DE2831094C2

DE2831094C2 -

Info

Publication number: DE2831094C2
Application number: DE2831094A
Authority: DE
Inventors: Tibor Dr. Horvath; Endre Dr. Csanyi; Sandor Dr. Eckhardt; Geb. Vida Emilia Budapest Hu Kiraly
Original assignee: Richter Gedeon Vegyeszeti Gyar RT
Current assignee: Richter Gedeon Vegyeszeti Gyar Nyrt
Priority date: 1977-12-29
Filing date: 1978-07-14
Publication date: 1988-12-15
Also published as: ES471778A1; BG30016A3; SE446529B; NO149960B; YU169978A; DK155047B; SE7807804L; FR2415096B1; GB2011382A; IL55138A0; DE2831094A1; DD137224A5; AT360045B; DK155047C; GR64891B; ATA500178A; BE868988A; CH639363A5; FI782238A; JPS6250461B2

Description

Die Erfindung betrifft neue 1,4-Bis-[3-(2-chloräthyl)-N-nitrosoureido]-1,4-didesoxy-polyole, 1,6-bis-[3-(2-chloräthyl)-N-nitrosoureido]-1,6-didesoxy-polyole und 1,3-bis-[3-(2-chloräthyl)-N-nitrosoureido]-1,2,3-tridesoxy-polyole, wobei der Polyolteil aus Threit, Erythrit, Mannit, Dulcit oder Scylloinosit besteht, die insbesondere eine zytostatische Wirkung besitzen.

Ferner betrifft die Erfindung Arzneimittel, die gekennzeichnet sind durch einen Gehalt an einer oder mehreren der erfindungsgemäßen Verbindungen als Wirkstoff bzw. Wirkstoffe, gegebenenfalls mit üblichen Träger- und/oder Hilfsstoffen.

In der BE-PS 8 32 227 werden 1-(2-Chloräthyl)-1-nitrosoharnstoffderivate beschrieben, die ein Polyol enthalten. Die bekannten Verbindungen mit offener Kohlenstoffkette sind nicht am Kettenende, sondern in der 2-Stellung monosubstituierte Polyolderivate, und auch die bekannten cyclischen Polyole sind ebenfalls monosubstituiert.

Demgegenüber handelt es sich bei den erfindungsgemäßen Verbindungen um teils am Kettenende disubstituierte Polyole mit offener Kohlenstoffkette und teils 1,3-disubstituierte cyclische Polyole, wobei zu berücksichtigen ist, daß bezüglich einer günstigen biologischen Wirkung das Trägermolekül, und zwar die Anzahl seiner Kohlenstoffatome, seine offene oder cyclische Konfiguration sowie die Zahl seiner Hydroxylgruppen, und die funktionelle Gruppe, und zwar ihre Stelle am Träger, ihre chemische Beschaffenheit sowie ihre Anzahl, eine simultane Rolle spielen, d. h., daß es nicht gleichgültig ist, an welchem Träger wieviele funktionelle Gruppen gebunden sind. Von den bekannten Verbindungen wird angegeben, daß sie eine Antileukämie- bzw. Antitumorwirkung zeigen.

Aus J. Med. Chem. 6 (1983), 669 und 9 (1966), 892, "Cancer Res.", 25, (1965), 1 876 und 31 (1971), 223 ist es bekannt, daß 1,3-Bis-(2-chloräthyl)-1-nitrosoharnstoff (BCNU) eine zytostatische Wirkung besitzt.

Gegenüber den bekannten Verbindungen zeigen die erfindungsgemäßen Verbindungen günstigere zytostatische Eigenschaften und Toxizitätseigenschaften.

Die biologische Wirkung der erfindungsgemäßen Verbindungen wurde an einigen experimetellen Tiertumoren nachgewiesen. Nachfolgend werden die Ergebnisse unter Verwendung folgender Verbindungen angegeben:

1,4-Bis-[3-(2-chloräthyl)-N-nitrosoureido]-1,4-didesoxy-D,L-threita)
1,6-Bis-[3-(2-chloräthyl)-N-nitrosoureido]-1,6-didesoxy-D-mannita)
1,3-Bis-[3-(2-chloräthyl)-3-nitrosoureido]-1,2,3-tridesoxyscylloinos-ita)
1-[3-(2-chloräthyl)-N-nitrosoureido]-4-[3-(2-chloräthyl)-1-nitrosour-eido1,4-didesoxy-D,L-threit
1,4-Bis-[3-(2-chloräthyl)-3-nitrosoureido]-1,4-didesoxy-D,L-threit

a) jeweils ein Gemisch der isomeren 1-[3-(2-Chloräthyl)-3-nitrosoureido]-4-[3-(2-chloräthyl)-1-nitrosour-eido]-, 1,4-Bis-[3-(2-chloräthyl)-3-nitrosoureido]- und 1,4-Bis-[3-(chloräthyl)-1-nitrosoureido]-Verbindungen

Als Vergleichssubstanz wurde 1,3-Bis-(2-chloräthyl)-1-nitrosoharnstoff (BCMU) verwendet.

I. Untersuchung der akuten Toxizität

Tierart:BDF₁-Mäuse beiderlei Geschlechtes. Behandlung:Mit einem Volumen von 0,2 cm³/10 g Körpergewicht einer Suspension der zu untersuchenden Substanz in einer 2%igen wäßrigen Polyoxyäthylensorbitanmonooleatlösung
(Tween-80-Lösung). Zahl der Tiere:10/Dosis. Zahl der Dosen:6. Beobachtungszeitraum:21 Tage.

Tabelle 1

Aus der vorstehenden Tabelle 1 ist zu ersehen, daß beispielsweise 1,4-Bis-(3-[2-chloräthyl]-N-nitrosoureido)-1,4-didesoxy-D,L-threit (Verbindung des Beispiels 1) gegenüber BCNU bei oraler Anwendung dreimal und bei parenteraler Anwendung zweimal weniger toxisch ist. Dies hat zur Folge, daß, zumal wegen der höheren Wirksamkeit, die errechneten Werte des therapeutischen Index

größer sind diejenigen der Vergleichssubstanz. (Ein therapeutischer Index von mehr als 1 ist die Voraussetzung für eine Humanbehandlung). In den folgenden Tabellen 5 bis 7 sind diese Werte für die angegebenen Tests aufgeführt.

II. Untersuchung der tumorhemmenden Wirkung Übertragung der Tumore (Transplantation)

Bei Leukämie und Ascites-Tumoren wurde die Transplantation mit 10⁵ bis 10⁷ Zellen intraperitoneal durchgeführt, während im Falle der soliden Tumore die Transplantation mit Hilfe eines Trokers subcutan mit Tumor-Partikeln erfolgte.

