BRPI0706788A2 - anticorpos antagonistas il-17 - Google Patents

Abstract

ANTICORPOS ANTAGONISTAS IL-17 A presente invenção refere-se a uma molécula de ligação de IL- 17, em particular, um anticorpo para IL-17 humana, mais preferencialmente um anticorpo humano para IL-17 humana, em que as regiões hipervariáveis das cadeias pesada e leve têm seqúências de aminoácidos conforme definido, para uso no tratamento de algumas doenças malignas sólidas ou hematológicas.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "ANTICOR-POS ANTAGONISTAS IL-17".

A presente invenção refere-se a imunoterapia e, mais particu-larmente, proporciona o uso de algumas moléculas de ligação de IL-17 notratamento de uma doença proliferativa e, em particular, de doenças prolife-rativas malignas sólidas ou doenças proliferativas hematológicas.

IL-17, uma citocina derivada de células T presente, por exemplo,na artrite reumatóide (RA), age como uma citocina pró-inflamatória, particu-larmente em combinação com IL-1 e TNF-α, e o bloqueio de IL-1 e IL-17 temum efeito sinérgico sobre inflamação e destruição óssea in vivo. A produçãoinadequada ou excessiva de IL-17 está associada com a patologia de váriasdoenças e distúrbios, tais como artrite reumatóide, osteoartrite, afrouxamen-to de implantes ósseos, rejeição aguda de transplante, septicemia, choqueséptico ou endotóxico, alergias, asma, perda óssea, psoríase, isquemia, es-clerose sistêmica, acidente vascular cerebral, e outros distúrbios inflamató-rios. Anticorpos para IL-17 foram propostos para uso no tratamento de doen-ças e distúrbios mediados por IL-17; vide, por exemplo, a Nq WO 95/18826 ea discussão na introdução da mesma.

Foi agora visto de acordo com a presente invenção que molécu-las de ligação de IL-17 são úteis para inibir o crescimento de algumas doen-ças malignas sólidas e hematológicas. Por conseguinte, em um primeiro as-pecto, a presente invenção proporciona o uso de uma molécula de ligaçãode IL-17 no tratamento de uma doença proliferativa, tal como câncer e, emparticular, de doenças proliferativas malignas sólidas ou doenças proliferati-vas malignas hematológicas.

Preferencialmente uma molécula de ligação de IL-17 é usadaconforme descrito no pedido de patente PCT PCT/EP2005/008470, o qual épor meio deste incorporado por referência, compreendendo no mínimo umsítio de ligação antigênica compreendendo uma molécula de ligação de IL-17 a qual compreende um sítio de ligação antigênica compreendendo nomínimo um domínio variável de cadeia pesada de imunoglobulina (Vh) quecompreende em seqüência regiões hipervariáveis CDR1, CDR2 e CDR3, areferida CDR1 tendo a seqüência de aminoácidos SEQ ID NO: 1 (N-Y-W-M-N), a referida CDR2 tendo a seqüência de aminoácidos SEQ ID NO: 2 (A-I-N-Q-D-G-S-E-K-Y-Y-V-G-S-V-K-G), e a referida CDR3 tendo a seqüência deaminoácidos SEQ ID NO: 3 (D-Y-Y-D-l-L-T-D-Y-Y-l-H-Y-W-Y-F-D-L); ou e-quivalentes de CDR diretos das mesmas.

Em uma modalidade preferencial, a molécula de ligação de IL-17compreende no mínimo um domínio variável de cadeia leve de imunoglobu-Iina (Vl) que compreende em seqüência regiões hipervariáveis CDR1', C-DR21 e CDR3', a referida CDR1' tendo a seqüência de aminoácidos SEQ IDNO: 4 (R-A-S-Q-S-V-S-S-S-Y-L-A), a referida CDR2' tendo a seqüência deaminoácidos SEQ ID NO: 5 (G-A-S-S-R-A-T) e a referida CDR31 tendo a se-qüência de aminoácidos SEQ ID NO: 6 (Q-Q-Y-G-S-S-P-C-T) ou equivalen-tes de CDR'diretos das mesmas.

Em outra modalidade preferencial, a molécula de ligação de IL-17 compreende um sítio de ligação antigênica compreendendo no mínimoum domínio variável de cadeia pesada de imunoglobulina (Vh) que compre-ende em seqüência regiões hipervariáveis CDR1-X, CDR2-X e CDR3-X, areferida CDR1-X tendo a seqüência de aminoácidos SEQ ID NO: 11 (G-F-T-F-S-N-Y-W-M-N), a referida CDR2-X tendo a seqüência de aminoácidos SEQID NO: 12 (A-l-N-Q-D-G-S-E-K-Y-Y), e a referida CDR3-X tendo a seqüênciade aminoácidos SEQ ID NO: 13 (C-V-R-D-Y-Y-D-I-L-T-D-Y-Y-I-H-Y-W-Y-F-D-L-W-G); ou equivalentes de CDR-χ diretos das mesmas.

Além disso, em uma modalidade preferencial a molécula de liga-ção de IL-17 compreende tanto domínios variáveis de cadeia pesada (Vh)quanto leve (Vl) ; a referida molécula de ligação de IL-17 compreende nomínimo um sítio de ligação antigênica compreendendo:

a) um domínio variável de cadeia pesada de imunoglobulina (Vh) quecompreende em seqüência regiões hipervariáveis CDR1, CDR2 e CDR3, areferida CDR1 tendo a seqüência de aminoácidos SEQ ID NO:1, a referidaCDR2 tendo a seqüência de aminoácidos SEQ ID NO:2, e a referida CDR3tendo a seqüência de aminoácidos SEQ ID NO:3 ou equivalentes de CDRdiretos das mesmas; eb) um domínio variável de cadeia leve de imunoglobulina (Vl) que com-preende em seqüência regiões hipervariáveis CDR1', CDR2' e CDR3', a re-ferida CDR1' tendo a seqüência de aminoácidos SEQ ID NO:4, a referidaCDR2' tendo a seqüência de aminoácidos SEQ ID NO:5, e a referida CDR3'tendo a seqüência de aminoácidos SEQ ID NO:6 ou equivalentes de CDR'diretos das mesmas.

Além disso, a molécula de ligação de IL-17 também pode com-preender tanto domínios variáveis de cadeia pesada (Vh) quanto leve (Vl) ; areferida molécula de ligação de IL-17 compreende no mínimo um sítio deligação antigênica compreendendo:

a) um domínio variável de cadeia pesada de imunoglobulina (Vh) quecompreende em seqüência regiões hipervariáveis CDR1-X, CDR2-X e CDR3-x, a referida CDRI-x tendo a seqüência de aminoácidos SEQ ID NO:11, areferida CDR2-X tendo a seqüência de aminoácidos SEQ ID NO:12, e a refe-rida CDR3-X tendo a seqüência de aminoácidos SEQ ID NO: 13 ou equiva-lentes de CDR-x diretos das mesmas; e

b) um domínio variável de cadeia leve de imunoglobulina (Vl) que com-preende em seqüência regiões hipervariáveis CDR11, CDR21 e CDR3', a re-ferida CDRVtendo a seqüência de aminoácidos SEQ ID N0:4, a referidaCDR2' tendo a seqüência de aminoácidos SEQ ID NO:5, e a referida CDR3'tendo a seqüência de aminoácidos SEQ ID NO:6 ou equivalentes de CDR'diretos das mesmas.

A menos que indicado de modo diverso, qualquer cadeia de po-lipeptídeo é descrita aqui, neste pedido de patente, como tendo uma se-qüência de aminoácidos iniciando na extremidade de N-terminal e terminan-do na extremidade de C-terminal. Quando o sítio de ligação antigênica com-preende ambos os domínios Vh e Vl , estes podem estar localizados sobre amesma molécula de polipeptídeo ou, preferencialmente, cada domínio podeestar sobre uma cadeia diferente, o domínio Vh sendo parte de uma cadeiapesada de imunoglobulina ou fragmento da mesma e o Vl sendo parte deuma cadeia leve de imunoglobulina ou fragmento da mesma.

Por "molécula de ligação de IL-17" se indica qualquer moléculacapaz de ligar ao antígeno de IL-17 quer sozinha ou associada com outrasmoléculas. A reação de ligação pode ser mostrada por métodos padrão (tes-tes qualitativos) incluindo, por exemplo, um teste de ligação, teste de compe-tição ou um bioensaio para determinar a inibição de ligação de IL-17 a seureceptor ou qualquer tipo de ensaios de ligação, com referência a um testecontrole negativo no qual é usado um anticorpo de especificidade não rela-cionada mas do mesmo isótipo, por exemplo, um anticorpo anti-CD25.

Exemplos de moléculas de ligação de antígeno incluem anticor-pos conforme produzidos por células B ou hibridomas e anticorpos quiméri-cos, enxertados com CDR ou ser humanos ou qualquer fragmento dosmesmos, por exemplo, fragmentos F(ab')2 e Fab, bem como anticorpos dedomínio único ou de cadeia única.

Um anticorpo de cadeia única consiste nos domínios variáveisdas cadeias pesada e leve de um anticorpo ligado de modo covalente porum encadeador de peptídeo geralmente consistindo em a partir de 10 a 30aminoácidos, preferencialmente a partir de 15 a 25 aminoácidos. Portanto,uma estrutura semelhante não inclui a parte constante das cadeias pesada eleve e se acredita que o pequeno espaçador de peptídeo deve ser menosantigênico do que uma parte constante inteira. Por "anticorpo quimérico" seindica um anticorpo no qual as regiões constantes de cadeias pesada ouleve ou ambas são de origem humana enquanto os domínios variáveis deambas as cadeias pesada e leve são de origem não humana (por exemplo,murina) ou de origem humana mas derivados de um anticorpo humano dife-rente. Por "anticorpo enxertado com CDR" se indica um anticorpo no qual asregiões hipervariáveis (CDRs) são derivadas de um anticorpo doador , talcomo um anticorpo não humano (por exemplo, murino) ou um anticorpo hu-mano diferente, enquanto todas ou substancialmente todas as outras partesda imunoglobulina, por exemplo, as regiões constantes e as partes altamen-te conservadas dos domínios variáveis, isto é, as regiões de estrutura princi-pai, são derivadas de um anticorpo aceitador, por exemplo, um anticorpo deorigem humana. Um anticorpo enxertado com CDR pode conter, no entanto,uns poucos aminoácidos da seqüência doadora nas regiões de estruturaprincipal, por exemplo, nas partes das regiões de estrutura principal adjacen-tes às regiões hipervariáveis. Por "anticorpo humano" se indica um anticorpono qual as regiões constantes e variáveis de ambas as cadeias pesada eleve são todas de origem humana, ou substancialmente idênticas a seqüên-cias de origem humana, não necessariamente do mesmo anticorpo e incluianticorpos produzidos por camundongos nos quais os genes das partes va-riável e constante de imunoglobulina murina foram substituídos por suas có-pias humanas, por exemplo, conforme descrito em termos gerais na EP0546073 B1, na USP 5545806, na USP 5569825, na USP 5625126, na USP5633425, na USP 5661016, na USP 5770429, na EP 0 438474 B1 e na EP 0463151 B1.

Moléculas particularmente preferenciais de ligação de IL-17 dainvenção são anticorpos seres humanos, especialmente o anticorpo AIN457conforme descrito nos Exemplos 1 e 2 do PCT/EP2005/008470.

Portanto, em anticorpos quiméricos preferenciais os domíniosvariáveis de ambas as cadeias pesada e leve são de origem humana, porexemplo, os do anticorpo AIN457 os quais são mostrados na SEQ ID NO: 10(= domínio variável de cadeia leve, isto é, aminoácido 1 a 109 de SEQ IDNO: 10) e SEQ ID NO: 8 (= domínio variável de cadeia pesada, isto é, ami-noácido 1 a 127 de SEQ ID NO: 8). Os domínios de região constante prefe-rencialmente também compreendem domínios de região constante humanaadequados, por exemplo, conforme descrito em "Sequences of Proteins ofImmunological lnterest", Kabat E.A. et al., US Department of Health andHuman Services, Public Health Service, National Institute of Health.

Regiões hipervariáveis podem ser associadas com qualquer tipode regiões de estrutura principal, embora preferencialmente sejam de origemhumana. Regiões de estrutura principal adequadas são descritas em KabatE.A. et al., ibid. O estrutura principal de cadeia pesada preferencial é um es-trutura principal de cadeia pesada humana, por exemplo, o do anticorpo A-IN457. Consiste na seqüência, por exemplo, das regiões FR1 (aminoácido 1a 30 de SEQ ID NO: 8), FR2 (aminoácido 36 a 49 de SEQ ID NO: 8), FR3(aminoácido 67 a 98 de SEQ ID NO: 8) e FR4 (aminoácido 117 a 127 deSEQ ID NO: 8). Tendo em conta as regiões hipervariáveis determinadas deAIN457 por análise por radiografia, outro estrutura principal de cadeia pesa-da preferencial consiste na seqüência das regiões FR1-x (aminoácido 1 a 25de SEQ ID NO: 8), FR2-X (aminoácido 36 a 49 de SEQ ID NO: 8), FR3-X (a-minoácido 61 a 95 de SEQ ID NO: 8) e FR4 (aminoácido 119 a 127 de SEQID NO: 8). Em uma maneira similar, o estrutura principal de cadeia leve con-siste, na seqüência, das regiões FR1' (aminoácido 1 a 23 de SEQ ID NO:10), FR2' (aminoácido 36 a 50 de SEQ ID NO: 10), FR3' (aminoácido 58 a 89de SEQ ID NO: 10) e FR4' (aminoácido 99 a 109 de SEQ ID NO: 10).

Uma molécula de ligação de IL-17 de acordo com a invençãocompreende no mínimo um sítio de ligação antigênica compreendendo ouum primeiro domínio tendo uma seqüência de aminoácidos substancialmen-te idêntica à mostrada na SEQ ID NO: 8 iniciando com o aminoácido na po-sição 1 e terminando com o aminoácido na posição 127 ou um primeiro do-mínio conforme descrito acima e um segundo domínio tendo uma seqüênciade aminoácidos substancialmente idêntica à mostrada na SEQ ID NO: 10,iniciando com o aminoácido na posição 1 e terminando com o aminoácido naposição 109.

