＥＬの精製は、上述のＭＥＬの精製に準じて行うことができる。

（ＭＭＬ等のＭＡＬの製造方法）
ＭＭＬ等のエリスリトール以外のアルジトールを有するＭＡＬの製造は、上述のバイオサーファクタントの製造方法に準じて行うことができる。その際、原料としては、マンニトール、アラビトール、リビトール、ソルビトール等のアルジトールの単独あるいは２種以上を添加することにより行う。
ＭＭＬ等のエリスリトール以外のアルジトールを有するＭＡＬの精製は、上述のＭＥＬの精製に準じて行うことができる。

（バイオサーファクタントを含有する水中油型乳化化粧品組成物の製造方法）
水中油型乳化化粧品組成物中のバイオサーファクタントの添加量は、バイオサーファクタントの有する作用を損なわない範囲で添加すれば良く、通常０．０００１〜４０質量％が好ましく、０．００５〜３０質量％がより好ましく、０．０１〜２０質量％がさらに好ましく０．０５〜２０質量％が特に好ましい。ここで、水中油型乳化化粧品組成物に添加する前記バイオサーファクタントの使用形態は任意である。例えば、バイオサーファクタントを培養液からの抽出物のまま、あるいは精製した高純度品、もしくは水に懸濁し、あるいはエタノール等の有機溶媒に溶かした後使用してもよい。油性成分の含有量が０．００１質量％よりも少ないと優れた保湿感が得られ難く、４０質量％よりも多いと優れた乳化安定性が得られ難い。

本発明のバイオサーファクタントを含む水中油型乳化化粧品組成物はリン脂質を含有していることを特徴としている。バイオサーファクタントを溶解した多価アルコールを水へ乳化・可溶化させるために、乳化・可溶化剤としてリン脂質を使用する。本発明の水中油型乳化化粧品組成物に用いられるリン脂質としては、大豆、なたね、ひまわり、サフラワー、綿実、トウモロコシ、アマニ、ごま、オリーブ、米、ヤシ、及びパームなどの種子から得られる植物性レシチン及び卵黄レシチンであり、具体的にはホスファチジルコリン（レシチン）、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルセリン、ホスファチジン酸、及びこれらの水素化リン脂質あるいは水酸化物が例示でき、これらは天然型であっても、水添されたものあるいは水酸化されたものであっても、化学的に合成されたものであっても良く、これらのリン脂質のうちリゾ体を用いるのがより好ましい。これは、これらのリン脂質の中でも水酸化レシチンの乳化・可溶化力が特に優れているからである。また、リゾ体の中でもリゾフォスファチジルコリン（水酸化レシチン（リゾレシチン））が特に好ましい。これは、リゾフォスファチジルコリンが、他のリゾ体に比して安定性が良く、また市販品として入手し易いからである。この様なリゾフォスファチジルコリンとしては、レシノールＬＬ２０、レシノールＳＨ５０（日本サーファクタント工業製）等があり、このものを購入して使用することができ、好ましい。この様な成分の含有量としては、外用剤に対して０．０１〜５質量％が好ましい。

本発明で用いられるレシチンの含有量は、乳化安定性と使用感の点で、０．０１〜５重量％（より好ましくは０．１〜１重量％）とすると良い。

本発明の水中油型乳化化粧品組成物に用いる多価アルコールとしては、例えば、２価のアルコール（例えば、エチレングリコール、プロピレングリコール、トリメチレングリコール、１，２−ブチレングリコール、１，３−ブチレングリコール、テトラメチレングリコール、２，３−ブチレングリコール、ペンタメチレングリコール、２−ブテン−１，４−ジオール、ヘキシレングリコール、オクチレングリコール等）；３価のアルコール（例えば、グリセリン、トリメチロールプロパン等）；４価アルコール（例えば、１，２，６−ヘキサントリオール等のペンタエリスリトール等）；５価アルコール（例えば、キシリトール等）；６価アルコール（例えば、ソルビトール、マンニトール等）；多価アルコール重合体（例えば、ジエチレングリコール、ジプロピレングリコール、トリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、テトラエチレングリコール、ジグリセリン、ポリエチレングリコール、トリグリセリン、テトラグリセリン、ポリグリセリン等）；２価のアルコールアルキルエーテル類（例えば、エチレングリコールモノメチルエーテル、エチレングリコールモノエチルエーテル、エチレングリコールモノブチルエーテル、エチレングリコールモノフェニルエーテル、エチレングリコールモノヘキシルエーテル、エチレングリコールモノ２−メチルヘキシルエーテル、エチレングリコールイソアミルエーテル、エチレングリコールベンジルエーテル、エチレングリコールイソプロピルエーテル、エチレングリコールジメチルエーテル、エチレングリコールジエチルエーテル、エチレングリコールジブチルエーテル等）；２価アルコールアルキルエーテル類（例えば、ジエチレングリコールモノメチルエーテル、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、ジエチレングリコールモノブチルエーテル、ジエチレングリコールジメチルエーテル、ジエチレングリコールジエチルエーテル、ジエチレングリコールブチルエーテル、ジエチレングリコールメチルエチルエーテル、トリエチレングリコールモノメチルエーテル、トリエチレングリコールモノエチルエーテル、プロピレングリコールモノメチルエーテル、プロピレングリコールモノエチルエーテル、プロピレングリコールモノブチルエーテル、プロピレングリコールイソプロピルエーテル、ジプロピレングリコールメチルエーテル、ジプロピレングリコールエチルエーテル、ジプロピレングリコールブチルエーテル等）；２価アルコールエーテルエステル（例えば、エチレングリコールモノメチルエーテルアセテート、エチレングリコールモノエチルエーテルアセテート、エチレングリコールモノブチルエーテルアセテート、エチレングリコールモノフェニルエーテルアセテート、エチレングリコールジアジベート、エチレングリコールジサクシネート、ジエチレングリコールモノエチルエーテルアセテート、ジエチレングリコールモノブチルエーテルアセテート、プロピレングリコールモノメチルエーテルアセテート、プロピレングリコールモノエチルエーテルアセテート、プロピレングリコールモノプロピルエーテルアセテート、プロピレングリコールモノフェニルエーテルアセテート等）；グリセリンモノアルキルエーテル（例えば、キミルアルコール、セラキルアルコール、バチルアルコール等）；糖アルコール（例えば、ソルビトール、マルチトール、マルトトリオース、マンニトール、ショ糖、エリトリトール、グルコース、フルクトース、デンプン分解糖、マルトース、キシリトース、デンプン分解糖還元アルコール等）；グリソリッド；テトラハイドロフルフリルアルコール；ＰＯＥ−テトラハイドロフルフリルアルコール；ＰＯＰ−ブチルエーテル；ＰＯＰ・ＰＯＥ−ブチルエーテル；トリポリオキシプロピレングリセリンエーテル；ＰＯＰ−グリセリンエーテル；ＰＯＰ−グリセリンエーテルリン酸；ＰＯＰ・ＰＯＥ−ペンタンエリスリトールエーテル、ポリグリセリン、１，２−ペンタンジオール、１，２−ヘキサンジオール、１，２−へプタンジオール等などが挙げられる。

特に、１，２−ヘキサンジオール、グリセリン、１，３−ブチレングリコール、１，２−ペンタンジオール及び１，２−へプタンジオールが好ましい。これらの１種または２種以上を使用し、好ましくは、保湿性と防腐性及び水溶性をバランスよく備えた１，３−ブチレングリコールを用いると良い。

本発明で用いられる多価アルコールは、水中油型乳化化粧品組成物の防腐性と安定性を得るために、１〜４０重量％（より好ましくは１０〜３０重量％）含有される。

本発明のバイオサーファクタントを含む水中油型乳化化粧品組成物には、上記化合物の他に本発明の効果を損なわない範囲で、一般的に使用されている化粧品原料を含有しても良い。例えば、使用目的に応じて美白剤、抗老化剤、保湿剤、紫外線吸収剤、抗菌剤、及びそれら以外のさまざまな成分をさらに添加させておくことができる。これらの成分は、バイオサーファクタントが形成するラメラ構造又は／及びベシクルの内部包埋されてもよい。以下に、一例を示す。

