Nothing Special   »   [go: up one dir, main page]

CN108368473A - 生物粒子计数器的校正方法及生物粒子计数器的校正装置 - Google Patents

生物粒子计数器的校正方法及生物粒子计数器的校正装置 Download PDF

Info

Publication number
CN108368473A
CN108368473A CN201680074759.1A CN201680074759A CN108368473A CN 108368473 A CN108368473 A CN 108368473A CN 201680074759 A CN201680074759 A CN 201680074759A CN 108368473 A CN108368473 A CN 108368473A
Authority
CN
China
Prior art keywords
particle
signal
biomone
correction
voltage value
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201680074759.1A
Other languages
English (en)
Other versions
CN108368473B (zh
Inventor
关本真
关本一真
大桥勇贵
三宫尚志
中岛勉
福田美幸
上野胜
植屋佑
植屋佑一
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Rion Co Ltd
Original Assignee
Rion Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Rion Co Ltd filed Critical Rion Co Ltd
Publication of CN108368473A publication Critical patent/CN108368473A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN108368473B publication Critical patent/CN108368473B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
    • G01N15/10Investigating individual particles
    • G01N15/1012Calibrating particle analysers; References therefor
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64Fluorescence; Phosphorescence
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/17Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
    • G01N21/25Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands
    • G01N21/27Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands using photo-electric detection ; circuits for computing concentration
    • G01N21/274Calibration, base line adjustment, drift correction
    • G01N21/278Constitution of standards

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)

Abstract

本发明能够与作为计数对象的生物粒子对应地准确校正生物粒子计数器。生物粒子计数器(1)具有生成与生物粒子相对于照射光而发出的荧光及散射光相对应的第一信号的第一电路(11)。测量值获取部(22)从生物粒子计数器(1)获取关于在聚苯乙烯粒子的表面内部浸润荧光剂的校正用粒子的第一信号的电压值。电路调整部(23)使用表示在聚苯乙烯粒子的表面内部的荧光剂含量相关的荧光剂参数值和与荧光剂参数值对应的第一信号的基准电压值之间对应关系的基准数据(31),确定关于校正所使用的校正用粒子的与荧光剂参数值对应的第一信号的基准电压值(V1r),且以使关于校正用粒子的第一信号的电压值(V1)成为该基准电压值(V1r)的方式来调整第一电路(11)。