Anticorpos monoclonais cultivados contra uma proteína encon-trada naturalmente em todos os seres humanos são tipicamente desenvolvi-dos em um sistema não-humano por exemplo, em camundongos, e comotais são tipicamente proteínas não-humanas. Como uma conseqüência dire-ta disto, um anticorpo xenogênico conforme produzido por um hibridoma,quando administrado a seres humanos, provoca uma reação imune indese-jável a qual é predominantemente mediada pela parte constante da imuno-globulina xenogênica. Isto claramente limita o uso de semelhantes anticor-pos uma vez que não podem ser administrados por um período de tempoprolongado. Portanto, é particularmente preferencial usar anticorpos sereshumanos de cadeia única, de domínio único, quiméricos, enxertados comCDR, ou especialmente anticorpos seres humanos os quais provavelmentenão provocam uma substancial reação alogênica quando administrados aseres humanos.Em vista do precedente, uma molécula de ligação de IL-17 maispreferencial da invenção é selecionada entre um anticorpo anti IL-17 huma-no o qual compreende no mínimo

a) uma cadeia pesada de imunoglobulina ou fragmento da mesma o qualcompreende (i) um domínio variável compreendendo em seqüência as regi-ões hipervariáveis CDR1, CDR2 e CDR3 ou equivalentes de CDR diretosdas mesmas e (ii) a parte constante ou fragmento da mesma de uma cadeiapesada humana; a referida CDR1 tendo a seqüência de aminoácidos SEQID NO: 1, a referida CDR2 tendo a seqüência de aminoácidos SEQ ID NO: 2,e a referida CDR3 tendo a seqüência de aminoácidos SEQ ID NO: 3; e

b) uma cadeia leve de imunoglobulina ou fragmento da mesma o qualcompreende (i) um domínio variável compreendendo em seqüência as regi-ões hipervariáveis e opcionalmente também as regiões hipervariáveis C-DR1', CDR2', e CDR3' ou equivalentes de CDR' diretos das mesmas e (ii) aparte constante ou fragmento da mesma de uma cadeia leve humana, a re-ferida CDR1' tendo a seqüência de aminoácidos SEQ ID NO: 4, a referidaCDR2' tendo a seqüência de aminoácidos SEQ ID NO: 5, e a referida CDR3'tendo a seqüência de aminoácidos SEQ ID NO: 6.

Alternativamente, uma molécula de ligação de IL-17 de acordocom a invenção pode ser selecionada entre uma molécula de ligação de ca-deia única a qual compreende um sítio de ligação antigênica compreenden-do

a) um primeiro domínio compreendendo em seqüência as regiões hiper-variáveis CDR1, CDR2 e CDR3 ou equivalentes de CDR diretos das mes-mas, a referida CDR1 tendo a seqüência de aminoácidos SEQ ID NO: 1, areferida CDR2 tendo a seqüência de aminoácidos SEQ ID NO: 2, e a referi-da CDR3 tendo a seqüência de aminoácidos SEQ ID NO: 3; e

b) um segundo domínio compreendendo as regiões hipervariáveis CDR1',CDR2' e CDR31 ou equivalentes de CDR' diretos das mesmas, a referidaCDR1' tendo a seqüência de aminoácidos SEQ ID NO: 4, a referida CDR21tendo a seqüência de aminoácidos SEQ ID NO: 5, e a referida CDR31 tendoa seqüência de aminoácidos SEQ ID NO: 6; ec) um encadeador de peptídeo o qual é ligado ou à extremidade de N-terminal do primeiro domínio e à extremidade de C-terminal do segundo do-mínio ou à extremidade de C-terminal do primeiro domínio e à extremidadede N-terminal do segundo domínio.

Conforme é de conhecimento geral, alterações menores em umaseqüência de aminoácidos tais como eliminação, adição ou substituição deum, uns poucos ou ainda vários aminoácidos podem levar a uma forma aléli-ca da proteína original a qual tem propriedades substancialmente idênticas.

Deste modo, pelo termo "equivalentes de CDR diretos das mes-mas" se indica moléculas de ligação de IL-17 compreendendo em seqüênciaas regiões hipervariáveis CDRIi, CDR2i, e CDR3i, (ao invés de CDR1, CDR2,e CDR3), em que

(i) a região hipervariável CDRIi difere por 3, preferencialmente 2, maispreferencialmente 1 aminoácido(s) da região hipervariável CDR1 con-forme mostrado na SEQ ID NO: 1; e

(ii) a região hipervariável CDR2, difere por 3, preferencialmente 2, maispreferencialmente 1 aminoácido(s) da região hipervariável CDR2 con-forme mostrado na SEQ ID NO: 2; e

(iii) a região hipervariável CDR3, difere por 3, preferencialmente 2, maispreferencialmente 1 aminoácido(s) da região hipervariável CDR3 con-forme mostrado na SEQ ID NO: 3; e

(iv) uma molécula semelhante compreendendo em seqüência as regiõeshipervariáveis CDRIi, CDR2,, e CDR3j é capaz de inibir a atividade de 1nM (= 30 ng/ml) de IL-17 humana em uma concentração de 50 nM, pre-ferencialmente 20 nM, mais preferencialmente 10 nM, mais preferenci-almente 5 nM da molécula referida por 50%, a atividade inibitória refe-rida é medida sobre a produção de IL-6 induzida por hu-IL-17 em fibro-blastos dermais humanos.

Similarmente, pelo termo "equivalentes de CDR-x diretos dasmesmas" se indica moléculas de ligação de IL-17 compreendendo em se-qüência as regiões hipervariáveis CDR1rx, CDR2rx, e CDR3i-x, (ao invés deCDR1 -χ, CDR2-X, e CDR3-x), em que(ν) a região hipervariável CDRIi-X difere por 3, preferencialmente 2, maispreferencialmente 1 aminoácido(s) da região hipervariável CDFM-x con-forme mostrado na SEQ ID NO: 11; e

(vi) a região hipervariável CDR2rx difere por 3, preferencialmente 2, maispreferencialmente 1 aminoácido(s) da região hipervariável CDR2-X con-forme mostrado na SEQ ID NO: 12; e

(vii) a região hipervariável CDR3,-x difere por 3, preferencialmente 2, maispreferencialmente 1 aminoácido(s) da região hipervariável CDR3-X con-forme mostrado na SEQ ID NO: 13; e

(viii) uma molécula semelhante compreendendo em seqüência as regiõeshipervariáveis CDR1rx, CDR2i-x, e CDR3rx é capaz de inibir a ativida-de de 1 nM (= 30 ng/ml) de IL-17 humana em uma concentração de 50nM, preferencialmente 20 nM, mais preferencialmente 10 nM, mais pre-ferencialmente 5 nM da referida molécula por 50%, a atividade inibitóriareferida é medida sobre a produção de IL-6 induzida por hu-IL-17 emfibroblastos dermais humanos.

Similarmente, pelo termo "equivalentes de CDR' diretos dasmesmas" se indica um domínio compreendendo em seqüência as regiõeshipervariáveis CDR1'iiCDR2,i, e CDR3'i, em que

(i) a região hipervariável CDRVj difere por 3, preferencialmente 2, maispreferencialmente 1 aminoácido(s) da região hipervariável CDR1' con-forme mostrado na SEQ ID NO: 4; e

(ii) a região hipervariável CDR2'i difere por 3, preferencialmente 2, maispreferencialmente 1 aminoácido(s) da região hipervariável CDR2' con-forme mostrado na SEQ ID NO: 5; e

(iii) a região hipervariável CDR3'i difere por 3, preferencialmente 2, maispreferencialmente 1 aminoácido(s) da região hipervariável CDR3' con-forme mostrado na SEQ ID NO: 6; e

(iv) uma molécula semelhante compreendendo em seqüência as regiõeshipervariáveis CDRI1j, CDR2Y e CDR3'i é capaz de inibir a atividade de1 nM (= 30 ng/ml) de IL-17 humana em uma concentração de 50 nM,preferencialmente 20 nM, mais preferencialmente 10 nM, mais prefe-rencialmente 5 nM da referida molécula por 50%, a referida atividadeinibitória é medida sobre a produção de IL-6 induzida por hu-IL-17 emfibroblastos dermais humanos.

Alternativamente, uma molécula de ligação de IL-17 de acordocom a invenção pode ser uma molécula de ligação de IL-17 a qual compre-ende no mínimo um sítio de ligação antigênica compreendendo no mínimoum domínio variável de cadeia pesada de imunoglobulina (Vh) o qual com-preende em seqüência

a) regiões hipervariáveis CDR1 (SEQ ID NO: 1), CDR2 (SEQ ID NO: 2) eCDR3 (SEQ ID NO: 3); ou

b) regiões hipervariáveis CDRIil CDR2i, CDR3j, a referida região hiperva-riável CDRIi difere por 3, preferencialmente 2, mais preferencialmente1 aminoácido(s) da região hipervariável de CDR1 conforme mostradona SEQ ID NO: 1, a referida região hipervariável CDR2, difere por 3,preferencialmente 2, mais preferencialmente 1 aminoácido(s) da regiãohipervariável de CDR2 conforme mostrado na SEQ ID NO: 2; e a refe-rida região hipervariável CDR3j difere por 3, preferencialmente 2, maispreferencialmente 1 aminoácido(s) da região hipervariável de CDR3conforme mostrado na SEQ ID NO: 3; e

a referida molécula de ligação de IL-17 compreendendo em se-qüência as regiões hipervariáveis CDR1Xj CDR2X, e CDR3X é capaz de inibira atividade de 1 nM (= 30 ng/ml) de IL-17 humano em uma concentração de50 nM, preferencialmente 20 nM, mais preferencialmente 10 nM, mais prefe-rencialmente 5 nM da referida molécula por 50%, a referida atividade inibitó-ria é medida sobre a produção de IL-6 induzida por hu-IL-17 em fibroblastosdermais humanos.

Similarmente, uma molécula de ligação de IL-17 de acordo coma invenção pode ser uma molécula de ligação de IL-17 a qual compreendeno mínimo um sítio de ligação antigênica compreendendo no mínimo umdomínio variável de cadeia pesada de imunoglobulina (Vh) o qual compreen-de em seqüência

a) regiões hipervariáveis CDR1-X (SEQ ID NO: 11), CDR2-X (SEQ ID NO:12) e CDR3-X (SEQ ID NO: 13); ou

b) regiões hipervariáveis CDR1rx, CDR2rx, CDR3i-x, a referida regiãohipervariável CDRIi-X difere por 3, preferencialmente 2, mais preferen-cialmente 1 aminoácido(s) da região hipervariável de CDR1-X conformemostrado na SEQ ID NO: 11, a referida região hipervariável CDR2rx di-fere por 3, preferencialmente 2, mais preferencialmente 1 aminoáci-do(s) da região hipervariável de CDR2-X conforme mostrado na SEQ IDNO: 12; e a referida região hipervariável CDR3rx difere por 3, preferen-cialmente 2, mais preferencialmente 1 aminoácido(s) da região hiperva-riável de CDR3-x conforme mostrado na SEQ ID NO: 13; e a referidamolécula de ligação de IL-17 compreendendo em seqüência as regiõeshipervariáveis CDRIi-X, CDR2i-x, e CDR3,-x é capaz de inibir a ativida-de de 1 nM (= 30 ng/ml) de IL-17 humano em uma concentração de 50nM, preferencialmente 20 nM, mais preferencialmente 10 nM, mais pre-ferencialmente 5 nM da referida molécula por 50%, a referida atividadeinibitória é medida sobre a produção de IL-6 induzida por hu-IL-17 emfibroblastos dermais humanos.

Similarmente, uma molécula de ligação de IL-17 de acordo coma invenção pode ser uma molécula de ligação de IL-17 a qual compreendeno mínimo um sítio de ligação antigênica compreendendo no mínimo umdomínio variável de cadeia leve de imunoglobulina (Vl) o qual compreendeem seqüência

a) regiões hipervariáveis CDR'1 (SEQ ID NO: 4), CDR'2 (SEQ ID NO: 5) eCDR'3 (SEQ ID NO: 6); ou

b) regiões hipervariáveis CDRI1i, CDR2'„ CDR3'i, a referida região hiper-variável CDR1Ii difere por 3, preferencialmente 2, mais preferencial-mente 1 aminoácido(s) da região hipervariável de CDR'1 conformemostrado na SEQ ID NO: 4, a referida região hipervariável CDR'2j dife-re por 3, preferencialmente 2, mais preferencialmente 1 aminoácido(s)da região hipervariável de CDR'2 conforme mostrado na SEQ ID NO: 5;e a referida região hipervariável CDR'3i difere por 3, preferencialmente2, mais preferencialmente 1 aminoácido(s) da região hipervariável deCDR'3 conforme mostrado na SEQ ID NO: 6; e a referida molécula deligação de IL-17 compreende em seqüência as regiões hipervariáveisCDR1Ii, CDR'2i, e CDROi é capaz de inibir a atividade de 1 nM (= 30ng/ml) de IL-17 humana em uma concentração de 50 nM, preferencial-mente 20 nM, mais preferencialmente 10 nM, mais preferencialmente 5nM da referida molécula por 50%, a referida atividade inibitória é medi-da sobre a produção de IL-6 induzida por hu-IL-17 em fibroblastos der-mais humanos.

