DE2423725A1

DE2423725A1 - 5-phenyl-4-oxo-delta hoch 2,alphathiazolidinessigsaeureester

Info

Publication number: DE2423725A1
Application number: DE2423725A
Authority: DE
Inventors: Manfred Dr Med Hermann; Gerhard Dipl Chem Dr Satzinger
Original assignee: Goedecke GmbH
Current assignee: Goedecke GmbH
Priority date: 1974-05-16
Filing date: 1974-05-16
Publication date: 1975-11-27
Also published as: ES437667A1; JPS6035344B2; JPS5951542B2; FR2270874B1; US4018775A; JPS514170A; BE829153A; DE2423725C2; JPS59130281A; FR2270874A1

Description

Gödecko AG 1000 Berlin 10 Salzufer

5~Phenyl~4--oxo-A ' "-thiazolidinessigsäureester

Die Erfindung betrifft neue pharmakologisch \virksame 5-Pbenylthiazolidinon(4)-Derivate, Verfahren zu deren Herstellung sowie Arzneimittel, welche die neuen Verbindungen enthalten.

Aus dem DBP 1 168 912, dem DBP 1 160 441 sowie aus Liebigs Anna 1 en der Chemie 665, S. 150-165 (1963) sind bereits substituierte 2-Methylen-thiazolidinone(4) bekannt geworden, welche eine anaigetische, sedative und entzündungshemmende Wirkung aufweisen. Von einigen Verbindungen dieses Typs ist auch eine gewisse gallen- und harntreibende Wirkung bekannt.

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Die erf indungs gemäßen Verbindungen unterscheiden r.ich von den vorbekannten Substanzen insbesondere dadurch, daß sie in 5-Stellung durch einen Phenylrest substituiert sind.

Die Einführung dieses Restes und eine gewisse Abwandlung der Substituenten führt nun überraschenderweise zu Verbindungen, die wertvolle Arzneimittel mit einem überlegenen hepatoprotektiven und curativ-antihepatotoxischen Effekt darstellen und keine insbesondere bei der Langzeitbehandlung - unerwünschten choleretischen Begleiterscheinungen oder andere Nebeneffekte mehr aufweisen.

Die erfindungsgemäßen Substanzen eignen sich daher hervorragend für eine langfristige Lebertherapie, wie sie z.B. nach Vergiftungen und Hepatopathien angezeigt ist.

Gegenstand der Erfindung sind demgemäß neue 5-Phenyl-thiazolidinon(4)-Derivate der allgemeinen Formel I

-O-C-CH = C C=O (I)

in welcher R₁ eine niedere Alkylgruppe, R₂ einen niederen Alkyl- oder Aralkylrest und R₃ einen niederen Alkyl- oder Aralkylrest

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/4

oder den Rest -(CH₀) —Ν , in dem m, 0 oder

\r

⁵
die Zahlen 1, 2 oder 3 und R. und R^- eine niedere

Alkyl-- oder Hydroxyalkylgruppe darstellen, wobei die Roste R. und R_r zusammen mit dem Stickstoff-

TC O

atom auch einen gesättigton heterocyclischen Ring mit 4 -r 6 Kohlenstoffatomen bilden können, bedeutet

sowie für den Fall, daß der Rest R~ eine basische Gruppe ent hält, deren pharmakologisch verträgliche Salze.

Als niedere Alkyl- bzw. Hydroxyalkylgruppen werden einwertige, unverzweigte oder verzweigte Alkyl- bzw. Hydroxyalkylreste mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen verstanden. Aralkylreste im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind Reste, die einen aromatischen Ring, bevorzugt den Benzolring und eine Alkylengruppe mit 1-3 Kohlenstoffatomen ,enthalten.

Bevorzugt sind Verbindungen der allgemeinen Formel I, in denen R^ eine Alkylgruppe mit bis zu 3 Kohlenstoffatomen, R₂ eine Alkylgruppe mit bis zu 3 Kohlenstoffatomen oder einen Benzylrest und Ro eine Alkylgruppe mit 1-3 Kohlenstoffatomen oder einen Benzylrest oder den Rest -(CH₀) —N , in dem m die Zahl

^R5 O oder 2 und R₄ und R₅, die gleich oder verschieden sein können, eine Alkyl- oder Hydroxyalkylgruppe mit 1-3 Kohlenstoffatomen darstellen, wobei die Reste R- und R₁- zusammen mit dem Stickstoffatom auch einen Piperidin- oder Pyrrolidinring bilden können,

bedeuten.

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-A-

Niedure Alkylgruppen im Rahmen dor vorliegenden Erfindung sind zum Beispiel Methyl-, Äthyl-, "Propyl-, Isopropyl-, n-Butyl-, Isobutyl-, n-Pentyl- und n-iicxylgruppen. 'Hydroxyalkylgruppen sind Ror;te entsprechender primärer oder sekundärer aliphatischer Alkohole,

Die wichtigsten Verbindungen der vor]legenden Erfindung sind diejenigen, die als Yi-. einen Äthylrest, als Rr, einen Methyl- oder Äthylrest und als R^ einen Äthyl-, Piperidino- oder Pyrrolidinorest besitzen, bzw. gegebenenfalls deren Salze mit pharmakologisch verträglichen Säuren.

Die vorliegenden Erfindung betrifft weiterhin ein Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der allgemeinen Formel I, das dadurch gekennzeichnet ist, daß man in an sich bekannter Weise

a) für den Fall, daß der Rest R~ über eine Alkylengruppe verfügt, die mit dem Thiazolidinonring verbunden werden soll, eine Verbindung der allgemeinen Formel II

R₁-O-C-CH=C C = O (II),

^R2

in welcher R-, und R„ die oben genannte Bedeutung haben und X Wasser stoff oder ein Alkalimetallatom dar stellt

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2A2372Ö

mit einer Verbindung der allgemeinen Formel

V-R₆ (III),

in welcher V eine reaktive Estergruppe und R„ einen niederen Alkyl- oder Aralkylrest oder den Rest -(CIT₉) -N^/R4 darstellt, in dem R-

und R₁- die oben genannte Bedeutung haben und η die Zahlen 1, 2 oder 3 darstellt

b) für den Fall, daß der Rest R₀ eine Aminogruppe darstellt, die direkt über ein Stickstoffatom mit dem Thiazolidinonring verbunden werden soll, eine Verbindung der allgemeinen Formel IV

R₁-O-C-CH=C C=O (IV),

*2

in welcher R-. und R₂ die oben genannte Bedeutung haben und Y ein Halogenatom darstellt,

mit einer Verbindung der allgemeinen Formel V

/H

H-N (V),

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242372b

in welcher R. und R die oben genannte Bedeutung besitzen,

umsetzt.

