CN106466313A

CN106466313A - 一类磺酰胺基取代的酰胺类衍生物在制备用于治疗阿尔茨海默病的药物中的用途

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Publication number: CN106466313A
Application number: CN201510508123.0A
Authority: CN
Inventors: 胡立宏; 沈旭; 雷敏; 朱志远; 孙广龙
Original assignee: Shanghai Institute of Materia Medica of CAS
Current assignee: Shanghai Institute of Materia Medica of CAS
Priority date: 2015-08-18
Filing date: 2015-08-18
Publication date: 2017-03-01

Abstract

本发明涉及如下通式I所示的一类磺酰胺基取代的酰胺类衍生物的医药用途。具体而言，涉及如下通式I所示的一类磺酰胺基取代的酰胺类衍生物在制备用于治疗阿尔茨海默病的药物中的用途。所述磺酰胺基取代的酰胺类衍生物具有保护神经细胞凋亡的作用，整体动物试验表明该类化合物具有改善老年性痴呆大鼠的记忆功能，可用于阿尔茨海默病的治疗。

Description

一类磺酰胺基取代的酰胺类衍生物在制备用于治疗阿尔茨海默病的药物中的用途

技术领域

本发明涉及药物化学和药物治疗学领域，具体地，本发明涉及一类磺酰胺基取代的酰胺类衍生物的医药用途。具体而言，涉及一类磺酰胺基取代的酰胺类衍生物在制备用于治疗阿尔茨海默病的药物中的用途。所述磺酰胺基取代的酰胺类衍生物具有保护神经细胞凋亡的作用，整体动物试验表明该类化合物具有改善老年性痴呆大鼠的记忆功能，可用于阿尔茨海默病的治疗。

背景技术

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease，AD)是一种进行性神经退行性病变,主要遭受不可逆性的神经元死亡以及随之而来的包括记忆和逻辑思维等损伤[Clive B S G,Anne C,Carol B,Dag A,Emma J.Alzheimer’s disease，Lancet,2011.]。目前全世界约有三千万AD患者，并以每年460万患者的速率递增，全世界每年对AD患者的照顾费用高达三千多亿美元[2013 Alzheimer’sdisease facts and figures，Alzheimers Dement,2013,9(2),208–245.]。我国已进入老年化社会，我国的AD患者也逐年增加，未来几十年内，AD患者将急速增长，但是在临床上，现有治疗AD的药物只能减缓患者的病症，不能从实质上减缓疾病的进程，这将对我国的社会和医疗保健系统造成极大压力，随着新技术和新手段的介入，AD的发病机制已经初窥端倪[Hardy J,Selkoe DJ,The amyloid hypothesis of Alzheimer's disease:progress and problems on theroad to the rapeutics.Science,2002,297,353–356.]。AD患者尸检显示其脑组织出现明显的萎缩，脑细胞，尤其是基底神经节区的脑细胞，出现广泛死亡，同时在这些部位还可见明显的老年斑、神经原纤维缠结等病变。年龄的增加导致线粒体功能和结构逐渐衰退，使得活性氧(reactive oxygen species，ROS)的产生增加而积累，过多的ROS加速神经元细胞的凋亡[Reddy P H,Reddy TP.Mitochondria as a therapeutic target for aging and neurodegenerative diseases.Curr Alzheimer Res.,2011,8(4),393–409.]。线粒体功能缺失导致的细胞凋亡将形成一个恶性循环，由于线粒体DNA的非正常表达，引起β分泌酶激活，导致Aβ生成增加，同时使Tau蛋白高度磷酸化聚集，Aβ的增加进一步导致线粒体功能障碍、ROS大量累积，引起细胞内氧化应激，从而激活线粒体相关凋亡通路，引起神经细胞凋亡，导致AD患者出现明显的症状以及脑组织萎缩等，最终导致死亡。因此减少神经细胞凋亡，保护神经细胞对于AD病理进程具有重要作用，可能起到治疗AD的作用。

AD病人最重要的病理结果之一为脑内神经元大量死亡，并且导致病人脑组织出现大量萎缩，因此神经元不可逆凋亡在AD病程中起着重要的作用。链脲佐菌素(STZ)能够通过引起氧化应激而导致神经细胞凋亡，并在散发型AD造模中广泛应用，因此本申请发明人采用STZ诱导，在神经母瘤细胞(SH-SY5Y)细胞水平中模拟AD病征，然后检测化合物对STZ诱导的SH-SY5Y细胞凋亡情况的作用，从而评价化合物是否具有可能的抗AD效应。

通过随机筛选发现小分子化合物A-1具有保护被STZ刺激下的SH-SY5Y神经元细胞凋亡的作用；在双侧脑室STZ诱导痴呆大鼠模型上的体内抗AD药效学评价试验中，A-1能够有效地改善STZ诱导大鼠的记忆力损伤。

发明内容

本发明的一个目的为提供一种用于治疗阿尔茨海默病的通式I所示的磺酰胺基取代的酰胺类衍生物，或其药学上可接受的盐。

本发明的又一目的为提供一种用于治疗阿尔茨海默病的药物组合物，其包含治疗有效量的通式I所示的磺酰胺基取代的酰胺类衍生物或其药学上可接受的盐中的一种或多种作为活性成分。