（美白剤）
美白剤が、メラニン生成抑制剤及び／またはチロシナーゼ活性阻害剤であってもよい。

例えば、美白剤として、Ｌ−アスコルビン酸及びその誘導体、ハイドロキノン及びその誘導体、ルシノール、エデト酸及びその誘導体、並びに胎盤抽出物、t-AMCHA、アセロラエキス、エイジツエキス、エラグ酸またはその誘導体、火辣エキス、カミツレエキス，カミツレ花エキス・（尿素）、キウイエキス、グルタチオン、トコトリエノール、フェルラ酸、ラズベリーケトン、ルシノール、ウワウルシエキス、ジパルミチン酸ピリドキシン、イオウ、コウジ酸またはその誘導体、グルコサミンまたはその誘導体、ヒドロキシケイヒ酸またはその誘導体、グルタチオン、アルニカエキス、オウゴンエキス、ソウハクヒエキス、サイコエキス、ボウフウエキス、マンネンタケ菌糸体培養物またはその抽出物、シナノキエキス、モモ葉エキス、エイジツエキス、クジンエキス、ジユエキス、トウキエキス、ヨクイニンエキス、カキ葉エキス、ダイオウエキス、ボタンピエキス、ハマメリスエキス、マロニエエキス、オトギリソウエキス、油溶性カンゾウエキス等が例示される。

これらの美白剤は、１種を単独で、若しくは２種以上を組み合わせて用いることができる。

（抗老化剤）
抗老化剤が、抗炎症剤及び／または抗酸化剤であってもよい。

例えば、抗老化剤として抗炎症剤と抗酸化剤が用いられ、抗炎症剤としては、グリチルリチン酸及びその塩、グリチルレチン酸及びその塩、イソプロピルアミノカプロン酸及びその塩、アラントイン、塩化リゾチーム、グアイアズレン、サリチル酸メチル、γ−オリザノール、抗酸化剤としては、αカロチン、βカロチン、γカロチン、リコピン、クリプトキサンチン、ルテイン、ゼアキサンチン、イソゼアキサンチン、ロドキサンチン、カプサンチン、クロセチン等のカロチノイド；１，４−ジアザシクロオクタン、２，５−ジメチルフラン、２−メチルフラン、２，５−ジフェニルフラン、１，３−ジフェニルイソベンゾフラン、αトコフェロール、βトコフェロール、γトコフェロール、ｄトコフェロール、ヒスチジン、トリプトファン、メチオニン、アラニン又はそのアルキルエステル；ジブチルヒドロキシトルエン、ブチルヒドロキシアニソール、アスコルビン酸、タンニン酸、エピカテキン、エピカロカテキン、エピカテキンガレート、エピカロカテキンガレート等のタンニン類、ルチン等のフラボノイド、その他没食子酸プロピル、アスタキサンチン、カロチン、トコフエロール、アスコルビン酸、エデト酸四ナトリウム、エリソルビン酸、酢酸トコフェロール、酢酸レチノール、ジビチルヒドロキシトルエン、ステアリン酸アスコルビル、パルミチン酸アスコルビル、メチルシラノールジオレイルトコフェロール・無水ケイ酸混合物、ニコチン酸ベンジル、感光素４０１号、アスパラギン酸、アデノシン三リン酸2Na 、アミノ酪酸、ウイキョウエキス、オランダカラシエキス、カフェイン、クロレラエキス、サフランエキス、ショウキョウエキス、ダイズエキス、タイソウエキス、葉酸、レチノール、パルミチン酸レチノール、イノシトール、ウコンエキス、オリザノール、カロチン、カロットエキス、コムギ胚牙エキス、センキュウエキス、チンピエキス、トウキエキス、トウキ根エキス、ドダミエキス、トコフエロール、ニコチン酸トコフエロール、ボタンエキス、エルゴカルシフェロール、ジカプリル酸ピリドキシン、バチルアルコール、ステアリン酸グリチルレチニル、グリチルリチン酸、グリチルレチン酸、塩酸ジフェンヒドラミン、塩化リゾチーム、アミノカプロン酸、レイシエキス、ヨクイニン、メリロートエキス、ボタンエキス、トウキエキス、トウキ根エキス、センキュウエキス、ゲンノショコエキス、アラントイン、アルニカエキス、アルニカ花エキス、オウゴンエキス、オウレンエキス、オドリコソウエキス、ガマ穂エキス、カミツレエキス、カラミン、カワラヨモギエキス、甘草エキス、グアイアズレン、クチナシエキス、クマザサエキス、グリチルリチン酸2K、グリチルレチン酸ステアリル、ゲンチアナエキス、紅茶エキス、コンフリーエキス、コンフリー葉エキス、酢酸トコフエロール、サリチル酸メチル、酸化亜鉛、シコンエキス，ムラサキ根エキス、シソエキス、シソ葉エキス、シモツケソウエキス、シャクヤクエキス、スイカズラエキス、セージエキス、セイヨウキズタエキス、セイヨウニワトコエキス、セイヨウノコギリソウエキス、センブリエキス、ソウハクヒエキス、トウキンセンカエキス、ピリドキシンHCl、ビワ葉エキス、フユボダイジュエキス、モモ葉・果実エキス、ヤグルマギクエキス、ユキノシタエキス、ヨモギエキス、レタスエキス、ローマカミツレエキス、ワレモコウエキス及びカカロール、ポリアミン等が例示される。

これらの抗老化剤は、１種を単独で、若しくは２種以上を組み合わせて用いることができる。

（保湿剤）
保湿剤としては、親水性保湿剤及び／または親油性保湿剤であればよく、親水性保湿剤として、アミノ酸，ペプチド，蛋白質，高級アルコール及びこれらの誘導体，親油性保湿剤として、リン脂質 ，糖 脂質 ，ステロイド類を用いてもよい。