Behandlung

Den Mäusen wurde ein Volumen von 0,1 cm³/10 g Körpergewicht einer 2%igen Polyoxyäthylensorbitanmonooleatsuspension (Tween-80-Suspension) der zu untersuchenden Substanz verabreicht und die Ratten wurden mit 0,1 cm³/100 g Körpergewicht einer 5%igen polyoxyäthylensorbitanmonooleatsuspension (Tween-80-Suspension) der zu untersuchenden Substanz behandelt.

Gewicht der Tiere am Anfang:

Maus: 20 bis 23 g
Ratte: 140 bis 160 g

Auswertung

Die Auswertung der Tumore der Typen Ascites und Leukämie (ausgenommen die der Rauscher-Leukämie) erfolgte an Hand der Verlängerung der Lebensdauer und der Genesung.

Genesung = 90 Tage tumorfreies Überleben nach der Übertragung.

Bei den Versuchen mit soliden Tumoren (Harding-Passey-Melanomen, S-180 und Yoshida-Sarkomen) wurde das Gewicht der herausgenommenen Tumore gemessen und die Hemmung wurde nach der folgenden Formel errechnet:

Ähnlich wurde auch bei der Rauscher-Leukämie verfahren: In diesem Falle wurde die dem Tumor entsprechende Milz gewogen und die Hemmung wurde nach der obigen Formel errechnet.

Die Ergebnisse sind in den folgenden Tabellen 2 bis 4 zusammengestellt.

Aus den obigen Tabellen 2 bis 4 geht eindeutig hervor, daß die erfindungsgemäßen Verbindungen bessere therapeutische Indices haben als die Vergleichssubstanz, ihr also überlegen sind.

III. Untersuchungen zur Ermittlung der Art der Dauer der Wirkung

Es wurden Mäusen mit Karzinomen vom Typ Ehrlich-Ascites gleich toxische Dosen der Verbindungen 1,4-Bis-[3-(2-chloräthyl)-N-nitrosoureido]-1,4-didesoxy-D,L-threit, 1,6-Bis-[3-(2-chloräthyl)-N-nitrosoureido]-1,6-didesoxy-D-mannit und 1,3-Bis-(2-chloräthyl)-1-nitrosoharnstoff [Vergleichssubstanz] am 6-ten Tag nach der Transplantation 1mal intraperitoneal verabreicht. Die Dauer der Wirkung wurde mittels der Bestimmung der Gesamtzahl der Ascites-Zellen und die Wirkungsweise mittels der Bestimmung des Mitose-Indexes (Zahl der sich teilenden Zellen je 1000 Tumorzellen) und des Thymidin-Indexes (Maß der Einverleibung von ³H-Thymidin in die Desoxyribonucleinsäure [DNS] der Tumorzellen) untersucht. Es wurde festgestellt, daß die Verbindungen 1,4-Bis-[3-(2-chloräthyl)-N-nitrosoureido]-1,4-didesoxy-D,L-threit und 1,6-Bis-[3-(2-chloräthyl)-N-nitrosoureido]-1,6-didesoxy-D-mannit die Zunahme der Gesamtzahl der Zellen etwa 35 Tage hemmten, während die Hemmung durch die Verbindung 1,3-Bis-(2-chloräthyl)-1-nitrosoharnstoff [Vergleichssubstanz] nur 17 Tage lang nachgewiesen werden konnte. Hinsichtlich der Art der Wirkung wurde festgestellt, daß die Verbindungen 1,4-Bis-[3-(2-chloräthyl)-N-nitrosoureido]-1,4-didesoxy-D,L-threit und 1,6-Bis-[3-(2-chloräthyl)-N-nitrosoureido]-1,6-didesoxy-D-mannit den Mitose-Index und den Thymidin-Index innerhalb 24 Stunden um 90% verminderten, während die Verminderung des Mitose-Indexes und Thymidin-Indexe nach der Verabreichung der Verbindung 1,3-Bis-(2-chloräthyl)-1-nitrosoharnstoff [Vergleichssubstanz] nur 45 bis 50% war und ihr Maximum erst am 4ten Tag erreichte.

IV.

Bei der Leukämie L-1210 ist außer der intraperitonealen Wirksamkeit die orale Wirksamkeit von (1,4-Bis-(3-[2-chloräthyl]-N-nitrosoureido)-1,4-didesoxy-D,L-threit)-, im folgenden als Verbindung 1 bezeichnet, wesentlich besser als die des BCNU, wie die p. o. Angaben und therapeutischen Indizes der Tabelle 5 zeigen. In diesem Fall ist es zweckmäßig, anstelle des im therapeutischen Index im allgemeinen vorkommenden ED₅₀-Wertes den DC₅₀-Wert anzugeben (DC₅₀ = dosis curative = heilende Dosis, d. h. die Dosis, die bei 50% der behandelten Tiere eine völlige Heilung hervorruft). Die völlige Heilung bedeutet in diesem Fall ein tumorfreies Überleben von 90 Tagen.

V.

Die i. p.-Angaben zur Wirksamkeit gegenüber der Leukämie P-388 können durch die p. o.-Angaben ergänzt werden (Tabelle 5). Die p. o.-Wirksamkeit der Verbindung ist ähnlich der im Falle der Leukämie L-1210 gefundenen; dies kommt auch in den Werten des therapeutischen Index zum Ausdruck.

Die beiden Leukämien sind in breitem Umfang angewendete resistente Tumoren. Die an solchen Tumoren erzielten Ergebnisse sind sowohl in der Beurteilung der Wirksamkeit einer Verbindung als auch in vergleichenden Untersuchungen sehr wichtig. Deshalb wird es als bedeutend angesehen, daß die Wirksamkeit der erfindungsgemäßen Verbindung an diesen Tumoren die Aktivität des sowieso schon stark wirkenden BCNU noch übertrifft.

VI.

An Tumoren des Typs Lymphon Ascites NK/Ly ist die Wirkung der beiden Verbindungen i. p. etwa gleich (Tabelle 5).

VII.

Beim Karzinom-Ehrlich-Ascites war die Verbindung 1 eindeutig besser als BCNU (Tabelle 5).

Die beiden Ascites-Tumoren zeigten gegenüber der Behandlung mit der erfindungsgemäßen Verbindung eine große Empfindlichkeit. Besonders überraschend war die erreichte, prozentual relativ hohe Heilung durch die orale Verabreichung. Das bedeutet, daß das Molekül in aktiver Form aus dem Magen absorbiert werden und aus dem Kreislauf in die Bauchhöhle gelangen kann.

VIII.

