CN101346371B

CN101346371B - 癌症治疗中用作酪氨酸激酶抑制剂的4-(3-氨基吡唑)嘧啶衍生物

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Publication number: CN101346371B
Application number: CN2006800488451A
Authority: CN
Inventors: X·冯; H·关; Y·侃; S·伊奥安尼迪斯; B·彭; M·苏; B·王; T·王; H·-J·张
Original assignee: AstraZeneca AB
Current assignee: AstraZeneca AB
Priority date: 2005-10-28
Filing date: 2006-10-26
Publication date: 2012-11-14
Anticipated expiration: 2026-10-26
Also published as: SI1945631T1; CN101346371A; ZA200803582B; UA95260C2

Abstract

本发明涉及新的具有下式(I)结构的化合物，其药物组合物及其使用方法。这些新的化合物提供癌症治疗方法。

Description

癌症治疗中用作酪氨酸激酶抑制剂的4-(3-氨基吡唑)嘧啶衍生物

发明领域

本发明涉及新的吡唑衍生物，其药物组合物及使用方法。另外，本发明涉及治疗和预防癌症的治疗方法以及这些吡唑衍生物在制备用于治疗和预防癌症的药物中的用途。

发明背景

受体酪氨酸激酶(RTK)是在细胞信号转导中起关键作用的蛋白激酶亚家族，参与多种与癌症相关的过程，包括细胞增殖、存活、血管生成和转移。目前已经鉴定出多达100种不同的RTK，包括原肌球蛋白相关激酶(Trk)。

Trk是被称为神经营养蛋白(neurotrophin，NT)的一组可溶性生长因子激活的高亲和性受体。Trk受体家族有三个成员-TrkA、TrkB和TrkC。NT中有：(i)激活TrkA的神经生长因子(NGF)，(ii)激活TrkB的脑源性生长因子(BDNF)和NT-4/5，和(iii)激活TrkC的NT3。每种Trk受体都包括胞外域(配体结合域)、跨膜区和胞内域(包括激酶域)。当与配体结合时，该激酶催化自身磷酸化，触发下游信号转导途径。

在神经元组织发育过程中，Trk在神经元组织中广泛表达，这对于这些细胞的维持和存活是十分重要的。然而，Trk/神经营养蛋白轴(或途径)的胚后期作用方面仍存有争议。有报道显示Trk在神经系统的发育和功能两方面都起重要作用(Patapoutian，A.等，Current Opinionin Neurobiology，2001，11，272-280)。

最近十年内，已发表了数量可观的将Trk信号转导与癌症联系在一起的文献资料。例如，虽然Trk在成人神经系统外以较低水平表达，但是在晚期前列腺癌中Trk的表达增加。正常前列腺组织和雄激素依赖性前列腺肿瘤都表达低水平的Trk A，Trk B和Trk C水平则无法检出。然而，Trk受体的所有同种型以及它们的关联配体都在晚期雄激素非依赖性前列腺癌中增量调节。其它证据表明，这些晚期前列腺癌细胞的存活变得依赖于Trk/神经营养蛋白轴。因此，Trk抑制剂可产生一类对雄激素非依赖性前列腺癌特异性的凋亡诱导因子(Weeraratna，A.T.等，The Prostate，2000，45，I40-I48)。

此外，最新的文献也显示Trk的过量表达、活化、扩增和/或突变与分泌性乳腺癌(Cancer Cell，2002，2，367-376)、结肠直肠癌(Bardelli等，Science，2003，300，949-949)和卵巢癌(Davidson，B等，ClinicalCancer Research，2003，9，2248-2259)有关。

还有选择性Trk酪氨酸激酶抑制剂的少量报道。Cephalon介绍了作为Trk抑制剂的CEP-751、CEP-701(George，D等，Cancer Research，1999，59，2395-2341)和其它吲哚并咔唑类似物(WO0114380)。有报道显示与仅用单一疗法相比，CEP-701和/或CEP751当与手术或化学诱导的雄激素去除联用时，效果更佳。GlaxoSmithKline在WO0220479和WO0220513中公开了某些作为Trk A抑制剂的羟吲哚化合物。近来，Japan Tobacco公司报道了作为Trk抑制剂的吡唑基缩合环状化合物(JP2003231687A)。Pfizer公司最近也公布了某些异噻唑Trk A抑制剂(Bioorg.Med.Chem.Lett.2006，16，3444-3448)。

除上述化合物外，Vertex Pharmaceuticals公司在WO0250065、WO0262789、WO03027111和WO200437814中介绍了作为GSK3、Aurora等抑制剂的吡唑化合物；AstraZeneca公司报道了作为针对IGF-1受体激酶抑制剂的吡唑化合物(WO0348133)。AstraZeneca还在国际申请WO 2005/049033、WO 2005/103010、WO 2006/082392、WO2006/087530和WO 2006/087538中报道了Trk抑制剂。

另一组则是JAK家族。JAK(詹纳斯相关激酶(Janus-associatedkinase))/STAT(信号转导及转录激活蛋白(signal transducers andactivators of transcription))信号转导途径参与多种过度增殖和与癌症相关的过程，包括细胞周期进程、细胞凋亡、血管生成、侵袭、转移和免疫系统逃逸(Haura等，Nature Clinical Practice Oncology，2005，2(6)，315-324；Verna等，Cancer and Metastasis Reviews，2003，22，423-434)。

JAK家族包括4种非受体酪氨酸激酶Tyk2、JAK1、JAK2和JAK3，这些激酶在细胞因子和生长因子介导的信号转导中起着关键作用。细胞因子和/或生长因子与细胞表面受体结合，促使受体二聚化，并通过自身磷酸化促进受体相关JAK的活化。活化的JAK使受体磷酸化，形成含SH2区域的信号转导蛋白、特别是STAT家族蛋白(STAT1、2、3、4、5a、5b和6)的停靠位点。结合受体的STAT自身通过JAK磷酸化，促使它们从受体中解离，随后二聚化并易位至细胞核。一旦进入细胞核，STAT便与DNA结合，并与其它转录因子协同调节许多基因的表达，包括但不限于细胞凋亡抑制蛋白(例如Bcl-XL、Mcl-1)编码基因和细胞周期调节蛋白(例如细胞周期蛋白D1/D2、c-myc)编码基因(Haura等，Nature Clinical Practice Oncology，2005，2(6)，315-324；Verna等，Cancer and Metastasis Reviews，2003，22，423-434)。

最近十年来，已经发表了数量可观的将组成型JAK和/或STAT信号转导与过度增殖性疾病和癌症联系在一起的科学文献。已在多种癌症和过度增殖性疾病中检测出组成型活化的STAT家族、特别是STAT3和STAT5(Haura等，Nature Clinical Practice Oncology，2005，2(6)，315-324)。此外，JAK/STAT途径的异常活化为许多下游激酶(例如Flt3、EGFR)提供了重要的增殖和/或抗凋亡动力，而这些下游激酶的组成型活化在多种癌症和过度增殖性疾病中为关键的驱动力(Tibes等，Annu Rev Pharmacol Toxicol 2550，45，357-384；Choudhary等，International Journal of Hematology 2005，82(2)，93-99；Sordella等，Science 2004，305，1163-1167)。另外，负调节蛋白(例如细胞因子信号转导抑制(SOCS)蛋白)的削弱，还可影响疾病中JAK/STAT信号转导途径的活化状态(JC Tan和Rabkin R，Pediatric Nephrology 2005，20，567-575)。

已经在多种疾病状况下鉴定出几种突变形式的JAK2。例如，导致JAK2激酶域与寡聚域(oligomerization domain)融合(即TEL-JAK2、Bcr-JAK2和PCM1-JAK2)的易位，涉及多种血液恶性肿瘤的发病机制(SD Turner和Alesander DR，Leukemia，2006，20，572-582)。最近，在相当多的真性红细胞增多症、特发性血小板增多症和特发性骨髓纤维变性症的患者中和较少的其它几种疾病的患者中，检测出编码JAK2中缬氨酸-苯丙氨酸(V617F)置换的独特的获得性突变。突变型JAK2蛋白能在细胞因子刺激不存在时激活下游信号转导，导致自主性生长和/或对细胞因子的超敏反应，认为其在驱动这些疾病时发挥关键作用(MJ Percy和McMullin MF，Hematological Oncology 2005，23(3-4)，91-93)。

JAK(特别是JAK3)在免疫抑制领域发挥重要的生物学作用，有报道将JAK激酶抑制剂用作防止器官移植排斥的工具(Changelian，P.S.等，Science，2003，302，875-878)。Merck(Thompson，J.E.等，Bioorg.Med.Chem.Lett.2002，12，1219-1223)和Incyte(WO2005/105814)报道了在单一nM水平下具有酶功效的基于咪唑化合物的JAK2/3抑制剂。Recent Vertex公司介绍了作为JAK抑制剂的氮杂吲哚化合物(WO2005/95400)。AstraZeneca公布了作为JAK3抑制剂的喹啉-3-甲酰胺化合物(WO2002/92571)。

除此以外，Vertex Pharmaceuticals公司在WO2002/50065、WO2002/62789、WO2003/027111和WO2004/37814中介绍了作为GSK3、Aurora等的抑制剂的吡唑化合物，AstraZeneca公司报道了作为IGF-1受体激酶抑制剂的吡唑化合物(WO2003/48133)以及作为Trk抑制剂的吡唑化合物(WO2005/049033和WO2005/103010)。

发明概述

根据本发明，本申请的申请人特此公开新的吡唑化合物或其药学上可接受的盐，这些化合物具有Trk激酶抑制活性，因此利用其抗增殖和/或促凋亡(例如抗癌)活性并用于治疗人或动物体的方法中。本发明还涉及所述吡唑化合物或其药学上可接受的盐的制备方法，含有所述化合物或盐的药物组合物及其在制备用于在温血动物(例如人)体内产生抗增殖和/或促凋亡作用的药物中的用途。

本发明的申请人还提供用这类吡唑化合物或其药学上可接受的盐治疗癌症的方法。

预期本发明要求保护的化合物的性质在治疗以下疾病中颇具价值：与细胞增殖相关的疾病例如癌症(实体瘤和白血病)、纤维增殖性和分化性疾病、牛皮癣、类风湿性关节炎、卡波西肉瘤(Kaposi’ssarcoma)、血管瘤、急性和慢性肾病、动脉粥样化、动脉粥样硬化、动脉再狭窄、自身免疫病、急性和慢性炎症、骨病和伴有视网膜血管增生的眼病。

此外，预期本发明的化合物或其药学上可接受的盐在治疗或预防选自以下的癌症中颇具价值：先天性纤维肉瘤、中胚层肾瘤、间皮瘤、急性原始粒细胞白血病、急性淋巴细胞白血病、多发性骨髓瘤、黑素瘤、食管癌、骨髓瘤、肝细胞癌、胰腺癌、宫颈癌、尤因肉瘤(Ewingssarcoma)、成神经细胞瘤、卡波西肉瘤、卵巢癌、乳腺癌(包括分泌性乳腺癌)、结肠直肠癌、前列腺癌(包括激素无疗效前列腺癌)、膀胱癌、黑素瘤、肺癌-非小细胞肺癌(NSCLC)和小细胞肺癌(SCLC)、胃癌、头颈部癌、肾癌、淋巴瘤、甲状腺癌(包括乳头状甲状腺癌)、间皮瘤和白血病；尤其是卵巢癌、乳腺癌、结肠直肠癌、前列腺癌和肺癌-NSCLC和SCLC；更尤其是前列腺癌；更尤其是激素无疗效前列腺癌。

根据本发明，本申请的申请人还特此公开了新的化合物及其药学上可接受的盐，这些化合物具有JAK激酶抑制活性，因此可利用其抗增殖和/或促凋亡活性并用于治疗人或动物体的方法。本发明还涉及所述化合物或其药学上可接受的盐的制备方法，含有所述化合物或其盐的药物组合物及其在制备用于在温血动物(例如人)体内产生抗增殖和/或促凋亡作用的药物中的用途。本发明的申请人还提供用所述化合物或其药学上可接受的盐在骨髓增殖性疾病、骨髓增生异常综合征和癌症中的治疗方法。

预期本发明要求保护的化合物的性质在治疗骨髓增殖性疾病、骨髓增生异常综合征和癌症中颇具价值，该方法抑制酪氨酸激酶，尤其是抑制JAK家族，更尤其是抑制JAK2。治疗方法靶向多种骨髓增殖性疾病、骨髓增生异常综合征和与癌症相关的过程所涉及的酪氨酸激酶活性，尤其是JAK家族活性，更尤其是JAK2活性。因此，预期酪氨酸激酶抑制剂，尤其是JAK家族抑制剂，更尤其是JAK2抑制剂，对以下的疾病具有活性：骨髓增殖性疾病例如慢性髓细胞性白血病、真性红细胞增多症、特发性血小板增多症、伴有骨髓纤维变性的骨髓化生、特发性骨髓纤维变性、慢性粒-单核细胞型白血病和嗜酸细胞增多综合征、骨髓增生异常综合征和肿瘤疾病例如乳腺癌、卵巢癌、肺癌、结肠癌、前列腺癌或其它组织癌和白血病、骨髓瘤和淋巴瘤、中枢神经系统和外周神经系统肿瘤以及其它的肿瘤类型例如黑素瘤、纤维肉瘤和骨肉瘤。还预期酪氨酸激酶抑制剂，尤其是JAK家族抑制剂，更尤其是JAK2抑制剂用于治疗其它增殖性疾病，包括但不限于自身免疫病、炎性疾病、神经疾病和心血管疾病。

此外，预期本发明的化合物或其药学上可接受的盐在针对骨髓增殖性疾病以及癌症的治疗或预防中颇具价值，所述骨髓增殖性疾病选自慢性髓细胞性白血病、真性红细胞增多症、特发性血小板增多症、伴有骨髓纤维变性的骨髓化生、特发性骨髓纤维变性、慢性粒-单核细胞型白血病和嗜酸细胞增多综合征、骨髓增生异常综合征，所述癌症选自食管癌、骨髓瘤、肝细胞癌、胰腺癌、宫颈癌、尤因肉瘤、成神经细胞瘤、卡波西肉瘤、卵巢癌、乳腺癌、结肠直肠癌、前列腺癌、膀胱癌、黑素瘤、肺癌-非小细胞肺癌(NSCLC)和小细胞肺癌(SCLC)、胃癌、头颈部癌、间皮瘤、肾癌、淋巴瘤和白血病；尤其是骨髓瘤、白血病、卵巢癌、乳腺癌和前列腺癌。

发明详述

因此，本发明提供下式(I)的化合物或其药学上可接受的盐：

其中：

R¹选自氢、羟基、氨基、巯基、C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷酰氧基、N-(C_1-6烷基)氨基、N，N-(C_1-6烷基)₂氨基、C_1-6烷酰基氨基、C_1-6烷基磺酰基氨基、3-5元碳环基或3-5元杂环基；其中R¹可在碳上被一个或多个R⁶任选取代；且其中如果所述杂环基含有-NH-部分，则氮可任选被选自R⁷的基团取代；

R²和R³独立选自氢、卤素、硝基、氰基、羟基、氨基、羧基、氨基甲酰基、巯基、氨磺酰基、C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷酰基、C_1-6烷酰氧基、N-(C_1-6烷基)氨基、N，N-(C_1-6烷基)₂氨基、C_1-6烷酰基氨基、N-(C_1-6烷基)氨基甲酰基、N，N-(C_1-6烷基)₂氨基甲酰基、C_1-6烷基S(O)_a(其中a为0-2)、C_1-6烷氧基羰基、N-(C_1-6烷基)氨磺酰基、N，N-(C_1-6烷基)₂氨磺酰基、(C_1-6烷基)₂N-S(O)₂-NH-、(C_1-6烷基)NH-S(O)₂-NH-、NH₂-S(O)₂-NH-、(C_1-6烷基)₂N-S(O)₂-N(C_1-6烷基)-、(C_1-6烷基)NH-S(O)₂-N(C_1-6烷基)-、NH₂-S(O)₂-N(C_1-6烷基)-、N-(C_1-6烷基)-N-(C_1-6烷基磺酰基)氨基、C_1-6烷基磺酰基氨基、碳环基-R¹⁹-或杂环基-R²¹-；其中R²和R³可以彼此独立地在碳上被一个或多个R⁸任选取代；且其中如果所述杂环基含有-NH-部分，则氮可任选被选自R⁹的基团取代；

R⁴选自氰基、羧基、氨基甲酰基、C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_1-6烷酰基、N-(C_1-6烷基)氨基甲酰基、N，N-(C_1-6烷基)₂氨基甲酰基、C_1-6烷氧基羰基、碳环基或杂环基；其中R⁴可在碳上被一个或多个R¹⁰任选取代；且其中如果所述杂环基含有-NH-部分，则氮可任选被选自R¹¹的基团取代；

R⁵选自卤素、硝基、氰基、羟基、氨基、羧基、氨基甲酰基、巯基、氨磺酰基、C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷酰基、C_1-6烷酰氧基、N-(C_1-6烷基)氨基、N，N-(C_1-6烷基)₂氨基、C_1-6烷酰基氨基、N-(C_1-6烷基)氨基甲酰基、N，N-(C_1-6烷基)₂氨基甲酰基、C_1-6烷基S(O)_a(其中a为0-2)、C_1-6烷氧基羰基、N-(C_1-6烷基)氨磺酰基、N，N-(C_1-6烷基)₂氨磺酰基、C_1-6烷基磺酰基氨基、碳环基或杂环基；其中R⁵可在碳上被一个或多个R¹²任选取代；且其中如果所述杂环基含有-NH-部分，则氮可任选被选自R¹³的基团取代；

n＝0、1、2或3；其中R⁵的取值可相同或不同；

R⁶、R⁸、R¹⁰和R¹²独立选自卤素、硝基、氰基、羟基、氨基、羧基、氨基甲酰基、巯基、氨磺酰基、C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷酰基、C_1-6烷酰氧基、N-(C_1-6烷基)氨基、N，N-(C_1-6烷基)₂氨基、C_1-6烷酰基氨基、N-(C_1-6烷基)氨基甲酰基、N，N-(C_1-6烷基)₂氨基甲酰基、C_1-6烷基S(O)_a(其中a为0-2)、C_1-6烷氧基羰基、N-(C_1-6烷基)氨磺酰基、N，N-(C_1-6烷基)₂氨磺酰基、C_1-6烷基磺酰基氨基、碳环基或杂环基；其中R⁶、R⁸、R¹⁰和R¹²可以彼此独立地在碳上被一个或多个R¹⁴任选取代；且其中如果所述杂环基含有-NH-部分，则氮可任选被选自R¹⁵的基团取代；

R⁷、R⁹、R¹¹、R¹³和R¹⁵独立选自C_1-6烷基、C_1-6烷酰基、C_1-6烷基磺酰基、C_1-6烷氧基羰基、氨基甲酰基、N-(C_1-6烷基)氨基甲酰基、N，N-(C_1-6烷基)氨基甲酰基、苄基、苄氧基羰基、苯甲酰基和苯基磺酰基；其中R⁷、R⁹、R¹¹、R¹³和R¹⁵可以彼此独立地在碳上被一个或多个R¹⁶任选取代；

R¹⁴和R¹⁶独立选自卤素、硝基、氰基、羟基、氨基、羧基、氨基甲酰基、巯基、氨磺酰基、C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷酰基、C_1-6烷酰氧基、N-(C_1-6烷基)氨基、N，N-(C_1-6烷基)₂氨基、C_1-6烷酰基氨基、N-(C_1-6烷基)氨基甲酰基、N，N-(C_1-6烷基)₂氨基甲酰基、C_1-6烷基S(O)_a(其中a为0-2)、C_1-6烷氧基羰基、N-(C_1-6烷基)氨磺酰基、N，N-(C_1-6烷基)₂氨磺酰基、C_1-6烷基磺酰基氨基、碳环基或杂环基；其中R¹⁴和R¹⁶可以彼此独立地在碳上被一个或多个R¹⁷任选取代；且其中如果所述杂环基含有-NH-部分，则氮可任选被选自R¹⁸的基团取代；

