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CN113512490B - 一种自驱动微流控检测装置及其用途 - Google Patents

一种自驱动微流控检测装置及其用途 Download PDF

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CN113512490B CN202110418804.3A CN202110418804A CN113512490B CN 113512490 B CN113512490 B CN 113512490B CN 202110418804 A CN202110418804 A CN 202110418804A CN 113512490 B CN113512490 B CN 113512490B
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Abstract

本发明公开了一种自驱动微流控检测装置及其用途，装置包括：上盖，固定于上盖下的底板，设置于上盖和底板之间的夹层，设置于上盖上的加样孔，连接于加样孔的微流控导流组件，设置于夹层上并位置对应于微流控导流组件的加样槽，设置于夹层上并连接于微流控导流组件的功能腔室，连接于微流控导流组件的层析试纸；微流控导流组件包括：毛细管导流渠，连接于毛细管导流渠并控制毛细管导流渠的联通和断开的通断连接器；本装置实现了加样和检测过程的精确控制，提高检测准确性，无需专业培训即可快速简便的操作，安全可靠；本装置可对多种样本进行检测，具有十分广泛的适用范围。

Description

一种自驱动微流控检测装置及其用途
技术领域
本发明涉及生物检测领域，特别是一种自驱动微流控检测装置及其用途。
背景技术
随着科学技术的发展，病原体、环境微生物、生化指标、肿瘤和器官标志物、毒品等领域的检测技术和设备得到了长足的发展。如应用核酸扩增原理的PCR仪、恒温扩增仪，在病原体、环境微生物检测领域正在逐渐取代传统的涂片或镜检的方法；自动化化学发光平台为生化指标、肿瘤标志物等检测项目提供了灵敏、快速、高通量的解决方案。
检测需求的扩大和检测场景丰富，使得POCT(point-of-care testing)式的检测成为近年来检测领域发展的主要方向之一。POCT检测是指在采样现场即刻进行分析，快速得到检验结果的一种检测形式。如POCT核酸检测仪，将核酸提取、扩增、荧光检测等功能全部整合在一台小型化的仪器上，可以在非实验室条件下进行快速、准确的核酸检测。
与传统的大型设备或标准实验室相比，POCT检测设备为广大基层单位，偏远地区或其他医疗条件不足的场景，提供了现场检测手段。同时，它也为对检测时间较为敏感的检测项目提供了便捷的快速方案。许多POCT产品如小型血糖仪，尿糖试纸装置等已经开始走进居家场景，由使用者以自检的形式完成检测。
许多情况下，人们希望能够通过自检的方式完成检测；而在一些野外环境或者缺乏专业人员、设备的情况下，人们更是迫切需要一种成本低廉，快速简单，结果准确，不需要专业培训即可使用的检测装置。该装置应具有广泛的场景适应性和使用安全性，能够在没有外部电源、水源的情况下进行检测。即使出现错误的操作，该装置亦不会对使用者产生危害性的后果。
目前的小型检测装置依然存在着诸多的问题：1，部分小型化检测仪器依然需要外部电源、水源，限制了应用的环境；2，目前小型化检测仪器对于老百姓来说，依然存在成本过高的问题；3，由于核酸检测往往需要进行核酸扩增或荧光信号的采集和分析，需要较为复杂的设备和专业技巧，目前国内居家自检的设备，仍不能实现核酸检测；4，目前的试纸类自检产品虽然满足了一定的要求，但是依然存在加样不精确，难以进行定量和多重检测困难等问题。5，目前的家庭检测装置缺乏灵活性，存在重复开发和资源浪费的问题。
市场需要一种成本低廉，快速简便，能够实现加样和检测过程的精确控制，安全可靠、无需经过专业培训即可使用的一次性检测装置，本发明解决这样的问题。
发明内容
为解决现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种自驱动微流控检测装置及其用途，采用微流控技术，实现了加样和检测过程的精确控制，提高检测准确性，无需专业培训即可快速简便的操作，安全可靠。
为了实现上述目标，本发明采用如下的技术方案：
一种自驱动微流控检测装置，包括：上盖，固定于上盖下的底板，设置于上盖和底板之间的夹层，设置于上盖上的加样孔，连接于加样孔的微流控导流组件，设置于夹层上并位置对应于微流控导流组件的加样槽，设置于夹层上并连接于微流控导流组件的功能腔室，显示检测结果的结果显示件；微流控导流组件包括：毛细管导流渠，连接于毛细管导流渠之间并控制毛细管导流渠的联通和断开的通断连接器。
前述的一种自驱动微流控检测装置，毛细管导流渠由多个毛细管导流渠单元组成；毛细管导流渠单元包括：两片平行的毛细管导流片，形成于毛细管导流片之间的导流通道。
前述的一种自驱动微流控检测装置，两片平行的毛细管导流片之间的间距范围为：0.01-2mm。
前述的一种自驱动微流控检测装置，在导流通道内的液体分子之间的吸引力为内聚力，在导流通道内的液体分子与毛细管导流片之间的吸引力为附着力；附着力大于内聚力。
前述的一种自驱动微流控检测装置，毛细管导流片的端部设置有向下延伸的桥接部。
前述的一种自驱动微流控检测装置，毛细管导流渠为三级毛细管导流渠，功能腔室为二级功能腔室；三级毛细管导流渠分别是：连接于加样槽与一级功能腔室之间的一级毛细管导流渠，连接于通断连接器与二级功能腔室之间的二级毛细管导流渠，连接于二级功能腔室与结果显示件之间的三级毛细管导流渠。
前述的一种自驱动微流控检测装置，一级功能腔室设置有缺口。
前述的一种自驱动微流控检测装置，通断连接器包括：连接于功能腔室的第一缓冲槽，连接于第一缓冲槽并放置毛细管导流渠的第二缓冲槽，设置于第一缓冲槽与第二缓冲槽之间的隔断；隔断的高度低于第一缓冲槽、第二缓冲槽的高度。
前述的一种自驱动微流控检测装置，通断连接器包括：连接于功能腔室的连接槽，放置在连接槽内并对应于毛细管导流渠下的吸水膨胀件。
前述的一种自驱动微流控检测装置，毛细管导流渠在加样孔下方位置相互交叉设置，交叉点位于加样孔中心的下方。
前述的一种自驱动微流控检测装置，还包括：设置于上盖上并位于结果显示件上方的结果阅读窗口，贴合于功能腔室底部并设置于底板内的加热模块，连接于加热模块的温控装置，连接于加热模块并固定于底板内的电源，连接于电源并固定于底板内的开关、指示灯，设置于上盖上的开关孔，设置于上盖上的指示灯窗口，设置于夹层上的指示灯孔。
前述的一种自驱动微流控检测装置，还包括：设置于上盖、底板上并用于组装的卡扣，设置于上盖、夹层上的结果显示件固定组件，设置于上盖上并匹配于功能腔室的功能腔室上盖，固定于加样孔上的加样孔盖。
前述的一种自驱动微流控检测装置的用途，装置预装有核酸检测试剂并用于生物核酸检测。
前述的一种自驱动微流控检测装置的用途，用于核酸检测新冠/新冠突变株/甲流/乙流病毒核酸检测包括如下内容：
采用4通道自驱动微流控检测装置，4通道自驱动微流控检测装置为加样孔通过毛细管导流渠与四个功能腔室连接，每个功能腔室对应一条层析试纸，一个结果阅读窗；
毛细管导流渠的毛细管导流片的材质为PE材质，毛细管导流片的间距为0.2mm；
采用的层析试纸为核酸免疫层析试纸；
步骤一，将新冠检测试剂系统，新冠B.1.1.7检测试剂系统，甲流检测试剂系统，乙流检测试剂系统预装于4个功能腔室中；
新冠检测试剂系统的引物探针包括：
正向外围引物：GGCAGTCAAGCCTCTTCTC，反向外围引物：TCTGTCAAGCAGCAGCAAAG，正向交叉引物：TTCCCCTACTGCTGCCTGGAGTTCCTCATCACGTAGTCGC，反向加速引物：AAGAGCAGCATCACCG，反向探针1：荧光标记物-GAATTTCTTGAACTGTTGCG，反向探针2：荧光标记物-TTCCCCTACTGCTGCCTGGA；新冠B.1.1.7检测试剂系统的引物探针包括：正向外围引物：TTCTTTCACACGTGGTGT，反向外围引物：GACAGGGTTATCAAACCTCT，正向交叉引物：AGGTAAGAACAAGTCCTGAGTTGATTATTACCCTGACAAAGTTTTCAG，反向加速引物：GTACCATTGGTCCCAGA，反向探针1：荧光标记物-GTCCCAGAGATAGCATGG，反向探针2：荧光标记物-AGGTAAGAACAAGTCCTGAGTTGA；甲流检测试剂系统的引物探针包括：正向外围引物：CAGAGGGCAATGATGGATCA，反向外围引物：TCCCGACCAGTGAGTACC，正向交叉引物：CCTCAGAATGAGTGCTGACCGTAAGTCGAAACCCAGGAAACG，反向加速引物：CTTCCCTTTCAAAGTCATGCCCA，反向探针1：荧光标记物-AGGAAAATGAGGTCTTCAATCTCAG，反向探针2：荧光标记物-CCTCAGAATGAGTGCTGACCGT；乙流检测试剂系统的引物探针包括：正向外围引物：CTTACCAATGGGTGCTTAA，反向外围引物：CGAAAAACAGAAAGGCAACAA，正向交叉引物：ATCCCATTGGAACATGTCTTCAAATTTAGTAACATTGAAGGCTCAG，反向加速引物：CTCAGAAGATGGCTGGTCAGTTTTCATAACCTCTTGGTCTC，反向探针1：荧光标记物-GTCTTCTTTTCCCAAAAGAAACTG，反向探针2：荧光标记物-CAAGAGCAGTGCTCAAACAAATGA；