Description

生物粒子计数器的校正方法及生物粒子计数器的校正装置
技术领域
本发明涉及生物粒子计数器的校正方法及生物粒子计数器的校正装置。
背景技术
在某生物粒子计数器中,使包含生物粒子的液体流入流动池内,向流动池内的规定的测量区域照射激光,接收来自通过测量区域的生物粒子的散射光及自体荧光。而且,根据散射光的检测信号及荧光的检测信号,与非生物粒子区分而对生物粒子进行计数,根据散射光的检测信号,测量通过测量区域的生物粒子的粒径,并根据荧光的检测信号,测量通过测量区域的生物粒子的荧光强度(例如参照专利文献1)。
另一方面,在某微生物检测装置的校正方法中,作为校正用粒子使用聚苯乙烯粒子,对聚苯乙烯粒子照射激光,检测聚苯乙烯粒子的自体荧光,并根据该荧光的强度进行微生物检测装置的校正(例如参照专利文献2)。
现有技术文献
专利文献
专利文献1:日本专利公开2013-117466号公报
专利文献2:日本专利公开2013-146263号公报
但是,生物粒子计数器能够检测各种生物粒子,因此为了能够对作为计数对象的生物粒子进行精度良好的计数,优选根据作为计数对象的生物粒子,使用与作为计数对象的生物粒子的粒径及荧光特性(荧光波长、荧光强度等)具有相近的粒径及荧光特性的校正用粒子来校正生物粒子计数器。
在上述的校正方法中,通过改变聚苯乙烯粒子的粒径,改变从聚苯乙烯粒子得到的荧光的强度。因此,为了由上述聚苯乙烯粒子得到足够的荧光强度,需要使用粒径大的聚苯乙烯粒子。因此,在对粒径小的生物粒子(尤其是粒径小但荧光强度比较高的生物粒子)进行计数时,除了荧光强度的校正以外,不得不使用与该小的粒径相当的聚苯乙烯粒子来进行由生物粒子计数器受光的散射光强度的校正。
此外,也考虑通过在基材中混合荧光剂而形成校正用粒子,使荧光强度与作为计数对象的生物粒子相应地增加,但根据基材与荧光剂的混合状况,来自校正用粒子的荧光的强度容易变化,因此很难边以荧光强度恒定地保持在期望值的方式控制荧光剂的量、边制造校正用粒子。此外,可知若生物粒子或含有荧光剂的粒子发出荧光,则该粒子发出的散射光减少。
发明内容
鉴于上述问题,本发明的目的在于提供一种能够与作为计数对象的生物粒子相应地校正生物粒子计数器的生物粒子计数器的校正方法及校正装置。
本发明涉及的生物粒子计数器的校正方法包括:第一测量步骤,利用具有生成与生物粒子相对于照射光而发出的荧光相对应的第一信号的第一电路并根据第一信号对生物粒子进行计数的生物粒子计数器,生成关于校正用粒子的第一信号;第一调整步骤,以使关于校正用粒子的第一信号的电压值成为基准电压值的方式来调整第一电路,校正用粒子是使聚苯乙烯粒子的表面内部浸润荧光剂的粒子,在第一调整步骤中,(a)使用表示与聚苯乙烯粒子的表面内部的荧光剂含量相关的荧光剂参数值和与荧光剂参数值相对应的第一信号的基准电压值之间对应关系的基准数据,确定关于在测量步骤中使用的校正用粒子的与荧光剂参数值对应的第一信号的基准电压值;(b)以使关于校正用粒子的第一信号的电压值成为根据基准数据确定的基准电压值的方式来调整第一电路。
本发明涉及的生物粒子计数器的校正装置包括:测量值获取部,从具有生成与生物粒子相对于照射光而发出的荧光相对应的第一信号的第一电路并根据第一信号对生物粒子进行计数的生物粒子计数器,获取关于校正用粒子的第一信号的电压值;电路调整部,以使获取的关于校正用粒子的第一信号的电压值成为基准电压值的方式来调整第一电路,校正用粒子是使聚苯乙烯粒子的表面内部浸润荧光剂的粒子,电路调整部,(a)使用表示与聚苯乙烯粒子的表面内部的荧光剂含量相关的荧光剂参数值和与荧光剂参数值相对应的第一信号的基准电压值之间对应关系的基准数据,确定关于由测量值获取部获取第一信号的电压值的校正用粒子的与荧光剂参数值对应的第一信号的基准电压值;(b)以使关于校正用粒子的第一信号的电压值成为根据基准数据确定的基准电压值的方式来调整第一电路。
根据本发明,能够与作为计数对象的生物粒子相应地校正生物粒子计数器。
附图说明
图1是表示本发明的实施方式涉及的生物粒子计数器的校正装置结构的框图。
图2的(A)是表示图1的基准数据31中的荧光剂参数的值(在此为导入量)和与荧光剂参数的值对应的第一信号的基准电压值(在此为峰值)之间的对应关系一例的图。图2的(B)是表示荧光剂参数的值(在此为导入量)和与荧光剂参数的值对应的第二信号的基准电压值(在此为峰值)之间的对应关系一例的图。
图3是对图1所示的校正装置2的动作进行说明的流程图。
具体实施方式
下面,根据附图说明本发明的实施方式。
图1是表示本发明的实施方式涉及的生物粒子计数器的校正装置结构的框图。图1所示的生物粒子计数器1的校正是按照本发明实施方式的生物粒子计数器的校正方法,由校正装置2自动执行。
生物粒子计数器1例如像上述日本专利公开2013-117466号公报中记载的装置那样,包括:供包含生物粒子或校正用粒子的试样液体流动的流动池(未图示);对流动池内的规定的测量区域照射激光的光源及光学系统(未图示);根据该照射光,将测量区域内的粒子(生物粒子或校正用粒子)发出的荧光和散射光分离的光学系统(未图示)。