所述药物组合物任选地可以进一步包含药学上可接受的辅料，如：载体、赋形剂、佐剂、或稀释剂。

本发明的另一目的是提供通式I所示的磺酰胺基取代的酰胺类衍生物、其药学上可接受的盐或其药物组合物在制备用于治疗或预防老年性痴呆症的药物或改善记忆力的产品中的用途。

本发明的再一目的为提供一种治疗老年性痴呆症或改善记忆力的方法，所述方法包括向具有该需要的患者给予治疗有效量的选自通式I所示的磺酰胺基取代的酰胺类衍生物或其药学上可接受的盐中的一种或多种，或根据本发明的包含治疗有效量的选自通式I所示的磺酰胺基取代的酰胺类衍生物或其药学上可接受的盐中的一种或多种作为活性成分的药物组合物。

在本发明的第一方面，提供了一类具有下面通式I所示的磺酰胺基取代的酰胺类衍生物，或其药学上可接受的盐：

其中：

R¹为取代或未取代的C₆-C₁₄芳基；优选为取代或未取代的苯基；其中，所述取代的C₆-C₁₄芳基上的取代基和所述取代的苯基上的取代基各自独立地为选自卤素、C₁-C₆烷基、氰基、硝基、氨基(NH₂)、羟基、羧基和C₁-C₆烷氧基中的1-3个取代基；优选为选自卤素、C₁-C₄烷基、氰基、硝基、氨基(NH₂)、羟基、羧基和C₁-C₄烷氧基中的1-3个取代基；最优选为选自卤素、甲基、乙基、丙基、甲氧基、乙氧基或丙氧基中的1-2个取代基；

R¹最优选为苯基、4-甲基苯基或4-氟苯基；

R²为取代或未取代的C₆-C₁₄芳基；优选为取代或未取代的苯基；其中，所述取代的C₆-C₁₄芳基上的取代基和所述取代的苯基上的取代基各自独立地为选自卤素、C₁-C₆烷基、氰基、硝基、氨基(NH₂)、羟基、羧基和C₁-C₆烷氧基中的1-3个取代基；优选为选自卤素、C₁-C₄烷基、氰基、硝基、氨基(NH₂)、羟基、羧基和C₁-C₄烷氧基中的1-3个取代基；最优选为选自卤素、甲基、乙基、丙基、甲氧基、乙氧基和丙氧基中的1-2个取代基；

R²最优选为2-甲氧基-5-氯苯基、4-氯苯基或4-甲氧基苯基；

R³为取代或未取代的C₆-C₁₄芳基、取代或未取代的5-7元杂芳基、取代或未取代的金刚烷基、3,4-亚甲二氧基苯基、取代或未取代的咔唑基；优选为3,4-亚甲二氧基苯基、取代或未取代的苯基、取代或未取代的萘基、取代或未取代的吡啶基、9-乙基-咔唑-3-基、金刚烷-1-基、3,5-二甲基金刚烷-1-基；其中，所述取代的C₆-C₁₄芳基上的取代基、所述取代的5-7元杂芳基上的取代基、所述取代的金刚烷基上的取代基、所述取代的咔唑基上的取代基、所述取代的苯基上的取代基、所述取代的萘基上的取代基和所述取代的吡啶基上的取代基各自独立地为选自卤素、C₁-C₆烷基、氰基、硝基、氨基(NH₂)、羟基、羧基和C₁-C₆烷氧基中的1-3个取代基；优选为选自卤素、甲基、乙基、丙基、丁基、氰基、硝基、氨基(NH₂)、羟基、羧基、甲氧基、乙氧基、丙氧基和丁氧基中的1-3个取代基；

R³最优选为3,4-亚甲二氧基苯基(又称苯并[1,3]二氧杂环戊烯-5基)4-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、2-甲氧基苯基、4-硝基苯基、3,4-二甲氧基苯基、吡啶-4-基、萘-1-基、9-乙基-咔唑-3-基、金刚烷-1-基或3,5-二甲基金刚烷-1-基。

在本发明中，术语“芳基”是指芳香族环基，如：苯基、萘基、联苯基。

在本发明中，术语“C₁-C₆烷基”是指主链上具有1至6个碳原子的直链或支链烷基，非限制性地包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、已基等；优选异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基。

在本发明中，术语“C₁-C₆烷氧基”是指主链上具有1至6个碳原子的直链或支链烷氧基，非限制性地包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基等；优选甲氧基、乙氧基。

在本发明中，术语“C₃-C₇环烷基”是指在环上具有3至7个碳原子的环状烷基，非限制性地包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基；优选环戊基、环己基和环庚基。

在本发明中，术语“5-7元杂芳基”是指在环上具有至少一个选自N、O和S中的杂原子的5-7元芳香环基，非限制性地包括呋喃基、吡咯基、噻吩基、噁唑基、咪唑基、吡唑基和吡啶基；优选吡咯基、咪唑基和吡啶基。

在本发明中，术语“卤素”包括氟、氯、溴和碘。

本发明中的术语“药学上可接受的盐”是指与磷酸、硫酸、盐酸等无机酸，或醋酸、酒石酸、柠檬酸、苹果酸等有机酸，或天冬氨酸、谷氨酸等酸性氨基酸形成的盐，或与上述酸成酯或酰胺后再与无机碱形成的盐，如钠、钾、钙、铝盐和铵盐。

本发明中，所述通式I所示的磺酰胺基取代的酰胺类衍生物优选选自下列化合物中：

在本发明的第二方面，还提供了一种制备根据本发明的磺酰胺基取代的酰胺类衍生物的方法，所述方法如下：

反应式1

(1)胺H与氯乙酰氯J发生酰化反应生成结构式K所示的化合物。

具体而言，将胺H溶于溶剂(例如，二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、乙腈等)中并加入碱(例如，碳酸钾、碳酸钠、三乙胺、吡啶等)，室温下加入氯乙酰氯J，并搅拌反应。反应结束后，反应液经饱和碳酸钠洗、干燥后浓缩，得到化合物K。