步骤二，采集测试者咽拭子样本；步骤三，将拭子头部浸入采样液中混匀；步骤四，将装置放置于水平台面，将采样液全部加入加样孔中，盖上加样孔盖；步骤五，反应温度50-65℃，静置10-30分钟；步骤六，随即将清洗液加入加样孔中，盖上加样孔盖，静置5-15分钟；步骤七，读取结果。
前述的一种自驱动微流控检测装置的用途，用于大肠杆菌、肠炎沙门氏菌检测包括如下内容：
采用2通道自驱动微流控检测装置，2通道自驱动微流控检测装置为加样孔通过毛细管导流渠与两个功能腔室连接，每个功能腔室对应一条层析试纸，一个结果阅读窗；
毛细管导流渠的毛细管导流片的材质为玻璃材质，毛细管导流片之间的间距为1mm；
采用的层析试纸为核酸免疫层析试纸；
步骤一，将大肠杆菌检测试剂系统，肠炎沙门氏菌检测试剂系统预装于2个功能腔室中；
大肠杆菌检测试剂系统的引物探针包括：
正向外围引物：ACCGTCAGGAAGCGGTAC，反向外围引物：TTTCACCCACTCTTCCTGGAT，正向交叉引物：AGACGGTTGGAGTTGGAGGAGTGCAGAACAGGCGGAAGTT，反向加速引物：GTCTTTCGCATCGTCAATCAAAA，反向探针1：荧光标记物-TTTTCGAACCGACCACCAACAC，反向探针2：荧光标记物-AGACGGTTGGAGTTGGAGGAGT；肠沙门氏菌检测试剂系统的引物探针包括：正向外围引物：CGTGATGCTGAAAGTACCGA，反向外围引物：GGCCGCCAAAACTTTCCTGA，正向交叉引物：CCACCGCGTACGGACTTCACCGAAACACAAACGGGCAAG，反向加速引物：AGATCTTTTAGCAATTGCTTCT，反向探针1：荧光标记物-TGCCGCGCATACGGAACAG，反向探针2：荧光标记物-CCACCGCGTACGGACTTCAC；步骤二，使用沾有少量采样液的拭子对待测物表面进行大范围擦拭5-20次；步骤三，将拭子头部浸入采样液中混匀；步骤四，将装置放置于水平台面，将采样液全部加入加样孔中，盖上加样孔盖；步骤五，反应温度50-75℃，静置10-30分钟；步骤六，随即将清洗液加入加样孔中，盖上加样孔盖，静置5-15分钟；步骤七，读取结果。
前述的一种自驱动微流控检测装置的用途，用于肛拭子中肠炎沙门氏菌检测包括如下内容：
采用2通道自驱动微流控检测装置，2通道自驱动微流控检测装置为加样孔通过毛细管导流渠与两个功能腔室连接，每个功能腔室对应一条层析试纸，一个结果阅读窗；
毛细管导流渠的毛细管导流片的材质为玻璃材质，毛细管导流片之间的间距为0.5mm；
采用的层析试纸为核酸免疫层析试纸；
步骤一，将特异性检测肠炎沙门氏菌的扩增试剂系统，装有人缘GAPDH基因的质控扩增试剂系统预装于2个功能腔室中；肠炎沙门氏菌的扩增试剂系统的引物探针包括：正向外围引物：CGTGATGCTGAAAGTACCGA，反向外围引物：GGCCGCCAAAACTTTCCTGA，正向交叉引物：CCACCGCGTACGGACTTCACCGAAACACAAACGGGCAAG，反向加速引物：AGATCTTTTAGCAATTGCTTCT，反向探针1：荧光标记物-TGCCGCGCATACGGAACAG，反向探针2：荧光标记物-CCACCGCGTACGGACTTCAC；装有人缘GAPDH基因的质控扩增试剂系统的引物探针包括：正向外围引物：AGAACGGGAAGCTTGTCATC，反向外围引物：CGAACATGGGGGCATCAG，正向交叉引物：CAGAGGGGGCAGAGATGAATCTTCCAGGAGCGAGATCC，反向加速引物：ATCTTCCAGGAGCGAGATCCCAGAGGGGGCAGAGATGA，反向探针1：荧光标记物-CAAAATCAAGTGGGGCGA，反向探针2：荧光标记物-GGGAGCCAAAAGGGTC；步骤二，采集肛拭子；步骤三，将拭子头部浸入采样液中混匀，使用滤膜对采样液进行过滤，滤去残渣；步骤四，将装置放置于水平台面，将采样液全部加入加样孔中，盖上加样孔盖；步骤五，反应温度50-75℃，静置10-30分钟；步骤六，随即将清洗液加入加样孔中，盖上加样孔盖，静置5-15分钟；步骤七，读取结果。
前述的一种自驱动微流控检测装置的用途，用于尿液样本中微生物检测包括如下内容：
采用4通道自驱动微流控检测装置，4通道自驱动微流控检测装置为加样孔通过毛细管导流渠与四个功能腔室连接，每个功能腔室对应一条层析试纸，一个结果阅读窗；
采用的层析试纸为核酸免疫层析试纸；
毛细管导流渠的毛细管导流片的材质为PE材质，毛细管导流片之间的间距为0.5mm；
步骤一，将大肠杆菌检测试剂系统，肠炎沙门氏菌检测试剂系统预装于4个功能腔室中；
解脲支原体检测试剂系统的引物探针包括：
正向外围引物：GTGATTTAACTGTAGAACAAGAACA，反向外围引物：AGGACCACTATATTGTAGTAGTGC，正向交叉引物：GGCATGCGATATGAAACACCATAGATCTTTTTTGACCAGGATC，反向加速引物：ATTATGATTTTTAACTGGTTCTTC，反向探针1：荧光标记物-CACCATTTTTAATTACAGTAACT，反向探针2：荧光标记物-GGCATGCGATATGAAACACCA；金黄色葡萄球菌检测试剂系统的引物探针包括：正向外围引物：CTGAATATGCAATGAAAGTAACTGA，反向外围引物：TTTTTCTCTTTGCATATTATCGC，正向交叉引物：GACAACGCTTCTTTATCATTTGTGACAAGAGCTAGAGTCGTTAGC，反向加速引物：ATAATTTCTTCAAGTCGTGCCGC，反向探针1：荧光标记物-GTGATACCAGCATGAATCGGTTTA，反向探针2：荧光标记物-GACAACGCTTCTTTATCATTTGTGA；淋病奈瑟球菌检测试剂系统的引物探针包括：正向外围引物：GCTTTTAAATCCAATACCGTATT，反向外围引物：TTGAGTTCGATGGTGCTG，正向交叉引物：GAGGCCATTTACGCCCAATCAACAATAAAATATCCATCACCACTG，反向加速引物：GTGCCGTCAAGGGAAGGTTG，
反向探针1：荧光标记物-GCCCAATCCCAAGCCGTCG，反向探针2：荧光标记物-GAGGCCATTTACGCCCAATC；白色念球菌检测试剂系统的引物探针包括：正向外围引物：CGAGTTGCCCCAAGACATG，反向外围引物：AATGACCGCTCTGAGTGATG，正向交叉引物：CAGGCCACAAACCCACCAAAGAGAATTGTCGAAAATCGCCCG，反向加速引物：GTGCTCTAATGGGGCAATTTCCA，反向探针1：荧光标记物-ATGCTGAGCCGGAGCCTTTA，反向探针2：荧光标记物-CAGGCCACAAACCCACCAAAGA；步骤二，使用干燥的拭子头部沾取尿液样本，当拭子顶部吸收到样本即可取出；步骤三，将拭子头部浸入采样液中混匀；步骤四，将装置放置于水平台面，将采样液全部加入加样孔中，盖上加样孔盖；步骤五，反应温度50-75℃，静置10-30分钟；步骤六，随即将清洗液加入加样孔中，盖上加样孔盖，静置5-15分钟；步骤七，读取结果。
前述的一种自驱动微流控检测方法，用于定量检测肾脏标志物包括如下内容：
采用4通道自驱动微流控检测装置，4通道自驱动微流控检测装置为加样孔通过毛细管导流渠与四个功能腔室连接，每个功能腔室对应一条层析试纸，一个结果阅读窗；
毛细管导流渠的毛细管导流片的材质为PP材质，毛细管导流片之间的间距为0.4mm；
步骤一，制备纳米金；步骤二，制备金标RBP单克隆抗体1；步骤三，将NC膜附在PVC底板，用往复划膜仪在NC膜的各个位置喷RBP单克隆抗体2及羊抗鼠二抗，分别为检测线(T线)和质控线(C线)，烘干；步骤四，在金标RBP单克隆抗体溶液中加入细胞融合剂；然后喷于玻璃纤维膜的结合垫上，烘干；步骤五，将玻璃纤维素膜的样品垫、玻璃纤维素膜的结合垫、NC膜和吸水垫组装成为检测试纸条，调整试纸条的灵敏度；步骤六，将检测试纸条组装于自驱动微流控检测装置中；步骤七，在4个功能腔室中依次预装四个梯度的生理盐水；步骤八，将尿液样本加入检测装置的加样孔中，吸出多余的样本，在微流控导流装置的控制下，进入4个功能腔室中，样本在4个功能腔室中分别被稀释100倍，10倍稀释，2倍稀释，和不稀释。步骤九，读取结果。
前述的一种自驱动微流控检测装置的用途，应用于甲流病毒、乙流病毒检测包括如下内容：