保湿剤として、ピリドンカルボン酸ナトリウム、グリコール、グリセリン、グルコース、マルトース、マルチトール、ショ糖、フラクトース、キシリトール、ソルビトール、マルトトリオース、スレイトール、エリスリトール、デンプン分解糖還元アルコール、ソルビトール、多価アルコール類としては、エチレングリコール、１，４−ブチレングリコール、ジグリセリン、トリグリセリン、テトラグリセリン、１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、１，３−プロパンジオール、その他セリン、グリシン、スレオニン、アラニン、コラーゲン、加水分解コラーゲン、ヒドロネクチン、フィブロネクチン、ケラチン、エラスチン、ローヤルゼリー、コンドロイチン硫酸ヘパリン、グリセロリン脂質、グリセロ糖脂質、スフィンゴリン脂質、スフィンゴ糖脂質、リノール酸またはそのエステル類、エイコサペンタエン酸またはそのエステル類、ペクチン、ビフィズス菌発酵物、乳酸発酵物、酵母抽出物、レイシ菌糸体培養物またはその抽出物、小麦胚芽油、アボガド油、米胚芽油、ホホバ油、ダイズリン脂質、γ−オリザノール、ビロウドアオイエキス、ヨクイニンエキス、ジオウエキス、タイソウエキス、カイソウエキス、キダチアロエエキス、ゴボウエキス、マンネンロウエキス、アルニカエキス、小麦フスマ、ピロリドンカルボン酸、トマトエキス、ツバキ油、大豆リン脂質、ヒアルロン酸、トレオニン、グリコール酸アンモニウム、アルギン酸メチルシラノール、ヨクイニン、トウキエキス、トウキ根エキス、ダイズエキス、アスパラガスエキス、DNA−Na、PCA−Na、RNA-Na、アシタバエキス、アスパラギン酸、アマチヤエキス、アラニン、アルギニン、アルギン酸Na、アルテアエキス、アロエベラエキスー、オイスタエキス、オオムギバクガエキス、カキ葉、加水分解ケラチン、加水分解コラーゲン、加水分解コンキオリン、加水分解卵殻膜、加水分解卵白、加水分解シルク、加水分解ダイズタンパク、褐藻エキス、カリンエキス、キイチゴエキス、キシリトール、キトサン、キュウリエキス、キュウリ果実エキス、グアバ菓エキス、クインスシードエキス、グリシン、グリセリン、グルコース、グレープフルーツエキス、グレープフルーツ果実エキス、クレマティスエキス、ゴボウエキス、コメ発酵液、コンドロイチン硫酸Na、魚コラ一ゲノ、サンザシエキス、シイタケエキス、ジオウエキス、グリセリン、シスチン、システイン、スギナエキス、ゼニアオイエキス、セリン、ソルビトール、ダイズタンパク、トマトエキス、乳酸Na、乳酸桿菌、ダイズ醗酵エキス、尿素仰／ノバラエキス・アーモンド浬、コーン油、ハチミツ、ヒアルロン酸Na、フクノエキス、ベタイン、ヘチマエキス、マルチトール、マルトース、マンニトール、ユリエキス、ラクトフェリン、リシン、リンゴエキス、レンゲソウエキス、ローヤルゼリー、ラノリン脂肪酸ポリエチレングリコール1000、ラノリン脂肪酸イソプロピル、ミリスチン酸イソプロピル、ミリスチン酸イソブチル、ヘキシルデカノール、乳酸ミリスチル、ラノリン脂肪酸、トリカプリルグリセリル、オレイルアルコール、オレイン酸オクチルドデシル、オレイン酸デシル、還元ラノリン、オクチルドデカノール、アーモンド油、アボカド油、オリーブ油、オレイン酸、オレンジラフイー油、カカオ脂、カロットエキス、ゴマ油、サザンカ油、サフラワー油、ジヒドロコレステロール、スクワラン、ステアリン酸コレステリル、セラミド2、月見草油、ヒマシ油、ヒマワリ油、セフニド3、ヒマワリ種子油ハイブリッドヒマワリ油、フィトスフィンゴシン、ブドウ種子油、ホホバ油、ホホバ種子油、ミネラルオイル、ミンク油、マカデミアナッツ油、メドウフォーム油、ユーリ油、ユーカリ葉油、ラノリン、リノール酸、ローズヒップ油、ワセリン及びポリグルタミン酸等が例示される。

これらの保湿剤は、１種を単独で、若しくは２種以上を組み合わせて用いることができる。

（紫外線吸収剤）
紫外線吸収剤 としては、安息香酸系紫外線吸収剤 、アントラニル酸系紫外線吸収剤 、サリチル酸系紫外線吸収剤 、ケイ皮酸系紫外線吸収剤 、トリアジン系紫外線吸収剤 、ベンゾフェノン系紫外線吸収剤などを使用しても良い。

例えば紫外線吸収剤 として、紫外線吸収剤が安息香酸アミル、パラアミノ安息香酸オクチル、サリチル酸エチレングリコール、サリチル酸フェニル、サリチル酸オクチル、サリチル酸ベンジル、サリチル酸ブチルフェニル、サリチル酸ホモメンチル、ケイ皮酸ベンジル、パラメトキシケイ皮酸２−エトキシエチル、パラメトキシケイ皮酸オクチル、ジパラメトキシケイ皮酸モノ２−エチルヘキサン酸グリセリル、パラメトキシケイ皮酸イソプロピル、ジイソプロピル・ジイソプロピルケイ皮酸エステル混合物、ウロカニン酸、ウロカニン酸エチル、ヒドロキシメトキシベンゾフェノン、ヒドロキシメトキシベンゾフェノンスルホン酸及びその塩、ジヒドロキシメトキシベンゾフェノン、ジヒドロキシメトキシベンゾフェノンジスルフォン酸ナトリウム、ジヒドロキシベンゾフェノン、テトラヒドロキシベンゾフェノン、４−ｔｅｒｔ−ブチル−４’−メトキシ−ジベンゾイルメタン、２、４、６−トリアニリノ−ｐ−（カルボ−２’−エチルヘキシル−１’−オキシ）−１、３、５−トリアジン、2-(2-ヒドロキシ-5-メチルフェニル）ベンゾトリアゾール、パラジメチルアミノ安息香酸2-エチルヘキシル、パラアミノ安息香酸エチル、トプチルメトキシジペンゾイルメタン、オキシベンゾン-1、グアイアズレンスルホン酸エチル、酸化亜鉛、シノキサート、アントラニル酸系紫外線吸収剤 としては、例えば、ホモメンチル−Ｎ− アセチルアントラニレートなどが例示される。

これらの紫外線吸収剤は、１種を単独で、若しくは２種以上を組み合わせて用いることができる。

（抗菌剤）
抗菌剤が、有機系抗菌剤及び／または無機系抗菌剤であってもよい。

例えば抗菌剤として、オウバク抽出液、ハロカルバン、クロロフェネシン、塩化リゾチーム、塩酸アルキルジアミノエチルグリシン、イソプロピルメチルフェノール、チモール、ヘキサクロロフェン、ベルベリン、チオキソロン、サリチル酸及びそれらの誘導体、安息香酸、安息香酸ナトリウム、パラオキシ安息香酸エステル、パラクロルメタクレゾール、塩化ベンザルコニウム、フェノキシエタノール、イソプロピルメチルフェノール、石炭酸、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、ヘキサクロロフェン、塩化クロルヘキシジン、トリクロロカルバニリド、感光素、ビス（２−ピリジルチオ−１−オキシド）亜鉛、チアントール、ヒノキチオール、トリクロサン、トリクロロヒドロキシジフェニルエーテル、クロルヘキシジングルコン酸塩、フェノキシエタノール、レゾルシン、アズレン、サリチル酸、ジンクピリチオン、モノニトログアヤコールナトリウム、ウイキョウエキス、サンショウエキス、塩化セチルピリジニウム、塩化ベンゼトニウム及びウンデシレン酸誘導体などが例示される。

これらの抗菌剤は、１種を単独で、若しくは２種以上を組み合わせて用いることができる。

本発明にかかる組成物を含有する水中油型乳化化粧品組成物において、界面活性剤を含有していても良い。例えば、界面活性剤としては、アニオン界面活性剤（カルボン酸塩、スルホン酸塩、硫酸エステル塩、リン酸エステル塩）、カチオン界面活性剤（アミン塩、四級アンモニウム塩）、両性界面活性剤（カルボン酸型両性界面活性剤、硫酸エステル型両性界面活性剤、スルホン酸型両性界面活性剤、リン酸エステル型両性界面活性剤）、非イオン界面活性剤（エーテル型非イオン界面活性剤、エーテルエステル型非イオン界面活性剤、エステル型非イオン界面活性剤、ブロックポリマー型非イオン界面活性剤、含窒素型非イオン界面活性剤）、その他の界面活性剤（天然界面活性剤、タンパク質加水分解物の誘導体、高分子界面活性剤、チタン・ケイ素を含む界面活性剤、フッ化炭素系界面活性剤などが挙げられる。

本発明にかかる組成物を含有する水中油型乳化化粧品組成物において、非イオン性の界面活性剤や低級アルコール、あるいはオリーブ油、スクワラン、脂肪酸などの天然油脂に溶解して用いてもよい。