而且,生物粒子计数器1包括:第一电路11,生成第一信号,所述第一信号与生物粒子或校正用粒子相对于该照射光而发出的荧光相对应;第二电路12,生成第二信号,所述第二信号与生物粒子或校正用粒子相对于该照射光而发出的散射光相对应;计数处理部13,根据该第一信号及第二信号对生物粒子进行计数。
第一电路11包括:光电二极管等荧光受光部11a、放大器11b、A/D转换器11c。荧光受光部11a接收来自上述生物粒子的荧光,并输出与接收到的荧光的强度相应的电压的电信号,放大器11b将该电信号的电压以规定放大率进行放大,A/D转换器11c将放大后的电信号转换为数字信号。
第二电路12包括:光电二极管等散射光受光部12a、放大器12b、A/D转换器12c。散射光受光部12a接收来自上述生物粒子的散射光,并输出与接收到的散射光的强度相应的电压的电信号,放大器12b将该电信号的电压以规定的放大率进行放大,A/D转换器12c将放大后的电信号转换为数字信号。
计数处理部13是根据从第一电路11输出的数字信号及从第二电路12输出的数字信号,将通过测量区域的生物粒子按粒径划分进行计数的数字处理电路。另外,粒径划分的阈值根据与作为标准粒子的聚苯乙烯粒子(荧光剂的含量为零)的粒径相对应的散射光强度来进行设定。
生物粒子或校正用粒子在通过上述测量区域时发出与照射的激光相对应的荧光及散射光。另外,不带有荧光特性的非生物粒子在通过测量区域时,发出散射光,但不发出荧光。因此,计数处理部13与通过上述测量区域的生物粒子或校正用粒子逐一对应地检测出脉冲状的第一信号及第二信号,并根据该脉冲状的第一信号及第二信号的数量来测量生物粒子的数量。此时,在脉冲状的第一信号及第二信号的峰值分别超过规定阈值的情况下,计数生物粒子的数量。
也就是说,计数处理部13在同一时刻观测到脉冲状的第一信号及第二信号的情况下,认为观测到生物粒子并进行计数,在观测到第二信号的时刻未观测到第一信号的情况下,认为观测到非生物粒子,不作为生物粒子计数。此外,根据第二信号的峰值来测量生物粒子的粒径,并根据第一信号的峰值来测量生物粒子的荧光强度。因此,生物粒子计数器1不仅能观测生物粒子的数量,还能观测粒径及荧光强度(的分布)。
而且,生物粒子计数器1包括接口14和控制部15。接口14与校正装置2等外部装置通过有线或无线进行连接并进行数据通信。例如,通过接口14从生物粒子计数器1输出测量结果、向生物粒子计数器1输入各种指令等。
控制部15对生物粒子计数器1的内部装置(第一电路11、第二电路12、计数处理部13、接口14等)进行控制,并控制测量开始、测量结束、测量结果的输出、第一电路11及第二电路的调整等生物粒子计数器1的动作。
另一方面,校正装置2包括:接口21、测量值获取部22、电路调整部23、存储装置24、输入装置25、显示装置26。
接口21是与生物粒子计数器1的接口14通过有线或无线进行数据通信的通信装置。通过接口21从生物粒子计数器1获取测量结果、向生物粒子计数器1提供校正指令等。
测量值获取部22从生物粒子计数器1获取关于校正用粒子的第一信号的电压值(在此为峰值)及第二信号的电压值(在此为峰值)。
另外,测量值获取部22既可以从生物粒子计数器1获取事先由生物粒子计数器1测量并保存的关于校正用粒子的第一信号的电压值及第二信号的电压值,也可以由生物粒子计数器1执行测量,并从生物粒子计数器1获取测量到的关于校正用粒子的第一信号的电压值及第二信号的电压值。
校正用粒子是具有对作为测量对象的生物粒子的粒径及荧光特性进行模拟的粒径及荧光特性的非生物粒子。在该实施方式中,作为校正用粒子使用基材粒子的表面内部浸润有荧光剂的粒子。例如,将含有荧光剂的溶液从表面外侧向内侧浸润并使其固附于表面内部的基材粒子作为校正用粒子使用。由于向基材粒子的表面内部浸润荧光剂,因此若使用相同的基材粒子,则校正用粒子的粒径与基材粒子的粒径相同,且不管荧光剂的含量如何均保持恒定。此外,该校正用粒子可以设为0.3μm~1.0μm范围的小粒径。
例如,作为校正用粒子的基材粒子,使用作为标准粒子的聚苯乙烯粒子,使用卟啉(Porphyrin)或卟啉衍生物作为荧光剂。例如,当藻类等包含叶绿素a的生物粒子为测量对象的情况下,使用具有与叶绿素a相近荧光特性的(即,相对于规定波长照射光的荧光波长相近)卟啉衍生物作为荧光剂。另外,荧光剂并不限定于卟啉,也可根据测量对象的生物粒子使用其他荧光剂。
当对生物粒子计数器1进行校正时,使含有该校正用粒子的试样液体流入生物粒子计数器1的流动池内,并进行测量。
电路调整部23从存储装置24读出基准数据31,并根据基准数据31,对生物粒子计数器1的第一电路11及第二电路12分别进行调整,以使由测量值获取部22获取的关于校正用粒子的第一信号的电压值及第二信号的电流值分别成为基准电压值。
具体来说,电路调整部23(a)使用基准数据31,确定关于本次校正使用的校正用粒子(即,由测量值获取部22获取第一信号的电压值的校正用粒子)的与荧光剂参数值对应的第一信号的基准电压值,并(b)调整第一电路11,以使关于该校正用粒子的第一信号的电压值成为根据基准数据31确定的基准电压值。此外,电路调整部23(c)使用基准数据31,确定关于本次校正使用的校正用粒子(即,由测量值获取部22获取第二信号的电压值的校正用粒子)的与荧光剂参数值对应的第二信号的基准电压值,并(d)调整第二电路12,以使关于该校正用粒子的第二信号的电压值成为根据基准数据31确定的基准电压值。
