CN110833551A - 吡唑并嘧啶衍生物在治疗急性胰腺炎的用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及药物技术领域，特别是吡唑并嘧啶衍生物在治疗急性胰腺炎的用途。本发明吡唑并嘧啶衍生物对急性胰腺炎有较好的治疗作用，能显著改善胰腺组织的水肿程度、炎症细胞浸润以及细胞坏死等症状，显著降低胰腺组织中ET和TXA₂的含量，其治疗效果等同甚至优于人重组白介素10。

Description

吡唑并嘧啶衍生物在治疗急性胰腺炎的用途

技术领域

本发明涉及药物技术领域，特别是吡唑并嘧啶衍生物在治疗急性胰腺炎的用途。

背景技术

急性胰腺炎(Acute Pancreatitis，AP)是多种诱因导致的胰酶在胰腺组织内被过度激活，从而引起胰腺组织自身的消化，出血，水肿，坏死等一系列炎症反应，伴或不伴多个器官的功能改变，是临床上常见的急腹症之一。在我国其发病率约为13-45/100000，其中有20％的患者，若不采取及时有效的治疗措施，病情可进一步进展为重症急性胰腺炎(SevereAcute Pancreatitis，SAP)，SAP病情复杂，病程凶险，治疗难度大，死亡率高达30％。

2012年AP亚特兰大诊断标准，在原有基础上，进一步规范了AP的临床分类，专家学者一致将AP分为三大类，分别为：轻症急性胰腺炎(m ild acutepancreatitis，MAP)中度重症急性胰腺炎(moderately severeacutepa ncreatitis，MSAP)和重症急性胰腺炎(severeacutepancreatitis，SAP)三大类，这使得AP的分类更加精确，对临床分期，治疗，改善预后有重大的指导意义。

吡唑并嘧啶衍生物(式Ⅰ)是一种靶向作用于FLT3激酶的小分子抑制剂，是申请人自主研发的新型化合物，目前化合物专利已经在中国、美国、日本等地区获得了授权。

目前仅有关于吡唑并嘧啶衍生物在治疗急性髓性白血病及银屑病方面的报道，而未见有在治疗急性胰腺炎方面的用途。

发明内容

为了克服现有技术存在的不足，本发明提供吡唑并嘧啶衍生物在治疗急性胰腺炎的用途。

本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：

一种如式Ⅰ所示的吡唑并嘧啶衍生物或其药学上可接受的盐、水合物在制备治疗急性胰腺炎药物方面的用途

优选地，所述急性胰腺炎表现为胰腺组织中内皮素水平升高。

优选地，所述急性胰腺炎表现为胰腺组织中血栓素A₂水平升高。

优选地，所述急性胰腺炎表现为胰腺组织有水肿现象。

优选地，所述急性胰腺炎表现为胰腺组织有炎症细胞浸润。

优选地，所述急性胰腺炎表现为胰腺组织有细胞坏死现象。

优选地，所述急性胰腺炎包括轻症急性胰腺炎、中度重症急性胰腺炎、重症急性胰腺炎。

优选地，所述药学上可接受的盐包括盐酸盐、硫酸盐、甲磺酸盐、磷酸盐。

本发明还提供一种药物组合物在制备治疗急性胰腺炎药物方面的用途，其特征在于，所述药物组合物包含如式Ⅰ所示吡唑并嘧啶衍生物或其药学上可接受的盐、水合物作为有效成分，和药学上可接受的赋形剂。

优选地，所述所述药物组合物为注射制剂、口服制剂、外用制剂、缓释制剂、控释制剂。

优选地，所述所述口服制剂包括片剂、颗粒剂、胶囊剂。

优选地，所述药物组合物为控释制剂、缓释制剂、速释制剂。

内皮素(ET)是目前所知道最强的血管活性物质之一，血管平滑肌细胞中其含量水平较高，激活启动后具有强烈而持久的血管收缩作用。ET可参与AP发生、发展的全过程，其作用机制可能是ET作用于血管平滑肌，使胰腺毛细血管通透性增加，渗漏增多，血流下降，同时也激活受体，通过信号传导使细胞内出现钙浓度超载，所形成的钙盐，在一定程度上也可堵塞微循环，而胰腺微小血管渗漏，一定程度上导致了胰腺内血液浓缩、粘稠度增加，血小板凝集形成微小血栓，改变胰腺内血流动力学，造成微循环淤滞，胰腺细胞缺血缺氧，诱发AP或者加重原有病情，使AP向SAP转化。

血栓素A₂(TXA₂)是一种内源性的炎症因子，机体内来源主要是血小板(AP时可由胰腺腺泡细胞合成)。机体受到外界或内部的刺激后激活TXA₂，其活性与血管内皮上相应的物质结合后发挥出强烈的收缩血管作用，同时本身还具有促血小板凝集作用，这一系列的作用，可导致胰腺组织缺血，发生水肿甚至是坏死，使AP病情向SAP发展。