非イオン界面活性剤としては、例えば、ソルビタン脂肪酸エステル類（例えば、ソルビタンモノオレエート、ソルビタンモノイソステアレート、ソルビタンモノラウレート、ソルビタンモノパルミテート、ソルビタンモノステアレート、ソルビタンセスキオレエート、ソルビタントリオレエート、ペンタ−２−エチルヘキシル酸ジグリセロールソルビタン、テトラ−２−エチルヘキシル酸ジグリセロールソルビタン等）；グリセリンポリグリセリン脂肪酸類（例えば、モノ綿実油脂肪酸グリセリン、モノエルカ酸グリセリン、セスキオレイン酸グリセリン、モノステアリン酸グリセリン、α，α’−オレイン酸ピログルタミン酸グリセリン、モノステアリン酸グリセリンリンゴ酸等）；プロピレングリコール脂肪酸エステル類（例えば、モノステアリン酸プロピレングリコール等）；硬化ヒマシ油誘導体；グリセリンアルキルエーテル等が挙げられる。

ＰＯＥ系の親水性非イオン界面活性剤としては、例えば、ＰＯＥ−ソルビタン脂肪酸エステル類（例えば、ＰＯＥ−ソルビタンモノオレエート、ＰＯＥ−ソルビタンモノステアレート、ＰＯＥ−ソルビタンモノオレエート、ＰＯＥ−ソルビタンテトラオレエート等）；ＰＯＥソルビット脂肪酸エステル類（例えば、ＰＯＥ−ソルビットモノラウレート、ＰＯＥ−ソルビットモノオレエート、ＰＯＥ−ソルビットペンタオレエート、ＰＯＥ−ソルビットモノステアレート等）；ＰＯＥ−グリセリン脂肪酸エステル類（例えば、ＰＯＥ−グリセリンモノステアレート、ＰＯＥ−グリセリンモノイソステアレート、ＰＯＥ−グリセリントリイソステアレート等のＰＯＥ−モノオレエート等）；ＰＯＥ−脂肪酸エステル類（例えば、ＰＯＥ−ジステアレート、ＰＯＥ−モノジオレエート、ジステアリン酸エチレングリコール等）；ＰＯＥ−アルキルエーテル類（例えば、ＰＯＥ−ラウリルエーテル、ＰＯＥ−オレイルエーテル、ＰＯＥ−ステアリルエーテル、ＰＯＥ−ベヘニルエーテル、ＰＯＥ−２−オクチルドデシルエーテル、ＰＯＥ−コレスタノールエーテル等）；プルロニック型類（例えば、プルロニック等）；ＰＯＥ・ＰＯＰ−アルキルエーテル類（例えば、ＰＯＥ・ＰＯＰ−セチルエーテル、ＰＯＥ・ＰＯＰ−２−デシルテトラデシルエーテル、ＰＯＥ・ＰＯＰ−モノブチルエーテル、ＰＯＥ・ＰＯＰ−水添ラノリン、ＰＯＥ・ＰＯＰ−グリセリンエーテル等）；テトラＰＯＥ・テトラＰＯＰ−エチレンジアミン縮合物類（例えば、テトロニック等）；ＰＯＥ−ヒマシ油硬化ヒマシ油誘導体（例えば、ＰＯＥ−ヒマシ油、ＰＯＥ−硬化ヒマシ油、ＰＯＥ−硬化ヒマシ油モノイソステアレート、ＰＯＥ−硬化ヒマシ油トリイソステアレート、ＰＯＥ−硬化ヒマシ油モノピログルタミン酸モノイソステアリン酸ジエステル、ＰＯＥ−硬化ヒマシ油マレイン酸等）；ＰＯＥ−ミツロウ・ラノリン誘導体（例えば、ＰＯＥ−ソルビットミツロウ等）；アルカノールアミド（例えば、ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド、ラウリン酸モノエタノールアミド、脂肪酸イソプロパノールアミド等）；ＰＯＥ−プロピレングリコール脂肪酸エステル；ＰＯＥ−アルキルアミン；ＰＯＥ−脂肪酸アミド；ショ糖脂肪酸エステル；アルキルエトキシジメチルアミンオキシド；トリオレイルリン酸等が挙げられる。

低級アルコールとしては、例えば、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、イソブチルアルコール、ｔ−ブチルアルコール等が挙げられる。

油類としては、アボカド油、オリーブ油、ゴマ油、ツバキ油、月見草油、タートル油、マカデミアンナッツ油、トウモロコシ油、ミンク油、ナタネ油、卵黄油、パーシック油、小麦胚芽油、サザンカ油、ヒマシ油、アマニ油、サフラワー油、綿実油、エノ油、大豆油、落花生油、茶実油、カヤ油、コメヌカ油、キリ油、ホホバ油、カカオ脂、ヤシ油、馬油、パーム油、パーム核油、牛脂、羊脂、豚脂、ラノリン、鯨ロウ、ミツロウ、カルナウバロウ、モクロウ、キャンデリラロウ、スクワラン等の動植物油及びその硬化油。流動パラフィン、ワセリン等の鉱物油、トリパルミチン酸グリセリン等の合成トリグリセリンがある。

高級脂肪酸としては、例えばラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、ステアリン酸、ベヘン酸、１２−ヒドロキシステアリン酸、イソステアリン酸、ウンデシン酸、トール酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸などがある。高級アルコールとしては、例えば、ラウリルアルコール、セチルアルコール、ステアリルアルコール、ベヘニルアルコール、ミリスチルアルコール、オレイルアルコール、セトステアリルアルコール、ホホバアルコール、ラノリンアルコール、バチルアルコール、２−デシルテトラテセシノール、コレステロール、フィトステロール、イソステアリルアルコール等がある。合成エステルとしては、例えば、オクタン酸セチル、ミリスチン酸オクチルドデシル、ミリスチン酸イソプロピル、ミリスチン酸ミリスチル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、ラウリン酸ヘキシル、オレンイ酸デシル、ジメチルオクタン酸、乳酸セチル、乳酸ミリスチル等がある。シリコーンとしては、例えば、ジメチルポリシロキサン、メチルフェニルポリシロキサン等の鎖状ポリシロキサン、デカメチルシクロポリシロキサン等の環状ポリシロキサン、シリコーン樹脂等の三次元網目構造のもの等がある。

本発明に係る本発明にかかる組成物を含有する水中油型乳化化粧品組成物は、必要に応じて本発明の効果を損なわない範囲内で、医薬部外品 、医療用品、衛生用品、医薬品に使用される成分や添加剤を併用して配合することができる。

例えば、ロウ類としては、ミツロウ、カルナバロウ、鯨ロウ、ラノリン、液状ラノリン、還元ラノリン、硬質ラノリン、カンデリラロウ、モンタンロウ、セラックロウなどが挙げられる。

例えば、鉱物油としては、流動パラフィン、ワセリン、パラフィン、オゾケライド、セレシン、マイクロクリスタンワックス、ポリエチレン末、スクワレン、スクワラン、プリスタンなどが挙げられる。

例えば、脂肪酸類としては、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ベヘン酸、オレイン酸、１２-ヒドロキシステアリン酸、ウンデシレン酸、トール油、
ラノリン脂肪酸などの天然脂肪酸、イソノナン酸、カプロン酸、２−エチルブタン酸、イソペンタン酸、２−メチルペンタン酸、２−エチルヘキサン酸、イソペンタン酸などの合成脂肪酸が挙げられる。

例えば、アルコール類としては、エタノール、イソピロパノール、ラウリルアルコール、セタノール、ステアリルアルコール、オレイルアルコール、ラノリンアルコール、コレステロール、フィトステロールなどの天然アルコール、２−ヘキシルデカノール、イソステアリルアルコール、２−オクチルドデカノールなどの合成アルコール、酸化エチレン、エチレングリコール、ジエチレングリコール、トリエチレングリコール、エチレングリコールモノエチルエーテル、エチレングリコールモノブチルエーテル、ジエチレングリコールモノメチルエーテル、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、ポリエチレングリコール、酸化プロピレン、プロピレングリコール、ポリプロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、グリセリン、バチルアルコール、ペンタエリトリトール、ソルビトール、マンニトール、ブドウ糖、ショ糖などの多価アルコール類などが挙げられる。