在本实施方式中,在荧光强度的校正中,电路调整部23导出用于使关于校正用粒子的第一信号的电压值对准基准电压值的放大器11b的放大率的修正系数,并将导出的修正系数通过接口21输出到生物粒子计数器1,调整生物粒子计数器1的第一电路11。也就是说,由生物粒子计数器1的控制部15,通过接口14、21接收该修正系数,并根据该修正系数设定放大器11b的放大率。具体来说,放大率设定为该修正系数与当前放大率之积。
例如,对于校正用粒子来说,当获取的第一信号的电压值(例如峰值)为V1,根据其粒径的值与其荧光剂参数值确定的第一信号的基准电压值为V1r的情况下,修正系数C1设为V1r/V1。在改变前的放大器11b的放大率为A1的情况下,改变后的放大率设为C1×A1。
此外,在散射光强度的校正中,电路调整部23导出用于使关于校正用粒子的第二信号的电压值对准基准电压值的放大器12b的放大率的修正系数,并将导出的修正系数通过接口21输出到生物粒子计数器1,调整生物粒子计数器1的第二电路12。也就是说,由生物粒子计数器1的控制部15,通过接口14、21接收该修正系数,并根据该修正系数设定放大器12b的放大率。具体来说,放大率设定为该修正系数与当前放大率之积。
例如,对于校正用粒子来说,当获取的第二信号的电压值(例如峰值)为V2,根据其粒径的值与其荧光剂参数值确定的第二信号的基准电压值为V2r的情况下,修正系数C2设为V2r/V2。当改变前的放大器12b的放大率为A2的情况下,改变后的放大率设为C2×A2。
图2的(A)是表示图1的基准数据31中的粒径0.7μm的聚苯乙烯粒子即校正用粒子的荧光剂参数(在此为荧光剂的导入量)值和与荧光剂参数值对应的第一信号的基准电压值(在此是作为荧光强度的第一信号的峰值)之间对应关系的一例的图。如图2的(A)所示,第一信号的基准电压值相对于荧光剂参数值单调增加。在第一信号的校正中,由于第一信号的基准电压值V1r与使用的校正用粒子的荧光强度相对应,因此能够根据荧光剂参数值唯一地确定第一信号的基准电压值V1r。
此外,图2的(B)是表示图1的基准数据31中的粒径0.7μm的聚苯乙烯粒子即校正用粒子的荧光剂参数(在此为荧光剂的导入量)值和与荧光剂参数值对应的第二信号的基准电压值(在此是作为散射光强度的第二信号的峰值)之间对应关系的一例的图。如图2的(B)所示,第二信号的基准电压值相对于荧光剂参数值单调减少。如此,即便基材粒子为聚苯乙烯粒子,由于荧光剂的导入有时也会使散射光强度发生变化。在第二信号的校正中,由于第二信号的基准电压值V2r与使用的校正用粒子的散射光强度相对应,因此能够根据荧光剂参数值来唯一地确定第二信号的基准电压值V2r。
而且,在该实施方式中,基准数据31针对多个粒径分别包括表示荧光剂参数值和与荧光剂参数值对应的第一信号的基准电压值及第二信号的基准电压值之间的对应关系的个别基准数据,电路调整部23从基准数据31中选择与校正所使用的校正用粒子的粒径相对应的个别基准数据来使用。
存储装置24为闪存等非易失性存储装置,并存储基准数据31。基准数据31是基材粒子的粒径以及对于各粒径表示与基材粒子的表面内部的荧光剂含量相关的荧光剂参数值和与荧光剂参数值对应的第一信号的基准电压值之间的对应关系的数据。例如,荧光剂参数使用制作校正用粒子时向基材粒子的表面内部导入的荧光剂的导入量、或校正用粒子制作时的过程中对上述含量造成影响的参数(例如用于向基材粒子的表面内部导入荧光剂的荧光剂溶液的浓度等)。此外,在基准数据31中,该对应关系以近似式、表格等来表示。因此,电路调整部23计算近似式或参照表格来确定上述基准电压值。
此外,输入装置25是检测用户对校正装置2的操作的硬键、触摸板等,显示装置26是对用户显示各种信息的液晶显示器、指示器等。
控制部27根据对输入装置25输入的用户操作等来控制校正装置2的内部装置(测量值获取部22、电路调整部23、显示装置26等),执行生物粒子计数器1的校正。
例如,当向输入装置25输入使用的校正用粒子的粒径值、荧光剂参数值等时,控制部27使测量值获取部22获取上述第一信号及第二信号的电压值,此外,将输入的粒径及荧光剂参数值提供给电路调整部23,使电路调整部23执行生物粒子计数器1的第一电路11及第二电路12的调整。
另外,上述的基准电压值是预先在规定的测量环境中使用校正用粒子准确测量到的电压值,基准数据31预先由此种实验等确定,并储存于存储装置24。
此外,测量值获取部22及电路调整部23既可由计算机执行程序以软件方式实现,也可通过专门电路以硬件方式实现。
另外,在该实施方式中,关于校正用粒子的上述第一信号及第二信号的电压值(在此为峰值)分别设为对于多个校正用粒子的电压值的平均值。生物粒子计数器1计算该平均值,或者校正装置2的测量值获取部22对于第一信号及第二信号分别获取对于多个校正用粒子的电压值,并计算获取的电压值的平均值。
下面,对于上述校正装置2的动作进行说明。图3是对图1所示的校正装置2的动作进行说明的流程图。