采用2通道自驱动微流控检测装置，2通道自驱动微流控检测装置为加样孔通过毛细管导流渠与两个功能腔室连接，每个功能腔室对应一条层析试纸，一个结果阅读窗；在核酸免疫试纸上设置有两条T线，分别显示甲流和乙流的检测结果；
采用的层析试纸为核酸免疫层析试纸；
毛细管导流渠的毛细管导流片的材质为玻璃材质，毛细管导流片之间的间距为0.2mm；
步骤一，将甲流病毒检测试剂系统、将乙流病毒检测试剂系统，按照系统的成份组成，依次预装于两个功能腔室中；
甲流病毒检测试剂系统的引物探针包括：正向外围引物：CAGAGGGCAATGATGGATCA，反向外围引物：ATCCCGACCAGTGAGTACC，正向交叉引物：CCTCAGAATGAGTGCTGACCGTAAGTCGAAACCCAGGAAACG，反向加速引物：CTTCCCTTTCAAAGTCATGCCCA，反向探针1：荧光标记物-AGGAAAATGAGGTCTTCAATCTCAG，反向探针2：荧光标记物-CCTCAGAATGAGTGCTGACCGT；乙流病毒检测试剂系统的引物探针包括：正向外围引物：ACTTACCAATGGGTGCTTAA，反向外围引物：CGAAAAACAGAAAGGCAACAA，正向交叉引物：GCATCCCATTGGAACATGTCTTCAAATTTAGTAACATTGAAGGCTCAG，反向加速引物：CCTCAGAAGATGGCTGGTCAGTTTTCATAACCTCTTGGTCTC，反向探针1：荧光标记物-GTCTTCTTTTCCCAAAAGAAACTG，反向探针2：荧光标记物-CAAGAGCAGTGCTCAAACAAATGA；步骤二，采集测试者咽拭子样本；步骤三，将拭子头部浸入采样液中混匀；步骤四，将装置放置于水平台面，将采样液全部加入加样孔中，盖上加样孔盖；步骤五，反应温度50-65℃，静置10-30分钟；步骤六，随即将清洗液加入加样孔中，盖上加样孔盖，静置5-15分钟；步骤七，读取结果。
本发明的有益之处在于：
本发明的装置采用微流控导流设计，毛细管导流渠相互交叉，交叉的结构能够起到液体储存和缓冲的作用，因此可以实现各个流向的液体平衡；本发明的毛细管导流片的结构和材质的配合使得附着力大于内聚力，液体可以浸润接触面，并形成毛细管作用，从而充满两片毛细管导流片之间的空间，起到导流的作用；从而实现了液体流动的精准控制，提高精确性的同时避免了交叉污染，实现了核酸检测的居家自检；
本发明的装置无需外部电源、水源；无需专业实验室环境；无需专业培训；在不当操作的情况下亦不会发生触电、机械性伤害等危害性后果，操作简便适合普通群众进行居家式检测，以及一些野外环境或者缺乏专业人员、设备的条件下的检测；
本发明的装置在微流控，多重检测的支持下，能够进行定量检测；
本发明的装置具有高度的灵活性，可应用于传染病检测、病原体分型检测、环境微生物检测、生化指标检测、标志物检测、毒品检测等多个领域。
附图说明
图1是本发明上盖的一种实施例的俯视图；
图2是本发明上盖的一种实施例的仰视图；
图3是本发明上盖的一种实施例的侧视图；
图4是本发明夹层的一种实施例的上视图；
图5是本发明装置的一种实施例的截面图；
图6是本发明通断连接器的一种实施例的结构示意图；
图7是本发明通断连接器的另一种实施例的断开状态的结构示意图；
图8是本发明通断连接器的另一种实施例的连接状态的结构示意图；
图9是本发明的毛细管导流片的一种实施例的结构示意图；
图10是本发明的毛细管导流片的另一种实施例的结构示意图。
图中附图标记的含义：
1上盖，2底板，3夹层，4加样孔，5毛细管导流渠，51毛细管导流渠单元，511毛细管导流片，5111桥接部，512导流通道，501一级毛细管导流渠，502二级毛细管导流渠，503三级毛细管导流渠，6通断连接器，601第一缓冲槽，6011缺口，602第二缓冲槽，603隔断，604吸水垫，605连接槽，7加样槽，8功能腔室，801一级功能腔室，802二级功能腔室，9层析试纸，10加热模块，11结果阅读窗口，12电池，13开关，14功能腔室上盖，15开关孔，16指示灯窗口，17指示灯孔，18卡扣，19加样孔盖，20、21结果显示件固定组件。
具体实施方式
以下结合附图和具体实施例对本发明作具体的介绍。
如图1、2、3、4、5所示，一种自驱动微流控检测装置，包括：上盖1，固定于上盖1下的底板2，设置于上盖1和底板2之间的夹层3，设置于上盖1上的加样孔4，连接于加样孔4的微流控导流组件，设置于夹层3上并位置对应于微流控导流组件的加样槽7，设置于夹层3上并连接于微流控导流组件的功能腔室8，显示检测结果的结果显示件，设置于上盖1上并位于结果显示件上方的结果阅读窗口11，贴合于功能腔室8底部并设置于底板2内的加热模块10，连接于加热模块10的温控装置，连接于加热模块10并固定于底板2内的电源，连接于电源并固定于底板2内的开关13、指示灯，设置于上盖1上的开关孔15，设置于上盖1上的指示灯窗口16，设置于夹层3上的指示灯孔17，设置于上盖1、底板2上并用于组装的卡扣18，设置于上盖1、夹层3上的结果显示件固定组件20、21，设置于上盖1上并匹配于功能腔室8的功能腔室上盖14，固定于加样孔4上的加样孔盖19。结果显示件可以根据检测类型连接不同的零部件，可以连接上盖、夹层、底板等不受限制。
反应试剂：为检测时所用的物料，预置于功能腔室内，根据不同的检测项目，物料所含的物质和预装的方式可为多种组合。
结果显示件包括：层析试纸9、荧光检测仪器或试纸，可见染料检测试纸或装置，电信号检测仪等，无论是检测的方法还是检测的设备都不被限制等，只要能够连接反应后试剂显示出检测结果的产品都适用于本发明；其中层析试纸9用来呈现检测结果，以固定有检测线和质控线的条状纤维层析材料为固定相，测试液为流动相，荧光标记抗体或抗原固定于连接垫，通过毛细管作用使待分析物在层析条上移动和捕获从而进行检测。
功能腔室为给予发生物理反应或化学反应空间的腔室；不受检测类型和对象的限制。
加样孔4和加样孔盖19位于上盖1顶部的一端的外表面，加样孔4的内径和加样孔盖19下方柱形部分的外径匹配，通过盖上和打开加样孔盖19可实现加样孔4的开放和密闭。
功能腔室上盖14位于上盖1顶部的内表面，其形状和位置与夹层3上的功能腔室匹配。当装置完整组装后，功能腔室上盖14即可盖于功能腔室的上方，起到防止液体无序溢出的作用。
结果显示件固定组件20、21位于上盖1顶部的内表面和夹层3的上表面，由结果显示件固定凸起组成。当装置完整组装后，结果显示件固定凸起起到固定和托起免疫试纸的作用。
结果阅读窗口11位于上盖1的顶部，为透明材质，当装置完成组装时，结果阅读窗口11位于结果显示件的上方。当使用装置进行检测时，可通过结果阅读窗口11进行测试结果的读取。结果阅读窗口11可根据需要印刷引导结果阅读的图文。
上盖1和底板2上都设置有卡扣18，上盖1的卡扣18位于上盖1的侧部的内表面，用于和夹层3进行组装；底板2的卡扣18，用于和上盖1进行固定组装。
加样槽7位于夹层3的上表面，加样槽7包括：设置于的边缘位置的加样凸起，起到容纳液体的作用，形成于加样凸起之间并数条相互交叉的加样凹槽。当装置完整组装时，加样槽7与加样孔4位置对应，加样槽7的加样凹槽与上盖1的微流控导流组件的位置对应。
功能腔室一端与加样槽7相连，另一端与微流控导流组件相连。功能腔室为试剂与样本发生反应或混合的位置。
微流控导流组件连接加样孔4、功能腔室、结果显示件。微流控导流组件包括：毛细管导流渠5，连接于毛细管导流渠5并控制毛细管导流渠5的联通和断开的通断连接器6。
毛细管导流渠5由多个毛细管导流渠单元51组成；毛细管导流渠单元51包括：两片平行的毛细管导流片511，形成于毛细管导流片511之间的导流通道512。在导流通道512内的液体分子之间的吸引力为内聚力，在导流通道512内的液体分子与毛细管导流片511之间的吸引力为附着力；附着力大于内聚力。毛细管导流片511的材质和表面纹理不受限制，可以根据检测的对象进行调节；作为一种实施例，毛细管导流片511的材质可为塑料，金属，玻璃，高分子聚合物等；毛细管导流片511的表面纹理可为光滑表面、磨砂表面及特定纹路。作为一种实施例，两片平行的毛细管导流片511之间的间距范围为：0.01-2mm。需要说明的是：这里的举例并非穷举，只要是能够让附着力大于内聚力的材质、纹理、间距都在本发明的保护范围内。
如图9、10所示，毛细管导流片511的端部设置有向下延伸的桥接部5111，作为一种实施例，如图9所示，毛细管导流片511的一端设置有一个桥接部5111，桥接部5111向下弯曲，桥接部5111使得毛细管导流片511的末端与功能腔室中预装的反应物料接触。作为一种实施例，如图10所示，毛细管导流片511的两端设置有两个桥接部5111，桥接部5111向下延伸，整体呈U型。
毛细管导流渠5在加样孔4下方位置相互交叉设置，交叉点位于加样孔4中心的下方。
该装置亦可根据不同的检测需求，功能腔室和毛细管导流渠的构成可为多级结构：如图6、7所示，具体的结构体现如下所述。