例えば、エステル類としては、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、ラウリン酸ヘキシル、ミリスチン酸ミリスチル、オレイン酸オレイル、オレイン酸デシル、ミリスチン酸オクチルドデシル、ジメチルオクタン酸ヘキシルデシル、乳酸セチル、乳酸ミリスチル、フタル酸ジエチル、フタル酸ジブチル、酢酸ラノリン、モノステアリン酸エチレングリコール、モノステアリン酸プロピレングリコール、ジオレイン酸プロピレングリコールなどが挙げられる。

例えば、金属セッケンとしては、ステアリン酸アルミニウム、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸亜鉛、ステアリン酸カルシウム、パルミチン酸亜鉛、ミリスチン酸マグネシウム、ラウリン酸亜鉛、ウンデシレン酸亜鉛などが挙げられる。

例えば、ガム質及び水溶性高分子化合物としては、アラビアゴム、ベンゾインゴム、ダンマルゴム、グアヤク脂、アイルランド苔、カラヤゴム、トラガントゴム、キャロブゴム、クインシード、寒天、カゼイン、デキストリン、ゼラチン、ペクチン、デンプン、カラギーナン、カルボキシアルキルキチン、キトサン、ヒドロキシアルキルキチン、低分子キトサン、キトサン塩、硫酸化キチン、リン酸化キチン、アルギン酸及びその塩、ヒアルロン酸及びその塩、コンドロイチン硫酸、ヘパリン、エチルセルロース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシエチルセルロース、カルボキシエチルセルロースナトリウム、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ニトロセルロース、結晶セルロース、ポリビニルアルコール、ポリビニルメチルエーテル、ポリビニルピロリドン、ポリビニルメタアクリレート、ポリアクリル酸塩、ポリエチレンオキサイドやポリプロピレンオキサイド等のポリアルキレンオキサイドまたはその架橋重合物、カルボキシビニルポリマー、ポリエチレンイミンなどが挙げられる。

例えば、ビタミン類としては、ビタミンＡ群ではレチノール、レチナール（ビタミンＡ1）、デヒドロレチナール（ビタミンＡ2）、カロチン、リコピン（プロビタミンＡ）、ビタミンＢ群では、チアミン塩酸塩、チアミン硫酸塩（ビタミンＢ1）、リボフラビン（ビタミンＢ2）、ピリドキシン（ビタミンＢ6）、シアノコバラミン（ビタミンＢ12）、葉酸類、ニコチン酸類、パントテン酸類、ビオチン類、コリン、イノシトール類、ビタミンＣ群では、アスコルビン酸及びその誘導体、ビタミンＤ群では、エルゴカルシフェロール（ビタミンＤ2）、コレカルシフェロール（ビタミンＤ3）、ジヒドロタキステロール、ビタミンＥ群では、トコフェロール及びその誘導体、ユビキノン類、ビタミンＫ群では、フィトナジオン（ビタミンＫ1）、メナキノン（ビタミンＫ2）、メナジオン（ビタミンＫ3）、メナジオール（ビタミンＫ4）などが挙げられる。

例えば、アミノ酸としては、バリン、ロイシン、イソロイシン、トレオニン、メチオニン、フェニルアラニン、トリプトファン、リジン、グリシン、アラニン、アスパラギン、グルタミン、セリン、システイン、シスチン、チロシン、プロリン、ヒドロキシプロリン、アスパラギン酸、グルタミン酸、ヒドロキシリジン、アルギニン、オルニチン、ヒスチジンなどや、それらの硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、クエン酸塩、あるいはピロリドンカルボン酸の如きアミノ酸誘導体などが挙げられる。

例えば、動物あるいは植物、生薬の抽出物やエキスとしては、アセンヤク（阿仙薬）、アシタバ、アセロラ、アルテア、アルニカ、アボカド、アマチャ（甘茶）、アロエ、アロエベラ、イラクサ、イチョウ（銀杏葉、銀杏）、ウイキョウ（茴香）、ウコン（鬱金）、ウスバサイシン（細辛）、ウメ（烏梅）、ウラジロガシ、ウワウルシ、ノイバラ（営実）、ヒキオコシ（延命草）、オウギ（黄耆）、コガネバナ（オウゴン）、ヤマザクラ（桜皮）、キハダ（黄柏）、オウレン（黄連）、オタネニンジン（人参）、オトギリソウ（弟切草）、オドリコソウ、オランダガラシ、オレンジ、イトヒメハギ（遠志）、ウツボグサ（夏枯草）、ツルドクダミ（何首烏）、エンジュ（槐花）、ヨモギ（ガイ葉）、ガジュツ（莪朮）、クズ（葛根）、カノコソウ（吉草根）、カミツレ、キカラスウリ（瓜呂根）、カワラヨモギ（茵チン蒿）、カンゾウ（甘草）、フキタンポポ（款冬花、款冬葉）、キイチゴ、キウイ果実、キキョウ（桔梗）、キク（菊花）、キササゲ（梓実）、ミカン属植物果実（枳実）、タチバナ(橘皮)、キュウリ、ウドまたはシシウド（羌活、独活）、アンズ（杏仁）、クコ（地骨皮、枸杞子、枸杞葉）、クララ（苦参）、クスノキ、クマザサ、グレープフルーツ果実、ニッケイ（桂皮）、ケイガイ（ケイガイ）、エビスグサ（決明子）、マルバアサガオまたはアサガオ（ケン牛子）、ベニバナ（紅花）、ゴバイシ（五倍子）、コンフリー、コパイバ、クチナシ（山梔子）、ゲンチアナ、ホオノキ（厚朴）、ヒナタイノコズチ（牛膝）、ゴシュユ（呉茱萸）、ゴボウ、チョウセンゴミシ（五味子）、米、米ぬか、コムギ、ミシマサイコ（柴胡）、サフラン、サボンソウ、サンザシ（山ザ子）、サンショウ（山椒）、サルビア、サンシチニンジン（三七人参）、シイタケ（椎茸）、ジオウ（地黄）、シクンシ（使君子）、ムラサキ(紫根)、シソ（紫蘇葉、紫蘇子）、カキ（柿蒂）、シャクヤク（芍薬）、オオバコ（車前子、車前草）、ショウガ（生姜）、ショウブ（菖蒲）、トウネズミモチ（女貞子）、シモツケソウ、シラカバ、スイカズラ（金銀花、忍冬）、セイヨウキヅタ、セイヨウノコギリソウ、セイヨウニワトコ、アズキ（赤小豆）、ニワトコ（接骨木）、ゼニアオイ、センキュウ（川キュウ）、センブリ（当薬）、クワ（桑白皮、桑葉）、ナツメ（大棗）、ダイズ、タラノキ、チクセツニンジン（竹節人参）、ハナスゲ（知母）、ワレモコウ（地楡）、ドクダミ（十薬）、フユムシナツクサタケ（冬虫夏草）、トウガラシ、ホオズキ（登呂根）、タチジャコウソウ、リョクチャ（緑茶）、コウチャ（紅茶）、チョウジ（丁子）、ウンシュウミカン（陳皮）、ツバキ、ツボクサ、トウガラシ（番椒）、トウキ（当帰）、トウキンセンカ、ダイダイ（橙皮）、ワレモコウ（地楡）、トウモロコシ（南蛮毛）、トチュウ（杜仲、杜仲葉）、トマト、ナンテン（南天実）、ニンニク（大サン）、オオムギ（麦芽）、ハクセン（白蘚皮）、ジャノヒゲ（麦門冬）、パセリ、バタタ、ハッカ（薄荷）、ハマメリス、バラ、ビワ葉（枇杷葉）、マツホド（茯リョウ）、ブドウまたはその葉、ヘチマ、ボダイジュ、ボタン（牡丹皮）、ホップ、マイカイ（マイ瑰花）、松葉、マロニエ、マンネンロウ、ムクロジ、メリッサ、メリロート、ボケ（木瓜）、モヤシ、モモ（桃仁、桃葉）、ヒオウギ（射干）、ビンロウジュ（檳ロウ子）、メハジキ（益母草）、ヤグルマギク、ユキノシタ（虎耳草）、ヤマモモ（楊梅皮）、ヤシャブシ（矢車）、ハトムギ（ヨクイニン）、モウコヨモギ、ヤマヨモギ、ラベンダー、リンゴ果実、マンネンタケ（霊芝）、レモン果実、レンギョウ（連翹）、レンゲソウ、ゲンノショウコ（老鸛草）、ハシリドコロ（ロート根）、鶏トサカ、牛・人の胎盤抽出物、豚・牛の胃、十二指腸、或いは腸の抽出物若しくはその分解物、水溶性コラーゲン、水溶性コラーゲン誘導体、コラーゲン加水分解物、エラスチン、エラスチン加水分解物、水溶性エラスチン誘導体、シルク蛋白、シルク蛋白分解物、牛血球蛋白分解物などが挙げられる。