Als reaktive Estergruppen V versteht man z.B. die Halogenide oder Sulfate. Die Real:(.ion a) wird gewöhnlich so durchgeführt., daß ein entsprechender 3~Alkyl-5-phenyl-4-oxo Δ- ' -thiazolidiuessigsäureester in einem niederen aliphatischen Alkohol wie κ.Β. Äthanol oder tert. Butanol gelöst und entsprechend der Reaktivität dos einzuführenden Restes entweder in Gegenwart von Säurebindern direkt mit den Verbindungen III umgesetzt oder mittels einem Alkalimetallalkoholat in dem entsprechenden Alkohol in das als Zwischenprodukt anfallende Alkalimotallsaiz übergeführt wird, das erst dann mit einer Verbindung der allgemeinen Formel III zur Reaktion gebracht wird. Die Reaktion erfolgt am besten in einem Bereich von 60 - 1OO°C und ist nach 1-5 Stunden abgelaufen .

Die Reaktion b) wird entweder in situ, d.h. in dem zur Herstellung ver\vendeten Chlorkohlenwasserstoff oder nach Isolierung des Zwischenprodukts IV in Diäthyläther,Dioxan oder Benzol bei 0 - 20°C durchgeführt. Die Reaktion läuft innerhalb von 4-20 Stunden ab, wobei in manchen Fällen eine Nacherhitzung (Rückfluß) über 0,5 - 1 Stunde notwendig ist.

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Die AusgangGprodukte gemäß den allgemeinen Formeln II und IV lassen sich dadurch herstellen, daß man eine Verbindung der allgemeinen Formel VI

(I \y_CII— SH , s

^/ CO— OR₇

in welcher R„ eine niedere Alkylgruppe bedeutet,

mit einem Nitril der allgemeinen Formel VII

NC-CH₀-CO-O-R₁ (VII),

in welcher R- die oben genannte Bedeutung hat,

unter Basenkatalyse umsetzt und die so erhaltene Verbindung der allgemeinen Formel VIII,

ff f \ w

R₁-O-C-CH=C C=O (VIII),

' \ / W I H

in welcher R- die oben genannte Bedeutung hat,

zunächst an der acideren Position 3 mit entsprechenden reaktiven Estern wie z.B. Alkyl- oder Bensylhalogeniden oder -sulfaten alkyliert bzw, benzyliert und anschließend entweder in ent-

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sprechend alkalischem Milieu in das 5-Alkalisalz überführt oder in inerten Lösungsmitteln mit einem freien Halogen vorzugsweise mit Brom umsetzt. Als inerte Lösungsmittel Averden bevorzugt Chlorkohlenwasserstoffe, wie z.B. Tetrachlorkohlenstoff, verwendet. Die Bromierung kann direkt mit elementarem Brom oder mit N-Brom= succinimid durchgeführt werden. Die Reaktionsdauer beträgt bei Temperaturen zwischen ca. 50⁰C und 80°C etwa 1-2 Stunden.

Die Z\vischenprodukte der allgemeinen Formel VIII sind neu und werden als Schlüsselprodukte zu den pharmakologisch aktiven Verbindungen der allgemeinen Formel I im Rahmen der vorliegenden Patentanmeldung ebenfalls beansprucht.

Die Einführung des Restes R₂ erfolgt bei einer Temperatur zwischen etwa 6O⁰C und l00°C für gewöhnlich in einem polaren Lösungsmittel, wie z.B. Äthanol oder Isopropanol unter Zusatz von molaren oder überschüssigen Mengen eines Säureacceptors wie Pyridin, Triäthylamin oder Kaliumcarbonat. Die Reaktionsdauer beträgt ca. 1 - 5 Stunden.

Die Cyclokondensation der Verbindungen VI und VII erfolgt in der prinzipiell aus den deutschen Patenten Nr. 1 168 912 und 1 160 441 bekannten Weise.

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Für den Fall, daß die Verbindungen I eine basische Aminogruppe enthalten, erhält man die pharmakologisch verträglichen Salze der Verbindungen I in üblicher Weise,z.B. durch Neutralisation der freien Base mit pharmakologisch unbedenklichen anorganischen oder organischen Säuren, wie Salzsäure, Schwefelsäure, Phosphorsäure, Milchsäure, Citronensäure, Apfelsäure, Salicylsäure, Malonsäure, Maleinsäure oder Bernsteinsäure.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen I und gegebenenfalls deren Salze können in flüssiger oder fester Form enteral oder parenteral appliziert werden. Als Injektionsmedium kommt vor allem Wasser zur Anwendung, welches die bei Injektionslösungen üblichen Zusätze wie Stabilisierungsmittel, Lösungsvermittler oder Puffer enthält. Derartige Zusätze sind z.B. Tartrat- und Citrat-Puffer, Äthanol, Komplexbildner (wie Äthylendiamin-tetraessigsäure und deren nicht-toxische Salze), hochmolekulare Polymere (wie flüssiges Polyäthylenoxid) zur Viskositätsregulierung. Feste Trägerstoffe sind z.B. Stärke, Lactose, Mannit, Methylcellulose, Talkum, hochdisperse Kieselsäuren, höhermolekulare Fettsäuren (wie Stearinsäure), Gelatine, Agar-Agar, Calciumphosphat, Magnesiumstearat, tierische und pflanzliche Fette, feste hochmolekulare Polymere (wie Polyäthylenglykole); für orale Applikation geeignete Zubereitungen können gewünschtenfalls Geschmacks- und/oder Süßstoffe enthalten.