R¹⁷选自卤素、硝基、氰基、羟基、三氟甲氧基、三氟甲基、氨基、羧基、氨基甲酰基、巯基、氨磺酰基、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、乙酰基、乙酰氧基、甲基氨基、乙基氨基、二甲氨基、二乙氨基、N-甲基-N-乙氨基、乙酰氨基、N-甲氨基甲酰基、N-乙氨基甲酰基、N，N-二甲氨基甲酰基、N，N-二乙氨基甲酰基、N-甲基-N-乙氨基甲酰基、甲硫基、乙硫基、甲基亚磺酰基、乙基亚磺酰基、甲磺酰基、乙磺酰基、甲氧羰基、乙氧羰基、N-甲基氨磺酰基、N-乙基氨磺酰基、N，N-二甲基氨磺酰基、N，N-二乙基氨磺酰基或N-甲基-N-乙基氨磺酰基；且

R¹⁹和R²¹独立选自化学键、-O-、-N(R²²)-、-C(O)-、-N(R²³)C(O)-、-C(O)N(R²⁴)-、-S(O)_s-、-SO₂N(R²⁵)-或-N(R²⁶)SO₂-；其中R²²、R²³、R²⁴、R²⁵和R²⁶独立选自氢或C_1-6烷基，s为0-2；

R¹⁸选自C_1-6烷基、C_1-6烷酰基、C_1-6烷基磺酰基、C_1-6烷氧基羰基、氨基甲酰基、N-(C_1-6烷基)氨基甲酰基、N，N-(C_1-6烷基)氨基甲酰基、苄基、苄氧基羰基、苯甲酰基和苯基磺酰基。

另一方面，本发明涉及式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其中：

R²和R³独立选自氢、卤素、硝基、氰基、羟基、氨基、羧基、氨基甲酰基、巯基、氨磺酰基、C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷酰基、C_1-6烷酰氧基、N-(C_1-6烷基)氨基、N，N-(C_1-6烷基)₂氨基、C_1-6烷酰基氨基、N-(C_1-6烷基)氨基甲酰基、N，N-(C_1-6烷基)₂氨基甲酰基、C_1-6烷基S(O)_a(其中a为0-2)、C_1-6烷氧基羰基、N-(C_1-6烷基)氨磺酰基、N，N-(C_1-6烷基)₂氨磺酰基、C_1-6烷基磺酰基氨基、碳环基-R¹⁹-或杂环基-R²¹-；其中R²和R³可以彼此独立地在碳上被一个或多个R⁸任选取代；且其中如果所述杂环基含有-NH-部分，则氮可任选被选自R⁹的基团取代；

R⁴选自氰基、羧基、氨基甲酰基、C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_1-6烷酰基、N-(C_1-6烷基)氨基甲酰基、N，N-(C^1-6烷基)₂氨基甲酰基、C_1-6烷氧基羰基、碳环基或杂环基；其中R⁴可在碳上被一个或多个R¹⁰任选取代；且其中如果所述杂环基含有-NH-部分，则氮可任选被选自R¹¹的基团取代；

n＝0、1、2或3；其中R⁵的取值可相同或不同；

R¹⁹和R²¹独立选自-O-、-N(R²²)-、-C(O)-、-N(R²³)C(O)-、-C(O)N(R²⁴)-、-S(O)_s-、-SO₂N(R²⁵)-或-N(R²⁶)SO₂-；其中R²²、R²³、R²⁴、R²⁵和R²⁶独立选自氢或C_1-6烷基，s为0-2；

R²和R³独立选自氢、卤素、硝基、氰基、羟基、氨基、羧基、氨基甲酰基、巯基、氨磺酰基、C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷酰基、C_1-6烷酰氧基、N-(C_1-6烷基)氨基、N，N-(C_1-6烷基)₂氨基、C_1-6烷酰基氨基、N-(C_1-6烷基)氨基甲酰基、N，N-(C_1-6烷基)₂氨基甲酰基、C_1-6烷基S(O)_a(其中a为0-2)、C_1-6烷氧基羰基、N-(C_1-6烷基)氨磺酰基、N，N-(C_1-6烷基)₂氨磺酰基、N-(C_1-6烷基)-N-(C_1-6烷基磺酰基)氨基、C_1-6烷基磺酰基氨基、碳环基-R¹⁹-或杂环基-R²¹-；其中R²和R³可以彼此独立地在碳上被一个或多个R⁸任选取代；且其中如果所述杂环基含有-NH-部分，则氮可任选被选自R⁹的基团取代；

n＝0、1、2或3；其中R⁵的取值可相同或不同；

式(I)中所包含的可变基团的具体取值如下。对于本申请所限定的定义、权利要求或实施方案，如果适当，就可以采用这些取值。

R¹选自C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、3-5元碳环基和N，N-(C_1-6烷基)₂氨基，其中R¹可在碳上被一个或多个R⁶任选取代；且其中R⁶为卤素。

R¹为C_1-6烷氧基或3-5元碳环基。

R¹选自C_1-6烷基、C_1-6烷氧基或3-5元碳环基。

R¹为C_1-6烷基或C_1-6烷氧基。

R¹为3-5元碳环基。

R¹为N，N(C_1-6烷基)₂氨基。

R¹为C_1-6烷基。

R¹为C_1-4烷基。

R¹为C_1-6烷氧基。

R¹选自甲基、甲氧基、三氟乙氧基、异丙氧基、环丙基和N，N-二甲氨基；

R¹为异丙氧基或环丙基。

R¹为甲基、甲氧基、异丙氧基或环丙基。

R¹选自甲基、甲氧基、异丙氧基，N，N-二甲氨基和环丙基。

R¹为异丙氧基。

R¹为甲基。

R¹为乙基。

R¹选自甲基、乙基、丙基和丁基。

R¹选自C_1-4烷基、C_1-4烷氧基和环丙基。

R¹为甲氧基。

R¹为环丙基。

R¹为N，N-二甲氨基。

R²选自氢、卤素、硝基和C_1-6烷基，其中R²可在碳上被一个或多个R⁸任选取代；且其中R⁸为卤素。

R²选自氢、氯、氟、溴、硝基和三氟甲基。

R²为卤素。

R²为C_1-6烷基，其中R²可在碳上被一个或多个R⁸任选取代；且其中R⁸为卤素。

R²和R³独立选自氢、卤素、硝基、氰基、羟基、氨基、羧基、氨基甲酰基、巯基、氨磺酰基、C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷酰基、C_1-6烷酰氧基、N-(C_1-6烷基)氨基、N，N-(C_1-6烷基)₂氨基、C_1-6烷酰基氨基、N-(C_1-6烷基)氨基甲酰基、N，N-(C_1-6烷基)₂氨基甲酰基、C_1-6烷基S(O)_a(其中a为0-2)、C_1-6烷氧基羰基、N-(C_1-6烷基)氨磺酰基、N，N-(C_1-6烷基)₂氨磺酰基、C_1-6烷基磺酰基氨基、碳环基-R¹⁹-或杂环基-R²¹-；其中R²和R³可以彼此独立地在碳上被一个或多个R⁸任选取代；且其中如果所述杂环基含有-NH-部分，则氮可任选被选自R⁹的基团取代。

R²和R³独立选自氢、卤素、硝基、氰基、羟基、氨基、羧基、氨基甲酰基、巯基、氨磺酰基、C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷酰基、C_1-6烷酰氧基、N-(C_1-6烷基)氨基、N，N-(C_1-6烷基)₂氨基、C_1-6烷酰基氨基、N-(C_1-6烷基)氨基甲酰基、N，N-(C_1-6烷基)₂氨基甲酰基、C_1-6烷基S(O)_a(其中a为0-2)、C_1-6烷氧基羰基、N-(C_1-6烷基)氨磺酰基、N，N-(C_1-6烷基)₂氨磺酰基、N-(C_1-6烷基)-N-(C_1-6烷基磺酰基)氨基、C_1-6烷基磺酰基氨基、碳环基-R¹⁹-或杂环基-R²¹-；其中R²和R³可以彼此独立地在碳上被一个或多个R⁸任选取代；且其中如果所述杂环基含有-NH-部分，则氮可任选被选自R⁹的基团取代。

R²和R³独立选自氢、卤素、N-(C_1-6烷基)-N-(C_1-6烷基磺酰基)氨基或杂环基-R²¹-；其中R²¹为化学键。

R²和R³独立选自氢和卤素。

R²和R³独立选自氢和氯。

R²和R³独立选自氢、氟、氯、溴、N-甲基-N-甲磺酰基氨基和吗啉代。

R²为卤素，R³为氢。

R²为氯，R³为氢。

R²为氯或氟，R³为氢。

R³选自氢、卤素、氰基、N-(C_1-6烷基)-N-(C_1-6烷基磺酰基)氨基、C_1-6烷基、(C_1-6烷基)₂N-S(O)₂-N(C_1-6烷基)-和杂环基-R²¹-，其中R³可在碳上被一个或多个R⁸任选取代；其中R⁸为卤素；且其中R²¹为化学键。

R³为氢。

R³为卤素。

R³选自N-(C_1-6烷基)-N-(C_1-6烷基磺酰基)氨基和(C_1-6烷基)₂N-S(O)₂-N(C_1-6烷基)-。

R³选自杂环基-R²¹-，其中R³可在碳上被一个或多个R⁸任选取代；其中R⁸为卤素；且其中R²¹为化学键。

R³选自氢、氯、氰基、三氟甲基、(CH₃)₂N-S(O)₂-N(CH₃)-、N-甲基-N-甲磺酰基氨基和吗啉代。

R³为(CH₃)₂N-S(O)₂-N(CH₃)-。

R³为N-甲基-N-甲磺酰基氨基。

R³为吗啉代。

R⁴为C_1-6烷基。

R⁴为甲基。

R⁵为卤素。

R⁵为氟。

n＝1。

R¹⁹和R²¹独立选自-O-、-N(R²²)-、-C(O)-、-N(R²³)C(O)-、-C(O)N(R²⁴)-、-S(O)_s-、-SO₂N(R²⁵)-或-N(R²⁶)SO₂-；其中R²²、R²³、R²⁴、R²⁵和R²⁶独立选自氢或C_1-6烷基，s为0-2。

因此，本发明又一方面提供式(I)化合物(如上所述)或其药学上可接受的盐，其中：

R¹选自C_1-6烷基、C_1-6烷氧基或3-5元碳环基；

R²和R³独立选自氢、卤素、N-(C_1-6烷基)-N-(C_1-6烷基磺酰基)氨基或杂环基-R²¹-；

R⁴为C_1-6烷基；

R⁵为卤素；

n＝1；

R²¹为化学键。

R¹为C_1-6烷氧基；

R²和R³独立选自氢和卤素；

R⁴为C_1-6烷基；

R⁵为卤素；

n＝1。

R¹为甲基、甲氧基、异丙氧基或环丙基；

R²和R³独立选自氢、氟、氯、溴、N-甲基-N-甲磺酰基氨基和吗啉代；

R⁴为甲基；

R⁵为氟；且

n＝1。

R¹选自C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、3-5元碳环基和N，N-(C_1-6烷基)₂氨基，其中R¹可在碳上被一个或多个R⁶任选取代；

R²选自氢、卤素、硝基和C_1-6烷基，其中R²可在碳上被一个或多个R⁸任选取代；

R³选自氢、卤素、氰基、N-(C_1-6烷基)-N-(C_1-6烷基磺酰基)氨基、C_1-6烷基、(C_1-6烷基)₂N-S(O)₂-N(C_1-6烷基)-和杂环基-R²¹-，其中R³可在碳上被一个或多个R⁸任选取代；

R⁴为C_1-6烷基；

R⁵为卤素；

R⁶为卤素；

R⁸为卤素；

R²¹为化学键；且

n＝1。

R²选自氢、氯、氟、溴、硝基和三氟甲基；

R³选自氢、氯、氰基、三氟甲基、(CH₃)₂N-S(O)₂-N(CH₃)-、N-甲基-N-甲磺酰基氨基和吗啉代；

R⁴为甲基；

R⁵为氟；且

n为1。

R¹选自C_1-6烷氧基，其中R¹可在碳上被一个或多个R⁶任选取代；

R²选自氢和卤素；

R³选自氢、卤素和杂环基-R²¹-；

R⁴为C_1-6烷基；

R⁵为卤素；

R⁶为卤素；

R²¹为化学键；

n为1。

R¹选自C_1-4烷基、C_1-4烷氧基和环丙基；

R⁴为C_1-6烷基；

R⁵为卤素；

R⁶为卤素；

R⁸为卤素；

R²¹为化学键；且

n＝1。

本发明另一方面，优选的本发明化合物是实施例中的任一种化合物或其药学上可接受的盐。

本发明另一方面，优选的本发明化合物是下列任一种化合物或其药学上可接受的盐：

(1)N-{5-氟-2-{[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]氨基}-6-[(5-甲基 -1H-吡唑-3-基)氨基]嘧啶-4-基}-N-甲基甲磺酰胺；

(2)5-氟-N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N ⁴ -(5-甲基-1H-吡唑-3- 基)嘧啶-2，4-二胺；

(3)5-氯-N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N ⁴ -(5-甲氧基-1H-吡唑 -3-基)嘧啶-2，4-二胺；

(4)N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N ⁴ -(5-甲氧基-1H-吡唑-3- 基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2，4-二胺；

(5)N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N ⁴ -(5-甲基-1H-吡唑-3- 基)-6-吗啉-4-基嘧啶-2，4-二胺；

(6)5-氯-N ⁴ -(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基) 乙基]嘧啶-2，4-二胺；

(7)5-氟-N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N ⁴ -(5-甲基-1H-吡唑-3- 基)嘧啶-2，4-二胺；

(8)5-溴-N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N ⁴ -(5-甲氧基-1H-吡唑 -3-基)嘧啶-2，4-二胺；

(9)N ⁴ -(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-5-氟-N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基) 乙基]嘧啶-2，4-二胺；

(10)N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-5-甲基-N ⁴ -(5-甲基-1H-吡唑 -3-基)嘧啶-2，4-二胺；

(11)N-{5-氯-2-{[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]氨基}-6-[(5-甲氧基 -1H-吡唑-3-基)氨基]嘧啶-4-基}-N-甲基甲磺酰胺；

(12)N-{5-氯-2-{[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]氨基}-6-[(5-甲基 -1H-吡唑-3-基)氨基]嘧啶-4-基}-N-甲基甲磺酰胺；

(13)N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N ⁴ -(5-甲氧基-1H-吡唑-3- 基)-6-吗啉-4-基嘧啶-2，4-二胺；

(14)5-氯-N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N ⁴ -(5-甲氧基-1H-吡唑 -3-基)-6-吗啉-4-基嘧啶-2，4-二胺；

(15)5-氟-N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N ⁴ -(5-甲基-1H-吡唑-3- 基)-6-吗啉-4-基嘧啶-2，4-二胺；和

(16)5-氟-N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N ⁴ -(5-甲氧基-1H-吡唑 -3-基)-6-吗啉-4-基嘧啶-2，4-二胺。

在又一个实施方案中，本发明提供用作药物的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

在又一个实施方案中，本发明提供式(I)化合物或其药学上可接受的盐，用来制备用于抑制Trk活性的药物。

在又一个实施方案中，本发明提供用式(I)化合物或其药学上可接受的盐，用来制备用于治疗或预防癌症的药物。

在又一个实施方案中，本发明提供式(I)化合物或其药学上可接受的盐，用来制备用于治疗温血动物(例如人)的癌症的药物。

在又一个实施方案中，本发明提供式(I)化合物或其药学上可接受的盐，用来制备用于治疗或预防温血动物(例如人)的以下疾病的药物：癌症(实体瘤和白血病)、纤维增殖性和分化性疾病、牛皮癣、类风湿性关节炎、卡波西肉瘤、血管瘤、急性和慢性肾病、动脉粥样化、动脉粥样硬化、动脉再狭窄、自身免疫病、急性和慢性炎症、骨病和伴有视网膜血管增生的眼病。

在又一个实施方案中，本发明提供式(I)化合物或其药学上可接受的盐，用来制备用于产生抗增殖作用的药物。

在又一个实施方案中，本发明提供式(I)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于在温血动物(例如人)体内产生抗增殖作用的药物中的用途。

在又一个实施方案中，本发明提供式(I)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于在温血动物(例如人)体内产生促凋亡作用的药物中的用途。

在又一个实施方案中，本发明提供式(I)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗温血动物(例如人)的以下疾病的药物中的用途：骨髓增殖性疾病、骨髓增生异常综合征和癌症。

在又一个实施方案中，本发明提供式(I)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗以下疾病的药物中的用途：慢性髓细胞性白血病、真性红细胞增多症、特发性血小板增多症、伴有骨髓纤维变性的骨髓化生、特发性骨髓纤维变性、慢性粒-单核细胞型白血病和嗜酸细胞增多综合征、骨髓增生异常综合征和癌症，所述癌症选自食管癌、骨髓瘤、肝细胞癌、胰腺癌、宫颈癌、尤因肉瘤、成神经细胞瘤、卡波西肉瘤、卵巢癌、乳腺癌、结肠直肠癌、前列腺癌、膀胱癌、黑素瘤、肺癌-非小细胞肺癌(NSCLC)和小细胞肺癌(SCLC)、胃癌、头颈部癌、间皮瘤、肾癌、淋巴瘤和白血病。

在又一个实施方案中，本发明提供式(I)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗癌症的药物中的用途，其中所述癌症选自食管癌、骨髓瘤、肝细胞癌、胰腺癌、宫颈癌、尤因肉瘤、成神经细胞瘤、卡波西肉瘤、卵巢癌、乳腺癌、结肠直肠癌、前列腺癌、膀胱癌、黑素瘤、肺癌-非小细胞肺癌(NSCLC)和小细胞肺癌(SCLC)、胃癌、头颈部癌、间皮瘤、肾癌、淋巴瘤和白血病。

在又一个实施方案中，本发明提供抑制Trk活性的方法，该方法包括给予需要这种治疗的宿主治疗有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

在又一个实施方案中，本发明提供治疗癌症的方法，该方法包括给予需要这种治疗的宿主治疗有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

在又一个实施方案中，本发明提供治疗或预防癌症的方法，该方法包括给予治疗有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

在又一个实施方案中，本发明提供治疗或预防温血动物(例如人)的以下疾病的方法：癌症(实体瘤和白血病)、纤维增殖性和分化性疾病、牛皮癣、类风湿性关节炎、卡波西肉瘤、血管瘤、急性和慢性肾病、动脉粥样化、动脉粥样硬化、动脉再狭窄、自身免疫病、急性和慢性炎症、骨病和伴有视网膜血管增生的眼病，该方法包括给予治疗有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

在又一个实施方案中，本发明提供在需要这种治疗的温血动物(例如人)体内产生抗增殖作用的方法，该方法包括给予所述动物有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

在又一个实施方案中，本发明提供在需要这种治疗的温血动物(例如人)体内产生促凋亡作用的方法，所述方法包括给予所述动物有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

在又一个实施方案中，本发明提供治疗需要这种治疗的温血动物(例如人)的以下疾病的方法：骨髓增殖性疾病、骨髓增生异常综合征和癌症，所述方法包括给予所述动物有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