例えば、微生物培養代謝物としては、酵母エキス、亜鉛含有酵母エキス、ゲルマニウム含有酵母エキス、セレン含有酵母エキス、マグネシウム含有酵母エキス、米醗酵エキス、ユーグレナ抽出物、脱脂粉乳の乳酸発酵物などが挙げられる。

例えば、α−ヒドロキシ酸としては、グリコール酸、クエン酸、リンゴ酸、酒石酸、乳酸などが挙げられる。

例えば、無機顔料としては、無水ケイ酸、ケイ酸マグネシウム、タルク、カオリン、ベントナイト、マイカ、雲母チタン、オキシ塩化ビスマス、酸化ジルコニウム、酸化マグネシウム、酸化亜鉛、酸化チタン、炭酸カルシウム、炭酸マグネシウム、黄酸化鉄、ベンガラ、黒酸化鉄、グンジョウ、酸化クロム、水酸化クロム、カーボンブラック、カラミンなどが挙げられる。

例えば、収斂剤としては、乳酸、酒石酸、コハク酸、クエン酸、アラントイン、塩化亜鉛、硫酸亜鉛、酸化亜鉛、カラミン、ｐ−フェノールスルホン酸亜鉛、硫酸アルミニウムカリウム、レソルシン、塩化第二鉄、タンニン酸などが挙げられる。

例えば、殺菌・消毒薬としては、アクリノール、イオウ、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、塩化メチルロザニリン、クレゾール、グルコン酸カルシウム、グルコン酸クロルヘキシジン、スルファミン、マーキュロクロム、ラクトフェリンまたはその加水分解物などが挙げられる。

例えば、頭髪用剤としては、二硫化セレン、臭化アルキルイソキノリニウム液、ジンクピリチオン、ビフェナミン、チアントール、カスタリチンキ、ショウキョウチンキ、トウガラシチンキ、塩酸キニーネ、強アンモニア水、臭素酸カリウム、臭素酸ナトリウム、チオグリコール酸などが挙げられる。

例えば、香料としては、ジャコウ、シベット、カストリウム、アンバーグリスなどの天然動物性香料、アニス精油、アンゲリカ精油、イラン精油、イリス精油、ウイキョウ精油、オレンジ精油、カナンガ精油、カラウェー精油、カルダモン精油、グアヤクウッド精油、クミン精油、黒文字精油、ケイ皮精油、シンナモン精油、ゲラニウム精油、コパイババルサム精油、コリアンデル精油、シソ精油、シダーウッド精油、シトロネラ精油、ジャスミン精油、ジンジャーグラス精油、杉精油、スペアミント精油、西洋ハッカ精油、大茴香精油、チュベローズ精油、丁字精油、橙花精油、冬緑精油、トルーバルサム精油、バチュリー精油、バラ精油、パルマローザ精油、檜精油、ヒバ精油、白檀精油、プチグレン精油、ベイ精油、ベチバ精油、ベルガモット精油、ペルーバルサム精油、ボアドローズ精油、芳樟精油、マンダリン精油、ユーカリ精油、ライム精油、ラベンダー精油、リナロエ精油、レモングラス精油、レモン精油、ローズマリー精油、和種ハッカ精油などの植物性香料、その他合成香料などが挙げられる。

例えば、色素・着色剤としては、赤キャベツ色素、赤米色素、アカネ色素、アナトー色素、イカスミ色素、ウコン色素、エンジュ色素、オキアミ色素、柿色素、カラメル、金、銀、クチナシ色素、コーン色素、タマネギ色素、タマリンド色素、スピルリナ色素、ソバ全草色素、チェリー色素、海苔色素、ハイビスカス色素、ブドウ果汁色素、マリーゴールド色素、紫イモ色素、紫ヤマイモ色素、ラック色素、ルチンなどが挙げられる。

例えば、甘味料としては、砂糖、甘茶、果糖、アラビノース、ガラクトース、キシロース、マンノース、麦芽糖、蜂蜜、ブドウ糖、ミラクリン、モネリンなどが挙げられる。

例えば、栄養強化剤としては、貝殻焼成カルシウム、シアノコラバミン、酵母、小麦胚芽、大豆胚芽、卵黄粉末、ヘミセルロース、ヘム鉄などが挙げられる。

その他、ホルモン類、金属イオン封鎖剤、ｐＨ調整剤、キレート剤、防腐・防バイ剤、清涼剤、安定化剤、乳化剤、動・植物性蛋白質及びその分解物、動・植物性多糖類及びその分解物、動・植物性糖蛋白質及びその分解物、血流促進剤、消炎剤・抗アレルギー剤、細胞賦活剤、角質溶解剤、創傷治療剤、増泡剤、増粘剤、口腔用剤、消臭・脱臭剤、苦味料、調味料、酵素などが挙げられる。

本発明にかかる組成物を含有する水中油型乳化化粧品組成物は、具体的には、例えば内用・外用薬用製剤、化粧水、乳液、クリーム、軟膏、ローション、オイル、パックなどの基礎化粧料、洗顔料や皮膚洗浄料、シャンプー、リンス、ヘアートリートメント、ヘアクリーム、ポマード、ヘアスプレー、整髪料、パーマ剤、ヘアートニック、染毛料、育毛・養毛料などの頭髪化粧料、ファンデーション、白粉、おしろい、口紅、頬紅、アイシャドウ、アイライナー、マスカラ、眉墨、まつ毛などのメークアップ化粧料、美爪料などの仕上げ用化粧料、香水類、浴用剤、その他、歯磨き類、口中清涼剤・含嗽剤、液臭・防臭防止剤、衛生用品、衛生綿類、ウエットティシュなどが挙げられる。より具体的には、化粧石鹸、シャンプー、洗顔料、リンス、アイクリーム、アイシャドウ、クリーム・乳液、化粧水、香水、おしろい、化粧油、頭髪用化粧品、染毛料、練香水、パウダー、パック、クレンジングクリーム、ひげそり用クリーム、びげそり用ローション、日焼けオイル、日焼け止めオイル、日焼けローション、日焼け止めローション、日焼けクリーム、日焼け止めクリーム、ファンデーション、粉末香水、ほお紅、マスカラ、眉墨、爪クリーム、美爪エナメル、美爪エナメル除去液、洗毛料、浴用化粧品、口紅、リップクリーム、アイライナー、歯磨き、デオドラント剤、オーデコロン、養毛剤及び育毛剤などとして使用することができる。また、本発明の本発明にかかる組成物を含有する水中油型乳化化粧品組成物は、軟膏剤や湿布剤などとして使用することもできる。

本発明の水中油型乳化化粧品組成物の塗布されたときに皮膚表面に膜として存在するだけでなく、角質の隙間に入り込んで保湿機能を持続させることができる。

尚、本発明の水中油型乳化化粧品組成物は、以下に述べる方法で製造できるが、これに限定されるものではない。レシチン、バイオサーファクタントを混合撹拌し、ここに多価アルコール、水を加え、撹拌しながら５０℃前後まで加熱し、ホモミキサーなどにより予備乳化を行う。これを高圧乳化機（ナノマイザー、ホモジナイザーなど）を用いて均質化して、水中油型乳化化粧品組成物を製造する。このようにして製造された水中油型乳化化粧品組成物は、水や水系の化粧料に容易に分散し、油分や水分の分離もなく安定である。