在校正装置2中,当利用输入装置25检测到规定的用户操作时,控制部27开始连接于该校正装置2的生物粒子计数器1的自动校正。首先,控制部27使用显示装置26促使用户输入校正用粒子的粒径及荧光剂参数值。
当用户向输入装置25输入本次校正所使用的校正用粒子的粒径及荧光剂参数值时,控制部27在输入装置25检测输入的粒径及荧光剂参数值,并输出到电路调整部23(步骤S1)。
电路调整部23从基准数据31中选择并读出与输入的粒径相对应的个别基准数据(步骤S2),并根据个别基准数据来确定第一信号的基准电压值V1r和第二信号的基准电压值V2r。
此外,控制部27通过接口21向生物粒子计数器1输出模式切换指示,将生物粒子计数器1的动作模式切换为校正模式。在校正模式下,第一电路11的放大器11b及第二电路12的放大器12b的放大率能够改变。之后,测量值获取部22从生物粒子计数器1获取关于该校正用粒子的上述第一信号的电压值V1及第二信号的电压值V2(在此为峰值)(步骤S3)。另外,关于该校正用粒子的测量既可事先进行,也可在动作模式切换为校正模式之后进行。
当通过测量值获取部22获取关于校正用粒子的上述第一信号的电压值V1及第二信号的电压值V2时,电路调整部23根据该第一信号的电压值V1及第二信号的电压值V2来计算修正系数C1、C2(步骤S4)。
而且,电路调整部23通过接口14、21将该修正系数C1、C2提供给生物粒子计数器1的控制部15,控制部15根据该修正系数C1、C2改变放大器11b、12b的放大率(步骤S5)。
生物粒子计数器1的控制部15在改变放大率之后自动地将动作模式从校正模式返回至测量模式。
如以上所述,根据上述实施方式,生物粒子计数器1包括生成第一信号的第一电路11及生成第二信号的第二电路12,并根据第一信号及第二信号来对生物粒子进行计数,其中第一信号与生物粒子对于照射光发出的荧光相对应,该第二信号与生物粒子对于照射光发出的散射光相对应,测量值获取部22从生物粒子计数器1获取关于校正用粒子的第一信号的电压值及第二信号的电压值。该校正用粒子是使聚苯乙烯粒子的表面内部浸润有荧光剂的粒子。电路调整部23(a)使用表示聚苯乙烯粒子的表面内部的荧光剂含量相关的荧光剂参数值和与荧光剂参数值相对应的第一信号的基准电压值之间的对应关系的基准数据31,确定对于利用测量值获取部22获取了第一信号的电压值V1的校正用粒子的与荧光剂参数值相对应的第一信号的基准电压值V1r,(b)以使关于校正用粒子的第一信号的电压值V1成为根据基准数据31确定的基准电压值V1r的方式来调整第一电路11。此外,电路调整部23(c)使用表示聚苯乙烯粒子的表面内部的荧光剂含量相关的荧光剂参数值和与荧光剂参数值相对应的第二信号的基准电压值之间的对应关系的基准数据31,确定对于利用测量值获取部22获取了第二信号的电压值V2的校正用粒子的与荧光剂参数值相对应的第二信号的基准电压值V2r,(b)以使关于校正用粒子的第二信号的电压值V2成为根据基准数据31确定的基准电压值V2r的方式来调整第二电路12。
由此,根据校正所使用的校正用粒子的荧光参数值,自动地准确校正作为荧光检测电路的第一电路11。即,由于生物粒子计数器1的荧光灵敏度对准基准值,因此降低生物粒子计数器装置间的荧光灵敏度的不均。具体来说,该校正用粒子由于在基材粒子的表面内部浸润荧光剂,因此减少荧光特性的不均,能够预先准确地确定基材粒子的表面内部的荧光剂含量相关的荧光剂参数值与作为荧光检测信号的第一信号的基准电压值之间的对应关系。因此,事先准备该对应关系作为基准数据31,当作为计数对象的生物粒子发生改变,与作为计数对象的生物粒子对应地再次校正生物粒子计数器1时,输入与作为改变后的计数对象的生物粒子相对应的校正用粒子的荧光剂参数值,从而能够与作为计数对象的生物粒子匹配地准确校正生物粒子计数器。
此外,在上述实施方式中,基准数据31包括聚苯乙烯粒子的表面内部的荧光剂含量为零时的第二信号的基准电压值,电路调整部23(c)以使关于校正用粒子的第二信号的电压值V2成为基准数据31中的第二信号的基准电压值V2r的方式来调整第二电路12。
由此,通过一次测量及校正,能够并行地对作为荧光检测电路的第一电路11及作为散射光检测电路的第二电路12两者进行校正,因此能够减少校正所需要的时间和工夫。
另外,上述实施方式是本发明的优选方式,但本发明并不限定于此,在不脱离本发明思想的范围内能够进行各种变形、改变。
例如,在上述实施方式中,校正装置2也可在上述校正之后使生物粒子计数器1对包含规定数量校正用粒子的规定个数浓度液体内的校正用粒子进行计数,或对包含规定数量校正用粒子和规定数量标准粒子即聚苯乙烯粒子的规定个数浓度液体内的校正用粒子和聚苯乙烯粒子进行计数,并根据其计数结果来确定并评价生物粒子计数器1的计数效率,。
此外,在上述实施方式中,根据修正系数C1、C2来调整放大器11b、12b的放大率,但代替其,也可根据修正系数C1、C2来调整受光部11a、12a的灵敏度,或调整A/D转换器11c、12c的输出。
工业实用性
本发明例如能够应用于生物粒子计数器的校正。
附图标记说明
1 生物粒子计数器
2 校正装置
11 第一电路
12 第二电路
22 测量值获取部
23 电路调整部
31 基准数据