在又一个实施方案中，本发明提供治疗需要这种治疗的温血动物(例如人)的以下疾病的方法：慢性髓细胞性白血病、真性红细胞增多症、特发性血小板增多症、伴有骨髓纤维变性的骨髓化生、特发性骨髓纤维变性、慢性粒-单核细胞型白血病和嗜酸细胞增多综合征、骨髓增生异常综合征和癌症，所述癌症选自食管癌、骨髓瘤、肝细胞癌、胰腺癌、宫颈癌、尤因肉瘤、成神经细胞瘤、卡波西肉瘤、卵巢癌、乳腺癌、结肠直肠癌、前列腺癌、膀胱癌、黑素瘤、肺癌-非小细胞肺癌(NSCLC)和小细胞肺癌(SCLC)、胃癌、头颈部癌、间皮瘤、肾癌、淋巴瘤和白血病，所述方法包括给予所述动物有效量的式(I)化合物。

在又一个实施方案中，本发明提供治疗需要这种治疗的温血动物(例如人)的以下疾病的方法：骨髓瘤、白血病、卵巢癌、乳腺癌和前列腺癌，所述方法包括给予所述动物有效量的式(I)化合物。

在又一个实施方案中，本发明提供治疗温血动物(例如人)的以下疾病的方法：骨髓增殖性疾病、骨髓增生异常综合征和癌症(实体瘤和血液肿瘤)、纤维增殖性和分化性疾病、牛皮癣、类风湿性关节炎、卡波西肉瘤、血管瘤、急性和慢性肾病、动脉粥样化、动脉粥样硬化、动脉再狭窄、自身免疫病、肢端肥大症、急性和慢性炎症、骨病和伴有视网膜血管增生的眼病，该方法包括给予治疗有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

在又一个实施方案中，本发明提供治疗需要这种治疗的温血动物(例如人)的癌症的方法，所述方法包括给予所述动物有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其中所述癌症选自食管癌、骨髓瘤、肝细胞癌、胰腺癌、宫颈癌、尤因肉瘤、成神经细胞瘤、卡波西肉瘤、卵巢癌、乳腺癌、结肠直肠癌、前列腺癌、膀胱癌、黑素瘤、肺癌-非小细胞肺癌(NSCLC)和小细胞肺癌(SCLC)、胃癌、头颈部癌、间皮瘤、肾癌、淋巴瘤和白血病。

在又一个实施方案中，本发明提供在需要这种治疗的温血动物(例如人)体内产生JAK抑制作用的方法，所述方法包括给予所述动物有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

在又一个实施方案中，本发明提供药物组合物，该药物组合物包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

在又一个实施方案中，本发明提供用于抑制Trk活性的药物组合物，该药物组合物包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

在又一个实施方案中，本发明提供用于治疗癌症的药物组合物，该药物组合物包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

在又一个实施方案中，本发明提供用于治疗或预防癌症的药物组合物，该药物组合物包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

在又一个实施方案中，本发明提供用于治疗或预防以下疾病的药物组合物：癌症(实体瘤和白血病)、纤维增殖性和分化性疾病、牛皮癣、类风湿性关节炎、卡波西肉瘤、血管瘤、急性和慢性肾病、动脉粥样化、动脉粥样硬化、动脉再狭窄、自身免疫病、急性和慢性炎症、骨病和伴有视网膜血管增生的眼病，该药物组合物包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

在又一个实施方案中，本发明提供用于在温血动物(例如人)体内产生抗增殖作用的药物组合物，该药物组合物包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

在又一个实施方案中，本发明提供用于在温血动物(例如人)体内产生促凋亡作用的药物组合物，该药物组合物包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐和至少一种药学上可接受的稀释剂或载体。

在又一个实施方案中，本发明提供用于治疗温血动物(例如人)的骨髓增殖性疾病、骨髓增生异常综合征和癌症的药物组合物，该药物组合物包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐和至少一种药学上可接受的稀释剂或载体。

在又一个实施方案中，本发明提供用于治疗温血动物(例如人)的以下疾病的药物组合物：慢性髓细胞性白血病、真性红细胞增多症、特发性血小板增多症、伴有骨髓纤维变性的骨髓化生、特发性骨髓纤维变性、慢性粒-单核细胞型白血病和嗜酸细胞增多综合征、骨髓增生异常综合征和癌症，所述癌症选自食管癌、骨髓瘤、肝细胞癌、胰腺癌、宫颈癌、尤因肉瘤、成神经细胞瘤、卡波西肉瘤、卵巢癌、乳腺癌、结肠直肠癌、前列腺癌、膀胱癌、黑素瘤、肺癌-非小细胞肺癌(NSCLC)和小细胞肺癌(SCLC)、胃癌、头颈部癌、间皮瘤、肾癌、淋巴瘤和白血病，该药物组合物包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐和至少一种药学上可接受的稀释剂或载体。

在又一个实施方案中，本发明提供用于治疗温血动物(例如人)的以下疾病的药物组合物：骨髓瘤、白血病、卵巢癌、乳腺癌和前列腺癌，该药物组合物包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐和至少一种药学上可接受的稀释剂或载体。

在又一个实施方案中，本发明提供用于治疗温血动物(例如人)的癌症的药物组合物，该药物组合物包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐和至少一种药学上可接受的稀释剂或载体，其中所述癌症选自食管癌、骨髓瘤、肝细胞癌、胰腺癌、宫颈癌、尤因肉瘤、成神经细胞瘤、卡波西肉瘤、卵巢癌、乳腺癌、结肠直肠癌、前列腺癌、膀胱癌、黑素瘤、肺癌-非小细胞肺癌(NSCLC)和小细胞肺癌(SCLC)、胃癌、头颈部癌、间皮瘤、肾癌、淋巴瘤和白血病。

在又一个实施方案中，本发明提供用于在温血动物(例如人)体内产生JAK抑制作用的药物组合物，该药物组合物包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐和至少一种药学上可接受的稀释剂或载体。

在又一个实施方案中，本发明提供用于抑制Trk活性的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

在又一个实施方案中，本发明提供用于治疗或预防癌症的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

在又一个实施方案中，本发明提供用于治疗温血动物(例如人)的癌症的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

在又一个实施方案中，本发明提供用于治疗或预防温血动物(例如人)的以下疾病的式(I)化合物或其药学上可接受的盐：癌症(实体瘤和白血病)、纤维增殖性和分化性疾病、牛皮癣、类风湿性关节炎、卡波西肉瘤、血管瘤、急性和慢性肾病、动脉粥样化、动脉粥样硬化、动脉再狭窄、自身免疫病、急性和慢性炎症、骨病和伴有视网膜血管增生的眼病。

在又一个实施方案中，本发明提供用于产生抗增殖作用的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

在一个实施方案中，如果提及抑制Trk活性，则尤其是指抑制TrkA活性。

在另一个实施方案中，如果提及抑制Trk活性，则尤其是指抑制TrkB活性。

如果提及治疗(或预防)癌症，则尤其是指治疗(或预防)中胚层肾瘤、间皮瘤、急性原始粒细胞白血病、急性淋巴细胞白血病、多发性骨髓瘤、食管癌、骨髓瘤、肝细胞癌、胰腺癌、宫颈癌、尤因肉瘤、成神经细胞瘤、卡波西肉瘤、卵巢癌、乳腺癌(包括分泌性乳腺癌)、结肠直肠癌、前列腺癌(包括激素无疗效前列腺癌)、膀胱癌、黑素瘤、肺癌-非小细胞肺癌(NSCLC)和小细胞肺癌(SCLC)、胃癌、头颈部癌、肾癌、淋巴瘤、甲状腺癌(包括乳头状甲状腺癌)、间皮瘤、白血病、中枢神经系统和外周血神经系统肿瘤、黑素瘤、纤维肉瘤(包括先天性纤维肉瘤和骨肉瘤)。更尤其是指前列腺癌。另外，更尤其是指SCLC、NSCLC、结肠直肠癌、卵巢癌和/或乳腺癌。又一方面是指激素无疗效前列腺癌。

本发明又一方面提供式(I)化合物或其药学上可接受的盐的制备方法，该方法(其中除非另有说明，否则可变基团如式(I)中定义)包括：

方法a)使下式(II)的嘧啶：

与下式(III)的吡唑胺反应：

式(II)中，L为可置换基团；

或者

方法b)使下式(IV)的嘧啶：

与下式(V)的化合物反应：

式(IV)中，L为可置换基团；

方法c)使下式(VI)的化合物：

与下式(VII)的化合物反应：

其中X为氧原子且q为1；或者X为氮原子且q为2；且其中各R²⁰独立表示C_1-6烷基；或者

方法d)使下式(VIII)的化合物：

与肼反应；或者

之后如有需要：

i)将一种式(I)化合物转化成另一种式(I)化合物；

ii)脱去任何保护基；

iii)制成药学上可接受的盐。

L为可置换基团，L的合适取值为例如卤素或磺酰氧基，例如氯、溴、甲磺酰氧基或甲苯-4-磺酰氧基。

上述反应的具体反应条件如下。

方法a)式(II)的嘧啶与式(III)的吡唑胺可在以下条件下进行反应：

a)在酮(例如丙酮)或者醇(例如乙醇或丁醇)或者芳烃(例如甲苯或N-甲基吡咯烷-2-酮)等合适溶剂的存在下，任选在无机酸(例如盐酸或硫酸)或者有机酸(例如乙酸或甲酸)等合适的酸(或合适的路易斯酸(Lewis acid))存在下，在0℃至回流的温度范围内、尤其是回流温度下；或者

b)在标准Buchwald条件(例如参见J.Am.Chem.Soc.，118，7215；J.Am.Chem.Soc.，119，8451；J.Org.Chem.，62，1568和6066)下，例如在乙酸钯存在下，在合适的溶剂(例如甲苯、苯或二甲苯等芳族溶剂)中，与合适的碱(例如碳酸铯等无机碱或者例如叔丁醇钾等有机碱)一起，在合适的配体例如2，2′-双(二苯基膦基)-1，1′-联萘存在时，在25-80℃的温度范围内。

式(II)的嘧啶可按照流程1来制备：

流程1

其中L为定义如上的可置换基团。

式(III)吡唑胺和式(IIa)化合物为市售化合物，或在文献中有记载，或可通过本领域已知的标准方法制备。

方法b)式(IV)化合物和式(V)化合物可以一起在方法a)所述相同条件下进行反应。

式(IV)化合物可按照流程2来制备：

流程2

式(V)化合物为市售化合物，或在文献中有记载，或可通过本领域已知的标准方法制备。

方法c)可方便地在100-200℃温度范围内，尤其是在150-170℃的温度范围内，在合适的溶剂(例如N-甲基吡咯烷酮或丁醇)中进行。该反应优选在合适的碱(例如甲醇钠或碳酸钾)存在下进行。

式(VI)化合物可按照流程3来制备：

流程3

式(VII)化合物可按照流程4来制备：

流程4

其中Pg是合适的氮保护基。Pg的合适取值如下定义。

式(VIa)、(VIb)、(VIIa)和(VIIb)化合物为市售化合物，或在文献中有记载，或可通过本领域已知的标准方法制备。

方法d)可在50-120℃的温度范围内，尤其在70-100℃的温度范围内，在合适溶剂例如醇(例如乙醇或丁醇)中进行。

式(VIII)化合物可按照流程5来制备：

流程5

应当理解的是，本发明化合物中各个环取代基中的某些取代基，可以通过标准芳族取代反应引入，或者在上述方法之前或者紧接其后通过常规官能团修饰产生，因此这些也包括在本发明的方法方面。这样的反应和修饰包括例如通过芳族取代反应引入取代基，取代基的还原，取代基的烷基化，取代基的氧化。这些方法步骤中所用的试剂和反应条件是化学领域众所周知的。芳族取代反应的具体实例包括用浓硝酸引入硝基；用例如酰基卤和路易斯酸(例如三氯化铝)在FriedelCrafts条件下引入酰基；用烷基卤和路易斯酸(例如三氯化铝)在FriedelCrafts条件下引入烷基；引入卤素基团。修饰的具体实例包括例如用镍催化剂催化氢化或在盐酸存在下周铁加热处理，使硝基还原成氨基；将烷硫基氧化成烷基亚磺酰基或烷基磺酰基。

还应当理解的是，在本文所述的一些反应中，保护化合物中的任何敏感基团可能是必要/需要的。其中保护是必要或需要的实例以及合适的保护方法为本领域技术人员所知。可以根据标准规程使用常用保护基(例如参见T.W.Green，Protective Groups in Organic Synthesis，JohnWiley和Sons，1991)。因此，如果反应物包括例如氨基、羧基或羟基等基团，则有可能需要在本文所述某些反应中保护这些基团。

对于氨基或烷基氨基的合适保护基团有例如酰基，如乙酰基等烷酰基，如甲氧羰基、乙氧羰基或叔丁氧羰基等烷氧基羰基，如苄氧基羰基等芳基甲氧羰基，或如苯甲酰基等芳酰基。对于上述保护基团的脱保护条件必将随保护基团的选择而变化。因此，酰基如烷酰基或烷氧基羰基或芳酰基，可以例如通过用合适的碱如氢氧化锂或氢氧化钠等碱金属氢氧化物水解脱去。或者，如叔丁氧羰基等酰基可以通过用合适的酸如盐酸、硫酸或磷酸或三氟乙酸处理脱去，如苄氧基羰基等芳基甲氧羰基可以例如通过在催化剂如披钯碳存在下氢化脱去或通过用路易斯酸如三(三氟乙酸)硼处理脱去。对于伯氨基合适的供选保护基团有例如邻苯二甲酰基，其可以通过用烷基胺如二甲氨基丙胺或用肼处理脱去。

对于羟基的合适保护基团有例如酰基，如乙酰基等烷酰基、苯甲酰基等芳酰基、或苄基等芳基甲基。对于以上保护基团的脱保护条件必将随保护基团的选择而变化。因此，例如烷酰基或芳酰基等酰基可以例如通过用合适的碱如氢氧化锂或氢氧化钠等碱金属氢氧化物水解脱去。或者，苄基等芳基甲基可以例如经披钯碳等催化剂氢化脱去。

对于羧基的合适保护基团有例如酯化基团，例如可以通过例如用氢氧化钠等碱水解脱去的甲基或乙基，或者可以通过例如用三氟乙酸等有机酸类的酸处理脱去的叔丁基，或者可以通过经催化剂如披钯碳氢化脱去的苄基。

采用化学领域熟知的常规技术，可以在合成的任何方便的阶段除去保护基团。

定义

本说明书中，术语“烷基”包括直链烷基和支链烷基，但是提及个别烷基如“丙基”，则仅特指直链的形式。例如“C_1-6烷基”和“C_1-4烷基”包括甲基、乙基、丙基、异丙基和叔丁基。然而，提及个别烷基如‘丙基’时，仅特指直链的形式，提及个别支链烷基如“异丙基”，则仅特指支链的形式。类似的惯例适用于其它基团。术语“卤素”是指氟、氯、溴和碘。

应当理解的是，如果任选的取代基选自“一个或多个”基团，则该定义包括：所有取代基选自一个规定基团，或者所述取代基选自两个或更多个规定基团。

“杂环基”是含有4-12个原子、其中至少一个原子选自氮、硫或氧的饱和、部分饱和或者不饱和的单环或二环，可以是碳或氮连接的，除非另有说明，其中-CH₂-基团可任选被-C(O)-置换，且环硫原子可任选被氧化形成S-氧化物。术语“杂环基”的实例和合适的取值有吗啉代、哌啶基、吡啶基、吡喃基、吡咯基、异噻唑基、吲哚基、喹啉基、噻吩基、1，3-苯并二氧杂环戊烯基、噻二唑基、哌嗪基、噻唑烷基、吡咯烷基、硫代吗啉代、吡咯啉基、高哌嗪基、3，5-二氧杂哌啶基、四氢吡喃基、咪唑基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、异噁唑基、N-甲基吡咯基、4-吡啶酮、1-异喹诺酮、2-吡咯烷酮、4-噻唑烷酮、吡啶-N-氧化物和喹啉-N-氧化物。术语“杂环基”的其它实例和合适的取值有吗啉代、哌嗪基和吡咯烷基。在本发明的一个方面，“杂环基”为含有5或6个原子、其中至少一个原子选自氮、硫或氧的饱和、部分饱和或者不饱和的单环或双环，可以是碳或氮连接的，除非另有说明，其中-CH₂-基团可任选被-C(O)-置换，且环硫原子可以任选被氧化形成S-氧化物。

“3-5元杂环基”是含有3、4或5个原子、其中至少一个原子选自氮、硫或氧的饱和、部分饱和或不饱和单环，可以是碳或氮连接的，除非另有说明，其中-CH₂-基团可任选被-C(O)-置换，且环硫原子可以任选被氧化形成S-氧化物。术语“3-5元杂环基”的实例和合适的取值为吡咯基、吡咯啉基、咪唑基、噻唑基和呋喃基。

“碳环基”是含有3-12个原子的饱和、部分饱和或不饱和单环或双环碳环；其中-CH₂-基团可任选被-C(O)-置换。“碳环基”尤其是含有5或6个原子的单环或者含有9或10个原子的双环。“碳环基”的合适取值包括环丙基、环丁基、1-氧代环戊基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、苯基、萘基、四氢萘基、茚满基或1-氧代茚满基。

“3-5元碳环基”是含有3、4或5个原子的饱和、部分饱和或不饱和单环碳环；其中-CH₂-基团可任选被-C(O)-置换。“3-5元碳环基”的合适取值包括环丙基、环丁基、1-氧代环戊基、环戊基或环戊烯基。

术语“C_m-n”或“C_m-n基团”单独或者作为前缀使用时，是指具有m-n个碳原子的任何基团。

术语“任选取代的”指取代的基团、结构或分子，以及未被取代的基团、结构或分子。

“C_1-6烷酰氧基”的实例为乙酰氧基。“C_1-6烷氧基羰基”的实例包括C_1-4烷氧基羰基、甲氧羰基、乙氧羰基、正丁氧羰基和叔丁氧羰基。“C_1-6烷氧基”的实例包括C_1-4烷氧基、C_1-3烷氧基、甲氧基、乙氧基和丙氧基。“C_1-6烷氧基亚胺基”的实例包括C_1-4烷氧基亚胺基、C_1-3烷氧基亚胺基、甲氧基亚胺基、乙氧基亚胺基和丙氧基亚胺基。“C_1-6烷酰基氨基”的实例包括甲酰氨基、乙酰氨基和丙酰氨基。“C_1-6烷基S(O)_a(其中a为0-2)”的实例包括C_1-4烷基磺酰基、甲硫基、乙硫基、甲基亚磺酰基、乙基亚磺酰基、甲磺酰基和乙磺酰基。“C_1-6烷硫基”的实例包括甲硫基和乙硫基。“C_1-6烷基磺酰基氨基”的实例包括甲基磺酰基氨基和乙磺酰基氨基。“C_1-6烷酰基”的实例包括C_1-4烷酰基、丙酰基和乙酰基。“N-(C_1-6烷基)氨基”的实例包括甲基氨基和乙基氨基。“N，N-(C_1-6烷基)₂氨基”的实例包括二-N-甲氨基、二-(N-乙基)氨基和N-乙基-N-甲氨基。“C_2-6烯基”的实例为乙烯基、烯丙基和1-丙烯基。“C_2-6炔基”的实例为乙炔基、1-丙炔基和2-丙炔基。“N-(C_1-6烷基)氨磺酰基”的实例为N-(甲基)氨磺酰基和N-(乙基)氨磺酰基。“N-(C_1-6烷基)₂氨磺酰基”的实例为N，N-(二甲基)氨磺酰基和N-(甲基)-N-(乙基)氨磺酰基。“N-(C_1-6烷基)氨基甲酰基”的实例为N-(C_1-4烷基)氨基甲酰基、甲基氨基羰基和乙基氨基羰基。“N，N-(C_1-6烷基)₂氨基甲酰基”的实例为N，N-(C_1-4烷基)₂氨基甲酰基、二甲氨基羰基和甲基乙基氨基羰基。“N-(C_1-6烷基)-N-(C_1-6烷基磺酰基)氨基”的实例为N-甲基-N-甲磺酰基氨基和N-乙基-N-甲磺酰基氨基。(C_1-6烷基)₂N-S(O)₂-NH-的实例包括(CH₃)₂N-S(O)₂-NH-和(CH₃)(C₂H₅)N-S(O)₂-NH-。(C_1-6烷基)NH-S(O)₂-NH-的实例包括(CH₃)NH-S(O)₂-NH-和(C₃H₇)NH-S(O)₂-NH-。(C_1-6烷基)₂N-S(O)₂-N(C_1-6烷基)-的实例包括(CH₃)₂N-S(O)₂-N(C_1-6烷基)和(CH₃)(C₃H₅)N-S(O)₂-N(C₂H₅)-。(C_1-6烷基)NH-S(O)₂-N(C_1-6烷基)-的实例包括(CH₃)NH-S(O)₂-N(CH₃)-和(CH₃)NH-S(O)₂-N(C₂H₅)。NH₂-S(O)₂-N(C_1-6烷基)-的实例包括NH₂-S(O)₂-N(CH₃)-和NH₂-S(O)₂-N(C₃H₇)。