Bei der Rauscher-Leukämie kann auch die orale Wirksamkeit der Verbindung 1 nachgewiesen werden (siehe Tabelle 6). Die Verbindung 1 übte eine besonders stark hemmende Wirkung auf diesen virusinduzierten Tumor aus. Die errechneten Werte des therapeutischen Index

ergaben hier i. p. einen Wert von 20 und p. o. einen Wert von 17, während der therapeutische Index der Vergleichssubstanz BCNU in keinem einzigen Fall über 2 lag. Dadurch wird auch das wesentlich günstigere therapeutische Spektrum der erfindungsgemäßen Verbindung bewiesen.

Die Punkte IV bis VIII zusammengefaßt kann festgestellt werden, daß bei leukämieartigen Tumoren die Verbindung 1 den BCNU in erster Linie hinsichtlich der oralen Wirksamkeit übertrifft. Beim Vergleich der die Sicherheit der Therapie bedeutenden und auch die Toxizität berücksichtigenden TI-Werte ist der Vorteil der erfindungsgemäßen Verbindung sowohl für den Fall der i. p.-Verabreichung als auch für den Fall der p. o.-Verabreichung eindeutig.

IX.

Das Harding-Passey-Melanom ist im allgemeinen eine sehr resistente, langsam wachsende Geschwulst. Am Harding-Passey-Melanom wurde die besondere Wirksamkeit der Verbindung 1 im Falle einer Frühbehandlung nachgewiesen (siehe die beiden in der Tabelle 6 angeführten Angaben). Es ist jedoch überraschend, daß die Verbindung 1 auch an der ausgebildeten Geschwulst in einem Fünftel (20 mg/kg) der maximalen tolerierten Dosis (100 mg/kg) fähig ist, eine bedeutende Hemmung zu entfalten. Im Falle einer einmaligen p. o.-Dosierung von 20 mg/kg kann am 8. Tag eine 72,5%ige Hemmung erreicht werden, im Falle einer dreimaligen p. o.-Dosierung von 20 mg/kg kann am 6., 7. oder 8. Tag eine 88%ige Hemmung erreicht werden.

Am subkutanen S-180-Sarkom sind die erhaltenen Werte für die Hemmung ähnlich (Tabelle 6). Den Vorteil der Verbindung 1 stellen auch hier die günstigeren TI-Werte dar. Der TI-Wert beträgt im Falle der i. p.-Verabreichung 3,1, er ist also rund zweimal besser als der des BCNU; im Falle der p. o.-Verabreichung ist er 5,4 und somit rund 8mal besser als der des BCNU.

XI.

Beim subkutanen Yoshida-Sarkom sind wiederum auch die p. o.-Dosen angegeben (siehe Tabelle 6). Der entsprechende TI-Wert beträgt 11,25 und der des BCNU 3,16. Bei der i. p.-Verabreichung ist die Wirksamkeit der beiden Verbindungen gleich, aber oral verabreicht ist die Verbindung 1 wiederum viel besser als der BCNU. Ausgebildete subkutanes Yoshida-Sarkom: Ohne Behandlung verwenden die an diesem Sarkom erkrankten Ratten im Durchschnitt innerhalb 8 bis 10 Tage. In der letzten Phase des Tumorwachstums bildet sich auch eine schwere Anämie heraus. Eine späte Behandlung am 6. Tag muß einesteils den Tumor heilen, andererseits der Herausbildung der Anämie zuvorkommen. Diese Fähigkeit besaß von den beiden Verbindungen 1 und BCNU nur die Verbindung 1; 5 von 7 Tieren wurden vollständig geheilt, während mit dem BCNU auch in der maximalen tolerierten Dosis nur eine unbedeutende Hemmung erreicht werden konnte (Tabelle 7). Auch dieser Versuch beweist die besonders starke Wirkung der erfindungsgemäßen Verbindung.

Humanes colorectales Carcinom HT-6

In letzter Zeit wurde die Wirksamkeit der Verbindungen 1 und BCNU auch am in immunsupprimierte, thymectomierte Mäuse umgeimpften, humanen colorectalen (Dickdarm-) Carcinom HT-6 untersucht. Die Behandlung der Tiere wurde begonnen, als die Tumoren tastbar wurden. Es wurde festgestellt, daß die durch die Verbindung 1 mit einmaliger p. o.-Behandlung hervorgerufene Regressionszeit bzw. Verdopplungszeitverschiebung insgesamt doppelt so groß wie die des BCNU ist. Die Wirkung der erfindungsgemäßen Verbindung ist also stärker und viel anhaltender als die des BCNU auch an diesen humanen Tumoren.

XIII. Untersuchung der methastasenhemmenden Wirkung am Lewis-Lungen-Carcinom

In letzter Zeit wurden die Untersuchungen zur Prävention und Hemmung von Metastasen am Lewis-Lungen-Carcinom beendet. Es wurde mit der folgenden Methode gearbeitet: Umimpfen mit einer Zellzahl von 10⁵ intramuskulär in das linke Hinterbein von BDF₁-Mäusen.

Die Entwicklung von Lungenmetastasen aus den Primärtumoren beginnt am 5. Tag und nimmt bis zum 12. Tag bereits ein sehr schwerwiegendes Ausmaß an. Der Primärtumor wurde am 12. Tag entfernt und am folgenden Tag erfolgte eine einmalige Behandlung mit der Verbindung 1 bzw. BCNU. Die Verbindung 1 heilte 50% der Tiere, während der BCNU wirkungslos war. Die beiden Verbindungen wurden in äquitoxischen Dosen angewendet. Die erfindungsgemäße Verbindung weist also gegenüber dem BCNU eine bedeutende Mehrwirkung auf.

XIV.

Bei der Untersuchung der Wirkungsweisen stellte sich heraus, daß beide Verbindungen von den Nukleinsäurepolymerasen die DNS-abhängige RNS-Polymerase II hemmen. Bei der äquimolaren Anwendung der beiden Verbindungen in dieser Hinsicht ist der ID₅₀-Wert (Wert der 50%igen Hemmung) der Verbindung Nr. 1 das 5,4fache des ID₅₀-Wertes des BCNU.

Aufgrund der tumorhemmenden Untersuchungen kann also der Vorteil der Verbindung 1 gegenüber dem BCNU wie folgt zusammengefaßt werden:

1. Höhere, insbesondere auch orale, Wirksamkeit bei leukämieartigen Geschwülsten (L-1210, P-388),
2. höhere Wirksamkeit bei ausgebildeten Tumoren (advanced Yoshida, Harding-Passey),
3. stärkere metastasenhemmende Wirkung (Lewis lung carcinoma),
4. anhaltendere Wirkung (HT-6).

Tabelle 5

Tabelle 6

Tabelle 7

XV. Zusammenfassung der Ergebnisse der biologischen Untersuchungen

1.) Die tumorhemmenden Wirkungen der erfindungsgemäßen Verbindungen sind schon als solche bei den Tumorversuchen meistens günstiger, in mehreren Fällen (zum Beispiel bei den Karzinomen vom Typ Ehrlich-Ascites und der Leukämie P-388) sogar um 1 Größenordnung günstiger, als die der Vergleichssubstanz 1,3-Bis-(2-chloräthyl)-1-nitrosoharnstoff.