作为一种实施例，如图6所示，毛细管导流渠5为三级毛细管导流渠503，功能腔室8为二级功能腔室802；三级毛细管导流渠503分别是：连接于加样槽7与一级功能腔室801之间的一级毛细管导流渠501，连接于通断连接器6与二级功能腔室802之间的二级毛细管导流渠502，连接于二级功能腔室802与层析试纸9之间的三级毛细管导流渠503。如图6所示，通断连接器6包括：连接于一级功能腔室801的第一缓冲槽601，连接于第一缓冲槽601并放置二级毛细管导流渠502的第二缓冲槽602，设置于第一缓冲槽601与第二缓冲槽602之间的隔断603；隔断603的高度低于第一缓冲槽601、第二缓冲槽602的高度。第一缓冲槽601与一级功能腔室801之间设置有缺口6011，引导液体流向第一缓冲槽601。运行过程为：当测试样本从加样孔4加入后，经一级毛细管导流渠501引导至一级功能腔室801进行反应；反应结束后，通过加入更多的液体，使得液体从一级功能腔室801溢出进入第一缓冲槽601，当一级功能腔室801中加入的样本略微过量时，液体从一级功能腔室801的缺口6011溢出至第一缓冲槽601，此时第一缓冲槽601起到隔断603一级功能腔室801与第二缓冲槽602的作用，因为隔断603的高度低于第一缓冲槽601、第二缓冲槽602的高度，当后续继续加入更多的液体时，进入第一缓冲槽601的液体越过隔断603进入第二缓冲槽602，从而实现通断连接器6的连通，经由二级毛细管导流渠502进入二级功能腔室802进行反应，此后通过三级毛细管导流渠503将液体引导至层析试纸9获得结果。
作为另一种实施例，通断连接器6包括：连接于一级功能腔室801的连接槽605，放置在连接槽605内并对应于二级毛细管导流渠502下的吸水膨胀件。作为一种实施例，吸水膨胀件为吸水垫604；需要说明是：吸水膨胀件的材质形状不受限制，只要是能够吸水膨胀实现通断都可以应用于本发明。检测肛拭子中肠炎沙门氏菌时，如图7所示，断开状态时，样本加入后均匀分配至一级功能腔室801中进行反应，一级功能腔室801内的液体通过缺口6011流入连接槽605，吸水垫604吸水膨胀，如图8所示，进入连接状态，吸水垫604接触二级毛细管导流渠502，通过二级毛细管导流渠502将两个反应的扩增产物导流至二级功能腔室802，在二级功能腔室802中进行混合，而后通过三级毛细管导流渠503，将二级功能腔室802与核酸免疫层析试纸9相连，层析试纸9的C线捕获GAPDH系统阳性扩增产物，T线捕获肠炎沙门氏菌扩增系统阳性产物。需要说明的是：这里的一级、二级、三级仅是为了清楚说明结构，并非必须是具有二级功能腔室和三级毛细管导流渠才能使用如上所述的通断连接器，功能腔室和毛细管导流渠的个数是不受限制的。
需要说明的是本发明只举了两个例子，但是这都不是穷举，只要是能够实现试剂液体与毛细管导流渠之间的连接和断开的都受到本发明的启示，都在本发明的保护范围内。除了本发明这样的结构，还可以是在二级毛细管导流渠502与一级功能腔室801之间设置连接管，连接管倾斜或垂直连接于一级功能腔室801，在液体流量达到指定的量后才能连通二级毛细管导流渠502，以此实现通断。也可以利用液压实现通断。也可以通过机械装置实现通断，比如阀门等；膨胀件也可以通过遇热膨胀的原理进行膨胀，在此不一一举例。
加热模块10组件包括：贴合于功能腔室底部并设置于底板2内的加热模块10，连接于加热模块10的温控装置，连接于加热模块10并固定于底板2内的电源，连接于电源并固定于底板2内的开关13、指示灯，设置于上盖1上的开关孔15，设置于上盖1上的指示灯窗口16，设置于夹层3上的指示灯孔17。
电池12，加热模块10、指示灯和开关13固定于底板2的内部。加热模块10：起到为反应提供加热的功能，它与功能腔室的底部贴合，通过电加热和温控装置控制功能腔室的温度。电池12：电池12预装于夹层3和底板2之间的空间，通过电线连接加热模块10、开关13和指示灯，为加热模块10提供电源。指示灯：指示灯起到指示电源是否接通的作用，当电源接通时，指示灯亮起。指示灯窗口16位于上盖1加样孔4一端，为透光材质，其在上盖1内表面的部分具有凸起结构，用于固定指示灯。开关孔15位于上盖1的侧部加样孔4一端，用于安装开关13。指示灯孔17为容纳指示灯的圆孔位于装置的加样孔4一端；开关13：为装置的电源开关13，通过开关13的打开和关闭可以接通和切断装置的电流，从而控制检测反应的进行。
该装置可根据不同的检测需求调整通道数量，如：2通道自驱动微流控检测装置为加样孔4通过毛细管导流渠5与两个功能腔室连接，每个功能腔室对应一条层析试纸9，一个结果阅读窗。4通道自驱动微流控检测装置为加样孔4通过毛细管导流渠5与四个功能腔室连接，每个功能腔室对应一条层析试纸9，一个结果阅读窗。6通道自驱动微流控检测装置为加样孔4通过毛细管导流渠5与6个功能腔室相连，每个功能腔室对应一条层析试纸9，一个结果阅读窗。
需要说明的是：装置可以根据检测项目的需求，选择使用各个组件。如当检测反应不需要加热时可不使用电池12，加热模块10，开关13等以节省制造成本。
本发明装置的操作步骤包括：
1.加样
将检测装置至于水平台面上，打开加样孔盖19，将样本加入加样孔4中。液体在微流控导流装置的引导下，均匀流向各个功能腔室。
2.检测反应
盖上加样孔盖19，打开开关13(如采用非加热检测方法则不需开关13)，静置0-60分钟。
3.层析反应
检测反应完成后，随即打开加样孔盖19，加入缓冲液，使得装置内部的液体从功能腔室流动至层析试纸9。重新盖上上盖1，静置5-15分钟。
4.从样本读取窗口读取测试结果。
以下通过本装置的几个检测应用验证本装置的检测精确度。
应用一，一种自驱动微流控核酸检测装置应用于新冠/新冠突变株/甲流/乙流病毒核酸检测的方法。
检测项目：新型冠状病毒、新型冠状病毒突变株B.1.1.7、甲流病毒、乙流病毒。
1，材料和方法
采用4通道自驱动微流控检测装置。4通道自驱动微流控检测装置为加样孔4通过毛细管导流渠5与四个功能腔室连接，每个功能腔室对应一条层析试纸9，一个结果阅读窗。
根据检测液体的特性，该方案中微流控导流装置的材质为PE材质，导流片的间距为0.2mm。
采用的层析试纸9为核酸免疫层析试纸9。
引物和探针如下表1所示：
表1
Figure BDA0003026995310000041
Figure BDA0003026995310000051
DNA聚合酶：Bst 3.0DNA聚合酶(NEB)
反转录酶：AMV反转录酶(NEB)
每个功能腔室中预装的成分为：正向外围引物：1-50pmol，反向外围引物：1-50pmol，正向交叉引物：10-500pmol，反向交叉引物：10-500pmol，正向探针：1-100pmol，反向探针：1-100pmol，DNA聚合酶:5-50U，反转录酶:0.5-8U，dNTP:10-300nmol，BSA:0.1-5μg。
四个检测系统的物料，按照系统的成份组成，依次预装于4个功能腔室中。
采样液成分：5-100mM Tris-HCl，0.5-40μM DTT，0.1～1M Betaine，0.1％～5％TritonX-100，2～15mM MgSO4，pH 7-9@25℃。清洗液成分：5-100mM Tris-HCl，2～15mMNaCl。
检测方法：
1，采集测试者咽拭子样本；
2，将拭子头部浸入0.2-1ml的采样液中，转动混匀或摇动混匀5-15秒；
3，将装置放置于水平台面，将采样液全部加入加样孔4中，盖上加样孔盖19；
4，打开电源开关13，反应温度50-65℃，静置10-30分钟；
5，步骤4完成后，随即将清洗液0.2-1ml加入加样孔4中，盖上加样孔盖19，静置5-15分钟；
6，读取结果。
结果：
使用分别含有新型冠状病毒，新型冠状病毒突变型B.1.1.7,甲流病毒，乙流病毒四种病原体核酸的假病毒作为检测样本进行检测；在采集的拭子上加入假病毒，样本浓度为100000拷贝/每拭子，10000拷贝/拭子，1000拷贝/拭子，100拷贝/拭子，10拷贝/拭子，1拷贝/拭子。每种假病毒，每个样本浓度的重复数为10(n＝10)。检测设阴性对照10测试。
检测结果显示：
当样本浓度为100000拷贝/拭子时，新型冠状病毒假病毒，新型冠状病毒B.1.1.7假病毒,甲流病毒假病毒，乙流病毒假病毒全部检出，检出率均为100％。
当样本浓度为10000拷贝/拭子时，新型冠状病毒假病毒，新型冠状病毒B.1.1.7假病毒,甲流病毒假病毒，乙流病毒假病毒全部检出，检出率均为100％。
当样本浓度为1000拷贝/拭子时，新型冠状病毒假病毒，新型冠状病毒B.1.1.7假病毒,甲流病毒假病毒，乙流病毒假病毒全部检出，检出率均为100％。
当样本浓度为100拷贝/拭子时，新型冠状病毒假病毒检出率为80％；新型冠状病毒B.1.1.7假病毒检出率为50％；甲流病毒假病毒检出率为30％；乙流病毒假病毒检出率为40％；
当样本浓度为10拷贝/拭子时，新型冠状病毒假病毒，新型冠状病毒B.1.1.7假病毒,甲流病毒假病毒，乙流病毒假病毒全部未检出，检出率均为0％。
当样本浓度为1拷贝/拭子时，新型冠状病毒假病毒，新型冠状病毒B.1.1.7假病毒,甲流病毒假病毒，乙流病毒假病毒全部未检出，检出率均为0％。
阴性对照结果为阴性。
结论：
实验结果证明一种自驱动微流控检测装置，应用于新型冠状病毒，新型冠状病毒突变型B117甲流病毒，乙流病毒四种核酸检测，灵敏度达到或优于1000拷贝/拭子。
应用二，一种自驱动微流控核酸检测装置应用于检测食品微生物的方法。
检测项目：大肠杆菌、肠炎沙门氏菌。
1.材料和方法
采用2通道自驱动微流控检测装置，2通道自驱动微流控检测装置为加样孔4通过毛细管导流渠5与两个功能腔室连接，
每个功能腔室对应一条层析试纸9，一个结果阅读窗。
根据检测液体的特性，该方案的微流控导流装置为玻璃材质，导流片之间的间距为1mm。
采用的层析试纸9为核酸免疫层析试纸9。
引物和探针如下表2所示：
表2
Figure BDA0003026995310000061
DNA聚合酶：Bst 3.0DNA聚合酶(NEB)
每个功能腔室中预装的成分为：
正向外围引物：1-50pmol，反向外围引物：1-50pmol，正向交叉引物：10-500pmol，反向交叉引物：10-500pmol，正向探针：1-100pmol，反向探针：1-100pmol，DNA聚合酶:5-50U，dNTP:10-300nmol，BSA:0.1-5μg。
两个检测系统的物料，按照系统的成份组成，依次预装于两个功能腔室中。
采样液成分：5-100mM Tris-HCl，0.5-40μM DTT，0.1～50mg/ml BSA，0.1～1MBetaine，0.1％～5％TritonX-100，2～15mM MgSO4，pH 7-9@25℃。清洗液成分：5-100mMTris-HCl，2～15mM NaCl。
检测方法：
步骤一，使用沾有少量采样液的拭子对食材表面进行大范围擦拭5-20次；
步骤二，将拭子头部浸入0.2-1ml的采样液中，转动混匀或摇动混匀5-15秒；
步骤三，将装置放置于水平台面，将采样液全部加入加样孔4中，盖上加样孔盖19；
步骤四，打开电源开关13，反应温度50-75℃，静置10-30分钟；
步骤五，步骤四完成后，随即将清洗液0.2-1ml加入加样孔4中，盖上加样孔盖19，静置5-15分钟；
步骤六，读取结果。
结果：
使用3批被大肠杆菌污染的食材、3批被肠炎沙门氏菌污染的食材、和三批没有被大肠杆菌和肠炎沙门氏菌污染的食材。采集的拭子样本一式两份，一份按照上述操作方法采集样本，并进行检测。另一份使用qPCR方法进行细菌含量的测定，三批被大肠杆菌污染的食材上采集的拭子标本中菌含量为：13500菌/拭子、6500菌/拭子、16000菌/拭子；三批被肠炎沙门氏菌污染的食材上采集的拭子标本中菌含量为：3500菌/拭子、1200菌/拭子、700菌/拭子。
自驱动微流控核酸检测装置应用于检测食品微生物的方法进行检测的结果如下表3：
表3
Figure BDA0003026995310000062
结论：
检测结果显示：自驱动微流控检测装置应用于检测食品微生物的方法能够一小时内检测食材是否遭到特定微生物的污染，结果准确，其检测灵敏度优于1000菌/拭子。
应用三，一种自驱动微流控检测装置应用于检测尿液样本中微生物的方法
检测项目：解脲支原体、金黄色葡萄球菌、淋病奈瑟球菌、白色念珠菌
2，材料和方法
采用4通道自驱动微流控核酸检测装置，4通道自驱动微流控检测装置为加样孔4通过毛细管导流渠5与四个功能腔室连接，每个功能腔室对应一条层析试纸9，一个结果阅读窗。
根据检测液体的特性，该方案采用的微流控导流装置为PE材质，导流片之间的间距为0.5mm。
采用的层析试纸9为核酸免疫层析试纸9。
引物探针如下表4所示：
表4
Figure BDA0003026995310000071
DNA聚合酶：Bst 3.0DNA聚合酶(NEB)
每个功能腔室中预装的成分为：正向外围引物：1-50pmol，反向外围引物：1-50pmol，正向交叉引物：10-500pmol，反向交叉引物：10-500pmol，正向探针：1-100pmol，反向探针：1-100pmol，DNA聚合酶:5-50U，dNTP:10-300nmol，BSA:0.1-5μg。四个检测系统的物料，按照系统的成份组成，依次预装于4个功能腔室中。
采样液成分：5-100mM Tris-HCl，0.5-40μM DTT，0.1～50mg/ml BSA，0.1～1MBetaine，0.1％～5％TritonX-100，2～15mM MgSO4，pH 7-10@25℃。清洗液成分：5-100mMTris-HCl，2～15mM NaCl。
检测方法：
步骤一，使用干燥的拭子头部沾取尿液样本，当拭子顶部吸收到样本即可取出；
步骤二，将拭子头部浸入0.2-1ml的采样液中，转动混匀或摇动混匀5-15秒后静置5-10分钟；
步骤三，将装置放置于水平台面，将采样液全部加入加样孔4中，盖上加样孔盖19；
步骤四，打开电源开关13，静置30分钟；
步骤五，步骤四完成后，随即将清洗液0.2-1ml加入加样孔4中，盖上加样孔盖19，静置5-15分钟；
步骤六，读取结果。
结果：
对含有解脲支原体、金黄色葡萄球菌、淋病奈瑟球菌、白色念珠菌的尿液进行检测，尿液中各病原体经稀释调整为100000cfu/ml、10000cfu/ml、5000cfu/ml、2000cfu/ml、1000cfu/ml、500cfu/ml、200cfu/ml。每种病原体，每个浓度的重复数为10(n＝10)。
当样本浓度为100000cfu/ml时，解脲支原体、金黄色葡萄球菌、淋病奈瑟球菌、白色念珠菌，检出率均为100％。
当样本浓度为10000cfu/ml时，解脲支原体、金黄色葡萄球菌、淋病奈瑟球菌、白色念珠菌，检出率均为100％。
当样本浓度为5000cfu/ml时，解脲支原体、金黄色葡萄球菌、淋病奈瑟球菌、白色念珠菌，检出率均为100％。
当样本浓度为2500cfu/ml时，解脲支原体、金黄色葡萄球菌、淋病奈瑟球菌检出率为100％，白色念珠菌检出率为60％。
当样本浓度为1000cfu/ml时，解脲支原体检出率为100％，金色葡萄球菌检出率为80％，淋病奈瑟球菌检出率为50％。白色念珠菌检出率为30％。
当样本浓度为500cfu/ml时，解脲支原体检出率为50％，金色葡萄球菌检出率为40％，淋病奈瑟球菌检出率为20％，白色念珠菌未检出。
当样本浓度为250cfu/ml时，解脲支原体检出率为10％，金色葡萄球菌、淋病奈瑟球菌、白色念珠菌均未检出。
结论：
实验结论证明，自驱动微流控检测装置应用于检测尿液样本中微生物的方法可以检出尿液中的病原体。其检出下限分别为：解脲支原体250cfu/ml，金色葡萄球菌500cfu/ml，淋病奈瑟球菌500cfu/ml，白色念珠菌1000cfu/ml。
应用四，一种自驱动微流控检测装置应用于定量检测肾脏标志物的方法。
检测项目：视黄醇结合蛋白(RBP)
材料和方法：
采用4通道自驱动微流控检测装置，4通道自驱动微流控检测装置为加样孔4通过毛细管导流渠5与四个功能腔室连接，每个功能腔室对应一条层析试纸9，一个结果阅读窗。
根据检测液体的特性，该方案中采用的微流控导流装置的导流片为PP材质，导流片的间距为0.4mm。
试剂和制备的步骤：
步骤一，将0.01-0.1％氯酸金溶液加热至沸腾后，在搅拌状态下加入1％柠檬酸三钠，二者体积比为10/1-100/1；当溶液完全变为透明的红色时，继续煮沸5-30分钟，搅拌冷却后，得到所需的纳米金。
步骤二，将步骤1中得到的纳米金溶液用碳酸钾溶液调节pH值至8-10，将鼠抗RBP单克隆抗体1，加入溶液均匀混合，浓度为20-50ng/μl.室温搅拌5-40分钟后，加10％入小牛血清溶液，其体积比为10/1-100/1搅拌20分钟。
步骤三，将步骤2制得的溶液以10000-17000rpm/min、低温离心10-30分钟、去上清。沉淀使用含5％BSA的硼酸盐缓冲液重悬至原体积，再次以同样的方法离心去上清后，加含5％BSA的硼酸盐缓冲液重悬至原体积的1/20，得到金标RBP单克隆抗体1。
步骤四，将NC膜附在PVC底板2，用往复划膜仪在NC膜的不同位置喷点RBP单克隆堂提2及羊抗鼠二抗，分别为检测线(T线)和质控线(C线)，37℃烘干2小时。
步骤五，在步骤3得到的金标RBP单克隆抗体溶液中加入PVP,PEG,蔗糖0.02g/mL,0.02g/mL,0.5g/mL。然后喷于玻璃纤维膜的结合垫上，37℃烘干备用。
步骤六，玻璃纤维素膜的样品垫、结合垫、NC膜和吸水垫604组装成为检测试纸条。通过调整结合垫和测试线的抗体浓度，将该试纸条的灵敏度下限调整为100mg/L。
步骤七，将检测试纸条组装于自驱动微流控检测装置中。
步骤八，在4个功能腔室中依次预装0.2475mL、0.225mL、0.125mL、0mL的生理盐水。
步骤九，将0.6mL的尿液样本加入检测装置的加样孔4中，1分钟后将孔中剩余的样本吸出。在微流控导流装置的控制下，进入4个功能腔室中，并且每个腔室的最终体积为0.25mL。因此样本在4个功能腔室中分别被稀释100倍，10倍稀释，2倍稀释，和不稀释。
步骤十，读取结果。
结果：分别测试4个样本，其中RBP的含量分来自健康人群，A样本浓度为150mg/L,B样本300mg/L，和有肾脏炎症的人群，RBP浓度为C样本1200mg/L和D样本1600mg/L.