Alternativamente, uma molécula de ligação de IL-17 de acordocom a invenção pode ser uma molécula de ligação de IL-17 compreendendoambos os domínios variáveis de cadeia pesada (Vh) e leve (Vl) e a referidamolécula de ligação de IL-17 compreende no mínimo um sítio de ligação an-tigênica compreendendo:

a) um domínio variável de cadeia pesada de imunoglobulina (Vh) quecompreende em seqüência regiões hipervariáveis CDR1 (SEQ ID NO:1), CDR2 (SEQ ID NO: 2) e CDR3 (SEQ ID NO: 3); e

um domínio variável de cadeia leve de imunoglobulina (Vl) que compreendeem seqüência regiões hipervariáveis CDR1' (SEQ ID NO: 4), CDR2" (SEQ IDNO: 5) e CDR3' (SEQ ID NO: 6); ou

b) um domínio variável de cadeia pesada de imunoglobulina (Vh) quecompreende em seqüência regiões hipervariáveis CDRIil CDR2,, eCDR3i( a referida região hipervariável regiões hipervariáveis CDRIi,CDR2,, CDR3i, a referida região hipervariável CDR1, difere por 3, prefe-rencialmente 2, mais preferencialmente 1 aminoácido(s) da região hi-pervariável de CDR1 conforme mostrado na SEQ ID NO: 1, a referidaregião hipervariável CDR2, difere por 3, preferencialmente 2, mais pre-ferencialmente 1 aminoácido(s) da região hipervariável de CDR2 con-forme mostrado na SEQ ID NO: 2; e a referida região hipervariávelCDR3, difere por 3, preferencialmente 2, mais preferencialmente 1 ami-noácido(s) da região hipervariável de CDR3 conforme mostrado naSEQ ID NO: 3; e

um domínio variável de cadeia leve de imunoglobulina (Vl) que compreendeem seqüência regiões hipervariáveis CDRI1jj CDR2'i, CDR31,, a referida regi-ão hipervariável CDR1Ii difere por 3, preferencialmente 2, mais preferencial-mente 1 aminoácido(s) da região hipervariável de CDR'1 conforme mostradona SEQ ID NO: 4, a referida região hipervariável CDR'2i difere por 3, prefe-rencialmente 2, mais preferencialmente 1 aminoácido(s) da região hipervari-ável de CDR'2 conforme mostrado na SEQ ID NO: 5; e a referida região hi-pervariável CDR'3i difere por 3, preferencialmente 2, mais preferencialmente1 aminoácido(s) da região hipervariável de CDR'3 conforme mostrado naSEQ ID NO: 6; e

a referida molécula de ligação de IL-17 definida em b) compreende em se-qüência as regiões hipervariáveis CDRIi, CDR2i, CDR3i, CDR1Ii, CDR'2i, eCDR'3i é capaz de inibir a atividade de 1 nM (= 30 ng/ml) de IL-17 humanaem uma concentração de 50 nM, preferencialmente 20 nM, mais preferenci-almente 10 nM, mais preferencialmente 5 nM da referida molécula por 50%,a referida atividade inibitória é medida sobre a produção de IL-6 induzida porhu-IL-17 em fibroblastos dermais humanos.

Alternativamente, uma molécula de ligação de IL-17 de acordocom a invenção pode ser uma molécula de ligação de IL-17 compreendendoambas os domínios variáveis de cadeia pesada (Vh) e leve (Vl) e a referidamolécula de ligação de IL-17 compreende no mínimo um sítio de ligação an-tigênica compreendendo:

a) um domínio variável de cadeia pesada de imunoglobulina (Vh) quecompreende em seqüência regiões hipervariáveis CDR1-X (SEQ IDNO: 11), CDR2-X (SEQ ID NO: 12) e CDR3-x(SEQ ID NO: 13); e

um domínio variável de cadeia leve de imunoglobulina (Vl) que compreendeem seqüência regiões hipervariáveis CDR1' (SEQ ID NO: 4), CDR2' (SEQ IDNO: 5) e CDR3' (SEQ ID NO: 6); ou

b) um domínio variável de cadeia pesada de imunoglobulina (Vh) quecompreende em seqüência regiões hipervariáveis CDRIi-X, CDR2i-x, eCDR3i-x, a referida região hipervariável regiões hipervariáveis CDR1,-x,CDR2rx, CDR3rx, a referida região hipervariável CDRIi-X difere por 3,preferencialmente 2, mais preferencialmente 1 aminoácido(s) da regiãohipervariável de CDR1-X conforme mostrado na SEQ ID NO: 11, a refe-rida região hipervariável CDR2rx difere por 3, preferencialmente 2,mais preferencialmente 1 aminoácido(s) da região hipervariável deCDR2-X conforme mostrado na SEQ ID NO: 12; e a referida região hi-pervariável CDR3i-x difere por 3, preferencialmente 2, mais preferenci-almente 1 aminoácido(s) da região hipervariável de CDR3-X conformemostrado na SEQ ID NO: 13; e

um domínio variável de cadeia leve de imunoglobulina (Vl) que compreendeem seqüência regiões hipervariáveis CDRVi, CDR2'i, CDRS1i, a referida regi-ão hipervariável CDR1Ii difere por 3, preferencialmente 2, mais preferencial-mente 1 aminoácido(s) da região hipervariável de CDR'1 conforme mostradona SEQ ID NO: 4, a referida região hipervariável CDR'2, difere por 3, prefe-rencialmente 2, mais preferencialmente 1 aminoácido(s) da região hipervari-ável de CDR'2 conforme mostrado na SEQ ID NO: 5; e a referida região hi-pervariável CDROi difere por 3, preferencialmente 2, mais preferencialmente1 aminoácido(s) da região hipervariável de CDR'3 conforme mostrado naSEQ ID NO: 6; e

a referida molécula de ligação de IL-17 definida em b) compreende em se-qüência as regiões hipervariáveis CDRIi, ΟϋΡ2ί,ΟΟΡ3ί, CDR1Ii, CDR'2i, eCDR'3i é capaz de inibir a atividade de 1 nM (= 30 ng/ml) de IL-17 humanaem uma concentração de 50 nM, preferencialmente 20 nM, mais preferenci-almente 10 nM, mais preferencialmente 5 nM da referida molécula por 50%,a referida atividade inibitória é medida sobre a produção de IL-6 induzida porhu-IL-17 em fibroblastos dermais humanos.

A inibição da ligação de IL-17 a seu receptor pode ser testadaconvenientemente em vários testes inclusive testes semelhantes descritos,por exemplo, no PCT/EP2005/008470. Pelo termo "na mesma extensão" seindica que as moléculas de referência e as moléculas equivalentes apresen-tam, em uma base estatística, atividade inibitória de IL-17 essencialmenteidêntica em um dos testes referidos aqui, neste pedido de patente. Por e-xemplo, moléculas de ligação de IL-17 da invenção tipicamente têm IC50Spara a inibição de IL-17 humana sobre a produção de IL-6 induzida por IL-17humana em fibroblastos dermais humanos os quais estão dentro de ± x5,isto é, abaixo de 10 nM, mais preferencialmente 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3 ou 2 nMde, preferencialmente substancialmente a mesma que, a IC5o da moléculade referência correspondente quando testadas conforme descrito no Exem-plo 1 no PCT/EP2005/008470.

Alternativamente, o teste usado pode ser um teste de inibiçãocompetitiva da ligação de IL-17 por receptores solúveis de IL-17 (por exem-plo, os constructos R/Fc de IL-17 humano do Exemplo 1) e as moléculas deligação de IL-17 da invenção.

O mais preferencialmente, o anticorpo contra IL-17 humanocompreende no mínimo

a) uma cadeia pesada a qual compreende um domínio variável tendo umaseqüência de aminoácidos substancialmente idêntica à mostrada naSEQ ID NO: 8 iniciando com o aminoácido na posição 1 e terminandocom o aminoácido na posição 127 e a parte constante de uma cadeiapesada humana; e

b) uma cadeia leve a qual compreende um domínio variável tendo umaseqüência de aminoácidos substancialmente idêntica à mostrada naSEQ ID NO: 10 iniciando com o aminoácido na posição 1 e terminandocom o aminoácido na posição 109 e a parte constante de uma cadeialeve humana.

A parte constante de uma cadeia pesada humana pode ser dotipo γι, γ2, Υ3, Y4, μ, α-ι, α2, δ ou ε, preferencialmente do tipo γ, mais preferen-cialmente do tipo Y1, ao passo que a parte constante de uma cadeia levehumana pode ser do tipo κ ou λ (o qual inclui os subtipos λι, λ2 e λ3) maspreferencialmente é do tipo κ. As seqüências de aminoácidos de todas estaspartes constantes são dadas em Kabat et al. (supra).

Conjugados das moléculas de ligação da invenção, por exemplo,conjugados de enzima ou toxina ou radioisótopo, também são incluídos den-tro do âmbito da invenção.

"Polipeptídeo", caso não especificado de modo diverso aqui,neste pedido de patente, inclui qualquer peptídeo ou proteína compreenden-do aminoácidos unidos uns aos outros por ligações peptídicas, tendo umaseqüência de aminoácidos iniciando na extremidade de N-terminal e findan-do na extremidade de C-terminal. Preferencialmente o polipeptídeo da pre-sente invenção é um anticorpo monoclonal, mais preferencial é um anticorpomonoclonal quimérico (também denominado V-enxertado) ou humanizado(também denominado enxertado com CDR) , o mais preferencial é um anti-corpo totalmente humano obtenível, por exemplo, pela tecnologia exemplifi-cada no Exemplo 1. O anticorpo monoclonal humanizado (enxertado comCDR) ou totalmente humano pode incluir ou não mutações adicionais intro-duzidas nas seqüências de estrutura principal (FR) do anticorpo aceitador.

Um derivado funcional de um polipeptídeo conforme usado aqui,neste pedido de patente, inclui uma molécula tendo uma atividade biológicaqualitativa em comum com um polipeptídeo da presente invenção, isto é,tendo a capacidade de ligar ao IL-17 humano. Um derivado funcional incluifragmentos e análogos peptídicos de um polpipeptídeo de acordo com apresente invenção. Fragmentos compreendem regiões dentro da seqüênciade um polipeptídeo de acordo com a presente invenção, por exemplo, deuma seqüência especificada. O termo "derivado" é usado para definir varian-tes da seqüência de aminoácidos, e modificações covalentes de um polipep-tídeo de acordo com a presente invenção., por exemplo, de uma seqüênciaespecificada. Os derivados funcionais de um polipeptídeo de acordo com apresente invenção, por exemplo, de uma seqüência especificada, por exem-plo, da região hipervariável da cadeia leve e da cadeia pesada, preferenci-almente têm no mínimo cerca de 65%, mais preferencialmente no mínimocerca de 75%, ainda mais preferencialmente no mínimo cerca de 85%, omais preferencialmente no mínimo cerca de 95, 96, 97, 98, 99% de homolo-gia de seqüência global com a seqüência de aminoácidos de um polipeptí-deo de acordo com a presente invenção, por exemplo, de uma seqüênciaespecificada, e substancialmente cnservam a capacidade de ligar o IL-17humano ou, por exemplo, neutralizar a produção de IL-6 de fibroblastosdermais humanos induzidos por IL-17.

O termo "modificação covalente" inclui modificações de um poli-peptídeo de acordo com a presente invenção, por exemplo, de uma seqüên-cia especificada; ou um fragmento da mesma com um agente de origem or-gânica proteináceo ou não-proteináceo, fusões a seqüências de polipeptídeoheterólogas, e modificações pós-translacionais. Polipeptídeos modificadoscovalentes, por exemplo, de uma seqüência especificada, ainda têm a capa-cidade de ligar o IL-17 humano ou, por exemplo, neutralizar a produção deIL-6 de fibroblastos dermais humanos induzidos por IL-17 por reticulação.Modificações covalentes são tradicionalmente introduzidas reagindo resí-duos aminoácidos visados com um agente de origem orgânica que é capazde reagir com os resíduos terminais ou laterais selecionados, ou por meca-nismos utilizando modificações pós-translacionais que funcionam em célulashospedeiras recombinantes selecionadas. Algumas modificações pós-translacionais são o resultado da ação de células hospedeiras recombinan-tes sobre o polipeptídeo expressado. Resíduos glutaminila e asparaginilasão freqüentemente pós-translacionalmente deamidados para os resíduosglutamila e aspartila correspondentes. Alternativamente, estes resíduos sãodeaminados sob condições moderadamente acidíferas. Outras modificaçõespós-translacionais incluem hidroxilação de prolina e lisina, fosforilação degrupamentos oxidrila de resíduos serila, tirosina ou treonila, metilação dosgrupamentos α-amino de cadeias laterais lisina, arginina, e histidina, vide,por exemplo, Τ. E. Creighton, Proteins: Structure and Molecular Properties,W. H. Freeman & Co., San Francisco, pp. 79-86 (1983). Modificações cova-lentes incluem, por exemplo, proteínas de fusão compreendendo um poli-peptídeo de acordo com a presente invenção, por exemplo, de uma seqüên-cia especificada e variantes de sua seqüência de aminoácidos, tais comoimunoadesinas, e fusões de N-terminal às seqüências de sinal heterólogas.

"Homologia" com respeito a um polipeptídeo nativo e seu deri-vado funcional é definida aqui, neste pedido de patente, como a percenta-gem de resíduos aminoácido na seqüência candidata que são idênticos aosresíduos de um polipeptídeo nativo correspondente, depois de alinhar asseqüências e introduzir brechas, caso necessário, para obter a máxima per-centagem de homologia, e não considerando quaisquer substituições con-servativas como parte da identidade de seqüência. Nem extensões de N- ouC-terminal nem inserções devem ser consideradas como reduzindo a identi-dade ou homologia. São de conhecimento geral métodos e programas decomputador para o alinhamento.

"Aminoácido(s)" se refere(m) a todos os L-a-aminoácidos queocorrem naturalmente, por exemplo, e inclusive D-aminoácidos. Os aminoá-cidos são identificados ou pelas designações de única letra ou de três letrasde conhecimento geral.

O termo "variante de seqüência de aminoácidos" se refere a mo-léculas com algumas diferenças em suas seqüências de aminoácidos com-paradas com um polipeptídeo de acordo com a presente invenção, por e-xemplo, de uma seqüência especificada. Variantes de seqüências de amino-ácidos de um polipeptídeo de acordo com a presente invenção, por exemplo,de uma seqüência especificada, ainda têm a capacidaqde de ligar o IL-17humano ou, por exemplo, neutralizar a produção de IL-6 de fibroblastosdermais humanos induzidos por IL-17. Variantes substitucionais são as quetêm no mínimo um resíduo aminoácido removido e um aminoácido diferenteinserido o invés dele na mesma posião em um polipeptídeo de acordo com apresente invenção, por exemplo, de uma seqüência especificada. Estassubstituições podem ser únicas, onde somente um aminoácido na moléculafoi substituído, ou podem ser múltiplas, onde dois ou mais aminoácidos fo-ram substituídos na mesma molécula. Variantes insercionais são aquelascom um ou mais aminoácidos inseridos imediatamente adjacentes a um a-minoácido em uma posição particular em um polipeptídeo de acordo com apresente invenção, por exemplo, de uma seqüência especificada. Imediata-mente adjacente a um aminoácido significa conectado ou ao grupamentofuncional α-carbóxi ou α-amino do aminoácido. Variantes de eliminação sãoaqueles com um ou mais aminoácidos em um polipeptídeo de acordo com apresente invenção, por exemplo, de uma seqüência especificada, removidos.Ordinariamente, variantes de eliminação terão um ou dois aminoácidos eli-minados em uma região particular da molécula.

O anticorpo desejado pode ser produzido em uma cultura celularou em um animal transgênico. Um animal transgênico adequado pode serobtido de acordo com métodos-padrão, os quais incluem microinjetar emovos os primeiro e segundo constructos de DNA colocados sob seqüênciascontrole adequadas transferindo os ovos preparados deste modo para fê-meas pseudo grávidas apropriadas e selecionar um descendente expres-sando o anticorpo desejado.