2.) Das außerordentlich bösartige subkutane Yoshida-Sarkom, das innerhalb 7 bis 8 Tage die Tiere tötete, wurde durch die Verabreichung der erfindungsgemäßen Verbindungen in einer späten einmaligen Behandlung am 6ten Tag zu einem hohen Prozentsatz geheilt, während sich die Vergleichssubstanz 1,3-Bis-(2-chloräthyl)-1-nitrosoharnstoff in diesem System als unwirksam erwies.

3.) Die Wirkung der einmaligen Behandlung mit den erfindungsgemäßen Verbindungen ist dauerhafter als die der mit der Vergleichssubstanz 1,3-Bis-(2-chloräthyl)-1-nitrosoharnstoff.

4.) Die Wirkung der erfindungsgemäßen Verbindungen auf die Kernteilung und auf die Synthese der Desoxyribonucleinsäure ist auch qualitativ von der der Vergleichssubstanz 1,3-Bis-(2-chloräthyl)-1-nitrosoharnstoff verschieden: Sie tritt schneller ein und ist viel stärker als nach der Verabreichung von 1,3-Bis-(2-chloräthyl)-1-nitrosoharnstoff.

5.) Die perorale und parenterale akute Toxizität der erfindungsgemäßen Verbindungen ist günstiger als die der Vergleichssubstanz 1,3-Bis-(2-chloräthyl)-1-nitrosoharnstoff. Auf Grund ihrer niedrigeren Toxizität sind dabei die therapeutischen Indices der erfindungsgemäßen Verbindungen stets höher als die der Vergleichssubstanz.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen können sowohl in peroral verabreichbaren Anwendungsformen als auch im parenteral, besonders als Injektion, und rektal verabreichbaren Anwendungsformen vorliegen. Beispiele für zur peroralen Verabreichung geeignete Anwendungsformen sind Tabletten, Kapseln, Suspensionen und Sirupe. Beispiele für zur parenteralen Verabreichung geeignete Anwendungsformen sind Injektionslösungen in physiologisch verträglichen Lösungsmitteln. Ein Beispiel für die rektal verabreichbaren Anwendungsformen sind Zäpfen. Die Tagesdosis der erfindungsgemäßen Verbindungen für Erwachsene beträgt im allgemeinen 20 bis 200 mg. Die anzuwendende Dosis hängt natürlich davon ab, wie weit die Krankheit, wie die soliden Tumore beziehungsweise die Leukämie, fortgeschritten ist, und welches Körpergewicht, welches Alter und welchen allgemeinen Gesundheitszustand der Patient hat.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen können in der Weise hergestellt werden, daß die entsprechenden Di-(ureido)-polyolderivate, wie 1,4-Bis-[3-(2-chloräthyl)-ureido]-1,4-didesoxy-D,L-threit, 1,4-Bis-[3-(2-chloräthyl)-ureido]-1,4-didesoxyerythrit, 1,6-Bis-[3-(2-chloräthyl)-ureido]-1,6-didesoxy-D-mannit, 1,3-Bis-[3-(2-chloräthyl)-ureido]-1,2,3-tridesoxyscylloinosit und 1,6-Bis-[3-(2-chloräthyl)-ureido]-1,6-didesoxydulcit sowie ihre O-Acetylderivate, die neue Verbindungen sind, in an sich bekannter Weise nitrosiert werden, worauf die gegebenenfalls vorliegende(n) Acetalgruppe(n) mittels einer Säure hydrolisiert wird bzw. werden. Im Falle von O-Acetylderivaten ist es zweckmäßig, ein O-Isopropolyiden- oder O-Benzylidenderivat zu verwenden.

Das Nitrosieren der als Ausgangssubstanz verwendeten Di-(ureido)-polyolderivate kann in an sich bekannter Weise (E. H. White, J. Am. Chem. Soc. 77 [1966], 6008; T. P. Johnston und Mitarbeiter, J. Med. Chem. 9 [1966], 892) mittels eines Alkalinitrites, Distickstofftrioxyd [N₂O₃], Distickstofftetroxyd [N₂O₄] oder Nitrosylchlorid in Gegenwart einer anorganischen oder organischen Säure durchgeführt werden. Es ist vorteilhaft, als Säure eine wasserfreie organische Säure, zum Beispiel Trifluoressigsäure, Ameisensäure oder Essigsäure, zu verwenden. Die rohen Bis-(nitrosoureido)-polyolderivate können durch Umkristallisieren und/oder Chromatographieren gereinigt werden.

Die zur Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen eingesetzten Di-(ureido)-polyolderivate können in an sich bekannter Weise (T. P. Johnston und Mitarbeiter, J. Med. Chem. 6 [1963], 669) so hergestellt worden sein, daß ein entsprechendes Diaminopolyolderivat bzw. ein O-Acetalderivat davon mit einem 2-Halogenäthylisocyanat oder einem 3-(2-Halogenäthyl)-1-methyl-1-nitrosoharnstoff umgesetzt wird oder ein entsprechendes Diisocyanat mit einem 2-Halogenäthylamin oder Äthylenimin (es wird im letzteren Fall auch noch mit einer Halogenwasserstoffsäure behandelt) zur Umsetzung gebracht wird, worauf, soweit ein O-Acetalderivat erhalten wird, gegebenenfalls von diesem die O-Acetalgruppe(n) abgespaltet wird bzw. werden.

Beispiel 1 1,4-Bis-[3-(2-chloräthyl)-N-nitrosoureido]-1,4-didesoxy-D,L-threit

Es werden zu einer gerührten Lösung von 16,55 g (0,05 Mol) 1,4-Bis-[3-(2-chloräthyl)-ureido]-1,4-didesoxy-D,L-threit in 120 ml wasserfreier Trifluoressigsäure bei 0-4°C innerhalb ca. 2 Stunden portionsweise 13,8 g (0,2 Mol) gepulvertes Natriumnitrit gegeben. Der Ansatz wird weitere 3 Stunden bei 0-4°C gerührt, anschließend mit 1200 ml Wasser vermischt und noch eine weitere Stunde gerührt und gekühlt. Die ausgeschiedenen Kristalle werden isoliert, mit Wasser und Äther gewaschen und über Phosphorpentoxyd im Vakuum getrocknet. Ausbeute: 9,2 g; Schmp. ca.: 117-119°C (Zers.). Aus der Mutterlauge scheiden sich über Nacht weitere 4,4 g Kristalle aus.

Dünnschichtchromatographie (DC): Auf Kieselgel 60 HF_{254 +366} (Reanal Budapest) Adsorbens; das Eluieren geschieht mit einem (9,5 : 0,5) Gemisch von Methylenchlorid-Isopropanol: R_f = 0,30; 0,37; 0,43.