检测装置的结果如表5所示：
表5
样本 1号试纸 2号试纸 3号试纸 4号试纸
A - - - +
B - - + +
C - + + +
D - + + +
结果显示A样本的RBP浓度大于100mg/L,B样本浓度大于200mg/L，C样本的浓度大于1000mg/L，D样本的浓度大于1000mg/L。实验结果提示两位患有肾脏验证的受试者，肾脏存在炎症，与实际样本相符。
结论：本发明自驱动微流控检测装置可以用于检测肾脏标志物，并对其进行初步的定量，为肾脏的健康提供初步的判断依据。
应用五，一种自驱动微流控核酸检测装置应用于甲流和乙流检测的方法。
检测项目：甲流病毒、乙流病毒。
1，材料和方法
采用2通道多级自驱动微流控检测装置，2通道自驱动微流控检测装置为加样孔4通过毛细管导流渠5与两个功能腔室连接，每个功能腔室对应一条层析试纸9，一个结果阅读窗。
样本从加样孔4进入后，经一级微流控导流渠进入一级功能腔室801，在一级功能腔室801中由加热装置进行加热进行核酸扩增反应，再通过加入清洗液，使得加入液体的体积超过通断连接器6的灵界值，从而启动通断连接器6使得液体经由二级微流控导流渠进入二级功能腔室802，在二级功能腔室802中，两种反应物充分混合，再经由三级微流控导流渠流至核酸免疫层析试纸9。在核酸免疫试纸上设置有两条T线，分别显示甲流和乙流的检测结果。
根据采样液的特性该方案中，微流控导流装置采用玻璃材质，导流片之间的间距为0.2mm。
采用的层析试纸9为核酸免疫层析试纸9，甲乙流的检测结果在一条试纸条上呈现。
引物和探针如下表6所示：
表6
Figure BDA0003026995310000081
DNA聚合酶：Bst 3.0DNA聚合酶(NEB)；反转录酶：AMV反转录酶(NEB)；每个功能腔室中预装的成分为：正向外围引物：1-50pmol，反向外围引物：1-50pmol，正向交叉引物：10-500pmol，反向交叉引物：10-500pmol，正向探针：1-100pmol，反向探针：1-100pmol；DNA聚合酶:5-50U；反转录酶:0.5-8U；dNTP:10-300nmol；BSA:0.1-5μg。
两个检测系统的物料，按照系统的成份组成，依次预装于两个功能腔室中。
采样液成分：5-100mM Tris-HCl，0.5-40μM DTT，0.1～1M Betaine，0.1％～5％TritonX-100，2～15mM MgSO4，pH 7-9@25℃。清洗液成分：5-100mM Tris-HCl，2～15mMNaCl。
检测方法：
1，采集测试者咽拭子样本；
2，将拭子头部浸入0.2-1ml的采样液中，转动混匀或摇动混匀5-15秒；
3，将装置放置于水平台面，将采样液全部加入加样孔4中，盖上加样孔盖19；
4，打开电源开关13，反应温度50-65℃，静置10-30分钟；
5，步骤4完成后，随即将清洗液0.2-1ml加入加样孔4中，盖上加样孔盖19，静置5-15分钟；
6，读取结果。
结果：
使用分别含有甲流和乙流病毒四的假病毒作为检测样本进行检测；在采集的拭子上加入假病毒，样本浓度为100000拷贝/每拭子，10000拷贝/拭子，1000拷贝/拭子，100拷贝/拭子，10拷贝/拭子。每种假病毒，每个样本浓度的重复数为10(n＝20)。检测设阴性对照10测试。
检测结果显示：
当样本浓度为100000拷贝/拭子时，甲流病毒假病毒，乙流病毒假病毒全部检出，检出率均为100％。
当样本浓度为10000拷贝/拭子时，甲流病毒假病毒，乙流病毒假病毒全部检出，检出率均为100％。
当样本浓度为1000拷贝/拭子时，甲流病毒假病毒检出率为85％，乙流病毒假病毒检出率均为90％。
当样本浓度为100拷贝/拭子时，甲流病毒假病毒检出率为30％；乙流病毒假病毒检出率为40％；
当样本浓度为10拷贝/拭子时，甲流病毒假病毒，乙流病毒假病毒全部未检出，检出率均为0％。
阴性对照结果为阴性。
结论：
实验结果证明一种自驱动微流控检测装置，能够应用于甲流病毒，乙流病毒四种核酸检测，且结果通过多级的微流控导流装置最终呈现在一条试纸条上，结果清晰明确，更加直观。
应用六，自驱动微流控核酸检测装置用于检测肛拭子中肠炎沙门氏菌的方法。
检测项目：肠炎沙门氏菌
1.材料和方法
采用2通道自驱动微流控检测装置。
根据检测液体的特性，该方案的微流控导流装置为玻璃材质，导流片之间的间距为0.5mm，采用的开关13装置为吸水垫604开关13装置。
如7、8所示，当加入液体较少时，开关13装置中的吸水垫604，因为吸收的液体较少，高度较低于二级毛细管导流渠502，无法连接。当操作中加入更多的液体时，吸水垫604的高度增加，并与二级毛细管导流渠502相连，从而连通二级毛细管导流渠502，将液体输送至二级功能腔室802，在二级功能腔室802中进行混合。而后通过三级毛细管导流渠503，将二级功能腔室802与核酸免疫层析试纸9相连，层析试纸9的C线捕获GAPDH系统阳性扩增产物，T线捕获肠炎沙门氏菌扩增系统阳性产物。
采用的层析试纸9为核酸免疫层析试纸9。
引物和探针如下表7所示：
表7
Figure BDA0003026995310000091
DNA聚合酶：Bst 3.0DNA聚合酶(NEB)
每个功能腔室中预装的成分为：
正向外围引物：1-50pmol；反向外围引物：1-50pmol；正向交叉引物：10-500pmol；反向交叉引物：10-500pmol；正向探针：1-100pmol；反向探针：1-100pmol；DNA聚合酶:5-50U；dNTP:10-300nmol；BSA:0.1-5μg；两个检测系统的物料，按照上述成分组成，依次预装于2个功能腔室中。
采样液成分：
5-100mM Tris-HCl，0.5-40μM DTT，0.1～50mg/ml BSA，0.1～1M Betaine，0.1％～5％TritonX-100，2～15mM MgSO4，pH7-9@25℃；清洗液成分：5-100mM Tris-HCl，2～15mMNaCl。
检测方法：
步骤一，采集肛拭子；
步骤二，将拭子头部浸入0.2-1ml的采样液中，转动混匀或摇动混匀5-15秒，使用滤膜对采样液进行过滤，滤去大体积的残渣；
步骤三，将装置放置于水平台面，将采样液全部加入加样孔4中，盖上加样孔盖19；
步骤四，打开电源开关13，反应温度50-75度，静置10-30分钟；
步骤五，步骤四完成后，随即将清洗液0.2-1ml加入加样孔4中，盖上加样孔盖19，静置5-15分钟；
步骤六，读取结果。
结果：
上述操作方法采集样本，并进行检测。
自驱动微流控核酸检测装置应用于检测肛拭子中肠炎沙门氏菌的结果如下表8：
表8
Figure BDA0003026995310000101
结论：
检测结果显示：自驱动微流控检测装置应用于检测肛拭子中肠炎沙门氏菌，能稳定检出样本浓度为1000菌/拭子的样本。证明该装置能够用于检测肛拭子中肠炎沙门氏菌。
本发明采用微流控导流设计，实现了液体流动的精准控制，结果呈现明确，报告时间短，无需专业培训，无需昂贵仪器亦可得到准确的检测结果。该产品在不当操作时，不会产生危害性的后果，具有极高的安全性，十分适合普通群众在家庭进行自我检测。该产品可对尿液，口咽拭子、肛拭子、食材表面刮取拭子等样本进行检测，具有十分广泛的适用范围。通过家庭自检，选择合适的应对措施，可缓解群众的焦虑，避免不必要的医疗资源占用和人群聚集。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和优点。本行业的技术人员应该了解，上述实施例不以任何形式限制本发明，凡采用等同替换或等效变换的方式所获得的技术方案，均落在本发明的保护范围内。
序列表
<110> 杭州优思达生物技术有限公司
<120> 一种自驱动微流控检测装置及其用途
<141> 2021-04-19
<160> 83
<170> SIPOSequenceListing 1.0
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<212> DNA
<213> Artificial Sequence
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ggcagtcaag cctcttctc 19
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<213> Artificial Sequence
<400> 53
gcccaatccc aagccgtcg 19
<210> 54
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 54
gaggccattt acgcccaatc 20
<210> 55
<211> 19
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 55
cgagttgccc caagacatg 19
<210> 56
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 56
aatgaccgct ctgagtgatg 20
<210> 57
<211> 42
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 57
caggccacaa acccaccaaa gagaattgtc gaaaatcgcc cg 42
<210> 58
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 58
atgctgagcc ggagccttta 20
<210> 59
<211> 22
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 59
caggccacaa acccaccaaa ga 22
<210> 60
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 60
cagagggcaa tgatggatca 20
<210> 61
<211> 19