水中油型乳化化粧品組成物は、前述の操作によりベシクルが形成される。ベシクルの粒径は特に制限されないが、たとえば、粒径１０ｎｍ以上１０００ｎｍ以下であればよく、好ましくは粒径５０ｎｍ以上９００ｎｍ以下、より好ましくは粒径１００ｎｍ以上８００ｎｍ以下、さらに好ましくは粒径２００ｎｍ以上８００ｎｍ以下であればよい。ベシクルの粒径は化粧品の使用形態にあわせて、選択してもよい。

本発明のバイオサーファクタントを含有する水中油型乳化化粧品組成物は、保湿効果、コラーゲン生成促進効果、細胞賦活効果、抗老化効果、育毛効果及び肌荒れ改善効果などが必要とされる場合に広く使用することができる。使用量は、所期の湿効果、コラーゲン生成促進効果、細胞賦活効果、抗老化効果、育毛効果及び肌荒れ改善効果などを十分に奏する範囲内で決定する。

本発明にかかる水中油型乳化化粧品組成物は、前記のような効果を期待して用いるものであるから、化粧品組成物や化粧品として利用されることは勿論であるが、そのほかにも、医薬部外品組成物 、医療用品組成物、衛生用品組成物、医薬品組成物、機能性食品組成物や、医薬部外品 、医療用品、衛生用品、医薬品などの形態やプレミックス品などの形態で利用することができる。

なお、発明を実施するための最良の形態の項においてなした具体的な実施態様及び以下の実施例は、あくまでも、本発明の技術内容を明らかにするものであって、そのような具体例にのみ限定して狭義に解釈されるべきものではなく、当業者は、本発明の精神及び添付の特許請求の範囲内で変更して実施することができる。

以下の実施例により、本発明を更に詳細に説明するが、本発明は、これらに何ら限定されるものではない。

実施例１ ＭＥＬ−Ａ及びトリアシルＭＥＬ−Ａの製造
種菌培養はPseudozyma antarcticaNBRC 10736を種培地(20ml/500ml坂口フラスコ)に1 loop植菌して実施した。30℃にて一晩培養した。得られた培養液を種菌とした。種培地組成は4% Glucose、0.3% NaNO3、0.02% MgSO4・H2O、0.02% KH2PO4、0.1% yeast extractであった。培養は上記種菌75mlを生産培地1.5L（５L-jar）に植菌し、30℃、300rpm（攪拌回転）、0.5L/min0（Air）の条件で5L-jarを用いて培養した。生産培地組成は、3% ダイズ油、0.02% MgSO4・H2O、0.02% KH2PO4、0.1% yeast extractであった。培養液250mlを遠心（6500rpm、30min）し、上清を取り除き、沈殿（菌体）を回収した。沈殿に、50mlの酢酸エチルを加え、十分攪拌後、遠心(8500rpm、30min)し、沈殿と上清に分け、上清をエバポーレーターで濃縮した。シリカゲルを用いて、ヘキサン：アセトン＝５：１、ヘキサン：アセトン＝１：２で溶出しＭＥＬ画分（ＭＥＬ-A、ＭＥＬ-B、ＭＥＬ-C）及びトリアシルＭＥＬ−Ａ画分を得た。

実施例２ ＭＥＬ−Ｂ及びトリアシルＭＥＬ−Ｂの製造
0.2mlのP.tsukubaensisフローズンストックを20mlのYM種培地/500ml容坂口フラスコに植菌し、26℃、180rpm、１晩培養させ、種種菌とした。0.2mlの種種菌を再度、20mlのYM種培地/500ml容坂口フラスコに植菌し、26℃、180rpm、１晩培養させ、種菌とした。20mlの種菌を2LのYM培地/５L Jarに植菌し、26℃ 300rpm（１／４VVM、0.5L air /min）で８日間培養した。培養液を7,900rpm 60min 4℃で遠心し、菌体（ＭＥＬ-Bを含む）と上清に分離した。菌体画分にそれぞれ80mlの酢酸エチルを加え、菌体が十分懸濁するように上下に攪拌した後、7,900rpm 30min 4℃で遠心した。得られた上清に等量の飽和食塩水を加え攪拌し酢酸エチル層を得た。酢酸エチル層に無水硫酸Naを適量加え、３０分間精置させた後、エバポレートしＭＥＬ-B粗精製品を得た。得られたＭＥＬ-B粗精製品をシリカゲルカラムを用いて、ヘキサン：アセトンで溶出しＭＥＬ−Ｂ及びトリアシルＭＥＬ−Ｂ画分精製品を得た。

実施例３ ＭＥＬ−Ｃ及びトリアシルＭＥＬ−Ｃの製造
0.2mlのP.hubeiensisフローズンストックを20mlのYM種培地/500ml容坂口フラスコに植菌し、26℃、180rpm、１晩培養させ、種種菌とした。0.2mlの種種菌を再度、20mlのYM種培地/500ml容坂口フラスコに植菌し、26℃、180rpm、１晩培養させ、種菌とした。20mlの種菌を2LのYM培地/５L Jarに植菌し、26℃ 300rpm（１／４VVM、0.5L air /min）で８日間培養した。培養液を7,900rpm 60min 4℃で遠心し、菌体（ＭＥＬ-Cを含む）と上清に分離した。菌体画分にそれぞれ80mlの酢酸エチルを加え、菌体が十分懸濁するように上下に攪拌した後、7,900rpm 30min 4℃で遠心した。得られた上清に等量の飽和食塩水を加え攪拌し酢酸エチル層を得た。酢酸エチル層に無水硫酸Naを適量加え、３０分間精置させた後、エバポレートしＭＥＬ-B粗精製品を得た。得られたＭＥＬ-C粗精製品をシリカゲルカラムを用いて、ヘキサン：アセトンで溶出しＭＥＬ−Ｃ及びトリアシルＭＥＬ−Ｃ画分精製品を得た。

実施例４
実施例１におけるＭＥＬの製造では、生産原料にダイズ油を用いたが、その代わりにオリーブ油を用いて実施例１と同様の方法で培養しＭＥＬ-A、ＭＥＬ-B、ＭＥＬ-Cを単離精製する。この時得られるＭＥＬ画分を、実施例１のＭＥＬと区別するためＭＥＬ-A(OL)、ＭＥＬ-B(OL)、ＭＥＬ-C(OL)と呼ぶ。

実施例５ マンノシルマンニトールリピッド（ＭＭＬ）の製造
シュードザイマ・パラアンタクティカ（Pseudozyma parantarctica）JCM 11752株の培養を行った。すなわち、保存培地（麦芽エキス３ｇ／Ｌ、酵母エキス３ｇ／Ｌ、ペプトン５ｇ／Ｌグルコース１０ｇ／Ｌ、寒天３０ｇ／Ｌ）に保存しておいたシュードザイマ・パラアンタクティカ（Pseudozyma parantarctica）JCM 11752株を、グルコース２０ｇ／Ｌ、酵母エキス１ｇ／Ｌ、硝酸ナトリウム３ｇ／Ｌ、リン酸２水素カリウム ０．３ｇ／Ｌ、及び硫酸マグネシウム０．３ｇ／Ｌの組成の液体培地２ｍＬが入った試験管に１白金耳接種し、３０℃で１日間振とう培養を行った。続いて、得られた菌体培養液を、植物油脂としてオリーブ油５０ｇ／Ｌ、糖アルコールとしてマンニトール１００ｇ／Ｌ、酵母エキス１ｇ／Ｌ、硝酸ナトリウム３ ｇ／Ｌ、リン酸２水素カリウム０．３ｇ／Ｌ、及び硫酸マグネシウム０．３ｇ／Ｌの組成の液体培地３０ｍＬの入った坂口フラスコに接種して、３４℃で７日間培養を行った。上記の培養液を採取し、培養液中のマンノシルアルジトールリピッドを酢酸エチルで抽出し、シリカゲルクロマトで精製後、¹³C NMR と¹H NMRで生産物の構造解析を行った