Das rohe N-Nitrosoderivat wird auf der Glasfritte mit Methylenchlorid aufgeschlämmt und schichtenweise gewaschen, dann aus Tetrahydrofuran-Methylenchlorid und aus Essigester umkristallisiert. Das isolierte Produkt ist 1-[3-(2-Chloräthyl)-1-nitrosoureido]-4-[3-(2-chloräthyl)-3-nitrosour-eido]-1,4-didesoxy-D,L-threit; Schmp.: 136-136,5°C (Zers.); R_f = 0,37.

Die Mutterlaugen der Waschprozesse und des Umkristallisieren werden vereinigt und bei Raumtemperatur im Vakuum eingedampft. Das Gemisch der Isomeren wird chromatographisch getrennt. So werden 1,4-Bis-[3-(2-chloräthyl)-3-nitrosoureido]-1,4-didesoxy-D,L-threit (Schmp.: 96-97°C [Zers.], R_f = 0,3) und 1,4-Bis-[3-(2-chloräthyl)-1-nitrosoureido]-1,4-didesoxy-D,L-threit (Schmp.: 115-116°C [Zers.] R_f = 0,43) erhalten.

Die Analysen des rohen Isomerengemisches und der getrennten Isomeren entsprechen der Berechnung.

Das als Ausgangsstoff verwendete 1,4-Bis-[3-(2-chloräthyl)-ureido]-1,4-didesoxy-D,L-threit wird wie folgt hergestellt:

Zu einer kräftig gerührten Lösung von 6,0 g (0,05 Mol) 1,4-Diamino-1,4-didesoxy-D,L-threit (H. R. Meyer und Mitarbeiter, Helv. Chim. Acta, 46, 2685 [1963]) in 70 ml Wasser werden bei 0-2°C 11,0 g (0,105 Mol) 2-Chloräthylisocyanat getropft. Nach 3,5 Stunden Rühren und Kühlen werden die ausgeschiedenen Kristalle abgesaugt und mit Wasser, Äthanol und Äther gewaschen.
Ausbeute: 14,9 g; Schmp.: 149-150°C; DC: auf Kieselgel G Adsorbens (Reanal, Budapest) mit einem (15 : 2 : 2)-Gemisch von Essigester-Wasser-Essigsäure : R_f = 0,52.

Beispiel 2 1,4-Bis-[3-(2-chloräthyl)-N-nitrosoureido]-1,4-didesoxy-erythrit Methode A

Zu einer gerührten Lösung von 6,62 g (0,02 Mol) 1,4-Bis-[3-(2-chloräthyl)-ureido]-1,4-didesoxy-erythrit in 99-100 proz. Ameisensäure werden bei 0-4°C innerhalb 2 Stunden 4,14 g (0,06 Mol) Natriumnitrit gegeben. Das Reaktionsgemisch wird nach 3,5 Stunden Rühren und Kühlen mit 200 ml Eiswasser verdünnt und mit Methylenchlorid extrahiert. Die Lösung wird mit einer wäßrigen Suspension von Natriumhydrogencarbonat neutral gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und im Vakuum unter 30°C eingedampft. Der trockene Rückstand (Gemisch der Isomeren, 6,34 g, 81,5%) wird mehrmals mit Ether behandelt, die dekantierten Lösungen werden vereinigt und eingeengt. Beim Kühlen scheiden sich blaßgelbe Kristalle aus, die abgesaugt und mit Ether gewaschen werden. Man trocknet sie über Phosphorpentoxid. Ausbeute: 0,78 g (10%), Schmp. ca. 117-118°C (Zersetzung). Das Produkt (1,4-Bis-[3-(2-chloräthyl)-3-nitrosoureido]-1,4-didesoxy-erythrit) wird aus Essigester oder Ethanol umkristallisiert. Schmp. ca. 122°C (Zers.). Dünnschichtchromatographie (DC) auf Kieselgel HF als Adsorbens mit einem Gemisch von Chloroform und Methanol (9 : 1): R_f = 0,58.

Analyse: C₁₀H₁₈N₆O₆Cl₂ (389,22)

Ber.C 30,86, H 4,63, N 21,60, Cl 18,22; Gef.C 31,20, H 4,82, N 21,38, Cl 18,11.

Das als Ausgangsstoff benutzte 1,4-Bis-[3-(2-chloräthyl)-ureido]-1,4-didesoxy-erythrit wird wie folgt hergestellt:

Zu einer kräftig gerührten Lösung von 36,0 g (0,3 Mol) 1,4-Diamino-1,4-didosoxy-erythrit (H. R. Meyer und Mitarbeiter Helv. Chem. Acta, 46, 2685 [1943]) in 360 ml Wasser werden bei 0-2°C 65,4 g (0,62 Mol) 2-Chloräthylisocyanat getropft. Nach 4 Stunden Rühren und Kühlen werden die ausgeschiedenen Kristalle abgesaugt und mit Wasser, Äthanol und Äther gewaschen. Ausbeute: 96 g (96,6%); Schmp.: 175-176°C. Das Produkt wird in konz. Salzsäure gelöst, durch eine Glasfritte filtriert und die klare Lösung wird mit Eiswasser verdünnt. Man erhält 83,2 g (87,7%) Kristalle; Schmp.: 177-178°C (Zers.).
DC: Auf Kieselgel G Adsorbens mit einem (15 : 2 : 2)-Gemisch von Essigester-Wasser-Essigsäure: R_f = 0,6.

Methode B

Zu einer gerührten Lösung von 6,60 g (0,02 Mol) 1,4-Bis-[3-(2-chloräthyl)-ureido]-1,4-didesoxy-erythrit in 63 ml wasserfreier Triflouressigsäure werden bei 0-2°C innerhalb ca. 1,5 Stunden 8,22 g (0,12 Mol) Natriumnitrit gegeben. Das Reaktionsgemisch wird nach 4 Stunden Rühren mit 350 ml Eiswasser verdünnt und die ausgeschiedene Substanz wird mit Methylenchlorid extrahiert. Man wäscht die Lösung mit einer wäßrigen Suspension von Natriumhydrogencarbonat neutral, trocknet über Natriumsulfat und engt im Vakuum ein. Beim Stehenlassen über Nacht scheiden sich Kristalle aus, die isoliert werden: 1,58 g. Man erhält 1,4-Bis-[3-(2-chlorethyl)-3-nitrosoureido]-1,4-didesoxyerythrit, Schmp. ca.: 116-118°C (Zers.). Die Mutterlauge (Gemisch der Isomeren) wird im Vakuum eingedampft und man löst den trockenen Rückstand bei 0°C in 40 ml Trifluoressigsäure. Nach 3 Stunden Kühlen wird die Lösung wie vorher mit Wasser verdünnt und extrahiert. Die Lösung wird neutral gewaschen, getrocknet und eingeengt. Der ganze Prozeß wird zweimal wiederholt und man erhält so weitere Produktmengen des oben erwähnten Isomeren: 1,2 g bzw. 0,84 g (Ausbeute: 46,5%). Die Fraktionen werden vereinigt und aus Essigester oder Ethanol umkristallisiert, Schmp.: ca. 122°C (Zers.).