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 61
atcccgacca gtgagtacc 19
<210> 62
<211> 42
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 62
cctcagaatg agtgctgacc gtaagtcgaa acccaggaaa cg 42
<210> 63
<211> 23
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 63
cttccctttc aaagtcatgc cca 23
<210> 64
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 64
aggaaaatga ggtcttcaat ctcag 25
<210> 65
<211> 22
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 65
cctcagaatg agtgctgacc gt 22
<210> 66
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 66
acttaccaat gggtgcttaa 20
<210> 67
<211> 21
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 67
cgaaaaacag aaaggcaaca a 21
<210> 68
<211> 48
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 68
gcatcccatt ggaacatgtc ttcaaattta gtaacattga aggctcag 48
<210> 69
<211> 42
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 69
cctcagaaga tggctggtca gttttcataa cctcttggtc tc 42
<210> 70
<211> 24
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 70
gtcttctttt cccaaaagaa actg 24
<210> 71
<211> 24
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 71
caagagcagt gctcaaacaa atga 24
<210> 72
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 72
cgtgatgctg aaagtaccga 20
<210> 73
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 73
ggccgccaaa actttcctga 20
<210> 74
<211> 39
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 74
ccaccgcgta cggacttcac cgaaacacaa acgggcaag 39
<210> 75
<211> 22
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 75
agatctttta gcaattgctt ct 22
<210> 76
<211> 19
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 76
tgccgcgcat acggaacag 19
<210> 77
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 77
ccaccgcgta cggacttcac 20
<210> 78
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 78
agaacgggaa gcttgtcatc 20
<210> 79
<211> 18
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<213> Artificial Sequence
<400> 79
cgaacatggg ggcatcag 18
<210> 80
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<213> Artificial Sequence
<400> 80
cagagggggc agagatgaat cttccaggag cgagatcc 38
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<213> Artificial Sequence
<400> 81
atcttccagg agcgagatcc cagagggggc agagatga 38
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caaaatcaag tggggcga 18
<210> 83
<211> 16
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 83
gggagccaaa agggtc 16

Claims (15)

1.一种自驱动微流控检测装置，其特征在于，包括：上盖，固定于上盖下的底板，设置于上盖和底板之间的夹层，设置于上盖上的加样孔，连接于加样孔的微流控导流组件，设置于夹层上并位置对应于微流控导流组件的加样槽，设置于夹层上并连接于微流控导流组件的功能腔室，显示检测结果的结果显示件；所述微流控导流组件包括：毛细管导流渠，连接于毛细管导流渠之间并控制毛细管导流渠的联通和断开的通断连接器；所述毛细管导流渠由多个毛细管导流渠单元组成；所述毛细管导流渠单元包括：两片平行的毛细管导流片，形成于毛细管导流片之间的导流通道；在所述导流通道内的液体分子之间的吸引力为内聚力，在所述导流通道内的液体分子与毛细管导流片之间的吸引力为附着力；所述附着力大于内聚力；所述毛细管导流片的端部设置有向下延伸的桥接部；所述毛细管导流渠为三级毛细管导流渠，功能腔室为二级功能腔室；三级毛细管导流渠分别是：连接于加样槽与一级功能腔室之间的一级毛细管导流渠，连接于通断连接器与二级功能腔室之间的二级毛细管导流渠，连接于二级功能腔室与结果显示件之间的三级毛细管导流渠。
2.根据权利要求1所述的一种自驱动微流控检测装置，其特征在于，所述两片平行的毛细管导流片之间的间距范围为：0.01-10mm。
3.根据权利要求1所述的一种自驱动微流控检测装置，其特征在于，所述一级功能腔室设置有缺口。
4.根据权利要求1所述的一种自驱动微流控检测装置，其特征在于，所述通断连接器包括：连接于功能腔室的第一缓冲槽，连接于第一缓冲槽并放置毛细管导流渠的第二缓冲槽，设置于所述第一缓冲槽与第二缓冲槽之间的隔断；所述隔断的高度低于第一缓冲槽、第二缓冲槽的高度。
5.根据权利要求1所述的一种自驱动微流控检测装置，其特征在于，所述通断连接器包括：连接于功能腔室的连接槽，放置在连接槽内并对应于毛细管导流渠下的吸水膨胀件。
6.根据权利要求1所述的一种自驱动微流控检测装置，其特征在于，所述毛细管导流渠在加样孔下方位置相互交叉设置，交叉点位于加样孔中心的下方。
7.根据权利要求1所述的一种自驱动微流控检测装置，其特征在于，还包括：设置于上盖上并位于结果显示件上方的结果阅读窗口，贴合于功能腔室底部并设置于底板内的加热模块，连接于加热模块的温控装置，连接于加热模块并固定于底板内的电源，连接于电源并固定于底板内的开关、指示灯，设置于上盖上的开关孔，设置于上盖上的指示灯窗口，设置于夹层上的指示灯孔。
8.根据权利要求1所述的一种自驱动微流控检测装置，其特征在于，还包括：设置于上盖、底板上并用于组装的卡扣，设置于上盖、夹层上的结果显示件固定组件，设置于上盖上并匹配于功能腔室的功能腔室上盖，固定于加样孔上的加样孔盖。
9.根据权利要求1所述的一种自驱动微流控检测装置的用途，其特征在于，装置预装有核酸检测试剂并用于制备生物核酸检测装置。
10.根据权利要求1所述的一种自驱动微流控检测装置的用途，其特征在于，用于制备核酸检测新冠/新冠突变株/甲流/乙流病毒核酸的检测装置，包括：
其中采用4通道自驱动微流控检测装置，4通道自驱动微流控检测装置为加样孔通过毛细管导流渠与四个功能腔室连接，每个功能腔室对应一条层析试纸，一个结果阅读窗；
所述毛细管导流渠的毛细管导流片的材质为PE材质，毛细管导流片的间距为0.2mm；
采用的层析试纸为核酸免疫层析试纸；
将新冠检测试剂系统，新冠B.1.1.7检测试剂系统，甲流检测试剂系统，乙流检测试剂系统预装于4个功能腔室中；
所述新冠检测试剂系统的引物探针包括：
正向外围引物：GGCAGTCAAGCCTCTTCTC，
反向外围引物：TCTGTCAAGCAGCAGCAAAG，
正向交叉引物：TTCCCCTACTGCTGCCTGGAGTTCCTCATCACGTAGTCGC，
反向加速引物：AAGAGCAGCATCACCG，
反向探针1：荧光标记物-GAATTTCTTGAACTGTTGCG，
反向探针2：荧光标记物-TTCCCCTACTGCTGCCTGGA；
所述新冠B.1.1.7检测试剂系统的引物探针包括：
正向外围引物：TTCTTTCACACGTGGTGT，
反向外围引物：GACAGGGTTATCAAACCTCT，
正向交叉引物：AGGTAAGAACAAGTCCTGAGTTGATTATTACCCTGACAAAGTTTTCAG，
反向加速引物：AGTACCATTGGTCCCAGA，
反向探针1：荧光标记物-GTCCCAGAGATAGCATGG，
反向探针2：荧光标记物-AGGTAAGAACAAGTCCTGAGTTGA；
