产品信息
1.分子别名
Ribonuclease R, VacB.
2.表达系统
E.coli表达。
3.纯度
>95%(根据SDS-PAGE结果分析)。
4.制剂
本产品经0.22µm滤器过滤,保存于50mM Tris-HCl(PH7.5), 100mM NaCl, 0.1mM EDTA, 0.1% Triton X-100, 1mM DTT, 50%甘油缓冲液中。
5.运输
干冰运输。
6.存储
-20到-80℃。
7.应用
环状RNA制备。
8.酶活定义
标准反应体系下,于37℃下10分钟将1μg poly (A) 转化成酸溶核苷酸所需的酶量定义为一个活力单位(U)。
产品验证
1.电泳-SDS-PAGE
图1. RNase R跑还原性SDS-PAGE胶后考马斯亮蓝染色,根据该结果显示蛋白纯度至少超过95%。
2.活性
图2. 37℃下利用商业化RNase R(Lucigen)和本产品将1μg RNA剪切1小时后凝胶电泳,可看出本产品与Lucigen在1U和5U组都有相当的效力。
使用方法
在1×Reaction Buffer中37℃孵育至少15分钟,注:(1)RNase R在0.1-0.5 mM Mg2+,0.05-0.5M KCl存在时活性最佳。(2)热失活:70℃孵育10分钟。
背景
RNase R
RNase R是一种依赖镁离子的3’-5’核糖核酸外切酶,可以从3’-5’方向将RNA逐步降解,释放5’-单磷酸核苷酸,产生二核苷酸和三核苷酸终产物。它能够消化几乎所有的线性RNA分子,但不易消化呈环形的RNA、套索结构或3’端突出末端少于7nt的双链RNA分子。RNase R是各种生物技术和制药应用的理想工具,它能够帮助鉴定circRNA,并在circRNA后期的纯化中有不可替代的作用。