(2)将K所示结构的化合物在与胺L发生取代反应生成M所示的化合物。

具体而言，将化合物K溶于溶剂(例如，乙醇、二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、乙腈等)中并加入碱(例如，碳酸钾、碳酸钠、三乙胺、吡啶等)，室温下加入胺L后，升温至回流搅拌反应。反应结束后，反应液经水洗、干燥后浓缩，经纯化后得到化合物M。

(3)将M所示结构的化合物在与磺酰氯N发生磺酰化反应生成I所示的化合物。

具体而言，将化合物M于溶剂(例如，乙醇、二氯甲烷、氯仿、吡啶等)中并加入碱(例如，碳酸钾、碳酸钠、三乙胺、吡啶、4-二甲氨基吡啶等)，室温下加入磺酰氯F后，室温搅拌反应。反应结束后，反应液经水洗、干燥后浓缩，经纯化后得到化合物I。

其中，R¹至R³的定义如通式I中所定义。

利用本发明所得的磺酰胺基取代的酰胺类衍生物或其药学上可接受的盐可给药于人，可以口服、直肠、肠胃外(静脉内、肌肉内或皮下)、局部给药(粉剂、软膏剂或滴剂)。

用于口服给药的固体剂型包括胶囊剂、片剂、丸剂、散剂和颗粒剂。在这些固体剂型中，活性化合物与至少一种常规惰性赋形剂(或载体)混合，如柠檬酸钠或磷酸二钙，或与下述成分混合：(a)填料或增容剂，例如，淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸；(b)粘合剂，例如，羟甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶；(c)保湿剂，例如，甘油；(d)崩解剂，例如，琼脂、碳酸钙、马铃薯淀粉或木薯淀粉、藻酸、某些复合硅酸盐、和碳酸钠；(e)缓溶剂，例如石蜡；(f)吸收加速剂，例如，季胺化合物；(g)润湿剂，例如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；(h)吸附剂，例如，高岭土；和(i)润滑剂，例如，滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠，或其混合物。胶囊剂、片剂和丸剂中，剂型也可包含缓冲剂。

固体剂型如片剂、糖丸、胶囊剂、丸剂和颗粒剂可采用包衣和壳材制备，如肠衣和其它本领域公知的材料。它们可包含不透明剂，并且，这种组合物中活性化合物或化合物的释放可以延迟的方式在消化道内的某一部分中释放。可采用的包埋组分的实例是聚合物质和蜡类物质。必要时，活性化合物也可与上述赋形剂中的一种或多种形成微胶囊形式。

用于口服给药的液体剂型包括药学上可接受的乳液、溶液、悬浮液、糖浆或酊剂。除了活性化合物外，液体剂型可包含本领域中常规采用的惰性稀释剂，如水或其它溶剂，增溶剂和乳化剂，例知，乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺以及油，特别是棉籽油、花生油、玉米胚油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油或这些物质的混合物等。

除了这些惰性稀释剂外，上述组合物也可包含助剂，如润湿剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、矫味剂和香料。

除了活性化合物外，悬浮液可包含悬浮剂，例如，乙氧基化异十八烷醇、聚氧乙烯山梨醇和脱水山梨醇酯、微晶纤维素、甲醇铝和琼脂或这些物质的混合物等。

用于肠胃外注射的组合物可包含生理上可接受的无菌含水或无水溶液、分散液、悬浮液或乳液，和用于重新溶解成无菌的可注射溶液或分散液的无菌粉末。适宜的含水和非水载体、稀释剂、溶剂或赋形剂包括水、乙醇、多元醇及其适宜的混合物。

用于局部给药的本发明化合物的剂型包括软膏剂、散剂、喷射剂和吸入剂。活性成分在无菌条件下与生理上可接受的载体及任何防腐剂、缓冲剂，或必要时可能需要的推进剂一起混合。

因此，在本发明的第三方面，还提供了一种用于治疗阿尔茨海默病的药物组合物，它含有治疗有效量的选自通式I所示的磺酰胺基取代的酰胺类衍生物和其药学上可接受的盐中的一种或多种作为活性成分，以及任选的药学上可接受的载体、赋形剂、佐剂、辅料和/或稀释剂。

在本发明第四方面，提供了根据本发明通式I所示的磺酰胺基取代的酰胺类衍生物或其药学上可接受的盐、和包含该衍生物或其药学上可接受的盐的药物组合物在制备用于治疗阿尔茨海默病的药物或改善记忆力的产品中的用途。

所述药物组合物进一步包含其他药学上可接受的治疗剂，特别是其它治疗阿尔茨海默病药物。

在本发明的第五方面，提供了一种治疗阿尔茨海默病或改善记忆力的方法，所述方法包括向具有该需要的患者给药治疗有效量的选自根据本发明通式I所示的磺酰胺基取代的酰胺类衍生物和其药学上可接受的盐中的一种或多种，或根据本发明的包含治疗有效量的选自根据本发明通式I所示的磺酰胺基取代的酰胺类衍生物和其药学上可接受的盐中的一种或多种作为活性成分的药物组合物。

有益效果

本发明制备的通式I所示的磺酰胺基取代的酰胺类衍生物对神经细胞具有保护作用，整体动物试验表明该类化合物具有改善老年痴呆大鼠的记忆功能，可用于阿尔茨海默病的治疗。本发明化合物合成简单，易于制备，且合成原料丰富。