Claims (5)

1.一种生物粒子计数器的校正方法,其特征在于,包括:
第一测量步骤,利用具有生成与生物粒子相对于照射光而发出的荧光相对应的第一信号的第一电路并根据所述第一信号对所述生物粒子进行计数的生物粒子计数器,生成关于校正用粒子的所述第一信号;
第一调整步骤,以使关于所述校正用粒子的所述第一信号的电压值成为基准电压值的方式来调整所述第一电路,
所述校正用粒子是使聚苯乙烯粒子的表面内部浸润荧光剂的粒子,
在所述第一调整步骤中,
(a)使用表示与所述聚苯乙烯粒子的表面内部的所述荧光剂含量相关的荧光剂参数值和与所述荧光剂参数值相对应的所述第一信号的基准电压值之间对应关系的基准数据,确定关于在所述测量步骤中使用的所述校正用粒子的与所述荧光剂参数值对应的所述第一信号的基准电压值;
(b)以使关于所述校正用粒子的所述第一信号的电压值成为根据所述基准数据确定的所述基准电压值的方式来调整所述第一电路。
2.根据权利要求1所述的生物粒子计数器的校正方法,其特征在于,
还包括:
第二测量步骤,利用还具有生成与所述生物粒子相对于所述照射光而发出的散射光相对应的第二信号的第二电路并根据所述第一信号及所述第二信号对所述生物粒子进行计数的所述生物粒子计数器,生成关于所述校正用粒子的所述第二信号;
第二调整步骤,以使关于所述校正用粒子的所述第二信号的电压值成为基准电压值的方式来调整所述第二电路,
在所述第二调整步骤中,
(c)使用表示所述荧光剂参数值和与所述荧光剂参数值相对应的所述第二信号的基准电压值之间对应关系的基准数据,确定关于所述测量步骤中使用的所述校正用粒子的与所述荧光剂参数值对应的所述第二信号的基准电压值,
(d)以使关于所述校正用粒子的所述第二信号的电压值成为所述基准数据中的所述第二信号的基准电压值的方式来调整所述第二电路。
3.根据权利要求1或2所述的生物粒子计数器的校正方法,其特征在于,从与多个粒径对应的所述基准数据中选择并使用与所述校正用粒子的粒径对应的所述基准数据。
4.根据权利要求1~3中任一项所述的生物粒子计数器的校正方法,其特征在于,至少在所述第一调整步骤之后,使所述生物粒子计数器对包含规定数量的所述校正用粒子的规定个数浓度液体内的校正用粒子进行计数、或对包含规定数量的所述校正用粒子和规定数量的所述聚苯乙烯粒子的规定标准浓度液体内的所述校正用粒子和所述聚苯乙烯粒子进行计数,并根据计数结果来确定所述生物粒子计数器的计数效率。
5.一种生物粒子计数器的校正装置,其特征在于,包括:
测量值获取部,从具有生成与生物粒子相对于照射光而发出的荧光相对应的第一信号的第一电路并根据所述第一信号对所述生物粒子进行计数的生物粒子计数器,获取关于校正用粒子的所述第一信号的电压值;
电路调整部,以使获取的关于所述校正用粒子的所述第一信号的电压值成为基准电压值的方式来调整所述第一电路,
所述校正用粒子是使聚苯乙烯粒子的表面内部浸润荧光剂的粒子,
所述电路调整部,
(a)使用表示与所述聚苯乙烯粒子的表面内部的所述荧光剂含量相关的荧光剂参数值和与所述荧光剂参数值相对应的所述第一信号的基准电压值之间对应关系的基准数据,确定关于由所述测量值获取部获取所述第一信号的电压值的所述校正用粒子的与所述荧光剂参数值对应的所述第一信号的基准电压值;
(b)以使关于所述校正用粒子的所述第一信号的电压值成为根据所述基准数据确定的所述基准电压值的方式来调整所述第一电路。
CN201680074759.1A 2015-12-25 2016-12-05 生物粒子计数器的校正方法及生物粒子计数器的校正装置 Active CN108368473B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2015-252703 2015-12-25
JP2015252703A JP6719203B2 (ja) 2015-12-25 2015-12-25 生物粒子計数器の校正方法および生物粒子計数器の校正装置
PCT/JP2016/086050 WO2017110435A1 (ja) 2015-12-25 2016-12-05 生物粒子計数器の校正方法および生物粒子計数器の校正装置