本发明吡唑并嘧啶衍生物原为FLT3抑制剂，通过研究发现，本发明吡唑并嘧啶衍生物对急性胰腺炎有较好的治疗作用，能显著改善胰腺组织的水肿程度、炎症细胞浸润以及细胞坏死等症状，显著降低胰腺组织中ET和TXA₂的含量，其治疗效果等同甚至优于人重组白介素10。

与现有技术比较，本发明的方法具有以下优点：

本发明提供的吡唑并嘧啶衍生物，是一种新的治疗急性胰腺炎的药物，不但扩展了现有治疗急性胰腺炎的药物选择性，为该病的有效治疗提供了更多的药物选择，也进一步扩展了本发明吡唑并嘧啶衍生物作为FLT3抑制剂的应用范围。

附图说明

图1为空白对照组12h时大鼠胰腺组织HE染色图。

图2为模型组12h时大鼠胰腺组织HE染色图。

图3为阳性药组12h时大鼠胰腺组织HE染色图。

图4为吡唑并嘧啶衍生物组12h时大鼠胰腺组织HE染色图。

图5为急性胰腺炎组织损伤评分标准。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

实施例1对重症急性胰腺炎大鼠影响

1.实验动物：清洁级SD大鼠，雄性，体质量200～250g，购于北京维通利华实验动物技术有限公司。

2.实验材料：吡唑并嘧啶衍生物由发明人合成。吡唑并嘧啶衍生物由发明人合成。将蓖麻油与乙醇1：1混合后经过0.22μm的无菌滤膜，得到ELE溶液，称取一定质量的本发明吡唑并嘧啶衍生物粉末，用ELE溶液溶解粉末，待粉末完全溶解后，加入一定体积的灭菌水，混匀待用。ELE溶液与无菌水的体积比为1：3。左旋精氨酸(l-arginine，sigma)，白介素10(rhIL-10，Protech)。

3.动物分组：取大鼠随机分为空白对照组、模型组、阳性药组、吡唑并嘧啶衍生物药物组(以下简称受试药物组)，每组30只。随后每个大组按时限随机分为3h、6h、12h组等三个亚组，每个亚组10只。

4.动物模型制备：除空白对照组外，其余大鼠(参照李仪奎.《中药药理实验方法学》上海科技出版社，第二版)，造模前12h禁食、自由饮水，将6％的左旋精氨酸(L-arginine)溶液，按150mg/10g的剂量缓慢腹腔注射，注射频次为：每小时1次，共进行3次。造模成功检验标准为肉眼观察胰腺组织大体呈现水肿，出血，部分组织有坏死，可见散在胰腺组织钙化斑，腹腔胀大，开腹后可见大量的血性腹水，肠壁毛细血管明显扩张，光学显微镜下可见胰腺小叶水肿，大量的炎症细胞浸润，累及范围广泛，视野下可见多处坏死的胰腺细胞。

5.给药方案：(1)正常对照组、模型组：造模前3天，灌胃给予ELE溶液和蒸馏水1:3体积比的混合液10mL/kg，连续3天。随后模型组按照“步骤4”，将左旋精氨酸(L-arginine)溶液注射至腹腔内。

(2)阳性药组：造模前1h，预先将稀释后的人重组白介素10，按10000IU/只的剂量，注射进入腹腔内。之后再按照“步骤4”，将左旋精氨酸(L-arginine)溶液注射至腹腔内。

(3)受试药物组：造模前3天，以12mg/kg/d(10mL/kg，1.2mg/mL药液)给大鼠灌胃，连续3天。之后再按照“步骤4”，将左旋精氨酸(L-arginine)溶液注射至腹腔内。

6.标本采集：以最后一次给大鼠腹腔注射6％左旋精氨酸(L-arginine)溶液为计时点，开始计时。在3h，6h，12h三个时间点上，分批次将大鼠处死，充分打开腹腔，显露视野，找到胰腺所在位置，无菌条件下迅速分离出胰腺组织并剪取，部分组织放入体积分数为4％的多聚甲醛溶液中，以备制作病理切片和光学显微镜下观察。剩余部分，装入预先进1.5ml生理盐水的EP管中，经充分捣碎、研磨后，在低温离心机中，以3000转/分的速度，离心10分钟并取上清。将该部分上清液，按一次用量分装后，冻存于-20℃冰箱，用于检测ET、NO、TXA₂、PGI₂含量。

7.检测指标

(1)病理组织学检测：实验结束取出大鼠胰腺组织，常规HE染色，每张切片观察10个视野，参照按Rongione等标准(见说明书附图5)从组织水肿、炎症、出血和细胞坏死等四个方面的轻重程度进行组织学评分。

(2)用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定大鼠胰腺组织中ET、TXA₂的含量。操作参照试剂说明书。

8.统计学方法：采用SPSS17.0处理数据，计量数据采用(均数±标准差)表示，方差齐则使用方差进行分析，方差不齐则使用秩和检验进行分析，P<0.05为差异有统计学意义。

9.实验结果

(1)病理组织学检测结果

如图1所示，空白对照组切片可见胰腺小叶结构清晰，腺泡结构完整，无明显病理改变，仅有个别切片可见少量炎性细胞浸润，小叶间轻度水肿，范围局限。

如图2所示，模型组病变明显，可见胰腺小叶间隙增宽，胰腺小叶以及小叶间隙水肿明显，腺管周围以及腺泡细胞内大量的中性粒细胞浸润，小叶内腺泡细胞局灶空泡变性，部分腺泡细胞出现点状坏死。变化最为明显的是12h节点的切片，可见视野下中性粒细胞遍布，大面积浸润；多处散在的的出血及细胞坏死，小叶结构模糊不完整，程度轻重不一。

如图3所示，阳性药组光镜下可见胰腺小叶间隙增宽，胰腺小叶以及小叶间隙水肿，腺管周围以及腺泡细胞内中性粒细胞浸润广泛浸润，小叶内也可见腺泡细胞局灶空泡变性，部分腺泡细胞可见点状坏死，但其病理变化在程度上较模型组轻。

如图4所示，受试药物组胰腺切片可见与模型组、阳性药组相似的改变，但在病变累及范围，胰腺小叶水肿程度以及炎症细胞浸润，细胞坏死数量上，较上述两组少，病变程度相对减轻。

(2)不同时间点胰腺组织病理评分结果比较

表1不同时间点胰腺组织病理评分结果比较

与空白对照组比较，*P＜0.05；与模型组比较，△P＜0.05。

由表1可知，与模型组比较，受试药物组能显著降低大鼠胰腺组织3h、6h、12h时的病理评分(P<0.05)，其效果等同甚至优于阳性药组。

(3)胰腺组织ET含量水平变化

表2不同时间点胰腺组织ET含量变化

组别	3h	6h	12h
				空白对照组	35.08±0.82	34.15±0.64	32.12±1.63
模型组	88.26±1.72*	148.02±2.08*	165.31±3.52*
				阳性药组	80.15±1.24△	124.77±2.52△	142.25±2.12△
受试药物组	86.37±2.20	132.85±1.82△	140.73±2.36△

与空白对照组比较，*P＜0.05；与模型组比较，△P＜0.05。

如表2所示，与模型组比较，受试药物组均能显著降低大鼠胰腺组织中6h、12h时ET的含量，(P<0.05)，其效果等同甚至优于阳性药组。3h时仅表现出降低趋势，并无统计学意义。

(4)胰腺组织TXA₂含量水平变化

表3不同时间点胰腺组织TXA₂含量变化

组别	3h	6h	12h
				空白对照组	280.46±18.35	282.95±20.14	281.74±15.63
模型组	475.28±61.32*	688.30±65.41*	912.23±72.63*
				阳性药组	314.76±29.36△	463.71±35.94△	662.45±58.31△
受试药物组	322.58±25.72△	428.59±42.15△	548.26±48.92△

与空白对照组比较，*P＜0.05；与模型组比较，△P＜0.05。

如表3所示，与模型组比较，受试药物组均能显著降低大鼠胰腺组织中6h、12h时TXA₂的含量，(P<0.05)，其效果等同甚至优于阳性药组。

结论

本发明吡唑并嘧啶衍生物对急性胰腺炎有较好的治疗作用，能显著改善胰腺组织的水肿程度、炎症细胞浸润以及细胞坏死等症状，显著降低胰腺组织中ET和TXA₂的含量，其治疗效果等同甚至优于人重组白介素10。

虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (12)

1.一种如式Ⅰ所示的吡唑并嘧啶衍生物或其药学上可接受的盐、水合物在制备治疗急性胰腺炎药物方面的用途

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述急性胰腺炎表现为胰腺组织中内皮素水平升高。

3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述急性胰腺炎表现为胰腺组织中血栓素A₂水平升高。

4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述急性胰腺炎表现为胰腺组织有水肿现象。

5.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述急性胰腺炎表现为胰腺组织有炎症细胞浸润。

6.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述急性胰腺炎表现为胰腺组织有细胞坏死现象。

7.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述急性胰腺炎包括轻症急性胰腺炎、中度重症急性胰腺炎、重症急性胰腺炎。

8.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药学上可接受的盐包括盐酸盐、硫酸盐、甲磺酸盐、磷酸盐。

9.一种药物组合物在制备治疗急性胰腺炎药物方面的用途，其特征在于，所述药物组合物包含如权利要求1所述的如式Ⅰ所示吡唑并嘧啶衍生物或其药学上可接受的盐、水合物作为有效成分，和药学上可接受的赋形剂。

10.根据权利要求9所述的用途，所述药物组合物为注射制剂、口服制剂、外用制剂、缓释制剂、控释制剂。

11.根据权利要求10所述的用途，所述口服制剂包括片剂、颗粒剂、胶囊剂。

12.根据权利要求9所述的用途，所述药物组合物为控释制剂、缓释制剂、速释制剂。

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