附图说明

图1显示A-1能够缩短STZ-ICV大鼠的潜伏期。V：溶剂-ICV组，SV：STZ-ICV溶剂组，SL：STZ-ICV 7mg/kg/day组，SH：STZ-ICV 10mg/kg/day组。

图2显示A-1能够增加STZ-ICV大鼠的穿台次数。V：溶剂-ICV组，SV：STZ-ICV溶剂组，SL：STZ-ICV 7mg/kg/day组，SH：STZ-ICV 10mg/kg/day组。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步阐述，但本发明不局限于此。

下述制备例中，¹H-NMR用Varian Mercury AMX300，400，500型仪器测定。MS用VG ZAB-HS或VG-7070型以及Esquire 3000plus-01005测定。所有溶剂在使用前均经过重新蒸馏，所使用的无水溶剂均是按标准方法干燥处理获得。除另有说明外，所有反应均是在氩气保护下进行并用TLC跟踪，后处理时均经饱和食盐水洗和无水硫酸镁干燥过程。产品的纯化除另有说明外均使用硅胶的柱色谱法，所使用的硅胶为200-300目，GF₂₅₄为青岛海洋化工厂或烟台缘博硅胶公司生产。

制备实施例

实施例1：化合物A-1的合成

取3,4-亚甲二氧基苯胺(3.022g，22mmol)及三乙胺(4.5mL，33mmol)溶于二氯甲烷(100mL)中，缓慢滴加氯乙酰氯(2.15mL，28.6mmol)，室温搅拌2小时后反应完全。反应液用饱和碳酸钠溶液洗2次后，用无水硫酸钠干燥，过滤后，滤液经减压蒸馏去除溶剂后，得棕色固体氯乙酰胡椒胺K-1(4.6g，98％)。

将化合物K-1(1.7g，8mmol)溶于乙醇(50mL)中，加入2-甲氧基-5-氯苯胺(1.2g，8mmol)、三乙胺(1.2mL，8mmol)，再加入碘化钠(1.2mg，8mmol)催化反应，反应液加热至回流搅拌反应12h。反应结束经过滤除去不溶物，滤液经减压蒸馏除去溶剂后，加入乙酸乙酯溶解，再用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤后，滤液经减压蒸馏去除溶剂后经柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3:1)，得到黄色固体M-1(1g，38％)。

将M-1(334mg，1mmol)溶于吡啶(15mL)中，加入4-二甲氨基吡啶(183mg，1.5mmol)，缓慢滴加苯磺酰氯(0.64mL，5mmol)，室温搅拌反应12h，反应结束后，减压蒸馏除去溶剂后得粗品，粗品经柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3:1)，得到淡黄色固体的产物A-1(450mg，95％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.08(s,1H),7.68-7.74(m,3H),7.57(t,J＝8.4Hz,2H),7.33(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.24(d,J＝2.0Hz,1H),6.92(d,J＝8.8Hz,1H),6.88(d,J＝2.4Hz,1H),6.85(dd,J＝8.4,2.0Hz,1H),6.78(d,J＝8.4Hz,1H),5.97(s,2H),4.21(s,2H),3.79(s,3H)。¹³C NMR(125MHz,CDCl₃)δ165.93,155.41,147.96,144.64,137.51,133.79,131.79,130.63,130.00,129.29,129.29,129.26,128.15,128.15,126.17,113.96,113.26,108.23,102.82,101.43,56.61,55.39。ESI-MS((m/z)475，[M+H]⁺)。

实施例2：化合物A-2的合成

反应操作如A-1的制备，原料用对甲基苯磺酰氯(380mg，2mmol)替代苯磺酰氯，经柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3:1)，得到黄色固体A-2(163mg，54％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.11(s,1H),7.60(d,J＝8.2Hz,2H),7.34(d,J＝8.2Hz,2H),7.31(dd,J＝9.0,2.5Hz,1H),7.21(d,J＝1.9Hz,1H),6.92(d,J＝8.9Hz,1H),6.87-6.80(m,2H),6.76(d,J＝8.3Hz,1H),5.95(s,2H),4.15(s,2H),3.82(s,3H),2.47(s,3H)。ESI-MS((m/z)489，[M+H]⁺)。

实施例3：化合物A-3的合成

反应操作如A-1的制备，原料用对氟苯磺酰氯(488mg，2.5mmol)替代苯磺酰氯，经柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3:1)，得到黄色固体A-3(98mg，40％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.01(s,1H),7.73-7.76(m,2H),7.35(d,J＝7.6Hz,1H),7.25-7.28(m,3H),6.93-6.94(m,2H),6.85(d,J＝8.0Hz,1H),6.78(d,J＝8.0Hz,1H),5.97(s,2H),4.20(s,2H),3.80(s,3H)。ESI-MS((m/z)493，[M+H]⁺)。

实施例4：化合物B-1的合成

反应操作如A-1的制备，原料用对氯苯胺(127mg，1mmol)替代5-氯-2-甲氧基苯胺，经柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3:1)，得到黄色固体B-1(190mg，43％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.17(s,1H),7.66(t,J＝7.4Hz,1H),7.60(d,J＝7.3Hz,2H),7.52(t,J＝7.7Hz,2H),7.31(d,J＝8.7Hz,2H),7.15(d,J＝1.9Hz,1H),7.07(d,J＝8.7Hz,2H),6.78(dd,J＝8.3,1.9Hz,1H),6.74(d,J＝8.3Hz,1H),5.95(s,2H),4.26(s,2H)。ESI-MS((m/z)445，[M+H]⁺)。