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN108368473A true CN108368473A (zh) 2018-08-03
CN108368473B CN108368473B (zh) 2022-03-01

Family

ID=59089395

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201680074759.1A Active CN108368473B (zh) 2015-12-25 2016-12-05 生物粒子计数器的校正方法及生物粒子计数器的校正装置

Country Status (6)

Country Link
US (1) US20190003951A1 (zh)
EP (1) EP3395938B1 (zh)
JP (1) JP6719203B2 (zh)
CN (1) CN108368473B (zh)
DK (1) DK3395938T3 (zh)
WO (1) WO2017110435A1 (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN118656710A (zh) * 2024-08-20 2024-09-17 浙江泰林分析仪器有限公司 一种在线检测微生物信号的算法

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10942108B2 (en) * 2016-01-22 2021-03-09 Sony Corporation Fine particle measurement apparatus, information processing apparatus, and information processing method
JP2020537148A (ja) * 2017-10-09 2020-12-17 ティーエスアイ インコーポレイテッド 粒子計数器の構成要素の較正
KR102435967B1 (ko) * 2018-09-05 2022-08-24 큐빅 센서 앤드 인스트루먼트 컴퍼니 리미티드 상이한 입경 입자상 물질의 질량 농도를 동시에 측정하는 방법 및 장치
JP7347979B2 (ja) * 2019-07-18 2023-09-20 シスメックス株式会社 測定装置、測定装置の調整方法およびプログラム
CN110987769B (zh) * 2019-12-26 2022-02-18 江苏苏净集团有限公司 液体颗粒计数器的标定方法
CN111521591B (zh) * 2020-05-09 2021-04-16 艾普拜生物科技(苏州)有限公司 用于微滴式数字pcr仪的计数校准装置、制备及使用方法

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040086423A1 (en) * 1995-03-10 2004-05-06 Wohlstadter Jacob N. Multi-array, multi-specific electrochemiluminescence testing
CN101092487A (zh) * 2007-07-25 2007-12-26 天津大学 荧光微球的染色方法
CN101419171A (zh) * 2007-10-26 2009-04-29 索尼株式会社 用于微粒的光学检测方法和光学检测装置
US20090186374A1 (en) * 2008-01-23 2009-07-23 Etogen Scientific Apparatus for measuring effect of test compounds on biological objects
CN101911139A (zh) * 2007-11-16 2010-12-08 粒子监测系统有限公司 用于光学粒子计数器的校准验证的系统和方法
JP2013117466A (ja) * 2011-12-05 2013-06-13 Rion Co Ltd 生物粒子計数器及び生物粒子計数方法
CN103175812A (zh) * 2011-12-21 2013-06-26 阿自倍尔株式会社 微生物检测装置的校正方法、以及微生物检测装置的校正套件
CN103328953A (zh) * 2011-04-21 2013-09-25 奥林巴斯医疗株式会社 光学测量系统、光学测量装置、校正用构件以及校正方法