“RT”或“rt”是指室温。

本发明化合物合适的药学上可接受的盐是例如具有足够碱性的本发明化合物的酸加成盐，例如与盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、三氟乙酸、柠檬酸或马来酸等无机酸或有机酸的酸加成盐。另外，具有足够酸性的本发明化合物合适的药学上可接受的盐为碱金属盐(例如钠盐或钾盐)、碱土金属盐(例如钙盐或镁盐)、铵盐或者与提供生理上可接受阳离子的有机碱的盐(例如与甲胺、二甲胺、三甲胺、哌啶、吗啉或三-(2-羟乙基)胺的盐)。

应当注意的是，本发明要求保护的化合物能够以不同的共振结构存在，因此，本文要求保护的化合物包括式(I)化合物所有可能的共振结构，例如旋光异构体、非对映异构体和几何异构体以及所有互变异构形式。

还应当理解的是，式(I)的某些化合物可以溶剂合物以及非溶剂合物的形式存在，例如水合物。应当理解的是本发明包括所有这些溶剂合物的形式。

制剂

本发明化合物可经口服、胃肠外、口腔、阴道内、直肠、吸入法、吹入法、舌下、肌内、皮下、局部、鼻内、腹膜内、胸内、静脉内、硬膜外、鞘内、脑室内和经注入关节给药。

在确定最适于具体患者的个别方案和剂量水平时，剂量将取决于给药途径、疾病的严重程度、患者的年龄和体重及主治医师通常考虑的其它因素。

用于治疗癌症的本发明化合物的有效量是足以在症状上减轻温血动物(特别是人)的癌症症状，减缓癌症进程或者减少具有癌症症状的患者恶化的风险的用量。

对于由本发明化合物制备药物组合物，药学上可接受的惰性载体可为固体或液体。固体形式的制剂包括散剂、片剂、可分散颗粒剂、胶囊剂、囊片剂和栓剂。

固体载体可以是一种或多种物质，这些物质还可用作稀释剂、矫味剂、增溶剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂或片剂崩解剂；还可以是包封材料。

散剂中，载体是微细固体，它是与微细活性组分相混的混合物。片剂中，活性组分按合适比例与具有必要粘合性质的载体相混合，压制成所需的形状和大小。

对于制备栓剂组合物，首先使低熔点蜡(例如甘油脂肪酸酯和可可脂的混合物)熔融后，将活性成分通过例如搅拌等方法分散在其中。然后将熔化的均匀混合物倒入大小适当的模内，使之冷却并固化。

合适的载体包括碳酸镁、硬脂酸镁、滑石粉、乳糖、糖、果胶、糊精、淀粉、西黄蓍胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、低熔点蜡、可可脂等。

一些本发明的化合物能够与各种无机酸和有机酸以及无机碱和有机碱形成盐，这些盐都包括在本发明的范围内。这些酸加成盐的实例包括乙酸盐、己二酸盐、抗坏血酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、碳酸氢盐、硫酸氢盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、胆碱、柠檬酸盐、环己氨基磺酸盐、二亚乙基二胺、乙磺酸盐、富马酸盐、谷氨酸盐、乙醇酸盐、半硫酸盐、2-羟乙基磺酸盐、庚酸盐、己酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、羟基马来酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、葡甲胺、2-萘磺酸盐、硝酸盐、草酸盐、双羟萘酸盐、过硫酸盐、苯乙酸盐、磷酸盐、二磷酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、奎尼酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、氨基磺酸盐、对氨基苯磺酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐(对甲苯磺酸盐)、三氟乙酸盐和十一烷酸盐。碱盐包括铵盐，例如钠盐、锂盐和钾盐等碱金属盐，例如铝盐、钙盐和镁盐等碱土金属盐，例如二环己基胺盐、N-甲基-D-葡糖胺盐等与有机碱的盐以及与例如精氨酸、赖氨酸、鸟氨酸等氨基酸的盐等。同样，碱性含氮基团可以用例如以下的试剂季铵化：低级烷基卤，例如甲基卤、乙基卤、丙基卤和丁基卤；硫酸二烷基酯，例如硫酸二甲酯、硫酸二乙酯、硫酸二丁酯；硫酸二戊酯；长链卤化物，例如癸基卤、月桂基卤、肉豆蔻基卤和硬脂基卤；芳烷基卤，例如苄基溴等。优选无毒的生理上可接受的盐，尽管其它盐也是有用的，例如在分离或纯化产物时。

盐可以通过常规方法制成，例如使游离碱形式的产物与一个或多个当量的适当酸在盐不能溶解的溶剂或介质或者在如水等溶剂中反应，经真空或者通过冷冻干燥除去所述溶剂或介质；或者在合适的离子交换树脂上使现有盐的阴离子与另一种阴离子交换。

为了使用式(I)化合物或其药学上可接受的盐用于哺乳动物(包括人)的治疗性治疗(包括预防性治疗)，通常根据标准制药规程制成药物组合物。

除本发明的化合物以外，本发明的药物组合物还可含有在治疗本文所述一种或多种疾病中有价值的一种或多种药物，或者与之共同给予(同时或序贯给予)。

术语组合物包括活性组分或药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体的制剂。例如本发明化合物可按照本领域已知方法制成例如以下的形式：片剂、胶囊剂、水性或油性溶液剂、混悬剂、乳剂、乳膏剂、软膏剂、凝胶剂、鼻内喷雾剂、栓剂、微细散剂或气雾剂或用于吸入法的雾化吸入剂和用于胃肠外(包括静脉内、肌内或输注)的无菌水性或油性溶液剂或无菌水性或油性混悬剂或无菌乳剂。

液体形式的组合物包括溶液剂、混悬剂和乳剂。活性化合物的无菌水或水-丙二醇溶液可作为适于胃肠外给药的液体制剂的实例。液体组合物也可以制成聚乙二醇水溶液中的溶液剂。可以通过将活性组分溶于水中，再按需要加入合适的着色剂、矫味剂、稳定剂和增稠剂，制备适于口服给药的水溶液剂。可以通过将微细的活性组分以及粘性材料例如天然/合成树胶、树脂、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和药物制剂领域已知的其它助悬剂分散到水中，来制备适于口服用的水性混悬剂。

药物组合物可为单位剂型。在这种剂型中，组合物被分成含有适量活性组分的单位剂量。单位剂型可为包装制品，包装中包括独立的若干制剂，例如包装的片剂、胶囊剂和小瓶粉剂或安瓿粉剂。单位剂型还可以是胶囊剂、扁囊剂或片剂本身，或者可以是适当数目的任何这些包装形式。

联合疗法

上文定义抗癌疗法可以作为单一疗法应用，或者除本发明化合物外，还可以包括常规的外科手术、放射疗法或化学疗法。这类化学疗法可以包括应用一种或多种以下类型的抗肿瘤药物：

(i)医学肿瘤学中使用的抗增殖/抗肿瘤药物及其组合，例如烷化剂(例如顺铂、卡铂、环磷酰胺、氮芥、美法仑、苯丁酸氮芥、白消安和亚硝基脲)；抗代谢药(例如抗叶酸药，例如氟嘧啶类如5-氟尿嘧啶和替加氟、雷替曲塞、甲氨蝶呤、阿糖胞苷和羟基脲)；抗肿瘤抗生素(例如蒽环类，如阿霉素、博来霉素、多柔比星、道诺霉素、表柔比星、伊达比星、丝裂霉素C、放线菌素D和普卡霉素)；抗有丝分裂药(例如长春花属生物碱，如长春新碱、长春碱、长春地辛和长春瑞滨，以及紫杉醇类如泰素和泰索帝)；拓扑异构酶抑制剂(例如表鬼臼毒素类如依托泊苷和替尼泊苷、安吖啶、托泊替康和喜树碱)；蛋白体抑制剂(例如硼替佐米(bortezomib)[Velcade])；药物anegrilide[阿那格雷(Agrylin)]；和药物α-干扰素；

(ii)细胞生长抑制剂，例如抗雌激素药(例如他莫昔芬、托瑞米芬、雷洛昔芬、屈洛昔芬和艾多昔芬(iodoxyfene))、雌激素受体下调药(例如氟维司群)、抗雄激素药(例如比卡鲁胺、氟他胺、尼鲁米特和醋酸环丙孕酮)、LHRH拮抗剂或者LHRH激动剂(例如戈舍瑞林、亮丙瑞林和布舍瑞林)、孕激素(例如醋酸甲地孕酮)、芳香酶抑制剂(例如阿那曲唑、来曲唑、伏氯唑(vorazole)和依西美坦)和5α-还原酶抑制剂例如非那雄胺；

(iii)抑制癌细胞侵袭的药物(例如金属蛋白酶抑制剂如马立马司他和尿激酶纤溶酶原激活物受体功能抑制剂)；

(iv)生长因子功能抑制剂：例如这类抑制剂包括生长因子抗体、生长因子受体抗体(例如抗erbb2抗体曲妥珠单抗[Herceptin]和抗erbb1抗体西妥昔单抗[C225])、法尼基转移酶抑制剂、酪氨酸激酶抑制剂和丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂，例如表皮生长因子家族抑制剂(例如EGFR家族酪氨酸激酶抑制剂，如N-(3-氯-4-氟苯基)-7-甲氧基-6-(3-吗啉代丙氧基)喹唑啉-4-胺(吉非替尼，AZD1839)、N-(3-乙炔基苯基)-6，7-双(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-胺(埃罗替尼，OSI-774)和6-丙烯酰氨基-N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(3-吗啉代丙氧基)喹唑啉-4-胺(CI 1033))，例如血小板衍生生长因子家族抑制剂，例如肝细胞生长因子家族抑制剂)，例如磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂，例如促分裂原活化蛋白激酶激酶(MEK1/2)抑制剂，例如蛋白激酶B(PKB/Akt)抑制剂，例如Src酪氨酸激酶家族和/或Abelson(Abl)酪氨酸激酶家族抑制剂如AZD0530和达沙替尼(dasatinib)(BMS-354825)和甲磺酸伊马替尼(Gleevec)；以及调节STAT信号转导的任何药物；

(v)抗血管生成药，例如抑制血管内皮生长因子作用的药物(例如抗血管内皮细胞生长因子抗体贝伐单抗(Avastin)和例如国际专利申请WO 97/22596、WO 97/30035、WO 97/32856和WO 98/13354中公开的化合物)以及通过其它机制起作用的化合物(例如利诺胺、整联蛋白αvβ3功能抑制剂和血管生长抑素)；

(vi)血管破坏性药例如考布他汀A4以及国际专利申请WO99/02166、WO 00/40529、WO 00/41669、WO 01/92224、WO 02/04434和WO 02/08213中公开的化合物；

(vii)反义疗法，例如对准上述靶的化合物例如ISIS 2503，为一种抗ras反义疗法；

(viii)基因疗法，包括例如置换异常基因(例如异常p53、异常BRCA1或BRCA2)的方法，GDEPT(基因指导的酶前药疗法)例如采用胞嘧啶脱氨酶、胸苷激酶或细菌硝基还原酶的方法，以及提高患者对化学疗法或放射疗法耐受性的方法例如多药耐药性基因疗法；

(ix)免疫疗法，包括例如提高患者肿瘤细胞免疫原性的离体(exvivo)法和体内(in vivo)法(例如用细胞因子如白介素2、白介素4或粒细胞巨噬细胞集落刺激因子转染)、减少T细胞无反应性的方法、利用转染的免疫细胞(例如细胞因子转染的树突细胞)的方法、利用细胞因子转染的肿瘤细胞系的方法、利用抗独特型抗体的方法以及利用免疫调节药物沙利度胺和来拿度胺(lenalidomide)[Revlimid]的方法；和

(x)其它治疗方案包括：地塞米松、蛋白酶体抑制剂(包括bortezomib)、异维A酸(13-顺视黄酸)、沙利度胺、revemid、利妥昔单抗(Rituximab)、ALIMTA、Cephalon激酶抑制剂CEP-701和CEP-2563、抗Trk或抗NGF单克隆抗体、用¹³¹I-间碘苄胍(metaiodobenzylguanidine)(¹³¹I-MIBG)的靶向放射治疗、化学疗法后使用或者不用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的抗G(D2)单克隆抗体治疗。

可通过同时、序贯或单独给予各个治疗组分来实施这类联合治疗。这类组合产品使用上述剂量范围内的本发明化合物或其药学上可接受的盐，以及批准剂量范围内的其它活性药物。

合成法

可通过有机合成领域技术人员熟知的多种方法，制备本发明的化合物或其药学上可接受的盐。可以应用下述方法以及合成有机化学领域已知的合成方法或者本领域技术人员已知的变通方法，合成本发明的化合物或其药学上可接受的盐。这类方法包括但不限于下述方法。本文所引用的所有参考文献都通过引用全文结合到本文中。

可以应用本文所述的反应和技术制备本发明新的化合物或其药学上可接受的盐。反应在与所使用的试剂和原料相宜的溶剂中进行，并适于要进行的转化。另外，应当理解的是，在下述合成方法的描述中，所有所给出的反应条件，包括溶剂、反应环境、反应温度、实验持续时间和后处理步骤，都选择该反应的标准条件，这是易被本领域技术人员认可的。有机合成领域的技术人员应当了解的是，存在于分子各个部分的官能团必须与所给出的试剂和反应相容。与反应条件相容的取代基的这些限制，对于本领域技术人员而言是显而易见的，须使用备选方法。

实施例

现在，通过下面示例性实施例对本发明进行说明，除非另有说明，否则：

(i)温度以摄氏温度(℃)表示；在室温或环境温度下，即在18-25℃的温度范围内进行操作；

(ii)有机溶液经无水硫酸镁干燥；在高达60℃的浴温下用旋转蒸发器减压(4.5-30mmHg)蒸发有机溶剂；

(iii)色谱法是指硅胶快速色谱法；薄层色谱法(TLC)在硅胶板上进行；

(iv)一般而言，反应进程用TLC和/或液相色谱法/质谱法(LC/MS)跟踪，反应时间仅用于例证；

(v)最终产物具有令人满意的质子核磁共振(NMR)谱和/或质谱数据；

(vi)所给出的收率仅用以说明目的，不一定是方法的持续开发可获得的收率；如需要更多原料可重复制备；

(vii)当给出的NMR数据为主要特征质子的δ值形式时，以相对于四甲基硅烷(TMS)内标的百万分之几(ppm)给出，除非另有说明，否则就用DMSO-d₆作溶剂在300MHz进行测定；

(viii)化学符号具有其通用含义；

(ix)溶剂比以体积∶体积(v/v)给出；

(x)使用下列缩写词：

DMF N，N-二甲基甲酰胺；

THF 四氢呋喃；

DCM 二氯甲烷；

DMAP 4-二甲氨基吡啶；

DMSO 二甲亚砜；

DIPEA N，N-二异丙基乙胺；

EtOAc 乙酸乙酯；

(xi)ISCO Combiflash是指硅胶快速色谱法，采用Isco

分离系统：RediSep正相快速柱，流速为30-40ml/分钟。

实施例1

5-氯-N ⁴ -(5-异丙氧基-1H-吡唑-3-基)-N ² -[1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]嘧啶-2，4-二胺

向微波反应容器中装入1-(5-氟嘧啶-2-基)乙胺(方法1，0.25g，1.77mmol)、2，5-二氯-N-(5-异丙氧基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(方法2，0.50g，1.77mmol)和DIPEA(0.30g，2.34mmol)。加入无水正丁醇(2ml)，将反应管密封并在微波反应器中于160℃加热10小时。反应混合物用硅胶色谱法纯化两次(用ISCO Combiflash，EtOAc和DCM梯度洗脱)，得到标题化合物(0.19g，27％，白色固体)。LC-MS，393(M+1)。¹H NMR(CDCl₃)δ8.50(s，2H)，7.75(s，1H)，5.50(s，1H)，5.20(m，1H)，4.68(m，1H)，1.55(d，3H)，1.20(d，6H)。

实施例2

5-氯-N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N ⁴ -(5-异丙氧基-1H-吡唑-3- 基)嘧啶-2，4-二胺

实施例3

5-氯-N ² -[(1R)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N ⁴ -(5-异丙氧基-1H-吡唑-3- 基)嘧啶-2，4-二胺

用手性HPLC系统从实施例1中分离出标题化合物。

柱和溶剂条件：

柱：Chiralpak AD，250×20mm，10μ；

条件：80％己烷，20％异丙醇，0.1％二乙胺；

流速：20ml/分钟。

纯化后纯度检查。样品纯度用下列条件检查：

手性HPLC，用二极管阵列(Diode Array)检测

柱：Chiralpak AD，250×20mm，10μ；

条件：80％己烷，20％异丙醇，0.1％二乙胺；

流速：1ml/分钟。

第一峰(保留时间：9.21分钟，具有(-)旋光度读数)是S-异构体

第二峰(保留时间：13.54分钟，具有(+)旋光度读数)是R-异构体

用254nm的面积百分比计算各个对映体的对映体过量(e.e.)：＞99％。

实施例2：LC-MS，393(M+1)。¹H NMR(CDCl₃)δ8.50(s，2H)，7.75(s，1H)，5.50(s，1H)，5.20(m，1H)，4.68(m，1H)，1.55(d，3H)，1.20(d，6H)。

实施例3：LC-MS，393(M+1)。¹H NMR(CDCl₃)δ8.50(s，2H)，7.75(s，1H)，5.50(s，1H)，5.20(m，1H)，4.68(m，1H)，1.55(d，3H)，1.20(d，6H)。

实施例4

5-氟-N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N ⁴ -(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2，4-二胺

将(S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙胺盐酸盐(方法7，95mg)、2-氯-5-氟-N-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(方法8，114mg)和DIPEA(0.13ml)在正丁醇(2.5ml)中的混合物装到微波反应容器中。将该容器密封并在微波反应器中于180℃加热6小时。减压除去溶剂后，残余物用Gilson纯化(10-50％MeCN/H₂O，15分钟)，得到标题化合物(40.7mg，固体)。NMR11.26(s，1H)，8.67-9.18(m，3H)，8.22(s，1H)，6.04(s，1H)，4.86-5.40(m，1H)，2.25(s，3H)，1.57(d，3H)；m/z 333。

实施例5

5-氯-N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N ⁴ -(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2，4-二胺