実施例６ マンノシルアラビトールリピッド（ＭＡｒａＬ）の製造
実施例５の培養を糖アルコールとしてアラビトール１００ｇ／Ｌを含む培地で行う以外は、実施例５と同様に培養しＭＡｒａＬを製造した。

実施例７ マンノシルソルビトールリピッド（ＭＳＬ）の製造
実施例５の培養を糖アルコールとしてソルビトール１００ｇ／Ｌを含む培地で行う以外は、実施例５と同様に培養しＭＳＬを製造した。

実施例８ マンノシルリビトールリピッド（ＭＲＬ）の製造
実施例５の培養を糖アルコールとしてリビトール１００ｇ／Ｌを含む培地で行う以外は、実施例５と同様に培養しＭＲＬを製造した。

実施例９ 配合試験及び性能試験
表１、２、３に示す原料と配合割合でそれぞれ実施例１〜８で得られたバイオサーファクタントを含有する水中油型乳化化粧品組成物を試作した。

また、表４に比較例として、バイオサーファクタント未添加の水中油型乳化化粧品組成物を試作した場合を示す。表１、２，３、４における配合は質量％で表され、「−」は無配合を意味する。

具体的な製造方法は、実施例、比較例とも、まずＡ相の各原料とＢ相の各原料とを別個にそれぞれ混合し、Ａ相を７０℃に加温して溶解混合し、Ｂ相の溶液を加えて５０℃に加温したものをホモミキサーで乳化して水中油型乳化化粧品組成物を作製した。

＜使用感＞
パネル（評価者）５名に使用させ、使用感を以下のように点数をつけ、総和を評価点として求めた。それを基に以下の基準で判定した。
《点数》
２点：塗布時はさっぱりとしており、塗布後はしっとり感がある。
１点：塗布時にべたつきがあり、塗布後はしっとり感がある。
０点：塗布時、塗擦後ともにべたつき感がある。
《判定基準》
◎：総和１０〜９点 …大変良い
○：総和８〜７点 …良い
△：総和６〜５点 …良い
×：総和４点以下 …悪い

＜持続性＞
パネル５名に使用させ、保湿感の持続性を以下のように点数をつけ、総和を評価点として求めた。それを基に以下の基準で判定した。
《点数》
２点：衣服との摩擦、手洗い後も保湿感が維持され、持続性に優れると感じる。
１点：衣服との摩擦、手洗い後も保湿感が残るが、持続性に優れるとは感じない。
０点：衣服との摩擦、手洗いにより保湿感がなくなり、持続性は劣ると感じる。
《判定基準》
◎：総和１０〜９点 …大変良い
○：総和８〜７点 …良い
△：総和６〜５点 …良い
×：総和４点以下 …悪い

＜経時安定性＞
経時安定性経時安定性は、室温、５０℃の２ヶ所で１ヶ月間保存した状態のものについて、目視で判断し、以下の基準で判断した。
◎：外観上、変化がなかったもの
○：外観上多少の変化はあるが、離油、離水、沈殿物などが生じなかったもの
△：外観上の変化が著しいが、離油、離水、沈殿物などが生じなかったもの
×：離油、離水、沈殿物などが生じたもの

＜水中油型乳化化粧料の粒径の測定＞
実施例９に示された方法で調製した水中油型乳化型化粧料の粒径は、化粧料液３ｍｌを直径１ｃｍのガラスセルに入れ、堀場製作所製の動的光散乱粒径分布測定装置ＬＢ−５００を使用し２５℃で測定した。

表１、２、３に示された実施例は表４に示された比較例よりも、いずれも、油性成分としてバイオサーファクタントを配合することで使用感、持続感のテスト結果が大変良い（◎）又は良い（○）となると共に、２つ以上のテスト結果が大変良い（◎）となり、使用感、持続感に優れていることが確認された。また経時安定性を調べたところ、未添加物と同様に安定であることが分かった。これらの実施例の水中油型乳化化粧品組成物は、皮膚に塗布された場合、従来のものよりさっぱりとした使用感でありながら、しっとり感が持続する感じを使用者に与えることが確認された。

本発明によれば、バイオサーファクタントを安定に含有し、皮膚水分バリア能に優れた水中油型乳化化粧品組成物を提供することができ、産業界に大きく寄与することが期待される。

Claims (12)

1. バイオサーファクタント、リン脂質、多価アルコール及び水を含むことを特徴とする水中油型乳化化粧品組成物。
2. バイオサーファクタントが、マンノース骨格を有することを特徴とする請求項１に記載の水中油型乳化化粧品組成物。
3. マンノース骨格を有するバイオサーファクタントのマンノース骨格の１位の水酸基に糖アルコールがグリコシド結合していることを特徴とする請求項２に記載の水中油型乳化化粧品組成物。
4. マンノース骨格を有するバイオサーファクタントがマンノシルエリスリトールリピッド（ＭＥＬ）、マンノシルマンニトールリピッド（ＭＭＬ）、マンノシルソルビトールリピッド（ＭＳＬ）、マンノシルアラビトールリピッド（ＭＡｒａＬ）又は／及びマンノシルリビトールリピッド（MRL）であることを特徴とする請求項３に記載の水中油型乳化化粧品組成物。
5. ＭＥＬが、マンノシルエリスリトールリピッドＡ（ＭＥＬ−Ａ）、マンノシルエリスリトールリピッドＢ（ＭＥＬ−Ｂ）、マンノシルエリスリトールリピッドＣ（ＭＥＬ−Ｃ）、マンノシルエリスリトールリピッドＤ（ＭＥＬ−Ｄ）、ＭＥＬ−Ａのトリアシル体、ＭＥＬ−Ｂのトリアシル体、ＭＥＬ−Ｃのトリアシル体及びＭＥＬ−Ｄのトリアシル体からなる群より選ばれた１種以上の化合物であることを特徴とする請求項４に記載の水中油型乳化化粧品組成物。
6. バイオサーファクタントが、飽和脂肪酸及び／又は不飽和脂肪酸をエステル骨格を有することを特徴とする請求項１〜５のいずれかに記載の水中油型乳化化粧品組成物。
7. バイオサーファクタントが、液晶を形成していることを特徴とする請求項１〜６のいずれかに記載の水中油型乳化化粧品組成物。
8. バイオサーファクタントが形成する液晶がラメラ構造又は／及びベシクル構造であることを特徴とする請求項１〜７のいずれかに記載の水中油型乳化化粧品組成物。
9. バイオサーファクタントが形成するラメラ構造又は／及びベシクルの内部に、共存する有効成分が包埋されることを特徴とする請求項８に記載の水中油型乳化化粧品組成物。
10. リン脂質が、ホスファチジルコリン（レシチン）、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルセリン、ホスファチジン酸、及びこれらのリゾ体あるいは水素添加物あるいは水酸化物からなる群から選択される一種以上のリン脂質であることを特徴とする請求項１〜９のいずれかに記載の水中油型乳化化粧品組成物。
11. 多価アルコールが、１，２−ヘキサンジオール、グリセリン、１，３−ブチレングリコール、１，２−ペンタンジオール及び１，２−へプタンジオールからなる群から選択される一種以上の多価アルコールであることを特徴とする請求項１〜１０のいずれかに記載の水中油型乳化化粧品組成物。
12. バイオサーファクタントの含有量が０．００１〜４０質量％、リン脂質の含有量が０．０１〜５質量％、多価アルコールの含有量が１〜４０質量％の範囲にあることを特徴とする請求項１〜１１のいずれかに記載の水中油型乳化化粧品組成物。