所述甲流检测试剂系统的引物探针包括：
正向外围引物：CAGAGGGCAATGATGGATCA，
反向外围引物：ATCCCGACCAGTGAGTACC，
正向交叉引物：CCTCAGAATGAGTGCTGACCGTAAGTCGAAACCCAGGAAACG，
反向加速引物：CTTCCCTTTCAAAGTCATGCCCA，
反向探针1：荧光标记物-AGGAAAATGAGGTCTTCAATCTCAG，
反向探针2：荧光标记物-CCTCAGAATGAGTGCTGACCGT；
所述乙流检测试剂系统的引物探针包括：
正向外围引物：ACTTACCAATGGGTGCTTAA，
反向外围引物：CGAAAAACAGAAAGGCAACAA，
正向交叉引物：CATCCCATTGGAACATGTCTTCAAATTTAGTAACATTGAAGGCTCAG，
反向加速引物：CCTCAGAAGATGGCTGGTCAGTTTTCATAACCTCTTGGTCTC，
反向探针1：荧光标记物-GTCTTCTTTTCCCAAAAGAAACTG，
反向探针2：荧光标记物-CAAGAGCAGTGCTCAAACAAATGA。
11.根据权利要求1所述的一种自驱动微流控检测装置的用途，其特征在于，用于制备检测大肠杆菌、肠炎沙门氏菌的检测装置，包括：
采用2通道自驱动微流控检测装置，2通道自驱动微流控检测装置为加样孔通过毛细管导流渠与两个功能腔室连接，每个功能腔室对应一条层析试纸，一个结果阅读窗；
所述毛细管导流渠的毛细管导流片的材质为玻璃材质，毛细管导流片之间的间距为1mm；
采用的层析试纸为核酸免疫层析试纸；
将大肠杆菌检测试剂系统，肠炎沙门氏菌检测试剂系统预装于2个功能腔室中，
所述大肠杆菌检测试剂系统的引物探针包括：
正向外围引物：ACCGTCAGGAAGCGGTAC，
反向外围引物：TTTCACCCACTCTTCCTGGAT，
正向交叉引物：AGACGGTTGGAGTTGGAGGAGTGCAGAACAGGCGGAAGTT，
反向加速引物：GTCTTTCGCATCGTCAATCAAAA，
反向探针1：荧光标记物-TTTTCGAACCGACCACCAACAC，
反向探针2：荧光标记物-AGACGGTTGGAGTTGGAGGAGT；
所述肠炎沙门氏菌检测试剂系统的引物探针包括：
正向外围引物：CGTGATGCTGAAAGTACCGA，
反向外围引物：GGCCGCCAAAACTTTCCTGA，
正向交叉引物：CCACCGCGTACGGACTTCACCGAAACACAAACGGGCAAG，
反向加速引物：AGATCTTTTAGCAATTGCTTCT，
反向探针1：荧光标记物-TGCCGCGCATACGGAACAG，
反向探针2：荧光标记物-CCACCGCGTACGGACTTCAC。
12.根据权利要求1所述的一种自驱动微流控检测装置的用途，其特征在于，用于制备肛拭子中肠炎沙门氏菌的检测装置，包括：
采用2通道自驱动微流控检测装置，2通道自驱动微流控检测装置为加样孔通过毛细管导流渠与两个功能腔室连接，每个功能腔室对应一条层析试纸，一个结果阅读窗；
所述毛细管导流渠的毛细管导流片的材质为玻璃材质，毛细管导流片之间的间距为0.5mm；
采用的层析试纸为核酸免疫层析试纸；
将特异性检测肠炎沙门氏菌的扩增试剂系统，装有人缘GAPDH基因的质控扩增试剂系统预装于2个功能腔室中；
所述肠炎沙门氏菌的扩增试剂系统的引物探针包括：
正向外围引物：CGTGATGCTGAAAGTACCGA，
反向外围引物：GGCCGCCAAAACTTTCCTGA，
正向交叉引物：CCACCGCGTACGGACTTCACCGAAACACAAACGGGCAAG，
反向加速引物：AGATCTTTTAGCAATTGCTTCT，
反向探针1：荧光标记物-TGCCGCGCATACGGAACAG，
反向探针2：荧光标记物-CCACCGCGTACGGACTTCAC；
所述装有人缘GAPDH基因的质控扩增试剂系统的引物探针包括：
正向外围引物：AGAACGGGAAGCTTGTCATC，
反向外围引物：CGAACATGGGGGCATCAG，
正向交叉引物：CAGAGGGGGCAGAGATGAATCTTCCAGGAGCGAGATCC，
反向加速引物：ATCTTCCAGGAGCGAGATCCCAGAGGGGGCAGAGATGA，
反向探针1：荧光标记物-CAAAATCAAGTGGGGCGA，
反向探针2：荧光标记物-GGGAGCCAAAAGGGTC。
13.根据权利要求1所述的一种自驱动微流控检测装置的用途，其特征在于，用于制备尿液样本中微生物的检测装置，包括：
采用4通道自驱动微流控检测装置，4通道自驱动微流控检测装置为加样孔通过毛细管导流渠与四个功能腔室连接，每个功能腔室对应一条层析试纸，一个结果阅读窗；
采用的层析试纸为核酸免疫层析试纸；
所述毛细管导流渠的毛细管导流片的材质为PE材质，毛细管导流片之间的间距为0.5mm；
将解脲支原体检测试剂系统，金黄色葡萄球菌检测试剂系统，淋病奈瑟球菌检测试剂系统，白色念球菌检测试剂系统预装于4个功能腔室中；
所述解脲支原体检测试剂系统的引物探针包括：
正向外围引物：GTGATTTAACTGTAGAACAAGAACA，
反向外围引物：AGGACCACTATATTGTAGTAGTGC，
正向交叉引物：GGCATGCGATATGAAACACCATAGATCTTTTTTGACCAGGATC，
反向加速引物：ATTATGATTTTTAACTGGTTCTTC，
反向探针1：荧光标记物-CACCATTTTTAATTACAGTAACT，
反向探针2：荧光标记物-GGCATGCGATATGAAACACCA；
所述金黄色葡萄球菌检测试剂系统的引物探针包括：
正向外围引物：CTGAATATGCAATGAAAGTAACTGA，
反向外围引物：TTTTTCTCTTTGCATATTATCGC，
正向交叉引物：GACAACGCTTCTTTATCATTTGTGACAAGAGCTAGAGTCGTTAGC，
反向加速引物：ATAATTTCTTCAAGTCGTGCCGC，
反向探针1：荧光标记物-GTGATACCAGCATGAATCGGTTTA，
反向探针2：荧光标记物-GACAACGCTTCTTTATCATTTGTGA；
所述淋病奈瑟球菌检测试剂系统的引物探针包括：
正向外围引物：GCTTTTAAATCCAATACCGTATT，
反向外围引物：TTGAGTTCGATGGTGCTG，
正向交叉引物：GAGGCCATTTACGCCCAATCAACAATAAAATATCCATCACCACTG，
反向加速引物：GTGCCGTCAAGGGAAGGTTG，
反向探针1：荧光标记物-GCCCAATCCCAAGCCGTCG，
反向探针2：荧光标记物-GAGGCCATTTACGCCCAATC；
所述白色念球菌检测试剂系统的引物探针包括：
正向外围引物：CGAGTTGCCCCAAGACATG，
反向外围引物：AATGACCGCTCTGAGTGATG，
正向交叉引物：CAGGCCACAAACCCACCAAAGAGAATTGTCGAAAATCGCCCG，
反向加速引物：GTGCTCTAATGGGGCAATTTCCA，
反向探针1：荧光标记物-ATGCTGAGCCGGAGCCTTTA，
反向探针2：荧光标记物-CAGGCCACAAACCCACCAAAGA。
14.根据权利要求1所述的一种自驱动微流控检测装置的用途，其特征在于，用于制备定量检测肾脏标志物的检测装置，包括：
采用4通道自驱动微流控检测装置，4通道自驱动微流控检测装置为加样孔通过毛细管导流渠与四个功能腔室连接，每个功能腔室对应一条层析试纸，一个结果阅读窗；
所述毛细管导流渠的毛细管导流片的材质为PP材质，毛细管导流片之间的间距为0.4mm；
步骤一，制备纳米金；
步骤二，制备金标RBP单克隆抗体1；
步骤三，将NC膜附在PVC底板，用往复划膜仪在NC膜的各个位置喷RBP单克隆抗体2及羊抗鼠二抗，分别为检测线(T线)和质控线(C线)，烘干；
步骤四，在金标RBP单克隆抗体溶液中加入细胞融合剂；然后喷于玻璃纤维膜的结合垫上，烘干；
步骤五，将玻璃纤维素膜的样品垫、玻璃纤维素膜的结合垫、NC膜和吸水垫组装成为检测试纸条，调整试纸条的灵敏度；
步骤六，将检测试纸条组装于自驱动微流控检测装置中。
15.根据权利要求1所述的一种自驱动微流控检测装置的用途，其特征在于，用于制备甲流病毒、乙流病毒的检测装置，包括如下内容：
采用2通道自驱动微流控检测装置，2通道自驱动微流控检测装置为加样孔通过毛细管导流渠与两个功能腔室连接，每个功能腔室对应一条层析试纸，一个结果阅读窗；在核酸免疫试纸上设置有两条T线，分别显示甲流和乙流的检测结果；
采用的层析试纸为核酸免疫层析试纸；
所述毛细管导流渠的毛细管导流片的材质为玻璃材质，毛细管导流片之间的间距为0.2mm；
将甲流病毒检测试剂系统、将乙流病毒检测试剂系统，按照系统的成份组成，依次预装于两个功能腔室中；
所述甲流病毒检测试剂系统的引物探针包括：
正向外围引物：CAGAGGGCAATGATGGATCA，
反向外围引物：ATCCCGACCAGTGAGTACC，
正向交叉引物：CCTCAGAATGAGTGCTGACCGTAAGTCGAAACCCAGGAAACG，
反向加速引物：CTTCCCTTTCAAAGTCATGCCCA，
反向探针1：荧光标记物-AGGAAAATGAGGTCTTCAATCTCAG，
反向探针2：荧光标记物-CCTCAGAATGAGTGCTGACCGT；
所述乙流病毒检测试剂系统的引物探针包括：
正向外围引物：ACTTACCAATGGGTGCTTAA，
反向外围引物：CGAAAAACAGAAAGGCAACAA，
正向交叉引物：GCATCCCATTGGAACATGTCTTCAAATTTAGTAACATTGAAGGCTCAG，
反向加速引物：CCTCAGAAGATGGCTGGTCAGTTTTCATAACCTCTTGGTCTC，
反向探针1：荧光标记物-GTCTTCTTTTCCCAAAAGAAACTG，
反向探针2：荧光标记物-CAAGAGCAGTGCTCAAACAAATGA。
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