Quando as cadeias de anticorpos são produzidas em uma cultu-ra celular, os constructos de DNA devem primeiro ser inseridos ou em umúnico vetor de expressão ou em dois vetores de expressão separados mascompatíveis, a última possibilidade sendo preferencial.

Por conseguinte, a invenção também proporciona um vetor deexpressão capaz de duplicar em uma linhagem celular procariótica ou euca-riótica a qual compreende no mínimo um dos constructos de DNA descritosacima.

Cada vetor de expressão contendo um constructo de DNA é emseguida transferido para um organismo hospedeiro adequado.

Quando os constructos de DNA são inseridos separadamentesobre dois vetores de expressão, podem ser transferidos separadamente,isto é, um tipo de vetor por célula, ou co-transferidos, esta última possibilida-de sendo preferencial. Um organismo hospedeiro adequado pode ser umabactéria, uma levedura ou uma linhagem celular de mamífero, esta últimasendo preferencial. Mais preferencialmente, a linhagem celular de mamíferoé de origem linfóide, por exemplo, um mieloma, hibridoma ou uma célula Bimortalizada normal, a qual convenientemente não expressa qualquer cadeiapesada ou leve de anticorpo endógeno.

Para expressão em células de mamíferos é preferencial que aseqüência codificando molécula de ligação de IL-17 seja integrada no DNAda célula hospedeira dentro de um Iocus o qual permite ou favorece alto ní-vel de expressão da molécula de ligação de IL-17. Células nas quais a se-qüência codificando molécula de ligação de IL-17 é integrada em semelhan-tes Ioci favoráveis podem ser identificadas e selecionadas com base nosníveis da molécula de ligação de IL-17 a qual expressam. Pode ser usadoqualquer marcador selecionável adequado para preparação de células hos-pedeiras contendo a seqüência codificando molécula de ligação de IL-17;por exemplo, pode ser usado um gene dhfr/metotrexato ou sistema de sele-ção equivalente. Sistemas alternativos para expressão das moléculas deligação de IL-17 da invenção incluem sistemas de amplificação/seleção àbase de GS1 tais como os descritos na patente européia no. EP 0256055 B,na EP 0323997 B e no pedido de na patente européia 89303964.4.

Para os fins da presente descrição, um anticorpo é "capaz deinibir a ligação de IL-17 como AIN457" se o anticorpo for capaz de inibir aligação de IL-17 a seu receptor substancialmente na mesma extensão que oanticorpo AIN457, em que "na mesma extensão" tem o significado conformedefinido acima.

O anticorpo AIN457 tem afinidade de ligação para IL-17 a qual émaior do que as afinidades previamente reportadas para anticorpos anti-IL-17, em particular, para qualquer anticorpos anti IL-17 humano. Deste modoAIN457 tem uma constante de equilíbrio de dissociação Kd para ligar a IL-17de cerca de 0,188 ± 0,036 nM (determinada por BIAcore1 por exemplo, con-forme descrito no pedido PCT PCT/EP2005/008470). Esta elevada afinidadede ligação torna o anticorpo AIN457 particularmente adequado para aplica-ções terapêuticas.

Na presente descrição os termos "tratamento" ou "tratar" se refe-rem tanto a tratamento profilático ou preventivo bem como tratamento curati-vo ou modificador da doença, incluindo tratamento de paciente em risco decontrair a doença ou suspeito de ter contraído a doença bem como pacien-tes que estão doentes ou foram diagnosticados como sofrendo de uma do-ença ou condição médica, e inclui supressão de recidiva clínica.

Moléculas de ligação de IL-17 conforme definido acima as quaistêm especificidade de ligação para IL-17 humano, em particular, anticorposos quais são capazes de inibir a ligação de IL-17 a seu receptor; e anticor-pos contra IL-17 os quais são capazes de inibir a atividade de 1 nM (= 30ng/ml) de IL-17 humano em uma concentração de 50 nM, preferencialmente20 nM, mais preferencialmente 10 nM, mais preferencialmente 5 nM da refe-rida molécula por 50%, a referida atividade inibitória é medida sobre a pro-dução de IL-6 induzida por hu-IL-17 em fibroblastos dermais humanos, sãoreferidas aqui, neste pedido de patente, como Anticorpos da Invenção.

Preferencialmente os Anticorpos da Invenção são anticorposseres humanos, o mais preferencialmente o anticorpo AIN457 ou equivalen-tes diretos dos mesmos.

Podem ser demonstradas atividades farmacológicas dos Anti-corpos da Invenção em métodos de teste padrão, por exemplo, conformedescrito abaixo:

Neutralização de produção, dependente de IL-17, de interleucina-6 por fibro-blastos seres humanos primários: A produção de IL-6 em fibroblastos sereshumanos primários (dermais) é dependente de IL-17 (Hwang SY et al.,(2004) Arthritis Res Ther; 6:R120-128.

Em resumo, fibroblastos dermais humanos são estimulados comIL-17 recombinante na presença de várias concentrações de Anticorpo daInvenção ou receptor de IL-17 humano com parte Fe. O anticorpo anti-CD25quimérico Simulect® (basiliximab) é usado como um controle negativo. Osobrenadante é tomado depois de 16 h de estimulação e testado para IL-6por ELISA. Os Anticorpos da Invenção tipicamente têm IC50S para inibiçãoda produção de IL-6 (na presença de 1 nM de IL-17 humano) de cerca de 50nM ou menos (por exemplo, a partir de cerca de 0,01 a cerca de 50 nM)quando testados como acima, isto é, a referida atividade inibitória é medidasobre a produção de IL-6 induzida por hu-IL-17 em fibroblastos dermais hu-manos. Preferencialmente, os Anticorpos da Invenção têm uma IC5o parainibição da produção de IL-6 conforme definido acima de cerca de 20 nM oumenos, mais preferencialmente de cerca de 10 nM ou menos, mais prefe-rencialmente de cerca de 5 nM ou menos, mais preferencialmente de cercade 2 nM ou menos, mais preferencialmente de cerca de 1 nM ou menos.

Conforme indicado no teste acima os Anticorpos da Invençãobloqueiam potentemente os efeitos de IL-17. Por conseguinte, os Anticorposda Invenção têm utilidade farmacêutica como se segue:

Os Anticorpos da Invenção são úteis para a profilaxia e o trata-mento de doenças ou condições médicas mediadas por IL-17, por exemplo,inibindo o crescimento de doenças proliferativas malignas sólidas ou hema-tológicas.

Doenças malignas sólidas podem incluir doenças de tumor ma-ligno onde quer que o tumor (ou a metástase) esteja localizado. Preferenci-almente, a doença de tumor maligno é câncer de mama, câncer genitouriná-rio, câncer pulmonar, câncer gastrointestinal, por exemplo, tumor colorretalou tumor genitourinário, especialmente um câncer de próstata ou um tumorestromal gastrointestinal (GIST), câncer epidermóide, melanoma, câncer deovário, câncer de pâncreas, neuroblastoma, câncer de cabeça e pescoço talcomo por exemplo, câncer de boca ou câncer de laringe, câncer de bexiga,ou em um sentido mais amplo câncer renal, cerebral ou gástrico, um tumorpulmonar, especialmente um tumor pulmonar de células não pequenas.

Doenças malignas hematológicas ("tumores líquidos") incluem,por exemplo, linfoma, leucemia, especialmente os expressando c-kit, KDR,Flt-1 ou Flt-3, mieloma ou malignidades linfóides, mas também cânceres dobaço e cânceres dos linfonodos. Exemplos mais particulares de semelhantescânceres associados com células B, incluindo, por exemplo, Iinfomas degrau elevado, intermediário e baixo (incluindo Iinfomas de células B tais co-mo, por exemplo, linfoma de células B de tecido linfóide associado com amucosa e linfoma não-Hodgkin, micose fungóide, Síndrome de Sezary, lin-foma de células do córtex cerebral, linfoma de Burkitt, linfoma linfocítico pe-queno, linfoma de zona marginal, linfoma de grande zona difusa, linfomafolicular, e linfoma de Hodgkin e Iinfomas de células T) e Ieucemias (incluin-do leucemia secundária, leucemia linfocítica crônica, tal como leucemia decélulas B (linfócitos B CD5+), leucemia mielóide, tal como leucemia mielóideaguda, leucemia mielóide crônica, leucemia linfóide, tal como leucemia Iinfo-blástica aguda e mielodisplasia), mieloma múltipla, tal como malignidãde decélulas plasmáticas, e outros cânceres hematológicos e/ou associados comcélulas B ou com células T. Também são incluídos cânceres de células he-matopoiéticas adicionais, incluindo leucócitos polimorfonucleares, tais comobasófilos, eosinófilos, neutrófilos e monócitos, células dendríticas, plaquetas,eritrócitos e células assassinas naturais. As origens de cânceres de célulasB são como se segue: Iinfoma de células B da zona marginal se origina emcélulas B da memória na zona marginal, Iinfoma folicular e Iinfoma de célulasB grande difuso se origina em centrócitos na zona clara de centros germi-nais, mieloma múltiplo se origina em células plasmáticas, leucemia Iinfocfticacrônica e leucemia linfocítica pequena se origina em células B1 (CD5+), Iin-foma de células do córtex cerebral se origina em células B naive na zona docórtex cerebral e Iinfoma de Burkitt se origina em centroblastos na zona es-cura de centros germinais.

Para estas indicações, a dosagem apropriada, logicamente, va-riará dependendo, por exemplo, do Anticorpo da Invenção, em particular, aser empregado, do hospedeiro, do modo de administração e da natureza eda gravidade da condição sendo tratada. No entanto, em uso profilático, re-sultados satisfatórios são geralmente indicados para serem obtidos em do-sagens de cerca de 0,05 mg a cerca de 20 mg ou 10 mg por quilograma depeso corporal mais geralmente de cerca de 0,1 mg a cerca de 5 mg por qui-lograma de peso corporal. A freqüência de dosagem para usos profiláticosnormalmente estará dentro da faixa de cerca de uma vez por semana atécerca de uma vez a cada 3 meses, mais geralmente na faixa de cerca deuma vez a cada 2 semanas até cerca de uma vez a cada 10 semanas, porexemplo, uma vez a cada 4 a 8 semanas. O Anticorpo da Invenção é conve-nientemente administrado por via parenteral, por via intravenosa, por exem-plo, dentro da veia antecubital ou outra veia periférica, por via intramuscular,ou por via subcutânea. Um tratamento profilático tipicamente compreendeadministrar o Anticorpo da Invenção uma vez ao mês a uma vez a cada 2 a3 meses, ou menos freqüentemente.

Os Anticorpos da Invenção podem ser administrados como oúnico ingrediente ativo ou em combinação com, por exemplo, como um ad-juvante a ou em combinação com, outros fármacos, por exemplo, fármacosúteis no tratamento, prevenção, melhora e/ou cura de cânceres, por exem-plo, para o tratamento ou prevenção das doenças mencionadas acima. Porexemplo, os Anticorpos da Invenção podem ser usados em combinação comum agente quimioterápico. Agentes quimioterápicos que podem ser adminis-trados com os anticorpos da invenção incluem, mas não estão limitados a,derivados de antibióticos (por exemplo, doxorubicina (adriamicina), bleomici-na, daunorrubicina, e dactinomicina); antiestrogênios (por exemplo, tamoxi-feno); antimetabólitos (por exemplo, fluorouracila, 5- FU, metotrexato, floxu-ridina, alfa-2b interferon, ácido glutâmico, plicamicina, mercaptopurina, e 6-tioguanina); agentes citotóxicos (por exemplo, carmustina, BCNU, lomustina,CCNU, citosina arabinosídeo, ciclofosfamida, estramustina, hidroxiuréia,procarbazina, mitomicina, bussulfam, cis-platina, e sulfato de vincristina);hormônios (por exemplo, medroxiprogesterona, sódio fosfato de estramusti-na, etinil estradiol, estradiol, acetato de megestrol, metiltestosterona, difosfa-to de dietilestilbestrol, clorotrianiseno, e testolactona); derivados de mostardade nitrogênio (por exemplo, mefalen, clorambucila, mecloretamina (mostardade nitrogênio) e tiotepa); esteróides e combinações (por exemplo, fosfato desódio de betametasona); e outros (por exemplo, dicarbazina, asparaginase,mitotano, sulfato de vincristina, sulfato de vinblastina, etoposídeo, Topote-can, 5-Fluorouracila, paclitaxel (Taxol), Cisplatina, Citarabina, e IFN-gama,irinotecan (Camptosar, CPT- 11), análogos de irinotecan, gencitabina (GEM-ZAR®), e oxaliplatina, ifosamida, e compostos de nitosouréia).

Em modalidades específicas, anticorpos da presente invençãopodem ser administrados em combinação com um ou mais quimioterápicosou outros agentes terapêuticos úteis no tratamento, prevenção, melhora e/oucura de cânceres incluindo, mas não limitados a, um ou mais agentes daTABELA 1

TABELA 1:

81C6 (anticorpo monoclonal antitenascina), 2- clorodesoxiadenosina, A007(4-4'-diidroxibenzofenona-2,4- dinitrofenilcidrazona), Abarelix® (Abarelix-Depot-M®, PPI-149, Ft-3827); Abiraterone acetate® (CB-7598, CB-7630),ABT-627 (ET-1 inibidor), ABX- EGF (anti-EGFr MAb), Acetildinalina (CI-994,GOE-5549, GOR-5549, PD- 130636), AG-2034 (AG-2024, AG-2032, GARFT[glicinamida ribonucleosídeo transformilase] inibidor), Alanosina, Aldesleuci-na (IL-2, Proleukin®), Alemtuuumab® (Campath®), Alitretinoína (Panreting,LGN-1057), Alopurinol (Aloprim®, Zyloprim®), Altretamina (Hexalen®, hexa-metilmelamina, Hexastat®), Amifostina (Ethyol®), Aminocamptotecina (9-AC,9- Aminocamptotecina, NSC 603071), Aminoglutetimida (Cytadren®), Ácidoaminolevulrnico (Levulan®, Kerastick®), Aminopterina, Ansacrina, Anastrozol(Arimidex®), Angiostatina1 Anamicina (AR-522, anamicina LF1 Aronex®), Te-rapia antiidiotipo (BsAb), Anti-CDI 9/CD3 MAb (anti-CD19/CD3 scFv, anti-NHL MAb), APC-8015 (Provenge®, Terapia de células dendríticas), Aplidina(Aplidin®, Aplidina®), Arabinosilguanina (Ara-G, GW506U78, Nelzarabine®,Composto 506U78), Trióxido arsênico (Trisenox®, ATO, Atrivex®), Avorelin®(Meterelin®, MF-6001, EP-23904), B43-Genisteína (conjugado anti- CD19Ab/genisteína), B43-PAP (conjugado anti-CD19 Ab/proteína antiviral de erva-dos-cancros), conjugados de B7 anticorpo, BAY 43-9006 (inibidor Raf quina-se), BBR 3464, Betatine (Beta-LT), Avastin® (Bevacizumab, Anticorpo mono-clonal anti-VEGF, rhuMAb-VEGF), Sutent® (malato de sunitinib), Nexavar®(tosilato de sorafenib), RAD001 (everolimus), Bexarotene (Targretin®,LGD1069), BIBH- 1 (Anti-FAP MAb), BIBX-1382, Biclutamide (Casodex®),Biricodar dicitrato (Incel®, Inibidor Incel MDR), Bleomicina (Blenoxane®),BLP-25 (peptídeo MUC-1), antagonistas BLyS, BMS-214662 (BMS-192331,BMS-193269, BMS- 206635), BNP-1350 (BNPI-1100, Carenitecinas), Com-posto de Protoporfirina Boronada (PDIT, Imunoterapia fotodinâmica), Brioes-tatina-1 (Bryostatin®, BMY-45618, NSC-339555), Budesonide (Rhinocort®),Bussulfam (Busulfex®, Myleran®), C225 (IMC-225, EGFR inibidor, Anti-EGFrMAb, Erbitux® (Cetuximab), C242-DM1 (huC242-DM1), Cabergolina (Dosti-nex®), Capecitabina (Xeloda®, Doxifluridine®, 5-FU oral), Carbendazin® (FB-642), Carboplatina (Paraplatin®, CBDCA), Carboxiamidotriazol (NSC 609974,CAI, L-651582), Carmustine (DTI-015, BCNU, BiCNU, Gliadel Wafer®), tera-pia de gene CC49-zeta, CEA-cide®) (Labetuzumab®, Anticorpo monoclonalanti-CEA, hMN-14), CeaVac® (MAb 3H1), Celecoxib (Celebrex®), CEP-701(KT-5555), Cereport® (Lobradimil®, RMP-7), Clorambucil (Leukeran®), CHML(Lipídeos Moleculares Heterogêneos Citotrópicos), Colecaliferol, CI-1033(Pan-erbB RTK inibidor), Cilengitide (EMD-121974, antagonista integrinaalfavbeta3), Cisplatina (Platinol®, CDDP), gel de Cisplatina-epinefrina (Intra-Dose®, FocaCist®), Cisplatina-lipossômica (SPI-077), ácido 9-cis retinóico (9-cRA), Cladribine (2-CdA, Leustatin®), Clofarabine (cloro-flúor-araA), Cloridre-to de clonadina (Duraclon®), CMB-401 (Anti-PEM MAb/caliqueamicina),CMT-3 (COL-3, Metastat®), Cordicepin1 Cotara® (chTNT-1/Β, [1311] -chTNT-1/B), CN-706, CP-358774 (Tarceva®, OSI-774, inibidor EGFR), CP- 609754,CP IL-4-toxina (toxina de fusão de IL-4), CS-682, CT-2584 (Apra®, CT- 2583,CT-2586, CT-3536), CTP-37 (Avicine®, vacina hCG bloqueadora), Ciclofos-famida (Cytoxan®, Neosar®, CTX), Citarabina (Cytosar-U®, ara-C, arabinosí-deo citosina, DepoCyt®, D-limoneno, DAB389-EGF (toxina de fusão EGF),Dacarbazine (DTIC), Daclizumab® (Zenapax®), Dactinomicina (Cosmegen®),Daunomicina (Daunorubicin®, Cerubidine®, Daunorubicina (DaunoXome®,Daunorubicin®, Cerubidine®), DeaVac® (vacina CEA antiidiotipo), Deeitabine(5-aza-2'-deoxiitidina), Deelopramida (0xi-104), Denileukin diftitox (Ontak®),Depsipeptídeo (FR901228, FK228), Dexametasona (Decadron®), Dexrazo-xane (Zinecard®), Dietilnorspermine (DENSPM), Dietilestilbestrol (DES), Dii-dro-5-azacitidina, Docetaxel (Taxotere®, Taxane®), Mesilato de dolasetron(Anzemet®), Dolastatin-10 (DOLA-10, NSC- 376128), Doxorubicina (Adri-amycin®, Doxil®, Rubex®), DPPE, DX-8951f (DX- 8951), Edatrexato, VacinaEGF-P64k, EIIiott1S B Solution®, EMD-121974, Endostatin, Eniluracil(776e85), E09 (E01, E04, E068, E070, E072), Epirubicin (Ellence®, EPI1.4'epi-doxorubicina), Epratuzumab® (Lymphocide®, anti-CD22 humanizado,HAT), Eritropoietina (EPO®, Epogen®, Procrit®), Estramustine (Emcyt®), Eta-nidazol (Radinyl®), Fosfato de etoposídeo (Etopophos®), Etoposídeo (VP-16,Vepesid®), Exemestane (Aromasin®, Nikidess®), Mesilato de exetecan (DX-8951, DX-8951f), Exisulind (SAAND, Aptosyn®, cGMP-PDE2 e 5 inibidor),F19 (Anticorpo monoclonal anti-FAP, MAb anti-FAP iodado), Fadrozol (Afe-ma®, Cloridreto de fadrozol, Arensin®), Fenretinide® (4HPR), Citrato de fen-tanil (Actiq®), Filgrastim (Neupogen®, G-CSF), FK-317 (FR-157471, FR-70496), Flavopiridol (HMR-1275), Fly3/flk2 Iigante (Mobista®), Fluasterone,Fludarabine (Fludara®, FAMP), Fludeoxiglucose (F-18®), Fluorouracila (5-FU,Adrueil®, Fluoroplex®, Efudex®), Flutamide (Eulexin®), FMdC (KW-2331,MDL-101731), Formestane (Lentaron®), Fotemustine (Nuphoran®, Mustopho-ran®), FUDR (Floxuridine®), Fulvestrant (Faslodex®), G3139 (Genasense®,GentaAnticode®, Bcl-2 anti-sentido), Gadolínio texafirina (Motexafina gadolí-nio, Gd-Tex®, Xcytrin®), Cloridreto de galarubicin (DA-125), GBC-590, Gas-trimmune® (imunogênio antigastrina-17, anti-g17), Gencitabina (Gemto®,Gemzar®), Gentuzumab-ozogamicina (Mylotarg®), GL331, Globo H hexassa-carídeo (Globo H- KLH®), Glufosfamideg (mostarda de β-D-glucosil-isofosfamida, D19575, INN) , Acetato de goserelina (Zoladex®), Granisetron(KytriI®), GVAX (terapia genética GM-CSF), vacina Her-2/Neu, Herceptin®(Trastuzumab®, Anticorpo monoclonal anti-HER-2, Anti-EGFR-2 MAb),HSPPC-96 (vacina contra câncer HSP1 complexo proteína-peptídeo de cho-que térmico gp96), Hu1D10 (anti-HLA-DR MAb, SMART 1D10), HumaLYM(MAb anti-CD20), Hidrocortisona, Hidroxiuréia (Hydrea®), Hypericin® (VI-tRxyn®), 1-131 Lipidiol®, lbritumomab®tiuxetan (Zevalin®), Idarubicina (Idamy-cin®,-DMDR» IDA), Ifosfamida (IFEX®), Mesilato de Imatinib (STI-571, Imati-nib®, Glivec®, Gleevec®, inibidor de Ab1 tirosina quinase ), INGN-101 (terapiade gene p53 /retrovírus), INGN-201 (terapia de gene p53/adenovírus), alfa-Interferon (Alfaferone®, Alpha-IF®), alfa 2a Interferon (Intron A®), gama-Interferon (Gama-interferon, Gamma 100®, Gamma-IF), lnterleucina-2 (Pro-leiukinR®), Intoplicina (RP 60475), Irinotecan (Camptosar®, CPT-11, Topote-cin®, CaptoCPT-1), Irofulven (MGI-114, Ivofulvan, análogo de Acilfulvene),ISIS-2053 (PKC- alfa-anti-sentido), ISIS-2503 (Ras anti-sentido), ISIS-3521(PKC-alfa-anti-sentido), ISIS-5132 (K-ras/raf anti-sentido), Isotretinoína (13-CRA, ácido 13-cis retinóico, Accutane®), Cetoconazol (Nizoral®), KRN-8602(MX, MY-5, NSC-619003, MX-2), L-778123 (Ras inibidores), L-asparaginase(Elspar®, Crastinin®, Asparaginase medac®, Kidrolase®), Leflunomide (SU-101, SU- 0200), Letrozol (Femara®), Leucovorin (Leucovorin®, Welleovorin®),Acetato de Leuprolida (Viadur®, Lupron®, Leuprogel®, Eligard®), Leuvectin®(citofectin+gene IL-2, terapia de gene IL-2), Levamisol (Ergamisol®), Liarozol(Liazal, Liazol, R-75251, R-85246, Ro-85264), Lmb-2 imunotoxina (imunoto-xina recombinante anti-CD25, anti-Tac(Fv)-PE38), Lometrexol (T-64, T-904064), Lomustine (CCNU®, CeeNU®), LY-335979, Lym-1 (131-1 LYM-1),Vacina contra Iinfoma (Genitope), vacina Manan-MUCI, Marimastat® (inibi-dor BB-2516, TA-2516, MMP), MDX-447 (MDX-220, BAB-447, EMD-82633,H-447, anti-EGFr/FcGammaR1r), Mecloretamina (Nitrogen Mustard, HN2,Mustargen®), Acetato de megestrol (Megace®, Pallace®), Melfalan (L-PAM,Alkeran®, Mostarda de fenilalanina), Mercaptopurina (6-mercaptopurina, 6-MP), Mesna (Mesnex®), Methotrexate® (MTX, Mexate®, Folex®), Metoxsalen(Uvadex®), 2-Metoxiestradiol (2-ME, 2-ME2), Metilprednisolona (Solume-drol®), Metiltestosterona (Android-10®, Testred®, Virilon®), MGV, MitomicinaC (Mitomycin®, Mutamycin®, Mito Extra®), Mitoxantrone (Novantrone®,DHAD), Mitumomab® (BEC-2, EMD-60205), Isetionato de Mivobulina (Cl-980), MN-14 (Imunoradioterapia anti-CEA, 131 l-MN-14, 188Re-MN-14), Mo-texafina Lutécio (Lutrin®, Optrin®, Lu-Tex®, lutécio texafirina, Lucyn®, An-trin®), MPV-2213ad (Finrozole®), MS-209, vacina Muc-1, NaPro Paclitaxel,Nelarabine (Composto 506, U78), Neovastat® (AE-941, inibidor MMP), com-postos Neugene compounds (Oncomyc-NG, Resten- NG, myc anti-sentido),Nilutamida (Nilandron®), NovoMAb-G2 scFv (NovoMAb-G2 IgM), 06-benzilguanina (BG, Procept®), Acetato de octreotida (Sandostatin LAR® De-pot), Odansetron (Zofran®), Onconase (Ranpirnase®), OncoVAX-CL, Onco-VAX-CL Jenner (vacina GA-733-2), OncoVAX-P (OncoVAX-PrPSA), Onyx-015 (terapia de gene p53), Oprelvekin (Neumage®), Orzel (Tegafur+Uracil+Leucovorin), Oxaliplatin (Eloxatine®, Eloxatin®), Pacis® (BCG, live), Paclitaxel(Paxene®, Taxol®), PacIitaxeI-DHA (Taxoprexin®), Pamidronato (Aredia®), PCSPES, Pegademase (Adagen®, Pegademase bovina), Pegaspargase® (On-cospar®), Peldesine (BCX-34, PNP inibidor), Pemetrexed dissódio (Alimta®,MTA, antifolato multialvejado, LY 231514), Pentostatin (Nipent®, 2-desoxicoformicina), Perfosfamida (4-hidroperoxiciclofosfamida, 4-HC), Álcoolperílico (álcool de perila, álcool perílico, perilol, NSC-641066), Fenilbutirato,Pirarubicin (THP), Pivaloiloximetila butirato (AN-9, Pivanex®), Sódio porfíme-ro (Photofrin®), Prednisona, Prinomastat® (AG-3340, inibidor MMP), Procar-bazina (Matulane®), PROSTVAC, Vacina contra Câncer de Mama do CentroMédico de Portland Providence, PS-341 (LDP- 341, inibidor de proteassoma26S), PSMA MAb (Anticorpo monoclonal contra Antígeno de Membrana Es-pecífico para Próstata), Pirazoloacridina (NSC-366140, PD-115934), Quini-na, R115777 (Zarnestra®), Cloridreto de raloxifeno (Evista®, Cloridreto deceoxifeno), Raltitrexed (Tomudex®, ZD-1694), Rebecamicina, Ácido retinói-co, R-flurbiprofen (Flurizan, E-7869, MPC-7869), RFS-2000 (9- nitrocampto-tecan, 9-NC, rubitecan®), Rituximab® (Rituxan®, MAb anti-CD20) , RSR-13(GSJ-61), Satraplatin (BMS-182751, JM-216), SCH-6636, SCH-66336, Sizo-filan® (SPG1 Sizofiran®, Schizophyllan®, Sonifilan®), SKI-2053R (NSC-D644591), Sobuzoxano (MST-16, Perazolin®), Squalamina (MSI-1256F), SR-49059 (inibidor de receptor de vasopressina, V1a), Estreptozocina (Zano-sar®), SU5416 (Semaxanib®, inibidor VEGF), SU6668 (PDGF-TK inibidor), T-67 (T- 138067, T-607), Talco (Sclerosòl®), Tamoxifen (Nolvadex®), Taurolidi-na (Taurolin®), Temozolamida (Temodar®, NSC 362856), Teniposídeo (VM-26, Vumon®), TER-286, Testosterona (Andro®, Androderm®, TestodermTTS®, Testoderm®, DepoTestosterone®, Androgel®, depoAndro®), Tf-CRM107 (Transferrina-CRM-107), Talidomida, Theratope1 Tioguanina (6-tioguanina, 6-TG), Thiotepa (trietilenotiofosfaoramida, Thioplex®), alfa-Timosina I (Zadaxin®, Thymalfasin®), Tiazofurina (Tiazole®), Tirapazamina(SR- 259075, SR-4233, Tirazone®, Win-59075), TNP-470 (AGM-1470, Fu-magillin), Tocladesine (8-C1-cAMP), Topotecan (Hycamtin®, SK&F-104864,NSC- 609699, Evotopin®), Toremifene (Estrirnex®, Fareston®), Tositumo-mab® (Bexxar®), Tretinoína (Retin-A®, Atragen®, ATRA, Vesanoid®), TriAb®(estimulador imune de anticorpo antiidiotipo), Trilostane (Modrefen®), Pamo-ato de triptorelina (Trelstar Depot®, Decapeptyl®), Trimetrexato (Neutrexin®),Troxacitabina (BCH-204, BCH-4556, Troxatyl®), TS-1, UCN-01 (7-hidroxistaurosporina), Valrubicina (Valstar®), Valspodar (PSC 833), Vapreoti-de® (BMY-41606), Vaxid (vacina de DNA de Iinfoma de células B), Vinblasti-na (Velban®, VLB), Vincristina (Oneovin®, Onco TCS®, VCR, Leurocristine®),Vindesina (Eldisine®, Fildesin®), Vinflunina (Javlor®, inibidor de polimerizaçãóde tubulina), Vinorelbina (Navelbine®), Vitaxin® (LM-609, antagonista MAbintegrina alfavbeta3), WF10 (regulador de macrófagos), WHI- P131, VacinaWT1, XR-5000 (DACA)1 XR-9576 (XR-9351, P-glicoproteína/MDR inibidor),ZD-9331, ZD-1839 (IRESSA®), e Zoledronato (Zometa®).

Parceiros de combinação preferenciais incluem Erbitux^ (Cetu-ximab), Avastin® (Bevacizumab), Nexavar® (tosilato de sorafenib), Sutent®(malato de sunitinib), Tarceva® (erlotinib), RAD001 (everolimus), Docetaxel(Taxotere®), Cisplatina, Capecitabina (Xeloda®, Doxifluridine®, 5-FU oral).

Em uma modalidade, a presente invenção proporciona composi-ção farmacêutica compreendendo um Anticorpo da Invenção, em particular,AIN457, como ingredientes ativos e no mínimo um agente anticancerígenoda TABELA 1, na qual os ingredientes ativos estão presentes em cada casoem forma livre ou sob a forma de um sal farmaceuticamente aceitável e op-cionalmente no mínimo um veículo farmaceuticamente aceitável; para usosimultâneo, separado ou seqüencial. 1 Em uma modalidade preferencial, oAnticorpo da Invenção, em particular, AIN457, e o no mínimo um agente an-ticancerígeno adicional da TABELA 1 são compreendidos em uma únicaformulação farmacêutica. A combinação referida, de acordo com a presenteinvenção, é particularmente útil para o tratamento de uma doença proliferati-va, tal como câncer e, em particular, de doenças malignas sólidas ou doen-ças malignas hematológicas.

De acordo com o precedente a presente invenção proporcionaem um aspecto ainda adicional:

Um método conforme definido acima compreendendo co-administração, por exemplo, concomitantemente ou em seqüência, de umaquantidade terapeuticamente eficaz de uma molécula de ligação de IL-17,por exemplo, um Anticorpo da Invenção, e no mínimo uma segunda subs-tância de fármaco, a referida segunda substância de fármaco sendo um fár-maco imunossupressor/imunomoduiador, quimioterápico antiinflamatório ouantiinfecicoso, por exemplo, conforme indicado acima.

Ou, uma combinação terapêutica, por exemplo, um kit, consis-tindo em uma quantidade terapeuticamente eficaz de a) uma molécula deligação de IL-17, por exemplo, um Anticorpo da Invenção, e b) no mínimouma segunda substância selecionada entre um fármaco imunossupres-sor/imunomoduiador, quimioterápico antiinflamatório ou antiinfecicoso, porexemplo, conforme indicado acima. O kit pode compreender instruções parasua administração.Onde os Anticorpos da Invenção são administrados em combi-nação com outra terapia imunossuppressora/imunomoduladora, quimioterá-pica antiinflamatória ou anti-infecciosa, as dosagens do composto da combi-nação co-administrado logicamente variarão dependendo do tipo de co-fármaco empregado, por exemplo, onde é um DMARD, anti-TNF, IL-1 blo-queador ou outros, do fármaco específico empregado, da condição sendotratada e assim por diante.

As composições farmacêuticas da invenção podem ser fabrica-das na maneira convencional. Uma composição de acordo com a invenção épreferencialmente proporcionada em forma liofilizada. Para administraçãoimediata é dissolvida em um veículo aquoso adequado, por exemplo águaestéril para injeção ou salina fisiológica tamponada estéril. É consideradodesejável compor uma solução de maior volume para administração por in-fusão ao invés de como uma injeção de bolo, é vantajoso incorporar albumi-na sérica humana ou o sangue heparinizado do próprio paciente na salina naocasião da formulação. Alternativamente, a formulação é administrada porvia subcutânea. A presença de um excesso de semelhante proteína fisiologi-camente inerte previne perda de anticorpo por adsorção sobre as paredesdo recipiente e tubagem usados com a solução para infusão. Se for usadaalbumina, uma concentração adequada é de 0,5 a 4,5% em peso da soluçãode salina. Outras formulações compreendem formulação líquida ou liofilizada.

A invenção é adicionalmente descrita a título de ilustração nosseguintes Exemplos.

EXEMPLOS

Exemplo 1

O anticorpo AIN457 é gerado e demonstrado que liga com afini-dade muito elevada a IL-17 humano recombinante (huiL-17); a KD é de0,188 ± 0,036 nM (BIAcore) e neutraliza a produção de IL-6 humano induzi-da por hulL-17 em fibroblasto dermal humano; IC50 é de 2,1 ±0,1 nM emuma concentração de 1,87 nM de hulL-17 conforme descrito no pedido depatente PCT PCT/EP2005/008470.Exemplo 2:

Tabela 2: Seqüência de nucleotídeos e aminoácidos da cadeia leve

A seqüência de aminoácidos codificando para o domínio variávelestá em negrito e sublinhada. Os iniciadores de oligonucleotídeos usadospara clonagem são indicados (sublinhados).

MV417 ACCATGGAAACCCCAGCGGAGCTTCTCTTCCTCCTGCTACTCTGGCTCCCAGATACCACC

1---------+---------+---------+---------+ _--------+---------+ 60

TGGTACCTTTGGGGTCGCCTCGAAGAGAAGGAGGACGATGAGACCGAGGGTCTATGGTGG

TMETPAELLFLLLLWLPDTT-

MV419 GGAGAAATTGTGTTGACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAAGAGCC

61 --------- +---------+---------+---------+---------+---------+ 120

CCTCTTTAACACAACTGCGTCAGAGGTCCGTGGGACAGAAACAGAGGTCCCCTTTCTCGG

G EIVLTOSPGTLSLSPGERA -

ACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAGCAG

121---------+---------+---------+---------+---;------+---------+ 180

TGGGAGAGGACGTCCCGGTCAGTCTCACAATCGTCGTCGATGAATCGGACCATGGTCGTC

TLSCRASQSVSSSYLAWYOQ -

AAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGGTGCATCCAGCAGGGCCACTGGCATC

181---------+---------+---------+---------+---------+---------+240

TTTGGACCGGTCCGAGGGTCCGAGGAGTAGATACCACGTAGGTCGTCCCGGTGACCGTAG

KPGOAPRLLIYGASSRATGI -

CCAGACAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTG

241 ---------+ ---------+ ---------+---------+---------+---------+ 300

GGTCTGTCCAAGTCACCGTCACCCAGACCCTGTCTGAAGTGAGAGTGGTAGTCGTCTGACPDRFSGSGSGTDFTXjTXSRXi -

GAGCCTGAAGATTTTGCAGTGTATTACTGTCAGCAGTATGGTAGCTCACCGTGCACCTTC

301 ---------+---------+---------+ ---------+---------+---------+ 360

CTCGGACTTCTAAAACGTCACATAATGACAGTCGTCATACCATCGAGTGGAGCGTGGAAG

EPEDFAVYYCQQYGSSPCTF -

GGCCAAGGGACACGACTGGAGATTAAACGAACTGTGGCTGCACCATCTGTCTTCATCTTC

361 ---------+---------+ :---------+---------+ -------— +---------+ 420

CCGGTTCCCTGTGCTGACCTCTAATTTGCTTGACACCGACGTGGTAGACAGAAGTAGAAG

GOGT RLEIKR TVAAPSVFIF -

CCGCCATCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAAC

421---------+---------+-------_- + --__-----+--------_ +---------+ 480

GGCGGTAGACTACTCGTCAACTTTAGACCTTGACGGAGACAACACACGGACGACTTATTG

PPSDEQLKSGTASVVCLLNN -

TTCTATCCCAGAGAGGCCAAAGTACAGTGGAAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAAC

481 ---------+ ---------+---------+---------+--------- +---------+ 540

AAGATAGGGTCTCTCCGGTTTCATGTCACCTTCCACCTATTGCGGGAGGTTAGCCCATTG

FYPREAKVQWKVDNALQSGN -

TCCCAGGAGAGTGTCACAGAGCAGGACAGCAAGGACAGCACCTACAGCCTCAGCAGCACC

541---------+---------+---------+---------+---------+---------+ 600

AGGGTCCTCTCACAGTGTCTCGTCCTGTCGTTCCTGTCGTGGATGTCGGAGTCGTCGTGGSQESVTEQDSKDSTYSLSST -CTGACGCTGAGCAAAGCAGACTACGAGAAACACAAAGTCTACGCCTGCGAAGTCACCCAT

601 ---------+---------+---------+---------+---------+---------+ 660

GACTGCGACTCGTTTCGTCTGATGCTCTTTGTGTTTCAGATGCGGACGCTTCAGTGGGTA

LTLSKADYEKHKVYACEVTH -

CAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAACAGGGGAGAGTGTTAG

661---------+---------+---------+---------+---------+ - 711

#223 GTCCCGGACTCGAGCGGGCAGTGTTTCTCGAAGTTGTCCCCTCTCACAATC

QGLSSPVTKSFNRGEC* -

Tabela 3: Seqüência de nucleotídeos e aminoácidos da cadeia pesada

A seqüência de amináacidos codificando para o domínio variávelestá em negrito e sublinhada. São indicados os iniciadores de oligonucleotí-deis usados para clonagem e seqüenciamento.

MV416 ACCATGGAATTGGGGCTGAGCTGGGTTTTCCTTGTTGCTATTTTAGAAGGTGTCCACTGT

χ---------+---------+ _---------+---------+--------__ +---------+ 60

TGGTACCTTAACCCCGACTCGACCCAAAAGGAACAACGATAAAATCTTCCACAGGTGACA

TMELGLSWVFLVAILEGVHC

MV418 GAGGTGCAGTTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCCAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTC

61---------+---------+---------+ _____----+ _-----—+---------+120

CTCCACGTCAACCACCTCAGACCCCCTCCGAACCAGGTCGGACCCCCCAGGGACTCTGAG

EVQLVESGGGLVOPGGSLRIi -

TCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGTAACTATTGGATGAACTGGGTCCGCCAGGCT

121---------+ —-------+---------+---------+---------+---------+ 180

AGGACACGTCGGAGACCTAAGTGGAAATCATTGATAACCTACTTGACCCAGGCGGTCCGA

SCAASGFTFSNYWMNWVROA -CCAGGGAAAGGGCTGGAGTGGGTGGCCGCCATAAACCAAGATGGAAGTGAGAAATACTAT

181---------+---------+---------+---------+---------+---------+ 240

GGTCCCTTTCCCGACCTCACCCACCGGCGGTATTTGGTTCTACCTTCACTCTTTATGATA

PGKGL EW VAAINQDGSEKYY -

GTGGGCTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAACGCCAAGAACTCACTGTAT

241---------+---------+---------+----------+------:---+---------+ 300

CACCCGAGACACTTCCCGGCTAAGTGGTAGAGGTCTCTGTTGCGGTTCTTGAGTGACATA

VGSVKGRFTISRDNAKNSLY -

MV432 CTGCAAATGAACAGCCTGAGAGTCGAGGACACGGCTGTGTATTACTGTGTGAGGGACTAT

301 ---------+---------+---------+---------+---------+ —.-------+ 360

GACGTTTACTTGTCGGACTCTCAGCTCCTGTGCCGACACATAATGACACACTCCCTGATA

IiQMNSLRVEDTAVYYCVRDY -

TACGATATTTTGACCGATTATTACATCCACTATTGGTACTTCGATCTCTGGGGCCGTGGC

361 ---------+---------+---------+---------+ --------- + —-------+ 420

ATGCTATAAAACTGGCTAATAATGTAGGTGATAACCATGAAGCTAGAGACCCCGGCACCG

YDILTDYYIHYWYFDLWGRG -MV433 ACCCTGGTCACTGTCTCCTCAGCCTCCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCC

421 ---------+---------+---------+---------+---------+---------+ 480

MV43 4 TGGGACCAGTGACAGAGGAGTCGGAGGTGGTTCCCGGGTAGCCAGAAGGGGGACCGTGGG

ThVTVSS ASTKGPSVFPLAP

TCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTC

481 ---------+---------+---------+---------+---------+---------+ 540

AGGAGGTTCTCGTGGAGACCCCCGTGTCGCCGGGACCCGACGGACCAGTTCCTGATGAAGSSKSTSGGTAALGCLVKDYF -

CCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTC

541 ---------+---------+---------+---------+---------+---------+ 600

GGGCTTGGCCACTGCCACAGCACCTTGAGTCCGCGGGACTGGTCGCCGCACGTGTGGAAG

PEPVTVSWNSGALTSGVHTF -

CCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCC

601 ---------+---------+---------+---------+---------+---------+ 660

GGCCGACAGGATGTCAGGAGTCCTGAGATGAGGGAGTCGTCGCACCACTGGCACGGGAGG

PAVLQSSGLYSLSSVVTVPS -

AGCAGCTTGGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAG

661 -------- +---------+ --------- +----___-_ +---------+---------+ 720

MV435 TCGTCGAACCCGTGGGTCTGGATGTAGACGTTGCACTTAGTGTTCGGGTCGTTGTGGTTÇ

S S LGTQTY I CNVNHKP SNTK -

GTGGACAAGAGAGTTGAGCCCAAATCTTGTGACAAAACTCACACATGCCCACCGTGCCCA

721 :---------+---------+---------+ ---------+---------+---------+ 780

#265 CACCTGTTCTCTCAACTCGGGTTTAGAACACTGTTTTGAGTGTGTACGGGTGGCACGGGT

VDKRVEPKSCDKTHTCPPCP -

TAA781 --- 783ATTTabela 4: (Seqüências de aminoácidos das alças de CDR):

<table>table see original document page 38</column></row><table>

Exemplo 3

Teste de proliferação celular (MTS ou incorporação de[3HJtimidina): a proliferação celular é monitorada com, por exemplo, o testede proliferação celular CeIITiter 96 AQueous One Solution Cell ProliferationAssay (Promega, Reino Unido). Em experimentos preliminares culturas delinhagens celulares diferentes, por exemplo, são estabelecidas 5 linhagenscelulares diferentes (1x105 células/mL em frascos de cultura de tecido) napresença ou ausência de AIN457. a proliferação é avaliada sobre alíquotastomadas diariamente dos dias 1 a 4 de modo a estabelecer o momento maisrepresentativo. Experimentos em replicata são depois disso determinadoslaminando as células diretamente em lâminas de 96 cavidades e corandocom MTS. Um mínimo de 95% de viabilidade conforme avaliado por colora-ção azul Trypan blue é necessária para o início de qualquer experimento.

Para cada linhagem celular 50 μΙ de uma suspensão celular em um meio decultura adequado são semeadas a 1x105 células/mL dentro de cavidades defundo liso (1x104 células/cavidade), às quais são adicionados 50 μΙ de meiode cultura ou uma 2x molécula de ligação de IL-17, por exemplo, AIN457,em um meio de cultura adequado. Todas as amostras são laminadas emquadruplicata. A lâmina é incubada em uma atmosfera umidificada, de 5%de C02. No dia 3, 20 μΙ de reagente MTS são adicionados a cada cavidade,e a lâmina é reincubada por um adicional de 3 a 4 horas para desenvolvi-mento de coloração. Ao final deste período, as lâminas são gentilmente agi-tadas e a absorvência a 490 nm é registrada em uma leitora de microlâminasautomática (MRX, Dynatech, Billingshurst, Reino Unido). A média de valoresem branco (sem células, nenhuma molécula de ligação de IL-17, por exem-plo, AIN457) e subtraída dos valores da amostra, e estes valores A490 corri-gidos são calculados como percentagens das culturas controle crescendo naausência de molécula de ligação de IL-17, por exemplo, AIN457. Barras deerro indicam a faixa definida em experimentos em duplicata, e diferençassignificativas consideradas como aquelas as quais estão fora da região desobreposição nas faixas das médias.

Exemplo 4: Modelo de Xenoenxerto

Atividade sobre modelos de xenoenxerto (tumores humanos im-plantados em camundongos SCID): tumores são estabelecidos em camun-dongos SCID por injeção subcutânea de uma suspensão de células tumoraishumanas derivada de culturas de células tumorais humanas dentro do fiandodo animal. O tratamento é iniciado uma vez que os tumores tenham atingidoum certo tamanho (por exemplo, 150 mm3), ou depois de um certo tempopós-inoculação celular, (por exemplo, dia 4 a 7). A molécula de ligação de IL-17, por exemplo, AIN457 a ser testada é administrada i.p. ou i.v. uma vez aodia (ou uma vez a cada 2 a 4 dias). A atividade antitumoral é expressadacomo T/C% (aumento médio nos volumes tumorais de animais tratados divi-dido pelo aumento médio dos volumes tumorais de animais controle multipli-cado por 100) e % de regressões (volume tumoral menos volume tumoralinicial dividido pelo volume tumoral inicial e multiplicado por 100).

Exemplo 5: Avaliação do efeito de IL-17 sobre a liberação de citocina porcélulas tumoraisLinhagens de células tumorais ou células tumorais recém-explantadas (1 x10*5/1711) são cultivadas em meio RPMI 1640 contendo 10%de FCS, 2 mM de L-glutamina, 100 lU/ml de penicilina, e 100 ug/ml de es-treptomicina com ou sem IL-17 (faixa de 0,1 ng/ml a 1 ug/ml) ou IL-17 maisum excesso de 10 a 100 vezes de AIN457 por 48 ou 72 h. Os sobrenadanteslivres de células podem ser coletados e testados imediatamente ou armaze-nados a -70°C por vários dias ou mesmo meses. As concentrações de mui-tas citocinas diferentes, tais como, por exemplo, IL-6, IL-8, CXCL1, CXCL5(mas não limitadas a estas) são medidas usando kits ELISA disponíveis co-mercialmente tais como os da R&D Systems. A concentração de PG E2 podeser avaliada também, usando fontes comerciais tais como o teste da Cay-man Chemicals. A concentração das citocinas medidas deve ser significati-vamente menor quando as células tumorais são cultivadas na presença deuma molécula de ligação de IL17, por exemplo, AIN457.

Exemplo 6: Modelo de Carcinogênese

Camundongos são tratados com 9,10-dimetil-1,2-benzantraceno(DMBA; Sigma) em 200 ml de acetona a 100 mg por camundongo uma vezna idade de 2 a 3 meses, em seguida tratados duas vezes por semana como promotor tumoral acetato de 12-O-tetradecanoil-forbol (TPA; Fisher) em200 ml de acetona, 30 ug por camundongo por até 1 ano. Os tumores obser-vados surgem como papilomas (ceratoacantomas), mas podem progredirpara carcinomas e metastatizar através de drenagem de linfa. Contagens depapilomas são conduzidas rotineiramente por exame visual e pode ser avali-ada estatisticamente. O papel de 11-17 é avaliado por administração de A-IN457, por exemplo, 1 mg por camundongo semanalmente, diariamente ou acada 2o ou 3o" dia. Camundongos tratados com uma moléculade ligação deIL17, por exemplo, AIN457, devem apresentar uma incidência significativa-mente menor de papiloma e progressão mais lenta para carcinomas e me-tástase.

Exemplo 7

Prova Clínica: um estudo de determinação de dose, fase 1, de AIN457 ad-ministrado uma vez a cada três semanas a pacientes adultos com tumoressólidos avançados.

Objetivos:

Primário:

Caracterizar o perfil de segurança, incluindo tanto toxicidadesagudas quanto cumulativas, e determinar a dose máxima tolerada de agenteúnico AIN457 administrado por infusão intravenosa uma vez a cada três se-manas a pacientes adultos com tumores sólidos avançados em que falhou aterapia sistêmica padrão ou para os quais não existe terapia sistêmica padrão.

Secundários:

1. Caracterizar a farmacocinética de agente único AIN457 administradopor infusão intravenosa uma vez a cada três semanas a esta popula-ção de pacientes; os dados obtidas são usados em combinação comdados farmacodinâmicos para fazer correlações farmacocinéti-cas/farmacodinámicas (PK/PD) que ajudam a prognosticar a segurança e a eficácia.

2. Obter evidência preliminar de atividade antitumoral de AIN457 adminis-trada por infusão intravenosa uma vez a cada três semanas a esta po-pulação de pacientes.

3. Correlacionar níveis de fármaco intratumoral entre pacientes adultoscom tumores sólidos avançados recebendo AIN457 por infusão intra-venosa uma vez a cada três semanas àqueles associados com eficáciaem modelos pré-clinicos.

4. Juntar informações sobre tumores a partir de amostras de biópsia tu-moral onde disponível e acessível pré- e pós-terapia de modo a identi-ficar fatores biológicos que se correlacionam com eficácia e resposta.

Design:

Este é um estudo aberto, de aumento progressivo da dose paraavaliar a segurança, farmacocinética, e farmacodinâmica de AIN457 admi-nistrada por infusão intravenosa uma vez a cada três semanas a pacientesadultos com tumores sólidos avançados que tenham falhado na standardterapia sistêmica padrão ou para os quais não existe terapia sistêmica pa-drão.

O período de tratamento consiste em até seis ciclos de 21 dias.Pacientes experimentando toxicidade inaceitável ou progressão da doençasão descontinuados prematuramente. Pacientes atingindo uma respostacompleta ou parcial, ou pacientes com doença estável ao fim de seis cicloscontinuam tratamento adicional de acordo com um protocolo de extensão acritério do pesquisador e depois de aprovação pelo patrocinador. Pacientesapropriados recebem ciclos adicionais até serem observadas progressão dadoença ou toxicidade inaceitável.

Na ausência de toxicidade Iimitante de dose (DLT), o aumentoprogressivo da dose prossegue como se segue:

1. Primeiro aumento progressivo da dose: 100% de aumento da dose (amenos que seja identificada toxicidade grau 2 na primeira coorte, emcujo caso o aumento progressivo da dose é de 25% a 67%).

2. Aumentos progressivos da dose depois de 100% de aumento da doseda primeira à segunda coorte: aumentos de 67% da dose até ser identi-ficada toxicidade grau 2.

3. Aumentos progressivos da dose final depois de identificação de toxici-dade grau 2: aumentos de 25% a 67% da dose, com base em consen-so atingido entre os pesquisadores e o patrocinador.

O aumento progressivo da dose se baseia nas toxicidades doprimeiro ciclo para cada coorte de pacientes. A dose máxima tolerada (MTD)provisória é definida como o nível de dose imediatamente abaixo daquele noqual a toxicidade Iimitante de dose é observada em no mínimo dois de 3 a 6pacientes. A coorte definida como a dose máxima tolerada provisória emseguida registra pacientes adicionais até um total de 12 para confirmar adose máxima tolerada através de avaliação adicional dos perfis de seguran-ça, farmacocinética, e farmacodinâmica de AIN457.

Não será permitido aumento progressivo da dose intrapaciente.

Todas as toxicidades são definidas de acordo com os Critériosde Toxicidade Comum do Instituto Nacional do Câncer dos Estados Unidosrevisados. As toxicidades Iimitante de doses são definidas no protocolo; emgeral, no entanto, a natureza de uma toxicidade Iimitante de dose é tal que éconsiderada inaceitável mesmo no caso de um tumor sólido incurável.

Pacientes

Critérios de Inclusão

Os seguintes critérios devem ser satisfeitos para inclusão noestudo:

1. Pacientes do sexo masculino ou feminino >18 anos de idade.

2. Tumor sólido avançado documentado histologicamente, que tenhamfracassado na terapia sistêmica padrão e até 1 terapia sistêmica adi-cional, ou para os quais não existe terapia sistêmica padrão.

3. No mínimo um sítio de doença mensurável, avaliável, ou não avaliávelconforme definido pelos Critérios de Resposta de Tumor Sólido doGrupo de Oncologia do Sudoeste incluindo valor de marcador tumoralque é acima do limite superior institucional do normal.

4. Mulheres com potencial para engravidar devem ter um teste negativode gravidez β-HCG sérica antes do início do fármaco do estudo. Paci-entes do sexo masculino ou feminino com potencial de reprodução de-vem concordar em empregar um método eficaz de controle do nasci-mento do início ao fim do estudo e por até 3 meses depois da descon-tinuação do fármaco do estudo.

5. Score de Status de Desempenho da Organização Mundial de Saúde(WHO) de <2.

6. Expectativa de vida de no mínimo 3 meses.

7. Consentimento informado por escrito é obtido antes de quaisquer pro-cedimentos de triagem.

Critérios de Exclusão

É necessária exclusão do estudo caso se aplique qualquer umdos seguintes:

1. Pacientes do sexo feminino que estão grávidas ou amamentando. Mu-lheres na pós-menopausa devem estar amenorréicos por no mínimo 12meses para serem consideradas sem potencial para engravidar.

2. Paciente tem uma doença médica grave e/ou descontrolada (isto é,diabetes descontrolada, falência cardíaca congestiva, enfarte do mio-cárdio dentro de 6 meses de estudo, doença renal crônica, ou infecçãodescontrolada ativa).

3. Paciente tem uma metástase cerebral conhecida.

4. Paciente tem uma doença hepática crônica aguda ou conhecida (isto é,hepatite ativa crônica, cirrose).

5. Paciente tem um diagnóstico conhecido de infecção pelo vírus da imu-nodeficiência humana (HIV).

6. Paciente recebeu qualquer agente experimental dentro de 30 dias an-tes do registro no estudo.

7. Paciente recebeu quimioterapia dentro de 4 semanas (6 semanas paranitrossouréias ou mitomicina C) antes do registro no estudo.

8. Paciente recebeu terapia de radiação anterior dentro de 4 semanasantes do registro no estudo.

9. Paciente recebeu previamente radioterapia para > 25% da medula ós-sea.

10. Paciente teve uma cirurgia importante dentro de 2 semanas antes doregistro no estudo.

11. Paciente tem um histórico de não-aceitação dos regimes médicos.

12. Paciente tem deterioração da função hepática, renal ou hematológicaconforme definido pelos seguintes parâmetros laboratoriais:

Contagem de plaquetas < 100 χ 109/L

Contagem de neutrófilos absoluta (ANC) < 1,5 χ 109/L

ALT sérica (SGPT) ou AST (SGOT) > 2,5 χ limite superior institucional donormal (IULN) (> 5 χ IULN para pacientes com metástases hepáticas)

Bilirrubina total sérica > 1,5 χ IULN

Creatinina sérica > 1,5 χ IULN

13. Paciente tem < 5 anos livre de outra malignidade primária; no entanto,são excluídos câncer de pele não-melanomatoso e carcinoma cervicalin situ somente se o paciente tiver doença ativa.

Tamanho da Amostra: Este estudo requer cerca de 40 pacientes.

Tratamentos: AIN457 é fornecido dentro de frascos de vidroindividuais de 6 ml, cada um contendo 50 mg de AIN457 como torta Iiofiliza-da. Reconstituição com 1,2 mL de WFI produzirá um Concentrado para So-lução para Infusão transparente a opalescente, incolor, em uma concentra-ção de 47 mg/mL do qual no mínimo 1 mL pode ser removido do frasco comuma agulha calibre padrão 20 com seringa fixada. A substância é formuladaem tampão isotônico (pH 5,8 ± 0,5) contendo histidina, sacarose, e Polissor-bato 80 e deve ser diluída em bolsas de infusão de 250 mL contendo solu-ção de glicose a 5 % antes da administração aos pacientes.

O nível da dose de partida é de 0,3 mg/m2. Esta dose é calcula-da como um terço da baixa dose tóxica (TDL) na espécie mais sensível es-tudada a qual, para AIN457, é o cão. Como não há modalidades na menordas 2 doses administradas a cães no estudo de toxicologia GLP- 0,1 mg/kg,repetido uma vez 3 semanas depois -- a TDL é estimada dentro da faixa de0,05 mg/kg. Usando um fator de 20 para converter mg/kg no cão para mg/m2em seres humanos, esta dose de partida é calculada como:

1/3 χ 0,05 mg/kg χ 20 kg/m2 = 0,3 mg/m2

O aumento progressivo da dose prossegue de acordo com oesquema resumido acima.

O estudo define atrasos do tratamento, reduções de dose, ouretirada de tratamento para indivíduos experimentando toxicidades hemato-lógicas ou outras que se sabe que resultam de AIN457. O tratamento conti-nua até um máximo de 6 ciclos a menos que o paciente experimente pro-gressão da doença ou toxicidade inaceitável. Ao fim de 6 ciclos, pacientesque tenham obtido uma resposta completa ou parcial e pacientes que te-nham tido doença estável podem continuar tratamento adicional de acordocom um protocolo de extensão a critério do investigador e depois de aprova-ção pelo patrocinador.

Variáveis de Segurança:

A segurança de AIN457 avaliada por exame físico e avaliaçãode sinais vitais, resultados clínico laboratoriais, eventos adversos, e uso demedicações concomitantes. Os eventos adversos são tanto provocadosquanto espontâneos e são graduados usando os Critérios de ToxicidadeComum do Instituto Nacional do Câncer dos Estados Unidos revisados.

Variáveis de Eficácia:

Embora este estudo fase 1 não seja designado para detectar aeficácia, a atividade é demonstrada como uma função da taxa de respostatumoral objetiva e extensão da sobrevida global e livre de progressão. Avali-ações tumorais basais incluem avaliação ótima de toda doença mensurável,avaliável, e não avaliável. Avaliações incluem exame físico e roentgenogra-ma torácico e, conforme apropriado, tomograma computadorizado do tórax,abdômen e pelve; sonograma do abdômen e pelve; cintigrama ósseo, comroentgenograma ósseo de todas as lesões ósseas conhecidas; e determina-ção de valores de marcadores tumorais. Estudos de seguimento são obtidosa cada dois ciclos e depois de suspensão do tratamento.

O estado objetivo é avaliado clinicamente usando as diretrizesda Novartis, as quais se baseaim nos critérios de resposta SWOG. Todas asrespostas completas e parciais devem ser confirmadas por uma segundaavaliação no mínimo quatro semanas depois. A melhor resposta tumoral écalculada para cada paciente usando os critérios de resposta SWOG.

Farmacocinética:

Os seguintes parâmetros farmacocinéticos são calculados eanalisados para os ciclos 1 e 2: tmax, Cmax, λζ, h/2, AUC, e Ra- Ra= a propor-ção de AUCtcício2/AUCtcícioi é avaliada como um índice de acumulação. Aavalição preliminar da proporcionalidade da dose se baseia na AUC da últi-ma dose entre diferentes grupos de doses. As correlações PK/PD com astoxicidades observadas (por exemplo, hematopoiética) são realizadas comoum prognosticador de segurança.

Farmacodinâmica:

Amostras de biópsia tumoral são obtidas onde viáveis e acessí-veis pré-terapia e depois do primeiro ciclo de terapia de modo a identificarfatores biológicos que se correlacionam com eficácia e reação.

Métodos Estatísticos:

Pacientes com eventos adversos clínicos que surgem com o tra-tamento (especialmente aqueles com toxicidade Iimitante de dose) ou comanormalidades laboratoriais, dos sinais vitais, ou ao exame físico (ocorrendorecentemente ou piora a partir da linha basal) são identificados e os valoressão marcados com bandeiras. O índice de anormalidades é tabelado porcoorte. índices de reações objetivas (incluindo tanto reações completasquanto parciais) são apresentadas por coorte. São usadas estatísticas des-critivas para resumir os parâmetros farmacocinéticos básicos por coorte.

LISTAGEM DE SEQÜÊNCIA

<110> Novartis AG

<120> Anticorpos Antagonistas IL-17<130>

<160> 13

<170> PatentIn version 3.2<210> 1<211> 5<212> PRT

<213> artificial<220>

<223> região CDRl de AIN457<220>

<221> DOMÍNIO<222> (1) .. (5)

<223> CDRl = região hipervariável 1 de cadeia pesada de AIN457<400> 1

Asn Tyr Trp Met Asn

<210> 2

<211> 17

<212> PRT

<213> artificial

<220>

<223> CDR2 de AIN457<220><221> DOMÍNIO<222> (1)..(17)

<223> CDR2 = região hipervariável 2 de cadeia pesada de AIN457

<400> 2

Ala Ile Asn Gln Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Gly Ser Val Lys1 5 10 15

Gly

<210> 3

<211> 18

<212> PRT

<213> artificial<220>

<223> CDR3 de AIN457<220>

<221> DOMÍNIO

<222> (1)..(18)

<223> CDR3 = região hipervariável 3 de cadeia pesada de AIN457

<400> 3

Asp Tyr Tyr Asp Ile Leu Thr Asp Tyr Tyr Ile His Tyr Trp Tyr Phe1 5 10 15

Asp Leu

<210> 4

<211> 12

<212> PRT

<213> artificial

<220>

<223> CDRl1 de AIN457<220>

<221> DOMÍNIO

<222> (1)..(12)<223> CDRl' = região hipervariável 1 de cadeia leve de AIN457<400> 4

Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Ser Tyr Leu Ala1 5 10

<210> 5

<211> 7

<212> PRT

<213> artificial

<220>

<223> CDR2' de AIN457

<220>

<221> DOMÍNIO

<222> (1) . . (7)

<223> CDR2' = região hipervariável 2 de cadeia leve AIN457

<400> 5

Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr1 5

<210> 6

<211> 9

<212> PRT

<213> artificial

<220>

<223> CDR31 de AIN457

<220>

<221> DOMÍNIO

<222> (1)..(9)

<223> CDR3' = região hipervariável 3 de cadeia leve AIN457

<400> 6

Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro Cys Thr

<210> 7

<211> 381<212> DNA<213> Homo sapiens<220>

<221> CDS<222> (1)..(381)

<223> DNA de domínio de cadeia pesada de AIN457<400> 7

gag gtg cag ttg gtg gag tct ggg gga ggc ttg gtc cag cct ggg gggGlu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly1 5 10 15

tcc ctg aga ctc tcc tgt gca gcc tct gga ttc acc ttt agt aac tatSer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr

20 25 30

tgg atg aac tgg gtc cgc cag gct cca ggg aaa ggg ctg gag tgg gtgTrp Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

gcc gcc ata aac caa gat gga agt gag aaa tac tat gtg ggc tct gtgAla Ala Ile Asn Gln Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Gly Ser Val

50 55 60

aag ggc cga ttc acc ate tcc aga gac aac gcc aag aac tca ctg tatLys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr65 70 75 80

ctg caa atg aac age ctg aga gtc gag gac acg gct gtg tat tac tgtLeu Gln Met Asn Ser Leu Arg Val Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

gtg agg gac tat tac gat att ttg acc gat tat tac ate cac tat tggVal Arg Asp Tyr Tyr Asp Ile Leu Thr Asp Tyr Tyr Ile His Tyr Trp

100 105 110

tac ttc gat etc tgg ggc cgt ggc acc ctg gtc act gtc tcc tcaTyr Phe Asp Leu Trp Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser115 120 125

<210> 8<211> 127<212> PRT<213> Homo sapiens<400> 8

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr

20 25 30

Trp Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Ala Ile Asn Gln Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Gly Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Val Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Val Arg Asp Tyr Tyr Asp Ile Leu Thr Asp Tyr Tyr Ile His Tyr Trp

100 105 110

Tyr Phe Asp Leu Trp Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser115 .120 125

<210> 9<211> 327<212> DNA<213> Homo sapiens<220>

<221> CDS<222> (1)..(327)

<223> DNA de parte variável de cadeia leve de AIN457<400> 9

gaa att gtg ttg acg cag tct cca ggc acc ctg tct ttg tct cca gggGlu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro <31y1 5 10 15gaa aga gcc acc ctc tcc tgc agg gcc agt cag agt gtt age age age 96

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Ser

20 25 30

tac tta gcc tgg tac cag cag aaa cct ggc cag gct ccc agg ctc ctc5 Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu35 40 45

ate tat ggt gea tcc age agg gcc act ggc ate cca gac agg ttc agtIle Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser50 55 60

10 ggc agt ggg tet ggg aca gac ttc act ctc acc ate age aga ctg gagGly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu65 70 75 80

cct gaa gat ttt gea gtg tat tac tgt cag cag tat ggt age tca ccgPro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro

15 85 90 95

tgc acc ttc ggc caa ggg aca cga ctg gag att aaa cgaCys Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys Arg100 105

<210> 1020 <211> 109

<212> PRT<213> Homo sapiens<400> 10

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

25 1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Ser

20 25 30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu35 40 45

30 Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser50 55 60

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu

144

192

240

288

32765 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro

85 90 95

Cys Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys Arg100 105

<210> 11<211> 10<212> PRT<213> artificial<220>

<223> CDRl-x de AIN457<220>

<221> DOMÍNIO<222> (1)..(10)

<223> CDRl-x = domínio hipervariável χ de cadeia pesada de AIN457<400> 11

Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Trp Met Asn .1 5 10

<210> 12<211> 11<212> PRT<213> artificial<220>

<223> CDR2-X de AIN457<220>

<221> domínio<222> (1)..(11)

<223> CDR2-X = domínio hipervariável de cadeia pesada χ de AIN457<400> 12

Ala Ile Asn Gln Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr1 5 10

<210> 13<211> 23<212> PRT<213> artificial<220>

<223> CDR3-X de ΑΙΝ457<220>

<221> domínio<222> (1). . (23)

<223> CDR3-X = domínio hipervariável χ de ΑΙΝ457 de cadeia pesada<400> 13

Cys Val Arg Asp Tyr Tyr Asp Ile Leu Thr Asp Tyr Tyr Ile His Tyr1 5 10 15

Trp Tyr Phe Asp Leu Trp Gly20

Claims (6)

1. Uso de uma molécula de ligação de IL-17 a qual é capaz deinibir a atividade de 1 nM de IL-17 humana em uma concentração de menosde 5 nM por 50%, a referida atividade inibitória é medida sobre a produçãode IL-6 induzida por hu-IL-17 em fibroblastos dermais humanos para a fabri-cação de um medicamento para o tratamento de uma doença proliferativamaligna sólida ou uma doença proliferativa hematológica.

2. Uso de uma molécula de ligação de IL-17 compreendendotanto domínios variáveis de cadeia pesada (Vh) quanto leve (Vl) ; a referidamolécula de ligação de IL-17 compreende no mínimo um sítio de ligação an-tigênica compreendendo:a) um domínio variável de cadeia pesada de imunoglobulina (Vh) quecompreende em seqüência regiões hipervariáveis CDR1, CDR2 e C-DR3, a referida CDR1 tendo a seqüência de aminoácidos SEQ IDNO:1, a referida CDR2 tendo a seqüência de aminoácidos SEQ IDNO:2, e a referida CDR3 tendo a seqüência de aminoácidos SEQ IDNO:3 ou equivalentes de CDR diretos das mesmas; eb) um domínio variável de cadeia leve de imunoglobulina (Vl) que com-preende em seqüência regiões hipervariáveis CDR1', CDR2' e CDR3',a referida CDR1' tendo a seqüência de aminoácidos SEQ ID NO:4, areferida CDR21 tendo a seqüência de aminoácidos SEQ ID NO:5, e areferida CDR3' tendo a seqüência de aminoácidos SEQ ID NO:6 ouequivalentes de CDR1 diretos das mesmas,para a fabricação de um medicamento para o tratamento de uma doençaproliferativa maligna sólida ou uma doença proliferativa hematológica.

3. O uso de uma molécula de ligação de IL-17 compreendendotanto domínios variáveis de cadeia pesada (Vh) quanto leve (Vl) ; a referidamolécula de ligação de IL-17 compreende no mínimo um sítio de ligação an-tigênica compreendendo:a) um domínio variável de cadeia pesada de imunoglobulina (Vh) quecompreende em seqüência regiões hipervariáveis CDR1-X, CDR2-X eCDR3-X, a referida CDR1-X tendo a seqüência de aminoácidos SEQ IDN0:11, a referida CDR2-X tendo a seqüência de aminoácidos SEQ IDNO: 12, e a referida CDR3-X tendo a seqüência de aminoácidos SEQ IDNO: 13 ou equivalentes de CDR-x diretos das mesmas; eb) um domínio variável de cadeia leve de imunoglobulína (Vl) que com-preende em seqüência regiões hipervariáveis CDR1', CDR21 e CDR3',a referida CDR11 tendo a seqüência de aminoácidos SEQ ID N0:4, areferida CDR21 tendo a seqüência de aminoácidos SEQ ID N0:5, e areferida CDR3" tendo a seqüência de aminoácidos SEQ ID N0:6 ouequivalentes de CDR1 diretos das mesmas,para a fabricação de um medicamento para o tratamento de uma doençaproliferativa maligna sólida ou uma doença proliferativa hematológica.

4. Uso de uma molécula de ligação de IL-17 de acordo com asreivindicações 1 a 3 em que a doença proliferativa maligna sólida é selecio-nada entre o grupo consistindo em câncer de mama, câncer genitourinário,câncer pulmonar, câncer gastrointestinal, por exemplo, tumor colorretal outumor genitourinário, especialmente um câncer de próstata ou um tumor es-tromal gastrointestinal (GIST), câncer epidermóide, melanoma, câncer deovário, câncer de pâncreas, neuroblastoma, câncer de cabeça e pescoço talcomo, por exemplo, câncer de boca ou câncer de laringe, câncer de bexiga,ou em um sentido mais amplo câncer renal, cerebral ou gástrico, um tumorpulmonar, especialmente um tumor pulmonar de células não pequenas.

5. Uso de uma molécula de ligação de IL-17 de acordo com asreivindicações 1 a 3, em que a doença proliferativa hematológica é selecio-nada entre o grupo consistindo em linfoma, leucemia, especialmente aquelasexpressando c-kit, KDR, Flt-1 ou Flt-3, mieloma ou malignidades linfóides,mas também cânceres do baço e cânceres dos linfonodos.

6. Método para o tratamento de uma doença proliferativa malig-na sólida ou uma doença proliferativa hematológica em um paciente que ne-cessite do mesmo, o qual compreende administrar ao paciente uma quanti-dade eficaz de uma molécula de ligação de IL-17 como definia nas reivindi-cações 1 a 3.