实施例5：化合物B-2的合成

反应操作如A-1的制备，原料用对甲氧基苯胺(123mg，1mmol)替代5-氯-2-甲氧基苯胺，经柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3:1)，得到黄色固体B-2(162mg，37％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.28(s,1H),7.68-7.58(m,3H),7.51(t,J＝7.8Hz,2H),7.17(d,J＝2.0Hz,1H),7.00(d,J＝9.0Hz,2H),6.85-6.78(m,3H),6.75(d,J＝8.3Hz,1H),5.94(s,2H),4.25(s,2H),3.79(s,3H)。ESI-MS((m/z)441，[M+H]⁺)。

实施例6：化合物C-1的合成

反应操作如A-1的制备，原料用甲氧基苯胺(246mg，2mmol)替代3,4-亚甲二氧基苯胺，经柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3:1)，得到黄色固体C-1(320mg，35％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.03(s,1H),7.72(d,J＝7.5Hz,2H),7.67(t,J＝7.4Hz,1H),7.55(t,J＝7.7Hz,2H),7.43(d,J＝8.9Hz,2H),7.31(dd,J＝8.9,2.5Hz,1H),6.93-6.84(m,4H),4.21(s,2H),3.80(s,3H),3.76(s,3H)。ESI-MS((m/z)461，[M+H]⁺)。

实施例7：化合物C-2的合成

反应操作如A-1的制备，原料用间甲氧基苯胺(246mg，2mmol)替代3,4-亚甲二氧基苯胺，经柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3:1)，得到黄色固体C-2(475mg，52％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.12(s,1H),7.72(d,J＝7.9Hz,2H),7.68(t,J＝7.5Hz,1H),7.55(t,J＝7.5Hz,2H),7.31(d,J＝9.0Hz,1H),7.28-7.20(m,2H),7.03(d,J＝7.8Hz,1H),6.93-6.84(m,2H),6.69(d,J＝7.4Hz,1H),4.21(s,2H),3.81(s,3H),3.78(s,3H)。ESI-MS((m/z)461，[M+H]⁺)。

实施例8：化合物C-3的合成

反应操作如A-1的制备，原料用邻甲氧基苯胺(246mg，2mmol)替代3,4-亚甲二氧基苯胺，经柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3:1)，得到黄色固体C-3(306mg，33％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.18(s,1H),8.29(dd,J＝7.9,1.4Hz,1H),7.71-7.65(m,2H),7.61(t,J＝7.4Hz,1H),7.53(d,J＝2.6Hz,1H),7.49(t,J＝7.7Hz,2H),7.28(dd,J＝8.9,2.6Hz,1H),7.08(td,J＝7.8,1.6Hz,1H),6.95(t,J＝8.5Hz,2H),6.70(d,J＝8.9Hz,1H),4.36(s,2H),4.04(s,3H),3.32(s,3H)。ESI-MS((m/z)461，[M+H]⁺)。

实施例9：化合物C-4的合成

反应操作如A-1的制备，原料用对硝基苯胺(276mg，2mmol)替代3,4-亚甲二氧基苯胺，经柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3:1)，得到黄色固体C-4(335mg，35％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.54(s,1H),8.24(d,J＝9.1Hz,2H),7.78-7.67(m,5H),7.58(t,J＝7.7Hz,2H),7.34(dd,J＝8.9,2.5Hz,1H),6.94(d,J＝8.9Hz,1H),6.85(d,J＝2.5Hz,1H),4.22(s,2H),3.82(s,3H)。ESI-MS((m/z)476，[M+H]⁺)。

实施例10：化合物C-5的合成

反应操作如A-1的制备，原料用4-氨基吡啶(188mg，2mmol)替代3,4-亚甲二氧基苯胺，经柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3:1)，得到黄色固体C-5(190mg，22％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.34(s,1H),8.54(d,J＝6.1Hz,2H),7.70(dd,J＝13.2,7.4Hz,3H),7.57(t,J＝7.7Hz,2H),7.50(d,J＝6.2Hz,2H),7.33(dd,J＝8.9,2.5Hz,1H),6.93(d,J＝8.9Hz,1H),6.84(d,J＝2.5Hz,1H),4.20(s,2H),3.82(s,3H)。ESI-MS((m/z)432，[M+H]⁺)。

实施例11：化合物C-6的合成

反应操作如A-1的制备，原料用金刚烷胺(302mg，2mmol)替代3,4-亚甲二氧基苯胺，经柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3:1)，得到黄色固体C-6(362mg，37％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.64-7.71(m,3H),7.52(t,J＝8.8Hz,2H),7.32(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),6.94(d,J＝8.8Hz,1H),6.85-6.87(m,2H),4.01(s,2H),3.66(s,3H),2.10(s,3H),2.00(s,6H),1.70(s,6H)。ESI-MS((m/z)489，[M+H]⁺)。

实施例12：化合物C-7的合成

反应操作如A-1的制备，原料用3,4-二甲氧基苯胺(306mg，2mmol)替代3,4-亚甲二氧基苯胺，经柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3:1)，得到黄色固体C-7(406mg，41％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.05(s,1H),7.68-7.75(m,3H),7.58(t,J＝8.0Hz,2H),7.32-7.35(m,2H),6.91-6.96(m,3H),6.84(d,J＝8.4Hz,1H),4.23(s,2H),3.91(s,3H),3.89(s,3H),3.77(s,3H)。ESI-MS((m/z)491，[M+H]⁺)。