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Die Dosierung der erfindungsgeraäßen Verbindungen richtet sich nach Art und Schwere der jeweiligen Erkrankung. Die orale Einzeldosis dürfte etwa 5 0 bis 5 00 mg betragen.

Gegenstand der Erfindung sind folglich auch Arzneimittel, die dadurch gekennzeichnet sind, daß sie mindestens eine Verbindung der allgemeinen Formel I oder gegebenenfalls ein pharmakologxsch verträgliches Salz derselben enthalten.

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PHARMAKOLOGISCHE VERGLEICIISVERSUCIIE

·"·· Akute Toxizität

Die akute Toxizität der erfindungsgemäßen Thiazolidone wurde an männlichen Mäusen (NMRI) mit einem Körpergewicht von 21-26 g untersucht. Alle Tiere wurden vor Versuchsbeginn 24 Stunden nüchtern gehalten, Wasser stand ad libitum zur Verfügung. Zu jeder Dosierungsgruppe gehörten 4 Mäuse. Die Dosis wurde mit dem Faktor 2 gesteigert. Die Substanzen wurden in l%igem Traganthschleim suspendiert per Schlundsonde intragastral verabreicht. Das applizierte Flüssigkeitsvolumen betrug 0,2 ml/10 g Körpergewicht. Die Tiere wurden insgesamt 7 Tage beobachtet. Als Standardsubstanz wurde Silymarin verwendet. Die ermittelten LD -Werte

50

sind in der folgenden Tabelle aufgeführt:

Tabelle I: Akute Toxizität der erfindungsgemäßen Thiazolidone bei Mäusen (7-Tage-Test)

Substanz · Nr.	Applikations- art	¹^₅O mg/kg
• 1	i.g.	> 1600.
2	i.g.	> 1600
3	i.g.	ca.1600
4	i.g.	> 1600 .
5	i.g.	> 1600
SILYMARIN·	i.g.	> 1600

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1 ~ S-Methyl-S-pheriyl-S-N-piperidiiio-'l-oxo-

Δ "' "-thiazolidin-essigsäureäthylester (Beispiel 7)

2 = S-Methyl-Ö-phenyl-S-N-pyrrolidino-^-oxo-

Δ ^j! -thiazolidin-essigsäureäthylester (Beispiel 8)

3 ₌ 3-Methyl-5-äthyl-5-phenyl-4-oxo-A²'^ci-thiazolidin-

essigsäureäthylester (Beispiel 1)

4 = 3-Athyl-5-phenyl-5-N-piperidino-4-oxo-

^ ' -thiazolidin-essigsäureäthylester (Beispiel 3)

5 = 3-Äthyl-5-phenyl-5(methyl-ß-hydroxy-äthylamino)-4~oxo-

A » -thiazolidin-essigsäureäthylester (Beispiel 6)

Ergebnisse:

Wie aus Tabelle I hervorgeht, ist die akute Toxizität
der fünf erfindungsgemäßen Thiazolidone sehr gering.
Die LDgQ-Werte der Substanzen Nr. 1, 2, 4 und 5 liegen über 1600 mg/kg. Auch für die Standardsubstanz SILYMARIN ergibt sich eine mittlere Letalität von mehr als 1600mg/kg Bei Verbindung Nr. 3 beträgt die LD₅₀ ca. 1600 mg/kg.

_ 1 -3 _ 509848/1037

-Rf -

2. Untersuchung der ant_ihepatotoxisclien Wirkung der erfindungsgemäßen Thiazolidone boirn durch Tetrachlorkohlenstoff bewirkten Leberschaden der Ratte.

In diesem Versuch wurde die Narkosedauer bei CCl₄-lebergeschädigten Ratten nach Verabreichung von Hexobarbital-Natrium sowohl ohne als auch nach Behandlung mit den erfindungsgemäßen Thiazolidonen bestimmt. Als Standardsubstanz wmxle Silymarin gewählt, da es den gegenwärtigen Stand der Technik hinsichtlich einer antihepatotoxischen Wirkung repräsentiert.

Die Narkosedauer nach Verabreichung von Hexobarbital-Na wird wesentlich durch die Metabolisierungsgeschwindigkeit dieser Verbindung in der Leber bestimmt. Bei Tieren mit einem durch CCl₄ verursachten Leberschaden ist die Hexobarbital-Narkosedauer verlängert infolge der Beeinflussung des fremdstoffabbauenden Enzymsystems der Leber durch Radikale, die aus Tetrachlorkohlenstoff gebildet Averden.

Diese treten in Wechselwirkung mit dem Enzymsystem und

1) 2) 3) blockieren es für den Abbau des Barbiturates .

Die Bestimmung der Narkosedauer bei CCl^-lebergeschädigten Tieren gibt daher Aufschluß über den Funktionszustand der Leber . Mit dieser Methode können Substanzen mit hepatoprotektiven Eigenschaften erfaßt werden, da sie der Verlängerung der Narkosedauer bei einem CCl.-Leberschaden entgegenwirken.

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Methodik:

Versuchstiere waren männliche Ratten (SIV 50) eigener Zucht mit einem Körpergewicht von 110-160 g. Es wurde Stan-dardfutter verabreicht, Wasser stand ad libitum zur Verfügung. Zu jeder Versuchsgruppe gehörten 10-12 Tiere. Die Behandlung mit den erfindungsgemäßen Thiazolidonen bzw. Silymarin erfolgte jeweils über einen Zeitraum von insgesamt vier Tagen, wobei die Subs tanzen täglich einmal in Traganthschleim suspendiert (2 ml/100 g) per Schlundsonde intragastral appliziert wurden. Am 2, Behandlungstag wurde CCl. verabreicht, am 4. Behandlungstag die Narkosedauer bestimmt. Die Tiere von zwei Kontrollgruppen, von denen die eine CCl₄ und die andere keines appliziert bekam, erhielten während des gleichen Zeitraumes täglich 2 ml/100 g Traganthschleim. Vor der CCl^₄-Verabreichung wurden die Tiere 16 Stunden nüchtern gehalten. CCl₄ ■wurde in einer Verdünnung von 1:50 in Oleum Sesami (1 ml der Verdünnung/100 g Körpergewicht) verabreicht. Die Tiere der Kontrollgruppe ohne CCl₄-Leberschaden erhielten zum Zeitpunkt der CC^-Verabreichung nur Oleum Sesami im zuvor angegebenen Vorumen.