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5701012A (en) * 1996-03-19 1997-12-23 Her Majesty The Queen In Right Of Canada, As Represented By The Minister Of National Defence Fluorescent biological particle detection system
JPH09274035A (ja) * 1996-04-03 1997-10-21 Toa Medical Electronics Co Ltd コントロール物質およびその染色方法
US5747667A (en) * 1997-05-19 1998-05-05 Hach Company Particle counter verification method
KR101166180B1 (ko) * 2003-08-13 2012-07-18 루미넥스 코포레이션 유세포 분석기식 측정 시스템의 하나 이상의 파라미터의 제어 방법
JP4953710B2 (ja) * 2005-07-12 2012-06-13 シスメックス株式会社 尿中有形成分分析装置用標準物質
WO2009042423A1 (en) * 2007-09-27 2009-04-02 Cellatope Corporation Methods and compositions for improved diagnostic assays
US9057676B2 (en) * 2010-02-05 2015-06-16 Cytonome/St, Llc Multiple flow channel particle analysis system
JP5859329B2 (ja) * 2012-02-02 2016-02-10 アズビル株式会社 微生物検出装置の校正支援装置及び微生物検出装置の校正支援方法
JP2014054232A (ja) * 2012-09-14 2014-03-27 Azbil Corp 微生物検出装置の校正方法、及び微生物検出装置の校正キット

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040086423A1 (en) * 1995-03-10 2004-05-06 Wohlstadter Jacob N. Multi-array, multi-specific electrochemiluminescence testing
CN101092487A (zh) * 2007-07-25 2007-12-26 天津大学 荧光微球的染色方法
CN101419171A (zh) * 2007-10-26 2009-04-29 索尼株式会社 用于微粒的光学检测方法和光学检测装置
CN101911139A (zh) * 2007-11-16 2010-12-08 粒子监测系统有限公司 用于光学粒子计数器的校准验证的系统和方法
US20090186374A1 (en) * 2008-01-23 2009-07-23 Etogen Scientific Apparatus for measuring effect of test compounds on biological objects
CN103328953A (zh) * 2011-04-21 2013-09-25 奥林巴斯医疗株式会社 光学测量系统、光学测量装置、校正用构件以及校正方法
JP2013117466A (ja) * 2011-12-05 2013-06-13 Rion Co Ltd 生物粒子計数器及び生物粒子計数方法
CN103175812A (zh) * 2011-12-21 2013-06-26 阿自倍尔株式会社 微生物检测装置的校正方法、以及微生物检测装置的校正套件

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
MANABU SHIMADA等: "Calibration of polarization-sensitive and dual-angle laser light scattering methods using standard latex particles", 《JOURNAL OF COLLOID AND INTERFACE SCIENCE》 *
张艳 等: "荧光粒子计数器在空气细菌监测中的应用评价", 《安徽医药》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN118656710A (zh) * 2024-08-20 2024-09-17 浙江泰林分析仪器有限公司 一种在线检测微生物信号的算法

Also Published As

Publication number Publication date
EP3395938B1 (en) 2022-07-13
CN108368473B (zh) 2022-03-01
EP3395938A1 (en) 2018-10-31
WO2017110435A1 (ja) 2017-06-29
JP6719203B2 (ja) 2020-07-08
DK3395938T3 (da) 2022-08-29
US20190003951A1 (en) 2019-01-03
EP3395938A4 (en) 2019-08-14
JP2017112922A (ja) 2017-06-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN108368473A (zh) 生物粒子计数器的校正方法及生物粒子计数器的校正装置
Akisue et al. Not all electronic foramen locators are accurate in teeth with enlarged apical foramina: an in vitro comparison of 5 brands
CN102301223B (zh) 自动分析装置
AlShaafi et al. Emission characteristics and effect of battery drain in “budget” curing lights
CN104345018B (zh) 一种基于探测器阵列的流式颗粒物测量仪
AU4559600A (en) A method of characterizing fluorescent molecules or other particles using generating functions
JPWO2011083754A1 (ja) 蛍光検出装置および蛍光検出方法
EP2392900A3 (en) Interferometer
JP5956587B2 (ja) 定量的な光学的測定のための方法及び実験機器
US20130236087A1 (en) Testing method and testing device for laser diode die
CN102022987B (zh) 放射线厚度计
JP6880059B2 (ja) 粒子径分布測定装置及び粒子径分布測定装置用プログラム
EP2843394A1 (en) Turbidity measuring sensor and method
Adams et al. Electrical counting and sizing of mammalian cells in suspension: an experimental evaluation
JP5902883B2 (ja) 分光蛍光光度計
CN109725024B (zh) 测量装置
Postolache et al. Sensor network for environment monitoring: Water quality case study
TW201416659A (zh) 生物晶片檢測裝置及其光源的檢測方法
JP2012217426A (ja) 培養中の試料の増殖を非接触で連続測定する方法
TWI522082B (zh) 細胞運動特性感測裝置及其運作方法
CN112946715B (zh) 高辐射剂量测量方法及系统
JP2015144581A (ja) 微生物計測システムおよびその制御方法
CN209820647U (zh) 一种衬底的温度测量装置
CN103884368A (zh) 血液透析机检测仪性能自动校准方法
RU2052860C1 (ru) Способ контроля эмиссионной неоднородности термокатодов электровакуумных приборов

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant