CN104546690A - 一种含有黄藤素的药物组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明属于医药技术领域，本发明公开了一种含有黄藤素的药物组合物，该药物组合物中包括：黄藤素、羟丙甲纤维素、羟苯乙酯、pH调节剂，本发明还公开了另外一种含有黄藤素的药物组合物，该药物组合物包括黄藤素、羟丙甲纤维素、山梨酸和L-谷氨酸。试验表明，本发明药物组合物制备成阴道凝胶剂，具有更好的安全性和稳定性。
Description
技术领域
本发明属于医药技术领域，具体涉及一种含有黄藤素的药物组合物。
背景技术
念珠菌性阴道炎即外阴阴道假丝念珠菌病（VVC），是由念珠菌引起的一种常见多发的外阴阴道炎症性疾病。白色念珠菌为条件致病菌，10%～20%的非孕妇女及30%的孕妇阴道中有此菌寄生，但菌量少，不引起症状。只有当全身及阴道局部免疫能力下降，尤其是局部细胞免疫力下降，白色念珠菌大量繁殖，才会引发阴道炎症状。该疾病的发病病因为：念珠菌是一种真菌，通常引起阴道炎的是念珠菌中的白色念珠菌。念珠菌对热的抵抗力不强，加热至60℃小时后即可死亡。但对干燥、日光、紫外线及化学制剂等抵抗力较强。其临床表现为：外阴瘙痒，且瘙痒症状时轻时重，时发时止，瘙痒严重时坐卧不宁，寝食难安，炎症较重时还可能出现排尿痛、性交痛等。白带增多是本病的另一主要症状，白带一般很稠，呈豆渣样或乳凝块状。在临床中其检查方法为：妇科检查白带呈白色稠厚豆腐渣样；阴道黏膜红肿，严重的形成浅溃疡少许阴道。分泌物放于10%KOH玻片上，在显微镜下找到菌丝。若有症状而多次镜检为阴性，可用培养法进行培养。诊断：1.外阴奇痒，白带呈白色稠厚豆腐渣样；2.阴道黏膜红肿，严重的形成浅溃疡；3.阴道分泌物中找到白色念珠菌。可取少许阴道分泌物，放于10%KOH或生理盐水玻片上，混匀后在显微镜下找到菌丝，即可确诊。用10%KOH可溶解其他细胞成分，检出率阳性率为70%～80%。若有症状而多次镜检为阴性，可用培养法进行培养确诊。
临床用于治疗念珠菌性阴道炎常用的制剂为黄藤素凝胶剂，黄藤素具有增强白细胞吞噬能力的作用，对多种革兰阳性和阴性菌有抑制作用，尤其抗真菌作用佳。对柯氏表皮癣菌等l2种真菌有不同程度的抑制作用；对白色念珠菌浅部或深部感染，均有良好疗效。另外，实验证明黄藤素腹腔注射，能增强大鼠非特异性免疫、细胞免疫及体液免疫功能，表明其对机体免疫功能的提高有作用。临床用于妇科炎症、菌痢、肠炎、呼吸道及泌尿道感染、外科感染、眼结膜炎等的治疗。以黄藤素为活性成分制备的凝胶剂在临床应用广泛。
发明内容
申请人在研究中发现，黄藤素凝胶虽然在临床应用广泛，但其具有一定的刺激性，给患者带来一定的痛苦，而这种刺激性有可能是凝胶辅料或者有关物质增多导致，因此，申请人通过多次创造性试验研究，得到一种新的黄藤素凝胶，该凝胶是由黄藤素、羟丙甲纤维素、山梨酸和L-谷氨酸为原料制备得到，通过刺激性、稳定性筛选试验，其中一定比例的山梨酸和L-谷氨酸对于黄藤素凝胶剂的有关物质变化影响较小，具有更好的安全性以及稳定性。
本发明通过下述技术方案实现的。
1、一种含有黄藤素的药物组合物，该药物组合物包括：黄藤素、羟丙甲纤维素、羟苯乙酯、pH调节剂。
其中pH调节剂为枸橼酸。
药物组合物包括黄藤素按C21H21NO4·HCl·3H2O计为40-60重量份，羟丙甲纤维素140-160重量份，枸橼酸1-2重量份，羟苯乙酯4-6重量份。
优选的药物组合物包括：黄藤素、羟丙甲纤维素、山梨酸和L-谷氨酸。
所述的药物组合物包括黄藤素按C21H21NO4·HCl·3H2O计为40-60重量份，羟丙甲纤维素140-160重量份，山梨酸和L-谷氨酸6-8重量份。
其中山梨酸与L-谷氨酸的重量比为1:0.20-0.40。
所述的药物组合物制备成药物制剂。
所述的药物制剂包括凝胶剂。
所述的凝胶剂的制备方法包括但不限于：
取山梨酸和L-谷氨酸，加入注射用水，溶解完全，加热至80-90℃，加入羟丙甲纤维素搅拌均匀，加入黄藤素，搅拌均匀，降温至室温，灌装，得到凝胶剂。
所述的药物组合物在制备治疗念珠菌性外阴阴道炎药物中的应用。
本发明的发明目的是为了获得一种刺激性小、有关物质变化小的凝胶剂，该凝胶剂具有更好的稳定性和安全性，对于临床用药具有重要意义。
下述试验研究是在多次试验基础上，针对本发明保护的技术方案进行的结论性论证试验。
一、刺激性筛选试验
试验1组： 黄藤素按C21H21NO4·HCl·3H2O计为50g，羟丙甲纤维素150g，枸橼酸1.5g，羟苯乙酯5g。
制备方法：取枸橼酸、羟苯乙酯，加入6.84kg的注射用水中，加热至85℃，加入羟丙甲纤维素，搅拌均匀，加入黄藤素，搅拌均匀，加入注射用水2.41kg，搅拌降温至室温，灌装，得到凝胶剂1000支。
试验2组：黄藤素按C21H21NO4·HCl·3H2O计为50g，羟丙甲纤维素150g，苹果酸1.35g，羟苯乙酯5g。
制备方法：取苹果酸、羟苯乙酯，加入6.81kg的注射用水中，加热至85℃，加入羟丙甲纤维素，搅拌均匀，加入黄藤素，搅拌均匀，加入注射用水2.39kg，搅拌降温至室温，灌装，得到凝胶剂1000支。
试验3组：黄藤素按C21H21NO4·HCl·3H2O计为50g，羟丙甲纤维素150g，马来酸1.50g，羟苯乙酯5g。
制备方法：取马来酸、羟苯乙酯，加入6.89kg的注射用水中，加热至85℃，加入羟丙甲纤维素，搅拌均匀，加入黄藤素，搅拌均匀，加入注射用水2.38kg，搅拌降温至室温，灌装，得到凝胶剂1000支。
试验4组：黄藤素按C21H21NO4·HCl·3H2O计为50g，羟丙甲纤维素150g，枸橼酸1.50g，山梨酸5g。
制备方法：取枸橼酸、山梨酸，加入6.85kg的注射用水中，加热至85℃，加入羟丙甲纤维素，搅拌均匀，加入黄藤素，搅拌均匀，加入注射用水2.42kg，搅拌降温至室温，灌装，得到凝胶剂1000支。
试验5组：黄藤素按C21H21NO4·HCl·3H2O计为50g，羟丙甲纤维素150g，L-天冬氨酸1.50g，山梨酸5g。
制备方法：取L-天冬氨酸、山梨酸，加入6.85kg的注射用水中，加热至85℃，加入羟丙甲纤维素，搅拌均匀，加入黄藤素，搅拌均匀，加入注射用水2.40kg，搅拌降温至室温，灌装，得到凝胶剂1000支。
试验6组：黄藤素按C21H21NO4·HCl·3H2O计为50g，羟丙甲纤维素150g，L-谷氨酸1.50g，山梨酸5g。
制备方法：取L-谷氨酸、山梨酸，加入6.85kg的注射用水中，加热至85℃，加入羟丙甲纤维素，搅拌均匀，加入黄藤素，搅拌均匀，加入注射用水2.41kg，搅拌降温至室温，灌装，得到凝胶剂1000支。
试验方法：取雌兔40只，随机分为8组，分别为空白组、机械刺激组、试验1组-试验6组。每天定时以消毒的玻璃套管将凝胶剂缓缓推入阴道深处（机械刺激组只使用玻璃套管不加药物，空白组不使用），给药前用消毒过的玻璃套管刺激使其排尿，给药后将家兔仰卧位固定10min后放回，连续给药7天，给药量为5mg/kg。于末次试验后24h内将雌兔处死解剖，肉眼观察并记录阴道充血和炎症情况。取阴道组织，以10%甲醛液固定，分成上、中、下三段，制成5μm石蜡包埋切片，常规染色进行组织学炎症刺激程度判定染色，光镜下观察。按Eckstein标准，以充血、水肿、炎症细胞浸润及上皮细胞坏死4项指标评分。每项刺激程度分别判定为0~4分，0分为无刺激反应，4分为严重损伤，总分在0~9分为可接受，9~10分为边缘值，≥11分为不可接受。
试验结果：各组雌兔阴道溃疡、浸润、水肿和充血评分及总分值见表1。
表1雌兔阴道刺激实验结果
| 组别 | 例数(只) | 充血 | 水肿 | 炎症细胞浸润 | 上皮细胞坏死 | 总分 |
| 空白 | 8 | 0.2 | 0.1 | 0.9 | 0.2 | 1.4 |
| 机械刺激 | 8 | 2.2 | 1.7 | 1.5 | 0.9 | 6.3 |
| 试验1组 | 8 | 3.7 | 3.3 | 2.6 | 2.1 | 11.7 |
| 试验2组 | 8 | 3.9 | 3.4 | 2.7 | 1.9 | 11.9 |
| 试验3组 | 8 | 3.8 | 3.3 | 2.6 | 1.7 | 11.4 |
| 试验4组 | 8 | 2.7 | 2.2 | 1.9 | 1.1 | 7.9 |
| 试验5组 | 8 | 2.6 | 2.1 | 1.7 | 0.9 | 7.3 |
| 试验6组 | 8 | 2.4 | 2.1 | 1.5 | 0.7 | 6.7 |
试验结论：上述试验表明，试验1组至试验3组的刺激性总分大于11分，因此申请人舍弃该试验组别，而试验4组至试验6组刺激性小于8分，申请人保留该3组组别。
二、稳定性试验
试验方法：取试验一试验4组至试验6组的凝胶剂在温度60℃温度下放置10天，于第5天和第10天取样，检测含量和有关物质，试验结果见表2。
【有关物质检测】取凝胶适量，加流动相（同含量测定流动相）溶解并制成每1ml约含黄藤素100μg的溶液，作为供试品溶液，精密量取供试品溶液适量，加流动相稀释成每1ml含2μg的溶液，作为对照溶液。照含量测定项下的色谱条件，取对照溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍。供试品溶液的色谱图中如显杂质峰，各杂质峰面积之和，不得大于对照溶液色谱图主成分面积的0.25倍（小于0.5%）。
【含量测定】照高效液相色谱法（中国药典2010年版二部附录VD）测定
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈：水：磷酸二氢钠：十二烷基硫酸钠（300ml：200ml：1.7g：0.85g）为流动相，流速1ml/min，检测波长345nm。理论板数按盐酸巴马汀计不低于1500。
取凝胶剂适量（约相当于盐酸巴马汀10mg），置100ml量瓶中，加流动相溶解，稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取盐酸巴马汀对照品适量，加流动相溶解并稀释制成每1ml含100μg的对照品溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。
表2 不同制剂稳定性试验结果
试验结论：上述稳定性试验表明，试验4组、试验5组经过高温试验后，其有关物质已增加很大，并且不符合质量要求，故应该舍弃。
三、比例筛选试验
试验1组：黄藤素按C21H21NO4·HCl·3H2O计为50g，羟丙甲纤维素150g，L-谷氨酸1.60g，山梨酸5.9g。
试验2组：黄藤素按C21H21NO4·HCl·3H2O计为50g，羟丙甲纤维素150g，L-谷氨酸1.08g，山梨酸5.42g。
试验3组：黄藤素按C21H21NO4·HCl·3H2O计为50g，羟丙甲纤维素150g，L-谷氨酸1.62g，山梨酸4.88g。
试验4组：黄藤素按C21H21NO4·HCl·3H2O计为50g，羟丙甲纤维素150g，L-谷氨酸1.86g，山梨酸4.64g。
试验5组：黄藤素按C21H21NO4·HCl·3H2O计为50g，羟丙甲纤维素150g，L-谷氨酸2.17g，山梨酸4.33g。
制备方法：取L-谷氨酸、山梨酸，加入6.85kg的注射用水中，加热至85℃，加入羟丙甲纤维素，搅拌均匀，加入黄藤素，搅拌均匀，加入注射用水2.40kg，搅拌降温至室温，灌装，得到凝胶剂1000支。
刺激性试验：同试验一，试验结果见表3。
稳定性试验：同试验二，试验结果见表4。
表3雌兔阴道刺激实验结果
| 组别 | 例数(只) | 充血 | 水肿 | 炎症细胞浸润 | 上皮细胞坏死 | 总分 |
| 空白 | 8 | 0.2 | 0.1 | 0.6 | 0.1 | 1.0 |
| 机械刺激 | 8 | 2.1 | 1.7 | 1.3 | 1.0 | 6.1 |
| 试验1组 | 8 | 2.5 | 2.2 | 1.6 | 0.8 | 7.1 |
| 试验2组 | 8 | 2.4 | 2.4 | 1.7 | 0.5 | 7.0 |
| 试验3组 | 8 | 2.4 | 2.5 | 1.6 | 0.3 | 6.8 |
| 试验4组 | 8 | 2.5 | 2.4 | 1.5 | 0.4 | 6.8 |
| 试验5组 | 8 | 2.7 | 2.7 | 1.6 | 0.5 | 7.5 |
试验结论：试验数据表明，L-谷氨酸与山梨酸的比例，对于刺激性影响不大。
表4 不同制剂稳定性试验结果
试验小结：上述数据表明，山梨酸与L-谷氨酸的重量比小于1：0.2，或者大于1:0.40时，经过10天高温后，其有关物质已经大于0.50%，不符合质量标准的要求，因此申请人保留山梨酸与L-谷氨酸的重量比为1:0.20-0.40。
制备实施例
实施例1
黄藤素按C21H21NO4·HCl·3H2O计为500g，羟丙甲纤维素1500g，L-谷氨酸10.9g，山梨酸54.1g。
制备方法：取L-谷氨酸、山梨酸，加入68.5kg的注射用水中，加热至85℃，加入羟丙甲纤维素，搅拌均匀，加入黄藤素，搅拌均匀，加入注射用水2.4kg，搅拌降温至室温，灌装，得到凝胶剂10000支。
实施例2
黄藤素按C21H21NO4·HCl·3H2O计为500g，羟丙甲纤维素1500g，L-谷氨酸16.2g，山梨酸48.8g。
制备方法：取L-谷氨酸、山梨酸，加入68.5kg的注射用水中，加热至85℃，加入羟丙甲纤维素，搅拌均匀，加入黄藤素，搅拌均匀，加入注射用水2.4kg，搅拌降温至室温，灌装，得到凝胶剂10000支。
实施例3
黄藤素按C21H21NO4·HCl·3H2O计为500g，羟丙甲纤维素1500g，L-谷氨酸18.6g，山梨酸46.4g。
制备方法：取L-谷氨酸、山梨酸，加入68.5kg的注射用水中，加热至85℃，加入羟丙甲纤维素，搅拌均匀，加入黄藤素，搅拌均匀，加入注射用水2.40kg，搅拌降温至室温，灌装，得到凝胶剂10000支。
实施例4
黄藤素按C21H21NO4·HCl·3H2O计为400g，羟丙甲纤维素1400g，山梨酸和L-谷氨酸60g，其中山梨酸50g，L-谷氨酸10g。
制备方法：取L-谷氨酸、山梨酸，加入68.1kg的注射用水中，加热至85℃，加入羟丙甲纤维素，搅拌均匀，加入黄藤素，搅拌均匀，加入注射用水2.44kg，搅拌降温至室温，灌装，得到凝胶剂10000支。
实施例5
黄藤素按C21H21NO4·HCl·3H2O计为400g，羟丙甲纤维素1400g，山梨酸和L-谷氨酸60g，其中山梨酸46.1g，L-谷氨酸13.9g。
制备方法：取L-谷氨酸、山梨酸，加入68.1kg的注射用水中，加热至85℃，加入羟丙甲纤维素，搅拌均匀，加入黄藤素，搅拌均匀，加入注射用水2.39kg，搅拌降温至室温，灌装，得到凝胶剂10000支。
实施例6
黄藤素按C21H21NO4·HCl·3H2O计为400g，羟丙甲纤维素1400g，山梨酸和L-谷氨酸60g，其中山梨酸42.86g，L-谷氨酸17.14g。
制备方法：取L-谷氨酸、山梨酸，加入68.1kg的注射用水中，加热至85℃，加入羟丙甲纤维素，搅拌均匀，加入黄藤素，搅拌均匀，加入注射用水2.35kg，搅拌降温至室温，灌装，得到凝胶剂10000支。
实施例7
黄藤素按C21H21NO4·HCl·3H2O计为600g，羟丙甲纤维素160g，山梨酸和L-谷氨酸80g，其中山梨酸66.67g，L-谷氨酸13.33g。
制备方法：取L-谷氨酸、山梨酸，加入72.0kg的注射用水中，加热至80℃，加入羟丙甲纤维素，搅拌均匀，加入黄藤素，搅拌均匀，加入注射用水2.55kg，搅拌降温至室温，灌装，得到凝胶剂10000支。
实施例8
黄藤素按C21H21NO4·HCl·3H2O计为600g，羟丙甲纤维素160g，山梨酸和L-谷氨酸80g，其中山梨酸59.3g，L-谷氨酸20.7g。
制备方法：取L-谷氨酸、山梨酸，加入69.6kg的注射用水中，加热至80℃，加入羟丙甲纤维素，搅拌均匀，加入黄藤素，搅拌均匀，加入注射用水2.50kg，搅拌降温至室温，灌装，得到凝胶剂10000支。
实施例9
黄藤素按C21H21NO4·HCl·3H2O计为600g，羟丙甲纤维素160g，山梨酸和L-谷氨酸80g，其中山梨酸57.1g，L-谷氨酸22.9g。
制备方法：取L-谷氨酸、山梨酸，加入69.6kg的注射用水中，加热至80℃，加入羟丙甲纤维素，搅拌均匀，加入黄藤素，搅拌均匀，加入注射用水2.50kg，搅拌降温至室温，灌装，得到凝胶剂10000支。
实施例10
黄藤素按C21H21NO4·HCl·3H2O计为450g，羟丙甲纤维素1455g，山梨酸和L-谷氨酸72g，其中山梨酸60g，L-谷氨酸12g。
制备方法：取L-谷氨酸、山梨酸，加入68.7kg的注射用水中，加热至90℃，加入羟丙甲纤维素，搅拌均匀，加入黄藤素，搅拌均匀，加入注射用水2.48kg，搅拌降温至室温，灌装，得到凝胶剂10000支。
实施例11
黄藤素按C21H21NO4·HCl·3H2O计为450g，羟丙甲纤维素1455g，山梨酸和L-谷氨酸72g，其中山梨酸51.4g，L-谷氨酸18.6g。
制备方法：取L-谷氨酸、山梨酸，加入67.3kg的注射用水中，加热至90℃，加入羟丙甲纤维素，搅拌均匀，加入黄藤素，搅拌均匀，加入注射用水2.40kg，搅拌降温至室温，灌装，得到凝胶剂10000支。
实施例12
黄藤素按C21H21NO4·HCl·3H2O计为450g，羟丙甲纤维素1455g，山梨酸和L-谷氨酸72g，其中山梨酸54.1g，L-谷氨酸17.9g。
制备方法：取L-谷氨酸、山梨酸，加入68.4kg的注射用水中，加热至90℃，加入羟丙甲纤维素，搅拌均匀，加入黄藤素，搅拌均匀，加入注射用水2.46kg，搅拌降温至室温，灌装，得到凝胶剂10000支。
将上述实施例按照说明书试验一刺激性试验方法进行试验，得到上述实施例的凝胶剂刺激性总分均小于8.0；按照说明书试验二稳定性试验，得到上述实施例的凝胶10天高温试验后，其有关物质均小于0.50%。
制备实施例包括但不限于上述。
Claims (10)
1.一种含有黄藤素的药物组合物，其特征在于该药物组合物包括：黄藤素、羟丙甲纤维素、羟苯乙酯、pH调节剂。
2.根据权利要求1所述的一种含有黄藤素的药物组合物，其中pH调节剂为枸橼酸。
3.根据权利要求1或2所述的一种含有黄藤素的药物组合物，药物组合物包括黄藤素按C21H21NO4·HCl·3H2O计为40-60重量份，羟丙甲纤维素140-160重量份，枸橼酸1-2重量份，羟苯乙酯4-6重量份。
4.一种含有黄藤素的药物组合物，其特征在于该药物组合物包括：黄藤素、羟丙甲纤维素、山梨酸和L-谷氨酸。
5.根据权利要求4所述的一种含有黄藤素的药物组合物，其中药物组合物包括黄藤素按C21H21NO4·HCl·3H2O计为40-60重量份，羟丙甲纤维素140-160重量份，山梨酸和L-谷氨酸6-8重量份。
6.根据权利要求5所述的一种含有黄藤素的药物组合物，其中山梨酸与L-谷氨酸的重量比为1:0.20-0.40。
7.根据权利要求3、4或5所述的一种含有黄藤素的药物组合物，其特征在于药物组合物制备成药物制剂。
8.根据权利要求7所述的一种含有黄藤素的药物组合物，其中药物制剂包括凝胶剂。
9.根据权利要求8所述的一种含有黄藤素的药物组合物，其中凝胶剂的制备方法为：
取山梨酸和L-谷氨酸，加入注射用水，溶解完全，加热至80-90℃，加入羟丙甲纤维素搅拌均匀，加入黄藤素，搅拌均匀，降温至室温，灌装，得到凝胶剂。
10. 根据权利要求3、4或5所述的一种含有黄藤素的药物组合物，其特征在于该药物组合物在制备治疗念珠菌性外阴阴道炎药物中的应用。
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