Methode C

In eine gerührte und auf 0-4°C gekühlte Lösung von 6,60 g (0,02 Mol) 1,4-Bis-[3-(2-chlorethyl)-ureido]-1,4-didesoxy-erythrit in 50 ml konz. Salzsäure wird 3 Stunden lang N₂O₃ eingeleitet. Anschließend wird das Gemisch mit 150 ml Eiswasser verdünnt und mit Chloroform extrahiert. Man wäscht die Lösung mit einer wäßrigen Natriumhydrogencarbonat-Suspension neutral, trocknet sie über Natriumsulfat und dampft sie im Vakuum ein. Der Rückstand (Gemisch der Isomeren) wird in Essigester gelöst und über Nacht gekühlt. Man isoliert die ausgeschiedenen gelben Kristalle, wäscht sie mit Wasser und Ether. So werden 0,78 g 1,4-Bis-[3-(2-chlorethyl)-3-nitrosoureido]-1,4-didesoxy-erythrit erhalten. Schmp.: 118-119°C (Zers.). Der Eindampfrückstand der Mutterlauge wird bei 0°C in Ameisensäure gelöst und auf die in Methode B beschriebene Weise werden weitere 0,74 g (19,5%) des oben erwähnten Isomeren erhalten. Das Rohprodukt wird aus Essigester umkristallisiert; Schmp.: 122°C (Zers.).

Methode D

Zu einer Lösung von 0,74 g (0,002 Mol) 1,4-Bis-[3-(2-chloräthyl)- ureido]-1,4-didesoxy-2,3-O-isopropyliden-erythrit in 5 ml 99-100 proz. Ameisensäure werden bei 0-4°C während 2 Stunden 0,89 g (0,012 Mol) Natriumnitrit gegeben. Der Ansatz wird nach 3 Stunden Rühren und Kühlen mit 5 ml Wasser verdünnt, eine weitere Stunde gekühlt und dann mit 25 ml Wasser weiter verdünnt. Das Gemisch wird anschließend mit Chloroform extrahiert. Die Chloroform-Lösung wird mit einer Kaliumhydrogencarbonat-Lösung neutralisiert, über Natriumsulfat getrocknet und im Vakuum eingedampft. Man chromatographiert den Eindampfrückstand (Gemisch der Isomeren) über eine mit Kieselgel 40 (Reanal, Budapest) gefüllte Säuel. Zum Eluieren benützt man ein (9 : 1)-Chloroform-Methanol Gemisch.

Es werden 0,29 g (37,2%) 1,4-Bis-[3-(2-chloräthyl)-3-nitrosoureido]- 1,4-didesoxy-erythrit erhalten (R_f = 0,58); Schmp.: 122°C (Zers.).

Das als Ausgangsstoff angewendete 1,4-Bis-[3-(2-chloräthyl)- ureido]-1,4-didesoxy-2,3-O-isopropyliden-erythrit kann wie folgt hergestellt werden:

Schritt a 1,4-Diazido-1,4-didesoxy-erythrit

Zu einer Lösung von 17,2 g (0,2 Mol) 1,2-3,4-Dianhydro-erythrit (P. W. Feit, Chem. Ber. 93, 116 [1960]) in 200 ml 95 proz. wäßrigem Methylcellosolve werden 52,0 g (0,8 Mol) Natriumazid und 10,6 g (0,2 Mol) Ammoniumchlorid gegeben. Der Ansatz wird 1 Stunde bei 90°C, dann bei Siedetemperatur gerührt.

Zum abgekühlten Gemisch werden 200 ml Aceton gegeben und es wird das ausgeschiedene Salzgemisch abgesaugt. Man dampft die Mutterlauge ein, gibt erneut Aceton zu und isoliert wieder das ausgeschiedene Salz. Der Eindampfrückstand der Mutterlauge wird mit 240 ml Benzol eluiert. Nach Dekantieren kristallisiert ein Produkt aus der Lösung, das isoliert wird.
Ausbeute: 24,8 g; Schmp.: 89-90°C. DC: Auf Kieselgel 60 HF_{254 + 366} Adsorbens mit einem 8 : 2 Gemisch aus Essigester-Chloroform, R_f = 0,62.

Schritt b

1,4-Diazido-1,4-didesoxy-2,3-O-isopropyliden-erythrit: Es werden 20,1 g (0,118 Mol) 1,4-Diazido-1,4-didesoxy-erythrit in einem Gemisch von 460 ml wasserfreiem Aceton und 16 ml 100 proz. Schwefelsäure gelöst. Das Reaktionsgemisch wird nach 3 Stunden (20°C) mit 100 g wasserfreiem Natriumcarbonat bis zur Neutralisation gerührt (ca. 5 Stunden), dann abgesaugt und im Vakuum eingedampft. Der Rückstand wird von zurückgebliebenen Aceton befreit, indem man Benzol abdampft. Das zurückbleibende Öl-Kristall-Gemisch wird mit Hexan auf eine Glasfritte gebracht, und so isoliert man 5,0 g unveränderte Ausgangssubstanz. Der Eindampfrückstand der Mutterlauge wird in Chloroform gelöst, die Lösung wird mit Wasser durchgeschüttelt und über Natriumsulfat getrocknet. Nach dem Eindampfen bei 50°C im Vakuum erhält man 16,7 g eines Öles.
DC: Adsorbens: Kieselgel G, das Eluieren geschieht mit einem (8 : 2)-Essigester-Chloroform-Gemisch, R_f = 0,75.

Schritt c 1,4-Diamino-1,4-didesoxy-2,3-O-isopropyliden-erythrit

Die Lösung von 20,7 g (0,091 Mol) 1,4-Diazido-1,4-didesoxy- 2,3-O-isopropyliden-erythrit in 125 ml Äther wird zur Lösung von 22,5 g LiAlH₄ in 450 ml Tetrahydrofuran allmählich zugegeben. Das Reaktionsgemisch wird 4 Stunden zum Sieden erhitzt und anschließend mit einer Lösung von 22,0 g Kalium-natriumtartrat in 45 ml Wasser vermischt. Es wird 30 Min. gerührt, dann filtriert.

Das zurückbleibende Salzgemisch wird mit Tetrahydrofuran gewaschen, und das Filtrat mit Natriumsulfat getrocknet. Man dampft die Lösung unter Stickstoff ein, der Rückstand wird dann durch mehrmaliges Eindampfen von Benzol befreit. Der so erhaltene Rückstand (14,4 g) wird im Vakuum fraktioniert. Man erhält ein leichtflüssiges farbloses Öl. Kp · 0,4 Hgmm 79-81°C; Ausbeute: 11,9 g. Das Dipikrat schmilzt bei 222°C unter Zersetzung. Das Dihydrochlorid schmilzt bei 310°C unter Zersetzung.
DC: Auf Kieselgel G Adsorbens mit einem (3 : 5 : 2 : 0,5)-Gemisch aus Chloroform - Methanol - Ammoniak-Essigsäure: R_f = 0,58.

Schritt d 1,4-Bis-[3-(2-chloräthyl)ureido]-1,4-didesoxy-2,3-O- isopropyliden-erythrit:

Es werden zu einer Lösung von 5,6 g (0,035 Mol) 1,4-Diamino- 1,4-didesoxy-2,3-O-isopropyliden-erythrit in 80 ml Äther 7,75 g (0,070 Mol) 2-Chloräthylisocyanat gegeben. Nach 3 Stunden Rühren wird eine ausgefallene kristalline Substanz (12,15 g) isoliert, die man aus Aceton umkristallisiert; - ein wenig unlösliches Produkt kann durch Filtrieren entfernt werden; Schmp.: 143,5-144,5°C.
DC: Auf Kieselgel G Adsorbens, mit einem 1 : 1-Gemisch aus Aceton-Isopropanol, R_f = 0,81.

Beispiel 3 1,6-Bis-[3-(2-chloräthyl)-N-nitrosoureido]-1,6-didesoxy-D- mannit

Zu einer gerührten Lösung von 3,91 g (0,01 Mol) 1,6-Bis-[3- (2-chloräthyl)-ureido]-1,6-didesoxy-D-mannit in 45 ml 99-100 proz. Ameisensäure werden bei 0-2°C innerhalb ca. 2 Stunden 5,52 g (0,08 Mol) Natriumnitrit gegeben. Das Gemisch wird 4 Stunden gekühlt, dann mit 220 ml Eiswasser verdünnt. Es wird nach einer weiteren Stunde Rühren und Kühlen mit Methylenchlorid (5 × 40 ml) und anschließend mit Essigester (3×80 ml) extrahiert. Die Essigesterauszüge werden vereinigt, mit Wasser und einer Natriumhydrogencarbonatlösung, neutral gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt. Nach mehrstündigem Kühlen werden die ausgeschiedenen Kristalle isoliert: 0,1 g; Schmp.: 103-104°C. Eindampfrückstand des Filtrats wird mit Methylenchlorid und nach dessen Dekantieren mit Äther behandelt. Das Produkt kristallisiert inzwischen durch und wird abgesaugt. In dieser Weise werden weitere 0,56 g Substanz gewonnen. Die vereinigten Fraktionen werden aus Essigester oder Isopropanol umkristallisiert (Ausbeute 0,50 g (11%); Schmp. ca.: 108-109°C (Zers.), Gemisch der Isomeren.
[α] = + 17,8°/c = 1, (Essigester)

Analyse: C₁₂H₂₂N₆O₈Cl₂ (449,23)

Ber.C 32,08, H 4,93, N 18,76, Cl 15,77; Gef.C 32,27, H 4,99, N 18,66 Cl 15,99.

Das Gemisch der Isomeren wird chromatographisch getrennt und auf diese Weise erhält man 1,6-Bis-[3-(2-chlorethyl-3- nitrosoureido]-1,6-didesoxy-D-mannit mit einem Schmelzpunkt von 127-128°C (Zers.), [α] = 14,03° (C = 1, DMSO). Die Analysen des getrennten Isomeren entsprechen der Theorie.
DC: Auf Kieselgel G als Adsorbens mit einem Gemisch von Chloroform und Methanol (9 : 1): R_f = 0,22.

Das als Ausgangsstoff eingesetzte 1,6-Bis-[3-(2-chloräthyl)- ureido]-1,6-didesoxy-D-mannit wird auf die folgende Weise hergestellt:

Bei intensivem Rühren wird zu einer Lösung von 6,7 g (0,037 Mol) 1,6-Diamino-1,6-didesoxy-D-mannit (W. N. Haworth und Mitarbeiter, J. Chem. Soc. 155 [1944]) in 74 ml Wasser bei 4°C 8,28 g (0,078 Mol) 2-Chloräthylisocyanat getropft. Nach 3,5 Stunden Rühren und Kühlen scheidet sich eine kristalline Substanz aus, die abgesaugt und mit Wasser, Äthanol und Äther gewaschen wird. Ausbeute: 13,7 g; Schmp.: 175-176°C (Zers.). Es wird aus Essigsäure-Wasser umkristallisiert; Schmp.: 177-177,5°C.
[α] = 2,93° (c = 1, Diemthylformamid)
DC: Auf Kieselgel G Adsorbens, mit einem (10 : 2 : 2)-Gemisch aus Essigester-Wasser-Essigsäure, R_f = 0,35.

Beispiel 4 1,6-Bis-[3-(2-chloräthyl)-N-nitrosoureido]-1,6-didesoxy-dulcit

Beim Rühren und Kühlen auf 0-2°C wird zu einer Lösung von 2,34 g (0,06 Mol) 1,6-Bis-[3-(2-chloräthyl)-ureido]-1,6- didesoxy-dulcit in 20 ml wasserfreier Trifluoressigsäure während ca. 2 Stunden 2,07 g (0,03 Mol) Natriumnitrit gegeben. Nach 3,5 Stunden werden zum Reaktionsgemisch 120 ml Eiswasser gegeben, es wird anschließend weitere 2 Stunden gekühlt. Man isoliert die ausgeschiedenen Kristalle und wäscht sie mit Wasser, Aceton und Ether. Es werden 2,31 g Gemisch der Isomeren erhalten. Schmp: 138-143°C (Zers.). Nach Umkristallisieren aus Ethanol oder Essigester erhält man 1,6-Bis-[3-(2-chlorethyl)- 3-nitrosoureido]-1,6-didesoxydulcit; Schmp.: 146-148°C (Zers.).
DC: Auf Kieselgel HF Adsorbens mit einem Aceton/Methanol-Gemisch (8 : 2): R_f = 0,70.

Analyse: C₁₂H₂₂N₆O₈Cl₂ (449,23)

Ber.C 32,08, H 4,93, N 18,71, Cl 15,79; Gef.C 31,92, H 4,97, N 18,66 Cl 15,62.

Das als Ausgangsstoff verwendete 1,6-Bis-[3-(2-chloräthyl)-ureido]- 1,6-didesoxy-dulcit wird wie folgt hergestellt:

Schritt a 1,6-Bis-[3-(2-chloräthyl)-ureido]-1,6-didesoxy-2,3-4,5-di- O-isopropyliden-dulcit

Es wurden zu einer gerührten und auf 0-2°C gekühlten Lösung von 13,0 g (0,05 Mol) 1,6-Diamino-1,6-didesoxy-2,3-4,5-di- O-isopropyliden-dulcit (J. W. W. Morgan und Mitarbeiter, J. Am. Chem. Soc. 78, 2496 [1956]) in 130 ml Wasser 10,8 g (0,103 Mol) 2-Chloräthylisocyanat getropft. Nach 3,5 Stunden Rühren und Kühlen werden die ausgeschiedenen Kristalle abgesaugt und mit Wasser, dann mit Äther gewaschen. Man erhält so 21,3 g Substanz (Schmp. 147-148°C), die aus Aceton umkristallisiert wird; Schmp.: 185-186°C (Zers.).
DC: Auf Kieselgel G Adsorbens, mit einem 1 : 1 Aceton-Isopropanol-Gemisch, R_f = 0,72.

Schritt b 1,6-Bis-[3-(2-chloräthyl)-ureido]-1,6-didesoxy-dulcit

7,4 g (0,0157 Mol) 1,6-Bis-[3-(2-chloräthyl)-ureido]-2,3-4,5-di- O-isopropyliden-dulcit werden in 25 ml 85 proz. wäßriger Trifluoressigsäure gelöst und über Nacht stehen gelassen. Anschließend wird die Lösung mit 360 ml Wasser verdünnt und gekühlt. Das ausgeschiedene Produkt wird isoliert und mit Wasser, Ethanol und Ether gewaschen. Ausbeute: 5,7 g (92,8%); Schmp.: 190-191,5°C (Zers.). Es wird aus einem Gemisch von Wasser und Ameisensäure umkristallisiert; Schmp.: 192°C (Zers.).
DC: Auf Kieselgel G Adsorbens, mit einem 1 : 1-Gemisch aus Aceton-Isopropanol, R_f = 0,62.

Beispiel 5 1,3-Bis-[3-(2-chloräthyl)-3-nitrosoureido]-1,2,3-tridesoxy- scylloinosit Methode A

Zu einer gerührten Lösung von 1,86 g (0,005 Mol) 1,3-Bis-[3- (2-chloräthyl)-ureido]-1,2,3-tridesoxy-scylloinosit in 14 ml Trifluoressigsäure werden bei 0-2°C während 2 Stunden 1,7 g (0,025 Mol) Natriumnitrit gegeben. Das Gemisch wird 4 Stunden gerührt und gekühlt und anschließend mit 140 ml Wasser versetzt. Nach einer weiteren Stunde wird das ausgeschiedene kristalline Produkt isoliert und mit Wasser und Äther gewaschen. Das erhaltene Produkt (1,98 g (91,8%), Schmp.: 118-120°C) wird aus Äthanol umkristallisiert; Schmp.: ca. 120-122°C (Zers.).
DC: Auf Kieselgel HF als Adsorbens mit einem Gemisch aus Chloroform und Methanol (9 : 1): R_f = 0,26.

Analyse: C₁₂H₂₀N₆O₇Cl₂ (431,24)

Ber.C 33,42, H 4,67, N 19,48, Cl 16,44; Gef.C 33,44, H 4,81, N 19,14 Cl 16,31.

Methode B

Beim Rühren und Kühlen auf 0-2°C wird in eine Lösung von 2,2 g (0,006 Mol) 1,3-Bis-[3-(2-chloräthyl)-ureido]-1,2,3- tridesoxy-scylloinosit in 20 ml konz. Salzsäure 4 Stunden lang N₂O₃ eingeleitet. Das Reaktionsgemisch wird in kleinen Teilen mit 70 ml Eiswasser vermengt und das ausgeschiedene kristalline Produkt wird nach 30 Min. abgesaugt und mit Wasser und Äther gewaschen. Man erhält 2,3 g (89,5%) 1,3-Bis-[3-(2-chloräthyl)- 3-nitrosoureido]-1,2,3-tridesoxy-scylloinosit; Schmp.: 114- 116°C (Zers.), das aus Essigester und Äthanol umkristallisiert wird. Schmp.: ca. 120-122°C (Zers.).

Das als Ausgangssubstanz angewendete 1,3-Bis-[3-(2-chloräthyl)- ureido]-1,2,3-tridesoxy-scylloinosit wird auf die folgende Weise hergestellt:

Bei kräftigem Rühren und Kühlen auf 0-2°C werden zur Lösung von 5,9 g (0,036 Mol) 1,3-Diamino-1,2,3-tridesoxy-scylloinosit in 150 ml Wasser 7,9 g (0,075 Mol) 2-Chloräthylisocyanat getropft. Nach 3,5 Stunden Rühren und Kühlen scheidet sich eine kristalline Substanz aus, die isoliert und mit Wasser, Äthanol und Äther gewaschen wird. Ausbeute: 11,7 g, (87,1%) Schmp.: 194-196°C. Es wird aus einem Ameisensäure-Wasser-Gemisch umkristallisiert. Schmp.: 201-203°C (Zers.).
DC: Auf Kieselgel G Adsorbens, mit einem (15 : 2 : 2)-Gemisch aus Essigester-Wasser-Essigsäure, R_f = 0,25.

Beispiel 6

Oral verabreichbare, 25 mg Wirkstoff enthaltende Tabletten für therapeutische Zwecke können gemäß dem folgenden Rezept hergestellt werden:

1,4-Bis-[3-(2-chloräthyl)-N-nitrosoureido]-
1,4-didesoxy-D,L-threit25 mg Maisstärke70 mg Lactose20 mg Polyvinylpyrrolidon2 mg Talk2 mg Kolloidales Siliciumdioxyd0,5 mg Magnesiumstearat0,5 mg

Das Durchschnittsgewicht einer Tablette betrug 120 mg. Die Tabletten wurden mit einem Filmüberzug versehen.

Claims

1. 1,4-Bis-[3-(2-chloräthyl)-N-nitrosoureido]-1,4-didesoxy-polyole, 1,6-bis-[3-(2-chloräthyl)-N-nitrosoureido]-1,6-didesoxy-polyole und 1,3-bis-[3-(2-chloräthyl)-N-nitrosoureido]-1,2,3-tridesoxy-polyole, wobei der Polyolteil aus Threit, Erythrit, Mannit, Dulcit oder Scylloinosit besteht.

2. Arzneitmittel, gekennzeichnet durch einen Gehalt an einer oder mehreren Verbindungen nach Anspruch 1 als Wirkstoff bzw. Wirkstoffe, gegebenenfalls zusammen mit üblichen Träger- und/oder Hilfsstoffen.