将(S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙胺盐酸盐(方法7，80mg)、2，5-二氯-N-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(方法9，122mg)和DIPEA(0.134ml)在正丁醇(2.5ml)中的混合物装到微波反应容器中。将该容器密封并在微波反应器中于180℃加热6小时。减压除去溶剂后，残余物用Gilson纯化(10-50％MeCN/H₂O，15分钟)，得到标题化合物(90mg，固体)。NMR10.34(s，1H)，8.91(s，3H)，8.30(s，1H)，5.94(s，1H)，4.96-5.34(m，1H)，2.25(s，3H)，1.56(d，3H)；m/z 350。

实施例6

5-溴-N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N ⁴ -(5-异丙氧基-1H-吡唑-3- 基)嘧啶-2，4-二胺

将5-溴-2-氯-N-(5-异丙氧基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(方法13，150mg，0.45mmol)、(S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙胺盐酸盐(方法7，88mg，0.5mmol)和DIPEA(0.12ml)在正丁醇(2ml)中的混合物装到微波反应容器中。将该容器密封并在微波反应器中于165℃加热4小时。减压除去溶剂后，残余物用硅胶快速色谱法纯化(20-60％EtOAc/己烷)，得到标题化合物(118mg，60％，固体)。NMR：11.98(s，1H)，9.36(s，1H)，8.82(s，2H)，8.10(s，1H)，7.96(s，1H)，5.56(s，1H)，5.13(s，1H)，4.66(m，1H)，1.48(m，3H)，1.26(m，6H)；m/z 437。

实施例7

5-氯-N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N ⁴ -(5-甲氧基-1H-吡唑-3-基) 嘧啶-2，4-二胺

将2，5-二氯-N-(5-甲氧基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(方法14，0.25mmol，64mg)和(S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙胺盐酸盐(方法7，0.25mmol，44.4mg)溶于正丁醇(0.8ml)后，加入DIPEA(0.13ml)。然后将反应物在110℃下搅拌过夜。使溶剂蒸发，使残余物在EtOAc与水之间分配，合并的有机萃取物用盐水洗涤后干燥。蒸发溶剂得到棕色油状物(59mg)。用Gilson纯化(10-50％MeCN/H₂O，15分钟)，得到标题化合物(14.3mg，白色固体)。MR：9.64(s，1H)，8.78(d，2H)，8.18(s，1H)，7.86(s，1H)，5.52(s，1H)，4.99-5.15(m，1H)，3.65(s，3H)，1.43(d，3H)；m/z 366。

实施例8

5-氯-N ⁴ -(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基] 嘧啶-2，4-二胺

将(S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙胺盐酸盐(方法7，93mg)、2，5-二氯-N-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(方法15，135mg)和DIPEA(0.26ml)在正丁醇(2.5ml)中的混合物装到微波反应容器中。将该容器密封并在微波反应器中于180℃加热6小时。减压除去溶剂后，残余物用Gilson纯化(10-50％MeCN/H₂O，15分钟)，得到标题化合物(435mg，固体)。NMR：10.64(s，1H)，8.91(s，3H)，8.30(s，1H)，5.97(s，1H)，5.17(s，1H)，1.83-1.97(m，1H)，1.56(d，3H)，0.93-1.09(m，2H)，0.63-0.77(m，2H).m/z 413。

实施例9

N ⁴ -(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-5-氟-N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基] 嘧啶-2，4-二胺

将(S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙胺盐酸盐(方法7，93mg)、2-氯-N-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-5-氟嘧啶-4-胺(方法16，127mg)和DIPEA(0.22ml)在正丁醇(2.5ml)中的混合物装到微波反应容器中。将该容器密封并在微波反应器中于180℃加热6小时。减压除去溶剂后，残余物用Gilson纯化(10-50％MeCN/H₂O，15分钟)，得到标题化合物(435mg，固体)。NMR 11.28(s，1H)，8.92(s，3H)，8.24(s，1H)，6.04(s，1H)，4.92-5.54(m，1H)，1.82-1.98(m，1H)，1.56(d，3H)，0.94-1.06(m，2H)，0.64-0.80(m，2H).m/z 395。

实施例10

N-[5-氯-2-[(1S)-1-(5-氟-嘧啶-2-基)-乙氨基]-6-(5-异丙氧基-1H-吡唑-3-基氨基)-嘧啶-4-基]-N-甲基-甲磺酰胺

向N-[2，5-二氯-6-(5-异丙氧基-1H-吡唑-3-基氨基)-嘧啶-4-基]-N-甲基-甲磺酰胺(方法18，191mg，0.5mmol)的正丁醇(2ml)溶液中加入S-1-(5-氟-嘧啶-2-基)-乙胺盐酸盐(方法7，172mg，1.2mmol)和乙基二异丙胺(157mg)。将混合物在微波中于180℃加热2小时。LC/MS显示反应完成。使溶剂蒸发，将残余物溶于DCM，然后用NaHCO₃水溶液洗涤，干燥后浓缩。进行快速色谱法(用EtOAc/Hex(75％)为洗脱液)。得到无色固体(134mg)，收率56％。NMR(CDCl₃)8.64(s，2H)，7.61(s，1H)，5.74(s，0.6H)，5.42(s，0.9H)，5.25(s，1H)，4.83(s，1H)，3.20(s，3H)，3.18(s，3H)，1.63(d，J＝6.2Hz，3H)，1.40(m，6H).MS(ES^-)m/z 498.19，500.14[M^-]。

实施例11

N-[5-氟-2-[(1S)-1-(5-氟-嘧啶-2-基)-乙氨基]-6-(5-异丙氧基-1H-吡唑-3-基氨基)-嘧啶-4-基]-N-甲基-甲磺酰胺

向N-[2-氯-5-氟-6-(5-异丙氧基-1H-吡唑-3-基氨基)-嘧啶-4-基]-N-甲基-甲磺酰胺(方法20，210mg，0.5mmol)的正丁醇(2ml)溶液中加入S-1-(5-氟-嘧啶-2-基)-乙胺盐酸盐(方法7，197mg，1.1mmol)和乙基二异丙胺(142mg)。将混合物在微波中于180℃加热2小时。LC/MS显示反应完成。使溶剂蒸发，将残余物溶于DCM，然后用NaHCO₃水溶液洗涤，干燥后浓缩。进行快速色谱法(用EtOAc/Hex(75％)为洗脱液)。得到无色固体(147mg)，收率55％。NMR(CDCl₃)8.62(m，2H)，7.57(s，0.8H)，5.38(s，0.8H)，5.18(m，1H)，4.81(s，0.9H)，3.23(s，3H)，3.20(s，3H)，1.61(d，J＝6.8Hz，3H)，1.39(m，6H).MS(ES+)m/z 484.32[MH+].MS(ES^-)m/z 482.18[M^-]。

实施例12

6-氯-N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N ⁴ -(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2，4-二胺

按照实施例9的类似方法，由2，6-二氯-N-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(方法17)和(S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙胺盐酸盐(方法7)合成标题化合物。m/z 348。

实施例13

N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N ⁴ -(5-甲基-1H-吡唑-3-基)-6-吗啉 -4-基嘧啶-2，4-二胺

将6-氯-N²-[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N⁴-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2，4-二胺(实施例12，175mg)、吗啉(0.09ml)和DIPEA(0.13ml)在正丁醇(2.5ml)中的混合物于110℃加热48小时。减压除去溶剂后，残余物用Gilson纯化(5-35％MeCN/H₂O，15分钟)，得到标题化合物(99mg，固体)。¹H NMR：11.19(s，1H)9.28(s，1H)8.74-9.03(m，3H)5.81-5.83(m，1H)5.73(s，1H)4.98-5.24(m，2H)3.58-4.12(m，6H)2.39(s，3H)1.54(d，3H)；m/z 436。

实施例14

N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-5-甲基-N ⁴ -(5-甲基-1H-吡唑-3-基) 嘧啶-2，4-二胺

向微波反应容器中装入(S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙胺(方法7，111mg，0.63mmol)、2-氯-5-甲基-N-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(方法22，0.50g，1.77mmol)和DIPEA(0.225ml，1.26mmol)。加入无水正丁醇(2.1ml)后，将反应管密封并在微波反应器中于180℃加热4小时。减压除去溶剂后，残余物用Gilson纯化(5-95％MeCN/H₂O，15分钟)，得到标题化合物(75mg，固体)。¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ10.08(s，1H)8.93(s，2H)8.70(s，1H)7.74(s，1H)5.98(s，1H)4.79-5.44(m，1H)2.23(s，3H)2.10(s，3H)1.57(d，3H)；m/z 330。

实施例15

N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N ⁴ -(5-甲基-1H-吡唑-3-基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2，4-二胺

向微波反应容器中装入(S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙胺(方法7，111mg，0.63mmol)、2-氯-N-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-胺(方法23，0.50g，1.77mmol)和DIPEA(0.225ml，1.26mmol)。加入无水正丁醇(2.1ml)，将反应管密封并在微波反应器中于180℃加热4小时。减压除去溶剂后，残余物用Gilson纯化(5-95％MeCN/H₂O，15分钟)，得到标题化合物(50mg，固体)。¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.79(s，2H)8.16(s，1H)8.08(s，1H)5.77(s，1H)5.13(m，1H)2.12(s，3H)1.43(d，3H)；m/z 383。

实施例16

5-氯-N ² -[(1R)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N ⁴ -(5-甲基-1H-吡唑-3-基) 嘧啶-2，4-二胺

将外消旋体-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙胺盐酸盐(方法1，100mg)、2，5-二氯-N-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(方法9，200mg)和DIPEA(0.150ml)在正丁醇(2.5ml)中的混合物装到微波反应容器中。将该容器密封并在微波反应器中于180℃加热6小时。减压除去溶剂后，残余物用Gilson纯化(10-50％MeCN/H₂O，15分钟)，得到5-氯-N²-[1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N⁴-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2，4-二胺(55mg，固体)。用SFC条件进行手性纯化(Chiralpak AD-H，20％ i-PrOH/80％ CO₂/0.1％二甲基乙胺)后，得到标题化合物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ12.03(s，1H)8.83(s，2H)7.88(s，1H)7.44(s，1H)5.93(s，1H)4.92-5.29(m，1H)2.20(s，3H)1.49(d，3H)；m/z 350。

实施例17

N-{5-氯-2-{[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]氨基}-6-[(5-甲基-1H-吡唑-3-基)氨基]嘧啶-4-基}-N，N′，N′-三甲基磺酰胺

向微波反应容器中装入N-{2，5-二氯-6-[(5-甲基-1H-吡唑-3-基)氨基]嘧啶-4-基}-N，N′，N′-三甲基磺酰胺(方法24，83.9mg，0.221mmol)、(S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙胺盐酸盐(方法7，78.4mg，0.443mmol)和DIPEA(0.120ml，0.682mmol)。加入无水正丁醇(1ml)，将反应管密封并在微波反应器中于160℃加热2小时。反应混合物用硅胶色谱法纯化(用ISCO Combiflash，EtOAc和己烷梯度洗脱)，得到标题化合物(95.8mg，89.6％，白色固体)。LC-MS，485(M+1)。¹H NMR(DMSO-d6，400MHz，80℃)δ11.48-12.40(br，1H)，8.77(s，1H)，7.85-8.66(br，1H)，6.98-7.61(br，1H)，6.23(s，1H)，5.14-5.11(m，1H)，2.93(s，3H)，2.83(s，6H)，2.21(s，3H)，1.53(d，3H)。

实施例18

N-{5-氯-2-{[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]氨基}-6-[(5-甲氧基-1H- 吡唑-3-基)氨基]嘧啶-4-基}-N，N′，N′-三甲基磺酰胺

向微波反应容器中装入N-{2，5-二氯-6-[(5-甲氧基-1H-吡唑-3-基)氨基]嘧啶-4-基}-N，N′，N′-三甲基磺酰胺(方法29，44.1mg，0.112mmol)、(S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙胺盐酸盐(方法7，39.5mg，0.223mmol)和DIPEA(0.062ml，0.352mmol)。加入无水正丁醇(1ml)，将反应管密封并在微波反应器中于160℃加热2小时。反应混合物用硅胶色谱法纯化(用ISCO Combiflash，EtOAc和己烷梯度洗脱)，得到标题化合物(48.6mg，87％，白色固体)。LC-MS，501(M+1)。¹H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ12.01(s，1H)，9.76(s，1H)，8.83(s，2H)，8.21(s，1H)，5.60(s，1H)，5.04-5.06(m，1H)，3.76(s，3H)，2.80(s，3H)，2.70(s，6H)，1.59(d，3H)。

实施例19

N-{5-氯-2-{[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]氨基}-6-[(5-甲氧基-1H- 吡唑-3-基)氨基]嘧啶-4-基}-N-甲基甲磺酰胺

向微波反应容器中装入N-{2，5-二氯-6-[(5-甲氧基-1H-吡唑-3-基)氨基]嘧啶-4-基}-N-甲基甲磺酰胺(方法25，63.8mg，0.174mmol)、(S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙胺盐酸盐(方法7，61.7mg，0.348mmol)和DIPEA(0.122ml，0.693mmol)。加入无水正丁醇(1ml)，将反应管密封并在微波反应器中于160℃加热2小时。反应混合物用硅胶色谱法纯化(用ISCO Combiflash，EtOAc和己烷梯度洗脱)，得到标题化合物(63.1mg，77％，白色固体)。LC-MS：472(M+1)。¹H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ11.71(s，1H)，9.40(s，1H)，8.77(s，2H)，7.91(s，1H)，5.65(s，1H)，5.07-5.10(m，1H)，3.79(s，3H)，3.01(s，6H)，1.54(d，3H)。

实施例20

N-{2-{[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]氨基}-6-[(5-甲基-1H-吡唑-3- 基)氨基]嘧啶-4-基}-N，N′，N′-三甲基磺酰胺

向微波反应容器中装入N-{2-氯-6-[(5-甲基-1H-吡唑-3-基)氨基]嘧啶-4-基}-N，N′，N′-三甲基磺酰胺(方法30，51.9mg，0.150mmol)、(S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙胺盐酸盐(方法7，53.3mg，0.301mmol)和DIPEA(0.079ml，0.449mmol)。加入无水正丁醇(1ml)，将反应管密封并在微波反应器中于180℃加热4小时。反应混合物用硅胶色谱法纯化(用ISCO Combiflash，EtOAc和己烷梯度洗脱)，得到标题化合物(47.4mg，70％，白色固体)。LC-MS，451(M+1)。¹H NMR(DMSO-d6，400MHz，80℃)δ11.61(s，1H)，8.95(s，1H)，8.77(s，2H)，5.84-6.89(m，3H)，5.17-5.23(m，1H)，3.17(s，3H)，2.74(s，6H)，2.18(s，3H)，1.54(d，3H)。

实施例21

N-{5-氟-2-{[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]氨基}-6-[(5-甲基-1H-吡唑-3-基)氨基]嘧啶-4-基}-N-甲基甲磺酰胺

向微波反应容器中装入N-{2-氯-5-氟-6-[(5-甲基-1H-吡唑-3-基)氨基]嘧啶-4-基}-N-甲基甲磺酰胺(方法32，111mg，0.332mmol)、(S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙胺盐酸盐(方法7，143mg，0.668mmol)和DIEA(0.250ml，1.44mmol)。加入无水正丁醇(1ml)，将反应管密封并在微波反应器中于160℃加热2小时。反应混合物用硅胶色谱法纯化(用ISCOCombiflash，0-5％MeOH/DCM与1％NH₄OH的梯度)，得到标题化合物(90mg，62％，白色固体)。¹H NMR(DMSO，400MHz，80℃)δ11.51(br，1H)，10.00(br，1H)，8.79(s，2H)，6.25(s，1H)，5.11(m，1H)，3.14(s，3H)，3.08(s，3H)，2.21(s，3H)，1.53(d，3H)；m/z 441。

实施例22

N ⁴ -[5-(二甲氨基)-1H-吡唑-3-基]-5-氟-N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基) 乙基]嘧啶-2，4-二胺

向微波反应容器中装入N³-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-N⁵，N⁵-二甲基-1H-吡唑-3，5-二胺(方法35，50mg，0.2mmol)、(S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙胺盐酸盐(方法7，50mg，0.23mmol)和DIPEA(0.15ml，0.86mmol)的正丁醇(1ml)溶液，使之在微波反应器中于160℃加热2小时。除去溶剂。残余物用硅胶色谱法纯化(用ISCO Combiflash，0-5％甲醇/二氯甲烷与1％NH₄OH梯度洗脱)，得到标题化合物(49mg，67％，白色固体)。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)δ8.77(s，2H)，8.23(s，1H)，5.32(br，1H)，3.92(q，1H)，3.13(s，6H)，1.71(d，3H)；m/z 362。

实施例23

5-氯-N ⁴ -[5-(二甲氨基)-1H-吡唑-3-基]-N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基) 乙基]嘧啶-2，4-二胺

向微波反应容器中装入N³-(2，5-二氯嘧啶-4-基)-N⁵，N⁵-二甲基-1H-吡唑-3，5-二胺(方法36，50mg，0.2mmol)、(S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙胺盐酸盐(方法7，50mg，0.23mmol)和DIPEA(0.15ml，0.86mmol)的正丁醇(1ml)溶液，使之在微波反应器中于160℃加热2小时。除去溶剂。残余物用硅胶色谱法纯化(用ISCO Combiflash，0-5％甲醇/DCM与1％NH₄OH梯度洗脱)，得到标题化合物，为白色固体。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)δ8.77(s，2H)，8.26(br，1H)，5.35(br，1H)，3.49(q，1H)，3.11(s，6H)，1.72(d，3H)；m/z 378。

实施例24

5-硝基-N ⁴ -(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]嘧啶-2，4-二胺

向20ml圆底烧瓶中装入(S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙胺盐酸盐(方法7，0.25g，1.77mmol)、2-氯-N-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-5-硝基嘧啶-4-胺(方法37，0.3g，1.0mmol)和DIEA(0.30g，2.34mmol)。加入无水正丁醇(5ml)，将该烧瓶于60℃加热4小时。反应混合物用盐水(5ml×3)洗涤，有机层经干燥后浓缩。所得残余物用硅胶柱分离，得到所需产物(0.3g，75％)。LC-MS，386(M+1)。¹H NMR(DMSO-d6)δ12.3(s，1H)，10.5(s，1H)，9.1(s，1H)，9.0(s，1H)，8.80(s，2H)，6.1(s，1H)，5.2(dd，1H)，2.0(m，1H)，1.7(d，3H)，1.0(m，2H)，0.8(m，2H)。

实施例25

5-溴-N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N ⁴ -(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2，4-二胺

向微波小瓶中加入(S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙胺盐酸盐(方法7，369mg，2.08mmol)、5-溴-2-氯-N-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(方法38，500mg，1.73mmol)和DIEA(468mg，3.8mmol)。加入无水正丁醇(5ml)，将小瓶在微波炉中于165℃加热5小时。使反应混合物浓缩。所得残余物用硅胶柱分离，得到所需产物(320mg，47％)。LC-MS，393(M+1)。¹H NMR δ12.02(s，1H)，8.82(s，2H)，7.94(s，1H)，7.48(s，0.55H)，5.90(s，0.41H)，5.09(s，1H)，2.19(m，3H)，1.49(m，3H)。

实施例26

5-溴-N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N ⁴ -(5-甲氧基-1H-吡唑-3-基) 嘧啶-2，4-二胺

向微波小瓶中加入(S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙胺盐酸盐(方法7，155mg，0.77mmol)、5-溴-2-氯-N-(5-甲氧基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(方法39，180mg，0.59mmol)和DIEA(181mg，1.48mmol)。加入无水正丁醇(2.5ml)，将小瓶在微波炉中于165℃加热5小时。使反应混合物浓缩。所得残余物用硅胶柱分离，得到所需产物(80mg，33％)。LC-MS，409(M+1)。¹H NMR δ12.03(s，1H)，9.38(s，1H)，8.82(s，2H)，7.97-8.12(m，2H)，5.60(s，1H)，5.13(s，1H)，3.75(m，3H)，1.49(m，3H)。