实施例13：化合物C-8的合成

反应操作如A-1的制备，原料用1-萘胺(286mg，2mmol)替代3,4-亚甲二氧基苯胺，经柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3:1)，得到黄色固体C-8(140mg，15％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.65(s,1H),8.13(d,J＝8.4Hz,1H),7.91(t,J＝6.8Hz,2H),7.79-7.81(m,2H),7.70-7.86(m,2H),7.54-7.65(m,4H),7.49(t,J＝7.6Hz,1H),7.34(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.02(d,J＝2.4Hz,1H),6.89(d,J＝8.8Hz,1H),4.36(s,2H),3.57(s,3H)。ESI-MS((m/z)481，[M+H]⁺)。

实施例14：化合物C-9的合成

反应操作如A-1的制备，原料用3,5-二甲基金刚烷胺(358mg，2mmol)替代3,4-亚甲二氧基苯胺，经柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3:1)，得到黄色固体C-9(300mg，29％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.64-7.70(m,3H),7.54(t,J＝7.6Hz,2H),7.31(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),6.93(d,J＝2.4Hz,1H),6.92(s,1H),6.86(d,J＝8.8Hz,1H),3.99(s,2H),3.65(s,3H),2.15-2.18(m,1H),1.84(d,J＝2.0Hz,2H),1.67(d,J＝11.2Hz,2H),1.61(d,J＝11.2Hz,2H),1.41(d,J＝12Hz,2H),1.31(d,J＝12Hz,2H),1.13-1.22(m,2H),0.87(s,6H)。ESI-MS((m/z)517，[M+H]⁺)。

实施例15：化合物C-10的合成

反应操作如A-1的制备，原料用3-氨基-9-乙基咔唑(420mg，2mmol)替代3,4-亚甲二氧基苯胺，经柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3:1)，得到黄色固体C-10(264mg，24％)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.99(s,1H),8.36(d,J＝1.2Hz,1H),8.08(d,J＝8.0Hz,1H),7.69-7.73(m,3H),7.39-7.63(m,8H),7.17(t,J＝8.0Hz,1H),7.02(d,J＝8.0Hz,1H),4.38-4.45(m,4H),3.38(s,3H),1.29(t,J＝7.2Hz,3H)。ESI-MS((m/z)548，[M+H]⁺)。

实验实施例

实验实施例1：细胞水平测试本发明磺酰胺基取代的酰胺类衍生物对STZ刺激下细胞的保护作用

本发明在神经母瘤细胞SH-SY5Y细胞上通过MTT比色法实验测试了磺酰胺基取代的酰胺类衍生物在链脲佐菌素(STZ)诱导的细胞凋亡条件下对细胞的保护作用，结果表明这类衍生物对STZ刺激条件下的细胞具有保护作用。

1.实验原理

MTT是一种商品名为噻唑蓝的黄色染料，能够被活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶还原成水不溶性的蓝紫色结晶甲瓉并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓉，用酶标仪在490nm波长处测定其光吸收值，在一定细胞数的范围内，MTT结晶形成的量与活细胞数成正比。根据测得的吸光度值(OD值)，来判断活细胞数量，OD值越大，细胞活性越强。

2.实验材料与方法

(1)MTT购于sigma公司，细胞培养试剂均购于Gibico公司

(2)SH-SY5Y细胞培养：SH-SY5Y细胞用DMEM/F12培养液(10％FBS)培养于48孔板中，于50％细胞密度时加入STZ(0.8mM)及A-1衍生物(20μM)孵育24小时，以DMSO为空白对照，以DMSO与STZ(0.8mM)为阳性对照，设置3个复孔。

(3)吸出含有化合物的培养基，加入新的含有0.5mg/ml MTT的培养基，孵育4小时后终止培养，小心吸去孔内培养基。每孔加入200μL DMSO，置振板器低速振荡10min，使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪OD 490nm处测量各孔的吸光值。

3.实验结果

合成的磺酰胺基取代的酰胺类衍生物对神经细胞保护的活性进行了测试，发现大多数化合物都具有对SH-SY5Y细胞的保护活性，其中，C-9和C-10的EC₅₀值分别为0.22和0.17μM，对SH-SY5Y细胞显示出了较高的保护活性。

表1、磺酰胺基取代的酰胺类衍生物神经保护活性评价

化合物	EC₅₀(μM)	化合物	EC₅₀(μM)
				A-1	15.80±1.34	A-2	10.34±0.89
A-3	16.48±1.10	B-2	16.30±1.52
				C-1	16.20±1.10	C-2	17.60±1.35
C-3	15.50±1.28	C-4	8.21±0.54
				C-5	22.30±1.77	C-6	4.22±0.50
C-7	22.57±2.33	C-8	17.43±1.24
				C-9	0.22±0.02	C-10	0.17±0.02

试验实施例2：化合物A-1逆转STZ双侧脑室定位注射(STZ-ICV)老年性痴呆模型大鼠记忆力损伤的作用

本发明通过腹腔注射给药给予STZ-ICV老年性痴呆模型大鼠化合物A-1，然后通过水迷宫实验测定化合物A-1对STZ-ICV模型大鼠记忆力损伤改善作用。结果表明化合物A-1能够明显逆转老年性痴呆模型大鼠的记忆力损伤。

1.实验原理

本实验采用的为STZ双侧脑室定位注射(STZ-ICV)老年性痴呆模型大鼠。STZ是一种亚硝基脲衍生物，在中枢可以阻断胰岛素受体自身磷酸化和内在的酪氨酸激酶活性，已证实STZ侧脑室注射可以引起大鼠脑持久的葡萄糖代谢紊乱和能量生成障碍，引起海马乙酰胆碱转移酶活性降低、氧化应激反应及神经元凋亡并最终导致学习和记忆障碍。

Morris水迷宫实验(Morris Water Maze,MWM)仪器为一个直径为1.5米，深60厘米的圆形水池。在水池中注入黑色浑浊的色素，并保持水温为20℃，同时将一个直径为10厘米的圆形平台置于水面下约1.5厘米处。在训练实验中，将圆形平台置于第四象限中，并在水池的四周放置一些可见的标志来帮助大鼠记忆平台所在位置。在每天的训练中发明人分别将大鼠面向池壁置于水中，然后给大鼠60秒钟时间去寻找平台位置，大鼠在平台上停留10秒钟时间以帮助它记忆平台位置，持续4天的时间。在此期间，大鼠找到平台的时间称为潜伏期，为大鼠记忆力的一个评价指标，时间越短表明其记忆力越好。在第5天，在训练之后，大鼠会进行平台寻找实验。在这次实验中，潜于水面下的平台被撤除，然后让大鼠在水池中持续60秒钟去寻找平台，记录大鼠穿越平台次数作为其记忆力的评价指标，次数越多表明其记忆力越好。

2.实验材料与方法

(1)STZ双侧脑室定位注射(STZ-ICV)老年性痴呆模型大鼠为普通体质量200g左右，SPF清洁级，Sprague-Dawley(SD)大鼠41只，购买于上海斯莱克公司，大鼠在标准条件下饲养(12/12小时明暗循环，足够水和食物，22℃的恒温，60％的湿度)。

(2)STZ-ICV大鼠模型制作：在预给药2周后，大鼠体重达到约250g时进行脑定位注射，大鼠经10％水合氯醛(10mL/kg，ip)，麻醉后，固定于脑立体定向仪。75％乙醇消毒皮肤后，正中失状切开，分离骨膜，锥颅器钻开颅骨，暴露硬脑膜。微量注射器每侧脑室各注射STZ 10μL(约3mg/kg)，坐标为前囟后1.0mm，矢状缝左右旁开1.5mm，脑表面下3.5mm。

(3)STZ-ICV大鼠给药：大鼠随机分为4组：不接受手术组(V，10只)、手术后溶剂组(SV，10只)、手术后A-1低剂量给药组(SL，10只，7mg/kg)和手术后A-1高剂量给药组(SH，11只,21mg/kg)。化合物A-1溶解于含有3％DMSO，5％吐温80的生理盐水中，预给药2周后进行脑定位注射手术，手术后继续给药3周后，开始行为学检测(Morris水迷宫实验)。

(4)大鼠每天进行三次训练，持续4天的时间。在三次训练中发明人分别将大鼠面向池壁于三个除平台所在的象限中置于水中，然后给大鼠60秒钟时间去寻找平台位置，大鼠在平台上停留10秒钟时间以帮助它记忆平台位置。在此期间，记录大鼠找到平台的时间即潜伏期。在第5天，在三次训练之后，大鼠会进行平台寻找实验。在这次实验中，潜于水面下的平台被撤除，然后让大鼠在水池中持续60秒钟去寻找平台，记录大鼠穿越平台次数作为其记忆力的评价指标，次数越多表明其记忆力越好。所有的动物实验操作都严格遵守《实验动物管理条例》。

3.实验结果

实验结果发现，发明人采用双侧侧脑室注射STZ的办法制造AD模型。以囟门为原点，注射坐标为-1.0,1.5,3.5。STZ注射浓度为3mg/kg，双侧10μL/侧，溶剂为人工脑脊液。预给药2周后进行脑定位注射手术，手术时老鼠平均体重为220g，手术后继续给药3周，给药浓度为7mg/kg/day和21mg/kg/day(相对于小鼠的10mg/kg/day和30mg/kg/day换算而来)，溶剂组为3％DMSO，5％吐温80。发明人对STZ-ICV大鼠进行Morris水迷宫实验(Morris Water Maze)，以检测A-1对大鼠的认知功能的影响。结果如图1所示，随着训练次数和天数的增加大鼠找寻到平台的潜伏期逐渐缩短，而STZ-ICV大鼠的潜伏期缩短幅度明显低于溶剂-ICV大鼠，并且在第2天的潜伏期测定中发明人发现STZ-ICV大鼠的潜伏期比溶剂-ICV大鼠有着显著性的延长。这说明STZ-ICV大鼠AD造模成功，由于记忆功能受损已经出现，对于平台所在位置记忆不足。同时发明人发现10mg/kg/day A-1给药处理的STZ-ICV大鼠的潜伏期缩短幅度明显低于溶剂(3％DMSO，5％的吐温80)处理的STZ-ICV大鼠，并且在第3天的潜伏期测定中发明人发现7mg/kg/dayA-1给药处理的STZ-ICV大鼠的潜伏期比溶剂处理的STZ-ICV大鼠有着显著性的减少，而21mg/kg/day A-1处理组在第4天亦显示出明显的记忆逆转作用。这个结果表明A-1处理可以起到逆转STZ-ICV大鼠记忆损伤的作用。

第4天撤去平台后的实验中，发明人通过记录大鼠穿越平台的次数来检测大鼠的记忆力情况。结果如图2所示，在实验中发明人发现STZ-ICV大鼠穿越原来平台所在位置次数较溶剂-ICV大鼠少，同样表明STZ-ICV大鼠记忆受损。但是7mg/kg/day和21mg/kg/day A-1处理后的STZ-ICV大鼠穿越原来平台所在位置次数明显多于溶剂处理STZ-ICV大鼠，同样表明7mg/kg/day和21mg/kg/day A-1能够逆转STZ-ICV大鼠记忆损伤的作用。

Claims

1.一种通式I所示的磺酰胺基取代的酰胺类衍生物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗阿尔茨海默病的药物或改善记忆力的产品中的用途，

其中，

R¹为取代或未取代的C₆-C₁₄芳基，其中，所述取代的C₆-C₁₄芳基上的取代基为选自卤素、C₁-C₆烷基、氰基、硝基、氨基(NH₂)、羟基、羧基和C₁-C₆烷氧基中的1-3个取代基；

R²为取代或未取代的C₆-C₁₄芳基，其中，所述取代的C₆-C₁₄芳基上的取代基为选自卤素、C₁-C₆烷基、氰基、硝基、氨基(NH₂)、羟基、羧基和C₁-C₆烷氧基中的1-3个取代基；

R³为取代或未取代的C₆-C₁₄芳基、取代或未取代的5-7元杂芳基、取代或未取代的金刚烷基、3,4-亚甲二氧基苯基、取代或未取代的咔唑基，其中，所述取代的C₆-C₁₄芳基上的取代基、所述取代的5-7元杂芳基上的取代基、所述取代的金刚烷基上的取代基和所述取代的咔唑基上的取代基各自独立地为选自卤素、C₁-C₆烷基、氰基、硝基、氨基(NH₂)、羟基、羧基和C₁-C₆烷氧基中的1-3个取代基。

2.根据权利要求1所述的用途，其中，

其中，R¹为取代或未取代的苯基，其中，所述取代的苯基上的取代基为选自卤素、C₁-C₄烷基、氰基、硝基、氨基(NH₂)、羟基、羧基和C₁-C₄烷氧基中的1-3个取代基；

R²为取代或未取代的苯基，其中，所述取代的苯基上的取代基为选自卤素、C₁-C₄烷基、氰基、硝基、氨基(NH₂)、羟基、羧基和C₁-C₄烷氧基中的1-3个取代基；

R³为3,4-亚甲二氧基苯基、取代或未取代的苯基、取代或未取代的萘基、取代或未取代的吡啶基、9-乙基-咔唑-3-基、金刚烷-1-基、3,5-二甲基金刚烷-1-基，其中，所述取代的苯基上的取代基、所述取代的萘基上的取代基和所述取代的吡啶基上的取代基各自独立地为选自卤素、甲基、乙基、丙基、丁基、氰基、硝基、氨基(NH₂)、羟基、羧基、甲氧基、乙氧基、丙氧基和丁氧基中的1-3个取代基。

3.根据权利要求1所述的用途，其中，

R¹为取代或未取代的苯基，其中，所述取代的苯基上的取代基为选自卤素、甲基、乙基、丙基、甲氧基、乙氧基或丙氧基中的1-2个取代基；

R²为取代或未取代的苯基；其中，所述取代的苯基上的取代基为选自卤素、甲基、乙基、丙基、甲氧基、乙氧基和丙氧基中的1-2个取代基；

R³为3,4-亚甲二氧基苯基、取代或未取代的苯基、取代或未取代的萘基、取代或未取代的吡啶基、9-乙基-咔唑-3-基、金刚烷-1-基、3,5-二甲基金刚烷-1-基，其中，所述取代的苯基上的取代基、所述取代的萘基上的取代基和所述取代的吡啶基上的取代基各自独立地为选自卤素、甲基、乙基、丙基、丁基、氰基、硝基、氨基(NH₂)、羟基、羧基、甲氧基、乙氧基、丙氧基和丁氧基中的1-2个取代基。

4.根据权利要求1所述的用途，其中，

R¹为苯基、4-甲基苯基或4-氟苯基；

R²为2-甲氧基-5-氯苯基、4-氯苯基或4-甲氧基苯基；

R³为3,4-亚甲二氧基苯基、4-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、2-甲氧基苯基、4-硝基苯基、3,4-二甲氧基苯基、吡啶-4-基、萘-1-基、9-乙基-咔唑-3-基、金刚烷-1-基或3,5-二甲基金刚烷-1-基。

5.根据权利要求1所述的用途，其中，所述药学上可接受的盐是指与无机酸，或有机酸，或酸性氨基酸形成的盐，或与上述酸成酯或酰胺后再与无机碱形成的盐。

6.根据权利要求1所述的用途，所述磺酰胺基取代的酰胺类衍生物为选自如下化合物：

7.一种药物组合物在制备用于治疗阿尔茨海默病的药物或改善记忆力的产品中的用途，其中，所述药物组合物含有治疗有效量的选自根据权利要求1至6中任一项所述的通式I所示的磺酰胺基取代的酰胺类衍生物和其药学上可接受的盐中的一种或多种作为活性成分，以及任选的药学上可接受的载体、赋形剂、佐剂、辅料和/或稀释剂。

8.根据权利要求7所述的用途，所述药物组合物进一步包含其他药学上可接受的治疗剂，特别是其它治疗阿尔茨海默病药物。

9.一种治疗阿尔茨海默病或改善记忆力的方法，所述方法包括向具有需要的患者给药治疗有效量的选自根据权利要求1至6中任一项所述的磺酰胺基取代的酰胺类衍生物和其药学上可接受的盐中的一种或多种，或向具有需要的患者给药治疗有效量的根据权利要求7或8所述的药物组合物。