Zur Bestimmung der Narkosedauer wurden 70 mg/kg einer frisch zubereiteten Hexobarbital-Na-Lösung (1 ml/100 g) in einer Minute in die Schwanzvene der Tiere injiziert. Als Kriterium für die Narkosedauer galt die Zeit vom Ende der Hexobarbital—Injektion bis zum Wiedererlangen der Stell- und Haltereflexe. Während der Narkose wurde die normale Körpertemperatur mit Wärmelampen aufrecht erhalten.

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Aus den Einzelergebnissen von jeder Untersuchungsgruppe wurden die Mittelwerte mit den dazugehörigen Standardabweichungen berechnet. Um den Einfluß der erfindungsgemäßen Thiazolidone bzw. des Silymarins auf die Narkosedauer von CCl.-lebergeschädigten Tieren zu ermitteln, wurde die Differenz zwischen der durchschnittlichen Narkosedauer der Kontrollgruppe mit CCl^-Leberschaden und der Kontrollgruppe ohne CCl.-Leberschaden gleich 100 gesetzt und die Differenz zwischen der durchschnittlichen Na!"kosedauer der Substanzgruppe mit CCl.-Leberschaden und der Kontrollgruppe ohne Leberschaden in % davon berechnet. Mit dem t-Test nach Student wurden die Differenzen zwischen den einzelnen Untersuchungsgruppen auf Signifikanz geprüft.Die erhaltenen Vergleichsversuche sind in der folgenden Tabelle II wiedergegeben:

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Tabellen: Beeinflussung der Hexobarbital-Na-Narkosedauer bei CCl₄-lebergeschädigten Ratten durch die erfindungsgemäßen Thiazolidone und Silymarin.

Substanz	4	Dosis	Narkosedauer in min	,80	Kontrollgruppe mit CCl₄-Leber- schaden	20,36	Substanzgruppe mit CCLj-Leber- schadeη	22,52	Zu- bzw. Abnahme der Narkosedauer in % Substanzgruppe	# «
Nr.	5	mg/kg i.g.	Kontrollgruppe ohne CCl4-Leber- schaden	,52 ,12	69,08 +	19,90 26,51	52,75 +	13,76 14,65	- 34,66	Signifikanz ρ -
1	SILYMARIN	150	18,10 + 5	,80	87,83 + 81,80 +	20,36	35,67 + 34,83 +	23,56	- 71,54 - 75,39	> 0,05
1 OI S 2	SILYMARIN	250 250	14,92 + 4 19,50 + 4	,08	69,08 +	21,09	31,67 +	3,77	- 73,38	< 0,001 < 0,001
OO ^ύ	75	18,10 + 5	,52	74,75 +	19,90	15,75 +	21,91	- 102,16	< 0,001
^ 3* CD	150	17,00 + 4	,57	87,83 +	15,26	55,82 +	5,20	- 43,90	< 0,005 i.
CO	100	14,92 + 4	,93	57,33 +	13,30	26,00 +	9,62	- 73,44	< 0,001
200	14,67 + 2	,48	73,00 +	22,75	36,58 +	17,43	- 63,49	< 0,001
200	15,64 +3	,48	79,73 +	22,75	90,92 +	16,41	+' 19,87	< 0,001
100	23,42 + 7	79,73 +		85,92 +	+ 10,99	>0,05 £
200	23,42 + 7		> 0,05 i3

diesem Versuch fanden pro Versuchsgruppe nur 4 Tiere Verwendung.

Ergebnisse:

Wie aus Tabelle II zu ersehen ist, führt eine durch CCl₄ verursachte Leberschädigung bei Ratten zu einer ausgesprochenen Verlängerung der Narkosedauer im Vergleich zu der von Kontroll-tieren ohne CCl₄-Leberschaden. Die statistische Berechnung ergab in allen Versuchen einen hochsignifikanten Unterschied (p = < 0,001) zwischen den beiden Kontrolluntersuchungsgruppen.

Die fünf erfindungsgemäßen Thiazolidone bewirken alle, wie aus der Tabelle II erkennbar ist, bei viertägiger intragastralei· Anwendung eine deutliche Verkürzung der Narkosedauer bei CCl₄-lebergeschädigten Ratten im Vergleich zu den Ergebnissen der entsprechenden lebergeschädigten Kontrollgruppen ohne Behandlung .

Diese antihepatotoxische Wirkung der erfindungsgemäßen Thiazolidone ist hochsignifikant, wie die letzte Spalte von Tabelle II zeigt.

Silymarin, das in Dosen von 100 und 200 mg/kg getestet wurde, führte hingegen zu keiner Abnahme der Narkosedauer bei CCl₄-lebergeschädigten Tieren. Die Narkosedauer der CCl₄-lebergeschädigten Tiere, die mit Silymarin behandelt wurden, sseigt sogar eine geringe, zwar nicht signifikante prozentuale Zunahme gegenüber der von unbehandelten lebergeschädigten Tieren.

Da die Prüfung der akuten Toxizität der erfindungsgeraäßen Thiazolidone in allen Fällen LD_5Q-Werte von mehr als 1600 mg/kg bzw. von ca. 1600 mg/kg erbrachte und die antihepatotoxischen Wirkungen im Tetrachlorkohlenstoff-Testmodell schon bei wesentlich niedrigeren Dosierungen auftraten, ergibt sich, für alle fünf Verbindungen eine sehr gute therapeutische Breite.

- 18: -. . ■

s ■ «

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3. Untersuchung der antihepatotoxischen Wirkung von erfindungsgemäßen Thiazolidonen beim durch a-Amanitin bewirkten Leberschaden der Maus.

Als weiteres tierexperimentelles Testmodell für die Prüfung antihepatotoxischer Wirkungen von Phannaka wird der durch a-Amanitin erzeugte Leberschaden bei Mäusen verwendet.

Da es sehr schwierig ist, a-Amanitin in ausreichender Menge zu beschaffen und daher für diese Versuche bis jetzt nur eine kleine a-Amanitin-Menge zur Verfügung stand, konnten bisher nur Versuche in sehr begrenztem Umfang durchgeführt werden.

Methodik ;

Es wurde der Einfluß von Verbindung Nr..1 und Nr. 4 auf die Überlebensrate von Mäusen mit einem durch a-Amanitin bewirkten Leberschaden bestimmt. Als Standardsubstanz wurde wiederum Silymarin verwendet, das von uns in der von HAHN et al» bei der gleichen Versuchsanordnung als antihepato- toxiscb wirksam ermittelten Dosis geprüft wurde.

Zu jeder Versuchsgruppe gehörten 25 Tiere. Die Prüfsubstanzen wurden über einen Zeitraum von insgesamt θ Tagen täglich intragastral in

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Traganthschleim suspendiert (0,2 ml/10 g KGW) per Schlundsonde verabreicht. Tiere der unbehandelten lebergeschädigten Kontrollgruppen bekamen während"des gleichen Zeitraumes lediglich ■ täglich Traganthschleim verabreicht.

Die intraperxtoneale Verabreichung von jeweils 0,3 mg/kg a-Amanitin erfolgte bei'allen Versuchsgruppen am 2. Versuchstag. Die a-Amanitin-Dosis war so gewählt, daß die Absterberate der unbehandelten Tiere unter 100 % blieb. Die Überlebensrate der Tiere aller Versuchsgruppen wurde täglich über einen Zeitraum von insgesamt 14 Tagen kontrolliert. Der statistische Vergleich der Überlebensraten von behandelten und unbehandelten Versuchsgruppen erfolgte nach dem VierfelderX -Test. Die erhaltenen Vergleichswerte sind in der folgenden Tabelle III enthalten:

Tabelle III: Beeinflussung der Überlebensrate

CKr-Amanit in-lebergeschädigter Mäuse durch erfindungsgemäße Thiazolidone und SILYMARIN

Substanz Nr.	Dosis mg/kg/ Tag	Überlebensrate in % von a-Amanitin-leber geschädigten Tieren	behandelt	Signifikanz P =
		unbehandelt	92
1	2 χ 250	52	100	0,001
4	2 χ 250	52	32	< 0,001
SILYMRIN	1 χ 100	36	> 0,05

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Wie die Ergebnisse in Tabelle IIIerkennen lassen, bewirken die beiden geprüften erfindungsgemäßen Thiazolidone auch in diesem Testmodell einen überlegenen antihepatotoxxschen Effekt.

Eine Behandlung mit Verbindung Nr. 1 erhöht die Überlebensrate α-Amanitin-lebergeschädigter Mäuse mit einer Signifikanz von 0,001 deutlich gegenüber der von unbehandelten Kontrolltieren. Verbindung Nr. 4 hebt die Überlebensrate der Tiere sogar auf 100 % an. Dieser Effekt war statistisch hochsignifikant. Der für Silymarin von HAHN et al. gefundene Anstieg der Überlebensrate von ot-Amanitin-lebergeschädigten Tieren, konnte in den eigenen Untersuchungen nicht bestätigt werden. Wie aus Tabelle ΠΙ zu ersehen ist, bewirkt Silymarin keine Anhebung der Überlebensrate.

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Literaturverzeichnis:

l)Butler, T.C: J. Pharmacol, exp. Therap.S.134, 311 (1961)

2 ) Slater, T. F. : Nature S. 209, 3_6 (1966)

3 )Recknagel, R.O.: Pharmacol. Rev. 19, 145 (1967)

4 )Balazs, T., Grice, H.C: Toxicol. appl. Pharmacol.

5, 387 (1963)

5)Megirian, R.: J. Pharmacol, exp. Therap. 144, 331 (1964)

6 )Hahn, G., Lehmann, H.D., Kürten, M., üebel, H., Vogel, G. Arzneim.-Forsch. 18, 697 (1968)

Die folgenden Beispiele dienen zur Erläuterung der vorliegenden Erfindung:

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B e i s ρ i e 1

2 UL

3-Methyl-5-äthyl-5-phenyl-4-oxo-A -thiazolidinessigsäureäthylester

Durch Auflösen von 1,2 g Natriumschnitzel (0.05 Mol) in 150 ml wasserfreiem, siedendem tert. Butanol wird eine Natrium tert.-butylat-Lösung bereitet. 14 g 3-Methyl-5-phenyl-4-oxo-A^2jCL-thiazolidin-essigsäureäthylester werden in diese Lösung, eingetragen, sodann wird mit einer Lösung von 20 ml Äthyljodid in 100 ml wasserfreiem Äthanol versetzt. Nach 45 minütigem Erhitzen unter Rückfluß hat sich eine gelbe Lösung gebildet. Nach weiteren 45 Minuten wird das gesamte Lösungsmittelgemisch im Vakuum abgezogen und der Rückstand zwischen 0,5 Liter Wasser und 100 ml Äther verteilt. Die Ätherphase wird getrocknet.und abdestilliert. Der Rückstand wird destilliert. Sdpt. 200°C/l Torr. Man erhält 3-Methyl-5-äthyl-5-phenyl-4-oxo-A ' -thiazolidin-essigsäure= äthylester als hochviskoses, gelbliches Öl. IR Spektrum: 1712 cm"¹ (s, Lactam cycl.), 1688 cm" (s, a.ß-unges. Ester), 1570 cm"¹ (CH=C), 1180 cm" (s, C-O asym.), 1040 cm"¹ (m, C-O sym.), 795 cm"¹ (m, H-C=), 695 cm"¹ (m, Phenyl).

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Λ Λ ft / Ό /■ λ r\ f\ r»

(305	.39)	C	62,	93	H	6,	27	N	4,	58	S	10,	50
Ber.			62,	70		6,	29		4,	75		10,	29
Gef.

In analoger Weise erhält man den

2 CL

3-Methyl-5-äthyl-5-phenyl~4~oxo-A ' -thiazolidin-essigsäuroitiethy !ester,

3-Methyl-5-äthyl-5-phenyl-4-oxo-A * "-thiazolidin-essigsäurebutylester

und den

3,5-Diäthyl-5-phenyl-4--oxo-A ' -thiazolldin-essigsäurebutylester.

Die als Ausgangsprodukte verwendeten Verbindungen werden wie folgt hergestellt:

In eine Lösung von 10,6 g (0.1 Mol) Triäthylamin in 210 ml wasserfreiem Benzol trägt man rasch eine Mischung aus 11,9 g (0.1 Mol) Cyanessigsäureäthylester und 18,2 g (0.1 Mol) <X-Mercaptophenylessigsäuremethylester ein und rührt den Ansatz 18 Stunden bei Raumtemperatur. Ein Teil des Reaktionsproduktes fällt nach und nach in Form farbloser Kristallplättchen aus, die abgetrennt werden. Der Ansatz wird im Vakuum zur Trockne gebracht und der Rückstand samt ausgefallenem Produkt aus Benzol umkr'istallisiert. Man erhält 14,6 g (55,5 % d. Th.) 5-Phenyl-4-oxo-Δ ' -thiazolidin-essigsäureäthylester. Schmp. 177-8°C.

- 24,-

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Analog stellt man den 5-Phenyl-4-oxo-A ' -thiazolidin-essigsäuren-butylester hör. Ausbeute (0.1 molarer Ansatz) 21,0 g (72 % d. Th.), umkx'istallisiert aus Aceton-Wasser 1:1. Schmp.137 c.

15,8 g (0.06 Mol) des 5-Phenyl-4-oxo-A ' -thiazolidin-essigsäureäthylesters werden in 240 ml 96 %igem Äthanol gelöst und 10 Minuten mit 9,1 g (0.66 Mol) gepulvertem Kaliumcarbonat unter schwachem Rückfluß gerührt. Unter weiterer äußerer Wärmezufuhr tropft man 7,6 g (0,06 Mol) Dimethylsulfat zu. Anschließend wird noch 1 Stunde unter Rückfluß erhitzt, sodann in ca. 1/2 Liter heißes Wasser eingetragen. Das abgeschiedene Produkt wird getrocknet und aus Cyclohexan umkristallisiert. Ausbeute 12,0 g

ο Cf

(72 % d. Th.) 3-Methyl-5-phenyl-4-oxo-A ' -thiazolidin-essig= säureäthylester vom Schmp. 112-14°C.

In analoger Weise stellt man den 3-Methyl-5-phenyl-4-oxo- Δ ' _ thiazolidin-essigsäure-n-butylester her. Ausbeute (0.035 molarer Ansatz) 8,0 g (74,8 % d. Th.), Schmp. 98°C, umkristallisiert aus

Ligroin. Durch Verwendung von Diäthylsulfat wird in analoger

2 cL Weise z.B. der 3-Äthyl-5-phenyl-4-oxo-A ' -thiazolidin-essig= säure-n-butylester erhalten. Ausbeute (0.06 molarer Ansatz) 12,1 g (63,3 % d. Th.) umkristallisiert aus Äther / Petroläther 1:1. Schmp. 84°C.

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Beispiel 2

5-Pheiiyl-3,5~dibeiizyl-4-oxo-A ' -thiazolidin-essigsäureäthylester

10j5 g (0.04 Mol) 5-Phenyl-4-oxo-A ' -thiazolidin-essigsäureäthylester werden in 180 ml wasserfreiem Äthanol gelöst und mit 12,14 g (0.088 Mol)wasserfreiem, gepulvertem Kaliumcarbonat versetzt . Unter Rühren wird zum Sieden erhitzt. Nach und nach gibt man 10,08 g (0.08 Mol) Benzylchlorid zu und erhitzt anschließend noch 2 Stunden unter kräftigem Rückfluß. Der Ansatz wird noch warm in 0,5 Liter heißes Wasser eingetragen und das abgeschiedene Produkt in Benzol/Äthylacetat 1:1 aufgenommen. Der Rückstand wird nach dem Entfernen des Lösungsmittelgemisches mit Äther digeriert und aus Methanol umkristallisiert. Man erhält 8 g (42,4 % d. Th.) 5-Phenyl-3,5-dibenzyl-4-oxo-A ' -thiazolidin-essigsäure-äthyl·= ester. Schmp. 154-6 C.

C₂₇H	25^NO3	C	S	72,	81	H 5,	70	N 3	,36	S 7,	37
(443	.57)			73,	10	5,	69	3	,16	7,	73
Ber.
Gef.

- 26 -

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Beispiel 3

2 Gi-3-Methyj-5-phenyl-5-benzyl-4-oxo-Δ ' -thiazolidin-essigsäure-

äthylester

8,31 g (0,03 Mol) 3-Methyl-5-phenyl-4-oxo-A²'^a-thiazolidinessigsäureäthylester und 4,56 g (0.033 Mol) Kaliumcarbonat (wasserfrei, fein gepulvert) werden in 120 ml wasserfreies Äthanol eingetragen. Es wird zum Rückfluß erhitzt und tropfenweise innerhalb von 1,5 Stunden mit 3,78 g (0.03 Mol) Benzylchlorid versetzt.

Die Half te des Lösungsmittels wird abdestilliert und der Rückstand mit heißem Wasser digeriert. Man extrahiert mit Äthylacetat und rührt den Rückstand dieses Extraktes einige Stunden mit Cyclohexan. Nach dem Umkristallisieren aus Petroläther erhält man 6,0 g (54,5 % d. Th.) 3-Methyl-5-phenyl-5-benzyl-4~oxo-Δ ♦ -thiazolidin-essigsäureäthylester vom Schmp. 105-107 C.

^C21^H	21^N03	C	S	68,	63	H 5	,76	N 3,	82	S 8,	73
(367	,47)			68,	63	5	,57	3,	93	9,	01
Ber.
Gef.

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Bei s pie! 4

3-Methyl-5-plxenyl-5-(2-diäthylamiiioäthyl)-4-oxo-A^2>oL-thzazolidin-essigsäureäthylester

In analoger Weise wie in Beispiel 3 beschrieben wird 3-Methyl-5-phenyl-4-oxo-Δ ' -thiazolidin-essigsäureäthylester mit Di= äthylaminoäthylchlorid umgesetzt. Nach dem Eintragen in heißes Wasser wird mit Äthylacetat extrahiert. Dieser Extrakt wird anschließend mit 2 η Salzsäure ausgeschüttelt. Die salzsaure Phase alkalisiert man mit 1 η Natronlauge und nimmt die abgeschiedene rohe Base in Äther auf. Der Ätherrückstand wird in Isopropanol gelöst und mit Oxalsäure gefällt. Das Oxalat kristallisiert man ebenfalls aus Isopropanol um. Ausbeute (0.025 molarer Ansatz) 3,5 g (27 % d. Th.) 3-Methyl-5-phenyl-5-(2-diäthylaminoäthyl)-4-oxo-A ' -thiazolidin-essigsäureäthylestei·. Schmp. 12.6-8°C.

^C22^H	3O^N2°	C	7^S	(Oxa	lat)	,49	N	6	,00	S	6,	87
(4.66	.56)					,27		6	,04		6,	58
Ber.	56,	64	H 6
Gef.	56,	53	6

- 28 -

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Beispiel

- A ' -tliiazolidin-

essigsäureäthylester

2 ÖL
Ausgehend von 5-Phenyl-4-oxo- Δ. ' -thiazolidin-essigsäureäthyl= ester stellt man wie in Beispiel 1 beschrieben durch Alkylierung mittels Diäthylsulfat 3-Äthyl-5-phenyl-4-oxo-A²'^a-thiazolidin» essigsäureäthylester her (Ausbeute 56 % d. Th.), Schmp. 119,5 120 C (aus Cyclohexan).

42,2 g" (0.15 Mol) 3-Äthyl-5-phenyl-4-oxo-A ' -thiazolidin-essigsäureäthylester werden in 0,9 Liter wasserfreiem Tetrachlorkohlenstoff gelöst. Die Lösung wird zum Rückfluß erhitzt und tropfenweise mit 24 g (7,7 ml, 0,15 Mol) Brom versetzt. Nach 1,5 Stunden wird der noch gelöste Bromwasserstoff durch Einleiten von Stickstoff verdrängt. Der gebildete 3-Äthyl-5-brom~5-phenyl~4-oxo-A » -thiazolidin-essigsäureäthylester wird sodann ohne Isolierung mit Piperidin (35,6 ml, 0.36 Mol) umgesetzt. Anschließend erhitzt man das Reaktionsgemisch noch 0,5 Stunden zum Rückfluß. Man trennt vom Piperidinhydrobromid ab und bringt das Filtrat zur Trockne. Der Rückstand wird in 75 ml heißem Isopropanol gelöst. Die abgeschiedenen Kristalle werden aus Äthanol umkristallisiert. Ausbeute 25,3 g (45,2 % d. Th. über 2 Stufen) 3-Ä'thyl-5-phenyl-5-N-piperidino-4-oxo-A ' -thiazolidin-essigsäureäthylester. Schmp. 1O6°C. - 29 -

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(374.52)

Ber.	C	64	,14	H	7	,00	N	7,	48	S	8,	56
Gef.		64	,28		6	,71		7,	66		8,	71

Beispiel 6

3-Äthyl-5-phenyl-5-(methyl-ß-hydroxyäthylamino)-4~oxoA ' -thiazolidin--essigsäureäthylester

2 ÖL

3-Äthyl-5-phenyl-4-oxo-A * -thiazolidin-essigsäureäthylester wird inanaloger Weise wie in Beispiel 5 beschrieben mit Brom umgesetzt. Der so erhaltene 3-Äthyl-5~brom-5-phenyl-4-oxo-A ' thiazolidin-essigsäureäthylester wird dann mit N-Methyl-äthanol= amin umgesetzt und das Reaktionsprodukt über eine Kieselgel-Säule mit Benzol/Methanol 9:1 Chromatographiert. Man erhält 8,5 g (0.1 molarer Ansatz entspr. 28 % d. Th. über 2 Stufen) 3-Äthyl-5-phenyl-5-(methyl-ß-hydroxyäthylamino)-4-oxo-A ' -thiazolidinessigsäureäthylester vom Schmp. 117°C (aus Isopropanol/Äther 2:1),

^C18^H24^N2°4^S
(364.47)

- 30 - .

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Ber.	C	59	,54	H	6,	61	N	7,	81	S	8,	65
Gef.		59	,32		6,	64		7,	69		8,	79

Beispiel.

2 d. 3 -Methyl -5 -phenyl -5 -N-pip er id ino -4 -oxo -Δ. ' -thiazolidin-

essigsäureäthylester

Gemäß Beispiel 1 hergestellter S-Methyl-o-phenyl^-oxo^""'

thiazolidin-essigsäureäthylester wird analog Beispiel 5 bromiert und in situ mit Piperidin umgesetzt. Ausbeute (0.05 molarer Ansatz) 8,2 g (45,6 % d. Th. über 2 Stufen) S-Methyl-ö-phenyl-ö-N-piperidino-4-oxo-" ' -thiazolidin-essigsäureäthylester vom Schmp. 173~4°C (aus Äthanol).

^C19^H24^N2°3^S	,45	H 6,	61	N 7,	81	S 8,	82
(360.47)	,30	6,	71	7,	70	8,	90
Ber. C 63
Gef. 63

- 31 -

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Beispiel 8

3-Methyl-5-pfaenyl-5-N--pyrrolidino~4-oxo~;A ⁷ -thiazolidinessigsäureäthylester

28 g (0.1 Mol) S-Methyl-o-phenyl^-oxo-A ' -thiazolidin-essig= Säureäthylester werden bromiert wie in Beispiel 5 beschrieben. Die Tetrachlorkohlenstoff-Phase wird im Vakuum eingeengt und der Rückstand aus Cyelohexan umkristallisiert. Man erhält 25,1 g (69,4 % d. Th.) 3-Methyl-5-brom-5-phenyl-4-oxo-A²'^_thiazolidinessigsäureäthylester vom Schmp. 96-106 C (Zers.)

Ber. Br 22,4 Gef 22,0

Der so erhaltene 3-Methyl-5-brom-5~phenyl-4-oxo-A ' -thiazolldinessigsäureäthylester wird in Äther bei 0 C mit Pyrrolidin analog Beispiel 5 umgesetzt. Ausbeute (0.07 molarer Ansatz) 12 g (50 % d. Th.) S-Methyl-S-phenyl-ö-N-pyrrolidino^-oxo-A²'⁰¹"-thiazolidin-essigsäureäthylester vom Schmp. 95 C (Äthanol).

- 32 -

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Beispiel

S-Methyl-S-phenyl-S-diathylamino-^-oxo-A * -thiazolidinessigsäureäthylester

10,7 g (0.03 Mol) S-Methyl-ö-phenyl-S-brom^-oxoessxgsäureäthylester werden in 125 ml trockenem Äther gelöst und bei 8 - 1O°C mit 4,4 g (0.06 Mol) Diäthylamin (ätherische Lösung) umgesetzt. Es wird vom Diäthylamin Hydrobromid abgetrennt und das Filtrat zur Trockne gebracht. Der Rückstand wird aus Isopropanol umkrxstallisiert. Ausbeute 3,3 g (32 % d. Th.) 3-Methyl-5-phenyl-5-diäthylamino-4-oxo-A ' -thiazolidin-essigsäureäthyl= ester. Schmp. 112 C.

^C18^H24^N2°3^S	,04	H 6,	94	N 8	,04	S 9,	20
(348.47)	,12	6,	82	7	,80	9,	05
Ber. C 62
Gef. 62

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Claims

Patentansprüche

l) 5-Phenyl-tliiazolidinon (4) -Derivate der allgemeinen Formel I

(D,

in welcher R* eine niedere Alkylgruppe, R„ einen niederen Alkyl- oder Aralkylrest und Ro einen niederen Alkyl- oder Aralkyl-

/R A

rest oder den Rest -(CH₀) —Ν ,in dem

ία, O oder die Zahlen 1, 2 oder 3 und R₄ und R₅ eine niedere Alkyl- oder Hydroxy= alkylgruppe darstellen, wobei die Reste R. und R_c zusammen mit dem Stickstoffatom auch einen gesättigten heterocyclischen Ring mit 4-6 Kohlenstoffatomen bilden können, bedeutet

sowie für den Fall, daß der Rest R₃ eine basische Gruppe enthält, deren pharmakologisch verträgliche Salze.
2. Verbindungen der allgemeinen Formel I gemäß Anspruch 1, in welcher R, einen Äthylrest, R„ einen Methyl- oder Ä

- 34 -

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und R₃ einen Äthyl-,' Piperidino- oder Pyrrolidinorest bedeuten.
3. Verbindungen der allgemeinen Formel VIII

R₁—O—C—CH =C C=O (VIII),

I H

in welcher R- eine niedere Alkylgruppe darstellt.
4. Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der allgemeinen Formel I

?3 R₁-O-C-CH=C C=O (I)

Rr

in welcher R₁ eine niedere Alkylgruppe, R_n einen niederen Alkyl- oder Aralkylrest und Ro einen niederen Alkyl- oder Aralkyl-

"P

rest oder den Rest —(CH₀) —N , in dem

^Δ ^m \p ^K5

m, O oder die Zahlen 1, 2 oder 3 und R₄ und R₁- eine niedere Alkyl- oder Hydroxy= alkylgruppe darstellen, wobei die Reste

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R. und R₁- zusammen mit dem Stickstoffatom auch einen gesättigten heterocyclischen Ring mit 4-6 Kohlenstoffatomen bilden können, bedeutet

bzw. von deren pharmakologisch verträglichen Salzen, dadurch gekennzeichnet, daß man in an sich bekannter Weise

a) für den Fall, daß der Rest R₃ über eine Alkylengruppe

verfügt, die mit dem Thiazolidinoiiring verbunden werden soll, eine Verbindung der allgemeinen Formel II

0 S-C » _o-c-CH= C C=O (ii),

in welcher R. und R₂ die oben genannte Bedeutung haben und X Wasserstoff oder ein Alkaliraetallatom darstellt,

mit einer Verbindung der allgemeinen Formel III

V-R₆ (HD,

in welcher V eine reaktive Estergruppe und Rg einen niederen Alkyl- oder Aralkylrest oder den Rest

/^R4

-(CH₀) -N darstellt, in dem R. ^n_x 4

und Rg die oben genannte Bedeutung haben und η die Zahlen 1, 2, oder

3 darstellt

— 36 —'

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b) für den Fall, daß der Rest R₃ eine Aminogruppe darstellt, die direkt über ein Stickstoffatom mit dem Thiazolidinonring verbunden werden soll, eine Verbindung der allgemeinen Formel IV

R₁-O-C-CH = C C=O (IV),

^{1 N}N⁷

^R2

in welcher R- und R₂ die oben genannte Bedeutung haben und Y ein Halogenatora darstellt,

mit einer Verbindung der allgemeinen Formel V

in v/elcher R. und R₅ die oben genannte Bedeutung besitzen,

umsetzt und gegebenenfalls anschließend in an sich bekannter Weise in die pliarmakologisch verträglichen Salze überführt.

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5. Arzneimittel mit hcpatoprotektiven und curativ-antibepatotoxischer Wirkung, dadurch gekennzeichnet, daß es mindestens eine Verbindung der allgemeinen Formel I bzw. gegebenenfalls deren pharmakolögischverträgliche Salze enthält.

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