实施例27

5-氯-N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N ⁴ -[5-(2，2，2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-3-基]嘧啶-2，4-二胺

向微波小瓶中加入(S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙胺盐酸盐(方法7，81mg，0.46mmol)、2，5-二氯-N-[5-(2，2，2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-3-基]嘧啶-4-胺(方法40，100mg，0.31mmol)和DIEA(110mg，0.9mmol)。加入无水正丁醇(2.5ml)，将小瓶在微波炉中于165℃加热5小时。使反应混合物浓缩。所得残余物用硅胶柱分离，得到所需产物(80mg，62％)。LC-MS，433(M+1)。¹H NMRδ12.19(s，1H)，9.76(s，1H)，8.83(s，2H)，7.92-8.10(m，2H)，5.67(s，1H)，5.13(s，1H)，4.75(m，2H)，1.49(m，3H)。

实施例28

6-氯-N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N ⁴ -(5-甲氧基-1H-吡唑-3-基) 嘧啶-2，4-二胺

将(S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙胺盐酸盐(方法7，512mg)、2，6-二氯-N-(5-甲氧基1-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(方法42，682mg)和DIPEA(1.16ml)在正丁醇(13ml)中的混合物于105℃加热过夜。减压除去溶剂后，残余物用Gilson纯化(10-50％MeCN/H₂O，15分钟)，得到标题化合物(500mg，固体)。¹H NMRδ8.92(s，2H)5.95(s，1H)5.18(s，1H)3.77(s，3H)1.49(d，3H)；m/z 366。

实施例29

N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N ⁴ -(5-甲氧基-1H-吡唑-3-基)-6-吗啉-4-基嘧啶-2，4-二胺

将6-氯-N²-[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N⁴-(5-甲氧基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2，4-二胺(实施例28，300mg)、吗啉(0.086ml)和DIPEA(0.218ml)在正丁醇(4ml)中的混合物在微波管中于120℃加热过夜。减压除去溶剂后，残余物用Gilson纯化(10-50％MeCN/H₂O，15分钟)，得到标题化合物(174mg，固体)。¹H NMR δ11.97(s，1H)9.49(s，1H)8.80(s，2H)7.58(s，1H)4.98-5.20(m，3H)3.72(s，3H)3.53(bs，4H)3.18(bs，4H)1.49(d，3H)；m/z 416。

实施例30

5，6-二氯-N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N ⁴ -(5-甲氧基-1H-吡唑 -3-基)嘧啶-2，4-二胺

将(S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙胺盐酸盐(方法7，500mg)，2，5，6-三氯-N-(5-甲氧基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(方法43，756mg)和DIPEA(1.14ml)在正丁醇(13ml)中的混合物于105℃加热6小时。减压除去溶剂后，残余物用Gilson纯化(10-50％MeCN/H₂O，35分钟)，得到标题化合物(210mg，固体)。¹H NMR δ9.87(s，1H)8.88(s，2H)8.78(s，1H)8.38(d，1H)5.62(s，1H)5.06-5.17(m，1H)3.77(s，3H)1.49(d，3H)；m/z399。

实施例31

5-氯-N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N ⁴ -(5-甲氧基-1H-吡唑-3- 基)-6-吗啉-4-基嘧啶-2，4-二胺

将5，6-二氯-N²-[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N⁴-(5-甲氧基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2，4-二胺(实施例30，100mg)、吗啉(0.026ml)和DIPEA(0.066ml)在正丁醇(2.0ml)中的混合物装到微波反应容器中。将该容器密封并于150℃加热24小时。减压除去溶剂后，残余物用Gilson纯化(2％-40％MeCN/H₂O，15分钟)，得到标题化合物(21.8mg，固体)。¹HNMR δ11.99(s，1H)9.30(s，1H)8.82(s，2H)7.89(d，1H)5.49(s，1H)4.93-5.14(m，1H)3.75(s，3H)3.44-3.62(m，4H)3.09-3.27(m，4H)1.47(d，3H)m/z 450。

实施例32

5-氟-N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N ⁴ -(5-甲基-1H-吡唑-3- 基)-6-吗啉-4-基嘧啶-2，4-二胺

将(S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙胺盐酸盐(方法7，141mg)，2-氯-5-氟-N-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)-6-吗啉-4-基嘧啶-4-胺(方法44，313mg)和DIPEA(0.266ml)在正丁醇(5.0ml)中的混合物装到微波反应容器中。将该容器密封并在微波反应器中于180℃加热9小时。减压除去溶剂后，残余物用Gilson纯化(2-40％MeCN/H₂O，15分钟)，得到标题化合物(38.4mg，固体)。¹H NMR δ8.84(s，2H)4.90-5.02(m，1H)3.38-3.72(m，8H)2.16(s，3H)1.44(d，3H)；m/z 418。

实施例33

5-氯-2-{[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]氨基}-6-[(5-甲氧基-1H-吡唑 -3-基)氨基]嘧啶-4-甲腈

使5，6-二氯-N²-[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N⁴-(5-甲氧基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2，4-二胺(实施例30，100mg)、锌(17mg)、氰化锌(31mg)、DPPF(7mg)和Pd₂(dba)₃(12mg)在DMA(2.0ml)中的混合物脱气后于100℃加热2小时。使溶液在乙酸乙酯与水之间分配。减压除去有机溶剂，残余物用Gilson纯化(10-50％MeCN/H₂O，15分钟)，得到标题化合物(42.5mg，固体)。¹H NMRδ10.20(s，1H)8.89(s，2H)8.56(bs，1H)5.63(s，1H)5.03-5.29(m，1H)3.75(s，3H)1.47(d，3H)；m/z 390。

实施例34

N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N ⁴ -(5-甲氧基-1H-吡唑-3- 基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2，4-二胺

将(S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙胺盐酸盐(方法7，139mg)、N-(5-甲氧基-1H-吡唑-3-基)-2-(甲磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-胺(方法45，265mg)和DIPEA(0.35ml)在正丁醇(5.0ml)中的混合物于90℃加热6小时。减压除去溶剂后，残余物用Gilson纯化(10-50％MeCN/H₂O，15分钟)，得到标题化合物(16.3mg，固体)。¹H NMR δ12.11(s，1H)10.47(s，1H)8.86(s，2H)8.29(s，1H)6.27(s，1H)5.30(s，1H)5.13-5.25(m，1H)3.77(s，3H)1.51(d，3H)；m/z 399。

实施例35

5-氟-N ² -[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N ⁴ -(5-甲氧基-1H-吡唑-3- 基)-6-吗啉-4-基嘧啶-2，4-二胺

将(S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙胺盐酸盐(方法7，232mg)、2-氯-5-氟-N-(5-甲氧基-1H-吡唑-3-基)-6-吗啉-4-基嘧啶-4-胺(方法46，361mg)和DIPEA(0.46ml)在正丁醇(2.5ml)中的混合物装到微波反应容器中。将该容器密封并于170℃加热24小时。减压除去溶剂后，残余物用Gilson纯化(2-40％MeCN/H₂O，15分钟)，得到标题化合物(74.2mg，固体)。¹H NMRδ10.07(s，1H)8.86(s，2H)5.48(s，1H)5.00(m，1H)3.86(s，3H)3.38-3.62(m，8H)1.48(d，3H)；m/z 434。

实施例36

N-{5-氯-2-{[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]氨基}-6-[(5-甲基-1H-吡唑-3-基)氨基]嘧啶-4-基}-N-甲基甲磺酰胺

按照实施例21的类似方法，由N-{2，5-二氯-6-[(5-甲基-1H-吡唑-3-基)氨基]嘧啶-4-基}-N-甲基甲磺酰胺(方法47)和(S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙胺盐酸盐(方法7)制备标题化合物。¹H NMR(DMSO-d6，400MHz，80℃)δ10.38(br，1H)，9.48(br，1H)，8.82(s，2H)，6.43(s，1H)，4.98(m，1H)，3.08(s，3H)，2.94(s，3H)，2.35(s，3H)，1.53(d，3H)。

实施例37

N-{5-氯-2-{[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]氨基}-6-[(5-异丙氧基 -1H-吡唑-3-基)氨基]嘧啶-4-基}-N，N′，N′-三甲基磺酰胺

按照实施例18的类似方法，由N-{2，5-二氯-6-[(5-异丙氧基-1H-吡唑-3-基)氨基]嘧啶-4-基}-N，N′，N′-三甲基磺酰胺(方法49)和(S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙胺盐酸盐(方法7)制备标题化合物。LC-MS，529(M+1)。¹H NMR(CD₂Cl₂，400MHz)δ11.47(br，1H)，8.61(s，2H)，7.80(s，1H)，6.0-6.40(br，1H)，5.44(s，1H)，5.23(m，1H)，4.75(s，1H)，2.02(s，3H)，2.92(s，6H)，1.62(s，3H)，1.35(s，6H)。

原料的制备

方法1

1-(5-氟嘧啶-2-基)乙胺

向装有2-(1-叠氮乙基)-5-氟嘧啶(方法3，0.60g，3.59mmol)的圆底烧瓶中装入10％Pd/C(0.191g)，抽真空后通过充气球回充入氢气。加入MeOH(10ml)，将混合物在室温下搅拌3小时。使混合物通过硅藻土垫过滤，随后用MeOH充分洗涤。使滤液浓缩得到标题化合物(0.50g，99％，浅黄色油状物)。¹H NMR(CDCl₃)δ8.60(s，2H)，4.65(brs 2H)，4.10(m，1H)，1.20(d，3H)。

方法2

2，5-二氯-N-(5-异丙氧基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺

将2，4，5-三氯嘧啶(533mg，2.93mmol)、5-异丙氧基-1H-吡唑-3-胺(413mg，2.93mmol)和三乙胺(0.49ml)的THF(5ml)溶液在室温下搅拌10小时。除去溶剂后加入EtOAc。溶液用水洗涤，经无水硫酸钠干燥后浓缩，得到标题化合物(582mg，69％，白色固体)。LC-MS，246(M-42)；¹H NMR(CDCl₃)δ8.19(s，1H)，7.80(s，1H)，5.79(s，1H)，4.65(m，1H)，1.30(d，6H)。

方法3

2-(1-叠氮乙基)-5-氟嘧啶

向装有1-(5-氟嘧啶-2-基)乙醇(方法4，0.79g，5.55mmol)的圆底烧瓶中装入三乙胺(0.67g，6.66mmol)和无水DCM(10ml)。使溶液冷却至0℃，滴加甲磺酰氯(0.70g，4.1mmol)。使所得混合物在室温下搅拌2小时，届时用旋转蒸发器除去挥发性组分。将残余物溶于DMF(15ml)，用叠氮化钠(0.72g，11.1mmol)处理。所得混合物在室温下搅拌60小时。然后使之在EtOAc与盐水之间进行分配。获取有机层，干燥(Na₂SO₄)并蒸发至干。粗产物用硅胶色谱法纯化(用ISCOCombiflash，以EtOAc和己烷梯度洗脱)，得到标题化合物(0.60g，两个步骤后收率65％，无色油状物)。GC-MS，167(M)，138(M-N₂)，125(M-N₃)；¹H NMR(CDCl₃)δ8.60(s，2H)，4.60(m，1H)，1.65(d，3H)。

方法4

1-(5-氟嘧啶-2-基)乙醇

将1-(5-氟嘧啶-2-基)乙酮(方法5，0.77g)溶于MeOH(15ml)，使溶液冷却至0℃。加入NaBH₄(0.210g，5.55mmol)。将混合物在室温下搅拌1小时后，在EtOAc和H₂O之间分配。有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤后浓缩，得到标题化合物(0.79g，99％，淡黄色油状物)。¹H NMR(CDCl₃)δ8.65(s，2H)，5.20(m，1H)，4.00(br s，1H)，1.80(d，3H)。

方法5

1-(5-氟嘧啶-2-基)乙酮

在氮气氛下，向装有5-氟嘧啶-2-甲腈(方法6，1.50g，12.19mmol)的圆底烧瓶中装入无水THF(30ml)。使溶液冷却至0℃后，滴加MeMgBr溶液(4.90ml 3.0M的乙醚溶液，14.62mmol)。在0℃下2小时后，反应混合物用冰水猝灭，用EtOAc萃取。有机萃取物用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥并蒸发至干，得到标题化合物(0.778g，收率46％，油状物)。GC-MS，140(M)；¹H NMR(CDCl₃)δ8.65(s，2H)，2.65(s，2H)。

方法6

5-氟嘧啶-2-甲腈

向10ml微波小瓶中装入2-氯-5-氟嘧啶(2.0g，15.09mmol)、Pd₂(dba)₃(0.549g，0.6mmol)、DPPF(0.67g，1.21mmol)、氰化锌(1.15g，9.81mmol)和锌粉(0.237mg，3.62mmol)。将该瓶抽真空后回充入氮气和无水二甲基乙酰胺。将小瓶放入Personal Chemistry微波反应器中于100℃加热10小时。反应混合物用EtOAc稀释后，用盐水洗涤三次。获取有机层并蒸发至干。将干燥残余物用硅胶色谱法纯化(用ISCOCombiflash，以EtOAc和己烷梯度洗脱)，得到标题化合物(1.50g，80％，乳白色固体)。GC-MS：123(M)；¹H NMR(CDCl₃)δ8.80(s，2H)。

方法7

(S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙胺盐酸盐

向(S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯(方法10，0.21g，0.87mmol)的DCM(5ml)溶液中加入HCl(1.3ml，5.2mmol)的二噁烷溶液。将反应物在室温下搅拌3小时。除去溶剂得到标题化合物(定量，白色固体)。MS：计算值：141；实测值：[M+H]⁺142。

合成(S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙胺盐酸盐的替代方法见方法50-53。

方法8

2-氯-5-氟-N-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺

向5-甲基-1H-吡唑-3-胺(612mg，6.0mmol)的无水EtOH(10ml)溶液中加入三乙胺(1.1ml)和2，4-二氯-5-氟嘧啶(1.0g，6.0mmol)，使所得溶液在室温下熟化12小时。使混合物在EtOAc与水之间分配。有机层用盐水洗涤后干燥。减压除去溶剂，得到标题化合物(679mg，固体)。m/z：228。

方法9

2，5-二氯-N-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺

向5-甲基-1H-吡唑-3-胺(2.78g，27.3mmol)的无水EtOH(30ml)溶液中加入三乙胺(5ml)和2，4，5-三氯嘧啶(5.0g，27.3mmol)，使所得溶液在室温下熟化12小时。使混合物在EtOAc与H₂O之间分配，有机层用盐水洗涤后干燥。减压除去溶剂，得到标题化合物(4.1g)。m/z：245。

方法10

(S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯

将THF(10ml)中的(S)-N-(1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基)乙酰胺(方法11，0.20g，1.09mmol)，DMAP(0.027g，0.22mmol)和二碳酸二叔丁酯(0.60g，2.73mmol)在50℃下搅拌40小时。冷却至室温后，加入氢氧化锂一水合物(0.094g，2.24mmol)和水(10ml)。将反应物在室温下搅拌9小时。加入乙醚(30ml)，分离有机层，用盐水(20ml)洗涤后经硫酸钠干燥。除去溶剂后，所得残余物用柱色谱法纯化(Hex-EtOAc＝5∶1)，得到标题化合物(0.21g，80％，浅黄色油状物)。NMR(400MHz)8.84(s，2H)，7.24(d，J＝7.6Hz，1H)，4.74(m，1H)，1.35(s，12H).MS：计算值241；实测值：[M+H]⁺ 242。

方法11

(S)-N-(1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基)乙酰胺

在氮气氛下，向MeOH(5ml)中的N-(1-(5-氟嘧啶-2-基)乙烯基)乙酰胺(方法12，0.10g，0.55mmol)加入(+)-1，2-双((2S，5S)-2，5-二乙基磷酸(diethylphospholano))苯(环辛二烯)三氟甲磺酸铑(I)(0.04g，0.0055mmol)。将溶液移至高压钢瓶中并充入150psi氢气。将反应物在室温下搅拌4小时。除去溶剂，所得残余物用柱色谱法纯化(EtOAc)，得到标题化合物(0.096g，95％，白色固体)。¹H NMR(400MHz)8.84(d，J＝0.8Hz，2H)，8.34(d，J＝7.6Hz，1H)，5.00(m，1H)，1.84(s，3H)，1.37(d，J＝6.8Hz，3H)。MS：计算值：183；实测值：[M+H]⁺ 184。用HPLC(Chiralpak IA；95∶5 CO₂/MeOH)测定的对映体过量＞99％ee。

方法12

N-(1-(5-氟嘧啶-2-基)乙烯基)乙酰胺

在0℃下，向THF(10ml)中的5-氟嘧啶-2-甲腈(方法6，1.0g，8.1mmol)中滴加MeMgBr(3.3ml，9.75mmol)的乙醚溶液中。加完后，将反应物升温至室温，在室温下搅拌1小时后，用DCM(10ml)稀释。一次性加入乙酸酐(1.23ml，13.0mmol)。将反应物在室温下搅拌1小时后在40℃下搅拌1小时。加入饱和碳酸氢钠溶液(10ml)后，用EtOAc萃取(2×20ml)。合并的有机层经硫酸钠干燥。除去溶剂后，所得残余物用柱色谱法纯化(己烷EtOAc＝2.5∶1)，得到标题化合物(0.38g，26％，白色固体)。¹H NMR(400MHz)9.34(s，1H)，8.95(s，2H)，6.25(s，1H)，6.03(s，1H)，2.11(s，3H).MS：计算值：181；实测值：[M+H]⁺182。

方法13

5-溴-2-氯-N-(5-异丙氧基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺

向5-异丙氧基-1H-吡唑-3-胺(11.6g，82.1mmol)的THF(85ml)溶液中加入DIPEA(16ml)和2，4-二氯-5-溴嘧啶(17g，74.6mmol)，将所得溶液在40℃下熟化16小时。使混合物在EtOAc与H₂O之间分配，有机层用盐水洗涤后干燥。减压除去溶剂，柱色谱法处理后得到标题化合物，为固体。m/z：332。

方法14

2，5-二氯-N-(5-甲氧基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺

向5-甲氧基-1H-吡唑-3-胺(890mg，7.8mmol)的无水EtOH(20ml)溶液中加入三乙胺(3.3ml，23.6mmol)和2，4，5-三氯嘧啶(1.4g，7.8mmol)，使所得溶液在室温下熟化12小时。使混合物在EtOAc与H₂O之间分配，有机层用盐水洗涤后干燥。减压除去溶剂，得到标题化合物，为静置时结晶的油状物(1.8g)。m/z：261。

方法15-17

下列化合物按照方法14，用合适的原料制备。

方法	化合物	m/z	原料
				15	2，5-二氯-N-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺	271	5-环丙基-1H-吡唑-3-胺和2，4，5-三氯嘧啶
16	2-氯-N-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-5-氟嘧啶-4-胺	254	5-环丙基-1H-吡唑-3-胺和2，4-二氯-5-氟嘧啶
				17	2，6-二氯-N-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺	245	5-甲基-1H-吡唑-3-胺和2，4，6-三氯嘧啶

方法18

N-[2，5-二氯-6-(5-异丙氧基-1H-吡唑-3-基氨基)-嘧啶-4-基]-N-甲基 -甲磺酰胺

向N-甲基-N-(2，5，6-三氯-嘧啶-4-基)-甲磺酰胺(方法19，1.236g，4.3mmol)的正丁醇(8ml)溶液中加入5-异丙氧基-1H-吡唑-3-基胺(601mg，4.3mmol)和乙基二异丙胺(556mg)。将混合物于70℃加热过夜。LC/MS显示反应完成。使溶剂蒸发，将残余物溶于DCM，然后用NaHCO₃水溶液洗涤，干燥后浓缩。进行快速色谱法(EtOAc/Hex(50％)为洗脱液)。得到无色固体(669mg)，收率39％。NMR(CDCl₃)8.06(s，1H)，5.78(s，1H)，4.61(m，1H)，3.21(s，3H)，3.16(s，3H)，1.32(d，J＝6.0Hz，6H).MS(ES+)m/z 395.2，397.1[MH+].MS(ES^-)m/z393.1，395.0[M^-]。

方法19

N-甲基-N-(2，5，6-三氯-嘧啶-4-基)-甲磺酰胺

向THF(20ml)中的N-甲基甲磺酸酯(954mg，8.7mmol)加入NaH(367mg，9.2mmol，60％/矿物油)。在室温下搅拌10分钟后，在0℃下，将其加到2，4，5，6-四氯-嘧啶(1.904g，8.7mol)的THF(10ml)溶液中。将反应混合物在0℃下搅拌3小时。LC/MS显示反应完成。使溶剂蒸发，将残余物溶于DCM，然后用NaHCO₃水溶液洗涤，干燥后浓缩。进行快速色谱法(EtOAc/Hex(25％)为洗脱液)。得到无色固体(1.236g)，收率49％。NMR(400MHz，CDCl₃)3.30(s，3H)，3.32(s，3H)。¹³C-NMR(400MHz，CDCl₃)162.2，161.2，156.0，124.7，39.5，37.1.MS(ES+)m/z289.83，291.82[MH+]。

方法20

N-[2-氯-5-氟-6-(5-异丙氧基-1H-吡唑-3-基氨基)-嘧啶-4-基]-N-甲基-甲磺酰胺

向N-(2，6-二氯-5-氟-嘧啶-4-基)-N-甲基-甲磺酰胺(方法21，440mg，1.6mmol)的正丁醇(3ml)溶液中加入5-异丙氧基-1H-吡唑-3-基胺(227mg，1.6mmol)和DIPEA(207mg)。将混合物于70℃加热过夜。LC/MS显示反应完成。使溶剂蒸发，将残余物溶于DCM，然后用NaHCO₃水溶液洗涤，干燥后浓缩。进行快速色谱法(EtOAc/Hex(50％)为洗脱液)。得到无色固体(280mg)，收率46％。¹H-NMR(300MHz，CD₃OD)5.84(s，0.8H)，4.61(m，1H)，3.32(s，3H)，3.27(s，3H)，1.36(d，J＝6.0；6H).MS(ES+)m/z 378.86，380.86[MH+].MS(ES^-)m/z376.88，378.87[M^-]。

方法21

N-(2，6-二氯-5-氟-嘧啶-4-基)-N-甲基-甲磺酰胺

向THF(20ml)中的N-甲基甲磺酸酯(546mg，5mmol)加入NaH(220mg，5.5mmol，60％/矿物油)。在室温下搅拌10分钟后，在0℃下，加到2，4，6-三氯-5-氟-嘧啶(1.007g，5mol)的THF(5ml)溶液中。将反应混合物在0℃下搅拌3小时。LC/MS显示反应完成。使溶剂蒸发，将残余物溶于DCM，然后用NaHCO₃水溶液洗涤，干燥后浓缩。进行快速色谱法(EtOAc/Hex(25％)为洗脱液)。得到无色固体(986mg)，收率72％。NMR(CDCl₃)3.45(d，J＝1.9Hz，3H)，3.37(s，3H).MS(ES^-)m/z 274.0，276.0[M^-]。

方法22

2-氯-5-甲基-N-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺

向2，4-二氯-5-甲基嘧啶(1.25g，7.8mmol)的EtOH(30ml)溶液中加入5-甲基-1H-吡唑-3-基胺(756mg，7.8mmol)和DIPEA(2.8ml)。将混合物于70℃加热过夜。LC/MS显示反应完成。通过真空过滤得到标题化合物(700mg，白色固体)。m/z 224。

方法23

2-氯-N-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-胺

向2，4-二氯-5-三氟甲基嘧啶(1.27g，5.8mmol)的MeCN(20ml)溶液中加入5-甲基-1H-吡唑-3-基胺(568mg，5.8mmol)和Et₃N(1.6ml)。将混合物在环境温度下搅拌过夜。LC/MS显示反应完成。蒸发溶剂后得到的黄色油状物，用Gilson纯化(5-95％MeCN/H₂O，15分钟)，得到标题化合物(300mg，固体)。m/z 278。

方法24

N-{2，5-二氯-6-[(5-甲基-1H-吡唑-3-基)氨基]嘧啶-4-基}-N，N′，N′-三甲基磺酰胺

向N，N，N′-三甲基-N′-(2，5，6-三氯嘧啶-4-基)磺酰胺(方法26，0.505g，1.59mmol)的正丁醇(3ml)溶液中加入5-甲基-1H-吡唑-3-胺(159mg，1.59mmol，纯度97％)和DIPEA(0.419ml，2.38mmol)。将混合物于50℃加热过夜。LC/MS显示反应完成。使溶剂蒸发，使残余物在DCM与H₂O之间分配。然后有机层经Na₂SO₄干燥，过滤除去固体，然后真空浓缩。残余物用硅胶色谱法纯化(用ISCO Combiflash，EtOAc和己烷梯度洗脱)，得到标题化合物(453mg，75％，浅黄色固体)。LC-MS，380(M+1)。NMR(DMSO，400MHz)δ12.33(s，1H)，9.82(s，1H)，6.24(s，1H)，3.08(s，3H)，2.91(s，6H)，2.25(s，3H)。

方法25

下列化合物按照方法24，用合适的原料制备。

方法	化合物	m/z	原料	NMR
					25	N-{2，5-二氯-6-[(5-甲氧基-1H-吡唑-3-基)氨基]嘧啶-4-基}-N-甲基甲磺酰胺	367	5-甲氧基-1H-吡唑-3-胺和N-甲基-N-(2，5，6-三氯嘧啶-4-基)甲磺酰胺	¹H(DMSO-d6，400MHz)11.26(s，1H)，9.91(s，1H)，5.81(s，1H)，3.81(s，3H)，3.28(s，3H)，3.19(s，3H)。

方法26

N，N，N′-三甲基-N′-(2，5，6-三氯嘧啶-4-基)磺酰胺

向NaH(343mg，8.58mmol，0％/矿物油)的无水DMF(2ml)溶液中加入N，N，N′-三甲基磺酰胺(方法28，492mg，3.56mmol)(于DMF(2ml)中)。将该反应混合物在室温下搅拌30分钟后，在0℃下加到2，4，5，6-四氯-嘧啶(726mg，3.26mmol)的THF(30ml)溶液中。将反应混合物由0℃至室温搅拌过夜。使溶剂蒸发，将残余物溶于DCM，然后用NH₄Cl水溶液洗涤，干燥后浓缩。进行快速色谱法(EtOAc/Hex(10％)为洗脱液)。得到白色固体(553mg)，收率53％。NMR(400MHz，DMSO)δ3.18(s，3H)，2.93(s，6H)。

方法27

下列化合物按照方法26，用合适的原料制备。

方法	化合物	m/z	原料	NMR
					27	N-(2，6-二氯嘧啶-4-基)-N，N′，N′-三甲基磺酰胺	367	N，N，N′-三甲基磺酰胺和2，4，6-三氯嘧啶	¹H(400MHz，DMSO)3.43(s，3H)，2.90(s，6H)。

方法28

N，N，N′-三甲基磺酰胺

在0℃下，向二甲氨基磺酰氯(1.49ml，13.8mmol)的DCM(2.0ml)溶液和K₂CO₃(1,24g，8.9mmol)中慢慢加入甲胺(16ml，32mmol，2M/THF)。将反应混合物于0℃搅拌1小时，然后升温至室温又1小时。真空除去溶剂，然后加入无水DCM(30ml)，过滤除去固体后，除去溶剂得到黄色液体产物(1.84g，产率97％)。NMR(400MHz，CDCl₃)δ4.40(s，1H)，2.74(s，6H)，1.70(s，3H)。

方法29

N-{2，5-二氯-6-[(5-甲氧基-1H-吡唑-3-基)氨基]嘧啶-4-基}-N，N′，N′- 三甲基磺酰胺

向N，N，N′-三甲基-N′-(2，5，6-三氯嘧啶-4-基)磺酰胺(方法26，318mg，1.0mmol)的正丁醇(1ml)溶液中加入5-甲氧基-1H-吡唑-3-胺(102mg)和DIPEA(0.240ml，1.36mmol)。将混合物于50℃加热过夜。使溶剂蒸发，使残余物在DCM与H₂O之间分配。然后有机层经Na₂SO₄干燥，过滤除去固体，然后真空浓缩。残余物用硅胶色谱法纯化(用ISCO Combiflash，EtOAc和己烷梯度洗脱)，得到标题化合物(123mg，34％，干的膜状物)。LC-MS，396(M+1)。NMR(DMSO，400MHz)δ9.74(s，1H)，5.81(s，1H)，3.81(s，3H)，3.12(s，3H)，2.93(s，6H)。

方法30

N-{2-氯-6-[(5-甲基-1H-吡唑-3-基)氨基]嘧啶-4-基}-N，N′，N′-三甲基磺酰胺

向N-(2，6-二氯嘧啶-4-基)-N，N′，N′-三甲基磺酰胺(方法27，1.72g，6.05mmol)的正丁醇(6ml)溶液中加入5-甲基-1H-吡唑-3-胺(0.605g，6.05mmol)和DIPEA(1.6ml，9.09mmol)。将混合物于70℃加热过夜。使反应混合物过滤；固体用MeOH洗涤三次，得到纯的白色固体(0.205g，产率9.7％)。LC-MS，346(M+1)。NMR(DMSO-d6，400MHz，80℃)δ11.89(s，1H)，9.82(s，1H)，7.22(s，1H)，5.97(s，1H)，3.32(s，3H)，2.87(s，6H)，2.21(s，3H)。

方法31

N-(2，6-二氯-5-氟嘧啶-4-基)-N-甲基甲磺酰胺

向NaH(60％/矿物油，176mg，8.58mmol)的无水DMF(2ml)溶液中，加入N-甲基甲磺酰胺(436mg，4.0mmol)/DMF(2ml)。将该反应混合物在室温下搅拌30分钟后，在0℃下，滴加到2，4，6-三氯-5-氟嘧啶(804mg，4.0mmol)的THF(30ml)溶液中。将反应混合物由0℃至室温搅拌过夜。使溶剂蒸发，残余物用硅胶色谱法纯化(用ISCOCombiflash，0-30％乙酸乙酯/己烷与1％TEA梯度洗脱)。得到白色固体(700mg)，收率64％。NMR(400MHz，DMSO)δ3.38(s，3H)，3.31(s，3H)。

方法32

N-{2-氯-5-氟-6-[(5-甲基-1H-吡唑-3-基)氨基]嘧啶-4-基}-N-甲基甲磺酰胺

向N-(2，6-二氯-5-氟嘧啶-4-基)-N-甲基甲磺酰胺(方法31，914mg，3.35mmol)的正丁醇(3ml)溶液中加入5-甲基-1H-吡唑-3-胺(351mg，3.62mmol，纯度97％)和DIPEA(1.2ml，6.9mmol)。将混合物于50℃加热过夜。LC/MS显示反应完成。使溶剂蒸发，残余物用硅胶色谱法纯化(用ISCO Combiflash，0-5％甲醇/DCM与1％NH₄OH梯度洗脱)，得到标题化合物(1.06g，95％，浅黄色固体)。LC-MS，335(M+1)。NMR(DMSO-d6，400MHz)δ12.27(s，1H)，10.53(s，1H)，6.32(s，1H)，3.27(s，3H)，3.20(s，3H)，2.25(s，3H)。

方法33

(2E或Z)-3-(二甲氨基)-3-(甲硫基)丙烯腈

使乙腈(12ml，228mmol)/THF(100ml)在-78℃下冷却，通过加料漏斗滴加丁基锂(2.5M/己烷，92ml，230mmol)。再搅拌反应物30分钟。在氮气流下，一次性加入固体的二甲基二硫代氨基甲酸甲酯(方法41，14.09g，104mmol)。在-78℃下搅拌30分钟后，在室温下搅拌6小时。然后使反应物在冰浴中冷却。通过注射器将碘甲烷(10ml，125mmol)加到反应物中。使反应物升温至室温，并在室温下搅拌过夜。向反应物中加入乙酸乙酯(200ml)，反应物用水(2×100ml)洗涤。合并有机相并浓缩，残余物用硅胶色谱法纯化(用ISCO Combiflash，O-20％乙酸乙酯/己烷梯度洗脱)，得到白色固体的标题化合物(10.5g，71％)，为褐色液体形式的EZ异构体的混合物。NMR(主要异构体)(CDCl3，400MHz)δ4.08(s，1H)，3.00(s，6H)，2.39(s，3H)。

方法34

N ⁵ ，N ⁵ -二甲基-1H-吡唑-3，5-二胺

将(2E或Z)-3-(二甲氨基)-3-(甲硫基)丙烯腈(方法33，9.525g，67mmol)和水合肼(10.06g，201mmol)在乙醇(70ml)中的混合物于85℃加热过夜。除去溶剂后，残余物用硅胶色谱法纯化(用ISCOCombiflash，以0-10％甲醇/二氯甲烷与1％NH₄OH梯度洗脱)。得到5.8g(69％)产物，为稠的褐色油状物。LC-MS，127(M+1)。LC-MS，127(M+1).NMR(DMSO，400MHz)δ9.51(br，1H)，4.67(s，1H)，2.62(s，6H)。

方法35

N ³ -(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-N ⁵ ，N ⁵ -二甲基-1H-吡唑-3，5-二胺

将2，4-二氯-5-氟嘧啶(166mg，1mmol)、N⁵，N⁵-二甲基-1H-吡唑-3，5-二胺(方法34，150mg，1.2mmol)和DIEA(0.35ml，2mmol)在乙醇(3ml)中于55℃加热过夜。除去溶剂后，残余物用硅胶色谱法纯化(ISCOCombiflash，以0-5％甲醇/二氯甲烷与1％NH₄OH梯度洗脱)，得到100mg产物(40％，白色固体)。MS：257(M+1)；NMR(DMSO-d6，400MHz，80℃)δ11.60(br，1H)，10.26(br，1H)，8.23(s，1H)，5.73(s，1H)，2.76(s，6H)。

方法36

下列化合物按照方法26，用合适的原料制备。

方法	化合物	m/z	原料	NMR
					36	N ³ -(2，5-二氯嘧啶-4- 基)-N ⁵，N⁵ -二甲基 -1H-吡唑-3，5-二胺	273	N⁵，N⁵-二甲基-1H-吡唑-3，5-二胺和2，4，5-三氯嘧啶	¹H(DMSO，400MHz，80℃)δ11.67(br，1H)，9.51(br，1H)，8.34(s，1H)，5.68(s，1H)，2.76(s，6H)。

方法37

2-氯-N-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-5-硝基嘧啶-4-胺

在25℃下，向2，4-二氯-5-硝基嘧啶(3.0g，15mmol)和DIEA(2.4g，18.5mmol)的正丁醇(30ml)溶液中慢慢加入5-环丙基-1H-吡唑-3-胺(2.0g，16.2mmol)。将所得溶液在25℃下搅拌5分钟并浓缩至干，得到标题化合物(3.1g)。NMR(CDCl₃)0.80(m，2H)，1.05(m，2H)，6.60(s，1H)，9.20(s，1H)，9.70(br s，1H)，10.40(br s，1H)。

方法38

5-溴-2-氯-N-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺

在室温下，向5-溴-2，4-二氯嘧啶(1.29g，5.66mmol)的EtOH(15ml)溶液中加入5-甲基-1H-吡唑-3-胺(549mg，5.66mmol)的EtOH(3ml)溶液和三乙胺(628mg，6.22mmol)，将反应混合物在室温下搅拌过夜。悬浮液经过滤后，用水洗涤并干燥，得到所需产物(1.27g，78％，白色固体)。NMR(CDCl₃)2.24(s，3H)，6.24(s，1H)，8.41(s，1H)，9.29(s，1H)，12.32(s，1H)。

方法39

5-溴-2-氯-N-(5-甲氧基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺

在室温下，向5-溴-2，4-二氯嘧啶(1.20g，5.26mmol)的THF(10ml)的溶液中加入5-甲氧基-1H-吡唑-3-胺(594mg，5.26mmol)和三乙胺(685mg，6.3mmol)，将反应混合物在40℃下搅拌过夜。悬浮液经过滤后，用水洗涤并干燥，得到所需产物，为白色固体。MS：305(M+1)。

方法40

2，5-二氯-N-[5-(2，2，2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-3-基]嘧啶-4-胺

在室温下，向2，4，5-三氯嘧啶(1.00g，5.45mmol)的THF(10ml)溶液中加入5-(2，2，2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-3-胺(986mg，5.45mmol)和三乙胺(606mg，6.0mmol)，将反应混合物在40℃下搅拌过夜。悬浮液经过滤后，用水洗涤并干燥，得到所需产物，为白色固体。MS：328(M+1)。

方法41

二甲基二硫代氨基甲酸甲酯

将二甲胺(2M/THF，60ml，120mmol)在冰浴中冷却。分批加入二氧化碳(6ml，100mmol)后，加入NaOH(4.8g)/H₂O(40ml)。将反应物在冰浴中搅拌30分钟后，在室温下搅拌2小时。然后将反应物用冰浴冷却，通过注射器慢慢添加碘甲烷(7.5ml，120mmol)。将反应物在冰浴中搅拌1小时后，在室温下搅拌过夜。加乙醚(100ml)萃取产物。合并有机相，经MgSO₄干燥。除去溶剂后得到14.32g产物(收率100％，白色固体)。NMR(400MHz，CDCl₃)δ3.52(s，3H)，3.35(s，3H)，2.61(s，3H)。

方法42

2，6-二氯-N-(5-甲氧基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺

向2，4，6-三氯-嘧啶(1.7g)的无水乙醇(100ml)溶液中加入DIEPA(4.1ml)和5-甲氧基-1H-吡唑-3-胺盐酸盐(1.46g)。所得溶液在室温下搅拌过夜。使溶剂减压蒸发。粗制化合物用Gilson纯化(10-60％MeCN/H₂O，15分钟)，得到标题化合物(1.23g，固体)。¹H NMR δ12.19(s，1H)10.68(s，1H)6.76(s，1H)5.40(s，1H)3.82(s，3H)；m/z 260。

方法43

2，5，6-三氯-N-(5-甲氧基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺

向2，4，5，6-四氯-嘧啶(2.18g)的无水乙醇(100ml)溶液中加入DIEPA(4.4ml)和5-甲氧基-1H-吡唑-3-胺盐酸盐(1.50g)。将所得溶液在室温下搅拌过夜。使溶剂减压蒸发。粗制化合物用Gilson纯化(10-60％MeCN/H₂O，15分钟)，得到标题化合物(0.76g，固体)。m/z 294。

方法44

2-氯-5-氟-N-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)-6-吗啉-4-基嘧啶-4-胺

向2，4，6-三氯-5-氟嘧啶(4.03g)的无水乙醇(100ml)溶液中加入DIEPA(5.3ml)和5-甲基-1H-吡唑-3-胺(2.03g)。所得溶液在室温下搅拌6小时。析出物经过滤后，用冷乙醇洗涤。化合物用真空炉干燥，得到2，6-二氯-5-氟-N-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(3.7g，固体)。m/z262。将吗啉(0.181ml)、2，6-二氯-5-氟-N-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(500mg)和DIPEA(0.505ml)在无水乙醇(10.0ml)中的混合物于80℃加热5小时。减压除去溶剂后，残余物用Gilson纯化(10-50％MeCN/H₂O，15分钟)，得到标题化合物(236mg，固体)。¹H NMR δ12.05(bs，1H)9.57(s，1H)6.21(s，1H)3.67(t，4H)3.57(t，4H)2.22(s，3H)；m/z 313。

方法45

N-(5-甲氧基-1H-吡唑-3-基)-2-(甲磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-胺

向4-氯-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶(2.29g)的无水乙醇(50ml)溶液中加入DIEPA(4.4ml)和5-甲氧基-1H-吡唑-3-胺盐酸盐(1.46g)。将所得溶液于90℃加热过夜。使溶剂减压蒸发。粗制化合物用Gilson纯化(10-60％MeCN/H₂O，15分钟)，得到N-(3-甲氧基-1H-吡唑-5-基)-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-胺(0.64g，固体)。m/z 306。将N-(3-甲氧基-1H-吡唑-5-基)-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-胺(240mg)溶于二氯甲烷(5ml)后，加入MCPBA(529mg)。将所得溶液在室温下搅拌0.5小时，在二氯甲烷和饱和碳酸钠水溶液之间分离。将有机层干燥，在低温下减压除去溶剂。粗产物(270mg)无需进一步纯化即可进行下一步骤。m/z 338。

方法46

2-氯-5-氟-N-(5-甲氧基-1H-吡唑-3-基)-6-吗啉-4-基嘧啶-4-胺

向2，4，6-三氯-5-氟嘧啶(2.01g)的无水乙醇(50ml)溶液中加入DIEPA(4.4ml)和5-甲氧基-1H-吡唑-3-胺(2.24g)。将所得溶液在室温下搅拌过夜。减压除去溶剂后，残余物用Gilson纯化(10-50％MeCN/H₂O，15分钟)，得到标题化合物2，6-二氯-5-氟-N-(5-甲氧基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(0.776g，固体)。m/z 278。将吗啉(0.256ml)、2，6-二氯-5-氟-N-(5-甲氧基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(776mg)和DIPEA(0.742ml)的正丁醇(14.0ml)混合物于90℃加热5小时。减压除去溶剂后，残余物用Gilson纯化(10-50％MeCN/H₂O，15分钟)，得到标题化合物(310mg，固体)。¹H NMR 9.80(s，1H)5.66(s，1H)3.77(s，3H)3.64-3.71(m，4H)3.53-3.64(m，4H)；m/z 329。

方法47

N-{2，5-二氯-6-[(5-甲基-1H-吡唑-3-基)氨基]嘧啶-4-基}-N-甲基甲磺酰胺

按照类似于方法32的方法，由N-(2，5，6-三氯-嘧啶-4-基)-N-甲基甲磺酰胺(方法48)制备标题化合物。MS：351(M+1)。

方法48

N-(2，5，6-三氯-嘧啶-4-基)-N-甲基甲磺酰胺

按照类似于方法32的方法，由N-甲基甲磺酰胺和2，4，5，6-四氯嘧啶制备标题化合物。MS：290(M+1)。

方法49

N-{2，5-二氯-6-[(5-异丙氧基-1H-吡唑-3-基)氨基]嘧啶-4- 基}-N，N′，N′-三甲基磺酰胺

按照类似于方法29的方法，由N，N，N′-三甲基-N′-(2，5，6-三氯嘧啶-4-基)磺酰胺(方法26)制备标题化合物。MS：424(M+1)。

方法50

5-氟嘧啶-2-甲醛

在-78℃下，在20分钟时间内向5-氟嘧啶-2-甲腈(方法6，1.0g，8.1mmol)的无水THF溶液中加入DIBAL-H(8.1ml)溶液。将所得混合物在此温度下搅拌2小时后加入MeOH。将溶液升温至室温，随后加入浓HCl溶液。将所得混合物在环境温度下搅拌2小时，水层用EtOAc洗涤(3x)。合并的有机萃取物用盐水洗涤后干燥(MgSO₄)。蒸发溶剂得到标题化合物(780mg，76％)。MS：[M+H]⁺127。

方法51

N-[(5-氟嘧啶-2-基)亚甲基]-2-(R)-甲基丙烷-2-亚磺酰胺

在室温下，向5-氟嘧啶-2-甲醛(方法50，1.55g，12.3mmol)的无水DCM溶液中加入2-(R)-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(1.79g，14.7mmol)和无水硫酸铜(II)(1.96g，12.28mmol)。将所得混合物在此温度下搅拌24小时，使固体真空过滤，用DCM洗涤(3x)，蒸发溶剂得到黄色油状物。所得残余物用柱色谱法纯化(Hex-EtOAc＝3∶1)，得到标题化合物(1.94g，69％)。1H NMR(300MHz，DMSO-D6)ppm 9.13(s，2H)8.47(s，1H)0.99(s，9H)。MS：[M+H]⁺232。

可采用方法51所述方法，用2-(S)-甲基丙烷-2-亚磺酰胺作为原料替换2-(R)-甲基丙烷-2-亚磺酰胺，得到N-[(5-氟嘧啶-2-基)亚甲基]-2-(S)-甲基丙烷-2-亚磺酰胺。

方法52

N-[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-(2R)-甲基丙烷-2-亚磺酰胺

在-20℃下，向N-[(5-氟嘧啶-2-基)亚甲基]-2-(R)-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(方法51，1.94g，8.5mmol)的无水THF溶液中慢慢加入MeMgBr(9.3mlg，9.3mmol)溶液。将所得混合物在此温度下搅拌3小时后，使之在H₂O和EtOAc之间分配。水层用EtOAc萃取(3x)，用盐水洗涤，干燥(MgSO₄)。真空下减压蒸发溶剂，得到黄色油状物。所得残余物用柱色谱法纯化(100％EtOAc)，得到标题化合物(660mg，50％)。1HNMR(300MHz，DMSO-D6)ppm 8.89(s，2H)5.53(d，1H)4.43-4.65(m，1H)1.46(d，3H)1.11(s，9H)。MS：[M+H]⁺246。

可采用方法52中所述方法，用N-[(5-氟嘧啶-2-基)亚甲基]-2-(S)-甲基丙烷-2-亚磺酰胺作为原料替换N-[(5-氟嘧啶-2-基)亚甲基]-2-(R)-甲基丙烷-2-亚磺酰胺，得到N-[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-(2S)-甲基丙烷-2-亚磺酰胺。

方法53

(S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙胺盐酸盐

向N-[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-(2R)-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(方法52，655mg，2.67mmol)的无水二噁烷(20ml)溶液中加入HCl(3.4ml，13.3mmol)的二噁烷溶液。将反应物在室温下搅拌3小时。除去溶剂，得到标题化合物(定量，白色固体)。MS：计算值：141；实测值：[M+H]⁺142。

也可采用方法53中所述方法，用N-[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-(2S)-甲基丙烷-2-亚磺酰胺作为原料替换N-[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-(2R-甲基丙烷-2-亚磺酰胺，得到(S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙胺盐酸盐。

效用

本发明的化合物通过抑制酪氨酸激酶，尤其是抑制Trk，更尤其是抑制Trk A和Trk B，从而用于治疗癌症。治疗方法靶向多种与癌症相关的过程所涉及的酪氨酸激酶活性，尤其是Trk活性，更尤其是Trk A和Trk B活性。因此，预期酪氨酸激酶、尤其是Trk、更尤其是Trk A和Trk B抑制剂具有针对例如以下肿瘤疾病的活性：乳腺癌、卵巢癌、肺癌、结肠癌、前列腺癌或其它组织癌、以及白血病和淋巴瘤、中枢神经系统和外周神经系统肿瘤和其它肿瘤类型例如黑素瘤、纤维肉瘤和骨肉瘤。还预期酪氨酸激酶抑制剂，尤其是Trk抑制剂，更尤其是Trk A和Trk B抑制剂用于治疗其它增殖性疾病，包括但不限于自身免疫病、炎性疾病、神经疾病和心血管疾病。

另外，预期本发明化合物在治疗或预防具有上调的组成型活化Trk激酶的特定癌症中颇具价值，包括但不限于导致ETV6-TrkC融合、TRP-TrkA融合蛋白、AML-ETO(t8；21)的致癌基因重排，导致NGF、BDNF、营养神经因子(neurotropins)血清水平上升的自分泌或旁分泌信号转导，或者具有与疾病攻击性、肿瘤生长和增殖或存活信号转导有关的组成型活性Trk的肿瘤。

有证据表明本发明的化合物抑制酪氨酸激酶、尤其是Trk、更尤其是Trk A和Trk B，正如本文所述Trk A测定法中所测定的一样。

本发明所提供的化合物还可在潜在药物抑制酪氨酸激酶、尤其是Trk、更尤其是Trk A和Trk B的能力测定中用作标准和试剂。这些可以在包含本发明化合物的商用试剂盒中提供。

Trk A测定方法

采用放大的发光迫近测定法(Amplified Luminescent ProximityAssay)(Alphascreen)技术(PerkinElmer，549 Albany Street，Boston，MA)，测定Trk A激酶活性，即其使普通多肽底物内的合成酪氨酸残基磷酸化的能力。

为了测定Trk A激酶活性，将HIS标记的人Trk A激酶胞内域(Trk A的442-796氨基酸，Swiss-Prot Primary检索号P04629)在SF9细胞内表达，用标准镍柱层析法纯化。将激酶与生物素化底物和腺苷三磷酸(ATP)在室温下孵育20分钟后，加入30mM乙二胺四乙酸(EDTA)终止激酶反应。反应在384孔微量滴定板中进行，加入链霉亲和素(strepavidin)包被的供体微珠(Donor Bead)和磷酸酪氨酸特异性抗体包被的受体微珠(Acceptor Bead)，在室温下孵育过夜后，采用EnVisionMultilabel读板仪检测反应产物。

尽管式(I)化合物的药理性质随结构变化而变化，但是一般而言，式(I)化合物所具活性可用IC₅₀浓度(达到50％抑制的浓度)或(0.01μM-10μM)范围内的剂量表示。

用上述体外测定法测定时，测得下列实施例的Trk抑制活性，用下列IC₅₀表示。

实施例	IC₅₀(μM)
		1	0.033

本发明化合物用于通过抑制酪氨酸激酶、尤其是JAK家族、更尤其是JAK2，来治疗骨髓增殖性疾病、骨髓增生异常综合征和癌症。治疗方法靶向酪氨酸激酶活性，尤其是JAK家族活性，更尤其是JAK2活性，所述激酶参与多种骨髓增殖性疾病、骨髓增生异常综合征和与癌症相关的过程。因此，预期酪氨酸激酶、尤其是JAK家族、更尤其是JAK2抑制剂具有针对例如以下骨髓增殖性疾病的活性：例如慢性髓细胞性白血病、真性红细胞增多症、特发性血小板增多症、伴有骨髓纤维变性的骨髓化生、特发性骨髓纤维变性、慢性粒-单核细胞型白血病和嗜酸细胞增多综合征、骨髓增生异常综合征和肿瘤疾病，所述肿瘤疾病例如乳腺癌、卵巢癌、肺癌、结肠癌、前列腺癌或其它组织癌、以及白血病、骨髓瘤和淋巴瘤、中枢神经系统和外周神经系统肿瘤和其它肿瘤类型例如黑素瘤、纤维肉瘤和骨肉瘤。另还预期酪氨酸激酶、尤其是JAK家族、更尤其是JAK2抑制剂用于治疗其它增殖性疾病，包括但不限于自身免疫病、炎性疾病、神经疾病和心血管疾病。

有证据表明本发明的化合物抑制酪氨酸激酶，尤其是JAK家族，更尤其是JAK2激酶，正如本文所述JAK2测定法所测定的一样。

本发明所提供的化合物还可在潜在药物抑制酪氨酸激酶、尤其是JAK家族、更尤其是JAK2的能力测定中用作标准和试剂。这些可以在包含本发明化合物的商用试剂盒中提供。

JAK2测定法

采用放大的发光迫近测定法(Alphascreen)技术(PerkinElmer，549Albany Street，Boston，MA)，测定JAK2激酶活性，即其使普通多肽底物内的合成酪氨酸残基磷酸化的能力。

为了测定JAK2激酶活性，采用市售的纯化酶，C端His6标记的重组人JAK2，氨基酸808-末端(Genbank检索号NM 004972)(在得自Upstate Biotechnology#14-640的Sf21细胞中由杆状病毒表达)。将激酶与生物素化底物和腺苷三磷酸(ATP)在室温下孵育60分钟后，加入30mM乙二胺四乙酸(EDTA)终止激酶反应。反应在384孔微量滴定板中进行，加入链霉亲和素(strepavidin)包被的供体微珠(Donor Bead)和磷酸酪氨酸特异性抗体包被的受体微珠(Acceptor Bead)，在室温下孵育过夜后，采用EnVision Multilabel读板仪检测反应产物。

用上述体外测定法测定时，测得下列实施例的JAK抑制活性，用下列IC₅₀表示。

实施例	IC₅₀(nM)
		7	3.9

Claims

1.下式(I)的化合物或其药学上可接受的盐：

其中：

R¹选自C_1-6烷基或C_1-6烷氧基；

R²是卤素；

R³是氢；

R⁴是C_1-6烷基；

R⁵是卤素；且

n＝1。

2.权利要求1的式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其中

R¹是甲基、甲氧基或异丙氧基。

3.权利要求1的式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其中

R²是氯或氟；且R³为氢。

4.权利要求1-3中任一项的式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其中

R²是氯；且R³为氢。

5.权利要求4的式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其中R⁴是甲基。

6.权利要求1的式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其中R⁵为氟。

7.权利要求1的式(I)化合物或其药学上可接受的盐，所述化合物选自：

5-氯-N⁴-(5-异丙氧基-1H-吡唑-3-基)-N²-[1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]嘧啶-2，4-二胺；

5-氯-N²-[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N⁴-(5-异丙氧基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2，4-二胺；

5-氯-N²-[(1R)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N⁴-(5-异丙氧基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2，4-二胺；

5-氟-N²-[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N⁴-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2，4-二胺；

5-氯-N²-[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N⁴-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2，4-二胺；

5-溴-N²-[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N⁴-(5-异丙氧基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2，4-二胺；

5-氯-N²-[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N⁴-(5-甲氧基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2，4-二胺；

5-氯-N²-[(1R)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N⁴-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2，4-二胺；

5-溴-N²-[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N⁴-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2，4-二胺；或

5-溴-N²-[(1S)-1-(5-氟嘧啶-2-基)乙基]-N⁴-(5-甲氧基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2，4-二胺。

8.一种制备权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐的方法，其中除非另有说明，否则可变基团如权利要求1中定义，所述方法包括：

方法a)使下式(II)的嘧啶：

与下式(III)的吡唑胺反应：

式(II)中，L为可置换基团；

或者

方法b)使下式(IV)的嘧啶：

与下式(V)的化合物反应：

式(IV)中，L为可置换基团；

方法c)使下式(VI)的化合物：

与下式(VII)的化合物反应：

方法d)使下式(VIII)的化合物：

与肼反应；或者

之后如有需要：

i)将一种式(I)化合物转化成另一种式(I)化合物；

ii)脱去任何保护基；

iii)制成药学上可接受的盐。

9.一种药物组合物，所述药物组合物包含：

a.权利要求1的式(I)化合物或其药学上可接受的盐；和

b.至少一种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

10.权利要求1-7中任一项的式(I)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于在温血动物体内产生抗增殖作用的药物中的用途。

11.权利要求1-7中任一项的式(I)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于在温血动物体内产生促凋亡作用的药物中的用途。

12.权利要求1-7中任一项的式(I)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗温血动物的以下疾病的药物中的用途：骨髓增殖性疾病、骨髓增生异常综合征和癌症。

13.权利要求1-7中任一项的式(I)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗以下疾病的药物中的用途：慢性髓细胞性白血病、真性红细胞增多症、特发性血小板增多症、伴有骨髓纤维变性的骨髓化生、特发性骨髓纤维变性、慢性粒-单核细胞型白血病和嗜酸细胞增多综合征、骨髓增生异常综合征和癌症，所述癌症选自食管癌、骨髓瘤、肝细胞癌、胰腺癌、宫颈癌、尤因肉瘤、成神经细胞瘤、卡波西肉瘤、卵巢癌、乳腺癌、结肠直肠癌、前列腺癌、膀胱癌、黑素瘤、肺癌-非小细胞肺癌(NSCLC)和小细胞肺癌(SCLC)、胃癌、头颈部癌、间皮瘤、肾癌、淋巴瘤和白血病。

14.权利要求1-7中任一项的式(I)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗癌症的药物中的用途。

15.权利要求14的用途，其中所述癌症选自食管癌、骨髓瘤、肝细胞癌、胰腺癌、宫颈癌、尤因肉瘤、成神经细胞瘤、卡波西肉瘤、卵巢癌、乳腺癌、结肠直肠癌、前列腺癌、膀胱癌、黑素瘤、肺癌-非小细胞肺癌(NSCLC)和小细胞肺癌(SCLC)、胃癌、头颈部癌、间皮瘤、肾癌、淋巴瘤和白血病。

16.权利要求1-7中任一项的式(I)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于产生JAK抑制作用的药物中的用途。

17.一种用于在温血动物体内产生抗增殖作用的药物组合物，所述药物组合物包含：

a.权利要求1-7中任一项的式(I)化合物或其药学上可接受的盐；和

b.至少一种药学上可接受的稀释剂或载体。

18.一种用于在温血动物体内产生促凋亡作用的药物组合物，所述药物组合物包含：

b.至少一种药学上可接受的稀释剂或载体。

19.一种用于治疗温血动物的骨髓增殖性疾病、骨髓增生异常综合征和癌症的药物组合物，所述药物组合物包含：

b.至少一种药学上可接受的稀释剂或载体。

20.一种用于治疗温血动物的以下疾病的药物组合物，所述药物组合物包含：

b.至少一种药学上可接受的稀释剂或载体，

所述疾病为慢性髓细胞性白血病、真性红细胞增多症、特发性血小板增多症、伴有骨髓纤维变性的骨髓化生、特发性骨髓纤维变性、慢性粒-单核细胞型白血病和嗜酸细胞增多综合征、骨髓增生异常综合征和癌症，所述癌症选自食管癌、骨髓瘤、肝细胞癌、胰腺癌、宫颈癌、尤因肉瘤、成神经细胞瘤、卡波西肉瘤、卵巢癌、乳腺癌、结肠直肠癌、前列腺癌、膀胱癌、黑素瘤、肺癌-非小细胞肺癌(NSCLC)和小细胞肺癌(SCLC)、胃癌、头颈部癌、间皮瘤、肾癌、淋巴瘤和白血病。

21.一种用于治疗温血动物的癌症的药物组合物，所述药物组合物包含：

b.至少一种药学上可接受的稀释剂或载体。

22.权利要求21的药物组合物，其中所述癌症选自食管癌、骨髓瘤、肝细胞癌、胰腺癌、宫颈癌、尤因肉瘤、成神经细胞瘤、卡波西肉瘤、卵巢癌、乳腺癌、结肠直肠癌、前列腺癌、膀胱癌、黑素瘤、肺癌-非小细胞肺癌(NSCLC)和小细胞肺癌(SCLC)、胃癌、头颈部癌、间皮瘤、肾癌、淋巴瘤和白血病。

23.一种用于在温血动物体内产生JAK抑制作用的药物组合物，所述药物组合物包含：

b.至少一种药学上可接受的稀释剂或载体。